Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Свойства и регуляция глутаминсинтетазы Azospirillum brasilense с разными степенями аденилирования

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Смирнова, Виктория Евгеньевна

Список сокращений и обозначений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Азоспириллы: характеристика рода и его экологических особенностей.!

1.2. Азотный метаболизм азоспирилл.

1.3. Бактериальные глутаминсинтетазы: катализ, структура и физико-химические свойства.

1.4. Регуляция активности1 и кинетические характеристики додекамерных глутаминсинтетаз.'.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования и условия его культивирования.

2.2. Разрушение клеток и получение грубого экстракта.

2.3. Хроматографические методы.

2.4. Определение концентрации белка.

2.5. Электрофорез в полиакриламидном геле.

2.6. Определение активности глутаминсинтетазы.

2.7. Определение степени аденилирования глутаминсинтетазы.

2.8. Метод кругового дихроизма.

2.9. Метод эмиссионной спектроскопии ядерного гамма-резонанса.

2.10. Получение пермеабилизированных клеток.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Влияние различных источников азота и углерода в среде культивирования на степень аденилирования ГС A. brasilense Sp245.

3.2. Получение электрофоретически гомогенных препаратов глутаминсинтетазы A. brasilense.

3.3. Исследование термостабильности глутаминсинтетазы.

3.4. Специфичность фермента к катионам двухвалентных металлов.

3.5. Кинетическое поведение глутаминсинтетазы при активации катионами двухвалентных металлов.

3.6. Влияние агглютинина зародышей пшеницы на активность и степень аденилирования глутаминсинтетазы.

3.7. Исследование вторичной структуры глутаминсинтетазы.

3.8. Изучение металлсвязывающих центров глутаминсинтетазы.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Свойства и регуляция глутаминсинтетазы Azospirillum brasilense с разными степенями аденилирования"

В последние годы проявляется повышенный интерес к микроорганизмам, обитающим в ризосфере возделываемых человеком растений. Известно, что высшие растения поддерживают на своих корнях существование целых бактериальных сообществ, которые, в свою очередь, активно фиксируют молекулярный азот атмосферы, передавая связанные его формы растению-хозяину (Vose and Ruschel, 1981; Умаров, 1986). Среди ассоциативных бактерий есть штаммы, способные колонизировать преимущественно внутренние части корня и проводящую систему растения-хозяина (Dobereiner et al., 1995). Эти бактерии получили название эндофитов. Они оказывают значительно более выраженное пози-♦ тивное влияние на рост и развитие растения-хозяина по сравнению с бактериями, не способными проникать внутрь корня (Steenhoudt and Vanderleyden, 2000; Dobereiner and Pedrosa, 1987). Среди азоспирилл, пожалуй, единственным штаммом, принадлежность которого к эндофитам строго доказана, является Azospirillum brasilense Sp245, природный симбионт пшеницы (Baldani et al., 1983; Assmus et al., 1995). Инокуляция пшеницы в полевых условиях этим штаммом приводила к более чем двукратному (237 % по сравнению с контролем) увеличению содержания азота в наземной части растения-хозяина (Dobereiner and Pedrosa, 1987). В связи с вышеизложенным изучение азотного обмена азоспирилл, в частности, A. brasilense Sp245, представляет большой интерес.

Глутаминсинтетаза (ГС) считается ключевым ферментом азотного обмеФ на, так как катализируемая данным ферментом реакция, с одной стороны, представляет собой единственный путь синтеза глутамина, а с другой -глутамин является донором аминогруппы в биосинтезе целого ряда клеточных метаболитов. В случае азоспириллы ГС, по-видимому, причастна к регуляции азотфиксации (Gauthier and Elmerich, 1977; Okon and Kapulnik, 1986) -процесса, лежащего в основе обеспечения растения экологически чистым азотом. В конце 80-х годов прошлого столетия структурный ген ГС А. brasilense был секвенирован (Bozouklian and Elmerich, 1986); таким образом, ф аминокислотная последовательность фермента к настоящему времени уже известна. В 90-х годах вышел ряд публикаций по ГС A. brasilense (Pirola et al., 1992; Беспалова и др., 1994; Bespalova et al, 1999; Чернышев, 1999). Усилиями итальянских и российских ученых ГС азоспириллы была частично охарактеризована: определены молекулярные массы мономерной и олигомер-ной форм фермента, изучены каталитические особенности среднеаденилиро-ванной ГС. В 90-е годы был также описан неизвестный ранее для глутамин-синтетаз тип регуляции активности фермента - регуляция экстраклеточным сигналом растения-хозяина (Antonyuk et al., 1993; Антонюк и др., 1997). Так, было установлено, что при росте A. brasilense Sp245 в условиях азотфиксации связывание агглютинина зародышей пшеницы (АЗП) с клетками азоспириллы приводит к увеличению активности ГС (Antonyuk et al., 1993), а также к активации биосинтеза данного фермента (Антонюк и др., 1997). Оставалось, однако, неизвестным, реализуется ли данный тип регуляции фермента только в азотфиксирующих условиях роста или он характерен для ГС азоспириллы независимо от азотного и кислородного статуса клетки.

Бактериальные аденилируемые глутаминсинтетазы считаются сложно-организованными ферментами как в отношении структурной организации, так и в отношении регуляции активности и биосинтеза фермента. Важно отметить, что представления о бактериальных глутаминсинтетазах ограничены пониманием строения и функционирования фактически только ГС энтеробактерий — Escherichia coli и Salmonella typhimurium (Eisenberg et al., 2000). Таким образом, важность ГС в азотном метаболизме бактерий, с одной стороны, и недостаточность сведений о строении и свойствах этого фермента у азоспирилл, — с другой стороны, - побудили нас продолжить изучение ГС A. brasilense и предпринять исследование, посвященное выделению, очистке и изучению свойств и регуляции ГС A. brasilense с разными степенями аденилирования.

Цель и задачи исследования

Целью данной работы было исследование свойств и регуляции глутаминсинтетазы - ключевого фермента азотного метаболизма почвенной ассоциативной бактерии A. brasilense.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Подобрать условия культивирования A. brasilense Sp245, индуцирующие образование глутаминсинтетазы с определенной степенью аденилирования.

2. Получить электрофоретически гомогенные препараты ГС азоспириллы с разной степенью аденилирования (для последующего изучения их свойств и регуляции); изучить термостабильность фермента.

3. Выяснить, зависит ли специфичность глутаминсинтетазы азоспириллы к Mg2+, Мп2+ и Со от степени аденилирования фермента.

4. Изучить кинетическое поведение неаденилированной формы глутаминсинтетазы в биосинтетической реакции.

5. Изучить влияние агглютинина зародышей пшеницы на активность глутаминсинтетазы у бактерий, растущих в аэробных условиях.

6. Исследовать вторичную структуру глутаминсинтетазы и оценить влияние на нее катионов двухвалентных металлов и степени аденилирования фермента.

7. Изучить связывание катионов в активных центрах фермента методом эмиссионной спектроскопии ядерного гамма-резонанса с использованием радиоактивного изотопа 57Со.

Научная новизна работы. Проведено комплексное исследование структуры и свойств глутаминсинтетазы, ключевого фермента азотного обмена азот-фиксирующей бактерии A. brasilense. Предложен новый метод определения степени аденилирования ГС, основанный на компьютерной обработке результатов электрофоретического анализа. Впервые получена неаденилированная форма бактериальной глутаминсинтетазы без использования мутагенеза и ковалентной модификации фермента. Впервые охарактеризована вторичная структура глутаминсинтетазы A. brasilense; установлено, что ГС азоспириллы является высокоструктурированным белком, до 77 % полипептидной цепи которой может быть представлено а-спиралью и Р-структурой. Установлено, что активный центр ГС A. brasilense имеет два металлсвязывающих сайта, вающих сайта, обладающие различным сродством к катиону Со2+ и различающиеся координационной симметрией. Впервые продемонстрирована возможность использования эмиссионной спектроскопии ядерного гамма-резонанса для изучения организации металлсвязывающих центров ферментов. Изучены каталитические особенности неаденилированной ГС A. brasilense; проведен сравнительный анализ кинетических характеристик неаденилированной и аденилированной ГС азоспириллы.

Практическая значимость работы. Полученные в нашей работе данные о ГС A. brasilense имеют существенное значение для понимания одного из важнейших процессов, протекающих в бактериальной клетке, - усвоения неорганического азота и, кроме того, расширяют представления об азоспирил-лах - важных в практическом отношении бактериях. Полученные сведения о ГС азоспириллы нашли применение при подготовке студентов старших курсов химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, биологического факультета СГУ им. Н.Г. Чернышевского.

Работа выполнена в Институте биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН в лаборатории биохимии в рамках темы «Изучение молекулярно-генетических механизмов узнавания, контакта и обмена метаболитами азоспирилл и культурных злаков» (научный руководитель заслуженный деятель науки РФ, профессор, д.б.н. Игнатов В.В., № гос. регистрации 01860024516) и в лаборатории биохимии растительно-бактериальных симбиозов в рамках темы «Особенности биохимии эндофитных и ассоциативных симбионтов рода Azospirillum» (научный руководитель д.б.н. Антонюк Л.П., № гос. регистрации 01200012855).

Работа поддержана грантами Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 01-04-48755), ИНТАС (проект № 96-1015) и Комиссии РАН по работе с молодежью (6-й Конкурс-экспертиза проектов, проект № 205).

Апробация работы. Материалы диссертации представлялись на 20th FEBS Meeting (Hungary, 1990), XII юбилейной конференции «Ферменты микроорганизмов» (Казань, 2001), 2nd International Conference on Trace Element Speciation in Biomedical, Nutritional and Environmental Sciences (Germany, 2001), 4 INTAS Interdisciplinary Symposium on Physical and Chemical Methods in Biology, Medicine, and Environment (Moscow, 2001), 7th International Symposium on Metal Ions in Biology and Medicine (St.-Petersburg, 2002), III Съезде биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), Первой региональной конференции молодых ученых «Стратегия взаимодействия микроорганизмов с окружающей средой» th

Саратов, 2002), 10 European Conference on the Spectroscopy of Biological Molecules (Hungary, 2003).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 работ в зарубежных и отечественных научных изданиях.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Смирнова, Виктория Евгеньевна

ВЫВОДЫ

1. Подобраны условия культивирования A. brasilense Sp245, индуцирующие образование глутаминсинтетазы с определенной степенью аденилирования.

2. Разработаны способы выделения и очистки глутаминсинтетазы A. brasilense Sp245, позволяющие получить электрофоретически гомогенные препараты с разной степенью аденилирования. Исследована термостабильность фермента.

3. Изучена специфичность неаденилированной и аденилированной (п=5,3) форм глутаминсинтетазы A. brasilense к катионам двухвалентных металлов. Установлено, что специфичность глутаминсинтетазы к Mg2+, Со2+ и Мп2+ зависит от степени аденилирования фермента.

4. Изучено кинетическое поведение неаденилированной глутаминсинтетазы А. brasilense. Установлено, что, как и в случае среднеаденилированной формы фермента, неаденилированная глутаминсинтетаза имеет сложное каталитическое поведение, не описываемое уравнением Михаэлиса-Ментен и зависящее от катиона, активирующего фермент.

5. Установлено, что при росте A. brasilense в аэробных аммонийассими-лирующих условиях агглютинин зародышей пшеницы не индуцирует активации глутаминсинтетазы и не влияет на ее степень аденилирования.

6. Изучена вторичная структура двух молекулярных форм глутаминсинтетазы A. brasilense: неаденилированной и аденилированной (п=5,3). Показано, что глутаминсинтетазы азоспириллы независимо от степени аденилирования является высокоструктурированным белком: до 78% полипептидной цепи представлено а-спиралью и ^-структурой. Установлено, что добавление катиона (Mg2+, Мп2+ или Со ) к свободному от металлов ферменту изменяет соотношение элементов вторичной структуры белка.

7. Впервые методом эмиссионной спектроскопии ЯГР с использованием еп радиоактивного изотопа Со изучены особенности организации активного центра глутаминсинтетазы A. brasilense. Показано, что активный центр фермента имеет два металлсвязывающих сайта, обладающих различным сродством к катиону Со2+ и различающихся координационной симметрией.

БЛАГОДАРНОСТИ

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 01-04-48755), ИНТАС (проект № 96-1015) и Комиссии РАН по делам молодежи (6-й конкурс-экспертиза проектов, проект № 205).

Автор выражает искреннюю признательность научным руководителям данной работы Л.П. Антонюк и А.А. Камневу за постоянное внимание и поддержку в ходе выполнения работы. Благодарю моих коллег, в соавторстве с которыми были выполнены отдельные части работы: заслуженного деятеля науки РФ, профессора Игнатова В.В., Л.А. Беспалову, О.Б. Серебренникову и О.И. Соколова (ИБФРМ РАН), Л.А. Куликова и А.А. Сапрыкина (химический факультет МГУ, Москва), М.А. Ванони (М.А. Vanoni, Dipartimento di Scienze Chimich, Fisiche-e Matematiche, Universita' degli Studi dell1 Insubria, Como, Italy), профессора Дж. Занетти (G. Zanetti, Dipartimento di Fisiologia e Biochimica Generali, Universita' di Milano, Italy), профессора Э. Кузманн и академика А. Вертеш (Kuzmann Е., Vertes A., Department of Nuclear Chemistry, L. Eotovs University, Budapest, Hungary). Хотелось бы высказать слова искренней признательности И.А. Куделиной (Институт биоорганической химии РАН, Москва) за помощь в работе по определению вторичной структуры фермента и профессору Ю.Д. Перфильеву (химический факультет МГУ, Москва), в группе которого были поведены эксперименты по анализу активного центра ГС методом эмиссионной спектроскопии ядерного гамма-резонанса. Благодарю рецензентов работы профессора В.И. Понасенко и О.В. Игнатова за внимательное критическое прочтение рукописи и А.В. Тугарову за помощь в оформлении иллюстративного материала.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Смирнова, Виктория Евгеньевна, Саратов

1. Акентьева Н.П. Функциональные группы активного центра и механизмы действия глутаминсинтетаз листьев гороха: Дис. . канд. биол. наук,- М., Ин-т биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, 1984. 174 с.

2. Антонюк Л.П., Игнатов В.В. О роли агглютинина зародышей пшеницы в растительно-бактериальном взаимодействии: гипотеза и экспериментальные данные в ее поддержку // Физиол. раст. 2001. — Т. 48, N. 3. - С. 427-433.

3. Антонюк Л.П. Множественные молекулярные формы глутаминсинтетазы растений гороха: Дис. . канд. биол. наук М., Ин-т биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, 1983.- 124 с.

4. Антонюк Л.П., Фомина О.Р., Игнатов В.В. Влияние лектина пшеницы на метаболизм Azospirillum brasilense: индукция биосинтеза белков // Микробиология. 1997. - Т. 67, N. 3. - С. 427-433.

5. Антонюк Л.П. Регуляция метаболизма бактерии Azospirillum brasilense Sp245: особенности азотного обмена и влияние лектина пшеницы (агглютинина зародышей пшеницы): Дис. докт. биол. наук.— М., Ин-т биохимии им. А.Н. Баха РАН, 2002.-374 с.

6. Баканчикова Т.И., Лобанок Е.В., Павлова-Иванова J1.K., Редькина Т.В., Нагапетян Ж.А., Майсурян А.Н. Подавление процесса опухолеобразования у двудольных растений штаммами Azospirillum brasilense // Микробиология. — 1993.-Т. 62, N. 3. С. 515-523.

7. Белимов А.А. Эффективность инокуляции ячменя смешанными культурами диазотрофов: Дис. канд. биол. наук-Л., ВНИИСХМ, 1990. 190 с.

8. Белимов А.А., Кунакова A.M., Груздева Е.В. Влияние рН почвы на взаимодействие ассоциативных бактерий с ячменем // Микробиология — 1998. -Т.67, N.4.-C. 561-568.

9. Белимов А.А. Взаимодействие ассоциативных бактерий и эндомикоризного гриба с ячменем при совместной инокуляции // Микробиология. 1999. - Т.68, N.1. -С. 122-126.

10. Белорукова O.K. Оценка характера взаимодействия озимой пшеницы с ассоциативными азотфиксирующими бактериями // Вестник Харьковского гос. аграрн. ун-та. Серия "Растениеводство", Харьков, 1998. С. 32-38.

11. Беспалова Л.А., Коршунова В.Е., Антонюк Л.П., Игнатов В.В. Выделение, очистка и кинетические свойства глутаминсинтетазы со средней степенью аденилирования из Azospirillum brasilense Sp245 II Биохимия. 1994. - Т. 59, вып. 1. - С. 55-61.

12. Беспалова JI.A. Глутаминсинтетаза Azospirillum brasilense: свойства и роль в азотном обмене: Дис. канд. биол. наук.- Саратов, РосНИПЧИ «Микроб», 1996.—125 с.

13. Волкогон В.В., Хальчицкий А.Е., Миняйло В.Г. Азотфиксирующие микроорганизмы корневой зоны райграса и костреца // Микробиологич. журн. — 1991. — Т.53, N.6. С. 3-10.

14. Волкогон В.В., Мамчур А.Е., Лемешко С.В., Миняйло В.Г. Азоспириллы — эндофиты семян злаковых растений // Микробиологич. журн. — 1995. — Т. 57, N.1.-C. 14-19.

15. Данг Хоанг Фыок Хьен. Глутаминсинтетаза Spirulinaplatensis: Дис. канд. биол. наук. М.: Ин-т биохимии им. А.Н.Баха АН СССР, 1988. - 132 с.

16. Джохаридзе Т.З., Радюкина Н.А., Пушкин А.В., Евстигнеева З.Г., Кретович В.Л. Множественные молекулярные формы глутаминсинтетазы в листьях гороха и тыквы // Докл. АН СССР. 1979. - Т. 247, N. 3. - С. 742-744.

17. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. М.: Мир, 1982 - 82 с.

18. Евстигнеева З.Г., Радюкина Н.А., Пушкин А.В., Переведенцев О.В., Шапошников Г.Л., Кретович В.Л. Очистка и физико-химические свойства глутаминсинтетазы хлоропластов листьев гороха // Биохимия. — 1979. — Т. 44. -С. 1303-1309.

19. Евстигнеева З.Г., Пушкин А.В. Глутаминсинтетаза, глутаматсинтаза и аспарагинсинтетаза // В кн: Молекулярные механизмы усвоения азота растениями / Под ред. Е.Н. Мишустина. М.: Наука, 1983. - С. 198-234.

20. Иманиси Ю. Биополимеры /Подред.В.В.Коршака,ИАЯмскова-М.:Мир, 1988.-544с.

21. Иосипенко А.Д., Сергеева Е.И., Антонюк Л.П., Игнатов В.В. Влияние лектина пшеницы на синтез индолил-3-уксусной кислоты у Azospirillum brasilense Sp245 // Докл. АН СССР. 1994. - Т. 336. - С. 554-561.

22. Иосипенко О.А. Лектины в процессе взаимодействия пшеницы с ассоциативными микроорганизмами рода Azospirillum'. Автореферат дис. . канд. биол. наук. — М.:ИФР РАН, 1996.-23 с.

23. Кауш М.В., Евстигнеева З.Г., Кретович B.JI. Роль перибактероидного пространства в регуляции аммонием синтеза глутаминсинтетазы в бактероидах Rhizobium lupini II Докл. АН СССР. 1984а. - Т. 274. - С. 745-747.

24. Кауш М.В., Евстигнеева З.Г., Пушкин А.В. и др. Множественные молекулярные формы глутаминсинтетазы бактероидов Rhizobium lupini, свойства и регуляция // Биохимия. 1984b. -Т. - 49. - С. 2012-2018.

25. Комина О.В. Глутаминсинтетаза и глутаматдегидрогеназа микро- и макросимбионтов азотфиксирующей ассоциации Azolla-Anabaena: Автореф. дис. . канд. биол. наук. -М., 1996. -23 с.

26. Корниш-Боуден Э. Основы математики для биохимиков. М.: Мир, 1983 - 144 с.

27. Королев Н.П. Функции лектинов в клетке // Итоги науки и техники. Серия "Общие проблемы физико-химической биологии", М.: ВИНИТИ. 1984.-Т. 1.-С.352.

28. Коэн Ф. Регуляция ферментативной активности. М.: Мир, 1986. - 144 с.

29. Кретович B.JL, Евстигнеева З.Г., Карякина Т.И. Молекулярные механизмы усвоения азота растениями. М.: Наука, 1983. - 160 с.

30. Кретович B.JL, Серебренникова В.М., Ауэрман T.J1. Регуляция активности глутаминсинтетазы кормовых дрожжей Candida tropicalis конечными продуктами обмена глутамина // Биохимия. 1976. - Т. 41 -. С. 167-174.

31. Мессбауэровская спектроскопия замороженных растворов / Под ред. А. Вертеша, Д. Надя. Пер. с англ. под ред. ЮД Перфильева.-М: Мир, 1998.-Гл. 6.-С. 271-293.

32. Неорганическая биохимия / Под. ред. Г. Эйхгорна. М: Мир, 1978.-Т. 1,2-1447С.

33. Никитина В.Е., Галкин М.А., Котусов В.В., Крапивина Л.И., Игнатов В.В. Влияние лектина пшеницы на азотфиксирующую активность Azospirillum brasilense II Прикл. биох. микробиол. 1987. - Т. 23, Вып. 3. - С. 389-392.

34. Никитина В.Е., Аленькина С.А., Пономарева Е.Г., Савенкова Н.Н. Изучение роли лектинов клеточной поверхности азоспирилл во взаимодействии с корнями пшеницы // Микробиология. 1996. - Т. 65, N. 2. - С. 165-170.

35. Позднякова Л.И., Каневская С.В., Леванова Г.Ф., Барышева Н.Н., Пилипенко Т.Ю., Богатырев В.А., Федорова Л.С. Таксономическое изучение азоспирилл, выделенных из злаков Саратовской области // Микробиология. — 1988. Т. 57, N. 2.-С. 275-278.

36. Пушкин А.В., Евстигнеева З.Г., Кретович В.Л. Определение активности глута-минсинтетазы в экстрактах из семян гороха по образованию ортофосфата // Прикл. Биохим. и микробиол. 1972. — Т.8, N. 1. — С. 86-91.

37. Пушкин А.В., Джохаридзе Т.З., Цупрун В.Л. и др. Четвертичная структура и некоторые свойства глутаминсинтетазы хлоропластов листьев тыквы // Докл. АН СССР. 1983. - Т. 271. - С. 234-237.

38. Пушкин А.В. Глутаминсинтетаза растений и микроорганизмов // Успехи биохимии. М.: Наука, 1990, Т. 31. - С. 25-49.

39. Расулов А. С., Евстигнеева 3. Г., Кретович В.Л. Физико-химические свойства глутаминсинтетазы хлореллы // Доклады АН СССР.- 1977.-Т. 223,N. 4. -С. 726-729.

40. Редькина Т.В. Механизм положительного влияния бактерий рода Azospirillum на высшие растения // Биологический азот в сельском хозяйстве СССР. / Под ред. Е.Н. Мишустина. М: Наука, 1989. - С. 132-141.

41. Садовникова Ю.Н., Беспалова Л.А., Антонюк Л.П. Агглютинин зародышей пшеницы является фактором роста для бактерии Azospirillum brasilense //Доклады АН СССР. 2003. - Т. 389, N.4.-C. 1-4.

42. Сараев В.В., Шмидт Ф.К. Вибронные аспекты координационного катализа // Координационная химия. 1994. - Т. 20, N. 4. - С. 256-261.

43. Софьин А.В., Комина О.В., Лосева Л.П., Шелмакова А., Бурцева О., Шамилов В.Р. Азотфиксирующие синцианозы: ферменты ассимиляции аммония у циано— бионтов // Тез. докл. 9 Баховского коллоквиума по азотфиксации. Москва, 2426 янв. 1995.-С. 52.

44. Ум аров М.М. Ассоциативная азотфиксация. М.: Из-во МГУ, 1986. - 136 с.

45. Федорова Л.С., Позднякова Л.И., Каневская С.В. Выделение азоспирилл из культурных и дикорастущих злаков Саратовской области // Микробиология. — 1985. Т. 54, N. 4. - С. 684-485.

46. Фишер М.Т. Участие шаперонина GroE в фолдинге и сборке додекамерной глутаминсинтетазы / Биохимия. 1998. - Т.63, вып. 4. - С.453-471.

47. Чернышев А.В. Физико-химические аспекты участия ионов металлов в метаболизме бактерии Azospirilhm brasilense: Дис. канд. хим. наук- Саратов, СГУ, 1999. — 174 с.

48. Abell L.M., Villafranca J.J. Effect of metal ions and adenylylation state on the internal thermodynamics of phosphoryl transfer in the Escherichia coli glutamine synthetase reaction//Biochemistry. 1991.-V. 30.-P. 1413-1418.

49. Abell L.M., Schineller J., Keck P.J., Villafranca J.J. Effect of metal-ligand mutations on phosphoryl transfer reactions catalyzed by Escherichia coli glutamine synthetase // Biochemistry. 1995. - V. 34. - P. 16695-16702.

50. Agarwala-Dutt R., Tilak K.V.B.R., Rana J.P.S. Isolation of Azospirillum from interior of various parts of some graminaceous plants //Z. Microbiol. -1991.-V. 146.-P. 217-219.

51. Adler S.P., Purich D., Stadtman E.R. Cascade control of Esherichia coli glutamine synthetase. Properties of the Рц regulation protein and the uridylyltransferase uri-dylylremoving enzyme // J. Biol. Chem. - 1975. - V. 250. - P. 6264-6272.

52. Alef К., Zumfit W.G. Molecular characterisation of glutamine synthetase from the nitrogen-fixing phototrophic bacterium Rhodopseudomonas palustris II Z. Naturforsch. 1981. - Bd.36, N. 3-4. - S. 784-789.

53. Alibhai M., Villafranca J.J. Kinetic and mutagenic studies of the role of the active site residues Asp-50 and Glu-327 of Escherichia coli glutamine synthetase I I Biochemistry. 1994. - V. 33. - P. 682-686.

54. Almassy R.J., Janson C.A., Hamlin R., Xuong N.-H., Eisenberg D. Novel subunit — subunit interactions in the structure of glutamine synthetase // Nature. — 1986. — V. 323.-P. 304-309.

55. Antonyuk L.P., Fomina O.R., Galkin M.A., Ignatov V.V. The effect of wheat germ agglutinin on dinitrogen fixation, glutamine synthetase activity and ammonia excretion in Azospirillum brasilense Sp245 // FEMS Microbiol. Lett. 1993. — V.110.-P. 285-290

56. Arsene F., Kaminski P.A., Elmerich C. Modulation of NifA activity by Pn in Azospirillum brasilense: evidence for a regulatory role of the NifA N-terminal domain // J. Bacteriol. 1996. - V. 178. - P.4830-4838.

57. Atkinson D.E. The energy charge of the adenylate pool as a regulatory parameter. Interaction of feedback modifiers //Biochemistry.-1968.-V. 7,N. 11.-P. 40304034.

58. Atkinson D.E. Regulation of enzyme function // Ann. Rev. Microbiol.-1969.-V.3.-P. 4648.

59. Baldani V.L.D., Alvares M.A., Baldani J.I., Dobereiner J. Establishment of inoculated Azospirillum spp. in roots of field grown wheat and sorghum // Plant and Soil. — 1986.-V. 90.-P. 35-45.

60. Baldani V.L.D., Baldani J.I., Dobereiner J. Effect of Azospirillum inoculation on root infection and nitrogen incorporation in wheat // Can. J. Microbiol. 1983. — V. 29. - P. 924-929.

61. Barbieri P., Zanelli Т., Galli E., Zanetti G. Wheat inoculation with Azospirillum brasilense Sp6 and some mutants altered in nitrogen fixation and indole-3-acetic acid production // FEMS Microbiol. Lett. 1986. - V. 36. - P. 87-90.

62. Bashan Y. Azospirillum plant growth-promoting strains are nonpathogenic on tomato, pepper, cotton, and wheat // Can. J. Microbiol. 1998. - V. 44. - P. 168-174.

63. Bashan Y. Interaction of Azospirillum spp. in soil: a review // Biol. Fertil. Soils. — 1999. -V. 29.-P. 246-256.

64. Bashan Y., de-Bashan L.E. Protection of tomato seedlings against infection by Pseudomonas syringae pv. tomato by using the plant growth-promoting bacterium Azospirillum brasilense // Appl. Environ. Microbiol. 2002. -V. 68, N. 6. - P. 2637-2643.

65. Bashan Y., Harrison K.S., Whitmoyer R.E. Enhanced growth of wheat and soybean plants inoculated with Azospirillum brasilense is not necessarily due to general enhancement of mineral uptake // Appl. Environ. Microbiol. 1990. - V. 56. — N. 3.-P. 769-775.

66. Bashan Y., Holguin G. Azospirillum-plant relationships: environmental and physiological advances (1990-1996) // Can. J. Microbiol. 1997. - V. 43. - P. 103-121.

67. Bashan Y., Holguin G. Plant growth-promoting bacteria: a potential tool for arid mangrove reforestation // Trees. 2002. - V. 16. - P. 159-166.

68. Bashan Y., Levanony H. Current status of Azospirillum inoculation technology: Azospirillum as a challenge for agriculture // Can. J. Microbiol. 1990.-V.36.-P. 591-608.

69. Bashan Y., Levanony H., Mitiku G. Changes in proton efflux of intact wheat roots induced by Azospirillum brasilense II Can. J. Microbiol. 1989. - V. 35. — P. 691-697.

70. Beijerinck M.W. Uber ein Spirillum, welches freien Stickstoff binden kann? // Zentralbl. Bakt. Parasiten. 1925. - Abt. II, Bd. 63. - P. 353-357.

71. Bender R.A., Kaaren A.J., Resnick A.D., Blumenberg M., Foor F., Magasanik B. Biochemical parameters of glutamine synthetase from Klebsiella aerogenes II J. Bacteriol. 1977.- V. 129, N. 2.-P. 1001-1009.

72. Bennett M.J., Schlunegger M.P., Eisenberg D. 3D domain swapping: a mechanism for oligomer assembly // Protein Sci. 1995. - V. 4, N. 12. - P. 2455-68.

73. Bernlohr R.W., Schreier H.J., Donohue T.J. Enzymes of glutamate and glutamine biosynthesis in Bacillus licheniformis II Current Topics in Cellular Regulation. -1984.-V. 24.-P. 145-152.

74. Bespalova L.A., Antonyuk L.P., Ignatov V.V. Azospirillum brasilense glutamine synthetase: influence of the activating metal ions on the enzyme properties // BioMetals. — 1999. -V. 12.-P. 115-121

75. Bhandari В., Nicholas D J.D. Some kinetic properties of a purified glutamine synthetase from bacteroids Glycine max // FEMS Microbiol. Lett. 1984.-N.25.-P. 129-131.

76. Boddey R.M., Baldani V.L.D., Baldani J.I., Dobereiner J. Effect of inoculation of Azospirillum spp. on the nitrogen assimilation on field grown wheat // Plant and Soil.-1986.-V. 95, N. l.-P. 109-121.

77. Bothe H., Klein В., Stephan M.P., Dobereiner J. Transformations of inorganic nitrogen by Azospirillum spp. // Arch. Microbiol. 1981. - V. 130. - P. 96-100.

78. Bothe H., Kronenberg A., Stephan M.P., Zimmer W., Neuer G. Nitrogen fixation and denitrification by a wheat-Azospirillum association // Azospirillum II: Genetics, Physiology, Ecology / Ed. W. Klingmuller. Basel: Birkhauser, 1983.-P. 100-113.

79. Bourret R.B., Hess J.F., Simon M.I. Conserved aspartate residues and phosphorylation in signal transduction by the chemotaxis protein Che Y // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V. 87. - P. 41-45.

80. Bozouklian H., Elmerich C. Nucleotide sequence of the Azospirillum brasilense Sp7 glutamine synthetase structural gene //Biochim. 1986. -N. 68. - P. 1181-1187.

81. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analyt. Biochem. 1976. - V. 72. - P. 248-254.

82. Brenchley J.E., Baker C.A., Patil L.G. Regulation of the ammonia assimilatory enzymes in Salmonella typhimurium II J. Bacteriol. 1975. - V. 124. - P. 182-189.

83. Burris R.H. Nitrogenases // J. Biol. Chem. 1991. - V. 266. - P.9339-9342.

84. Chiti F., Webster P., Taddei N., Clark A., Stefani M., Ramponi G., Dobson C.M. Designing conditions for in vitro formation of amyloid protofilaments and fibrils // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - V. 96. - P. 3590-3594.

85. Christiansen-Weniger C., van Veen J.A. NH4+-excreting Azospirillum brasilense mutants echance the nitrogen supply of a wheat host // Appl. Environ. Microbiol. — 1991-V. 57.-P. 5147-5152.

86. Clark D.D., Villafranca J.J. Isotope-exchange echancement studies of Escherichia coli glutamine synthetase // Biochemistry. 1985. - V. 24. - P. 5147-5152.

87. Cohen R.J., Benedek J.B. The functional relationship between polymerization and catalytic activity of beef liver glutamate dehydrogenase // J. Mol. Biol. 1979. — V. 129.-P. 37-44.

88. Colanduoni J., Nissan R., Villafranca J.J. Studies of the mechanism of glutamine synthetase utilizing pH-dependent behavior in catalysis and binding // J. Biol. Chem. 1987. - V. 262. - P. 3037-3043.

89. Colombo G., Villafranca J.J. Amino acid sequence of Escherichia coli glutamine synthetase deduced from the DNA nucleotide sequence // J. Biol. Chem. — 1986. -V. 261, N. 23. P.10587-10591.

90. Day J.M., Dobereiner J. Physiological aspects of N2-fixation by a Spirillum from

91. Emerich D.W., Burris R.H. Complementary functioning of the component proteins of nitrogenase from several bacteria // J. Bacteriol. 1978. - V. 134. - P. 936-943.

92. Eskert В., Weber O.B., Kirchhof G., Halbritter A., Stoffels M., Hartmann A. Azospirillum doebereinerae sp. nov., a nitrogen-fixing bacterium associated with the C4-grass Miscanthus // Int. J. Syst. Evolution. Microbiol. 2001.-V.51,N. l.-P. 17-26.

93. Fadel-Picheth C.M., Souza E.M., Rigo L.U., Funayama S., Yates M.G., Pedrosa F.O. Regulation of Azospirillum brasilense NifA gene expression by ammonium and oxygen // FEMS Microbiol. Lett. 1999. - V. 179, N. 2. - P. 281-288.

94. Florencio F.GJ, Marques S., Candau P. Identification and characterization of glutamine dehydrogenase in the unicellular Synechocystis PPC6803 // FEBS Lett. 1985. -V. 223,N. l.-P. 37-41.

95. Foor F., Janssen K.A., Magasanik B. Regulation of synthesis of glutamine synthetase by adenylylated glutamine synthetase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1975. V. 72. — p. 4844-4848.

96. Frey T.G., Eisenberg D., Eisenberg F.A. Glutamine synthetase forms three and seven stranded helical cables // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1975.-V.72.-P.3402-3404.

97. Frink R.L., Eisenberg D., Glitz D.G. Localization of the site of adenylylation of glutamine synthetase by electron microscopy of an enzyme-antibody complex // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1978. - V. 75, N 12. - P. 5778-5782.

98. Gabius H.J. Animal lectins // Eur. J. Biochem. 1997. - V. 243. - P. 543-576.

99. Gauthier D., Elmerich C. Relationship between glutamine synthetase and nitrogenase in Spirillum lipoferum II FEMS Microbiol. Lett. 1977. - V. 2. - P. 101-104.

100. Ginsburg A., Stadtman E.R. Regulation of glutamine synthetase in Escherichia coli II The enzymes of glutamine metabolism / Ed. S. Prusiner, E. R. Stadtman. -N.Y.:Acad. Press. 1973. - P. 9-43.

101. Ginsburg A., Stadman E.R. The enzymes. N.Y., L.: Acad. Press. - 1974. - P. 755-807.

102. Ginsburg A., Yeh J., Hennig S.B. and Denton M.D. Some effects of adenylylation of the biosynthetic properties of glutamine synthetase from Escherichia coli II Biochemistry. 1970. - V. 9, N 3. - P. 633-649.

103. Glutamine: Metabolism, Enzymology and Regulation / Ed. by J. Mora, O. Palacios. Acad. Press N.-Y., 1980. 295 p.

104. Hachimori A., Matsunaga A., Shimizu M., Samejima Т., Noso Y. Purification and properties of glutamine synthetase from Bacillus stearothermophilus II Biochem., Biophys. Acta. 1974. - V. 350, N 2. - P. 461-474.

105. Hague D.M., Martin S.R., Zetter M.S. Role of metals in enzymatic reactions. Part 5. Kinetics of ternary complex form // J. Chem. Soc. Faraday Trans. Pt I. — 1972. V. 1.—P. 37-45.

106. Hartmann A., Fu H.A., Burris R.H. Regulation of nitrogenase activity by ammonium chloride in Azospirillum spp // J. Bacteriol. 1986. - V. 165. - P. 864-870.

107. Hartmann A., Burris R.H. Regulation of nitrogenase activity by oxygen in Azospirillum brasilense and Azospirillum lipoferum // J. Bacteriol. -1987.—V. 169.-P. 864-870.

108. Haschemeyer R.H., Wall J.S., Hainfield J., Maurizi M.R. Promotion of the in vitro rena-turation of dodecameric glutamine synthetase from Escherichia coli in the presence of GroEL (chaperonin-60) and ATP // J. Biol. Chem. -1982.-N.257.-P.7252-7253.

109. Hebert E. Endogenous lectins as cell surface transducer // Biosci. Rep. 2000. - V. 20, N. 4.-P. 213-237.

110. Hendrix R.W. Purification and properties of groE, a host protein involved in bacteriophage assembly // Mol. Biol. 1979. - N. 129. - P. 375-392.

111. Hemmingsen S.M., Woolford C., van der Vies S.M., Tilly K., Dennis D.T., Georgo-poulos S.P., Hendrix R.W., Ellis R.J. Homologous plant and bacterial proteins chaperone oligomeric protein assembly // Nature. — 1988. — V. 333. P. 330-334.

112. Hohn Т., Hohn В., Wortz M., Smith P.R. Isolation and characterization of the host protein groE involved in bacteriophage lambda assembly // Mol. Biol. 1979. — N. 129.-P. 359-373.

113. Horowitz J. Role of nitrates in unstable angina pectoris // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1992.-V. 89. P. 10449-10453.

114. Jack R., De Zamaroczy M., Merrick M. The signal transduction protein GlnK is required for M/Z,-dependent nitrogen control of nif gene expression in Klebsiella pneumoniae I I J. Bacteriol. 1999. - V. 181, N. 4.-P. 1156-1162.

115. Jaenicke L., Jesior J.-C. Pig brain glutamine synthetases in interpretation of the sigmoidal kinetics for magnesium and adenosine triphosphate // FEBS Lett 1978. -V. 90.-P. 115-118.

116. Jain D.K., Patriquin D.G. Root hair deformation, bacterial attachment, and plant growth in wheat-Azospirillum associations I I Appl. Environ. Microbiol. 1984. - V.48. -P. 1208-1213.

117. James E.K. Nitrogen fixation in endophytic and associative symbioses // Field Crops Research. 2000. - V. 65. - P. 197-209.

118. Janssen K.A., Magasanik B. Glutamine synthetase of Klebsiella aerogenes: genetic and physiological properties of mutants in the adenylytion system // J. Bacteriol. — 1977. V. 129. - P. 933-1000.

119. Jirgensons B. Optical activity of proteins and other macromolecules. — Springer-Verlag, Berlin, 1973.-178 p.

120. Johansson C., Gest H. Adenylylation — control of the glutamine synthetase of Rhodop-seudomonas capsulata И Eur. J. Biochem. 1977. - V. 81, N. 2. — P. 365-371.

121. Kamnev A.A., Antonyuk L.P., Smirnova V.E., Serebrennikova O.B., Kulikov L.A., Per-filiev Yu.D. Trace cobalt speciation in bacteria and at enzymic active sites using emission Mossbauer spectroscopy // Anal. Bioanal. Chem.-2002.-V. 372, N. 3.-P. 431-435.

122. Kapulnik Y., Okon Y., Henis Y. Changes in root morphology of wheat caused by Azospirillum inoculation // Can. J. Microbiol. 1985a. - V. 31. - P. 881-887.

123. Kapulnik Y., Gafni R., Okon Y. Effect of Azospirillum spp. inoculation on root development and NO3" uptake in wheat (Triticum aestivum cv. Miriam) in hydroponic systems // Can. J. Bot. 1985b. - V. 63. - P. 627-631.

124. Karpati E., Kiss P., Ponyi Т., Fendrik I., de Zamaroczy M., Orosz L. Interaction of Azospirillum lipoferum with wheat germ agglutinin stimulates nitrogen fixation // J. Bacteriol. 1999.-V. 181, N. 13.-P. 3949-3955.

125. Khammas K.M., Agtron E., Grimont P.A.D., Kaiser P. Azospirillum irakense sp. nov., a nitrogen-fixing bacterium associated with rice roots and rhizosphere soil // Res. Microbiol. 1989. - V. 140. - P.679-673.

126. Kimura К., Yagi К., Matsuoka К. Regulation of Mycobacterium smegmatis glutamine synthetase by adenylylation // J. Biochem. 1984. -V. 95, N. 6. - P. 1559-1567.

127. Kimura K., Nakano Y., Matsuoka K. O-Phosphotyrosyl glutamine synthetase: modification of the nucleotide ligation site of adenylylated glutamine synthetase // J. Biochem. 1989. - V. 105. - P. 84-87.

128. Kimura K., Sugano S. Inactivation of Bacillus subtilis glutamine synthetase by metal-catalyzed oxidation // J. Biochem. 1992. - V. 112, N. 6. - P.828-834.

129. Kirchhof G., Hartmann A. Development of gene-probes of Azospirillum based on 23 S-rRNA sequences // Symbiosis. 1992. - V. 13. - P. 23-35.

130. Kleinschmidt J.A., Kleiner D. The glutamine synthetase from Azotobacter vinelandii. — Purification, characterization, regulation and localization // Eur. J. Biochem. — 1978.-N. 89.-P. 51-60.

131. Magalhaes F.M.S., Neyra C.A., Dobereiner J. Nitrate and nitrite reductase negative mutants ofN2-fixing Azospirillum spp // Arch. Microbiol. 1978.-V.l 17.-P. 247-252.

132. Magalhaes F.M.S, Baldani J.I., Souto S.M., Kuykendall J.R., Dobereiner J. A new acid tolerant Azospirillum species//Ann. Acad. Bras. Sci.—1983.—V. 55.—P. 417-430.

133. Magasanik В., Neidhardt F.C. Regulation of carbon and nitrogen utilization // Escherichia coli and Salmonella typhimurium. Cellular and Molecular Biology / Ed. F.C. Neidhardt.-Washington, D.C.: ASM, 1987. V.2.-P. 1318-1325.

134. Marchal K., Sun J., Keijers V., Haaker H., Vanderleyden J. A cytochrome cbb3 (cytochrome c) terminal oxidase in Azospirillum brasilense Sp7 supports microaerobic growth // J. Bacteriol. 1998. - V. 180, N. 21. - P. 5689-5696.

135. Matsuoka K., Kimura K. Conformational changes in Mycobacterium smegmatis glutamine synthetase induced by certain divalent cations // J. Biochem. — 1985. — V. 97, N. 4. — P.1033-1042.

136. Matveeva E.V., Sokolov O.I., Schwartsburd B.I. Isolation and immunochemical determination of glutamine synthetase from Azospirillum brasilense Sp245 // Abstr. 14th Int. Congr. on Biochem. Prague, 10-15 July, 1988. V. 3. - P. 50.

137. Maulik P., Ghosh S. NADPH/NADH dependent cold-labile glutamate gehydrogenase in Azospirillum brasilense II Eur. J. Biochem. - 1986. - V. 155, N. 3. - P. 595-602.

138. Maurizi M.R., Ginsburg A. Active site ligand stabilization of quarternary structures of glutamine synthetase from Esherichia coli II J. Biol. Chem. 1982. — V. 257, N. 12.-P. 7246-7251.

139. Meek T.D., Villafranca J.J. Kinetic mechanism of Ecsherichia coli glutamine synthetase // Biochemistry. 1980. - V.19, N. 24. - P.5513-5519.

140. Meers J.L., Tempest D.W., Brown C.M. Glutamine (amide): 2-oxoglutarate amino transferase oxido-reductase (NADP), an enzyme involved in the synthesis of glutamate by some bacteria II J. Gen. Microbiol. 1970. - V. 64. - P. 187-194.

141. Meister A. Catalytic mechanisms of glutamine synthetase; overwiew of glutamine metabolism // Glutamine: metabolism, enzymology and regulation. / Ed. J. More, R. Palacios. -N.Y.: Acad. Press, 1980. P. 1-40.

142. Merrick M.J. Regulation of nitrogen fixation genes in free-living and symbiotic bacteria // Biological Nitrogen Fixation. / Ed. G. Stacey, R.H. Burris, H.J. Evans. N.Y.: Chapman and Hall, 1992. - P. 835-876.

143. Miller R.E., Shelton E., Stadtman E.R. Zinc-induced paracrystalline aggregation of glutamine synthetase // Arch. Biochem. Biophys. 1974. - V. 163. - P. 155-171.

144. Mishkind M., Keegstra K., Palevitz B.A. Distribution of wheat germ agglutinin in young wheat plants // Plant Physiology. 1980. - V. 66. - P. 950-955.

145. Mishkind M., Raikhel N.V, Palevitz B.A., Keegstra K. Immunocytochemical localization of wheat germ agglutinin in wheat // J. Cell Biol. 1982. - V. 92. - P. 753-764.

146. Mishkind M., Palevitz B.A., Raikhel N.V., Keegstra K. Localization of wheat germ agglutinin-like lectins in various species of the Gramineae // Science. 1983a. - V. 220.-P. 1290-1292.

147. Mishkind M.L., Raikhel N.V., Palevitz B.A., Keegstra K. The cell biology of wheat germ agglutinin and related lectins // Chemical Taxonomy, Molecular Biology and Function of Plant Lectins / Ed. by R. Alan. N.Y.: Liss Inc., 1983b. - P. 163-176.

148. Mitchell A.P., Magasanik В. Purification and properties of glutamine synthetase from Saccharomyces cerevisiae II J. Biol. Chem. 1983. - V. 258, N 1. - P. 119-124.

149. Moss J., Stanley S.J. Inactivation of bacterial glutamine synthetase by ADP-ribosylation // J. Biol. Chem. 1990. - V. 265, N 34. - P. 21056-21060.

150. Nair S.K., Jara P., Quiviger В., Elmerich C. Recent developments in the genetics of nitrogen fixation in Azospirillum II Azospirillum II: Genetics, Physiology, Ecology / Ed. by W. Klingmuller. Basel: Birkhauser, 1983. - P. 29-38.

151. Nagatani H., Shimizu M., Valentine R.C. The mechanism of ammonia assimilation in nitrogen fixing bacteria // Arch. Microbiol. 1971. - V. 79. - P. 164-175.

152. Nakamura K., Stadtman E.R.Oxidative inactivation of glutamine synthetasesubunits // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984.-V.81.-P.2011-2015.

153. Nakano Y., Kimura K. Independent binding of Mn2+ and Mg2+ to the active site of Bacillus cereus glutamine synthetase // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. -V. 142, N. 2.-P. 475-482.

154. Natanaka M., Tashiki Т., Furukawa R., Tochikura T. Purification and some properties of glutamine synthetases from Bifidobacteria II Agric. Biol. Chem. 1987. - V. 51, N. 2.-P. 425-433.

155. Neyra C.A., Dobereiner J., Lalande R., Knowles R. Denitrification by N2-fixing Spirillim lipoferum II Can. J. Microbiol. 1977. -V. 23. - P. 300-305.

156. Neyra C.A., Van Berkum P. Nitrate reduction and nitrogenase activity in Spirillum lipoferum II Can. J. Microbiol. 1977 - V. 23. - P. 306-310.

157. Nosco P., Bliss L.C., Cook F.D. The association of free-living nitrogen-fixing bacteria with the roots of High Arctic graminoids // Arc. Alp. Res.-1994.-V. 26.-P. 180-186.

158. Ohnishi S., Koide A., Koide S. Solution conformation and amyloid-like fibril formation of a polar peptide derived from a beta-hairpin in the OspA single-layer beta-sheet // J. Mol. Biol. 2000. - V. 301. - P. 477-489.

159. Okon Y., Albrecht S.L., Burris R.H. Factors affecting growth and nitrogen fixation of Spirillum lipoferum II J. Bacteriol. 1976b. - V. 127. - P. 1248-1254.

160. Okon Y., Albrecht S.L., Burris R.H. Carbon and ammonia metabolism of Spirillum lipoferum И J. Bacteriol. 1976a. - V. 128, N. 2. - P. 592-597.

161. Okon Y., Heytler P.G., Hardy R.W.F. N2 fixation by Azospirillum brasilense and its incorporation into hostSetaria italica II Appl. Environ. Microbiol. -1983. V. 46. -P.694-697.

162. Okon Y., Kapulnik Y. Development and function of Azospirillum-inoculated roots // Plant and Soil. 1986. - V. 90, N. 1 - P. 3-16.

163. Okon Y., Labandera-Gonzales C.A. Agronomic applications of Azospirillum. An evaluation of 20 years worldwide field inoculation // Soil Biol. Biochem. 1994. -V. 26. - P. 1591-1601.

164. Okon Y., Itzigsohn R. The development of Azospirillum as commercial inoculant for improving crop yealds // Biotechnol. Adv. 1995. - V. 13. - P. 415-424.

165. Orr J., Haselkorn R. Kinetic and inhibition studies of glutamine synthetase from cyano-bacterium Anabaena 7120 //J. Biol. Chem.-1981.-V.256,N.24.-P. 13099-13104.

166. Oshtrakh M.I. Mossbauer spectroscopy of iron-containing biomolecules and model compounds in biomedical research // J. Mol. Struct. -1999.-V.480481.-P. 109-120.

167. Passaglia L.M., Van Soom C., Schrank A., Schrank I.S. Purification and binding analysis of the nitrogen fixation regulatory NifA protein from Azospirillum brasilense И Braz. J. Med. Biol. Res. 1998. — V. 31, N. 11 - P. 1363-1374.

168. Patriquin D.G., Dobereiner J. Light microscopy observations of tetrasolium reducing bacteria in the endorhizosphere of maize and other grasses in Brazil // Can. J. Microbiol. 1978. - V. 24. - P. 734-742.

169. Patriquin D.G., Dobereiner J., Jain D.K. Sites and processes of association between diazotrophs and grasses // Can. J. Microbiol. 1983. - V. 29. - P. 900-915.

170. Pedrosa F.O., Yates M.G. Regulation of nitrogen fixation (nij) genes in Azospirillum brasilense by ni/A and ntr (gin) type gene products // FEMS Microbiol. Lett. — 1984.-V. 2,N. l.-P. 95-101.

171. Pelanda R., Vanoni M.A., Perego M., Piubelli L., Galizzi A., Curti B. Glutamate synthase genes of the diazotroph Azospirillum brasilense. Cloning, sequencing and analysis of functional domains // J. Biol. Chem. 1993. - V. 268. - P. 3099-3106.

172. Pirola M.C., Monopoli R., Aliverti A., Zanetti G. Isolation and characterization of glutamine synthetase from diazotroph Azospirillum brasilense II Int. J. Biochem. — 1992. -V. 24, N. 11.-P. 1749-1754.

173. Plazinski J., Rolfe B.G. Analysis of pectolytic activity of Rhizobium and Azospirillum strains isolated from Trifolium repens И J. Plant Physiol.-1985.-V. 120.-P. 181-187.

174. Pontius B.W., Lett W.B., von Hippel P.H. Observations on catalysis by hammerhead ribozymes are consistent with a two-divalent-metal-ion mechanism // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - P. 2290-2294.

175. Provencher S.W., Glockner J. Estimation of globular protein secondary structure from circular dichroism // Biochemistry. 1981. - V. 20. - P. 33-37.

176. Ratti S., Curti В., Zanetti G., Galli E. Purification and characterization of glutamate synthase from Azospirillum brasilense II J. Bacteriol.-1985.-V.163,N.2.-P. 724-729.

177. Reddy P.H., Burra S.S., Murthy P.S. Correlation between calmodulin-like protein, phospholipids, and growth in glucose-grown Mycobacterium phlei II Can. J. Microbiol. 1992. - V. 38. - P. 339-342.

178. Redkina T.V., Mishustin E.N. Nitrogen-fixing microorganisms of the genus Azospirillum and their relations with higher plants // Interrelationships between Microorganisms and Plants in Soil. /Ed. V. Vancura,F.Kung.-Praha: Academia, 1989.-P. 263-267.

179. Reinhold В., Hurek Т., Fendrik J., Pot В., Gillis M., Kerster S.H., Thielemans S., Dedey J. Azospirillum halopraeferans sp. nov., a nitrogen fixing organism associated with roots of kallar grass // Int. J. Syst. Bacteriol. 1987. -V. 37. - P. 43-51.

180. Renu A., Tilak K.V.B.R., Rana J.P.S. Isolation of Azospirillum from the interior of various parts of some graminaceous plants // Zbl. Mikrobiol. 1991. - V. 146, N. 3.-P. 217-219.

181. Rowell P.S., Sampaio M.J.A.M., Ladha J.K., Stewart W.D.P. Alteration of cyanobacterial glutamine synthetase activity in vivo in response to light and NH/ // Arch. Microbiol. 1979. - V. 120, N 3. - P. 195-200.

182. Rudiger H. Plant lectins more than just tools for glycoscientists: occurrence, structure, and possible functions of plant lectins //ActaAnaL (Basel).-1998,—V.161.—P.130-152.

183. Rudiger S., Germeroth L., Schneider-Mergener J., Bukau B. Substrate specificity of the DnaK chaperone determined by screening cellulose-bound peptide libraries // EMBO J. 1997. - V. 16.-P. 1501-1507.

184. Schloter M., Hartmann A. Endophytic and surface colonization of wheat roots (Triticum aestivum) by different Azospirillum brasilense strains studied with strain specific monoclonal antibodies // Symbyosis. 1998. - V. 25. - P. 159-179.

185. Scott D.B., Scott C.A., Dobereiner J. Nitrogenase activity and nitrate respiration in Azospirillum spp. // Arch. Microbiol. 1979. - V. 121. - P. 141-145.

186. Segal A., Stadtman E.R. Effects of cobaltous ion on various catalytic parameters and on heterologous subunit interactions of Ecsherichia coli glutamine synthetase // Arch. Biochem. Biophys. 1972. - V. 152,N. 1.-P.356-366.

187. Shah S., Karkhanis V., Desai A. Isolation and characterization of siderophore, with antimicrobial activity, from Azospirillum lipoferum II Current Microbiology. -1992.-V. 25.- P. 347-351.

188. Shapiro B.M., Stadtman E.R. Regulation of glutamine synthetase. Reactivity of the sulfhydryl groups of the enzyme from Esherichia coli И J. Biol. Chem. — 1967. — V. 124, N21.-P. 5069-5073.

189. Shapiro B.M., Stadtman E.R. Glutamine synthetase (Escherichia coli) // Methods of Enzymology. N.Y.; London: Academic Press, 1970. -V. 17A. - P. 910-922.

190. Skerman V.B.D., Sly L.I., Williamson M. Conglomeromonas largomobilis gen nov., sp. nov., a sodium-sensitive, mixed-flagellated organism grom freshwater // Int. J. Syst. Bacteriol. 1983. - V. 33. - P. 300-308.

191. Song S.D., Hartmann A., Burris R.H. Purification and properties of the nitrogenase of Azospirillum amasonense II J. Bacteriol. 1985. - V. 164. - P. 1271-1277.

192. Stacey C, Baalen C.V., Tabita F.R. Nitrogen and ammonia assimilation in the cyanobacteria // Arch. Biochem. Biophys. 1979. - V. 194, N. 2. - P. 457-467.

193. Stadtman E.R., Shapiro B.M., Kingdon H.S., Woolfolk C.A., Hubbard J.S. Cellular regulation of glutamine synthetase activity in E. coli II Adv. Enzyme Regul. — 1968. V. 6, N. 2. - P. 257-289.

194. Stadtman E.R., Hohman R.J., Wittenberg M.E. Multiple molecular forms of adeny-lylated glutamine synthetase // Biochem. Soc. Trans. 1981. - V. 9, N. 2. - P. 69.

195. Stadtman E.R., Deuel T.F. Some kinetic properties of Bacillus subtilis glutamine synthetase // J. Biol. Chem. 1970. - N. - 20. - P. 5206-5213.

196. Stahl J., Henicke L. Investigation of the structure of glutamine synthetase from pig brain //Eur. J. Biochem. 1972. - V. 29, N. 3. - P. 401-407.

197. Steenhoudt O., Vanderleyden J. Azospirillum, a free-living nitrogen-fixing bacterium closely associated with grasses: genetic, biochemical and ecological aspects // FEMS Microbiol. Rev. 2000. - V.24. - P. 487-506.

198. Steitz T.A., Steitz J.A. A general two-metal-ion mechanism for catalytic RNA // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - V. 90. - P. 6498-6502.

199. Stephan M.P., Zimmer W., Bothe H. Denitrification by Azospirillum brasilense Sp7. II. Growth with nitrous oxide as respiratory electron acceptor // Arch. Microbiol. — 1984. V. 138.-P. 212-216.

200. Streicher S.L., Tyler B.M. Regulation of glutamine synthetase activity by adenylylation in the Gram-positive Streptomyces cattleya (nitrogen metabolism /covalent modification of proteins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1981. - V. 78. - P. 229-233.

201. Sun J., Peng X., Van Impe J., Vanderleyden J. The ntrB and ntrC genes are involved in the regulation of poly-3-hydroxybutyrate biosynthesis by ammonia in Azospirillum brasilense Sp7 // Appl. Environ. Microbiol. 2000. - V. 66, N. 1. - P.l 13-117.

202. Sunde M., Serpell L.C., Bartlam M., Fraser P.E., Pepys M.B., Blake C.C. Common core structure of amyloid fibrils by synchrotron X-ray diffraction // J. Mol. Biol. 1997. -V. 273.-P. 729-739.

203. Tarrand J.J., Krieg N.R., Dobereiner J. A taxonomic study of the Spirillum lipoferum group, with descriptions of a new genus, Azospirillum gen. nov. and two species,

204. Azospirillum lipoferum (Beijerinck) comb. nov. and Azospirillum brasilense sp. nov. II Can. J. Microbiol. 1978. - V. 24. - P. 967-980.

205. Tapia-Hernandez A., Mascarua-Esparza M.A., Caballero-Mellado J. Production of bacteriocines and siderophore-like activity by Azospirillum brasilense II Microbios. 1990. — V. 64.-P. 73-83.

206. Tate S.S., Meister A. Regulation of rat liver glutamine synthetase: activation by a-ketoglutarate and inhibition by glycine, alanine and carbamyl phosphate // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1971. - V. 68, P., N. 3. - 781-785.

207. Tempest D.W., Meers J.L., Brown C.M. Synthesis of glutamate in Aerobacter aero-genes by a hitherto unknown route // J. Biochem. 1970. - V. 117. - P. 405-407.

208. Tibelius K.H., Knowles R. Uptake of hydrogenase activity in denitrifying Azospirillum brasilense grown anaerobically with nitrous oxide or nitrate // J. Bacteriol. — 1984. -V.157.-P. 84-88.

209. Tien T.M., Gaskins M.H., Hubell D.H. Plant growth substances produced by Azospirillum brasilense and their effect on the growth of pearl millet (Pennicetum americanum L.) // Appl. Environ. Microbiol. 1979. - V. 37. - P. 1016-1024.

210. Tien T.M., Diem H.G., Gaskins M.H., Hubell D.H. Polygalacturonic acid transeliminase production by Azospirillum species // Can. J. Microbiol.-198l.-V. 27.-P.426-431.

211. Tischner R., Schmidt A. Light mediated regulation of nitrate assimilation in Synechococcus leopoliensis II Arch. Microbiol. 1984. -N. 47. — P. 1127-1162

212. Thomas M.D., Durbin R.D. Glutamine synthetase from Pseudomonas syringae pv. tabaci: properties and inhibition by tabtoxiline-b-lactame // J. Gen. Microbiol. — 1985.-N. 131. -P.1061-1067.

213. Tronick S.R., Ciardi J.E., Stadtman E.R. Comparative biochemical and immunological studies of bacterial glutamine synthetases //J. Bacteriol.-1973.-V. 115.-P. 858-868.

214. Tsuprun V.L., Boekema E.J., Pushkin A.V., Tagunova I.V. Electron microscopy and image analysis of the GroEL-like protein and its complexes with glutamine synthetase from pea leaves // Biochim. Biophys. Acta. 1992. -V. 1099.-P.67-73.

215. Tyler В. Regulation of the assimilation of nitrogen compounds // Annual Rev. Biochem. 1978.-V. 47.-P. 1127-1142.

216. Umali-Garcia M., Hubbel D.H., Gaskins M.H. Dazzo F.B. Association of Azospirillum with grass roots // Appl. Environ. Microbiol. 1980. - V. 39. - P. 219-226.

217. Valentine R.C., Shapiro B.M., Stadtman E.R. Regulation of glutamine synthetase. XII. Electron microscopy of the enzyme from Escherichia coli II Biochemistry. 1968. -V. 7.-P. 2143-2167.

218. Vanoni M.A., Rescigo M., Nuzzi L., Zanetti G., Curti B. The kinetic mechanism of the reactions catalyzed by the glutamate synthase from Azospirillum brasilense II Eur. J. Biochem. 1991 a. - V. 202. - P. 181 -189.

219. Vanoni M.A., Edmondson D.E., Rescigno M., Zanetti G. Curty B. Mechanistic studies on Azospirillum brasilense glutamate synthase//Biochemistry.- 1991b.—V. 30.-P. 11478-11484.

220. Vanoni M.A., Mazzoni A., Fumagalli P., Negri A., Zanetti G., Curti B. Interdomain loops and conformational changes of glutamate synthase as detected by limited proteolysis // Eur. J. Biochem. 1994. - V. 226. - P. 505-515.

221. Vanoni M.A., Verzotti E., Zanetti G., Curti B. Glutamate synthase: properties of the recombinant subunit // Eur. J. Biochem. 1996. - V. 236. - P. 937-946.

222. Vanoni M.A., Fischer F., Ravasio S., Verzotti E., Edmondson D.E., Hagen W.R. The recombinant subunit of glutamate synthase: spectroscopic and catalytic properties // Biochemistry. 1998.-V. 37.-P. 1828-1838.

223. Vanoni M. A., Curti В. Glutamate synthase: a complex iron-sulfur flavoprotein // Cell.

224. Villafranca J.J. Structure function correlates in glutamine synthetase //16 International

225. Congress of Biochemistry and Molecular Biology.-India, New Delhi, 1994.—V.l.-P. 124. Volpon A.G.T., De-Polli H., Dobereiner J. Physiology of nitrogen fixation in

226. Zimmer W., Stephan M.P., Bothe H. Denitrification by Azospirillum brasilense Sp7 1. Growth with nitrite as respiratory electron acceptor // Arch. Microbiol. — 1984. V. 138.-P. 206-211.

227. Zhulin I.B., Bespalov V.A., Johnson M.S., Taylor B.L. Oxygen taxis and proton motive force in Azospirillum brasilense II J. Bacteriol. 1996. - V. 178. - P. 5199-5204.