Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

УРОВЕНЬ СУПЕРОВУЛЯЦИИ, КАЧЕСТВО И ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ГОРМОНАЛЬНОГО ПРОФИЛЯ КРОВИ КОРОВ-ДОНОРОВ МЯСНЫХ ГОРОД

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "УРОВЕНЬ СУПЕРОВУЛЯЦИИ, КАЧЕСТВО И ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ГОРМОНАЛЬНОГО ПРОФИЛЯ КРОВИ КОРОВ-ДОНОРОВ МЯСНЫХ ГОРОД"



всероссийский научно-ис след0влтельсй1й институт

животноводства

(в к 2)

Яэ правах рукописи • УЖ 612*646.02

Вэнатбаев Сорик Гэниелпч

уровщь слеровпяши, качество и прюгишшюсть

эмбрионов з зашсивдстк от гормонального проеш крови 1ЮРОВ-доноров мясшх погод

03.00.13 - Физиология человека к живогнцх

АВТОРЕФЕРАТ

диссертаций на соискание ученой степени кандидата биологических наук

п. Дубровицы Московской облаета 1995

О - 2 - ■ .■ .. '

Райота выполнена в отдела по трансплантации эмбрионов с.-х. ■ дивотыа Всероссийского научно-исследовательского института животноводства.

Научные руководителя - доктор биологических наук, профессор

- П.И.Сергеев зсэвдпдат биологических иэук, а. У.Байтлэсоа

Официальные оппоненты: доктор биологических наух, профессор

Б.П.Кснопэз

кандвдат бяолотчоскЕХ наук,

Л.Н.ЗариавскяЗ . .

Ведущее учреждений: Всероссийски цзучно-иссдедоЕательслий ееяекигтопш-гэнеткчеоккй институт . кшютноэодства

Защита диссертация состоится " '* С&у^и£--1995 г.

в " ¿¿О и часов ка заседании специализированного,совета

Д. 020.16.02 при Всероссийском научно-исследовательском институте

ХИВ0ТН0Р0ДС7Э.1.

Адрес института: 142012, Московская обл., подольский райоа, пос. Дубровиш,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ШЕЙ. Автореферат разослан 4 " ^¿у^-ТЙ 1995 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доктор биологических наук

- 3 -

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТА

Основной задачей сельскохозяйственного производства страна является полноо удовлетворенна потребностей населения- высококачэст-воигша продуктами питания. S Ж1вот1>оэодстве это должно осуществляться путем увеличения численности поголовья скота, создсшля проч-«0 Л кормов ой ¿0351, mis еден иовнх наиболее продуктивных пород, да- , пай и cot.iGiioi'b, совершенством нля содзкцеоняоЗ ра^отп, мдптавл&инуо ira щкскг.ольиоо непользсизпне ях генетического потенциала.

СУ L™ 6 С 5 В 6Ш i ИМ ПреШГГОТШСМ на пути JЗОЛЦЧВНЮТ ПОГОЛОВЬЯ BUSOKO-ценного крупного рогатого ^кота хпхяо 1'ся маяолдодле ii период эщжтягшя плода. й.'осто с том, сам:;:; крупного рогатого енота облэдзат огромным топотатистм потенциалом, 1!змзряс:.:;гм сот-нямл тысяч яйцеклеток, дз которых только незначительная часть их реализуется до конца их хозяйственного пользования.

Для осуществления этой задачи больное значение отводится новому йкотехнологг-ргвелому метода - трансплантации эмЗриопоа,

- Поль 1! эятачк исследований. Цоль псследований заключалась а усовершенствован метода отбора коров-доноров л роц!:пкентоа по гормональному пробили* п ;-:pt>3'i riep-Чд гормональной оdpлбо? г» У м пересадкой эмбриошв.

Для разросашш дашой цалк бшгл кестмдеъ'и елздувяцчэ задачт«:

-.изучить Г0рМО(ШЫ1!1Ё Ирофнль в 1ГС0ЯИ >,"Ш0Т;1Ш; в рЙЗШЗ период! t полового цикла;

- изучить влияние сезона года iio изучаешм докйзэтулям;

- определять оптимальнее условия синхронизации Слоты в осеменения коров-доноров с супоровуляцией.

На^чна^иовкзщ исследований заключается в определен:«! срлз:;

lis:'**

^овального..профиле крови коров-доноров и реципиентов перед "«ормональноЗ обработкой с уровнем сугорояуляции, качеством и пря-

центра-льная [

научная библиотека | Моск. сег.ь-кс;;« ЙКГ^ЬС.;^ L

касля'эмозтыа эьйрлонсв, а таюхе в нзучзнпи факторов, ъляявдах на результаты трансплантации.

Почтам-гоот-гля значимость ттаЗотк состо;-:? в разработке слсге:,^ целенаправленного отбора :: подготовки короэ-донороэ ц реципиентов о целью гллт/чеяир оптимального числа э:,:брт;о;юз.

Атообэикя получекних розулбтэтО!?. Основные положения диссертация дологены и полумили положительную оценку:

- на на у ч н о-мет од;: ч с сксИ конференция аспирантов и молодых ученых'"проблема внтенсифзяацки яявотноЕодетаа", пос.Дуброшцц, ВИЖ, 13-20 ишя 1921 г*;

- на П-Л ежре спу б лд;са н с ко й научко-щактичеокой конференции молодых ученых и опезиэлчстов "резервы увеличаиая производства и повышения качества сельскохозяйственной продукции", г.Оренбург, 1992 (£4-25 нарта).

ОД ш,: р-чботы. ®:ссертащ1.ц к а лоте на на 109 страницах мэшкно-гпсного текста, состоит нэ эзедоняя, обзоре литература, материала к методов, результатов собственных исследования, обсуаден^я, риао-' доз я практических продчокеиий. Содержат 2,2 таблиц, 5 рисунков и приложения. Список использованной литературы вклотэет , наименований, в том числе ¿03 иностранных.

2. АЙГШАЛ И ЫЕТСЩН ШСЛЕДОВЖЙ

Исследования проводили в плшзаводе "Чапаевский", совхозах "ЕерезоасккВ", лкэни М. Макетов ой, учебно-опытном хозяйстве "фрунзенское" западно-Казахстанской облает:! н в отделе трансплантации эмбрионов ЕШШй.

Б качестве доноров эмбрионов бшк использованы чистопородные пороги казахской белоголовой породы класса элитаФ элита-рекорд в возрасте 3-12 лет. Реципиентами служил:! те лвд.Гс лучного возраста^ (18-20 мес.) а молодые коровы (1-3 отелое) казахской белоголовой

порода, менее ценные в племенном отношения, клинически здоровые, без отклонений в репродуктивных органах и нормальной половой анклавов.

При проведении исследований максимально првдерхшэлксъ кроаз-водотаеншх условий и традиционной технологии раза сдан и содержания мясного скота. Кормление осуществляла с учетом фнзяологичео-кого состояния н продуктивности акзотних согласно норм и рационов, установленных и хозяйство. Пород гормональной обработкой у доноров и пересадкой у реципиентоз ректальной пальпацией определяли наличие а состояние жолтого гола в яйчяяко*

Для нияснепэд вЕзцг.госатаа ri сходных концентраций прсгесторопз п у страда о лй в кровя коров-допоров а реципиентов о результатами гормональных обработок ii переездок эмбрионов, отбор проб крови осуществляла пврзд началом обработок, а .цепь ссе:.;оаеоия( а дэиь азака-ченяя эмбрионов у «онорои к пород ¡¡о хирургической поросодной эморионов у рецпаношгов.

Определенно концвпттоцлЯ прогестерона и остродиола осуществлю-лз радионологотеck:lm матодок в лаборатории зоотехнической эндокринологии В112Й.

Для гер.монйльного вызывания ¡зупоровуляцип у коров -доноров использовала пропарат ЖГ-п (США) в дозах ¿2 а 50 ?.:х\ ССГ (фолллтро--пин) в дозо 1200 ИЕ, ГСКК (4GÎP) в дог,о ЗОСО ИЕ,

.Для ьызшшля окота п овуллцип поело лряивдзн;!.? ганадотровш»" препаратов внутряьщиечно в_одида: проста г до щцш (зотрофан) в дог„ 500 мкг.

Большинство ко ров-доноров балл гигамлшалроЕэны усшиэдащи препаратом "Теграадт" в дозе 5 и Ю w; на 2-й день эстрадного ла, геред гормональной обработкой*

Искусственное осемененкб коров-доноров осуществлял:; через A3

часов после рэедеияя эотрсфана дву-"- я трежратио с интервалом

3-10 часов двойной дозой свегаполучешюй разбавленной (1:3 я 1:6), Храишзагйся лр:1 0° спорой с а:япгоностыэ 5 баллов и концентрацией слергатозоядод более 30 млп/мл, а тшсже заморовеяно-оттаяшиШ спорной бы ко в-у лу чза те ле й, оценетшх по качеству потомства. Гфоме того, кспользорали естественное спаривание с бнкзшмтрон эводэто ля-ми (1-3 садяк),

Отбор коров-дэнорда, их гормональную обработку, оссманогше, неющурглчоскоо извлеченно, поиск « оценку качества за родам й, выбор реципиентов и шресадг.у эмбрионов шгаолнияи по методике ИЖЕа <1950).

Цифровой материал обрабатывалч биометрическим методом по Е.К.Меркурьевой (1576) с пржеиением про гра; руемого микрокалькулятора Ж-56.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Влияние разных гопэдотрсшшог на уровень суперовуляции л качество зародышей у корсв-докоров казахской белоголовой порода

Сравнительные':: скита нет препарата ГСЖК (ЧСФР) я глпсфгззрного гормона зсг (Литва) показали полное преимущество фоллитропяна (табл.1), Так, масло овуляций из донора было достоверно (Р. <0,05) выше на 335 положительного донора по извлечения». Статистическая достоверная разлада бала получена (?< 0,01) по выходу нормальных эмЗркопов составила 4.0 при наименьшем числе ншплодотзорекных яйцеклеток. '

В поисках путей повшения результативности гормонального вызывания сусерсвуляции у шснкх коров был проведен анализ действия разных аналогоз фоллнкулосткмуллрувдего гормона-разных фирм ФСГ (Литва) и ФСГ-п (СОД) (табл.2),

Не было выявлено особых различий в числа доноров с суиэрову-дяцкаЛ (65,0 и 87,5&), а такие овуляции на донора (9,45^0,17 и

: . '1. " ' ': . ' V'. '. ~' Таблица I

. Уровень суперовуляции и; качество эмбрионов у мясных норов в зависимости от тяпа гонадогропных препаратов

Показатель 4 1 гсшс- (ЧСФ?) Доза 3000 Фоллитропип (Виза) НЕ ■ 1200

Обработано коров I? 53 '

Реагировало супоровудяцаой' 12-70,5 45-85,0

Ч'.'.с.ю овул.<1ц:1Й на до по та • 2,4-0,82х 9, #0,17"

Полого тольнух докоров по :,'звл-эче1:1:а

эмйр-онов 7 ' 42

Процент от члела 53;3 93,3

Получено-но до;:от 6,1-Х[5

з той лпеле яор:далк;т: о;л5рг;онов 2,8^0,17^ 4,0=0,14^

Процент от ч::сда зэродккэ*: 45,3 53,8

дзгенермрозз нных 0,45^0,12 - 1,6*0,12

г; е ояло до творе нннх япце^сгок ,. 3,12^1,1 1,23-0,13

Кэчестно эмбрионов: отдцчнпз 0,52-0,2 0,(^0,1

■ . . хорошо ■ 1,57*0,7 2,^0,3

. удовлетворительно 0,71^0,4 1,1*0,2

X - : ; р < 0,05; XX - р < о,ох -

и 9,4*1,13) при Еарлзбедьиости 48,0 ц 45, - ^ Б тоже врежг прл обработке £ОГ (Литва). положительных доноров по извлечению эмбряонов бшю больае на Однако число эародьшй

на донора было в пользу ФСГ-п (США) и составило,7,5 против С,8. Таким образом, анализ подученных данных показал; что <КГ ,(-2-!тва) почти но уступает по своим бпологачей;га качествам 5СГ-Е (США).

Многими исследователями доказано, что несоответствий дозы и схемы применения ФСГ отрицательно сказывается на результатах супер-

овуляции. : ■

Таблица 2

Уровень суперовуляцщ к екход нормальных эмбрионоз при применен;« разных препаратов ФСГ

Показатель

ОС Г

Литзз США

Обработано коров ■ .. РЗ . 40

Реагировало оупоровуляцией (п-%) 45-35,0 35-87,5' "

Число овуляций на донора 9,4*0,17* 9,4*1,13х

Коэффициент изменчивости^ 43,0 45,0

Положительных доноров по извле- - ^ п ^ .

ченгао эмбрионов (п-%) ■ ои-оэ,/

Получено зародышей на донора 6,8*0,16 7,5*0,66

Лимит 1-13 г,- 3-18 '

В том числе: процент нормальных со йхх -".до лхх

эмбрионов 58,Ь

дегенерированных 23;4 16,4

неоплодотворенных яйцеклеток ' ■ 18,0 " - ' :. 14,6

х/ ? < 0,0Ь зОу/ Р-с 0,01

Наак исследова н ия били направлены на изучение действия разных . доз £СГ-л (США) на уровень суперовухчцна и качество э&;брноноз; у V мясных коров. Было испытано две дозы препарата: 50 от (стандартная, доза) и 42 мг (табл.3). ; ■ ; ; .

Данные табл.3 показывают, что коровы,- обработанное разными до-заш ФСГ-П (США), реагировали оуперовуляцпей с разницей-в 3,8£. Число овуляций достоверно повышалось (Р ^ 0,01) с уменьшенном дозы-ФСГ от 8,7 до 10,2 на донора. Вариабельность составила" 43,"Е^,1 .что" ; на 7,5* меньше, чем в первой группа. Отмечено также увеличение количества полояательных доноров по извлечению эмбрионов (94,1 против 77,7$). Число зародышй на донора оказалось меньше у коров, обра- ■ ботэвннх $СГ-п в дозе 50 мг. Аналогичные результаты были получены , я в числе нормальных эмбрионов/(3,6 и (¿,'8 на донора); или не -

больше. Из полученных данных следует, что для коров мясных пород оптимальной и более эффективной дозой ФСГ-п (США) является 42 мг.

Таблица 3

Результаты суперозуляции у клров в зависимости от дозы ФСГ-п

Показатель _Д°5а' _

50 42 •

Обработано коров 21 19

реагировало суперовулящел' (п-£) 10-05,5 17-89,4

Число на донора 10,2*1,Iх*

Коэффициент язмончивоотя,?) 50,6 43,1

Положительных допоров по извлечений эмбрионов 14 16

Процент от числа оперированных 77,7 94; I

получено зародышей на донора 6,1±1,17К 8,9*0,16*

В том число: нормальных эмС5р:;онол 3,6^,16** о.б^О.Г?1^

Процент от числа зародышей ■ 59,0 76,4

деген ерировашшх 1,4*0,15 1,0*0,12

неоплодотзоренних яйцеклеток 1,1*0,17 I,0*0,14

г/ Р < С,05 хх/ Р с 0,01 - •

3.2. Эндогонные л экзогенные факторы, влияющею на эффективность трансплантации эмбрионов.5 короз мясных пород

Учитывая внрзкепную сезонность размножения жиеотных [.мсных пород, нами былгг изучены физиологические воздажнос ишо лноце ¡и ого вызывания суперовуляции у короа,в разные сезоны года, а .также эти по-•казатели были, согюставлеш с уровнем прогестерона. Анализ проведенных исследований показал; что о изменением концентрации прогестерона по сезонам года изменилась результативность гормонального вызывания суперовуляции у коров, концентрация прогестерона в крови коров составила весной - 2,9 кг/ми; летом - 2,5 ег/и:; осенью -

3,7 нг/ил зжэй - 3,5 :!г/кл (табл.4).

ТабЛЛЦЗ 4

Уровень суггеровуляцкл, концентрации прогестерона и эстрадлола, число портальных эмбрионов у .коров в зап'дсшшстк от сезона года

Сезон года

Показатель

весна /■■ лето осень. . .;..зиш.

Обработано коров 19 ■ 26 28 37

Концентрация: -''у-

прогестерона, иг/мл 2,9*0,27 2,5^0,18 3,7*0,15 3,5^0,II

эстрадиола, нгАга 13,5*0,52 " 27,0^0,42 ■ 25,5*0,41 16,5*0,35

. . : .18.

Обработанных0^ 78,2 60,2 89,2 91,8

Число^овуляций на 9>0Й>4 7,4±0,ах 9,7*1,0 9,8*0,7х'

Коэ||й1|ент нзиэвта- 51>4 ,,8>4 48,0 40,5 Положительных доноров

по извлечению зароди- 12 16 ?0 31

оей. ' . . ■ ■.;■..

Процента числа опери- 60г0 83,9 80,0 83,7

Получено зародышей ; й я ■ ... " '1 V

на донора 6,5-0,В 4,9*1,0/ 7,3*0,5 , 8,4*0,8

КоэЦиодент изменчи- ^ 83,5 33,-1 55,5 Б том числе: -

Нормальных эмбрионов З,!^^^ й^О.о^ 5,4*0,5:':}С 4,6*0,6

Пооцонт от число зародышей 47,3 ' 60,1 73,9 54,8

дегенерированных 1,3*0,5 1,0*0,3х - 0,7*0,2х* 1,9*0,3х

ХЗт^1" 2,2^0,5Х 0,9*0,4х 1.2*0,2 1,^0,3 Ъ/ Р <0,05; зо:/ Р < 0,01

Наибольший процент квотных, реагирующих суперовуляцией, ¿нл в осенний к зимний периоды (89,2 и 91,0) и превосходили этот показатель на'20-22$ в летний период (69,¿%). Число овуляций на до-

нора по сезонам составило 2,8; 7,4; Э,7 и 3,8, сооипв-гимешо. Саши низкий коэйзкц'юнт изменчивости (40, был в зкмний период. Поло стольких доноров по извлечению зародышей било тттачесжи ОДЕК01С0ЕЖ1 <80; 83,9; 30 'Л 53,7%).

Разница мегда числом овуляций в летние г. зд:лш;д месяца била стэтнстпчески достоверной (р < 0,05). 3 сродно« да о^^' корову-донора ш. сезонам года бто долучо;:о 6,5;. 4,8; 7,3 и С,ч зародышей на донора.

■ ■ Число норма лык;: з!.тбр::сзо1! ¡и донора Сдло болю о осоиыэ (5,4) г злмон (4,6), а меньше ноской (3,1) " летом (Д, 9).

ИЗ ТГрПйОДЭНРТГХ дапяггя СЛО^уйТ ззддд дть, что успех гормонального з^знвзн::л суперосудяцм::. заЕЛс:;^ и ;.:грздодз:::юл отенет; от со-зоил года' п содержа ксогестероггл в коог-ц корои-донорои порэд горкогтдькоГ- обработкой. 3 оееппо-к:;^:::; лер:-:од поблюдсе-гся солее активная реакция ддвсштих на го.чйдотг-оп:::! I- более погназгиюе содержа низ прогестерона в дрок; коров, до;* в другие дзр.иедц года.

По д.зш|№:; ряда исследователе:! з-^д1:'л;;в1Юстъ визжания супер-ов;удягдш зависит от празпльного вдоорз д;:л начала оирзооткд, кото-рдо рзколгепдуют б пределах 8-7.',; рдзл астрального ц;д;ло.

Дашшз наших [¡сслэдозоад,'] покзиали, что длл зшиевння еулзр-ов;,д.тд:1Л из г.неннх короэ при еЕедзг:;::; препаратов ФСГ а разниэ дпл доловово цикла наиболее эйрз1:д.:Е!:ыгл язллс.тсд обработка пз э и ХО дки полового цпкло»•

3 »том случае реагирущих оусерозулящюи коров составляла '30,4 С 55^0/5, при;среднем выходе морфологически гюрмальних эмбрионов 6, 5^0,9 п 4,5*0,6, соответственно (р 0,01).

Одним изважных факторов при отборо коров в качестве доноров является возраст'короз (табл.5). -

■ ,.3 экспериментах использовали г.'ленцд коров разного возраста

(от 3 до 13 лет), особых различий в показателях овуляций, нор- ' малыш эмбрионов у коров разного возраста не выявлено. Отмочена тенденция, что с 3 зеленением возраста у ко рос повышается число овуляций и ззродшей, а такке выход кормэлытих эмбрионов.

Таблица 5

Число овуляций и нормальных эмбрионов у коров разного возраста

Возраст (лет)

Показатель -:-;-;-

3-5 6-9 10-13

Обработано коров 17 44 16 ■

Среднее число овуляций на донора 8,4-1,1 9,6*0,6 9,2*0,8

Коэффициент изменчивости,# 58,2 45,0 37,4

Получено зародышей 6,0*0,7 7,4-0,6 7,4*0,9

Процент от числа овуляций 71,4 76,г 80,4

Коэффициент изменчивости 52,3 60,0 52,0

в т.ч. нормальных эмбрионов 4,3*0,6 4,0*0,4 4,7*0,8

Процент от.числа зародыэей 71,6 54,0 63,5

Коэффициент изменчивости,^ 61,0 73,5 71,0

Технология выращивания телят вод коровама-мэтердан, используемая в мясном скотоводстве, создает благоприятные условия для

их роста и развития. "

Йлесте с тем имеются данные о том, что подсос оказывает больное влияние нэ результативность гормонального вызывания суперовуляции у короз мясных пород.

Влияние разной продолжительности лодсоса на результаты гормональной обработки коров наш! изучено на по тавотных. Опыт проводился в течэние двух лет, включая все сезоны, года. Исходя аз возрзста подсосных телят, животные были распределены на три группы. В качестве контроля были использованы коровы-доноры без телят, либо после отъема, либо повторно использованные в качестве доно- ■

ров (ТЗбЛ.6).

Таблица 6

Влияние подсоса на уровень суперовуляции и выход нормальных эмбрионов

•О

Позсззатель Копт-роль Продолжительность подсоса, ■ мео

до 3-х 3-5 более 5

Обработано коров 30 29 28 23

реагировало супеи-овуляцпей 23 24 . 21 18

Процент от числа обработанных 93,3 02,7 75,0 78,2

Число овуляций на донора 10,5*0,7 0,5*0,7 7,3*1,2 3,8*1,2

Козр^цпеит изменчивости , % 33, э 40,9 64,1 •18,3

полоштолышх доггоров по пзвлоченикз эмбрионов 26 21 17 15

Процент от числа оперированных 92,б 87,5 81,0 83,3

Получено зародился но донора 8,0*0,6 6,7*1,1 6,8*0,2 6,4*0,9

Коэффициент изменчивости, % 42,1 74,0 57,3 62,1

Б т.ч. нормальных эмбрионов 5,5*0,5х 3,8*0,6х 4,5*0,9 3,1*0,

Процент от числа зэро-дшвей 68,7 56,7 66,1 43,4

х/ ~ Р < 0,05; xx/ р < 0,01

данные табл.6 показывая?, что тавотаыо с наличием телят на подсосе ло всем показателям явно уступали контрольной группе (без телят). В опытных группах лучшие результаты по выходу нормальных эмбрионов' наблюдались у короэ-доноров, у которых возраст подсосных телят составлял 3-6 месяцев. По остальным показателям различия были невысокими и провести какую-то градации и выявить превосходный период в общей продолжительности подсоса не было возможным. Таким образом, можно заключить, "что на результаты гормональной

обработка :: крчостеошшх. смсришюз подсос скг.т-глое?

0?-;'1!.-?0лгг;с^ рой.г.экствяе. ■ '

для г,рпо.глолс\п'.5т сезон но-.".эктац^он кого окзструсп ;жо-

г;;о :;сслгч!.о£ател:- предлагают подсос. .2 шип; ■.

исследованиях т оргзпязогзд;: 'роглаглептлроЕаь;;-:.^ подсос в теяэ- :'.-..

месяца с 1-го дтш,' отшйззя- толят кз в часов. (1-я оштная) ч ко-

12 часов (П-я спи1 чая). в контрольной группе норови постоянно

и а ходили съ иле сто с то ля там;;. Во всех группах ггозрзот коров был..

одснзковнм (3 отела), а возраст телят от- 3 до 5 месяцев.(табл. 7),'

.Таблица 7 ■',;■-.

Суперопу.тиздая и выход нормальных эмбрионов у юс;;их -: коров при регламентированном подсосе . . V

ГЩ'ППИ ., . .. .V . ■ .v Показатель -:--——----

■ контроль ■■ •■• - ^ -4-_■ • ■ ' Т-(С час) г.~(12 час)

реагировало овуляцпей 6 ■ 5 5 - :

Число овуляций на донора 0,7*1,7 10,4*1,5 12,0*1;0 Коэффициент изменчивости, 45,4 32,0 35,0

Положительных доноров по п ,-_тт '.'* г -лД

извлечен™ зародшеи (п-:?> 4 : J-iw

Число зародышей на донора 2,2*0,4 3,0*1,5 6,8*0,6

внт.ч. нормальных эмбрио- ■ 1>0±0>2 3,2*1,5 4,6*0,6-

процент от числа зарода- 45>4 88,8 ' 67,6 .

Исследования показали,/что у. коров всех груш была ЮС2-ная реакция на ФСГ. В то ке время установлено, что при отъеме телят ' на 6 и 12 часов число овуляций на донора оказалось больше; |чем в контрольной группе при сравнительно низкой-вариабельности (32 и 35$)♦ Процент положительных доноров по'извлечению от чисАн ;one-, рированных <5ил на 33,3$ больше, чем в контрольной, диалогичные

данные были получены п по выходу зародышей и нормальных эмбрионов на донора. И отсвда следует вывод, что1 организация регламентированного подсоса, отнимая телят на б и 12часов, дазт возможность улучшить результата сутровуляцнл и еыход нормальных эмбрионов у мясных коров.

3.3. Концентрация прогостерона и эстрадиола в крови коров л уровень супоровуляции, число и качество эайрпонов

Питаются данные, свздетальствуодие о наличии прямой зависимости меуду концентрацией прогестерона в крови кород парод гормональной обработкой с показателям*! супоровуляции (табл.8).

Таблица 8

Уровень овуляции в зависимости от конца нтраш*;;

прогестерона и эстрадмола в крови коров перед гормональной обработкой

Количество Число Средняя концентрация

.корм овуляций прогсстооона, эстрадпсла,

ИГ/.лл нг/мд

19 12 п более

21 7-11

23 3-в

16 отсутствие

реакции

ххх/ Р < 0,00 Г

Анализ дэннгсс табл.8 показывает, что каждому уровга реакции личникои овуляцией соответствует определенный исходный гормональный фон. Особенно это выражено в отношении концентраций прогостерона. С повышением сродней концентрации его от до 5,4 нг/мл число овуляций увеличивается от 3-6 до 12 и более.

Аналогичной зависимости овулявди от концентраций эстрадиола но наблюдалось. С увеличением средних его значений от 21,5 до

5,4*0,г]:*** 24,5*0,95 22,0-1,03 2,4*0,23Х::Х 21,5±0,Э2 0,3*0,15 25,0*1,10

25,0 нг/мл реакция яичпиков либо совсем отсутствовала, либо увеличивалась до 12 и болео овуляций.

Только 23, О^'ороз? с исходной концентрацией прогестерона до 0,9 нг/мл реагировал;: су порозу ляцп ей яри среднем числе овуляций 4,0; зародышей - 2,5 и нормальных эмбрионов - 0,7 на донора (табл.9). Цри концентрации от 1,0 до 2,5 нгАш число реагярувдих коров увеличивается до 5CÍÍ. С повышением концентрации от 2,6 д^ 3,8 нг/мл с;.перовуляцлей реагировала 76,9!» хоров, прл достоверном (Р^О,ОГ) повкшнян среднего числа овуляций, зародшей я нормальных эглбр;юков на донора.

Таблица 9

Уровень супаровуляции н число нормальных эмбрионов в зависимости от концентрация прогестерона перед гормональной обработкой

Показатель

Концентрация прогестерона, иг/мл ДО 0,9 '1,0-2,5 2,6-3,8' 3,9-5,0'

Обработано коров 14 16 13 10 II

^ЭеПЛГ^' 4-33.0 5-50,0 10-76,3 10-100 П-100 докора°ВУЛЯЧИЙ НЭ 4'7±0'6 12,5*1,3 12,5*1,4

Коно?а3аР°ДШеЙ 2,5*0,3 3,4-0,5 5,4*0,6 7,9*1,2 8,5*0,4 в т.ч. нормальных 0,7*0,2 2,0-0,3 3,7*0,5 5,8*1,0 5,5*0,8 МГза^дЙГ 28,0 58,8 68,5 70,8 64,7

Прл значениях уровня прогестерона от 3,9 до 5,0 нгДи реагировали все обработанные нивотные с средним числом овуляцяй 12,5, зародышей 7,9 и нормальных эмбрионов 5,8 на донора. Прошение концентрация более 5,0 нг/мл дают аналогичные разультаты.

В исследованиях также было проведено сопоставление качества желтого тела перед гормональной обработкой с уровнен прогестерона и показателями суперовудяцга (табл.10).

. - Г7 -

Таблица 10

результаты су лерову лядин и концентрация прогестерона в зависимости от качества желтого тела пород гормональной обработкой

Качоство нелтого тела Показатель ,

отличное хорошо е да®

Число коров 21 13 20

Уровень прогестерона,нг/мл 4,7*0,8 3,6*0,4 2,8*0,7

реагировало су перо гулящей 20 16 17

Процент от числа обработанных 95,2 88,9 85,0

Число огуляцим па донора IX ,4*0,7]тс 10,6*0,6х 8,9*0,3

Полокаталькик доноров по 20 15

извлечен™ зародышей

Процент от числа оперированных 100,0 53,7 88,2

Получено зародышей на донора 8,1*0,8 6,9*1,1 5,6*1,2

В т.ч. нормальных 4,0*0,9Х 2,1*0,6

Процент от общего числа зародышей 66,6 57,9 37,5

*** Р < 0,001 х Р < 0,05

Результаты исследований показали, что между концентрацией

прогестерона в крова коров и качеством яелтого тела имеется некб-

яорая взаимозависимость, Так, пря отличном яедтом теле концентра-

о

пия прогестерона составляла в среднем 4,7; при хроием - 3,6; при удовлетворительном - 2,8 нг/мл. Число реагирующих суперовуляцией коров во всех 3-х группах заметно не отличалось. Однако качество желтого тела значительно повлияло на число овуляций и нормальных эмбрионов (11,4; 10,6 и 8,9 и 5,4; 4,0 и 2,1), соответственно.

Для сравнения эндокринного профиля у коров, проявивших различную реакцию на гормональную обработку 82 коровы разделили в зависимости от числа овуляций на 4 группы: I - число овуляций 12 и более; 2 - число овуляций 7-11; 3 - число овул,ций 3-6; 4 - животные, не реагярояавше на обработку.

Из рис. I видно, что у коров концентрация прогестерона в

/ &. -з у & с ? г /1 // и

/о ■

—г—т—!-1 ■ 4 | I 1 "■!-■ г

•3 $ с г * » /о //

Рис. I. Усрэдазк;1гя длнамсса про гест срок а в плазш крови у коров

при визыва]!?.:: еуперову^лщ!^., Де::ь О - каркй день сбработо I- прогестерон (нгДг.); 2 - дни

со I

суперозуляцкн, День О - первый день обработки, I - эстрзд:ол (ег/;лт); Z - дай

плазме крова в денг. обработки а I, 2 и 3-х группах достоверно вы-Ш9'С5г4: 4,1 и 2,4 иг/ж) по сравнению с 4-3 группой (0,9 нг/мл),' в которой отсутствовала сугаровуячций. В день охоты концентрацшт прогестерона бала низкой в I п 2 группе, чем в 3-4 группах, но различие не было статистическим достоверным. В день извлечения эмбрионов содержание прогестерона в крови резко увеличивалось в I, 2 и з-ей группах (14; 12,1 и 8,2 нг/мя) соответственно. В 4-ой группе оставалось почти на тш но уровне, что и до начала обработки.

Из рпо. 2 видно, 'Мо концентрация эстрадиола в плазме крови у коров в день обработка почти одинаковая. Но в день охоты уровень эстрадиачэ ензчитольио погашался в 1,2 и 3-еЙ группах (70,1; 60,0 в 43,2 иг/:,иг), сооткэтстаемно. в 4-й группе пик эстрадиола был оглашений я ярзвкаешйо его от исходного составило дкзь . 10 нг/i.vi.

Из приведенных данных следует, что определение содерзаная э плазме кроэа прогестерона и эстрэдкола е значительно раннее сроки дает возможность судить о состоянии репродуктивной систем: я прогнозировать результаты гормонального вызывания сушэрозуляции.

Для получения оптимальных результатов супзрозуляции у [лясшп: коров уровень прогестерона доляон быть нэ ¡.гекоо 2,5 иг/мя.

3.4. Морфологическая оценка качества эмбрионов шеи ого скотз

:■.?:[ исследовано 435 эмбрионов, получению: от мясных коров казахской ¡. ело голо вой породы н ахиру рги че сига.: методом m 7-о2 день полового :;шэ (тзбл.ц).

Из 435 исследованных эмбрионов пригодные для пересадки я криокойсерварозазяя снизались 326 (7SS) и дегенерировавши:. 109 (2S&). В том числе отличных - 67 ( 20,б), хороших - 175 ( 53,6), удовлетворительных - 73 (22,5) и условно годных - II (3,3$). Нормальные эмбрионы у мясных коров в ходе исследований в основ-

ном находились на стадии развития поздней мору.ты (180-57,6«) п ранней бдастоцпсты (84-25,7Я.

При изучена!! эмбрионов у коров-доноров мпсн1сс пород обнаружено некоторое особенности, которые за клались в Солее рыхлой структуре п насколько ослабленной связью ме^иу бла с т омарами. Нз-блкдалнсь некоторые различия в скорости развития одновозрастных эмбрионов у коров-доноров молочных и мясных пород. Если у перзих иа 7-ой день индуцированного цикла поэдшш морулн от общего числа нзвлечошшх эмбрионов составляют 35-40:£, то у последних доходило до 80&.

Таблица П

Стадия развития и качество амбрионов шспых

коров-доноров на день извлечения (п-£)

Стадия рэзрнтия : ~

Показатель Морула_Бластсцлстз

;_■_ ранняя 'поздняя ранняя поздняя ^ •

435

325-75,9

709-25,1

67-20,6 175-53,6 В4-25,0

Следует отметить, что с целью получения эмбрионов на стадии ранней блзстоцисты, которые лучие прпплвляктся при пересади и меньше подвергаются разруиешш при при ок онсерв иров а н ни, у мнених норов извлечение эмбрионов можно приводить на 7,5-6-й день после осеменения.

■ 3,5. Изучение эффективности различных методов синхронизации охоты и осеменения коров-доноров мясных пород

Большой интерес преде т^-ляет изучение эффективности синхрони-

Исследовано эмбрионов

Процент от общего числа

■ В т.ч.нормальных

Процент от общего числа:нормальных

дегенерированных

.Из числа нормзлшых

отличных

. хороших

удовлетворительных

47 239

II 54,7

22 188

6,7 57,6

25-53,2 51-21,4

3-13,6 22-11,7

7-31,8 108-57,4

12-54,6 58-30,9

104 45

24,0 10,3

84 32

25,7 9,8

23-21,5 10-23

20-23,8 22-68,6 52-62,0 8-25,0 12-14,2 2-6,2

-2 2- : . ■ /у- у^у

зацн:' охоты «квотных о использованием простагландана в комбинаций--с сывороточным и гипофизарнцм гонэдотрошшами. В процессе подготовка короны-доноры была разделены кэ 3 группы. У первой группы коров охоту сшпфонизпровали с помощью простагланд::нэ,:во второй-простагландин в сочетании с ГШЛС, в третьей - простагландин в ком-Синпцяк с ХГ {табл.12).

■. ТзСшщз 12" ■ Результаты с:шхрош:зац;!;; охоты у ко роз-до поров (п-£)

Показатель

прос^шш

4:10,10 шгютпцх 41 37 «V ^ и

Пришл:; ц эхо г;; 35-35,3 34-91,9 23-07,5

В том ч;гсло:

через 24 та с а 7-17,1 3-3,1 2—£, 3

через часов 2^70,4 25-70,I

через 72 часа 5-Т2.2 2-5,4 ■ 1-3,1

Не проявили признаков охоти 6-14,6 3-6,1 4-12,5

Число коров,пригодных в качества доно- 21-5.1.,2 24-64,8 20-62,5

рог

Установлено, что комбинированный .'.:этодЬ оинхрондзаццм способствуют более рпв ¡юморному проявлен::» ;;:ггвоа'(иг.:л признаков схот-г по эремокк, Число кот.10-! пр^'здчкк т; охоту чпрзз чао лось до 78Й. В группо корон, обработанных одн::м простаглацт^ном, 29,3£ кнвотпых охоту проявили э болез раннио плл поздно сро:с1, что на 16-10/3 было больсе, чзы при комбянкровакной -синхронизации.

Б наших исследованиях способ введения спер'да при ооезленснп:; .... коров с суперовудяцией оказал определенное влияние на результаты ■ оплодотворяемостп яйцеккеток я выход качественных экбрконрв .. (таблЛЗ). Г'

Шло выявлено, .что глубокое введение епзрмл прз !:сг;усствен- ; ном осеменении мясных коров позволяет полутать в среднем на доко-\ рэ по 3,8 и 4,1 морфологически Нормальных эмбрионов.. Прл'этом

.. : - 23 -

число неошюдотвореншх яйцеклоток уменьшается в 2,5 раза по сравнению с осеменением доноров виэо~цервикзльшм способом,

Табл;::;а 13

Влияние способа и кратности■осеменения коров-доноров на результаты извлечена.? эмбрионов

В'лзо-церэикэльныЗ рокто-цервико/.ьакй Показатель кратность ооемёненшТ

2 3 о 3

Число коров 10 9 21 18

Получено на донора:

овуляций 8,0*1,3 10,3*0,7 8,3*0,5 8,4*1,3

зародышей 7,1*1,0 3,9*0,9 7,7*0,5 8,0*1,2

в т.ч. нормальных эмбрионов 2,6*1,0 4,1*1,3 3,8*0,7 4,1*1,0

Процент от числа зародшьй 36,6 41,4 49,3 и,?.

дегенердрованных,% 23,9 30,3 36,4 32,5

не одлодотзо'оеккых яйцеклеток,% 39,5 28,3 14,3 16,3

Более высокие показатели по извлечению в качеству зародине3 била получены яря естественном осеменения короз бккэш-пронзвода-теллш (та Сл. К).

Таблица 14

результаты суперовуляшт а качество эмбрионов у коров-доноров при искусственном и естественном оселэке;(:ги

'Л :ку остренное_ £етеоТЕен1?св

Показатель Коатность осеменения

Чзсло коров

Среднее число овул цнй на донора

Получено зародилей на донора

э т.ч. нормальных

эмбрионов Процент от чзела зародышей

Оплодотворяемость яйцеклеток,%

2 3 1 г

31 2? 12 14.

9,2*1,1 7,6*0,6 8,1*0,9 9,6*1,3

5,2*1,1 4,4*Т,0 8,4*0,8 9,2*1,2

■'3,5*1,0 2,0*0,6 4,7*0,8 5,1*1,1

33,0 45,4 56,0 55,4

65, 52,2 76,2 78,2

При естественном осеменении в среднем на донора получено 8,'4 и 9,2 зародышей при одной и двух садках. Из .них 4,7 и 5,1 качественных эмбрионов, что составило 56,0 и 55,4$ от общего числа за- ; родыаей. Число неошюдотворенных яйцеклеток не превышало 23,8 и 21,8, что'в 1,5-2 раза меньше, чем при искусственном осеменении.

Оплодотворяемоеть при естественном спаривании повышалась на II и 26$.

3.6. Связ^ меэду гормолальнш фолом, пряживляомостью эмбрионов л розданном двоен у реципиентов

Исследования по определении опталалышх неходких концентраций прогестерона к эстрад ко лз в плазме кров;; проведено на 70 телках и коровах казахской белоголовой породы (табл.15).

Таблица 15

Пракивляешсть эмбрионов в зависимости от с од ерш пая

прогестерона и эстрадиола в крови решш центов

Концонтрацйя : число реци- сгельных' 1 lino цент

прогестерона,-зс'^юла, miaHTof> P^iP" СТЙЛЬ110СТП

0,3*0,05 45,0*4,1 16 Е 12^

^^¿О,^ 24,1-1,2 20 6 30,0

4,I*0,5XX;i 25,0*1,4 24 II 49,2/

7,5*0, 26,5*1,5 10 4 40,0

ххх/ р < 0,с"у

Д,; -"'.о та'кт,' 15 показ ива ют, что при низком уровнэ прогестерона (до ■ ;г/ш) концентрация эстрадкола возрастает в среднем.' до 45 иг/ приапвляемость эмбрионов при этом фоне была очень :У нлэкой (12,5$).

С уввличениэм концентрации прогестерона значительно спишется уровень э страда о ла в среднем ¡20 грушгам до 25,2 пг/мл, а при-яшвляемооть эмбрионов возрастала с 30,0 до 49,2$. С повышением концентрации прогестерона (в среднем до 7,5 нг/мл) наблюдается снижение результатов стельности (40,"05Е).

- 25 -

Нами изучена такке взаимосвязь мезду качеством эмбрионов п гормональным профилем в крови реципиентов.

При этом выявлена некоторая зависимость результатов стельности от гормонального профиля и качество эмбрионов.

С повещенном концентрации прогестерона увеличивалась и пр:;-жявляемость эмбрионов отличного к хорошего качества.

При уровне прогестерона до 2 нг/мд стельность отсутствовала, от 2 до 5 нгДга - 40,больше 5 нгАи - 33,9$.

Отмечена более высокая частота овуляций в правом яичнике, по сравнению с- левым (58,6 протлв 41,4^), однако это не оказывало влияние на уровень прогестерона и эстрадкола (3,5 нг/ыл и 29,3 :пг/мл против 3,3 нг/мл и 29,0 пг/мл).

; ■ результаты пркжяЕляемости свешполученних эмбрионе- прэниаа-ют показатели стельности от пересада заморояенно-оттаяшшх эмбрионов.

Одной из' основных 1эдач трансплантации эмбрионов в мясном скотоводстве является получение двоен, з наших исследованиях ставилась задача выяснить возможность получения двоен у щеного скота при нехкрурглческой перэ^здке, определить влияние гормонально-.го профиля на результативность пересадки 2-х эмбрионов реципиентам, (табл. 1$).

Лрияавляамость эмбрионов била наиболее высокой при пересадке двух эмбрионов отличного и хорошего качества в разные рога матки (65,2?). Установлено таетв, что при пересадке двух эмбрионов," один из которых удовлетворительного качества, прияивляешеть была достаточно высокой и составила 53,8?. Относительно числа пересаженных эмбрионов процент пр. ишвляе мости составил по группам: 52,0; 27,0 и 32,3. Концентрация прогестерона в крови реципиентов по -группам существенно не различалась.

■ Отелы двойнями зарегистрированы в первой группе - 4 (30,75)»

во второй - I (14,2£) и в третьей - 4 (40,0$).

Таблица-16

результаты получения двоен при нехируртаческой пересадке эьзбрионов

Группы

Показатель подсадка одного эготао-иа 2 эмбриона в один рог шткл 2 эмбтяо-на в таз-ныо юта катгл

Число реципиентов 25 13 17

Уровень прогестерона ,иг/;.:л 3,1-0,4 2,6*0,3 3,7*0 ,'6

Пересалено эмбрионов 25 26 34

Число стельнцх реципиент ш? 13 ту II

Процент стельности 52,0 53,0 35,2

Процент стельности о? ли пересага пик-: эмбриоказ 52,0 27,0 32,3

Число отелоэ дзопнлж 4 I

Процент двойназых отелов 30,7 14,2 40,0

Получено телят 16 3 15 .

При этом уровень двой;:евост;: нэ зависел от содор^нм прогестерона в шоен, но аяа у коров с бола о догшгппо;: но к-цантраппеЛ прогестерона а 3-5 группе - 3,7 нг/кд - 403, в 1-й группе - 3,1 нгДп - и 2-Я группу - 2,6 нг-Дк - 14,2;;.

Кэ дгтигх следует, что лупию показатели двоЛ-

невости у мх-нах коров мотшо получить при пересадке дг?ух э тарпонов в разные рога штки, а такко при контрлатералъко" нэроюдко, предю: }::-т.:л г,;:о осомепэишял кор осам-рсцк пи о п тан.

.3; 0.Щ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРВДЛОЗЯЗТЯ

1. , 'л.ркэарпий препарат ССГ (фоллитроппн) по свои:.! биологическим действиям но уступает другим ззрубеипзл аналогам подобного типа. Для мясных коров оптимальной дозой препарата $СТ-п (СК1А) следует считать 42 мг, фоллитропина (Литва) - 1200 ЕДГ которые обеспечивают получение в среднем 9,4-10,2 овуляций и 4,0-6,8 нормальных эмбрионов на донора.

2. Сезон года, возраст коров-доноров и подсос оказывают оп~

ределенное отрицательнее елитше па уровень супоровуляшш и выход нормальных эмбрионов у коров мчсиых пород.

3. Уровень супзровудяции и выход нормальных эмбрионов зависит от концентрации прогестерона в крови коров-доноров кэ день гормонально" обработки. Для получения оптимальных результатов супоровуляциа у мясных коров уровень прогестерона в крови должен бц|ь не менее 2,5 пг/мл,

4. Для синхронизации охоты у норов-донорсв к реципиентов целесообразно использовать простагладаш в сочетании с ГСЖ и ОСГ. Искусственное осеменение коров с сукоровуляциеЗ ректо-цервцкаль-ним способом дает возможность получать 3,8-4,1 и естественное осеыононив быками - 4,7-5,1 качественных эмбриона на донора,

5. Онтшлалыгля уровнем прогестерона в крови реципиентов парад пересадкой следует считать от 2 до 5 нг/мл, при котором можно получить до 50$ стельноетай посла пехирургзческоЛ пересадки. Более Ексокие показателя двойневости у мясных коров мошю получить при пересадке двух эмбрионов в раэгше рога матки (40^) при контрлатеральной подсадке предварительно освмененным«реципиентам (30,1

Практические предложения

При отборе мясных коров при использовании в качества доноров эмбрионов рекомендуется определить концентрацию прогестерона в крови перед гормональной -обработкой. Использовать коров в качестве доноров эмбрионов с концентратдаей прогестерона ив менее 2,5 нг/ш. Дня повышения прьнизляемости эмбрионов следует использовать реципиентов с концентрацией прогестерона в крови от 2 до 5 нг/мл.

- 28 -

Основные иолоденак диссертации опубликованы в следувдих работах: t .

1. Абуов А.Г., Еайтлесоэ Е.У., Калатбаев С.Г, Результата трансплаптацпп эмбрионов в «ясном скотоводство / Бпотехиолога-4öoiüi6 српош в технологии тралсалаптацпи ембрдошв* Бщл. туч. работ ВИЙ, £Ш1. 101, 19й1. С. 53-59.

2. Влияние гонадотропияа на суиоровуляцкп я выход нормальных э1<бр:;оков у шсннх коров-доноров / Абуов А.Г., Еайтлесов Е,У.. КбватЗаев С.]1., Акимов // №йор.\$1иотщй листок. - Алма-Ата, 1992, - 4 с.

3. Абуов Л.Г„, Кгшатбаев С.Г., Байтлссеп Б.У. llpasaama-мооть эыбраопов при г. ер оседке па да о i [новость // Тозлси докладов Хл можрэспублгкацской иаучпо-нрактичос кой конференции шлодих ученых к специалистов. - Оренбург, 1002. (24-25 ,\;арта) С. 120125.

4. Кзкатбаев С.Г., Еайтлесоп Е.У, Урсизопъ суаерозуляцяв и качество эмбрионов в зависаиостя от кедцентрацпя прогестерона в крови шекых пород коров перед гормонально И обработкой // Теэпск дошюдоа ЛИ региональной научно-практической конференция молодых уадшх и специалистов. - Оренбург. IS3-1. (7-8 апреля)

С. 3C8-3G9.

Пырпсако к печати 6.СЗД905 г.

Обхем ;з уч.нэп.л. S&423 21

_ î;;ras 20 зкъ. '

Участок спзратпанол ЕСл*иГра&и;: BH'Hi.il