Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Влияние гена рилизинг-фактора гормона роста человека на продуктивные качества свиней белорусской мясной породы

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Влияние гена рилизинг-фактора гормона роста человека на продуктивные качества свиней белорусской мясной породы"

«V Л»

сх.

Л БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА

УДК 636.4.082.12

КИРЕЕВ Геннадий Львович

ВЛИЯНИЕ ГЕНА РИЛИЗИНГ - ФАКТОРА

ГОРМОНА РОСТА ЧЕЛОВЕКА НА ПРОДУКТИВНЫЕ КАЧЕСТВА СВИНЕЙ БЕЛОРУССКОЙ МЯСНОЙ ПОРОДЫ

06.02.01 — разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Жодино, 1997 год

Работа выполнена в Белорусском научно-исследовательском институте животноводства.

Научные руководители:

член-корреспондент ААН РБ, доктор сельскохозяйственных

наук, профессор Горин В. В. кандидат с/х наук Романов Ю. Д.

Официальные оппоненты:

доктор с/х наук, профессор, член-корреспондент ААН РБ Будевич И. И. доктор с/х наук, профессор Гильман 3. Д.

Оппонирующая организация — Витебская Государственная Академия ветеринарной медицины.

Защита состоится «//Г» . 1997 г. на заседа-

нии совета по защите диссертаций Д.05.14.01 при Белорусском научно-исследовательском институте животноводства по адресу: 222160, г. Жодино, Минская область, ул. Фрунзе, 11, БелНИИЖ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского научно-исследовательского института животноводства.

Автореферат разослан « . 1997 г.

Ученый секретарь совета по защите диссертаций грлЖ^-у^ М. А. ГУЗЕНОК

ОБЩАЯ 'ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ'

Актуальность темы диссертации. Имеющиеся в настоящее время per 'льтаты по получению трансгенных животных свидетельствуют о воэ-»жности существенного изменения ряда их важнейших хозяйственно -шезных признаков. В частности, свиньи,. трансгенные по гену рили-

: : I

IHP - :фактора гормона роста, характеризуются "существенно меньший •держанием жира iv туше. Установлен также факт значительно большей менчивости многих других признаков этих животных, - что делает их ¡сьыа перспективными объектами для селекционеров, так как увеличи-иэтся: возможности отбора.

Связь работы о крупными программами, темами. Исследования про-» ¡дены в период с 1994 по 1996 гг. в соответствии с государственны-I планами научно - исследовательских работ лаборатории генетики шьскохозяйственных животных БелНИИЖа по теме OCX 42: 01.08 Н 'азраВотать приемы использования генной и клеточной инженерии . в ¡лекции сельскохозяйственных животных». ВелНИИЖ, совместно с ин-?итутами России: ВНИИРГЖ,' ВИЖ, ВНИИФВ и П, и др. включен как соис-шнитель общего проекта КП НТП СЭВ 5.1.3 «Разработка методов био-сженерии в животноводстве для совершенствования продуктивных И экологических качеств сельскохозяйственных животных» под рухово-ггвом академика РАСХН Л.'К. Эрнста. >

Цель и оада«ас исследований. Нами поставлена цель: установить гияние гена рилизинг-фактора гормона роста человека на продуктив-гв качества свиней белорусской мясной породы. '

Для достижения этой цели необходимо было решите, следующие за-1ЧИ! ;•"■;. ', .'»'■ "-V-". ""'-Г:' "--v -

подготовить исходное поголййье свиноматок для искусственного : вменения зацороженно-оттаянной спермой трансгенных хряков;

- йояучить потомство ■ первого поколения о» Условно - >»рансген-м хряков; ^¡¿^ Y ; V* !

г. изучить интеграцию¡гена рилизинг-фактора гормона роста Чело-ma в тканях опытных живейпшх первого йокбления;

- получить Второе поколение условно - трансгенных свиней путем Лредного и аутбредного спаривания;

, »

- исследовать результаты экспрессии встроенного гена ..путе

(

контроля физиологических1 параметров и анализа роста и развит опытных животных в сравнении со' сверстниками;

- изучить мясные и откормочные качества потомства второго пс коления с разной лозой гена рилизинг - фактора гормона роста.

Научная новизна работы. Впервые в Республике Беларусь получо трансгенные свиньи, в геном которых встроен ген рилизинг - факто{ гормона роста человека. С помощью иммуногенетическйх маркеров групп крови установлены достоверные различия генетической структу! в микропопуляции условно трансгенных свиней. Установлена возиоз ность использования трансгенных хряков в селекционных программ; для улучшения мясных качеств свиней.

Практическая ¡значимость полученных рввультатов. Применение I практике разработанных приемов использования трансгенных хряков селекции позволили увеличить живую массу опытных инбредных и ау вредных потомков к семимесячному возрасту на 13% по сравнению с яа вотными контрольной группы. Интеграция гена позволяет увеличить ш ход мяса на 2» 5% и уменьшить выход сала на 4% в туше. На основан! проведенных исследований прлучены достоверные данные, что интегр; ция гена рилизинг - фактора гормона роста человека в геном евин! способствует получению"поросят с большой; живой массой при рождении

Экономическая акачимасть полученных раауяыгатов. экономическ эффективность от внедрения гена рилизинг-фактора гормона роста ч ловека в геном свиней белорусской мясной порода складывается : Экономии кормов на 14%, .затрачиваемых на один килограмм прирос живой массы, а также на 13% за счет более высоких темпов роста возрасте 210 дней, при достижении живой массы 90 кг. Общая эконом затрачиваемых средств по сравнению с контрольными животными соста ляет ' '

Основшга подояаиия диссертацииг вмносшме на ааврсту:

- данные роста и развития условно - трансгенных свиней первого второго поколения: .

- частота интеграции гена рилизинг - фактора гормона роста челов Ка! - ■

биохимические параметры ,и показатели естественной резистенти сти у условно - трансгенных свиней:

■ показатели дифференциального анализа экспрессии гена по росту и 1азвит(ш, фиэиолого-биохи^ическим параметрам, данным контрольного >ткорма у трансгенных свиней;

• имыуиогенетические параметры условно - трансгенных животных.

Личный вклад соискатели. Диссертационная работа выполнена лич-ю автором. Отдельные этапы исследований проводились совместно с готрудкиками лаборатории; генетики сельскохозяйственных животных, отдела зоогигиены и экологии ВелНИИЖ, ВИЖа.

Апробация рааультатов диссертации. Основные положения диссер-гации доложены и получили положительную оценку на методических и ученых советах БелНИИЖа Ц994-1997 гг.); на международной конферен-ши «Научлыг основы интенсивного развития животноводства» 1-3 сен-рября 1995 г., Беларусь, г. Горки/ на Международной научно-трактическоЙ конференции «Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства» 6-8 ишя 1996 г., г. Горки.

Опубликованность равультатоп диссертации. По теме диссертации опубликовано 7 научных статей в сборниках научных трудов белорусской сельскохозяйственной академии и ВелННШСа, а также а сборниках тезисов и докладбз Международных конференций в города Горки, Витебск, Боровск и других.

Объем работы: Диссертация изложена на 94 страницах машинописного текста, состоит из введения, оОаей характеристики работы» обзора литература, материала и методики исследований, результатов исследований, обсуждения, выаодоа и практических предложений. Иллюстрирована 31 таблицей, список литературы включает 167 источников, в том числа 111 иностранных. 'V

• ОСНОЕШЗ СОДЗИШШЗ РАБОТЫ Н&терйады и иатодмва коспедоавнма.

Исследования проводились а период с 1994-1996 года на база ОПХ «Будагово» Минской области Смолепичского района и лаборатории генетики сельскохозяйственных животных ВелНИИЖ.

Для получения условно-трансгенных потомков использовали 1.9 ос новных свиноматок Селорусской мясной породы и одну матку пород ланврас. Их возраст 3-5 лет, 1989-1991 года рождения, живой массо 200-220 кг.

Схема 9 1

Получение условно-трансгешшх свиней Fi.

Инд. I» Доза Порода Кол-во

•грансгвиннх гена хряков подобранных Породы маток

хряков свиноматок

№ 52 50% СМ х Эдедьшвайн 10 Белорусская мясная

№ 31 50% - СМ х ЭдельшваЙн 10 . 9 Белорусская мясная 1 Ландрас

Примечание: СМ - Советская мясная.

Их одновременно -обрабатывали а комплексе тривитамиНоМ в до: 5 мл., СЖК 1000 И.В. йа голову для стимуляции охоти, и ocgmchhj замороженно-оттаянной спермой траысгенных хряков ® 31 и 9 52. Ci гласно методических рекомендаций ВИЖа (Боровск, 1991 г.).

В течение месяца проводился контроль за .результативность!! oci

менения. Из 20 свиноматок] осемененных спермой трансгенных хряко!

.i ■ -

плодотворно осеменилось 10 (50%). Весь молодняк (72 головы), пол; чейный от 10 сгязт:ис; с£икз»аток, взвешивался и брались промеры < рождения до 10 - ти месячного возраста. В январе 1995 года бы отобраны 25 голов опытных животных для дальнейшей селекции.

План случки ремонтный свинок, для получения второго поколен животных был составлен так!иы образом, чтобы получить удвоенную до гена соматолиберина у потомков второго поколения, что позволяет и пользование инбридинга типа 11-11 (полубрат-полусестра).

Схема V 2. Получение трансгенных свиней 5"г •

№ опыта, 1 Тип спаривания Кол-во каток Доэа гена Кол-во хряков Доэа гена Предполагаемая доза гена а потомства

ЭпЫт 1 инбредный 10 25% 5 25% 50%

Опыт 2 аутОрсдпий 60 - 4 25% 12,51

контрольная группа. 10

Одновременно были спарены аутбредные свиноматки белорусской мясной породы в количестве 60 голов с хряками первого поколения, имеющими трансформированный ген рилизинг-фактора гормона роста человека с дозой гена 251.

Для сравнения со сверстниками была подобрана группа из 10 свиноматок, спаренных с хряками белорусской мясной породы не имеющих интегрированного гена 1 соматолиберина. .

При рождении из потомства второго поколения были сформированы две опытные группы для изучения мясных и откормочных качеств.

Показатели роста и развития учитывались в" соответствии с требованиями бонитировки ремонтного молодняка свиней для пород I класса. Анализ интеграции гена рилизинг - фактора гормона роста человека проводился методом полимераэной цепной реакции.

Генетическая экспертиза свиней проводилась пр методике В.Н, Тихонова (Москва, 1967 г.) к Ю.Д. 'Романова (Яодино, 1980 г.), с помощью антисывороток детерминирующих 27 антигенных факторов из 10 генетических систем групп крови а лаборатории генетики' сельскохозяйственных животных. ' . -.[.<

В лаборатории зооанализа определялись качественные показатели мяса и сала опытных свиней при помощи методики оценки качества мяса и шНиха убойных животных (Москва, 1975) таких как! физико-химическая оценка. качества мышечной ткани, определение содержания жира и влаги в мясе, кислотности (рН), водосвязываоцей способности мяса.

Состояние естественной резистентности, морфологические и, биохимические показатели крови животных определяли в отделе эоогигиеш и экологии ВелНИИЖ.

Достоверность по генетическим критериям групп крови определял) по методу угла фи Фишера (Плохинекий Н.П., 1970 г.)

Биометрическую обработку экспериментального материала проводили по П.Ф. Рокицкому (Москва, 1976 г.).

РЕЗУЛЬТАТ! ИССЛЕДОВАНИЙ

От десяти опытных свиноматок, осемененных замороженно-оттаянной спермой трансгенных хряков, родилось 72 поросенка.

Живая масса при рождении была высокой. Некоторые поросята ро дились с живой массой 1850-2300 г. Средняя живая масса опытны: хрячков при рождёнии составила 1,607 кг, свинок -1,407 кг при (р • 0,001). С 3-х до 8-ми месячного возраста опытные хрячки и свиню удовлетворяли требованиям!второго класса. С 9-ти месячного возраст стали соответствовать животным первого класса.

о *

Животные второго поколения были получены методом близкородст венного спаривания (полубрат-полусестра) с цельв достижения концен трации гена соматолиберина 501 и выяснения его физиологической рол на процессы роста и развития, а также мясные и откормочные качеств опытного молодняка второго поколения. Кромэ этого свинки белорус ской мясной породы были спарены с потомками хряка Р31 с целью полу чения и исследования потомков, шгеадих 12,5% дозы гена рилизинг фактора гормона роста человека. Достоверная разница при рождении { < 0,1) была обнаружена в группе инбредных поросят. В двух месячно возрасте различия по живой массе между поросятами инбредной, ауп вредной и контрольной группами выли о 3,8 и 2,8 кг при (р < 0,01

Ч , I •

Р < 0,05). Во все остальные месяцы различия в пользу опытных груг были существенными при {р < 0,001). Следует отметить, что животнь опытных групп в пять месяцевfcсоответствовали классу элита, а кок трольные животные достигли уровня второго класса. Данные представ лены в таблице JH. '

Таблица 1

Динамика развития опытного молодняка свиней второго поколения

Опытные группы животных п При рождении Масса (кг) i *

1 2 3 4 5 6 7

Лнбредная 10 1,18 * 0,023 5.45* 0,179 0,539 29,131 0,700 46,00* 1,143 60,89* 1,252 75,29i 0,837 92,141 0,8000

Ьутбредная 10 1,20* 0,017 5,15* 0,279 14,07* 0,272 29,13* 10,441 43,75* 0,453 59,38* 0,653 75,25* 0,590 91,63* 0,882

Контроль 15 1,13* 0,019 5.27J; 0,221 11,63* 0,615 22,00* 0,691 35,90* 0,809 51,70* 1,513 63,14* 1,682 78,28* 1,666

Достоверное увеличение среднесуточного прироста живой массы в

рруппе инбредных поросят наблздалось в два'и три месяца 'при (р <

1 • • '

0;001) в четыре при (р < 0,01) в шесть при (р < 0,05), в семь месяцев только в группе инбредных поросят было достоверное увеличение среднесуточных приростов при (р < 0,05) по сравнении с контроле!«. В один и пять месяцев достоверных различий не наблюдалось.

биохимические паракетш и показатели естественной резистентности у

условио-тРАНсггиных свиней ;' ■

• Важное значение для; понимания формирования неспецифических факторов зашиты организма В изучаемых условиях имеет определение Гуморальных й клеточных показателей крови, а тагако показатели клеточных факторов защиты. ..' : , ,

Состояние естественной резистентности,морфологические , ¿» биохимические показатели Крови животных определяли в отделе зоогигиены и экологии ВелНИИЖ. '

количество лейкоцитов определяли с помоиьп счетчика микрочастиц «Пикосель - РБ - 4» (ВНР), эритроцитов и гемоглобина - ФЭК-м по методике Г.В. Дервиз и А.И. Воробьева (Москва 1959 г.), содержание

'Л . . 8

общего белка - рефрактометром ИРФ-22, белковые фракции - электрофорезом на агарозовом геле.

Бактерицидную активность Ьыворотки крови определяли по методике О.В. Смирновой и. Т.А. Кузьминой (М., 1959 г.) с использованием в качестве тест-культуры кишечной палочки, лизоцимную активность сыворотки крови по методике В.Г. Дорофейчука (М., 1968 г.). Фагоцитарную активность по методике B.C. Гостева (М., 1950 г.).

В группе трансренных. и условно-трансгенных животных по таким показателям, как количество лейкоцитов, содержание гемоглобина и количество эритроцитов достоверных различий не обнаружено. В группе трансгенных животных количество лейкоцитов, содержание гемоглобина и количество эритроцитов находилось в пределах 9,400 тыс/мм3; 6,905 г/4; 12,650 млн/мм3 соответственно, а в группе'условно-трансгенных в пределах 8,640 тыс/ымЗ;'6,968 г/%; 12,080 млн/мм3 соответстйенно, и было на уровне показателей по всей породе, что свидетельствует об одинаковом уровне гемопоэза у этих животных.

Полученные .данные по этим исследованиям свидетельствуют, что практически' никаких достоверных отклонений состояния естественной резистентности, морфологических и биохимических показателей крови животных не отмечено и соответствовали в среднем показателям по породе. , °

ОТКОРМОЧНЫЕ КАЧЕСТВА ПОДОПЫТНОГО МОЛОДНЯКА

Исследованиями многих авторов показано, что введение свиньям рекомбинантного ,сом'атотропина значительно уменьшает количество жира в тушах, (особенно заметно,у более сальных пород) и практически не сказывается на химическом составе мяса.

Полученные нами условно-трансгенные животные второго поколения и их нетрансгенные сибсы,: прошедшие период оценки откормочных качеств, были убиты на мясокомбинате колхоза «1 мая» Смолевичского района и прошли оценку качества туш. Данные представлены в таблице №2.

Таблица 2

. Мясные качества опытного.поголовья молодняка свиней

Опытные группы Кол-во Убойный выход, % Длина туши, см. Площадь мышоч. глаака, нн* Выход в тука, %

мясо сало

Инбредная 5 60, 6 ±0,632 91,4 ±2, 09 27,552 ±2,151 61,26 ±0,805 25,00 ±0,388

Аутбредная 5 58,6 . ±1,778 90,50 ±1,987 27, 720 ±0,776 57,6 ±1,887 27,000 ±3,564

Контроль 5 60,2 ±0, 678 90,50 ±2,089 25,712 ±1,841 58,0 ±1,581 29,400 ±1,860

Убойный выход у инОредных свиней был несколько выше, а в аут-Вредной группе был ниже по сравнению с контролем, но достоверной разницы ни в первом, ни во втором случае обнаружено не было. Достоверной разницы не обнаружено и по длине туши. Не было отмечено достоверных различий между группами по площади ыыгзечного глазка, хотя в опытных группах она былк на 2 мм2 больше или 74 вше. В группе инбредных поросят выход мяса в туша был на 3% больше при (р < 0', 1), а выход сала на 4* ыеньие при (р < 0,05) по сравнению с контролем. В группе аутбредных поросят выход мяса и сала, был|ниже, но достоверной разницы не обнаружено.| Л . ,

Распределение сала в туше у опытных животных- имело несколько Иной профиль- ' ' " . .'. "' , •

Толщина вишка над 6-7 грудными позвонками а также на холке и Пояснице была меньше на 17% по сравнению с контролем в группе инбредных Норосят. Причем, разница по толщине шпика на холка и пояснице была достоверная при. (р < 0,01). В группё аутбредных поросят над 6-7 грудными позвонками толщина шпика была больше (так как спаривание было топкроссным) ¡при (р >0,01). Данные представлены в таблице 3. ' ' •'.'.

Таблица 3 Показатели промеров шпика

Группы животных Кол-во Холка 6-7 позвонки Пояснич.

Инбредные 5 3,400 ± 0,170 2,28 ± 0,246 2,100 ± 0, 158

Лутбредпые 5 3,820 ;± 0,517 3,060 ± 0,479 2,420 ± 0,551

Контроль 5 '4,100 ± 0,427 2,760 ± 0,304 2,540 ± 0,236

Не наблюдалось достоверных различий по таким физическим покс зателям, как цвет мяса, рН, общий процент влаги, влагоудерживающг способность, общий процент увариваемости.

По содержанию воды, жира, золы в мясе и сале инбредной груш наблюдалось увеличение показателей, но достоверных различий не от мечено. В группе инбредных поросят достоверные различия установле! только по содержанию протеина в мясе при (р < 0,05).

Затраты корма на единицу прироста у опытного поголовья были среднем ниже на 14% (р <!0,001) и составили 4,47 и 4,57 кормовь единицы на один килограмм прироста.

В группе аутбредцых поросят наблюдалось увеличение•содержан* воды в мясе и сале, отмечено увеличение таких показателей как се держание жира, <золы, протеина в мясе и сале, но достоверных разлг чий не наблюдалось. >

Отмечено значительное различие по массе легких. Масса которь

1

у инбредных животных была! на 23% ниже, а у аутбредных на 4% ниже чем в контроле, но достоверной разницы не обнаружено. Объяснит значительную разницу в ыассе легких на данный момент не представл» ется возможным.' Не было ^обнаружено достоверного увеличения - масс почек в двух опытных группах, хотя различия по массе были знач> тельными. В инбредной группе ыасса селезенки была достоверно выи

при (р < 0,05). По массе сердца и желудка . в группе инбредных поре * » ' '

сят не было обнаружено достоверного увеличения, хотя разница с< ставила 13Ъ и 6,86% соответственно. Данные представлены в таблш 4. '

Таблица 4

Средняя масса (г) внутренних органов свиней в воарасте 180 дней

Группы жи- Кол- Печень Легки« Лочкм Селааекка Сердце Желудок

аоткшс во

Инбредкая 5 1528,00 824.00 2^6,00 130,00 338,00 З5о;оо

±83,99 ±57,67 ±14,70 ±17,32 ±43,29 ±24,29

АугЗре дп ая 5 1668,00 919,00 249,00 82,00 ' 241,00 328,00

1104,99 ±86,35 ±25,42 ±10,20 ±8,12 ±22,67

Контроль 5 1522,00 1020,00 222,00 82,00 258,00 326,00

ill?,29 ±131,99 ±27,82 ±11,14 ±52,48 ±20,40

ИЗУЧЕНИЕ ИНТЕГРАЦИЯ ГЕНА РИЛИЗИНГ-ФАКТОРА ГОМОНА РОСТА ЧЕЛОВЕКА.

Интеграцию гена рилизинг-фактора гормона роста человека у опытного молодняка первого и второго поколения изучали По образцам , тканей уха с помощью экспресс-метода ПЦР-амплификации п лаборатории по изучению трансгенных животных ВИЖа.

Тесту подвергались; ' .

' 1. поросята, первого поколения полученные от искусственного

: осеменения свиноматок трансгенным хряком.

2. поросята, второго[поколения полученные от спаривания либо с ■ трансгенныыи хрякам, либо с трансгенными свинками. ,

В первой случае было' протестировано 25 образцов кожи поросят. ; Из протестированных животных трансгенными оказались 3 поросенка, у , двух поросят установлена • сомнительная реакция. Не обнаружено I встраивание гена рилизинг-фактора гормона роста у 20 поросят. Трансгенные поросята, номера 15:17:23. Сомнительная реакция,-номера 3:16. Процент встраиваемости гена составил 12%. , '

Во втором случае,, было протестировано .24 образца кожи поросят. Из протестированных животных трансгенными оказались 3 поросенка. Трансгенные поросята,, номера 6:7:12. Сомнительная реакция, номера 25:28:29.

Процент встречаемости гена у свиней второго поколения, составил 12%. •

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ РАЗЛИЧИЯ МЕЗДУ ТРАНСГЕННОЙ УСЛОВНО-ТРАНСГЕННОЙ И КОНТРОЛЬНОЙ ГРУППОЙ ЖИВОТНЫХ.

Нами проведен дифференциальный анализ между трансгенной и ус ловно-трансгенной группами животных с целью установления различий этих двух опытных группах. Сравнение проводилось по таким показате лям как рост, развитие опытного поголовья, данные естественной ре зистентности, показатели промеров шпика, затраты корма на единии прироста, мясные качества.

Данные роста и развития опытных свиней первого поколения пока зывают, что разница по живой массе фактически трансгенных порося при рождении . была достоверно • выше {р < 0,1), чем у условно трансгенных поросят. С 21 дня достоверной разницы в росте трансгеи них и условно-трансгенных животных на наблюдалось, хотя трансгеннь животные росли быстрее. В девягьи десять месяцев различия в рос1 были достоверными при (р < 0,05)1 При сравнении группы фактичесг трансгенных и'группы контрольных поросят была так' же выявлена теь денция к увеличение роста граксгенных поросят при рождении' (р 0,001), а так же в девять месяцев. В десять месяцев живая масс трансгенных поросят была выше при (р < 0,01). Так же наблодалос достоверное увеличение/рос-ра трансгенных свиней при (р < 0,1 и р 0,05) в петь .и шесть месяцев соответственно. Данные представлены таблице 5.' • ' • _

' • . Таблицу 5 ' Даяние'роста и ра*шсткя «ракся^вяяых

я усяовно-траясгчавяых сокной (парсото поколения)

, Гц;1шы *а нотных ■

Первая мараете а . тршсгишые о 1 усдовво-трптапй а коитраяь -

1 2 •" 3 ■4-/ /8 6 • 7 . '

При рохдеяя» 3 1,84 ±0,111 • 19 1,60 ±0,072 10 1,18 ±0.019

21 день 3 5.53 ± 0,609 , 19 5,18 ±0,257 10 4,85 ±0,086

1 мес. 3 7,07 ±0,789 19 6,61 ±0,307 10 6,42 ±0,109

2 мес. г ' 3 13.88 ±1,589 19 11,62 ±0,628 10 11,60 ±0,240

3 мес. 3 21,68 ±2,79 19 22,05 ±1,274 10 20,85 ±0,508

4 мес. 3 42,25 ± 3,33 Г 19 37,47 ±1,597 10 37,23 ± 0,642

Продолжение табл. 5

1 2 3 4 5 6 7

5 мес. 3 60,00 ±6,124 19 52,21 ± 2,010 10 48,50 ± 0,642

> мес. 3 78,33 ±8,819 19 63,16 ±2,815 10 59,20 ± 1,249

Г мес 3 83,33 ±8,819 19 73,16 ±2,301 10 72,70 ±0,471 .

1 мес. 3 100,00 ±7,638 19 91,00 ±2,789 10 88,05 ±0,559 '

' мес. 3 134,33 ±3,480 19 124,68 ±3,229 10 118,53 ± 0,239

>0 мес. 3 138,33 ± 7,265 19 120,68 ±3,829 10 118,50 ±0,235

Различия в росте трансгенных животных второго поколения по гравнению с контрольной группой животных были значительными и со-:тавляли при (р < 0,01) при рождении, в три, четыре и пять месяцев 1ри (р < 0,05) в два месяца в шесть и семь месяцев при (р < 0,001). 1о сравнению с условно-трансгенными животными наблюдалось статмсти-¡ески недостоверная разница. Данные представлены в таблице 1? 6.

Таблица б Датеша роста я райвития трансгетшх и условно-трансгеияых свиней (второго поколения)

Кол- ПрЯ 1 2 : 3 « а 6 7

ЕШОТШК во ро*д. ММ. мае. . мее. маа. ЮО< мао. мае.

3 1,250 5,03^ 15,100 '28,400 46,67 59,00 70,50 90,00

■впям ±0,029 ±0,367 ±1,429 ±1,701 ±3,742 ±2,082 ±0,500 . ±0,01

'олсвяо- 19 1,19 5,18 14,37 28,71 44,57 59,92 75,69 92,15

раяс- 40,015 ±0,201 ±0,304 ±0,425 ) ±0,429 ±0,99^ ±0,444 ±0,608

■енпав

!ОШрОД1> 10 1,139 5,21 11,64. 22,00 35,90 51,70 63,14 78,29

10,019 ±0,227 ±0,615 ±0,691 ±0,809 ±1,513 ±1,6В2 ±1,6В6

Толщина шпика над 6-7 грудными позвонками в группе трансгенных юросят была достоверно меньше, как по сравнению с группой условно-рансгенных животных, так и с контролем. Измерениями данного пока-¡ателя в хрлк'? и пояснице достоверных различий не выявлено по срав-!ению с условио-трансгенными животными. В то вр.емя как по сравнению : контролем э,пи показатели были выше на 1-9% и 18% соответственно.

Убойный гыход мяса, длина туши, площадь мышечного глазка были ьпне у трансгенных животных, по- сравнению с группой условно-рансгенных поросят и поросят контрольной группы. Достоверной раз-

ницы выхода в туше мяса и. сала не наблюдалось, но в группе трансгенных поросят выход ылса был больше на' 2,5%, а выход сала на 41 меньше, чем в группе контрольных аивотных, а по сравнению с группой условно-трансгенных животных этц показатели были на и 1,2%

соответственно.. !

Различий затрат корма на единицу прироста у трансгенного и условно-трансгенного поголовья не выявлено, наблюдались достоверные снижения, на 14% при (р < 0,01) потребления корма у опытного поголовья.

Дифференциальный ' анализ .трансгенной и условно-трансгенной групп по химическому составу показал, что достоверных различий содержания воды, жира, золи и протеина в мясе не наблюдалось.

По таким физическим показателям, как цвет мяса, было обнаружено ослабление цвета в группе трансгенных животных при (р < 0,01) по сравнению с группой условно-транргешадх и контрольных животных.

* Незначительное снижение общегЬ 4 влаги было обнаружено при ■; (р < 0,1) . в I группе трансгенных животных й достоверное увеличение общего процента увариваеыости в группе трансгеннйх животных при (р < 0,1) по сравнению с животными условно-трансгенной группы.

ИШУНО-ТЕНЕТИЧ£С2СИБ ПАРАМЕТРЫ : УСЛОВНО'-ТРАИСГЕНИЫК ЖИВОТНЫХ

Использование иымуно-генатических методов при получении трансгенных свиней мотивировали, прежде всего, необходимостью объективного иммуногенетического контроля ; за происхождением полученных условно-трансгенных свиней. Во-Вторкх, осуществляя искусственный от. бор и подбор в опытной популяхЫи/ хотелось бы знать, какая генетическая изменчивость в стаде^х4^,п°лУч®нии трех последовательны: поколений, в какой мере услов|1с|-)грансгеынуе свиньи отличаются о* исходной, контрольной популяции.| ; V ' г.; '

Осуществляя искусственный ; отбор в популяции услЪвно трансгенных свиней первого и второго поколений, наряду с лучшим: показателями роста и развития «ля,последующего размножения, мы ос ' тавляли хрячков и свинок, происхождение которых было подтверждено ■ помощью.групп крови. •

н

выводы

1

1. Установлено, что внедрение в геном свиней рилизинг-фактора гормона роста человека положительно влияет на откормочные качества ;виней белорусской мясной породы не отражаясь на здоровье животных 4 не изменяя основные физические и,химические характеристики мяса и ;ала.

2. Впервые в Республике Беларусь при осеменении свиноматок белорусской мясной порош эамороженно-оттаянно'й спермой трансгенных кряков получено первое поколение условно-трансгешшх животных в ко-ничестве 72 голоп, а в результате лнбредного спаривания трансгенных «ряков и маток получено второе поколение в количестве 135 голов.

3. Методом полииеразиой цэпнйй реакции установлено, что процент интеграции гена рилизииггфактора гормона роста человека, при внедрении его в геном свиньи, составил 12% от числа исследованных животных.

4. Живая масса при рождении опытных свиней была на 18%, а хрячков на 28% выгае по сравнению с контролем.

5. Трансгонныо яивотныа первого поколеют росли на 14%, а второго поколения на 13% Солее интенсивно по сравнения со сверстниками

6. Трансгенные животные за период откорма затратили на 14% меньше корьюп, чем контрольные животные.

7. В группе траясгеннах свиней выход мяса в туше был на 2,5% больше, а выход сала на 4% маНызЬ (р < 0,05),- чем в контрольной группе. '

8. Результаты контрольного убоя не выявили достоверных различий по химическому и физическому составу мяса и сала между группами опытных и кон*рольних животных.

9. Установлено, что такие иммунологические параметры как частота встречаемости антигенов, генотипов, генная частота аллелей групп крови, генетическая дистанция между* популяциями, объективно отражают процессы изменчивости генетического профиля микропопуляции при интеграции' луена-рилйзинг фактора гормона роста человека.

! I6

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Рекомендуется селекционно-гибридным центрам и * свиноводческим комплексам использовать трансгенных хряков для совершенствования мясных-качеств белорусской мясной породы.

, 2. В селекционных программах рекомендуется использовани« трансгенных хряков с целью достижения топкроссинга для повышен»; гетерозиготности в белорусской мясной породе.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Киреев Г.Л., Горин В.В., Романов Ю.Д.,- Эрнст Л.К., Некрасо] A.A. Изучение роста и развития условно - трансгенных сви ней.//Материалы 2 междунар. конФ- «Актуальные проблемы биологии i животноводстве» 5-8 сентября 1995, Боровск, стр. 1вЗ

2. Киреев Г.Л. Получение и исследование условно-трансгенны свиней.//Сб. науч. трудов междунар. конф. «Актуальные проблемы ин тенсивного развития животноводства.» б-8июня 1996 г. Горки, 1996 стр. 167-169. I • ; ,

3. Киреев Г.Л., Горин В.В., Романов К),Д., Эрнст Л,К., Некрасо A.A. Получение и исследование условно-трансгенннх свиней.//Тез докл. междунар. конф. «Научные основы интенсивного развития ,живот новодства.» 1-3 сентября 1995 г. стр. 31. ,

- 4. КИреев Г.Л. Оценка качества туш и химического состава мяс при убое трансгекних свиней.//Сб. науч. трудов «Ветеринарные и зоо инженерные проблемы животноводства.» Витебск, 1996, стр, 183-184.

5. Киреев Г.Л. Рост, и' развитие условно-трансгенных сви ней,//Сб. науч. трудов «Зоотехническая наука Беларуси» - T.- 3Î Минск, 1996, стр. 122-129, ; :

6. V, ÍUnaanav./ S. Abraalcoví,, V. Letkevitch., A. Chevtsov, T. Rasrationok., G. Kireev. Experiments on obtaining of transgenJ animals.//Abstráete of 24 International Conference on aninal Genet les// Prague Czech Republic 23-29, July 1995.

7. Y. Romanov, G. Kiréev, W. Goryn,: L.* Ernst, PhenotypJ traits of transgenic pigs. //25 International conferenceon Anim; Genetics 21-25 july 1996. Veine. Topic 4, p. 385.

РЭЗЮМЕ

Рэзюме дысертацыйнай 1 працы К1рэева Генадз1я Львов1ча «Уплыу гена рыл1з1нг-фактару гармЬна роста чалавека на прадуктыуныя якасц! св!ней Оеларускай мясной пароды».

ГАРМОНИ, ГЕН, ГЕНОМ,ЭКСПРЭС1Я, 1НТЭГРАЦЫЯ, ТРАНСГЕН,РШ11Э1НГ- . ФАКТОР, С0МАТ0Л1ВЕРЫН. 1

Упершыню у Рэспубл1аэ Беларусь атрыыаны трансгенныя св1нь1, у геном як!х уОудован ген рьш1з1нг фактора гормона роста чалавека.

Установлена ыагчыыасць карыстання трансгенных хракоу у селек-Ьгйных праграмах дзеля паляшюння мясных якасцей св1ней.

• О '

РЕЗКМЕ

Резюме диссертационной работы Киреева Геннадия Львовича «Влияние гена рилизинг-фактора гормона роста человека на продуктивные качества свиней белорусской ыясной породы».

! ГЕН, ГЕНОМ, ГОРМОН, ЭКСПРЕССИЯ, ИНТЕГРАЦИЯ, РИЛИЗИНГ-ФАКТОР, . СОКАТОЛИВЕРИН. i

Впервые в Республике Беларусь получены трансгенные свиньи, в геном которых встроен ген рилизинг-фактора гормона роста человека. Установлена возможность использования трансгенных хрякоЬ в селекционных программах для улучшения мясных качеств свиней,

Л ' t

SUKMSKY

Thesis summery of Kireev Genadlj «The influence ,of humans gene of rilising - factor of grbwth hormone on the production qualities j pf Belarussian meat bried pigs».

GEN, GENOM, HORMON, EXSPRESSION,INTEGRETION, RILISING-FACTOR, SOMATOLIBERIN.

For the first time in Belarus transgenic pigs are bred into t genom of which the gene of' rili3ing - factor of humans growth hormone is introduced. The opportunity of' transgenic boars using in selection' programs for meal; qualities of pigs Improvement is determined. 1