Влияние сыворотки крови и некоторых ее компонентов на сократимость и адрено- и холинореактивность изолированного миокарда человека и крысы

Коротаева, Карина Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние сыворотки крови и некоторых ее компонентов на сократимость и адрено- и холинореактивность изолированного миокарда человека и крысы
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние сыворотки крови и некоторых ее компонентов на сократимость и адрено- и холинореактивность изолированного миокарда человека и крысы"

Коротаева Карина Николаевна

ВЛИЯНИЕ СЫВОРОТКИ КРОВИ И НЕКОТОРЫХ ЕЕ КОМПОНЕНТОВ НА СОКРАТИМОСТЬ И АДРЕНО- И ХОЛИНОРЕАКТИВНОСТЬ ИЗОЛИРОВАННОГО МИОКАРДА ЧЕЛОВЕКА И КРЫСЫ

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

- 3 НОЯ 2011

Нижний Новгород - 2011

4858559

Работа выполнена в лаборатории физиологии мышц и биологически активных веществ кафедры биологии естественно-географического факультета в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Вятский государственный гуманитарный университет»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Циркин Виктор Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Мухина Ирина Васильевна доктор медицинских наук, профессор Перетяган Сергей Петрович

Ведущая организация: Казанский (Приволжский) федеральный

университет

Защита состоится « 3 » д 2011 года в_часов на засе-

дании диссертационного совета^. 212.166.15 Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского по адресу: 603950, г. Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 23, корп. 1, биологический факультет.

Факс: (8312) 465-82-92.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского по адресу: 603950, г. Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 23, корп. 1.

Автореферат разослан « р ли>р$ 2011 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

С. В. Копылова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность работы. Сердечно-сосудистые заболевания до настоящего времени являются одними из самых распространенных заболеваний и одной из самых частых причин смерти человека (Рео1а М. ее а1., 2004; Шаленкова М. А. и соавт., 2005; Гордеев И. Г. и соавт., 2009). Поэтому изучение физиологических свойств миокарда, и особенно, миокарда человека, представляет большой интерес. С этих позиций важным является изучение участия в процессах регуляции деятельности сердца человека и животных эндогенных модуляторов адрено- и холинореак-тивносги срочного действия, в том числе эндогенного сенсибилизатора бета-адре-норецепторов (ЭСБАР), эндогенного блокатора бета-адренорецепторов (ЭББАР) и эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР). Гипотеза о существовании этих факторов была высказана на основе многочисленных исследований, проведенных, главным образом, на гладких мышцах матки крысы (Циркин В. И. и соавт., 1997, 2011; Туманова Т. В., 1998; Сизова Е. Н. и соавт., 2002, 2004; Мапьчико-ваС. В. и соавт., 2003; Кононова Т. Н., 2004; Хлыбова С. В., 2007; Куншин А. А. и соавт., 2007; Торопов А. Л. и соавт., 2010). Вместе с тем, вопрос об участии этих факторов в регуляции адрено- и холинореактивности миокарда человека и животных остается открытым. Действительно, удалось лишь показать, что сыворотка крови человека как источник ЭСБАР усиливает положительный инотропный эффект адреналина на изолированном сердце лягушки (Трухин А. Н. и соавт., 2004; Демина Н. Л., и соавт., 2008; Пенкина Ю. А. и соавт., 2008) и крысы (Пенки-на Ю. А. и соавт., 2008). В отношении же миокарда человека этот вопрос не исследовался. В опытах с гладкими мышцами было показано, что гистидин, триптофан, тирозин, а также милдронат и предуктал проявляют ЭСБАР-активность, т. е. подобно сыворотке крови повышают эффективность активации бета-АР (Ноздра-чев А. Д и соавт., 1998; Туманова Т. В., 1998; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006; Сизова Е. Н. и соавт., 2008). Данные о способности этих веществ оказывать ЭСБАР-активность в отношении миокарда крысы оказались противоречивы (Пенкина Ю. А. и соавт., 2008), а в отношении миокарда человека они отсутствуют. Вместе с тем, изучение этого вопроса имеет не только теоретическое значение, но и практическое, так как считается, что при сердечной недостаточности возникает необходимость в повышении эффективности активации бета-адренорецепторов миокарда (Красникова Т. Л., Габрусенко С. А., 2000; ВгосМе О. е1 а1., 2006). Способность сыворотки крови проявлять М-холинолитическую, или М-холиноблокирую-щую активность (за счет наличия в ней ЭБМХР) была исследована в отношении миокарда лягушки и кролика в лаборатории Турпаева Т. М. ¡па N. В. е1 а!.,

1978; Суслова И. В., и соавт., 1995; Проказова Н. В. и соавт., 1998), а также в нашей лаборатории в отношении миокарда лягушки (Трухин А. Н. и соавт., 2004; Демина Н. Л., и соавт., 2008). Кроме того, в опытах с миокардом лягушки и кролика был исследован М-холинолитический эффект лизофосфатидилхолина, или ЛФХ (Ъчег-сИпа N. Б. й а1,. 1978; Суслова И. В. и соавт., 1995; Проказова Н. В. и соавт., 1998), который, вероятно, можно рассматривать в качестве компонента ЭБМХР. В отношении миокарда крысы и человека данные о влиянии сыворотки крови и ЛФХ на проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина до настоящего времени отсутствуют. Следует отметить, что в литературе имеются лишь единичные работы, касающиеся физиологических свойств изолированного миокарда человека (Маак К. и соавт., 2004), но в них отсутствуют сведения о действии адрено- и холиномодуляторов. Учитывая важность вопроса о физиологических свойствах

миокарда человека и о возможном влиянии эндогенных модуляторов адрено- и хо-линореактивности на миокард человека, в работе сформулированы следующие цель и задачи.

Цель исследования - оценить изменение сократимости, бета-адренореактив-ности и М-холинореактивности изолированного миокарда человека и крысы под влиянием сыворотки крови человека и ряда веществ.

Задачи исследования:

1. Оценить сократимость и адренореактивность изолированного миокарда человека и влияние на них сыворотки крови человека, тирозина, гистидина, триптофана, милдроната.

2. Оценить сократимость и холинореактивность изолированного миокарда крысы и влияние на них сыворотки крови человека и лизофосфатидилхолина.

Положения, выносимые на защиту:

1. Сократимость изолированного миокарда человека и крысы повышается под влиянием сыворотки крови (за счет наличия в ней так называемого эндогенного активатора сократимости миоцитов, или ЭАСМ), а также тирозина, гистидина и триптофана (установлено в опытах с миокардом человека) и снижается под влиянием лизофосфатидилхолина (установлено в опытах с миокардом крысы).

2. Положительный инотропный эффект адреналина в отношении миокарда человека повышается под влиянием 1000-, 500- и 100- кратных разведений сыворотки крови человека (это объясняется наличием в ней эндогенного сенсибилизатора бета-адренорецепторов, или ЭСБАР), но не изменяется под влиянием тирозина, гистидина, триптофана и милдроната, хотя эти вещества усиливают эффективность активации бета-адренорецепторов гладких мышц.

3. Отрицательный инотропный эффект ацетилхолина в отношении миокарда крысы снижается под влиянием 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных кратных разведений сыворотки крови человека (это объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов, или ЭБМХР), а также лизофосфатидилхолина (2x10"6-2x10"4 М), который рассматривается в качестве термолабильного компонента ЭБМХР.

Научная новизна исследования. Впервые показано, что амплитуда вызванных сокращений полосок миокарда из ушка правого предсердия пациентов с сердечной недостаточностью III функционального класса находится в прямой зависимости от величины фракции выброса левого желудочка по Тейхольцу (ФВЛЖТ), т. е. сократимость изолированного миокарда отражает сократимость левого желудочка сердца. В опытах с изолированным миокардом человека впервые установлено, что амплитуда сокращений миокарда возрастает под влиянием 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови небеременных женщин, а также при действии тирозина (5,5х10"5 М и 5,5x10"* М), гистидина (6,5х10"5 М) и триптофана (4,9x1g"4 М). Впервые оценена адренореактивность изолированного миокарда человека и установлена константа диссоциации для адреналина. Ее величина, равная 1100±54 нМ, указывает на снижение адренореактивности у пациентов с сердечной недостаточностью. Впервые показано, что способность адреналина в концентрации 5,5хЮ"8М оказывать положительный инотропный эффект усиливают 1000-, 500- и 100-кратные разведения сыворотки крови человека, а при его использовании в концентрации 5,5x10"6 М - усиливает 10-кратное и снижает 500-кратное разведение сыворотки крови, что объясняется наличием в крови эндогенных модуляторов адренорецеп-торов (ЭСБАР и ЭББАР). Впервые показано, что вещества, которые повышают эф-

фективность активации бета-АР гладких мышц (тирозин, гистидин, триптофан и милдронат), не проявляют бета-адреносенсибилизирующую активность в отношении бета-АР миокарда человека. Тем самым поставлен вопрос о необходимости поиска селективных сенсибилизаторов бета-АР миокарда. В опытах с миокардом крысы впервые выявлена способность ЛФХ в концентрациях 2х1(Г9М- гхЮ^М уменьшать сократимость миокарда и одновременно (в концентрациях 2x10^ --2х10^М) снижать проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхоли-на, т. е. проявлять М-холиноблокирующую активность. В этих экспериментах также впервые выявлена подобная активность и для 1000-, 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови человека, что объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР), в качестве термолабильного компонента которого предложено рассматривать ЛФХ. Впервые проведен анализ природы положительного инотропного эффекта сыворотки крови, обусловленного наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ) - в экспериментах с полосками миокарда крысы показано, что этот эффект 5-кратного разведения сыворотки крови частично снижается при ее тепловой денатурации, не меняется при блокаде рецепторов ангиотензина II лозапом, но полностью снимается при воздействии верапамила. Это указывает на то, что ЭАСМ, не являясь ангиотензин-ном II, повышает проницаемость Са-каналов Ь-типа кардиомиоцитов для ионов Са2+. В целом, результаты исследования позволили впервые доказать, что содержащиеся в крови человека эндогенные модуляторы адренореактивности (ЭСБАР и ЭББАР) и холинореактивности (ЭБМХР), а также эндогенный активатор сократимости миоцитов (ЭАСМ) способны влиять на сократимость миокарда человека, в том числе за счет модуляции эффективности адренергических и холинергических воздействий на сердце.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты работы дают первые сведения о физиологических свойствах миокарда человека, иссеченного у пациентов с сердечной недостаточностью. Они расширяют представление о факторах, влияющих на сократимость, адренореактивность и холинореактивность миокарда человека и животных, в том числе о способности свободных аминокислот - тирозина, гистидина, триптофана повышать сократимость миокарда человека. Внесено новое в изучении физиологической роли эндогенных модуляторов адренореактивности (ЭСБАР и ЭББАР) и холинореактивности (ЭБМХР). В частности, продемонстрирована способность ЭСБАР повышать эффективность активации бета-АР миокарда человека. Доказана возможность ЭБМХР существенно снижать эффективность активации М-холинорецепторов (М-ХР) миокарда млекопитающих. Расширено представление об ЛФХ как факторе, снижающем сократимость миокарда и эффективность активации М-ХР миокарда. Это необходимо учитывать при разработке вопросов патогенеза заболеваний сердца. Углублено представление о природе ЭАСМ и ЭБМХР. Все эти данные имеют значение для физиологии кровообращения, физиологии возбудимых тканей, патофизиологии, биохимии, фармакологии, терапии и кардиологии.

Результаты исследования указывают на необходимость поиска селективных сенсибилизаторов бета-АР миокарда. Данные, полученные в работе, могут быть использованы в учебной деятельности кафедр физиологии, патофизиологии и терапии. В настоящее время они внедрены в учебный процесс кафедры нормальной физиологии Кировской государственной медицинской академии и кафедры биологии Вятского государственного гуманитарного университета (ВятГГУ).

Апробация работы. Результаты исследования доложены на научных сессиях ВятГГУ (Киров, 2008, 2009, 2010), конференции «Молодежь и наука на севере» (Сыктывкар, 2008), VIII и IX Молодежной научных конференциях «Физиология человека и животных» (Сыктывкар, 2009, 2010), VIII всероссийской научной конференции «Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии» (Москва, 2009), конференции «Фундаментальная и клиническая медицина» (Санкт-Петербург, 2010) и всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2010).

По материалам диссертации опубликована 22 работы, в числе которых 5 статей в журналах, рекомендованном ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 203 страницах компьютерного текста и состоит из введения, 4 глав (обзор литературы, методы исследования, результаты исследований и их обсуждения), заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы (150 источников на русском языке и 197 - на иностранных языках) и содержит 15 таблиц и 13 рисунков.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследовано 95 полосок миокарда правого ушка сердца 95 пациентов кар-диохирургического отделения Кировской областной клинической больницы. Их возраст варьировал от 13 до 71 года и в среднем составил 55±1 лет. Биоптаты ушка иссекали при постановке венозной канюли во время подключения аппарата искусственного кровообращения при аортокоронарном шунтировании (Бураков-скийВ. И. и соавт., 1989). Шунтирование проводилось у 81 пациента с ишемиче-ской болезнью сердца (стенокардия I, II и III функционального класса, по классификации NYHA) и у 14 пациентов с пороками сердца различной этиологии при протезировании клапанов сердца.

В работе также использовали 89 белых беспородных крыс- самцов весом 450-500 г, у которых под эфирным наркозом извлекали сердце, а из его правого желудочка иссекали полоску размерами 5-8 мм х 3-4 мм х 1-2 мм). Полоски миокарда человека или крысы помещали в рабочую камеру (объемом 1 мл) «Миоцитографа» (фирмы «Норис», Россия) и соединяли с изометрическим датчиком силы (фирмы Honeywell, USA), сигнал с которого подавали на компьютер через аналого-цифровой преобразователь ЛА-70. Полоску растягивали микроманипулятором до длины, при которой сила сокращений была максимальной, и с помощью шпри-цевого дозатора «Миоцитографа» непрерывно перфузировали при 37 С со скоростью 2,0 мл/мин оксигенированным раствором Кребса, содержащим (мМ) - NaCl -136; КС1 - 4,7; СаС12 - 2,52; MgCl2 - 1,2; КН2Р04 - 0,6; NaHC03 - 4,7; С6Н1206 - 11 (рН = 7,4). Сокращения полоски вызывали непрерывной стимуляцией от электростимулятора ЭСЛ-01 с частотой 1 Гц при длительности импульсов 5 мс и амплитуде 25-30 В через стальные электроды, погруженные в рабочую камеру. Исследования сократительной активности полосок начинали через 30-40 минут после забора материала. Схемы опытов приведены при описании результатов исследования. Длительность каждого этапа опытов была, как правило, в пределах 5 мин.

Кровь была получена от 102 доноров крови - женщин репродуктивного возраста (30±1 лет). Забор крови (в объеме 7-8 мл) из локтевой вены осуществлялся на станции переливания крови в 8-9 ч. утра. Сыворотку получали путем 15-минутного центрифугирования (при 1000 об/мин) полностью свернувшейся крови. Перед опытом ее разводили раствором Кребса в 10000, 1000, 500, 100, 50, 10 и 5 раз и исследовали в течение 5-6 часов с момента забора крови. В работе использовали адреналина гидрохлорид (Московский эндокринный завод, Россия), ацетилхолина хлорид (Acros ORGANICS, Бельгия), лизофосфатидилхолин (Харьковский завод бактерийных препаратов, Украина), гистидин (SIGMA-ALDRICH, Япония), тирозин и триптофан (ACROS ORGANICS, Бельгия), милдронат (Grindex, Латвия) и прозерин («ДАЛЬХИМФАРМ», Россия), которые разводили раствором Кребса. Всего проведено 44 серии опытов, в том числе 24 - на миокарде человека и 20 на миокарде крысы.

Анализ результатов исследования проводили с помощью статистической программы BIOSTAT.Primer for Windows McGraw-Hill, рассчитывая среднее арифметическое (М) и ошибку среднего (гп). Различия показателей оценивали по критерию Уилкоксона и считали их достоверными при р < 0,05 (Гланц С., 1999).

Автор выражает благодарность кардиохирургам Кировской областной клинической больницы профессору В. А. Вязникову и В. Р. Пинегину, зав. лабораторией консервирования крови Кировского НИИ гематологии и переливания крови, д. м. н. А. А. Костяеву, старшему научному сотруднику Института экспериментальной кардиологии РКНПК, к. х. н. Н. В. Проказовой за помощь в работе.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Миокард человека

1.1. Общая характеристика сократимости миокарда правого ушка сердца человека. При непрерывной перфузии раствором Кребса и электростимуляции полоски миокарда человека генерировали сокращения, амплитуда которых была относительно постоянной для каждого опыта, но в среднем варьировала от 1,04±0,09 мН до 2,40±0,32 мН (рис. 1). Установлено, что амплитуда сокращений полосок миокарда коррелировала с величиной фракции выброса левого желудочка, рассчитанной по Тейхольцу (ФВЛЖТ)- коэффициент корреляции составил 0,37, р = 0,0048, а уравнение линейной регрессии имело вид А = 0,06ФВЛЖТ - 1,75. Это означает, что амплитуда сокращений миокарда тем ниже, чем ниже систолический объем крови, выбрасываемый им во время систолы.

Рис. 1. Механограмма полоски миокарда из ушка правого предсердия сердца человека, демонстрирующая относительное постоянство амплитуды вызванных электростимулами сокращений при ее перфузии раствором Кребса. Калибровка - 1,5 мН, 2 сек.

1.2. Влияние адреналина на сократимость миокарда человека (серия 1).

Опыты проводили по схеме: раствор Кребса (РК) —» адреналин (Ад), 5,5х10"9М —> РК Ад, 5,5хЮ"8М ->■ РК Ад, 5,5x10^ РК. Установлено (рис. 2), что

адреналин в концентрации 5,5х10"9М и 5,5х10"8 М, как правило, не изменяет амплитуду вызванных сокращений, а в концентрациях 5,5x10' и 5,5х10"6 М дозозависимо и обратимо повышает ее (соответственно до 177±34% и 267±54% от фонового

уровня). Инотропный эффект адреналина в концентрациях 5,5x10"" и 5,5x10"4 М был не выше, чем эффект адреналина в концентрации 5,5x10"6 М. Константа диссоциации для адреналина составила 1100±54 нМ. Это указывает на низкую чувствительность миокарда к адреналину, что согласуется и с представлением Краснико-вой Т. Л., Габрусенко С. А. (2000) и ВгосМе О. е1 а1. (2006) о снижении эффективности активации бета-АР при сердечной недостаточности. Это снижение авторы объясняют повышением активности киназы бета-АР и накоплением ЛФХ. По нашему мнению, помимо этих причин в основе снижения бета-адренореактивности миокарда лежит уменьшение экспрессии бетагАР при хронической сердечной недостаточности и повышение числа альфа-АР.

мН

-- # # # -т—

— # 1 ш т 1

! # _г_ Щ-

I. ;

Р А9 Р А8 Р А7 Р АЗ Р А6 Р А4 Р

Рис. 2. Амплитуда вызванных сокращений миокарда человека (в мН) при пятиминутных

воздействиях адреналина в концентрациях 5,5х (10", 10"8, 10"7, 10"6, 10"5и 10"4) М (соответственно А9, ..., А4), чередующихся перфузией миокарда раствором Кребса (Р); - различия с фоном, т. е. с предыдущим этапом, достоверно (р < 0,05) по критерию Уилкоксона.

1.3. Влияние сыворотки крови (1:10000, 1:1000, 1:500, 1:100, 1:50, 1:10, 1:5) небеременных женщин на сократимость миокарда человека и на проявление положительного инотропного эффекта адреналина в концентрациях 5,5х10"8М (серии 2-7) и 5,5х10"6М (серии 8-14). Все 13 серий этого раздела проводили по схеме: РК —> Ад (5,5х10"8 М или 5,5х1043 М) —♦ РК —» одно из разведений сыворотки (Сыв) —> Сыв + Ад —> РК —»Ад —► РК.

Анализ результатов всех 13 серий показал, что в разведениях 1:10000, 1:1000, 1:500, 1:100 и 1:50 сыворотка крови небеременных женщин не влияет на амплитуду сокращений кардиомиоцитов человека, а в разведении 1:5 и 1:10 (рис. 3) достоверно повышает ее соответственно до 143,3±8,9%* и 133,0±12,4% от фонового уровня ("- здесь и ниже означает, что изменения с фоном достоверно, р < 0,05 по критерию Уилкоксона). Величина этого инотропного эффекта составляет около 20% от максимального инотропного эффекта адреналина при его использовании в высокой концентрации (5,5х10"6 М). Подобно другим авторам (Демина Н. Л. и соавт., 2008; Циркин В. И. и соавт., 2008), полагаем, что положительный инотропный эффект сыворотки крови связан с наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ).

Рис. 3. Механограмма полоски миокарда человека, демонстрирующая положительные инотропные эффекты адреналина (5,5x10"6 М; Адб) и 5-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин (Сыв 1:5). РК -раствор Кребса. Калибровка - 1,5 мН, 1 мин.

При анализе влияния указанных выше разведений сыворотки крови на положительный инотропный эффект адреналина в концентрации 5,5x10" М (серии 2-7) установлено, что в этой концентрации при 1-м тестировании адреналин, как правило, не повышает амплитуду сокращений, и лишь при исследовании 50-кратного разведения (серия 6) он вызывает достоверный рост амплитуды сокращений, т. е. проявляет положительный инотропный эффект. При 2-м тестировании адреналином, т. е. совместно с сывороткой крови установлено, что 10000-, 50- и 10-крагные ее разведения не усиливают реакцию миокарда на адреналин, т. е. не проявляют ад-реносенсибилизирующую активность. В то же время 1000-, 500- и 100-кратные разведения проявляли ее, т. е. повышали способность адреналина вызывать положительный инотропный эффект (рис. 4, 5 и 9). Так, в опытах с 500-кратным разведением сыворотки крови при 1-м тестировании адреналина амплитуда вызванных сокращений составила 1,24±0,1мН или 105,2±9,0% от фона, а при 2-м тестировании, т. е. совместно с сывороткой крови она возрастала до 1,53±0,2 мН , или до 155,3±14,0%# от фона, или до 125,4,±9,0%# от 1-го тестирования (различия между ответами миокарда при 1-м и 2-м тестированиях адреналином носили достоверный характер. р,.2<0,05). Аналогично, в опытах со 100-кратным разведением при 1-м тестировании адреналином амплитуда сокращений составила 1,12±0,1 мН или 108,8±8,9% от фона, а при 2-м тестировании, т. е. совместно с сывороткой крови она возрастала до 1,29±0,1мН#, или до 127,5±5,8%# от фона, или до 119,9±7,7% от 1-го тестирования. При этом различия между 1-м и 2-м тестированием носили достоверный характер (р,_2 < 0,05) для двух последних способов расчетов.

А __________________I |||Щ|йШ|11>............

РК ' ЛД8 РК Сын 1:500 Сыв+Ддв РК

Рис. 4. Механограммы полосок миокарда человека, демонстрирующие влияние на амплитуду сокращений адреналина 5,5х10"8 М (Ад8) и 500- и 50-кратных разведений сыворотки крови небеременных женщин (Сыв 1:500 или 1:50). На панели А исходно

адреналин не изменяет амплитуду вызванных сокращений, а на фоне сыворотки в разведении 1:500 повышает ее; это доказывает наличие адреносенсибилизирующей активности сыворотки крови. На панели Б адреналин при ] -м тестирован проявляет положительный инотропный эффект, который, однако, не усиливается сывороткой крови

в разведении 1:50. Горизонтальные линии под механограммами здесь и на других рисунках отражают момент воздействия растворов. Калибровка - 1 мН, 1 мин.

При анализе влияния сыворотки крови на положительный инотропный эффект адреналина в концентрации 5,5х10"6М (серии 8-14) установлено, что в этой концентрации адреналин при 1-м тестировании достоверно повышает амплитуду сокращений, т. е. проявляет положительный инотропный эффект. Установлено, что сыворотка крови в разведениях 1:10000, 1:1000, 1:100, 1:50 не влияет на этот эффект адреналина. В разведении 1:500 (рис. 6) сыворотка крови снижала положительный инотропный эффект адреналина, т. е. проявляла бета-адреноблокирующую активность. Действительно, при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином амплитуда вызванных сокращений составила соответственно 140,9±6,5% , 115,0±10,1% и 161,9±20,2%# от фона (различия между 1-м и 2-м тестированием носили достовер-

ный характер, р2-з < 0,05). В разведении 1:10 сыворотка крови, наоборот, дополнительно повышала положительный инотропный эффект адреналина, т. е. проявляла бета-адреносенсибилизирующую активность. Действительно, при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином амплитуда вызванных сокращений составила соответственно 160,2±23,8%#, 203,7±46,8%# и 141,5±22,5%* от фона (р2_3<0,05).

§оо

1ЭО ISO 140 120 ЮО SO

ео до 20

Рис. 5. Амплитуда вызванных сокращений миокарда человека (в % к фоновому уровню)

при трех тестированиях адреналином (5,5x10"8 М) - до (1-е столбики), на фоне (2-е столбики) и после удаления (3-е столбики) сыворотки крови небеременных женщин. Цифры вверху отражают кратность разведения сыворотки, цифры над столбиками (1 и/или 2) означают, что различие с 1-м и/или 2-м тестированиями адреналином достоверно (р < 0,05) по критерию Уилкоксона (у); # - отличие от фонового уровня достоверно (р < 0,05) по критерию Уилкоксона.

Рис. 6. Механограмма миокарда человека, демонстрирующая положительный инотропный эффект адреналина (5,5х10_6 М, Адб) и бета-адреноблокирующую активность

500-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин (Сыв 1:500).

РК - раствор Кребса. Калибровка - 1,5 мН, 1 мин.

Таким образом, результаты серий 2-14 позволили впервые показать, что сыворотка крови человека способна проявлять бета-адреносенсибилизирующую и бе-та-адреноблокирующую активность в отношении миокарда человека. Как и другие авторы (Циркин В. И. и соавт., 1997, 2011; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006, Хлы-бова С. В., 2007, Торопов А. Л. и соавт., 2010), мы объясняем эту активность наличием в крови соответственно ЭСБАР и ЭББАР. Полагаем, что эти модуляторы выполняют важную функцию - усиливают эффект низких концентраций катехолами-нов и, в определенной степени, ограничивают действие их высоких концентраций.

1.4. Влияние тирозина (5,5х105 и х10"4М), гистидина (6,5x10 ®, хЮ"8, х10"7, х10"5 и хЮ"4 М), триптофана (4,9x10"5 и х10"4М) и милдроната (6,9х10"6 М) на сократимость миокард человека и на проявление положительного инотропного эффекта адреналина в концентрациях 5,5х10~8М (серии 15-23) или 5,5х10"6М (серии 24). Серии 15-23 проводили по схеме: РК —> адреналин (5,5х10"8 М, Ад8) -* РК —> одна из аминокислот (АК) —> АК + Ад8 -» РК —>Ад8 —> РК. Серию 24 проводили по схеме: РК —> адреналин (5,5х10"6 М, Адб) —» РК —» милдронат —> милдро-нат + Адб ^ РК —>Ад6 ->РК.

Показано, что тирозин (5,5х10"5 и 5,5хЮ"4М), гистидин (6,5х10"5М) и триптофан (4,9x10"4М) проявляют положительный инотропный эффект (см. рис. 7 и 8), ко-

торый сравним с инотропным эффектом адреналина (5,5x10" М). Так, тирозин (рис. 7) в концентрации 5,5x10"5 М достоверно повышал амплитуду вызванных сокращений до 148,4±13,0%* от фонового уровня, а адреналин - до 147,9±13,8% ; в концентрации 5,5х10"4М тирозин повышал ее до 150,0±12,0%" (адреналин- до 137,6±15,0%#). Гистидин в концентрации 6,5х10"5 М повышал амплитуду сокращений до 133,1±14,0%# (адреналин- до 118,2±6,6%#), а в остальных концентрациях (6,5x10"9, х10"8х10"7 и хЮ"4М) гистидин не влиял на нее. Триптофан в концентрации 4,9x10^ М повышал амплитуду сокращений до П6,7±6,9% (адреналин- до 112,3±7,4%), а в концентрации 4,9х10"5М не влияли на нее (рис.7). Предполагаем, что в основе положительного инотропного эффекта аминокислот лежит их способность связываться со специфическими рецепторами (их роль, вероятно, выполняют транспорты этих АК). Это активирует Са-каналы Ь-типа, что в итоге приводит к росту концентрации свободных ионов Са2+ в цитоплазме кардиомиоцитов. В целом, результаты наших исследований ставят вопрос о возможности клинического применения этих трех аминокислот для повышения сократимости миокарда у пациентов с сердечной недостаточностью. В то же время нами установлено, что милдронат (6,9x10"6 М) не изменял амплитуду вызванных сокращений.

~РК ' Ад8 1 Рк ' Тир 5

Рис. 7. Механограмма полоски миокарда человека, отражающая положительный инотропный эффект адреналина (5,5x10'8 М; Ад8) и тирозина (5,5х10"5М, Тир 5). РК - раствора Кребса. Калибровка - 1,5 мН, 1 мин.

Рис. 8. Амплитуда сокращений миокарда человека (в % к фоновому уровню) при воздействии тирозина (5,5х10"5М, тир5; 5,5х10"4М, тир4), гистидина (6,5x10"5М, гис5; 6,5х10"4М, гис4) и триптофана (4,9х10"5М, трф5; 4,9х10"4М, трф4).

Цифры 1, 2 и 3 - под столбиками - амплитуда сокращений на фоне раствора Кребса (1), на фоне адреналина (5,5х10"8М; 2) или на фоне указанной аминокислоты (3). # - отличие от фонового уровня достоверно (р < 0,05) по критерию Уилкоксона.

При оценке влияния аминокислот на проявление адреналином (5,5х10"8М) положительного инотропного эффекта установлено, что адреналин при 1-м тестировании достоверно повышает амплитуду сокращений только в опытах с тирозином (5,5х10"5 М и 5,5x10"4 М) и гистидином (6,5х10"5 и 6,5х10"4 М), в остальных же сериях он не влияет на амплитуду сокращений (см. рис. 9 и 10). Гистидин, триптофан и тирозин в исследованных нами концентрациях не проявляли адреносенсибилизи-рующую активность, независимо от концентрации адреналина и его эффектов. Так, в опытах с триптофаном в концентрации 4,9х10"5 М при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином з концентрации 5,5x10"8 М амплитуда вызванных сокращений со-

ставила соответственно 113,7±7,2%, 121,0±11,4%, 107,5±8,4%от фона. Более того, в тех случаях, когда при 1 -м тестировании адреналин проявлял положительный ино-тропный эффект, на фоне аминокислоты этот эффект не проявлялся, но вновь восстанавливался после удаления аминокислоты. В опытах с тирозином в концентрации 5,5x10""М при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином в концентрации 5,5х10'8М амплитуда вызванных сокращений составила соответственно 147,9±13,9%", 95,9±7,6 и 133,7±9,4%# от фона. Аналогично, в опытах с гистидином в концентрации 6,5х10"5М эти значения составили соответственно 118,2±6,7%#, 107,1±9,9 и 125,6±10,8%* от фона. В опытах с милдронатом (рис. 9), в которых адреналин применялся в концентрации 5,5х10'6 М, также не наблюдалась способность этого вещества повышать инотропный эффект адреналина. Действительно, при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином амплитуда сокращений составили соответственно 211,8±34,8%", 164,1±25,5%* 180,5±27,3%# (различия между тестированиями недостоверны, р > 0,1).

1234 1234 1234 1234 1234 1234 1234 1234 1234

Рис. 9. Амплитуда сокращений полосок миокарда человека (в мН) при их перфузии раствором Кребса (столбики под цифрой 1) и при трех тестированиях адреналином в концентрации 5,5х10~8М (или 5,5хЮ"<'М в опытах с милдронатом) -до (2), на фоне (3) и после удаления (4) исследуемого фактора. Подписи над диаграммами: тир4, тир5, гис5, гис.4, трф5, трф4 - соответственно тирозин, гистидин и триптофан в концентрациях 10~5 или 10~4 М; милдб - милдронат(6,9х10"6 М), сыв500 и сывЮО - сыворотка крови небеременных женщин в разведениях 1:500 и 1:100. Символ # - различие с фоновым уровнем достоверно (р<0,05) по критерию Уилкоксона; цифры 2 и/или 3 над столбиками - различие с 2-м и/или 3-м тестированиями адреналином достоверно (р < 0,05) по критерию Уилкоксона.

Рис. 10. Механограмма полоски миокарда человека, демонстрирующая наличие у гистидина (6,5x10"5М; Гис 5) положительного инотропного эффекта и отсутствие у него бета-адреносенсибилизирующей активности.

РК- раствор Кребса, Ад8 - адреналин (5,5х10"8М). Калибровка - 1,5 мН, 1 мин.

Результаты этих исследований существенно отличаются от данных, полученных в опытах с гладкими мышцами матки крысы и других органов, согласно которым гистидин, триптофан, тирозин и милдронат повышают эффективность активации бета-АР (Ноздрачев А. Д. и соавт., 1998; Туманова Т. В., 1998; Сизова Е. Н. и со-авт., 2008; Торопов А. Л. и соавт., 2011). Возможны несколько вариантов объяснения таких различий: 1) исходно, присоединяясь к сайту бета-АР, эти аминокислоты акти-

вируют бета-АР и тем самым вызывают положительный инотропный эффект; поэтому последующая активация бета-АР адреналином не приводит к повышению силы сокращения; 2) при сердечной недостаточности настолько изменены свойства бета-АР миокарда и система передачи сигнала от этого рецептора внутрь кардиомиоци-тов, что аналоги ЭСБАР не способны проявить бета-адреносенсибилизирующую активность; 3) бета-АР миокарда человека (и других представителей млекопитающих) отличаются по своим свойствам от бета-АР гладких мышц, в том числе в отношении чувствительности к аналогам ЭСБАР. Мы в большей степени склоняемся к третьему варианту объяснения, из которого следует, что гистидин, триптофан, тирозин и мил-дронат являются селективными сенсибилизаторами бета-АР гладких мышц и поэтому они не способны повышать эффективность активации бета-АР миокарда человека. Это означает, что необходим поиск новых аналогов ЭСБАР, тропных к бета-АР миокарда человека. О наличии таких веществ косвенно свидетельствуют наши данные о способности сыворотки крови человека проявлять бета-адреносенсибилизирующую активность по отношению к миокарду человека.

2. Миокард крысы

2.1. Общая характеристика сократимости миокарда крысы. Нами подтверждены данные Пенкиной Ю. А. и соавт. (2008) о том, что в ответ на постоянную электростимуляцию с частотой 1 Гц миокард крысы генерирует сокращения. Амплитуда этих сокращений в разных сериях варьировала от 1,8 мН до 4,8 мН и оставалась в каждом опыте относительно постоянной длительное время (рис. 11).

2.2. Зависимость отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина (АХ) от его концентрации в среде (серия 25). Эти опыты проводили по схеме: РК -> АХ; 5,5х10"9 М —► РК —> АХ; 5,5х10"8 М — РК АХ; 5,5x10" М — РК. Показано (рис. 11), что АХ в концентрациях 5,5х10"9 М и 5,5х10"8 М не изменяет амплитуду вызванных сокращений, а в более высоких концентрациях (5,5х10~7, 5,5х10"6, 5,5х10"5 и 5,5х10"4 М) дозозависимо понижает ее соответственно до 82,1%*, 72,5% , 71,9%# и 64,4%# от фона. Константа диссоциации для АХ составила 904±15 нг/мл или (5,0±0,1)х10"6М.

РК * АХ ' РК ' Сыв ' Сыв+АХ

Рис. 11. Механограмма полоски миокарда крысы, демонстрирующая отрицательный инотропный эффект ацетилхолина (АХ) в концентрации 5,5x10"6 М и способность 100-кратного разведения сыворотки крови (Сыв) небеременных женщин блокировать этот эффект. РК - раствор Кребса. Катибровка - 1 мН, 1 мин.

2.3. Влияние сыворотки крови (1:10000, 1:1000,1:500, 1:100, 1:50, 1:10, 1:5) небеременных женщин на сократимость миокарда крысы и проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина в концентрации 5,5х10"6 М (серии 26-32). Все эти серии проводили по схеме: РК —> АХ (5,5x10'6 М) —* РК —» одно из разведений сыворотки крови (Сыв) —» это же разведении Сыв + АХ —♦ РК —► АХ —> РК. Установлено (рис. 11, табл.), что сыворотка крови в разведениях 1:10000, 1:1000, 1:100, 1:50 и 1:10 не влияет на амплитуду вызванных сокращений. Однако в разведении 1:500 она достоверно снижала ее до 85,7%# от фонового уровня, что мы объясняем наличием в сыворотке эндогенного ингибитора сократимости миоцитов (ЭИСМ). В разведении 1:5 сыворотка крови, как и в опытах с миокардом человека, наоборот, повышала амплитуду сокращений до 134,5±8,1%# от фонового уровня.

Это объясняется нами наличием в ней эндогенного активатора сократимости мио-цитов (ЭАСМ). В дополнительных сериях опытов (33-37), проведенных с целью изучения природы положительного инотрогшого эффекта сыворотки крови человека, было показано (рис. 12), что этот эффект у 5-кратного разведения сыворотки исчезает при блокаде Са2+-рецепторов верапамилом (2x10"6 М). Так, исходно при 1-м воздействии 5-кратного разведения сыворотки крови амплитуда сокращений достоверно возрастала до 112,5±5,2% от фона, а при 2-м воздействии, т. е. совместно с верапамилом она не менялась и составила 103,2±5,7% от фона. Тепловая 40-минутная денатурация в водяной бане при 80°С также снижала проявление положительного инотропного эффекта сыворотки крови и даже сопровождалась появлением способности сыворотки крови снижать амплитуду сокращений, что было показано при исследовании 500- и 10-кратных разведений. Например, при воздействии 10-кратного разведения нативной сыворотки амплитуда сокращений составила 107,4±5,1% от фона, а при действии инактивированного разведения она достоверно снизилась до 72,8±2,7%* от фона. С другой стороны, показано, что положительный инотропный эффект сыворотки крови не изменяется в присутствии лозапа (2,2x10"6 М), являющегося блокатором рецепторов ангиотензина II. Так, исходно 5-кратное разведение сыворотки повышало амплитуду сокращений до 113,6±6,9%" от фона, а совместно с лозапом- до 128,9±6,5%* от фона. Все это позволят заключить, что ЭАСМ является термолабильным соединением (наиболее вероятно, полипептидом, отличающимся от ангиотензина II), а его положительный инотропный эффект связан с повышением проницаемости Са-каналов Ь-типа.

РК 1 Сые ' РК1 Вер 1 вер + Сыв Рис. 12. Механограмма полоски миокарда крысы, демонстрирующая положительный инотропный эффект 5-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин (Сыв) и его блокаду верапамилом (2х10 6 М, Вер). РК - раствор Кребса, калибровка - 1,5 мН, 1 мин.

Амплитуда вызванных сокращений (% к фону) полосок миокарда крысы на 8 этапах экспериментов, в которых изучалось влияние нативной (серии 26-32) и инактивированной (инакт; серии 36-37) сыворотки (Сыв) крови

Разведение сыворотки N Этапы эксперимента

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й 6-й 7-й 8-й

РК АХ РК Сыв Сыв+АХ РК АХ РК

10000 11 100 84,0±5,8") 100 95,5±6,1 81,8±3,5 (4) 100 87,9±7,6 100

1000 10 100 81,9±6,11" 100 88,6±6,7 78,2±4,4 (4> 100 83,9±3,9ВД 100

500 11 100 75,3±5,2(" 100 ч-Г ОО] 91,2±4,6 |2) 100 93,8±3,1(2) 100

100 10 100 70,7±1,9(') 100 96,9±5,9 85,8±4,Зи-4' 100 92,7±4,2(Ч 100

50 10 100 75,9±3,1(1) 100 84,5±5,2 91,2±4,9 и> 100 85,9±5,3(6) 100

10 10 100 80,3±3,2(" 100 107,4±5,1 95,4±5,5 ,2) 100 82,1±4,81(,) 100

5 12 100 83.5±4.5|" 100 134,5±8,1(-" 89,2±2,4 (4) 100 94,8±6,8 100

10 (инакт.) 10 100 80,3±2,4(" 100 72,8±2,7 (3) 87,9±3,8 (4> 100 100,4±4,1 100

500(инакт.) 10 100 81,7±3,6(1) 100 59,0±2,3 82,3±5,9(4) 100 87,6±4,3((,) 100

критерию Уилкоксона. Для значений 5-го этапа за 100% принята величина амплитуды на 4-м этапе. РК - раствор Кребса.

При исследовании влияния сыворотки крови небеременных женщин на проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина установлено (см. таблицу), что в разведениях 1:10000 и 1:1000 сыворотка не влияла на него. Так, в опытах с 1000-кратным разведением АХ при всех трех воздействиях, т. е. исходно, совместно с сывороткой и после ее удаления достоверно снижал амплитуду сокращений соответственно до 81,9%*, 78,2%* и 83,9%* от фонового уровня (р].2-з> 0,1). В разведениях 1:500, 1:100, 1:50 и 1:10 сыворотка крови достоверно снижала отрицательный инотропный эффект АХ, т. е. проявляла М-холиноблокирующую активность, что отмечено и в момент ее воздействия (в опытах с 500- и 100-кратными разведениями) и после ее удаления. Так, в опытах с 500-кратным разведением исходно АХ снижал амплитуду сокращений (до 75,3%# от фона), а при воздействии совместно с сывороткой или после ее удаления не влиял на нее (амплитуда сокращений составила соответственно 91,2% и 93,8% от фона). В целом, эти данные показывают, что сыворотка крови человека при ее разведении в 500, 100, 50 и 10 раз за счет наличия в ней ЭБМХР снижает эффективность активации М-ХР. Подобный эффект ранее был выявлен в опытах с сердцем лягушки (Ъччгдлпа N. О. е1 а1., 1978; Суслова И. В. и соавт., 1995; Трухин А. Н., 2003, Демина Н. Л. и соавт., 2008) и сердцем кролика N. Б. й а1., 1978; Суслова И. В. и соавт., 1995). Это оз-

начает, что эффект ЭБМХР, т. е. комплекса веществ, снижающего эффективность передачи сигнала от М-ХР внутрь кардиомиоцитов, характерен для миокарда всех животных и, вероятно, человека.

Данные, представленные в таблице, указывают на то, что 5-кратное разведение сыворотки не проявляет М-холиноблокирующую активность в момент воздействия, но вызывает снижение реакции на АХ после удаления сыворотки. Эти данные говорят о том, что сыворотка крови наряду с ЭБМХР содержит в небольших количествах и ЭСМХР, наличие которого постулировано ранее (Сизова Е. Н., Цир-кин В. И., 2006).

Как известно (Ветров В. В., Маслова М. Н„ 2000; Северин Е. С., 2003), в крови человека находится холинэстераза (ХЭ), которая быстро разрушает АХ. Поэтому возникает предположение о том, что М-холиноблокирующий эффект сыворотки крови может быть следствием наличия в ней ХЭ. Для проверки этой гипотезы мы провели серию 38, в которой изучали влияние сыворотки крови человека на проявление отрицательного инотропного эффекта АХ на фоне ингибитора ХЭ прозерина (2,9x10"6 М). Опыты проводили по схеме: РК —► АХ (5,5х10'6 М) -» РК -> сыворотка 1:500 -<■ сыворотка 1:500 + АХ + прозерин —» РК АХ —> РК (п=10). Нами установлено, что исходно АХ достоверно (р<0,05) проявляет отрицательный инотропный эффект - он снижал амплитуду сокращений до 69,8±2,9% от фона. При

2-м воздействии, т. е. совместно с сывороткой и прозерином АХ также достоверно (р<0,05) снижал амплитуду сокращений (до 80,0±3,9% ), но величина этого снижения в определенной степени была ниже, чем при 1-м тестировании (р > 0,054). При

3-м тестировании, т. е. после удаления сыворотки и прозерина, АХ также достоверно (р < 0,05) снижал амплитуду сокращений (до 82,2±5,1%" от фона), но это снижение было достоверно (р < 0,05) меньше, чем при 1-м тестировании. Эти данные позволили утверждать, что, несмотря на ингибирование ХЭ, 500-кратное разведение сыворотки крови сохранило способность снижать эффективность активации М-ХР, что проявилось и в период воздействия сыворотки, и после ее удаления. Это означает, что М-холиноблокирующая активность сыворотки крови, действительно, обусловлена наличием в ней ЭБМХР, а не ХЭ.

Нами также выполнены серии 36 и 37, в которых оценивалось влияние тепловой 40-минутной денатурации 500- и 10-кратных разведений сыворотки крови на проявление М-холиноблокирующей активности. Опыты проводили по схеме РК —♦ АХ (5,5x10"6 M) — РК —* сыворотка крови (СК, в одном из разведений) —► СК (в этом же разведении) + АХ —» РК —* АХ —» РК. Показано (табл.), что денатурация снижает способность сыворотки крови проявлять М-холиноблокирующую активность. Так, в опытах с 500-кратным разведением сыворотки крови АХ при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях снижал амплитуду вызванных сокращений соответственно до 81,7%*, 82,3%* и 87,6%* от фона, т. е. сыворотка утрачивала способность блокировать М-холинорецепторы. В опытах с 10-кратным разведением амплитуда сокращений при трех тестированиях составила соответственно 80,3%#, 87,9% и 100,4% от фона. Это означает, что тепловая денатурация частично препятствует проявлению М-холиноблокирующей активности сыворотки крови. Нами сделан вывод о том, что в составе ЭБМХР имеется два компонента - термостабильный и термолабильный. Наиболее вероятно, что в качестве термолабилыюго компонента выступает лизофосфатидилхолин. Эта гипотеза основана на данных лаборатории Турпае-ва T. M. (Zvezdina N. D. et al., 1978; Суслова И. В. и соавт., 1995; Проказова Н. В. и соавт., 1998) и результатах наших исследований (серии 40-44), изложенных ниже.

2.4. Влияние лизофосфатидилхолина (ЛФХ, 2,0x10"'-2,0x1o"4 M) на сократимость миокарда крысы и проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина в концентрациях 5,5-10"7М и 5,5-10'é M (серии 39-44). Оценку влияния ЛФХ на сократимость мы провели в сериях 39-42. Серию 39 проводили по схеме РК —ЛФХ; 5,5х10"9 M РК — ЛФХ; 5,5х10'8 M — РК — ...— ЛФХ; 5,5x10" M РК. Серии 40, 41 и 42 проводили по схеме РК —> АХ (5,5x10'7 М) —► РК -* ЛФХ (в одной из трех концентраций - 2x10"6, 2x10"5 или 2x1o"4 M) -» ЛФХ (в этой же концентрации) + АХ —» РК -+ АХ —> РК.

Установлено, что ЛФХ в концентрациях 2x10"9 M - 2x10"4 M проявляет отрицательный инотропный эффект, выраженность которого, однако, не зависит от концентрации ЛФХ. Например, ЛФХ в концентрации 2x10"9 M снижал амплитуду сокращений до 77,6±3,5%* от фонового уровня, а в концентрациях 2х10"8М, 2х10"7М, 2х10'6М, 2х10"5М и 2Х10"4 M соответственно до 85,1±4,2%#, 78,9±6,0%*, 80,5±4,9%#, 80,0±7,4%* и 74,2±7,1%* от фона. При длительном воздействии ЛФХ наблюдается десенситизация, т. е. снижение проявления отрицательного инотропного эффекта ЛФХ. В ряде опытов помимо этого эффекта ЛФХ вызывал подъем изолинии меха-нограммы, что косвенно указывало на снижение скорости расслабления кардио-миоцитов. В целом, эти два эффекта ЛФХ, которые ранее в опытах с изолированным сердцем крысы наблюдали Биленко М. В. и соавт. (1989) и Hoque Е. et al. (1997), мы объясняем тем, что ЛФХ, взаимодействуя с орфановыми рецепторами типа GPR4 и G2A, о наличии которых указывают данные литературы (Lum H. et al, 2003; Matsumoto T. et al. 2007), повышает проницаемость Са-каналов кардиомиоци-тов, что уменьшает длину саркомеров. Это приводит к снижению силы сокращения и к замедлению скорости расслабления кардиомиоцитов. Полагаем, что подобная ситуация может иметь место и в условиях целостного организма при накоплении ЛФХ, которое нередко возникает при стрессе (Fuchs В., Schiller J., 2009), гипоксии (Hashizume H. et al., 1997), инфаркте миокарда (Торкунов П. А. и соавт., 1997) и других критических состояниях.

При оценке влияния ЛФХ на проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина установлено (рис.13), что ЛФХ препятствует проявлению этого

эффекта либо уже в момент воздействия (установлено при исследовании ЛФХ в концентрации 2х10'5М), либо в первые 10 минут после удаления ЛФХ (2x10"6 и 2х10"4М). Так, при исследовании ЛФХ в концентрации 2х10"5 М ацетилхолин исходного достоверно снижал амплитуду сокращений до 69,3±4,6%# от фона, а совместно с ЛФХ или после удаления ЛФХ ацетилхолин не снижал ее (она составила соответственно 88,6±6,7% и 89,1±5,9%* от фона). А в опытах с ЛФХ в концентрации 2x10"6 М исходно АХ достоверно снижал амплитуду сокращений до 78,7±5,7% от фона, при воздействии совместно с ЛФХ он также достоверно снижал ее до 87,4±4.8% от фона, а после удаления ЛФХ он не изменял амплитуду сокращений (она составила 91,1±7.1% от фона). Это говорит о том, что ЛФХ снижает эффективность активации М-ХР, но не в момент воздействия, а после удаления ЛФХ. В целом, результаты наших исследований согласуются с данными, полученными в лаборатории ТурпаеваТ. М. в опытах с сердцем лягушки и кролика (Суслова И. В. и соавт., 1995; Проказова Н. В. и соавт., 1998) и позволяют рассматривать ЛФХ в качестве одного из возможных компонентов ЭБМХР. Об этом свидетельствует аналогия М-холиноблокирующей активности сыворотки крови и ЛФХ. Расчеты также подтверждают данное предположение. Действительно, если учитывать, что в сыворотке крови концентрация ЛФХ достигает 2-8х10"5 М, т.е. 20-80 мкМ (Суслова И. В. и соавт., 1995), или в среднем 50 мкМ, то минимальная концентрация ЛФХ в среде при разведении сыворотки крови в 500, 100, 50 и 10 раз должна составлять соответственно 10"7М, 5хЮ"7 М, Ю^М, 5х10"бМ. Исходя из этого, можно полагать, что М-холиноблокирующая активность 100-, 50- и 10-кратных кратных (и вероятно, и 500-кратных разведений) разведений может быть следствием наличия в крови ЛФХ. Не исключено, что помимо ЛФХ в составе ЭБМХР могут быть и другие вещества. Наиболее вероятно, что механизм М-холиноблокирующей активности ЛФХ связан с тем, что при его воздействии повышается активность протеинкиназы С, следствием чего является повышение фосфорилирования М-ХР, что снижает эффективность их активации.

PK ' ÄX ' PK ' ЛФХ ' ЛФХ+АХ

Рис. 13. Механограмма полоски миокарда крысы, отражающая способность лизофосфатидилхолина (ЛФХ) в концентрации 2x10"5 М блокировать отрицательный инотропный эффект ацетилхолина (АХ), используемого в концентрации 5,5x10"7 М.

РК-раствор Кребса. Калибровка - 1мН, 1мин.

Ранее было показано, что ЛФХ проявляет бета-адреноблокирующее влияние на миокарде крысы (Пенкина Ю. А. и соавт., 2008) и на миометрии крысы (Торо-пов А. Л., и соавт., 2011), а также проявляет альфа-адреноблокирующее влиянии на гладких мышах почечной артерии коровы (Циркин В. И. и соавт., 2009; Кашина Р. Ю. и соавт., 2010). Во всех этих случаях гистидин и другие аналоги ЭСБАР восстанавливали эффективность активации указанных рецепторов. Мы проверили способность гистидина восстанавливать эффективность активации М-ХР миокарда крысы, сниженную под влиянием 50-кратного разведения куриного яичного желтка как источника ЛФХ. В серии 44, которую проводили по схеме: РК —> АХ (5,5x10"6 М) -» РК -» желток, 1:50 желток, 1:50 + АХ —> желток, 1:50 + АХ +

гистидин (6,5x10"4 М) —» РК—► АХ —* РК, мы показали, что желток снижает способность АХ проявлять отрицательный инотропный эффект, но гистидин (6,5x10'4 М) не восстанавливает эту способность. Действительно, амплитуда сокращений при 1-м (исходно), 2-м (совместно с яичным желтком), при 3-м (совместно с яичным желтком и гистидином) и 4-м (после удаления желтка и гистидина) тестированиях ацетилхолином составила соответственно 90,7±2,1%#, 92,9±3,6%#, 120,0=3,4%", 93,4±3,2% от фона. Косвенно эти данные указывают на то, что механизм нарушения эффективности передачи сигнала от М-ХР внутрь клетки под влиянием ЛФХ может отличаться от подобного механизма в отношении других клеточных рецепторов. Так как в организме ЛФХ может накапливаться в больших количествах и тем самым снижать влияния вагуеа на сердце, результаты наших исследований ставят вопрос о поиске веществ, способных предотвратить М-холиноблокирующий эффект ЛФХ.

***

Исследование, проведенные на изолированном миокарде человека и крысы, указывает на наличие в крови факторов, способных существенно изменять сократимость миокарда (например, ЭАСМ) и его реактивность в отношении агонистов бета-адренорецепторов (ЭСБАР, ЭББАР) и М-холинорецепторов (например, ЭБМХР). Их дальнейшее изучение является весьма перспективным, так как понимание механизма действия этих модуляторов, установление их природы и выявление экзогенных аналогов откроет новые пути для создания эффективных методов лечения заболеваний сердца.

ВЫВОДЫ

1. Амплитуда вызванных сокращений полосок миокарда из ушка правого предсердия пациентов с сердечной недостаточностью III функционального класса находится в прямой зависимости от величины фракции выброса левого желудочка по Тейхольцу (ФВЛЖТ), т. е. сократимость изолированного миокарда отражает сократимость левого желудочка сердца.

2. Амплитуда сокращений полосок миокарда человека возрастает под влиянием 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови небеременных женщин (более кратные разведения не влияют на нее), а также при действии тирозина (5,5х10~5 и 5,5х10~4 М), гистидина (6,5х 10"5 М) и триптофана (4,9x10"4 М).

3. Адреналин в концентрациях 5,5х10'9 М и 5,5х10~8 М не влияет на амплитуду сокращений полосок миокарда человека, а в концентрациях 5,5 (хЮ'^Ю"6, 10~5 и 10^) М дозозависимо повышает ее (константа диссоциации равна 1100±54 нМ). Способность адреналина в концентрации 5,5х10"8 М оказывать положительный инотропный эффект усиливают 1000-, 500- и 100-кратные разведения сыворотки крови небеременных женщин, а способность адреналина в концентрации 5,5х10"6 М усиливает 10-кратное разведение и снижает 500-кратное разведение сыворотки крови. Бета-адреносенсибилизирующая и бета-адреиоблокирующая активность сыворотки крови объясняется наличием в ней соответственно эндогенного сенсибилизатора бета-АР (ЭСБАР) и эндогенного блокатора бета-АР (ЭББАР).

4. Тирозин, гистидин, триптофан и милдронат как аналоги ЭСБАР, способные усиливать влияние адреналина на бета-адренорецепторы гладких мышц, не повышают положительный инотропный эффект адреналина в опытах с изолированным миокардом человека. Это говорит о селективности действия аналогов ЭСБАР по отношению к бета-АР гладких мышц.

5. Амплитуда вызванных сокращений изолированного миокарда правого желудочка сердца крысы снижается под влиянием лизофосфатидилхолина (2х109-2x10^ М), но возрастает под влияние 5-кратного разведения сыворотки крови человека. Положительный инотропный эффект сыворотки крови человека, наблюдаемый на изолированном миокарде человека и крысы, частично снижается при ее тепловой денатурации, не меняется при блокаде рецепторов ангиотензина II лозапом (2,2x10'6 и 2,2x10"4 М), но полностью снимается при воздействии верапамила (2Х10"6 М). В целом, этот эффект объясняется наличием в крови эндогенного активатора сократимости (ЭАСМ), отличного от ангиотензина II и действие которого связано с повышением проницаемости Са-каналов Ь-типа кардиомиоцитов для ионов Са2+.

6. Ацетилхолин в концентрациях 5,5х10'9 и 5,5х10"8 М не изменяет амплитуду вызванных сокращений изолированного миокарда крысы, а в концентрациях 5,5х10"7, 5,5x10", 5,5х10"5 и 5,5х10"4М дозозависимо и обратимо понижает ее (константа диссоциации - 5,0±0,1 мкМ). Способность ацетилхолина вызывать отрицательный инотропный эффект уменьшается под влиянием 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови, что объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР).

7. В опытах с полосками миокарда крысы М-холиноблокирующий эффект 500-кратного разведения сыворотки крови не снижается под влиянием прозерина (2,9х10"6 М), но полностью утрачивается при тепловой денатурации; подобный эффект 10-кратного разведения сыворотки частично сохраняется при тепловой денатурации. Лизофосфатидилхолин (ЛФХ) в концентрациях 2х10"6, 2х10"5 и 2х 10"4 М, а также 50-кратное разведения куриного яичного желтка (как источник ЛФХ) подобно сыворотке крови проявляет М-холиноблокирующую активность, которая не снимается гистидином (6,5x10"1 М). Все эти данные указывают на то, что ЭБМХР по своей природе отличается от ацетилхолинэстеразы, состоит из термостабильного и термолабильного компонентов, роль которого выполняет ЛФХ.

8. Сыворотка крови человека содержит эндогенный сенсибилизатор и эндогенный блокатор бета-адренорецепторов (ЭСБАР и ЭББАР), эндогенный блокатор М-холинорецепторов (ЭБМХР) и эндогенный активатор сократимости миоцитов (ЭАСМ). Они способны влиять на сократимость миокарда, в том числе за счет модуляции эффективности адренергических и холинергических воздействий на сердце.

Практические рекомендации

1. Изолированный миокард ушка правого предсердия человека можно использовать в экспериментах для поиска новых кардиотропных веществ.

2. Целесообразно провести исследования, направленные на клиническое применение данных о способности тирозина, гистидина и триптофана повышать сократимость миокарда.

3. Необходим поиск селективных сенсибилизаторов бета-адренорецепторов миокарда, так как известные аналоги ЭСБАР (тирозин, гистидин, триптофан и мил-дронат) не повышают эффективность активации бета-адренорецепторов миокарда человека

4. Рекомендуется при рассмотрении вопросов патогенеза заболеваний сердца учитывать способность лизофосфатидилхолина, накапливающегося при стрессе, гипоксии, ПОЛ и в других ситуациях, снижать сократимость, адрено- и- холиноре-активность миокарда.

Список основных работ по теме диссертации Статьи в журналах, рекомендованных перечнем ВАК РФ

1. Торопов A. JL, Коротаева К. Н., Самоделкина Е. О., Циркин В. И., Вязников В. А. Влияние лизофосфатидилхолина на адрено- и М-холинореактивность гладких мышц и миокарда // Вестник Новосибирского государственного университета. Серия биология, клиническая медицина. -2010. - Т. 8. - Вып. 3. - С. 18-26.

2. Коротаева К. Н., Вязников В. А., Циркин В. И., Костяев А. А. Влияние сыворотки крови человека на сократимость и p-адренореактивность изолированного миокарда человека // Физиология человека. - 2011. - Т. 37, № 3. - С. 83-91.

3. Коротаева К. Н., Циркин В. И. Влияние лизофосфатидилхолина и яичного желтка на амплитуду вызванных сокращений миокарда крысы // Вестник Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского. Сер. биология. 2011.-№ 1.-С. 110-116.

4. Коротаева К. Н., Ноздрачев А. Д., Вязников В. А., Циркин В. И. Влияние тирозина, гистидина, триптофана, милдроната и сыворотки крови человека на амплитуду вызванных сокращений кардиомиоцитов человека и инотропный эффект адреналина // Вестник Санкт-Петербургского университета. Сер. 3.- 2011 (биология).-Вып. 2.-С. 45-57.

5. Коротаева К. Н., Ноздрачев А. Д., Циркин В. И. Влияние сыворотки небеременных женщин и лизофосфатидилхолина на эффективность активации М-холи-норецепторов миокарда крысы // Вестник Санкт-Петербургского университета. Сер. 3 (биология). - 2011. - Вып. 3. - С. 57-65.

Статьи в журналах

6. Торопов А. Л., Коротаева К. Н., Самоделкина Е. О., Циркин В. И., Вязников В. А., Проказова Н. В. Влияние лизофосфатидилхолина, яичного желтка и гистидина на адрено- и М-холинореактивность мышц // Вятский медицинский вестник. - 2010. - № 1. - С. 69-75.

7. Попова О. В., Коротаева К. Н., Пенкина Ю. А., Вязников В. А., Циркин В. И., ТрухинаС. И. Влияние гистидина на амплитуду сокращений изолированного миокарда человека и показатели кардиоинтервалографии и электроэнцефалографии // Вятский медицинский вестник. - 2010. - № 2. - С. 32-35.

Тезисы материалов конференций

8. Коротаева К. Н. Влияние лизофосфатидилхолина на эффективность активации М-холинорецепторов изолированного миокарда крысы // Молодежь и наука на Севере: Материалы VII молодежной науч. конф. II т. - Сыктывкар: ИФ Коми НЦ УрО РАН, 2008. С. 226-228.

9. Коротаева К. Н., Куншин А. А., Самоделкина Е. О., Сизова Е. Н., Торопов А. Л. Миоцитстимулирующая активность сыворотки крови - ее природа и изменение при артериальной гипертензии // Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии: Тезисы VIII юбилейной рос. науч. конф. - М., 2009. - С. 52-53.

10. Коротаева К. Н., Циркин В. И., Вязников В. А., Костяев А. А. Влияние сыворотки крови человека на инотропный эффект адреналина в опытах с изолированным миокардом человека // Там же. — С. 99-100.

11. Коротаева К. Н. Характеристика сократимости биоптатов изолированного миокарда человека // Фундаментальная наука и клиническая медицина: Тезисы 11-йвсерос. медико-биол. конф. молодых исследователей «Человек и его здоровье». - СПб.: СПбГУ, 2010. - С. 94-95.

12. Попова О. В., Коротаева К. Н. Изменение амплитуды вызванных сокращений изолированного миокарда человека, показателей ВСР и ЭЭГ под влиянием L-гистидина // Там же. - С. 158-159.

13. Коротаева К. Н., Вязников В. А., Костяев А. А., Циркин В. И. Бета-адре-номодулирующая активность сыворотки крови человека в опытах с изолированным миокардом человека. // Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины: Материалы всерос. науч.-практ. конф. - Киров: КНИИГПК, 2010. - С. 334— 335.

14. Попова О. В., Коротаева К. Н. Пенкина Ю. А. Влияние гистидина, триптофана и тирозина на сократимость изолированного миокарда и вариабельность сердечного ритма человека // Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике: Материалы IX всерос. молодежной науч. конф. Сыктывкар: ИФ КомиНЦ УрО РАН, 2010. - С. 136-138.

15. Коротаева К. Н., Циркин В. И. Положительный инотропный эффект сыворотки крови человека и его природа // Науке нового века - знание молодых: Материалы всеросс. научно-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и соискателей. - Ч. II. Биологические науки, ветеринарные науки, технические науки. - Киров: ВГСХА, 2010.-С. 21-26.

16. Коротаева К. Н, Циркин В. И., Вязников В. А. Влияние аминокислот, милдроната и сыворотки крови человека на сократимость и бета-адренореактив-ность миокарда человека // Актуальные вопросы современной физиологии и медицины: Материалы межрегион, науч.-практ. конф. - Ижевск: ИГМА, 2010.- С. 5658.

Список сокращений:

Ад - адреналин

АК - аминокислота

АР - адренорецептор

АХ - ацетилхолин

Вер - верапамил

Гис - гистидин

ЛФХ - лизофосфатидилхолин

Милд - милдронат

РК - раствор Кребса

Сыв - сыворотка крови

Тир - тирозин

Трф - триптофан

ФВЛЖТ_фракция выброса левого желудочка по Тейхольцу ХЭ - холинэстераза

ЭАСМ - эндогенный активатор сократимости миоцитов ЭББАР - эндогенный блокатор бета-адренорецепторов ЭБМХР - эндогенный блокатор М-холинорецепторов ЭИСМ - эндогенный ингибитор сократимости миоцитов ЭСБАР - эндогенный сенсибилизатор бета-адренорецепторов ЭСМХР - эндогенный сенсибилизатор М-холинорецепторов

Подписано в печать 20.10.2011 г. Формат 64x80/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ № 1855.

Издательство

Вятского государственного гуманитарного университета, 610002, г. Киров, ул. Красноармейская, 26, т. (8332) 673674

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Коротаева, Карина Николаевна

Введение.

Глава 1. Адрено- и холинореактивность миокарда человека и животных и их изменения под влиянием эндогенных модуляторов хемореактивности (обзор литературы).

1.1. Энергетика миокарда.

1.2. Ионные каналы и ионные насосы кардиомиоцитов.

1.3. Вещества, влияющие на сократимость миокарда.

1.4. Эндогенные и экзогенные модуляторы адрено- и холинореактивности миокарда.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Общий дизайн исследования.

2.2. Технология забора миокарда человека и работы с ним.

2.3. Клинические методы оценки сократимости миокарда.

2.4. Технология забора миокарда крысы и работы с ним.

2.5. Методика регистрации сокращений полосок миокарда человека и крысы.

2.6. Оценка адреномодулирующей и М-холиномодулирующей активности сыворотки крови небеременных женщин.

2.7. Растворы и вещества.

2.8. Статистический анализ результатов исследования.

Глава 3. Результаты исследований на изолированном миокарде человека и их обсуждение.

3.1. Общая характеристика сократимости миокарда из правого ушка сердца человека (по данным сери 1-24).

3.2. Влияние адреналина на сократимость изолированного миокарда сердца человека (серия 1).

3.3. Влияние сыворотки крови небеременных женщин на сократимость и адренореактивность миокарда человека (серии 2-14).

3.3.1. Влияние сыворотки крови небеременных женщин на сократимость.

3.3.2 Влияние сыворотки крови небеременных женщин на положительный инотропный эффект адреналина, используемого в концентрациях, близких к пороговым (5,5x10" М), в опытах с изолированным миокардом человека серии 2-7).

3.3.3. Влияние сыворотки крови небеременных женщин на положительный инотропный эффект адреналина, используемого в высокой концентрации (5,5x10"6 М) в опытах с изолированным миокардом человека (серии 814).

3.4. Влияние тирозина, гистидина, триптофана и милдроната на сократимость и инотропный эффект адреналина в опытах с изолированным миокардом человека (серии 15-24).

3.5. Аналоги ЭСБАР (тирозин, гистидин, триптофан и милдронат) и положительный инотропный эффект адреналина в опытах с изолированным миокардом человека.

Глава 4. Результаты исследований на изолированном миокарде крысы и их обсуждение.

4.1. Общая характеристика сократимости миокарда крысы.

4.2. Влияние ацетилхолина на амплитуду вызванных сокращений миокарда крысы (серия 25).

4.3. Влияние сыворотки крови человека на сократимость миокарда крысы (серии 26-32).

4.4. Исследование природы и механизма действия эндогенного активатора сократимости миоцитов, или ЭАСМ (серии 33).

4.5. Влияние сыворотки крови человека на отрицательный инотропный эффект АХ (серии 26-32).

4.6. Влияние лизофосфатидилхолина на сократимость миокарда крысы (серии 39-42).

4.7. Влияние лизофосфатидилхолина на проявление ацетилхолином отрицательного инотропного эффекта в опытах с миокардом крысы (серии

40-42).

4.8. Влияние 50-кратного разведения желтка куриного яйца как источника ЛФХ на фоновую сократимость миокарда и на проявление ацетилхолином отрицательного инотропного эффекта (серии 43, 44).

4.9. Обсуждение результатов исследования серий 39-44, в которых изучалось влияния ЛФХ на сократимость и М-холинореактивность миокарда крысы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние сыворотки крови и некоторых ее компонентов на сократимость и адрено- и холинореактивность изолированного миокарда человека и крысы"

Актуальность работы. Сердечно-сосудистые заболевания до настоящего времени является одними из самых распространенных заболеваний и одной из самых частых причин смерти человека (Рео1а е1 а1., 2004; Шаленкова и соавт., 2005; Гордеев и соавт., 2009). Поэтому изучение физиологических свойств миокарда, и особенно, миокарда человека, представляет большой интерес. С этих позиций важным является изучение участия в процессах регуляции деятельности сердца человека и животных эндогенных модуляторов адрено- и холинореактивности срочного действия, в том числе эндогенного сенсибилизатора бета-адренорецепторов (ЭСБАР), эндогенного блокатора бета-адренорецепторов (ЭББАР) и эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР). Гипотеза о существовании этих факторов была высказана на основе многочисленных исследований, проведенных, главным образом, на гладких мышцах матки крысы (Циркин и соавт., 1997, 2011; Туманова, 1998; Сизова и соавт., 2002, 2004; Мальчикова и соавт., 2002; Кононова, 2004; Хлыбова, 2007; Куншин и соавт., 2007; Торопов и соавт., 2010). Вместе с тем, вопрос об участии этих факторов в регуляции адрено- и холинореактивности миокарда человека и животных остается открытым. Действительно, удалось лишь показать, что сыворотка крови человека как источник ЭСБАР усиливает положительный инотропный эффект адреналина на изолированном сердце лягушки (Трухин и соавт., 2004; Демина и соавт., 2008; Пенкина и соавт., 2008) и крысы (Пенкина и соавт., 2008). В отношении же миокарда человека этот вопрос не исследовался. В опытах с гладкими мышцами было показано, что гистидин, триптофан, тирозин, а также милдронат и предуктал проявляют ЭСБАР-активность, т.е. подобно сыворотке крови повышают эффективность активации бета-АР (Ноздрачев и соавт., 1998; Туманова, 1998; Сизова, Циркин, 2006; Сизова и соавт., 2008). Данные о способности этих веществ оказывать ЭСБАР-активность в отношении миокарда крысы оказались противоречивы (Пенкина и соавт., 2008), а в отношении миокарда человека они отсутствуют. Вместе с тем, изучение этого вопроса имеет не только теоретическое значение, но и практическое, так как считается, что при сердечной недостаточности возникает необходимость в повышении эффективности активации бета-адренорецепторов миокарда (Красникова, Габрусенко, 2000; Brodde et al., 2006). Способность сыворотки крови проявлять М-холинолитическую, или М-холиноблокирующую активность (за счет наличия в ней ЭБМХР) была исследована в отношении миокарда лягушки и кролика в лаборатории Турпаева Т. М. (Турпаев и соавт., 1974; Zvezdina et al., 1978; Суслова и соавт., 1995; Проказова и соавт., 1998), а также в нашей лаборатории в отношении миокарда лягушки (Трухин и соавт., 2004; Демина и соавт., 2008). Кроме того, в опытах с миокардом лягушки и кролика был исследован М-холинолитический эффект лизофосфатидилхолина, или ЛФХ (Zvezdina et al,. 1978; Суслова и соавт., 1995; Проказова и соавт., 1998), который, вероятно, можно рассматривать в качестве компонента ЭБМХР. В отношении миокарда крысы и человека данные о влиянии сыворотки крови и ЛФХ на проявление отрицательного инотропного эффекта ацетилхолина до настоящего времени отсутствуют. Следует отметить, что до настоящего времени имеются лишь единичные работы, касающиеся физиологических свойств изолированного миокарда человека (Маак и соавт., 2004), но в них отсутствуют сведения о действии адрено- и холиномодуляторов. Учитывая важность вопроса о физиологических свойствах миокарда человека и о возможном влиянии эндогенных модуляторов адрено- и холинореактивности на миокард человека, в работе сформулированы следующие цель и задачи.

Цель исследования - оценить изменение сократимости, бета-адренореактивности и М-холинореактивности изолированного миокарда человека и крысы под влиянием сыворотки крови человека и ряда веществ.

Задачи исследования:

Новизна исследования. Впервые показано, что амплитуда вызванных сокращений полосок миокарда из ушка правого предсердия пациентов с сердечной недостаточностью III функционального класса находится в прямой зависимости от величины фракции выброса левого желудочка по Тейхольцу (ФВЛЖТ), т.е. сократимость изолированного миокарда отражает сократимость левого желудочка сердца. В опытах с изолированным миокардом человека впервые установлено, что амплитуда сокращений миокарда возрастает под влиянием 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови небеременных женщин, а также при действии тирозина (5,5x10'5 М и 5,5x10"4 М), гистидина (6,5x10-5 М) и триптофана (4,9x10"4 М). Впервые оценена адренореактивность изолированного миокарда человека и установлена константа диссоциации для адреналина. Ее величина, равная 1100±54 нМ, указывает на снижение адренореактивности у пациентов с сердечной недостаточностью. Впервые показано, что способность адреналина в концентрации 5,5x10"8 М оказывать положительный инотропный эффект усиливают 1000-, 500- и 100-кратные разведения сыворотки крови человека, а способность адреналина в концентрации 5,5х10"6 М - усиливает 10-кратное и снижает 500-кратное разведение сыворотки крови, что объясняется наличием в крови эндогенных модуляторов адренорецепторов. Впервые показано, что вещества, которые повышают эффективность активации бета-адренорецепторов гладких мышц (тирозин, гистидин, триптофан и милдронат), не проявляют бета-адреносенсибилизирующую активность в отношении бета-адренорецепторов миокарда человека. Тем самым поставлен вопрос о необходимости поиска селективных сенсибилизаторов бета-АР миокарда. В опытах с миокардом крысы впервые выявлена способность лизофосфатидилхолина в концентрациях 2x10"9 М - 2x10"4 М снижать сократимость миокарда и одновременно (в концентрациях 2x10'6 - 2x10'4 М) снижать проявление отрицательного инотропного эффекта ацетитилхолина, т.е. проявлять М-холиноблокирующую активность. В этих экспериментах также впервые выявлена подобная активность и для 1000-, 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови человека, что объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР), в качестве термолабильного компонента которого предложено рассматривать ЛФХ. Впервые проведен анализ природы положительного инотропного эффекта сыворотки крови, обусловленного наличием в ней эндогенного активатора сократимости миоцитов (ЭАСМ) - в экспериментах с полосками миокарда крысы показано, что этот эффект 5-кратного разведения сыворотки крови частично снижается при ее тепловой денатурации, не меняется при блокаде рецепторов ангиотензина II лозапом, но полностью снимается при воздействии верапамила. Это указывает на то, что ЭАСМ не является ангиотензинном II, а его действие связано с повышением проницаемости Са-каналов Ь-типа кардиомиоцитов для ионов Са2+. В целом, результаты исследования позволили впервые доказать, что содержащиеся в крови человека эндогенные модуляторы адренореактивности (ЭСБАР и ЭББАР) и холинореактивности (ЭБМХР), а также эндогенный активатор сократимости миоцитов (ЭАСМ), т.е. регулятор Са-каналов способны влиять на сократимость миокарда человека, в том числе за счет модуляции эффективности адренергических и холинергических воздействий на сердце.

Научная и практическая значимость работы. Результаты работы дают первые сведения о физиологических свойствах миокарда человека, иссеченного у пациентов с сердечной недостаточностью. Они расширяют представление о факторах, влияющих на сократимость, адренореактивность и холинореактивность миокарда человека и животных, в том числе о способности свободных аминокислот - тирозина, гистидина, триптофана повышать сократимость миокарда человека. Внесено новое в изучении физиологической роли эндогенных модуляторов адренореактивности (ЭСБАР и ЭББАР) и холинореактивности (ЭБМХР). В частности, продемонстрирована способность ЭСБАР повышать эффективность активации бета-адренорецепторов миокарда человека. Доказана возможность ЭБМХР существенно снижать эффективность активации М-холинорецепторов миокарда млекопитающих. Расширено представление об ЛФХ как факторе, снижающем сократимость миокарда и эффективность активации М-холинорецепторов миокарда. Это необходимо учитывать при разработке вопросов патогенеза заболеваний сердца. Углублено представление о природе ЭАСМ и ЭБМХР. Все эти данные имеют значение для физиологии кровообращения, физиологии возбудимых тканей, патофизиологии, биохимии, фармакологии, терапии и кардиологии.

Результаты исследования важны и в практическом плане. В частности, они позволяют применять биоптаты из ушка правого предсердия человека, получаемые при оперативном лечение пациентов с ИБС, в экспериментах для поиска новых кардиотропных веществ. Они также указывают на целесообразность проведения исследований, направленных на клиническое применение тирозина, гистидина и триптофана как кардиотропных средств, например, при сердечной недостаточности. Результаты исследования указывают на необходимость поиска селективных сенсибилизаторов бета-адренорецепторов миокарда. Данные, полученные в работе, могут быть использованы в учебной деятельности кафедр биологии, физиологии, патофизиологии и терапии.

Положения, выносимые на защиту. 1. Сократимость изолированного миокарда человека и крысы повышается под влиянием сыворотки крови (за счет наличия в ней так называемого эндогенного активатора сократимости миоцитов, или ЭАСМ), а также тирозина, гистидина и триптофана (установлено в опытах с миокардом человека) и снижается под влиянием лизофосфатидилхолина (установлено в опытах с миокардом крысы).

3. Отрицательный инотропный эффект ацетилхолина в отношении миокарда крысы снижается под влиянием 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных кратных разведений сыворотки крови человека (это объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов, или ЭБМХР), а также лизофосфатидилхолина (2x10"6 - 2x10"4 М), который рассматривается в качестве термолабильного компонента ЭБМХР.

Внедрение. Результаты исследования используются в учебной и научной деятельности кафедры нормальной физиологии Кировской государственной медицинской академии и кафедры биологии Вятского государственного гуманитарного университета.

Апробация работы. Результаты исследования доложены на научных сессиях Вятского государственного гуманитарного университета (Киров, 2008, 2009, 2010), конференции «Молодежь и наука на севере» (Сыктывкар, 2008), VIII Молодежной научной конференции «Физиология человека и животных» (Сыктывкар, 2009), VIII юбилейной Российской научной конференции с международным участием «Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии» (Москва, 2009), конференции Фундаментальная и клиническая медицина (С-П, 2010), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2010), IX Молодежной научной конференции «Физиология человека и животных» (Сыктывкар, 2010).

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Коротаева, Карина Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Амплитуда вызванных сокращений полосок миокарда из ушка правого предсердия пациентов с сердечной недостаточностью III функционального класса находится в прямой зависимости от величины фракции выброса левого желудочка по Тейхольцу (ФВЛЖТ), т.е. сократимость изолированного миокарда отражает сократимость левого желудочка сердца.

2. Амплитуда сокращений полосок миокарда человека возрастает под влиянием 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови небеременных женщин (более кратные разведения не влияют на нее), а также при действии тирозина (5,5x10"5 М и 5,5x10"4 М), гистидина (6,5x10"5 М) и триптофана (4,9x10'4 М).

3. Адреналин в концентрациях 5,5x10"9 М и 5,5x10"8 М не влияет на амплитуду сокращений полосок миокарда человека, а в концентрациях 5,5 (х 10"7,10"6, 10'5 и 10"4) М дозозависимо повышает ее (константа диссоциации равна 1100±54 нМ). Способность адреналина в концентрации g

5,5x10* М оказывать положительный инотропный эффект усиливают 1000-, 500- и 100-кратные разведения сыворотки крови небеременных женщин, а способность адреналина в концентрации 5,5x10"6 М усиливает 10-кратное разведение и снижает 500-кратное разведение сыворотки крови. Бета-адреносенсибилизирующая и бета-адреноблокирующая активность сыворотки крови объясняется наличием в ней соответственно эндогенного сенсибилизатора бета-АР (ЭСБАР) и эндогенного блокатора бета-АР (ЭББАР).

5. Амплитуда вызванных сокращений изолированного миокарда правого желудочка сердца крысы снижается под влиянием лизофосфатидилхолина (2x10'9 - 2x10"4 М), но возрастает под влияние 5-кратного разведения сыворотки крови человека. Положительный инотропный эффект сыворотки крови человека, наблюдаемый на изолированном миокарде человека и крысы, частично снижается при ее тепловой денатурации, не меняется при блокаде рецепторов ангиотензина II лозапом (2,2x10'6 М и 2,2x10"4 М), но полностью снимается при воздействии верапамила (2х10"6 М). В целом, этот эффект объясняется наличием в крови эндогенного активатора сократимости (ЭАСМ), отличного от ангиотензина II, и действие которого связано с повышением проницаемости Са-каналов Ь-типа кардиомиоцитов для ионов Са2+.

6. Ацетилхолин в концентрациях 5,5х10"9 М и 5,5х10"8 М не изменяет амплитуду вызванных сокращений изолированного миокарда крысы, а в концентрациях 5,5x10'7, 5,5x10"6, 5,5x10"5 и 5,5x10"4 М дозозависимо и обратимо понижает ее (константа диссоциации - 5,0±0,1 мкМ). Способность ацетилхолина вызывать отрицательный инотропный эффект уменьшается под влиянием 500-, 100-, 50-, 10- и 5-кратных разведений сыворотки крови, что объясняется наличием в ней эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР).

7. В опытах на миокарде крысы М-холиноблокирующий эффект 500-кратного разведения сыворотки крови не снижается под влиянием прозерина (2,9x10"6 М), но полностью утрачивается при тепловой денатурации; подобный эффект 10-кратного разведения сыворотки частично сохраняется при тепловой денатурации, Лизофосфатидилхолин (ЛФХ) в концентрациях 2x10"6, 2x10"5 и 2х 10"4 М, а также 50-кратное разведения куриного яичного желтка (как источник ЛФХ) подобно сыворотке крови проявляет М-холиноблокирующую активность, которая не снимается гистидином (6,5x10'4 М). Все эти данные указывают на то, что ЭБМХР по своей природе отличается от ацетилхолинэстеразы, состоит из термостабильного и термолабильного компонентов, роль которого выполняет ЛФХ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

3.Необходим поиск селективных сенсибилизаторов бета-адренорецепторов миокарда, так как известные аналоги ЭСБАР (тирозин, гистидин, триптофан и милдронат) не повышают эффективность активации бета-адренорецепторов миокарда человека.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Коротаева, Карина Николаевна, Нижний Новгород

1. Абрамочкин Д. В., Петров К. А., Зобов В. В., Ягодина Л. О., Никольский Е. Е., Розенштраух Л. В. Исследование влияния нового класса ингибиторов ацетилхолинэстеразы на электрическую активность сердца // Кардиология. 2009. - № 1. - С. 47-50.

2. Авакян А. Э., Ткачук В. А. Структурная и функциональная организация систем передачи сигнала через рецепторы, сопряженные с G-белками // Рос. физиол. журн. 2003. - Т.89, №2. - С. 219-239.

3. Авдонин П. В., Ткачук В. А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М., 1994.-186 с.

4. Алабовский В. В.; Болдырев А. А.; Винокуров А. А.; Щаврацкий В. X. Действие гистидинсодержащих дипептидов в условиях ишемии и реперфузии изолированного сердца. // Биохимия. 1997. - Т. 62, №1. - С. 91-102.

5. Александрова Е.А. Кальцийтранспортирующие системы и регуляция концентрации кальция в кардиомиоцитах // Успехи физиол. наук. 2001, -Т. 32, №3. - С.40-48.

6. Алинов Н. Н. Основы медицинской физиологии. Учебное пособие. М.: Практика, 2008.-413 с.

7. Андреев Д. А. Антиаритмические лекарственные средства / Клиническая фармакология / под ред. В.Г. Кукес 4-ое изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 440-457.

8. Афанасьев Ю. И., Юрьина Н. А. Гистология: Учебник / под ред. Ю. И. Афанасьев, Н. А. Юрьиной. 5-е издание переработанное и дополненное. - М.: Медицина, 1999. - 744 с.

9. Бабская Н. Е., Ашмарин И. П. Действие дипептидов GL Y-PRO, PRO-GLY, глицина и пролина на кардиотропные эффекты ацетилхолина // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1998.- Т.124, №8,- С.139-141.

10. Ю.Балашов А. М. Эндогенные аллостерические регуляторы рецепторов // Успехи физиологических наук. 2004. - Т. 35, № 2. - С 73-91.

11. Беленков Ю. Н., Оганова Р. Г. Кардиология: национальное руководство -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. 1232 с.

12. Белизи С. Антиоксидантные свойства лактоферрина из женского молока / С. Белизи, И.А. Назарова, И.А. Климова и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1999. Т. 127, №5. - С.523-525.

13. Белоусов Ю. Б., Ерофеева С. Б., Манешина О. А. Ивабрадин первый ^ ингибитор избирательного и специфического действия, новый препарат для лечения стабильной стенокардии // Кардиология. - 2006. - № 8. - С. 36-48.

14. Братухина С. В. Адренергический механизм при беременности и в родах, его роль в патогенезе слабости родовой деятельности // Автореф. дисс. .канд. мед. наук. М.: РУДН, 1997. - 22 с.

15. Бураковский В. И., Бокерия Л. А. Сердечно-сосудистая хирургия / СССР. М.: Медицина, 1989. - 752 с.

16. Ватанабе А., Линдеманн Дж. (\Уа1:апаЬе А., 1лпс1етапп I.) Механизмы адренергической и холинергической регуляции сократимости миокарда // Физиология и патофизиология сердца. пер. с анл. под ред. Розенштраух Л. В. - М., Медицина, 1990.- С. 124-168.

17. Ветров В. В., Маслова М. Н. Влияние комплексной эфферентной терапии при гестозе на активность ацетилхолинэстеразы в сыворотке крови // Вестник Росс. Ассоц. акушеров-гинекологов. 2000. - № 2. - С. 13-15.

18. Власова Т. Ф., Ушаков А. С., Бычков В. П., Мирошникова Е. Б. Аминокислотный спектр крови человека при нервно-эмоциональном напряжении // Космическая биология и авиакосмическая медицина. -1986. Т.20. -№1. - С. 80-82.

19. Власова И. Г., Циркин В. И. Изучение антигипоксических свойств некоторых аминокислот-модуляторов адренергических структур мозга// Мат. I Международн. конф. «Хроноструктура и хроноэкология репродуктивной функции». М., Изд-во РУДН., 2000. С. 49-51.

20. Вышковский Л. Г. Определитель лекарств. РЛС. / под ред., Г. Л. Вышковского. -2004.: Издательство. РЛС-2005. С. 124.

21. Гаврилов В. Б., Лычковский А. В., Шостак Е. П., Конев С. В. Флуоресцентный анализ содержания тирозина в плазме крови // Ж. прикл. спектроскопии. 1998.-№3.-С. 366-371.

22. Гайтон А. К., Холл Д. Э. Медицинская физиология. -М.: Логосфера, 2008. 1296 с.

23. Гиляревский С. Р. Практические подходы к выбору Р-адреноблокатора для лечения сердечно-сосудистых заболеваний: новые данные, основанные на на доказательствах // Кардиология. 2006. - № 11. - С. 79-85.

24. Гордеев И. Г., Лучинкина Е. Е., Люсов В. А. Антиоксидантный эффект кардиопротектора милдроната у пациентов, подвергшихся коронарной реваскуляризации // Рос. Кардиол. Журн. 2009. - Т. 75, № 1. - С. 31-37.

25. Гриффин Дж., Охеда С. Физиология эндокринной системы / под ред. Дж. Гриффина, С. Охеды; пер. с англ.- М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2008.-496 с.

26. Демина Н. Л., Циркин В. И., Тарловская Е. И., Кашин Р. Ю. а и р -адрено-, М-холиномодулирующая активность сыворотки крови при артериальнойгипертензии // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2008. - № 2. -С. 16-22.

27. Джергения С. JI. Гуморальные компоненты систем регуляции сократительной деятельности матки беременных женщин / Дис. . канд. биолог.наук.-Киров, 1995.-218 е.-автореф.-М., 19 с.

28. Иваницкий Э. А., Пынько Н. П., Протопопов А. В. Электрокардиостимулятор ЭКС 451, впечатления практического врача // Вестник аритмологии. 2004. - № 34. - С. 76-77.

29. Ильина Е. Е. Применение миокардиальных цитопротекторов у больных стабильной стенокардией в предоперационном и послеоперационном периодах коронарного шунтирования: Автореф. дис. на соиск. уч. степ, канд. мед. наук 2005.- 26 с.

30. Исаам А. Особенности течения послеродового мастита и состояние аминокислотного спектра сыворотки крови // Автореф. дисс. канд. мед. наук. 1987. - 16 с.

31. Казарян Н. Б. Влияние миокардиального цитопротектора триметазидина на систолическую и диастолическую функцию левого желудочка у больных с ишемической болезнью сердца: Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук.-2004-21 с.

32. Камкин А. Г., Киселева И. С., Кирищук С. И., Лозинский И. Т. Потенциал-управляемые кальциевые каналы (часть I) // Успехи физиол. наук. 2006. -Т. 37,№4.-С. 3-33.

33. Камкин А. Г., Киселева И. С., Кирищук С. И., Лозинский И. Т. Потенциал-управляемые кальциевые каналы (часть II) // Успехи физиологических наук. -2007.-Т. 38, № 1.-С. 14-38.

34. Капелько В. И. Внеклеточный матрикс миокарда и его изменения при заболеваниях сердца // Кардиология. 2000. - № 9. - С. 78-90.

35. Кашин Р.Ю., Циркин В.И. Сыворотка крови снижает эндотелийзависимый релаксирующий эффект ацетилхолина на циркулярных полосках почечной артерии коровы // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. 2009. - Т. 2, № 26. - С. 119-121.

36. Климов А. Н., Никульчева Н. Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз / А.Н. Климов, Н.Г. Никульченко. 1995. - СПб: Питер Пресс. - С. 156-159.

37. Кондратьев Д. В., Казанский В. Е., Камкин А. Г. Роль кальция в реакции сердца на механическое воздействие // Успехи физиологических наук. -2008.-Т. 39, №3.-С. 3-28.

38. Кононова Т. Н. Роль эндогенных р-адрено и М-холиномодуляторов в регуляции деятельности систем организма человека / дис. канд. биолог, наук. Киров, 2004. - 173 с.

39. Краев А. В., Резцов А. В. Анатомия человека: Учебное пособие в 2 томах. Издание 2-ое, переработанное и дополненное. М.: «Медкнига», 2007. -Т.2.-398 с.

40. Кратенко Р. И. Ь-триптофан модулятор серотониновых рецепторов // Биол. вестн. - 1998. - Т.2, №1. - С.42-45.

41. Кузнецов С. Л., Мушкамбаров Н. Н. Гистология, цитология и эмбриология: Учебник для медицинских вузов. М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2007. - 600 с.

42. Кузьмин В. С., Розенштраух Л. В. Ионные механизмы действия антиаритмических препаратов III класса // Кардиология. 2010. - Т. 50, № 7.-С. 49-61.

43. Кукес В. Г., Стародубцев А. К. Клиническая фармакология и фармакотерапия: учебн. / под ред. В.Г. Кукеса, А.К. Стародубцева . 2-е изд., испр. - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2006. - 640 с.

44. Кукес В. Г., Румянцев А. С., Сычев Д. А. |3-Адреноблокаторы / Клиническая фармакология: учеб. / под ред. В.Г. Кукеса. 4-ое изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, - 2008. - С. 321-336.

45. Кукес В. Г., Сычев Д. А. Блокаторы медленных кальциевых каналов / Клиническая фармакология: учеб. / под ред. В.Г. Кукеса. 4-ое изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 351-374.

46. Куншин А. А. Влияние сыворотки крови человека на М-холино- и а-, (3-адренореактивность гладких мышц желудка крысы // Дисс.к.б.н. -Киров, 2006. 198 с. // Авторе. дисс.к.б.н. - Киров, 2006,- 23 с.

47. Курашвили JI. В., Васильков В. Г. Липидный обмен при неотложных состоянях / Л. В. Курашвили, В. Г. Васильков. Пенза. - 2003. - 198 с.

48. Куцарев И. П. Показатели жидкостных систем человека в норме: Справочник для врачей и клинических лаборантов,- Ростов-на-Дону: «Феникс», 2003.- 110 с.

49. Марин Т. В. а-адреноблокаторы / Клиническая фармакология / под ред.

50. B.Г. Кукеса 4-ое изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 313-321.

51. Марков X. М. Оксид азота и сердечно-сосудистая система// Успехи физиологических наук. 2001. - Т.32, № 3. - С. 49-65.

52. Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. Т. 1. 14-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Издательство Новая Волна»: Издатель

53. C.Б. Дивов. 2002. - 540 с.

54. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике М.: Медицина, 1987. - С. 222-224.

55. Миннахметов Р. Р., Ситдиков Ф. Г., Гильмутдинова Р. И., Зефиров Т. Л. Асимметрия влияний блуждающих нервов на функциональные показатели сердца крыс в постнатальном онтогенезе // Бюллет. экспер. биол. и мед. 2000.-Т. 130, №7.-С. 10-13.

56. Мойбенко А. А., Павлюченко В. Б., Даценко В. В., Майский В. А. Роль оксида азота в механизмах формирования рефлекторных вазомоторных реакциях // Успехи физиол. Наук. 2005. - № 4. - С. 3-14.

57. Морозова М. А. Роль нервных и гуморальных факторов в срочной регуляции р-адренореактивности миометрия человека и животных. -Киров, 2000.-280 с.

58. Морова Н. А., Федоров В. А. Динамика параметров левого желудочка после коррекции митрально-аортальных пороков сердца // Российский кардиологический журнал. 2003. - № 3. - С. 29-33.

59. Нигматуллина Р. Р., Земская С. Н., Зефиров А. Л., Смирнов А. В. Клеточно-молекулярные механизмы функционирования и регуляции сердца / учебно-методическое пособиедля мед ВУЗов и биологических факультетов Унив-в / Казань. 2004. 100 с.

60. Остроумова О. Д., Маринин В. Ф. Антагонисты рецепторов ангиотензина II / Клиническая фармакология / под ред. В.Г. Кукеса 4-ое изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 392-396.

61. Павлович Е. Р. Ультраструктура миокарда кролика в поздние сроки иммобилизационного стресса // Бюллетень эксп. биол. и мед. 2001. - Т. 132, №7.-С. 99-102.

62. Помаскин И. Н., Медведев Б. И., Циркин В. И., Захаров В. В. Эндогенный ß-адреномиметик как компонент ß-адренорецепторного ингибирующего механизма //Акушерство и гинекология. 1989. - № 6. - С. 23-27.

63. Покровский В. И., Сулейманов А. К., Лебедев В. В. Иммунореабилитирующее действие тимогексина при лечении больных хроническим бруцеллезом. // Тер. архив. 1992. №11. - С. 22-26.

64. Преображенский Д. В., Сидоренко Б. А., Дедлва И. С., Тарыкина Е. В. Блокаторы бета-адренорецепторов в лечении сердечно-сосудистых заболеваний: место карведилола // Кардиология. 2006. - № 12. - С. 6372.

65. Проказова Н. В., Звездина Н. Д., Коротаева А. Л Влияние лизофосфатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внутрь клетки. Обзор // Биохимия. 1998. - Т. 63, выпуск 1. - С. 38-46.

66. Покровский В.М., Осадчий O.E., Шейх-заде Ю.Р., Свиряев В.И., Васьковский Б. В., Зиганшин Р. X., Михалева И. И. Ваготропное действие пептидов, выделенных из мозга гибернирующих сусликов // Физиологический журн. СССР. 1992. - Т.78, №4. - С.26-31.

67. Расулов М. М., Ландо А. Н., Стамова Л. Г. Повышение эффективности лечения больных с инфарктом миокарда // Паллиатив, мед. и реабилитация. 2005. - № 4. - С. 36-38.

68. Реброва Т. Ю., Кондратьева Д. С., Афанасьев С. А., Барзах Е. И. Активность перекисного окисления липидов и функциональное состояние миокарда при ремоделировании сердца крыс после экспериментального инфаркта // Кардиология. 2007. - № 6. - С. 41-45.

69. Резник А. В., Федоров В. В., Розенштраух Л. В. Ионные каналы и токи в кардиомиоцитах // Кардиология. 2006. - Т. 2. - С. 4-18.

70. Реутов В. П., Охотин В. Е., Шуклин А. В., Сорокина Е. Г., Косицын Н. С., Турин В. Н. Оксид азота (N0) и цикл N0 в миокарде: молекулярные, биохимические и физиологические аспекты // Успехи физиол. Наук. -2007.-Т. 38,№4.-С. 39-58.

71. Розенштраух. М. Физиология и патофизиология сердца / пер. с анг. Розенштраух. М.: Медицина, 1990. Т. 2 - С. 125.

72. Рубцов А. М. Са-АТРаза саркоплазматического ретикулума: молекулярная органзация, механизм функционирования и особенности регуляции активности // Успехи биологической химии. 2005. - Т. 45. - С. 235-268.

73. Рудзит В. К. Диабетогенные метаболиты триптофана как причина сахарной болезни / В. К. Рудзит. Рига.: «Зинтане». - 1981 - 83 с.

74. Сазанов А. В. Влияние длительной экспозиции изолированного миометрия небеременных крыс в сыворотке крови беременных женщин наего сократительную активность и Р-адренореактивность // Российский физиол. журн. 2000. - №1. - С. 103-112.

75. Сазанова М. Л. Влияние сыворотки пуповинной крови человека нагладкие мышцы матки и сосудов пуповины / дисс.канд. биол. наук. 1. Киров, 2002.-180 с.

76. Самойлов В. О. Медицинская биофизика: Учебник / В. О. Самойлов. -СПб. Спец. Лит, 2004. 496 е.: ил.

77. Северин Е. С. Биохимия: учебник / под ред. Е.С. Северина. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. - 784 с.

78. Сергеев П. В., Шимановский Н. Л., Петров В. И. Рецепторы физиологически активных веществ: Монография. // Волгоград., изд-во «Семь ветров», 1999. 640 с.

79. Сизова Е. Н. Физиологическая характеристика эндогенного сенсибилизатора Р-адренорецепторов и других гуморальных компонентов (3-адренорецепторного ингибирующего механизма // Автореф. дис. канд. биол. наук. Москва, 1998. - 16 с.

80. Сизова Е. Н, Циркин В. И., Костяев А. А. Влияние озона на сократительную активность и хемореактивность продольной мускулатуры рога матки небеременных крыс // Российский физиологический журн. имени И.М. Сеченова, 2003. Т. 89, № 4. - С. 427-435.

81. Сизова Е. Н., Циркин В. И., Костяев А. А. Влияние озонированного раствора Кребса на тоническую активность и р-адренореактивность гладких мышц трахеи коровы // Успехи современного естествознания. -2003. № 6. - С.23-27.

82. Сизова Е. Н., Циркин В. И. Длительность проявления М-холиноблокирующей активности сыворотки крови человека в опытах смиометрием крысы //Современные наукоемкие технологии. 2004. - № 3. -С. 27-31.

83. Сизова Е. Н. Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинореактивности и их участие в регуляции деятельности различных систем организма человека и животных // Автореф. дисс. д.б.н. . М, 2005. - 32 с.

84. Сизова Е. Н., Циркин В. И. Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинореактивности. Киров, Изд-во ВСЭИ, 2006. - 183 с.

85. Сизова Е. Н., Циркин В. И., Туманова Т. В. Влияние пищевых аминокислот на сократительную способность, ß-адрено- и М-холинореактивность гладких мышц крыс // Вопросы питания. 2008. - Т. 77, №5.-С. 26-32.

86. Стародубцев А. К., Кузнецов А. Б. Антиаритмические лекарственные средства / Клиническая фармакология / под ред. В.Г. Кукеса 4-ое изд., перераб. И доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 411-440.

87. Суслова И. В., Коротаева А. А., Проказова Н. В. Изменение параметров равновесного связывания ЗН-хинуклидинилбензилата на мембранах предсердия кролика под действием лизофосфатидилхолина // Докл. РАН. 1995. Т. 342, № 2. - С. 273-276.

88. Сычев Д. А. Ингибиторы If каналов синусового узла / Клиническая фармакология: учеб. / под ред. В.Г. Кукеса. 4-ое изд., перераб. и доп. -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 396-398.

89. Тиц Н. Энциклопедия клинических лабораторных тестов. Перевод с англ. Москва: «Лабинформ», 1997. - 960 с.

90. Ткачук В. А., Авакян А. Э. Молекулярные механизмы сопряжения G-белков с мембранными рецепторами и системами вторичных посредников. // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2003. - Т. 89, № 12. - С 1478-1490.

91. Торкунов П. А., Сапронов Н. С., Новоселова Н. Ю. Фосфолипиды сердца в динамике экспериментального инфаркта миокарда у крыс. // Пат. физ. и эксп. терапия. 1997. - №2. - С. 21-23.

92. Торопов А. Л., Ноздрачев А. Д., Циркин В. И. Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора бета-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов // Вестник Санкт-Петербургского университета, Серия 3 (биология). 2011. - Вып. 1. - С. 27-42.

93. Трухин А. Н., Анисимова О. В. Влияние гистидина на ß-адрено-реактивность сердца лягушки //Мат. Всеросс. научн. конф., посвящ. 150-летию акад. И.П. Павлова. Изд-во СПбГМУ, 1999. - С. 303.

94. Трухин А. Н. Влияние эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинорецепторов на хемореактивность миометрия, миокарда и вариабельность сердечного ритма / дис. . канд. биол. наук. Киров, 2003.-287 с.

95. Трухин А. Н., Циркин В. И., Сизова Е. Н. Повышение ß-адренореактивности миокарда лягушки под влиянием гистидина // Бюлл. эксп. биол. и мед. 2004. - Т. 138, №8. - С. 144-131.

96. Туманова Т. В. Изучение природы эндогенного сенсибилизатора ß-адренорецепторов других факторов, регулирующих сократимость и адренореактивность гладкой мускулатуры: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Москва, 1998.

97. Туманова Т. В., Сизова Е. Н., Циркин В. И. Способность L-гистидина снижать десенситизацию миометрия к адреналину // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2004. - Т.138, №10. - С.364-367.

98. Турпаев Т. М., Путинцева Т. Г. Биохимический механизм саморегуляции холинергического медиаторного процесса // Усп. физиол. Наук. 1974. - Т. 5, № 1. - С. 17-47.

99. Хлыбова С. В., Циркин В. И., Дворянский С. А. Роль системы L-аргинин-оксид азота в регуляции висцеральных функций и обеспечении гестационного периода / С. В. Хлыбова, В. И. Циркин, С. А. Дворянский -2007.- 178 с.

100. Хушматов Ш. С., Салимов Б. Т., Усманов П. Б. Действие дитерпеноидного алкалоида дельфатина на Са2+ -транспортирующие системы кардиомиоцитов крысы // Доклады Академии наук Республики Узбекистан. Ташкент. - 2009. - № 2. - С. 58-61.

101. Хобот В. В., Горбаченков А. А. Благоприятный эффект триметазидина в постинфарктном периоде. Клиническое состояние, функция левого желудочка. // Кардиология. 2004. - Т. 44, № 11.- С. 28-33.

102. Циркин В. И., Дворянский С. А., Ноздрачев А. Д., Заугольников В. С., Сизова Е. Н. Повышение р-адренореактивности коронарных артерий под влиянием сыворотки крови // Доклады Академии наук. 1996. - Т. 351, №4.-С. 565-566.

103. Циркин В. И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. Адреномодулирующие эффекты крови ликвора, мочи, слюны и околоплодных вод человека // Докл. Академии наук. 1997. - Т. 352, № 1. - С. 124-126.

104. Циркин В.И., Дворянский С.А., Джергения С.Л. Адреномиметический эффект сыворотки крови человека и животных // Физиология человека. -1997.-Т. 23, № 3. С. 88-96.

105. Циркин В. И., Ноздрачев А. Д., Сазанова М. Л., Дворянский С. А., Хлыбова С. В. Утероактивные, р-адреномодулирующие и М-холиномодулирующие свойства сыворотки пуповинной крови человека. // Доклады РАН,- 2003. Т. 388, № 5. - С. 704-707.

106. Циркин В. И., Ноздрачев А. Д., Трухин А. Н., Сизова Е. Н. Влияние эндогенных модуляторов Р-адрено- и М-холинореактивности на вариабельность сердечного ритма // Доклады РАН. 2004. - Т. 394, №4. -С.562-565.

107. Цирин В. И., Демина Н. Д., Сизова Е. Н., Хлыбова С. В., Куншин А. А., Пенкина Ю. А., Кашин Р. Ю. Эндогенный активатор сократимости миоцитов и артериальная гипертензия // Вятский медицинский вестник. -2008.-№ 1.-С. 55-66.

108. Циркин В. И., Ноздрачев А. Д., Кашин Р. Ю. Модуляция эффективности активации а-адренорецуепторов гладких мышц почечной артерии коровы // Доклады РАН. 2009. - Т. 425, № 4. - С.-561-566.

109. Циркин В. И., Ноздрачев А. Д., Торопов A. JI. Эндогенный сенсибилизатор бета-адренорецепторов и его аналоги в опытах с миометрием крысы уменьшают бета-адреноблокирующий эффект обзидана // Доклады РАН. 2010. - Т. 435, № 1.-С. 131-137.

110. Чазов Е. И. Эмоциональные стрессы и сердечнососудистые заболевания // Вести. АМН СССР. 1975. - № 8. - С. 3-8.

111. Чучалин А. Г. Бронхиальная астма. М.: Изд-кий дом «Русский врач», 2001.-144с.

112. Шаленкова М. А., Алексеева О. П., Криштопенко С. В., Семенова А. К. Анализ совместного применения метопролола и триметазидина длялечения стабильной стенокардии на основе построения фукнции эффективности // Нижегор. мед. ж. 2005. - № 2. - С. 58-60.

113. Шушканова Е. Г. Механизмы регуляции адренореактивности миометрия человека и животных. Дисс. . канд. биол. наук. Киров. -1997.-244 с.

114. Яговкина Н. В. Адренореактивность тромбоцитов при физиологически протекающей и осложненной гестозом беременности. Киров, КГМА, 2006.-22 с.

115. Abe H. Distribution and function of histidine containing dipeptides // Докл. междунар. раб. совещ. по конформации биомкромолекул., Москва. -Нейрохимия. 1996. - №4. - С. 279-287.

116. Adams В. A., Tanabe Т., Mikami A., Numa S., Beam К. Intramembrane charge movement restored in dysgenic skeletal muscle by injection of dihydropyridine receptor cDNAs // Nature. 1990. - V. 346. - P. 569-572.

117. Ahmed A. Myocardial beta-1 adrenoceptor down-regulation in aging and heart failure: implication for beta-blocker use in older adults with heart failure // Eur J. Heart Fail. 2003. - V. 5. - P. 709-715.

118. Alves M., Oliveira P., Carvalho R. Mitochondrial preservation in celsior versus histidine buffer solution during cardiac ischemia and reperfusion.// Cardiovasc Toxicol. 2009. - V. 9, № 4. - P.185-193.

119. Arch J. Do low-affinity states of beta-adrenoceptors have roles in physiology and medicine? // Br. J Pharmacol. 2004. - V. 143, № 5. - P. 517-518.

120. Babenko A.P., Aguilar-Bryan L., Bryan J. A view of sur / KIR6.X, KATP channels // Ann. Rev. Physiol. 1999. - V. 60. - P. 667-687.

121. Babusikova E., Jesenak M., Racay P., Dobrota D., Kaplan P. Oxidative alternations in rat heart homogenate and mitochondria during ageing // Gen. Physiol. Biophys. 2008. - № 27. - P. 115-120.

122. Baselli E., Brandes S., Luthin G., Ruggeri M The effect of pregnancy and contractile activity on bladder muscarinic receptor subtypes // Neurourol. and Urodyn. 1999. - V.18, №5. - P.511-520.

123. Bers D.M. Cardiac excitation-contraction coupling. // Nature. 2002. - V. 415.-P. 198-205.

124. Bers D. M. Carddiac calcium channels, in cardiac electrophysiology: from cell to bedside // Eds. D. P. Ziper, J. Jalife. Philadelphia. 2004. - P. 10-18.

125. Bishop S. P., Drummond J. I. Surface morphology and cell size measurement of isolated rat cardiac myocytes. // J. molec. Cell. Cardiol. 1977. -V. 11.-P. 423-433.

126. Blunt B., Creek A., Henderson D.C., Hofmann P.A. H202 activation of HSP25/27 protects desmin from calpain proteolysis in rat ventricular myocytes. // Am J Physiol Heart Circ. Physiol. 2007. - V. 293, № 3. - P. 1518-1525.

127. Böhm M., Maack C. Treatment of heart failure with beta-blockers. Mechanisms and results // Basic Res Cardiol. 2000. V. 95. - P. 15-24.

128. Boyett M. R., Kodama I., Honjo H., Arai A., Suzuki R., Toyama J. Ionic basis of the chronotropic effect of acetylcholine on the rabbit sinoatrial node. // J. Cardiovasc. Res. 1995. - V. 29, № 6. - P. 867-878.

129. Bristow M., Hershberger R., Port J., Minobe W., Rasmussen R. pi-and P2-adrenergic receptor mediated adenylate cyclase stimulation in nonfailing and failing human ventricular myocardium // Mol. Pharmacol. 1989. - V. 35. - P. 295-303.

130. Brodde O., Bruck H., Leineweber K. Cardiac adrenoceptors: physiological and pathophysiological relevance // J. Pharmacol. Sci. 2006. - V. 100, № 5. -P. 323-337. .

131. Brodde O. Betal- and beta2-adrenoceptor polymorphisms and cardiovascular diseases. // Fundam. Clin. Pharmacol. 2008. - V. 22, № 2. - P. 107-125.

132. Canelo R., Hakim N., Ringe B. Experience with hystidine tryptophan ketoglutarate versus University Wisconsin preservation solutions in transplantation // Int Surg. 2003. - V. 88, № 3. - P. 145-151.

133. Catterall W.A. Structure and regulation of voltage-gated Ca2+-channels // Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 2000. - V. 16. - P. 521-555.

134. Chowdhary S., Nuttall S., Coote J., Townend J. L-arginine augments cardiac vagal control in healthy human subjects // Hypertension. 2002. - V. 39, № 1. -P. 51-56.

135. Chuang R., Jaffe H., Cribbs L., Perez-Reyes E., Swartz K. Inhibition of T-type voltage-gated calcium channels by a new scorpion toxin // Nature Neurosci. 1998. - V. 1. - P. 668-674.

136. Coleman B., Patel D., Carpentier R. Adrenergic-mediated effects of cocaine on force-frequency relationship // FASEB J. 1997. - V.l 1, №3. - P. 498.

137. Cox D., Cohen M. Selective enhancement of 5-hydroxytryptamine-induced contraction of porcine coronary artery by oxidized low-density lipoprotein. // J. Pharmacol Exp Ther. 1996. -V. 276, № 3. - P. 1095-1103.

138. Crover G., Garlid K. ATP-Sensitive potassium channels: a review of their cardioprotective pharmacology // J. Mol. Cell. Cardiol. 2000. - V. 32, № 4. -P. 677-695.

139. Damron D., Summers B. Arachidonic acid enhances contraction and intracellular Ca2+ transients in individual rat ventricular myocytes. // Am J. Physiol. 1997. - V. 272, № 1. - P. 350-359.

140. Dangel V., Giray J., Ratge D., Regulation of b-adrenoceptor density and mRNA levels in the rat heart cell-line H9c2 // Biochem. J. 1996. - №3. - P. 925-931.

141. De Bruin M. L., Pettersson M., Meyboom R. H., Hoes A.W., Leufkens H.G. Anti-HERG activity and the risk of drug-induced arrhythmias and sudden death. // Eur. Heart J. 2005. - V. 26. - P. 590-597.

142. Dean J., Lab M. J. Regional changes in ventricular excitability during load manipulation of the in situ pig heart. // J. Physiol. 1990. - V. 429. - P. 387400.

143. Degrace P., Demizieux L., Gresti J., Tsoko M., Andre A., Demaison L., Clouet P. Fatty acid oxidation and related gene expression in heart depleted ofcarnitine by mildronate treatment in the rat // Mol. and Cell Biochem. 2004-V. 258, № l.-P. 171-182.

144. Deng HF, Xiong Y. Effect of pravastatin on impaired endothelium-dependent relaxation induced by lysophosphatidylcholine in rat aorta. // Acta Pharmacol Sin. 2005. - V. 26, № 1. - P. 92-98.

145. DiFrancesco D., Ferroni A., Mazzanti M., Tromba C. Properties of the hyperpolarizing-activated current (if) in cells isolated from the rabbit sinoatrial node // J. Physiol. 1986. V. 377. - P. 61-88.

146. DiFrancesco D., Tromba C. Inhibition of the hyperprolarization-activated current (if) induced by acetylcholine in rabbit sinoatrial node myocytes // J. Physiol. 1988. -V. 405. P. 477-491.

147. DiFrancesco D. Serious working of the funny current // Prog. Biophys. Mol. Biol.-2005.-V. 90, № 1-3.-P. 13-25.

148. Du Y., Tang M., Liu C., Luo H., Hu X. Inhibitory effect of adrenomedullin on L-type calcium currents in guinea-pig ventricular myocytes // Shengli xuebao. 2002. - V.54, №6. - P.479-484.

149. Eckard L., Kirchhof P., Breithardt G., Haverkamp W. // Basic. Rec. Cardiol. -2001.-V. 96.-P. 368-380.

150. Endoh M., Cardiac ai-adrenoceptors that regulate contractile function: Subtypes and subcellular signal transduction mechanisms // Neurochem. Res. -1996. -№2. -P. 217-229.

151. Favero T., Zable A., Abramson J. Hydrogen peroxide stimulates the Ca2+ release channel from skeletal muscle sarcoplasmic reticulum. // J. Biol. Chem. -1995. -V. 27, № 43. P. 25557-25563.

152. Flucher B., Franzini-Armstrong C. Formation of junction involved in excitation-contraction coupling in skeletal and cardiac muscle // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93. - P. 8101-8106.

153. Fischmeister R., Vandecasteele G., Abi-Gerges N., Verde I., Eschenhagen T., Mery P. Muscarinic regulation of the heart: NO news is bad news // J. Physiol. Proc. 1998. - P.2-3.

154. Franz M.R., Cima R., Wang D., Profitt D., Kurz R. Electrophysiological effects of myocardial stretch and mechanical determinants of stretch-activated arrhythmias. // Circulatia. 1992. - V. 86, № 3. - P. 968-978.

155. Franz M., Bode F. Mechano-electrical feedback underlying arrhythmias: the atrial fibrillation case // Prog. Biophys. Mol. Biol. 2003. - V. 82, № 1-36. P. 163-174.

156. Fuchs B., Schiller J. Lysophospholipids: their generation, physiological role and detection. Are they important disease markers? // Mini Rev Med Chem. -2009. V. 9, № 3. - P. 368-378.

157. Galijasevic S., Abdulhamid I., Abu-Soud H. Potential role of tryptophan and chloride in the inhibition of human myeloperoxidase // Free Radic. Bio. Med. -2008. V. 44, № 8. - P. 1570-1577.

158. Gao T., Chien A., Hosey M. Complexes of the alpha 1 C and beta subunits generate the necessary signal for membrane targeting of class C L-type calcium channels // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274, № 4. - P. 2137-2144.

159. Gauthier C., Langin D., Balligand J. Beta3-adrenoceptors in the cardiovascular system. // Trends Pharmacol. Sci. 2000. - V. 21, № 11. - P. 426-431.

160. Gauthier C., Langin D., Balligand J. Beta3-adrenoceptors in the cardiovascular system. // Trends Pharmacol. Sci. 2000. - V. 21, № 11. - P. 426-431.

161. Garaves S., Seely E., Williams C. A purified, high affinity inhibitor of Na, K.-ATP-ase from human amniotic fluid causes vasoconstriction // Clin, and Exp. Hypertens. B. 1991. - V. 10, №1-2. - P. 166.

162. Germack R., Leon-Valerde F., Valdes De La Barra R., Farias J., Soto G., Richalet J.P. Effect of intermittent hypoxia on cardiovascular function, adrenoceptors and muscarinic receptors in Wistar rats. // Exp. Physiol. 2002. -V. 87, №4.-P. 453-460.

163. Gether U., Kobilka B. G-protein-coupled receptors. II. Mechanism of agonist activation//J. Biol. Chem. 1998. -V. 273. - P. 17979-17982.

164. Gordeev I., Liusov V., Il'ina E., Baiandin N., Kuznechevskiï F. Derangements of contractility of left ventricular myocardium in patients subjected to coronary bypass surgery. Methods of their correction // Kardiologiia. 2007. - V. 47, № 2. - P. 22-24.

165. Grigat S., Fork C., Bach M., Golz S., Geerts A., Schômig E., Griindemann D. The carnitine transporter SLC22A5 is not a general drug transporter, but it efficiently translocates mildronate. // Drug Metab Dispos. 2009. - V. 37, № 2. -P. 330-337.

166. Gu K., Kin S., Saitoh Y., Nosaka S., Sasaki T., Yamauchi M., Nakayama K. Cardioprotective effect of nicorandil in histidine-tryptophan-ketoglurate solution during the cold storage of isolated hearts // Transplantation. 1996. -V. 61,№ 11.-p. 1572-1575.

167. Pharmacology. Compendium of voltage-gated ion channels: potassium channels I I Pharmacol. Rev. 2003. - V. 55, № 4. - P. 583-586.

168. Han X., Shimoni Y., Giles W. A cellular mechanism for nitric oxidemediated cholinergic control of mammalian heart rate // J. Gen. Physiol. -1995. -№1. -P. 45-65.

169. Hashizume H., Hoque A., Magishi K., Hara A., Abico Y. A new approach to the development of anti-ischemic drugs. Substances that counteract the deleterious effect of lysophosphatidylcholine on the heart // Jpn. Heart. 1997. -V.38,№l.-P. 11-25.

170. Hasselbach, W., Makinose, M. ATP and active transport // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1962. - № 7. - P. 132-136.

171. Heady T., Gomora J., Macdonald T., Perez-Reyes E. Molecular pharmacology of T-type Ca -channels // Japanese J. Pharmacol. 2001. - V. 85.-P. 339-350.

172. Heidbuchel H., Vereecke J., Carmeliet E. Three different potassium channals in human atrium. Contribution to the basal potassium conductance // Circulat. Res. 1990. - V. 66, № 5. - P. 1277-1286.

173. Hille B. Ionic channels of excitable membranes // 3rd edn. Sunderland, MA: Sinauer. 2001. - 814 p.

174. Hirst G., Bramich N.J., Cousins H., Edwards F., Sympathetic neuro-effector transmission to pacemaker cells of the toad heart // J. Physiol. Proc. 1996. - P. 29-39.

175. Hoekstra R., Fekkes D., Loonen A.J., Pepplinkhuizen L., Tuinier S., Verhoeven W.M. Bipolar mania and plasma amino acids: increased levels of glycine // Eur. Neuropsychopharmacol. 2006. - V. 16, № l.P. 71-77.

176. Hofmann F., Lacinova L., Klugbauer N. Voltage-dependent calcium channels: frome structure to function // Rev. Physiol. Biohem. Pharmacol. 1999.-V. 139.-P. 33-87.

177. Hool L., Middleton L., Harvey R. Genistein increases the sensitivity of cardiac ion channels to p-adrenergic receptor stimulation // Circ. Res. 1998. -V.83, №1. - P. 33-42.

178. Hool L., Middleton L., Harvey R. Genistein increases the sensitivity of cardiac ion channels to P-adrenergic receptor stimulation // Circ. Res. 1998. -V.83, №1.-P. 33-42.

179. Horn N., Thomas A. The effect of copper on zinc uptake into human erythyrocytes // J. Physiol. Proc. 1997. - P. 26.

180. Horn N., Oakley F., Thomas A. Histidine stimulated metal uptake into human erythrocytes // J. Physiol. Proc. 1998. - P. 50-51.

181. Hu J., Huang Y., Song H., Zhang D., Xiang F., Zhu Z., Teng M., Zhang Q. Protective effects of Astragaloside and Quercetin on rat myocardial cells after hypoxia // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2007. V. 23, № 3. - P. 175-178.

182. Hussain M., Orchard C. Sarcoplasmic reticulum Ca2+ content, L-type Ca2+ current and the Ca2+ transient in rat myocytes during beta-adrenergic stimulation. // J. Physiol. 1997. - № 1. - P. 385-402.

183. Janvier N., Boyert M. The role of Na-Ca exchange current in the cardiac action potential // Cardiovasc. Res. 1996. - V. 32, № 1. - P. 69-84.

184. Jung S., Lee Y., Han S., Kim Y., Nam T., Ahn D. Lysophosphatidylcholine increases Ca current via activation of protein kinase C in rabbit portal vein smooth muscle cells.// Korean J. Physiol. Pharmacol. 2008. - V. 12, № 1. - P. 31-35.

185. Jurkat-Rott K., Lehmann-Horn F. The impact of splice isoforms on voltage-gated calcium channel alpha subunits // J. Physiol. 2004 - V. 554, № 2-4. - P. 609-619.

186. Kabarowski J. G2A and LPC: regulatory functions in immunity // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2009. - V. 89, № 3-4. - P. 73-81.

187. Kaibara M., Nakajima T., Irisawa H., Giles W. Regulation of spontaneous opening of muscarinic K+ channels in rabbit atrium // J. Physiol. 1991. - V. 433.-P. 589-613.

188. Kalsi K., Smolenski R., Pritchard R. Energetics and function of the failing human heart with dilated or hypertrophic cardiomyopathy. // Eur. J. Clin. Invest. 1999. - V. 29, № 6. - P. 469-477.

189. Kannankeril P. Goldberger J. Parasympathetic effects on cardiac electrophysiology during exercise and recovery. // Am. J. Physiol. HeartCirc. Physiol. 2002. - V. 282. - P. 2091-2098.

190. Kawaguchi T., Koehler R., Brusilow S., Traystman R., Pial arteriolar dilation to acetylcholine is inhibited by ammonia-induced increases in glutamine // FASEB Journal. 1997. - V. 11, №3. - P. 486.

191. Kikuta K., Sawamura T., Miwa S., Hashimoto N., Masaki T. High-affinity arginine transport of bovine aortic endothelial cells is impaired by ^phosphatidylcholine // Circ. Res. 1998. - V. 83, № 1. - P. 1088-1096.

192. Kim Y., Im Y., Ha N., Im D. Albumin inhibits cytotoxic activity of lysophosphatidylcholine by direct binding. // Prostaglandins Other Lipid Mediat. 2007. - V. 83, № 1-2. - P.130-138.

193. Kirchhof P., Fabritz C., Franz M. Postrepolarization refractoriness versus conduction slowing caused by class I antiarrhythmic drugs: antiarrhythmic and proarrhythmic effects. // Circulation. 1998. - V. 25. - P. 2567-2574.

194. Kissling G., Blickle B., Ross C., Pascht U., Gulbins E. alpha 1-adrenoceptor-mediated negative inotropy of adrenaline in rat myocardium // J. Physiol.- 1997.-V. 15,№499.-P. 195-205.

195. Korotaeva A., Cheglakov I. Prokazova N. Inhibitory effect of lysophosphatidylcholine and phospholipase A2-treated low density lipoproteins on receptor-dependent regulation of {Ca2+}i in platelets // Platelets. 1997. -V. 8, № 1. - P. 43-52.

196. Koumi S., Wasserstrom J. Acetylcholine sensitive muscarinic K+ channels in mammalian ventricular myocytes // Am. J. Physiol. - 1994. - V. 266, № 2. -P. 1812-1821.

197. Koumi S., Backer C., Arentzen C., Sato R. (3- Adrenergic modulation of the inwardly rectifying potassium channel in isolated human ventricular myocytes.

198. Alteration in channel response to beta-adrenergic stimulation in failing human hearts I I J. Clin. Invest. 1995. - V. 96, № 6. - P. 2870-2881.

199. Kurokawa J., Abriel H., Kass R. S. Molecular basis of the delated rectifier basis of lite delayed rectifier current I(ks)m heart // J. Mol. Cell. Cardiol. -2001. V. 33. - № 5. - P. 873-882.

200. Laflamme M., Becker P. Do P2-adrenergic receptors modulate Ca2+ in adult rat ventricular myocytes? // Amer. J. Physiol. 1998. - V. 274, №4. - P. 13081314.

201. Lambert I., Falktoft B. Lysophosphatidylcholine induces taurine release from HeLa cells. // J. Membr. Biol. 2000. - V. 176, №2. - P. 175-185.

202. Layland J., Kentish J. Effects of a- and P-adrenoceptor stimulation on the power-frequency relationship of isolated rat ventricular trabeculae // J. Physiol. Proc. 1997. - V.501. - P. 136-137.

203. Lee E., Chen H., Shepherd K., Lamango N., Soliman K., Charlton C. Inhibitory effects of lysophosphatidylcholine on the dopaminergic system. // Neurochem Res. 2004. -V. 29, № 7. P. 1333-1342.

204. Lee S., Schwinger R., Brixius K. Genetically changed mice with chronic deficiency or overexpression of the beta-adrenoceptors-what can we learn for the therapy of heart failure? // Pflugers Arch. 2008. - V. 455, № 5. - P. 767774.

205. Lieberman H. Nutrition, brain function and cognitive performance // Appetite. 2003. - V. 40, № 3. - P. 245-254.

206. Li S., Zhao G., LI J., Qian W. Effect of histidine on myocardial mitochondria and platelet aggregation during thrombotic cerebral ischemia in rats // Zhongguo yaoli xuebao. 1998. - №5. - P. 493-496.

207. Liao P., Wang S., Wang S., Zheng M., Zheng M., Zhang S., Cheng H., Wang Y., Xiao R. p38 mitogen-activated protein kinase mediates a negative inotropic effect in cardiac myocytes // Circ. Res. 2002. - V. 90, № 2. - P. 190196.

208. Limas C. Autoimmunity in dilated cardiomiopathy and the major histocompatibility complex // Intern. J. Cardiol. 1996. - V. 54. - P. 113-116.

209. Linke A., Li W., Huang H., Wang Z., Hintze T. Role of cardiac eNOS expression during pregnancy in the coupling of myocardial oxygen consumption to cardiac work // Amer. J. Plysiol. 2002. - V. 283, № 3. - P. H. 1208-H. 1214.

210. Lum H., Qiao J., Walter R., Huang F., Subbaiah P., Kim K., Holian O. Inflammatory stress increases receptor for lysophosphatidylcholine in human microvascular endothelial cells. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2003. -V. 285,№4.-P. 1786-1789.

211. Maack C., Cremers B., Flesch M., Hoper A., Siidkamp M., Bohm M. Different intrinsic activities of bucindolol, carvedilol and metoprolol in human failing myocardium // Br. J. Pharmacol. 2000. - V. 130, № 5. - P. 1131-1139.

212. MacMahon N. Cauman S. Effects of ACE inhibitors, calcium antagonists, and other blood pressure lowering drugs: results of prospectively designed overviews of randomized trials. BPLTCT // Lancet. 2004. - V. 345. - P. 1076-1078.

213. Magnusson Y., Wallukat G., Waagstein F., Hjalmarson A, Hoebeke J. Autoimmunity in idiopathic dilated cardiomyopathy // Circulation. 1994. - V. 89.-P. 2760-2767.

214. Mamas M., Terrar D. Inotropic actions of protein kinase C activation by phorbol dibutyrate in guinea-pig isolated ventricular myocytes // Exp. Physiol. 2001. - V.86, №5. - P. 561-570.

215. Matsumoto T., Kobayashi T., Kamata K. Role of lysophosphatidylcholine (LPC) in atherosclerosis. // Curr. Med. Chem. 2007. - V. 14, № 30. - P. 3209-3220.

216. Meghji P. Nazir S.A., Dick D., Bailey M., Johnson K., Lab M. Regional workload induced changes in electrophysiology and immediate early gene expression in intact in situ porcine heart // J. Mol. Cell. Cardiol. 1997. - V. 29, № 11.-P. 3147-3155.

217. Murphy S., Chung-Landers M., Honczarenko M., Gaulton G. Linkage of reduced receptor affinity and superinfection to pathogenesis of TR1.3 murine leukemia virus // J. Virol. 2006. - V. 80, № 9. - P. 4601-4609.

218. Musialek P., Paterson D., Casadei B. The chronotropic response to nitric oxide in the isolated guinea-pig atria is not affectd by p-adrenergic blockade // J. Physiol. Proc. 1997. - V. 504. - P. 83.

219. Nagashima M., Hattori Y., Tohse N., Kanno M. ar Adrenoceptor subtype involved in the positive and negative inotropic responses to phenylephrine in rat papillary muscle // Gen. Pharmacol. 1997. - №5. - P. 721-725.

220. Nagykaldi Z., Kem D., Lazzara R., Szabo B. Canine ventricular myocyte beta2-adrenoceptors are not functionally coupled to L-type calcium current // J. Cardiovasc Electrophysiol. 1999. - V. 10, № 9. - P. 1240-1251.

221. Nair L., Grant A. Emerging class III antiarrythmic agents: mechanism of action and proarrythmic potential // Cardiovasc Drugs Ther. 1997. - V. 11, № 2.-P. 149-167.

222. Nattel S., Maguy A., Le /Bouter S., Yeh Y. Arrhythmogenic ion-chnnel remodeling in the heart: heart failure, myocardial infarction, and atrial fibrillation // Physiol. KyMio 2007. - V. 87. - P. 425-456.

223. Nerbonne J. Molecular basis of functional voltage-gated K+ channel diversity in the mammalian myocardium // J. Physiol. 2000. - V. 525, № 2. -P. 285-298.

224. Nichols C., Lederer W. The mechanism of KATP channel inhibition by ATP // J. Gen. Physiol. 1991. - V. 97, № 5. - P. 1095-1098.

225. Niemeyer M. Cid L., Pena-Munzenmayer G., Sepulveda F. Separate gating mechanisms mediate the regulation of K2P potassium channel TASK-2 by intra- and extracellular pH. // J. Biol. Chem. 2010. - V. 285, № 22. - P. 16467-16475.

226. Oudit G., Kassiri Z., Sah R., Ramirez R., Zobel C., Backx P. The molecular physiology of the cardiac transient outward potassium current (I(to)) in normal and diseased myocardium // J. Mol. Cell. Cardiol. 2001. - V. 33, № 5. - P. 851-872.

227. O'Neill S., Perez M., Hammond K., Sheader E., Negretti N. Direct and indirect modulation of rat cardiac sarcoplasmic reticulum function by n-3 polyunsaturated fatty acids // J. Physiol. 2002. - V. 538, №1. - P. 179-184.

228. Patel A., Lazdunski M., Honore E. Lipid and mechano-gated 2P domain K(+) channels // Curr Opion Cell. Biol. 2001. - V. 13, № 4. - P. 422-428.

229. Peeters E., Neyt A., Henot D., Geers R. Effect of supplemental magnesium, tryptophan, vitamin C and vitamin E on pigs' stress responses to vibration // Commun Agric Appl Biol Sci. 2004. - V. 69, № 2. - P. 215-218.

230. Petrenko Iu., Titov V., Vladimirov I. Metabolites of tetracycline obtained during its irradiation with visible light peroxidase oxidation. Their toxic properties in relation to hemoglobin //Antibiot. Khimioter. 1995. - № 7. - P. 8-14.

231. Phillips S., Dacey D., Bove A., Conger A. Quantitative date on the shape of the mammalian ventricular heart cell. // Fed. Proc. 1977. - V. 36. - P. 601.

232. Provan W., Eyton-Jones H., Lappin G., Pritchard D., Moore R., Green T. The incorporation of radiolabeled sulphur from captan into protein and its impact on a DNA binding study // Chem Biol Interact. 1995. - V. 96, № 2. -P.173-184.

233. Pupure J., Isajevs S., Skapare E., Rumaks J., Svirskis S., Svirina D., Kalvinsh I., Klusa V. Neuroprotective properties of mildronate, a mitochondria-targeted small molecule // Neurosci. Lett. 2010. - V. 12, № 2. - P. 100-105.

234. Qin D., Takano M., Noma A. Kinetics of ATP-sensitive K+ channel revealed with oil-gate concentration jump method // Am. J. Physiol. 1989. - V. 257, № 5.-P. 1624-1633.

235. Reuter H., Cachelin A., dePeyer J., Kokubin S. Modulation of calcium channels in cultured cardiac cells by isoproterenol and 8-bromo-cAMP // Cold Springs Harbor Symp. Quant. Biol. 1983. - V. 48. - P. 193-200.

236. Rials S., Xu X., Wu Y., Liu T., Marinchack R., Kowey P. Restoration of normal ventricular electrophysiology in renovascular hypertensive rabbits after treatment with losartan // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2001. - V. 37, № 3. - P. 317-323.

237. Riemann B., Schefers M., Law M., Wichter T., Schober O. Radioligands for imaging myocardial alpha- and beta-adrenoceptors // Nuklearmedizin. 2003. -V. 42, № l.-P. 4-9.

238. Rockman H., Koch W., Lefkowitz R. Seven-transmembrane-spanning receptors and heart function // Nature 2002. - V. 415, № 6868. - P. 206-212.

239. Rohacs T., Chen J., Prestwich G., Logothetis D. Distinct specificities of inwardly rectifying K (+) channels for phosphoinositides // J. Biol. Chem. -1999. V. 274, № 51. - P. 36065-36072.

240. Rudy Y. Molecular Basis of Cardiac Action Potential repolarization // NY Acad. Sci. -2008. -№ 1123.-P. 113-118.

241. Samb A., Taille C., Almolki A., Megret J., Staddon J.M., Aubier M., Boczkowski J. Heme oxygenase modulates oxidant-signaled airway smooth muscle contractility: Role of bilirubin // Amer. J. Physiol. 2002. - V. 283, №3.-P. 596-603.

242. Sanguinetti M. Jurkiewiez N. Delayed rectifier outward K+ current is composed of two currents in guinea pig atrial cells // Am. J. Physiol. 1991. -V. 260, №2.-P. 393-399.

243. Sanguinetti M., Mitcheson J. Predicting drug-hERG channel interaction that cause acquired long QT syndrome // Trends. Pharmacol. Sci. 2005. - V. 26. -P. 119-124.

244. Sato R., Koumi S. Modulation of the inwardly rectying K+ channel in isolated human atrial myocytes by alpha 1-adrenergic stimulation // J. Membr. Biol.- 1995.-V. 148, №. 2.-P. 185-191.

245. Scharam G., Pourrier M., Melnyk P., Nattel S. Differential distribution of cardiac ion channel exspression as a basis for reginal specialization in electrical function // Circular Res. 2002. - V. 90, № 9. - P. 939-950.

246. Schmiedl A., Bach F., Fehrenbach H., Schnabel P., Richter J. Cellular distribution patterns of lanthanum and morphometry of rat hearts exposed to different degrees of ischemic stress // Anat. Rec. 1995. - V. 243, № 4. - P. 496-508.

247. Schnabel P., Maack C., Mies F., Tyroller S., Scheer A., Bohm M. Binding properties of beta-blockers at recombinant betal-, beta2-, and beta3-adrenoceptors. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2000. - V. 36, № 4. - P. 466-471.

248. Schneider M., Proebstle T., Hombach V., Hannekum A., Rubel R. Characterization of the sodium currents in isolated human cardiocytes // Pflugers Arch. 1994. - V. 428, № 1. - P. 84-90.

249. Scott G., Jacobs S., Pentland A. sPLA2-X stimulates cutaneous melanocyte dendricity and pigmentation through a lysophosphatidylcholine-dependent mechanism. //J. Invest. Dermatol. 2006. - V. 126, № 4. - P. 855-861.

250. Sesti C., Simkhovich B., Kalvinsh I., Kloner R. Mildronate, a novel fatty acid oxidation inhibitor and antianginal agent, reduces myocardial infarct size without affecting hemodynamics. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2006. - V. 47, № 3. - P. 493-499.

251. Shadyro O., Kisel R., Vysotskii V., Edimecheva I. Effects of vitamins, coenzymes and amino acids on reactions of homolytic cleavage of the O-glycoside bond in carbohydrates. // Bioorg Med Chem Lett. 2006. - V.16, № 18.-P. 4763-4766.

252. Shah A. Cohen I., Datyner N. Background K+ current in isolated canine cardiac Purkinje myocytes // Biophys. J. 1987. - V. 52, № 4. - P. 519-525.

253. Shibata Т., Ikomi F., Ohhashi T. Plasma-mediated potentiation in prostanoid-induced contractions in isolated canine external jugular veins. // Jpn J. Physiol. 2002. - V. 52, № 5. - P. 441-448.

254. Shimoni Y. Clard R., Giles W. Role of an inwardly rectifying potassium current in rabbit ventricular action potential // J. Physiol. 1992. - V. 448. - P. 709-727.

255. Simmerman H., Jones L. Phospholamban: protein structure, mechanism of action, and role in cardiac function. // Phys. Rev. 1998, № 78. - P. 921-947.

256. Singh K., Xiao L., Remondino A., Sawyer D., Colucci W. Adrenergic regulation of cardiac myocyte apoptosis // J. Cell. Physiol. 2001. - V.189, №3. - P. 257-265.

257. Sjostrand F., Anderson-Cedergren E., Dewey M. The uitrastructure of the intercalated discs of frog, mouse and guinea pig cardiac muscle // J. Ultrastruct. Res.- 1958.-V. l.-P. 271-287.

258. Swietach P., Camelliti P., Hulikova A., Kohl P., Vaughan-Jones R. Spatial regulation of intracellular pH in multicellular strands of neonatal rat cardiomyocytes // Cardiovasc. Res. 2010. V. 85, № 4. - P. 729-738.

259. Takayama M., Yao K., Wada M. The dihydropyridine calcium channel blocker benidipine prevents lysophosphatidylcholine-induced endothelial dysfunction in rat aorta. // J. Biomed Sci. 2009. - V. 26. - P. 16-57.

260. Takenouchi Т., Sato M., Kitani H. Lysophosphatidylcholine potentiates Ca2+ influx, pore formation and p44/42 MAP kinase phosphorylation mediatedby P2X7 receptor activation in mouse microglial cells. // J. Neurochem. 2007. -V. 102, №5.-P. 1518-1532.

261. Ten Eick R., Nawrath H., McDonald T., Trautwein W. On the mechanism of the negative inotropic effect of acetylcholine // Pflugers Arch. 1976. - V. 361. -P. 207-213.

262. Terzic A., Jahangir A., Kurachi Y. Cardac ATP-sensitive K+ channels: regulation by tracellular nucleotides and K+ channel-opening drugs // Am. J. Physiol. 1995. - V. 3. - P. 525-545.

263. Thiebot H., Duchatelle-Gourdon I., Regulation des canaux potassiques muscariniques // C. r. seances Soc. Biol. 1996. - № 2-3. - P. 237-241.

264. Tseng G. N. I(Kr): the hERG channel // J. Mol. Cell. Cardiol. 2001. - V. 33, №5.-P. 835-849.

265. Van Gelderen J., Daeffler L., Scherrer D., Mousli M., Landry Y., Gies J. M2-muscarinic receptors: how does ligand binding affinity relate to intrinsic activity? // J Recept Signal Transd. Res. 1996. - V. 16, № 1-2. - P. 135-148.

266. Vulcu S., Wegener J., Nawrath H. Differences in the nitric oxide/soluble guanylyl cyclase signalling pathway in the myocardium of neonatal and adult rats // Eur. J. Pharmacol. 2000. - V. 406, №2. - P. 247-255.

267. Vilskersts R., Liepinsh E., Kuka J., Cirule H., Veveris M., Kalvinsh I., Dambrova M. Myocardial infarct size-limiting and anti-arrhythmic effects ofmildronate orotate in the rat heart // Cardiovasc. Drugs. Ther. 2009. - V. 23, №4. -P. 281-288.

268. Vilskersts R., Liepinsh E., Mateuszuk L., Grinberga S., Kalvinsh, Chlopicki S. Mildronate, a regulator of energy metabolism, reduces atherosclerosis in apoE/LDLR-/- mice. // Pharmacology. 2009. - V. 83, № 5. - P. 287-293.

269. Wang Z., Yue L., White M., Pelletier G., Nattel S. Differential distribution of inward rectifier potassium channel transcripts in human atrium versus ventricle // Circulation. 1998. - V. 98, № 22. - P. 2422-2428.

270. Wang H., Zeng S.-J., Qiu P.-X. Development of muscarinic m3 and m4 receptor antibodies with pharmacological activities // Zhongguo yaoli xuebao-1998. V.19, №6. - P.523-526.

271. Wang Z., Feng J, Shi H, Pond A, Nerbonne JM, Nattel S. Potential molecular basis of different physiological properties of the transient outward K+ current in rabbit and human atrial myocytes // Circulat. Res. 1999. - V. 84.-P. 551-561.

272. Watanabe A., Lindemann J., Fleming J. Mechanisms of muscarinic modulation of protein phosphorylation in intact ventricles // Fed Proc. 1984. -V. 43, № 11.-P. 2618-2623.

273. Watts J., Ford M., Leonova E. Iron-mediated cardiotoxicity develops independently of extracellular hydroxyl radicals in isolated rat hearts // J. Toxicol. Clin. Toxicol. 1999. - № 1. - P. 19-28.

274. Wischmeyer E., Karschin A. Receptor stimulation causes slow inhibition of IRK 1 inwardly rectifying K+ channels by direct protein kinase A-mediated phosphorylation // Proc. Natl. Acad Sci USA. 1996. - V. 93, № 12. - P. 58195823.

275. Wood N., Ganguly P., Neuropeptide Y prevents agonist-stimulated increases in contractility // Hypertension. 1995. - №3. - P. 480-484.

276. Xu Q., Dong E., Chen K., Han Q. Ингибиторный бета-адренергический рецептор в сердце // Zhongguo bingli shengli zazhi. 2002. - V. 18, № 12. -P. 1544.1547.

277. Yamamoto Sh., Miyamoto A., Kawana Sh., Namiki A., Ohshika H. Role of nitric oxide production through M2-cholinergic receptors in cultured rat ventricular myocytes // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1998. - V. 245, №3.-P. 791-795.

278. Yatzidis H. Oral supplement of six selective amino acids arrest progression renal failure in uremic patients / Int Urol Nephrol. 2004. - V. 36, № 4. - P. 591-598.

279. Ye F., Deng P., Li D., Luo D., Li N., Deng S., Deng H., Li Y. Involvement of endothelial cell-derived CGRP in heat stress-induced protection of endothelial function. // Vascul Pharmacol. 2007. - V. 46, № 4. - P. 238-246.

280. Yoshimatsu H., Tsuda K., Niijima A., Tatsukawa M., Chiba S., Sakata Т. Histidine induces lipolysis through sympathetic nerve in white adipose tissue. // Eur J. Clin. Invest. 2002. - V. 32, № 4. - P. 236-241.

281. Young S., Rey O., Sternini C., Rozengurt E. Amino acid sensing by enteroendocrine STC-1 cells: role of the Na+-coupled neutral amino acid transporter 2 // Am J. Physiol Cell. Physiol. 2011. - V. 298, № 6. - P. 14011413.

282. Zenteno-Savin Т., Sada-Ovalle I., Ceballos G., Rubio R. Effects of arginine vasopressin in the heart are mediated by specific intravascular endothelial receptors // Eur. J. Pharmacol. 2000. - V. 20, № 410, № 1. - P. 15-23.

283. Zhang J., Wu Y., Williams В., Rodney G., Mandel F., Strasburg G., Hamilton S. Oxidation of the skeletal muscle Ca2+ release channel alters calmodulin binding // Am. J. Physiol. 1999. - V. 276, № 1. - P. 46-53.

284. Zhang L., Rui Y. Ch., Chu Z. Влияние пробукола и других средств на вызываемую лизофосфатидилхолином вазоконстрикцию базилярной артерии быка in vitro. // Di-er junyi daxue xuebao. 2000. - № 3. - P. 257259.

285. Zhang H., Holden A., Noble D., Boyett M. Analysis of the chronotropic affect of acetylcholine on sinoatrial node cells // J. Cardiovasc. Electrophysiol. 2002. - V. 13, № 5. - P. 465-474

286. Zvezdina N., Prokazova N., Vaver V., Bergelson L, Turpaev T. Effect of lysolecithin and lecithin of blood serum on the sensitivity of heart to acetylcholine//Biochem. Pharm.- 1978.-V. 27, № 10.-P. 2793-2801.

287. Zygmunt A. Intracellular calcium activates a chloride current in canine ventricular myocytes // Am. J. Physiolo. 1994. - V. 267, № 5. - P. 19841995.

Информация о работе

Коротаева, Карина Николаевна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Влияние сыворотки крови и некоторых ее компонентов на сократимость и адрено- и холинореактивность изолированного миокарда человека и крысы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы