Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние органического загрязнения на структуру и состояние микробных сообществ поверхностных вод бухты Золотой Рог
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Влияние органического загрязнения на структуру и состояние микробных сообществ поверхностных вод бухты Золотой Рог"

На правах рукописи

Калитина Елена Геннадьевна

ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА СТРУКТУРУ И СОСТОЯНИЕ МИКРОБНЫХ СООБЩЕСТВ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОД БУХТЫ ЗОЛОТОЙ РОГ

03.00.16 - экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Владивосток 2006

Работа выполнена на кафедре общей экологии Дальневосточного государственного университета МОН РФ

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Бузолева Любовь Степановна

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Латыпов Юрий Яковлевич

кандидат медицинских наук Терехова Валерия Евгеньевна

Биолого-почвенный институт ДВОРАН

Защита состоится « 22 » июня 2006 г. в 1300 часов на заседании диссертационного совета Д 212.056.02 при Дальневосточном государственном университете МОН РФ по адресу: 690600, г. Владивосток, Океанский пр-т, 37, Научный музей ДВГУ. Факс: (4232) 268543

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Дальневосточного государственного университета МОН РФ

Автореферат разослан « мая 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

¿С

Ю.А. Гапышева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Бухта Золотой Рог относится к акваториям с чрезвычайно высоким уровнем загрязнения. Значительную его часть составляют органические вещества хозяйственно-бытовых сточных вод, а также загрязнители техногенного происхождения (нефтеуглеводороды, фенолы и т.д.), источниками которых являются большое скопление судов и расположенная в порту нефтебаза. По официальным данным наибольший объем загрязненных сточных вод сбрасывают предприятия Владивостокской ТЭЦ-2 - 244,6 млн м3/год, водоканализационного хозяйства города - 25,1 млн м3/год и рыбною пор га - 5,5 млн м3/год. Так, юлько в 2001 г. предприятиями в бухту, объем которой составляет 66 млн м , было сброшено 278 млн м , то есть, суммарный годовой сброс сточных вод в бух гу более чем в 4 раза превышал ее объем (Малышев и др., 2002). Загрязнения поступают сюда также с водами р. Объяснение, которая сама является приемником сточных вод большого количества объектов, а также подвергается воздействию теплых вод ТЭЦ - 2 (Гаврилевский и др., 1998). По данным A.B. Ткалина с соавторами (1993), среднегодовое содержание нефтеуглеводородов в бухте превышает ПДК в 2-3 раза, а в районах морского Торгового порта концентрация поллютантов была выше ПДК в 55 раз, поэтому морские воды б. Золотой Рог классифицируют как очень грязные.

Постоянный обмен загрязненных вод бухты с водными массами залива Петра Великого может способствовать распространению загрязнителей в морские акватории, не подверженные существенному загрязнению, и оказывать влияние на выживаемость ценных промысловых видов морских организмов, находящихся под охраной в Дальневосточном государственном морском заповеднике.

Мощное антропогенное загрязнение бухты оказывает существенное влияние на структуру сообществ морских организмов. К настоящему времени известно, что б. Золотой Рог отличается небольшим видовым разнообразием, но высокой численностью доминирующих видов морских организмов, устойчивых к органическому загрязнению, что характерно для акваторий с высокой антропогенной нагрузкой (Ткалин и др., 1993; Ващенко, 2000; Фадеева, Фадеев, 2001; Бегун, 2002; Звягинцев и др., 2004).

Следует отметить, что до настоящего времени не было проведено исследований, касающихся изучения состояния и структуры микробных сообществ в условиях высокого антропогенного загрязнения б. Золотой Рог. Известны лишь единичные работы, в которых оценивалась общая численность бактерий и количество гетеротрофных микроорганизмов (Краткий обзор..., 1979; Михайлов и др., 1987; Обзор экологического

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С.-Петербург

_ОЭ 200 4кт

состояния ., 1990; Шульгина и др., 1995). И.П. Безвербной (2005) из поверхностных вол бухты были выделены и изучены штаммы бактерий, устойчивые к тяжелым металлам.

Тем не менее, именно микроорганизмы играют основную роль в круговороте веществ в природе и, следовательно, в процессах восстановления морской среды.

Возрастающее антропогенное загрязнение морских вод способно изменить состояние морских микробных сообществ, нарушить его внутреннее динамическое равновесие, поддерживаемое постоянной функциональной саморегуляцией ее составляющих. Поскольку бактериопланктон неразрывно связан с другими компонентами биоценоза, то нарушение его характеристик, безусловно, повлечет за собой изменения структурно-функциональных связей в экосистеме моря и предопределит его переход на иной грофический уровень (Олейник и др., 1996). Поэтому оценка изменений, происходящих в микробном сообществе, в результате хронического антропогенного загрязнения б. Золотой Рог, необходима для определения устойчивости функционирования микроорганизмов, что может быть выявлено на основе изучения структуры и состояния микробных сообществ б. Золотой Рог.

Цель и задачи исследования. Цель работы - изучить структуру и состояние микробных сообществ под влиянием хронического антропо! енного загрязнения б. Золотой Рог в сравнении с контрольным районом, расположенным в зоне морского заповедника.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить влияние органического загрязнения и гидрохимических показателей морской воды на динамику численности и физиологическую активность бактериопланктона поверхностных вод б. Золотой Рог и контрольного района.

2. Исследовать структуру микробных сообщес в поверхностных вод б Золотой Рог в условиях высокого органического загрязнения (техногенного и хозяйственно-бытового).

3. Определить численность и деструктивную активность гидролитически-активных бактерий, нефтеуглеводород - и фенолокисляющих бактерий как потенциальных ремедиаторов морской среды.

Научная новизна. Впервые на основании даш ых микробиологического мониторинга исследована структура и состояние микробных сообществ, сформированных под влиянием хронического орган веского (техногенного и хозяйственно-бытового) загрязнения. Выявлены факторы, лимитирующие

размножение бактерий в бухте с низким водообменом и высокой антропогенной нагрузкой.

Показано неравномерное распределение численности микроорганизмов по периметру б. Золотой Рог, зависящее от близости расположения станций к источнику загрязнения.

На основании выявленной высокой гидролитической активности микроорганизмов, населяющих поверхностные воды б. Золотой Рог, доказана ее самоочищающая способность.

Практическая ценность работы. С помощью микробиологических методов, характеризующих структуру и физиологическую активность микробной флоры, дана оценка экологического состояния поверхностных вод б. Золотой Рог, подвергающихся хроническому органическому загрязнению.

Для изучения самоочищающей способности микробных сообществ поверхностных вод акваторий с низким водообменом и устойчивым поступлением аллохтонной микрофлоры рекомендовано использовать не только показатель численности микрофлоры, но и физиологическую активность бактерий, с учетом типа их метаболизма.

Собрана коллекция штаммов, обладающих высокой гидролишческой активностью, являющихся потенциальными ремедиаторами среды Коллекция культур и материалы диссертации используются в лекционном курсе по экологии бактерий, а 1акже большом микробиоло! ическом практикуме на кафедре общей экологии ДВГУ.

Защищаемые положения:

1. Постоянное поступление органических загрязняющих веществ в акваторию б. Золотой Рог, характеризующейся низким водообменом, приводит к существенным изменениям структуры микробных сообществ поверхностных морских вод, при этом, определяющим фактором является характер загрязнения. В ответ на техногенное загрязнение доминирующими эколою-трофическими группами, по сравнению с контрольным районом, являются утлеводородокисляющие микроорганизмы, загрязнение бытовыми стоками приводит к преобладанию энтеробактерий. Факторами, регулирующими численность и физиолог ическое состояние микрофлоры, являются температура и кислород.

2. Процессы ремедиации в поверхностных водах б Золотой Рог осуществляются за счет эколм о-трофических групп микроорганизмов, утилизирующих как простые (белки, жиры и углеводы), так и сложные органические субстраты (нефтеуглеводороды и фенолы). Гидролитическая активность микроорганизмов наиболее выражена осенью и весной

Апробация работы. Результаты работы были представлены на Международной научно-практической конференции «Приоритет России XXI века: от биосферы и техносферы к ноосфере» (Пенза, 2003), на Общероссийской конференции «Биология - наука XX] века» (Пущино, 2003), на Международном Байкальском симпозиуме по микробиологии «Microorganisms in ecosystems of lakes, rivers and reservoirs» (Иркутск, 2003), на VII региональной конференции по актуальным проблемам экологи л, морской биологии и биотехнологии (Владивосток, 2004), на IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Далянь, 2005), а также на семинарах ДВГУ и НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 181 стр., состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, трех глав исследований, выводов, списка литературы, состоящего из 247 источников, в том числе 65 иностранных, и приложения. Работа содержит 43 рисунка и 18 таблиц.

Автор выражает искреннюю благодарность научному руководителю д.б.н., с.н.с. J1.C. Бузолёвой за всестороннюю помощь и поддержку в работе, к.б.н., доц. И.П. Безвербной, A.M. Кривошеевой за ценные советы и практическую помощь, В.В. Полкопаевой за предоставленные химические данные, а также всем сотрудникам НИИ ЭМ СО РАМН, студентам и аспирантам -микробиологам ДВГУ за практическую помощь и моральную поддержку.

РАЙОН РАБОТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для проведения исследований была выбрана прибрежная акватория б. Золотой Рог, характеризующаяся комплексным антропогенным загрязнением, а также контрольный район, расположенный в районе морского заповедника (б. Пограничная, о. Попова) и отличающийся отсутствие« источников загрязнения (рис.1).

Отбор проб. Пробы воды отбирали на глубине 10 - 15 см в стерильные шприцы объемом 20 мл на пяти станциях в б. Золотой Рог и на одной станции в контрольном районе в течение 2004-2005 г. по сезонам. Микробиологический анализ проводили непосредственно после доставки отобранных образцов в лабораторию.

Рис. 1. Схема отбора проб для микробиологических исследований 1-м. Чуркин, 2 - Мачьцевская переправа, 3 - устье р. Объяснение, 4 - район 36 причала, 5 - район Торгового порта, 6 - Контрольный район (б. Пограничная)

Среды и условия культивирования бактерий. Учет наиболее вероятной численности гетеротрофной микрофлоры проводили на жидкой питательной среде для морских микроорганизмов - СММ (УоисЫгшги, Кдтига, 1976), численность энтеробактерий оценивали на среде Эндо (Егоров, 1983), при этом учитывали грамотрицательные каталазоположительные и

оксидазоотрицательные изоляты. Нефтеуглеводородокисляющую и фенолокисляющую микрофлору оценивали в жидкой элективной среде МКД (морская калиево-дрожжевая среда) (Динамика экосистем..., 2000), содержащей в качестве единственного источника углерода поллютанты: нефть, дизельное топливо, мазут и фенол в концентрации 0,1%. Для определения численности микроорганизмов, синтезирующих экзогенные гидролазы, использовали СММ (УоисЫгшги, Кнтшга, 1976) с добавками молока (протеолитики), крахмала (амилолитики) Для изучения численности бактерий - липолитиков, использовали среду с добавлением липидного гомогенизата. Количество аммонийокисляющих, нитрит окисляющих и денитрифицирующих бактерий определяли на средах, описанных в известных методиках (Кузнецов, Дубинина, 1989).

В качестве объектов исследования использована коллекция микроорганизмов (энтеробактерии, аммонийокислякзщие, нитритокисляюгцие, денитрифицирующие, нефтеуглеводород - и фенолокисляющие бактерии, а также гидролитически-активные микроорганизмы), выделенных из поверхностных вод б. Золотой Рог и контрольного района.

Методы исследования. Общую численность бактерий определяли методом прямого счета на мембранных фильтрах фирмы «Бупрог» (Егоров, 1983). Методом предельных разведений определяли: количес1во гетеротрофных, нефтеуглеводород- и фенолокисляющих бактерий, а также численность бактерий, участвующих в круговороте азота (Методы общей..., 19841. Количество энтеробактерий, а также микроорганизмов, синтезирующих экзо1енные гидролазы, определяли по численности колониеобразующих единиц (КОЕ/мл) на плотных средах (Еюров, 1983).

Изучение степени устойчивости гетеротрофных микроорганизмов к минимальным ингибирующим концентрациям поллютанта проводили методом отпечатка Гидролитическую активность штаммов учитывали чашечным меюдом, ре!истрируя и ¡менспия величины зоны лизиса субстрата вокруг колонии на чашке (Руководство по методам, 1980).

Морфологические, культуральные и биохимические признаки бактерий изучали общепринятыми бактериологическими методами (Методы..., 1983). Идентификацию энтеробактерий до рода осуществляли по диагностическим ключам в соотве!стьии с признаками, указанными в определителе Берджи (Определи1ель..., 1997).

Интенсивность бактериальной ассимиляции углекислоты, а также суточной продукции и деструкции ор! аническою вещества оценивали радиоуглеродным методом (Динамика экосистем..., 2000).

Концентрацию растворенного кислорода и биологического потребления кислорода (БПК 5) определяли по методу Випклера (Руководство..., 1977).

Все эксперименты проводили в трех повторноетях. Для статистической обработки данных рассчитывали средние значения и относительную погрешность полученных результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОЬСУЖДЕНИЕ

Микробные сообщества бухты Золотой Рог в условиях хронического антропогенного загрязнения

Результаш исследований показали, что в поверхностных водах б. Золотой Рог отмечено мозаичное распределение численпоаи бактериопланктона по

периметру бухты. При этом, общая численность (04) бактерий значительно варьировала в течение 2004-2005 г. Наибольшую ОЧ во все сезоны года наблюдали в устье р. Объяснение. Это может быть связано с поступлением неочищенных сточных вод в реку, а также тепловым загрязнением вследствие сбросов ТЭЦ-2 (табл.1).

Таблица 1.

Сезонная динамика обшей численности бактериопланктона в поверхностных водах б. Золотой Рог и контрольного района (2004-2005 г.)

Станции Сезон исследования

лето | осень | зима | весна

Кл/'чл

м Чуркин (3,8±0,01)хЮ8 (6,1±0,01)х106 (l,2d-0,02)x104 (7,7±0,07)ХЮ6

Мальцевская перенрава (5±0,05)х10п (1,8±0,1 у\0* (3,9±0,3)*105 (6,Ь0,05]хЮ7

устье р. Объяснение (1,1±0,01)х1015 (5,3±0,07)*1012 (4,8±0,04)хЮ7 (1,5±0,09)х1012

район 36 причала (3 ±0,03)х109 (2,5±0,08)х107 (1±0,03)хЮ4 (7,7±0,05)х10б

район Topi ового порта (5±0,02)*10п (1,8±0,11)х109 (1 ±0,02) х ю7 (5±0,07)х ю'°

Контрольный район (2,5±0,04)*105 (2,1±0,017)х103 (0,017±0)х103 (0,6±0,02)х10'

Достаточно высокая ОЧ бактерий обнаружена также в районе Торгового порта, где наблюдается наиболее мощный сброс канализационных с 1 очных вод (Подкопаева, 2004). Наименьшие количества бактерий летом и осенью обнаружены в поверхностных водах м. Чуркин, что связано с наибольшей открытостью вод станции и влиянием ветров, которые способствуют рассеиванию и выносу загрязнителей за пределы бухты. Сезонная динамика ОЧ микроорганизмов в б. Золотой Рог и контрольном районе (наибольшая численность бактерий наблюдалась летом, наименьшая - зимой) обусловлена изменением температуры морской воды (табл 1).

По данным общей численности микроорганизмов, в мкмветствии с классификатором качества морских вод (Гусева и др., 2000), поверхностные воды б. Золотой Рог можно охарактеризовать как грязные и очень грязные летом, осенью и весной. В зимний сезон, качество вод бухты характеризовалось в зависимости от расположения станций (р. Объяснение, Торговый порт - как очень грязные; Мальцевская переправа, 36 причал - умеренно-загрязненные; м. Чуркин - чистые). Поверхностные воды контрольного района во все сезоны года классифицированы как очень чистые.

Рис. 2. Распределение общей численности и физиологической активности бактерий в поверхнос1ных водах б. Золотой Рог (а) и конгрольного района (б) 04 - общая численность; ТА - гемновая ассимиляция С02 бак1ериями

N - кл/мл

Изучение интенсивности ассимиляции углекислоты бактериальными клетками показало, что в поверхностных водах б. Зо/отой Рог, по сравнению с контрольным районом, отмечена высокая физиологическая активность микроорганизмов. При этом, в б. Золотой Рог максимальные значения физиологической активности обнаружены в районе Мальцевской переправы зимой (690,9 мг С/л в сутки), минимальные выявлены в районе 36 причала летом (40,29 мг С/л в сутки). В сравнении с контрэльным районом в те же сезоны года указанные значения были выше в 7,4 и 552 раза соответственно. Следует отметить, что в летний сезон на всех станциях б. Золотой Рог наблюдали резкое снижение физиологической активности бактериопланктона на фоне увеличения его численности, в отличие от контрольного района, где рост физиологической активности бактерий совпадал с увеличением численности микроорганизмов (рис.2). В зимний период на всех исследуемых станциях б. Золотой Рог отмечали резкий рост физиологической активности бактерий при снижении 04 микроорганизмов (рис.2) По-видимому, помимо температуры, фактором, лимитирующим физиологическую активность бактерий, является кислород, количество которого, по нашим данным, было значительно ниже в летний период (3,3 мг/л) по сравнению с зимним сезоном года (9,64 мг/л). Доля аллохтонной микрофлоры, в больших количествах поступающей в б. Золотой Рог вместе с канализационными стоками, вносит ощутимый вклад в увеличение общей численности бактерий по сравнению с контрольным районом. Высокие летние темзературы способствуют сохранению привнесенной аллохтонной микрофлоры (представленной в большинстве своем мезофилами), конкурирующей с психрофильной автохтонной микрофлорой. В связи с этим, активность автохтонной

микрофлоры резко падает летом и восстанавливается только в более холодные периоды времени, когда низкие температуры тормозят рост и размножение аллохтонной микрофлоры. На основании данных химического анализа поверхностных вод установлено высокое органическое загрязнение б. Золотой Рог. Так, летом концентрация аммонийного азота превышала ПДК в 1,16 раз (р. Объяснение) и 1,14 раз (36 причал), а значения БПК5 были ниже предельно-допустимых в 1, 03 и 1,87 раз (Мальцевская переправа, устье р. Объяснение соответственно).

Поскольку одними из основных потребителей органических веществ являются гетеротрофные бактерии, представляло интерес изучить их распространение в поверхностных водах б. Золотой Рог и контрольного района. В течение сезонного мониторинга в разных районах бухты обнаружены значительные колебания количества гетеротрофных микроорганизмов. По убыванию численности гетеротрофов (во все сезоны года, кроме зимы) исследуемые районы можно расположить в следующем порядке: устье р. Объяснение > Торговый порт > Мальцевская переправа > 36 причал > м. Чуркин. Максимальные количества гетеротрофной микрофлоры в течение года были обнаружены в устье р. Объяснение. Необходимо огметшь, что минимальные значения численности гетеротрофных бактерий, выявленные в б. Золотой Рог (м. Чуркин, зима), отличались от контрольного района более чем на два порядка, а максимальные (устье р. Объяснение, лето) - на 5,5 порядков в соответствующие сезоны года. Летом в б. Золотой Рог на фоне высокой численности гетеротрофных микроорганизмов отмечена высокая концентрация в морской воде минерального фосфора и низкая - органического, что можно объяснить активным потреблением последнею морскими организмами. В период с 2004 по 2005 год в б. Золотой Рог и контрольном районе не отмечено значительного изменения численности гетеротрофных бактерий

Изучение свойств гетеротрофных микроорганизмов, выделенных за весь период наблюдения из исследуемого и контрольного районов, показало, что они были представлены, в основном, палочковидными бактериями. Г? б. Золоюй Рог, по сравнению с контрольным районом, были обнаружены дрожжи (23% от общего количества выделенных микроорганизмов) Сравнительный анализ типов метаболизма бактерий, выделенных из районов с разной антропогенной нагрузкой, выявил ряд различий. Так, среди штаммов, изолированных из воды контрольной станции, преобладали бактерии с окислительным типом метаболизма (64%), что указывает на экологическое благополучие этого района (Динамика экосистем .., 2000) (рис 3 б). Для большинства штаммов опытного района (64%) был характерен ферментативный тип метаболизма (рис. 3 а) Важно отметить, что наблюдаемый высокий процент микроорганизмов, способных к анаэробному сбраживанию глюкозы, связан с

дефицитом кислорода, отмеченного в поверхностных Е.одах бухты Золотой Рог в летний период времени (3,33 ± 0,28 мг 02 / л). Вероятно, в таких условиях в микробных сообществах доминирующее положение занимают факультативно-анаэробные бактерии, к которым можно отнести э1ггеробактерии, являющиеся представителями аллохтонной микрофлоры.

□ ферментативный тип ■ окислительный

□ не используют глюкозу

7%

□ ферментативный тип Q окислительный В не используют глюкозу

64%

а б

Рис 3 Характеристика типов метаболизма микроорганизмов, изолированных из поверхностных вод б. Золотой Рог (а) и контрольной станции (б)

Количественное распределение энтеробактерий в б. Золотой Рог, так же как и гетеротрофов, носило мозаичный характер. Высокие значения их численности отмечены в месте выхода канализационного стока в районе устья р. Объяснение и Торгового порта, особенно в летний период времени (рис. 4).

Анализ идентифицированных штаммов энтеробактерий позволил выявить 1ри доминирующих рода бактерий - Escherichia (4S%), Enterobacter (23%) и Klebsiella (15%) (рис. 5). Возможно, это связано, с наибольшей устойчивостью этих микроорганизмов к факторам окружающей среды, что способствует их сохранению в морской воде (Бухарин, Немцева, 2003)

Если влияние аллохтонной микрофлоры на структуру микробных сообществ было показано на примере энтеробактерий, то в качестве примера автохтонной флоры были взяты микроорганизмы, участвующие в круговороте азота. Так, по данным мониторинга численность нитритокисляющих и аммонийокисляющих бактерий на всех станциях б. Золотой Рог в теплый сезон снижалась и повышалась в холодный, что совпадало с изменениями физиологической активности бактерий (рис.6).

Рис 4. Динамика численности энтеробактерий в поверхностных водах б. Золотой Рог и контрольного района

(И - КОЕ/мл, р < 0,05)

QEshenchia Я Enterobacter □ Klebsiella О Proteus 0Hafnia 0 Citrobacter

5% 5% 3%

Рис. 5. Таксономический состав энтеробактерий, выделенных из поверхностных вод б. Золотой Рог

Поскольку автохтонные бактерии, обитающие в поверхностных водах б. Золотой Рог, являются микроаэрофилами и аэробами, то низкое содержание кислорода летом (3,33±0,051 мг СЬ/л) тормозило их активность. В контрольном районе в условиях более высокого содержания кислорода летом (7,78±0,17 мг 02) наблюдали наибольшую численность нитрит- и аммонийокисляющих бактерий по сравнению с б. Золотой Рог (рис.6).

Наряду с фекальным загрязнением, которое обеспечивается хозяйственно-бытовыми стоками, к веществам, загрязняющими бухту, можно отнести нефтеуглеводороды и фенолы. В связи с этим были изучены эколого-трофические группы микроорганизмов, окисляющих эги поллютангы. В результате исследований было установлено, что по сравнению с контрольным районом содержание микроорганизмов, окисляющих нефтеуглеводороды, в б. Золотой Рог было значительно выше в течение всего юда. Необходимо отметить неравномерное распределение нефтеуглеводород- и фенолокисляющих бактерий в б. Золотой Рог,

что может быть обусловлено различной степенью техногенной нагрузки на акваторию. Наибольшие количества мазут - и нефтеокисляющих микроорганизмов наблюдали в пробах воды, взятых в районе Торгового порта в летний период (11 О*5 кл/мл и 1,8><105 кл/мл соответственно). Максимальную численность бактерий, окисляющих дизельное топливо, отмечали в районе Матьценской переправы (2,5* 105 кл/мл, лето), что, скорее всего, связано с расположением здесь стоянки крупных судов. Высокие количества фенолокисляющей микрофлоры выявлены в устье р. Объяснение (2,0х 105 кл/мл, лето). По-видимому, основной причиной 'пого является наличие фекальных стиролов, содержащихся в сточных водах, которые являются производными фенолов Наименьшую численность бактерий, окисляющих нефть, мазуг и фенол, наблюдали в районе м. Чуркин летом. Следует отметить, что рост численности микроорганизмов, окисляющих нефтеуглеводороды и фенолы сопровождался снижением концентраций поллютантов в водах бухты (рис 7).

3.5- /

м Чуркин Мальцсвска« р Объяснение 36 причал Тсрговый порт Контрольный

район_|

Рис 6. Динамика численности автохтонных нитритокисляющих бактерий в поверхностных водах б. Золотой Рог и контрольного района (Ы- кл/мл)

Гаким образом, в бухте Золотой Рог выявлена зональность в распределении бапериопланктона, и в частности гетеротрофной микрофлоры, обусловленная высокой плотностью бактерий в местах поступления в бухту органических стоков Характер органического загрязнения оказывает существенное влияние не только на структуру микробного сообщества, но и на состояние микроорганизмов, в частности на их физиологические и биохимические свойства. Для б. Золотой Рог, характеризующейся низким водообменом и высокой антропогенной нагрузкой, факторами, лимитирующими численность и состав микроорганизмов поверхностных вод.

является температура и кислород. При этом температура регулирует численность аллохтонной микрофлоры, а кислород - автохтонной.

а б

Рис. 7. Изменение численности микроорганизмов окисляющих нефтеуглеводороды (НУОМ) (а) и фенолы (ФОМ) (б) и концентраций поллютантов в б. Золотой Рог

НУ - нефтеуглеводороды, Ф - фенолы

Оценка восстановительного потенциала микробного сообщества б.

Золотой Рог в условиях ее хронического загрязнения

Изучение гидролитической активности коллекции штаммов, выделенных из б. Золотой Рог, показало, что наибольшее количество бактерий, обладающих ферментативной активностью, было выявлено в районе устья р. Объяснение. Максимальное количество микроорганизмов с протеолитической, амилолитической и липолитической активностью микроорганизмов, изолированно из б. Золотой Рог осенью и весной.

Из литературных источников известно, что адаптация бактерий к действию химических токсикантов в морской воде сопровождается повышением деструктивной активности микроорганизмов (Цыбань и др., 1981; Израэль, Цыбань, 1989; Иваница, 1990). В связи с этим была изучена устойчивость исследуемых штаммов к высоким концентрациям нефти и фенола. Результаты показали, что 0,2%-ю концентрацию нефти в среде выдерживали практически все исследуемые штаммы. Увеличение содержания нефтепродукта оказывало постепенный ингибирующий эффект, при этом прекращения роста штаммов отмечено не было. Максимальный ингибирующий эффект в отношение исследуемых бактерий наблюдался при внесении в среду 0,7% нефти. В этом случае доля устойчивых штаммов соаавляла 11,3%. Наиболее высокая резистентность к фенолу обнаружена у 5% штаммов, которые росли на средах с 0,5% содержанием фенола.

На основе визуального наблюдения установлено, что десять из тридцати исследуемых штаммов полностью разрушали дизельное топливо в течение 5 суток. Остальные штаммы разлагати поллютант через 7 суток. Исчезновение мазутной пленки наблюдали через 10 суток культивирования. При этом всего два штамма были способны полностью разрушать поллютант.

Таким образом, микроорганизмы, выделенные из б. Золотой Рог, высокоусюйчивые к повышенным концентрациям нефтеуглеводородов и фенолов, принимают активное участие в разрушении поллютантов. Сформированная коллекция микроорганизмов, разрушающих нефтеу1 леводороды и фенолы и простые органические вещества, может быть рекомендована к использованию в целях ремедиации морской среды б. Золотой Рог.

ВЫВОДЫ

1. Хроническое органическое загрязнение б. Золотой Рог вызывав! изменения структуры микробного сообщества в сравнении с контрольным районом, которые проявляются в увеличении численности специфических эколого-трофических групп бактерий (нефтеокисляющих, фенолокисляющих, энтеробактерий и т.д.) в зависимости от характера загрязнения (техногенное и хозяйственно-бытовое).

2. Установлено неравномерное распределение численности индикаторных групп бактерий в поверхностных водах по периметру бухты Золотой Poi. Максимальные концентрации гетеротрофов, в частности энтеробактерий, выявлены в районах выхода канализационных и хозяйственно-бытовых стоков (р. Объяснение и Торговый порт). Наибольшие количества нефтеуглсводород- и фенолокисляющих бактерий обнаружены в районе нефтебазы и местах скопления судов (Торговый порт, Мальцевская переправа)

3. В б. Золотой Рог, характеризующейся низким водообменом и значительным хроническим органическим загрязнением, численность микроорганизмов лимитируется такими факторами, как температура и кислород. При этом температура регулирует рост и размножение аллохтонной микрофлоры, а кислород - автохтонной.

4. В летний период в б. Золотой Poi на фоне увеличения численности бактериопланктона отмечено снижение его физиологической активности в отличие о г контрольного района, где рост физиологической активности совпадал с увеличением численности микроорганизме в.

5. В микробных биоценозах поверхностных вод б. Золотой Рог преобладают микроорганизмы с ферментативным типом метаболизма в отличие от контрольного района, где превалируют микроорганизмы с окислительным типом обмена.

6. Показано преобладание аллохтонной микре флоры в летний период времени на примере изменения численности эн геробактерий, представленных в основном родами Escherichia, Enterobacter, Klebsiella. Доминирование

автохтонной микрофлоры доказано в зимний период времени на примере аммонийокисляюших и нитритокиеляющих бактерий, участвующих в круговороте азота.

7. У штаммов микроорганизмов, выделенных из б. Золотой Рог, установлена высокая гидролитическая активность (с максимальными значениями осенью и весной), а также нефте- и фенолокисляющая активность, что указывает на способность поверхностных вод к самоочищению.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Бузолева JT.C., Безвербная И. П., Калитина Е.Г. Микробиологическая оценка качества прибрежных вод бухты Золотой Рог // Здоровье семьи - XXI век: Материалы VII международной научной конференции. - Пермь (Россия) -Валетта (Мальта), 2003. - С. 38-39.

2. Калитина Е.Г., Бузолева Л.С., Безвербная И.П. Применение микробной индикации для оценки экологического потенциала микробного сообщества б. Золотой Рог // Биология- наука XXI века: Материалы VII школы-конференции молодых ученых. - Пущино, 2003. - С. 277-278.

3. Driga N.V., Babich T.V., Kalitina E.G. Sanitary condition of the coastal area of Vladivostok city // Microorganisms in ecosystems of lakes, rivers and reservoirs: Abstracts of International Baikal Symposium on Microbiology. - Irkutsk, 2003. -C. 33 -34.

4. Дрига H.B., Калитина Е.Г., Бузолева Л.С. Критическое состояние рекреационных зон города Владивостока // Общественное здоровье. Гигиена труда. Экология: Материалы XXXIX научно-практической конференции с международным участием. - Новокузнецк, 2004. - С. 149-152.

5. Бузолева Л.С., Безвербная И.П., Дрига Н.В., Калитина Е.Г. Микробиологическая оценка качества прибрежных вод рекреационных зон приморского края // Здоровье семьи - XXI век: Материалы VIII международной научной конференции. - Гоа, 2004. - С. 48-50.

6. Калитина Е.Г'., Бузолева Л.С. Участие основных физиологических групп бактерий в деструкции органического вещества в б. Золотой Рог // Вестник БГТУ. №8. 2004. - С. 77-79.

7. Калитина Е Г. Сравнительная характеристика степени загрязнения акватории б. Золотой Рог // VII региональная когференция по актуальным проблемам экологии, морской биологии и биотехнологии. - Владивосток,

2004. - С.57-58.

8. Калитина Е Г., Анисимова Н.И., Бабич Т.В., Смирнова М.С., Дегтярева В.А., Бузолева JI.C. Оценка экологическою состояния бухты Золотой Рог г. Владивостока с помощью методов микробной индикации // Здоровье семьи - * 21 век: материалы IX международной научной конференции. - Далянь: Изд-

во ПОНИЦАА, 2005. - С. 142-145.

9. Калитина Е Г, Бузолева JI.C., Анисимова Н.И Динамика численности 1 энтсробактерий, выделенных из загрязненных морских вод бухты Золотой

Рог залива Петра Великого Японского моря // Природные условия, история и кульгура западной Монголии и сопредельных регионов: Материалы VII международной конференции. Т.2. - Кызыл: Изд-во ТувиКОПР СО РАН,

2005.-С. 251 -255.

Ю.Калишна ГГ., Бузолева Л.С. Микробиологическая оценка загрязнения органическими вещес1вами поверхностных вод бухты Золотой Рог // Морская экология - 2005' Материалы международной научно-практической конференции. 7 2. - Владивосток, 2005. - С. 77 - 81. И.Ьуюлева JI.C., Безвербная И.П., Журавель Е.В., Калитина Е.Г. Микробиологический мониторинг качества морской среды окраинных морей Российски о Дальнего Востока // Океанология. 2006. Т. 46, № 1. - С. 50-56. 12.Калитина Е.Г., Безвербная И.П., Бузолева Л.С Динамика численности гидролитически-активной микрофлоры в условиях комплексного зафязнения бухты Золотой Рог // Электронный ж\рнал «Исследовано в России», 007. с. 56 - 66. 2006.

(http^/zhurnal.apc relarn ru/arcticles/2006/007,pdf).

КАЛИТИНА Елена Геннадьевна

ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА СТРУКТУРУ И СОСТОЯНИЕ МИКРОБНЫХ СООБЩЕСТВ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОД БУХТЫ ЗОЛОТОЙ РОГ

АВТОРЕФЕРАТ

Подписано в печать 17 05 2006 г Формат 60х84'16 Уел печ. л 1 Тир 100 экз Заказ 345 Отпечатано с оригинала заказчика

Типография ТИНРО-центра г. Владивосток, ул Западная, 10

АШ/L

is 1 3 9 О 9

ч

I

I

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Калитина, Елена Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.5

ГЛАВА 1. ЗАГРЯЗНЕНЕНИЕ МОРСКИХ ПРИБРЕЖНЫХ ВОД ОРГАНИЧЕСКИМИ ВЕЩЕСТВАМИ (ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР)

1.1. Источники поступления органических веществ в морские воды.11

1.2. Характеристика основных органических загрязнителей, поступающих в морскую среду вместе со сточными водами.17

1.3. Антропогенное загрязнение прибрежных морских вод в ф промышленно-развитых странах.20

1.4. Микроорганизмы как индикаторы и ремедиаторы морской щ среды.40

ГЛАВА 2. РАЙОН РАБОТ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Краткая характеристика районов работ.56

2.2. Материалы и методы исследования.59

ГЛАВА 3. ХИМИКО-ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА

ОРГАНИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ МОРСКИХ ВОД Б. ЗОЛОТОЙ РОГ

Оценка качества морской среды по гидрохимическим показателям.76

Распределение азота и фосфора в поверхностных водах б. Золотой Рог.81

3.3. Содержание нефтеуглеводородов и фенолов в поверхностных водах бухты Золотой Рог.90

ГЛАВА 4. ОЦЕНКА ИЗМЕНЕНИЙ, ПРОИСХОДЯЩИХ В МИКРОБНЫХ СООБЩЕСТВАХ Б. ЗОЛОТОЙ РОГ В УСЛОВИЯХ ЕЕ ХРОНИЧЕКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ

4.1. Оценка общей численности и физиологической активности бактериопланктона.96

4.2. Качественная и количественная характеристика основных эколого-трофических групп гетеротрофных микроорганизмов поверхностных вод б. Золотой Рог

4.2.1. Анализ общей численности гетеротрофных микроорганизмов в поверхностных водах б. Золотой Рог.107

4.2.2. Характеристика гетеротрофных микроорганизмов в условиях хронического антропогенного загрязнения поверхностных вод б. Золотой Рог.110

4.2.3. Количественный и качественный анализ энтеробактерий, как представителей аллохтонной микрофлоры в поверхностных водах б. Золотой Рог.112

4.2.4. Оценка численности автохтонной микрофлоры, принимающей участие в круговороте азота.115

4.2.5. Нефтеуглеводородокисляющие и фенолоокисляющие бактерии поверхностных вод б. Золотой Рог.120

ГЛАВА 5. ОЦЕНКА ВОССТАНОВИТЕЛЬНОГО ПОТЕНЦИАЛА МИКРОБНОГО СООБЩЕСТВА БУХТЫ ЗОЛОТОЙ РОГ В УСЛОВИЯХ ЕЕ ХРОНИЧЕКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ

5.1. Распределение численности гидролитически-активной микрофлоры в поверхностных водах б. Золотой Рог.127

5.1.1. Влияние факторов среды и длительного хранения штаммов на синтез гидролитических ферментов микроорганизмами.137

5.2. Характеристика нефтеуглеводород- и фенолокисляющих бактерий.142

ВЫВОДЫ.148

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние органического загрязнения на структуру и состояние микробных сообществ поверхностных вод бухты Золотой Рог"

Бухта Золотой Рог относится к акваториям с чрезвычайно высоким уровнем загрязнения. Значительную его часть составляют органические вещества хозяйственно-бытовых сточных вод, а также загрязнители техногенного происхождения (нефтеуглеводороды, фенолы и т.д.), источниками которых являются большое скопление судов и расположенная в порту нефтебаза. По официальным данным наибольший объем загрязненных сточных вод сбрасывают предприятия Владивостокской ТЭЦ-2 - 244,6 млн м3/год , водоканализационного хозяйства города - 25,1 млн м3/год и рыбного порта — 5,5 млн м3/год. Так, только в 2001 г. предприятиями в бухту, объем которой составляет 66 млн м3, было сброшено 278 млн м3, то есть, суммарный годовой сброс сточных вод в бухту более чем в 4 раза превышал ее объем (Малышев и др., 2002). Загрязнения поступают сюда также с водами р. Объяснение, которая сама является приемником сточных вод большого количества объектов, а также подвергается воздействию теплых вод ТЭЦ — 2 (Гаврилевский и др., 1998). По данным А.В. Ткалина с соавторами (1993), среднегодовое содержание нефтеуглеводородов в бухте превышает ПДК в 23 раза, а в районах морского Торгового порта концентрация поллютантов была выше ПДК в 55 раз, поэтому морские воды б. Золотой Рог классифицируют как очень грязные.

Постоянный обмен загрязненных вод бухты с водными массами залива Петра Великого может способствовать распространению загрязнителей в морские акватории, не подверженные существенному загрязнению, и оказывать влияние на выживаемость ценных промысловых видов морских организмов, находящихся под охраной в Дальневосточном государственном морском заповеднике.

Мощное антропогенное загрязнение бухты оказывает существенное влияние на структуру сообществ морских организмов. К настоящему времени известно, что б. Золотой Рог отличается небольшим видовым разнообразием, но высокой численностью доминирующих видов морских организмов, устойчивых к органическому загрязнению, что характерно для акваторий с высокой антропогенной нагрузкой (Ткалин и др., 1993; Ващенко, 2000; Фадеева, Фадеев, 2001; Бегун, 2002; Звягинцев и др., 2004).

Следует отметить, что до настоящего времени не было проведено исследований, касающихся изучения состояния и структуры микробных сообществ в условиях высокого антропогенного загрязнения б. Золотой Рог. Известны лишь единичные работы, в которых оценивалась общая численность бактерий и количество гетеротрофных микроорганизмов (Краткий обзор., 1979; Михайлов и др., 1987; Обзор экологического состояния., 1990; Шульгина и др., 1995). И.П. Безвербной (2005) из поверхностных вод бухты были выделены и изучены штаммы бактерий, устойчивые к тяжелым металлам.

Тем не менее, именно микроорганизмы играют основную роль в круговороте веществ в природе и, следовательно, в процессах восстановления морской среды.

Возрастающее антропогенное загрязнение морских вод способно изменить состояние морских микробных сообществ, нарушить его внутреннее динамическое равновесие, поддерживаемое постоянной функциональной саморегуляцией ее составляющих. Поскольку бактериопланктон неразрывно связан с другими компонентами биоценоза, то нарушение его характеристик, безусловно, повлечет за собой изменения структурно-функциональных связей в экосистеме моря и предопределит его переход на иной трофический уровень (Олейник и др., 1996). Поэтому оценка изменений, происходящих в микробном сообществе, в результате хронического антропогенного загрязнения б. Золотой Рог, необходима для определения устойчивости функционирования микроорганизмов, что может быть выявлено на основе изучения структуры и состояния микробных сообществ б. Золотой Рог.

В связи этим, целью работы было - изучить структуру и состояние микробных сообществ под влиянием хронического антропогенного загрязнения б. Золотой Рог в сравнении с контрольным районом, расположенным в зоне морского заповедника.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить влияние органического загрязнения и гидрохимических показателей морской воды на динамику численности и физиологическую активность бактериопланктона поверхностных вод б. Золотой Рог и контрольного района

2. Исследовать структуру микробных сообществ поверхностных вод б. Золотой Рог в условиях высокого органического загрязнения (техногенного и хозяйственно-бытового).

3. Определить численность и деструктивную активность гидролитически-активных бактерий, нефтеуглеводород - и фенолокисляющих бактерий как потенциальных ремедиаторов морской среды.

Научная новизна

Впервые, на основании данных микробиологического мониторинга исследована структура и состояние микробных сообществ, сформированных под влиянием хронического органического (техногенного и хозяйственно-бытового) загрязнения. Выявлены факторы, лимитирующие размножение бактерий в бухте с низким водообменом и высокой антропогенной нагрузкой.

Показано неравномерное распределение численности микроорганизмов по периметру б. Золотой Рог, зависящее от близости расположения станций к источнику загрязнения.

На основании выявленной высокой гидролитической активности микроорганизмов, населяющих поверхностные воды б. Золотой Рог, доказана ее самоочищающая способность.

Практическая ценность работы

С помощью микробиологических методов, характеризующих структуру и физиологическую активность микробной флоры, дана оценка экологического состояния поверхностных вод б. Золотой Рог, подвергающихся хроническому органическому загрязнению.

Для изучения самоочищающей способности микробных сообществ поверхностных вод акваторий с низким водообменом рекомендовано использовать не только показатель численности микрофлоры, но и физиологическую активность бактерий, с учетом типа их метаболизма.

Собрана коллекция штаммов, обладающих высокой гидролитической активностью, являющихся потенциальными ремедиаторами среды. Коллекция культур и материалы диссертации используются в лекционном курсе по экологии бактерий, а также большом микробиологическом практикуме на кафедре общей экологии ДВГУ.

Защищаемые положения:

1. Постоянное поступление органических загрязняющих веществ в акваторию б. Золотой Рог, характеризующейся низким водообменом, приводит к существенным изменениям структуры микробных сообществ поверхностных морских вод, при этом, определяющим фактором является характер загрязнения. В ответ на техногенное загрязнение доминирующими эколого-трофическими группами, по сравнению с контрольным районом, являются углеводородокисляющие микроорганизмы, загрязнение бытовыми стоками приводит к преобладанию энтеробактерий. Факторами, регулирующими численность и физиологическое состояние микрофлоры, являются температура и кислород.

2. Процессы ремедиации в поверхностных водах б. Золотой Рог осуществляются за счет эколого-трофических групп микроорганизмов, утилизирующих как простые (белки, жиры и углеводы), так и сложные органические субстраты (нефтеуглеводороды и фенолы). Гидролитическая активность микроорганизмов наиболее выражена осенью и весной.

Апробация результатов диссертации

Результаты работы были представлены на Международной научно-практической конференции «Приоритет России XXI века: от биосферы и техносферы к ноосфере» (Пенза, 2003), на Общероссийской конференции «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2003), на Международном Байкальском симпозиуме по микробиологии «Microorganisms in ecosystems of lakes, rivers and reservoirs» (Иркутск, 2003), на VII региональной конференции по актуальным проблемам экологии, морской биологии и биотехнологии (Владивосток, 2004), на IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Далянь, 2005), а также на семинарах ДВГУ и НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН. По теме диссертации опубликовано 12 работ.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 181 стр., состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, трех глав исследований, выводов, списка литературы, состоящего из 247 источников, в том числе 65 иностранных, и приложения. Работа содержит 43 рисунка и 18 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Калитина, Елена Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. Хроническое органическое загрязнение б. Золотой Рог вызывает изменения структуры микробного сообщества в сравнении с контрольным районом, которые проявляются в увеличении численности специфических эколого-трофических групп бактерий (нефтеокисляющих, фенолокисляющих, энтеробактерий и т.д.) в зависимости от характера загрязнения (техногенное и хозяйственно-бытовое).

2. Установлено неравномерное распределение численности индикаторных групп бактерий в поверхностных водах по периметру бухты Золотой Рог. Максимальные концентрации гетеротрофов, в частности энтеробактерий, выявлены в районах выхода канализационных и хозяйственно-бытовых стоков (р. Объяснение и Торговый порт). Наибольшие количества нефтеуглеводород-и фенолокисляющих бактерий обнаружены в районе нефтебазы и местах скопления судов (Торговый порт, Мальцевская переправа)

3. В б. Золотой Рог, характеризующейся низким водообменом и значительным хроническим органическим загрязнением, численность микроорганизмов лимитируется такими факторами, как температура и кислород. При этом температура регулирует рост и размножение аллохтонной микрофлоры, а кислород - автохтонной.

4. В летний период в б. Золотой Рог на фоне увеличения численности бактериопланктона отмечено снижение его физиологической активности в отличие от контрольного района, где рост физиологической активности совпадал с увеличением численности микроорганизмов.

5. В микробных биоценозах поверхностных вод б. Золотой Рог преобладают микроорганизмы с ферментативным типом метаболизма в отличие от контрольного района, где превалируют микроорганизмы с окислительным типом обмена.

6. Показано преобладание аллохтонной микрофлоры в летний период времени на примере изменения численности энтеробактерий, представленных в основном родами Escherichia, Enterobacter, Klebsiella. Доминирование автохтонной микрофлоры доказано в зимний период времени на примере аммонийокисляющих и нитритокисляющих бактерий, участвующих в круговороте.

7. У штаммов микроорганизмов, выделенных из б. Золотой Рог, установлена высокая гидролитическая активность (с максимальными значениями осенью и весной), а также нефте- и фенолокисляющая активность, что указывает на способность поверхностных вод к самоочищению.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Калитина, Елена Геннадьевна, Владивосток

1. Айвазян С.А., Енюков И.С., Мешалкин А.Д. Прикладная статистика. Исследование зависимостей. М.: Финансы и статистика, 1985. - 168 с.

2. Акимова Т.А., Кузьмин А.П., Хаскин В.В. Экология. Природа — Человек — Техника: Учебник для вузов. М.: ЮНИТИ-ДАНА, 2001. - 343 с.

3. Алферова А.А., Нечаев А.П. Замкнутые системы водного хозяйства промышленных предприятий, комплексов и районов. М.: Стройиздат, 1987. -С. 12-32. Антропогенное перераспределение органического вещества в биосфере. - СПб.: Наука, 1993. - 206 с.

4. Башкатова Н.А. , Северина Л.О. Экзолипазы некоторых видов Pseudomas // Микробиология. 1978. - Т. 47, №2. - С. 234 - 240.

5. Бегун А.А. Фитопланктон прибрежных вод г. Владивостока в условиях антропогенного загрязнения // Морская экология — 2002: Материалы международной научно-практической конференции. Владивосток: МГУ, 2002.- 175 с.

6. Безбородое A.M. Секреция ферментов у микроорганизмов. М.: Наука, 1984. - 426 с.

7. Безвербная И.П., Бузолева Л.С., Христофорова Н.К. Металлоустойчивые гетеротрофные бактерии в Прибрежных акваториях Приморья // Биология моря. 2005. - Т.31, №2. - С. 89 - 93.

8. Белан Т.А. Полихеты как индикаторы загрязнения Амурского залива (Японское море) // Многощетинковые черви и их экологическое значение. -СПб.: ЗИН РАН, 1992. С. 120 - 125.

9. Белоусова Н.И., Шкидченко А.Н. Деструкция нефтепродуктов различной степени конденсации микроорганизмами при пониженных температурах // Прикладная биохимия и микробиология. 2004. - Т. 40, №3. - С. 312 — 316.

10. Белоусова Н.И., Барышникова JI.M., Шкидченко А.Н. Отбор микроорганизмов, способных к деструкции нефти и нефтепродуктов при пониженных температурах // Прикладная биохимия и микробиология. 2002. -Т. 38,№5.-С. 513-517.

11. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. -115 с.

12. Битюкова В.Р. Социально-экологические проблемы развития городов России. М.: УРСС, 2004. - 448 с.

13. Блиева Р.К., Сафуани Ж.Е., Искакбаева Ж.А. Влияние различных источников азота и углерода на биосинтез протеолитических ферментов у культуры Aspergillus awamori // Прикладная биохимия и микробиология. -2003. Т.39, №2. - С. 213 - 216.

14. Бухарин О.В., Немцева Н.В. Фермент-субстратные механизмы выживания бактерий в водных биоценозах // Микробиологический журнал. — 2003. №4. — С. 27-31.

15. Валова В.Д. Основы экологии: Учебное пособие. 2-е изд., перераб. и доп.- М.: Издательский Дом «Дашков и К°, 2001. - 212 с.

16. Вахненко Р.В. Морские порты Японо-морского региона: экономико-географическая характеристика.- Владивосток: Дальнаука, 1998. 132 с.

17. Вахненко Р.В. География морских портов Дальнего Востока России. -Владивосток: Дальнаука, 2002. С. 17-25.

18. Ващенко М.А. Загрязнение залива Петра Великого Японского моря и его биологические последствия // Биология моря. — 2000. Т. 26, №3. - С. 149 -159.

19. Вельков В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы // Биотехнология. 1995. № 3 - 4. - С. 20- 27.

20. Владимиров В.А., Измалков В.И. Катастрофы и экология.- М.: Просвещение, 2000. 516 с.

21. Все о г. Гамбурге. Режим доступа: http://www.frg.ru/hamburg.php Дата обращения 12.12.2005 г..

22. Выделение и идентификация микроорганизмов: Учебно-методическое пособие / Под ред. Т. А. Желдаковой. Минск, Высшая школа, 2003. - 17 с.

23. География: энциклопедия. М.: Просвещение, 1999. - С. 78 - 82.

24. Глазовская М.А., Добровольская Н.Г. Геохимические функции микроорганизмов. М.: МГУ, 1984. - С.66 - 70.

25. Глобальная экология. Гидросфера. — Режим доступа: http://nis.spb.ru/school/94/ecology/ hvdrosphere.htm Дата обращения 10.12.2005

26. Головин В. Л., Ничепоренко Е.Н. Экологические проблемы загрязнения акваторий Японского и Охотского морей нефтепродуктами. Режим доступа: http://seapi.msun.ru/seapi/konf/confl 31501.html#linkl 1 Дата обращения 02.12.2005 г..

27. Государственный доклад «О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в 1997 году». М.: Государственный комитет Российской Федерации по охране окружающей среды, 1998. - С. 78 - 129.

28. Государственный доклад «О состоянии окружающей среды Российской Федерации в 1998 году». М.: Государственный комитет Российской Федерации по охране окружающей среды, 1999. - С. 89 - 132.

29. Грушко Я.М. Вредные органические соединения в промышленных сточных водах. JL: Химия, 1976. - 128 с.

30. Гусев М.В., Коронелли Т.В., В.В. Ильинский. Нефтяное загрязнение и микрофлора морских экосистем // Человек и биосфера. 1980. №5. - С. 36 - 52.

31. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Физиолого-биохимические основы микробиологического окисления нефтепродуктов в море // Человек и биосфера. 1982. № 7. - С. 20 - 29.

32. Гусев М.В., Коронелли Т.В., Максимов В.Н., Ильинский В.В. Биодеградация дизельного топлива в присутствии легкодоступного органического вещества // Человек и биосфера. 1982. № 7. - С. 8 — 19.

33. Гусев М.В., Коронелли Т.В., Сенцова О.Ю. Использование микроорганизмов в качестве биоиндикаторов с целью изучения экологических последствий загрязнения вод // Экологические последствия загрязнения океана. JL: Гидрометеоиздат, 1985. - С. 113-125.

34. Гусева Т.В., Молчанова Я.П., Заика Е.И., Винниченко В.И. Гидрохимические показатели состояния окружающей среды. М.: Эколайн, 2000.-С. 67-89.

35. Давранов К.Д., Табак М.Я. Влияние источников углерода на синтез липазы микромицетом Oospora lactis // Прикладная биохимия и микробиология. 1990. - Т. 26, №3. - С. 403 - 407.

36. Давыдкова И.Л., Фадеева Н.П., Ковековдова Л.Т., Фадеев В.И. Содержание тяжелых металлов в тканях доминирующих видов бентоса и в донных осадках бухты Золотой Рог Японского моря // Биология моря. 2005. -Т. 31, №3.- С. 31 -44.

37. Демина Т.А. Экология, природопользование, охрана окружающей среды. М.: Аспект пресс, 1995. — С. 45 — 76.

38. Димитриева Г.Ю. Микроорганизмы-биоиндикаторы фенольного загрязнения прибрежной морской среды // Биология моря. 1995. - Т. 20, № 6. -С. 407-411.

39. Дроздовская О.А. Поиск микроорганизмов индикаторов и деструкторов фенолов в прибрежных водах дальневосточных морей: Дис. . канд. биол. Наук / ДВГУ. - Владивосток, 2000. - С. 78 - 112.

40. Дулепов В.И. О систематическом мониторинге прибрежных вод г. Владивостока // Сборник научных трудов первой региональной научно-технической конференции «Приморские зори». Владивосток, 1998. - 156 с.

41. Егоров Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. -М.: МГУ, 1983. 220 с.

42. Ежегодник качества морских вод дальневосточных морей СССР по гидрохимическим показателям. Владивосток: Гидрометеоиздат,1989. - 45 с.

43. Еремеева С.В., Курапов А.А., Мельников С.А. Современное экологическое состояние северной части Каспийского моря в зимнее-весенний период // Вестник МАНЭБ. 1999. №9. - С. 51 - 55.

44. Еремеева С.В. Анализ состояния акватории Северного Каспия по микробиологическим показателям // Морская экология 2002: Материалымеждународной научно-практической конференции. Владивосток: МГУ, 2002. С. 96-99.

45. Журавель Е.В., Безвербная И.П., Бузолева JI.C. Микробная индикация загрязнения прибрежных вод Охотского моря и Авачинской бухты // Биология моря. 2004. - Т. 30, №2. - С. 138 - 142.

46. Журавель Е.В. Опыт применения химических и микробиологических методов для оценки качества прибрежных вод // Микробная индикация и ремедиация: Материалы первой международной школы. Владивосток: Изд-во Дальневосточного ун-та, 2004. - С. 65 - 79.

47. Заварзин Г.А., Колотилова Н.Н. Введение в природоведческую микробиологию. М.: Книжный дом «Университет», 2001. - 256 с.

48. Звягинцев А.Ю., Будникова JI.JI. Разноногие раки (Amphipoda, Crustacea) в обрастании системы охлаждения Владивостокской ТЭЦ -2 // Известия ТИНРО. 2003. - Т. 131. - С.280 -298.

49. Звягинцев А.Ю., Корн О.М., Куликова В.А. Сезонная динамика пелагических личинок и оседание организмов — обрастателей в условиях термального загрязнения // Биология моря. 2004. -Т. 30, №4. - С. 296 — 307.

50. Иваница Т.А. Микробиологические методы экологического мониторинга морской среды // Тез. Докл. Респ. научно-практической конференции. -Одесса, 1990. С. 46-47.

51. Иванова Е.П., Михайлов В.В. Микроорганизмы — ассоцианты мидии Crenomytilus grayanus и их гидролитическая активность // Микробиология. -1992. Т.61, №3. - С. 514 - 519.

52. Израэль Ю.А., Цыбань А.В. Антропогенная экология океана. JL: Гидрометеоиздат, 1989. - 528 с.

53. Ильинский В.В., Гусев М.В., Коронелли Т.В. Углеводородокисляющая микрофлора незагрязненных морских вод // Микробиология. 1979. - Т. 48, №2. - С. 346-320.

54. Ильинский В.В., Поршнева О.В., Семененко М.Н. Углеводородокисляющие микроорганизмы в прибрежных и открытых водах Можайского водохранилища // Водные ресурсы. 1998. - Т. 25, №3. - С. 335 -338.

55. Ильинский В.В. Микробиологический мониторинг нефтяного загрязнения: практические аспекты // Новые технологии в защите биоразнообразия в водных экосистемах: Материалы международной конференции. М.: МАКС Пресс, 2002. - С. 32.

56. Исследование экосистемы Берингова моря / Под ред. Ю.А. Израэля, А.В. Цыбань. JL: Гидрометеоиздат, 1990. Вып.З. - 344 с.

57. Исследование экосистем Берингова и Чукотского морей / Под ред. Ю.А. Израэля, А.В. Цыбань. СПб.: Гидрометеоиздат, 1992. - С. 93 - 220.

58. Калитина Е.Г., Бузолева JI.C. Участие основных физиологических групп бактерий в деструкции органического вещества в б. Золотой Рог // Вестник БГТУ. 2004. №8. - С. 77-79.

59. Каретникова Е.А. Оценка экологического риска фенольного загрязнения водных экосистем: Автореф. дисс. канд. биол. наук / Институт водных и экологических проблем ДВО РАН. Хабаровск, 2002. — 22 с.

60. Квасников Е.И., Кпюшникова Т.М. Микроорганизмы-деструкторы нефти в водных бассейнах. — Киев: Наукова думка, 1981. 131 с.

61. Китанович Б. Планета и цивилизация в опасности. М.: Просвещение, 1991.-С. 65-74.

62. Кобзев Е.Н., Петрикевич С.Б., Шкидченко А.Н. Исследование устойчивости ассоциации микроорганизмов-нефтедеструкторов в открытой системе // Прикладная биохимия и микробиология. — 2001. Т. 37, №4. - С. 413-417.

63. Ковалева Н.В. Изменение численности бактериопланктона северозападной части Черного моря в зависимости от гидролого-гидрохимических факторов // Микробиологический журнал. 2003. - Т.65, №5. - С. 3 — 8.

64. Колесникова И.Г., Куимова Т.Ф. Быстрый отбор микроорганизмов из рода Pseudomonas и порядка Actinomycetales, образующих внеклеточные лецитиназы // Микробиология. 1976. №6. - С. 987 — 989.

65. Колтукова Н.В., Бондарчук А.А., Коваленко Э.А. и др. Некоторые физико-химические свойства амилолитического комплекса Bacillus mesentericus // Прикладная биохимия и микробиология. 1990. - Т. 26, №1. - С. 50 - 52.

66. Кондратьева JI.M. Морские бактерии и первичное почвообразоваие на вулканопластах. Владивосток: Дальнаука, 1996. - 118 с.

67. Кондратьева JI.M., Каретникова Е.А. Микробиологическая индикация фенольного загрязнения водных экосистем // Экология пойм сибирских рек и Арктики: Материалы II совещания. Томск, 2000. - С. 248 — 256.

68. Копылов Ю.П., Дивавин И.А. Рост нефтеокисляющих микроорганизмов рода Mycobacterium на многокомпонентных субстратах // Микробиологический журнал. 1986. - Т.48, №2. - С. 21 -38.

69. Коробкин В.И., Передельский JI.B. Экология. Ростов на Дону: Феникс, 2003. - 576 с.

70. Коронелли Т.В., Ильинский В.В., Семененко М.М. Нефтяное загрязнение и стабильность морских экосисем // Экология. 1994. №4. - С. 78 —81.

71. Коронелли Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т. 32, №6. - С. 579-585.

72. Коршунов В.В. Биосинтез протеиназы и амилазы Aspergillus tericolla в глубинных условиях // Прикладная биохимия и микробиология. 1965. №1. -С. 56-62.

73. Краткий обзор гидробиологического контроля состояния морей СССР за 1978 г. М.: Госкомгидромет, ГОИН, 1979. - 271 с.

74. Краткий обзор гидробиологического контроля состояния морей СССР за 1980 г. М.: Госкомгидромет, ГОИН, 1981. - 137 с.

75. Крупнейшие города мира: проблемы экономики и управления. / Под ред. В.А. Виноградова. М.: УРСС, 1995. - 172 с.

76. Кузнецов С.И., Дубинина Г.А. Методы изучения водных микроорганизмов. -М.: Наука, 1989. 288 с.

77. Лаппо Г.М. География городов. М.: Просвещение, 1997. - С. 25 — 51.

78. Леванова Г.Ф. Юшин А.С., Кашников С.Ю. Метод сравнительного биотестирования питьевой воды с помощью индикаторных штаммов бактерий // Гигиена и санитария. 1999. №2. - С. 77 - 79.

79. Малахов В.М., Сенич В.Н. Тепловое загрязнение окружающей среды промышленными преприятиями / Аналитический обзор: серия «Экология», вып. 44. — Новосибирск, 1997. 69 с.

80. Малышев А.А., Иванова К.А., Фролова А.А. Экологическое состояние бухты Золотой Рог залива Петра Великого // Морская экология — 2002: Материалы международной научно-практической конференции. Владивосток: МГУ, 2002. 175 с.

81. Мамонтова Л.И. Основы микробиологического мониторинга водных экосистем и контроля питьевой воды: Автореф. дисс. . докт. биол. наук / Лимнологический институт СО РАН. Иркутск, 1998. - 39 с.

82. Методы общей бактериологии. Т.1. / Под. ред. Ф. Герхарта и др. М.: Мир, 1984.-264 с.

83. Микроорганизмы в экосистемах Приамурья / Кондратьева JI.M., Гаретова Л.А., Имранова Е.Л. и др. Влаливосток: Дальнаука, 2000. - 198 с.

84. Миронов О.Г. О роли микроорганизмов, растущих на нефти, в самоочищении и индикации нефтяного загрязнения в море // Океанология. -1970. Т. 10, № 5. - С. 820 - 827.

85. Митчелл П. 101 ключевая идея: Экология. М.: ФАИР, 2001. - 224 с.

86. Мишуков, В.Ф. Комплексные исследования нефтяного загрязнения океана // Вестник ДВО РАН, 1997. № 4. - С. 105-118.

87. Молев В.П. Владивостокская ТЭЦ-2 как источник радиоактивного загрязнения окружающей среды // Экологический вестник Приморья. 2000. № 6. - С. 9-13.

88. Мониторинг и методы контроля окружающей среды: Учебное пособие в 2 ч.: Ч. 2. Специальная / Ю.А. Афанасьев, С.А. Фомин, В.В. Меньшиков и др. -М.: Изд-во МНЭПУ, 2001. 337 с.

89. Найденко В.В., Губанов Л.Н, Петрова Е.Н. Глобальные эколого-экономические проблемы: Учебное пособие. Нижний Новгород, 2002. - 294с.

90. Народная энциклопедия городов и регионов. Режим доступа: http://rfdata.al.rulautoicitv/14/64//htm Дата обращения 06.09.2005 г..

91. Народная энциклопедия «Мой город». СПб, 2002. - Режим доступа: http://www.moigorod.ru/gor spb/spb/index.html Дата обращения 11.11.2005 г..

92. Нежмаков А. Морские порты России состояние и перспективы. 2002. -Режим доступа: http://www.icss.ac.ru Дата обращения 16.09.2005 г..

93. Немировская И.А., Люцарев С.В., Шанин С.С. Органические вещества воды и взвеси Сахалинского шельфа // Геохимия. 1997. № 9. - С. 959-966.

94. Немировская И.А. Углеводороды в океане (снег лед - вода-взвесь -донные осадки): Автореф. дисс. канд. биол. наук/МГУ. - М., 2000. - 40 с.

95. Новиков Ю.В. Экология, окружающая среда и человек. М.: Мир, 1998. -С.34-58.

96. Новиков В.Н. Экология. Урбанизация. Жизнь. М.: УРСС, 2002. - 328 с.

97. Обзор состояния загрязненности дальневосточных морей СССР в 1970 г. -М.: ГОИН, 1971.-87 с.

98. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / Под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой. М.: Медицина, 2004. - 576 с.

99. Огородникова А.А., Вейдеман Е.Л., Силина Э.И., Нигматулина Л.В. Воздействие береговых источников загрязнения на биоресурсы залива Петра Великого (Японское море) // Известия ТИНРО. 1997. - Т. 122. - С. 430-450.

100. Огородникова А.А. Эколого-экономическая оценка воздействия береговых источников загрязнения на природную среду и биоресурсы залива Петра Великого. ВладивЬсток: ТИНРО, 2001. - 193 с.

101. Озерова Г.Н., ПЬкшйшевский В.В. География мирового процесса урбанизации. М.: Мир, 2001. - С. 43 - 58.

102. Олейник Г.Н., Якушин Ё.М., Кабакова Т.Н. Реакция бактериопланктона как индикатор изменений в экосистеме водоемов в результате антропогенного загрязнения // Гидробиология. 1996. - Т.32, №2. - С.29 - 41.

103. Определитель бактерий Берджи: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. М.: Мир, 1997. Т.1. 432 с.

104. Определитель бактерий Берджи: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. М.: Мир, 1997. Т.2. 368 с.

105. О состоянии и об охране окружающей среды Российской Федерации в2002 году: Государственный доклад. М.: МПР РФ, 2003. - 479 с.

106. Охрана окружающей среды, природопользование и обеспечение экологической безопасности в Санкт-Петербурге в 2001 году. СПб.: Администрация СПб, 2001. - 461 с.

107. Перетрухина И.В. Изучение антропогенного воздействия на морскую микробиоту литорали Кольского залива // Новые технологии в решении проблем сохранения биоразнообразия в водных экосистемах: Международная научная конференция. М.: МГУ, 2002. - С. 154.

108. Перцик Е.Н. Города мира. География мировой урбанизации. М.: Международные отношения, 1999. - 384 с.

109. Петрикевич С.Б., Кобзев Е.Н., Шкидченко А.Н. Оценка углеводородокисляющей активности микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология. 2003. -Т.39, №1. - С. 25 - 30.

110. Петров К.М. Общая экология: Взаимодействие общества и природы: Учебное пособие для вузов. СПб.: Химия, 1998. - 352 с.

111. Плешакова Е.В., Муратова А.Ю., Турковская О.В. Деградация минерального масла штаммом Acinetobacter calcdaceticus // Прикладная биохиМия и микробиология. 2001. - Т. 37, №4. - С. 398 - 404.

112. Пбдкопаева В.В. Экологическая характеристика прибрежной зоны Японского моря, 2004. — Режйм доступа: http://www.primpogoda.ru Дата обращёния 17.09.2005 г..

113. Подорванова Н.Ф., ИЁашинйикова Т.С., Петренко B.C., Хомйчук J1.C. Основные черты гидрохимии залива Петра Великого (Японское море). -Владивосток: ДВО РАН СССР, 1989. 201 с.

114. Позднякова А.Н. Биохимическое потребление кислорода // Руководство по химическому анализу поверхностных вод суши. JL: Гидрометеоиздат, 1977.-С. 335-340.

115. Потенко Е.И. Химико-экологическая оценка речных вод г. Уссурийска: органические вещества: Автореф. дис. . канд. биол. наук / ДВГУ. -Владивосток, 2002. 27 с.

116. Проблемы и перспективы совершенствования законодательства в области охраны окружающей природной среды // Аналитический вестник Совета Федерации ФС РФ.-2001.-Т.134,№ 4. -С. 22 -23.

117. Ралько В.Д. Экология города: Учебное пособие. Владивосток: ВГУЭС, 1998. - 88 с.

118. Романенко В.И. Гетеротрофная ассимиляция СОг микрофлорой воды // Микробиология. 1964. - Т. 33. - С. 679 - 683.

119. Россия: курс на нефтяные катастрофы // Журнал экология и право. -Режим доступа: http://www.bellona.nO/ru/international/ecopravo/30465 .html Дата обращения 10.09.2005 г..

120. Рубцова С.И. Гетеротрофные бактерии показатели загрязнения и самоочищения морской среды // Экология моря. - 2002. № 62. - С. 32 - 38.

121. Руководство по методам биологического анализа морской воды и донных отложений / Под. ред. А.В. Цыбань. JI.: Гимиз, 1980. - 190 с.

122. Руководство по химическому анализу поверхностных вод. — JI.: Гидрометеоиздат, 1977. С.314-333.

123. Рыбалко А.Е., Спиридонов М.А., Федорова Н.К.и др. Геоэкологическое районирование восточной части Финского залива, особенности миграции и накопления химических элементов // Вопросы геоэкологии Северо-Запада

124. России. СПб.: Северо-Западный региональный геологический центр, 1998. -С. 60-87.

125. Саенко Г.Н. Антропогенное воздействие на биоценозы и таксоны шельфа морей России. М.: Ноосфера, 2001. - С. 383 -416.

126. Салманов М.А. Экология и биологическая продуктивность Каспийского моря. Баку. 1999. - 400 с.

127. Сенявский А. С. Урбанизация России в XX веке. Роль в историческом процессе. М.: Наука, 2003. - 228 с.

128. Синюгин О.А., Слука Н.А. Большой Токио. Режим доступа: http://geo. 1 september.ru/article.php?ID=200401903 ГДата обращения 01.10.2005 г..

129. Скокленева Н.С., Чупышева Н.Г. Оценка последствий антропогенного воздействия на воспроизводство сельди в заливе Петра Великого (Японское море) // Тез. докл. 3-й Всесоюз. Конф. По морской биологии. Киев, 1988. - Ч. 2.-С. 140-141.

130. Смирнова М.А. Использование метода предельных разведений для оценки загрязнения в заливе Анива (Сахалин) // VII региональная конференция по актуальным проблемам экологии, морской биологии и биотехнологии. -Владивосток, 2004. С. 108 - 109.

131. Современные Соединенные штаты Америки: Энциклопедический справочник. М.: Просвещение, 1988. - С. 78 - 112.

132. Состояние окружающей природной среды Мурманской области в 2000 г. -Режим доступа: http://2004.murman.ru/nature/ecology/report00/portl 2 3.shtml Дата обращения 12.10.2005 г..

133. Степановских А.С. Экология: Учебник для вузов. М.: ЮНИТИ-ДАНА, 2001.-703 с.

134. Стоник И.В. Фитопланктон Амурского залива (Японское море) в условиях эвтрофицирования: Автореф. дис. . канд. биол. наук / ИБМ СО РАН. -Владивосток, 1999. 26 с.

135. Тепфер К. Глобальная экологическая перспектива 3: прошлое, настоящее и перспективы на будущее. 2002. Режим доступа: http://www.grida.no/geo/geo3/russian/index.htm Дата обращения 18.09.2005 г..

136. Техногенное загрязнение природных вод углеводородами и его экологические последствия / Под ред. Гольдберг В.М., Зверев В.П., Арбузов А.И. и др. М.: Наука, 2001. - 125 с.

137. Ткалин А.В., Климова Е.В., Шаповалов Е.Н., Белан Т.А. Некоторые региональные последствия антропогенного воздействия на морскую среду. -JL: Гидрометеоиздат, 1990, 179 с.

138. Фадеева Н.П., Фадеев В.И. Структура морских бентосных сообществ в условии загрязнения // Человек в прибрежной зоне: опыт веков: Материалы международной научной конференции. Петропавловск - Камчатский, изд-во КГПУ, 2001.-С. 175-176.

139. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир, 1980. -С. 373-388.

140. Фениксова P.M. Гидролитические ферменты у микроорганизмов. М.: Мир, 1984.-256 с.

141. Хемосинтез: к 100-летию открытия С.В. Виноградским / Гл. ред. М.В. Иванов. М.: Наука, 1989. - С. 41 - 45.

142. Хотунцев Ю.Л. Экология и экологическая безопасность: Учебное пособие для студ. высш. пед. учеб. заведений. М.: Издательский центр «Академия», 2002. - 480 с.

143. Центалович В. Т. Влияние техногенных факторов на биоресурсы Цемесской бухты // Безопасность жизнедеятельности. 2003. №9. - С. 11-15. — Режим доступа: http://www.novtex.ru/bid/annot9.htm#2 Дата обращения 06.09.2005 г..

144. Цыбань А.В. Панов Г.В., Баринова С.П. Индикаторная микрофлора в Балтийском море // Исследование экосистемы Балтийского моря. Вып.З. Л.: Гидрометеоиздат, 1990. - С.69 - 83.

145. Цыбань А.В., Симонов А.И. Процессы микробного окисления нефти в море (обзор) // Океанология. 1978. - Т. 18, №4. - С. 695 - 709.

146. Цыбань , А.В., Теплинская Н.Г. О методе изучения морских липолитических бактерий //Гидробиология. 1974. - Т. 10, №2. - С. 116-121.

147. Цыбань А.В., Теплинская Н.Г. Эколого физиологические своства липолитической и протеолитической микрофлоры в море // Океанология. -1982. - Т. 22, №1. - С. 108 - 114.

148. Черников В.А., Соколов О.А, Байбеков Р.Ф. Агроэкология. Модуль 15: Экологические основы качества воды и здоровье человека. Пущино: ОНТИ ПНЦ, 2004.- 151 с.

149. Шапоренко С.И. Загрязнение прибрежных морских вод России // Водные ресурсы. 1997. - Т.24, №3. - С. 320 - 327.

150. Шкидченко А.Н., Аринбасаров М.У. Изучение нефтедеструктивной активности микрофлоры прибрежной зоны Каспийского моря // Прикладная биохимия и микробиология. 2002. - Т. 38, №5. - С. 509 - 512.

151. Шкидченко А.Н., Петрикевич С.Б., Кобзев Е.Н. Влияние длительности хранения суспензии микроорганизмов нефтедеструкторов на их физиологическую активность // Биотехнология. - 2004. №3. - С. 70 -74.

152. Шульгина JI.B., Загородняя Г.И., Шульгин Ю.П., Бывальцева Т.М. Ми1фофлора дальневосточных морей и ее влияние на продукцию из промысловых гидробионтов // Санитария и гигиена. 1995. - №1. - С. 14-15.

153. Экологическое состояние территории России: Учебное пособие. М.: ACADEMA, 2002. - 128 с.

154. Экосистемы морей и прибрежные экосистемы. Режим доступа: http//www.biodat.ru ГДата обращения 11.10.2005 г..

155. Экологический энциклопедический словарь. М.: Изд. Дом «Ноосфера»,2000. 930 с.1;

156. Экологическое состояние Санкт-Петербурга. — Режим доступа: http://iaera.narod.ru Дата обращения 05.10.2005 г.1.

157. Экологическая обстановка г. Новороссийска. Режим доступа: http://nvis.ru/ecolobs.php Дата обращения 03.08.2005 г..

158. Abed R., Koster J. The direct role of aerobic heterotrophic bacteria associated with cyanobacteria in the degradation of oil compounds // International Biodeterioration and Biodegradation. 2005. - Vol. 55, №1. - P. 29 - 37.

159. Aim E., Burke J. Spain A. Fecal indicator bacteria are abundant in wet sand at fresh water beaches // Water Research. 2003. - Vol. 37, №16. - P. 3978 - 3982.

160. Atlas R.M. Fate of oil from the two major oil spill: role of microbial degradation in removing oil from the Amoco Xcadiz and Ixtoc spill // Environ. Int. -1981.-Vol. 5, № l.-P. 33-38.i

161. Atlas R.M. Bacteria and bioremediation of marine oil spills // Oceanus. 1993. - V.36, №2. - P. 71.

162. Awadhi H., Al-Hasan., Radwan S.S. Comparison of the potential of coastal materials loaded with bacteria for bioremediation oily sea water in batch culture // Microbiol. Res. 2002. Vol. 157, №4. - P. 331 - 336.

163. Bajpaj S.U., Kapur V.I. Abudance of pollution indicator and pathogenic bacteria in Mumbai water // Current science. 2004. - Vol. 87, №4. - P. 765 - 771.

164. Bauer J. E., Capone D.G. Degradation and mineralization of the polycyclic aromatic hydrocarbons anthracene and naphthalene in intertidal marine sediments // Appl. Environ. Microbial. 1985. - Vol. 50. - P. 81 - 90.

165. Blazka P. Phosphorus Cycles in Terrestrial and Aquatic Ecosystems. New York: SCOPE-UNER Regional Workshop, 1989. - P. 232-243.

166. Bourguet N., Torreton J., Galy O. et al., Application of a specific and sensitive radiometric assay for microbial lipase activities in marine water samples from the lagoon of Noume // Appl. environ. Microbiol. 2003. - Vol. 69, №12. - P. 7395 -7400.

167. Bruns K., Dahlman G.D., Gunken W. Distribution and activity of petroleum hydrocarbon degrading bacteria in the North and Baltic seas // Deatsche Hydrographische Zeitshrift. 1993. - Vol. 6. - P. 359 - 369.

168. Caruso G., Genovese L., Mancso M., et al.,. Effect of fish farming on microbial enzyme activities and densities: comparison between three Mediterranean sites // Let. Appl. Microbiol. 2003. - Vol. 37, №4. - P. 324 - 328.

169. Chenje M., Johnson P. Water in Southern Africa. Harare and Maseru. SADS. 1996.-P. 45-49.

170. Davies C.M., Long J.A. Donald M., Ashbolt N.J. Survival of fecal microorganism in marine and freshwater sediments // App. Environ.Microbiol. -1995.-Vol. 61.-P. 1888-1898.

171. Davies K., anderson M., Yates M. Distribution of indicator bacterid in Canyon Lake, California // Water Reserarch. 2005. - Vol. 39, №7. - P. 1277 - 1288.

172. Driga N.V., Babich T.V., Kalitina E.G. Sanitary condition of the coastal area of Vladivostok city // Microorganisms in ecosystems of lakes, rivers and reservoirs: Abstracts of International Baikal Symposium on Microbiology. Irkutsk. 2003. - C. 33 -34.

173. Environment in the European union at the turn of the century / Environment assessment: Copenhagen, European environment agency. 1999. №2. - C. 11-15.

174. Fedorak P.M., Westlake W.S. Microbial degradation of aromatics and saturates in Prudhoe Bay crude oil as determined by glass capillary gas chromatography // Can. J. Microbiol. 1981. - Vol. 27. - P. 432-443.

175. Fedorak P.M., Semple K.M., Westlake W.S. Oil-degrading capabilities of yeast and fungi isolated from coastal marine environments // Can. J. Microbiol. -1984.-Vol.30.-P.565-571.

176. Fenner N., Freeman C., Reynold B. Hydrological effects on diversity of phenolic degrading bacteria in peat land: implications for carbon cycling // Soil biology and biochemistry. 2005. - Vol. 37, №7. - P. 1277 - 1287.

177. Fiksdal L., Pommepuy M., Caprais M.P., Midttun I. Monitoring of fecal pollution in coastal water by use of rapid enzymatic techniques // App. Environ. Microbiol. 1994. - Vol. 60. - P. 1581 - 1584.

178. Genthner F., Jomes J., Yates D., Friedman S. Use of composite and shore line interstitial water on Pensacola, Florida // Marine pollution Bulletin. 2005. - Vol. 50,№7.-P. 724 - 732.

179. Hasan R.H., Sorkhoh N.H., Al Bader D., Radwan S.S. Utilization of hydrocarbons by cyanobacteria from microbial mats on oily coasts of the Gulf// Appl. Microbiol Biotechnol. 1994. - Vol. 41. - P. 615 — 619.

180. Heitkamp M.A., Cerniglia C.E. Mineralization of polycyclic aromatic hydrocarbons by a bacterium isolated from sediment below an oil field // Appl. Environ. Microbiol. 1988. - Vol. 54. - P. 1612 - 1614.

181. Holliger C., Zehnder A. Anaerobic biodegradation of hydrocarbons // Current opinion in biotechnology. 1996. - Vol. 7, №3. - P. 326 - 330.

182. Katayama Y., Oura Т., Iizuka M., Orita I. Effects of spilled oil on microbial communities in a tidal flat // Marine Pollution Bulletin. 2003. Vol. 47, № 1 - 6. -P. 85-90.

183. Kirk P.W., Gordon A.S. Hydrocarbon degradation by filamentous marine higher fungi // Mycologia. 1988. - Vol. 80.- P. 776 - 782.

184. Kiyashko S.I., Fadeeva N.P., Fadeev V.I. Petroleum Hydrocarbons as a source of organic carbon for the benthic macrofauna of polluted marine habitats as assayed by the ,3C/ llC ratio analysis // Doklady biological sciences. Vol. 381. 2001. P. 535-537.

185. Kondratjeva L.M., Karetnicova E.A. Microbiological indication phenol pollution of sea water // Ecology, Environment and human health. San -Francisco, 1999.-P. 171.

186. Madigan M.T., Martinko J.M., Parker J. Biology of microorganisms. — California: Llinois, 2000. C. 414 -701.

187. Mathews E., Hammond A. Critical consumption trends and implications: degrading earths ecosystems. Washington: DC, 1999. - P. 98 - 112.

188. Mohapatra B. R., Bapuji M., Sree A. Production of industrial enzymes (amylase, carboxymethycellulase and protease) by bacteria isolated from marine sedentary organisms // Acta biotechnologica. 2003. - Vol. 23, №1. - P. 75- 84.

189. Nitcowski F., Dudley Sh., Graicoski J.T. Zolen tification and characterization of lipilytic and proteolytic bacteria // Mar. Poll. Bull. 1977. - Vol.8, №12. - P.276-279

190. Noble R.T., Moore D.F., Leecaster M.K. Comparison of total coliform, and enterococcus bacterial indicator response for ocean recreational water quality testing // Water Research. 2003. - Vol. 37, № 7. - P. 1637 - 1643.

191. Podgorska В. Mudryk Z. Distribution and enzymatic activity of heterotrophic bacteria decomposing selected macromolecular compounds in a Baltic sea sandy beach // Estuarine, Coastal and Shelf Science. 2003. - Vol. 56, №3 - 4. - P. 539 -546.

192. Pollution in Japan our tragic experience. - Tokyo, 1991. - P. 6-10. - Режим доступа: http://www.pollution.ru/Japan/sea/php Дата обращения 02.09.2005 г..

193. Price A., Robinson J., The gulf war: coastal and marine environment consequences // Marine Pollution Bulletin. 1993. - Vol. 27. - P. 380 - 382.

194. Puntus I.F., Sakharovsky V.G., Filinov A.E., Boronin A.M. Suface activity and metabolism of hydracarbon degrading microorganisms growiihg on hexadecane and naphthalene // Process Biochemistry. - 2005. - Vol.40, № 8. - P. 2643 - 2648.

195. Radwan S.S., Hasan R.H., Salamah S., Al-Dabbous S. Bioremediation of oily sea water by bacteria immobilized in biofilms coating macroalge // International Biodeterioration and Biodegradation. 2002. - Vol. 50, № 1. - P. 55 - 59.

196. Report of marine pollution in Tokio. Режим Доступа: http://www.ea.gov.au/cost. html Дата обращения 11.12.2005 г..

197. Ron Е., Rozenberg Е. Biosurfactant and oil bioremediation // Marine Pollution Bulletin. 2003. - Vol.46, №10. - P. 1245 - 1252.

198. Rosenberg E., Legman R., Kushmaro A., Adler E., et al.,. Oil bioremediation using insoluble nitrogen source // Journal of Biotechnology. 1996. - Vol. 51, №3. -P. 273 -278.

199. Roubal G., Atlas R., Distribution hydrocarbon-utilizing microorganisms and Hydrocarbon biodegradation potentials in Alaskan continental shelf areas // Appl. Environ. Microbiol. 1978. - Vol. 35. - P. 897 - 905.

200. Rozen Y., Belkin S. Survival of enteric bacteria in seawater // Microbiology Reviews 2001. - Vol. 25. - P. 513 - 529.

201. Quality of the Environment in Japan. Tokyo, 1993. P.27. - Режим доступа: http://www.iapantoday.ru/znakjap/ekonomika/026 01 .shtml Дата обращения 09.12.2005 г..

202. Samuel R.R., Stack A., Weston L. Biosurfactant production by crude oil -degrading microorganisms // Abst. Gen. Am. Soc. Microbiology. Mexico, 1996. -P.439.

203. Shiaris M.P. Seasonal biotransformation of naphthalene, phenantrene, and benzopyrene in surficial estuarine sediments // Appl. Environ. Microbiol. 1989. -Vol. 55.-P. 1391-1399.

204. Sisler F.D., Zobell C.E. Microbial utilization of carcinogenic hydrocarbons // Science.- 1947. P. 521 -522.

205. Slater J.H., Lovatt D. Microbial degradation of organic compounds. New York: Marcel Dekker, 1993. - P. 439 - 485.

206. State of the Environment in Asia and the Pacific and Asian Development bank.

207. New York: United Nations, 2000. Режим доступа: http:www.unescap.org/enrd/environ/soe.htm Дата обращения 03.08.2005 г..

208. State and pressures of the marine and coastal Mediterranean environment / Environment assessment. №5. Copenhagen: European environment agency, 1999. - C. 61 — 82.

209. Tagger S., Truffaut N., Lepetit J. Preliminary study onrelashionship among strains forming a bacterial community selected on naphthalene from a marine sediment // Can. J. Microbiol. 1990. - Vol. 36. - P. 676 - 681.

210. Tkalin A.V., Belan T.A. Shapovalov E.N. The state of the marine environment near Vladivostok, Russia // Mar. Pollut. Bull. 1993. - Vol.26, №8. - P. 418 - 422.

211. Troussellier M et al. Responses of enteric bacteria to environmental stresses in seawater // Oceanol. Acta. 1998. - Vol. 21. - P.965 - 981.

212. Vollenweider R.A. Eutrophication a global problem // Water Qual. Bull. 1981. - Vol. 6, №3.-P. 59-62

213. Waker J.D.Colwell R.R. Microbial petroleum degradation: use of mixed hydrocarbon substrates // Appl. Microbiol. 1974. - Vol.27, №6. - P. 76-82.

214. Worm J. Jensen L., Hansen T.S., et al.,. Interaction between proteolytic and non-proteolytic Pseudomonas fluorescens affect protein degradation in a model community // FEMS Microb. Ecol. 2000. - Vol. 32. - P. 103 - 109.

215. Yablokov A.V. Facts and probleblems related to radioactictive waste disposal in seas adjacent to the territory of the russian federation // Materials for a report by the government commission. M., 1993. P. 56 - 61.

216. Year of the ocean: Perspectives on marine environmental quality today / National oceanic and atmospheric administration. 1998. Режим доступа: http://www.voto98.noaa.gov/voto/meeting/mar env 316.html Дата обращения 15.11.2005 г..

217. Yilmaz A., Orus A., Ovez S. Bacteriological indicators of anthropogenic impact prior to and during the recovery of water quality inane extremely polluted estuary, Golden Horn, Turkey // Mar. Pollut. Bull. 2004. - Vol. 49, №11 - 12. - P. 951 -958.

218. Youchimizu M., Kimura T. Study of intestinal microflora of Salmonids // Fish. Pathol. 1976. - Vol. 10, № 2. - P. 243.

219. Рис.1. Изменение концентраций аммонийного азота и кислородав разные сезоны года Коофициент корреляции = 0,98