Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Всасывание аминокислот у телок в связи с физической формой кормов рациона

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Всасывание аминокислот у телок в связи с физической формой кормов рациона"

я

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ Физиологам, БИОХИМИИ И ПИТАНИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

На правах рукописи ИСКЕНДЕРОВ ТЕЛЬМАН БАЙРАМ ОГЛЫ УДК 636.2.085.62:612.398.192

ВСАСЫВАНИЕ АМИНОКИСЛОТ У ТЕЛОК В СВЯЗИ С ФИЗИЧЕСКОЙ ФОРМОЙ КОРМОВ РАЦИОНА

03.00.13 физиология человека и животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Боровск 1991

Работа ышалнена в лаборатории межуточного ой^она lc^ocvd Всесоюзного научно-нсследоватольского института ^язполопш, биомшли п шиоцая сольскохозяйсгеошшх гатотшх.

Научзш2 руководитель - ЗсссугошшЗ доятодь паука FOÜJP,

докгор баолоютосгдг паук, профоссор Amiod A.A.

Офадшыышо оппоноити:

П.И.Курллов - доктор биологичоскпх паук; Ы.Д.Аитом - кандидат баологичосгах наук

Бодусэо учрслдошш - Украинский научно-исслодовагольсшИ циститу? физиологии и daoxrj.uui с.-х. яшоишх

Зааага диссертация состоятся ^u-u^/jT^- ISdJL-r.

на засодашш спецпалпзиромсшго совэга Д.020.17.01 црл Всссо-сзнол иоуздо-дссйодоЕакхЕъсаии шсглгу^о Слггогога, и

плталля ссдьйкохозяНогьогших сзсогсих:.

¿драо састигута: 2430X0, r.Eoposo;, Kosyscsoll ойасгл, EIHIIIEdl с.-х. пдагшх •'

С лдссортадаой toaio озшжлтьса в (¡дйтоюпо naosasysa.

Автореферат разослан " ' - -' ISi>__ г.

УчешЗ cGKpoTcji опсцзагдзаровашого cozz+л

BJIJgxzz

г

Лисе \ ОНДАЯ 1АРШЕРИСТИКА РАБОТЫ

XI. Актуальность. Проблема ампнокислотного питания жвачных, хотя я является предметом давних исследований многочисленных советских и зарубежных ученых, остается во многом ещз не выясненной. Она полякошгононтиая, большое значение, наряду с другими факторами, несомненно играет биосинтез микробного балка, переход корлювого белка в кишечник, а также эндогенная циркуляция. Все эти факторы в свою очередь в определенной мере обусловливаются физической формой кормов рациона, что предопределяет продолжительность пребывания и скорость прохождения кормовых масс через преднелудшк В современной кормовой базе крупного рогатого скота и других видов сельскохозяйственных животных индекс измельченяостя кормов рациона создают с использованием зерновых концентратов и травяных гранул.

Установлено, что введение в рационы гранул из травяной мука способствует значительной экономии зерновых концентратов, создает более благоприятные условия для синтеза микробного белка л обусловливает повышенное поступление аминокислот в тонкий отдел кдшечнлкэ, увеличение живой массы скота без снижения показателей контрольного убоя и качества мяса и повышение коэффициента конверсии протеинов корма в пищевой белок.

В комплексных исследованиях рада лабораторий ЕЧИИФЕиП с.-х. животных доказана возможность выраадтаняя первотелок с продуктивностью 3700 кг молока в год при использовании в их рационе 40$ травяных гранул по энергетической питательности, без применения зерновых концентратов. Исследован метаболический и гормональный сгатуо (обмен энергии, азотистых и минеральных веществ, липидов, углеводов, витаминов, а также эндокринный статус) организма выращиваемого .молодняка и первотелок. При этом всаснванио и обмен аминокислот в зкелудочко-кшлечяом тракте растущего молодняка изучались недостаточно.

1.2. Цель и задачи исследований. Цельв исследований является изучение интенсивности синтеза микробного белка в предаелудках

гелок и всасывания аминокислот из яелудочяо-кншечного тракта при различном соотношении в рационе тонкоизмельчешшх (травяные гранулы л зерновые концентраты) и крупяоводошшстых компонентов. Поставлены задачи:

- изучить скорость проховдения пищевых масс через различные отдели келудочно-кищечного тракта и синтез микробного белка в предаелудках;

- определить поступление азотистых веществ из предоелудков в сичуг, переваривание д всасывание их в килечшхке;

- на основе измерения объемной скорости кровотока по портальной вене дать количественную характеристику поступления свободных аминокислот из пищеварительного тракта в портальную систему;

- выяснить некоторые закономерности обмена свободных аминокислот в печени;

- установить частое всасывание аминокислот в организма с учетом их метаболизма в стенке аелудочно-кищечного тракта и в печени.

1.3. Научная новизна. В работе впервые в зависимости от соотношения тонкоизмельченных и крупноволокнястых компонентов или физической формы кормов рациона, исследованы количественные аспекты синтеза микробного белка, обмена азотистых веществ в предаелудках и поступления их в сычуг; переваривание и всасывание азотистых веществ в желудочно-кишечном тракте, транспорт свободных аминокислот в портальную систему о учетом объемного кровотока и гидратации крова, некоторые стороны обмена свободных аминокислот в стенка келудочно-кяшечного .тракта я в печени. Использованы новые методические приемы: англоканшя портальной вены с окклвдером и алектро-магнитаым датчиком (заявка № 4781064/30-14, полож.решшше от 21.01,ё) г.), а уякяе модяЯпвдроваи мйгод окраоки корюЪых частиц

для измерения скорости прохождения пищевых масс по яелудочно-кпаечному тракту (радгрвдл. - удостоверение Jí 258, IS88).

Получила данные о влиянии соотношения тонкоизмельчешшх и крупноволокнистшс компонентов в рационо на скорость дрохоядения пищевых масс через различныэ отделы пелудочяо-кшлечного гранта и синтез микробного балка в прэдаелудаах. Установлено, что оптимальной Ев личиной для этих показагелей является индекс измзльченяосги кормов (ИНК) в рационе равны;,? 1,5, т.е. S03 травяных гранул или зерновых концентратов по энергетической питательности. Между скорость» прохождения твердой фазы содержимого из лредаелудков в сычуг и эффективностью синтеза микробного белка на исследуемых рационах существует прямая корреляция (Z =0,92; Р<0,05). На основе полученного экспериментального материала и с помощью корре^щиошю-регрессионного анапиза выявили, закономерности количественной сто-рош обмена свободных .аминокислот в стенке Еслудочно-кшечного тракта и в печени. В результате установили поступление аминокислот в фонд межуточного обмена веществ с использованием данных по метаболизму аминокислот в печени.

1.4. Практическая значимость. Установлено, что замена зерновых концентратов травяными гранулами (до 60$ по энергетической питательности) оказывает благоприятное влияние на процессы обмена азотистых веществ в аолудочно-юшечном тракте, особенно на чистое всасывание аминокислот. Полученные данные использованы при разработке рекомендаций по системе выращивания молочного скота в Нечерноземной зоне РСФСР (1988). Ангиоканшя портальной вены с опшодурои и электромагнитным датчиком вошли в учебное пособие А.А.Алиева "Экспериментальная хирургия с.-х.животных" (е печати).

Результаты исследований могут бить использованы при составлении математической модели обмана аминокислот у молодняка конечного скота.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на IX Всесоюзной научно-практической конференции молодых ученых "Резервы увеличения производства с.-х.продукции" (Оренбург, 199О г.); Международной конференции "Биологические основы высокой продуктивности с.-х.животных" (Калуга, 1990 г.); на межлаборатор-ноы заседании отдела регуляции метаболизма и продуктивности животных (ВШШФБиП с.-х.лшвэгных, ииль,-19,91 г.).

1.6. Объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 171 страницах машинописи, состоит из введения, обзора литературы, описания объекта и методов исследований, результатов исследований, заключения, выводов и приложений. Список литературы включает 99 источников отечественных а 207 зарубежных авторов. Содержит 10 рисунков, 26 таблиц.

2. объект и метод; иссэдований

Экспериментами ну» часть работы выполняли в комплексе с аспирантами И.ИДонгус и Н.С.Семиной, которые изучали углеводный и лишдный обмен. Провели две серий опытов в лаборатории межуточного обмена веществ и в виварии ВИШФБиЕ с.-х.животных на 15 телках черно-пестрой порода в возрасте 12 месяцев, живой массой 257 кг, подобранных по принципу аналогов.

Первая серия опытов проведена на 3 оаеряровашшх телках с каншей рубца и шлюзнрованной кашалей, отделяющей сычуг от предае-лудкоь по А.А.Алиеву (а.с. Ш6799А, приоритет от 30.01,85 г.). Экспериментальны« животным методом латинского квадрата скармливали рэннони, различающиеся физической формой кох«ов. В 1-й рацион входило 20% трсшшх гранул (Г1Г) и 80% сена, во 2-й - Щь 1Т и 40?» сснш, а в - £¡0,% 'ГГ и 20% сена по энергетической питательности. В >1-м, 5-м и 6-м рационах: вместо ТГ использовали зерновые концои-тр«ти (ил) в тех хо сооишшеишис. Индекс измелвчшшости кормов

(ИЖ) 1-го и 4-го рационов Сил равен 0,25; 2-го л 5-го - 1,50; 3-го И 6-го - 4,00.

Животных кормили 2 раза в сугки в 8 и 18 часов при свободном доступэ к воде. Все испытываемые рационы бит изоэнергогичесюши и язонитрогеншш. Продолжительность скармливания кадцого рациона составляла 25 дней; затем в течение 3 дней по Q часов в сутки измеряли поток щщовшс масс, поступающих из предаолудеов в сычуг, беря каждые 15 шнут 3% содержимого для исследований.

С целью определения продолжительное ти пребывания содершшого в желудочно-кишечном тракте и скорости его прохождения толкал; в начале каадого периода через канюлю рубца вводила» 200 г резаной соломы (размер частиц 3-5 см), окрашенной фуксином, по модифицированной наш методике (рацпредл,- удостоверение Л 258, I98d г.). Затем проводили наблюдение за продвижением окрашенной соломы в составе химуса по желудочно-кишечному тракту, подсчитывая число окрашенных частиц в 50 мл содержимого предаелудков и в 50 г кала в течении 12 дней.

Вторая серия опытов проведена на 12 телках, разделенных на 4 группы. Животным I группы давали 20% ТГ и 80% сена, 2 - Щь ТГ и 40$ сена, 3 - 20$ ЗК и 80% сена и 4 - 6D% ЗК и 40% сена по энергетической питательности. Индекс измельчешгосги кормов рациона в I и 3 грушах составил 0,25, а во 2 и 4 - 1,50.

После предварительного периода (21 день) телок оперировали по комплексной методике с катетеризацией воротной, печеночных вен и плечеголовного артериального ствола (A.A.Алиев, 1974). На воротную . вену имплантировали ангаоканяшю с окклвдаром я электромагнитным датчиком (заявка № 4781064/30-14, полож.решение от 21.01.31 г.).

Пробы крови браля в динамике за I час до кормления животных и через 1 и 3 часа после него.

Объемную скорооть кровотока по воротной вене измерили с помощью прибора ГКЭ-2 (окклшнонный нуль прибора установили при помощи окклвдера). Электромагнитные сигналы фиксировали в течение 3 суток до 10 шн за час до кормления, через I, 2 д 3 часа после него.

Фракцию бактерий и инфузорий из содержимого предаедудков выделяли методой дифференциального центрифугирования (А.А.Алиев, И.Ш.Кафаров, 1970). Для выделения простейших содержимое центрифугировали при 1000 в течение 10 шн, а бактерий - 20000 шн"* в течение 20 шн. Содержание общего а остаточного азота определяли по Къелъдалв, обвдх и свободных аминокислот во всех исследуемых субстратах - на аминокислотном анализатора ААА-Т-339 (ЧСФР). Анализ сухого вещества кормов, содержимого преднелудков и кала проводили по методике Д.И.Маркова и др. (1982), Уровень гемоглобина в крош определяли по методу Драбкика (И.Тодоров, 1968), а геыато-крит - шкрометодом в модификации И.Тодорова (1985). Экспериментальный материал был обработан методами вариационной статистики и корреляционно-регрессионного анализа (Г.Ф.Лакин, 1990).

3. РЕЗУЛЬТАТ!! ИССШЩОШИЛ

3.1. Скорость прохождения пищевых масс по желудочно-кишечному тракту. Время прохождения первых окрашенных частиц через цреджелуд-ки находилось в определенной зависимости от физической формы кормов исслодуемых рационов (таблД). При использовании 1-го рациона первые окрашенные частицы проходили предкелудки за 6,15+0,06 ч, шш в 1,5 (Р <0,05) ц 1,7 (Р <0,01) раза медленнее, чем соответственно при 2-м н 3-м рационах. При скармливании 4-го рациона первые окрашенные частицы появлялись в сычуга через 4,63+0,22 ч или в 1,2 (Р < 0,05) и 2,1 (Р < 0,001) раза позже, чем при 5-м и 6-м рационах соотвогсгвонно.

В го же время необходимо отметить, что с увеличением доли тонкоизмельченных компонентов (как ТГ, так и ЗК) в рационе скорость прохождения окрашенных частиц через кишечник имело тенденция к снижению. По времени прохождения первых окрашенных частиц через весь яелудочно-китечный тракт рационы с ТГ закономерно различались медду собой. При 1-м рационе величина этого показателя была на 7,3% больше, чем при 2-м, и составляла 19,83 ч, а при 3-м оказалась на 20% (Р < 0,01) меньше, чем при 1-м. При рационах с ЗК таких различий не обнаружено.

Таблица I

Время прохождения первых окрашенных частиц по желудочно-кишечному тракту, ч

Рационы :_Время дроходдения частиц через_

: предаелудкя : кшгечгшк : весь ЕКТ

1 6,15+0,06 33,70+0,32 19,83+0,36

2 4,16^3,10 14,335),30 18,48JD, 40

3 3,64+0,81 12,89+0,66 16,53^0,15

4 4,83+0,22 ; 7,54+b,09 12,42+0,30

5 4,04+0,13 8,12+0,46 12,23^3,34

6 2,3<¿Í,09 9,99^,49 12,32+0,40

Следовательно, с возрастанием ИИК! в рационах, независимо от вида корма (IT или ЗК), линейно увеличивается скорость прохождения пищевых масс через предаелудки. В кишечнике при этом происходят компенсаторные процессы, т.е. с увеличением скорости их прохоадения через предаелудки в кишечник она уменьшается, так что скорость прохоадения пищевых масс по всему желудочно-кишечному тракту оказывается относительно постоянной:, при этом компенсаторное снижепчо скорости в кишечнике более выражено при рационах с зерновики концентратами .

Наряду с .изученном скорости прохождения пищевых масс через желудочко-кииечный тракт по окрашенным частицам проводили измерение

(прямым переливанием) суточного объема содержимого, поступающего из предаелудков в сычуг. Он составил соответственно рационам 53,2+2,10 л, 59,7+2,24; 62,6+1,19; 46,7+2,40; 44,9+2,10 и 45,3+2,20 л. О возрастанием доли ТГ в рационе наблюдалась тенденция к увеличению объема содераимого, поступащего из предкелудков в сычуг. При скармливании животным 3-го рациона он был на 11,7% (? < 0,05) больше до сравнению с отмеченным при 1-м рационе. При кормлении зерновыми концентратами объем содерасшого, поступающего из ародаодудков в сычуг, существенно не менялся, хотя скороств прохождения твердой фазы (измеренная по окрашенным частицаи) возрастала с увеличением доли ЗК в рационе. Видаю, это связано с тем, что при увеличении доли ТГ в рационе повышается скорость прохождения в сычуг как твердой, так л жидкой фазы содержимого, иоступ£.эдего из яредоселудков. Увеличение скорости прохождения твердой и жидкой фазы пра большом количестве молотых шш гранулированных травяных кормов в рационах отмечено и в других работах (¿.А.Кс^егв еЬ а1 ., 1979; У.О.Вехвеп et а! . , 1962; М.Й.Ыег-сЬеп. е.а., 1986).

3.2. Поступление общего и микробного азота из предкелудков в сычуг. Количество общего азота, переходящего из предкелудков в сычуг, во всех случаях было меньше, чем количество потребленного. О поышюшеи доли ТГ яла ЗК в рационе линейно ьозрасгал поток общего азота из предкелудков в сьгчуг (габл.2). Так, при 2-ы и 3-м рационах его величина была соответственно на 28,3^ (Р < 0,01) и 25,(Р < 0,01) больше, чем при 1-м рационе, а при 5-м и 6-м рационах соответственно на 9,8 и 10,8/' больше, чем при 4-и.

Поток бактериального азота из иродкелудков в снчуг (г/сут) имел тенденция к усилении при увеличении ШК от 0,25 до 4,00 в Родионах, содерасшдех как травяные гщнрт, так и зерновые концен-

Таблица 2

Поступление общего и цикробтго азота вэ предмаудсов в сычут, г/су*

Показатели »' • Рацион

; I : 2 : 3 ! 4 : 5 6

Поступило кз предкелуд-ков в сычуг : . общего азота 64,92+1,96 100,99+3,64 106,40+2,99 105,62+3,20 115,94+7,26 117,06+3,63

азота бактерий 23,66+4,85 28,92+4,09 26,05+1,79 26,04+2,57 31,95^0,60 34,63+2,14

азота простейших П,42+0,15 П,61+0,27 9,64+0,41 13,92+1,72 13,41+0,7У 12,63+0,64

азота шпфоорганиз-мэв 35,03+4,90 40,33+3,66 35,69+2,12 41,95+0,66 45,36*1,59 47,46+2,96

ййективность синтеза,г микробного азота на I кг ПСВ в предкелудках 10,66 15,10 16,21 12,98 18,27 26,60

■

"-Н

0

трагы. При скармливании 2-го и 3-го рационов поток бактериального азота был соответственно на 21,4$ и 10,больше, чем при 1-й рацаоне, е при 5-м и 6-и рационах соответственно на 13,9 и 23,5$ больае, чем при 4-«. Поток азота простейших из предаелудков в сычуг при 1-м и 2-м рационах был на одном уровне, а при 3-й - значительно ниже (Р < 0,05), Видимо, это связано с изменением рИ и микробной активности в рубце при скармливании животным больших количеств измельченных корцов ( Л.Е.ШЬоН е* а1. , 1973; З.С.ЬоегсЬ «Ъ «1 ., 1983). Рационы, содержащие зерновые концентраты, по этому показателю практически не различались.

Поток микробного азота (азот бактерий + азот простейших) был наивысшим при скаршшванни 2-го рациона (60$ ТГ по энергетической питательности); он был па 14,97;3 больше, чем при 1-м рационе. С увеличением доли ЗК наблвдадась лшь тенденция к повышению этого показателя: при 5-ц и 6-м рационах он бил соответственно на 8,13$ и на 13,13$ больше, чем при 4-ы.

Эффективность синтеза микробного белка в предаелудках, выраженная в граммах микробного азота на I кг сухого вещества, перева-решого в дредаелудках, возрастала с увеличением ИИК. При 2-м и 3-м рационах этот показатель был соответственно - на 39,04 и 49,26$ больше, чем при 1-м, а при 5-м и 6-м - на 40,76 и 104,93$ больше, чем при 4-и. .При большом количестве сена в рационе, как правило, отмечается низкий уровень синтеза микробного белка в рубце ( Л. С .Набега, . Ь. Ш.11ег . , 1981; У.КаиГщаш,а.1.ирр1.1^, 1982; У.СЛМ/Ье1о* ег а1 . , 1984).

Наши исследования явились еще одним подтверждением того, что инфузории вносят значительный вклад в общий поток микробного азота (Б.В.Тараканов, 1987;а.^.Со1ещал , 1974; В.З.Ршиа, 1ю1а , 1964).

Установлена высокая положительная корреляция (У-0,2Ш0,69; Ъ =0,92; Р < 0,05) между скоростью прохоздония твердоЛ {азы содержимого яз прздяелудков в сычуг (У) и эффективностью синтеза микробного белка (X) в исследуемых рационах. Получешш!1 в папшх исследованиях высокий коэффициент корреляции подтверждает тот факт, что большинство рубцовнх микроорганизмов пмеот теснул связь с твердой фазой (адгезия) содерзшюго ( С.я.РогаЪегк, К.Ьаа., 1977; , 1989).

При увеличении доз ЗК в рационах коэффициент переваримости азота в киизечнике оставался относительно постоянным. Пря повнзе-нял содер.-шняя ТГ в корме он изменялся з значительных пределах. Так, прл 2-й рационе его величина составляла 53,12*, т.о. была соответственно на 7,14 а 48,42$ больше, чем при 1-м и 3-м рационах. Низкий коэффициент переваримости азотистых веществ в кшочнпке при 3-м рационо объясняется тем, что в результате увеличения скорости прохождения пищевых масс, выделения азота с калом достоверно (Р <0,01) больше, чем пра 1-м я 2-й рационах.

Переваривание общего азота во всем яелудсчно-кшдечясм тракта прл 3-м рационе также было значительно ниже (Р < 0,05), чем при 1-м я 2-м рационах, а яри 5-м рационе величина этого показателя достоверно (Р< 0,05) превышала отмеченную при 4-м. Это свидетельствует о поклеила переваримости азотистых веществ во всем желудочно-кишечном тракта при увеличении доли зерновых концентратов (Н.Н.Скоробогатых, А.Ф.Бойчук, 1984; К.А.СистШз е* а! . , 1982;

О.О.Ыпйсау, О. О.АгаггЬгопе 1982; К.А.а.Уееп о* а1. , 1988).

Таюш образом, установлено, что скармливание телкам рационов с содержанием ТГ до 60$ по энергетической питательности (ИИК=1,5) по оказывает отрицательного действия на переваривание и всасывание азотистых веществ в кишечнике и во всом желудочно-кишечном тракта. Однако лра дальнейшем увеличении долз ТГ в роцяоне (до ¡30?,

11ИК=4,00) переваривание азотистых веществ как в кишечнике, так и во всем калудочно-кишечнои тракте снижается (Р<.0,05). При увеличении доли ЗК в рационе достоверно (Р<0,05) увеличивалось переваривание азотистых веществ во всем желудочно-кишечном тракте. При сравнения рационов, содержащих ТГ и ЗК, ыохно обнаружить не-которро превосходство последних по переваривании азотистых веществ, однако рацион, содержавши 60$ ТГ по этим показателям можно оценивать как^раваоценный рациону с 60% ЗК. Из этого следует, что замена зерпошх концентратов гравяншш гранулами в количестве до 602 ио энергетической питательности не оказывает отрицательного влияний н« переваривание и всасывание азогистих веществ в хелудочно-кишочнш тракто. _

¿.3, Ьогок шанокислог из проджелудков в сичуг. Количество щепного!слог (г/суг), переходящих из средаелудков в сычуг, во всех случая:: било болъле потребленного, т.е. синтез аминокислот в пред-кедудках преобладал над их дазашнировашеи.

При скармливании рационов с ТГ поток аминокислот бил значительное, чаи при рационах с ЗК.. Как показали наши опнты, это связано с теи, что при скаршшьаяпи толкая ТГ скорость прохождения пищевых ыасс через предаолудка значительно вше, чей при рационах с ЗК. Помимо згого установлено, что ТГ имеет более низкую распа-давность 1а е!4и в рубце, чей ЗК (№.£.Аитова, Б.И.Горбачев, 1967). ••

С увеличением ЙЙК в рационах от 0,25 до 4,СО поток аминокислот из предаедудков в сычуг лане&ю возрастал (таСл.З). Так, при ¿-а! и 3-й рационах из предаелудков б сычуг поступило больше (Р<0,05), чем дри 4-м рационе. УстаноЕлено, такке, что при увеличении доли ТГ в рационах усиливается преимущественно (Р<0,05) поток незаменимых аминокислот, а при увеличении доли ЗК - заиеш-тк (Р <. 0,05),

Поток шотохисхот из предаезгудков & сачуг, г/сут

ТсйяЕда 3

Ашнокислота Рацион

: I : 2 : 3 : 4 : 5 : 6

$иэин 26,36+0,79 29,79+0,73 30,53+0,25 27,79+0,35 31,42+0,10 30,01+1,01

Гистидин 17,95+0,54 22,60+0,54 22,3^0,18 16,72+0,57 19,19+0,06 17,45+0,59

АрГИНИН . 21,06+0,63 26,71+0,65 ¿1,08+0,22 20,72+0,71 19,70+0,06 23,04+0,78

Аспарагиновая кислота 51,73+1,54 64,36+1,66 69,09+0,56 42,87+1,47 49,25+0,16 50,15+1,66

Треонин 30,23+0,90 30,12+0,74 32,60+0,27 33.45+1,15 30,50+0,10 32,40+1,06

Серин ■ 26,01+0,76 36,37+0,91 31,10+0,25 28,2^0,97 27,01+0,09 30,10+1,01

Глутаминовая кислота 62,96+1,68 70,66+1,64 75,72+0,61 69,32+2,37 103,2^0,32 120,7^4,04

Пролин -$7,61+1,42 38,30+0,96 37,29+0,30 50,9^1,74 49,60+0,16 46,50+1,56

Г яшш 27,77^0,83 32,55+0,61 36,40+0,29 31,10+1,07 40,51+0,13 41,77+1,12

Аяанин 34,10^1,02 40,97+1,03 43,47+0,35 33,05+1,13 36,03+0,12 33,3&Л,12

Валик 35,12+1,05 40,60+1,02 44,18+0,36 32,06+1,10 35,17^0,11 35,59+1,19

Метконин 5,56^0, Г7 7,64+0,?* 4,77+0,04 9,23+0,32 6,23^0,03 9,73+0,33

йзслейцин 29,56+0,88 32,96+0,82 30,21+0,24 29,19+1,00 32,73+0,11 29,12+0,98

Лейцин 50,32+1,50 54,78+1,41 58,49+0,47 47,70+1,63 54,97+0,15 50,90+1,70

Тирозин 25,20+0,75 27,96+0,68 23,46*0,19 23,12+0,79 25,54+0,06 23,30+0,76

Фенилаланин 24,25+0,72 35,96+0,90 38,0«), 31 17,31+0,60 16,87+0,05 15,51+0,52

Сумма аминокислот 515,7^15,39 992,35+34,84 604,78+4,89 512,9^17,53 £79,94+1,63 569,62+19,72

Суша кеэаиенишх 240,42+7,18 261,16+6,95 288,26^2,33 234,17+6,01 245,77+0,76 243,73+8,16

Сумма заменикьк 275,37+6,22 311,19+7,65 316,52+2,80 276,76+9,52 331,17+1,04 345,69+11,57

Аминокислотный индекс 0,67 С,90 0,91 0,84 0,75 0,70

I

(—I

Зеасызаняе аминокислот из к*лз;ечн;яа у телок, г/сутки

Таблица 4

Р а п и о н

.змяноки слота I : 2 : 3 ■» I 4 : 5 : 6

Лгаин 17,77+0,79 20,52+0,73 ".20,55+0,25 18,67+0,95 22,92+0,10 21,61+1,01

Гистидин 12,Сб£Э,54 15,98+0,54 14,48+0,Г6 11,73+0,57 14,15+0,06 12,45+0,59

Ас повод 14,73+0,63 19,67+0,65 20,47+0,22 15,29+0,71 15,05+0,06 17,88+0,78

Асяаяагияовая кислота 35,39+1,54 43,47+1,66 «7,25+0,56 30,48+1,47 34,99+0,16 36,82+1,68

Треонин 19,7£к0,90 20,45+0,74 21,25+0,27 22,92+1,15 21,60+0,10 24,40+1,08

Огрин 18,00^0,78 25,49^0,91 л .19,66+0,25 20,20+0,97 20,40+0,09 23,9%1,01

Глутаыиновая кислота 42,46+1,89 46,27+1,84 50,1+0,61 47,42+2,37 72,33+0,33 60,72+4,04

Пполин ' 32,10+1,42 26,05+0,95 24,55+0,30 35,57+1,74 35,5^0,16 20,40+1,56

Глицин Г7,37^0,83 21,29^0,81 24,79+0,29 20,45+1,06 г? ,62+0,13 29,29+1,40

Алании 20,22+1,02 26,45*1,03 28,40+0,35 21,16+1,13 23,82+0,12 21,58+1,12

Бадин 22,35+1,05 26,6(^1,02 29,53+0,36 21,51+1,10 24,31+0,11 26,46+1,19

Матионин 3,67+0,17 6,30+0,14 3,27+0,04 6,65+0,32 6,44+0,03 6,82+0,33

Изолейотн 19,55+0,68 22,60+0,62 19,81+0,24 20,11+1,00 23,34+0,11 20,53+0,98

Лейцин 32,76+1,50 36,02+1,41 39,02+0,47 32,66+1,63 39,49+0,18 34,03+1,70

Тирозин Г7,ЗвТо,75 20,08+0,66 15,92+0,19 16,49+0,79 18,49+0,08 37,42+0,78

£енклаланин 16,08+0,72 24,82+0,90 27,19+0,31 12,15+0,60 12,35+0,05 10,96+0,52

Сумма аминокислот 341,67+15,39 402,46+14,84 406,96+4,88 353,6^Г7,53 413,10+1,62 415,49+19,72

С^кма незаменима 158,96+7,18 193,36^5,95 196,10+2,33 161,87+8,01 Г79,74+0,78 175,32+8,15

Сукна заиенкиьк 182,91+6,21 209,10+7,89 210,88+2,56 191,78+9,53 233,36+1,04 240,Г7+И,57

Аиинокислстный индекс 0,87 0,92 0,93 0,84 0,77 0,73.

Что касается отдельных аминокислот в предаелудках, то при рационах с ТГ наиболее интенсивно синтезировались лизин, треонин, аспарагиновая кислота, серия, валин и лейцин, а при скармливании ЗК - лизин, треонин, серии, меглонш л тирозин.

Следовательно, регулируя авдекс измальченности кормов рациона, а такжэ путем включения в рационы ГГ можно воздействовать на поступление аминокислот из продкзлудков в сычуг' жвачных животных.

3.4. Переваривание и всасывание аминокислот в ки!дечш1ке.

С увеличением И1ЕС (как за счот ТГ, так и ЗК) в рационе от 0,25 до 4,00 достоверно возрастало количество аминокислот, всосавшихся из кишечника. При скармливания животным ТГ с увеличением дх доли в рацноне наиболее интенсивно усиливалось всасывание незаменимых аминокислот: при 2-м и 3-ы рационах величина этого показателя повышалась соответственно на 21,64$ (Р<0,05) и 23,36$ (Р<0,01) по сравнению с отмеченной при 1-м рационе (табл.4). При скармливании ЗК и увеличении их доли в рационе возрастало всасывание заменимых аминокислот: пря 5-м и 6-м рационах этот показатель был соответственно на 21,68 (Р< 0,05) и 25,23% (Р <0,05) больше, чем яри, 4-м. С увеличением доли ТГ в рационе линейно возрастал, а при увеличении дола ЗК сшивался аминокислотный индекс всосавшихся аминокислот.

По уровни всасывания аминокислот в кишечника как между рационами, гак и мэвду отдельнш.ш аминокислотами отмечены незначительные различия (Б.В.Тараканов, Г.К.Соколовская, 1989; Г.Е.Логинов • И др., 1988; Ы.1).АИ;оиа, J.Voi¿t . , 1984; 1\Нуе1р1ип(1,1Л.11оаио1Ьо11, 1987). Следует только отметить, что коэффициент всасывания аминокислот при рационах с ЗК был на 0,2-0,3 единицы выше, чем при скармливании животным ТГ.

3,5. Всасывание свободных аминокислот в портальную систему.

Измерение объемной скорости кровотока по воротной вене позволило судить о количестве свободных аминокислот, поступавдих из желудочно-кишечного тракта в систему портальной вены.

После кормления у телок всех групп усиливался транспорт свободных аминокислот из яелудочно-шлечного тракта в портальную систему. При этом наиболее интенсивно возрастала разница В-А большинства незаменимых аминокислот и аланина. Увеличение всасывания алалина поело кормления можно объяснить тем, что эта аминокислота является хорошим глюкогенным фактором ( С.Еоаеву et «1, 1966; u.a.ilndsay #J 1982) и может синтезироваться в стенке кишечника.

На основе полученных в опытах данных нам удалось рассчитать сродни!! уровень всасывания аминокислот в портальную систему. Оказалось, что изменение соотношения крупноволокнисткх и тонкоизмель-чешшх кормов-.'в рационе влияот На ваасывание аминокислот из желудочно-кишечного тракта в портальную кровь. При увеличении доли ТГ в рационе преимущественно возрастает величина всасывания незаменимых аминокислот (табл.5). Так, у гелок 2 группы она была на 16,больше, чем у животных 1-й. Также с увеличением дола ТГ в рационе достоверно повыпалооь всасывание гистидина (Р<0,01) и. валина (Р<0,05), Усиление всасывания гистидина, который является -аминокислотой, лиштирущей мясную продуктивность (Н.А.Ыманенков, 1966; u.Gahei, а.Poppe ,t 1966), объясняет тот факт, что скармливание гранулированных кормов улучшает прирос!* живой ыаосы л качество мяса.

При повышении доли ЗХ в рационе возрастал уровень всасывания как незаменимых* (на 95,1%), гак и заменимых {на 42,2%) аминокислот в кровь портальной венн. У телок 4 группы всасывание гистидина (Р< 0,05), осрарзгяновой (Р<0,01) и глутамяновой (Р<0,05) кислот

Таблица б

Всасывание свободных аминокислот в портальную систему,г/ч

Аминокислота Группа

: I : 2 3 : 4

Лизин 2,45+0,10 2,21+0,72 0,71+0,29 2,72+0,99

Гкстидин 0,63+0,09 1,87+0,19 0,82$0,23 3,88+0,17

Аргинин 2,58+0,41 1,92^0,16 1,56^0,52 3,85+1,44

Треонин 3,22+0,15 1,48+0,63 0,76+0,39 3,96+1,34

Валин 2,24+0,36 3,60+0,Г/ 1,50+0,67 2,24+1,11

Нетионин 0,73+0,05 0,66+0,34 0,34+0,06 0,63+0,17

Изолейцин 1,74+0,23 2,10+0,21 1,30*0,48 1,61+0,59

Лейцин 2,40+0,31 2,53+0,18 1,40+0,61 2,61+1,59

Фенил ал агат 1,66+0,31 1,96+0,14 1,04+0,27 3,46+0,47

Аспарагиновая кислота 0,62+0,14 0,27+0,09 1,57+0,04 0,50+0,15

Серин 1,73+0,42 1,67+0,35 1,34+0,34 2,20+0,39

Глугаыиновая кислота 2,34+0,46 2,01+0,96 1,52+0,12 3,20+0,43

Цисгин 1,39+0,36 1,81+0,24 0,68+0,39 3,59+0,77

Глицин 2,79+0,66 1,68+0,40 1,44+0,33 2,04+0,99

Алании 3,95+1,54 2,04+0,64 1,14+0,39 2,30+0 ,&9

Тирозин 1,66+0,20 1,60+0,59 1,69+0,42 2,44+1,23

Сумма свободных аминокислот 30,34+3,63 29,70+4,16 16,91+5,08 ЗХ,ЗЗШ,01

Сумма незоменшда 15,66^0,73 18,54+1,75 8,78+3,62 I7.13_i7.79

Суша заменимых 14,46+3,16 11,16+2,51 8,13+1,55 14,0043,24

аминокислотный индекс 1,10 1,66 1,0В 1,22

было значительно больше, чем у животных 3 группы. Увеличение всасывания аспарагияовой и глутамяновой кислот при повышения доли ЗК в рационе можно объяснить тем, что при этом рационе значительно выше синтез микробного белка. Содержание вышеуказанных аминокислот в микробном белке довольно значительно. Что касается аспа-рагановой кислоты, то она также является хорошим .глюкогенным ( С.В.С11вгаргеЛоп , 1977; О.Еввеву н «I . , 1986) и метаболически активным фактором.

3.6. Чистое всасывание аминокислот в организме телок с учетом метаболизма в печени. При вычислении истинного всасывания аминокислот в организме животных необходимо учитывать метаболизм свободных аминокислот в печени. Чистое всасывание свободных аминокислот в »¡екуточный фовд организма определят следущим образом: из количества аминокислот, всосавшегося в поргальнуи систему, вычитали количество аминокислот, которое мэтаболизировалось в шчени (при положительном значении разницы П-0), шш суммировали значения этих двух показателей (при отрицательной величине разницы П-0).

Полученные нами результаты указывают на то, что у всех групп телок приток свободных аминокислот к печени возрастает после кормления. Это связано с тем, что в это время усиливается транспорт аминокислот из калудочно-кишечаого тракта в портальную кровь. Величина опока свободных аминокислот значительно варьировала по группам адвогных. Эа I ч до кормлония у телок всех групп разница по критекагацей и оттекающей крови печена (П-О) по большинству аминокислот била отрицательной. Следовательно, до кормления печень в основном евделяет (синтезирует) аминокислоты. После кормления у всех нсследуэмнх животных разница П-0 многих аминокислот была по-яйтигельчой. Значит, после кормления существенная часть аминокислот, необходимых для метаболизма, удерживается в печени. Спектр аминокислот в кропи проходящей через печень изменялся как в зави-

- 2С -

симооти от типа рациона, raie и в связи с актом кормления.

В результате этих подсчетов были установлены значительные различия величины чистого всасывания аминокислот в фонд межуточного обмена (табл.6) у телок разных групп. Так, у животных 2 группы оно было на 25,22$ выше, чем у телок I группы, а у животных 4 группы на 40,68$ выше, чем у телок 3-й. Количество всосавшихся заменимых аминокислот у телок I и 2 груш было примерно одинаковым; большие различия отмечены по незаменимым аминокислотам; у телок 2 группы величина этого показателя ва 46,29$ превышала полученную для телок I группы. У животных 3 и 4 групп различались количества как незаменимых, так и заменимых аминокислот. У телок 4 группы величины всасывания незаменимых и замешшых аминокислот превыпали полученные для 3 группы соответственно на 42,84 и 38,36$.

Чистое всасывание аминокислот у телок, получавших травяные гранулы, било больше, чем у животных, которым скармливали зерновые концентраты. Так, у телок 2 группы величина этого показателя на 30,28$ превосходила полученную в 4 группа, а у животных I группы она была на 46,365 больше, чем у телок 3 группы. Разница била обусловлена в основном незаменимыми аминокислотами. Это, видимо, связано с меньшим распадом незаменимых аминокислот в рубце телок, получавших травяные гранулы.

Бри рассмотрении данных по отдельным аминокислотам видно, что с увеличением доли ТГ в рационе возрастал показатель всасывания многих из них. Так, всасывание лизина увеличивалось на 5,2%, гпсти-дина - на 115,1$ (Р<0,001), аргинина - на 32,9$, треонина - на 3,6$, сэрина - на 51,0$, глугаминовой кислоты - на 5,9%, аланина -на 3,1цистина - на 7,9$, валина - на 85,2$, метионяна - на 28,1$,-'изолейцииа - на 57,0$,. лейцина - на 56,6$ и фенилалашша - на 56,9$.

С увеличением доли ЗК в рационе также увеличивалось всасывание.

Таблица б

Чистое всасывание аминокислот (г/ч), с учетом их метаболизма в печени

: Группа

Аминокислота :--

: I : 2 : 3 4

Лизин 2,29+0,24 2,41+1,13 1,03+0,21 1,66+0,63

Гистидин 1,06+0,13 2,28^0,05 0 «75+0,29 1,72+0,46

Аргинин 1,85+0,22 2,46*0,71 1,49+0,21 2,64+0,45

Треонин 1,11+0,25 1,15+0,53 0,67+0,25 0,53+0,42

Валин 1,62+0,40 3,00+0,97 1,25+0,24 1,67*0,81

Метионин 0,64+0,09 0,62+0,14 0,52+0,23

Изолейцин 1,21+0,15 1,90+0,63 0,83+0,25 1,26+0,64

Лейцин 1,52+0,Г7 2,38^-1,04 0,78+0,27 0,92+0,44

Фешлаланин 1,23+0,47 1,93+0,53 0,7%0,И 0,83+0,30

Аспарагиновая кислота 0,30+0,04 0,20+0,06 0,16+0,03 0,26+0,13

Серии 1,43+0у44 2,1бчнО,Э6 1,14+0,27 1,3910,59

Глутаыиновая кислота 1,87+0,59 1,98*0,15 1,35+0,32 2,94+0,45

Дистин 3,6340,23 1,76+0,14 1,7^,66 2,01+1,08

Глицин 1,78+0,26 1,51+0,62 1,42^0,49 1,72+0,44

Алании 1,6340,65 Х,6%0,59 0,74^,18 0,62+0,12

Тирозин 1,75+0,24 1,06+0,43 1,04^0,52 1,32+0,60

Суима свободных аминокислот 22,92+4,37 28,70+8,28 15,66+4,53 22,03+7,64

Орта незаиянкмьсс 12,53+2,12 18,33+5,73 8,10+2,06 11,57^,23

Оуима заменимых 10,39+2,25 10,37+2,65 7,56+2,47 10,46+3,41

Аминокислотный индекс 1,21 1,77 1,07 1.П

амшокислот: лизина - на 61,аргинина - на 77,2$, аспарагило-вой кислоты - на 62,серина - на 21,9$, глутаминовой кислоты -на 117,7$ (Р<0,05), глидана - на 2I.IJS, аланина - на 10,8$, цис-тина - на 17,5^, валила - на 28,В%, изолейцина - на 58,лейцина - на 17,3%, тирозина - на 26,9$ и феиилалашша - на 6,41$.

Таким образом, с увеличением доли ТГ в рационе с 20 до 60$ по энергетической питательности в основном возрастает показатель всасывания незаменимых аминокислот, а лри таком же повышения доли ЗК увеличивается всасывание как незаменимых, так и заменимых аминокислот. В итоге по суше всосавшихся аминокислот телки, получавшие рационы с ТГ превосходила животных, которым скармливали ЗК, при включении их в рационы до 60% по энергетической питательности.

4. В'ЫВОДи

1. Увеличение ;ола тонконзмельченних компонентов в виде ТГ или ЗК в рационах достоверно (Р<0,05; Р<Г,Ш1) повышает скорость прохоздения пищевых масс через иредаелудки. В кишечнике при этом происходит компенсаторное снижение скорости эвакуации химуса.

2. Между перевариванием сухого вещества в предаелудгсах и скоростью прохождения пищевых масс через преджелудки при исследуемых рационах существует высокая отрицательная корреляция (г =-0,96).

3. Поток общего азота из предаелудков в сычуг' при всех исследуемых рационах нижа уровня потребления. С увеличением доли ТГ или ЗК в рационе линейно (Р<0,01) повышается уровень потока азотистых веществ из предаелудков в сычуг.

4. Эффективность синтеза микробного бэлка в предаелудках воз растает с увеличением доли гонкоизмельченных компонентов - ТГ или БК в рационе.

Скорость прохождения твердой фазы содержимого из продаелудкой в сычуг и эффективность синтеза микробного белка tipa исследуемых рационах мезду собой имеют положительную коррелятивную сьлаь

(г =0,92; Г< 0,05).

5. Замена ЗК с ТР в рационах гелок (до 60$ по энергетической питательности) оказывается равноценной, по показателям в желудочно-кишечной тракте переваривания и всасывания азотистых веществ.

6. Поток аминокислот из предаелудков в сычуг превышает их потребление с кормом, т.е. синтез аминокислот в рубцо преобладает над их дезашнированцем. При увеличения доли ТГ в рационах преа-ыуцестьешю увеличивается (Р<0,05) поток незаменимых аминокислот, а при увеличении доли ЗК (Р<0,05) - поток эамешпшх из продаелуд-ков в сычуг. Следовательно, путей регулирования индекса изыельчен-носги кормов рациона, а такае включая в него ТГ, можно воздействовать на поступление аминокислот в тошеий отдел кишечника жвачных. •

С увеличением доли ТГ пли ЗК в рационах до 60# по энергетической питательности улучшается усвоение аминокислот в кишечнике. При скармливании ашвотним рационов с ТГ наиболее интенсивно усваиваются незаменимые аминокислоты, а с ЗК - заменимые аминокислоты.

7. Объемная скорость кровотока по воротной вене у телок в возрасте 12 месяцев колеблется от 37,13 до 54,01 мл/кг/мдн, изменяется как в связи с актом кормления, так и в зависимости от типа рациона и достигает максимума у гелок, получавшие в составе рациона 60$ ТГ (Р«С0,01; Р<0,05),

8. При увеличении доли ТГ в рационе возрастает преимущественно всасывание в портальную кровь незаменимых аминокислот, 'особенно гастедияа (Р<0,01) и валила (Р<0,05), а при увеличении доли ЗК -как незаменимых, так и заменимых аминокислот.

9. Перед кормлением в крови, оттекающей от печени, увеличивается поток свободных аминокислот, а в связи с кормлением значительная часть аминокислот удерживается поченью. В среднем печень

свободных шинокислог больше продуцирует в кровь, кололи поглодает из нее, поэтому величина чистого всасывания шинокислог с уметем метаболизма в печени несколько ниже, чем ого уровень в портальной крови.

10. Чистое всасывание аминокислот с учетом метаболизма в печени колеблется от 15,66 г/чао (у телок, получавших в составе рациона 20% ЗК) до 28,70 г/час (где в состав рациона входило 60^ ТГ). С увеличением доли ТГ в рационе с 20 до 60$ по энергетической питательности в основном возрастает чистое всасывание незаменимых аминокислот (на 46,29$), а при таком ко погашении доли ЗК увеличивается всасыванио как незаменимых (на 42,84£), гак и замешкал аминокислот (на 39,25$).

Практические предложения.

1. Уровень тонкопзмельченных компонентов в рационах ремонтного молодняка не должен превышать 60^ по энергетической питательности.

2. Замена зерновых концентратов гранулами из разнотравья

до 60% по энергетической питательности в рационах ремонтного молодняка мгасет обеспечить равноценное всасывание аминокислот в фонд межуточного обмена.

3. При измерении объемной скорости кровотока в магистральных сосудах методом электромагнитной флоумегрии пользоваться ангиока-шалей с окклвдером и электромагнитнш датчиком.

Опубликованные работы по теме диссертапии

1. (Ьособ окрашивания солома для использования в качестве маркера при определении интенсивности потока содержимого в желудочно-кишечном тракте жвачных / А.А.Алиев, Т.Б.Искендеров, Н.И. Лонгус, Н.С. Семина// Бюлл.ШИИЖиП с.-х. животных.- Боровск,1989,-

B.4.-С.73-75.

2. Скорость прохождения пищевых касс через преджелудки у телок в связи с физической формой кормов/Т.Б.Искевдеров, Н.И.Лон-гус, Н.С.Семина,А.А.Алиев// Матер.Всес.кон£. <$изиология продуктивных: животных:.-Тарту, 13-15 сентября 1969 г.- С Л 53.

3. Искендеров Т.Е. Объемная скорость кровотока в портс.:ь-ной системе телок//Тез.докл. IX Всес.симпозиума.Венозное кровообращение и лимфообращение/ - Алма-Ата,10-13 октября 1989.-

C.139.

4. Искендеров Т.Е. Переваривание питательных веществ у телок в связи '§■физической форыая кормов рациона /Дез.докл. IX Всес.кон$.молодых ученых и специалистов - Резервы увеличения производства сельскохозяйственной продукции/ - Оренбург, 1990.-

С.33-34.

5. Искендеров Т.Е. Поток азотистых веществ из предкелудков в сычуг телок и влияние на него физической формы кормов рациона// Тез.докл.Междуиар.кснф.Биологические основы высокой продуктивности с.-х. животныхЛЕоровсн, 3-7 сентября 1990.-С.23-24.

6. Искендеров Т.Е. Чистое всасывание аминокислот в портальную систему телок// Теэ.докл.ХУ Бсес.конф. Физиология пищеварения и всасывания/ - Краснодар,1990, 27-29 сентября.-С.112.

7. Искендеров Т.Б.,Лонгус И.Я.,Свккна Н.С. Скорость прохождения пщевьк масс через жолу дочно-кишечный тракт у телок в связи

с фпгтчсскоП аор'-эв раштана// Теэ.докл.ХУ Всес. кон{).

С:гз::э.-огг:л п—эгсрзтл п гспсиг?л;::л/ - Краснодар, 1990, г?-29 с»н-?.-Прл. - С.113.

Ь. "сисн-гроэ Т.п. Поток сг-пгаиислот из предзелудков в си-гут тзлог! э сети о фгтэ¡Я1зскоП фор--о Л пор!?за рациона// Балл, с.-х. - С.19-24.

9. Л-ггээ Л.Л. Т.О. ^тенсигносгь всасиганяя шга-

гг-г:г-з? п тслс^ о сзгзп о фпзпчсскоП форглоп коргяв

Оттзт с.-х. глготс:«. - Есрогсгс,1591 (п печати).

Подписано в печать 4.11.1991г. Формат 60x84/1,6 Объем 1 уч.-иэд. п. Тираж 100. Заказ 201.

% Ротапринт ВНИИ древа Балабаиово Калужской области