Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВОСПРОИЗВОДСТВО КАРПОВЫХ РЫБ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ВОСПРОИЗВОДСТВО КАРПОВЫХ РЫБ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ"

К-ъот

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ им. К. А. ТИМИРЯЗЕВА

На правая рзкоааса ПОПОНОВ Сергей Юрьевич

ВОСПРОИЗВОДСТВО КАРПОВЫХ РЫБ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Специальность 03.00.13— Физиология человека и животных Специальность 06.02.04—Частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства

I Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА 1093

Работа выполнена на кафедре прудового рыбоводства Мо сковской сельскохозяйственной академии им. К А Тимирязева.

Научные руководители доктор биологических наук про фессор В. В. Лавровский; доктор биологических на\к, профессор Ю. Н. Шамберев.

Официальные оппоненты доктор биологических на\к Н. И. Маслова; кандидат биологических наук Н. А. Эпштейн.

Ведущая организация — Всероссийский научно-исследовательский институт прудового рыбного хозяйства (ВНИИПРХ).

Защита диссертации состоится ¿М&Л . . . .

.¿-30

1993 г в «'-> » часов на заседании специализированного совс та Д-120 35 06 в Московской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии имени К А Тимирязева (ТСХА)

Адрес 127550, Москва И 550, Тимирязев* кая ул , 49, чче ный совет ТСХА

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХ \

Автореферат разослан «^ » г" г г

Ученый секретарь специализированного совета —

кандидат сельскохозяй

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

, - Актуальность проблемы.' В последние несколько десятилетий при искусственном рыборазведении в прудовом рыбоводстве ■ для стимуляции созревания половых продуктов ценных промысловых видов рыб применяют, в основном, гонадотропные препараты. - суспензию ацвтонированных гипофизов рыб и хорионический гонадотро-пин. . •,.■'"'.:. " . -' "-Ч •'.:'" .

' Однако, высокая стоимость этих препаратов при нестабильных результатах.... трудоемкость заготовки гипофизов от рыб доноров, их видовая специфичность и ряд других , побочных отрицательных.. "показателей . требуют перехода к более современным стандартным . препаратам. ~ . , . ■•'- ■ • - \ V , . *'

: ■ Основными вадачами исследований были: - ' • ,

. -подбор препаратов, вызывающих овуляцию у самок рыб; . 1 ; '-определение эффективных доз препаратов, вызывающих созревание и овуляцию половых продуктов у разных'видов карповых рыб;

.. '-изучение ■действия препаратов на .качество половых продуктов и выживаемость личинок;.'..-'■, . . : .'.-изучение влияния препаратов-на состояние производителей.

Научная новизна Впервые в ходе проведенных исследований подобраны сочетания и дозы синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона млекопитающих (аГнРГ} : и антагониста дофамина, вызывающие овуляцию у вьюна, карпа, белого и пестрого толстолобиков , белого амура, измены'закономерности действия аГнРР и антагониста дофамина в зависимости от дозы, краткости введения , препаратов, .. в условиях повышенной нерестовой температуры воды. . У ряда видов;рыб обнаружены видовые различия в чувствительности к исследуемым препаратам.. .■ ■ ■ ■■ л • '

центральная ^

ночная г-' --зчотека-Моск. се;« . .'эдв»мй

Ш&

Практик екая значимость Показана герспективнссть совместного использования сюпетического аналога гонадотропин -рили-еинг гормона и антагониста дофамина при разведении карповых рыб. Композиция препаратов обладает стандартной биологической активностью, срок 1 ¿пользования препаратов в 2 раза дольше по сравнению с гипофизарными препаратами Д."я самок карпа, белого и пестрого толстолобиков, белого амура подобраны схема и дозы введения препаратов, вызывающих овуляцию у 7С-100Х производителей

Апробация работы Основные положения диссертационной работы доложены на ежегодных конференциях молодых ученых 1989-1991гг. Московской сельскохозяйственной академии им К. А. Тимирязева, на Всесоюзном совещании по репродуктивной физиологии рыб (г Минск 1991)

Публикации По результатам диссертации опубликованы 6 науч-.ных статей и тезисов, получено авторское свидетельство на изобретение, сдано в печать 2 статей

Объем работы и структура'Диссертации Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и включает следующие разделы* обзор литературы, материал и методика, результаты исследований, обсуждение результатов, выводы , список литературы и

г

приложения. Текст иллюстрирован 16 таблицами и 7 рисунками. Список литературы включает 86 работ на русском ц 187 на иностранных языках.

Материал и методика

Исследования проводились в два этапа в период 1988-1991гг. I этап включал проведение экспериментов на ."ассраторном объекте

Схема постановки опытов .

*; Объекты ' • исследований /■' . , - - Опыт -'.'.".'.'*■•; ' * . КОНТРОЛЬ '

Дозы 'аГнРГ, мкг/кг Дозы дофаминоли-тиков,мг/кг . Хорионический гонадотропин • ед/г . Гипофиз, . мг/кг

Предварительная доза Разрешающая доза

/1г 1-10 10-50(50< <1 1-10 10-40

I ЭТАП МОДЕЛЬНЫЕ ОПЫТЫ* ' . ' . ' ' .

Вьюн •'.' + + , + + • + 10 ■

+ + -

- ■ - -- + •

II ЭТАП ПРОИЗВОДСТВЕННЫЕ ОПЫТЫ** , ' . . '

Белый -' '•' . толстолобик ■ '+ • .. - -г - ' 0,6 ' 2,4

Пестрый" -толстолобик ♦ , 1 - - • +!■ - •

Белый амур . *' : • - + - . +

.Карп' '." - + - +

Примечание: * При постановке опытов на самках вьюна использовали 4 уровня доз агнРГ - от <1 до 400 мкг/кг. ; ■ ** При постановке опытов на объектах промышленного разведения , -использовали 2 уровня доз аГнРГ - 1-10 мкг/кг. < - .г

-вьюне {Mi sgurnus fossil us L. ). Исследование проводилось в лабораторных условиях в Группе регуляции гаметогэнеза Института биологии развития им. Е К. Кольцова Российской Академии наук. Схема постановки опытов предотавлена в табл. 1. Эффективность применения препаратов оценивали по проценту овулировавших самок, выживаемости икры на стадиях "желточной пробки" и пигментации глав, проценту выклева личинок.

I! этап включал проведение опытов на промышленно разводимых видах рыб - Селом толстолобике ( Hypophthal iw chthys mol i tri x Yal. ). пестром толстолоОике ( Ari sti chthys nobi lis Rl ch. ), Селом амуре (Ctenopharyngodon í dell a Val.), карпе (Cyprinus carpto L.). Исследования проводились в производственных условиях на "Чврепетском", "Щекинском" (Тульская обл.), "Ставропольском" (Ставрополью^ крО. "Ергенинском" ( Волгоградская обл. ), "Вол-горечвноком" рыбоводных комбинатах (Костромская обл.} и в Кона-

t

ковском экспериментально-производственном отделе ВНПО по рыбоводству (Тверская обх).

Опыты на производителях карпа и растительноядных рыб (белый толстолобик, пеотрый толстолобик, белый амур) проводились а

летнее время в течение нескольких лет в равных хозяйствах стра-

/

кы I-V рыбоводных зон. Методика постановки опытов была одинаковой.

В качестве, синтетического аналога гонадотропин- рилизинг гормона использовали (des GB у"-CD-Alá' ] -Pro* -Et-ГнРГ) (а-ГнРГ), который был получен из экспериментально-производственной лаборатории "Сигферм" (Латвия); хорионический . гонадотропин, дофаминолитики - медицинские препараты. Изготовители пимозида, галоперидола фирма Геден Рихтер А. О , Венгрия; метоклопрамида-

- 4 -

; YEB ARZNE1 MI TTELWERK,Дрезден. Германия; сульпирида фирма Алколо-. * ид С(юпье,: Очюлавия; хорионический.гонадотропин отечественно*

■ го производства. А-ГнРГ, галоперидол, метоклопрамид,- суль'пирид,"-: 1 хорионический.гонадотропин растворяли в 0.ббХ•растворе NaCl, а . ' таблетки пимовида растирали.и, готовили суопенеию." Подсчет живых -.и погибших: эмбрионов проводили на стадиях./"желточной пробки" у- пигментации глав и выклева личгаок у. вьюна (Костомарова,; 1975}, ; у карпа *( Брагинская,1960) , ;у растительноядных рыб С Соин,1963;" •

Суханова, 1966]),' / •' '/. '*•, / ^ .; "v

••'.;.-У "В период-проведения опытов постоянно контролировался .тем-'" •

пературный и гидрохимический режимы" (Дурье, 1984; Бвооонов, При-//V веаенцев, 1987), .'Л.V ' /V; '".V • '.'■ ''

' j \ В процессе'выполнения работы исследован следующий матери- ■■ • ajLv; : индивидуала>но : в8вешено Л525 рыб;■ поставлено 23 длительных Ьд опытов/; проаналиаированно 22128 эмбрионови 10004 личинок рыб. /•/ Проведено 248 анализов воды. '. :о.Y-,'■'".'-VV-i-''"'■ ,'-'. *i; ^ Весь'цифровой материал обработан с привлечением J статист«-"'; ' ' ческих; методов / наГ персональной. ЭВМ - IBM PC/XT по программе ■■ • *"Statgraphics 1986". .Для сравнения ревультов При альтернативной: . .'••, иеменчивости . испольвоваликритерия хк : кюдот;-°-«гяри "Сравнвнт-/; средних значений количественных показателей критерий;Стыаден- ■ та (Урбах,19б4).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

•. Чувствительность разных партий самок высна к синтетическому -аналогу говадотропин-рилизинг гормона млекопитающих. ..

- . В опытах; проведенных ранее на вьюне (Гончаров, .1984),- от- „ ,. мечено; что;самки малочувствительны при. стимуляции у них cospe-" вания половых; продуктов синтетическим аналогом гонадотропин-ри- ;

X ОВУДИ- '00

ровавших самок

ео

во

40

20

10

26 100 ОПЫТ - аГнРГ

400

О в« ЫвС1 хг КОНТРОЛЬ

Рио.1 Чувствительность самок вьюна разных партий к аГнРГ.

По оси абсцисо - доеы аГнРГ в мкг/кг, ЯаС1 -0.6Х раствор КаС1, ХГ - хориони-чеекяй гоцадотролин |0_еД/г. Партии оамок: Ш - I. Ш "П, Ш "ПЛ. вш -IV.

лизинг гормоном. Наши исследования показали, что при стимуляции у самок вьюна овуляции а^нРГ при температуре воды 17?8-18?7 О четыре партии самок различаются по чувствительности к гормону (рио. 1). У рыб Оолее чувствительных партий овуляция наблюдалась при дозе 100 мкг/кг у 44-60%. У малочувствительных партий при этой же дозе реагировало 0-10Х самок. Инъекция 400 мкг/кг аГнРГ вызывала овуляцию в чувствительной партии у 75\ самок, а в малочувствительных у ЗОХ

- б -

X овули- 100 ровавших оамок

. '. во

во

*0

20

8.6 'Ю • 0.6« Nad

: ' ••' I : "' ' :

хг ;

е.в

ю го" о.в* n«ci ; II

хг

Рио. 2 Сравнение действия антагонистов дофамина на овуляции, . индуцированную аГнРГ. . , * '

- - Ш оси абсцисс - довы аГнРГ в ыкг/кг,

- - 1,11 - партии самок.

■■ . агнРГ+ Юмг/кг сульпирида

Ш аГнРГ+ Юмг/кг метоклопрамида

- П аГнРГ+ Юмг/кг галоперидола

; . вт аГнРГ+ Юмг/кг пимозида - : - . " ' . ЕШЩ. 0.6Х раствор Май

•"■■■• авд хорионичеокий гонадотропин 10 ед/г •

^ Сравнение действия антагонистов дофамина при введении о аналогом гонадотропин-рилизинг гормона. ' ■, .

• '.I У ряда костистых рыб существует негативный контроль сакре-ции гонадотропйнов, который осуществляется о помощью дофамина . (Peter е.а. ,1978; Chang е. а , 1983); Применение дофаминодитиков 'позволяет -' снять * дофаминовую блокаду и усилить воздействие аГ-

НРГ. ' '." : ■ ■.";'-*•'"-' ' -, :

. , Проведенные исследования покаэали. что из используемых антагонистов дофамина наиболее 'активны пимозйд и сульпирид. По

- - 7 - • г у - '

7. овуди- 100

ровавших

оамок

ео

ео

40 20 О

Рио.З Влияние различных доз пимозида и сульпирида на овуляцию у вьюна, индуцированную аГнРГ (20 мкг/кг).

1Ь оси абсцисо - дозы антагониста дофамина в мг/кг. ■1 20мкг/кг аГнРГ+ оульпирид СИ 20ЫКГ/КГ аГнРГ+ пимовид

своей активности испытанные препараты антагонистов дофамина можно расположить в оледующей последовательности пимозид>суль-пирид> метоклопрамид> галоцеридол (рио.2).

Использование сульпирида и пимозида в дозе 10 мг/кг сов-месно о 10 мкг/кг аГнРГ выявило, что пимовид Солее активен, чем оульпирид ( рис. 2). Уменьшение дозы пимозида в 16 раз (о 40 до 2,5 мг/кг) незначительно онижало процент овулировавших самок (100Х при дозе 40 мг/кг и 70Х при дозе пимоэида 2,5 мкг/кг) (рис. 3).

- а -

* овули- 80 ровавших оамок '70

8 О ю N ВАРИАНТА ОПЫТА

Рио:4.Чувствительность самок вьюна при разной кратности введения препаратов. . ■ , '

Реакция самок вьюна в зависимости от кратности введения препаратов. ' ' •' ■ .'•'' *.'"-! В предыдущих опытах было показано.что пимозид более активный препарат. чем сульяирид. С 'целью выяснения '.эффективности ' применения" сульпирида изучали реакцию самок вьюна.при различных схемах введения сульпирида и аГнРГСтаб.2).: Инъецирование сульпирида в:дозе 10 мг/кг самкам' вьюна,- как ■до-введения; смеси сульпирида ;и: аГнРГ. так.и после этого не увели-'чивало процент'овулировавших самок - (варианты ,4.5,6) (рис.4).

' ' • ' " ■■ - з

Таблица 2

Схема опыта по изучение реакции самж выпна ог крайности введения препаратов

N варианта . Препараты Интервал меаду инъекциями, ч Препараты Интервал метау инъекциями, ч препараты

1 аГнРГ гомкг/кг сульпирид 20МГ/КГ

г аГяРГ Бмкг/кг сульпирид ЮМГ/КГ

3 сульпирид 10мг/кг 2-а аГнРГ 5мкг/кг

4 оульпирид 10МГ/КГ 2,5-3 аГнРГ 5мкг/кг сульпирид 10МГ/КГ

5 сульпирид Юмг/кг 2,5-3 аГнРГ 5мкг/кг сульпирид Юмг/кг 1,5-2 сульпирид Юмг/кг

6 р-р МаС1 2-3,5 аГнРГ бмкг/кг сульпирид Юмг/кг 1-2,5 сульпирид 10МГ/КГ

7 р-р НаС1 2-3,5 аГнРГ 5мкг/кг сульпирид 10МГ/КГ

8 р-р N301 2-3,5 аГнРГ 5мг/кг сульпирид Юмг/кг 1-2 р-р N3*21

9 р-р НаС1 2-3,5 р-р ИэС1 1.5 р-р ИаШ

10 аГнРГ 5мкг/кг ПИШ8ИД ЮМГ/КГ

Продолжительность созревания самок выэна при стимуляции аГнРГ в зависимости от их чувствительности и применяемых антагонистов дофамина.

N партии самок Средняя температура воды, С Препараты Овулиро-вавшие самки, X Время до овуляции, ч

аГаРГ мкг/кг сульпирид мг/кг ПИМ08ИД мг/кг

1 18,5 100 10 100 48.1

10 10 90 50,3

100 60 66,2

10 2,5 20 64,5

10 0.6 10 64.5

II 18.7 10 10 90 42,7

20 10 80 45.9

400 30 65

100 10 87

10 10 10 45.5

III 17.8 20 • 10 100 42.6

20 2.5 70 42.4

20 10 30 45.5

400 30 59

100 0 -

20 2.5 0 -

IV 17,8 • 400 75 59,3

5 10 70 55,4*

20 10 70 59

100 44 66

б 10 30 69,5

Результаты раздельного и совместного введения сульпирида в дозе 10 мг/кг и аГнРГ в дозе 5 мкг/кг недостоверно отличались (вариант 3. в сравнении со 2 вариантом).

Применение аГнРГ и антагониста дофамина в различных дозах и схемах введения на самках вьюна показало; что наиболее эффективным является совместное однократное .введение препаратов. Увеличение числа инъекций сульпирида (варианты 3,4,Б) не повышает процента овулиро'вавших самок по сравнению с 1. вариантом. • Зависимость пролжительности созревания от эффективности препаратов. '....*- ; • _ '' . ■ •' '' ' . .

'• В опыте по,определению реакции самок'на аГнРГ было отмечено, что: в вариантах с низким'процентом овуляции продолжительность созревания самок наибольшая. Аналогичная закономерность просматривается ' в вариантах, где применяли аГнРГ, и антагонист дофамина. У самок с 70-100% овуляцией время от инъекции до наступления овуляции было наименьшим по сравнению с группами самок, имеющими низкий процент овуляции (0-30%) (табл. 3). \ ■' Влияние аГнРГ и антагонистов дофамина на качество икры.

Эффективность использования аГнРГ и антагониста дофамина оценивали по выживаемости-'зародышей в ходе эмбриогенеза.. Препараты использовали в'дозах, вызывавших максимальный процент.овуляции У: самок. ' v »,'*.;: ; По результатам инкубации икры,' полученную от самок при введении препаратов in vivó; оценивали действие пимозида и сульпирида.в комбинации с аГнРГ по сравнении с хорионическим гонадотропином. Результаты опыта приведены в таблице 4. , . '. :В ходе инкубации не:выявлено,-различий в развивающейся икре. Полученные результаты статистически между, собой но различа-

Сравнение качества подовых продуктов, полученных с помощью различных гормональных препаратов

Препараты Дозы препаратов Число самок, шт Живые зародыши,X Выклюнувшие личинки,X

стадия 19 стадия 33

аГнРГ мкг/кг пимозид мг/кг 1 8 89,9+2,5 87,6+2,2 79,1+7,6

аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг оо | 7 87,4+3,2 85,2+3,4 76,2+7,5

хорионический гонадотропин ед/г 10 9 83,1*4,2 77,5+4.5 75.5+4,2

Стимуляция овуляции у карпа аГнРГ и антагонистом дофамина

Карп является одним ив основных видов рыб, выращиваемых в прудовых и тепловодных хозяйствах. Для получения 8релой икры применяют, как правило, метод гипофизарных инъекций (Гербиль-ский,1941).

Данные предыдущих опытов по стимуляции созревания половых продуктов у самок вьюна позволили определить наиболее активные антагонисты дофаьина. о учетом наименьшей стоимости инъекции для стимуляции созревания половых продуктов у самок карпа использовали смесь препаратов, состоящую из аГнРГ и сульпирида.

Использование аГнРГ в дозе 10 мкг/кг совместно о 2 мг/кг сульпирида позволило получить овуляцию у 80Х самок карпа (табл 5). Применение одного аГнРГ в дове 10 мкг/кг не вызывает у самок овуляции Однократное введение смеси аГнРГ (10мкг/кг) и сульпирида (1 мг/кг) также не эффективно. В ю же время двухкратное введение этих препаратов в тех же дозах вызывают овуляцию у 80* самок. Применение аГнРГ в дозе 10 мкг/кг и 10 мг/кг

- 13 -

Результаты действия аГнРГ и сульпирида при ведении их самкам карпа в разных довах

Серия опыта Препараты ' Число рыб Температура воды "•'■' Дозы препаратов Овулиро-вавшие самки, 1 Время • созре--вания,ч Средняя масса . икры,г Процент оплодотворения %

предварительная разрешающая

I аГнРГ мкг/кг- ■5 22 2 8. 0 1 " — •

аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг '5 ■ . 22 ' 2 ' " ' 0.4 8 ' • 1,6 80 11-17 303,3+92,6 '77,9+4,4

'суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 5'. 22 . 0,6 " 2,6 100 13-15 445+255 , 80,9+5,4

II аГнРГ мкг/кг. сульпирид мг/кг ' " 5 19 10' , 1. , 0 '

аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг ' 5.. 19 . 2 0,2 8 , 0,8 ■ 80 10-36 1060+74,3 46,9+10,3

суспензия ацетон, гююфива мг/кг • 5' 19 0.6 2,4 : 100 . 14-18; 938+267,9 54,1+10,1

Ш аГнРГ мкг/кг ■ -.'■. сульпирид мг/кг . 6 28 .2 ".; 2 ' . 8'. 8 0 - ...

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг : ' 11 23. » 0.6 . 2,6.;';. 72,7 '8-11 420+96,7.; 28,2+7,3

IV аГнРГ юсг/кг' . сульпирид мг/кг. 30 .24 2 ' 2 ; • 8 ' ■ 8 100 " •ю. 258+63,5 87,2+7,8

суспензия ацетон-гипофиза мг/кг 30- 24 ••0,6 2.6' 98 8-11 237+75,3 84,6+5,7

сульпирида при температуре 24°С позволяет подучить овуляцию черев 10ч после второй инъекции у 100%. самок.

Эффективность применения аГнРГ и сульпирида при стимуляции овуляции у самок карпа в условиях верхней границы нерестовой температуры (28еС) снижается Использование суапенэии ацетони-рованного гипофиза и аГнРГ с сульпиридом в границах оптимума нереотовых температур (24° С) способно вызывать овуляцию у 98-1002 сашк (табл.5).

Стимуляция овуляции у растительноядных рыб препаратами аГнРГ и антагонистом дофамина.

Йрименение аГнРГ в дозе 10 мкг/кг и 10 мг/кг сульпирида При двухратном введении стимулировало овуляцию у самок карпа.

I

Нас интересовала возможность использования данных препаратов для индукции овуляции у самок растительноядных рыб.

Действие препаратов исследовали при двухкратном введении -202 обшей дозы предварительная и 802 разрешающая инъекции. АГнРГ в дозе 1 мкг/кг и 1 мг/кг сульпирида у пестрого толстолобика вьвывает овуляцию 832 самок при продолжительности совревания 9-22ч после разрешающей инъекции Увеличение довировок до 2 мкг/кг аГнРГ и 2 мг/кг сульпирида синхронизировало процесс созревания и вызывало овуляцию у 1002 самок пестрого толстолобика и 752 белого амура (табл.б).

В ходе применения аГнРГ и сульпирида на самках карпа и растительноядных рыбах не отмечено гибели производителей. При использовании суопензии ацетонированных гипофизов в ряде случаев наблюдались гибель производителей или же тромбы яйцеводов. Экономическая эффективность применения препаратов

Применение аГнРГ и сульпирида для созревания половых продуктов и овуляции у карповых рыб позволяет снизить стоимость

- 15 -

Таблица' 6 —

- Сравнение эффективности использования суспензии ацетонированных гипофизов и смеси . -;., • аГнРГ о судьпиридом для получения ередых половых продуктов у Ьамок растительноядных рыб .

|Вид • рыб Л ; Препараты' ' '/V Число рыб; - •, Дозы , препаратов Овулирб-вавшие • самкиД Продолжительность со-8ревания,ч Средняя масса икры,г Процент оплодотворения Д

предварительная разрешающая

¡Пестрый; [толстолобик аГнРГ шг/кг' ■ - " сульпирид мг/кг:.. . 0,2 . ■ 0,2 • . 0.8 > 0.8 ■ '.83,0 V 9 -22 ; 1496,7+318,4

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг ' 7 : 'о,б " '2.4': ; 66.0 10-12 , 1837,5+392,3 •'• ' '

{Белый X -. ¡толстолобик аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг. ' 12 ' ' ". 0.4 Л 0.4 ' ' ' 1.6 - ■ - 1,6 •;••• : 100-, '''б: 931.8+53.3---. 66.5+8.5

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 22' - 0.6 *■• :: 2.4 ■'-: 59,1 •■'. 9-10..". . 938.5+49.'4 - 75.3+7,4

! ,. , г ' |Белый амур. аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг. 8'. ор , 1,6 1.6. 75,0 7 1283,3+157.9 78,8+7,5

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг ' 17 '' 0.6 : 2.4 88,2 •• '8,5-10 1286.7+94.4 • 81,9+6,1

инъекций на одну самку карпа в сравнении с применение« экстракта гипофизов (в ценах 1990г.) с 12,0 руб до 2,63 руб. то есть в 4.6 раза Использование смеси препаратов для стимуляции овуляции у белого и пестрого толстолобиков и белого амура так яе позволила снизить стоимость инъекции на одну самку. У самок белого толстолобика о 17 руб до 0.76 руб т.е. • в 22.4 ргиа, у белого амура о 23 руб до 1,06 руб т.е. в 21.7 раза к г мстрого толстолобика в 21.2 раа. Однако следует отметить ем® ряя паю- . жительных эффектов:

1) Длительный срок хранения препаратов. Для аГкЕС и сульпирида при 4°О составляет более 4 лет при сохранении стандартной активности препаратов. Доя обевдиренного препарата гапофгва срок хранения без существенной потери гонадотропиой агаиааостя ограничен - и составляет всего 2 года.

2) При использовании аГнРГ и сульпирида практически т отмечена гибель производителей, фи гицофиварных инъекцивс к некоторых случаях наблвдается гибель рыбы или же в течояш- нескольких сезонов они не в состоянии нереститься из-за резорбции половых продуктов.

3) При использовании смеси аГнРГ и сульпирида викнмвяа возможность передозировок ( поскольку используютоя - выпускаемые промышленностью стандартные препараты), что имеет мезга оря применении гипофизарных инъекций.

В Ы В,0 Д ы

1) Равные партии вьюнов различаются по чувствитваювшппе к аналогу гонадотропин- рилизинг гормона. На дозу препараяп» 10(1 '

- 17 -

мкг/кг овуляцией реагируют от О до 60Х самок. Максимальный ответ,-(,75Х) был получен, при инъекции 400 мкг/кг. ■ ' ' ' -, .2) Подтвержден тормозящий эффект дофамина для•самок вьюна и карпа при стимуляции у них, овуляции , который можно'снять в результате применения дофаминолитиков. • -

3) Наиболее эффективными из испытанных антагонистов дофамина, при совместном введении с аналогом гонадотропин - рилизинг... гормона оказались пимозид и сульпирид. По своей активности испытанные препараты антагонистов дофамина можно расположить.в сле-дуюедэй последовательности пимозид>сульпирид>мвтоклопрамид>га-лоперидол. ' " * / ' - ' *

4) Использование сульпирида или пимозида в дозе 10 мг/кг " совместно с 10-20мкг/кг аГнРГ позволяет получать у самок вьюна из достаточно чувствительной партии 80-100% положительный.. ответ. Применение меньших доз сульпирида понижает эффект. На менее чувствительных партиях хорошо выраженный ответ возможно получить' за счет;увеличения дозы либо аналога гонадотропин-ри-ливинг.гормона,'.."либо антагониста дофамина. : . , *■•

•''■'■ 5) Впервые установлены дозы аналога гонадотропин —рилизинг гормона и сульпирида, вызывающие 75-1002 овуляцию у вьюна и промышленно'1 разводимых рыб. Для-карпа такими дозами являются. 10'. мкг аГнРГ и 10 мг сульпирида на кг,'массы тела: для растительно- ■ ядных рыб (белый и пестрый толстолобики,,'белый амур) 2 мкг/кг аГнРГ и 2мг/кг сульпирида. ' ;

. 6) Использование аГнРГ в дозе 10 мкг/кг для • карпа - и 2 мкг/кг для'растительноядных рыб совместно.с-сульпиридом поэвот лило в большей степени управлять процессом овуляции,(-получение ; зрелой икры в определенные ,сроки),/чем при 'применении экстрак-j. та гипофиэа. ,

' ' - 18 - , ' •'

7) Качество икры, получаемой с помощью аналога гонадотро-пин-рилиэинг гормойа и айтагйкйстов дофамина у вьюна и карпа, не отличается от качеств^ получаемой с помощью высокоэффективных препаратов хорионического гонадотропина для вьюна и

f -г I г

экстракта гипофйаа для карпа

8) Применение аГнРГ и сульпирида в 4,6-СЗ раза дешевле применения экстракта гипофиза при стимуляции овуляции у самок карпа и растительноядных рыб

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

Рекомендуется использование смеси препаратов синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и сульпирида для симуляции созревания ооцитов и овуляции у самок в следующих дозах: для карпа аГнРГ - 10мкг/кг и сульпирида 10 мг/кг, для растительноядных рыб (белый и пестрый толстолобики,белый амур) аГнРГ -2 мкг/кг и сульпирида 2 мг/кг. Введение препаратов двукратное-20% обтай дозы - предварительная инъекция и 80% - разрешающая.

По материалам диссертации опубликованы следующие работы:

1. Мот лох а Н., Попонов С. а Стимуляция созревания и выделения половых продуктов производителей рыб снятием дофаминовой блокады люлибериновых рецепторов аденогипофиза В сб. Всес. сов по новым объектам и новым технологиям рыбоводства на теплых водах М.,1933, 136-138

2. Мотлох ЕЕ, Попонов С КХ , Николаев С.Г. Синтетические олигопептиды - стимуляторы гаметогенеза и регенерации в замене гипофизарных инъекций Сб тез докл VII Всео. конф "Экологическая физиология и биохимия рыб". Ярославль, 1989ц 51-53

3. Мот лох Н. R , Глубокое А. И., Микодина Е.Е. Новолоцкий В. А., Попонов С. КХ , Седова М. А.' Зависимость овуляции карпа от температурного режима при инъекциях "Нерестина-ГV Тез. докл. IV Всес. сов. по рыбохозяйственному использованию теплых вод. • М.. 1990; 146-149. м ' , " , '. ' ' ;

4. Мотлох Н. а , Попонов С.Ю., Подольский И. Я Способ стимуляции созревания половых продуктов карповых рыб. Авт. св. на изобр. N1653579 от 8 февраля 1991г. .

5. Шпонов С. 10., Веселовзоров С. И., Мэтлох 11Е , Гончаров ЕФ. Дофаминовая регуляция овуляции и'спермиации у рыб. Эколого-физиологические и токсикологические аспекты рыбохо-вяйственных исследований Сб. науч. тр. М.:ВНИРО, 1990. ' Г 102-117.' ' ' " , ■ 1 ч ' ' ' '

6. Шпонов С. Ю., Гончаров Б. Ф. Влияние синтетического ана-. лога- гонадотропин-рилизинг гормона и антагонистов дофамина на овуляцию у вьюна (Mi sgurnus fossilis L.). Tes. докл. Всес. совет "Репродуктивная физиология рыб". Шнек, 1991. 43.

7. Ifotlokh N. N., Poponov 5. Yu., Podol ski I. Уа . Enhancement' of maturation and releasing . of gametes 'in fish, induced = by combi ned admi ni strati on of a LH-RH superacti ve anal oque and sulpiride, a D-2 antagonist. Abst,' Зулр. "Signal moUcules and mechanisms of ani mal behaviour",,Pushchi no,' 1989 , 41. ' I

Объем 1 'Л п л

Закаа И8

Тираж 100

Типография Московской н академии им К А Тимирязева 1J7550, Москва И 550, Тимирязевская ул, 44