Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Влияние иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Влияние иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота"

На правах рукописи

ВАСИЛЬЕВ Игорь Константинович

Влияние иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота

.02.01 - Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук

п. Лесные Поляны Московской области 2006 г.

Работа выполнена в Тверской государственной сельскохозяйственной академии.

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор,

Никитин Анатолий Константинович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Гавриков Александр Михайлович

доктор сельскохозяйственных наук, профессор Охапкин Станислав Константинович

Ведущее учреждение: Российский государственный аграрный

университет - Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева.

Защита состоится « 14 » апреля 2006 года в 11-00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.017.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте племенного дела: 141212, Московская область, Пушкинский район, п. Лесные поляны, ВНИИплем, факс: (8 495 515-95-57).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института племенного дела.

Автореферат разослан « 10 » марта 2006 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Ерохин А.С.

аоосл

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1 Актуальность исследования. Промышленное развитие животноводства, достижения зоотехнической науки и ветеринарной медицины, свидетельствует, что эффективность и конкурентоспособность животноводства в значительной степени зависит от внедрения современных технологий ускоренного воспроизводства животных. В настоящее время в мировой практике молочного животноводства метод искусственного осеменения животных дополняется биотехнологическим методом трансплантации эмбрионов коров.

Однако как метод искусственного осеменения, так и метод трансплантации эмбрионов коров, хотя и прогрессивны, но далеки от совершенства. В животноводстве отмечаются многочисленные факты низкой оплодотворяемости коров, яловости; нередки случаи отхода новорожденных телят.

Сравнительно новой областью научных исследований, способствующей более полному пониманию физиологических процессов оплодотворения и сохранности новорожденного приплода, являются исследования роли иммунных факторов в процессе размножения животных (М.П. Тушнов, 1938; И.И. Соколовская, 1971, 1997; С,К. Охапкин, 1984, 1987; А.Н. Успенский, 1992; В.П. Радченко 1993; С.А. Боргуль, 2002 и др.).

Большинство ученых считают, что отрицательное влияние иммунных факторов в воспроизводстве животных обусловлено патологическими процессами, однако существуют и другие мнения. Всё это и обусловливает актуальность изучаемого вопроса.

1.2. Цель и задачи исследования. Основной целью исследований являлось изучение роли иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота и выявление степени отрицательного влияния этих факторов. _ _ „

!ИОС. НАЦИОНАЛЫ) ч

БИБЛИОТЕКА

С.Петербург <ЭУл ' 08

С целью определения влияния иммунологических механизмов в воспроизводстве крупного рогатого скота нами были изучены следующие вопросы:

1- распространенность аутоспермоантител в свежеполучен-ных эякулятах быков и их влияние на качество и криорезистент-ность спермы;

2- влияние аллоспермоантител на оплодотворяемость коров и протекание их стельности;

3- влияние аллоантител на жизнеспособность и сохранность новорожденных телят в первые дни жизни;

4- возможность внедрения эффективных подходов, способствующих снижению отрицательного влияния иммунологических факторов на качество и криорезистентность спермы, оплодотворяемость коров и сохранность новорожденного приплода.

1.3. Научная новизна. В результате изучения влияния иммунологических факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота получены новые данные:

- в свежеполученных эякулятах всех быков и секретах половых путей коров выявляются спермоантитела, обусловливающие агглютинацию спермиев в пределах от 10 - 99%, что определяет индивидуальные воспроизводительные способности быков и коров;

- по форме агглютинации спермиев можно судить о месте нахождения специфического антигена;

- установлено, что одной из причин неоплодотворяемости коров являются аутоспермоантитела быков и аллоспермоантите-ла секретов половых путей коров;

- показано, что иммуноконфликтные беременности, характерные для многих видов животных, имеют место и в крупном животноводстве: токсическая диспепсия телят обусловливается антителами лизинами, а алиментарная антителами агглютининами.

1.4. Теоретическая и практическая значимость исследования. Проведенные исследования вносят определённый вклад в теорию воспроизводства сельскохозяйственных животных. Результаты исследований целесообразно использовать при оценке качества эякулятов быков-производителей. Оценка иммунологического статуса спариваемых особей исключает иммуноконфликтные стельности, что позволит повысить оплодо-творяемость коров и сохранность новорожденного приплода.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Широкое распространение аутоспермоантител у быков и аллоантител у коров свидетельствует не о патологической их природе, а о закономерном физиологическом явлении.

2. Аутоспермоантитела свежеполученных эякулятов быков, в случае их комплементарное™ антигенам спермиев снижают воспроизводительные качества спермы.

3. Повышение эффективности биотехнологических методов ускоренного воспроизводства высокопродуктивных коров возможно на основании оценки комплементарное™ спермоанти-тел у быков и коров.

4. Понимание патологических механизмов, действующих при иммуноконфликтных стельностях и обусловливающих диспепсию новорожденных телят, позволяет снизить отрицательное влияние аллоантител и тем самым повысить сохранность телят в молозивный период.

1.6. Апробация работы. Основные материалы исследований доложены на научных конференциях Тверской сельхозакадемии (Тверь, 1999 - 2002), на Всероссийской научно-практаческой конференции «Ветеринария современные аспекты и перспективы» (Орёл, 2002).

1.7. Публикации. Основные материалы исследований, включенные в диссертацию, опубликованы в 6 печатных работах.

1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста иллюстрирована 16 таблицами, 3 рисунками и 5 фотографиями. Текст диссертации включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и список литературы, включающий 179 источников, в том числе 45 иностранных авторов.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Диссертационная работа выполнена в период 1996 по 2003 гг. в Тверской сельскохозяйственной академии в соответствии с тематическим планом НИР кафедры морфологии и биотехнологии животных.

Материалом для исследований служили животные ГСП "Тверское" по племенной работе, где в разные годы содержалось от 30 до 100 быков производителей разных пород, а также коровы чёрно-пёстрой, ярославской и сычевской пород учхоза "Сахарою".

Схема исследований.

[Роль иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота]

Аутоспермоантитела 32 гол.

Аллоспермоантитела 191 гол.

Иммуноконфликтные стельности 156 гол.

Распространенность

Распространенность

Токсическая диспепсия

Специфичность

Специфичность

Качество спермы

Оплодотворяемость

Алиментарная диспепсия

В период работы изучалось наличие аутоспермоантител в свежеполученных эякулятах 32 быков-производителей. О наличии и распространенности аутоспермоантител в эякулятах быков разных пород судили по результатам анализа 853 свежеполученных эякулятов. О наличии и распространенности аллоспер-моантител в эякулятах быков судили по результатам перекрестной серологической реакции спермоаглютинации 91 эякулята. По эякулятам 17 быков производителей судили об индивидуальной, породной и сезонной изменчивости аутоспермоантител в течение года.

Наличие и распространенность спермоантител в секретах половых путей и сыворотке крови коров изучали на основании анализа материалов, полученных от 191 коровы, как яловых и многократно осеменяемых, и коров с нормальной огоюдотворяе-мостью. Реакцию спермоагглютинации проводили по методике, описанной в «Инструкции по искусственному осеменению коров ителок»(1981).

Специфичность аутоспермоантител и аллоспермоантител определяли по форме спермоагглютинации, указывающей о месте расположения исследуемого антигена на спермиях и по результатам анализирующей абсорбции спермоантител клеточными антигенами. В качестве абсорбентов брали эритроцитарные антигены крупного рогатого скота и свиней. Эякулята оценивали на предмет наличия патологических форм спермиев по общепринятой методике, описанной в «Инструкции по искусственному осеменению коров и тёлок»(1981).

Влияние аутоспермоантител на криогенные качества спермиев определяли по качеству 70 спермодоз после хранения в жидком азоте в течении 24 часов. О влиянии спермоантител на оплодотворяемость коров, судили на основании результатов оплодотворения 352 коров, в том числе 66 яловых. По результатам отёла 156 коров судили об иммунологическом конфликте

между иммунной системой коровы и антигенами новорождённого приплода. Патологоанатомический диагноз на предмет токсической или алиментарной диспепсии осуществляли по оценке слизистой желудочно-кишечного тракта 23 павших телят.

Серологические реакции с целью определения аллоантител у коров к эритроцитам новорождённых телят ставили по общепринятой методике, описанной В. Н. Тихоновым (1967).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Аутоспермоантитела быков-производителей

Одним из вопросов нашей работы стоял вопрос о наличии и распространенности аутоспермоантител в эякулятах быков.

В таблице 1 показаны результаты определения аутоспермоантител в свежеполученных эякулятах быков изучаемых пород за ряд лет в ГСП «Тверское».

Таблица 1.

Аутоспермоантитела в эякулятах быков_

Год Всего эякулятов Количество агглютинируемых спермиев, %

10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

1997 369 79 91 96 53 23 11 - - 7 9

1998 271 47 32 112 61 8 3 - 8 - -

1999 208 11 48 102 32 6 3 - - 5 5

Всего 853 618 184 51

В% 100 72 22 6

Из результатов таблицы 1 видно, что в семенной плазме всех свежеполученных эякулятах (853) определялись аутоспермоантитела. В большинстве случаев, в 618 из 853 эякулятов, аутоспер-моагглютинация не превышала 30%, практически не снижая её оплодотворяющую способность. В 184 эякулятах агглютинация спермиев составила 40-50%, что в определенной степени снижало её оплодотворяющую способность. В 51 эякуляте спермоагглю-тинация колебалась в пределах 60-100%. Такое количество

агглютинируемых спермиев в свежеполученных эякулятах характеризует их как биологический брак.

Полученные нами результаты свидетельствуют, что широкое распространение аутоспермоантител невозможно объяснить только патологическими процессами в организме быков.

При изучении распространенности аутоспермоантител была установлена значительная индивидуальная особенность быков по данному признаку. Всех быков производителей условно можно разделить на 4 группы (табл. 2).

Таблица 2.

Групповая характеристика быков в зависимости от изменчи-

вости аутоспермоантител.

Группы

Порода Гол. I II III IV

гол. % гол. % гол. % гол %

Чёрно-Пёстрая 14 4 29 4 29 5 35 1 7

Ярославская 7 2 28 3 34 2 28 - -

Сычевская 5 1 20 3 60 1 20 - -

Всего 26 7 27 10 38 8 31 1 4

Быки I группы (27%) - это производители, у которых количество агглютинируемых спермиев в свежеполученных эякулятах не изменяется в течение года. Вторая группа быков (38%) представляет производителей, у которых количество агглютинируемых спермиев кратковременно, в течение 7-15 дней может увеличится на 30-50%. В III группу включены производителей (31%) у которых отмечается зависимость количества агглютинируемых спермиев от сезона года. Осенью и весной качество спермы несколько ухудшается, т. е. менее стабильно, чем в другие сезоны года. Наименьшее количество производителей входят в IV группу (4%), у которых количество агглютинируемых спермиев изменяется на продолжительное время, на 45 и более дней.

Особенностью реакции спермоагглютинации является то, что спермии, в отличии от эритроцитов, активные клетки, в этой связи на начальных этапах реакции они сопротивляются агглютинации. Видимая стадия реакции агглютинации наиболее

выраженно проявляется в течении 15-20 минут, когда спермин "ослабевают", активность их снижается. Полученные результаты свидетельствуют, что широкое распространение аутоспермоанти-тел в эякулятах быков не случайное, а закономерное явление, чем, в значительной мере, и обусловливается различная оплодотворяющая способность спермиев разных производителей.

3.2. Спермоантитела коров Результаты исследования ряда авторов свидетельствуют, что в некоторых случаях в секретах половых путей коров могут появляться спермоантитела к антигенам спермиев быков.

В этой связи нами изучалось наличие и распространенность спермоантител в секретах половых путей коров (таблица 3).

Таблица 3

Спермоантитела секретов половых путей коров

к спермиям разных быков.

№ Коровы Номера быков и количество агглютинируемых спермиев в %

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

1 Хозяйка 660 20 70 10 10 10 70 10 10 10 80 10 10

2 Карамель 818 30 20 20 30 20 60 60 20 20 30 20 20

3 Роксана 332 40 10 20 20 10 40 30 30 30 40 40 30

4 Белоснежка539 30 30 30 30 60 60 30 20 20 60 20 30

5 Дочка 400 30 30 20 40 30 30 30 30 40 20 20 40

6 Грета 50 70 70 20 60 60 70 10 30 30 30 10 30

7 Кузина 323 40 90 90 10 90 30 30 90 30 10 90 90

8 Лама 410 40 40 40 10 40 50 40 80 50 40 40 40

9 Линда 151 70 30 30 10 70 70 40 30 30 70 70 40

10 Анжелика 663 90 10 30 30 90 30 50 50 80 40 40 40

11 Разита 690 30 30 30 60 40 40 40 60 10 60 40 40

12 Пихта 546 60 60 60 60 60 10 60 30 60 60 60 30

13 Муха 145 90 90 20 20 60 60 60 60 20 40 90 40

14 Крошка 191 20 20 50 50 20 50 20 50 50 20 20 50

15 Пеструха 884 40 30 30 90 30 30 30 30 80 30 40 30

Из данных таблицы 3 видно, что наименьшее количество спермоантител имелось в секретах половых путей у коров: Роксана 332; Карамель818, Дочка 400 и Пеструха 884.

Из 12 быков сперми только двух производителей в секретах половых путей коров агглготировались в пределах 60-90%. Остальные коровы агглютинируют спермии разных производителей в различном количестве, что и обусловливает разную продолжительность сервис периода у одной и той же коровы за время ее эксплуатации. Данные таблицы свидетельствуют, что плодотворное осеменение клинически здоровых коров не гарантировано спермой любого производителя.

Результаты показали, что в секретах половых путей всех коров, как и у быков, определяются спермоантитела к антигенам спермиев, агглютинирующие различное их количество.

Более того, оплодотворяемость коров находится в прямой зависимости от количества комплиментарных спермоантител секретов половых путей.

Несмотря на значительные индивидуальные различия особей по содержанию аллоспермоантител, всех коров можно условно разделить на 3 группы. Полученные результаты показаны в таблице 4.

Таблица 4

Распределение коров в зависимости от изменчивости __спермоантител._

Год Голов Группы

1 II III

гол % гол % гол %

1999 71 14 20 50 70 7 10

2000 106 16 15 71 67 19 18

Всего 177 30 17 121 68 26 15

В 1 группу включены коровы (17%), в секретах половых путей которых количество агглютинируемых спермиев не превышает 20% и в течение года этот процент практически не повышается. Группа II (68%), это особи, у которых количество агглюти-

нируемых спермиев может изменяться в течение 20-40 дней после осеменения или отёла. И группа III коровы (15%) в секретах половых путей, которых агглютинируется значительное количество спермиев (40-80%) большинства быков и практически в течение всего года.

3.3. Специфичность спермоантител Результаты по определению титра аутоспермоантител у быков и аллоспермоантител у коров показали, что в большинстве случаев титр спермоантител колеблется в пределах от 1:2 до 1:16. Титр спермоантител семенной плазмы быков, несколько ниже.

Присутствие комплиментарных аутоспермоантител в эякуля-тах быков даже в невысоких титрах обеспечивает агглютинацию определённого количества спермиев, обусловливая избирательность гамет при оплодотворении.

Результаты анализирующей абсорбции аутоспермоантител из эякулятов некоторых быков и аллоспермоантител из секретов половых путей некоторых коров показаны в таблице 5.

Таблица 5

Абсорбция спермоантител эритроцитарными антигенами.

Животное Агглютинация, % Абсорбент, эритроциты.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Люкс 583 40 40 40 40 40 40 10 10 10 40 40

Якорь 303 40 40 40 40 20 40 40 10 40 40 40

Алый 2421 30 30 30 30 30 30 10 30 10 30 30

Челнок 641 30 30 30 30 30 10 10 30 30 30 30

Кумир 739 30 30 30 30 20 20 10 30 30 30 30

Дочка 400 40 40 10 40 40 20 40 40 40 40 40

Грета 50 60 60 10 60 60 30 60 60 10 - 60

Анжелика 663 60 60 60 60 60 50 60 60 20 - 20

Лама 410 40 40 40 40 10 10 40 40 40 40 40

Разита 690 20 20 20 - 20 20 20 10 20 20 20

Карамель 818 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10

Белоснежка539 50 50 50 20 50 50 50 10 50 50 50

Кузина 323 90 30 90 20 20 90 30 20 30 90 30

Пихта 546 30 30 30 30 30 30 10 30 30 10 30

Полученные результаты показали, что использование эрит-роцитарного антигена в качестве абсорбента, хотя и возможно, но абсорбент необходимо подбирать индивидуально, а это весьма трудоемкая работа.

Так,'например, из эякулята быка Люкс 583 эритроцитарными абсорбентами 6, 7 и 8 можно снизить агглютинацию спермиев с 40% до 10%, т. е. биологический брак эякулята исключить и сперма может успешно использоваться для осеменения коров.

Различная эффективность клеточных абсорбентов указывает на клеточную специфичность спермоантител.

3.4. Формы агглютинации спермиев

Полученные нами результаты показали, что в зависимости от места расположения антигена наблюдаются различные формы агглютинации спермиев. Формы спермоагглютинации обусловлены, так называемыми, "полными" и "неполными" спермоанти-телами. Принято считать, что "полные" антитела это двух и более валентные антитела, в этой связи они обусловливают визуально наблюдаемые серологические реакции. Так называемые "неполные" антитела, одновалентные, не дают видимой серологической реакции агглютинации. Наличие некоторых "неполных" спермоантител можно определить визуально, но без агглютинации спермиев. О некоторых "неполных" спермоантителах можно судить косвенно.

Необходимо отметить, что форма агглютинации, однозначно, определяется местом расположения антигена на спермиях. Проведённые исследования показали, что все части спермиев, действительно характеризуются как общими, так и "частными" антигенами.

В том случае если комплиментарные спермоантителам антигены находятся на плоской поверхности головки, головки агглютинируются всей поверхностью, т.е. как бы накладываются одна на другую. В этих случаях при поверхностном наблюдении

создаётся впечатление, что в поле зрения движутся спермии с двумя хвостиками. Однако, изменяя фокусное расстояние микровинтом микроскопа, становится четко видно, что "двухвостый" спермий имеет две головки. Аналогичная картина наблюдается при агглютинации спермиев всей поверхностью тела и хвостика. Создается видимость, что в поле зрения попали "двуглавые" спермии, но с одним хвостом.

О наличии "двухвостовых" и "двуглавых" спермиев у самцов отмечали некоторые авторы (Г.В. Зверева 1963; С.А. Коган1969; И. Иогансон 1970; И.И. Родин 1973; и др.). Однако ни в одном эякуляте таких форм спермиев у быков нами не наблюдались.

Весьма интересными результатами следует считать результаты серологических реакций при взаимодействии антигенов спермиев с "неполными" спермоантителами. Моновалентные спермоантитела на месте расположения комплиментарного антигена формируют протоплазматическую каплю (ПЗК) Различное расположение ПЗК указывают на то, что "неполные" как и "полные" спермоантитела взаимодействуют с антигенами любых частей спермия.

Таким образом, спермоантитела характеризуются своей ком-плиментарностью к антигенам спермиев, что и наделяет их свойствами, характерными для всех антител, а именно, способностью абсорбироваться, различаться по титрам и взаимодействовать с клеточными антигенами, т.е. комплиментарными антигенами гамет.

3.5. Влияние спермоантител на качество свежеполученных эякулятов быков.

Для определения влияния аутоспермоантител эякулятов быков на качество спермы были определены две группы производителей. Полученные результаты показаны в таблице 6.

Таблица 6

Количество бракуемых эякулятов в зависимости _ от аутоспермоантител, %_

Группы быков Быков (п) Месяцы года В среднем

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

1 5 25 31 33 59 37 18 19 - 30 48 48 33 33,7

II 6 6 5 6 9 7 2 2 - 3 9 10 9 6,7

В среднем 11 14 17 20 33 18 9 9 - 16 26 28 19 19

В 1-ю группу входили быки в эякулятах, которых агглютинация спермиев составляла 40 % и более. Во II - быки с агглютинацией до 30 %.

Полученные результаты представляют наибольший интерес не только в том, что показывают значительную разницу в количестве бракуемых эякулятов двух групп быков но и в том, что от 1-ой группы производителей значительное количество эякулятов направляется в хозяйства для осеменения коров.

3.6. Влияние аутоспермоантител на криогенные качества спермы.

Полученные нами результаты (табл.7) показали, что биологический брак спермодоз после криоконсервирования, полученных из эякулятов разных быков по количеству значительно различается. Значительное количество свежеполученных эякулятов бракуется (быки Баклажан-42,6%; Волшебник-32,9%), у некоторых производителей (Люкс, Якорь), где имеются "неполные" спермоантитела, эякуляты разбавляются и криоконсервируются. Как следствие, значительно повышается количество бракуемых спермодоз, соответственно по перечисленным производителям брак составил: 10%-16%.

Таблица 7

Влияние аутоспермоантител на количество бракуемой спермы.

Быки Агглютинация,0/» Получено спермы, за 1 год Биологический брак

мл спермодоз свежеполученый криоконсерви эовный

мл % ДОЗ %

Баклажан 60 601 8685 256 42,6 1042 12

Волшебна 60 427 6510 136 32,9 65 10

Люкс 40 456 8155 347 22,4 82 10

Якорь 40 656 11583 119 18,1 1853 16

Челнок 30 601 12599 62 10,3 882 7

Узелок 20 524 10430 35 6,7 626 6

Кумир 30 616 13240 63 10,2 702 5,3

Алый 30 503 10769 20 4,0 356 3,3

Бисер 10 865 19345 31 3,6 1064 5,5

Несмотря на то, что в настоящее время разработаны и нашли широкое применение довольно эффективные защитные среды для криоконсервации спермы быков, количественная разница в биологическом браке спермы разных быков в течении года достоверна.

Полученные в течении года результаты (табл. 8) показали, что аутоспермоантитела быков-производителей способствуют увеличению выбраковки спермадоз.

Таблица 8

Влияние аутоспермоантител на криогенные качества спермы.

№ п \гглютинция% Месяцы года Среднее %

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

I 5 40 и более 7 16 19 15 9 7 7 - 11 15 16 11 12

II 5 до 30% 4 4 11 10 8 9 3 - 6 9 12 6 8

Производители разных групп отличались по количеству ау-

тоспермоантител в свежеполученных эякулятах. У быков I гр. количество агглютинируемых спермиев составляло 40% и более, а у быков II гр. менее 30%. Разница в количестве бракуемых спермадоз между группами составила 4%.

Полученные нами результаты свидетельствуют о целесообразности оценки аутоспермоантител в свежеполученных эякуля-тах быков.

3.7. Иммуногенетическая несовместимость на организменном уровне

Под иммуногенетической несовместимостью на организменном уровне понимается иммуноконфликт, обусловленный взаимодействием аллоантител материнского организма с антигенами новорожденного.

У сельскохозяйственных животных в силу специфики строения плаценты иммуноконфликтные осложнения происходят после первых кормлений .молозивом.

Полученные нами результаты показали, что причиной заболевания новорожденных телят диспепсией является иммунологический конфликт между иммунной системой коровы и антигенным полиморфизмом приплода. Клинические формы проявления диспепсии телят проявляются в течение 1-5го дней жизни. При этом, иммуноконфликтные заболевания телят обусловливаются как агглютининами, так и лизинами. Следует отметить, что диспепсия, обусловленная агглютининами, клинически проявляется с первого дня жизни телят, однако у 70% заболевших устанавливается на 3-4 день жизни. Это обусловлено тем, что антитела, взаимодействуя с антигенами ворсинок слизистой желудка, абсорбируются на слизистой, образуют непроницаемую для пищеварительных ферментов тонкую пленку из гаммаглобу-лина молозива.

Антитела лизины лизируют ворсинки слизистой. В этом случае на слизистой кишечника ворсинки отсутствуют и нередки кровоизлияния различной "обширности"; от точечных до обширных "поверхностей".

При своевременном симптоматическом лечении, так называемая алиментарная диспепсия может быть приостановлена, тем

не менее, отход телят колеблется от 10% до 70%, по нашим данным 48%.

При диспепсии, обусловленной антителами лизинами, прогноз менее благоприятный. Отход телят колеблется в пределах 80-90%. По нашим данным сохранность составила 12%.

Полученные результаты свидетельствуют, что в крупном животноводстве, так же как и в свиноводстве, иммуноконфликтные причины часто определяют заболевание и отход новорожденного приплода.

ВЫВОДЫ

1. В семенной плазме всех эякулятов быков-производителей определяются аутоспермоантитела в различном количестве (1099%), по данному, признаку отмечаются значительные индивидуальные различия.

2. В секретах половых путей коров определяются аллоспер-моантитела, агглютинирующие спермии быков-производителей в различном количестве, что обусловливает их различную оплодо-творяемость.

3. Аутоспермоантитела быков и аллоспермоантитела коров подразделяются на поливалентные или "полные" и одновалентные или "не полные". При взаимодействий спермиев с "полными" спермоантителами серологическая реакция контролируется визуально. При взаимодействии спермиев с "неполными" аллоспермоантителами серологическая реакция контролируется по косвенным признакам: образованию ПЗК (протоплазматиче-ской капли) или искривлению формы спермиев.

4. Несмотря на индивидуальную особенность быков и коров по количеству агглютинируемых спермиев, их можно условно сгруппировать в несколько групп; быков в четыре группы, коров в три. Разделение быков и коров на группы позволяет осуществ-

лять групповой подбор спариваемых особей с учетом их иммунной реактивности.

5. В большинстве случаев (80%) титр аутоспермоантител и аллоспермоантител колеблется в пределах 1:2, - 1:16. В этой связи аутоспермоантитела в некоторых эякулятах можно частично или полностью абсорбировать клеточными антигенами, однако абсорбент необходимо подбирать к каждому производителю индивидуально, что практически пока мало приемлемо.

6. Индивидуальные особенности коров по наличию аллоспермоантител в секретах половых путей обусловливают различную иммунологическую несовместимость с разными быками, что необходимость учитывать при искусственном осеменении.

7. От быков, у которых отмечается аутоагглютинация 30% и менее, в среднем за год бракуется 6,2% эякулятов, а с агглютинацией 40% и более, биологический брак составил 34,6%. Биологический брак спермадоз, обусловленный "неполными" спермоан-тителами равен, соответственно: 8% и 12%.

8. Иммунеконфликтные беременности, определяемые у многих видов животных, характерны и для крупного рогатого скота. Они значительно снижают жизнеспособность новорожденных телят, обусловливая их диспепсию различной степени тяжести. По серологическим свойствам аллоантитела молозива коров подразделяются на лизины и агглютинины, обусловливая соответственно: токсическую и алиментарную диспепсию.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. С целью повышения качества спермы и ее оплодотворяющей способности, необходимо учитывать наличие аутоспермоантител в свежеполученных эякулятах быков-производителей, для этого активность спермиев необходимо оценивать трижды в течении 25 минут.

2. С целью повышения сохранности новорожденных телят необходимо учитывать наличие комплиментарных аллоантител в сыворотке крови стельных коров. Это даёт возможность оценить целесообразность или нецелесообразность выпаивания материнского молозива.

3. Включить в учебную программу зооветеринарных факультетов сельхозвузов курс "Значение иммунных факторов в процессе воспроизводства сельскохозяйственных животных".

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Васильев И.К, Никитин А.К, Никитина З.Я. Методы повышения темпов воспроизводства крупного рогатого скота// Сб. науч. тр. Тверь.-1999.- С. 243-247.

2. Васильев И.К, Никитин А. К, Никитина З.Я. Иммунологический подход к диспепсии телят// Сб. науч.тр. Тверь.-1999.- С. 288-295.

3. Васильев И.К. Уникальная технология молочного и мясного скотоводства одновременно// Мат. XXII научно-прак. конф. «Научное обеспечение аграрного производства Верхневолжья» Тверь,- 1999.-С. 125-126.

4. Васильев И.К, Никитина З.Я, Никитин А.К. О применении иммунобиотехнологической технологии в воспроизводстве// Молочное и мясное скотоводство №3,- 2000.-С. 28-30.

5. Никитина З.Я, Никитин А К, Васильев И.К, и др. Уникальная, конкурентоспособная технология - и молоко и мясо// Первая межд. научно-прак. конф. Уфа.- 2000.-С. 40-43.

6. Васильев И.К, Ходырев А.А, Никитин А.К. Многоплодие коров - перспективный путь развития молочного и мясного скотоводства// Мат. научно-прак. конф. «Ветеринария современные аспекты и перспективы» Орёл.- 2002.-С. 114-116.

Заказ 3_Объем 1 п л_Тираж 60 экз

Типография ВНИИплем

j

V

(

/'

I

t Г

f «

I

I t

6743

6749

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Васильев, Игорь Константинович

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Генетические основы индивидуальной сочетаемости спариваемых животных.

1.2. Иммунологические основы индивидуальной сочетаемости спариваемых животных.

1.3. Современные биологические методы воспроизводства сельскохозяйственных животных.

II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Место проведения исследований.

2.2 Материал и схема исследований.

III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Аутоспермоантитела быков-производителей.

3.2. Аллоспермоантитела секретов половых путей коров.

3.3. Аллоспермоантитела быков.

3.4. Специфичность спермоантител.

3.5. Влияние аутоспермоантител на качество свежеполученных эя-кулятов быков.

3.6.Влияние аутоспермоантител на криоконсервирование спермы.

3.7. Влияние аллоспермоантител секретов половых путей коров на их оплодотворяемость.

3.8. Иммунологическая несовместимость на организменном уровне.

IV. ОБСУЖДЕНИЕ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Влияние иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота"

За последнее десятилетие в нашей стране количество крупного рогатого скота значительно сократилось. В этой связи восстановление отрасли и дальнейшее ее развиие значително зависит от темпов воспроизводства.

В настоящее время зоотехнической науке и практике известны биотехнологические методы ускоренного воспроизводства высокопродуктивного крупного рогатого скота: искусственное осеменение и трансплантация эмбрионов коров.

Технология искусственного осеменения коров признана мировой практикой. Технология трансплантации эмбрионов коров практически внедрена в животноводство наиболее развитых стран. По непонятным причинам эта технология не нашла широкого применения у нас в стране. Возможно, из-за невысокой биологической эффективности.

Сегодня учёным, руководителям и специалистам животноводства стало очевидно, что в условиях свободных рыночных отношений, конкурентоспособность отрасли - это современные технологии, эффективная организация труда и персональная экономическая ответственность.

Новой областью научных исследований, способствующих повышению эффективности воспроизводства сельскохозяйственных животных, являются исследования влияния иммунных факторов (И.И.Соколовская, 1971; Г.К Сердюк, 1981; С.К. Охапкин, 1987, A.M. Гавриков, 1996; А.Г. Са-моделкин, 1996, и др.).

Однако до настоящего времени не сложилось общего мнения о закономерности иммунологических механизмов в воспроизводстве крупного рогатого скота.

В этой связи, главная задача наших исследований заключалась в изучении значения иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота, степени их отрицательного влияния и возможности определения оптимальных мероприятий, исключающих или снижающих влияние этих факторов в животноводстве.

Материалы диссертационной работы являются частью исследований темы кафедры морфологии и биотехнологии животных Тверской государственной сельскохозяйственной академии, обозначенной: "Изучение влияния иммунологических факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота» (регистрационный государственный № 01.99.00 09299)

Актуальность темы. Современные достижения зооветеринарной науки и практики свидетелствуют, что существуют общие схемы последовательного внедрения современных технологий ускоренного воспроизводства животных. Метод искусственного осеменения животных дополняется биотехнологическими методами трансплантации и клонированием эмбрионов.

Однако биотехнологические методы воспроизводства высокопродуктивных животных, хотя практически приемлемы, но далеки от совершенства. Практические работы по искусственному осеменению коров сопровождаются фактами неоплодотворяемости, потерей стельности и гибелью телят в молозивный период.

Новой областью научных исследований, способствующих повышению эффективности воспроизводства, являются исследования роли иммунных факторов в процессе размножения животных (М.П. Тушнов, 1938; И.И. Соколовская, 1951, 1994; М.Н. Решетникова, 1970; Г.Н. Сердюк, 2000г; А.Д. Субботин, 2001 и др.).

Публикации в этой области знания свидетельствуют об определенной роли иммунных механизмов в воспроизводстве животных, но они фрагментарны и не позволяют представить общепринятую теорию, указывающую на общебиологическую закономерность, а, следовательно, целенаправленно воздействовать на темпы воспроизводства. Большинство ученых считают, что отрицательное влияние иммунных факторов в воспроизводстве животных обусловлено патологическими процессами. Противоречивость мнений обусловливает актуальность изучаемой проблемы.

Цель и задачи исследований

Целью работы является комплексное изучение значения иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота, разработка наиболее оптимальных мероприятий, снижающих их отрицательное влияние в практике животноводства.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: -изучить распространенность аутоспермоантител в свежеполученных эякулятах быков;

-определить частоту встречаемости аллоспермоантител в секретах половых путей коров;

-изучить серологическую характеристику аутоспермоантител быков и их влияние на качество и криорезистентность спермы;

- выяснить влияние аллоспермоантител на оплодотворяемость коров; -определить влияние аллоспермоантител на сохранность телят в мо-лозивный период;

-определить эффективные меры профилактики, способствующие снижению отрицательного влияния иммунологических факторов на оплодотворяемость коров и сохранность новорожденного приплода.

Научная новизна работы. В результате изучения значения иммунологических факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота получены новые данные:

- в семенной плазме свежеполученных эякулятов быков определены аутоспермоантитела, обусловливающие агглютинацию спермиев в пределах от 1 до 99%, что характеризует индивидуальные воспроизводительные способности производителей;

- в секретах половых путей всех коров определяются аллоспермоан-титела, агглютинирующие различное количество спермиев разных быков;

- впервые установлено, что спермоантитела, подразделяются на "полные" и "неполные". Взаимодействие спермиев с "полными" антителами контролируется визуально, с "неполными" по косвенным признакам;

- определено, что спермоантитела быков и коров характеризуются серологическими свойствами, что свидетельствует об их иммунной природе;

-доказано, что одной из причин неоплодотворяемости коров являются аллоспермоантитела;

- установлено, что иммуноконфликтные стельности обусловливают диспепсию телят; токсическая диспепсия обусловливается лизинами, алиментарная - агглютининами.

Практическая значимость. Результаты исследований целесообразно использовать на племпредприятиях при оценке качества эякулятов и крио-консервировании спермы быков, на пунктах искусственного осеменения коров, в родильных отделениях промышленных молочных комплексов с целью профилактики диспепсии у новорожденных телят. Оценка иммунологического статуса спариваемых особей по аллоантителам позволит снищ зить количество иммуноконфликтных стельностей. Результаты работы могут быть использованы в процессе переподготовки зооветспециалистов по вопросам воспроизводства крупного рогатого скота.

Реализация результатов исследований. Результаты исследований использованы на ГСП "Тверское" по племенной работе и в некоторых хозяйствах области, в учебном процессе Тверской сельскохозяйственной академии, в ряде сельскохозяйственных академий и институтов повышения квалификации кадров АПК Российской Федерации.

Апробация работы. Материалы исследований доложены на научных конференциях Тверской и Ставропольской государственных сельхозяйствен-ных академиях (Ставрополь-2000; Тверь,-2001), на I Международной конференции «Актуальные проблемы животноводства (Уфа,2000.), на Всероссийской научно-практической конференции, "Основные направления продвижения инновационных процессов и перспективы антикризисного управления в АПК", г. Тверь, 2001 г., Всероссийской научно-практической конференции "Ветеринария современные аспекты и перспективы" г. Орёл, 2002 г.

Публикации. Основные материалы исследований, включенные в диссертацию, опубликованы в 6 печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста иллюстрирована 16 таблицами, 3 рисунками и 5 фотографиями. Текст диссертации включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и список литературы, включающий 179 источников, в том числе 45 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Васильев, Игорь Константинович

выводы

1. В семенной плазме всех эякулятов быков-производителей определяются аутоспермоантитела в различном количестве (10-99%), по данному, признаку отмечаются значительные индивидуальные различия.

2. В секретах половых путей коров определяются аллоспермоантите-ла, агглютинирующие спермии быков-производителей в различном количестве, что обусловливает их различную оплодотворяемость.

3. Аутоспермоантитела быков и аллоспермоантитела коров подразделяются на поливалентные или "полные" и одновалентные или "неполные". При взаимодействии спермиев с "полными" спермоантителами серологическая реакция контролируется визуально. При взаимодействии спермиев с "неполными" аллоспермоантителами серологическая реакция контролируется по косвенным признакам: образованию ПЗК (протоплазматической капли) или искривлению формы спермиев.

4. Несмотря на индивидуальную особенность быков и коров по количеству агглютинируемых спермиев, их можно условно сгруппировать в несколько групп; быков в четыре группы, коров в три. Разделение быков и коров на группы позволяет осуществлять групповой подбор спариваемых особей с учетом их иммунной реактивности.

5. В большинстве случаев (80%) титр аутоспермоантител и аллоспер-моантител колеблется в пределах 1:2, - 1:16. В этой связи аутоспермоантитела в некоторых эякулятах можно частично или полностью абсорбировать клеточными антигенами, однако абсорбент необходимо подбирать к каждому производителю индивидуально, что практически пока мало приемлемо.

6. Индивидуальные особенности коров по наличию аллоспермоанти-тел в секретах половых путей обусловливают различную иммунологическую несовместимость с разными быками, что необходимость учитывать при искусственном осеменении.

7. От быков, у которых отмечается аутоагглютинация 30% и менее, в среднем за год бракуется 6,2% эякулятов, а с агглютинацией 40% и более, биологический брак составил 34,6%. Биологический брак спермодоз, обусловленный "неполными" спермоантителами, равен, соответственно: 8% и 12%.

8. Иммунеконфликтные беременности, определяемые у многих видов животных, характерны и для крупного рогатого скота. Они значительно снижают жизнеспособность новорожденных телят, обусловливая их диспепсию различной степени тяжести. По серологическим свойствам алло-антитела молозива коров подразделяются на лизины и агглютинины, обусловливая соответственно: токсическую и алиментарную диспепсию.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. С целью повышения качества спермы и ее оплодотворяющей способности, необходимо учитывать наличие аутоспермоантител в свежепо-лученных эякулятах быков-производителей, для этого активность спермиев необходимо оценивать трижды в течении 25 минут.

2. С целью повышения сохранности новорожденных телят необходимо учитывать наличие комплементарных аллоантител в сыворотке крови стельных коров. Это даёт возможность оценить целесообразность или нецелесообразность выпаивания материнского молозива.

3. Включить в учебную программу зооветеринарных факультетов сельхозвузов курс "Значение иммунных факторов в процессе воспроизводства сельскохозяйственных животных".

V. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведённых исследований, анализа литературных данных и зарубежного опыта можно сделать следующие заключения:

S На стадии гаметогенеза и оплодотворения весьма существенное влияние оказывают ауто - и аллоспермоантитела, на стадии эмбриогенеза и молозивный период - органоспецифические антитела. Понимание этих иммунологических механизмов и осуществление иммунологического подбора спариваемых особей значительно повышает эффективность темпов воспроизводства крупного рогатого скота как при искусственном осеменении, так и при применении метода трансплантации эмбрионов коров. ^ Для осуществления оценки иммунологической совместимости спариваемых особей при применении метода искусственного осеменения необходимо определять количество аутоспермоантител в эякулятах быков-производителей. Для искусственного осеменения использовать эякуляты быков, у которых в свежеполученных эякулятах агглютинация спермиев колеблется в пределах 10-30%. S С целью повышения оплодотворяемости телок случного возраста, коров, коров-доноров и коров-реципиентов необходимо оценивать количество аллоспермоантител в секретах половых путей. S Отход новорожденных телят в молозивный период характеризуется как наивысший селекционный и экономический ущерб в воспроизводстве крупного рогатого скота. В этой связи, исключение иммуно-конфликтных стельностей является наиболее эффективной иммунологической технологией.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Васильев, Игорь Константинович, Тверь

1. Абилов А.И., Кочетков А.А., Соколовская И. И. и др. Аутоиммун-ность быков и воспроизводительные функции. //Зоотехния. 1989, №5, С. 61-64.

2. Абилов А.И. Разработка методов оценки и регуляции иммунного состояния организма в связи с совершенствованием технологии искусственного осеменения в скотоводстве. Диссертация на соискание степени д.б.н. ВИЖ, 1996.

3. Агалакова Т., Перминова Л., Русаков Р. Синхронизация половой охоты и овуляции у мясных телок и коров. Молочное и мясное скотоводство. 2004

4. Анохин Б, Лопатин В. Новое в лечении поросят при диспепсии. //Свиноводство. 2001. № 1.

5. Антонюк В. Повышение эффективности искусственного осеменения. //Свиноводство. 1984, стр. 22-24.

6. Андерсен И. Структура и функции антител. Цит. по Тернеру М. М. Мир. 1983

7. Арзуманян Е.А. Теория и практика применения инбридинга в молочном скотоводстве. В сб.: Использование инбридинга в животноводстве. Изд. Наука. М., 1977.

8. Барановский Д. Сочетаемость пород свиней при скрещивании // Свиноводство. 1997, №5.

9. Беккер М.Е. Биотехнология. Москва Агропромиздат. 1990.

10. Белоногов А., Половинко Л. Приамурью- выгодное дело. //Мясное и молочное скотоводство. 2004, № 1.

11. Бернштейн А.Д. О спермоагглютининах и спермоагглютинирующем титре сыворотки крови. //Сб. Этюды по физиологии сперматозоида. Москва-Самара. 1933.

12. Бесхлебнов А.В. О влиянии влагалищной слизи на переживаемость сперматозоидов. //Сов. Ветеринария. 1934. С 10-74.

13. Безенко С.П, Новиков А.А. Встречаемость изоантигена Ас на спер-миях хряков и репродуктивные качества свиноматок. //Животнводство. 1975.

14. Бишоп У.Х. Генетическое изучение плодовитости и бесплодия с.-х. ж.-х.\\ ВИНТИСХ.М. 1969.

15. Бодяжина В.И. Акушерство. М. Медицина. 1980.

16. Бойд В. Введение в иммунологическую специфичность. //М. Изд. «ИЛ.». 1963.

17. Бойд В. Основы иммунологии. М. Мир. 1969

18. Борисенко Е.Я. О природе гетерозиса и инбредной депрессии.// Известия ТСХА. 1967. в. 4.

19. Братанов К. Иммунология размножения.// Сб. Проблемы по размножению в животноводстве. София 1966.

20. Васильева З.Ф. Шабалин В.Н. Применение антилимфоцитарного глобулина при резус-конфликтной беременности.// Казанский мед. журнал, 1980, №5.

21. Васильева З.Ф. Шабалин В.Н. Иммунологические основы акушерской патологии. М. Медицина. 1984.

22. Вершигора А.Е. Основы иммунологии. Киев. Высшая школа. 1980.

23. Волкова JI.C. Иммунология и акушерская практика. //Проблемы гематологии. 1961, №1 -С.6-10.

24. Вязов О.Т. Иммунология эмбриогенеза. М. Мед. литература. 1962.

25. Гавриков А.М, Дронин А. Приживляемость эмбрионов мясных коров. // Зоотехния. 1994, №7.

26. Гавриков А.М, Самоделкин А., Дряглов В. Влияние содержания и уровня кормления мясного скота на индуцирование полиовуляции. // Молочное и мясное скотоводство. 1997, №4, С.32-35.

27. Гудвин и др. Цит. по В.Н. Тихонову, 1967.

28. Доморадский И.В. Проблемы перекрестного иммунитета. Изд. Ме-цина. М.1973.

29. Дубинин Н.П. Генетика популяций и селекция. Изд. Наука. М. 1967.

30. Душак Р.В. Гемолитическая болезнь новорожденных поросят. // Сельское хозяйство за рубежом. Серия животноводство. 1963, №2, С.38-42.

31. Дыгин В.П. Аутоиммунные заболевания системы крови. Изд. Медицина, Ленинград. 1964.

32. Ерохин А.С., Григошина М.В. Повышение оплодотворяемости коров инъекциями комплексоната меди. //Зоотехния. 2000, №3.

33. Жаркин В.В. Иммунологический способ оценки оплодотворяющей способности семени быков. //Ж. Животноводства. 1979. №3, С.64-65.

34. Жаркин В.В. Изменение величины титра аутоспермоантител, фиксированных на живчиках быков. // Животноводство. 1982, №7, С. 49.

35. Жаркин В.В, Детько М.М. Изучение влияния аутоантител на акро-сому живчиков. // Тезисы доклада IY Всесоюзного симпозиума по иммунологии репродукции. Киев1990, С. 47.

36. Жуковская Н. Влияние антиоксидантов на криоустойчивость спермы быков.// Молочное и мясное скотоводство. 1997, №4, С.25-26.

37. Завертяев Б.П. Генетические методы оценки племенных качеств молочного скота. Л. Агропромиздат.1986.

38. Запреднянский П.П. Инбридинг в практике разведения герефор-дов. //Зоотехния, 2000, №3.

39. Зверева Г.В., Черномаз Л.А. Некоторые вопросы морфологии спермиев быка. // Сб. Новое в племенном деле и искусственном осеменении. М. Колос. 1977.

40. Зеленская Т. М. Функциональные и морфологические изменения яичников у животных под влиянием антиовариальной цитотоксической сыворотки. В кн.: Цитотоксины в современной медицине. Т. 4. Киев. 1967.

41. Земсков М.В., Соколов М.И., Земсков В.М. Основы общей микробиологии, вирусологии и иммунологии.// М. Колос. 1977.

42. Иванов А.Г., Малиновский И.Ф. Иммунные реакции коров на на внутриматочное введение гомологичных живчиков. // Тезисы докладов 3 международного симпозиума по иммунологии размножения. Варна, 1975.

43. Иванов И.И. Искусственное размножение домашних животных. СНБ, 1910.

44. Ильинский Е.В., Сальников Г.С. Роль иммунных факторов в воспроизводстве крупного рогатого скота. // Ветеринария. 1970, №11.

45. Ильинскии Е.В. Экспериментальные исследования иммунных факторов, влияющих на воспроизводство крупного рогатого скота // Труды международного симпозиума по иммунологии размножения. Варна.1971.

46. Ильинскии Е.В. Иммунология размножения. Б АН. София. 1973.

47. Иоганессон И. Генетика и разведение домашних животных. М. Колос. 1970.

48. Кабанов В.Д. и др. Теория и методы создания скороспелой мясной породы свиней. //М. Изд. ВНИИПлем. 1998. С.380.

49. Кидди Генетическое изучение плодовитости и бесплодия с.-х. животных. ВИНТИСХ. М.1969.

50. Клинский Ю.Д., Алексеенко А.Н., Гомаев A.M., Спотаева Г.С. Реакция овуляции и возможность направленной ее регуляции // Р.Ж. Животноводство. 1992, №9.

51. Коган С.А. Патология сперматогенеза. JI. 1969.

52. Кононов В.П , Горбунова Р.И. Изменение антигенов живчиков в процессе сперматогенеза и созревания в организме самцов // Тезисы III Международное симпозиума по иммунологии размножения. Варна. 1975.

53. Кононов В.П., Мамбеталиев М.С. Оценка потенциала воспроизводительной способности быков // Зоотехния. 1994,№7, С. 27-29.

54. Косяков П.Н. Антигенные вещества организма и их значения в биологии и медицине М. 1954.

55. Косяков П.Н. Иммунология изоантигенов и изоантител М. 1965.

56. Кочетков А.А. Аутоиммуннные процессы у самцов, их выявление и устранение с целью улучшения воспроизводства // Автореферат диссертации к.б.н. Дубровицы,1988, 24 с.

57. Кочетков А.А, Макаревич А.В., Лавченко Э.Н., Спустова 3., Буйлла А. Акросомная реакция замороженно-оттаянных сперматозоидов быка с культурой клеток яйцеводов коровы // Доклады РА сельскохозяйственных наук МП ИСИ, 1994, №3.

58. Кошель П.П. и др. Новое в методике выведения скороспелой мясной породы свиней. //Тр.: Актуальные проблемы аграрной науки Верхневолжья. Тверь. 2001.

59. Кузьмина Т.И. Возможность созревания и оплодотворения ооцитов ин витро. //Зоотехния. 2000, №11.

60. Кунин М.А. К методике исследования спермы при бесплодном браке. Сов. мед., 1962.

61. Кушнер Х.Ф. Применение гетерозиса в практике животноводства. //Сб. Генетические основы селекции животных. Наука. М. 1969.

62. Левицкий В.Ф. К вопросу об иммунологическом изучении нарушения процесса зачатия. Тр. Московского НИИ педиатрии. Мин. Здрав. РСФСР. 1968. т.54.

63. Линдеман В. Цитолизины как причина токсических нефритов. М.1901.

64. Лазовик Н., Ментентоколо Б., Маслак О. Результативность осеменения перегулявших коров от замены использования семени быков-производителей // Молочное и мясное скотоводство 1994, №3.

65. Лондон Д. Антигенные свойства спермий. Арх. Биол. Наук. 1901.

66. Лопырин А.И. Опыт межпородной пересадки зародышей овец // Советская зоотехния. 1950, №8, С 50-52.

67. Лопырин А.И. Биология размножения овец. М. Колос. 1971.

68. Лукьянов Б.,Лукьянов П. Комплексное планирование рационов. //Животноводство России. 2000, №11.

69. Мадисон В., Мадисон Н., Остапенко С. Высококачественные гона-дотропины успех полиовуляции //Молочное и мясное скотоводство, 1997, №7.

70. Мадисон В. Теоретические и практические возможности корректировки полового цикла коров и телок. //Молочное и мясное скотоводство. 2001. №2.

71. Максимов В.И. Профилактика и ликвидация болезней с.-х. животных. //Сб. тр. Донского СХИ. 1973. 8. в.1.

72. Малаховский А.Я. Методика индивидуального подбора в животноводстве в связи с иммуногенетическими особенности крови КРС. Тр.Сиб НИИЖ. В.14. Барнаул. 1958.

73. Марченко Г.Г. Система разведения свиней по линиям.//Зоотехния, 2000, С. 112.

74. Медведев Г.Ф.,Турчанов С.О. Критерий для отбора быков-производителей по плодовитости. // Зоотехния.2000, №1.

75. Матоушек Цит. по В.Н.Тихонов, 1967.С.325.

76. Менге А. Генетическое изучение плодовитости и бесплодия сельскохозяйственных животных. //ВНИИИ и ТЭИ. М.1970.

77. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М. Сельхозиздат, 1962.

78. Милованов В.К. Биологические и зоотехнические аспекты оплодотворения и плодовитости с.-х. животных. //Животноводство. 1967. С. 4.

79. Милованов В.К., Соколовская И.И., Смирнов И.В. Свойства живчиков млекопитающих сохранять биологическую полноценность после быстрого замораживания Диплом на открытие №103. 1972.

80. Милованов В.К., Соколовская И.И., Среда для глубокого замораживания семени //Животноводство. 1985, №7.

81. Найдич М.С. Новые данные в области противозачаточных средств. Временный стерилетет, достигнутый введением сперматозоидов. М.1928.

82. Никитин А.К. Аутоспермоантитела хряков-производителей фактор отбора гамет // Труды ССХИ, 1979 т.4.

83. Никитин А.К. Влияние иммунологических факторов на воспроизводство свиней. Диссертация М.,1988.

84. Никитин В.Я., Тимченко Л.Д. Роль риккетсий в заболеваемости коров послеродовым эндометритом // Ветеринария. 1994, №10.

85. Овайдис Р.Н, Абилов А.И. Спонтанные аутоиммунные явления в организме самцов, их распознавание и влияние на воспроизведение.// Всесоюзный симпозиум по иммунологии воспроизведения. Киев, 1985. С.59.

86. Овсянников А.И., Терентьева А.С. Современные методы селекции и их значение в повышении продуктивности свиней. //Обзорная информация. ВНИИНТЭИ по сельскому хозяйству. М.1973.

87. Ожин Ф.В. Справочник по искусственному осеменению с.-х. животных. М. Россельхозиздат. 1983.

88. Орлов К.А. и др. Эффективность использования ландрасов в промышленном скрещивании свиней на Ставрополье. //Тр. СХИ. 1971. т.З. в.34.

89. Осетров А.А., Марчук О.Т. Некоторые аспекты иммуногенного бесплодия коров // Профилактика бесплодия с-х. животных на Северном Кавказе. Новочеркасск, 1974.

90. Осташко Д.И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей. //Киев. Урожай, 1978, 256с.

91. Охапкин С.К. Презиготический отбор в многоаллельных локусах у крупного рогатого скота// Москва. Отдельный оттиск, 1984, С 330-335.

92. Охапкин С.К. Презеготический отбор в В-локусе групп крови крупного рогатого скота// Киев, 1987 Цитология и генетика.- Т.21, №3. С 203206.

93. Ожин Ф.В. Справочник по искусственному осеменению с.-х. животных. М. Россельхозиздат. 1983.

94. Павличенко В.П. Спермоагглютинины в сыворотке крови коров и их связь с бесплодием // ВНИИРСХЖ. Л., 1971.

95. Пакенас П.И. Бойсогальская. Технология кормления, содержания, подготовка быков к взятию спермиев, его криоконсервации и использования. //Вильнюс. 1980. 89 с.

96. Пархоменко Л.А., Мороз В.В. Создание нового типа скота на Кубани. //Зоотехния.2000,5.

97. Патров B.C., Герасимов В.И. Изменение уровня и качества спермы хряков-производителей взависимости от типа кормления и возраста. //Материалы конференции молодых ученых по разведению и гненетики с.-х. животных. Л. 1962.

98. Петров Р.В., Иммунология. М. Медицина. 1987.

99. Полянцев Н.И., Цыганков П. Биотехнологический контроль сроков осеменения коров для получения уплотненных отелов // Молочное и мясное скотоводство. 1990, №1, с.28-29.

100. Поливанов Р.П, Вылчанов В.Х. Разделение человеческих сперматозоидов на сперматозоиды с антигеном А и В. Изд. Микробио. Инстит. БАН. София. 1967.

101. Полупан Ю, Близниченко В. Модельное животное и целевые стандарты создаваемой породы скота//Молочное и мясное скотоводство. 1995.1.

102. Попов Н., Бордановская Н. Генетические особенности коров с большим производственным долголетием. // Молочное и мясное скотоводство. 1997, №2, с.25-29.

103. Порфирьев И.А., Молчанов И.А., Соломаха Н.А., Кордюков А.Н. Профилактика бесплодия коров // Достижения науки и техники. 1997, №6, С.18.

104. Радченков В.П. Иммунорегуляция эмбрионального развития. Экспериментальное моделирование. // Автореферат диссертации д.б.н. Дубро-вицы, 1993, С 30.

105. Райцина С.С. Аутоиммунная диструкция семенных канальцев при действии сезонных и повреждающих факторов на семенники млекопитающих. / Тр. Международного симпозиума. София, 1982, С. 129-132.

106. Райхлин П. Как покончить с застоем в селекции.// Животноводство России. 2000, №6.

107. Решетникова М. Н. Интенсификация воспроизводства крупного рогатого скота в племенном хозяйстве. / Автореферат диссертаии д.б.н./ ВНИИПЛЕМ -«Лесные поляны», 1996, С. 37.

108. Рендель Я. Использование групп крови и типов белков сыворотки для выявления сходства и различия между паопуляциями животных. Сельское хозяйство за рубежом. Животноводство. 1968. С. 10.

109. Родин И.И. Нарушение спермообразования у производителей и меры устранения их В кн. «Справочник по искусственному осеменению с-х животных». М. Россельхоз,1973.

110. Родин И.И. Влияние некоторых факторов на качество спермы быков и баранов. // Ветеринария. 1981, №7, с48.

111. Рюмке Ф. Антитела против сперматозоидов человека. Международный симпозиум по иммунологии оплодотворения. София. 1967.

112. Самоделкин Н., Дрячнов В., Чавриков Н., Смыслова Н. Усовершенствование режимов замораживания эмбрионов мясных пород // Молочное и мясное скотоводство. 1997, №5.

113. Сахаров П.П. Цит.по кн. Лабораторное животноводство. М.-Л. 1937.

114. Севастьянова В.В., Прокофьев М.И., Лунин В.Г., Анисимова С.В. Новый способ пересадки гена в зиготу.// Зоотехния, 2000, №9.

115. Сергеев Н.И., Смыслова Н.И., Бушманов В.И. Морфологическая оценка эмбрионов // Зоотехния. 1993, №8.

116. Сердюк Г.Н Влияние иммунологической несовместимости родительских пар на жизнеспособность поросят // Животноводство, 1973, №7.

117. Серебрянников В.Н. Различная сочетаемость родительских пар и значение индивидуального подбора в борьбе с перекрытием и яловостью коров. Тр. Омского СХИ. 1957. т.23.

118. Синицина Н. Хороший бык половина стада. //Животноводство России, 2000, №12.

119. Смирнов И.В. К теории глубокого охлаждения спермы // Животноводство 1974, №11.

120. Соколовская И.И., Дроздова Л.И. О некоторых вопросах оплодотворения животных. Ж.общ.биол. животных. 1954. т.15.

121. Соколовская И.И. Гемато-генитальные барьеры и воспроизведение животных.//Животноводство. 1967 №4.

122. Соколовская И.И., Милованов В.К. Иммунология воспроизведения животных. М. Колос. 1981.

123. Соколовская И.И. Генетическая обусловленность в регуляции иммунологического ответа в воспроизводстве //Животноводство. 1985, №7, С.41.

124. Солсбери Г.У., Бэкер Ф.Н. Генетическое изучение плодовитости и бесплодия сельскохозяйственных животных.//ВНИИИТЭИ по сельскому хозяйству. М. 1970.

125. Стрекозов Н.И., Левина Г.Н. Индивидуальный подбор с учетом типа животных и селекции быков.// Зоотехния, 2001, №1.

126. Субботин А. Повышение эффективности использования спермы высокоценных хряков. //Свиноводство, 2001, №1

127. Сысоев А.А. Физиология размножения с.-х. животных. М. Колос. 1978. С.360.

128. Тихонов В. Исследование групп крови животных. М. Ко-лос.1967.С.391.

129. Трифонов Г., Перунова Е. Влияние препаратов микроэлемента селена на воспроизводительные качества свиней.// Свиноводство.2001.№1

130. Филатов А. Гибридизация основной путь получения высококачественных свиней. // Свиноводство 1997, №4.

131. Филипович Э.Г. и др. Витаминизация животных для повышения их жизнеспособности. //Зоотехния.2001 .№ 1.

132. Хрусталева Г.Ф. Выявления ановуляторных циклов посредством некоторых функциональных тестов. Акушерство и гинекология. 1963.1.С. 44-48.

133. Черекаева И. И. Использование двойневых отелов коров для увеличения производства говядины в Ирландии.// Экспресс-информация,-Госагропром СССР-ВАСХНИЛ-ВНИИТЭИагропром.СерияЗ в.23.1988г.

134. Шабалин В.Н. Изо- и аутоиммунные процессы у больных лейкозом. Автореферат канд. Диссерт. JI. 1968. с.21

135. Шапочкин В.В. Животноводство России сегодня.//3оотехния.2000, №9.

136. Швынденков В. и др. Эффективность лимузинов при чистопородном разведении и скрещивании с симменталами в Башкорстане. //Молочное и мясное скотоводство.2001. 2.

137. Шелл Дж. Гибридная кукуруза. М. Изд. Иностр. Литер.1955. С.28-73.

138. Шевелев А.С. Противоречия иммунологии. М. Медицина. 1978.

139. Шергин Н.П., Семаков В.Г. Влияние некоторых физико-химичеких факторов на спермив.// Кн. Справочник по искусственному осеменению с.-х. животных./М. Россельхозиздат. 1983. С.99-104.

140. Шубин А., Писарева Н. Способы применения сурфагона при искусственном осеменении коров. // Молочное и мясное скотоводство. 1995, №3.

141. Щепаренкова Т.И. Влияние скрещивания на иммунологический потенциал овец.// Зоотехния.2000, №2.

142. Эрнст JI.K., Кабанов В.Д. Новое в организации племенного дела. * Новое в науке и технике.// Серия. Сельское хозяйство. 1981.4. /Изд.Знание.

143. Эфроимсон В.П. Иммуногенетика.// М. Медицина. 1971.С.336.

144. Яблонский В.А, Мизык В.П. Локальный иммунитет репродуктивного тракта коров при трансплантации эмбрионов. // IY Всесоюзный симпозиум иммунологии репродукции. Киев. 1990, С. 104-105.

145. Aellen W.P. J. Reprd. Fertic. 1984. 71. 2-607-313.

146. Burice W.H. Цит. по В.П. Эфроимсону. Иммуногенетика. Изд. Медицина. М. 1971.

147. Davenport С.В. Degeneration, albinism and inbreeding.- Science, 1908. v.28.

148. East E.M. Inbreeding in corn. Rept. Connenct. Agrie. Exper Stat.for 1907.419-428.

149. East E.M. Heterossis, Genetics, 193 6, 21,375.

150. Garsia C. A. Perez. Proceedings of the 3 worid congress of ferbiliti and sterilliti. Amsterdam. 1959. 194.

151. Jerasaki P. S., MecCelland. 1968.

152. Jones R.G. The plasma membrana of ram. boor and bull spermatozoa. \\ J. Reprod. Fertil. 1973, v 33,1

153. Johanson I. Genetic causes of faulty germcells and low fortillity. Supplement. J.Dairy. Sc.1960. 43.1-30.

154. Haurowitz F. Immunochemistry and the biosinthesis of antibodies, N. Y.,1968. 292-299.

155. Hoppe P., Koo G. J. of reprod. immunology. 1984. P.6.1-9.

156. Holman Цитируется по Эфроимсону. Иммуногенетика. Изд. Медицина. М. 1971.

157. Henle W.T. Exptl. Med. 1938.68.335. Henle G. Chambers L.

158. Kabat and Mayer. Inbreeding and the fundamental theorem 1968.

159. Kauffold P., Topner H. Schmidt D. Ergebnisse die Jn. -vitro- Befruch-tung tubaler Oocyten des Rindes //Tag. Ber., Akad Landwrisch, Wiss. DDR. Berlin, 1986, p. 252.

160. Kiddy C.A., Casids L.E. S. Deiiy Sci., 1956,42,110 Stone W.H. Tyier W.S.

161. Kiddy C.A. Inherited differences in specific biood and milk proteins in cattfe.S. Dairi Sci., 1964. 47

162. King G.S. New horesons in animal breeding // Agric. progress. 1977, vol 52,p. 21-31.

163. Laren A.U. Immunological control of fertility in female mice.-Nature. London. 1964. 201.

164. Lyon M.F. Nature (Lond) 1961. 190. 372.

165. Loda P., Baboni G.C. Considerazioni sulle cause deiia sterilita bo-vina in provincia dimanva.-Riv. Zootecn.,1970. 43. 2.

166. Hull F. Owerdominance and corn bredsing where hybridseed is not feo-sible.- S. Amer. Soc. Agron., 1946. v. 38.

167. Mandel S., Barral S. Inbreeding and the fundamental theorem of no-tural Selection.-Yeredity. 1972.29. 1.

168. Matsunaga E. Aspecta on human reprodaction. Am. S. Human. 1955.

169. Menge A.C. J. Reprod. Fertill., 1969,18,p.64-67.

170. Menge A.C. J. Reprod. Fertill,1967 13,445.

171. Nuwicki B. Bastardy rasy buflaloh Prz. hod., 1993, v. 61, №3, p. 20-21.

172. Reid B. L. Lancet. 1964. 1. 21.

173. Rottman O. Embriyomanipulation eine biotechnik fur tierzuchter // xxxiii Ann. meeting Europ. Assoc. Anim Production. Leningred, 1982.

174. Rommel P., Konig I. Embryotransfer Rind-Akademie der Land Wir-chaften der DDR, 1982.

175. Stewart U., Tofer S.H., Ensminger M.E. The Pelocese dread of swine.-Wach. Agric. Exper. Stat., Buit., 1959. N 604/

176. Shelton E., Eyans Y., Parker G. J. Natl. Cancer Jnst. 1963,30,377.

177. Yarnek J. Spermaundersogeison yed sterilitet. Aurinis, 1944.

178. Voisin G/A., Toullet F. Etude sur lorenete aspermatogenetigue autoimmune et les autoantigtnes de spermatozoides chez le cobaye. Ann. Inst. Pas-teuer. 1968. 114.6.

179. Wilson G.S., Miles A.A. Topili and Wilsons prineipies of bacteriologi and immunity. V. 1. London. 1964.