Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс

Торопов, Алексей Леонидович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс"

ТОРОПОВ Алексей Леонидович

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ ЭНДОГЕННОГО СЕНСИБИЛИЗАТОРА р-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ (ЭСБАР) И ЕГО АНАЛОГОВ В ОПЫТАХ С МИОМЕТРИЕМ КРЫС

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 4 АП Р ?011

Нижний Новгород - 2011

4843892

Работа выполнена на кафедре биологии Вятского государственного гуманитарного университета.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Циркин Виктор Иванович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Смирнов Владимир Павлович доктор биологических наук, Сизова Елена Николаевна

Ведущая организация: ГОУ ВПО Российский государственный

медицинский университет

Защита диссертации состоится «¿^ » »някл. 2011 года в /3 часов на заседании диссертационного совета Д 2(2.166.15 Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского по адресу: 603950 Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 23, корп. 1, биологический факультет. Факс: (8312) 465-82-92

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского» по адресу: 603950, г. Нижний Новгород, ул. Гагарина, 23, корп. 1.

Автореферат разослан « » сма^тъ. 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат биологических наук, ^ ^^

доцент С. В. Копылова

Актуальность темы. Ранее (Циркин В. И. и соавт., 1997, 200В; Цир-кинВ. И., Дворянский С. А., 1997; Мальчикова С. В. и соавт., 2003; Тру-хин А. Н. и соавт., 2004; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006; Хлыбова С. В., 2007; ПенкинаЮ. А. и соавт., 2008; Демина H.JI. и соавт., 2008) была установлена способность 100-, 500- и 1000-кратных разведений сыворотки крови человека повышать эффективность активации Р-АР миоцитов матки крысы, трахеи коровы, коронарной артерии свиньи, а также миокарда лягушки и крысы. Это объяснялось наличием в крови эндогенного сенсибилизатора р-АР (ЭСБАР). Подобную Р-адреносенсибилизирующую активность проявляют гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал (Циркин В. И., Дворянский С. А., 1997; Ноздрачев и соавт., 1998; Туманова Т. В., 1998; Сизова Е. Н„ Циркин В. И., 2006; Пенкина Ю. А. и соавт., 2008). Эти вещества были названы аналогами ЭСБАР и стали использоваться для изучения механизма действия и физиологической роли ЭСБАР. В частности, при этом в опытах с миометрием крысы было показано (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006), что ЭСБАР и его аналоги проявляют Р-адреносенсибилизирующую активность на фоне спонтанной СА и на фоне СА, вызванной ГРК, а также окситоцином или простагландином F2„. Эта активность у сыворотки проявляется еще 20-80 минут после ее удаления из среды. Показано, что сыворотка крови, т. е. ЭСБАР, и аналоги ЭСБАР восстанавливают эффективность активации р-АР миоцитов матки, трахеи и сосудов, сниженную озоном (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006), или р-АР кардиомиоци-тов лягушки и крысы, сниженную лизофосфатидилхолином (ЛФХ), который является естественным метаболитом клеток (Пенкина Ю. А. и соавт., 2008). Эти данные позволили предположить, что механизм действия ЭСБАР и его аналогов связан с их способностью восстанавливать конформационную структуру белков, участвующих в передачи сигнала от рецептора в клетку, в том числе а-субъединицы G-белка, а ЭСБАР и его аналоги предложено рассматривать как разновидность шаперонов (Пенкина Ю. А. и соавт., 2008). Таким образом, для понимания механизма действия ЭСБАР и его аналогов большой интерес могут представлять данные о их способности восстанавливать эффективность активации Р-АР, сниженную любыми воздействиями, в том числе озоном, ЛФХ, гипотонической средой, классическими конкурентными p-адреноблокаторами, а также длительным воздействием агонистов Р-АР, при котором, как известно (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006), развивается десенситизация Р-АР за счет их фосфорилирования специфической киназой р-АР. Однако до настоящего времени эти данные либо отсутствуют (в отношении миометрия крысы это касается эффектов ЭСБАР и его аналогов при действии p-адреноблокаторов или ЛФХ, а также в условиях осмотического шока), либо они единичны — это, например, касается способности ЭСБАР и его аналогов влиять на процессы де-í сенситизации (Туманова Т. В. и соавт., 2004; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006). Не исследовался и вопрос о способности аналогов ЭСБАР проявлять свой эф-"^ фект на фоне сыворотки крови, в том числе при наличии в ней ЭСБАР. Вместе с тем, изучение всех этих вопросов помимо теоретического значения имеет и практическую направленность, так как уже в первых исследованиях, в которых была выявлена способность гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и

предуктала проявлять Р-адреносенсибилизирующую активность (Циркин В. И. и соавт., 1997, 2008; Циркин В. И., Дворянский С. А., 1997; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006; ХлыбоваС. В., 2007; ПенкинаЮ. А. и соавт., 2008), был поставлен вопрос о возможности их применения в клинике, например, для лечения угрозы преждевременных родов или бронхиальной астмы. В последние годы стало известно, что во многих клетках организма имеются белки - аквапо-рины, с участием которых вода переходит через поверхностную мембрану. (Agre Р., 2004; Титовец Э. П., 2007; Yukutake Y. et al., 2008). При этом в литературе был поставлен вопрос о возможности ряда гормонов и БАВ (подобно антидиуретическому гормону) влиять на процесс встраивания аквапоринов в мембрану клетки (Ishikawa Y. et al. 1998; Marinelli R. et al., 1999; Yasui H. et al., 2008; Sonalker P. et al., 2008). Мы предположили, что адреналин может влиять на этот процесс, а гистидин и другие аналоги ЭСБАР, в силу своих свойств, вероятно, должны повышать эффективность влияния адреналина на этот процесс.

Поддерживая представление ряда авторов о том, что ЭСБАР может играть важную физиологическую роль как регулятор эффективности взаимодействия катехоламинов как гормонов и медиаторов с Р-адренорецепторами, мы считали возможным продолжить изучение механизма действия ЭСБАР и его аналогов, и тем самым углубить представление о возможной физиологической роли этого вещества.

Цель исследования. В опытах с изолированным миометрием крысы изучить механизмы, лежащие в основе Р-адреносенсибилизирующей активности сыворотки крови (как источника ЭСБАР) и его аналогов (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната, предуктала).

В работе были поставлены следующие задачи:

1. Изучить зависимость релаксирующего влияния адреналина на тоническую активность продольных полосок рога матки небеременных крыс от его концентрации в среде и наличия в ней р-адреноблокаторов.

2. Исследовать способность сыворотки крови небеременных женщин (как источника ЭСБАР) и его аналогов противодействовать влиянию Р-адреноблокаторов на релаксирующий эффект адреналина на фоне тонической активности миометрия крыс.

3. Изучить влияние сыворотки крови человека на проявление р-адрено-сенсибилизирующей активности аналогов ЭСБАР в опытах с миометрием крыс.

4. Изучить способность гистидина противодействовать развитию десен-ситизации, развивающейся при воздействии адреналина на миометрий крыс в условиях его спонтанной сократительной активности.

5. Исследовать влияние лизофосфатидилхолина (ЛФХ) и куриного яичного желтка (как источника ЛФХ) на сократительные эффекты адреналина и аце-тилхолина.

6. Изучить влияние адреналина на транспорт воды в миометрии крысы и возможность гистидина модулировать это влияние.

Положения, выносимые на защиту.

1. ЭСБАР, содержащийся в сыворотке крови человека, и его аналоги -гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал восстанавливают эффек-4

тивность активации р2-АР миометрия крысы, сниженную (3-адреноблокаторами, а также (судя по эффекту гистидина) сниженную лизофосфатидилхолином (ЛФХ) или десенситизацией.

2. Сыворотка крови человека не препятствует способности аналогов ЭСБАР усиливать релаксирующее действие адреналина как агониста р2-АР миометрия крысы

3. ЭСБАР и его аналоги предлагается рассматривать в качестве факторов, повышающих сродство р2-АР к агонисту, и как внеклеточные и внутриклеточные шапероны, увеличивающие эффективность передачи сигнала от р2-АР внутрь клетки. Это указывает на перспективность применения аналогов ЭСБАР в клинической практике как антагонистов р2-адреноблокаторов, как пролонга-торов действия р2-адреномиметиков и как экзогенных шаперонов, восстанавливающих эффективность активации Р2-АР

Новизна исследования. В опытах с миометрием небеременных крыс подтверждена способность адреналина вызывать дозозависимый и обратимый релаксирующий эффект и впервые показано, что в условиях калиевой контрактуры этот эффект реализуется только за счет активации р2-АР. Подтверждена способность разведений сыворотки крови небеременных женщин (за счет наличия в ней ЭСБАР), а также гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала как аналогов ЭСБАР усиливать релаксирующий эффект адреналина. Впервые детально изучено проявление этого свойства в условиях тонуса, вызванного ГРК. Впервые установлена способность сыворотки крови как источника ЭСБАР и аналогов ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) препятствовать эффекту Р-адреноблокаторов (обзидана), что удалось продемонстрировать на миометрии в условиях тонуса, вызванного ГРК. Впервые показана способность аналогов ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) проявлять Р-адреносенсибилизирующую активность на фоне сыворотки крови (как источника ЭСБАР). Тем самым доказано, что сыворотка крови не препятствует проявлению р-адреносенсибилизи-рующей активности аналогов ЭСБАР. Подтверждена способность гистидина (как представителя аналогов ЭСБАР) препятствовать развитию десенситизации Р-АР. Впервые это удалось продемонстрировать в условиях многократного кратковременного воздействия адреналина на спонтанно активный миометрий крысы. Впервые выявлена способность лизофосфатидилхолина (ЛФХ) и яичного желтка как источника ЛФХ снижать эффективность активации р2-АР миометрия крысы и впервые показана возможность ее восстановления под влиянием гистидина. Впервые установлено, что способность ЛФХ снижать эффективность активации передачи сигнала в отношении М-холинорецепторов миометрия крысы выражена в меньшей степени, чем в отношении р-АР. Тем самым впервые выявлена относительная специфичность хемоблокирующего действия ЛФХ. Новым является и обнаружение способности гистидина усиливать релаксирующее влияние адреналина на вход воды в миоциты матки крысы, которое, как впервые показано в данной работе, обусловлено активацией р2-АР. Результаты работы позволили сформулировать принципиально важное положение о том, что в основе механизма действия ЭСБАР и его аналогов (гистидина, трип-

тофана, тирозина, милдроната и предуктала) лежит их способность повышать сродство р2-АР к агонисту, а также способность репарировать повреждения, возникающие в процессе функционирования клеток, в том числе за счет восстановления конформационной структуры G-белка и/ или других посредников, участвующих в передачи сигнала от рецепторов внутрь клетки, следствием чего является рост эффективности этой передачи.

Научная значимость работы. Результаты исследования расширяют представление о механизме действия ЭСБАР и его аналогов, а также дают новые доказательства физиологической роли ЭСБАР. В частности, углублено представление об ЭСБАР и его аналогах, как факторах, повышающих эффективность активации метаботропных р2-АР за счет увеличения сродства этих рецепторов к агонисту, а также как факторах, препятствующих действию Р- адре-ноблокаторов. Результаты исследования расширяют представление о ЛФХ как модуляторе р2-адрено- и М-холинорецепторов.

Практическая значимость работы. Получены доказательства возможности клинического применения аналогов ЭСБАР (в том числе путем внутривенного их ведения) с целью повышения эффективности активации Р-АР у пациентов с дефицитом адренергических воздействий и снижения десенситиза-ции в отношении вводимых в организм Р-адреномиметиков (например, при бронхиальной астме), а также в качестве антагонистов p-адреноблокаторов при их избыточном введении пациентам. Для диетологии важным является положение о том, что естественные компоненты пищи - гистидин, триптофан и тирозин после их приема могут оказать существенное влияние на процессы регуляции деятельности висцеральных систем организма и мозга. Для клиницистов представляют интерес сведения о способности милдроната и предуктала, которые широко используются в кардиологии и других разделах клинической медицины как антиоксиданты, оказывать p-адреносенсибилизирующее влияние, и тем самым снижать эффективность p-адреноблокаторов.

Внедрение Результаты работы используются в учебной и научной деятельности кафедры биологии Вятского государственного гуманитарного университета.

Апробация работы. Результаты исследования доложены на I всероссийской молодежной научной конференции «Молодежь и наука на сервере» (Сыктывкар, 2008), на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 90-летию со дня рождения академика Т. М. Турпаева «Механизмы нервных и нейроэндокринных регуляций» (Москва, 2008), на 12 Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина» (С.-Петербург, 2009), на XI итоговой межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов Вятской государственной медицинской академии «Молодежь и медицинская наука в XXI веке» (Киров, 2009) на научной конференции Вятского государственного гуманитарного университета (2008, 2009), на заседании Кировского отделения физиологического общества имени И. П. Павлова (Киров, 2009). Результаты представлены в материалах VIII Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиология человека и животных: б

от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар, 2009), VIII юбилейной российской научной конференции с международным участием «Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии» (Москва, 2009), XIV международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (Москва, 2009), всероссийской научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и соискателей, посвященной 80-летию Вятской ГСХА (Киров, 2010), на XXI съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Калуга, 2010), всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы трансфу-зиологии и клинической медицины» (Киров, 2010).

По материалам диссертации опубликовано 13 работ, в том числе 4 статьи в журналах, включенных в Перечень ВАК России.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 150 страницах компьютерного текста и состоит из введения, трех глав (обзор литературы, объекты и методы исследования, результаты исследования и их обсуждение), заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 105 источников на русском языке и 182 на иностранных языках. Диссертация иллюстрирована 14 таблицами и 15 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объекты и методы исследования

Проведено 40 серий исследований, в которых оценивали влияние адреналина, ацетилхолина, ЛФХ, 100- и 50-кратных разведений сыворотки венозной крови 35 небеременных женщин как источника ЭСБАР, а также гистидина и других аналогов ЭСБАР на спонтанную или вызванную ГРК сократительную активности продольных полосок (п=386) рога матки небеременных крыс (n = 117), взятых в опыт в стадии метаэструса или диэструса. Ее определяли по картине влагалищного мазка (Киршенблат Я.Д., 1969). Забой крысы осуществляли по «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приказ МЗ СССР от 12.08.77). Полоски рога матки имели длину 58 мм и ширину 2-3 мм. Регистрацию их сократительной активности проводили на многоканальном «Миоцитографе» по методике Циркина В. И. и соавт. (1997) при 38 °С, постоянной скорости перфузии раствора Кребса со скоростью 0,7 мл/мин, пассивной аэрации рабочей камеры и исходной нагрузке полосок, равной 500 мг (4,9 мН). «Миоцитграф» включал самопишущие приборы типа Н-3020, механотроны 6МХ1Б или 6МХ1С, измерители-регуляторы температуры ТРМ1А «Овен» и шприцевые дозаторы (все - российского производства). Во всех сериях началу опытов предшествовал 30-минутный период адаптации полосок, т. е. перфузия раствором Кребса до установления стабильной спонтанной СА. Результаты тестирований полосок оценивали по механограммам. Изменение тонической активности полосок выражали в мН или в процентах к одному из этапов эксперимента. Забор венозной крови проводили (при добровольном согласии) у доноров в Кировском НИИ гематологии и переливания крови. Сыворотку получали путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 20 минут и исследовали в течение 3-6 часов от момента её забора.

В работе использовали раствор Кребса (рН = 7,4), содержащий (мМ): ЯаС1- 136, КС1- 4,7, СаС12-2,52, М§С12- 1,2, КН2Р04- 0,6, КаНС03- 4,7, С6Н]20б -11. Гиперкалиевый раствор Кребса дополнительно содержал 60 мМ КС1. Применяли адреналина гидрохлорид, атенолол (все - Россия), лизофосфа-тидилхолин (Украина), обзидан, метопрололол (Германия), ацетилхолина хлорид, тирозин, триптофан (Бельгия), милдронат (Латвия), гистидин (Япония) и предуктал (Польша). Результаты исследования подвергнуты статистической обработке; различия оценивали по критерию Стьюдента и считали их достоверными при р < 0,05 (Гланц С., 1999).

Результаты исследования и их обсуждение

1. Способность сыворотки крови и аналогов ЭСБАР противодействовать влиянию р-адреноблокаторов на релаксирующий эффект адреналина (серии 1-15). С учетом того, что Р-АР относятся к метаботропным рецепторам, все 15 серий проводили на фоне тонуса, повышенного ГРК. Это позволило минимизировать изменения СА, неизбежно происходящие при длительной работе с изолированным миометрием крысы. При замене раствора Кребса на ГРК тоническая активность (КС1-контрактура) развивалась относительно быстро (рис. 1-3). Она была устойчива на протяжении всего периода воздействия ГРК и многократно воспроизводилась. Адреналин (Ю^-Ю"6 г/мл) вызывал дозозави-симое и обратимое снижение КС1-контраюуры. Так, в сериях 1-3, проводимых по схеме: РК —* ГРК —> ГРК + Ад (соответственно в концентрации 10"8, или 10"7, или 10"6 г/мл) —> РК, адреналин дозозависимо и обратимо снижал контрактуру соответственно до 71,8±4,7%, 56,7±6,3% и 52,1±5,5% от ее исходной величины. Поэтому в остальных сериях, проводимых на фоне КС1-контрактуры, адреналин использовали в концентрациях 10"8 или 10" г/мл, вызывающих выраженный, но ке максимальный релаксирующий эффект. Это позволяло наблюдать р-адреномодулирующее действие сыворотки крови и аналогов ЭСБАР.

При исследовании влияния адреноблокаторов (атенолола, метопролола и обзидана, 10"9-10"6 г/мл) на релаксирующий эффект адреналина в сериях 4-6, которые проводили по схеме: РК —> ГРК —► ГРК + Ад, 10"7 г/мл —> ГРК + Ад-7 + блокатор (его концентрация возрастала ступенчато с 10"9до Ю-*5 г/мл) —► РК, установлено (рис. 1; табл. 1), что селективные Р]-адреноблокаторы атенолол и ме-топролол не влияют на релаксирующий эффект адреналина, а неселективный Р-адреноблокатор обзидан (10"9-10~6 г/мл) дозозависимо снижает его. Частичную блокаду эффекта адреналина обзидан вызывал в концентрации 10'9 г/мл, а полную - в концентрации 10"7 г/мл (табл. 1 и 2). В целом, результаты серий 4-6 указывают на то, что релаксирующий эффект адреналина реализуется за счет активации лишь р2-АР, которые, как известно (Сизова Е. Н., ЦиркинВ. И., 2006), доминируют в миоцитах продольного слоя рога матки небеременных крыс. Поэтому в сериях 7-15, в которых оценивали способность ЭСБАР и его аналогов противодействовать Р-адреноблокатору, использовали обзидан.

Mal Mv-tS М«т 1 Her 6

Рис. 1. Механограммы продольных полосок рога матки небеременных крыс, демонстрирующие

ß-адреноблокирующую способность ойзидана (10"9,10"8 г/мл; Обз 9, 8; панель А) и отсутствие у метопролола (10'9- 10"6 г/мл; Мет 9 - Мет 6; панель Б) ß-адреноблокирующего эффекта. Горизонтальные линии под механограммами отражают воздействия соответствующих веществ, в том числе адреналина (10 г/мл; Ад 7). Калибровка - 10 мН, 10 мин.

Таблица 1

Величина тонуса (М±ш), вызванного гиперкалиевым (60 мМ KCl) раствором Кребса у продольных полосок рога матки небеременных крыс на различных этапах эксперимента с адреналином (10"7 г/мл; Ад) и блокаторами - атенололом, метопрололом и обзиданом

(10'-IQ-6 г/мл)

Единицы измерения тонуса ')гаг:ь: эксперимента

1 2 3 4 5 6

KCl KCl + Ад KCl + Ад + блокатор, 10"9 KCl + Ад + блокатор, 10"8 KCl + Ад + блокатор, 10"7 KCl + Ад + блокатор,! О"6

Серия 4 - атенолол (п=10)

мН 13,9±0.7 8,5±0,7 1 8,7±0,8 ' 9,4±0,7 1 9,8±0,8 1 9,8±0,7 1

% 100 60,8±4,6 1 63,7±4,4 1 67,3±3,8 1 70,4±4,2 ' 71,2±5,3 1

Серия 5- метопролол (п=12)

мН 12,5±1,1 7,0±0,9 ' 7,1 ±0,9 1 8,0± 1,0 ' 8,3±1,0 ' 8,6±1,0 1

% 100 55,2±4,8 1 55,4±4,6 1 63,0±5,8 1 65,3±4,8 ' 68,5±5,9 1

Серия 6-обзидан (п=10)

мН 13,4*1,4 7,2±0,9 1 9,6±1,3 1 10,9±1,5 2 13,0±1,5 ¿J 12,8±1,6 "

% ...4 ... 100 54,1 ±4,5 1 70,5±4,7 79,8±5,3 96,8±1,9 -JA 100,4±1,7AJ'4

Таблица 2

Концентрации обзидана, которые в опытах с продольными полосками рога матки небеременных крыс частично или полностью снимают релаксирующий эффект адреналина

ß-Адреносенсибилизатор (г/мл) Число опытов Концентрация снимающая эф обзвдана (г/мл), >ект адреналина

частично полностью

Контроль 10 10"9 ю-7

Сыворотка, 1:100 10 10"8 10"6

Гистидин, 10"5 5 ю-7 ю-7

Гистидин, Ю-1 8 10-' ю-'

Триптофан, 10"5 5 Ю"6 ю-

Триптофан, 10"* 11 10"8 >10-11

Тирозин, 10"5 5 10"8 10"8

Тирозин, 10"1 9 10-' ¡0-'

Милдронат, 10"° 11 10"

Предуктап, 10"6 12 ю-9 > 10-*'

Исследование влияния 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин (как источника ЭСБАР) на р-адреноблокирующее действие обзидана (серия 7, п= 10) проводили по схеме: РК —► ГРК —> ГРК + Ад-7 —<• ГРК + Ад-7 + Сыв —»• РК —<■ ГРК —> ГРК + Ад-7 -<• ГРК + Ад-7 + обзидан (10"9 г/мл, Обз-9) те же воздействия + Сыв —» РК —> ГРК + Ад-7 + Обз-8 + Сыв ГРК + Ад-7 + Обз-7 + Сыв -> ГРК + Ад-7 + Обз-б + Сыв -> РК. Установлено (рис. 2), что исходно, как и в опытах других исследователей (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006), сыворотка крови не влияла на тоническую активность полосок, но проявляла р-адреносенсибилизирующую активность, т. е. усиливала релаксирующее действие адреналина.

Рис. 2. Механограмма продольной полоски рога матки небеременной крысы, отражающая

способность сыворотки крови (1:100, Сыв 100) оказывать адреносенсибилизирующий эффект и уменьшать бета-адреноблокирующие свойства обзидана (10"9-10^' г/мл; Обз 9-6) на фоне КС1-контрактуры. Горизонтальные линии под механограммой означают момент воздействия веществ, в том числе адреналина (10"7 г/мл; Ад 7). Калибровка - 10 мН, 10 мин.

Так, если первоначально адреналин снижал КС1-контрактуру до 82,7±6,8% от исходного уровня, то на фоне сыворотки крови (1:100) он снижал ее до 35,6±5,5%, т.е. проявлял достоверно (р < 0,05) более выраженное релаксирующее влияние, чем при 1-м тестировании. В этих условиях обзидан в концентрациях 10"9 г/мл не влиял на релаксирующий эффект адреналина, а в концентрациях 10"8, 10"7 и 10"6г/мл дозозависимо снижал его: КС1-контрактура восстанавливалась соответственно до 57,4±4,7%, 68,6±9,4 и 87,2±9,0% от исходного уровня. Таким образом, на фоне сыворотки крови концентрации обзидана, частично или полностью блокирующие эффект адреналина, составили соответственно 10"8 и 10"6 г/мл, что в 10 раз превышает исходные значения (табл. 2). Это означает, что сыворотка крови противодействует влиянию р-адреноблокатора на релаксирующий эффект адреналина. Скорее всего, это связано с наличием в ней ЭСБАР. Об этом свидетельствуют и результаты опытов с аналогами ЭСБАР (серии 8-15). Их проводили по измененной схеме: (табл. 3): РК —> ГРК ГРК + Ад 7 —> ГРК + Ад 7 + аналог ЭСБАР (в одной из концентраций) —> эти же компоненты + обзидан в возрастающих концентрациях от 10"9 до 10"6г/мл. Результаты экспериментов показали, что подобно сыворотке крови исходно аналоги ЭСБАР проявляют Р-адреносенсибилизирующую активность на фоне КС1-контрактуры, а при наличии в среде обзидана они снижают его способность блокировать релаксирующее действие адреналина (табл. 2 и 3), о чем свидетельствует 10-1000-кратный рост пороговых концентраций обзидана, частично или полностью снимающие релаксирующий эффект адреналина. Так, в серии 11 адреналин (10"7г/мл) первоначально снижал КС1-контрактуру до

89,9% от ее исходного уровня, на фоне триптофана (10"4 г/мл) он снижал ее до 65,3%, а на фоне триптофана и обзидана в концентрациях 10"9, 10'8, 10"7 и 10"6 г/мл - соответственно до 72,3%, 81,5%, 85,5% и 88,6% (табл. 3). Эти данные показывают, что триптофан повышает пороговые концентрации обзидана, частично или полностью блокирующие эффект адреналина, соответственно в 10 и в 100 раз.

Таблица 3

Величина тонуса (М±ш; в мН и в % к 1 -му этапу), вызванного гиперкалиевым (60 мМ KCl) раствором Кребса, у продольных полосок рога матки небеременных крыс на различных этапах эксперимента с адреналином (Ю-7 г/мл), аминокислотами (10'5 и 10'4 г/мл), милдронатом и предукталом (Ю'6 г/мл) и обзиданом (IQ'9 - Ю-6 г/мл).

Этапы эксперимента

1 2 3 4 | 5 | 6 | 7

KCl КС1 + адреналин Ш + адреналин + вещество KCl + адреналин + вещество

обзидан 10"' г/мл обзидан 10"8 г/мл обзидан 107 г/мл обзидан 10"6 г/мл

Серия 8 - гистидин, 10° г/мл (п=5)

мН 12,9i2,2 12,4±2,2 10,3±1,б 11,5±1,7 12,3±1,9 12,7±2,1 12,4±2,1

% 100 94,7±1,7 1 81,6d6,5 1 89,7±3,3 ' 95,9±2,5 98,6±1,1 " 96,0±0Л 1

Серия 9 - гистидин, КГ* г/мл (п=8)

мН 15,7±1,4 14,5±1,3 11,7±1,5 13,1±1,4 14,1±1,2 14,8±1,3 14,7±1,3

% 100 92,7±1,4 1 74,6±7,1 и 85,1±6,3 1 91,9±5,7 96,2±6,4 J , 96,0±6,8 J

Серия 10 - триптофан, 10° г/нл (п=5)

мН 15,5±1,5 12,9±1,6 12,1 ±1,5 11,7±1,5 12,б±1,4 13,9±1,3 14,7±1,3

% 100 82,5±2,7 1 77,2±4,0 ' 75,2±4,7 ' 81,9±4,б 1 90,5±4,7 95,7±5,0

Серия 11 - триптофан, 10"1 г/мл (п=11)

мН 15,5±0,9 13,8±0,7 I 9,9±0,7 и I 10,9±0,5 и 12,4±0,5 13,1±0,6 13,5±0,6 "

% 100 89,9±1,8 1 1 65,3±4,I u | 72,3±4,0 u 81,5±2,9 UJ 85,5±2,8 '■J J 88,6±3,1 1Л4

Серия 12 - тирозин, 10"' г/мл (п=5)

мН 11,8±1,3 11,3±1,3 9,7±1,3 10,3±1,2 11,5±1,5 11,9±1,5 12,0±1,5

% 100 95,5±1,6 1 81,7±3,8 u 87,5±4,3 1 97,2±2,9 J 100,3±3Л"' 101,5±2,5

Серия 13 - тирозин, 10ч г/мл (п=9)

мН 16,0±1,9 14,4±1,7 11,3±1,9 11,3±2,0 12,8±1,6 14,2±1,6 14,4±1,5

% 100 90,1±2,7 1 68,6±5,9 u 69,6±9,0 u 81,6±5,2 ' 91,0±4,б J 93,4±5,4 J-4

Серия 14 - милдронат, 10* г/мл (п=11)

мН 13,8±1,2 7,2±1,2 1 6,3±1,2 ' 6,6±1,2 ' 7,8±1,4 1 12,2±1,4 2,3,4,5 13,1±1,4 2,3,4,5

Серия 15 -предуктал, 10"" г/мл (п-12)

мН 15,7±1,7 10,9±1,7 9,1±1,4 1 10,8±1,1 1 12,3±1,1 14,9±1,3 " 15,0±2,3 л

% 100 65,3±4,9 ' 54,0±4,2 ' 13,1 ±6,7 83,7±6,2 w 83,0±2,3 'JJ 84,б±5,6 UJ

различие с соответствующим этапом достоверно (р < 0,05) по критерию Стьюдента.

Как известно, классические р-адреноблокаторы оказывают свое действие за счет того, что в силу более высокого сродства к адренорецепторам, они конкурентно связываются с Р-АР и тем самым препятствуют активации этих рецепторов агонистами (Кукес В. Г. и соавт., 2005). Способность ЭСБАР и его аналогов препятствовать действию обзидана подтверждает предположение о том, что один из механизмов их действия связан с повышением сродства Р-АР к агонисту. Результаты серий 7-15 также дают основание считать, что ЭСБАР при достаточно высокой его концентрации в крови, которая, как показано (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006; Хлыбова С. В., 2007), зависит от возраста, пола (у женщин - от фазы репродуктивного процесса) и наличия патологии, может существенно ослабить действие р-адреноблокаторов, используемых с лечебной

целью. Подобный эффект могут оказать и аналоги ЭСБАР, поступающие в организм с пищей (гистидин, триптофан, тирозин) или в виде лекарственных средств (милдронат, предуктал).

Таким образом, результаты наших исследований впервые показывают, что клиническая эффективность адреноблокаторов может зависеть от содержания в крови ЭСБАР и его аналогов.

2. Способность аналогов ЭСБАР проявлять р-адреносенсибилизи-рующую активность в присутствии 100-кратного разведения сыворотки крови как источника ЭСБАР (серии 16-20). Эксперименты по исследованию совместного действия 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин с одним из аналогов ЭСБАР проводили на фоне КС1-контрактуры по схеме: КР — ГРК ГРК + Ад-8 — ГРК + Ад-8 + Аналог -> РК -> ГРК -> ГРК + Ад-8 —> ГРК + Ад-8 + Сыв, 1:100 —» РК —► ГРК — ГРК +Ад-8 -> ГРК + Ад-8 + Аналог + Сыв—* РК (рис. 3, табл. 4). В этих опытах исходно адреналин снижал КС1-контрактуру до 71,8-86,6% от ее исходного уровня. На фоне сыворотки крови (1:100) или на фоне аналога ЭСБАР - гистидина, триптофана, тирозина (все - 10"4 г/мл), милдроната и предуктала (оба - 10"6 г/мл) его релакси-рующий эффект, как правило, достоверно возрастал. Это означает, что сыворотка крови и каждый из аналогов ЭСБАР проявляют Р-адреносенсибилизи-рующую активность. При действии адреналина на фоне сыворотки крови (1:100) и аналога ЭСБАР релаксирующий эффект адреналина также был достоверно выше, чем при 1-м тестировании или при воздействии адреналина совместно с сывороткой крови, но не выше, чем при воздействии адреналина совместно с аналогом ЭСБАР. Так, в серии 18 исходно адреналин снижал КС1-конт-рактуру до 86,5% от ее первоначальной величины, а на фоне триптофана - до 69,7%, т. е. достоверно (р < 0,05) больше; аналогично - до и на фоне сыворотки адреналин снижал КС1-контрактуру соответственно до 92,9% и 84,2% (р < 0,05), а до и на фоне триптофана и сыворотки - соответственно до 92,3% и 74,6% (р < 0,05).

_ KCl KCl KCl _

Лд! Ад8 1 Ад 8 _

Тир 4 Сыв 100 Тир 4

Сыв100

Рис. 3. Механограмма продольной полоски рога матки небеременной крысы, демонстрирующая бета-адреносенсибилизирующую активность тирозина (10" г/мл; Тир 4), 100-кратного разведения сыворотки крови (Сыв 100), в том числе

при их совместном воздействии, на фоне КС1-контрактуры. Горизонтальные линии означают момент воздействия веществ, включая адреналина (10"s г/мл; Ад 8). Калибровка - 10 мН, 10 мин.

Таблица 4

Величина тонуса (М±ш), вызванного гиперкалиевым (60 мМ KCl) раствором Кребса

у продольных полосок рога матки небеременных крыс на различных этапах эксперимента с адреналином (108 г/мл; Ад), экзогенными сенсибилизаторами (С) -аминокислотами (10"4 г/мл), милдронатом и предукталом (10"6 г/мл),

Ед. измерения Этапы эксперимента

1 2 3 4 5 6 7 8 9

KCl KCl + Ад KCl + Ад + С KCl KCl + Ад KCl + Ад + Сыв KCl KCl + Ад KCl + Ад + Сыв + С

Серия 16 - гиетидин, 1 О"4 г/мл (п = 12)

мН 16,4± 0,9 13,2± 0,7 1 6,4± 1,0 '-3 18,7± 0,9 17,3± 1,0 16,0± 1,2 18,5± 1,2 17,1± 1,2 9,6± 1,4 7'8

% 100 81,6± 4,0 1 39,2± 6,1 100 92,8± 3,0" 85,0+ 4,4 4 100 93,0± 2,2' 53,5± 7 1 7,8

Серия 17-тирозин, 10"1 г/мл (п=11)

мН 13,6± 1,3 11,3± 1.6 6,3± 1,2 15,5± 1,2 13,7± 1,3 11,0+ 1,2" 14,1± 1,7 11,7± 1,7 8,8± 1,3 7

% 100 78,2± 7,4 ' 43,9± 6,7 u 100 86,6± 4,2 4 68,3± 5,1 45 100 79,5± 5,9 7 58,7± 7,3 7-8

Серия 18-триптофан,! О"1 г/мл (п=9)

мН 13,9± 1,7 12,1± 1,5 9,8± 1,3 13,6± 2,1 12,6± 1,9 11,5± 1,8 13,5± 1,9 12,4± 1,7 9,8± 1,2

% 100 86,5± 2,3 1 69,7± 4,0 ^ 100 92,9± 0,8 4 84,2± 2,4 4'5 100 92,3± 0,8 7 74,6± 3,3 78

Серия 19- милдронат, 10"'' г/мл (и -11)

мН 10,9± 1,6 8,2± 1,6 6,4± 1,6 9,4± 1,8 8,2± 1,9 6,1± 1,4 9,8± 1,6 8,4± 1,7 6,8± 1,6

% 100 71,8± 4,7' 52,4± 7,0 u 100 80,7± 5,3 4 59,0± 4,5 4 5 100 80,5± 4,1 7 61,9± 4,9 7,8

Серия 20 - предуктал, 1 О"3 г/мл (п=10)

мН 10,7±1,0 8,2± 0,8 5,8+ 0,9 1 9,9± 0,8 8,3+ 0,6 6,3± 0,4 4S 10,8± 1,3 9,9± 1,2 6,9+ 0,9 7

% 100 76,4± 2,3 ' 53,0± 5,3 12 100 85,1± 2,4" 64,7± 2,6" 100 90,9+ 0,8 7 64,0± 2,17'8

- различие с <

В целом, результаты серий 16—20 указывают на то, что сыворотка крови, независимо от наличия в ней ЭСБАР (в опытах с гистидином его содержание в сыворотке крови оказалось невысоким), не препятствует Р-адреносенсибилизи-рующему эффекту аналогов ЭСБАР. В то же время не удалось наблюдать взаимного потенцирования эффектов ЭСБАР и его экзогенных аналогов. Это означает, что механизм Р-адреносенсибилизирующей активности сыворотки крови такой же, как и у аналогов ЭСБАР. Есть так же все основания утверждать, что аналоги ЭСБАР можно использовать для изучения механизма действия ЭСБАР. Очевидно также, что при внутривенном введении аналогов ЭСБАР, например, с целью повышения эффективности активации Р-АР при лечении бронхиальной астмы или угрозы преждевременных родов, кровь не будет препятствовать проявлению их р-адреносенсибилизирующей активности.

3. Способность гистидина противодействовать десенситизации, вызываемой многократными кратковременными (по 10 мин) воздействиями адреналина (серия 21). Опыты проводили на спонтанно активных полосках миометрия, на которых, как известно (ЦиркинВ. И., Дворянский С. А., 1997; Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006), десенситизация проявляется достаточно яр-

ко. Их вели по схеме: РК Ад-7 РК -» Ад-7 РК Ад-7 Ад-7 + Гис-6 —► РК—> Ад-7 + Гис-6 —> РК —> Ад-7 + Гис-6 -»РК(п=10). Было показано (рис. 4), что в условиях перфузии раствором Кребса полоски генерируют фазные сокращения. Их суммарная СА, т. е. сумма амплитуд, составила 73,2±3,4 мН/10 мин. Адреналин (10"7 г/мл) при 1-м тестировании обратимо угнетал ее до 15,1±0,9 мН/10 мин, или до 20,6% от исходной величины.

Ад7 Ад 7 Аа7 Ад7+Гис« М' + Гис« Лд.7+Гис*

Рис. 4. Механограмма продольной полоски рога матки небеременной крысы, демонстрирующая способность гистидина (10'6 г/мл, Гис 6) препятствовать десенситизации, вызванной адреналином (10"7 г/мл, Ад 7).

Горизонтальные линии означают момент воздействия. Калибровка - ЮмН, Юмин.

Однако уже при 2-м тестировании адреналин оказывал более слабое угнетение спонтанной СА - с 62,0±3,5 до 49,5±4,1 мН/10 мин., т. е. всего лишь до 80% от исходного уровня, что говорит о выраженной десенситизации. Аналогичная ситуация повторилась при 3-м тестировании - адреналин снижал суммарную СА с 53,8±3,6 до 42,1±2,0 мН/10 мин, т. е. до 78%. Гистидин (Ю-6 г/мл) сам по себе не изменял суммарную СА полосок, но достоверно повышал способность адреналина ингибировать суммарную СА - на его фоне адреналин снижал суммарную СА с 40,5±3,3 до 2,0±0,3 мН/10 мин, т. е. до 5% от исходного уровня. При последующих двух тестированиях совместно с гистидином адреналин продолжал оказывать выраженный релаксирующий эффект - суммарная СА снижалась соответственно с 53,5±3,3 до 4,8±0,9 мн/10 мин, т. е. до 9% и с 51,7±2,8 до 8,8±0,8 мн/10 мин, т. е. до 17%. Таким образом, нами установлено, что гистидин даже в невысокой концентрации (10 6 г/мл) снимает развившуюся под влиянием периодических воздействий адреналина десенситизацию Р-АР и препятствует ее дальнейшему развитию, т. е. пролонгирует действие адреналина как ингибитора СА. Наши результаты согласуются с данными Тумановой Т. В. и соавт. (2004) о способности гистидина восстанавливать эффективность активации Р-АР миометрия крысы, сниженную в результате 30-минутного непрерывного воздействия адреналина. Как известно, десенситизация Р-АР является результатом фосфорилирования р-АР под влиянием киназы р-АР и/или протеинкиназы А, которым противодействует фосфатаза (Сизова Е. Н., Циркин В. И., 2006). Результаты наших исследований позволяют считать, что гистидин восстанавливает нативную структуру Р-АР, т. е. способствует их де-фосфорилированию. Не исключено, что это связано с повышением активности фосфатазы под влиянием гистидина. Вероятно, подобный механизм действия характерен для ЭСБАР и других его аналогов. Полагаем, что способность ЭСБАР и его аналогов противодействовать развитию десенситизации и пролонгировать действие катехоламинов должна найти широкое клиническое применение, так как введение пациентам р-адреномиметиков, как правило, сопровождается развитием выраженной десенситизации. 14

4. Способность гистнднна модулировать сократительные эффекты адреналина и ацетнлхолина на фоне ЛФХ и куриного яичного желтка как источника ЛФХ (серии 22-30). Опыты с адреналином были выполнены на спонтанно активных полосках миометрия (серии 22) и на полосках в условиях их КС1-контрактуры (серии 23 и 24). Серию 22 (п = 10), в которой исследовали влияния ЛФХ на эффекты адреналина, проводили по схеме: РК —► АД-8 —> РК — АД-8 + Гис-6 — РК — ЛФХ-4 — ЛФХ-4 + АД-8 + Гис-б —» РК —► АД-8 + Гис-6 -+ РК —> АД-8 + Гис-4 —► РК (рис. 5). Применение гистидина на первых этапах этой серии было связано с необходимостью снизить скорость десенсити-зации Р-АР, вызываемой периодическими воздействиями адреналина. В этих опытах исходно адреналин (10"8 г/мл) снижал суммарную СА с 69,3±3,1 до 34,4±2,4 мН/10 мин, т. е. до 50% от исходного уровня. На фоне гистидина (10 6 г/мл) он снижал ее намного сильнее - с 66,2±3,2 до 10,5±0,9 мН/10 мин, т. е. до 16%. Сам по себе ЛФХ (10"4 г/мл) не влиял на суммарную СА — исходно она составляла 71,3±3,2 мН/10 мин, а на фоне ЛФХ - 74,8±2,8 мН/10 мин, или 105%. На фоне ЛФХ и гистидина адреналин первоначально сохранял способность ингибировать СА- он снижал суммарную СА с 74,8±2,8 до 16,5±1,5 мН/10 мин, т. е. до 22% от исходного уровня. Однако при двух последующих тестированиях, которые проводились после удаления ЛФХ, адреналин, несмотря на присутствие гистидина (Ю-6 г/мл), снижат суммарную СА на значительно меньшую величину - с 89,5±3,7 до 44,2±3,5 мН, т. е. до 49%, и с 88,5±4,6 до 44,9±2,4 мН, т. е. до 51%. Повышение в среде концентрации гистидина до 10"4 г/мл лишь в части опытов приводило к росту релаксирующего эффекта адреналина (рис. 5), хотя в среднем и в этих условиях адреналин снижал суммарную СА в меньшей степени - с 98,2±6,5 до 46,1±10,1 мН/10 мин, т. е. до 47%. Все это говорит о том, что ЛФХ проявляет р-адреноблокирующий эффект, но с большим латентным периодом. Этот эффект ЛФХ сохраняется 2040 минут. Гистидин восстанавливает способность адреналина ингибировать спонтанную СА, но для этого он должен быть использован в высоких концентрациях и его эффект наблюдается не в 100% опытов.

L_JJ

■

Ад8

Ал8 Гисб

ЛФХ 4

Ад8 1нс6

Ад8 Гисб

Ад8 Пк4

Рис. 5. Механограмма продольной полоски рога матки небеременных крыс, демонстрирующая способность лизофосфатидилхолина (10"4 г/мл; ЛФХ 4) оказывать бета-адреноблокирующее действие на фоне адреналина (10"8 г/мл; Ад 8) и гистидина (10"6, 10"4 г/мл; Гис 6,4). Горизонтальные линии означают момент воздействия.

Калибровка - 10 мН, 10 мин.

Наши результаты частично подтверждают данные Пенкиной Ю.А. и со-авт. (2008), согласно которым ЛФХ (10 5 г/мл) блокирует Р-АР кардиомиоцитов лягушки и крысы, а гистидин (10"4 г/мл) снимает эту блокаду. По мнению этих

авторов, р-адреноблокирующий эффект ЛФХ обусловлен изменением конфор-мации С-белка и других посредников передачи сигнала, а гистидин восстанавливает их нативную конформацию и тем самым восстанавливает эффективность передачи сигнала от рецептора внутрь клетки. Ранее было показано (Про-казова Н. В. и соавт., 1998; Куншин А. А. и соавт., 2007), что ЛФХ может снижать эффективность активации М-холинорецепторов (М-ХР). Проказовой Н. В. и соавт. (1998) это объяснялось способностью ЛФХ активировать протеинкина-зу С, в результате чего происходит фосфорилирование М-ХР. Мы полагаем, что в основе р-адреноблокирующего действия ЛФХ лежат оба указанных механизма, т. е. фосфорилирование Р-АР под влиянием активированной ЛФХ протеин-киназы А и изменение конформации в-белка и других посредников, а гистидин дефосфорилирует Р-АР (активируя фосфатазу) и восстанавливает конформацию участников передачи сигнала; тем самым он восстанавливает эффективность активации Р-АР.

С учетом важности данных о способности ЛФХ как естественного компонента клетки снижать эффективность передачи сигнала от р-АР внутрь клетки, мы считали возможным получить дополнительное доказательство этому в опытах, в которых в качестве источника ЛФХ использовали куриный яичный желток (ЯЖ) в разведении 1:100 (серия 23) и 1:50 (серия 24). Ранее было показано, что ЯЖ в разведении 1:500, 1:100 и 1:50 за счет наличия в нем ЛФХ блокирует М-ХР гладких мышц трахеи коровы (Кононова Т.Н., 2004) и желудка крысы (Куншин А. А. и соавт., 2007). Кроме того, в этих опытах мы поставили задачу проверить способность ЛФХ (в составе ЯЖ) блокировать Р-АР в условиях деполяризации. Поэтому опыты в серии 23 и 24 вели по схеме: РК —» ГРК —* ГРК + АД-7 —> РК —> ГРК -> ГРК + ЯЖ — ГРК + ЯЖ+ АД-7 — КР ГРК — ГРК + АД-7 —> РК ГРК -> ГРК + ЯЖ —» ГРК + ЯЖ + АД-7 -> ГРК + ЯЖ + АД-7 + Гис-5 —«■ РК. Нами установлено, что ЯЖ в разведении 1:100 (серия 23, п = 5) не влиял на релаксирующее действие адреналина, а в разведении 1:50 (серия 24, п = 9) проявлял Р-адреноблокирующую активность. В частности, в серии 24 адреналин (10'7 г/мл) при 1-м тестировании снижал КС1-контрактуру до 70,2±6,3% от исходного уровня, а ЯЖ не влиял на нее (на фоне ЯЖ ее амплитуда составила 113,3±7,9% от исходного уровня). На фоне ЯЖ адреналин снижал контрактуру лишь до 85,9±4,1% от ее исходной величины (р2_1>0,05), т.е. в определенной степени ниже, чем при 1-м тестировании. При 3-м тестировании, т. е. на фоне ЯЖ и гистидина (10"5 г/мл) адреналин снижал КС1-контрактуру до 60,2±5,4% (рз-7 < 0,05). Это говорит о том, что гистидин достоверно повысил релаксирующий эффект адреналина, сниженный ЯЖ.

Таким образом, результаты серии 24 подтверждают вывод о том, что ЛФХ (в том числе в составе ЯЖ), снижает эффективность активации Р-АР, а гистидин восстанавливает ее. Мы не исключаем, что подобно гистидину, такой же эффект будут оказывать триптофан, тирозин, предуктал и милдронат, а также ЭСБАР.

Исследование способности гистидина модулировать эффекты аце-тилхолина в условиях воздействия ЛФХ и ЯЖ (серии 25-30) выполнено на спонтанно активных полосках миометрия. Эти опыты были проведены с целью 16

оценки специфичности действия ЛФХ и гистидина. Для этого оценивали влияние ЛФХ на эффективность активации М-ХР миометрия крысы и способность гистидина модулировать это влияние. Серию 25, в которой изучали эффект ЛФХ в концентрации 10"6 г/мл, вели по схеме: РК—> АХ-6 —> РК —> ЛФХ —»• ЛФХ +АХ-6 —» РК —> АХ-6 —> РК. По такой же схеме вели опыты с ЛФХ в концентрациях 10'5 и 10"4 г/мл (серии 26, 27) и с ЯЖ в разведениях 1:100 (серия 28) и 1:50 (серии 29). Во всех этих сериях АХ вызывал типичный обратимый стимулирующий эффект, а ЛФХ и ЯЖ, как и в сериях 22-24, сами по себе не влияли на суммарную СА полосок (рис. 6). В этих опытах ЛФХ (Ю-6—10"4 г/мл) и ЯЖ в разведении 1:100 не оказывали достоверного влияния на стимулирующий эффект АХ (рис. 6, А), а ЯЖ в разведении 1:50 снижал этот эффект в момент воздействия (серия 29), т. е. проявлял М-холиноблокирующую активность. Так, в серии 29 (п = 9) при 1 -м тестировании АХ (10"6 г/мл) повышал суммарную СА до 105,1±13,9 мН/10 мин, а при 2-м тестировании, т. е. на фоне ЯЖ он повышал ее лишь до 78,7±5,1 мН/10 мин, что составляет 81,7±7,1% от величины, наблюдаемой при 1-м тестировании АХ (р2-1 < 0,05). Это говорит о достоверном снижении стимулирующего эффекта АХ. После удаления ЯЖ способность АХ оказывать стимулирующий эффект восстанавливалась - при 3-м тестировании он повышал суммарную СА до 97,0±11,9 мН/10 мин, или до 100,3±8,2%, т. е. также, как и 1-м тестировании.

№

чЛ

ии

АХ 6

ЛФХ4

АХ 6

ЯЖ 50

АХ 6

Рис. 6. Механограммы продольных полосок рога матки небеременных крыс, демонстрирующие влияние лизофосфатидилхолина (Ю-1 г/мл; ЛФХ 4) на эффект ацетилхолина (10~б г/мл; АХ 6) - панель А, и М-холиноблокирующую способность куриного яичного желтка (1:50; ЯЖ 50) - панель Б. Горизонтальные линии означают момент воздействия веществ. Калибровка- 10 мН, 10мин.

В серии 30 (п=10) было исследовано влияние гистидина (Ю-4 г/мл) на М-холиноблокирующее действие ЯЖ в разведении 1:50. Опыты проводили по аналогичной схеме, но с добавлением этапа с гистидином, т. е. РК —► АХ-6 —►

РК ЯЖ ->ЯЖ + АХ-6 -» РК АХ-6 —> РК —> АХ + Гис-4 -» РК. В этой серии ЯЖ снижал стимулирующий эффект АХ не в момент воздействия ЯЖ, как отмечено в серии 29, а после удаления ЯЖ. При этом гистидин не восстанавливал способность АХ повышать СА миометрия. Действительно, при 1-м тестировании АХ (10"6 г/мл) повышал суммарную СА до 184,1±35,7 мН/10 мин, на фоне ЯЖ- до 155,7±21,9 мН/10 мин, что составляет 90,7±10,7% от 1-го тестирования АХ (p2-i > 0,05), а при 3-м тестировании, т. е. после удаления ЯЖ он повышал суммарную СА до 132,8±31,1 мН/10 мин, или до 71,4±9,5% (р3.2<0,05), т. е. достоверно слабее. При 4-м тестировании, проводимом совместно с гистидином (Ю4 г/мл), АХ повышал суммарную СА лишь до 135,0±22,2 мН/10 мин или до 82,2±19,6% (Р4-1,2,з > 0,1) от первого тестирования ацетилхолином.

В целом, результаты серий 28-30 указывают на то, что ЛФХ, содержащийся в яичном желтке, снижает эффективность передачи сигнала от М-ХР внутрь клетки, но слабее, чем в отношении передачи сигнала от (3-АР. Т. е. М-холиноблокирующее влияние ЛФХ и ЯЖ слабее, чем их р-адреноблокирую-щее влияние. Это означает, что способность ЛФХ снижать эффективность передачи сигнала от рецепторов, ассоциированных с G-белком, зависит от вида рецепторов. Мы также не исключаем, что эта способность зависит и от вида клеток, так как согласно данным литературы, ЛФХ блокирует М-ХР миоцитов желудка крысы (Куншин А. А. и соавт., 2007) и М-ХР кардиомиоцитов сердца лягушки (Проказова Н. В. и соавт., 1998) и крысы (Коротаева К. Н., 2008).

5. Способность гистидина модулировать влияние адреналина на сократительную реакцию миоцитов в ответ на замену раствора Кребса дистиллированной водой (серии 31-40). Известно, что миоциты матки крысы содержат аквапорины, в том числе AQ1, AQ2, AQ3, AQ4, AQ5, AQ8 и AQ9 (Jablonski Е. et al., 2003; Richard С et al., 2003; Lindsay L., Murphy С., 2006). При этом показано, что на процессы встраивания аквапоринов из цитоплазмы в поверхностную мембрану может влиять не только антидиуретический гормон, но и другие гормоны и медиаторы, в том числе ацетилхолин (Ishikawa Y et al., 1998; InoueN. et al., 2003) и адреналин (InoueN. et al., 2003; YasuiH. et al., 2008). Постановка эксперимента данного раздела работы (серии 31-40) базировалась на рабочей гипотезе, согласно которой замещение обычного раствора Кребса дистиллированной водой (ДВ) должно сопровождаться входом воды в миоциты через аквапорины. Вошедшая в миоциты вода вследствие нарушения работы митохондрий должна заблокировать работу Са2+-насосов клетки и тем самым временно повысить тонус миоцитов. Этому может также способствовать вход в миоциты ионов Са2+ из внеклеточных пространств, а также феномен «защелки», характерный, как известно (Циркин В. И., Трухина С. И., 2001), для гладких мышц. Очевидно, что если адреналин каким-либо образом влияет на состояние аквапоринов, активируя Р-АР, то он должен изменить скорость нарастания тонуса, вызванного заменой раствора Кребса на ДВ. Очевидно также, что по мере вхождения воды в миоциты внутриклеточная концентрация Са2+ и других ионов должна снижаться и все это будет приводить к падению тонуса. Гистидин, в силу присущей ему ЭСБАР-активности, должен усилить эффект адреналина. 18

Результаты серий 31, 35, 38, которые проводили на спонтанно активных полосках по схеме РК —» ДВ, показали, что замена раствора Кребса на ДВ сопровождается торможением генерации фазных сокращений и развитием тонуса, для которого характерно постепенно снижение (рис. 7; табл. 5).

Кр

ДВ + Ад7 + Гис4

А Б В

Рис. 7. Механограммы продольных полосок рога матки небеременных крыс, демонстрирующие изменение их напряжения при замене раствора Кребса (Кр) на дистиллированную воду (ДВ), в том числе совместно с адреналином (10"7 г/мл; Ад-7) или адреналином (Ю-7 г/мл) и гистидином (Ю-4 г/мл; Гис4). Горизонтальные линии под механограммами означают момент воздействия. Калибровка - 10 мН, 10 мин.

В серии 32, проведенной по схеме: РК —* ДВ + АД-6, было показано (рис. 7, Б; табл. 5), что при замене раствора Кребса на воду, содержащую адреналин (10"6 г/мл), полоски миометрия изменяли свою СА по такому же типу, как и в серии 31, но абсолютная и удельная скорость нарастания максимального напряжения в этом случае были достоверно (р < 0,05) ниже, чем в серии 31 (1,0 против 3,6 мН/мин и 0,03 против 0,09 мН/мин/мг сырой массы). Это означает, что адреналин снижает скорость перехода воды в миоциты.

Таблица 5

Параметры (М±ш), характеризующие изменение напряжения продольных полосок рога матки небеременных крыс при воздействии дистиллированной воды (ДВ), i том числе совместно с адреналином (10"7 и 10"6 г/мл; Ад 7, Ад 6), обзиданом (10"6 г/мл; Обз 6), ницерголином (10"6 г/мл; Ниц б) и гистидином (104 г/мл; Гис 4).

Серии

31 32 33 34 35 36 37

Параметры ДВ ДВ + Ад 6 ДВ + Ад 6 + Обз 6 ДВ + Ад 6 + Ниц 6 ДВ ДВ + Ад 7 ДВ + Ад 7 + Гис 4

Число полосок 9 10 13 8 10 10 10

1Максимальное напря- 11,7± 10,5± 9,6± 9,6± 13,8± 14,4± 14,0±

жение (Бтах), мН 1,2 1,8 1,2 1,0 1,2 1,2 0,7

Время достижения Рт!К) МИН 3,4± 0,4 10,8± 1,131 4,4± 0,6« 11,9± 2,5 3|'33 5,6± 1,0 7,8± 1,2 12,7± 1,6 35'36

Скорость нарастания Ртах, МН/МИН 3,6± 0,3 1,0± 0,2 2,3± 0,231'32 1,0± 0,231,33 3,0± 0,4 2,5± 0,5 1,5± 0,3 36

Удельная скорость нарастания Ртах, мН/мин / мг массы 0,09± 0,02 0,03± 0,006 31' 0,07± 0,01 32 0,03± 0,005 31'33 0,07± 0,01 0,07± 0,01 0,04± 0,0135'36

-различие с соответствующим этапом достоверно (р < 0,05) по критерию Стьюдента.

Одним из объяснений этого может быть предположение о том, что адреналин способствует возвращению аквапоринов из поверхностной мембраны миоцита в цитоплазму или тормозит встраивание аквапоринов в эту мембрану. Конечно, не исключается и иное объяснение этого феномена, например, активация адреналином энергообразования в митохондриях, повергаемых гипоос-мотическому стрессу.

В серии 33, проводимой по схеме: РК —> ДВ + Ад-6 + Обз-б, было показано, что при замене раствора Кребса на воду, содержащую адреналин (10"6 г/мл) и обзидан (10"6 г/мл), полоски миометрия изменяли свою СА по такому же типу, как и в сериях 31, 35, 38, при этом скорость нарастания максимального напряжения в этом случае была такой же, как в серии 31. Следовательно, обзидан блокировал эффект адреналина. В аналогичной серии 34, проведенной по схеме РК —► ДВ + Ад 6 + Ниц-6, было показано, что в этом случае адреналин (10'6 г/мл), несмотря на наличие ницерголина (10"6 г/мл), продолжал оказывать тормозное влияние на развитие тонуса, как и в серии 32. Все это позволяет утверждать, что способность адреналина снижать скорость развития напряжения, вызванного заменой раствора Кребса на ДВ, реализуется за счет активации Р-АР, причем, главным образом Рг-АР, число которых, как известно (Цир-кин В. И., Дворянский С. А., 1997), доминирует в миоцитах матки крысы.

Результаты серий 31-34 дали нам основание поставить задачу- оценить возможность гистидина повысить эффективность активации Р-АР адреналином, следствием которого является замедление скорости развитие напряжения в условиях водной нагрузки. С этой целью мы провели синхронно три серии. Серию 35 вели по схеме РК —>ДВ; серию 36 - по схеме: РК —» ДВ + АД-7, а серию 37 по схеме РК—► ДВ+АД-7 + гистидин,10^гм/мл. Было установлено, что замена раствора Кребса на ДВ повышает напряжение миометрия (серия 36), при этом адреналин в концентрации 10'7 г/мл не вызывал достоверного снижения скорости развития напряжения (табл. 5), однако в присутствии гистидина (10"4 г/мл) адреналин в этой же концентрации (серия 37) вызывал достоверное снижение абсолютной и удельной скорости развития напряжения (рис. 7, В, табл. 5). Косвенно, эти данные означают, что гистидин повышает эффективность активации р-АР под влиянием адреналина, в результате которой замедляется процесс перехода воды внутрь миоцита. Таким образом, нами установлено, что гистидин как экзогенный сенсибилизатор Р-АР может проявлять свое действие не только в опытах с интактным миометрием, но и в условиях воздействия на миометрий ДВ.

В сериях 38-40 было установлено, что адреналин в еще более низкой концентрации (10"8 г/мл) не снижает скорость развития напряжения, а гистидин (10"4 г/мл) в этих условиях не проявляет р-адреносенсибилизирующую активность. Действительно, этот показатель при действии ДВ (серия 38), ДВ и адреналина (серия 39) и ДВ, совместно с адреналином и гистидином (серия 40) составил, соответственно 2,0±0,3; 2,5±0,4 и 2,8±0,4 мН/мин (рз8-змо> ОД)- Эти данные указывают на то, что способность адреналина уменьшать переход воды внутрь миоцита зависит от его концентрации в среде, а гистидин в этих условиях оказывает р-адреносенсибилизирующий эффект, но при использовании адреналина в концентрации, близкой к пороговой. 20

Таким образом, нами впервые установлено, что адреналин, активируя р2-АР, снижает скорость перехода воды из внеклеточной среды внутрь миоци-тов (возможно, за счет торможения переноса аквапоринов из цитозоля в поверхностную мембрану миоцитов), а гистидин (как аналог ЭСБАР) повышает эффективность активации Рг-АР в этих условиях, т. е. он проявляет (3-адрено-сенсибилизирующую активность независимо от конечного результата этой активации.

***

Результаты исследования и данные литературы позволяют рассматривать ЭСБАР и его аналоги (гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал) в качестве внеклеточных и внутриклеточных шаперонов, т.е. веществ, которые участвуют в репарации повреждений, возникающих в процессе функционирования клеток, благодаря чему восстанавливается эффективность передачи сигнала от Рг-АР к внутриклеточным эффекторам. Это говорит, в целом, о перспективности применения аналогов ЭСБАР в клинической практике. В то же время можно констатировать, что многие аспекты, касающиеся механизмов действия и физиологической роли ЭСБАР и его аналогов, требуют дальнейшего изучения.

Выводы

1. На фоне тонической сократительной активности миометрия крысы, вызванной гиперкалиевым раствором Кребса (ГРК), адреналин (Ю^-Ю^г/мл) вызывает дозозависимый и обратимый релаксирующий эффект. Он реализуется за счет активации р2-АР, так как его величина при действии адреналина (10"7 г/мл) не меняется в присутствии селективных ргадреноблокаторов атенолола (10"9-10"6 г/мл) и метопролола (10"9-106 г/мл), но дозозависимо снижается при воздействии неселективного р-адреноблокатора обзидана (10~9-10~6 г/мл).

2. На фоне тонической сократительной активности миометрия крысы, вызванной гиперкалиевым раствором Кребса (ГРК), релаксирующий эффект адреналина (10 8 или 10"7г/мл) усиливается под влиянием 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин, используемого в качестве источника ЭСБАР. Он также возрастает под влиянием аналогов ЭСБАР- гистидина (10"4 г/мл), триптофана (Ю-4 г/мл), тирозина (105, 10"4 г/мл), милдроната (Ю-6 г/мл) и предуктала (10 6 г/мл). Это позволяет рассматривать ЭСБАР и аналоги ЭСБАР как факторы, повышающие эффективность активации метабо-тропных Р2-АР.

3. В опытах с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы 100-кратное разведение сыворотки крови небеременных женщин, так же как и аналоги ЭСБАР - гистидин (10"5, 10"4 г/мл), триптофан (10"5, 10"4 г/мл), тирозин (10"5, 10"4 г/мл), милдронат (10"6 г/мл) и предуктал (10"6 г/мл) повышают в 10-100 раз пороговую концентрацию обзидана, при которой адреналин (10"7г/мл) уменьшает свой релаксирующий эффект. Это говорит о том, что а) ЭСБАР и его аналоги могут снижать эффективность действия р2-адреноблокаторов; б) одним из механизмов действия ЭСБАР и его аналогов является их способность повышать сродство р2-АР к агонисту (возможно, за счет восстановления их конформаци-онной структуры).

4. В опытах с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы гистидин (Ю-4 г/мл), триптофан (Ю-4 г/мл), тирозин (1(Г4 г/мл), милдронат (Ю-6 г/мл) и предуктал (10"6 г/мл) сохраняют способность усиливать релаксирующее действие адреналина (10~8 г/мл) в присутствии 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин. Это означает, что а) сыворотка крови, независимо от наличия в ней ЭСБАР, не препятствует действию аналогов ЭСБАР; б) механизм действия ЭСБАР и его аналогов однотипен; в) поступающие в кровь (при пищеварении или при внутривенном введении) аналоги ЭСБАР могут проявлять присущую им р2-адреносенсибилизирующую активность.

5. В опытах с интактным миометрием крысы релаксирующий эффект адреналина (10"7г/мл) при периодическом (по 10 мин, с 10-минутным интервалом) его воздействии постепенно снижается. Гистидин (Ю-6 г/мл) восстанавливает релаксирующий эффект адреналина и сохраняет его на этом уровне при последующих воздействиях совместно с адреналином. Это говорит о том, что а) гистидин препятствует развитию десенситизации р2-АР; б) аналоги ЭСБАР перспективно применять в клинической практике в качестве пролонгаторов (синергистов) р2-адреномиметиков.

6. В опытах с интактным или с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы ЛФХ (Ю-4 г/мл) и яичный желток (в разведении 1:50) как источник ЛФХ снижают (с 10-минутным латентным периодом) релаксирующее действие адреналина (Ю-8 или 10'7 г/мл), а гистидин (10"4 г/мл) восстанавливает это действие адреналина. Это означает, что а) ЛФХ уменьшает эффективность активации (3-АР; б) подтверждается гипотеза об универсальной способности гистидина восстанавливать передачу сигнала от Р-АР внугрь клетки, независимо от причины, вызывающей ее нарушение; в) аналоги ЭСБАР перспективно применять в клинической практике в качестве веществ, восстанавливающих эффективность активации р-АР.

7. В опытах с интактным миометрием крысы куриный яичный желток (в разведении 1:50) как источник ЛФХ снижает (с 10-минутным латентным периодом) стимулирующий эффект ацетилхолина (Ю-6 г/мл). И хотя ЛФХ (10_6-10"4 г/мл) не проявляет подобной активности, это позволяет говорить о том, что а) ЛФХ способен снижать эффективность передачи сигнала от М-холинорецеп-торов (ХР) внутрь клетки, но способность ЛФХ в отношении М-ХР выражена в меньшей степени, чем в отношении Р-АР; б) хемомодулирующая активность ЛФХ зависит от вида рецепторов, ассоциированных с С-белком.

8. В опытах с интактным миометрием крысы адреналин (Ю'бг/мл) снижает скорость развития напряжения, вызываемого заменой раствора Кребса на дистиллированную воду. Этот эффект блокируется обзиданом (Ю-6 г/мл), но не ницерголином (10_6 г/мл) и усиливается (в отношении более низкой концентрации адреналина, равной 10"7 г/мл) гистидином в концентрации Ю-4 г/мл. Эти данные указывают на то, что а) адреналин, активируя р2-АР, снижает скорость перехода воды из внеклеточной среды внутрь миоцитов (возможно, за счет торможения переноса аквапоринов из цитозоля в поверхностную мембрану миоцитов); б) гистидин (как аналог ЭСБАР) способен повышать эффективность активации р2-АР независимо от конечного результата этой активации.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

Статьи в журналах, рекомендованных Перечнем ВАК

1. Торопов А. Л., Коротаева КН., Самоделкина Е. О., ЦиркинВ. И., Вязников В. А. Влияние лизофосфатидилхолина на адрено- и м-холинореактивность гладких мышц и миокарда. // Вестник Новосибирского государственного университета. Серия Биология, клиническая медицина. - 2010. - Т. 8. № 3. - С. 18-26.

2. Торопов А. Л., Циркин В. И. Влияние адреналина и гистидина на ответ изолированных гладких мышц матки крысы, вызванный заменой раствора Кребса на дистиллированную воду // Вестник Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского. -2010.-№2(2).-С. 682-685.

3. Циркин В. И., Ноздрачев А. Д., Торопов А. Л., Эндогенный сенсибилизатор р-адре-норецепторов и его аналоги в опытах с миометрием крысы уменьшают Р-адреноблокирую-щий эффект обзидана //ДАН. - 2010. - Т. 435, № 1 - С. 131-137.

4. Торопов А. Л., Ноздрачев А. Д., Циркин В. И., Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора бета-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов // Вестник Санкт-Петербургского ун-та. - 2011. - Сер. 3 (биология), № 1. - С. 27-42.

Статьи в журналах, сборниках и материалах конференций.

1. Торопов А. Л. Влияние лизофосфатидилхолина на эффективность активации М-хо-лино- и p-адренорецепторов изолированного миометрия крысы // Молодежь и наука на севере: в 3 т. Т. II: Материалы докладов I всероссийской молодежной научной конференции. -Сыктывкар, 2008. - С. 262-263.

2. БерезовчукЕ. А., Боброва А. А., Самоделкина Е. О., Коротаева К. Н., Торопов A. JI. Изучение функциональной роли аквапоринов в деятельности миокарда, висцеральных и сосудистых гладких мышц // Молодежь и медицинская наука в XXI веке»: материалы XI итоговой межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием - Вятский медицинский вестник. - 2009. - № 1. - С. 95.

3. Торопов А. Л., Циркин В. И., Костяев А. А. Способность сыворотки крови как источника эндогенного сенсибилизатора p-адренорецепторов и гистидина уменьшать Р-адреноблокирующее действие пропранолола в опытах с миометрием крысы // Эколо-го-физиологические проблемы адаптации: материалы XIV международного симпозиума. -М.: РУДН, 2009. - С. 402^104

4. Торопов А. Л. Гистидин и сыворотка крови снимают адреноблокирующее действие пропранолола в опытах с миометрием крысы // Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике: тез. докл. VIII Молодежной научной конф. ИФ Коми НЦ УрО РАН. - Сыктывкар, 2009. - С. 198-210.

5. Торопов А, Л. Способность гистидина и сыворотки крови препятствовать адрено-блокирующему действию пропранолола в опытах с миометрием крысы // Фундаментальная наука и клиническая медицина: тез. докл. 12всерос. медико-биологической конф. молодых ученых. - СПб.: СПбГУ, 2009. - С. 374-375.

6. Торопов А. Л., Циркин В. И., Костяев А. А. Эффективность действия Р-адренобло-кагоров может снижаться под влиянием эндогенного сенсибилизатора p-адренорецепторов и его компонентов // Там же. - С.217-218.

7. Циркин В. И., Стрельникова А. И., Торопов А. Л., Кашин Р. Ю., Коротаева К. Н., Самоделкина Е. О. Влияние факторов внешней среды на эффективность активации клеточных рецепторов // Там же. - С. 224-225.

8. Торопов А. Л., Циркин В. И. Способность гистидина уменьшать Р-адреноблокирующее действие обзидана в опытах с продольными полосками рога матки небеременных крыс // Науке нового века - знание молодых: материалы всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых. - Ч. II. Биологические науки, ветеринарные науки, технические науки. - Киров: ВГСХА, 2010. - С. 80-84.

9. Торопов А. Л., Коротаева К. Н., Самоделкина Е. О., Циркин В. И., Вязников В. А., Проказова Н. В. Влияние лизофосфатидилхолина, яичного желтка и гистидина на адрено- и М-холинореактивность мышц// Вятский медицинский вестник. -2010. — № 1. - С. 69-75.

Список сокращений:

Ад - адреналин а-АР - а-адренорецелторы [5-АР - р-адренорецепторы АХ - ацетилхолин Гис - гистидин

ГРК - гиперкалиевый раствор Кребса ДВ - дистиллированная вода ЛФХ - лизофосфатидилхолин М-ХР - М-холинорецепторы Ниц - Ницерголин Обз - обзидан

СА - сократительная активность

ЭСБАР - эндогенный сенсибилизатор р-адренорецепторов ЯЖ - яичный желток

Цифра после сокращения означает отрицательный десятичный логарифм концентрации вещества (г/мл), например, Ад-7 = 10"7 г/мл.

Подписано в печать 18.03.2011 г. Формат 64x80/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ № 1625.

Издательство

Вятского государственного гуманитарного университета, 610002, г. Киров, ул. Красноармейская, 26, т. (8332) 673674

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Торопов, Алексей Леонидович

Введение.

Глава 1. Модуляция сократительной активности миометрия крысы эндогенными и экзогенными факторами (обзор литературы).

1.1. Модулирующее влияние сыворотки крови и некоторых других факторов на а- и р-адрено и М-холинореактивность.

1.2. Адренорецепторы.

1.3. М-Холинорецепторы.

1.4. Физиологические эффекты лизофосфатидилхолина (ЛФХ), или лизо лецитина.

1.5. Гистидин.

1.6. Триптофан.

1.7. Тирозин.

1.8. Предуктал и милдронат.

1.9. Аквапорины и влияние на их функцию БАВ.

Глава 2. Объекты и методы исследования.

Глава 3. Результаты и обсуждение собственных исследований.

3.1. Влияние адреналина на тоническую активность полосок миометрия, вызванную ГРК (серии 1-3).

3.2. Влияние и а-адреноблокаторов на ингибирующий эффект адреналина в условиях КС1-контрактуры миометрия крысы (серии 4 - 6).

3.3. Влияние 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин на эффект обзидана в условиях КС1-контрактуры миометрия крысы (серия 7).

3.4. Влияние экзогенных аналогов ЭСБАР на блокирующий эффект обзидана в условиях КС1-контрактуры миометрия крысы (серии 8 - 15).

3.5. Способность аналогов ЭСБАР проявлять |3адреносенсибилизирующую активность в присутствии кратного разведения сыворотки крови как источника ЭСБАР в условиях KCl-контрактуры миометрия крысы (серии 16 — 20).

3.6. Способность гистидина противодействовать десенситизации, вызываемой многократными кратковременными (по 10 мин) воздействиями адреналина (серия 21).

3.7. Способность гистидина модулировать сократительные эффекты адреналина на фоне ЛФХ (серия 22).

3.8. Способность гистидина модулировать сократительные эффекты адреналина на фоне яичного желтка (серии 23, 24).

3.9. Влияние ЛФХ на сократительные эффекты ацетилхолина на миометрии крысы (серии 25 — 27).

3.10. Влияние яичного желтка на сократительные эффекты ацетилхолина на миометрии крысы, в (серии 28, 29), в том числе в присутствии гистидина (серия 30).

3.11. Способность гистидина модулировать влияние адреналина на сократительную реакцию миоцитов в ответ на. замену раствора Кребса дистиллированной водой (серии 31 - 40).

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс"

Актуальность темы. Ранее (Циркин В.И., Дворянский С.А., 1997; Циркин В.И. и соавт., 1997, 2004; Мальчикова C.B. и соавт., 2003; Трухин

A.Н. и соавт., 2004; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006; Хлыбова C.B., 2007; Демина H.JT. и соавт., 2008; Пенкина Ю.А. и соавт., 2008) была установлена способность 100-, 500- и 1000-кратных разведений сыворотки крови человека повышать эффективность активации ß-адренорецепторов (ß-AP) миоцитов матки крысы, трахеи коровы, коронарной артерии свиньи, а также миокарда лягушки и крысы. Это объяснялось наличием в крови эндогенного сенсибилизатора ß-AP (ЭСБАР). Подобную ß-адреносенсибилизирующую активность проявляют гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал (Циркин В.И., Дворянский С.А., 1997; Ноздрачев и соавт., 1998; Туманова Т.В., 1998; Сизова E.H., Циркин В.И., 2006; Пенкина Ю.А. и соавт., 2008). Эти вещества были названы аналогами ЭСБАР и стали использоваться для изучения механизма действия и физиологической роли ЭСБАР. В частности, при этом в опытах с миометрием крысы было показано (Сизова E.H., Циркин

B.И., 2006), что ЭСБАР и его аналоги проявляют ßадреносенсибилизирующую активность на фоне спонтанной сократительной активности (CA) и на фоне CA, вызванной гиперкалиевым раствором Кребса

ГРК), а также окситоцином или простагландином F2a. Эта активность у сыворотки проявляется еще 20 - 80 минут после ее удаления из среды.

Показано, что сыворотка крови, т.е. ЭСБАР, и аналоги ЭСБАР восстанавливают эффективность активации ß-AP миоцитов матки, трахеи и сосудов, сниженную озоном (Сизова E.H., Циркин В.И., 2006), или кардиомиоцитов лягушки и крысы, сниженную лизофосфатидилхолином

ЛФХ), который является естественным метаболитом клеток (Пенкина Ю.А. и соавт., 2008). Эти данные позволили предположить, что механизм действия

ЭСБАР и его аналогов связан с их способностью восстанавливать конформационную структуру белков, участвующих в передачи сигнала от рецептора в клетку, в том числе а-субъединицы G-белка, а ЭСБАР и его 4 аналоги предложено рассматривать как разновидность внутриклеточных шаперонов (Пенкина Ю.А. и соавт., 2008). Таким образом, для понимания механизма действия ЭСБАР и его аналогов большой интерес могут представлять данные об их способности восстанавливать эффективность активации Р-АР, сниженную любыми воздействиями, в том числе озоном,

ЛФХ, классическими конкурентными р-адреноблокаторами, а также длительным воздействием агонистов Р-АР, при котором, как известно

Бй^ег К, ЬеАсошкг К., 1985; Вешмс I. & а1., 1986; Б^аёег С. еЬ а1., 1989;

Випетапп М. е1 а1., 1999; Сизова Е.Н., Циркин В.И., 2006), развивается десенситизация Р-АР за счет их фосфорилирования специфической киназой

Р-АР. Однако до настоящего времени эти данные либо отсутствуют (в отношении миометрия крысы это касается эффектов ЭСБАР и его аналогов при действии Р-адреноблокаторов или ЛФХ, а также в условиях осмотического шока), либо они единичны - это, например, касается способности ЭСБАР и его аналогов влиять на процессы десенситизации

Туманова Т.В. и соавт., 2004; Сизова Е.Н., Циркин В.И., 2006). Не исследовался и вопрос о способности аналогов ЭСБАР проявлять свой эффект на фоне сыворотки крови, в том числе при наличии в ней ЭСБАР.

Вместе с тем, изучение всех этих вопросов помимо теоретического значения имеет и практическую направленность, так как уже в первых исследованиях, в которых была выявлена способность гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала проявлять Р-адреносенсибилизирующую активность (Циркин В.И., Дворянский С.А., 1997; Сизова Е.Н., Циркин В.И.,

2006; Хлыбова С.В., 2007; Пенкина Ю.А. и соавт., 2008), был поставлен вопрос о возможности их применения в клинике, например, для лечения угрозы преждевременных родов или бронхиальной астмы. В последние годы стало известно, что во многих клетках организма имеются белки аквапорины, с участием которых вода переходит через поверхностную мембрану (Аяге Р., 2004; Титовец Э.П., 2007; Уиктаке У. а а1., 2008). При этом в литературе был поставлен вопрос о возможности ряда гормонов и 5

БАВ (подобно антидиуретическому гормону) влиять на процесс встраивания аквапоринов в мембрану клетки из цитозоля (ЬЫка\уа У. & а1., 1998; МаппеШ К. е1 а1., 1999; Уаэш Н. & а1., 2008; БопаИсег Р. & а1., 2008). Мы предположили, что адреналин может влиять на этот процесс, а гистидин и другие аналоги ЭСБАР повышать эффективность влияния адреналина на этот процесс.

Поддерживая представление ряда авторов (Циркин В.И., Дворянский С.А., 1997; Ноздрачев и соавт., 1998; Туманова Т.В., 1998; Сизова Е.Н., Циркин В.И., 2006) о том, что ЭСБАР может играть важную физиологическую роль как регулятор эффективности взаимодействия катехоламинов (гормонального и медиаторного происхождения) с Р-АР, мы считали возможным продолжить изучение механизма действия ЭСБАР и его аналогов и тем самым расширить представление о физиологической роли ЭСБАР.

В работе были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать способность сыворотки крови (как источника ЭСБАР) и его аналогов противодействовать влиянию Р-адреноблокаторов на ингибирующий эффект адреналина.

2. Оценить влияние сыворотки крови человека (как источника ЭСБАР) на проявление Р-адреносенсибилизирующей активности гистидина и других аналогов ЭСБАР.

3. Изучить способность гистидина, как аналога ЭСБАР, противодействовать развитию десенситизации, развивающейся при непродолжительных многократных воздействиях адреналина.

4. Исследовать влияние ЛФХ и куриного яичного желтка (как источника ЛФХ), в том числе при наличии в среде гистидина, на сократительные эффекты адреналина и ацетилхолина.

5. Оценить способность адреналина влиять на транспорт воды в миоцитах матки и возможность гистидина модулировать её.

Новизна исследования. В опытах с миометрием небеременных крыс, подтвердив способность адреналина вызывать дозозависимый и обратимый ингибирующий эффект, впервые удалось показать, что в условиях калиевой контрактуры этот эффект реализуется только за счет активации рг-АР, а не

Р1-АР. Подтвердив способность 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин (за счет наличия в ней ЭСБАР), а также гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала как аналогов ЭСБАР усиливать ингибирующий эффект адреналина в опытах с миометрием крыс, впервые детально изучено проявление этого свойства в условиях тонуса, вызванного ГРК. Впервые установлена способность сыворотки крови (1:100) как источника ЭСБАР и аналогов ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) препятствовать эффекту Р-адреноблокаторов обзидана). Это удалось продемонстрировать в опытах с миометрием крыс в условиях тонуса, вызванного ГРК. Впервые показана способность аналогов

ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) проявлять Р-адреносенсибилизирующую активность на фоне сыворотки крови (как источника ЭСБАР). Тем самым доказано, что сыворотка крови не препятствует проявлению Р-адреносенсибилизирующей активности аналогов

ЭСБАР. Подтверждена способность гистидина, как аналога ЭСБАР, препятствовать развитию десенситизации Р-АР. Это впервые удалось продемонстрировать в условиях многократного кратковременного воздействия адреналина на миометрий крысы в условиях спонтанной СА.

Впервые выявлена способность ЛФХ и яичного желтка (как источника ЛФХ) снижать эффективность активации р2-АР миометрия крысы, и показана возможность ее восстановления под влиянием гистидина. Впервые установлено, что способность ЛФХ снижать эффективность активации передачи сигнала в отношении М-холинорецепторов (М-ХР) миометрия крысы выражена в меньшей степени, чем в отношении Р-АР. Тем самым 7 впервые выявлена относительная специфичность хемоблокирующего действия ЛФХ. Новым является и обнаружение способности гистидина усиливать ингибирующее влияние адреналина на вход воды в миоциты матки крысы, которое, как впервые показано в данной работе, обусловлено активацией Рг-АР. Результаты работы позволили сформулировать принципиально важное положение о том, что в основе механизма действия ЭСБАР и его аналогов (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) лежит их способность повышать сродство Р2-АР к агонисту, а также положение о том, что ЭСБАР и его аналоги способны репарировать повреждения, возникающие в процессе функционирования клеток, в том числе за счет восстановления конформационной структуры в-белка и/или других посредников, участвующих в передаче сигнала от рецепторов внутрь клетки, следствием чего является рост эффективности этой передачи.

Научная значимость работы. Результаты исследования расширяют представление о механизме действия ЭСБАР и его аналогов, а также дают новые доказательства физиологической роли ЭСБАР. В частности, выдвинуто представление об ЭСБАР и его аналогах как факторах, повышающих эффективность активации метаботропных (32-АР за счет увеличения сродства этих рецепторов к агонисту, а также как факторах, препятствующих действию р-адреноблокаторов. Результаты исследования обосновывают представление о ЛФХ как модуляторе рг-адрено- и М-холинорецепторов.

АР у пациентов с дефицитом адренергических воздействий и снижения десенситизации в отношении вводимых в организм Р-адреномиметиков например, при бронхиальной астме), а также в качестве антагонистов Радреноблокаторов при их избыточном введении пациентам. Для диетологии важным является положение о том, что естественные компоненты пищи 8 гистидин, триптофан и тирозин после их приема могут оказать существенное влияние на процессы регуляции деятельности висцеральных систем организма и мозга. Для клиницистов представляют интерес сведения о способности милдроната и предуктала, широко применяемых в медицине как метаболические препараты, оказывать Р-адреносенсибилизирующее влияние.

Положения, выносимые на защиту.

1. ЭСБАР, содержащийся в сыворотке крови человека, и его аналоги -гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал можно рассматривать в качестве антагонистов р2-адреноблокаторов, так как они в 10 - 100 раз повышают пороговую концентрацию обзидана, в которой он препятствует действие адреналина в опытах с миометрием крысы. Гистидин (как аналог ЭСБАР) способен восстанавливать эффективность активации р2-АР миометрия крысы, сниженную под влиянием ЛФХ или вследствие десенситизации, вызываемой многократным воздействием адреналина.

2. Сыворотка крови человека, независимо от наличия в ней ЭСБАР, не препятствует способности аналогов ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) усиливать ингибирующее действие адреналина как агониста р2-АР в опытах с миометрием крысы, что указывает на возможность внутривенного введения аналогов ЭСБАР для повышения эффективности активации р2-АР в клинических условиях.

3. ЭСБАР и его аналоги (гистидин, триптофан, тирозин, милдронат и предуктал) предлагается рассматривать в качестве факторов, повышающих сродство р2-АР к агонисту, и как внеклеточные и внутриклеточные шапероны, т.е. как вещества, участвующие в репарации возникающих в процессе функционирования клеток повреждений, в том числе за счет восстановления конформационной структуры в-белка и/или других посредников, следствием чего является рост эффективности передачи сигнала от р2-АР внутрь клетки.

4. Перспективно применение аналогов ЭСБАР в клинической практике как антагонистов р2-адреноблокаторов, как пролонгаторов антидесенситизаторов, синергистов) действия р2-адреномиметиков и как экзогенных шаперонов, восстанавливающих эффективность активации (З2-АР, сниженную под влиянием ЛФХ и других повреждающих воздействий.

Вятского государственного гуманитарного университета (2008, 2009), на заседании Кировского отделения физиологического общества имени И.П.

Павлова (Киров, 2009). Результаты представлены в материалах VIII

Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО

РАН «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар, 2009), VIII юбилейной российской научной конференции с международным участием «Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии» (Москва, 2009), XIV международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (Москва,

2009), всероссийской научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и соискателей, посвященной 80-летию Вятской ГСХА (Киров,

2010), на XXI съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Калуга, 2010), всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2010).

По материалам диссертации опубликовано 15 работ, в том числе 4 статьи в журналах, включенных в Перечень ВАК России.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Торопов, Алексей Леонидович

выводы

1. В опытах с деполяризованным гиперкалиевым раствором Кребса

-К Л

ГРК) миометрием крысы адреналин (10" -10" г/мл) вызывает дозозависимый и обратимый ингибирующий эффект. Он реализуется за счет активации р2-АР, так как его величина при действии адреналина (10" г/мл) не меняется в присутствии селективных ргадреноблокаторов атенолола

10"9-106 г/мл) и метопролола (10 9—10"6 г/мл), но дозозависимо снижается при воздействии неселективного Р-адреноблокатора обзидана (10"9-10 6 г/мл).

2. В опытах с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы о п ингибирующий эффект адреналина (10" или

10"' г/мл) усиливается под влиянием 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин, используемого в качестве источника ЭСБАР, и аналогов ЭСБАР - гистидина (10"4 г/мл), триптофана (10"4 г/мл), тирозина (10"5, 10"4 г/мл), милдроната (10"6 г/мл) и предуктала (10"6 г/мл). Это позволяет рассматривать ЭСБАР и аналоги ЭСБАР как факторы, повышающие эффективность активации метаботропных р2-АР.

3. В опытах с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы 100-кратное разведение сыворотки крови небеременных женщин, так же как и аналоги ЭСБАР — гистидин

10"5, 10"4 г/мл), триптофан (10"5, 10"4 г/мл), тирозин (Ю-5, 10"4 г/мл), милдронат (10"6 г/мл) и предуктал (10"6 г/мл) повышают в 10-100 раз пороговую концентрацию обзидана, при которой у адреналин (10' г/мл) уменьшает свой ингибирующий эффект. Это говорит о том, что а) ЭСБАР и его аналоги могут снижать эффективность действия р2-адреноблокаторов; б) одним из механизмов действия ЭСБАР и его аналогов является их способность повышать сродство р2-АР к агонисту (возможно, за счет восстановления их конформационной структуры).

4. В опытах с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы гистидин (10"4 г/мл), триптофан (10"4 г/мл), тирозин

10"4 г/мл), милдронат

10"6 г/мл) и предуктал (10"6 г/мл) сохраняют способность усиливать ингибирующее действие адреналина (10"8 г/мл) в присутствии 100-кратного разведения сыворотки крови небеременных женщин. Это означает, что а) сыворотка крови, независимо от наличия в ней ЭСБАР, не препятствует действию аналогов ЭСБАР; б) механизм действия ЭСБАР и его аналогов однотипен; в) поступающие в кровь (при пищеварении или при внутривенном введении) аналоги ЭСБАР могут проявлять присущую им ß2-адреносенсибилизирующую активность.

5. В опытах с интактным миометрием крысы ингибирующий т эффект адреналина (10" г/мл) при периодическом (по 10 мин, с 10-минутным интервалом) его воздействии постепенно снижается. Гистидин (10~6 г/мл) восстанавливает ингибирующий эффект адреналина и сохраняет его на этом уровне при последующих воздействиях совместно с адреналином. Это говорит о том, что а) гистидин препятствует развитию десенситизации р2-АР; б) аналоги ЭСБАР перспективно применять в клинической практике в качестве пролонгаторов (синергистов) р2-адреномиметиков.

6. В опытах с интактным или с деполяризованным (ГРК) миометрием крысы ЛФХ (10"4 г/мл) и яичный желток (в разведении 1:50) как источник ЛФХ снижают (с 10-минутным латентным периодом)

О *7 Л ингибирующее действие адреналина (10" или 10"' г/мл), а гистидин (10 г/мл) восстанавливает это действие адреналина. Это означает, что а) ЛФХ уменьшает эффективность активации Р-АР; б) подтверждается гипотеза об универсальной способности гистидина восстанавливать передачу сигнала от Р-АР внутрь клетки, независимо от причины, вызывающей ее нарушение; в) аналоги ЭСБАР перспективно применять в' клинической практике в качестве веществ, восстанавливающих эффективность активации Р-АР.

115 сигнала от М-холинорецепторов (ХР) внутрь клетки, но способность ЛФХ в отношении М-ХР выражена в меньшей степени, чем в отношении р-АР; б) хемомодулирующая активность ЛФХ зависит от вида рецепторов, ассоциированных с в-белком.

8. В опытах с интактным миометрием крысы адреналин (1С)"6 г/мл) снижает скорость развития напряжения, вызываемого заменой раствора Кребса на дистиллированную воду. Этот эффект блокируется обзиданом (10"6 г/мл), но не ницерголином (10"6 г/мл) и усиливается (в отношении более низкой концентрации адреналина, равной 10"7 г/мл) гистидином в концентрации 10"4 г/мл. Эти данные указывают на то, что а) адреналин, активируя р2-АР, снижает скорость перехода воды из внеклеточной среды внутрь миоцитов (возможно, за счет торможения переноса аквапоринов из цитозоля в поверхностную мембрану миоцитов); б) гистидин (как аналог ЭСБАР) способен повышать эффективность активации р2-АР независимо от конечного результата этой активации.

Практические рекомендации.

1. При использовании Р-адреноблокаторов как лекарственных средств рекомендуется учитывать наличие в организме ЭСБАР, содержание которого может возрасти после приема пищи, богатой гистидином, триптофаном и тирозином, а также о способности милдроната и предуктала как лекарственных средств проявлять Р-адреносенсибилизирующую активность, т.е. снижать эффективность действия р-адреноблокаторов.

2. Рекомендуется изучить возможность применения аналогов ЭСБАР (гистидина, триптофана, тирозина, милдроната и предуктала) в клинической практике как антагонистов р2-адреноблокаторов, как пролонгаторов действия р2-адреномиметиков и как экзогенных шаперонов, восстанавливающих эффективность активации р2-АР, сниженную под влиянием ЛФХ и других повреждающих воздействий.

Выражаю искреннюю благодарность и признательность моему научному руководителю - доктору медицинских наук, профессору Циркину Виктору Ивановичу за помощь в организации и выполнении диссертационного исследования. Также благодарю доцента кафедры биологии ВятГТУ, кандидата биологических наук Трухину Светлану Ивановну за помощь и поддержку в проведении исследований. За помощь в работе выражаю благодарность руководству кировского НИИ гематологии и перливания крови и доктору медицинских наук A.A. Костяеву. Благодарю всех сотрудников, аспирантов и выпускников кафедры нормальной физиологии КГМА и кафедры биологии ВятГТУ, в том числе лично кандидата биологических наук Куншина Алексея Александровича за ценные советы и консультации в проведении исследований.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Торопов, Алексей Леонидович, Киров

1. Авакян А.Э., Ткачук В.А. Структурная и функциональная организация систем передачи сигнала через рецепторы, сопряженные с G-белками. // Рос. физиол. журн. 2003. - Т.89, № 2. - С.219-239.

2. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций — М., Наука, 1994.-186 с.

3. Агаджанян H.A., Тель JI.3., Циркин В.И., Чеснокова С.А. Физиол. человека М.: Медицинская книга. - 2001. - 527 с.

4. Айвазашвили З.И., Игнатков В.Я., Бабичев В.Н. Модулирующее действие эстрадиола на чувствительность одиночных нейронов преоптической области гипоталамуса к норадреналину. // Бюлл. эксп. биологии и мед.- 1990.- Т. 104, № 4.- С. 317-318.

5. Бабская Н.Е., Ашмарин И.П. Действие дипептидов GL Y-PRO, PRO-GLY, глицина и пролина на кардиотропные эффекты ацетилхолина. // Бюл. эксп. биологии и мед.- 1998.- Т. 124, № 8.- С.139-141.

6. Баскаков М.Б., Медведев М.А. Механизмы межклеточной и внутриклеточной сигнализации в гладких мышцах. // Мат. симпозиума, посвящ. 115-летию каф. физиологии ТГУ и СГМУ- 2004.- С.7-25.

7. Белизи С., Назарова H.A., Климова И.А., Прокофьев В.Н., Пушкина Н.В. Антиоксидантные свойства лактоферрина из женского молока. // Бюл. эксп. биол. и мед. 1999. - № 5. - С. 523-525.

8. Бердышева JI.B. Кинетика ai-адренергической сократительной реакции семявыносящего протока крысы на фоне действия карбахола. // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова,- 2004,- Т.90, № 8. С.238.

9. Братухина С.В Адренергический механизм при беременности и в родах, его роль в патогенезе слабости родовой деятельности. //Дисс. канд. мед. наук. Киров, 1997. 257 с.

10. Ватанабе A.M., Линдеманн Дж.П., Механизмы адренергической и холинергической регуляции сократимости миокарда. // Физиология ипатофизиология сердца. под ред. поф. Розенштрауха JI.B. - М. Медицина. -1990.-с. 124-168.

11. Вдовиченко Ю.П., Талько О.В. Шляхи зниження акушерських та перинатальних ускладнень у жшок bîkom понад 40 роюв. // Перинатол. та пед1атр1я. 2003.- № 2.- С. 12-16.

12. Гаврилов В.Б., Лычковский A.B., Шостак Е.П., Конев C.B. Флуоресцентный анализ содержания тирозина в плазме крови. // Журн. приют, спектроскопии. 1998. - №3. - С.366-371.

13. Галявич A.C., Галеева З.М., Балеева Л.В. Эффективность и переносимость милдроната при лечении пациентов с хронической сердечной недостаточностью. // Рос. кардиол. журн 2005, № 5.- С. 55-59.

14. Гланц С. Медико-биологическая статистика.- М.:Практика.1999. 459с.

15. Демина Н.Л., Циркин В.И., Тарловская Е.И., Кашин Р.Ю. а и ß -адрено-, М-холиномодулирующая активность сыворотки крови . при артериальной гипертензии. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. -2008. №2.- С. 16-22.

16. Денисюк Т. А., Покровский М.В. Актопротекторное действие регуляторов энергетического обмена и фосфолипидов при алиментарных нарушениях гомеостаза. // Курск, науч.-практ. вестн. "Человек и его здоровье".-2005,-№ 1.-С. 11-15.

17. Елаева Е. Е. Исследование противоаритмической активности композиций, созданных на основе аминокислот. // Дис. канд. мед. наук -Мордовский государственный университет (МордГУ)., 1999. С.

18. Западнюк В.И., Купраш Л.П., Заика М.У., Безверхая И.С. Аминокислоты в медицине. Киев: Здоровье, 1982, С. 140-151.

19. Зарудий Ф.С., Лазарева Д.Н. Адреномиметики и состояние адренорецепторов при бронхиальной астме. // Фармакология и токсикология.- 1986.- Т. 49.-№ 6.- С. 103-111.

20. Затейщиков Д.А., Данковцева E.H. ß-Адреноблокаторы в современнойкардиологии: метопролола сукцинат. // Кардиология. 2007, №8, - С. 87-92.119

21. Збарский И.Б. Большая медицинская энциклопедия- М., Медицина, 1984, *** с.

22. Киршенблат Я.Д. Практикум по эндокринологии. М.:Высшая школа, 1969.-256 с.

23. Кисель М.А., Шадыро О.И., Юркова И.Л. Влияние лизофосфатидилхолина на радиционно-инициированное перекисное окисление липидов в липосомах. // Радиац. биол. радиоэкол. — 2001.— № 1 — С. 20-23.

24. Кононова Т.Н. Роль эндогенных Р-адрено и М-холиномодуляторов в регуляции деятельности систем организма человека. // Дис. канд. биолог, наук. Киров, ВятГГУ, 2004. - 173 с.

25. Коротаева К. Н. Влияние лизофосфатидилхолина на эффективность активации М-холинорецепторов изолированного миокарда крысы. // Материалы I Веросс. научн. конф. «Молодежь и наука на сервере». Том II. -Сыктывкар, 2008. С. 226-228.

26. Кравченко В.А. Патогенетическое обоснование применения антиги-поксантов и гепатопротекторов в комплексном лечении перитонита угинекологических больных: (эксперим.-клинич.исслед.): Автореф. дис.канд. мед. наук СПб., 2005. - 26 с.

27. Красникова Т.Д., Габрусенко С.А. ß-адренергические рецепторы сердца в норме и при сердечной недостаточности. // Успехи физиологических наук, 2000. - Т. 31, № 2. - С. 35-50.

28. Кукес В.Г., Сычев Д.А., Андреев Д.А. Клиническая фармакология ß-адреноблокаторов. //Рус. мед. журн. 2005, вып. 13(14) С. 932-938.

29. Куншин А. А. Влияние сыворотки крови человека на М-холино- и a-, ß-адренореактивность гладких мышц желудка крысы. // Автореф. дисс. .к.б.н. — Киров, ВятГГУ, 2006. 23 с.

30. Куцарев И.П. Показатели жидкостных систем человека в норме: Справочник для врачей и клинических лаборантов. Ростов-на-Дону: «Феникс», 2003.-110 с.

31. Литвинко H.H., Кисель М.А. Эндогенные фосфолипазы А2: структура и функции. Мн.: Навука i тэхшка, 1991- 270с.

32. Лишманов Ю.Б., Маслов Л.Н., Реброва Т.Ю. Влияние энкефалинов на активность периферических стресс-лимитирующих систем в процессе развития аритмий, вызванных острой ишемией миокарда. // Бюлл. Томского научного центра АМН СССР. 1991.- № 3. - С. 3-14.

33. Лукьянцева Г.В., Сергеев И.Ю., Копылова Т.Н., Самонина Т.Е., Герман C.B. Влияние амилина на тонус изолированного кольцевого препарата аорты крысы. // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 2001. Т.131, № 10. - С.375-377.

34. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. М.: ООО «Издательство Новая Волна», 2000.- Т.1., 540с.; Т.2, 608с.

35. Морозова М.А. Роль нервных и гуморальных факторов в срочной регуляции ß-адренореактивности миометрия человека и животных. // Дис.канд. биол. наук.-Киров, 2000, 160 с.

36. Музаффаров Д.У. Сродство М-холиномиметиков к М-холинорецепторам различных тканей. // Эксперим. и клин, фармакол — 2000. Т.63, № 1. - С.24-28.

37. Насырова А.Г., Сагдеев Н.Р., Нигматуллина P.P. Модуляция оксидом азота адренергических влияний на насосную функцию сердца крыс. // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова 2004. - Т.90, № 8. - С.444.

38. Ноздрачев А.Д., Туманова Т.В., Дворянский С.А., Циркин В.И., Дармов И.В., Дробков В.И. Активность ряда аминокислот как возможных сенсибилизаторов ß-адренорецепторов гладкой мышцы. // Доклады РАН. — 1998. Т. 363, № 1. - С. 133-136.

39. Осокина A.A. Клинико-лабораторная характеристика Радренергического механизма при угрозе преждевременных родов. //. Дис. канд. мед. наук. Киров, 1998. - 150 с.

40. Пенкина Ю. А. Модуляция ß-адренореактивности изолированного миокарда при воздействии сыворотки крови и ряда веществ. // Дис. канд. биол. наук. Киров, КГМА, 2007. - 161 с.

41. Попов A.A., Лоленко A.B., Скрипкин С.А., Попова Е.А., Любченко A.A., Утц Н.В. Сочетанное применение 7,5% растора натрия хлорида и адаптогенов при травматическом шоке на догоспитальном этапе. // Скорая мед. помощь. 2005. - Т.6, № 3.- С. 19-22.

42. Попова О.В., Коротаева К.Н. Изменение амплитуды вызванныхсокращений изолированного миокарда человека, показателей вер и ээг подвлиянием 1-гистидина. // Фундаментальная наука и клиническая медицина:123

43. Тезисы 13 Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье», С-Петербург, 24 апреля 2010. — СПб: СПбГУ, 2010. С. 158-159.

44. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Коротаева A.JI Влияние люофосфатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внутрь клетки. Обзор. // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 1. - С. 38-46.

45. Розен В.Б. Основы эндокринологии — М.: Изд-во. МГУ. 1994. — 384 с.

46. Рудзит В.К. Диабетогенные метаболиты триптофана как причина сахарной болезни. Рига: «Зинтане», 1981. — 83 с.

47. Сазанов A.B. Изучение механизмов долгосрочной модуляции ß-адренореактивности миометрия человека и животных. // Дис. канд. биол. наук. Киров, 2000, 157 с.

48. Сазанов A.B., Циркин В.И., Дворянский С.А. Прямое влияние гидрокортизона на сократительную активность и ß-адренореактивность продольных полосок изолированного миометрия небеременных крыс. // Вятский медицинский вестник.— 1999. № 3. — С. 32-39.

49. Сазанова М. Л.Влияние сыворотки пуповинной крови человека на гладкие мышцы матки и сосудов пуповины. // Дис. канд. биол. наук — Киров, 2002.-180 с.

50. Сазанова М.Л., Циркин В.И., Дворянский С.А. Эндогенные утероактивные факторы сыворотки пуповинной крови человека. // Вятский медицинский вестник, 2003. № 1. - С.38-44.

51. Северин Е.С. (ред.) Биохимия: Учебник. М.: ГЭОТАР - МЕД, 2003. -784 с.

52. Сергеев П.В., Шимановский H.JL, Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ. Волгоград., изд-во «Семь ветров», 1999.-640 с.

53. Сидоренко Б. А., Преображенский Д.В. Ишемия миокарда: от понимания механизмов к адекватному лечению. // Кардиология- 2000. -Т.40. № 9 (приложение).- С. 106-119.

54. Сизова Е. Н. Физиологическая характеристика эндогенного сенсибилизатора ß—адренорецепторов и других гуморальных компонентов Ь-адренерецепторного ингибирующего механизма. // Дисс. канд. биолог, наук. Киров, 1998. - 289 с.

55. Сизова E.H., Циркин В.И. Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинореактивности. — Киров: Изд-во В СЭИ, 2006.-183 с.

56. Сизова E.H., Циркин В.И., Костяев A.A., Утемов C.B. Влияние озонированного раствора Кребса на тоническую активность и ß-адренореактивность гладких мышц коронарной артерии свиньи. // Российский кардиологический журнал 2002, №6 (38). - С.66-71.

57. Сизова E.H., Циркин В.И., Трухин А.Н. Наличие в крови и ликворе человека эндогенных модуляторов М-холинорецепторов. // Вестник Поморского университета. Серия «Физиологические и психолого-педагогические науки». 2005. - №2(6). - С. 22-31.

58. Сизова E.H., Циркин В.И., Туманова Т.В. Влияние пищевых аминокислот на сократительную способность, ß-адрено- и М-холинореактивность гладких мышц крыс. // Вопросы питания. 2008. — Т.77. №5.-С. 26-32.

59. Сизова E.H., Циркин В.И., Туманова Т.В., Костяев A.A. Способность гистидина, триптофана, тирозина, триметазидина, милдроната и сыворотки i крови уменьшать ß-адреноблокирующий эффект озона. // Современные наукоемкие технологии. — 2004. № 3. - С. 21-26.

60. Суслова И.В., Коротаева A.A., Проказова Н.В. Изменение параметровравновесного связывания Н.-хинуклидинилбензилата на мембранах126предсердия кролика под действием лизофосфатиднлхолина. // Доклады РАН. 1995.-Т. 342. №2.-С. 273.

61. Талаева Т.В., Шумаков В.А., Братусь В.В. Энергетический метаболизм миокарда в условиях коронарной недостаточности; возможности его фармакологической коррекции. // Укр. кардюл. ж. 2005. - №3. - С.9-16.

62. Терещенко С.Н., Голубев A.B., Косицына И.В., Джаиани H.A., Кочетов А.Г. Триметазидин MB в комплексной терапии острого инфаркта миокарда на фоне сахарного диабета 2-го типа. // Кардиология.-2006.-Т.46,№2.-С.31-34.

63. Титовец Э.П. Аквапорины человека и животных: фундаментальные и клинические аспекты. Минск: Белорус, наука, 2007. - 239 с.

64. Ткачук В.А. Гормональная регуляция транспорта Са2+ в клетках крови и сосудов. // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1998. - Т. 84, № 10. - С. 1006-1018.

65. Ткачук В.А., Авакян А.Э. Молекулярные механизмы сопряжения G-белков с мембранными рецепторами и системами вторичных посредников. // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2003. — Т.89. № 12.-С 1478-1490.

66. Ткачук В. А. Рецепция и внутриклеточная сигнализация. // Современный курс классической физиологии. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2007. - С. 325-348.

67. Трухин А.Н. Влияние эндогенных модуляторов ß-адрено- и М-холинорецепторов на хемореактивность миометрия, миокарда и вариабельность сердечного ритма. // Дис. к.б.н. Киров, 2003. - 287с.

68. Трухин А.Н., Циркин В.И., Сизова E.H. Повышение ß-адренореактивности миокарда лягушки под влиянием гистидина. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. — Т. 138, №8. -С. 144-131.

69. Туманова Т.В. Изучение природы эндогенного сенсибилизатора ßадренорецепторов и других факторов, регулирующих сократимость иадренореактивность гладкой мускулатуры.//Дис. к.б.н. Киров, 1998.- 236 с.127

70. Туманова Т.В., Сизова E.H., Циркин В.И. Способность L-гистидина снижать десенситизацию миометрия к адреналину. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2004. - Т.138. № 10. - С. 364-367.

71. Турпаев Т.М., Путинцева Т.Г. Биохимический механизм саморегуляции холинергического медиаторного процесса. // Усп. физиол. наук, 1974. Т.5. № 1 - С. 17-47.

72. Ульянинский JI.C., Звягинцева М.А., Кошарская И.Л. Пептид дельта-сна как модулятор действия медиаторов на сердце. // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1990. - Т. 109. № 5. - С. 419-420.

73. Хлыбова С.В Состояние адренергического механизма и содержание свободных аминокислот при физиологическом течении гестационного процесса и ряде акушерских осложнений.//Дисс. .д.м.н. Киров, 2007.- 297 с.

74. Хлыбова C.B., Циркин В.И. Содержание свободных аминокислот при физиологическом течении гестационного процесса и ряде акушерских осложнений. // Медицинский альманах (Н. Новгород). 2008. — № 5 (4). — С. 68-71.

75. Циркин В.И., Дворянский С.А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции). Киров, 1997. — 270 с.

76. Циркин В.И. Трухина С.И. Физиологические основы психической деятельности и поведения человека. М.: Медицинская книга, 2001. — 524с.

77. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сазанова M.JL, Дворянский С.А. Физиологические свойства миоцитов артерий и вены пуповины человека и влияние на них сыворотки пуповинной крови. // Доклады РАН. 2003. -Т.388, № 3. - С. 426-429.

78. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова E.H., Туманова Т.В. Изучение физиологических свойств эндогенного сенсибилизатора ß-адренорецепторов (ЭСБАР) и его возможных компонентов. // Доклады РАН. 2004. - Т.398. № 4. - С. 563-566.

79. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Куншин A.A. Влияние сыворотки крови человека на М-холинореактивность гладких мышц желудка крысы. // Доклады РАН. 2007 - Т.414. № 3. - С. 419-422.

80. Циркин В.И., Кононова Т.Н., Сизова E.H., Попова И.В., Вахрушева A.C. Изменение ß-адрено- и М-холиномодулирующей активности сыворотки крови и мочи при бронхиальной астме. // Физиология человека. 2008. -Т.34. -№ 3. — С. 1-4.

81. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Кашин Р.Ю. Модуляция эффективности активации а-адренорецуепторов гладких мышц почечной артерии коровы. // Доклады РАН. 2009. - Т.425. № 4. - С. 561-566.

82. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма. М.: Изд-кий дом «Русский врач», 2001.-144с.

83. Шишкина Г.Т., Дыгало H.H. Молекулярная физиология адренорецепторов. // Успехи физиол. наук. 1997. - Т.28. № 1. - С. 61-74.

84. Шмушкович Б.И., 2001 цит. по Чучалин А.Г. Бронхиальная астма. -М.: ИА «Русский врач», - 2001. - 144с.

85. Шушканова Е.Г. Механизмы регуляции адренореактивности миометрия человека и животных. // Дисс. канд. биолог, наук. Киров, 1997. -244 с.

86. Agre P. Nobel Lecture. Aquaporin water channels. // J. Biosci Rep.- 2004. -Vol. 24, №3.-P. 127-163.

87. Alves M., Oliveira P., Carvalho R. Mitochondrial preservation in celsior versus histidine buffer solution during cardiac ischemia and reperfusion. // Cardiovasc Toxicol. 2009. Vol. 9, № 4. -P.185-193.

88. Arriza J., Dawson Т., Simerley R. et al. The G-protein-coupled! receptor kinases b-ARK 1 and b-ARK 2 are widely distributed at synapses in rat brain. // J. Neurosci. 1992. - Vol.12, № 10. - P. 4045-4055.

89. Benchekroun M., St-Pierre S., Foumier A. et al Caracterisation des resepteurs du neuropeptide Y sur la trachee de cobaye. // MIS: Med.Sci. 1992. -Vol. 8, Sappl.2. - P. 17.

90. Benovic J., StrasserR., Caron M. et al. (3-Adrenergic receptor kinase: Identification of a novel protein kinase that phosphorylates the agonist-occupied form of the receptor. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. - Vol. 83. - P. 27972801.

91. Bohm S., Grady E., Bunnett N. Regulatory mechanisms that modulate signaling by G-protein-coupled receptors. // Biochim. J. 1997. - Vol. 322. - P.l-18.

92. Bordeleau L., Gailis L., Fournier D., Morissette M., Di Paolo T., Daleau P. Cut-off phenomenon in the protective effect of alcohols against lysophosphatidylcholine-induced calcium overload. // Pflugers Arch. 2005. -Vol. 450, №5. - P.292-297.

93. Boulton A. Phenylethylalaninergic modulation of catecholaminergic neurotransmission. // Prog. Neuro-Psychopharmacol. and Biol. Psychiat 1991. -Vol. 15, №2.-P. 139-156.

94. Brodde O., Bruck H., Leineweber K. Cardiac adrenoceptors: physiological and pathophysiological relevance. // J. Pharmacol. Sci. 2006. - Vol. 100, № 5. -P. 323-337.

95. Bunemann M., Lee K., Pals-Rylaarsdam R., Roseberry A., Hosey M. Desensitization of G-protein-coupled receptors in the cardiovascular system. // Annu. Rev. Physiol. 1999. - Vol. 61. -P.169-192.

96. Chen Min, Xiao Chun-Yang, Hashizume H., Abiko Y. Phospholipase A2 is not responsible for lysophosphatidylcholine-induced damage in cardiomyocytes. // Amer. J. Physiol. 1998. Vol, 275, № 5. - H1782-H1787.

97. Choi S., Park S., Liang GH., Kim J.A., Suh SH. Superoxide generated by lysophosphatidylcholine induces endothelial nitric oxide synthase downregulation in human endothelial cells. // Cell Physiol Biochem. 2010 Vol.25, № 2 - 3. - P. 233-240.

98. Coelho E.,Ballejo G., Salgado M Nitric oxide blunts sympathetic response of pregnant normotensive and hypertensive rat arteries. // Hypertension 1997. -Vol. 30, №3.-P. 585-588.

99. Coleman B., Patel D., Carpentier R. Adrenergic-mediated effects of cocaine on force-frequency relationship. // FASEB J.- 1997- Vol. 11, №3.- P.498.

100. Croset M., Brossard N., Polette A., Lagarde M. Characterization of plasma unsaturated lysophosphatidylcholines in human and rat. // Biochem J. 2000.- Vol. 345, Ptl.-P. 61-67.

101. Dalmau M., Lim S., Wang SW. pH-triggered disassembly in a caged protein complex. //Biomacromolecules.- 2009.- Vol 10, № 12. -P.3199-3206.

102. Datte J., Gohlke P., Pees C., Ziegler A. At receptor inhibition affects the noradrenaline sensitivity in isolated portal vein of normotensive rat // J. Cell Biol.,' 2000, Vol. 148, № 2 -P.177-187.

103. Deng HF, Xiong Y. Effect of pravastatin on impaired endothelium-dependent relaxation induced by lysophosphatidylcholine in rat aorta. // Acta Pharmacol Sin. 2005. Vol. 26, № 1.- P. 92-98.

104. Doi H., Masubuchi Y., Narimatsuu S., Nishigaki R., Horie T. Salicylic acid-induced lipid peroxidation in rat liver microsomes. // Res. Commun. Mol. Pathol, and Pharmacol. 1998. - Vol.100, № 3. - P. 265-271.

105. Duo Q., Huang H., Xie Z., Zheng X., Liao D. Защитное действие онихина при вызываемом лизофосфатидилхолином нарушении эндотелий-зависимой вазорелаксации. кит. // Zhongguo dongmai yinghua zazhi. - 2001. - Vol.9, №1. -P.27-30.

106. Ezimokhai M. Human chorionic gonadotrophin alters isolated vascular smooth muscle reactivity. // Hypertens. Pregnancy.- 2000. Vol. 19, № 1. - P. 150.

107. Fearon I. OxLDL enhances L-type Ca2+ currents via lysophosphatidylcholine-induced mitochondrial reactive oxygen species (ROS) production. // Cardiovasc Res. 2006. - Vol.69, №4. - P.855-864.

108. Ferguson S., Downey W., Colapietro A. et al. Role of {3-arrestin in mediating agonist-promoted G protein-coupled receptor internalization. // Science.-1996.-Vol. 271, № 19. -P.363-366.

109. Flavahan N. Lysophosphatidylcholine modifies G protein-dependent signaling in porcine endothelial cells. // Am. J. Physiol. 1993. - Vol. 264, № 3, Pt2. - H722-H727.

110. Freedman R., Sabharwal S., Moten M., Migagly P. Local temperature modulates al- and a2- adrenergic vasoconstriction in man. // Amer. J. Physiol.-1992.- Vol. 263. № 4, pt. 2.- H 1197- H1200.

111. Fuchs В., Schiller J. Lysophospholipids: their generation, physiological role and detection. Are they important disease markers? // Mini Rev Med Chem. -2009. Vol. 9, № 3.- P.368-378.

112. Gailis L., Lamarche J., Boudriau S., Chahine M., Daleau P. Ethanol delays and reverses lysophosphatidylcholine-induced calcium overload in neonatal rat heart cells. // Pflugers Arch.- 2001.- Vol. 443, №1.- P. 48-53.

113. Gether U., Kobilka B. G-protein-coupled receptors. II. Mechanism of agonist activation. // J. Biol. Chem.- 1998.- Vol. 273. № 29 P. 17979-17982.

114. Gong Hai-Bin, Han Qi-De, Действия свободных радикалов кислорода на агадренорецепторы миокарда и их подтипы у крыс. // Shengli xuebao, — 1996, -№1,-Р-48-52.

115. Goodman О.В., Krupnick J.G., Santini F. et al. |3-Arrestin acts as a clathrin adaptor in endocytosis of P-adrenergic receptor. // Nature. 1996. - Vol. 383. № 3 P. 447-450.

116. Grossman N., Schneid N., Reuveni H., Halevy S., Lubart R. 780 nm lowpower diode laser irradiation stimulates proliferation of keratinocyte cultures:1341.volvement of reactive oxygen species. // Lasers Surg, and Med. 1998. -Vol.22, №4.-P. 212-218.

117. Gupta J., Prasad K. Mechanism of H202-induced modulation of airway smooth muscle. // Amer. J. Phisiol.- 1992.- Vol. 75, №2.- Pt.l.- P.714-722.

118. Harayama T., Shindou H., Shimizu T. Biosynthesis of phosphatidylcholine by human lysophosphatidylcholine acyltransferase 1. // J. Lipid Res. 2009. Vol. 50, № 9.- PI824-1831.

119. Hashizume H., Hogue A., Magishi et al. A new approach to the development of antiischemic drugs. Substances that counteract the deleterious effect of lysophosphatidylcholine on the heart. // Jpn. Heart J.- 1997, №1.- P. 11-25.

120. Hausdorff W., Caron M., Lefkowitz R. Turning of the signal: desensitization of p-adrenergic receptor function // FASEB Journal.- 1990.- Vol. 4, № 11.- P. 2881-2899.

121. Hiramatsu M., Murai M., Kameyama T. Different modulation of cholinergic neuronal systems by dynorphin A (1-13) in carbon monoxide-exposed mice// Biochem. Pharmacol.- 1999.- Vol. 57, №11.- P. 1321-1329.

122. Hoekstra R., Fekkes D., Loonen A., Pepplinkhuizen L., Tuinier S., Verhoeven W. Bipolar mania and plasma amino acids: increased levels of glycine. // Eur. Neuropsychopharmacol. 2006. - Vol. 16, № 1. - P. 71-77.

123. Holmer S., Susanni E., Tobise K. et al. Development regulation of myocardial beta- receptor adenylat cyclase transduction system. // Eur. Heart. J.-1991.- Vol.12, Abstr. Suppl.- P. 223.

124. Hool L., Middleton L., Harvey R. Genistein increases the sensitivity of cardiac ion channels to p-adrenergic receptor stimulation. // Circ. Res. 1998. -Vol.83, №l.-P.33-42.

125. Horn N., Oakley F., Thomas A. Histidine stimulated metal uptake into human erythrocytes // Abstr. Jr Sci. Meet. Physiol. Soc. with Brit. Pharmacol. Soc., Southampton, 8-11 Sept., 1998. J. Physiol. Proc.- 1998.- P. 50-51.

126. Hu J. S., Li YB., Wang JW., Sun L., Zhang GJ. Mechanism of lysophosphatidylcholine-induced lysosome destabilization. // J Membr Biol. 2007 -Vol .215, № 1.- P.27-35.

127. Hurd W., Reimer R., Goldfiew A., Roberts J. Prostaglandins modulate hormonal effects on rabbit myometrial alpai-adrenergic responses. // Endocrinology.- 1991.- Vol. 129, № 3.- P. 1436-1442.

128. Inglada L., Salo J., Arriyo Y. Neuropeptide Y: un nuevo vasoconstrictor endogeno importante en la homeostasis circulatoria. // Med. Clin.- 1993.- Vol. 100, № 17.- P. 751-756.

129. Inoue N., Iida H., Yuan Z., Ishikawa Y., Ishida H. Age-related decreases in the response of aquaporin-5 to acetylcholine in rat parotid glands. // J. Dent. Res.-2003. Vol. 82, № 6. - P. 476-480.

130. Izzo A., Mascolo N., Di C., Capasso F. Ascending neural pathways in the isolated guinea-pig ileum: Effect of muscarinic Mi M2 and M3 cholinergic antagonists. // Neuroscience. 1999. - Vol. 91,№ 4. -P. 1575-1580.

131. Jablonski E.M., McConnell N.A., Hughes F.M. Jr, Huet-Hudson Y.M. Estrogen regulation of aquaporins in the mouse uterus: potential roles in uterine water movement. //J.Biol. Reprod. 2003.- Vol. 69, № 5.- P.1481-1487.

132. Jeong S., Ikeda S. Endogenous regulator of G-protein signaling proteins modify N-type calcium channel modulation in rat sympathetic neurons. // J Neurosci. 2000. Vol. 20, № 12.- P. 4489-4496.

133. Ji T., Grossmann M., Ji I. G protein-coupled receptors. I. Diversity of receptor-ligand interactions. // J. Biol. Chem. -1998.- Vol. 273, № 28.- P. 1729917302.

134. Jiang DJ, Jiang JL, Tan GS, Du YH, Xu KP, Li YJ. Protective effects of daviditin A against endothelial damage induced by lysophosphatidylcholine. // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 2003.- Vol. 367, № 6. P. 600-606.

135. Jung S., Lee Y., Han S., Kim Y., Nam T., Ahn D. Lysophosphatidylcholine increases Ca current via activation of protein kinase C in rabbit portal vein smooth muscle cells. // Korean J Physiol Pharmacol. 2008.- Vol. 12, № 1. P. 31-35.

136. Kabarowski J. G2A and LPC: regulatory functions in immunity. // Prostaglandins Other Lipid Mediat.- 2009- Vol. 89, № 3-4- P.73-81.

137. Kamata K., Kojima S., Sugiura M., Kasuya Y. Preservation of endothelium-dependent vascular relaxation in cholesterol-fed mice by the chronic administration of prazosin or pravastatin. // Jpn J Pharmacol. -1996.- Vol. 70, № 2-P.149-156.

138. Kawaguchi T., Koehler R., Brusilow S., Traystman R. Pial arteriolar dilation to acetylcholine is inhibited by ammonia-induced increases in glutamine. // FASEB Journal, 1997.- Vol.11, №3.- P. 486.

139. Khorana H. Rhodopsin, photoreceptor of the rod cell. An emerging pattern for structure and function. // J. Biol. Chem. 1992.- Vol. 267, № 1. - P 1-4.

140. Kikuta K., Sawamura T., Miwa S., Hashimoto N., Masaki T. High-affinity arginine transport of bovine aortic endothelial cells is impaired by lysophosphatidylcholine. // Circ. Res. -1998.- Vol. 83, № 1- P. 1088-1096.

141. Kim YL, Im YJ, Ha NC, Im DS. Albumin inhibits cytotoxic activity of lysophosphatidylcholine by direct binding. // Prostaglandins Other Lipid Mediat. -2007.- Vol. 83, № 1-2. P.130-138.

142. Kudo Y., Boyd C., Spyropoulou I., Redman C., Takikawa O., Katsuki T., Hara T., Ohama K., Sargent I. Indoleamine 2,3-dioxygenase: distribution and function in the developing human placenta // J. Reprod. Immunol. 2004. - Vol. 61, №2.-P. 87-98.

143. Kyozuka M., Crankshaw D., Crankshaw J. et al. Alpha-2-adrenoceptors on nerves and musles of rat uterus. // J. Pharmacol, and Exp. Ther.- 1988.- Vol. 244, №3.- P. 1128 1138.

144. Lambert IH., Falktoft B. Lysophosphatidylcholine induces taurine release fromHeLa cells. //J. Membr. Biol.- 2000.- Vol. 176, №2 P.175-185.

145. Lee J.-J., Han I.-K., Ha J.-K. // Chungang uihak.- 1995.- №8.- P.685-693.

146. Lew M., Angus J. Vascular responses to sympathetic nerve stimulation in vitro are enhanced by vasoconstrictors at subthreshold concentration // Proc. Austral. Physiol, and Pharmacol. Soc.- 1992.- Vol. 23, № 1.- P. 46.

147. Liang GH, Park S, Kim MY, Kim JA, Choi S, Suh SH. Modulation of nonselective cation current by oxidized LDL and lysophosphatidylcholine and its inhibitory contribution to endothelial damage. // Life Sci.- 2010.- Vol.86, № 19-20k>- P.733-739.

148. Lindsay L.A., Murphy C.R. Redistribution of aquaporins 1 and 5 in the rat uterus is dependent on progesterone: a study with light and electron microscopy. // J. Reproduction.- 2006.- Vol.131, № 2. -P. 369-378.

149. Liu Q., Hofmann P. Antiadrenergic effects of adenosine A(l) receptor-mediated protein phosphatase 2a activation in the heart // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2002. - Vol. 283, № 4. - H1314-H1321

150. Lohse M., Benovic J., Codina J. et al. P-Arrestin: A protein that regulates P-adrenergic receptor function//Science.- 1990.- Vol. 248.- P. 1547-1550.

151. Lucas A., Grynberg A, Lacour B, Goirand F. Dietary n-3 polyunsaturated fatty acids and endothelium dysfunction induced by lysophosphatidylcholine in Syrian hamster aorta. // Metabolism. 2008. - Vol. 57, № 2.- 233-240.

152. Magnusson Y., Wallukat G., Waagstein F. et al. Autoimmunity in idiopathic dilated cardiomyopathy // Circulation.- 1994.- Vol. 89.- P. 2760-2767.

153. Maier U., Babich A., Macrez N. et al. Gp5y2 is a highly selective activator of phospholipid-dependent engines // J. Biol. Chem.- 2000.- Vol.275.- P. 1374613754.

154. Maigaard S., Forman A., Andersson K.-E. Relaxant and contractile effects of some amines and prostanoids in the myometrial and vascular smooth muscle within the human uteroplacental unit // Acta Physiol. Scand 1986.- Vol. 128, № l.-P. 33-40.

155. Maltier J-P., Petit I., Legnard Ch. Autoradiographic visualization of ar adrenergic receptors in cervix of early pugnant rat // J. Histochem. And Cytochem. 1989. - Vol. 37, № 5. - P. 703-707

156. Marinelli R.A., Tietz P.S., Pham L.D., Rueckert L., Agre P., LaRusso N.F. Secretin induces the apical insertion of aquaporin-1 water channels in rat cholangiocytes . //Am. J. Physiol. 1999.- Vol. 276, № 1, Pt 1.- G280- G286.

157. Matsui T, Sato M, Tanaka M, Yamada Y, Watanabe S, Fujimoto Y, Imaizumi K, Matsumoto K. Vasodilating dipeptide Trp-His can prevent atherosclerosis in apo E-deficient mice. //Br. J. Nutr. -2010.- Vol. 103, № 3.-P.309-313.

158. Matsuura H., Ehara T. Modulation of the muscarinic K+ channel by P2-purinoceptors in guinea-pig atrial myocytes // J. Physiol.- 1996.- Vol.497, №2.-P.379-393.

159. Miura M., Belvisi M., Stretton C. et al. // Role of K+ channels in the modulation of cholinergic neural responses in guinea-pig and human airways // J. Phisiol.- 1992.- Vol.455, №1,- P.l-15

160. Mizukawa H., Okabe E. Inhibition by singlet molecular oxygen of the vascular reactivity in rabbit mesenteric artery // Brit. J. Pharmacol.- 1997.-Vol.120, № 1.- P. 63-70.

161. Moore P., Laporte J., Gonzalez S. et al. Glucocorticoids ablate IL-ip-induced (3-adrenergic hyporesponsiveness in human airway smooth muscle cells // Amer. J. Physiol.- 1999.- Vol.277, № 5.- P.L932-L942.

162. Morris N., Carroll S., Nicolaides K. et al. Exhaled nitric oxide concentration and amniotic fluid nitrite concentration during pregnancy // Eur. J. Clin. Invest — 1995.- Vol. 25, № 2.- P. 138-141

163. Morrison J., Nimmo A., Whitaker C. The disrtibution of beta-adrenoceptors in the rat uterus // J. Physiol.(Gr.Br).-1987 Vol. 396.- P. 72.

164. Myshkin A., Khromova V. Histidin as a mercurial poisoning inhibitor // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 2000. - Vol. 273, № 3. - P. 816-819.

165. Nakanishi T. Test for analysing nerve conduction velocity // Rinsho Shinkeigaku. 1991. - Vol.31, №2. - P.1326-1329.

166. Naruta K., Osa T., Inouc H. Comparison of Mg, Mn, and Co ions affecting the b-adrenoceptor-mediated membrane response in the guinea-pig taenia caeci // Jap. J. Physiol.- 1989.- Vol. 39, № 5.- P. 659- 671.

167. Neumann J., Boknik P., Bodor G. et al. Effects of adenosine receptor and muscarinic cholinergic receptor agonists on cardiac protein phosphorylation. Influence of pertussis toxin//J. Pharmacol, and Exp. Ther. 1994. - №3 - P. 13101318.

168. Nimmo A., Whitaker E., Morrison J.F.B., Carstairs J.R. Multiple mechanisms of heterologous p-adrenoceptor regulation in rat uterus // J. Endocrinol. 1995. - 147, №2. - P. 303 - 309.

169. Okamoto T., Murayama Y., Hayashi Y. et al. Identification of a Gs activator region of the p2-adrenergic receptor that is autoregulated via protein kinase A -dependent phosphorylation // Cell.- 1991.- Vol. 67.- P. 723-730.

170. Olianas M., Ingianni A., Onali P. Role of G protein Py subunits in muscarinic receptor-induced stimulation and inhibition of adenylyl cyclase activity in rat olfactory bulb // J. Neurochem.- 1998.- Vol.70, №6.- P.2620-2627.

171. Olofsson K., Andersson L., Nilsson J., Bjorkbacka H. Nanomolar concentrations of lysophosphatidylcholine recruit monocytes and induce proinflammatory cytokine production in macrophages. // Biochem Biophys Res Commun.- 2008.- Vol. 370, №2. P. 348-352.

172. Ota Y., Kugiyama K., Sugiyama S., Matsumura T., Terano T., Yasue H. Complexes of apoA-1 with phosphatidylcholine suppress dysregulation of arterial tone by oxidized LDL. // Amer. J. Physiol. 1997. - Vol.273, №3. - H. 1215-1222.

173. Pang J., Xu X., Li H. et al. Inhibition of (3-estradiol on trachea smooth muscle contraction in vitro and in vivo // Acta Pharmacol. Sin.- 2002.-Vol.23, № 3,- P. 273-277.

174. Patterson R., Leake D. Human serum, cysteine and histidine inhibit the oxidation of low density lipoprotein less at acidic pH // FEBS Lett.- 1998.-Vol.430, №3.- P.317-321.

175. Peleg D., Munsick R., Diker D. et al. Distribution of catecholamines between fetal and maternal compartments during human pregnancy with emphasis on L-DOPA and dopamine // J. Clin. Endocrinol, and Metab.- 1986.- Vol. 62, № 5.- P. 911-914.

176. Persad S., Rupp H., Jindal R., Arneja J., Dhalla N. Modification of cardiac (3-adrenoceptor mechanisms by H202 // Amer. J. Physiol.- 1998.- Vol.274, № 2.-P.416-423.

177. Petrenko Iu., Titov V., Vladimirov I. Metabolites of tetracycline obtained during its irradiation with visible light peroxidase oxidation. Their toxic properties in relation to hemoglobin / /Antibiot. Khimioter. 1995. - № 7. - P. 8-14.

178. Qiao J, Huang F, Naikawadi RP, Kim KS, Said T, Lum H. Lysophosphatidylcholine impairs endothelial barrier function through the G protein-coupled receptor GPR4. // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2006.-Vol. 291, № 1.-L91-101.

179. Richard C., Gao J., Brown N., Reese J. Aquaporin water channel genes are differentially expressed and regulated by ovarian steroids during theperiimplantation period in the mouse. // J.Endocrinology.- 2003. Vol. 144, № 4.-P.1533-1541.

180. Robillard L., Ethier N., Lachance M., Hébert T. Gbetagamma subunit combinations differentially modulate receptor and effector coupling in vivo. //Cell Signal. 2000 - Vol. 12, № 9-10.- P. 673-682.

181. Rubio E., Tomas F., Espejo M., Santonja J., Martinez-Mir I. Study of the spontaneous motility and effect of histamine on isolated myometrial strips from patients with GnRH analog-treated myoma // Meth. and Find. Exp. and Clin. Pharmacol. 1999.-P. 48.

182. Sanborn B, Yue C. Wang W. Dodge K. G protein signalling pathways in myometrium: Affecting the balance between contraction and relaxation// Reprod. 1998, Vol.3, №3,P.196-205

183. Schilling T, Eder C. Lysophosphatidylcholine- and MCP-1-induced Chemotaxis of monocytes requires potassium channel activity.// Pflugers Arch. -2009.- Vol. 459, № 1. P.71-77.

184. Schmiedl A., Bach F., Fehrenbach H. et al. Cellular distribution patterns of lanthanum and morphometry of rat hearts exposed to different degrees of ischemic stress // Anat. Ree.- 1995.- № 4.- P. 496-508.

185. Schmitz G, Ruebsaamen K. Metabolism and atherogenic disease association of lysophosphatidylcholine. // Atherosclerosis. 2010. Vol.208, № 1. - P. 10-8.

186. Schramm C., Arjona N., Grunstein M. Role of muscarinic M2 receptors in regulating beta-adrenergic responsiveness in maturing rabbit airway smooth muscle. //Am J Physiol. 1995 - Vol. 269, № 6, Pt 1- L783- L7 90.

187. Schrocksnadel K., Wirleitner B., Winkler C., Fuchs D. Monitoring tryptophan metabolism in chronic immune activation // Clin. Chim. Acta. 2006. Vol. 364. N 1-2. P. 82-90.

188. Scott GA, Jacobs SE, Pentland AP. sPLA2-X stimulates cutaneous melanocyte dendricity and pigmentation through a lysophosphatidylcholine-dependent mechanism. //J Invest Dermatol. 2006. Vol. 126, № 4. - P. 855-861.

189. Seo HS, Kwak SY, Lee YS., Antioxidative activities of histidine containing caffeic acid-dipeptides. // Bioorg Med Chem Lett. 2010. Vol.20. № 14. - P. 4266-72.

190. Shadyro O., Kisel R., Vysotskii V., Edimecheva I. Effects of vitamins, coenzymes and amino acids on reactions of homolytic cleavage of the O-glycoside bond in carbohydrates. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006. - Vol.16, №18. -P.4763-4766.

191. Sharma S., Dietz K. The significance of amino acids and amino acid-derived molecules in plant responses and adaptation to heavy metal stress. // J. Exp. Bot. -2006. Vol. 57, № 4. - P. 711-726.

192. Shibata T, Ikomi F, Ohhashi T. Plasma-mediated potentiation in prostanoid-induced contractions in isolated canine external jugular veins. // Jpn J Physiol.-2002. Vol. 52, № 5- P.441-448.

193. Sonalker PA, Tofovic SP, Bastacky SI, Jackson EK. Chronic noradrenaline increases renal expression of NHE-3, NBC-1, BSC-1 and aquaporin-2 // Clin Exp Pharmacol Physiol. 2008.- Vol. 35, № 5-6.- P.594-600.

194. Stadel J., Strulovici B., Nambi P. et al. Desensitization of the (3-adrenergic receptor of frog erythrocytes. Recoveri and characterization of the down-regulated receptors in sequestered vesicles // J. Biol. Chem.- 1983.- Vol. 258.- P. 30323038.

195. Sterin A., Goldray A., Gimeno M. et al. In vitro contractile responses of theuterus from "restricted died" rats to adrenoceptor agonists. Influence of

196. Cyclooxigenase inhibitors // Eur. J. Pharmacol.- 1983,- Vol. 90, № 4.- P. 411-417.144

197. Strader C., Candelore M., Hill W., Sigal I., Dixon R. Identification of two serine residues involved in agonist activation of the P-adrenergic receptor // J. Biol. Chem. 1989. - Vol.264. - P.13572-13578.

198. Strasser R., Lefkowitz R. Homologous desensitization of p-adrenergic receptor coupled adenylate cyclase // J. Biol. Chem. -1985. -Vol.260. P. 45614564.

199. Strasser R., Lefkowitz R. Homologous desensitization of P-adrenergic receptor coupled adenylate cyclase // J. Biol. Chem. -1985. -Vol.260. P. 45614564.

200. Sugawara A., Miguel T., de Oliveira L et al. Noradrenaline and mixed a2-adrenoceptor/imidazoline-receptor ligands: Effects on sodium intake // Brain Res. -1999.- Vol.839, №2. P.227-234.

201. Sugawara A., Miguel T., de Oliveira L et al. Noradrenaline and mixed a2-adrenoceptor/imidazoline-receptor ligands: Effects on sodium intake // Brain Res. -1999.- V.839, №2. P.227-234.

202. Suryanarayana S., van Zastrow M., Kobilka B. Identification of intramolecular interactions in adrenregic receptors //J. Biol.Chem.- 1992.- Vol.267, № 13.- P. 21991-21994.

203. Takayama M, Yao K, Wada M. The dihydropyridine calcium channel blocker benidipine prevents lysophosphatidylcholine-induced endothelial dysfunction in rat aorta. // J Biomed Sci.- 2009 Vol. 26.- P. 16-57.

204. Takenouchi T., Sato M., Kitani H. Lysophosphatidylcholine potentiates Ca2+ influx, pore formation and p44/42 MAP kinase phosphorylation mediated by P2X7 receptor activation in mouse microglial cells. // J. Neurochem. 2007. -Vol.102, №5.-P.1518-1532.

205. Thulesius O., Said S., Shuhaiber H. et al. Endothelial mediated enhancement of noradrenaline indused vasoconstriction in normal and varicose veins // Clin. Physiol.-1991.- V. 11, № 2.-P. 153-159.

206. Tolszczuk M., Pelletier G. Autoradiographic localization of (3-adrenoreceptors in rat uterus // J. Histochem. and Cytochem.- 1988,- Vol. 36, № 12.-P. 1475-1479

207. Tomura H, Mogi C, Sato K, Okajima F. Proton-sensing and lysolipid-sensitive G-protein-coupled receptors: a novel type of multi-functional receptors.// Cell Signal. 2005.- Vol. 17, № 12.- P.1466-1476.

208. Townsend R., Yamamoto R., Nickols M. et al. Insulin enhances pressor responses to norepinephrine in rat mesenteric vasculature // Hypertension.- 1992.-Vol. 19, № 2, Suppl.- P. 105- 110.

209. Undrovinas A., Maltsev V., Kyle J., Silverman N., Sabbah H. Gating of the late Na+-channel in normal and failing human myocardium. // J. Mol. Cell Cardiol. 2002. Vol.34, №11. - P.1477-1489.

210. Van Oosterhaut J., Nijkamp F. Effect of lymphokines on (5-adrenoceptor function of human peripheral blood mononuclear cells // Brit. J. Clin. Pharmacol.-1990.- Vol. 30, Suppl. 1.- P. 150- 152.

211. Verkman A.S., Hara-Chikuma M., Papadopoulos M.C. Aquaporins—new players in cancer biology. // J Mol Med.- 2008.- Vol. 86, № 5.- P.523-529.

212. Wang В., Cheng F. // Zhongguo bingli shengli zazhi.- 2001.- Vol.17, №11.-P.1093-1096.

213. Wang L, Radu CG, Yang LV, Bentolila LA, Riedinger M, Witte ON. Lysophosphatidylcholine-induced surface redistribution regulates signaling of the murine G protein-coupled receptor G2A. // Mol Biol Cell. 2005.- Vol. 16, № 5. -P. 2234-2247.

214. Wang Li-Feng, Yu G.-Sh., Zhang Y.-Yi et al. Влияние длительного воздействия атенолола на подтипы (3-адренорецепторов в сердце крысы // Shengli xuebao.- 1995.-№4.- Р.381-386.

215. Watanabe Т, Капоте Т, Miyazaki A, Katagiri Т. Human urotensin II as а link between hypertension and coronary artery disease. // Hypertens Res. 2006-Vol. 29, № 6.- P. 375-387.

216. Watanabe Т., Koba S., Katagiri Т., Pakala R., Benedict Ch. Lysophosphatidylcholine potentiates the mitogenic effect of the various vasoactive compounds on rabbit aortic smooth muscle cells //Jpn. Heart J.-2002.- Vol.43, № 4.- P.409-416.

217. Watson C., Gold M. Lysophosphatidylcholine modulates cardiac INa via multiple protein kinase pathways // Circ. Res.- 1997.- №3.- P.387-395.

218. Watts J., Ford M., Leonova E. Iron-mediated cardiotoxicity develops independently of extracellular hydroxyl radicals in isolated rat hearts // J. Toxicol. Clin. Toxicol.- 1999.- № 1.- P. 19-28.

219. Widdowson P., Masten Т., Halaris A. Interactions between neuropeptide Y and alpha2-adrenoceptors in selective rat frain region //Peptides.- 1991.- Vol. 12.-№ 1.- P.71-75.

220. Wiklund N., Samuelson U., Hammarstrom M. Adenosine modulation of neuroeffector transmission in guinea-pig uterine smooth muscle // Acta Physiol. Scand.- 1991.- Vol. 143, № 1.- P. 33- 43.

221. Wood N., Ganguly P. Neuropeptide Y prevents agonist-stimulated increases in contractility. // Hypertension, 1995. - Vol., №3. - P. 480 - 484.

222. Wray S., Kupittayanant S., Shmygol A., Smith R.D., Burdyga T. The physiological basis of uterine contractility: A short review // Exp. Physiol. 2001, Vol.86, №2, P.239-246

223. Xiao R.-P., Pepe S., Spurgeon H. et al. Opioid peptide stimulation reverses p-adrenergic effects in rat heart cells // Am. J. Phisiol.- 1997.- Vol.272.- P.H797-H805.

224. Yamada K., Yanagida H., Ito Y., Inoue R. Postsynaptic enhancement by motilin of muscarinic receptor cation currents in duodenal smooth muscle // Amer. J. Physiol.- 1998.- Vol.274, №3.- P.G487-G492.

225. Yasui H., Kubota M., Iguchi K., Usui S., Kiho T., Hirano K. Membrane trafficking of aquaporin 3 induced by epinephrine. // J.Biochem Biophys Res Commun.- 2008.- Vol. 373, № 4.- P.613-617.

226. Yatzidis H Oral supplement of six selective amino acids arrest progression renal failure in uremic patients // Int. Urol. Nephrol. 2004. - Vol. 36, № 4. - P. 591-598.

227. Ye F., Deng PY., Li D., Luo D., Li NS, Deng S., Deng HW, Li YJ. Involvement of endothelial cell-derived CGRP in heat stress-induced protection of endothelial function. // Vascul Pharmacol. 2007.- Vol. 46, № 4.- P.238-246.

228. Yi B., Ma B., Xing B. // Shengli xuebao.- 1999.- Vol.51, №2.- P.147-152.

229. Yoneda S., Suzuki H. Nitric oxide inhibits smooth muscle responses evoked by cholinergic nerve stimulation in the guinea pig gastric fundus // Jap. J. Physiol.-2001.- №6.- P.693-702.

230. Young SH, Rey O, Sternini C, Rozengurt E.Amino acid sensing by enteroendocrine STC-1 cells: role of the Na+-coupled neutral amino acid transporter 2. // Am J Physiol Cell Physiol. -2010.- Vol. 298, № 6.- C1401- C1413.

231. Yuan Y., Schhoenwaelder S., Salem H., Jackson S. The bioactive phospholipid, lysophosphatidylcholine, induces cellular effects via G-protein-dependent activation of adenylyl cyclase. //J. Biol. Chem.- 1996- Vol. 271, № 43.-P 27090—27098.

232. Yukutake Y., Tsuji S., Hirano Y., Adachi Т., Takahashi Т., Fujihara K., Agre P., Yasui M., Suematsu M. Mercury chloride decreases the water permeability of aquaporin-4-reconstituted proteoliposomes. // Biol Cell.- 2008.-Vol. 100, № 6.-P. 355-363.

233. Zhang L., Rui Y., Chu Z. Влияние пробукола и других средств на вызываемую лизофосфатидилхолином вазоконстрикцию базилярной артерии быка in vitro кит. // Di-er junyi daxue xuebao. - 2000. - №3. - P.257-259.

234. Zhang R, Bai N, So J, Laher I, MacLeod KM, Rodrigues B. The ischemic metabolite lysophosphatidylcholine increases rat coronary arterial tone by endothelium-dependent mechanisms. // J Mol Cell Cardiol.- 2009 Vol. 47, № 1.-P. 112-120.

235. Zheng M, Wang Y, Kang L, Shimaoka T, Marni F, Ono K. Intracellular Ca2+- and PKC-dependent upregulation of T-type Ca2+ channels in LPC-stimulated cardiomyocytes. // J Mol Cell Cardiol. 2010.- Vol. 48, № 1. -P. 131-139.

236. Zou Y, Kim DH, Jung KJ, Heo HS, Kim CH, Baik HS, Yu BP, Yokozawa T, Chung HY. Lysophosphatidylcholine enhances oxidative stress via the 5-lipoxygenase pathway in rat aorta during aging. // Rejuvenation Res. 2009 - Vol. 12, № i.p. 15-24.

237. Zvezdina N., Prokazova N., Vaver V. et al. Effect of lysolecithin and lecithin of blood serum on the sensitivity of heart to acetylcholine // Biochem. Pharm.-1978.- Vol.27, №10,- P. 2793-2801.1. Tso

Информация о работе

Торопов, Алексей Леонидович
кандидата биологических наук
Киров, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Исследование механизма действия эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) и его аналогов в опытах с миометрием крыс - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы