Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Воспроизводство карповых рыб с использованием биологически активных веществ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Воспроизводство карповых рыб с использованием биологически активных веществ"

РГ6 од

. дпр 'г\п'-^0ск0вская ордена ленина 1 в 6>дёна трудового красного знамени сельскохозяйственная академия им. к. а. тимирязева

На правах рукописи

ПОЛОНОВ Сергей Юрьевич

ВОСПРОИЗВОДСТВО КАРПОВЫХ РЫБ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Специальность 03.00.13— Физиология человека и животных Специальность 06.02.04—Частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

москва 1993

Работа выполнена на кафедре прудового рыбоводства Московской сельскохозяйственной академии им. К. А. Тимирязева.

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор В. В. Лавровский; доктор биологических наук, профессор Ю. Н. Шамберев.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук Н. И. Маслова; кандидат биологических наук Н. А. Эпштейн.

Ведущая организация — Всероссийский научно-исследовательский институт прудового рыбного хозяйства (ВНИИПРХ).

199 заседании специализированного сове-

та Д-120.35.06 в Московской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии имени К. А. Тимирязева (ТСХА).

Адрес: 127550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 49, ученый совет ТСХА.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА.

Автореферат разослан » . . . 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета — кандидат сельскохозяйственных наук

Т. М. Подколзина

состоится

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы, В последние несколько десятилетий при искусственном рыборазведении в прудовом рыбоводстве для стимуляции созревания половых продуктов ценных промысловых видов рыб применяют, в основном, гонадогропные препараты - суспензию ацетонированных гипофизов рыб и хорионический гонадотро-пин.

Однако, высокая стоимость этих препаратов при нестабильных результатах, трудоемкость заготовки гипофизов от рыб доноров, их видовая специфичность и ряд других побочных отрицательных показателей требуют перехода к более современным стандартным препаратам.

Основными задачами исследований были: ~ . -подбор препаратов, вызывающих овуляцип у самок рыб;

-определенив эффективных доз препаратов, выэываюадге созревание и овуляцию половых продуктов у разных видое карповых рыб;

-изучение действия препаратов на качество половых продуктов и выживаемость личинок;

-изучение влияния препаратов■на состояние производителей. Научная новизна. Впервые в ходе проведенных исследований подобраны сочетания и дозы синтетического аналога гонадотропш-рилизкнг гормона млекопитающих (аГнРГ) и антагониста дофамина, вызывающие овуляцию у вьюна, карпа, белого и пестрого толстолобиков, белого амура. Изучены закономерности действия аГнРГ и антагониста дофамина в зависимости от добы, кратности введения препаратов, в условиях повышенной нерестовой томлературы воды. У ряда' видов рыб обнаружены видовые различия в чувствительности к исследуемым препаратам.

Практическая значимость. Показана перспективность совместного использования синтетического аналога гонадотропин - ршш-еинг гормона и антагониста дофамина при разведении карповых рыб. Композиция препаратов обладает стандартной биологической активностью, срок использования препаратов в 2 раза дольше по сравнению с гипофизарными препаратами. .Для самок карпа, белого и пестрого толстолобиков, белого амура подобраны схема и дозы введения препаратов, вызывающих овуляцию у 75-100Х производителей.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на ежегодных конференциях молодых ученых 1989-1991гг. Московской сельскохозяйственной академии им. К А. Тя миряэева, на Всесоюзном совещании, по репродуктивной физиологии рыб (г.Минск 1991).

Публикации. По результатам диссертации опубликованы 6 науч-,ных статей и тезисов, получено авторское'свидетельство на изобретение, сдано в печать 2-стат£И.

Объем работы и структура'-Диссертации. Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и включает следующие разделы: обзор литературы, материал и методика, результаты исследований, обсуждение результатов/ выводы .список литературы и приложения. Текст иллюстрирован 16 таблицами и 7 рисунками. Список литературы включает 86 работ на русском ц 187 на'иностранных языках. '

Материал и методика .■:

Исследования проводились в 'два этана в период'1988-1991гг I этап включал проведение экспериментов на лабораторном объекте

- 2 - • '. „ • ■

Таблица 1

Схема постановки опытов

Объекты исследований. Опыт • Контроль

Дозы аГнРГ,мкг/кг Дозы дофаминоли-тиков,мг/кг Хорионический гонадотропин ед/г , Гипофиз, мг/кг

Предварительная доза Разрешающая доза

п 1-10 10-50 50< <1 1-10 10-40

I этап модельные опыты*

Вьюн + + + + + + + 10 - -

- + + + - - -

- - - - + +

11 этап производственные опыты**

Белый толстолобик + - - - -г - - 0,6 2,4

Пестрый толстолобик - + - + -

Белый амур - + - - + -

Карп - + - - - + -

Примечание: * При постановке опытов на самках вьюна использовали 4 уровня доз аГнРГ - от <1 до 400 мкг/кг. ** При постановке опытов на объектах промышленного разведения использовали 2 уровня доз аГнРГ - 1-10 мкг/кг.

твыонв (Misgurnus fossi l us L.). Исследование проводилось в лабораторных условиях в Группе регуляции гаметогенева Института биологии развития им, Н. К. Кольцова Российской Академии наук. Схема постановки опытов представлена в табл. 1. Эффективность применения препаратов оценивали по проценту овулировавших самок, выживаемости икры на стадиях "желточной пробки" и пигментации глав, проценту вьклева личияок."

И этап включал проведение опытов на промьишенно разводимых видах рыб - Селом толстолобике (Hypophthal michthys mol i tri х Val.), пестром толстолобике (Ari sti chthys trobi Iis Ri ch.), белом амуре (Ctenopharyngodon i del la VaJ.), карпе (Cyprl ñus carpió L.). Исследования проводились, в производственных условиях на "Черепетском", "Пекинском" . (Тульская обл.),. "Ставропольском'* (Ставрополью^ кр.),"Ергенинском" ( Волгоградская обл.), "Вол-гореченском" рыбоводных комбинатах (Костромская обл.) и в Конаковском экспериментально-проивводственном отделе ВНПО по рыбоводству (Тверская обл.). .

Опыты на производителях карпа и растительноядных рыб (белый толстолобик, пестрый толстолобик, белый -амур) проводились в летнее время, в течение нескольких лет в равных хозяйствах страны Í-V рыбоводных вон. Методика постановки опытов была одинако-эой. .. ' ' ... : . -

В качестве, синтетического аналога гонадотропин рилизинг

• * ЙА ■ f . . Я

гормона попользовали (des 61 у -CD-Al а ) -Pro -Et-ГнРГ) (а-ГнРГ), который был получен ив экспериментально-проивводствек-ной лаборатории "Сигфарм" (Латвия); хорионический . гонадотропин, дофаминолитики -'медицинские препараты. Наготовители пимовида, галоперидола фирма Теден Рихтер А. 0., Венгрия;' мётоклопрамида^:

УЕВ ARZNEI Wt TTELWERK,Дрезден, Германия; сульпирида фирма Алколо-ид Скопье. Югославия;хорионическиЯ гонадотропин - отечественного производства.■ А-;ГнРГ, галоперидол, иетоклопрамид, сульпирид, корионический гонадотропин растворяли в 0,65% растворе NaCl, а габлетки пимовида растирали и готовили суспензию. Подсчет живых и погибших эмбрионов проводили на стадиях "желточной пробки", пигментации глаз и выклева личинок у вьюна (Костомарова.' 1975), у карпа ( Брагинская, 1960), у растительноядных рыб (. Соин.1953;' Суханова, 1966). ' - •. ' •

В период проведения опытов постоянно контролировался температурный и гидрохимический режимы (Дурье, 1984; Бессонов, При-везенцев, 1987).

. В процессе выполнения работы исследован следующий материал: индивидуально взвешено. 1525-рыб; поставлено 29 длительных опытов ; проанализировало 22128 эмбрионов и 10004 личинок рыб. Проведено 248 анализов воды.

Весь цифровой материал обработан с привлечением, - статистических методов 'на персональной ЭВМ - 1 ЕМ PC/XT по программе "Statgraphics 1986". Для сравнения розультов при альтернативной изменчивости попользовали критерий хи квадрат, а при сравнении средних значений количественных покаватедей - критерий Стьюден-га (Урбах,1964).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Чувствительность разных партий самок вьюна к синтетическому аналогу гойадотропин-рилизинг гормона млекопитающих.

В опытах, проведенных ранее на. вьюне "(Гончаров, 1984) , отмечено, что самки малочувствительны при'стимуляции у них созревания полоеых продуктов синтетическим аналогом гонадотропин-ри-■."•".'■,"■'-•.- 5 - ' "':<

% овули-100

ровавшх

самок

ео

26 100 ОПЫТ - аГнРГ

0.6% ЫаС1 хг КОНТРОЛЬ

Рио. 1 Чувствительность самок вьюна разных партий к'аГнРГ.

По оои абсцисо - довы аГнРГ в жг/кг/.й,6?. КаС1 -- 0, 6% раствор Май , ХГ- - . хйриони-' ческой гочадотррдйн-.ГОвД/г. . Партии оамок:'• в - I, ЕЗ -П. Ш> "1П> ^

лизинг гормоном. Вайи исследования показали, что при стимуляции у самок вьюна овуляции а?нРГ при температуре води 1?°в-Хв,°,7 С чбтира партии самок различаются по чувствительности к гормону (рио. 1). У рыб более чувствительных партий овуляция наблюдалась при дозе 100 мкг/кг у 44-бОХ. У малочувствительных партий при этой «э дозе реагировало О-10Х самок. Инъекция 400 мкг/кг аГнРГ вызывала овуляцию в чувствительной партии у 75% самок, а в малочувствительных. у ЗОХ.

- б -

ровавших самок

! t ! P i; il

i i i î I } r i i i и fj

i | 1 i t; L f i t | i'1 4 il

i i : s . i f4 t i'-j

! ' ! i i iL—l Si—-L--L-. l , n i i t $ i 'à.

2.® 10 0.«Х NaCI

I

ХГ .

г.е

10 го о.о% Haci И

кг

Рио. 2 Сравнение действия антагонистов дофамина на овуляцию, индуцированную аГнРГ.

По оси абсцисс - дозы аГнРГ в Mtr/кг. 1,11 - партии сашк. П~1 аГнРГ+ ШяУкг сульпирмда в аГнРГ+ ICioVkt датоюшрамвда

ШаГнРГ+ 10мг/кг галоперадола аГнРГ+ Юмг/ïît пимоэида . ШШЗ. 0,6% раствор NaCl

И хорионический гонадотропин 10 ед/г .

Сравнение действия антагонистов дофаышш при введении о аналогом гоиадотропин-рилиаинг гормона

У ряда костистых рыб существует негативный контроль секреции гонадотропшгов, который осуществляется о помощью дофашна (Peter о. а/1970; Chang о. а , 1983). Пришяение дофамикожгикоз позволяет снять дофаминовую блокаду и усилить воздействие аГ-НРГ.

Проводшшыэ исследования показали, что из используемых антагонистов дофамина наиболее, активны пимозид и оульлирид. По

• - 7 •

X овули- 100 ' ровавшх оамок

ео

60

40

го

о

2,6 10 40

Рио. 3 Влияние различных доз пимозида и сульпирида на овуляцию у вьюна,.индуцированную аГнРГ {20 мкг/кг).

По оси абсцисс - дозы антагониста дофамина в мг/кг. ■В 20мкг/кг аГнРГ+ оульпирид ШЛШ £Омкг/кг аГнРГ*- пимобид

своей активности испытаннее препараты антагонистов дофамина можно расположить в оледующей последовательности пимозид>суль-

пирид>мэтоклопраыид>гадоцеридол (рис. 2).

Использование сульпирида и пимозида.в дозе 10 мг/кг сов-месно о 10 мкг/кг аГнРГ выявило. что пимозид более активен, чем оульпирид ( рис. 2). Уменьшение дозы пимозида в 16 раз (о 40 до 2.5 мг/кг) незначительно снижало процент овулировавших самок (1007. при доае 40 мг/кг и 70Х при дозе пимозида 2,5 мкг/кг) (рис.3).

- 8 - :

* Л /• Я > и ■ .,] 1 ¿- ' IV-■ м

НИ::::!;:::::

-

рр

7. овули- 60 ровавших самок 70

.60

БО

40

30

20

10

О

. N ВАРИАНТА ОПУГА

Рис. 4 Чувствительность самок вьюна при разной кратности введения препаратов.

Реакция самок вьюна в зависимости от кратности введения препа^ ратов.

В предыдущих опытах было показано что пимозид более активный препарат, чем оульпирид. С целью выяснения .эффективности применения сульпирида изучали реакцию самок вьюна при различных схемах введения сульпирида и аГнРГ(таб.2).

Инъецирование сульпирида в дозе 10 мг/кг самкам вьюна, кап до введения .смеси сульпирида и аГнРГ, так и после этого не увеличивало процент овулировавших самок (варианты 4,5,6) (рис.4).

Таблица 2

Су.&& огшта по изучению реакции самок вьюна от краткости введения препаратов

N варианта . Црепарати Интервал шаду инъекциями, ч Препараты Интервал . между инъекциями, ч Препараты

1 аГнРГ 20мкг/кг СУЛЬПИРИД 20МГ/КГ

2 аГнРГ бмкг/кг сулыжрид 10МГ/КГ

3 сульпирид ЮМГ/КГ 2-3. аГнРГ 5мкг/кг

4 сульпирид Юмг/кг 2,5-3 аГнРГ 5мкг/кг сульпирид Юмг/кг

5 сульпирид Юмг/кг 2,5-3 аГнРГ 5мкг/кг сульпирид Юмг/кг 1,5-2 сульпирид Юмг/кг

6 р-р МаЯ 2-3,5- аГнРГ 5мкг/кг сульпирид Юмг/кг 1-2,5 сульпирид Юмг/кг

7 р-р ИаС1 " 2-3,5 аГнРГ бмкг/кг сульпирид Юмг/кг

8 р-р N301 2-3,5 У' аГнРГ 5мг/кг сульпирид. Юмг/кг ■ 1-2 р-р Май

9 р-р ЫаС1 2-3.5 р-р ИаС1- 1.5 р-р НаС1

10 аГнРГ 5мкг/кг пимов ид Юмг/кг

Таблица 3

. Продолжительность созревания самок вьюна при стимуля-■ дай аГнРГ в зависимости от их чувствительности и применяемых антагонистов дофамина.

N партии самок Средняя температура воды, С Препараты . Овулиро-вавшие самки, 7. Время до овуляции, ч

аГнРГ ют/кг сульпирид иг/иг пим08ид мг/кг

I ,18,6 ' 100 10 100 48,1

10 10 90 50,3 .

100 60 66,2

10 2,5 .20 64,5 '

10 0,6 10 64,5

П 18,7 10 . 10 90 42,7

20 10 80 45,9

400 30 65

100 10 37

10 10 10 45,5

III 17,8 20 • 10 100 42,6/

20 2,5 70 42,4 '

20 10 30 45,5

400 30 59

100 0 -

20 2,5 0 -

IV 17,8 400 75 59,3

' б 10 70 55,4'

20 10' 70 59

100 44 66

б 10 30 69,5

Результаты раздельного и совместного введения сульпирида в дозе 10 мг/кг и аГнРГ в дозе 5 мет/кг недостоверно отличались (вариант 3 в сравнении со 2 вариантом).

Применение аГнРГ и антагониста дофамина в различных дозах и схемах введения на самках вьюна показало, что наиболее эффективным является совместное однократное введение препаратов. Увеличение числа инъекций сульпирида (варианты 3,4,6) не повышает процента овулировавших самок по сравнению с 1 вариантом.

Зависимость пролжительности созревания от эффективности препаратов.

Б опыте по определению реакции самок на аГнРГ было отмечено, что в вариантах о низким процентом овуляции продолжительность созреван/я самок наибольшая. Аналогичная закономерность просматривается в вариантах, где применяли аГнРГ и антагонист дофамина. У самок с 70-100% овуляцией время от инъекции до наступления овуляции было наименьшим по сравнению с группами самок, шэшими низкий процент овуляции (0-30%)(табл. 3). Влияние аГнРГ и антагонистов дофамина на качество икры.

Эффективность использования аГнРГ и антагониста дофамина оценивали по выживаемости зародышей в ходе эмбриогенеза. Препараты использовали в дозах, вызывавших максимальный процент овуляции у самок. • По результатам инкубации икры, полученную от самок при введении препаратов 1 п VI \о. оценивали действие пимозида и сульпирида в комбинация с аГнРГ по сравнении с хорионичееким гонадотропином. Результаты опыта приведены.в таблице 4.

В ходе инкубации не выявлено различий в развивающейся икре. Полученные результаты статистически шэду собой но различаются.

Таблица 4

Сравнение качества половых продуктов, полученных с помощью различных гормональных препаратов.

Препараты Довы препаратов Число самок, шт Живые'зародыши, X Выклюнувшие личинки,%

стадия 19 стадия 33

аГнРГ мкг/кг пим08ид мг/кг оо 1 8 89,9+2,5 87,6+2,2 79.1+7,6

аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг оо 7 87, 4+3,2 85.2+3,4 76,2+7,5

хорионический гонадотропин ед/г 10 9 ' 83,1+4,2 77,5+4,5 75,5+4,2

Стимуляция овуляции у карпа аГнРГ и антагонистом дофамина.

Карп является одним из основных видов рыб, выращиваемых в прудовых и тепловодных хозяйствах. Для получения эрелой икры применяют, как правило, метод гипофизарных инъекций (Гербиль-ский.1941).

Данные предыдущих опытов по стимуляции созревания половых, продуктов у самок вьюна повволили определить наиболее активные антагонисты дофамина. С учетом наименьшей стоимости инъекции для стимуляции соэревания половых продуктов у самок карпа ис-польвовали смесь препаратов, состоящую из аГнРГ й сульпирида.

Использование аГнРГ в дозе 10 мкг/кг совместно с 2 мг/кг оульпирида позволило получить овуляцию у 80% самок карпа (табл.5). Применение одного аГнРГ в.доэе 10 мкг/кг не вызывает' у самок овуляции. Однократное введение смеси аГнРГ (10мкг/кг) и сульпирида (1 мг/кг) таю® не эффективно. В то же время двухкратное введение этих препаратов в тех же дозах вызывают овуляцию у 80% самок. Применение аГнРГ в дозе 10 мкг/кг и 10 мг/кг

- 13 -

Таблица.5

Результаты действия аГнРГ и сульпирида при ведении их самкам карпа в разных дозах

Серия опыта Препараты Число рыб Температура воды Дозы препаратов Овулиро-вавшвд самки,% Время созревания,« Средняя масса икры, г Процент оплодотворения %

предварительная разрешающая

I аГнРГ мкг/кг 5 22 2 8. 0 _, п, _

аГиРГ мкг/кг сульпирид МГ/КГ 5 22 2 0,4 8 1,6 80 11-17 303,3+92,6 77,9+4,4

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 5 22 0,6 2,6 100 13-15 445+255 80,0+5,41

| П аГнРГ мот/кг сульпирид мг/кг 5 19 - 10 1 0 - - . -

аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг 5 19 2 0,2 8 , 0,8 80 10-36 1060+74,3 46,9+10,3

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 5 19 0,6 2,4 100 14-18 938+267,9 54,1+10,1

| III | аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг 6 28 2 2 8 8 0 - - -

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 11 . 28 . 0,6 2,6 72,7 8-11 420+96,7 28,2+7,3 |

9 - — - 5 IV аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг 30 24 2 2 8 8 100 •10 . 258+63,5 87,2+7,8 |

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 30 24 0,6 2,6 98 8-11 237+75,3 84,6+5,7 \

сульпирида при температуре С Позволяет получить овуляцию черев 10ч после второй инЮкции у 100% самок.

Эффективность применения аГнРГ и сульпирида при стимуляции овуляции у самок карпа в условиях верхней границы нерестовой температуры (28°С) снижается. Использование суспензии ацетони-рованного гипофиза и аГнРГ с сульпиридом- в границах оптимума нерестовых-температур (24° С) способно вызывать овуляцию у 98-100% самок (табл. 5).

Стимуляция овуляции у растительноядных рыб препаратами аГнРГ и антЬгалтйтом дофамина.

'•Йри'мененив аГнРГ в дозе 10 мкг/кг-и 10 мг/кг сульпирида

йри двухратном введении стимулировало овуляцию у самок карпа,

i

Нао интересовала вовможноогь использования данных препаратов для индукции овуляции у самок растительноядных рыб.

Действие препаратов исследовали при двухкратном введении -20% общей дозы предварительная и 80% разрешаяющая инъекции. АГнРГ в дозе 1 мкг/кг и 1 мг/кг сульпирида у пестрого толстолобика вызывает овуляцию 83% самок при продолжительности согревания 9-22ч после разрешающей инъекции. Увеличение дозировок до 2 мкг/кг аГнРГ и 2 мг/кг сульпирида синхронизировало процесс созревания и вызывало овуляцию у 100% самок пестрого толстолобика и 75% белого амура (табл. 6).

В ходе применения аГнРГ и сульпирида на самках карпа и растительноядных рыбах, не отмечено гибели производителей. При использовании суспензии абонированных гипофизов в ряде случаев; наблюдались гибель производителей или же тромбы яйцеводов. Экономическая эффективность применения препаратов.

Применение аГнРГ и сульпирида для созревания половых продуктов и овуляции у карповых рыб позволяет снизить стоимость

- 15 -

Таблица 6

Сравнение эффективности использования суспензии ацетонированных гипофизов и смеси аГнРГ с судьпиридом для получения врелых половых продуктов у самок растительноядных рьй

V Цвид рыб II Прэпарзты" Число рыб Дозы препаратов Овулиро-вавшие самкиД Продолжительность созревания, ч Средняя масса икры, г Процент 1 оплодот- | ворениядЦ

• ! предварительная разрешавшая

¡Пестрый аГнРГ мкг/кг сульпирид МГ/КГ 6/ 0,2 0,2 0,8 0,8 83.0 9 »22 1496,7+318,4 -

, ¡¡толстолобик суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 7 0,6 2.4 56,0 10-12 . 1837,5+392,3

О г , ЕБелый, ¡(толстолобик ■ 1 аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг 12 0,4 . 0,4 1.6 1,6 100 8 931,8+63,3 б6,5+8,5|

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 22 0,6 2,4 59,1 . 9-10 938,5+49,4 75.3+7,4|

н ! '■ . .¡'Белый, амур ' ; 1! ' Я аГнРГ мкг/кг сульпирид мг/кг 8 1 1 • - ОО ; 1,6 1.6 75,0 7 1283,3+157,9 78,8+7,5}

суспензия ацетон, гипофиза мг/кг 17 0,6 2.4 88,2 8,5-10 1286,7+94,4 81,9+6,11

инъекций на одну самку карпа в сравнении с применением экстракта гипофизов (в ценах 1990г.) с 12,0 руб до 2,63 руб, то есть в 4.6 раза. Использование смеси препаратов для стимуляции овуляции у белого и пестрого толстолобиков и белого амура так же позволила снизить стоимость инъекции на одну самку. У самок белого толстолобика о 17 руб до 0,76 руб т.е.-в 22,4 pasa, у бе-

i

лого амура о 23 руб до 1,06 руб т. е. в 21,7 раза и у пестрого толстолобика в 21,2 раэ. Однако следует отметить еще ряд положительных эффектов:

1) Длительный.срок хранения препаратов. Для аГнРГ и суль-пирида при 4°0 составляет более 4 лет при сохранении стандартной активности препаратов. Для обевздренного препарата гипофиза срок хранения бее существенной потери гонадотропной активности ограничен - и составляет всего 2 года.

2) При использовании аГнРГ и сульпирида практически не отмечена гибель производителей. При гипофиварных инъекциях в некоторых случаях наблюдается гибель рыбы или л» а течение нескольких сезонов они не в состоянии нереститься И8-8а реворбции половых продуктов. .

.3) При использовании смеси аГнРГ и сульпирида исключена возможность передозировок ( поскольку используются ■ выпускаемые промодленностыо стандартные препараты), что имеет ыеото при применении гипофизарных инъекций.

В Ы В О Д Ы '

, 1) Разные партии вьюнов различаются по чувствительности к аналогу . гонадотропин-риливинг гормона. На дозу препарата 100

•/ •' ■ - 17 - .;

мкг/кг одуляндай.реагируют от О до 60% самок. Максимальный ответ, (.75%) был получен, при инъекции 400 мкг/кг.

2) Подтвержден тормозящей э<йект дофамина для самок вьюна \ карпа при стимуляции у них овуляции , который можно снять в ре-вультате применения дофаминолитиков.

3) Наиболее эффективными из испытанных антагонистов дофамина, при совместном введении с аналогом гонадотропин- рилизинг гормона оказались пимозид и сульпирид. По своей активности испытанные препараты антагонистов дофамина можно расположить в следующей последовательности пимозид>су,льпирид>метоклопрамид>га-лоперидол.

4) Использование сульпирида или пимовида в дозе 10 мг/кг совместно с 10-20мкг/кг аГнРГ позволяет получать у самок вьюна из достаточно чувствительной партии 80-100% положительный ответ. Применение меньших доз сульпирида понижает аффект. На менее чувствительных партиях хорошо выраженный ответ возможно получить за счет увеличения дозы либо аналога гонадотропин-ри-ливинг гормона, либо антагониста дофамина.

5) Впервые установлены дозы аналога гонадотропин - рилизинг гормона и сульпирида, вызывающие 75-100% овуляцию у вьюна и промышленно разводимых рыб. Для карпа такими дозами являются 10 мкг аГнРГ и 10 мг сульпирида на кг массы тела: для растительноядных рыб (белый и пестрый толстолобики, белый амур) 2 мкг/кг аГнРГ и 2мг/кг сульпирида.

6) Использование аГнРГ в дозе 10 мкг /кг для карпа и 2 мкг/кг для растительноядных рыб совместное сульпиридом позволило в большей степени управлять процессом овуляции ( получение врелой икры в определенные сроки), чем при применении экстракта гипофиза.

7) Качество икры, получаёибй с '-помощью аналога гонадотро-

лин- рил из инг гормона и айтйгбййстов дофамина у выона и карпа,

"-'V'-ii, -

не отличается от качества !%pti, получаемой с помощью высокоэффективных препаратов. ¡¡¡орионического гонадотропина для вьюна и экстракта гипбфйвча'для карпа.

8) Применение аГнРГ и сульпирида в 4,6-23 раза дешевле применения экстракта гипофиза при стимуляции овуляции у самок карпа и растительноядных рыб.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

Рекомендуется использование смеси препаратов синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и сульпирида для симуляции созревания ооцитов и овуляции у самок в следующих дозах: для карпа аГнРГ - '10мкг/кг и сульпирида 10 мг/кг, для растительноядных рыб (белый и пестрый толстолобики,белый амур) аГнРГ -2 мкг/кг и сульпирида 2 мг/кг. Введение препаратов двукратное: 20% общей дозы - предварительная инъекция и 80% - разрешавшая.

По материалам диссертации опубликованы следующие работы:

1. Мотлох Н.Н., Попонов С. Ю. Стимуляция созревания и выделения половых продуктов производителей рыб снятием дофаминовой блокады i люлибериновых рецепторов аденогипофиза. В сб. Всес. сов. по новым объектам и новым тбхнологиям рыбоводства на теп-.лых водах. М. ,1939,. 136-138.

2. Мотлох-Н. Е , Попонов 0. КГ, Николаев С. Г, Синтетические олигопептиды - стимуляторы гаметогенеэа и регенерации в замене гипофизарных инъекций. СО, тез. докл. VII- Всес. конф. "Экологическая. физиология и биохимия рыб".. Ярославль, 1989,_ 51-53.

3. Мотлох Е а , Глубоков А. И. , Микодина Е. В. , Новолоцкий Е А., Попонов С. Ю., Седова М. А. Зависимость овуляции карпа от температурного режима при инъекциях "Нерестина-1". Тез. докл. 1V Всес. сов. по рыбохозяйственному использованию теплых вод. М.. 1990, 146-149.

4. Мотлох К Н., Попонов С. Ю. , Подольский И. Я Способ стимуляции созревания половых продуктов карповых рыб. Авт. св. на изобр. N1653579 от 8 февраля 1991г.

5. Попонов 0. П., Веселовзоров С. И., Мотлох IL Н., Гончаров Б. Ф. Дофаминовая регуляция овуляции и спермиации у рыб. Эколого-фиэиологические и токсикологические аспекты рыбохо-вяйственных исследований. Сб. науч. тр. М.: ЕНИРО, 1990, 102-117.

6. Попонов С. Ю. , Гончаров Б. Ф. Влияние синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и антагонистов дофамина на овуляцию у вьюна (Msgurnus fossil is L. ). Tee. докл. Все с. совея "Репродуктивная физиология рыб". Шнек, 1991, 43.

7. Mot] okh N. N. , Poponov S. Yu. , Podol ski I. Ya. Enhancement of maturation and rt-1 easing of gametes in fish induced by combined administration of a LH-RH superactive analogue and sulpiride, a D-2 antagonist. Abst. Synp. "Signal molecules and mechanisms of animal behaviour", Pushchino, 1989, 41.