Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения

Шеховцова, Оксана Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения
ВАК РФ 03.02.03, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения"

На правах рукописи

ШЕХОВЦОВА ОКСАНА ВИКТОРОВНА

Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения

03.02.03 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 1 НОЯ 2012

Москва - 2012

005054289

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Шаталова Елена Васильевна

Официальные оппоненты:

Пашков Евгений Петрович, доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

Червинец Вячеслав Михайлович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии и вирусологии с курсом иммунологии ГБОУ ВПО «Тверская медицинская академия»

Ведущая организация:

ГБОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия»

Защита состоится «Л£у> ¿-¿-¿А-^'-^У' 2012 г. в часов на заседании диссертационного совета Д 208.040.08 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Первый МГМУ им. И.М. Сеченова по адресу: 119992, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНМБ ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова по адресу: 117998, г. Москва, Нахимовский проспект, д. 49.

Автореферат разослан

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Миронов Андрей Юрьевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Одной из компонент, характеризующих «индекс здоровья» нации, является уровень инфекционной заболеваемости, в формировании которого важную роль играют внутри-больничные инфекции (ВБИ). Заболеваемость ВБИ в определенной степени отражает качество медицинской помощи, оказываемой населению, и является одной из важных составляющих экономического ущерба в практическом здравоохранении (Акимкин В.Г., 2005; Семина H.A., 2007; Покровский В.И., 2011).

Несмотря на обилие новых препаратов с антимикробным действием, выборочные исследования, проведенные на различных территориях нашей страны и за рубежом, свидетельствуют о значительном распространении ВБИ, большом медицинском и социально-экономическом ущербе, наносимом ими (Венцель Р.П., 2004; Зайцев С.Н., 2010). Это в основном отделения для ожоговых больных, онкологии, гематологии, кардиохирургии, трансплантации органов и тканей, интенсивной терапии, неонатологии, СПИД и др.

Снижение антиинфекционной защиты у таких пациентов приводит к созданию для микроорганизмов новых экологических ниш, в которых происходит селекция микроорганизмов с новым набором детерминант вирулентности и устойчивости к факторам внешней среды. Итогом этих процессов является появление и значительное распространение лекарственно-устойчивых госпитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов.

Этиологическая структура возбудителей ВБИ многообразна и отличается своим разнообразием не только между регионами, но и между отдельными ЛПУ и зависит от его профиля, политики применения антибиотиков и оказываемой лечебной помощи. Как правило, это госпитальные штаммы условно-патогенных грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов с нарастающей тенденцией дрожжеподобных грибов рода Candida spp. Однако особое беспокойство у врачей разных специальностей вызывают смешанные Кандида-бактериальные инфекции, которые из потенциальных «болезней будущего» превратились в актуальные «болезни настоящего» (Сергеев А.Ю., 2003; Шкарин В.В., 2006; Wingard E.J., 2007).

Сложные и неоднозначные взаимоотношения между разными видами возбудителей при гнойно-воспалительных процессах смешанной этиологии могут оказывать существенное влияние на характер инфекционного процесса, усугубление иммуносупрессии у боль-

ных и соответственно на формирование штаммов с признаками «госпитальных».

Между тем до сих пор роль дрожжеподобных грибов рода Candida spp. во взаимоотношениях с другими видами бактерий, равно как и влияние их на механизм формирования госпитальных штаммов микроорганизмов, течение и исход инфекционного процесса Кандида-бактериальной природы изучено недостаточно.

Учитывая высокую значимость ВБИ, все вышеизложенное требует комплексного подхода к изучению данной проблемы и поиска способов предупреждения формирования штаммов с признаками «госпитальных» в условиях гнойно-воспалительных процессов Кандида-бактериальной этиологии.

Работа выполнена по плану НИР Курского государственного медицинского университета (номер государственной регистрации 01.2.00950632).

Цель исследования: изучить влияние дрожжеподобных грибов рода Candida spp. на формирование структуры популяций ведущих возбудителей ВБИ по клинически значимым признакам в условиях иммуносупрессии организма и разработать способ предупреждения формирования штаммов с признаками «госпитальных».

Задачи исследования.

1. Изучить мониторинг видового состава возбудителей внутри-больничных инфекций в отделениях многопрофильных стационаров города Курска за период 2007 - 2011 гг.

2. Изучить некоторые факторы вирулентности (гемолитическая и протеолитическая активность, адгезивные свойства) и факторы пер-систенции (антилизоцимная и антилактоферриновая активность), способствующие проявлению патогенности клинических штаммов микроорганизмов, и профиль их устойчивости к антимикробным препаратам.

3. Изучить структуру популяций основных возбудителей (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и Candida albicans) нозокомиальных инфекций в городе Курске по клинически значимым признакам.

4. Изучить влияние дрожжеподобных грибов рода Candida spp. на формирование структуры популяции Staphylococcus aureus, Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa по признакам патогенности, персистенции и устойчивости к антимикробным препаратам в условиях иммуносупрессии in vivo.

5. Оценить выраженность связи между механизмом формирования популяций ведущих госпитальных штаммов возбудителей в условиях мико-ассоциаций и течением и исходом гнойно-воспалительного процесса Кандида-бактериальной природы.

6. Экспериментально обосновать применение препаратов, обеспечивающих высокоэффективную коррекцию антиинфекционной резистентности организма, с целью предупреждения формирования штаммов с признаками «госпитальных» через иммунокомпрометиро-ванный организм.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Высокая степень проявления пенетрантности и экспрессии по клинически значимым признакам в популяциях бактерий в условиях ассоциации с дрожжеподобными грибами рода Candida spp. способствует более длительной персистенции микроорганизмов в организме хозяина, угнетает развитие иммунного ответа у экспериментальных животных и влияет на течение и исход инфекционного процесса.

2. Дрожжеподобные грибы рода Candida albicans индуцируют формирование популяций бактерий-ассоциантов с признаками «госпитальных», однако выраженность этого эффекта зависит от принадлежности их к таксономической группе.

3. Система «гетерогенность популяций микроорганизмов - состояние иммунной системы макроорганизма» имеет диагностическое значение и может быть использована для прогнозирования и профилактики возникновения внутрибольничных инфекций.

4. Галавит (отечественный препарат с иммуномодулирующим, противовоспалительным и регенерирующим эффектами -200 мкг/мышь) индуцирует возникновение иммуностимулирующего эффекта при Кандида-бактериальной инфекции у животных с имму-носупрессией, вызванной термической травмой. Однако выраженность этого эффекта зависит от вариантов бактерий-ассоциантов.

5. Сочетанное применение галавита (200 мкг/мышь) с лидокаи-ном (ингибитор фосфолипаз - 5 мкг/кг) эффективно корригирует иммунологическую реактивность экспериментальных животных и приводит к полной сапрофитизации возбудителей гнойно-воспалительного процесса Кандида-бактериальной природы всех изученных вариантов.

Научная новизна.

Впервые:

- научно обосновано разнонаправленное влияние дрожжепо-добных грибов рода Candida albicans на механизм формирования структуры популяций ведущих возбудителей госпитальных инфекций. Установлено, что грибы рода C.albicans способствуют нарастанию и достоверно увеличивают количество клонов с высокими показателями клинически значимых признаков в популяциях E.coli и S.aureus соответственно в условиях in vivo у иммунодепрессирован-ных животных.

В тех же условиях штаммы Ps.aeruginosa формируют однородные популяции по содержанию высоковирулентных и панрезистент-ных клонов;

- установлена высокая корреляционная связь между механизмом формирования штаммов возбудителей ВБИ с признаками «госпитальных» и течением и исходом гнойно-воспалительных процессов Candida-бактериальной природы;

- научно доказано, что система «гетерогенность популяций микроорганизмов - состояние иммунной системы макроорганизма» имеет диагностическое значение и может быть использована для прогнозирования возникновения ВБИ.

Показано, что микроорганизмы с высоковирулентными и пан-резистентными клонами в популяциях, которые формируются под влиянием грибов рода C.albicans, подавляют регенераторные потенции тканей макроорганизма, способствуют длительному функционированию естественного ингибирующего фактора (ЕИФ) в организме и обусловливают развитие тяжелой формы инфекционного процесса с высоким уровнем летальных исходов у экспериментальных животных.

Установлено, что применение галавита с лидокаином обеспечивает выраженный протективный эффект за счет высокоэффективной коррекции антиинфекционной резистентности организма животных с Кандида-бактериальной инфекцией в условиях термической травмы и способствует достоверной сапрофитизации возбудителей в организме.

Практическая значимость. Установлено прямое разнонаправленное влияние дрожжеподобных грибов рода C.albicans на механизм формирования госпитальных штаммов E.coli, S.aureus, P.aeruginosa на устойчивость их ассоциаций с грибами, длительность циркуляции по-

следних в организме экспериментальных животных, продолжительность и исход инфекционного процесса.

Полученные данные расширяют теоретические представления о механизмах формирования штаммов с признаками «госпитальных», способствуют более детальной расшифровке эпидемиологии внутри-больничных инфекций и обусловливают настоятельную необходимость дифференцированного подхода при разработке рациональных схем терапии гнойно-воспалительных осложнений СапсИ<За-бактериальной природы.

Существенно расширены представления о состоянии гетерогенности популяций исходных штаммов условно-патогенных микроорганизмов, что способствует более точной диагностике инфекционных процессов, позволяет предупредить изменение свойств госпитальных штаммов микроорганизмов в сторону повышения их вирулентности и резистентности к антибактериальным препаратам, прогнозировать течение и исход инфекционного процесса и оценить эффективность терапии гнойно-септических осложнений.

Практическое значение исследований определяется разработкой способа предупреждения формирования госпитальных штаммов возбудителей гнойно-септических процессов в условиях ожоговой травмы, включающего экспериментальное обоснование возможности применения галавита с лидокаином, восстанавливающих антиинфекционную резистентность экспериментальных животных и способствующих элиминации из состава популяций микроорганизмов вирулентных и резистентных к антибиотикам особей, что приводит к са-профитизации возбудителей в организме, предупреждая формирование штаммов с признаками «госпитальных» и соответственно возникновение ВБИ.

Внедрение в практику результатов работы. Полученные материалы использованы в методических рекомендациях для врачей и научных работников «Условно-патогенные бактерии в этиологии внутрибольничных инфекций в г. Курске и мониторинг их чувствительности к антибактериальным препаратам». Результаты исследования внедрены в практику бактериологической лаборатории ОБУЗ «Курская городская клиническая больница скорой медицинской помощи», ОБУЗ «Областная клиническая инфекционная больница им. Семашко», хирургического отделения БМУ «Курская областная клиническая больница», в учебный процесс на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии Курского государственного медицинско-

го университета, в лекционный курс на факультете повышения квалификации для врачей.

Апробация работы. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на научных региональных конференциях молодых ученых (Курск, 2009; 2011); межвузовской научно-практической конференции «Проблемы и перспективы современной науки» (Томск, 2009); Международной научной конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 2009); Международной научно-практической конференции «Инфекции и паразитарные болезни в практике клинициста» (Харьков, 2010); научной сессии отделения медико-биологических наук ЦентральноЧерноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН (Курск, 2010); научно-практической конференции по медицинской микологии (VIII Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2010); совместном заседании кафедр микробиологии, вирусологии, иммунологии, инфекционных болезней и эпидемиологии, биохимии, клинической иммунологии и аллергологии Курского государственного медицинского университета.

Публикации. Основные положения диссертации отражены в 13 научных публикациях, включая 3 публикации в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК РФ, методических рекомендациях для врачей и научных работников лечебно-профилактических учреждений. Получен патент на изобретение № 2458138 от 10.08.2012 г. Зарегистрировано 5 внедрений.

Личный вклад автора. Автором составлен план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации. Лично проведены исследования, сбор материала, проанализированы полученные результаты, сделаны выводы и практические рекомендации. В работах, выполненных в соавторстве, использованы результаты исследования с долей личного участия автора 75-95%.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками и 24 таблицами; состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка цитированной литературы, включающего 263 работы: 147 из них отечественных и 116 зарубежных авторов. Диссертация содержит 5 приложений.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выполнены на мышах линии СВА (980) и крысах Вистар (120), полученных из опытно-племенных питомников АМН РФ «Светлые горы» и «Столбовая», прошедших карантинный режим вивария Курского государственного медицинского университета и не имевших внешних признаков каких-либо заболеваний. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме, при свободном доступе к воде и пище. В контрольные и опытные группы входили животные одной массы и одного пола, полученные из вивария одновременно. Все исследования проводили в одно и то же время суток (с 8 до 13 час.). Из опыта животных выводили дека-питацией под эфирным наркозом.

Требования, изложенные в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (город Страсбург, Франция, 18 марта 1986), в работе полностью соблюдены.

Видовую принадлежность выделенных микроорганизмов определяли с помощью диагностических биохимических тест-систем Мюго1а-Тез1 ("ЬасЬеша", Чехия). Гемолитическую и протеолитиче-скую активность определяли по общепринятым методикам.

Каталазную и цитохромоксидазную активность определяли согласно приказу № 535 от 22 апреля 1985 г. Чувствительность к антимикробным препаратам определяли с помощью метода диффузии в агар с применением элективных сред и дисков НИЦФ, Санкт-Петербург; интерпретация результатов согласно указаниям производителя дисков. При этом использовали антибиотики, к которым изучаемые микроорганизмы обладают природной чувствительностью: для синегнойных бактерий использовали тобрамицин, гентамицин, амикацин, цефтазидим, ципрофлоксацин, полимиксин М, карбени-циллин, стрептомицин, имипенем; чувствительность кишечных палочек изучали по отношению к тобрамицину, амикацину, цефтазидиму, ципрофлоксацину, имипенему, карбенициллину и стрептомицину; стафилококка - по отношению к тобрамицину, гентамицину, амикацину, цефтазидиму, ципрофлоксацину, имипенему и стрептомицину; грибов рода Кандида - по отношению к амфотерицину В, леворину и нистатину.

В отношении части культур (синегнойных бактерий) определяли минимальную подавляющую концентрацию (МПК) методом серийных разведений в чашках Петри с плотной питательной средой, со-

держащей вышеперечисленные антибиотики в концентрации 25, 50, 100, 200, 400 мкг/мл.

Способность к адгезии изучаемых микроорганизмов определяли с помощью экспресс-метода по В.И. Брилис и соавт. (1986). Антилак-тоферриновую активность (АЛФА) микроорганизмов изучали по методике И.В. Валышевой и соавт. (2003) с использованием лактофер-рина из коровьевого молока фирмы "Fluca" (Швейцария), номер по каталогу 61323 с применением твердофазного иммуноферментного метода и использованием реагентов ЗАО «Вектор-БЕСТ», город Новосибирск. Способность микроорганизмов к инактивации лизоцима определяли по методу О.В. Бухарина (1985).

Ожог III-B степени площадью около 30% поверхности тела животного получали под легким эфирным наркозом на депиллирован-ном участке кожи спины животного с помощью устройства, поддерживающего температуру обжигающей поверхности на уровне 100 С при экспозиции 8 сек (Минухин В.В., 1985).

Структуру популяций микроорганизмов изучали по признакам лекарственной устойчивости и патогенности путем рассева 0,1 мл суточной бульонной культуры исследуемых штаммов на чашки с МПА для получениях изолированных колоний, после чего петлей пересевали 100 изолированных колоний на чашки с МПА с различными концентрациями антибиотиков (от 25 до 400 мкг/мл) или другими субстратами и на чашку с МПА без них (контроль). Чашки с посевами инкубировали в течение суток при 37°С. При сравнении популяций микроорганизмов учитывали процент колоний, выросших на чашках с антибиотиками в максимальных концентрациях. При этом использовали антибиотики, к которым изучаемые микроорганизмы обладают природной чувствительностью: для синегнойных бактерий использовали карбенициллин, полимиксин М и тобрамицин; чувствительность кишечных палочек изучали по отношению к карбеницил-лину, стрептомицину и тобрамицину; стафилококка - по отношению к тобрамицину, ципрофлоксацину и стрептомицину.

Популяцию микробов-ассоциантов из ожоговой раны получали путем отпечатков с помощью стерильных бархатных штампов размером 1 х 1 см2 на поверхность агаризованных элективных питательных сред: среда, содержащая N-цетилпиридинийхлорид (ЦПХ), служила для псевдомонад; молочно-солевой агар служил для выделения стафилококка; среда Эндо - для кишечных палочек.

Иммунологические исследования. Процесс фагоцитоза поли-морфноядерными лейкоцитами периферической крови изучали по общепринятой методике с вычислением относительного содержания активных фагоцитов (активность, %) и количества фагоцитируемых микроорганизмов в расчете на один фагоцит (фагоцитарное число, интенсивность). При этом кровь у мышей брали из супраорбитальной вены.

С целью определения завершенности фагоцитарного процесса применяли методику З.Е. Матусис и С.П. Пылаевой (1978).

Активность кислороднезависимых бактерицидных систем изучали по наличию лизосомальных катионных белков в цитоплазме лейкоцитов периферической крови в мазках, окрашенных бромфено-ловым синим по методике, предложенной М.Г. Шубич (1974) с определением среднего гистохимического показателя (СГП).

Выраженность гуморального иммунного ответа (ГИО) оценивали по двум интегральным показателям: а) количеству антителообра-зующих клеток (АОК) селезенки после иммунизации эритроцитами барана (ЭБ) (Мальберг К., 1987) и б) эффекту подавляющего действия на образование антител естественного ингибирующего фактора (ЕИФ), отличительной чертой которого является ингибирование активности циркулирующих в крови макромолекулярных (1ёМ) антител различной специфичности в присутствии 2-меркаптоэтанола (Родосская Н.К., 2003).

Неспецифическое ингибирование активности ^ определяли с помощью реакции ингибирования агглютинации (РИА) с применением брюшнотифозной агглютинирующей неадсорбированной диагностической сыворотки (тест-сыворотка) с вычислением индекса ингибирования (ИИ) - отношение суммарного титра контрольного ряда к суммарному титру опытного ряда. РИА считали положительной, если ИИ был равен 1,2 и более (Журавлева Н.В., 1985).

Интенсивность реакции (ИР) гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) определяли путем сенсибилизации мышей ЭБ в дозе 1 х 107 с последующим введением разрешающей дозы ЭБ (Черноусое А.Д., Фонталин Л.Н., 1979).

Способ введения изучаемых препаратов в организм животных соответствовал инструкциям и положению по применению, дозы экспериментально обоснованы по данным литературы. Препараты вводили сразу после воспроизведения ожоговой травмы и ее инфицирования 1 раз в сутки в течение 3 дней: галавит в дозе 200 мкг/мышь в

объеме 0,1 мл внутримышечно, лидокаин - 5 мкг/кг внутрибрюшин-но,

В качестве контрольных были следующие группы:

- интактные, которым по тем же схемам вводили стерильный изотонический раствор хлорида натрия;

- животные с «чистым» ожогом;

- животные с ожоговой травмой и Кандида-бактериальной инфекцией.

Все полученные данные подвергнуты статистической обработке с определением критерия Стьдента, X2 и Вилкоксона-Манна-Уитни с помощью пакета прикладных программ "Microsoft Office ХР".

Для доказательства связи некоторых признаков был использован корреляционный анализ с помощью программного комплекса "Microsoft Exel - 97" для IBM PC с вычислением коэффициента корреляции и его ошибки.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние грибов рода C.albicans на формирование госпитальных штаммов возбудителей ВБИ и исход инфекционного процесса Кандида-бактериальной этиологии у животных

Невозможно полностью экстраполировать на конкретный стационар не только данные комплексных исследований о ВБИ, полученные в других странах (США и европейских странах), но и данные, полученные в других стационарах нашей страны и даже в городе. В связи с этим блок параметров, связанных с микробиологическим мониторингом, имеет в отделении стационаров любого профиля первостепенное значение.

Нами было изучено 380 штаммов микроорганизмов, выделенных из патологического материала от больных многопрофильных стационаров г. Курска за период 2007-2011 гг. По видовому составу это были: Staphylococcus spp. - 120 штаммов, Pseudomonas aeruginosa - 90 штаммов, дрожжеподобных грибов рода Candida spp. -105 штаммов и 65 штаммов Escherichia coli. Из них 235 (61,8%) культур входили в состав различных ассоциаций (табл. 1).

Этиологическая структура и уровень резистентности возбудителей ВБИ имеют принципиальное значение, т.к. между отдельными исследованиями и географическими регионами отмечаются значительные вариации этих показателей (Яковлев С.В. и др., 2008).

Таблица 1

Структура ведущих возбудителей нозокомиальных инфекций

Возбудители Выделенные Итого

в монокультуре из ассоциации

Staphylococcus spp. 50/13,2 70/18,4 120/31,6

Pseudomonas aeruginosa 40/10,5 50/13,2 90/23,7

Candida spp. 20/5,3 85/22,3 105/27,6

Escherichia coli 35/9,2 30/7,9 65/17,1

Итого 145/38,2 235/61,8 380/100

Примечание. Числитель - абсолютное число; знаменатель - %.

Наименьшей активностью в отношении штаммов Staphyloccocus spp. обладает гентамицин (24,2%). Наиболее активными были имипе-нем и тобрамицин (80,8% и 85,0% чувствительных штаммов соответственно).

Штаммы грибов рода Candida spp. были более чувствительными к амфотерицину В (97,9%).

В отношении грамотрицательных возбудителей (E.coli и P.aeruginosa) наиболее активным является препарат из группы карба-пенемов - имипенем (96,9% и 80,0% чувствительных штаммов соответственно), что противоречит данным литературы.

Длительное выживание возбудителя в организме хозяина и, соответственно, формирование высоковирулентных штаммов, обеспечивают различные механизмы персистенции последних (Бухарин О.В., 2009). С учетом этого у всех культур было изучено распространение признака антилизоцимной (АЛА), АЛФА активности и способности к адгезии. Изученные нами микроорганизмы обладают в разной степени АЛА, АЛФА и способностью к адгезии, распространенность и выраженность которых зависит от принадлежности к виДУ-

Так, АЛА обладали 8,3%; 87,7%; 91,1% и 93,3% стафилококков, кишечных палочек, псевдомонад и грибов рода Кандида соответственно. 100% изученных штаммов P.aeruginosa и E.coli обладали способностью к адгезии; среди грибов рода Candida spp. активных куль-

тур было 81,0%, и всего лишь 21,2% Staphyloccocus spp. обладали способностью к адгезии, причем с низкой интенсивностью (СПА=1,7±0,4).

При изучении АЛФА было установлено, что распространенность этого признака находится в пределах от 29,2% у стафилококков до 68,6% - у грибов с низким уровнем выраженности у всех культур, что не совпадает с данными литературы.

Такая дивергентность изученных признаков у штаммов, выделенных от больных, еще раз подтверждает данные литературы об обязательном включении блока параметров микробиологического мониторинга с целью своевременного выявления новых эпидемических штаммов возбудителей ВБИ.

Из всех изученных культур 61,8% штаммов были выделены в ассоциации с грибами рода C.albicans, особенности взаимодействия между которыми также могут влиять на проявление значимых признаков для госпитальных штаммов.

Проведенные нами исследования показали, что по возрастанию степени пенетрантности и экспрессии по клинически значимым признакам и тяжести вызываемой иммуносупрессии у животных изученные ассоциации возбудителей располагаются в следующей последовательности: C.albicans+E.coli —► C.albicans+S.aureus —► C.albicans+ P.aeruginosa. Это подтверждается и впервые полученными нами данными о влиянии грибов C.albicans на выживаемость и формирование структуры популяции ведущих бактерий-ассоциантов, а также на исход инфекционного процесса Кандида-бактериальной этиологии. При одновременном орошении одинаковым количеством микробных клеток грибов и кишечных палочек, грибов и стафилококка, грибов и си-негнойной палочки (по 0,2 мл 1 млрд взвеси) экспериментальной ожоговой раны уже на 4 сутки исследования отмечалось достоверное увеличение колониеобразующих единиц (КОЕ) E.coli (450 на 1см ), S.aureus - (460 на 1 см2) и P.aeruginosa (680 на 1 см2) относительно монокультур при высеве их на элективные питательные среды. При этом высеваемость монокультур из раны прекратилась на 12 сутки для E.coli и на 16 и 20 сутки для S.aureus и P.aeruginosa соответственно, в то время как из ассоциации с грибами высеваемость сохранялась до 14 сутки для E.coli и до 22 - для S.aureus. В этих же условиях высеваемость P.aeruginosa сохранялась до 28 суток на уровне 100 КОЕ/см2 (рис. 1).

u 600

№ 1

i 400

•--ЧН—

200

s т

сутки

Рис. 1. Выживаемость P.aeruginosa в ассоциации с С.albicans in vivo.

Полученные данные позволили установить широкий диапазон влияния грибов на выживаемость бактерий в ассоциациях и устойчивость последних в иммуносупрессированном организме животных.

Принципиально новым этапом в разработке проблемы ВБИ стало изучение грибов рода С.albicans на механизм формирования популяций бактерий-ассоциантов при гнойно-воспалительных процессах Кандида-бактериальной этиологии.

Принимая во внимание полученные нами данные, в следующей серии экспериментов было изучено влияние грибов рода Кандида на формирование популяций E.coli, S.aureus и P.aeruginosa, так как, согласно теории, выдвинутой академиком В.Д. Беляковым (1987), по-пуляционный подход в разработке проблемы механизмов формирования штаммов с признаками «госпитальных» является перспективным и единственно верным.

Изучение распределения колоний в популяциях бактерий проводили в динамике инфекционного процесса: на 12 сутки исследования для E.coli, на 16 и 20 сутки - для S.aureus и P.aeruginosa соответственно, т.е. к концу срока прекращения высеваемости из ожоговой раны соответствующих монокультур.

Установлено, что популяции E.coli и S.aureus из ассоциации с грибами invivo по признакам вирулентности и лекарственной устойчивости не претерпевали достоверных изменений. В то же время по признакам персистенции (АЛФА и адгезивно-активных) число колоний достоверно повышалось относительно популяций монокультур.

Причем следует отметить, что степень интенсивности адгезии у стафилококков повышалась с низкой (1,7 ± 0,4 у монокультур) до средней (2,2±0,6 у культур из ассоциации).

Особого внимания заслуживают данные по изучению формирования структуры популяции P.aeruginosa в условиях с грибами рода С.albicans.

В популяциях псевдомонад, выделенных из ассоциации с грибами, наблюдалось достоверное увеличение особей, обладающих лекарственной устойчивостью, признаками вирулентности и перси-стенции. В этих условиях популяции псевдомонад на 20 сутки исследования становятся однородными по проявлению гемолитических, протеолитических и адгезивных свойств с высокой степенью интенсивности (рис. 2), что, по-видимому, обеспечивает устойчивость данного микобиоценоза и высокий уровень иммуносупрессии организма животных.

% _ ________

120,0 -I---------

Рис. 2. Распределение клонов в популяциях Р.аеп^поэа. Примечание. Распределение по степени лекарственной устойчивости, гемоли-тически-, протеолитически-, АЛФА- и адгезивно-активных особей (в % из 100 колоний); *- достоверность различий с данными монокультуры (Р<0,01).

Впервые полученные нами данные о корреляционном анализе выживаемости, механизмах формирования популяций псевдомонад в условиях ассоциации с грибами и клиническим течением инфицированной ожоговой раны позволили установить наличие сильной прямой связи между изучаемыми параметрами (г=0,892±0,094 и 0,982±0,090 соответственно).

Разработка способа предупреяадения формирования штаммов микроорганизмов с признаками «госпитальных»

Полученные результаты послужили основанием для изучения состояния антиинфекционной защиты иммуносупрессированного организма животных, инфицированных вышеописанными вариантами Кандида-бактериальной инфекции. Для создания иммуносупрессии организма нами была выбрана модель ожоговой травмы, т.к. известно (Парамонов Б.А., 2003; Алексеев А.А., 2004), что в патогенезе обширных термических повреждений большую роль играют механизмы дестабилизации иммунного статуса с развитием иммунодефицита, влекущего за собой возникновение комплекса патологических изменений практически во всех внутренних органах, вызванных как самой травмой (через механизм стресса), так и интоксикацией, связанной с повреждением тканей (Перетягин С.П. и др., 2009).

Учитывая вышеизложенное, были изучены показатели фагоцитарного процесса и бактерицидных систем лейкоцитов (катионные белки), так как известно, что основной в защите от инфекции, вызванной условно-патогенными микроорганизмами, является фагоцитарная система, обладающая ауторегулирующими свойствами.

У всех животных с Кандида-бактериальной инфекцией на фоне ожоговой травмы наблюдалось статистически достоверное (Р<0,01) снижение уровней всех исследуемых показателей фагоцитоза по сравнению с интактными и животными с ожогом, что согласуется с данными литературы. Неферментные КБ нейтрофилов периферической крови у таких животных не обнаруживались на всех сроках исследования, в то время как у животных с «чистым» ожогом они обнаруживались в виде пылевидных отложений. Причем следует отметить, что наиболее выраженное угнетение изучаемых показателей у обожженных животных вызывала ассоциация возбудителей из грибов с псевдомонадами.

ГИО к Candida spp. имеет ряд особенностей, отличающих его от ответа на многие другие антигены. Клеточная стенка Candida spp. обладает прочной структурой, и активация системы комплемента не приводит к лизису клеток грибов. Протективный эффект антител при кандидозах осуществляется в основном опосредованно за счет их оп-сонизирующих свойств, что только ограничивает размножение гриба в организме (Лебедева Т.Н., 2004). Однако широкое распространение условно-патогенных Candida spp. в окружающей среде, наличие у них общих внутривидовых антигенов, а также антигенов, перекрестно

реагирующих с Saccharomyces cerevisiae (истинными дрожжами, широко применяемыми в пищевой промышленности), способствует накоплению естественных антител, реагирующих с Candida spp. Такие антитела присутствуют в сыворотке практически всех здоровых людей, и их особенность состоит в высокой нейтрализующей активности по отношению к Candida (Шабашова Н.В., 2009).

В связи с вышеизложенным выраженность ГИО оценивали по двум интегральным показателям: а) количеству АОК селезенки после иммунизации эритроцитами барана и б) эффекту подавляющего действия на образование антител ЕИФ.

Изучение числа АОК селезенки и ЕИФ сыворотки крови у животных показало, что активность ЕИФ в организме больных животных находится в обратной зависимости относительно количества АОК. Выраженная активность ЕИФ в сыворотке крови с Кандида-бактериальной инфекцией на фоне ожоговой травмы (ИИ=от 2,0 до 3,9) сопровождалась резким снижением числа иммунных АОК в селезенке (от 14,1 при C.albicans+E.coli до 5,5 - при C.albicans + P.aeruginosa) (количество АОК на селезенку в тыс. на орган).

Важным, а иногда и ведущим звеном в патогенезе разнообразных инфекционных осложнений (особенно грибковой этиологии), является формирование ГЗТ (Караев З.О., 2007).

Стойкое угнетение ГИО у обожженных животных с Кандида-бактериальной инфекцией сопровождается достоверным (Р<0,01) разнонаправленным изменением реакции формирования ГЗТ. Установлено, что у мышей в ответ на ожоговую травму происходит угнетение ГЗТ (Р<0,05). На присоединившуюся Кандида-бактериальную инфекцию организм обожженных животных по-разному реагировал относительно формирования ГЗТ. Это зависело от видовой принадлежности бактерий-ассоциантов. Так, у животных с ожогом C.albicans+E.coli и C.albicans+S.aureus вызывали резкое угнетение ГЗТ (ИР=19,0±1,3 и 12,0±1,2 соответственно). В то время как ассоциация C.albicans+P.aeruginosa формировала у последних гиперерги-ческую реакцию ГЗТ (ИР=68,0±3,3) (рис. 3).

Таким образом, результаты проведенных нами исследований показали, что влияние грибов рода C.albicans на формирование однородных популяций с высоковирулентными и лекарственно-устойчивыми клонами и тяжести вызываемой иммуносупрессии у животных зависит от видовой принадлежности бактерий-ассоциантов

и убывает в ряду: С.albicans+P.aeruginosa —> С.albicans+S.aureus C.albicans+E.coli.

группы животных

Рис. 3. Интенсивность реакции ГЗТ у животных с ожоговой травмой, осложненной Кандида-бактериальной инфекцией.

Примечание. Группы животных: 1 — интактные; 2 — ожог; 3 — ожог инфицирован С.albicans + P.aeruginosa; 4 - ожог инфицирован С.albicans + S.aureus; 5 - ожог инфицирован С.albicans + E.coli. Достоверность различий с данными контрольной группы (интактные) *Р<0,05, **-Р<0,01.

Однако проводить исследования, доказывающие госпитальную природу штаммов и их ассоциаций, без применения иммунокоррек-ции супрессированного организма животных является не достоверно доказывающим фактором.

В связи с этим нами была поставлена задача изучить в эксперименте возможность восстановления нарушенной иммунологической реактивности организма иммуносупрессированных животных с Кандида-бактериальной инфекцией с помощью галавита и лидокаина.

Выбор препаратов был обусловлен не только механизмом их действия, но и выбранной нами моделью иммуносупрессии. Галавит - отечественный иммуномодулятор, обладающий иммуномодули-рующим, противовоспалительным и регенерирующим эффектами (Абидов М.Т., 1999).

Трехкратное введение только галавита (200 мкг/мышь/ в/мышечно) оказывало позитивное влияние на депрессированную активность антиинфекционной резистентности у животных, однако восстановления изучаемых показателей до уровня интактных животных нами не отмечено (Р>0,05).

Принимая во внимание патогенез развития ожоговой болезни, в следующей серии экспериментов галавит применяли совместно с ли-докаином (5 мкг/кг в/брюшинно) (как ингибитор фосфолипаз), который не только препятствует поступлению в сосудистое русло токсических и иммуносупрессирующих субстанций (Грек О.Р., 1998), но и купирует проявление болезненного синдрома (Машковский М.Д., 1998). А как известно, болевой шок, который развивается в первые дни болезни при ожоговых травмах, также вызывает супрессию иммунного ответа. Кроме того, в малых концентрациях лидокаин является нетоксичным, он медленно метаболизируется в организме и таким образом оказывает продолжительное действие.

Нами установлено, что у всех животных, получавших галавит с лидокаином, все изучаемые показатели были достоверно выше относительно уровней показателей интактных животных.

Несмотря на то что развитие ГЗТ отличается от ГИО по свойствам основных клеток и выделяемым ими факторам, параллельно с ГИО отмечалась нормализация ГЗТ. Введение галавита с лидокаином достоверно снижало сенсибилизацию организма у инфицированных С.аНисапв+Р.аеп^тоза животных до 39,0% и достоверно повышало ИР ГЗТ до 41,0% и 42,0% у животных, инфицированных С.аНмсапБ+З.аигеиБ и С.аИмсага+Е.соН соответственно (при норме у интактных животных - 35,0%) (рис. 4).

Сочетанное применение препаратов способствовало достоверной элиминации из состава популяций вирулентных и резистентных к антибиотикам особей уже на 7 сутки исследования, что приводило к сапрофитизации возбудителей в организме при всех вариантах Кандида-бактериальной инфекции и 100% выживаемости животных.

Таким образом, применение галавита с лидокаином обеспечивает выраженный протективный эффект и позволяет предупредить влияние грибов рода С.а1Ысапз на изменение свойств изученных нами Е.соН, З.аигеш и Р.аеп^тоБа в сторону повышения их вирулентных и персистентных свойств и устойчивости к антибиотикам за счет высокоэффективной иммунокоррекции супрессированного организма животных.

2 3 4 группы животных

Рис. 4. Интенсивность реакции ГЗТ у животных после сочетанного применения препаратов.

Примечание. По оси абсцисс: группы животных: 1 - интактные; 2 - ожог инфицирован С.albicans + P.aeruginosa; 3 - ожог инфицирован C.albicans + S.aureus; 4 - ожог инфицирован C.albicans + E.coli. Достоверность различий относительно применения галавита отдельно: * - Р<0,01.

ВЫВОДЫ

1. В этиологической структуре гнойно-воспалительных процессов у иммунокомпрометированных больных многопрофильных стационаров г. Курска превалируют Staphylococcus spp., Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, часто обнаруживаемые в ассоциациях с дрожжеподобными грибами рода Candida spp.

2. Популяции клинических штаммов возбудителей гетерогенны по признакам вирулентности, факторам персистенции и лекарственной устойчивости, что является основой для формирования госпитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов.

3. Дрожжеподобные грибы рода Candida albicans способствуют нарастанию и достоверно увеличивают количество особей с высокими показателями вирулентности, персистенции по АЛФА и СПА и устойчивости к антибактериальным препаратам в популяциях E.coli и S.aureus соответственно в условиях in vivo у иммуносупрессирован-ных животных.

4. Штаммы Pseudomonas aeruginosa в тех же условиях формируют однородные популяции по содержанию высоковирулентных и панрезистентных клонов, что является подтверждением широкого

распространения в отделениях ЛПУ устойчивых биоценозов Канди-да-псевдомонадной природы.

Следовательно, единственным ориентиром для выбора адекватной терапии при СапсИск-бактериальных инфекциях могут быть данные микробиологического мониторинга в стационарах региона и в настоящее время.

5. Выявлена высокая корреляционная связь между выживаемостью бактерий, механизмом формирования их популяций, уровнем иммуносупрессии организма животных и течением и исходом гнойно-воспалительного процесса Кандида-бактериальной этиологии.

По возрастанию степени пенетрантности и экспрессии по клинически значимым признакам в популяциях бактерий-ассоциантов и тяжести вызываемой иммуносупрессии у животных изучаемые ассоциации возбудителей располагаются в следующей последовательности: С.а1Ысапз+Е.соП —»■ С.аИмсапз+З.аигеиБ —» С.а1Ысапз+ Р.аеп^тоэа.

6. Установлено, что система «гетерогенность популяций микроорганизмов - состояние иммунной системы макроорганизма» имеет диагностическое значение и может быть использована для прогнозирования возникновения ВБИ.

Высокий уровень гетерогенности клинических штаммов возбудителей гнойно-септических процессов и депрессированная активность иммунной системы макроорганизма обусловливает развитие тяжелой формы инфекционного процесса с высоким процентом летальности у экспериментальных животных.

7. Эффективность влияния галавита на депрессированную активность иммунной системы организма и сапрофитизацию популяций возбудителей Кандида-бактериальной инфекции в организме животных с термической травмой зависит от принадлежности к виду бактерий-ассоциантов.

При гнойно-воспалительных процессах, вызванных С.а1Ысапз+Е.соП и С.аШюапз+З.аигеиз, галавит вызывает достоверное повышение показателей микробицидных систем нейтрофилов и ГЗТ, но не нормализует последние у экспериментальных животных.

При Кандида-псевдомонадной этиологии галавит лишь уменьшает выраженность снижения иммунологической реактивности и слабо активирует процесс сапрофитизации в популяциях псевдомонад.

8. Сочетанное применение галавита с лидокаином обеспечивает выраженный протективный эффект за счет высокоэффективной коррекции антиинфекционной резистентности, позволяет предупредить влияние грибов рода С.albicans на изменение свойств E.coli, S.aureus и P.aeruginosa в сторону повышения их вирулентных и персистент-ных свойств и устойчивости к антибактериальным препаратам. Высокий уровень элиминации таких клонов из популяций приводит к са-профитизации возбудителей в организме и в конечном итоге - к предупреждению формирования госпитальных штаммов возбудителей ВБИ.

Результаты защищены патентом № 2458138 от 10.08.2012 г.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Экспериментальные данные могут использоваться в учебном процессе медицинских вузов с целью углубления изучения и расширения знаний о механизмах формирования госпитальных штаммов возбудителей ВБИ и закономерностях иммуномоду-лирующего действия иммунотропных препаратов при Кандида-бактериальных инфекциях.

2. Результаты исследований, выразившиеся в разработке способа предупреждения формирования госпитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов, и методические рекомендации для врачей могут быть использованы для апробации в клинической практике с целью профилактики возникновения ВБИ.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Шаталова Е.В., Шеховцова О.В. Состояние антибиотикоре-зистентности этиологически значимых возбудителей госпитальных инфекций // Материалы 74-й научной конференции КГМУ. - Курск, 2009. - Т. 1. - С. 377-379.

2. Криволапова М.С., Шеховцова О.В. Экспериментальное обоснование формирования «госпитальных» штаммов возбудителей нозокомиальных инфекций // Материалы 74-й итоговой научной межвузовской конференции студентов и молодых ученых. - Курск, 2009. - Ч. 1. - С. 38-39.

3. Шеховцова O.B. Микробиологический мониторинг при гнойно-септических инфекциях смешанной этиологии // Материалы 74-й итоговой научной межвузовской конференции студентов и молодых ученых. - Курск, 2009. - Ч. 1. - С. 48.

4. Шаталова Е.В., Вельский В.В., Шеховцова О.В. Динамика структуры популяций возбудителей смешанной инфекции ожоговой травмы в условиях иммунодефицита и после применения иммуномодуляторов // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». - 2009. -№3.-С. 14-17.

5. Шеховцова О.В., Шаталова Е.В. Особенности взаимоотношений между возбудителями госпитальных инфекций грибково-бактериальной этиологии // Сборник научных трудов - Томск, 2009. - С. 74-75.

6. Криволапова М.С., Шеховцова О.В. Влияние грибов рода Candida на структуру популяции микробов-ассоциатов возбудителей госпитальных инфекций // Материалы XXVII Международной научной студенческой конференции -Новосибирск: НГУ, 2009. - С. 12-13.

7. Шеховцова О.В., Шаталова Е.В., Жалнина Т.С. Влияние характера взаимоотношений возбудителей смешанной инфекции на продолжительность и эпидемиологию госпитальных инфекций // Сборник научных трудов научно-практической конференции с международным участием. - Харьков, 2010. -С. 364-357.

8. Жалнина Т.С., Шеховцова О.В., Падалкина JI.B. Лизоцим, как фактор патогенности микроорганизмов, выделенных от больных с гнойно-воспалительными процессами // Сборник научных трудов Всероссийской научной конференции с международным участием.-Курск, 2010. -Ч. 1.-С. 39.

9. Шеховцова О.В., Шаталова Е.В., Жалнина Т.С. Влияние гнойно-воспалительного процесса Candida-бактериальной этиологии на проявление гиперчувствительности замедленного типа // Проблемы медицинской микологии. - 2010. - Т. 12, № 2. - С. 143-144.

10. Шаталова Е.В., Шеховцова О.В. Иммуно- и микробиологические аспекты гнойно-воспалительных процессов Candida-бактериальной этиологии // Материалы итоговой научной

конференции сотрудников КГМУ. - Курск, 2011. - Т. 1. -С. 150-154.

11. Шеховцова О.В., Шаталова Е.В. Условно-патогенные бактерии в этиологии внутрибольничных инфекций в г. Курске и мониторинг их чувствительности к антибактериальным препаратам: методические рекомендации для врачей и научных работников лечебно-профилактических учреждений -Курск, 2010.-8 с.

12. Шеховцова О.В., Шаталова Е.В., Вельский В.В., Ефремова H.H. Способ моделирования предупреждения формирования госпитальных штаммов // Патент № 2458138 от 10.08.2012 г.

13. Шеховцова О.В. Механизм формирования госпитальных возбудителей внутрибольничных инфекций и способ их предупреждения // Клиническая лабораторная диагностика. -2012. - № 7. - С. 58-61.

Лицензия JIP № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 02.10.2012 г. Подписано в печать 09.10.2012 г. Формат 30х42'/8 Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 214"А". Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шеховцова, Оксана Викторовна

Введение

Глава I. Обзор литературы.

1.1. Общая характеристика внутрибольничных инфекций.

1.2. Возбудители внутрибольничных инфекций и роль дрожжеподобных грибов рода Candida spp. в этиологической структуре ВБИ.

1.3. Иммунометаболические аспекты при кандидозах и подходы к иммунокоррекции.

1.4. Краткие сведения о применении некоторых иммуномодуляторов в клинической практике.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения"

Актуальность темы

Несмотря на обилие новых препаратов с антимикробным действием, внутрибольничные (госпитальные, нозокомиальные) инфекции продолжают сохранять актуальность для здравоохранения всего мира в силу широкого распространения, большого социально-экономического и медицинского ущерба, причиняемого здоровью человека [24, 111, 127].

Гнойно-воспалительные процессы у больных многопрофильных стационаров все чаще регистрируются в виде госпитальных смешанных (микст) инфекций [33, 139, 149].

Особое беспокойство у врачей разных специальностей вызывают смешанные грибково-бактериальные инфекции, которые из потенциальных «болезней будущего» превратились в актуальные «болезни настоящего» [112, 225]. Лечение таких инфекций является серьезной проблемой для клиницистов всего мира [7, 9, 239].

Это обусловлено тем, что наиболее часто мико-бактериальные инфекции обнаруживаются у иммунокомпрометированных больных (при ожоговых травмах, облучении, после хирургических вмешательств, при использовании иммунодепрессантов и т.д.), а во-вторых, - с широким спектром условно-патогенных возбудителей, циркулирующих в условиях стационаров.

Инфекции у таких больных развиваются особенно часто, отличаются, как правило, выраженной тяжестью клинических проявлений, трудностями диагностики, лечения и высокой летальностью [16, 245]. Это объясняется спецификой состояния иммунокомпрометированных больных, при котором формируется выраженная иммуносупрессия в связи с резким нарушением метаболических процессов в организме [92, 194].

Профилактика и лечение гнойно-воспалительных процессов у иммунокомпрометированных больных представляет до настоящего времени особые трудности по нескольким причинам, основными из которых являются многообразие и нестабильность этиологии последних и широкое распространение госпитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов, которые формируются в условиях стационара.

Распространение госпитальных штаммов, прежде всего стафилококков, псевдомонад, энтеробактерий и в последнее время - дрож-жеподобных грибов рода Candida spp. [54, 68, 71, 166, 170, 230], обусловлено рядом особенностей последних, отражающихся на эпидемиологии внутрибольничных инфекций. Это - обсеменение госпитальной среды носителями, контаминация медицинских приборов с образованием биопленки, длительная персистенция в окружающей среде, разнообразные механизмы устойчивости к антимикробным препаратам [5, 43, 96, 161] и, что особенно важно, - скопление в стационарах иммунокомпромети-рованных больных за счет основного заболевания. Все это позволяет этим микроорганизмам быстро адаптироваться, выживать и получать селективные преимущества в больничной среде с накоплением в популяциях вирулентных особей, что, безусловно, ведет к возрастанию частоты внутрибольничных инфекций.

Кроме того, развитие инфекционного процесса в организме с первичной иммуносупрессией значительно усугубляет иммунологическую недостаточность последнего [47, 77, 171]. При этом организм иммуно-компрометированных больных может быть биотопом для модификации факторов патогенности возбудителей госпитальных инфекций, что обусловит трудности диагностики, профилактики и лечения внутрибольничных инфекций и основу для формирования госпитальных штаммов.

Немаловажное значение в формировании штаммов с признаками «госпитальных» имеют и сложные и неоднозначные взаимоотношения между разными видами возбудителей при гнойно-воспалительных процессах смешанной этиологии, что также может оказывать существенное влияние на характер инфекционного процесса и усугубление иммуносупрессии у больных.

Известно, что между возбудителями в микробных ассоциациях существуют разные формы взаимоотношений. В имеющихся к настоящему времени публикациях констатируется лишь видовой состав возбудителей, которые обнаруживаются в ассоциациях [76, 115, 119, 202]. При этом авторы справедливо отмечают, что спектр возбудителей может быть различен не только в каждом регионе, но и в отдельно взятом стационаре [140] и зависит от его профиля, политики применения антибиотиков и оказываемой лечебной помощи [25, 97].

В то же время, не может не беспокоить тот факт, что особую озабоченность у многих авторов вызывает достоверное увеличение в стационарах любого профиля, наряду с различными таксономическими группами бактерий, дрожжеподобных грибов рода Candida spp. [27, 53, 150].

Между тем, до сих пор роль дрожжеподобных грибов рода Candida spp. во взаимоотношениях с другими видами бактерий, равно как и влияние их на течение и исход инфекционного процесса мико-бактериальной природы изучена недостаточно.

Кроме того, в литературе отсутствуют сведения о влиянии дрожжеподобных грибов рода Candida spp. на механизм формирования штаммов бактерий-ассоциантов с признаками «госпитальных».

Учитывая столь высокую значимость внутрибольничных инфекций, все выше изложенное требует комплексного подхода к изучению механизмов формирования госпитальных штаммов возбудителей и поиска способов предупреждения формирования последних в условиях гнойно-воспалительных процессов Candida-бактериальной природы и, соответственно, - возникновения внутрибольничных инфекций.

Цель работы

Изучить влияние дрожжеподобных грибов рода Candida spp. на формирование структуры популяций ведущих возбудителей внутриболь-ничных инфекций по клинически значимым признакам в условиях иммуносупрессии организма и разработать способ предупреждения формирования штаммов с признаками «госпитальных».

Задачи работы

1. Изучить мониторинг видового состава возбудителей внутриболь-ничных инфекций в отделениях многопрофильных стационаров города Курска за период 2007 - 2011 гг.

2. Изучить некоторые факторы вирулентности (гемолитическая и протеолитическая активность, адгезивные свойства) и факторы персистенции (антилизоцимная и антилактоферриновая активность), способствующие проявлению патогенности клинических штаммов микроорганизмов, и профиль их устойчивости к антимикробным препаратам.

Основные положения, выносимые на защиту

3. Система «гетерогенность популяций микроорганизмов -состояние иммунной системы макроорганизма» имеет диагностическое значение и может быть использована для прогнозирования и профилактики возникновения внутрибольничных инфекций.

4. Галавит (отечественный препарат с иммуномодулирующим, противовоспалительным и регенерирующим эффектами - 200 мкг/мышь) индуцирует возникновение иммуностимулирующего эффекта при кандида-бактериальной инфекции у животных с иммуносупрессией, вызванной термической травмой. Однако выраженность этого эффекта зависит от вариантов бактерий-ассоциантов.

5. Сочетанное применение галавита (200 мкг/мышь) с лидокаином (ингибитор фосфолипаз - 5 мкг/кг) эффективно корригирует иммунологическую реактивность экспериментальных животных и приводит к полной сапрофитизации возбудителей гнойно-воспалительного процесса Candida-бактериальной природы всех изученных вариантов.

Научная новизна

Впервые:

- научно обосновано разнонаправленное влияние дрожжеподобных грибов рода Candida albicans на механизм формирования структуры популяций ведущих возбудителей госпитальных инфекций. Установлено, что грибы рода С.albicans способствуют нарастанию и достоверно увеличивают количество клонов с высокими показателями клинически значимых признаков в популяциях E.coli и St.aureus соответственно в условиях in vivo у иммунодепрессированных животных.

В тех же условиях штаммы Ps.aeruginosa формируют однородные популяции по содержанию высоковирулентных и панрезистентных клонов;

Показано, что микроорганизмы с высоковирулентными и пан-резистентными клонами в популяциях, которые формируются под влиянием грибов рода Candida albicans, подавляют регенераторные потенции тканей макроорганизма, способствуют длительному функционированию ЕИФ в организме и обусловливают развитие тяжелой формы инфекционного процесса с высоким уровнем летальных исходов у экспериментальных животных.

Практическая значимость

Полученные результаты констатируют факт прямого разнонаправленного влияния дрожжеподобных грибов рода Candida albicans на формирование госпитальных штаммов с высоковирулентными и панрезис-тентными свойствами условно-патогенных микробов - возбудителей гнойно-воспалительных процессов у иммунодепрессированных животных, на устойчивость ассоциаций таких возбудителей, длительность циркуляции их в организме, продолжительность и исход инфекционного процесса.

Полученные данные расширяют теоретические представления о механизмах формирования штаммов с признаками «госпитальных», способствуют более детальной расшифровке эпидемиологии внутриболь-ничных инфекций и обусловливают настоятельную необходимость дифференцированного подхода при разработке рациональных схем терапии гнойно-воспалительных осложнений Candida-бактериальной природы.

Практическое значение исследований определяется разработкой способа предупреждения формирования госпитальных штаммов возбудителей гнойно-септических процессов в условиях ожоговой травмы, включающего экспериментальное обоснование возможности применения галавита с лидокаином, восстанавливающих антиинфекционную резистентность экспериментальных животных и способствующих элиминации из состава популяций микроорганизмов вирулентных и резистентных к антибиотикам особей, что приводит к сапрофитизации возбудителей в организме, предупреждая формирование штаммов с признаками «госпитальных» и, соответственно, возникновение ВБИ.

Внедрение в практику результатов работы

Полученные материалы использованы в методических рекомендациях для врачей и научных работников «Условно-патогенные бактерии в этиологии внутрибольничных инфекций в гор. Курске и мониторинг их чувствительности к антибактериальным препаратам» (Курск, 2010). Результаты исследования внедрены в практику бактериологической лаборатории ОБУЗ «Курская городская Клиническая больница скорой медицинской помощи», ОБУЗ «Областная клиническая инфекционная больница им. Семашко», хирургического отделения БМУ «Курская областная клиническая больница», в учебный процесс на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии Курского государственного медицинского университета, в лекционный курс на факультете повышения квалификации для врачей. Подана заявка на патент «Способ моделирования предупреждения формирования госпитальных штаммов» (положит, решение по заявке №2010145360/10 от 03.02.2012).

Апробация работы

Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на:

• научных региональных конференциях молодых ученых (Курск, 2009; 2011);

• межвузовской научно-практической конференции «Проблемы и перспективы современной науки» (Томск, 2009);

• Международной научной конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 2009);

• Международной научно-практической конференции «Инфекции и паразитарные болезни в практике клинициста» (Харьков, 2010);

• научной сессии отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН (Курск, 2010);

• научно-практической конференции по медицинской микологии (VIII Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2010);

• совместном заседании кафедр микробиологии, вирусологии, иммунологии, инфекционных болезней и эпидемиологии, биохимии, клинической иммунологии и аллергологии Курского государственного медицинского университета.

Публикации

Основные положения диссертации отражены в 13 научных публикациях, в том числе: 3 публикации в рецензируемых научных журналах, 1 положительное решение на выдачу патента, методические рекомендации для врачей и научных работников лечебно-профилактических учреждений. Зарегистрировано 5 внедрений.

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками и 24 таблицами; состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка цитированной литературы, включающего 263 работы: 147 из них отечественных и 116 зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Шеховцова, Оксана Викторовна

Выводы

1. В этиологической структуре гнойно-воспалительных процессов у иммунокомпрометированных больных многопрофильных стационаров гор. Курска превалируют Staphylococcus spp., Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, часто обнаруживаемые в ассоциациях с дрожжеподобными грибами рода Candida spp.

4. Штаммы Pseudomonas aeruginosa в тех же условиях формируют однородные популяции по содержанию высоковирулентных и панрезис-тентных клонов, что является подтверждением широкого распространения в отделениях ЛПУ устойчивых микобиоценозов Кандида-псевдомонадной природы.

Следовательно, единственным ориентиром для выбора адекватной терапии при Candida-бактериальных инфекциях могут быть данные микробиологического мониторинга в стационарах региона и в настоящее время.

По возрастанию степени пенетрантности и экспрессии по клинически значимым признакам в популяциях бактерий-ассоциантов и тяжести вызываемой иммуносупрессии у животных изучаемые ассоциации возбудителей располагаются в следующей последовательности: С.albicans + E.coli —> С.albicans + S.aureus —► С.albicans + P.aeruginosa

7. Эффективность влияния галавита на депрессированную активность иммунной системы организма и сапрофитизацию популяций возбудителей Candida-бактериальной инфекции в организме животных с термической травмой зависит от принадлежности к виду бактерий-ассоциантов.

При гнойно-воспалительных процессах, вызванных С.albicans + E.coli и С.albicans + S.aureus, галавит вызывает достоверное повышение показателей микробицидных систем нейтрофилов и ГЗТ, но не нормализует последние у экспериментальных животных.

8. Сочетанное применение галавита с лидокаином обеспечивает выраженный протективный эффект за счет высокоэффективной коррекции антиинфекционной резистентности, позволяет предупредить влияние грибов рода С.albicans на изменение свойств E.coli, S.aureus и P.aeruginosa в сторону повышения их вирулентных и персистентных свойств и устойчивости к антибактериальным препаратам. Высокий уровень элиминации таких клонов из популяций приводит к сапрофитизации возбудителей в организме и, в конечном итоге, - к предупреждению формирования госпитальных штаммов возбудителей ВБИ.

Заключение

Одной из компонент, характеризующих «индекс здоровья» нации, является уровень инфекционной заболеваемости, в формировании которого важную роль играют ВБИ. Заболеваемость ВБИ в определенной степени отражает качество медицинской помощи, оказываемой населению, и является одной из важных составляющих экономического ущерба в практическом здравоохранении [53].

Несмотря на обилие новых препаратов с антимикробным действием, выборочные исследования, проведенные на различных территориях нашей страны и за рубежом, свидетельствуют о значительном распространении ВБИ (6 - 25%), большом медицинском и социально-экономическом ущербе, наносимом ими [38]. Это, в основном, отделения для ожоговых больных, онкологии, гематологии, кардиохирургии, трансплантации органов и тканей, интенсивной терапии, неонатологии, СПИД и др.

Этиологическая структура возбудителей ВБИ многообразна и отличается своим разнообразием не только между регионами, но и между отдельными ЛПУ и зависит от его профиля, политики применения антибиотиков и оказываемой лечебной помощи. Как правило, это госпитальные штаммы условно-патогенных грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов с нарастающей тенденцией дрожжеподобных грибов рода Candida spp. [27, 150]. Однако, основную проблему в тенденции нарастания нозокомиальных инфекций, представляют гнойно-септические процессы Кандида-бактериальной природы, многие вопросы которых остаются не изученными.

Известно, что грибы, как правило, редко выступают в качестве первичного патогена. Чаще они развиваются в условиях микробных ассоциаций, которые отличаются высокой устойчивостью [53, 62, 208, 210].

В связи с этим, вероятной причиной наличия госпитальных штаммов возбудителей в ОРИТ и персистирующих инфекций у пациентов из группы риска многие исследователи отмечают образование таких ассоциаций.

Распространение госпитальных штаммов возбудителей обусловлено рядом особенностей последних, отражающихся на эпидемиологии ВБИ. Это — обсеменение госпитальной среды носителями, контаминация медицинских приборов с образованием биопленки, длительная персистенция в окружающей среде, разнообразные механизмы устойчивости к антимикробным препаратам [96, 161] и, что особенно важно, — скопление в стационарах иммунокомпрометированных больных [4].

Немаловажное значение в формировании штаммов с признаками «госпитальных» имеют сложные и неоднозначные взаимоотношения между разными видами возбудителей, что может позволять последним быстро адаптироваться, выживать и получать селективные преимущества в больничной среде с накоплением в популяциях вирулентных особей, что, безусловно, ведет к возрастанию частоты ВБИ через организм иммунокомпрометированных больных.

Однако механизмы формирования популяций госпитальных штаммов организмов и роль дрожжеподобных грибов рода Кандида в этом процессе остаются не изученными. Кроме того, остаются мало изученными вопросы взаимоотношений дрожжеподобных грибов с другими видами бактерий, равно как, и влияние их на течение и исход инфекционного процесса мико-бактериальной природы.

Учитывая столь высокую значимость госпитальных инфекций, все вышеизложенное требует комплексного подхода к изучению механизмов формирования госпитальных штаммов возбудителей ВБИ и поиска способов предупреждения формирования последних в условиях гнойно-воспалительных процессов Кандида-бактериальной этиологии.

Анализ литературы показывает, что этиологическая структура возбудителей ВБИ многообразна и отличается своим разнообразием не только между регионами, но и между отдельными ЛПУ [84, 207, 256].

В связи с этим, согласно блока параметров, предусмотренных микробиологическим мониторингом, что имеет в отделении стационаров любого профиля первостепенное значение, на первом этапе работы был изучен видовой состав микроорганизмов, выделенных из патологического материала от больных хирургического, ожогового и урологического отделений. Ведущие возбудители нозокомиальных инфекций обладали свойствами стафилококков 31,6%, дрожжеподобных грибов рода Candida spp. 27,6%, P.aeruginosa 23,7% и 17,1% E.coli. Всего было изучено 380 штаммов, из них 38,2% штаммов полученных в монокультуре и 61,8% выделенных из ассоциаций.

Выбор рациональной антибиотикотерапии при любой инфекции основывается, в первую очередь, на определении чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам. Так как структура, уровни и спектры антибиотикорезистентности микробов различаются в зависимости от географического района их выделения и постоянно меняются с течением времени, для проведения рациональной антибиотикотерапии до получения антибиотикограммы возбудителя, целесообразно использовать информацию о лекарственной устойчивости циркулирующих в настоящее время в данном регионе штаммов.

Все изученные нами штаммы обладали разными антибиотико-граммами к традиционным препаратам и значительной вариабельностью к современным антибиотикам с выраженной полирезистентностью у псевдомонад. Но при этом у синегнойных бактерий сохранилась высокая чувствительность к имипенему (80,0%) и полимиксину М (76,7%), что противо-речитданным литературы [102, 109].

Штаммы дрожжеподобных грибов рода Candida spp. оказались более чувствительными к амфотерицину В (97,9%) по сравнению с леворином (86,3%).

Стафилококки были более чувствительными к тобрамицину (85,0%) и имипенему (80,8%).

Кишечные палочки сохранили высокую чувствительность к имипенему и амикацину (96,9% и 92,3% соответственно).

Одним из основных факторов, определяющих возникновение и тяжесть инфекционного процесса, является степень патогенности возбудителя, представляющая сумму различных биологических признаков, обеспечивающих ему способность к проникновению и размножению в организме хозяина. В настоящее время в клинической микробиологии активно обсуждаются условия развития и механизмы бактериальной персистенции [18], которые обеспечивают длительное выживание возбудителя в организме хозяина. Особого внимания заслуживают факторы, секретируемые микробной клеткой, блокирующие механизмы естественной защиты, в связи с чем нарушается иммунный гомеостаз организма и создаются условия для персистенции возбудителя.

С учетом этого, все штаммы были подвергнуты изучению по распространению персистентного потенциала по АЛА, АЛФА и адгезивным свойствам. Установлено, что изученные нами культуры в разной степени обладают АЛА, АЛФА и адгезивными свойствами, распространенность и выраженность которых зависит от принадлежности к виду.

Результаты проведенных нами исследований не совпадают с данными литературы о распространенности факторов персистенции и интенсивности данных признаков у возбудителей ВБИ. Такая дивергентность признаков лекарственной устойчивости и факторов персистенции у госпитальных штаммов микроорганизмов подтверждает данные литературы об обязательном включении блока параметров микробиологического мониторинга с целью своевременного выявления новых эпидемических штаммов возбудителей ВБИ.

В настоящее время в литературе обсуждаются вопросы о роли мико-бактериальных ассоциаций в инфекционной патологии человека [41, 42], однако механизмы межклеточных взаимодействий, направленных на поддержание и формирование устойчивых микобиоценозов до сих пор остаются не изученными.

Из 61,8% изученных нами микробных ассоциаций доминирующими были дрожжеподобные грибы рода С.albicans в различных сочетаниях с E.coli, S.aureus и P.aeruginosa.

В связи с этим, важно было установить особенности влияния С.albicans на механизм формирования популяций бактерий-ассоциантов, так как согласно теории, выдвинутой академиком В.Д. Беляковым (1987), популяционный подход в разработке ВБИ является самым перспективным и единственно верным.

Изучение процессов на уровне популяций (а не отдельных штаммов) позволяет уже на начальном этапе выяснить механизмы формирования штаммов с высокой вирулентностью и множественной лекарственной устойчивостью, т.е. признаков, характерных для госпитальных штаммов. Решение этой задачи может обеспечить возможность своевременного предупреждения селекции штаммов с указанными свойствами и повышения эффективности лечебных мероприятий.

Установлено, что популяции клинических изолятов состоят из особей, которые отличаются по степени чувствительности к антибиотикам, по проявлению гемолитической и протеолитической активности, АЛА, АЛФА и способности к адгезии.

Такая неоднородность популяций по клинически значимым признакам создает возможность селекции наиболее приспособленных особей при переходе возбудителя из внешней среды в организм и в обратном направлении, что увеличивает шансы для сохранения вида в меняющихся условиях.

Кроме того, нами впервые установлено, что дрожжеподобные грибы рода С.albicans, в свою очередь, также проявляют неоднозначное влияние на формирование популяций микробов-ассоциантов, что играет существенную роль при формировании госпитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов и их ассоциаций и имеет важное патогенетическое значение для развития инфекций.

Полученные данные убедительно показывают, что грибы рода С. albicans способствуют нарастанию и достоверно увеличивают количество особей с высокими показателями вирулентности, персистенции по АЛФА и АЛА и устойчивости к антибактериальным препаратам в популяциях E.coli и S.aureus соответственно в условиях in vivo у иммуносупрессированных животных.

Штаммы Р.aeruginosa в тех же условиях формируют однородные популяции по содержанию высоковирулентных панрезистентных клонов, что является подтверждением широкого распространения госпитальных штаммов псевдомонад в ассоциации с грибами.

Важное значение имеют впервые полученные нами данные о корреляционном анализе механизма формирования популяций изученных возбудителей, их выживаемости in vivo в условиях ассоциации с грибами и клиническим течением ожоговой раны, который позволил установить наличие сильной прямой связи между изучаемыми параметрами (г=0,982±0,090 и 0,892±0,094 соответственно).

Как следует из анализа литературы, госпитальные инфекции, вызванные условно-патогенными микроорганизмами, чаще всего развиваются на фоне сниженной антиинфекционной защиты.

В условиях Кандида-бактериальной инфекции возникает парадоксальная для иммунной системы ситуация, требующая одновременного включения двух оппозитных форм иммунного ответа: антибактериального и противогрибкового. Основными защитными факторами первого в подавляющем большинстве случаев являются антитела и фагоциты, второго - активированные макрофаги с проявлением аллергизации, как правило, ГЗТ. Это приводит к торможению обеих форм иммунного ответа и угнетению системы иммунитета в целом [47, 59, 235].

Результаты изучения иммунореактивности организма животных с ожоговой травмой (выбранная нами экспериментальная модель иммуно-супрессии) согласуются с данными литературы о наличии иммуносупрес-сии, которая резко усугублялась после инфицирования Кандида-бактериальной инфекции. Особенно следует отметить резкое снижение уровней всех изучаемых показателей (фагоцитарная активность, интенсивность и завершенность, активность кислороднезависимого механизма бактерицидное™ фагоцитов по уровню катионных белков, показатели ГИО - АОК и ЕИФ) в группе животных с Кандида-псевдомонадной инфекцией, где выживаемость животных составила 38,0%. КБ у таких животных не обнаруживались на всех сроках исследования. Это важно, так как лизосомальные КБ нейтрофилов играют значительную роль в эффекторных и регуляторных механизмах воспаления и репаративных процессах ожоговых повреждений [89, 92,].

Кроме того, у таких животных наблюдалось формирование гиперер-гической реакции ГЗТ (ИР=68,0±3,3), в то время как у обожженных животных, инфицированных E.coli + С.albicans и S.aureus + С.albicans, наблюдалось резкое угнетение ГЗТ (ИР=19,0±1,3 и 12,0±1,2) с выживаемостью животных 56,0% и 50,0% соответственно.

Эти данные, по нашему мнению, должны учитываться клиницистами, так как формирование чрезмерной ГЗТ приводит к значительным повреждениям тканей, которые утяжеляют течение основного заболевания [46, 63].

Проведенные нами исследования показали, что влияние грибов рода Кандида на механизм формирования высоковирулентных и лекарственно устойчивых популяций и тяжести вызываемой иммуносупрессии у животных, зависит от видовой принадлежности бактерий-ассоциантов и убывает в ряду: С.albicans + P.aeruginosa —> С.albicans + S.aureus —> С.albicans + E.coli.

Однако, проводить исследования, доказывающие госпитальную природу штаммов, без применения иммунокоррекции супрессированного организма животных является не достоверно доказывающим фактором.

Изучение эффективности галавита показало позитивное влияние на депрессированную активность иммунной системы обожженных и инфицированных животных, однако при этом не наблюдалось восстановления изучаемых показателей до уровня инактных животных (Р>0,05).

Результаты изучения влияния грибов на формирование популяций бактерий-ассоциантов в динамике инфекционного процесса у леченых галавитом животных показали изменения в сторону снижения количества особей с клинически значимыми признаками для госпитальных штаммов, однако и эти изменения не были статистически достоверными.

Принимая во внимание патогенез развития ожоговой болезни и то обстоятельство, что галавит не обеспечивает нормализации иммунного ответа и полной сапрофитизации популяций возбудителей, нами было изучено иммуномодулирующее действие сочетанного введения галавита с лидокаином с целью купирования болевого синдрома и восстановления функции клеточных мембран [67], так как известно [92], что сразу после ожога возникают нарушения микроциркуляции и сосудистой проницаемости, от чего зависят эффективность кровообращения в микрососудах, оптимальное обеспечение тканей кислородом и адекватное удаление из них продуктов метаболизма. Кроме того, общепринято, что основные компоненты противошоковой терапии предусматривают борьбу с болью, нормализацию микроциркуляции, уменьшение сосудистой проницаемости.

С этой целью животным II серии галавит (200 мкг/мышь) вводили с лидокаином (5 мкг/кг) в течение 3 дней 1 раз в сутки после инфицирования ожоговой раны.

Динамика изучаемых показателей после сочетанного применения указанных препаратов выгодно отличалась при сравнении с применением галавита отдельно.

Установлено, что у всех животных, получавших галавит с лидокаином, на 14 сутки исследования отмечались высокие уровни показателей фагоцитоза, КБ и АОК, наблюдалась нормализация ИИ РИА и ИР ГЗТ. Причем, следует отметить, что уровни последних не только восстанавливались, но в некоторых случаях и превышали уровни контрольных (интактных) животных.

Особого внимания заслуживают впервые полученные нами данные, свидетельствующие о достоверной элиминации из состава популяций вирулентных и резистентных к антибактериальным препаратам особей уже на 7-12 сутки (в зависимости от принадлежности к виду) исследования, что приводило к сапрофитизации возбудителей в организме при всех вариантах Кандида-бактериальной инфекции и 100,0% выживаемости животных.

Таким образом, нами показана принципиальная возможность предупредить влияние грибов рода С.albicans на изменение свойств ключевых возбудителей ВБИ (E.coli, S.aureus, Р.aeruginosa) в сторону повышения их вирулентных и персистентных свойств, а также устойчивости к антибиотикам, что является основой для формирования госпитальных штаммов, применяя галавит с лидокаином для иммуно-коррекции ВИД, развивающегося при Кандида-бактериальных инфекциях в условиях ожоговой травмы.

Есть основания предположить, что установленные эффекты воздействия сочетания данных препаратов, вероятно, происходит вследствие возникновения качественно новых биохимических процессов, обусловленных восстановлением под их влиянием функции клеточных мембран и внутриклеточных образований, что приводит к интенсификации и ускорению биоэнергетических процессов. Это усиливает образование макроэргов, повышает энергетический потенциал клеток, что в свою очередь сопровождается активацией органелл и усилением функциональной активности клеток в целом и, соответственно, сапрофитизацией возбудителей в организме.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шеховцова, Оксана Викторовна, Москва

1. Абидов, М.Т. Новый отечественный иммуномодулирующий и противовоспалительный препарат / М.Т. Абидов, О.В. Калюжин, Т.И. Гришина // Воен.-мед. журн. 1999. - № 1. - С. 41-45.

2. Абидова, З.М. Иммунокорригирующая терапия больных микозом стоп с применением Вобэнзима® / З.М. Абидова, Н.Д. Икрамова // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, №1.- С. 15-19.

3. Абидова, З.М. Микозы стоп в аридном регионе: эпидемиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение и профилактика : автореф. дис. д-ра мед. наук / З.М. Абидова. Ташкент, 2007. - 37 с.

4. Акимкин, В.Г. Профилактика внутрибольничных инфекций в лечебно-профилактических учреждениях Московской области Российской Федерации / В.Г. Акимкин, Ф.В. Музыченко // Воен.-мед. журн. 2007. - № 9. - С. 51 -56.

5. Акимкин, В.Г. Система профилактики внутрибольничных инфекций в России. Служба развития госпитальных эпидемиологов: итоги и перспективы / В.Г. Акимкин // Эпидемиология и инфекц. болезни. -2005.-№ 1.-С. 4-8.

6. Александров, М.А. Заболеваемость внутрибольничной инфекцией как индикатор стационарной медицинской помощи / A.M. Александров // Вопр. экспертизы и качества мед. помощи. 2009. -№5.-С. 13-22.

7. Анализ адекватности стартовых эмпирических режимов антибактериальной терапии при тяжелых нозокомиальных инфекциях (исследование АСЭТ) / C.B. Яковлев, В.Б. Белобородов, C.B. Сидоренко и др. // Клинич. фармакология и терапия. 2006. -№2.-С. 14-21.

8. Антибиотикорезистентность нозокомиальных штаммов Staphylococcus spp., выделенных в ожоговом центре в 2002-2008 гг. / Н.А. Гординская, Н.В. Абрамова, Е.С. Некаева, Е.В. Сабирова // Клинич. микробиология и антимикроб, химиотерапия. 2010. - № 1. - С. 7781.

9. Антибиотикотерапия при гнойных хирургических заболеваниях органов брюшной полости и мягких тканей / В.П. Сажин, A.JI. Авдовенко, Д.Е. Климов и др. // Хирургия. 2010. - № 6. - С. 4-9.

10. Ашмарин, И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев JI. : Госиздат, 1962. - 180 с.

11. Батрак, Т.Е. Дозирование лекарственных средств экспериментальным животным / Т.Е. Батрак, А.Н. Кудрин. М. : Медицина, 1979. - 134 с.

12. Безкоровайний, Б.О. Етютропна тератя та профшактика поверхневого кандидозу ротовоТ порожнини у новонароджених тадггей раннього вшу // Клинич. педиатрия. 2007. -Т. 1, № 4. - С. 8789.

13. Белобородова, Н.В. Госпитальные инфекции у детей, вызванные «проблемными» грамположительные кокками: новые возможности антибиотикотерапии / Н.В. Белобородова, Д. А. Попов, Т.Ю. Вострикова // Педиатрия. 2007. - № 5. - С.43-50.

14. Брусина, Е.Б. Профилактика внутрибольничных гнойно-септических инфекций в хирургических стационарах: новый взгляд на старую проблему / Е.Б. Брусина, И.П. Рычагов // Эпидемиология и инфекц. болезни. 2006. - № 1. - С. 18-21.

15. Бухарин, О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий / О.В. Бухарин // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994. - № 5. - С. 4-13.

16. Бухарин, О.В. Инфекция модельная система ассоциативного симбиоза / О.В Бухарин // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 2009. - № 1. - С. 83-86.

17. Бухарин, О.В. Лизоцим микроорганизмов / О.В. Бухарин, Н.В. Васильев, В.Я. Усвяцов. Томск, 1985. - 211 с.

18. Веселов, A.B. Современные возможности фармакотерапии инвазивного кандидоза у детей / A.B. Веселов // Клинич. микробиология и антимикроб, химиотерапия. 2008. - Т. 10, № 4. -С. 298-304.

19. Влияние комплексной терапии онихомикоза на клинико-иммунологические параметры / В.Ю. Васенова, A.B. Пичугин, Ю.С.

20. Бутов, Р.И. Атауллаханов // Рос. журн. кож. и венерич. болезней. -2008.-№2.-С. 48-51.

21. Влияние тяжелой ожоговой травмы на иммунный статус детей раннего возраста / Г.В. Булыгин, В.В. Ломиворотов, Н.И. Камзалакова, С.А. Артемьев // Инфекции в хирургии. 2008. - № 4. -С. 25-29.

22. Внутрибольничные инфекции / под ред. Р.П. Венцеля. М. : Медицина, 2004. - 828 с.

23. Внутрибольничные инфекции как индикатор низкого качества стационарной медицинской помощи // Вопр. экспертизы и качества мед. помощи. 2008. - № 3. - С. 55-57.

24. Гельфанд, Б.Р. Кандидозная инфекция в хирургии и интенсивной терапии / Б.Р. Гельфанд, В.А. Гологорский, Е.Б. Гельфанд // Клинич. антибиотикотерапия. 2002. - № 2 (16). - С. 23-30.

25. Глушко, Н.И. Адгезивные свойства штаммов Candida albicans при кандидозах различной этиологии / Н.И. Глушко, Е.В. Халдеева, С.А. Лисовская // Проблемы мед. микологии. 2007. - № 1. - С. 26-29.

26. Гоитова, И.И. Ассиметрия реакции ГЧЗТ у мышей / И.И. Гоитова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - Т. 135, № 1. - С. 8082.

27. Гординская, H.A. Влияние иммунопрепаратов на течение инфекции при экспериментальной термической травме / H.A. Гординская // Иммунология. 2008. -№ 4. - С. 212-213.

28. Григоренко, А.П. Метаболические нарушения и их коррекция у больных с тяжелой ожоговой травмой / А.П. Григоренко, М.Н.

29. Козий, С.Ю. Куприн // Вестн. интенсив, терапии. 2007. - № 4. - С. 51-53.

30. Гришина, Т.И. Новый отечественный иммуномодулирующий и противовоспалительный препарат / Т.И. Гришина, М.Т. Абидов, О.В. Калюжин // Воен.-мед. журн. 1999. - № 1. - С. 41-45.

31. Гублер, Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов / Е.В. Гублер. М.: Медицина, 1978. -294 с.

32. Дайа, М. Комплексное лечение и профилактика пиодермии с использованием кислородно-озоновой смеси и иммуномодулятора "Галавит" : автореф. дис. . канд. мед. наук : 14.00.11 / Мохаммед Дайа; Моск. мед. акад. им И.М. Сеченова. М., 2007. - 24 с.

33. Долгушин, И.И. Адгезивность дрожжеподобных грибов в системе «Candida albicans вагинальные эпителиоциты» / И.И. Долгушин, М.А.Свиридов // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2008. - № 3. - С. 66-69.

34. Журавлева, Н.В. Методы определения ЕИФ в сыворотке крови больных / Н.В. Журавлева // Естественное ингибирование активности антител в эксперимента и клинике : сб. науч. тр. -Воронеж, 1985. С. 106.

35. Зайцев С.Н. Эпидемиологический надзор за внутрибольничными инфекциями важнейший компонент системы управления качеством стационарной медицинской помощи / С.Н. Зайцев // Вопр. экспертизы и качества мед. помощи. - 2010. - № 4. - С. 24-28.

36. Иванов, Д.В. Чувствительность к антибиотикам Pseudomonas aeruginosa, выделенной при внутрибольничных инфекциях / Д.В. Иванов // Эпидемиология и инфекц. болезни. 2006. - № 5. - С. 3236.

37. Иванов, Д.В. Этиология внутрибольничных хирургических инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями, и профиль их антибиотикорезистентности / Д.В. Иванов, И.В. Крапивина // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2007. - № 5.-С. 90-93.

38. Изменение вирулентных свойств Candidaalbicans в ассоциациях с Klebsiellapneumoniae / С.А. Лисовская, Н.И. Глушко, Е.В. Халдеева, Л.Т. Баязитова // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, № 2. - С. 107-108.

39. Изучение видового состава микроорганизмов в биопленках на венозных и уретральных катетерах в отделениях реанимации и интенсивной терапии / О.Н. Пинегина, A.B. Сатурнов, Г.Г. Выборнова и др. // Проблемы мед. микологии. 2009. - Т. 11, № 2. -С. 105.

40. Иммунологическая коррекция препаратом галавит больных колоректальным раком / B.C. Ананьев, В.М. Кулушев, О.В. Короткова и др. // Рос. биотерапевт, журн. 2006. - Т. 5, № 2. - С. 81-84.

41. Иммунология и аллергология / под ред. A.A. Воробьева, A.C. Быкова, A.B. Караулова. М. : Практич. медицина, 2006. - 288 с.

42. Иммунотерапия : рук. для врачей / под ред. P.M. Хаитова, Р.И. Атауллаханова. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 672 с.

43. Инфекции в отделениях реанимации и интенсивной терапии // Клинич. фармакология и терапия. 2004. - Т. 13, № 2. - С. 5-11.

44. Караев, З.О. Патогенез кандидоза и аллергии к грибам рода Candida / З.О. Караев, Т.Н. Лебедева. Баку : Тэбиб, 2007. - 215 с.

45. Караев, З.О. Формирование Candida-стафилококковых биопленок на материале катетера / З.О. Караев, Л.Р. Мамедова // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, № 2. - С. 92.

46. Каталог фирмы "Sigma" (chemical company): Biochemicals organic compounds and diagnostic reagents. Б.м., 1996. - С. 222.

47. Клиническая иммунология и аллергология: в 3 т. / под ред. JT. Йегера. M.: Медицина, 1990. - Т. 3. - 528 с.

48. Куликова, Т.Ю. Галавит в комплексной терапии больных с астеническими расстройствами / Т.Ю. Куликова, О.И. Турина // Рос. психиатр, журн. 2006. - № 6. - С. 75-81.

49. Кулько, А.Б. Исследование чувствительности к противогрибковым препаратам клинических штаммов Candida krusei, выделенных от больных туберкулезом легких / А.Б. Кулько // Антибиотики и химиотерапия. 2008. - № 11/12. - С. 22-24.

50. Лазаренко, Л. Современный подход к терапии смешанных инфекций / Л. Лазаренко, А. Коваленко, М. Романцов // Врач. 2007. - № 8. -С. 25-29.

51. Лебедев, К.А. Иммунная недостаточность (выявление и лечение) / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. М. : Мед. кн.; Н.-Новгород : Изд-во НГМА, 2003.-443 с.

52. Лебедева, Т.Н. Иммунитет при кандидозе (обзор) / Т.Н. Лебедева // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т. 6, № 4. - С. 8-16.

53. Левин, Г.Я. Роль перикисного окисления липидов в агрегации клеток крови при ожоговой болезни / Г.Я. Левин, М.Н. Егорихина // Клинич. лаб. диагностика. 2008. - № 8. - С. 43-44.

54. Лесовой, B.C. Микозы пищеварительного тракта (обзор) / В.С.Лесовой, A.B. Липницкий, О.М. Очкурова // Проблемы мед. микологии. 2004. - Т. 6, № 2. - С. 19-23.

55. Лященко, В.А. Мукозный иммунитет и мукозные вакцины / В.А. Лященко // Мед. иммунология. 2003. - Т.5, № 1/2. - С. 5-10.

56. Малачева, Т.Г. Эффективность биопарокса при круглогодичном аллергическом рините с колонизацией слизистой оболочки полости носа грибами Candida и Staphylococcus aureus у детей / Т.Г. Малачева, Н.И. Глушко // Педиатрия. 2008. - Т. 87, № 2. - С. 94-97.

57. Мальберг, К. Методы локального гемолиза: пер. с нем. / К. Мальберг, Э. Зигель // Иммунологические методы / под ред. Г. Фримеля. М. : Медицина, 1987. - С. 57-72.

58. Махрова, Т.В. Влияние метаболитов стафилококков на адгезивные реакции в системе «Candida albicans буквальные эпителиоциты» / Т.В. Махрова, М.И. Заславская, А.И. Маянский // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2004. - № 5. -С. 4-7.

59. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М.Д. Машковский. Харьков, 1998.-Т. 1.-С. 299-301.

60. Метициллинрезистентные Staphylococcus aureus реальная угроза безопасности больных в стационарах // Вопр. экспертизы и качества мед. помощи. - 2010. - № 3. - С. 15-20.

61. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов / В.И. Брилис, Т.А. Брилене, Х.П. Ленцнер, А.А. Ленцнер // Лаб. дело. -1986. № 4. - С. 210-212.

62. Методы оценки эффективной иммунокорригирующей терапии // Клиническая иммунология / под ред. А.В. Караулова. М.: МИА, 1998.-С. 408-426.

63. Микробиологический мониторинг за пациентами в отделении гнойно-септической хирургии / И.В. Наполова, В.В. Фетцер, И.З. Сергеева и др. // Клинич. микробиология и антимикроб, химиотерапия. 2003. - Т. 5, прил. 1. - С. 26.

64. Миллер, Г.Г. Микстинфектология. Основные понятия, направления исследований, клиническое и общебиологическое значение (лекция) / Г.Г. Миллер // Клинич. лаборатор. диагностика. 2002. - № 6. - С. 25-32.

65. Миронов, А.Ю. Клиническая микробиология // Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник / под ред. A.A. Воробьева. 2-е изд., испр. и доп. - М.: МИА, 2008. - Гл. 20. -С.663-684.

66. Митрохин, С.Д. Значение синегнойной палочки в инфекционной патологии человека / С.Д. Митрохин // Инфекции и антимикроб, терапия. 2004. - Т. 6, № 3. - С. 96-97.

67. Моно- и ассоциированная микрофлора при раневой инфекции у больных с термической травмой / Д.Д. Меньшиков, Е.Д. Меньшикова, Т.В. Черненькая и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2009. - № 6. - С. 3-7.

68. Новиков, Д.К. Грибковая иммунопатология: иммунодефициты и аллергия / Д.К. Новиков, Ю.В. Сергеев, П.Д. Новиков // Успехи медицинской микологии : материалы I Всерос. конгр. по мед. микологии. М. : Нац. акад. микологии, 2003. - Т. 1. - С. 202-204.

69. Новый метод определения антилактоферриновой активности микроорганизмов / И.В. Валышева, A.B. Валышев, J1.B. Карташова и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии иммунологии. -2003.-№4.-С. 64-67.

70. Оценка неспецифической резистентности организма с помощью лизосомально-катионного теста при действии длительного стресса / П.И. Мельниченко, В.А. Гришанин, Г.Т. Фолошня и др. // Воен.-мед. журн,- 1992.-№ 11.-С. 57-59.

71. Оценка этиологической структуры инфекционных осложнений у пациентов хирургического стационара / П.И. Огарков, Т.Н. Суборова, A.A. Кузин и др. // Воен.-мед. журн. 2009. - № 11. - С. 46-47.

72. Павленко, Е. Ю. Место кандидозов в инфекционной патологии на современном этапе / Е. Ю. Павленко, М.С. Зиядинова // Крым. журн. эксперимент, и клинич. медицины. 2011. - Т. 1, № 2. - С. 63-66.

73. Парамонов, Б.А. Ожоги : рук. для врачей / Б.А. Парамонов, Я.О. Порембский, В.Г. Яблонский. СПб. : СпецЛит, 2000. - 480 с.

74. Перегуд, Д.М. Влияние иммуномодулятора галавит на соматические последствия отмены хронического введения морфина / Д.М. Перегуд, М.В. Онуфриев, Л.Ф. Панченко // Наркология. 2005.- № 8.-С. 32-37.

75. Перетягин, С.П. Метаболические аспекты патогенеза ожогового эндотоксикоза / С.П. Перетягин, А.К. Мартусевич, И.Е. Погодин // Патолог, физиология и эксперимент, терапия. 2009. - № 1. - С. 3032.

76. Пинегин, Б. В. Алармины эндогенные активаторы воспаления и врожденного иммунитета / Б. В. Пинегин, М. И. Карсонова // Иммунология. - 2010. - № 5. - 246-255.

77. Покровский, В.И. Внутрибольничные инфекции: проблемы и пути решения / В.И. Покровский, H.A. Семина // Эпидемиология и инфекц. болезни. 2000. - № 5. - С. 12-14.

78. Покровский, В.И. Национальная система надзора за внутрибольничными инфекциями / В.И. Покровский, H.A. Семина,

79. Е.П. Ковалева // Эпидемиология и инфекц. болезни. 2001. - № 3. -С. 4-11.

80. Попов, Д.А. Проблема послеоперационных кандидемий у детей / Д.А. Попов, Н.В. Белобородова, А.Р. Сердякян // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. 2009. - Т. 54, № 3. - С. 52-58.

81. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии / под ред. JI.C. Страчунского, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова. -Смоленск: МАКМАХ, 2007.

82. Раздорская, И.М. Фармакоэкономическое обоснование рациональной антибиотикотерапии при термических ожогах у детей, осложненных бактериальной инфекцией / И.М. Раздорская, И.А. Занина, И.В. Чембарцева // Педиатрич. фармакология. 2009. - № 2. -С. 20-25.

83. Редькин, Ю.В. Иммунный и цитокиновый статус у больных хроническим вирусным гепатитом С при использовании противовирусного средства Панавир и иммуномодулятора Галавит / Ю.В. Редькин, Е.В. Дронь // Цитокины и воспаление. 2007. - № 1. -С. 40-46.

84. Решедько, Г.К. Современные аспекты эпидемиологии, диагностики и лечения нозокомиальной пневмонии / Г.К. Решедько, E.J1. Рябкова, P.C. Козлов // Клинич. микробиология и антимикроб, химиотерапия. 2008. - Т. 10, №2.-С. 143-153.

85. Родосская, Н.К. Изучение свойств естественного ингибирующего фактора и путей коррекции иммунопатологии, обусловленной его гиперфункцией : автореф. дис. д-ра мед. наук / Н.К. Родосская. Курск, 2003. - 31 с.

86. Роль иммунного статуса в прогнозе тяжелой термической травмы у детей / В.В. Иванов, А.П. Поляков, A.B. Бубен и др. // Иммунология. -2008. -№ 3. С. 161-163.

87. Роль кандидозной биопленки при резистентности к антимикотикам кандидемии / М.А. Бразоль, И.В. Карабельская, А.С. Колбин и др. // Consillium medicum. 2008. - Т. 10, № 1. - С. 53-57.

88. Руднов, В.А. Антибиотикотерапия госпитальных инфекций вызванных P. aeruginosa / В.А. Руднов // Рус. мед. журн. 2005. - Т. 13, № 7.-С. 485-490.

89. Руководство по инфекционному контролю в стационаре : пер. с англ. / под. ред. Р.П. Венцеля, Т. Бревера, Ж.-П. Бутцлера. -Смоленск: МАКМАХ, 2003. 272 с.

90. Румянцев, А.Г. Эффективность препарата галавит у часто и длительно болеющих детей старше 6 лет / А.Г. Румянцев, А.Ю. Щербина // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. 2008. - Т. 53, №6.-С. 76-77.

91. Сажин, В.П. Ранняя диагностика внутрибольничных инфекций на основе мониторинга раневой микрофлоры в отделении гнойной хирургии / В.Г. Сажин, A.JI. Авдовенко, Н.Г. Бодрова // Хирургия. -2007.-№ 10.-С. 32-35.

92. Семененко, Т.А. Иммунодефицитные состояния как фактор риска развития госпитальных инфекций / Т.А. Семененко, В.Г. Акимкин // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2000. - № 5. -С. 14-17.

93. Сергеев, А.Ю. Грибковые инфекции : рук. для врачей / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. М. : Бином-пресс, 2003. - 440 с.

94. Сергеев, А.Ю. Иммунитет при кандидозе Электронный ресурс. / А.Ю. Сергеев // Научная сеть: сайт. Режим доступа: http://nature. web.ru/db/msg.html?mid=l 160673&s=l 11400110 свободный.

95. Сергеев, А.Ю. Иммунитет при кандидозе и подходы к иммунокоррекции / А.Ю. Сергеев, С.А. Бурова // Антибиотики и химиотерапия. 2000. - Т. 45, № 12. -С. 30-31.

96. Скопенко, O.J1. Этиологическая структура основных возбудителей нозокомиальных инфекций в ожоговом отделении МУЗ МСЧ «Северсталь» / O.JI. Скопенко, JIM. Котик // Проблемы мед. микологии. -2010. -Т. 12, №2.-С. 132-133.

97. Смирнов, В.М. Антибиотикорезистентность грамотрица-тельных возбудителей госпитальных инфекций в ОРИТ многопрофильных стационаров г. Минска / В.М. Смирнов, Г.В. Илюкевич, H.H. Левшина // Антибиотики и химиотерапия. 2009. -№ 11.-С. 25-31.

98. Соболь, В.Н. Влияние факторов госпитальной среды на распространение внутрибольничных инфекций / В.Н. Соболь, Т.А. Лукичева, А.Ф. Карниз // Гигиена и санитария. 2010. - № 5. - С. 6063.

99. Соколова, Т.В. Особенности течения и ведения больных микробной экземой, осложненной кандидозом / Т.В. Соколова, С.А. Григорян, М.А. Мокроносова // Рос. журн. кож. и венерич. болезней. 2007. - № 1.-С. 13-20.

100. Сологуб, Т.В. Новые возможности терапии хронического гепатита С с включением отечественного иммуномодулирующего препарата галавит / Т.В. Сологуб, Н.А. Семеняко // Вестн. С.-Петерб. гос. мед. акад. им. И.И. Мечникова. 2009. - № 1. - С. 167-171.

101. Сулейманова, Т.Х. Ассоциация С. albicans со слизистой оболочкой гастроинтестинального тракта / Т.Х. Сулейманова // Азербайджан, мед. журн. 2008. - № 4. -С. 140-144.

102. Сулейманова, Т.Х. Синергизм Staphylococcus aureus и Candida albicans при Candida-колонизации кишечного тракта / Т.Х. Сулейманова // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, № 2- С. 136.

103. Сухоруков, A.JI. Эффективность галавита в профилактике и лечении гнойно-воспалительных осложнений хирургической патологии органов брюшной полости / A.JI. Сухоруков // Воен.-мед. журн. 2005. - Т. 326, № 6. - С. 31-33.

104. Терапия хронических дерматозов, осложненных Candida инфекцией /Е.Е. Агафонова, Н.В. Дворянкова, З.Ф. Добриян, И.М. Корсунская // TERRAMEDICA. 2006. - №1. - С. 34-35.

105. Уроки эпидемиологических исследований нозокомиальных инфекций в России / A.A. Фокин, Д.В. Галкин, В.М. Мищенко и др. // Клинич. микробиология и антимикроб, химиотерапия. 2008. - Т. 10, № 1.-С. 4-14.

106. Устройство для нанесения дозированного ожога мелким животным / В.В. Минухин, В.Г. Шамрай, Т.Н. Губина и др.. 1985. - Деп. во ВНИИМИ, № Д-9976.

107. Формирование устойчивости к антисептикам и дезинфектантам возбудителей ВБИ и её микробиологический мониторинг / Е.И. Гудкова, A.A. Адарченко, И.Н. Слабко и др. // Белорус, мед. журн. 2003. - № 3. - С. 57-60.

108. Хаитов, P.M. Иммуномодуляторы: механизмы действия и клиническое применение / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2003. - Т. 24, № 4. - С. 196-202.

109. Цинзерлинг, A.B. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза Текст.: научное издание : Рук. / A.B. Цинзерлинг. СПб. : СОТИС, 2002. - 352 с.

110. Цитофизиологические особенности клеточного иммунитета при системном кандидозе / A.B. Ковнер, Ю.С. Бугримова, Т.В. Шаркова и др. // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, № 2. -С. 98-99.

111. Чернишова, JI.I. Кандидозна шфекщя у дггей / JI.I. Чернишова, Д.В. Самарш. Вшниця : Нова кн., 2006. - 168 с.

112. Шабашова, H.B. Грибы и иммунитет : учеб. пособие / Н.В. Шабашова. СПб. : СПбМАПО, 2008. - 83 с.

113. Шабашова, Н.В. Иммунодефициты при хроническом кандидозе кожи и слизистых оболочек / Н.В. Шабашова // Проблемы мед. микологии. 2009. - Т. 11, № 1. - С. 3-10.

114. Шабашова, Н.В. Особенности локального иммунного ответа и его дефекты при орофарингеальном кандидозе (обзор) / Н.В. Шабашова // Проблемы мед. микологии. 2010. - Т. 12, № 4. - С.3-9.

115. Шкарин, В.В. Эпидемиологический надзор за госпитальными гнойно-септическими инфекциями / В.В. Шкарин, H.A. Давыдова, О.В. Ковалишева // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2002. - № 2. - С. 611.

116. Шуб, Г.М. Циркуляция метициллинрезистентных стафилококков в лечебных учреждениях разного профиля / Г.М. Шуб, Н.Г. Ходакова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2008. - № 1. - С. 66-68.

117. Шубич, М.Г. Выявление катионных белков в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфенолового синего // Цитология. 1974. -Т. 16,№ 10.-С. 1321.

118. Шукуров, С.И. Иммунный статус тяжелообожженных на фоне традиционного лечения и применения иммунокорригирующей терапии / С.И. Шукуров // Проблемы клинич. медицины. 2007. - № 4.-С. 84-87.

119. Этиология тяжелых госпитальных инфекций в отделениях реанимации и антибиотикорезистентность среди их возбудителей / С.В. Сидоренко, С.П. Резван, JI.B. Еремина и др. // Антибиотики и химиотерапия. -2005.- Т. 50, № 2/3. С. 34-41.

120. Яковлев, С.В. Время для переоценки места карбепенемов при нозокомиальных инфекциях / С.В. Яковлев // Рус. мед. журн. 2006. -№ 5.-С. 376-380.

121. Яковлев, С.В. Госпитальные инфекции, вызванные резистентными грамотрицательными микроорганизмами: клиническое значение и современные возможности терапии / С.В. Яковлев // Инфекции и антимикроб, терапия. 2004. - Т. 6, № 4. - С. 133-136.

122. Яковлев, С.В. Нозокомиальные инфекции, вызванные полирезистентными грамотрицательными микроорганизмами: как с ними бороться? / С.В. Яковлев // Consillium medicum. 2008. - Т. 10, № 1. - С. 44-49.

123. Activated lactoferrin's ability to inhibit Candida growth and block yeast adhesion to the vaginal epithelial monolayer / A.S. Naidu, J. Chen, C. Martinez et al. // J. Reprod. Med. 2004. - Vol. 49, N 11. - P. 859866.

124. Adherence of Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans to urinary catheters / R.A. Falleiros de Padua, M.F. Norman Negri, A.E. Svidzinski et al. // Rev. Iberoam. Micol. 2008. - Vol. 25, N 3. - P. 173-175.

125. Al-Fattani, M. Biofilm matrix of Candida albicans and Candida tropicalis: chemical composition and role in drug resistance / M. Al-Fattani, L. Douglas // J. Med. Microbiol. 2006. - Vol. 55, № 8. - P. 999-1008.

126. Al-Fattani, M. Penetration of Candida biofilms by antifungal agents / M. Al-Fattani, L. Douglas // Antimicrob. Agents. Chemother. 2004. -Vol. 48, №9.-P. 3291-3297.

127. Altered CD4+ T cell phenotype and function determine the susceptibility to mucosal candididasis in transgenic mice expressing HIV-1 / D. Lewandowski, M. Marquis, F Aumont et al. // J. Immunol. -2006.-Vol. 177.-P. 479-491.

128. Amin, W.M. A new form of intraoral delivery of antifungal drugs for the treatment of denture-induced oral candidosis / W.M. Amin // Eur. J. Dent. 2009. - Vol. 3, N 4. - P. 257-266.

129. Antibiotic therapy for Klebsiella pneumoniae bacteremia: implications of production of extended-spectrum (3-lactamases / D.L. Paterson, W.C. Ko, A. Von Gottberg et al. // Clin. Infect. Dis. 2004. -Vol. 39.-P. 31-37.

130. Anti-fungal activity of cathelicidins and their potential role in Candida albicans skin infection / B. Lopez-Garcia, P.H. Lee, K. Yamasaki, R.L. Gallo // J. Invest, dermatol. 2005. - Vol. 125. - P. 108115.

131. Antifungal mechanisms supporting boric acid therapy of Candida vaginitis / M. Schmidt et al. // J. Antimicrob. Chemother. 2008. - Vol. 23, N 4. - P. 178-181.

132. Antifungal resistance in Candida spp. isolated in Italy between 2002 and 2005 from children and adults / L. Cualco, E.A. Debbia, R. Badenttini, L. Pescetto // Int. J. Antimicrob. Agents. 2007. - Vol. 29, N 2.-P. 179-184.

133. Antifungal susceptibilities of Candida species causing vulvovaginitis and epidemiology of recurrent cases / S.S. Richer, R.P. Galask, S.A. Messer et al. //J. Clin. Microbiol. 2005. - Vol. 43, N 5. -P. 2155-2162.

134. Anti-metabolic activity of caspofungin against Candida albicans and Candida parapsilosis biofilms / C. Cocuaud, M. Rodier, G. Daniaault et al. // J. Antimicrob. Chemother. 2005. - Vol. 56, № 3. - P. 507-512.

135. Biswas, S.K. Anaerobic growth of Candida albicans does not support biofilm formation under similar conditions used for aerobic biofilm / S.K. Biswas, W.L. Chaffin // Cuit. Microbiol. 2005. - Vol. 51, N2.-P. 100-104.

136. Candida albicans mannoprotein influences the biological function of dendritic cells / D. Pietrella, G. Bistoni, C. Corbucci et al. // Cell. Microbiol.-2006.-Vol. 8, N4.-P. 602-612.

137. Candida albicans-secreted aspartic proteinases modify the epithelial cytokine response in an in vitro model of vaginal candidiasis / M. Schaller, H.C. Körting, C. Borelli et al. // Infect. Immun. 2005. - Vol. 73, N 5. - P. 2758-2765.

138. Candida and mycotic infections / M.M. Coogan. P.L.Jr. Fidel, M.C. Komesu et al. // Adv. Dent. Res. 2006. - Vol. 19, N 1. - P. 130-138.

139. Candida biofilm: a well-designed protected environment / P. Mukherjee, G. Zhoou, R. Munyon et al. // Med. Mycol. 2005. - Vol. 43, № 3.-P. 191-208.

140. Carbapenems for the treatment of immunocompetent adult patients with nosocomial pneumonia / I.I. Siempos, K.Z. Vardakas, K.G. Manta, M.E. Falagas // Eur. Respir. J. 2007. - Vol. 29. - P. 548-560.

141. Cater, R.E. Chronic intestinal candidiasis as a possible etiological factor in the chronic fatigue syndrome / R.E. Cater // Med. Hypotheses. -1995,-Vol. 44, № 6.-P. 507-515.

142. Chaffin, W.L. Candida albicans cell wall proteins / W.L. Chaffin // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2008. - Vol. 72, N 3. - P. 495-544.

143. Characterization of switch phenotypes in Candida albicans biofilms / Y. Jin, Y.H. Samaranayake, H.K. Yip, L.P. Samaranayake // Mycopathologia. 2005. - Vol. 160, N 3. - P. 191-200.

144. Chronik candidosis and oral cancer in APECED-patients: production of carcinogenic acetaldehyde from glucose and ethanol by Candida albicans / J. Uittamo, E. Siikala, P. Kaihovaara et al. // Int. J. Cancer. 2008. - Sep. 2.

145. Correlation of in vitro itraconazole and fluconazole susceptibility with clinical outcome for patients with vulvovaginal candidiasis / M.

146. Costa, X.S. Passos, A.T. Miranda et al. // Mycopathologia. 2004. -Vol. 157, N 1. - P. 43-47.

147. De Groot, P.W. Features and functions of covalently linked proteins in fungal cell walls / P.W. De Groot, A.T. Ram. F.M. Klis // Fungal. Genet. Biol. 2005. - Vol. 42, N 8. - P. 657-675.

148. Development and characterization of an in vivo central venous catheter Candida albicans biofilm model / D. Andes, J. Nett, P. Oschel et al. // Infect. Immun. 2004. - Vol. 72, № 10. - P. 6023-6031.

149. Disparate requirement for T cells in resistance to mucosal and acute systemic candidiasis / I. Jones-Carson, A. Vaiquez-Torres, T. Warner, E. Balish // Infect. Immun. 2000. - Vol. 68, N 4. - P. 2363-2365.

150. Dongari-Bagtzoglou, A. Candida albicans-infected oral epithelial cells augment the antifungal activity of human neutrophils in vitro / A. Dongari-Bagtzoglou, C.C. Villar, H. Kashleva // Med. Mycol. 2005. -Vol. 43, N6.-P. 545-549.

151. Donlan, R.M. Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms / R.M. Donlan, J.W. Costerton // Clin. Microbiol. Rev. -2002.-Vol. 15.-P. 167-193.

152. Döring, G. Vaccines and immunotherapy against Pseudomonas aeruginosa' / G. Döring, G.B. Pier // Vaccine. 2008. - Vol. 26, N 8. - P. 1011-1024.

153. Driscoll, J.A. The epidemiology, pathogenesis and treatment of Pseudomonas aeruginosa infections / J.A. Driscoll, S.L. Brody, M.H. Kollef//Drugs.-2007.-Vol. 67, N3.-P. 351-368.

154. Duration of antibiotic therapy for ventilator-associated pneumonia caused by non-fermentative gram-negative bacilli / T.L. Hedrick, S.T. McElearney, R.L. Smith et al. // Surg. Infect. 2007. - N 8. - P. 589597.

155. Effect of in vivo administration of recombinant murine gamma interferon on in vitro lymphoproliferative responses following immunization with Candida albicans / R.E. Garner et al. // Infect. Immun. 2005. - Vol. 60, № 5. - P. 27-35.

156. Effect of neutropenia and treatment delay on the response to antifungal agents in experimental disseminated candidiasis / W.W. Hope, G.L. Drusano, C.B. Moore et al. // Antimicrob. Agents Chemother.• 2007.-Vol. 51, N 1,-P. 285-295.

157. Eggimann, P. Epidemiology of Candida species infections in critically ill non-immunosuppressed patients / P. Eggimann, J. Garbino, D. Pittet // Lancet Infect. Dis. 2003. - N 3. - P. 685-702.

158. Epidemiology and outcomes of ventilator-associated pneumonia in a large US database / J. Rello, D.A. Ollendorf, C. Oster et al. // Chest. -2002.-Vol. 122.-P. 2115-2121.

159. Evaluation of caspofungin and amphotericin B deoxycholate against Candida albicans biofilms in an experimental intravascular catheter infection model / J. Shuford, M. Rouse, K. Piper et al. // J. Infect. Dis.-2006.-Vol. 194, № 5. P. 710-713.

160. Exogenous farnesol interferes with the normal progression of cytokine expression during candidiasis in a mouse model / D.H.

161. Navarathna, K.W. Nickerson, G.E. Duhamel et al. // Infict. Immun. -2007. Vol. 75, N 8. - P. 4006-4011.

162. Falagas, M. Attributable mortality of Acinetobacter baumannii infection among critically ill patients / M. Falagas, P. Kopterides, I. Siempos // Clin. Infect. Dis. 2006. - Vol. 43. - P. 389.

163. Fidel, P.L. Mice immunized by primary vaginal Candida albicans infection develop acquired vaginal mucosal immunity / P.L. Fidel, M.E. Lynch, D.H. Con-away // Infection Immunology. 2005. - Vol. 63 - P. 547-553.

164. Fluconazole for the management of invasive candidiasis: where do we stand after 15 years? / C. Charlier, E. Hart, A. Lefort et al. // J. Antimicrob. Chemother. 2006. - Vol. 57. - P. 384-410.

165. Fungal Infections in the Immunocompromised Patient / ed. J.R. Wingard, E.J. Anaissie. London ; New York ; Singapore : Taylor&Francis, 2007. - 487 p.

166. Fungal Infections in the Immunocompromised Patient / ed.: J.R. Wingard, E.J. Anaissie. London ; New York ; Singapore : Taylor&Francis, 2007. - 487 p.

167. Gaigi, G. Les mycoses du pied chez le diabetique: etude prospective de 150 patients / G. Gaigi, M.R. Kamoun // J. Med. Mycology. 2009. -Vol. 19, Issue l.-P. 29-33.

168. Granulocyte govern the transcriptional response, morphology and proliferation of Candida albicans in human blood / C. Fradin, P. De Groot, D. MacCallum et al. // Mol. Microbiol. 2005. - Vol. 56. -P.397-415.

169. Havlichova, B. Epidemiological trends in skin mycoses worldwide / B. Havlichova, V.A. Czaika, M. Friedrich // Mycoses. 2008. - Vol. 51, suppl. 4. - P. 2-15.

170. Havlickova, B. The advantages of topical combination therapy in the treatment coses / B. Havlickova, M. Friedrich // Mycoses. 2008. - N 51, Suppl. 4.-P. 16-26.

171. Hogan, D.A. A Pseudomonas aeruginosa quorum -sensing molecule influences Candida albicans morphology / D.A. Hogan, A. Vik, R. Kolter // Mol. Microbiol. 2004. - Vol. 54, N 5. - P. 1212-1223.

172. Horan, T.C. Surveillance of nosocomial infections / T.C. Horan, R. Gaynes // Hospital epidemiology and infection control / ed.: C.G. Mayhall. Philadelphia : Lippincott Williams & Wilkins, 2004. - P. 1659-1702.

173. Hospital mortality for patients with bacteremia due to Staphylococcus aureus or Pseudomonas aeruginosa / S. Osmon, S. Ward, V.J. Fraser, M.H. Kollef// Chest. 2004. - Vol. 125. - P. 607-616.

174. Human neutrophils produce interferon gamma upon stimulation by interleukin-12 / F. Ethuin, B. Gerard, J.E. Benna et al. // Laboratory Investigation. -2004. Vol. 84.-P. 1363-1371.

175. IL-17 and Therapeutic Kynurenines in Pathogenic Inflammation to Fungi / L. Romani, T. Zelante, T. De Luca et al. // J. Immunol. 2008. -Vol. 180.-P. 5157-5162.

176. Immunology of fungal infections / eds. G.D. Brown, M.G. Netea. -Netherlands : Springer, 2007. 487 p.

177. Impact of Acinetobacter infection on the mortality of burn patients / M. Albrecfyt, M. Griffith, C. Murray et al. // J. Am. Coll. Surg. 2006. -Vol. 203.-P. 546-550.

178. Impact of ring wearing on hand contamination and comparison of hand hygiene agents in a hospital / W.E. Trick, M.O. Vernon, R.A. Hayes et al. // Clin. Infect. Dis. 2003. - Vol. 36. - P. 1383-1390.

179. In vitro method to study antifungal perfusion in Candida biofilms / Y. Samaranayake, J. Ye, J. Yau et al. // J. Clin. Microbiol. 2005. -Vol. 43, №2.-P. 818-825.

180. In vitro susceptibility of oral Candida to seven antifungal agents / T. Kuriyama et al. // Oral. Microbiol. Immunol. 2005. - Vol. 20, N 6. -P. 349-353.

181. Incidence rate of Candida species in the oral, cavity of middle-aged and elderly subjects / M.L. Zaremba et al. // Adv. Med. Sci. 2006. -Vol. l.-P. 233-236.

182. Induction of human neutrophil chemotaxis by Candida albicans-derived beta-1.6-long glycoside side-chain-branched beta-glucan / T. Sato, K. Iwabuchi, I. Nagaoka et al. // J. Leukocyte. Biol. 2006. - Vol. 80, N l.-P. 204-211.

183. Inefficient T cell memory in the brain of mice infected with Candida albicans / M. Kretschmar, A. Hem, G. Geginat et al. // J. Neuroimmunol. 2000. -Vol. 105, №2.-P. 161-168.

184. Influence of aging on murine neutrophil and macrophage function against Candida albicans / C. Murciano, A. Yanez, J.E. O'Connor et al. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2008. - Vol. 53, N 2. - P. 214-221.

185. Inhibition of monocytic interleukin-12 production by Candida albicans via selective activation of ERK mitogen-activated protein kinase

186. N. Tang, L. Lium, K. Kang et al. // Infect. Immun. 2004. - Vol. 72, N5.-P. 2513-2520.

187. Ioannidou, E. Administration of antimicrobials via the respiratory tract for the treatment of patients with nosocomial pneumonia: a metaanalysis / E. Ioannidou, I.I. Siempos, M.E. Falagas // J. Antimicrob. Chemother. 2007. - Vol. 60. - P. 1216-1226.

188. Kim, H.S. Expression of genes encoding innate host defense molecules in normal human monocytes in response to Candida albicans / H.S. Kim, E.H. Choi, J. Khan // Infections Immunity. 2005. - Vol. 73. -P. 3714-3724.

189. Kiska, D.L. Pseudomonas / D.L. Kiska, P.H. Gilligan // Manual of Clinical Microbiology / eds.: P.R. Murray et al..- 8th ed. Washington : ASM Press, 2003. - P. 719-772.

190. Kollef, M.H. Prevention of hospital-associated pneumonia and ventilator-associated pneumonia / M.H. Kollef // Crit. Care Med. 2004. -Vol. 32.-P. 1396-1405.

191. Koray, M. Fluconazole and/or hexetidine for management of oral candidiasis associated with denture-induced stomatitis / M. Koray // Oral. Dis.-2005.-Vol. 11, N 5. P. 309-313.

192. Lactoferrin acts as an alarmin to promote the recruitment and activation of APCs and antigen-specific immune responses / De la Rossa G., Yang D., Tewary P. et al. // J. Immunol. 2008. - Vol. 180. - P. 6868-6876.

193. Lavigne, L.M. Beta-glucan is a fungal determinant for adhesion-dependent human neutrophil functions / L.M. Lavigne, J.E. Albina, J.S. Reichner//J. Immunol. 2006. - Vol. 177,N 12.-P. 8667-8675.

194. Levy, S.B. Antibacterial resistance worldwide: causes, challenges and responses / S.B. Levy, B. Marshall // Nat. Med. 2004. - N 10, Suppl. 12.-P. 122-129.

195. Lilic, D. Candida. Chapter 16 / D. Lilic // Immunology of Fungal infections / eds.: G.D. Brown, M.G. Netea. Netherlands : Springer, 2007. —487 p.

196. Llovera Suarez, V. Identification of yeasts in pap smears: clinical characteristics associated with candidiasis / V. Llovera Suarez, M.R. Perurena Lancha // Rev. Cubana Med. Trop. 2004. - Vol. 56, N 1. - P. 21-25.

197. Meropenem by continuous versus intermittent infusion in ventilator-associated pneumonia due to gram-negative bacilli / L. Lorente, L. Lorenzo, M.M. Martin et al. // Ann. Pharmacother. 2006. - Vol. 40. -P. 219-223.

198. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus disease in three communities / S.K. Fridkin, J.C. Hageman, M. Morrison et al. // N. Engl. J. Med. 2005. - Vol. 352. - P. 1436-1444.

199. Mixed Candida albicans strain populations in colonized and infected mucosal tissues / M. D. Jacobsen, A.D. Duncan, J. Bain, E.M. Johnson // FEMS yeast research. 2008. - Vol. 8. - P. 1334-1338.

200. Nett, J. Candida albicans biofilm development, modeling a host-pathogen interaction / J. Nett, D. Andes // Curr. Opin. Microbiol. 2006. -Vol. 9, N4.-P. 340-345.

201. Neutrophil activation and arthritis induced by C. albicans water-soluble manno-protein- beta-glucan complex (CAWS) / A. Ishida-Okawara, N. Nagi-Miura, T. Oharaseki et al. // Exp. Mol. Pathol. -2007. Vol. 82, N 2. - P. 220-226.

202. Neutrophil extracellular traps capture and kill Candida albicans yeast and hyphal forms / C.F. Urban, U. Reichard, V. Brinkmann, A. Zychlinsky // Cellular Microbiology. 2006. - Vol. 8, N 4. - P. 668-676.

203. Neutrophil extracellular traps kill bacteria / V. Brinkmann, U. Reichard, Ch. Goosmann et al. // Science. 2004. - Vol. 303. - P. 15321535.

204. Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective Nationwide Surveillance Study / H. Wisplinghoff, T. Bischoff, S.M. Tallent et al. // Clin. Infect. Dis. 2004. -Vol. 39.-P. 309-317.

205. O'Toole, G. Biofilm formation as microbial development / G. O'Toole, H.B. Kaplan, R. Kolter // Annu. Rev. Microbiol. 2000. - Vol. 54.-P. 49-79.

206. Pea, F. Antimicrobial therapy in critically ill patients / F. Pea, P. Viale, M. Furlanut // Clin. Pharmacokinet. 2005. - Vol. 44. - P. 10091034.

207. Peculiarities of humoral immunity in patients with candidosis / T.N. Lebedeva, S.M. Ignatieva, S.B. Minina et al. // 8-th Congress of the European Confederation of Medical Mycology. Budapest, 2002. - P. 34.

208. Perumal, P. Role for cell density in antifungal drug resistance in Candida albicans biofilms / P. Perumal, S. Mekala, W.L. Chaffin // Antimicrob. Agents Chemother. 2007. - Vol. 51, N7.-P. 2454-2463.

209. Platelet-activating factor-induced early activation of NF-kappa B plays a crucial role for organ clearance of Candida albicans / H. Choi, H.M. Ko, F.W. Kim et al. // Immunol. 2001. - Vol. 166, N 8. - P. 5139-5144.

210. Pneumonia caused by oxacillin-resistant Staphylococcus aureus treated with glycopeptides / J. Rello, J. Sole-Violan, M. Sa-Borges et al. // Crit. Care Med. 2005. - Vol. 33. - P. 1983-1987.

211. Poulain, D. Candida albicans cell wall glycans. host receptors and responses: elements for a decisive crosstalk / D. Poulain, T. Jouault // Current opinion microbiology. 2004. - Vol. 7. - P. 342-349.

212. Prevalence of Candida albicans and Candida non-albicans in clinical samples during 1999-2001 / M.T. Mujica, J.L. Finquelievich, V. Jewtuchowicz, C.A. Iovannitti // Rev. Argent. Microbiol. 2004. - Vol. 36, N3,-P. 107-112.

213. Pseudomonas aeruginosa: resistance and therapeutic options at the turn of the new millennium / N. Mesaros, P. Nordman, P. Plesiat et al. // Clin. Microbiol. Infect. 2007. - N 13. - P. 560-578.

214. Risk factors for late-onset nosocomial pneumonia caused by Stenotrophomonas maltophilia in critically ill trauma patients / S.D. Hanes, K. Demirkan, E. Tolley et al. // Clin. Infect. Dis. 2002. - Vol. 35.-P. 228-235.

215. Romani, L. Controlling pathogenic inflammation to fungi / L. Romani, P. Puccetti // Expert. Rev. Antiinfect. Ther. 2007. - Vol. 5, N 6.-P. 1007-1017.

216. Romani, L. Controlling pathogenic inflammation to fungi / L. Romani, P. Puccetti // Experimental review anti infection therapy. 2007. -Vol. 5-P. 1007-1017.

217. Romani, L. Immunity to fungal infections / L. Romani // Nat. Rev. Immunol.-2004.-Vol. 4.-P. 1-13.

218. Romani, L. Immunity to fungal infections / L. Romani // Nature Reviews. 2004. - Vol. 5. - P. 1-13.

219. Shoham, S. The immune response to fungal infections / S. Shoham, S.M. Levitz // British J. Immunology. 2005. - N 129. - P. 569-582.

220. The relationship of myceliated colonies of Candida albicans with denture stomatitis: an in vivo/in vitro study / E. Emami, J. Seguin, P.H. Rompre et al. // Int. J. Prosthodont. 2007. - Vol. 20, N 5. - P. 514520.

221. Topete, E.G. Assessment of efficacy of ketoconazole/clindamycin vs metronidazole/ nistatine in candidiasic vaginitis and bacterial vaginosis / E.G. Topete, M.G. Valencia // Ginecol. Obstet. Mex. 2004. - Vol. 72. -P. 575-580.

222. TOS9 regulates white-opaque switching in Candida albicans / T. Srikantha, A.R. Borneman, K.J. Daniels et al. // Eukaryot. Cell. 2006. -Vol. 5, N 10.-P. 1674-1687.

223. Treatment of recurrent vulvovaginal candidosis with mycosyst (fluconazole) / B. Pekhlivanov, I. Amaliev, Kh. Ivancheva, L. Zisova // Akush Ginekol (Sofiia). 2005. - Vol. 44, suppl. 2. - P. 25-27.

224. Tuite, A. Genetic analysis of innate immunity in resistance to Candida albicans / A. Tuite, A. Mullick, P. Gros // Gene Immun. 2004. -Vol. 5.-P. 576-587.

225. Ungpakorn,R.Nondermatophyte infections of the skin and nails: Implications for therapy / R. Ungpakorn // Abstracts of The 17th

226. Tokyo, Japan, May 25-29, 2009). Tokyo, 2009. - P. 224.

227. Update on daptomycin activity and spectrum when tested against ram-positive strains collected in European medical cen tres (2006) / H. Sader, P. Rhomberg, T. Fritsche, R. Jones // Abstracts of 17th ECCMID, 2007.-P. 1828.

228. Valenti, P. Lactoferrin: an important host defence against microbial and viral attack / P. Valenti, G. Antonini // Cellular molecular life Science. 2005. - Vol. 62. - P. 2576-2587.

229. Van der Graaf, C. A. Differential cytokine production and Toll-like receptor signaling pathways by Candida albicans blastoconidia and hyphae / C.A. Van der Graaf, M.G. Netea, I. Verschueren // Infections Immunology. 2005. - Vol. 73. - P. 7458-7464.

230. Vulvovaginal candidiasis is associated with the production of germ tubes by Candida albicans / M.E. Consolaro, T.A. Albertoni, A.E. Svidzinski et al. // Mycopathologia. 2005. - Vol. 159, N 4. - P. 501107.

231. Yazdi, A.R. Etiologies of onychomycosis in Shahre Rey, Iran: a 5-year study / A.R. Yazdi, S. Hamidi, Fusis // Abstracts of The 10th International Congress of Dermatology (Prague, Czec Republic, May 2024, 2009). Prague, 2009.

Информация о работе

Шеховцова, Оксана Викторовна
кандидата медицинских наук
Москва, 2012
ВАК 03.02.03

Диссертация

Влияние грибов рода Candida на механизм формирования госпитальных штаммов возбудителей внутрибольничных инфекций и экспериментальное обоснование способа его предупреждения - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы