Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Свободнорадикальные процессы и антиоксидантная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Свободнорадикальные процессы и антиоксидантная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов"

005006953

/ 1а правах рукописи

МАЖИТОВА Марина Владимировна

СВОБОДНОРАДИКАЛЫ1ЫЕ ПРОЦЕССЫ II АНТИОКСИДАНТНАЯ ЗАЩИТА РАЗНЫХ ОТДЕЛОВ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ НА ЭТАПАХ ПОСТНАТАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА БЕЛЫХ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ДЕЙСТВИИ ПРОМЫШЛЕННЫХ СЕРОСОДЕРЖАЩИХ ПОЛЛЮТАНТОВ

03.03.01 - физиологии

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

12 янв ш

Астрахань, 2012

005006953

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Астраханский государственный университет»

Научный консультант Теплый Давид Львович

доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты Сердюков Василий Гаврилович

доктор биологических наук, профессор

Анищенко Татьяна Григорьевна

доктор биологических наук, профессор

Котельников Андрей Вячеславович

доктор биологических наук, доцент

Ведущая организация Институт эволюционной физиологии и

биохимии им И.М. Сеченова РАН

Защита диссертации состоится « 29 » февраля 2012 года в 14 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета

Автореферат разослан « б » .26уу года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

ОКЩЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАЬОТЫ

Актуальность исследования.

Ткань мозга характеризуется интенсивной генерацией активных форм кислорода в биоэнергетических и специфических нейрохимических процессах. Это создает благоприятные условия для окисления мембранных липидов, белков и нуклеиновых кислот. Продукты перекисного окисления липидов, к которым нервная ткань наиболее чувствительна, являются важным звеном регуляции функциональной активности нервной системы и имеют большое значение в формировании приспособительных реакций на уровне клетки (Флеров М.А. и др., 2000). Однако активация свободнорадикальных процессов существенно модифицирует функциональное состояние нейронов и может привести к их гибели (Ерин А.Н. и др., 1994). В этих условиях накопление продуктов ПОЛ и перекисного окисления белков повышает проницаемость мембран для ионов, что приводит к интенсификации синтеза Са2+ -зависимых протеаз и липаз, приводящих к гибели нервных клеток. Безусловно, этот механизм носит универсальный характер, однако в разных отделах мозга он может происходить по-разному, что определяется как структурной, так и функциональной гетерогенностью разных отделов мозга. Это, в свою очередь, предполагает необходимость адекватного для каждого из отделов мозга уровня свободнорадикальных процессов и соответствующей антиоксидантной защиты.

Исследования многих авторов указывают на тканевую специфику уровня свободных радикалов и эндогенных антиоксидантов в головном мозге у плодов (Прокопенко В.М.и др., 1995), однако без дифференцировки по отделам мозга, или указывают на особенности про- и антиоксидантной системы коры больших полушарий без указания на возрастные особенности (Райзе Т.Е. и др., 1994). Другие исследователи характеризуют особенности интенсификации свободнорадикальных процессов и ослабление антиоксидантной системы мозга и других функциональных систем организма при старении, аргументируя концепцию свободнорадикального окислени при старении Хармана-Эмануэля (Кольтовер В.К. 2000; Болдырев A.A. 2001, Хавинсов В.Х. и др. 2003, Коркушко О.В. и др., 2010).

Таким образом, налицо фрагментарность данных о возрастной динамике системы свободных радикалов и уровня антиоксидантов центральной нервной системы без дифференцировки на разные отделы мозга. Имеющиеся многочисленные данные выполнены, к тому же, с использованием разных методических подходов и на разных экспериментальных моделях.

Отмечается особое внимание исследователей на состояние системы про-и антиоксидантов мозга на этапе возрастной инволюции, особенно в связи с возрастной патологией мозга. Старение затрагивает все органические структуры организма человека.

Между тем знание основных промежуточных этапов формирования интенсивности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты представляет не только несомненный теоретический, но и практический интерес с учетом роли этих процессов в нормальном и патологическом формировании и функционировании разных отделов центральной нервной

системы, сопровождающихся развитием окислительного стресса.

Учитывая, что неблагоприятные факторы окружающей среды, способствующие развитию окислительного стресса такие как ионизирующая и ультрафиолетовая радиация, гипо- и гипероксия, загрязненность атмосферного воздуха, воды и пищи вредными химическими веществами, канцерогенами играют не последнюю роль в процессах старения, результаты исследований могут послужить основой для существенного углубления механизмов формирования возрастных особенностей свободнорадикапьных процессов и системы эндогенных антиоксидантов во всех отделах мозга на разных этапах постнатального онтогенеза.

Функционирующий Астраханский газоперерабатывающий завод вносит немалый вклад в общую экологическую обстановку области. Несмотря на то, что серосодержащий газ Астраханского месторождения относится к пульмотоксикантам, многочисленные работы свидетельствуют о наличии его выраженного нейротропного эффекта (Солнышкова Т.Г. 2003). Кроме того, аналогичные газоконденсатные месторождения имеются в Оренбургской области, Казахстане, Канаде, США, Китае. По содержанию сероводорода они уступают Астраханскому. Так содержание сероводорода и меркаптанов в Оренбургском газоконденсатном месторождении доходит до 4,5 %, в то время как в Астраханском - до 25 %.

Учитывая вышесказанное, исследование сдвига антиоксидантной -прооксидантной системы на разных уровнях центральной нервной системы в эксперименте на разнополых молодых и старых животных в условиях хронического воздействия серосодержащим газом, является, несомненно, актуальным направлением не только для Астраханской области, но и для других регионов России и зарубежья.

Цель исследования - определить стационарный уровень свободнорадикапьных процессов и антирадикальной защиты в разных отделах мозга на этапах онтогенеза разнополых животных, а также их модуляцию при действии промышленных серосодержащих поллютантов с последующей их коррекцией антиоксидантами.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности свободнорадикапьных процессов в разных отделах центральной нервной системы и плазме крови молодых и старых крыс разного пола.

2. Изучить изменения физиологической антиоксидантной системы в мозге и плазме крови самцов и самок белых крыс при старении.

3. Изучить влияние антиоксидантов с разным механизмом действия: а-токоферола и эмоксипина на свободнорадикапьные процессы и антиоксидантную защиту в плазме крови и разных отделах головного и спинном мозге молодых и старых белых крыс обоего пола.

4. Определить уровень ориентировочно-исследовательской реакции интактных самцов и самок белых крыс в двух возрастных группах и его изменение после введения антиоксидантов.

5. Выяснить возрастные, половые и тканевые особенности уровня свободнорадикапьных процессов и эндогенных антиоксидантов при хроническом воздействии (сероводородсодержащий газ Астраханского

месторождения) в разных отделах головного и спинном мозге и плазме крови белых крыс.

6. Изучить возможность корректирующего действия а-токоферола и эмоксипина на поведенческие реакции, молодых и старых белых крыс обоего пола на фоне воздействия сероводородсодержащим газом.

7. Определить возможность антиоксидантной коррекции свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в плазме крови и разных отделах головного и спинном мозге самцов и самок белых крыс двух возрастных групп (6 и 24 месяца) при хроническом действии серосодержащего газа.

Научная новизна.

Впервые показано разнонаправленное изменение свободнорадикальных процессов в разных отделах центральной нервной системы у разнополых животных и при старении.

Установлены половые и возрастные особенности поведенческих реакций интактных животных, а также неодинаковое изменение показателей поведения под действием антиоксидантов, серосодержащего газа Астраханского месторождения и их совместного влияния на самцов и самок белых крыс разного возраста.

Впервые проведено сравнительно-физиологическое исследование влияния двух антиоксидантов (а-токоферол и эмоксипин) с разным механизмом действия на показатели свободнорадикальных процессов плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы молодых и старых разнополых животных.

Впервые изучено изменение свободнорадикальных процессов и состояния антиоксидантной защиты разных отделах центральной нервной системы под влиянием промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Показана возможность коррекции а-токоферолом и эмоксипином смещения равновесий в системе прооксиданты - антиоксиданты в плазме крови и отделах центральной нервной системы, вызванного серосодержащим газом; установлены тканевые, половые и возрастные особенности влияния этих антиоксидантов на изучаемые показатели.

В результате комплексного исследования системы «липопероксидация-антиоксидантная защита» на разных уровнях центральной нервной системы решена проблема интегральной оценки антиоксидантпого потенциала экспериментальных животных на этапах постнатального онтогенеза в условиях «нормы» и при действии промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Теоретическая и практическая значимость.

В результате выполненных экспериментальных исследований и на основании проведенного теоретического анализа возрастных и половых особенностей свободнорадикальных процессов обоснована значимость поддержания определенного физиологического равновесия в системе прооксиданты - антиоксиданты в плазме крови и на разных уровнях центральной нервной системы разнополых крыс в процессе старения. Учитывая роль свободнорадикальных процессов в нормальном

функционировании разных отделов центральной нервной системы, и при развитии окислительного стресса, изучение формирования интенсивности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в онтогенезе представляет не только несомненный теоретический, но и практический интерес для формирования представлений о процессах старения и развитии различных свободнорадикальных нарушений под действием неблагопроятных факторов окружающей среды.

Изучено влияние а-токоферола и эмоксипина на свободнорадикальные процессы и уровень эндогенных антиоксидантов плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы интактных животных.

Исследованы закономерности изменения поведенческих реакций самцов и самок белых крыс на этапах постнатального онтогенеза под влияние а-токоферола и эмоксипина.

Установлены параметры изменчивости показателей про-, антиоксидантного баланса в плазме крови и на разных уровнях центральной нервной системы на фоне воздействия промышленного природного газа Астраханского месторождения. На основе проведенного анализа и соотнесение показателей свободнорадикального окисления и состояния антиоксидантной защиты в разных отделах головного и спинном мозге предложен способ интегральной оценки степени выраженности влияния промышленного природного газа Астраханского месторождения на изучаемые показатели самцов и самок белых крыс на этапах постнатального онтогенеза.

Выявлена эффективность антиоксидантной коррекции а-токоферолом и эмоксипином свободнорадикальных процессов на фоне воздействия промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. У крыс разного пола в процессе старения происходит разнонаправленное изменение показателей пероксидации липидов в центральной нервной системе: у самцов - повышение, а у самок - понижение конечных продуктов перекисного окисления липидов. Окислительная модификация белков у крыс обоего пола при старении повышается. Общая антиокислительная активность разных отделов ЦНС старых животных остается на уровне молодых, при неравнозначной модуляции отдельных звеньев эндогенной антиоксидантной системы.

2. Наиболее часто усиление свободнорадикальнх процессов в мозге происходит у самок под действием а -токоферола, нежели эмоксипина. Введение а-токоферола и эмоксипина молодом животным приводит к компенсаторному снижению активности эндогенных антиоксидантов, которое отличается степенью выраженности в разных отделах центральной нервной системы.

3. Хроническое действие серосодержащего газа Астраханского месторождения приводит к усилению свободнорадикальных процессов в ЦНС, что проявилось в росте окислительной модификации белков и, реже, продуктов окисления липидов. Наиболее глубокие нарушения про-антиоксидантного баланса под действием газообразного поллютанта отмечены у старых животных, что, вероятно, связано с истощением

антиоксидантного пула, с разной степенью выраженности на разных уровнях ЦНС у 24-х месячных самцов и самок крыс.

4.Антиоксидантная коррекция, примененная на фоне воздействия серосодержащим газом Астраханского месторождения, оказывает наибольший модулирующий эффект на свободорадикальные процессы, протекающие в плазме крови и центральной нервной системе старых животных.

Апробация работы.

Материалы диссертации докладывались и представлялись на Всероссийской конференции «Астраханский край: история и современность» (Астрахань, 1997), II Всероссийской конференции-школе «Высокореакционные интермедиа™ химических реакций» Chemlnl 2007 (Астрахань, Москва, 2007), 6-й Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, Москва, 2008), XV Международной научно-практической конференции. «Экология и жизнь» (Пенза, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные процессы в области химико-педагогического и естественнонаучного образования» (Оренбург, 2009), VII Международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования» (Тамбов, 2009), Всероссийской конференции с международным участием «Социально-экономические, валеологические и социокультурные аспекты развития рекреационных территорий Юга России», (Анапа, 2009), V Международной научно-практической конференции «Wschoünia Spolka-2009» (Польша, 2009), IV Всероссийском Съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Саратов, 2009), VI Международной научно-практической конференции "Vëda a technologie: krok do budoucno.sti-2010" (Прага, 2010), научной Международной конференции «Фундаментальные исследования» (Израиль, 2010), научно-практическом Симпозиуме с международным участием «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия» (Волгоград, 2010), III Съезде физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» (Ялта, Украина, 2011), научно-практической конференции «Актуальные проблемы геронтологии и гериатрии» (Санкт-Петербург, 201 1), Международной научно-практической конференции «Достижения, инновационные направления развития и проблемы современной медицинской науки, генетики и биотехнологии» (Екатеринбург, 2011), II Всероссийской научной конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение» (Астрахань, 2011 ).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 45 работ, общим объемом 19,25 п.л. (авторский вклад 17,38 п.л.) в том числе монография - 1, статьи в научных изданиях, рекомендованных ВАК для докторских диссертаций - 15, статьи в прочих рецензируемых журналах - 10, статьи в материалах международных научных конференций - 19.

Декларация личного участия автора.

Экспериментальные исследования выполнялись автором лично, либо при его непосредственном участии в коллективных работах. В совместных

публикациях вклад автора составил 50-100 %.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, главы собственного исследования, состоящей из 4 подглав, заключения, выводов и библиографического списка. Диссертация изложена на 277 страницах, содержит 56 таблицы и 9 рисунков. Список литературы включает 525 источников, втом числе 263 иностранных.

Автор выражает глубокую благодарность д.б.н. профессору Д.Л. Теплому за помощь в выборе актуальных направлений исследований, ценные критические замечания, оказавшие значительное влияние в формирование концептуальной основы исследовательской работы, д.м.н., профессору H.H. Тризно за неоценимую методическую помощь в постановке и проведении экспериментального исследования.

МЕТОДЫ И ОРГАНИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные исследовании были проведены в лаборатории экспериментальной физиологии Астраханского государственного университета, а также на кафедре патологической физиологии Астраханской государственной медицинской академии. Для достижения поставленных целей белые беспородные крысы были разделены на группы (по 10 животных) по половому и возрастному признакам: самцы и самки 6-ти месячного и 24-х месячного возраста. Формировали: контрольные группы (без воздействия) и опытные, получавшие в течение 14 дней перед декапитацией перорально а-токоферол в дозе 1 мг/100 г массы тела; получавшие в течение 14 дней перед декапитацией внутримышечно водный раствор эмоксипина (0,5 мг/100 г массы тела); получавшие ингаляторно серосодержащий газ (ССГ) в дозе 100 мг/м1 по 4 часа в день понедельник-пятница в течении 6 недель. Для изучения антиоксидантной коррекции части животных, получавшим ССГ, в течение 14 дней перед декапитацией вводили а-токоферол, другим группам - эмоксипин по выше указанной схеме. Для ингаляций использовался промышленный природный газ Астраханского месторождения. Все работы с лабораторными крысами проводили в соответствии с принципами биоэтики, согласно принципам гуманного отношения к животным и правилам лабораторной практики (Правила лабораторной практики в РФ, 2003). В день декапитации отбирались самки в фазе диэструса. Очередность фаз контролировали по картине влагалищных мазков (Кабак Я.М., 1968). Для исключения влияния тканевых факторов на изучаемые показатели забор крови осуществляли из нижней полой вены. Далее декапитировали животных. Все операции с лабораторными животными производили после наркотизации этаминапом натрия (40 мг/кг массы тела). Все исследования проводили в плазме крови и отделах мозга: большие полушария, промежуточный мозг, средний мозг, мозжечок, продолговатый мозг, спинной мозг, которые подвергали заморозке при -20 С0. Приготовление гомогенатов осуществляли на холоду непосредственно перед проведением исследований на фосфатном буферном растворе рН=7,45.

Для выявления ориенторовочно-исследовательской активности накануне перед опытом животных всех групп тестировали в «открытом поле» (Буреш Я. и др., 1991). Изменение числа эозинофилов контролировали по методике

Ронина B.C. с соавт. (1989). Окислительно-восстановительный потенциал (ОВП) измеряли на иономере И-130. Перекисное окисление липидов оценивали по содержанию продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-рп), скорости спонтанного ПОЛ (сп.ПОЛ), скорости индуцированного ПОЛ (Аск.ПОЛ). (Стальная И.Д. и др. 1977). Окислительную модификацию белков (ОМБ) определяли по методике Е.Е. Дубининой с соавт. (1995), уровень метаболитов оксидов азота - по методике В.А. Метельской с соавт. (2005). Общую антиокислительную активность (АОА) оценивали по методике Г.И. Клебанова с соавт (1988). Определяли активности каталазы (Королюк М.А., и др., 1988), супероксиддисмутазы (СОД) (Чевари С. И др. 1984), содержание жирорастворимых витаминов: А, Р-каротина, а-токоферола, а также метаболитов а-токоферола - а-токоферилхинона (ТФХ) и оксотокоферола (ОТФ) (Tailor S.L. et all., 1976).

Статистическая обработка полученных данных производилась с использованием программы «EXCEL». Для оценки вариационных рядов и достоверности результатов исследования использовали показатели: М -средняя арифметическая величина; 5 - среднее квадратичное отклонение; С -коэффициент вариации; m - средняя ошибка для средней арифметической. Достоверность различий двух средних или относительных величин определяли с помощью критерия I Стыодента. Уровень значимости Р=0,05, рекомендованный для биологических и медицинских исследований, определялся при 1=2,10 (n> 10).

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ 1. Изучение половых и возрастных особенностей свободнорадн-кальных процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы белых крыс

Учитывая разнородность экспериментальных результатов, представленных в литературе, а также наличие половых различий в антиоксидантной защите и особую роль свободных радикалов при старении, для достижения поставленных целей были изучены особенности протекания свободнорадикапьных процессов и антиоксидантной защиты в половом и возрастном аспекте у интактных животных.

При сравнении показателей пероксидации липидов и белков в плазме крови обращает на себя внимание факт, что содержание ТБК-рп (Р<0,05) и содержание окисленной модификации белков (Р<0,05) у молодых самок имеет более низкие значения по сравнению с самцами того же возраста, в то время как скорость аскорбатзависимого ПОЛ у молодых самок, напротив, значимо выше и составляет 61,22±3,061 нмоль/ч (Р<0,01 в сравнении с самцами).

С возрастом у самцов и самок произошло увеличение всех показателей ПОЛ и содержания окисленных белков (Р<(),05 - Р<0,0()1). Однако, несмотря на рост этих показателей у животных обоего пола, у старых самцов это увеличение произошло в большей степени и превысило таковые самок в старшей возрастной группе. Так у самцов ОМБ с возрастом увеличилось с 0,54+0,016 до 0,98±0,034 мкмоль/мг белка (Р<(),0()1 по сравнению с молодыми самцами), а у самок - с 0,48±0,017 до 0,69±0,027 мкмоль/мг белка (Р<0,()01 по сравнению с молодыми самками).

Полученные результаты свидетельствуют также о половых различиях в содержании метаболитов N0 в плазме крови у животных двух возрастных групп. У молодых самок этот показатель в плазме крови составил 78,35^=5,103 мкмоль, что в 2,6 раза больше, чем у молодых самцов. Однако, с возрастом картина меняется на противоположную в ходе снижения уровня метаболитов N0 у самок, и повышения - у самцов и в плазме старых самцов содержание конечных продуктов окисления N0 превысило этот же показатель старых самок на 24 %. Исследования О.В. Семячкиной-Глушковской с соавт. (2008) показали, что гонадоэктомия сопровождалась существенным снижением базальной продукции N0 у самок, но не у самцов. Поэтому в нашем случае, вероятно, уменьшение содержания конечных метаболитов N0 у самок с возрастом связано со снижением уровня гормонов, в том числе и эстрогенов.

В плазме старых самцов и самок, нами обнаружено, что содержание ТБК-рп, скорость спонтанного ПОЛ, уровень ОМБ у самок по прежнему остается более низким, чем у самцов, а уровень N0 метаболитов значимо снижается как по сравнению с молодыми самками (Р<0,05), так и по сравнению с самцами той же возрастной группы (Р<0,05).

Полученные данные свидетельствуют о более высокой (на 24 %) АОА плазмы крови молодых самок, которая хоть и снижается с возрастом с 72,14±2,597 % до 63,90±2,636 % (Р<0,05), но остается значительно выше, чем у самцов той же возрастной группы (Р<0,001). Несмотря на то, что активность катапазы имеет примерно одинаковое значение у молодых самцов (31,06±1,74 у.е./мг белка) и самок (28,34±1,73 у.е./мг белка), в ходе старения активность этого фермента увеличилась и в плазме крови самцов (на 16 %) и в плазме крови самок (на 20,5 %). Такое повышение активности катапазы с возрастом может быть как результатом снижения прочности эритроцитарной мембраны, что привело к повышению концентрации катапазы в плазме крови, так и иметь компенсаторную направленность на фоне снижения АОА плазмы крови с возрастом. СОД имеет неодинаковую активность как у животных разного пола, так и у разновозрастных крыс. Так, активность СОД молодых самок превышает таковую самцов на 76,8 % и, хотя снижается с возрастом на 30,8 %, но остается по-прежнему выше, чем у старых самцов.

В связи с тем, что при старении общая АОА плазмы крови снижается, а активность антиоксидантных ферментов увеличивается (каталаза) можно заключить, что с возрастом в плазме крови животных увеличивается роль ферментативной антиоксидантной системы в регуляции СРО.

В эксперименте нами обнаружен более высокий уровень витамина А (Р<0,001) в плазме крови у молодых самок и р-каротина (Р<0,01) и а-токоферола (Р<0,01) - у стареющих самок по сравнению с самцами. В то же время уровень Р-каротина (Р<0,001) и а-токоферилхинона (Р<0,001) у молодых самок был значимо ниже в плазме крови, чем у самцов-ровесников.

Сравнивая полученные данные об изменениях с возрастом концентрации а-токоферола и его димеров в плазме крови белых крыс обоего пола можно отметить, что эти изменения однонаправлены и хорошо согласуются между собой. Все три показателя и у самцов и у самок с возрастом снизились, что, по-видимому, и повлияло на уровень АОА,

который снизился у старых животных обоего пола.

Таким образом, в плазме крови на фоне снижения общей антиокислительной активности происходит усиление свободнорадикальных процессов у животных обоего пола.

В больших полушариях (БП) у молодых самок обнаружен более высокий уровень ТБК-рп (Р<(),()5), сп.ПОЛ (Р<(),()01), уровня N0 (Р<(),001), чем у самцов, что говорит о более высоком уровне протекания радикальных метаболических процессов. С другой стороны уровень АОА, активности каталазы и СОД самок не отличался от таковых самцов, а Аск.ПОЛ оказался значимо ниже (Р<(),05). Также, у самок обнаружен более низкий уровень ОМБ (Р<0,001). При исследовании содержания жирорастворимых витаминов в БП установлено, что у молодых самок уровень витамина А (Р<0,001), Р-каротина (Р<0,01) и а-токоферола (Р<0,()01) значимо выше, нежели у самцов. Полученные результаты позволяют заключить, что антиоксидантный пул больших полушарий у молодых самок белых крыс имеет иной качественный и количественный состав, чем у самцов и, несмотря на более высокий уровень свободнорадикальных процессов по некоторым показателям ПОЛ, позволяет сдерживать развитие процесса при его индукции аскорбатом.

С возрастом у самцов и самок в БП происходит разнонаправленное изменение содержания ТБК-рп. Так, у старых самцов этот показатель возрос на 37,8 %, а у старых самок снизился почти в 2 раза. С другой стороны Аск.ПОЛ снижается у животных обоего пола с 110,03 ± 9,33 до 55,39±4,915 нмоль/ч у самцов (Р<0,001), и с 82,58±4,763 до 68,16±2,726 нмоль/ч у самок (Р<0,05), а сп.ПОЛ только у самок (Р<(),05). Уровень ОМБ значимо возрос только у самцов и составил 0,71 ±0,021 мкмоль/мг белка. Активность каталазы (самцы Р<0,001, самки Р<0,01 в сравнении с молодыми) и СОД (самцы Р<0,001, самки Р<0,05 в сравнении с молодыми) в БП оказались достоверно ниже у старых животных, чем у молодых, причем у самцов эти изменения выражены в большей степени, по сравнению с самками.

При изучении неферментного антиоксидантного звена у самцов с возрастом зафиксировано снижение содержания |3-каротина (Р<(),01), а-токоферола (Р<0,001), а-ТФХ (Р<0,01) и ОТФ (Р<0,()1) до значений 0,11 ±0,009 мкмоль/1г ткани, 0,31 ±0,025 мкмоль/1 г ткани, 1,07+0,055 ед. оп. пл./1г ткани, 0,48+0,024 мкмоль/1 г ткани соответственно. У самок возрастные изменения содержания жирорастворимых витаминов в больших полушариях происходит более полого, чем у самцов, что выражается в снижении уровня меньшего количества показателей, а именно Р-каротина (Р<0,01), а-токоферилхинона (Р<0,01) и оксотокоферола (Р<0,()5).

Таким образом, у старых животных половые различия в больших полушариях проявились в более низком уровне ТБК-рп (Р<(),001), ОМБ (Р<0,001) и а-окоферилхинона (Р<0,05), а также в более высоком уровне скорости аскорбатзависимого ПОЛ (Р<(),05), ЫО-метаболитов (Р<0,001), ОВП (Р<0,001), активности СОД (Р<(),()()1), витамина А (Р<(),001), Р-каротина (Р<0,001), а-токоферола (Р^0,0()1) и АОА у самок(Р<0,05), чем у самцов.

Несмотря на то, что активность основных антиоксидантов в БП снижается, АОА уменьшилась незначительно: у самцов на 17 %, а у самок всего лишь на 4 %, Это позволяет предположить, что буферная емкость

ткани, сдерживающая СРО не исчерпана и разнонаправленные изменения в активности отдельных звеньев антиоксидантной системы у животных разного пола носят компенсаторный характер и позволяют сохранить уровень общей антиокислительной активности ткани больших полушарий.

В промежуточном мозге (ПМ) у интактных животных половые различия проявились в более высоком уровне ТБК-рп (Р<0,01), сп. ПОЛ (Р<0,001), уровня метаболитов N0 (Р<(),001) и в более низкой скорости Аск.ПОЛ (Р<0,001) и ОВП (Р<0,0()1) у молодых самок, чем у самцов.

С возрастом у самцов значимо увеличился уровень ТБК-рп (Р<0,001), скорость спонтанного ПОЛ (Р<0,001), содержание продуктов ОМБ (Р<0,05), МО-метаболитов (Р<0,0()1). У старых самцов оказались достоверно ниже Аск.ПОЛ (Р<0,001), ОВП (Р<0,()01), активности каталазы (Р<0,001) и СОД (Р<0,0()1) по сравнению с молодыми животными. У самок второй возрастной группы имело противоположное по сравнению с самцами изменение некоторых показателей. Все три показателя ПОЛ у самок с возрастом снизились (Р<0,01 - Р<0,001) и оказались достоверно ниже, чем у самцов-ровесников (Р<0,01 - Р<(),001). С другой стороны у них же показатель ОВП и активность каталазы значимо не изменились, но стали выше, чем у самцов той же возрастной группы. Об усилении с возрастом процессов окислительной деструкции в промежуточном мозге свидетельствует увеличение содержания окисленных белов у животных обоего пола.

При изучении уровня жирорастворимых антиоксидантов в промежуточном мозге отмечено снижение их с возрастом и у самцов, и у самок. Однако, несмотря на это, у старых самок содержание витамина А, Р-каротина и а-токоферола составило 0,041 ±0,002, 0,39+0,016 и 1,589±0,092 мкмоль/1 г ткани соответственно, превысив эти же показатели старых самцов.

В среднем мозге (СР) у молодых самок обнаружен более высокие уровни сп.ПОЛ (Р<0,001) и N0 (Р<0,001) и более высокая скорость Аск.ПОЛ (Р<0,001). Половые отличия антиоксидантной системы проявились в более высоком содержании витамина А (Р<0,001), Р-каротина (Р<0,001) и одного из метаболитов а-токоферола — ОТФ (Р<(),01). Все остальные изучаемые показатели не имели различий между группами животных разного пола.

В процессе старения отмечено увеличение на 28 % уровня ТБК-рп, в 2,1 раза сп.ПОЛ, на 19,8 % ЬЮ-метаболитов, а также снижение ОВП (Р<0,001) и Аск.ПОЛ (Р<0,001) у самцов. У старых самок же оказались достоверно ниже по сравнению с молодыми только сп.ПОЛ (Р<0,001) и Аск. ПОЛ (Р<0,001). В ходе старения содержание жирорастворимых антиоксидантов значимо снизилось у животных обоего пола, при неизменном уровне АОА ткани СР.

При сравнении изучаемых показателей в СР у старых самцов и самок имели место половые различия, которые проявились в более низких значениях уровня ТБК-рп (Р<0,()1), сп.ПОЛ (Р<0,001) и более высокие значения уровня N0 (Р<0,001) и ОВП (Р<0,05), уровня витамина А (Р<0,001), Р-каротина (Р<(),001) и ОТФ (Р<0,001) у самок.

Результаты исследования уровня свободнорадикальных процессов и антирадикальной защиты в мозжечке (МЧ) свидетельствуют о более низкой скорости Аск.ПОЛ (Р<0,0()1), превышении на 63,6 % уровня метаболитов N0 и почти в 2 раза ОВП у молодых самок, по сравнению с самцами той же

возрастной группы. Также половые различия у молодых животных проявились в повышенном содержании всех определяемых (кроме а-ТФХ) неферментных антиоксидантов у самок.

С возрастом в МЧ у самок произошло значимое снижение всех трех показателей ПОЛ, которые при этом стали ниже, чем у старых самцов. Продукты ОМБ увеличились у крыс обоего пола, а уровень МО-метаболитов у самок хотя и снизился до 40,11 ± 1,203 мкмоль, но остался также как и у молодых животных выше, чем у самцов. Если в группе молодых животных половых различий в активности СОД не зафиксировано, то у стареющих самок этот показатель превышает таковой самцов на 19 %. В ходе старения содержание витаминов-антиоксидантов снизилось у животных обоего пола. Однако более резкое снижение произошло у самцов, нежели у самок, что проявилось в изменении большего количества показателей с большей степенью достоверности. В результате у старых самок уровень витамина А превысил таковой старых самцов в 2 раза, р-каротина — в 1,8 раз, а-токоферола— в 1,7 раз, а-токоферилхинона в 1,4 раза.

В продолговатом мозге (ПД) в группах молодых животных имеет место более высокий уровень ТБК-рп (3,754 ± 0,293 нмоль/(),5г ткани, Р<0,01 в сравнении с самцами), сп.ПОЛ (32,864 ± 1,616 нмоль/ч, Р<(),001 в сравнении с самцами), ОМБ (0,51 ± 0,013 мкмоль/мг белка, Р<0,01 в сравнении с самцами), N0 (62,38 ± 2,807 мкмоль, Р<0,001 в сравнении с самцами) у самок, чем у самцов.

С возрастом у самок происходит снижение всех изучаемых характеристик ПОЛ. Уровень N0-метаболитов, как и в других изучаемых отделах, оказался достоверно ниже у самок старшей возрастной группы (51,17 ± 2,047 мкмоль), по сравнению с молодыми самками (62,38 ± 2,807 мкмоль). Несмотря на снижение этого показателя с возрастом, у самок уровень N0 по-прежнему выше, чем у самцов в старшей возрастной группе (Р<0,01). У самцов в ПД с возрастом достоверно снизились лишь Аск.ПОЛ (Р<0,001), ОВП (Р<0,05), а уровень N0 увеличился на 42,8 %.

Таким образом у животных старшей возрастной группы в ПД половые отличия проявились по иному, нежели у молодых животных. У 24х-месячных самок уровень ТБК-рп (Р<0,()1), сп.ПОЛ (Р<0,05), оказались ниже, а содержание ОМБ (Р<0,05), уровень ЫО-метаболитов (Р<0,05) и ОВП (Р<0,05) достоверно выше, чем у самцов той же возрастной группы.

В спинном мозге (СП) достоверные половые различия изучаемых характеристик СРО у молодых животных отсутствуют. Однако с возрастом у самцов и самок происходит разнонаправленное изменение некоторых изучаемых показателей, что может косвенно говорить о разном антиоксидантном статусе и его качественном и количественном изменении в спинном мозге при старении у животных разного пола. У старых самок же все три показателя ПОЛ оказались достоверно ниже (Р<0,()1 - Р<0,001), чем у молодых самок. В результате у животных старшей возрастной группы обнаружены следующие половые различия в СП: уровень ТБК-рп в 2 раза, скорость сп.ПОЛ в 3 раза, а Аск.ПОЛ на 34 % ниже у самок, чем у самцов. Активность ферментных и содержание неферментных антиоксидантов самцов и самок находится примерно на одинаковом уровне. Однако

показатель ОВП в СП самок оказался значимо выше, чем у самцов.

Таким образом, при сравнении изучаемых показателей в плазме крови и в разных отделах ЦНС обнаружены половые различия, которые в большей степени проявились в плазме крови, больших полушариях, промежуточном и среднем мозге, мозжечке и в меньшей степени продолговатом мозге молодых животных. В спинном мозге молодых животных половых различий не обнаружено, что, по-видимому, связано с тем, что спинной мозг является наиболее старым в филогенетическом плане отделом.

При сравнении тканевых особенностей обнаружено, что у молодых животных уровень ТБК-рп значимо различается в изучаемых отделах мозга (рис.1). Так у молодых самцов и самок этот показатель значимо выше в БП, нежели в других отделах мозга. У самцов старшей возрастной группы произошло увеличение этого показателя, который стал еще более значимо превышать значения уровня ТБК-рп в других отделах мозга. У самок по мере взросления, напротив, содержание ТБК-рп в БП снизилось настолько, что почти сравнялось с этим показателем в ПМ и CP мозге. Снижение в ходе старения СРО липидов в тканях мозга самок можно объяснить, вероятно, снижением интенсивности процессов митохондриального окисления (Кольтовер, 1998, 2000). Однако, при этом параллельно снижается мощность и надежность систем антиокислительной защиты, что может способствовать более выраженному повреждению тканей (Обухова и др., 1983, Shigenaga et al., 1994, Papa et al., 1997).

БП ПМ CP МЧ ПД СП

ЕЗ самцы молодые □ самки молодые в самцы старые ш самки старые^

Рис. 1. Уровень ТБК-реактивиых продуктов в разных отделах мозга самцов и самок белых

крыс разного возраста Примечание: Д - различие значимо по сравнению с молодыми животными; # -различие значимо по сравнению с самцами.

Полученные нами результаты по изучению активности СОД в тканях мозга свидетельствуют о неодинаковой активности СОД в разных отделах ЦНС: у молодых самцов этот показатель значительно меньше в больших полушариях и мозжечке, чем в промежуточном и среднем мозге. По мере взросления активность СОД снижается и у самцов, и у самок и остается достоверно ниже, чем в промежуточном и среднем мозге. Причем с возрастом эта разница увеличивается. Наименьшая разница в значениях активности СОД имела место в продолговатом и спинном мозге, где активность СОД имела примерно одинаковые значения и у животных разного пола, и у животных разного возраста. Онтогенетических изменений в

активности СОД не обнаружено в мозжечке, среднем мозге животных обоего пола, в промежуточном мозге самок и продолговатом мозге самцов.

2. Изучение влиянии антиоксидантов на свободнорадикальные процессы плазмы крови н мозга самцов и самок белых крыс разного возраста и уровень их антиоксидаитной защиты. Поведенческие аспекты

Учитывая изначально разный уровень свободнорадикальных процессов и антиоксидантного статуса разнополых животных, интерес представляло исследовать влияние а-токоферола и эмоксипина па оксидантный-прооксидантный гомеостаз плазмы крови, головного и спинного мозга интактных самцов и самок белых крыс и его изменение с возрастом на фоне введения этих препаратов.

Т.к. поведение является функциональной производной активности мозга, представляло интерес выяснить характер их действия на поведение животных в тесте открытого поля.

Обнаружены половые и возрастные особенности поведенческих реакций у интактных крыс и животных, получавший витамин Е и эмоксипин. Молодые самки проявляли более высокую горизонтальную подвижность, что выражалось в увеличении числа посещений центральной зоны площадки (Р<0,05), а также имели больше вертикальных стоек без опоры (Р<0,05) нежели самцы. С другой стороны число вертикальных стоек с опорой (Р<0,05) и количество заглядываний в норку (Р<0,05) у молодых самок было ниже, чем у самцов.

При сравнении поведенческих реакций животных двух возрастных групп обнаружено снижение и горизонтальной, и вертикальной двигательной активности у старых самцов. Помимо этого, если у молодых самцов отсутствовали болюсы, у старых животных этот показатель присутствует и свидетельствует о повышении «эмоциональности» животных. У самок с возрастом снизились число посещений центральной зоны (Р<0,()5), вертикальных стоек с опорой (Р<(),()5), частота актов груминга (Р<0,05), что может говорить об усилении чувства страха.

После введения витамина Е в группах молодых животных (с? и 5) произошло значимое увеличение вертикальной и горизонтальной активности и количество посещаемых норок, что говорит об усилении ориентировочно-исследовательской реакции. Появление болюсов говорит о повышении эмоциональной реактивности животных.

Введение эмоксипина молодым животным привело к увеличению числа пересеченных центральных квадратов (Р<(),()5), вертикальной активности (Р<0,05) у самцов и увеличению вертикальной активности (Р<(),()5) и числа посещений норок (Р<0,05) у самок. В этих группах болюсы отсутствуют, так же, как и в контроле. Таким образом, эмоксипин привел к увеличению меньшего числа параметров нежели витамин Е.

При сравнении этих же показателей на фоне введения антиоксидантов в группах старых животных обнаружено увеличение горизонтальной активности, числа стоек с опорой и болюсов, а также уменьшение посещений норок у самцов, получавших а-гокоферол. У них же эмоксипин вызвал увеличение числа центральных квадратов, стоек с опорой, частоте актов

груминга, но значимо снизил число стоек без опоры, норок и болюсов у старых самцов. У старых самок на фоне введения витамина Е имело место увеличение выходов в центральную зону, стоек с опорой, частоты актов груминга и появление болюсов. При этом снизилось число стоек без опоры. Введение эмоксипина также привело к разнонаправленному изменению изучаемых параметров у старых самок. Так, после двухнедельного введения эмоксипина у старых самок произошло увеличение посещений центральных квадратов, стоек с опорой и уменьшение пересеченных периферических квадратов, стоек без опоры и норок.

Действие витамина Е сказалось в повышении эмоциональной реактивности животных (появление болюсов), что обычно отрицательно коррелирует с уровнем локомоторной и ориенторовочно-исследовательской активности (Титов С.Н. и др., 1980). Повышение уровня эмоциональной реактивности чаще всего означает усиление «страха» в обстановке опыта, однако более частое посещение центра арены свидетельствует об обратном.

Таким образом, результаты по исследованию поведенческих реакций при введении антиоксидантов позволяют утверждать, что вещества являющиеся ингибиторами СРО, проявляют нейротропное действие и влияют на состояние ЦНС.

Учитывая изначально разный уровень свободнорадикапьных процессов в изучаемых отделах интерес представляло изучить влияние антиоксидантов на скорость пероксидации липидов и белков, а также антиоксидантный статус плазмы крови и разных отделов ЦНС.

В плазме крови введение витамина Е привело к снижению уровня ТБК-рп у молодых самцов (на 28,4%) и старых животных обоего пола (у самцов на 46,7%, у самок 76,8%). В плазме крови молодых самок произошло, напротив, увеличение этого показателя, что, вероятно связано со сложным характером вовлечения а -токоферола в антиоксидантный гомеостаз самок который за счет стероидного звена имеет большую емкость, чем у самцов. Таким образом а-токоферол оказал больший эффект на животных старшей возрастной группы, что, вероятно, связано с увеличением потребности организма в антиоксидантах. Это согласуется со снижением скоростей сп.ПОЛ и Аск.ПОЛ (Р<(),05) после введения а-токоферола у старых самцов группы, а также со снижением скорости Аск.ПОЛ у старых самок.

Содержание ОМБ после введения витамина Е в группах молодых животных не изменилось, за исключением молодых самок, у которых уровень ОМБ снизился на 20 % по сравнению с контролем. Повышенный с возрастом уровень ОМБ снизился на фоне дополнительного введения антиоксиданта и у самцов (на 60,6 %), так и у самок (на 86,5 %).

Уровень N0 метаболитов после введения витамина Е снизился у молодых самок (на 28 %) и животных второй возрастной группы обоего пола.

Введение витамина Е привело к резкому увеличению ОВП в плазме молодых самок и к менее выраженному, но достоверному снижению этого показателя у старых самок.

Таким образом витамин Е снизил большее количество показателей СРО в плазме молодых самцов, а у молодых самок даже увеличил некоторые из них. Наибольший эффект этот препарат оказал на старых животных обоего

пола, что связано со снижением антиоксидантного звена плазмы крови в ходе старения и своевременности введения антиоксиданта.

Введение эмоксипина привело к увеличению ОВП плазмы крови молодых самцов и самок, причем к более резкому у самок. У старых самцов эмоксипин вызвал снижение сл.ПОЛ (на 19 и увеличение ОВП в плазме крови. У старых самок введение эмоксипина привело к снижению уровня ТБК-рп (на 42 %), продуктов ОМБ (на 40,8 %) и ОВП.

АОА и каталаза плазмы крови остались на уровне контрольных значений у молодых животных обоего пола, а активность СОД снизилась у молодых самцов и под воздействием витамина Е (Р<(),05), и эмоксипина (Р<0,05), а у молодых самок только после введения витамина Е (Р<(),05). Содержание жирорастворимых антиоксидантов изменилось иначе. В результате введения а-токоферола у молодых самцов произошло увеличение уровня витамина А (Р<0,05), Р-каротина, а-токоферола. Введение эмоксипина снизило содержание а-токоферола и а-ТФХ в плазме крови. У самок этой же возрастной группы а-токоферол вызвал увеличение всех изучаемых нами форм жирорастворимых витаминов, кроме ОТФ, а эмоксипин снизил уровень а-токоферола и его метаболитов.

В группах старых животных на фоне введения а-токоферола у самцов произошло увеличение АОА (Р<0,05), активности СОД (Р<(),()5), уровня р-каротина (Р<0,()5) и а-токоферола (Р<0,()5), активность каталазы снизилась (Р<0,05). У них же эмоксипин вызвал увеличение АОА, СОД, и снижение активности каталазы и уровня а-токоферола. У старых самок витамин Е увеличил АОА, уровень витамина А, Р-каротина, а-токоферола и ОТФ плазмы крови. Эмоксипин снизил активность каталазы (Р<0,05).

Анализируя полученные нами результаты, можно заключить, что введение антиоксидантов молодым животным не всегда снижает скорость СРО в плазме крови, а иногда (молодые самки) влечет за собой их увеличение. Это еще раз доказывает важную роль свободных радикалов и необходимость поддержания радикальных реакций окисления липидов и белков на определенном уровне, свойственном для каждого органа.

С возрастом применение антиоксидантов становится более целесообразным, что подтверждается снижением ПОЛ и ОМБ в плазме крови у животных обоего пола под действием и витамина Е, и эмоксипина. Но все же большее число показателей СРО в плазме крови снизилось на фоне введения а-токоферола, нежели эмоксипина, что может быть связано с различиями в токсикокинетике и токсикодииамике этих препаратов.

Анализ полученных результатов по влиянию антиоксидантов на состояние прооксидантной — антиоксидантной системы в больших полушариях дает основание полагать, что введение молодым животным а-токоферола и эмоксипина вызывает ряд компенсаторных изменений в активности антиоксидантов и позволяет сохранять АОА этой ткани БП. Так, у молодых крыс активность СОД на фоне антиоксидантной коррекции уменьшалась (Р<0,05). Это обнаружено в равной степени и при введении а -токоферола, и эмоксипина. Витамин Е повышал уровень тканевого а-токоферола (Р<0,05) при неизменном уровне а-ТФХ и ОТФ у молодых самцов. У молодых самок же повышался уровень и а-токоферола, и его

метаболитов, что может косвенно свидетельствовать о более высокой скорости расходования этого антиоксиданта у самок. Напротив, эмоксипин не приводил к достоверному снижению жирорастворимых антиоксидантов. Уровни активности каталазы, витамина А и (3-каротина заметно не изменились под воздействием антиоксидантов у животных разного пола.

Несмотря на неизменный антиоксидантиый статус, токоферол снизил сп.ПОЛ у молодых самок (Р<(),05) и Аск.ПОЛ (Р<0,05) у самцов в ткани больших полушарий. Эмоксипин же не снизил ни показатели ПОЛ, ни ОМБ.

С возрастом у самцов произошло увеличение уровня ТБК-рп и ОМБ в больших полушариях. а-Токоферол снизил содержание ТБК-рп (Р<0,05) и увеличил ОВП (Р<0,05) ткани БП, а эмоксипин снизил не только уровень ТБК-рп, но и сп.ПОЛ. С другой стороны эмоксипин значимо увеличил скорость Аск.ПОЛ. При введении токоферола старым самцам в БП обнаружено увеличение его эндогенного уровня (Р<0,001) и метаболитов (ТФХ — Р<0,()01, ОТФ — Р<0,01). Эти изменения привели к вполне закономерному увеличению содержания витамина Аир -каротина, снижению активности СОД. Введение эмоксипина снизило лишь активность СОД, при сохранении других изучаемых показателей на уровне контрольных значений.

Введение витамина Е старым самкам также повысило уровень тканевого токоферола (Р<0,01) и его метаболитов (Р<0,05), но с меньшей степенью достоверности, чем у самцов. Дополнительное введение витамина Е привело к увеличению уровня ТБК-рп и сп.ПОЛ в ткани БП. Это в свою очередь может быть проявлением прооксидантных свойств витамина Е. Однако, учитывая, что в ходе старения у самок все показатели ПОЛ достоверно снизились по сравнению с молодыми, такое увеличение ПОЛ на фоне введения витамина можно рассматривать как регуляторное.

Эмоксипин не привел к изменению показателей свободнорадикапьного процесса в больших полушариях молодых самок. В антиоксидантном звене снизилась только активность СОД (Р<0,05).

В промежуточном мозге введение витамина Е привело к повышению уровня ТБК-рп у молодых самцов и старых самок. Похожая картина получена нами в больших полушариях старых самок и может быть объяснена аналогичным образом. Повышение же этого показателя у молодых самцов под действием биоантиоксиданта может косвенно свидетельствовать о превышении оптимальной физиологической концентрации а -токоферола и реализации его прооксидантных свойств, которые обусловлены многими факторами, среди которых отсутствие восстановителей токоферильных радикалов, превалирование жирных кислот над а-токоферолом и др.

Ожидаемый антиоксидантиый эффект а-токоферола проявился в снижении всех показателей ПОЛ, МО-метаболитов в ПМ старых самцов и уровня ОМБ старых животных обоего пола. Кроме этого у самок увеличились уровень ЫО-метаболитов и ОВП.

Все перечисленные изменения СРО после введения витамина Е произошли на фоне снижения активности СОД у молодых крыс обоего пола (Р<0,05), Р-каротина у молодых самок (Р<0,05). Учитывая значимое увеличение содержания а-токоферола (Р<(),0()1 самцы, Р<0,01 самки), а-ТФХ

(Р<0,05) и ОТФ (Р<0,01 самцы) в ПМ молодых животных можно предположить компенсаторный характер выявленных нами изменений.

У старых крыс на фоне введения витамина Е произошло увеличение содержания а-токоферола и его метаболитов (Р<0,()01 все три показателя), а у старых самцов также увеличилась активность каталазы.

Введение эмоксипина привело к изменению в ПМ меньшего числа показателей СРО, чем а-токоферол. Так, у молодых животных эмоксипин значимо снизил лишь ОВП самок. Однако в отличие от витамина Е эмоксипин снизил активности и каталазы, и СОД молодых крыс.

У старых животных на фоне введения эмоксипина снизились показатели ПОЛ (кроме Аск.ПОЛ), ОМБ у самцов и ОВП у самок. В антиоксидантном звене под действием эмоксипина увеличилось содержание а-токоферола (Р<0,05) у разнополых крыс и а-ТФХ (Р<0,()5) у самцов.

В среднем мозге под действием антиоксидантов произошли изменения свободнорадикальных процессов, имеющие половые и онтогенетические особенности. Витамин Е привел к значимому увеличению уровня ТБК-рп на 26,7 % у молодых самцов, 19,4 % у молодых самок и 18,4 % у старых самок. Кроме этого под действием витамина значимо увеличилась сп.ПОЛ у молодых самцов (Р<0,05) и старых самок (Р<0,05).

Антиоксидантный эффект витамина Е проявился в уменьшении Аск.ПОЛ у молодых животных (Р<0,05) и старых самцов, что свидетельствует об увеличении буферной емкости антиоксидантного пула ткани среднего мозга и дает возможность сдерживать свободнорадикальный процесс при его индукции ионами железа. Также нами отмечено увеличение уровня ЫО-метаболитов и ОВП у молодых и ОВП у старых самцов.

Несмотря на достоверное увеличение эндогенного токоферола и его метаболитов у разнополых животных разного возраста после двухнедельного введения витамина Е общая антиокислительная активность не изменилась, что вероятно связано со снижением активности других антиоксидантов. Действительно, введение витамина Е снизило активность СОД у молодых животных, каталазу у молодых самцов и р-каротин у молодых самок.

В среднем мозге на фоне ведения эмоксипина у молодых животных произошло снижение скорости Аск.ПОЛ (на 29% у самцов и 38% у самок). У старых самцов кроме этого снизился уровень ТБК-рп на 27,5 %. С другой стороны у старых самцов скорость Аск.ПОЛ увеличилась (Р<0,()5), что на фоне возрастного снижения окислительного метаболизма вполне объяснимо.

Эмоксипин привел к снижению активности каталазы и СОД в СР молодых крыс, а у старых увеличил содержание а-токоферола.

Таким образом, картина изменения антиоксидантной защиты ткани СР мозга после введении антиоксидантов в целом сходна с таковой в ПМ.

В мозжечке введение антиоксидантов не привело к значимым изменениям интенсивности свободнорадикальных процессов у молодых животных. Исключение составляет исходный уровень ТБК-рп (Р<0,05), N0-метаболитов (Р<0,05) и ОВП (Р<0,05) молодых самцов, которые значимо превысили контрольные значения после введения витамина Е. Эмоксипин же увеличил лишь ОВП (Р<0,05) в мозжечке молодых самцов.

В группах старых животных витамин Е изменил большее число показателей, нежели у молодых крыс. Это проявилось в значимом снижении уровня ТБК-рп (Р<0,05), сп.ПОЛ (Р<0,05) и содержания ОМБ (Р<0,05). Однако, скорость Аск.ПОЛ (Р<0,05) в этих же условиях оказалась выше контрольных значений.

Как уже отмечалось, в ходе старения в МЧ у самок произошло значимое снижение ПОЛ по трем показателям. Введение же витамина Е старым самкам привело к увеличению исходного уровня ТБК-рп и сп.ПОЛ в этой области мозга. Учитывая то, витамин Е снизил ОМБ в МЧ старых животных обоего пола, мы можем утверждать, что токоферол предотвращает развитие окислительного стресса, т. к. усиление ОМБ более показательно свидетельствует о возрастной окислительной деградации ткани, нежели ПОЛ, а введение витамина Е успешно снижает ОМБ у старых самцов и самок.

Введение эмоксипина старым животным не привело к изменению изучаемых параметров свободнорадикальных процессов в мозжечке.

Полученные результаты свидетельствуют об увеличении содержания а-токоферола и его метаболитов в МЧ в результате его введения у животных разного возраста. Исключение составляет группа молодых самок, у которых введение природного антиоксиданта увеличило лишь уровень ОТФ (Р<0,001). Некоторое повышение уровня метаболитов а-токоферола в МЧ молодых самок при сохранении уровня эндогенного токоферола, вероятно, связано с повышенной утилизацией антиоксиданта. Компенсаторное снижение активности СОД на фоне введения токоферола отмечено только в группе молодых самцов, а в группе старых самок, напротив, витамин Е вызвал увеличение содержания витамина А на 58 % и Р-каротина на 42 %.

Введение эмоксипина неодинаково изменило изучаемые параметры в МЧ у животных разного возраста и пола. Так, у молодых самцов активности каталазы (Р<0,05) и СОД (Р<0,01) оказались ниже контрольных значений, что позволило сохранить скорость СРО на базальном уровне. У старых самцов и самок эмоксипин значимо увеличил содержание витамина А и Р-каротина. Вероятно, это повлекло за собой увеличение содержания токоферола у старых самцов (Р<0,05) и его димера — у старых самок (Р<0,05).

В продолговатом мозге и а-токоферол, и эмоксипин проявили антиоксидантные свойства и вызвали практически равнозначное снижение сп.ПОЛ (Р<0,05) и Аск.ПОЛ (Р<0,05) у молодых самцов.

У молодых самок витамин Е вызвал изменения большего числа параметров, нежели эмоксипин. Под его влиянием сп.ПОЛ (Р<0,05) и Аск.ПОЛ (Р<(),()5) процессов снизились, а уровень ТБК-рп (Р<0,05) значимо возрос. Эмоксипин же достоверно снизил лишь Аск.ПОЛ (Р<0,05).

В группах старых животных оба антиоксиданта снизили ПОЛ по некоторым показателям и уровень N0 у самцов, а витамин Е также увеличил ОВП. В продолговатом мозге старых самок ни природный, ни синтетический антиоксиданты не вызвали достоверных изменений изучаемых параметров.

У молодых самцов экзогенный витамин Е не привел к накоплению этого антиоксиданта в ткани продолговатого мозга, но увеличил уровень а-ТХФ (Р<0,01) и ОТФ (Р<0,001) и незначительно снизил активность каталазы и СОД. Эмоксипин снизил активности каталазы (Р<0,05) и СОД (Р<0,05).

Картина изменения активности антиоксидантов в ПД молодых самок под действием а-токоферола схожа с таковой у самцов-ровесников, а введение эмоксипина привело к снижению активности только СОД (Р<(),05).

Учитывая большую потребность в антиоксидантах при старении введение витамина Е и эмоксипина не снизило активности ферментных антиоксидантов, а в случае а-токоферола увеличило содержание Р-каротина у старых самцов. Эмоксипин не изменил изучаемые показатели в ПД самцов.

В ПД старых самок выявлена более сложная картина: витамин Е увеличил уровень тканевого а-токоферола (Р<(),()01), его метаболитов (Р<0,05), витамина А (Р<0,05 - Р<(),()01), Р-каротина (Р<(),05), но снизил активности СОД (Р<0,05) и каталазы (Р<0,05). Введение эмоксипина оказало регуляторное воздействие на активности ферментных антиоксидантов, которое проявилось в снижении активности СОД па 27 % и каталазы на 24,5 %. Вероятно, это и позволило предотвратить колебания СРО под воздействием эмоксипина в ПД старых самок.

Результаты исследования влияния антиоксидантов на свободнорадикальные процессы синимого мозга в основном ключе совпадают с направлениями изменений, зафиксированных в ПД.

У старых самцов витамин Е снизил большее число показателей (ТБК-рп (Р<(),05), сп.ПОЛ (Р<0,05), N0 (Р<0,05)), а эмоксипин снизил ТБК-рп (Р<0,()5), сп.ПОЛ (Р<0,()5), но увеличил скорость Аск.ПОЛ процесса (Р<0,05).

В спинном мозге старых самок нами не выявлены изменения уровня свободнорадикальных процессов под действием антиоксидантов.

Вводимый витамин Е увеличил уровень тканевого а-токоферола и его метаболитов во всех группах, помимо этого у старых животных увеличился уровень Р-каротина (Р<(),05) у самцов, а также витамин А у самок на фоне снижения активности каталазы (Р<0,()5) и СОД (Р<(),()5).

Эмоксипин вызвал снижение активности СОД во всех группах, кроме старых самцов и каталазы у молодых самцов и старых самок.

Обращает на себя внимание факт, что если у интактных молодых животных в ПД и СП пракгически отсутствовали половые различия, то при введении антиоксидантов они проявились достаточно ярко. Это может свидетельствовать о более глубоких половых отличия регуляции функциональной активности этих отделов мозга антиоксидантами.

Почти во всех областях ЦНС на фоне антиоксидантной коррекции мы наблюдали компенсаторное снижение активности СОД и реже и менее значимо каталазы. Меньшая модуляция каталазы, вероятно, связана с разными скоростями реакций а-токоферола и эмоксипина с радикалами.

Нами установлено что усиление СРО при введении антиоксидантов в тканях мозга происходит чаще у самок, чем самцов, что мы наблюдали в больших полушариях, промежуточном, среднем мозге и мозжечке старых самок и в среднем, продолговатом и спинном мозге у молодых самок после введения а-токоферола Причину половых различий можно объяснить, учитывая факт ингибирующего действия стероидных гормонов на процессы ПОЛ (Бурлакова Е.Б., 1975, Чукаев С.А. и др., 1997). Однако помимо того, что половые различия зависят от антирадикальной активности андрогенов и эстрогенов, следует учитывать и различия в составе полиненасыщенных

жирных кислот нейрональных мембран у животных разного пола (Сейфулла Р.Д., 1990), а также роль стероидных гормонов надпочечников. Помимо этого модифицирующее влияние на синтез эстрогенов и андрогенов оказывает гипоталамо-гипофизарная система. Различия во влиянии этой системы проявляются уже на ранних стадиях онтогенеза у животных разного пола (Угрюмов М.В., 1999).

3. Модуляция свободнорадикальпых процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови и ткани мозга белых крыс на фоне хронического воздействия природным серосодержащим газом Астраханского месторождения

Представляло интерес исследовать влияние хронического воздействия ССГ на стресс-реакции, поведение и антиоксидантно-прооксидантный статус плазмы крови и ткани головного и спинного мозга самцов и самок белых крыс разного возраста

Хроническое воздействие ССГ привело к снижению горизонтальной двигательной активности на периферии открытого поля (Р<0,05), числа вертикальных стоек с опорой на бортик (Р<0,05) у молодых животных независимо от пола. Число и длительность актов груминга на фоне воздействия значимо возросло и составило 5,7±0,44 у молодых самцов (Р<0,001) и 4,8±0,45 у молодых самок (Р<0,05). Снижение двигательной активности на фоне повышения реакции груминга может свидетельствовать об усилении уровня тревожности крыс при хроническом воздействии ССГ.

Как было показано с возрастом у животных произошло снижение горизонтальной и вертикальной активности. Степень выраженности этих изменений преобладает у самцов. Хронические ингаляции ССГ привели к уменьшению двигательной активности старых крыс, которое выразилось в снижении числа пересеченных центральных квадратов на 25,7 %, числа вертикальных стоек без опоры на 53,8 % у самок и самцов. У крыс обоего пола снизилась частота заглядываний в норки (Р<0,05) на фоне возросшей груминговой активности. Таким образом, у старых животных произошли схожие, но более выраженные изменения в поведении под действием ССГ, чем у молодых животных.

У самцов и самок обеих возрастных групп на фоне хронических ингаляций наблюдали развитие эозинопении, однако более глубокие нарушения, свидетельствующие о наличии стрессорной реакции мы наблюдали у старых самок.

Результаты исследования уровня свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови разнополых молодых и старых животных на фоне хронического воздействия ССГ свидетельствуют, что на фоне хронического воздействия серосодержащего газа Астраханского месторождения в плазме крови животных, независимо от возрастной и половой принадлежности развивается оксидативный стресс, который проявился в усилении ПОЛ, увеличении ОМБ и ОВП. Указанные изменения ярче проявились у самцом обеих возрастных групп, чем у самок того же возраста. Обращает на себя внимание факт повышения концентрации суммарных метаболитов N0 в плазме крови молодых самцов, получавших ССГ (46,73±2,765 мкмоль, Р<0,001).

У контрольных молодых самок содержание N0 достоверно выше чем у интактных самцов-ровесников и составляет 78,35±5,103 мкмоль (Р<0,001, в сравнении с молодыми самцами), а после ингаляции показатель снижается до 43,51+3,171 мкмоль (Р<0,001, в сравнении с контролем) и выравнивается с показателями опытной группы самцов. Таким образом, у животных разного пола наблюдали противоположную картину изменения содержания NO-метаболитов, что вероятно связано с различиями в исходном уровне N0, в антиоксидантном статусе на гормональном уровне и в путях вовлечения N0 в СРО на фоне оксидативного стресса. Об этом говорит анализ изменения уровня ТБК-рп, который показал увеличение этого показателя и у самцов (Р<0,001) и у самок (Р<0,001). Скорости сп.ПОЛ и Аск.ПОЛ у животных опытных групп оказались достоверно выше, чем в контроле.

У старых животных ингаляции ССГ привели к значимому увеличению NO-метаболитов у животных обоего пола, что может быть связано с усиливающимся каскадом окислительных процессов. Об этом же свидетельствуют результаты изучения антиоксидантов плазмы крови животных. Активность каталазы в крови как самцов, так и самок обоих возрастов после ингаляторного воздействия сероводородсодержащим газом снизилась до 23,11±1,39 у.еУмг белка у молодых самцов (Р<0,01), 19,34+0,89 у.е./мг белка у молодых самок (Р<0,0()1), 21,98±1,51 у.еУмг белка у старых самцов (Р<0,001), и 26,44+1,78 у.еУмг белка у старых самок (Р<(),01).

Та же направленность изменений имеет место и с активностью СОД, которая снизилась в плазме крови на фоне ингаляции ССГ у животных всех групп. В свою очередь N0 может оказывать прооксидантное действие в плазме крови, в результате того, что его молекулы могут окислять а-токоферол, что мы имеем в плазме крови старых самок: на фоне роста NO-метаболитов почти на 56 %, содержание токоферола снижено (Р<0,05).

Таким образом, нарастающий вал свободнорадикальных процессов, вызванный хроническим ингаляторным воздействием ССГ, приводит к усилению ПОЛ, ОМБ и истощению антиоксидантного пула плазмы крови крыс, что усугубляет токсический эффект сероводорода.

Результаты исследования уровня свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты ткани больших полушарии разнополых молодых и старых животных на фоне воздействия ССГ говорят о росте ОМБ в ткани БП у животных разного пола и возраста. Несмотря на снижение показателей ПОЛ у молодых животных (АскПОЛ у самцов и сп.ПОЛ у самок), усиление ОМБ служит доказательством повреждающего действия газа. Также обнаружено увеличение сп.ПОЛ у молодых самцов до 48,001 ±3,055 нмоль/ч (Р<0,001) и ОВП у молодых самок (0,205±0,012 эВ, Р<0,05).

При сравнении половых особенностей антирадикальной защиты БП молодых животных обнаружена неодинаковая направленность некоторых изучаемых показателей. Так, активность каталазы у молодых самцов опытной группы оказалась значимо выше (3,54+0,245 у.еУмг белка, Р<0,05), чем в контрольной. У самок того же возраста, напротив, активность каталазы снизилась и составила 1,34±0,087 у.еУмг белка. Параллельно с этим у молодых самцов произошло снижение содержания ß-каротина (0,11+0,009 мкмоль/1г ткани, Р<0,00! по сравнению с контролем) и а-токоферола (0,34±0,021

мкмоль/1 г ткани, Р<0,()()1). Несмотря на снижение содержания жирорастворимых антиоксидантов АОА ткани БП молодых самцов не изменилась. У самок же помимо каталазы, достоверно снизились содержание а-токоферол и АОА. Снижение содержания а-токоферола до 0,64+0,035 мкмоль/1 г ткани привело к увеличению а-ТФХ (1,48±0,075 ед. оп. пл./1г ткани), что может свидетельствовать об усилении окислительной деструкции витамина Е в ходе вовлечения его в СРО.

В группах старых животных на фоне воздействия ССГ произошло увеличение большего числа показателей ПОЛ: на 44 % -сп.ПОЛ у самцов, на 58 % - уровень ТБК-рп и на 35 % Аск.ПОЛ у самок. У старых животных обоего пола значимо увеличились содержание ОМБ и показатель ОВП. У старых самцов в ответ на усиление СРО достоверно снизилось содержание р-каротина (Р<0,05) и а-токоферола (Р<0,05), а у самок — активность каталазы (Р<0,05). Это повлекло изменение АОА ткани БП у старых разнополых животных, которая снизилась до 41,47±2,864 % у самцов и 48,11+3,951 % у самок (Р<0,05 в обоих случаях). Обращает на себя внимание факт увеличения уровня а-ТФХ на фоне снижения а-токоферола в группах старых животных.

Все эти изменения говорят о более глубоких нарушениях, происходящих в БП под действием ССГ у старых животных по сравнению с молодыми.

В промежуточном мозге молодых самцов на фоне воздействия ССГ произошло усиление сп.ПОЛ (Р<0,05), ОМБ (Р<0,05), МО-метаболитов (Р<0,05) и снижение Аск.ПОЛ (Р<0,05) и ОВП (Р<0,05). У молодых самок достоверно снизилась скорость сп.ПОЛ (20,31 ±1,333 нмоль/ч, Р<0,001), уровень N0 (20,4+1,571 мкмоль, Р<0,001) и увеличился уровень ОМБ (0,42+0,025 мкмоль/мг белка, Р<0,01) и ОВП (0,204+0,013 эВ, Р<0,001). Ответная реакция антиоксидантного звена ПМ у молодых животных разного пола была неодинакова. Так у молодых самцов отмечено снижение АОА до 60,38±4,768 % при падении активности каталазы и витамина А до 3,11 ±0,145 у.е./мг белка (Р<(),05) 0,033+0,004 мкмоль/1 г ткани (Р<0,05) соответственно. У молодых самок снижение активности каталазы, СОД и р-каротина, хотя и снизило АОА, но не достоверно, что косвенно может свидетельствовать об активизации других составляющих антиоксидантного звена ПМ.

У старых самцов на фоне затравки ССГ произошло снижение уровня ТБК-рп (4,06+0,304 нмоль/0,5г ткани, Р<0,01) и сп.ПОЛ (25,11+1,919 нмоль/ч, Р<0,05) при усилении Аск.ПОЛ (73,85±4,110 нмоль/ч, Р<0,05). О повреждении структур ПМ старых самцов говорит также увеличение уровня ОМБ (Р<0,05) и ОВП (Р<0,001). У старых самок все три показателя ПОЛ и ОМБ значимо увеличились. В ПМ старых крыс обоего пола произошли схожие изменения в антиоксидантной системе под действием ССГ. И у самцов, и у самок снизились активность каталазы, СОД, Р-каротина и а-токоферола, кроме этого у старых самцов увеличился уровень а-ТХФ, а у самок того же возраста снизилось содержание витамина А, которое составило 0,()32±(),0()3 мкмоль/1 г ткани (Р<0,05 в сравнении с контролем).

Полученные данные свидетельствуют об истощении антиоксидантной системы ПМ на фоне хронического воздействия промышленного газа.

Реакция ткани среднего мозга на хроническое воздействие ССГ имеет возрастные и половые особенности. У молодых животных несмотря на

повышение сп.ГЮЛ у самцов до 29,539± 1,982 нмоль/ч (140,01) и уровня ТБК-рп у самок до 3,562 ± 0,280 имоль/0.5г ткани (140.05), скорость Аск.ПОЛ значимо снижается, причем у самцов более резко (в 2 раза но сравнению с контролем), под действием стрессора. Сдерживанию ПОЛ при его индукции, по-видимому, способствует некоторая активизация ферментного антиокендантного звена, что проявилось в повышении активности каталазы (Р<(),05 самцы и самки). Однако о напряжении антиоксидантной системы СР говорит факт повышения уровня ОМБ почти в 2 раза у молодых самцов, 1,7 раза — у молодых самок и резкое увеличение ЫО-метаболитов у крыс обоего пола (в 3,5 раза самцы и 1.6 раз самки).

В ходе старения уязвимость антиоксидантной системы СР увеличивается и ее емкости на хватает для сдерживания СРО в отпет на действие ССГ. У старых самок воздействие ССГ привело к увеличению всех показателей ПОЛ (Р<0,0()1), ОМБ (Р<(),001) и ОВП (140,05). У старых самцов имеют место аналогичные изменения, что у самок, однако скорость сп.ПОЛ в результате воздействия снизилась (Р<0.05). а ОВП возросло более резко (па 44 </<■). Снижение активность каталазы, СОД, Р-каротина, и а-токоферола у старых самцов и каталазы, СОД и р-каротина — у старых самок обменяет падение АОА ткани СР. Увеличение содержания а-ТФХ на фоне снижения а-токоферола может быть следствием усиления расходования антнокендаита по пути его окисления на фоне усиления СРО.

В мозжечке увеличение уровня ТБК-рп, сп.ПОЛ, ОМБ и ОВП у молодых самцов иллюстрируют интенсификацию СРО иод действием ССГ. У самок того же возраста изменения оказались менее выраженными, чем у самцов и проявились в снижении сп.ПОЛ до 25,85()± 1,250 пмоль/ч (Р<0.05 с сравнении с контролем) и ОВП до 0,180±(Ш)9 эВ (140,05 с сравнении с контролем), но в усилении уровня ОМБ в 1,5 раза и [МО-метаболитов в 1,8 раз. О более глубоком повреждении у молодых самцов говорит значимое снижение АОА, активности каталазы и СОД. а-токоферола и а-ТФХ. У молодых самок же, напротив активности каталазы и СОД увеличились при достоверном снижении Р-каротина и а-токоферола. Гакие разнонаправленные изменения в активности аитноксидантов позволило сохранить АОА мозжечка молодых самок на уровне контрольных значений.

Если у молодых животных больший повреждающий -эффект газа выявлен в МЧ у самцов, то в группах старых животных и у самцов, и у самок возросло ПОЛ по всем показателям, уровень ОМБ и ОВП. Эти изменения произошли на фоне снижения АОА па 24.9 % у самцов и 23% у самок, активности каталазы, Р-каротина, а-токоферола у животных обоего пола, а также усилении активности СОД у старых самцов, снижении содержания витамина А и увеличении а-ТФХ в мозжечке старых самок.

В условиях дефицита каталазы и глутатионпероксидазы высокая ферментативная активность СОД может служить причиной развития деструктивных процессов. В нашем эксперименте снижение активности каталазы при хроническом воздействии ССГ у старых животным может служить дополнительным фактором усиления радикал-иродуцирующей активности СОД с последующим ростом СРО.

Изменения уровня СРО и антиоксидантной системы ткани

продолговатого мозга в ответ на действие ССГ имеют схожие черты с изменениями, происходящими в ткани СР. Однако следует отметить некоторые особенности. У молодых самцов в ПД помимо кинетических показателей изменился уровень ТБК-рп (Р<0,05) в сторону достоверного увеличения. У самок того же возраста, напротив, содержание конечного продукта ПОЛ не изменилось под действием газа. Таким образом, антиокенданшая система ПД молодых самок лучше справилась с окислительной провокацией, о чем также говорит увеличение активности ни только каталазы (Р<(),()5), по и СОД (Р<0,05), в отличие от самцов.

У старых животных повреждающее действие газа проявилось в увеличении уровня ТБК-рп (Р<0,05), ОМБ (Р<(),01) и ОВП (Р<0,001) у самцов и более резком росте содержания ТБК-рп (на 204 %), сп.ПОЛ (на 91,7 %). ОМБ (па 23,6%) и ОВП (на 61 %) у самок.

На фоне интенсификации СРО в ткани ПД под действием токсиканта произошло значимое снижение активности каталазы (Р<0,0()1) и содержания Р-кяротнна и а-токоферола (Р<(),()01) у старых самцов и каталазы, СОД и Р-кпротина у старых самок. Следствием перечисленных изменений в активности антиокепдантов продолговатого мозга старых животных стало снижение ЛОЛ у животных обоего пола старшей возрастной группы, которая составила 41.23+2.703 % у самцов и 47,69±3,918 % у самок.

В спинном мозге молодых самцов на фоне хронического воздействия ССГ отмечено увеличение уровня ТБК-рп на 21 %, МО-метаболитов в 2,3 раза и снижение Лек.ПОЛ на 22,6 %. У самок того же возраста воздействие ССГ привело к снижению уровня ТБК-рп в 1,3 раза, сп.ПОЛ на 16,2 % и увеличению содержания N0 в 3,2 раза и ОВП на 18 %. Эти изменения сопровождались увеличением активности каталазы у молодых животных обоего пола и снижением содержания а-токоферола у самцов.

В СП старых крыс, не смотря на снижение сп.ПОЛ, произошло увеличение уровня ОМБ и ОВП у самцов. Л у самок возросло ПОЛ по всем показателям, ОМБ и ОВП. Достоверных изменений в изучаемых компонентах антпоксидантпой защиты в спинном мозге у старых самцов не выявлено. У самок же произошло даже увеличение активности каталазы, СОД и а-ТФХ при сниженном содержании р-каротина и а-токоферола.

Обращает на себя внимание факт повышения уровня ОМБ под действием ССГ но всех изучаемых тканях мозга и плазме крови крыс разного пола н возраста. При этом в мозговой ткани создаются условия для интенсивной генерации свободнорадикальных продуктов, повышения окислительной деструкции белков, липидов, что приводит к нарушению структуры клеточных мембран. Интенсификация процессов окислительной деструкции компонентов клеточных мембран мозговой ткани может явиться причиной изменений, связанных со способностью мембран проводить и воспроизводить нервный импульс, нарушения рецепторных, медиаторных и энергетических систем (Федорова Т.Н. и др., 1999, УсгЬеке Р. е1 а1., 2000).

Таким образом, полученные результаты о влиянии ССГ на сиободнорадикапьные процессы и антиоксидантный статус разных отделов ЦНС свидетельствует о половой и возрастной специфике происходящих изменений па разных уровнях ЦНС, что, вероятно, способствует перестройке

внутриструктурных связей с преобладанием процессов, способствующих адаптации отдельных структур ЦНС и всего организма в целом в условиях хронического воздействия серосодержащим газом.

4. Антиокспдантная коррекция свобод норадпюим.пих процессов, протекающих в тканях мозга п плазме крови на фоне воздействия серосодержащим газом Астраханского месторождения

Результаты исследований, приведенные в предыдущей главе, свидетельствуют, что воздействие ССГ Астраханского месторождения приводят к резкому росту свободнорадикальных процессов в плазме крови животных независимо от пола и возраста, что характеризует общей статус организма. Также полученные результаты говорят о ткапеспецифичности его действия в разных отделах головного и спинном мозге. 11а следующем тгапс представляло интерес изучить возможность коррекции повреждающего действия ССГ в разных структурах мозга и плазме крови аптнокеидантамп: а-токоферолом и эмоксипином.

Результаты изучения антиоксидантной коррекции поведенческих реакций крыс после воздействия ССГ свидетельствуют о том, что антиоксиданты привели к восстановлению не всех параметров ориентировочно-исследовательской реакции у молодых крыс. При этом витамин Е показал более высокие корректирующие свойства в сравнении с эмоксипином. Так, при введении а-токоферола число пересеченных центральных квадратов возросло по сравнению с группой ССГ у самцов крыс до контрольного уровня, тогда как у самок показатель стал даже выше, чем в контроле. Число вертикальных стоек с опорой оставалось ниже в сравнении с контрольной группой независимо от иола. Число актов груминга также снизилось практически до контрольного значения. Кроме того, было характерно снижение количества заглядыванин в норки у самок крыс. Эмоксипмн не привел к восстановлению поведенческих параметров, а в некоторых случаях еще более усилил эти сдвиги. Так, произошло снижение числа вертикальных стоек с опорой по сравнению с группой ССГ и контрольными животными, а также снижение числа заглядывашж в норку.

В группах старых животных а-токоферол п эмоксипнн на фоне ССГ вызвали неравнозначные изменения в поведении крыс. Гак введение витамина Е старым самцам привело к увеличению числа пересеченных центральных квадратов по сравнению с контрольной и опытной группами, снижению частоты груминга по сравнению с группой, получавшей ССГ. увеличению вертикальных стоек без опоры и порок по сравнению с опытом.

Эмоксипин на фоне ССГ привел к снижению числа пересеченных периферических квадратов, стоек с опорой, частоты актов груминга, норок и болюсов у старых самцов по сравнению с опытными животными.

У старых самок, получавших на фоне ССГ а-токоферол произошло изменение вертикальной и горизонтальной активности, что проявилось в снижении числа периферических квадратов, но увеличении выходов в центр, увеличении стоек без опоры, но снижении — с опорой. Частота актов груминга и число болюсов снизились по сравнению с затравленными ССГ животными. Такие разнонаправленные изменения поведенческих реакций старых самок могут косвенно говорить о различных эффектах, оказываемых

а -токоферолом на разные отделы ЦНС. Эмоксипин также как витамин Е увеличил выходы в центр, но, в отличие от него, снизил стойки без опоры, увеличил грумпнговую активность и число болюсов в сравнении с опытом.

Таким образом, результаты нашей работы свидетельствуют о возможности модуляции поведенческих реакций веществами с антиоксидаптпой активностью, что вероятно связано с изменением функционального состояния нейрональных мембран.

Результаты изучения стресс-реакции на фоне воздействия ССГ по показателю изменения количества эозинофилов свидетельствуют об уменьшении стрессорпой реакции у животных разного пола и возраста, получавших антиоксиданты на фоне хронического воздействия ССГ. И у молодых, и у старых крыс сх-токофсрол более значимо увеличил количество эозинофильпых гранулоцитов, чем эмоксипин, так, что у молодых крыс, и старых самцов этот показатель превысил даже контрольные значения.

При исследовании скорости свободнорадикальных процессов и уровня антиоксидаптпой защиты плазмы крови в ходе совместного введения токсиканта и аптиокспдантов установлено, что и а-токоферол, и эмоксипин значимо снизили ПОЛ (Р<0.05), ОМБ (Р<0,05) и ОВП (Р<0,05) в плазме крови молодых животных. Однако, витамин Е изменил большее число показателей. ЫО-метаболиты на фоне введения антиоксидантов увеличились в плазме крови только у самок, что, учитывая изначально высокий уровень ЫО-метаболитов в плазме контрольных крыс и снижении его на фоне ингаляций ССГ можно рассматривать как нормализацию уровня этого эндогенного модулятора. Снижение интенсификации СРО произошло на фоне увеличения активности каталазы и АОА плазмы крови под влиянием обоих антиоксидантов. Витамин Е также увеличил уровень витамина А ((),() 15±0,001 мкмоль/1г ткани, Р<0,05) у молодых самцов и р-каротина (0.14+0,008 мкмоль/1г ткани, Р<(),()()1) у молодых самок, а эмоксипин -активность СОД (1,50+0,081 у.е./мгбелка, Р<(),()5) у молодых самок.

Оба антиоксиданта снизили уровень ТБК-рп, ОМБ, МО-метаболитов, ОВП. скорости ПОЛ у старых самцов. У старых самок более значимо снизил уровень ТБК-рп и ОМБ витамин Е, чем эмоксипин. Если у старых самцов возросший на фоне ингаляций ОВП в ходе антиоксидантной терапии снизился, то у старых самок эмоксипин резко увеличил этот показатель.

Таким образом антиоксиданты оказали больший эффект в плазме старых самцов, нежели самок, что также проявилось в повышении АОА, активности каталазы плазмы крови старых самцов, но не самок. Помимо этого, у старых самцов витамин Е увеличил активность СОД. витамина А, Р-каротина и а-ТФХ, а эмоксниин — активность СОД и уровень витамина А.

У старых самок введение витамина Е на фоне воздействия ССГ увеличилась активность СОД, уровень р -каротина, а-токоферола и а-ТФХ по сравнению с опытной группой, а эмоксипин увеличил активность СОД и уровень Р-каротина.

Введение а-токоферола на фоне хронического воздействия вызвало усиление ПОЛ к брлмиих полушариях у молодых самок. У молодых самцов и старых крыс обоего пола витамин Е снизил некоторые показатели ПОЛ по сравнению с опытной группой.

Эмоксипин в отличии от а-токоферола вызвал усиление иероксидации липндов у молодых самцов, которое проявилось в увеличении уровня ТБК-рп в 1,5 раза (Р<0,()5), но сп.ПОЛ и Аск.ПОЛ снизились. Также хорошие антиоксидантные свойства эмоксипин проявил в БП молодых самок и старых крыс. ОМБ под влиянием обоих аптиоксидантов значимо снизилась во всех группах животных. ОВП в ткани БП молодых и старых животных на фоне воздействия ССГ был увеличен. Введение чмоксипина, в отличии от а-токоферола. привело к значимому снижению л ого показателя п у самцов, и у самок. Витамин Е привел к уменьшению ОВП БГ1 только старых самцов, а у молодых самцов - даже увеличил его значение (рис. 2, 4). Лнтиоксиданты. вводимые совместно с ССГ не изменили уровень МО-метаболитов, только витамин Е снизил этот показатель у старых самок (Р<().()5).

Несмотря на то, что ни витамин Е, ни эмоксипин не-изменили уровень общей антиокислительной активности, оба антиоксиданта в разной степени оказали влияние на отдельные составляющие аитиоксидаптной защиты. Так. сочетанное введение а-токоферола с ССГ вызвало снижение активности каталазы в ткани БП молодых самцов (Р<0.05 но сравнению с животными, получавшими ССГ), которая составила 2,()8±(), 139 у.сУмгбелка. Учитывая, что ингаляция ССГ без коррекции привела к увеличению активности этого фермента, снижение активности каталазы на фоне введения витамина Е может рассматриваться как компенсаторное. На это же указывает увеличение содержания Р-каротина в 1,45 раз (Р<0,()1), а-ТФХ в 1,37 раз (Р<0,()1) н ОТФ в 1,2 раза (Р<0,05). У молодых самок и животных старшей возрастной группы а-токоферол, напротив увеличил активность каталазы, что говорит о регуляторном влиянии а-токоферола на активность этого фермента. У молодых самок в этих же условиях эксперимента увеличилось содержание а-токоферола (Р<0,05).

Витамин Е увеличил большее число параметров АОЗ и больших полушариях старых животных: у старых самцов помимо каталазы, повысил содержание Р -каротина (Р<(),()5) и а-токоферола (Р<(),()5), у старых самок — витамина А (Р<0,05), Р-каротина (Р<0,05) и а-ТФХ (Р<(),()5).

Эмоксипин на фоне затравки вызвал в БП увеличение активности СОД (Р<0,05) и снижение а-ТФХ (Р<(),05) у молодых самцов, увеличение активности каталазы (Р<(),05) и снижение а-ТФХ (Р<(),()5) у молодых самок, увеличение активности каталазы у старых крыс обоего пола и СОД (Р<(),()5) — старых самцов.

У самцов и самок старшей возрастной группы оба антиоксиданта привели к увеличению большего числа показателей АО'З и как следствие -обшей антиокислительной активности ткани БП. что свидетельствует о целесообразности антиоксидаитнои коррекции в группах Старых животных.

В промежуточном мозге молодых животных введение аитиоксидаптов на фоне воздействия ССГ привело к активизации свободнорадикальных процессов, о чем говорит увеличение уровня ТБК-рп и Аск.ПОЛ у самцов и самок после введения витамина Е. Эмоксипин увеличил лишь содержание ТБК-рп у самок, но снизил Аск.ПОЛ. Оба антиоксиданта увеличили активность каталазы у молодых крыс. Витамин Е также увеличил уровень витамина А у молодых самцов, Р-каротина и у самцов, и у самок и а-ТФХ н ОТФ только у молодых самок.

Модуляция NO-метаболитов отмечена у молодых самок: сниженный ССГ уровень NO под действием а-токоферола увеличился на 126 %, а под действием эмоксипина на 49 %.

Картина изменения ОВГ1 в ПМ молодых крыс при совместном введении ССГ и антиоксидантов сходна с таковой в больших полушариях (рис. 2, 3). Оба антиоксиданта снизили ОВП ткани промежуточного мозга, причем эмоксипин привел к более резкому снижению этого показателя.

0,25 -] " , " * » ,

шмш

БП ПЫ1_CP_МЧ_ГЩ_ СП

| □ контроль U ССГ ВССС+ТФ ШССГ+Э~|

I'iiï. 2. Окисли гелыньтксгановительмын потенциал ií разных отделах Ц11С молодых самцов белых крыс после воздействия ССГ и введения антиоксидантов

I ]рнмечанне: * - /наличие точимо по сравнению с контрольной группой: " - различие точимо по cjHiiuicnuio с группой, поручавшей CCI

Введение на фоне ингаляций антиоксидантов привело к значимому снижению ПОЛ, ОМБ и NO-метаболитов в ПМ старых животных. Некоторые показатели эмоксипин снизил более значимо, чем а-токоферол. Так, у старых самок сочетанное введение ССГ и а-токоферола снизило уровень ОМБ на 30,6 %. а сочетанное введение ССГ и эмоксипина на 46,9 %.

Перечисленные изменения показателей свободнорадикапьных процессов в ПМ старых крыс проявились на фоне активации некоторых компонентов ферментативного и неферментагивного антиоксидантного звена. И а-токоферол, и эмоксипин увеличили активность каталазы у старых крыс обоего пола. Кроме того, а-токоферол увеличил уровень (3-каротина и эндогенного а-токоферола как у самцов, гак и у самок, а также витамина А — у старых самок. Эмоксипин привел к изменению большего числа параметров в ПМ старых самцов, нежели самок, что проявилось в увеличении активности СОД у животных обоего пола и в увеличении (3-каротина, а-'ГФХ и ОТФ только у старых самцов.

Таким образом антиоксидантная терапия оказала больший положительный эффект на ткань ПМ старых животных, чем молодых.

В ткани среднего мозга введение а-токоферола на фоне токсиканта привело к снижению ОМБ, и NO-метаболитов у молодых самцов и самок. В отличие от самцов у молодых самок витамин Е на фоне ССГ также усилил ПОЛ по показателям ТБК-рп и Аск.ПОЛ, что косвенно свидетельствует о высокой активности собственной антиоксидантной защиты среднего мозга молодых самок по сравнению с самцами. Об этом же говорит значимое увеличение OBII (рис. 3). a-Токоферол привел к снижению активности каталазы в среднем мозге у молодых самцов и увеличил содержание витамина А, а-ТФХ и ОТФ у молодых самок.

1

0,25 0,2 0,15 0,1 -0,05

J о

I БП _ПМ_CP_МЧ_ПД_ СП

□ контроль ИССГ ИССС+ТФ ИССГ+Э

Рис. 3. Окислителыю-восстанов1п'слыи.1м потенциал и разных отделах III 1С молодых самок белых крыс после воздействия С'СГ м введения апшокепдаицж

И у самцов, и у самок младшей возрастной группы токоферол снизил уровень NO-метаболитов. При этом повышение содержания тканевого | токоферола не произошло, а у самок увеличилось содержание его

метаболитов. Вероятно, это связано с повышенным расходованием ' токоферола в условиях оксидативного стресса, которое может происходить

при взаимодействие а-токоферола с пероксинитритом, сопровождаться двухэлектронным окислением и приводить к образованию преимущественно 8а-метокситокоферона и а-ТФХ (Hogg N. El al., 1994).

В CP старых животных и а-токоферол. и эмоксипин снизили усиление пероксидации на фоне ингаляции ССГ. что выразилось в снижении уровня ТБК-рп, ОМБ, ОВП и Аск.ПОЛ. Предварительное введение эмоксипииа привело к более резкому, по сравнению с сх -токоферолом, снижению ОВП. Кроме того, эмоксипин снизил уровень NO-метаболитов у старых самцов и скорость сп.ПОЛ у старых самок.

Анализ полученных данных о состоянии антиоксидантной защиты CP показал, что наибольшее число изучаемых параметров изменилось у старых | самцом при коррекции а -токоферолом. Предварительное ведение витамина

Е привело к увеличению сниженной под действием ССГ активности катапазы (Р<0,05), СОД (Р<0,05), содержания p-каротина (Р<0,()5) и а-токоферола | (Р<0.05). что вызвало повышение АОА (Р<0,05) ткани CP старых самцов. У

старых самок этот же антиоксидант увеличил только активность каталазы (Р<0,05) и содержание p-каротииа (Р<().()5).

Введение эмоксипииа на фоне ингаляций увеличило активности каталазы (Р<0.05) и СОД (Р<0.05) у старых крыс обоего пола и уровень ОТФ (Р<0,05) в среднем мозге старых самок.

Таким образом динамика изменений СРО и антиоксидантной защиты в среднем мозге имеет схожие черты с таковыми промежуточного мозга.

В мозжечке молодых самцов введение а-токоферола на фоне ССГ I усилило скорость спонтанного ПОЛ (Р<0,05), NO-метаболитов (Р<0,05) и

ОВП (Р<0,()5). Несмотря на усиление пероксидации липидов. ОМБ на этом 1 фоне снизилось (Р<0,05). Усиление ПОЛ и ОВП, возможно, связано с

перегрузкой собственной антиоксидантной системы МЧ, т.к. экзогенных а-токоферол увеличил СОД, а-токоферол и а-ТФХ у молодых самцов.

Эмоксипин. напротив снизил все показатели ПОЛ (Р<(),05) и ОМБ (Р<0,()5), но также как а- токоферол увеличил ОВП (Р<0,05). на фоне

* * 1

повышения активности каталазы (Р<(),()5) и СОД (Р<(),05).

В МЧ молодых самок витамин Е с одной стороны снизил уровень ТБК-рп и ОМБ, по увеличил кинетические характеристики ПОЛ. Также а-токофсрол снизил возросший на фоне ингаляций ССГ уровень N0 (Р<0,05). Эти изменения СРО отмечены на фоне снижения активности каталазы (Р<().()5) п повышения содержания Р-каротина (Р<(),05) и а-ТФХ (Р<0,05).

Эмокснпнн при неизменном уровне ТБК-рп снизил Аск.ПОЛ, но увеличил сн.ПОЛ и МЧ молодых самок. При этом и МО-метаболиты, и ОВП значимо снизились, что сопровождалось снижением активности каталазы.

В старших возрастных группах самцов и самок оба антиоксиданта привели к снижению ПОЛ, ОМБ и ОВП в мозжечке. И эмоксипин, и а-токоферол оказали большее влияние на антиоксидантную систему МЧ старых самцов. Витамин Е увеличил активность каталазы (Р<0,05) и содержание Р-каротнна (Р<(),05) и эндогенного а-токоферола (Р<0,05) при снижении активности СОД (Р<0,05), а эмоксипин увеличил активность каталазы (Р<(),05), что повысило АОА ткани мозжечка.

У старых самок в мозжечке витамин Е увеличил активность каталазы, содержание витамина А (Р<0,05), Р-каротина (Р<(),05) и а-токоферола (Р<(),()5). а эмоксипин увеличил только активность каталазы (Р<0,05).

Таким образом, эмоксипин действует одинаково на изучаемые показатели СРО и аитиоксидантиой системы старых самцов и самок. Большей половой дифференцировкой отличается действие антиоксидантов на ткань мозжечка молодых животных.

Введение а-токоферола в ходе ингаляций ССГ смодулировало показатели ПОЛ в продолговатом мозге следующим образом: увеличенный на фойе ингаляций ССГ уровень ТБК-рп под действием витамина снизился (Р<0,()5). и, напротив, сниженная на фоне воздействия токсиканта сп.ПОЛ увеличилась (Р<0,()5). а-Токоферол снизил также ОМБ (Р<0,()5), МО-метаболиты (Р<0,()5) и увеличил ОВП (Р<0,()5) в ПД молодых самцов. В антиоксидантной системе этой области под действием витамина Е произошло снижение активности каталазы (Р<0,05), что свидетельствует о компенсаторных сдвигах на фоне поступления экзогенного токоферола и о высокой буферной емкости собственной АОС продолговатого мозга.

Эмоксипин привел к равнозначным изменениям свободнорадикапьных процессов п антиоксидантной системы в ПД молодых самцов, что и а-токоферол, однако ОВП под действием эмоксипина в отличии от витамина Е не изменился, что говорит о большей чувствительности этой области ЦНС к и-токоферолу, чем к эмокеннипу (рис. 2).

В ПД у молодых самок а-токоферол на фоне ингаляторного воздействия ССГ усилил ПОЛ по показателям ТБК-рп (Р<0,05) и скорость индуцированного ПОЛ (Р<(),()5), сравняв их с контрольными значениями, а также значимо снизил уровень ОМБ (Р<(),()5). Активность изучаемых эндогенных антиоксидантов в этих же условиях не изменилась.

Эмоксипин увеличил скорости ПОЛ при неизменном уровне ТБК-рп и снизил ОМБ (Р<(),05) и ОВП (Р<0,()5) в продолговатом мозге молодых самок.

В группах старых крыс коррекционный эффект антиоксидантов имел схожие между собой черты. И а-гокоферол, и эмоксипин на фоне

воздействия ССГ снизили содержание ТБК-рп. ОМЬ и ОНИ в Г1Д старых самцов (рис. 4). Однако, витамин Е снизил уровень ОМБ в 2 раза, но сравнению с группой, получавшей только ССГ, а эмоксипин — в 1,3 раза. С другой стороны эмоксипин более значимо, чем а-токоферол, снизил OBI!. Если картина изменения СРО на фоне предварительного введения антиоксидантов у старых самцов схожа, то большее число параметров эндогенной АОС изменил все же а-токоферол. Так, витамин Е увеличил активность катапазы (Р<0,05) и содержание (3-каротина (Р<0,()5) и тканевого а-токоферола (Р<0,05), которые снизились под действием экотоксиканта. Эмоксипин скорректировал в сторону повышения только активность катапазы (Р<0,05) в продолговатом мозге старых самцов.

Рис. 4. Окислительно-восстановительный потенциал в разных отделах I (11С старых самцов белых крыс после воздействия ССГ и введения антиоксидантов У старых самок в ПД действие антиоксидантов проявилось по разному. a-Токоферол более значимо на 61.4 % снизил уровень ТБК-рп (по сравнению с опытом), чем эмоксипин, и приблизил это значение к контрольному. Несмотря на то, что эмоксипин снизил этот показатель на 54,6 % по сравнению с опытной группой, уровень ТБК-рп остался выше контроля. Кинетические же показатели ПОЛ снизились только на фоне предварительного введения эмоксипина. Оба антиоксиданта предотвратили рост ОМБ на фоне хронических ингаляций и снизили OBI 1 в ПД. Повышенный уровень NO-метаболитов снизился только при сочетанном введении ССГ и витамина Е (Р<0,()5). a-Токоферол увеличил большее число показателей антиоксидантной защиты ПД, чем эмоксипин. Оба антиоксиданта увеличили активность катапазы и СОД, а а-токоферол также повысил содержание (З-каротина до 0,36+0,032 мкмоль/1 г ткани (Р<().()5).

Таким образом негативное воздействие ССГ предотвратили оба антиоксиданта и в лучшей степени в продолговатом мозге старых животных, а-токоферол скорректировал большее число показателей СРО и АОС.

Введение антиоксидантов на фоне воздействия ССГ привело к изменению незначительного числа параметров в спинном мозге молодых самцов. Витамин Е снизил только уровень NO-метаболитов (Р<0,()5), а эмоксипин значимо увеличил уровень ТБК-рп (Р<0,05), но снизил ОВП (Р<0,05) в этой области. Снижение NO-метаболитов под действие а-токоферола произошло на фоне увеличения содержания токоферола и его метаболита — а-ТФХ, что еще раз подтверждает возможность участия витамина Е в предупреждении образования пероксинитрита путем окисления а-токоферола с образованием а-ТФХ. Кроме того, введение а-токоферола на

фоне ССГ снизило активности каталазы (Р<0,05) и СОД (Р<0,05) и увеличило содержание витамина Л (Р<0.()5) и p-каротина (Р<0,05). Такое снижение активности основных ферменгов-антиоксидантов при введении а-токоферола. учитывая повышение активности каталазы под действием сероводородсодержащего газа, можно рассматривать как компенсаторное.

0.35 -, I

БП ПМ_СР_МЧ_ПД_ СП

□ контроль ИССГ ЕССС+ТФ ИССГ+Э

IMk',5. Окислм гслыю-носсишоыггельиый потенциал в разных отделах ЦНС старых самок белых крыс после воздействия ССГ и введения антиоксидантов

Введение эмоксипина привело к увеличению содержания а-ТФХ (Р<().()5) и ОТФ (Р<0,05) в СП молодых самцов, что косвенно говорит с I одной стороны об усиленной утилизации токоферола, а с другой стороны,

учитывая обратимость реакции а-токоферол — а-ТФХ или а-токоферол ~ ОТФ — о накоплении биологически активных метаболитов токоферола.

У молодых самок ССГ' вызвал резкое снижение показателей ПОЛ (ТБК- 1 рп и сп.ПОЛ). Введение витамина Е привело к значимому увеличению ТБК-рп и сп.ПОЛ до уровня превышающего даже контрольные значения, а эмоксипина — к увеличению уровня ТБК-рп (Р<(),()5), но падению скоростей ПОЛ и по сравнению с опытной, и по сравнению с контрольной группой. Помимо этих изменений оба антиоксиданта снизили содержание конечных метаболитов NO и ОВП. Учитывая, что и эмоксипин, и а-токоферол снизили активность каталазы, рост ПОЛ может свидетельствовать о важности поддержания этого процесса на физиологическом необходимом для ткани СГ1 уровне. Кроме того витамин Е и эмоксипин увеличили уровень а-ТФХ, a эмоксипин снизил содержание а-токоферола, что говорит в пользу того, что именно а-токоферол в ходе своего окисления предотвращает развитие окислительного стресса, вызванного повышением уровня NO-метаболитов.

У старых самцов повышенный под действием ССГ уровни ТБК-рп, ОМБ, а также ОВП в СП были успешно снижены антиоксидантами. а-Ткоферол на фоне ССГ' увеличил содержание витамина А (Р<0,05), (3-каротина (Р<0,05) и а-токоферола (Р<(),05), а эмоксипин — ОТФ (Р<0.05). L

В СП старых самок оба антиоксиданта предотвратили последствия окислительного стресса, вызванного ССГ, в результате чего были снижены ПОЛ, ОМБ п ОВП. Учитывая возросшую под действие токсиканта активность каталазы и СОД, их снижение под действием антиоксидантов вполне оправданно. К тому же и витамин Е, и эмоксипин предотвратили

Г

окисление эндогенного а-токоферола, повысили его уровень, a в опытной группе, получавшей совместно с газом «-токоферол, увеличилось содержание (3-каротина.

Таким образом в ткани спинного мозга ярко проявилось модулирующее действие а-токоферола и, в меньшей степени, эмоксипина на равновесие в системе антиоксиданты — проокендапты. Если сниженные на фоне хронического воздействия ССГ процессы пероксидации и активность антиоксидантов повышались под влиянием антпоксидаптов, то завышенные по сравнению с контролем показатели, напротив, снижались.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

При экспериментальном стрессе у животных имсег место активация перекисного окисления липидов в различных органах, тканях и периферической крови. Выраженность сдвигов в системе «лииоперокепдация — антиоксидантная защита» во многом зависит от специфичности действия стрессора, его силы и реализуется в различных системах и органах неодинаково.

Результаты наших исследований выявили половые и тканевые различия у молодых животных, которые проявились в более высоком уровне ТБК-рп у самок, чем у самцов в больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге. Интересен установленный факт разнонаправленного изменения этого показателя у животных разного пола: у самцов повышение, а у самок -понижение и факт отсутствия возрастных изменений активности исследуемых антиоксидантов в продолговатом мозге. Основываясь на результатах нашего эксперимента можно заключить что, чем филогенетически более древний отдел ЦНС, тем в меньшей степени появляются половые различия у иитактных молодых животных в уровне свободиорадикальных процессов и исследуемых звеньев антиоксидантной защиты.

Введение витамина Е и эмоксипина интакгным крысам и целом не изменяет АОА, т.к. происходят компенсаторно-ретуляторпые изменения в ферментативном и неферментативном аптпокендаптном пуле нервной ткани. Эти сдвиги более выражены у молодых животных, что позволяет сохраня ть их антиоксидантный статус на стационарном уровне. В ходе старения, на фоне снижения общей метаболической активности, увеличения проницаемости ГЭБ усиливается потребность животных в антиоксида!ггах. По вектору н степени реагирования на введение антиоксидантов наиболее сходны между собой промежуточный и средний мозг, продолговатый н спинной.

Нами показано, что эмоксипнн нередко не оказывал ожидаемого антиоксидантного действия у интактных молодых животных, однако в случае возрастных изменений ПОЛ, вносил вклад в стабилизацию СРО.

Основываясь на проведенном исследовании влияния ССГ на окислительные процессы в нервной ткани нами разработан функциональный подход к оценке степени выраженности стрессорпых реакций по состоянию свободиорадикальных процессов на разных уровнях центральной нервной системы у молодых и старых животных разного пола.

Полученные результаты по изучению состояния свободиорадикальных процессов на фоне хронической интоксикации, свидетельствуют о

разбаланснровкс системы ПОЛ-ЛОЗ, которая проявилась в неодинаковой степени в разных отделах ЦНС.

Для интегральной оценки полученных результатов мы использовали классификацию Ф.И. Фурдуй с соавг. (1996), предполагающую деление физиологических и патологических ответных реакций организма в условиях стресса па три тина: 1) функционально-нормативный тип реакций, характеризующийся устойчивым функционированием органов, тканей и систем; 2) функционально-паранормативный, отличительной особенностью которого являются неустойчивые, лабильно-обратимые изменения физиологических и биохимических параметров тех или иных систем или органов: 3) стабильно-гетеростазный тип реакции, предполагающий стойкие отклонения физиологических и биохимических параметров тех или иных органов или систем.

На основании полученных данных мы выделили следующие ситуации:

• Усиление СРО н увеличение активности эндогенных антиоксидантов — соответствуют 1-ому уровню стрессированности (аварийная стадия, функционально-нормативный тип реакции).

• Разнонаправленное, небольшое по модулю изменение скорости СРО, при этом активность антиоксидантов выходит на плато (близко к контрольным значениям) или же несколько выше — 2-ой уровень стрессированности (стадия относительной компенсации, функционально-паранормативный тип реакции).

• Истощение аптиоксидаптного пула с резким спадом активности. При этом возможно как усиление СРО, так и его спад — 3-ий уровень стрессированности (стадия стойких функциональных отклонений, стабнлыю-гстеростазнып чип реакции).

У молодых самцов наиболее чувствительным к воздействию оказался мозжечок н промежуточный мозг, а у молодых самок — большие полушария, промежуточный мозг и мозжечок, т.к. их реакция в ответ на токсикант соответствует стабильно-гетеростазному типу. Следующие по стрессорной устойчивости - это большие полушария, средний и продолговатый мозг у молодых самцов и средний и продолговатый — у молодых самок. Их состояние соответствует функционально-паранормативному типу реакции). Спинной мозг независимо от половой принадлежности оказался самым устойчивым, т. к. после 1,5-месячного хронического воздействия ССГ его состояние по изучаемым показателям соответствовало функционально-нормативному т ипу реакции.

Свободнорадикалышя теория старения связывает возрастные отклонения с усилением продукция активных форм кислорода на фоне снижения активности антиокепдантной защиты, что приводит к накоплению продуктов окислительного повреждения. С возрастом происходит снижение адаптивных возможностей организма при разных скоростях снижения резистентности отдельных органов и тканей. Вышеуказанные процессы углубляются на фоне вредных внешних воздействий. Очевидно, что устойчивость к различного рода воздействиям различна у молодых и старых животных как на уровне целостного организма, так и на уровне отдельных органов и тканей. У старых животных, и у самцов, и у самок наиболее

уязвимыми к оксидативному стрессу, вызванному газообразным токсикантом оказались все изучаемые отделы ЦНС, кроме спинного мозга.

Нам представляется, что анализ структуры и выраженности типов реакции со стороны отдельных органов или систем при стресс-нпдуцируюшпх воздействиях имеет прогностическое и отчасти диагностическое значение. Последнее находит выражение в определении уровня стрессорного повреждения и установлении того или иного тина реакции. Использование показателей, характеризующих уровень свободпорадпкальных процессов и активность антиокислительных систем, в качестве индикаторов выраженности стрессорного процесса (острого и хронического) и его прогнозирования является перспективным направлением. Эти исследования позволяют понять роль свободнорадикальных реакций в развитии самого стресса, сто последствий и наметить пути его коррекции. Состояние свободнорадикальных реакций и активности антиокнслительпых систем (ферментативных и неферментативных), является критерием оценки надежности биосиетем и состояния адаптивных механизмов па разных уровнях организации живой материи.

Учитывая важность поддержания функций ЦНС для правильной работы всего организма в целом, а также чувствительность клеток мозга к недостатку кислорода, который сопровождает многие патологические процессы, в том числе токсикогенной природы, своевременное применение антиоксидантов способно предотвратить или сгладить последствия сероводородной интоксикации.

Анализируя полученные данные о возможности коррекции СРО антиоксидантами на фоне токсического воздействия ССГ можно заметить, что во всех тканях ЦНС повышенное содержание ОМБ и опытной труппе под действием антиоксидантов снижалось. Снижение окислительной модификации белков на фоне введения антиоксидантов при хроническом воздействии ССГ говорит о возможности предотвращения окислительных повреждений а-токоферолом и омоксипииом на начальной стадии окислительных деструкции. Учитывая, что продукты окислительной модификации белков, так же как и продукты ПОЛ, обладают цитотоксическим действием, можно заключить, что исследованные антиоксиданты предотвращают не только инициацию СРО, по и каскад окислительных изменений, вызванных конечными продуктами окисления мембранных компонентов.

И а-токоферол, и эмоксипин проявили себя как достаточно сильные антиоксиданты. Однако, сравнивая значения ОВП после коррекции антиоксидантами (рис. 2, 3, 4, 5), можно заключить, что эмоксинпн но всех отделах ЦНС (кроме мозжечка и продолговатого мозга молодых самцов) приводит к значимому снижению этою показателя по сравнению с животным, получавшими ССГ. Токоферол, в некоторых случаях, даже превысил значение ОВП по сравнению с опытной группой. Повышение ОВП при действии ССГ и последующем введении а-токоферола были зафиксированы в больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге, мозжечке молодых самцов и среднем мозге молодых самок, что может быть косвенным доказательством напряжения антиоксидантной системы в

перечисленных отделах

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что ткань мозга более чутко реагирует на действие а-токоферола, чем на эмоксипин, что проявляется в модуляции ПОЛ, на фоне снижения ОМБ у молодых животных. Введение аитноксидантов на фоне ССГ у старых крыс приводит к более выраженному аптиоксидантному эффекту во всех изучаемых нами отделах ЦНС и плазме крови, что говорит о своевременности и целесообразности антиоксидантпой коррекции на этом этапе. Таким образом, если эмоксипин проявляет антноксидантиое действие практически во всех исследованных нами тканях, то действие а-токоферола обладает большей половой и тканевой спецификой и оказывает модулирующее действие на СРО. что объясняется присутствием в его спектре физиологических эффектов не только антиоксидантпой и антирадикальной составляющих, но в том числе и витаминной.

Анализируя полученные нами результаты по исследованию влияния серосодержащего газа Астраханского месторождения можно заключить, что реакция разных отделов ЦНС на токсикант хотя и неодинакова, однако своевременное применение аитноксидантов может способствовать нормализации многих характеристик СРО. Однако антиоксиданты могут привести к разнонаправленному (как положительному, так и отрицательному) эффекту. Результаты наших экспериментальных исследований свидетельствуют о необходимости поддержания гомеостаза в достаточно узком 'интервале. Поэтому как повышение, так и снижение СРО могут повлечь необратимые Изменения в структуре клеточных и функции нейронов и, как следствие, изменение их физиологических и физико-химических хара ктер нети к.

ВЫВОДЫ

1. Половые и возрастные различия свобод|юрадикальпых процессов в разных отделах I (11С и плазме крови проявились в более низких значениях иерекиспого окисления липидов п белков и более высоком уровне N0 в плазме у молодых самок, по сравнении) с молодыми самцами. В больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге молодых самок уровень ТБК-рсактивпых продуктов выше, чем у самцов. В процессе старения у самцов и самок имеет место разнонаправленное изменение уровня ТБК-реактивных продуктов — у самцов повышение, у самок - понижение.

2. Общая антиокислителышя активность плазмы крови и мозга у молодых и старых самок выше, чем у самцов внутри возрастной группы. Активность СОД и содержание ви тамина А в плазме крови у молодых самок выше, чем у самцов. В мозге молодых самок содержание жирорастворимых антиоксидаптов превышает таковое самцов. Половые различия антиоксидантпой системы отсутствуют в продолговатом и спиппом мозге животных. С возрастом у самцов н самок происходит снижение активностей ферментативных и содержание пефермсптативных аитноксидантов в плазме крови и мозге, за исключением продолговатого и спинного мозга, что приводит к более выраженным половым различиям у старых животных.

3. Введение ((-токоферола и шоксииииа оказывает более выраженное антноксидантиое действие на свободпорадикальные процессы в плазме крови и мозге старых животных. Витамин К оказывает прооксидаитное действие

преимущественно у самок, что проявляется в повышении уровня ГЬК-реактивиых продуктов в плазме крови, среднем, продолговатом и спинном мозге у молодых самок и в Гвдлыпих полушариях, промежуточном, среднем мозге и мозжечке старых самок. г)моксинип реже, чем «-токоферол (и только п плазме крови молодых самок) приводил к усилению IIOJI. И н-токоферол. и эмоксипин вызвали компенсаторные изменения в изучаемых звеньях антиоксидантной системы плазмы крови и мозга молодых животных.

4. Введение витамина Е приводит к увеличению большего числа параметров горизонтальной и вертикальной активности определяющих уровень ориентировочно-исследовательской реакции молодых животных. И а-токоферол, и эмоксипин увеличиваю) горизонтальную центральную активность и число стоек с опорой при неизменной или сниженной нерпферическо-горизоитальной и вертикальной активности без опоры и группах старых животных. Поведенческие половые различия в большей степени проявились у старых животных в ответ на введение «-токоферола.

5. Наиболее чувствительным к воздействию серосодержащего таза Астраханского месторождения у молодых самцов оказался мозжечок и промежуточный мозг, а у молодых самок — большие полушария, промежуточный мозг и мозжечок. У старых животных обоего пола газообразный поллютант инициировал развитие океидативного стресса по всех изучаемых отделах ЦНС. Наиболее устойчив!,im к воздействию является спинной мозг.

6. При хроническом воздействии серосодержащим ['азом на фоне снижения горизонтальной и вертикальной активности у молодых и старых животных происходит усиления груминговой реакции, что свидетельствует о нарастании страха н ходе нарушения механизмов регуляции повеления при изменении функционального состояния нейропальпых мембран, а -Токоферол и эмоксипин корректируют эти изменения.

7. Ткань мозга более выражено реагирует на действие сх -токоферола, чем на эмоксинин, что проявляется в модуляции морские!юго окисления .чинило». на фоне снижения окислительной модификации белков у молодых животных. Введение антиоксидаитов старым крысам на фоне хронического воздействия приводит к более выраженному аптиоксидаптпому эффекту во всех отделах ЦНС и плазме кропи, что говорит о своевременности и целесообразности антиоксидантной коррекции. Снижение уровня окислительной модификации белков свидетельствует о положительных эффектах аптиокендаптной на всех этапах развития окислительного стресса.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I.Мажитова, М.В. Свободно-радикальные процессы н центральной нервной системе в норме и при действии стрессогеипых факторов |Текст| / М.В. Мажитова. - Астрахань: изд-но АГМА. 2010. - 162 с. (Монография) *2.Мажитопа, М.В. Ткапеспспифическис и половые особенности нерекисного окисления липидов белых крыс при введении доксорубицина |Текет| / М.В. Мажитова, E.H. Кондратенко. А.Г'. Глинина. Д.Л. Теплый, И.В. Чиптимирова // Журнал Нейрохимия. - изд-но РАН, 2000. - Т. 17. - № I. - С. 32 - 36. *3.Мажитова, М.В. Медико-биологические аспекты влияния серосодержащих токсикантов [Текст] / М.В. Мажитова // Естественные науки - Астрахань:

издательский лом «Астраханский университет», 2009. -№ 2 (27). - С. 131-136. *4.Мажи'1'она. М.В. Морфологические проявления вазомоторной дисфункции эндотелия на фоне хронического воздействия еероводородеодержащего газа 1'Гокс11 / М.В. Мажитова, Т.Д. Шишкина. 11.11. Тризно, O.A. Доброславская // Журнал Морфология. 2009. - № 4. - С. 157.

®5. Мажптона, М.В. Влияние еероводородеодержащего газа на поведенческие реакции белых крыс |Текст] / М.В. Мажитова, 1 I.A. Ломтева. Д.Л. Теплый. H.H. Тризно, Е.И. Кондратенко // Известия Самарского научного центра Российской академии паук. - изд-во Самарского научного центра РАН, 2009 - Т. 11 (27). -№1 (5). - С. 988-990.

*6.Мажитова, М.В. Исследование возможности определения эмоксипина по его реакции с м-крезолфталексоном SA и в присутствии ионов железа [Текст] / М.В. Мажитова, М.А. Карибьянц // Естественные пауки - Астрахань: издательский дом «Астраханский университет», 2009. -№ I. (26) - С. 33-40. '■7.Мажи това. М.В. Возрастные и половые особенности свободно-радикальных процессов и аптиокеидаптнон защи ты плазмы крови белых крыс [Текст] / М.В. Мажи това, /(.Д. Теплый // Естественные науки, 2010 - №1(30). - С. 79-85. *8.Мажитова. М.В. Возрастные и половые особенности антиоксидаптной зашиты и свободно-радикальных процессов в мозге белых крыс ¡Текст] / М.В. Мажитова, /[.Л. Теплый. 11.11. Тризно //Журнал «Успехи геронтологии», 2010. -Т. 23,-№3,-С. 396-400.

*9.Мажитова. М.В. Изменение aiттиоксиданпюго стшуса и свободиорадикальных процессов в крови белых крыс при хроническом воздействии еероводородеодержащего газа |Текст| / М.В. Мажитова // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - изд-во Самарского научного астра РАН, 2010 - Т. 12. - №1 (7). -С. 1766-1768*

*10.Мажитона, М.В. Влияние серонодородеодержашего газа Астраханского месторождения mi уровень конечных метаболитов N0 плазмы крови [Текст] / М.В. Мажтова. Д.Д. Теплый, В.К). Шур, И.А. Беднов, Д.В. Карпсева, Л.Ю. Белышева // Аллергология и иммунология 2011. - Т 12. - №1. - С. 57. *11.Мажи това. М.В. Влияние еероводородеодержащего газа па свобод! юрадикальиые процессы в нешралмюй нервной системе |Текст| / М.В. Мажитова, Д.Д. Теплый. В.К). Шур, O.A. Овсянникова, И.А. Беднов. M.II. Тризно, М.Д. Осипенко, М.А. Карибьяни // Естественные н технические пауки, 2011. - № I (51). - С. 78 - 81. *12.Мажитова. М.В. Определение эмоксипина в биологическом материале с применением м-крсзолфталексопа SA [Текст] / М.В. Мажитова, М.А. Карибьянц, Д.Л. Теплый // Естественные пауки, 2011. - №1 (34).- С. 226-231. *13.Мажитова, М.В. Свободнорадикальиыс процессы в среднем мозге на фоне экспериментального хронического воздействия серосодержащим газом [ Текст] / М.В. Мажи това // Естественные и технические науки, 2011. - № 4. - С. 217-220. *14.Мажитопа, М.В. Исследование влияния серосодержащих поллютантов на свободнорадикальиыс процессы в мозжечке белых крыс [Текст] / М.В. Мажитова // Фундаментальные исследования, 2011. - № 10. - С. 422-427. й:15.Мажитова, М.В. Спектрофотометричеокое определение уровня метаболитов моноокенда азота в плазме крови и ткани мозга белых крыс [Электронный ресурс] / М.В. Мажитова // Современные проблемы науки и образования. -

2011. 3; URL: www.sciencc-L4lucation.ni/y7-46fi5.

*16.Мажитова, M.В. Экспериментальное изучение возможности аитиоксидаптпой коррекции свободиорадикальных процессов в центральной нервной системе при хроническом воздействии серосодержащих ноллютантои [Текст] / М.В. Мажитона II Известия Самарскою научного центра Российской академии паук, том 1.3, №1(7). 201 I. С. 1734-1736.

17.Мажитова, М.В. Изменение скорости перекисного окисления лииидон и катал азной активности в печени белых крыс иод влиянием и-токоферола и ионола П'екет] / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. Д.Г. Глнника. C.B. Бормотона. Н.А. Зайцева. Т.Д. Гребенщикова // В кн. тез. докл. и тоговой науч. конф. АГПУ 29 апрель. 1997. -С. 22.

18.Мажитовп, М.В. Изменение скорости перекисного окисления линидов и ткани больших полушарий мозги белых крыс под влиянием гопадожтомин и на фоне введения аптиоксидаитов |Текст| / М.В. Мажитова, ДЛ. Теплый. А.Г. Глинипа. И.А. Зайцева, Т.Д. Гребенщикова // В кн. тез. докл. итоговой науч. конф. АГПУ 29 апреля. 1997. - С. 23.

19.Мажитоиа, М.В. Сравнительное изучение перекисного окисления лииидон » гомогепатах мозга и печени на фоне введения аитиокендаптов и топило ж томии [Текст] / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. А.Г. Глинипа // В кн. тез. докл. Всероссийской конф. «Астраханский край: история и современность», -Астрахань:.А ГПУ, 1997. - С. 312 - 314.

20.Мажитова, М.В. Влияние антиоксидантов, гонадочктомии и их сочетаний на скорость перекисного окисления линидов и каталазную актиниость в гепагоцитах белых крыс [Текст] / М.В. Мажитова. Д.Л. Теплый. А.Г. Глинипа. C.B. Бормотова // В кн. тез. докл. Всероссийской конф. «Астраханский кран: история и современность», - Астрахань: АП 1У, 1997. - С. 331 - 333. 21-Мажитова, М.В. Окислитслыю-восстанопительпый потенциал мозга и печени белых крыс в условиях окислительного стресса |Текст| I М.В. Мажитоиа. А. Дубровин. О. Дубровина // В кн. тез. докл. итоговой науч. конф. АГПУ апрель. 2001.-С. 55.

22.Мажигова, М.В. Влияние промышленного природного сероводородсодержашего газа Астраханского месторождения па нерекиспое окисление линидов в тканях мозга и печени / М.В. Мажитона, Г.И. Кондратенко [Текст] // Проблемы охраны здоровья и окружающей среды: Сборник научных трудов, посвященный 20-летию ООО «Астраханьгпзпром». - Астрахань. 2001. -С. 239-241.

23.Мажитова, М.В. Исследование окислительного стресса в тканях мозга, печени и крови белых крыс иод воздействием промышленного природного серонодородсодержашего газа астраханского месторождения |'1екст| / М.В. Мажитона // Вестник МГОУ. Серия «1-стестнеппые пауки». Выпуск «Химия и химическая экология». - Москва: изд-во МГОУ, 2006. -№3. - С.165-169.

24.Мажитова. М.В. Особенности окислительных процессов в гипоталамусе белых крыс при введении альфа-токоферола | Текст 1 / М.В. Мажи това. Г.В. Курьянова // 11 Всероссийская конференция-школа «Выеокореакнионпые интермедиа™ химических реакций» Chemlnl 2007, программа и тезисы докладов, 27-29 августа 2007. Астраханская область, 22-26 октября 2007,

Московская область. С. 19.

25.Мажитова. М.В. Влияние серосодержащего газа Астраханского месторождения на содержания конечных метаболитов N0 и уровень малонового днальдегида и плазме крови белых крыс [Текст] / МЛ. Мажитова, Д.Д. Теплый, H.I I. Тризно // Астраханским медицинский журнал. - Астрахань-Москва. - 2008. - Т.З. - №3. - С. 261 -263.

26.Мажитова. М.В. Изменение продукции оксида азота и цитокипового статуса па фоне хронического воздействия токсическими веществами [ Текст] / М.В. Мажитова. 11.11. Тризно, O.A. Молоткова, Т.А. Шишкина, Д.А. Алешин // Коиф. с международным участием «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине. Успехи современного естествознании» (приложение) 2008. - № 7. - С. 158-159.

27.Мажитова, М.В. Модуляция исрскисиого окисления линидов в разных отделах центральной нервной системы иод воздействием серосодержащего газа |Текст| / М.В. Мажитова, Д.Д. Теплый. ДЛ. 'Теплый, H.H. Тризно, H.H. Карпеева. O.A. Ходарииа// XV Междуиар. 11аучпо-практич. Коиф. «Экология и жизнь».-Пенза. 2008. - С. 32-34.

28.Мажитова. М.В. Возрастные аспекты модуляции перекиепого окисления лииидон н разных отделах цен тральной нервной системы иод воздействием серосодержащего газа |Текет| / М.В. Мажитова. Д.Л. Теплый // Всероссийская научпо-ирактичеекая конференция Оренбург, 16-17 февраля 2009 г. «Инновационные процессы в области химико-недагогического и естественнонаучного образования»,- Оренбург: изд-во ОГ11У. - С.220-223.

29.Мажптова. М.В. Влияние природного и синтетического антиоксидантов на окисление линидов и RED-OX потенциал в тканях мозга [Текст] / М.В. Мажитова. Д.Л. Теплый //«Фундаментальные исследования в биологии и медицине» CT), науч. трудов, выи. 6 Ставрополь: изд-во СевКавГТУ, 2009. - С. 80-85.

30.Мажитова. М.В. Изменение содержания конечных метаболитов NO, активности каталазы и уровня перекиепого окисления липидов в плазме крови белых под воздействием жотокеикапта |Текст) / М.В. Мажитова // Сборник научных трудов VII Международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования». 26 февраля. - Тамбов, 2009,- С. 221-223.

31.Мажитова. М.В. Модуляция некоторых поведенческих реакций аптиоксидантами |Текст| / М.В. Мажитова. Д.Л. Теплый, 11.11. Тризно II Всероссийская копф. с междупар участием «Социально-экономические, валсологичсские и социокультурные аспекты развития рекреационных территорий Юга России». 7-10 октября. - Анапа. 2009. - С. 307 - 309.

32.Мажитова. М.В. Антиоксидаитная коррекция некоторых поведенческих реакции стареющих крыс ГТскст ] / М.В. Мажитова, H.H. Тризно , Д.Л. Теплый, Д.Л. Карпеева II Malcrialy V Mi ^clzynarodowej naukowi-praktycznej konfereneji «Wschodnia Spolka-2009» 07-15 wrzesnia 2009. Volume 6. - Przemysl. Nauka I sltidia. Sir. 20-25.

33.Мажитова. М.В. Половые особенности свободно-радикальных процессов и антиоксидаптпоп защи ты плазмы крови белых крыс в онтогенезе [Текст] / М.В.

Мажитова, Д.Л. Теплый, 11.11. Тризио // Malerialy VI me/.inárodní vêdecko-praktická konference "Vèda a technologie: krok do budoucimsti-2010" - Dil 12. Lékafslví. Biologické vëdy. Tëlovychova a sport: Praha. Publishing House "Education and Science". 72-76.

34.Мажитова, M.B. Возрастные особенности антиоксидаптпой защиты и свободно-радикальных процессов к мопс самцов и самок белых крыс | Гекет| / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. 11.11. Тризио, Д.15. Кариеева // Лстрахаиекий медицинский журнал. - 2010. - Т. 5. - № I.-C. 119- 122.

35.Тер!у D.L. The influence of .sulfur-containing gas on maliiiulialdehyde level in white rats blood plasma [Text| / D.L. Teply, M.V. Mazhitova. N.N. Tri/.no // Europen Journal of Natural History. - 2010. - № 5 - C. 35-36.

36.Мажитова, M.B. Модуляция содержания конечных метаболитов NO и плазме крови белых крыс иод влиянием серосодержащем) газа Астраханского месторождения [Текст| / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. 11.11. Три ¡но // Журнал «Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований» 2010. - №5.-С. 70-71.

37.Мажитова, М.В. Антиокеидаптпая коррекция возрастных изменений свободно-радикальных процессов н плазме белых крыс |Текст| / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. 11.11. Тризио // «Кислород и аптнокеиданты», вып. 2. 3 Научно-практ. Симпозиум с междуиар. Участием «Свободноради-кадьпая медицина и аптиоксидантпая терапия»12-14 мая. - Волгоград, 2010. - С. I 1-1 2.

38.Мажитова. М.В. Влияние промышленного природного ссроводородеодержашего газа Астраханского месторождения на уровень промежуточных и конечных продуктов окисления линидов | Гскс11 / М.В. Мажитова, Д. Куатаева, I I, Ваяретанова, А. Тарасов // Межрегиональная научно-практическая конференция «Актуальные проблемы естественнонаучной подготовки», 2-3 ноября 2010 г. / иод ред. ').Ф. Матвеевой. - Астрахань: изд-во АИПКП, 2010.-С. 80-85.

39.Мажитова. М.В. Изменение аптиоксидантноп) статуса и евободорадикальпых процессов в крови белых крыс при хроническом воздействии сероводородсодсржашего газа [Текст] / М.В. Мажитова, И.А. Веднов. В.10. Шур, М.А. Карибьянц // Казанская паука - Казаиыизд-ио Казанский Издательский Дом, 2010. - № К). - С.20-22.

40.Мажитова. М.В. Изменение количества -юзппофплон крови и условиях хронического воздействия сероводородеодержащим газом |Текет| / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый, H.H. Тризио, В.10. Шур, И.А. Веднов. JI.IÎ. 11етрепко II III Съезд физиологов Cl 1Г, Ялта. Украина, 1-6 октября 201 I. С 292.

41.Мажитова, М.В. Возрастные особенности поведения |Текст| / M.Ii. Мажтпона. Л.В. Петренко // Науч.-практ. конф. «актуальные проблемы геронтологии и гериатрии». - Санкт-Петербург, 21-22 апреля. 2011. - С. 278-279.

42.Мажитова, М.В. Особенности реакции про- и аптиоксидантпой систем больших полушарий в условиях воздействия вредных факторов (Текст1 / М.В. Мажитова // Междунар. науч.-практ. конференция «Достижения, инновационные направления развития и проблемы современной медицинской науки, генетики и биотехнологии», Екатеринбург. 2011. - С. 169-170.

43.Мажитова, М.В. Изменение уровня NO-метаболитов на фоне хронической

интоксикации природным газом |Электронный peeypcl / M.B. Мажитова, Д.В. Кариеева // II Региональная конференция ученых и иниоваторов «ИНН-KACI 1ИИ»плектроппый сборник тезисов докладов [Электронный ресурс]. Электрон, текстовые, граф. (5,7 Мб).-Аетрахань: издательство АГТУ, 2011.

44.Мажптова. М.В. Некоторые показатели свободиорадик&льпых процессов в сродном мозге в условиях хронической интоксикации. Антиоксидаптная коррекция |Текст | / М.В. Мажитова // Материалы 11 Междупар науч. копф. «Свободные радикчинп, антиоксидапты и старение». Астрахань, 2-3 ноября. -Астрахань: Издат. дом «Астраханский универси тет. 2011.- С. 114-117.

45.Мажитова. М.В. Типизация реакций разных отделов ЦНС в ответ на хроническое воздействие по состоянию свободнорадикальпых процессов |Тскст| / М.В. Мажитова, Д.Л. Теплый. 1 I.A. Горст, 10.В. Нестеров, H.I I. Тризно // Материалы И Междупар науч. копф. «Свободные радикалы, антиоксидаиты и старение». Астрахань. 2-3 ноября. - Астрахань: Издат. дом «Астраханский универси тет. 2011,- С. 74-76.

* - статьи н журналах, рекомендованных ВАК РФ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ

а-ТФХ-н-токофсрилхипоп; Аск.ПОЛ-скороеть аскорбатзависимого 1 ЮЛ; АКМ-активироваппые кислородные метаболиты; АОА-общая аитиокиелительпая активность; АОЗ-аитиокеидаптпая защита; БП-большие полушария; IV! Ч-мозжечок; ОВП-окислителыю-иосстаноиител1>т>|й потенциал; ОМБ-окнслеппая модификация белков; ОТФ-оксотокофсрол; ПД-продолговатый мозг; ПМ-нромсжуточный мозг; ПОЛ-иерекисное окисление липндов; СОД-суиероксиддисмутаза; СП-спинной мозг; сп.ПОЛ-скорость спонтанного 1IOJ1; СР-средний мозг; СРО-свободнорадикальное окисление; ССГ-серосодержащий газ; ТБК-рп-иродукты, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой.

Заказ № 25! 2. Тираж 100 жз. Уч.-изд.-л. 2.8. Уел.-неч. л. 2,6.

Издательский дом «Астраханский университет» 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, 20 Тел. (8512) 48-53-47 (отдел маркетинга). 48-53-45 (магазин). 48-53-44, факс: (8512)48-53-46. K-mail: asuprcss@yaiKlex.rii

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Мажитова, Марина Владимировна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.^

1.1 .Физиологическая роль свободнорадикальных процессов и окислительный стресс как неспецифическая реакция.

1.2. Антиоксидантная система организма в норме и в условиях окислительного стресса.

1.3. Роль половых гормонов в поддержании антиоксидантного статуса организма.

1.4. Возрастная динамика системы «оксиданты - антиоксиданты».

1.5.Особенности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в центральной нервной системе.

1.6. Токсические эффекты серосодержащего газа на функциональные системы организма.

Глава 2. Материалы и методики исследования.

2.1. Общая характеристика эксперимента.

2.2. Исследование поведения и стресс-устойчивости.

2.3. Исследование уровня свободнорадикальных процессов.

2.3.1. Окислительно-восстановительный потенциал.

2.3.2.Определение перекисного окислений липидов.

2.3.3.Определение окислительной модификации белков.

2.3.4.Определение метаболитов оксидов азота.

2.3.5. Определение общей антиокислительной активности.

2.4. Определение активности ферментов-антиоксидантов и содержания жирорастворимых витаминов.

2.4.1 .Определение активности каталазы.

2.4.2.0пределения активности супероксидцисмутазы.

2.4.3.Определение содержания жирорастворимых витаминов.

2.5. Математическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение.

3.1. Половые и возрастные особенности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы белых крыс.

3.2. Влияние антиоксидантов на свободнорадикальные процессы, протекающие в плазме крови и мозге самцов и самок белых крыс разного возраста и уровень их антиоксидантной защиты. Поведенческие аспекты.

3.3. Модуляция свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови и ткани мозга белых крыс на фоне хронического воздействия природным серосодержащим газом Астраханского месторождения.

3.4. Антиоксидантная коррекция свободнорадикальных процессов, протекающих в тканях мозга и плазме крови на фоне воздействия серосодержащим газом Астраханского месторождения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Свободнорадикальные процессы и антиоксидантная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов"

Ткань мозга характеризуется интенсивной генерацией активных форм кислорода в биоэнергетических и специфических нейрохимических процессах. Это создает благоприятные условия для окисления мембранных липидов, белков и нуклеиновых кислот. Продукты перекисного окисления липидов, к которым нервная ткань наиболее чувствительна, являются важным звеном регуляции функциональной активности нервной системы и имеют большое значение в формировании приспособительных реакций на уровне клетки (Флеров М.А. и др., 2000). Однако, активация свободнорадикальных процессов существенно модифицирует функциональное состояние нейронов и может привести к их гибели (Ерин А.Н. и др., 1994). В этих условиях накопление продуктов и перекисного окисления липидов и белков повышает проницаемость мембран для ионов, что приводит к интенсификации синтеза Са2+ -зависимых протеаз и липаз, приводящих к гибели нервных клеток. Безусловно, этот механизм носит универсальный характер, однако в разных отделах мозга он может происходить по-разному, что определяется как структурной, так и функциональной гетерогенностью разных отделов мозга. Это, в свою очередь, предполагает необходимость адекватного для каждого из отделов мозга уровня свободнорадикальных процессов и соответствующей антиоксидантной защиты.

Исследования многих авторов указывают на тканевую специфику уровня свободных радикалов и эндогенных антиоксидантов в головном мозге у плодов (Прокопенко В.М.и др., 1995), однако без дифференцировки по отделам мозга, или указывают на особенности про- и антиоксидантной системы коры больших полушарий без указания на возрастные особенности (Райзе Т.Е. и др., 1994). Другие исследователи характеризуют особенности интенсификации свободнорадикальных процессов и ослабление антиоксидантной системы мозга и других функциональных систем организма при старении, аргументируя концепцию свободнорадикального окисления при старении Хармана-Эмануэля (Кольтовер В.К. 2000; Болдырев A.A. 2001, Хавинсов В.Х. и др. 2003, Коркушко О.В. и др., 2010).

Таким образом, налицо фрагментарность данных о возрастной динамике системы свободных радикалов и уровня антиоксидантов центральной нервной системы без дифференцировки на разные отделы мозга. Имеющиеся многочисленные данные выполнены, к тому же, с использованием разных методических подходов и на разных экспериментальных моделях.

Отмечается особое внимание исследователей на состояние системы про- и антиоксидантов мозга на этапе возрастной инволюции, особенно в связи с возрастной патологией мозга. Старение затрагивает все органические структуры организма человека.

Между тем, знание основных промежуточных этапов формирования интенсивности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты представляет не только несомненный теоретический, но и практический интерес с учетом роли этих процессов в нормальном и патологическом формировании и функционировании разных отделов центральной нервной системы, сопровождающихся развитием окислительного стресса.

Учитывая, что неблагоприятные факторы окружающей среды, способствующие развитию окислительного стресса, такие как ионизирующая и ультрафиолетовая радиация, гипо- и гипероксия, загрязненность атмосферного воздуха, воды и пищи вредными химическими веществами, канцерогенами, играют непоследнюю роль в процессах старения, результаты исследований могут послужить основой для существенного углубления механизмов формирования возрастных особенностей свободнорадикальных процессов и системы эндогенных антиоксидантов во всех отделах мозга на разных этапах постнатального онтогенеза.

Функционирующий Астраханский газоперерабатывающий завод вносит немалый вклад в общую экологическую обстановку области. Несмотря на то, что серосодержащий газ Астраханского месторождения относится к пульмотоксикантам, многочисленные работы свидетельствуют о наличии его выраженного нейротропного эффекта (Солнышкова Т.Г. 2003). Кроме того, аналогичные газоконденсатные месторождения имеются в Оренбургской области, Казахстане, Канаде, США, Китае. По содержанию сероводорода они уступают Астраханскому. Так, содержание сероводорода и меркаптанов в Оренбургском газоконденсатном месторождении доходит до 4,5 %, в то время как в Астраханском -до 25 %.

Учитывая вышесказанное, исследование сдвига антиоксидантной -прооксидантной системы на разных уровнях центральной нервной системы в эксперименте на разнополых молодых и старых животных в условиях хронического воздействия серосодержащим газом является, несомненно, актуальным направлением не только для Астраханской области, но и для других регионов России и зарубежья.

Цель исследования - определить стационарный уровень свободнорадикальных процессов и антирадикальной защиты в разных отделах мозга на этапах онтогенеза разнополых животных, а также их модуляцию при действии промышленных серосодержащих поллютантов с последующей их коррекцией антиоксидантами.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности свободнорадикальных процессов в разных отделах центральной нервной системы и плазме крови молодых и старых крыс разного пола.

2. Изучить изменения физиологической антиоксидантной системы в мозге и плазме крови самцов и самок белых крыс при старении.

3. Изучить влияние антиоксидантов с разным механизмом действия: а-токоферола и эмоксипина на свободнорадикальные процессы и антиоксидантную защиту в плазме крови и разных отделах головного и спинном мозге молодых и старых белых крыс обоего пола.

4. Определить уровень ориентировочно-исследовательской реакции интактных самцов и самок белых крыс в двух возрастных группах и его изменение после введения антиоксидантов.

5. Выяснить возрастные, половые и тканевые особенности уровня свободнорадикальных процессов и эндогенных антиоксидантов при хроническом воздействии (сероводородсодержащий газ Астраханского месторождения) в разных отделах головного и спинном мозге и плазме крови белых крыс.

6. Изучить возможность корректирующего действия а-токоферола и эмоксипина на поведенческие реакции молодых и старых белых крыс обоего пола на фоне воздействия сероводородсодержащим газом.

7. Определить возможность . антиоксидантной коррекции свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в плазме крови и разных отделах головного и спинном мозге самцов и самок белых крыс двух возрастных групп (6 и 24 месяца) при хроническом действии серосодержащего газа.

Научная новизна.

Впервые показано разнонаправленное изменение свободнорадикальных процессов в разных отделах центральной нервной системы у разнополых животных и при старении.

Установлены половые и возрастные особенности поведенческих реакций интактных животных, а также неодинаковое изменение показателей поведения под действием антиоксидантов, серосодержащего газа Астраханского месторождения и их совместного влияния на самцов и самок белых крыс разного возраста.

Впервые проведено сравнительно-физиологическое исследование влияния двух антиоксидантов (а-токоферол и эмоксипин) с разным механизмом действия на показатели свободнорадикальных процессов плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы молодых и старых разнополых животных.

Впервые изучено изменение свободнорадикальных процессов и состояния антиоксидантной защиты разных отделов центральной нервной системы под влиянием промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Показана возможность коррекции а-токоферол ом и эмоксипином смещения равновесий в системе прооксиданты - антиоксиданты в плазме крови и отделах центральной нервной системы, вызванного серосодержащим газом; установлены тканевые, половые и возрастные особенности влияния этих антиоксидантов на изучаемые показатели.

В результате комплексного исследования системы «оксиданты-антиоксиданты» на разных уровнях центральной нервной системы решена проблема интегральной оценки антиоксидантного потенциала экспериментальных животных на этапах постнатального онтогенеза в условиях «нормы» и при действии промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Теоретическая и практическая значимость.

В результате выполненных экспериментальных исследований и на основании проведенного теоретического анализа возрастных и половых особенностей свободнорадикальных процессов обоснована значимость поддержания определенного физиологического равновесия в системе прооксиданты - антиоксиданты в плазме крови и на разных уровнях центральной нервной системы разнополых крыс в процессе старения. Учитывая роль свободнорадикальных процессов в нормальном функционировании разных отделов центральной нервной системы и при развитии окислительного стресса, изучение формирования интенсивности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в онтогенезе представляет не только несомненный теоретический, но и практический интерес для формирования представлений о процессах старения и развитии различных свободнорадикальных нарушений под действием неблагоприятных факторов окружающей среды.

Изучено влияние а-токоферола и эмоксипина на свободнорадикальные процессы и уровень эндогенных антиоксидантов плазмы крови и разных отделов центральной нервной системы интактных животных.

Исследованы закономерности изменения поведенческих реакций самцов и самок белых крыс на этапах постнатального онтогенеза под влиянием а-токоферола и эмоксипина.

Установлены параметры изменчивости показателей про-, антиоксидантного баланса в плазме крови и на разных уровнях центральной нервной системы на фоне воздействия промышленного природного газа Астраханского месторождения. На основе проведенного анализа и соотнесения показателей свободнорадикального окисления и состояния антиоксидантной защиты в разных отделах головного и спинном мозге предложен способ интегральной оценки степени выраженности влияния промышленного природного газа Астраханского месторождения на изучаемые показатели самцов и самок белых крыс на этапах постнатального онтогенеза.

Выявлена эффективность антиоксидантной коррекции а-токоферолом и эмоксипином свободнорадикальных процессов на фоне воздействия промышленного природного газа Астраханского месторождения.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. У крыс разного пола в процессе старения происходит разнонаправленное изменение показателей пероксидации липидов в центральной нервной системе: у самцов - повышение, а у самок -понижение конечных продуктов перекисного окисления липидов. Окислительная модификация белков у крыс обоего пола при старении повышается. Общая антиокислительная активность разных отделов ЦНС старых животных остается на уровне молодых, при неравнозначной модуляции отдельных звеньев эндогенной антиоксидантной системы.

2. Наиболее часто усиление свободнорадикальных процессов в мозге происходит у самок под действием а -токоферола, нежели эмоксипина. Введение а-токоферола и эмоксипина молодом животным приводит к компенсаторному снижению активности эндогенных антиоксидантов, которое отличается степенью выраженности в разных отделах центральной нервной системы.

3. Хроническое действие серосодержащего газа Астраханского месторождения приводит к усилению свободнорадикальных процессов в ЦНС, что проявилось в росте окислительной модификации белков и реже -продуктов окисления липидов. Наиболее глубокие нарушения про-антиоксидантного баланса под действием газообразного поллютанта отмечены у старых животных, что, вероятно, связано с истощением антиоксидантного пула с разной степенью выраженности на разных уровнях ЦНС у 24-х месячных самцов и самок крыс.

4.Антиоксидантная коррекция, примененная на фоне воздействия серосодержащим газом Астраханского месторождения, оказывает наибольший модулирующий эффект на свободнорадикальные процессы, протекающие в плазме крови и центральной нервной системе старых животных.

Апробация работы.

Материалы диссертации докладывались и представлялись на итоговых научно-практических конференциях АГПУ (Астрахань 1997, 2001), Всероссийской конференции «Астраханский край: история и современность» (Астрахань, 1997), II Всероссийской конференции-школе «Высокореакционные интермедиаты химических реакций» Chemlnt 2007 (Астраханская область, Московская область, 2007), 6-й Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань-Москва, 2008), конференции с международным участием «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине. Успехи современного естествознания» (2008), XV Международной научно-практической конференции. «Экология и жизнь» (Пенза, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные процессы в области химико-педагогического и естественнонаучного образования» (Оренбург, 2009), VII Международной научно-практической конференции

Фундаментальные и прикладные исследования в системе образования» (Тамбов, 2009), Всероссийской конференции с международным участием «Социально-экономические, валеологические и социокультурные аспекты развития рекреационных территорий Юга России», (Анапа, 2009), V Международной научно-практической конференции «Wschodnia Spolka-2009» (Польша, 2009), IV Всероссийском Съезд анатомов, гистологов и эмбриологов (Саратов, 2009), VI Международной научно-практической конференции "Vëda a technologie: krok do budoucnosti-2010" (Прага, 2010), 7-й Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2010), научной Международной конференции «Фундаментальные исследования» (Израиль, 2010), научно-практическом

Симпозиуме с международным участием «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия» (Волгоград, 2010), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы естественнонаучной подготовки», (Астрахань, 2010), III Съезде физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» (Ялта, Украина, 2011), научно-практической конференции «Актуальные проблемы геронтологии и гериатрии» (Санкт-Петербург, 2011), XVI Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Париж, Франция, 2011), Международной научно-практической конференции «Достижения, инновационные направления развития и проблемы современной медицинской науки, генетики и биотехнологии» (Екатеринбург, 2011), Региональная конференция ученых и инноваторов «ИНН-КАСПИЙ (Астрахань, 2011), II Всероссийской научной конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение» (Астрахань, 2011).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 45 работ, общим объемом 19,25 п.л. (авторский вклад 17,38 п.л.) в том числе монография - 1, статьи в научных изданиях, рекомендованных ВАК для докторских диссертаций -15, статьи в прочих рецензируемых журналах - 10, статьи в материалах международных научных конференций - 19.

Декларация личного участия автора.

Экспериментальные исследования выполнялись автором лично, либо при его непосредственном участии в коллективных работах. В совместных публикациях вклад автора составил 50-100 %.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, главы собственного исследования, состоящей из 4 подглав, заключения, выводов и библиографического списка. Диссертация изложена на 277 страницах,

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Мажитова, Марина Владимировна

выводы

1. Половые и возрастные различия свободнорадикальных процессов в разных отделах ЦНС и плазме крови проявились в более низких значениях перекисного окисления липидов и белков и более высоком уровне N0 в плазме у молодых самок, по сравнению с молодыми самцами. В больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге молодых самок уровень ТБК-реактивных продуктов выше, чем у самцов. В процессе старения у самцов и самок имеет место разнонаправленное изменение уровня ТБК-реактивных продуктов: у самцов ^повышение,-у самок - понижение^

2. Общая антиокислительная активность плазмы крови и мозга у молодых и старых самок выше, чем у самцов внутри возрастной группы. Активность СОД и содержание витамина А в плазме крови у молодых самок выше, чем у самцов. В мозге молодых самок содержание жирорастворимых антиоксидантов превышает таковое у самцов. Половые различия антиоксидантной системы отсутствуют в продолговатом и спинном мозге животных. С возрастом у самцов и самок происходит снижение активностей ферментативных и содержание неферментативных антиоксидантов в плазме крови и мозге, за исключением продолговатого и спинного мозга, что приводит к более выраженным половым различиям у старых животных.

3. Введение а-токоферола и эмоксипина оказывает более выраженное антиоксидантное действие на свободнорадикальные процессы в плазме крови и мозге старых животных. Витамин Е оказывает прооксидантное действие преимущественно у самок, что проявляется в повышении уровня ТБК-реактивных продуктов в плазме крови, среднем, продолговатом и спинном мозге у молодых самок и в больших полушариях, промежуточном, среднем мозге и мозжечке старых самок. Эмоксипин реже, чем а-токоферол (и только в плазме крови молодых самок) приводил к усилению ПОЛ. И а-токоферол, и эмоксипин вызвали компенсаторные изменения в изучаемых звеньях антиоксидантной системы плазмы крови и мозга молодых животных.

4. Введение витамина Е приводит к увеличению большего числа параметров горизонтальной и вертикальной активности определяющих уровень ориентировочно-исследовательской реакции молодых животных. И а-токоферол, и эмоксипин увеличивают горизонтальную центральную активность и число стоек с опорой при неизменной или сниженной периферическо-горизонтальной и

---вертикальной активности без опоры в группах старых животных.

Поведенческие половые различия в большей степени проявились у старых животных в ответ на введение а-токоферола.

5. Наиболее чувствительным к воздействию серосодержащего газа Астраханского месторождения у молодых самцов оказался мозжечок и промежуточный мозг, а у молодых самок - большие полушария, промежуточный мозг и мозжечок. У старых животных обоего пола газообразный поллютант инициировал развитие оксидативного стресса во всех изучаемых отделах ЦНС. Наиболее устойчивым к воздействию является спинной мозг.

6. При хроническом воздействии серосодержащим газом на фоне снижения горизонтальной и вертикальной активности у молодых и старых животных происходит усиления груминговой реакции, что свидетельствует о нарастании страха в ходе нарушения механизмов регуляции поведения при изменении функционального состояния нейрональных мембран, а -Токоферол и эмоксипин корректируют эти изменения.

7. Ткань мозга более выражено реагирует на действие а -токоферола, чем на эмоксипин, что проявляется в модуляции перекисного окисления липидов на фоне снижения окислительной модификации белков у молодых животных. Введение антиоксидантов старым крысам на фоне хронического воздействия приводит к более выраженному антиоксидантному эффекту во всех отделах ЦНС и плазме крови, что говорит о своевременности и целесообразности антиоксидантной коррекции. Снижение уровня окислительной модификации белков свидетельствует о положительных эффектах антиоксидантной коррекции на всех этапах развития окислительного стресса.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Элементарным проявлением неспецифического ответа клетки на раздражение являются свободнорадикальные процессы перекисного окисления разных элементов клеточных мембран. При усилении процессов пероксидации выше физиологически обоснованных уровней, развивается окислительный стресс клетки, при котором свободные радикалы оказывают повреждающее действие на клеточные мембраны, внутриклеточные структуры и генетический аппарат (Крыжановский Г.Н., 2002-)-При экспериментальном стрессе у животных имеет- место активация перекисного окисления липидов в различных тканях, органах и периферической крови. Выраженность сдвигов в системе «оксиданты -антиоксиданты» во многом зависит от специфичности действия стрессора, его силы, и реализуется в различных физиологических системах неодинаково.

Учитывая, что нервная ткань особенно чувствительна к недостатку кислорода, богата окислительным субстратом, морфологически, биохимически и функционально неоднородна, реакция ее разных областей в ответ на стрессорные воздействия может быть неоднозначной. Возможность комплексной оценки биосистем в состоянии напряжения зависит от того, на каком уровне ее организации проводятся исследования. По мере углубления исследований на молекулярном и субмолекулярном уровнях информативность в интегральных оценках целостного организма повышается.

На основании проведенных исследованиях влияния ССГ на окислительные процессы в нервной ткани, нами разработан функциональный подход к оценке степени выраженности стрессорных реакций по состоянию свободнорадикальных процессов на разных уровнях центральной нервной системы у молодых и старых животных разного пола. Полученные результаты по изучению состояния свободнорадикальных процессов на фоне хронической интоксикации свидетельствуют о разбалансировке системы ПОЛ/АОЗ, которая проявилась в неодинаковой степени в разных отделах ЦНС.

Для интегральной оценки полученных результатов мы использовали классификацию Ф.И. Фур дуй с соавт. (1996), предполагающую деление физиологических и патологических ответных реакций организма в условиях стресса на три типа:

1) функционально-нормативный тип реакций, характеризующийся устойчивым функционированием органов, тканей и систем; 2) функционально-паранормативный, отличительной особенностью которого являются неустойчивые, лабильно-обратимые изменения физиологических и биохимических параметров тех или иных систем или органов; 3) стабильно-гетеростазный тип реакции, предполагающий стойкие отклонения физиологических и биохимических параметров тех или иных органов или систем.

Несмотря на то, что эта классификация предложена для оценки состояния целостного организма, мы сочли возможным ее использование для определения степени выраженности стрессорных реакций по состоянию свободнорадикальных процессов на разных уровнях центральной нервной системы. Ранее такой же подход был успешно использован (Нестеров Ю.В. и др., 2001) для выявления реакции дыхательной системы по показателям липидного обмена при действии стрессогенных факторов различной природы.

Учитывая, что свободнорадикальные процессы взаимосвязаны с активностью ферментных и содержанием неферментных антиоксидантов, для выявления ответа разных отделов ЦНС к определенному типу реакции были соотнесены изучаемые параметры в ответ на стрессорное воздействие ССГ (схема).

СТРЕССОР V

Уровни проявления с стресса О

ОКИСЛИТЕЛЬНЫМ

СТРЕСС с О последствия действия стрессора V V V

На основании полученных экспериментальных данных мы выделили следующие ситуации:

• Усиление СРО и увеличение активности эндогенных антиоксидантов - соответствуют 1-ому уровню стрессированности (аварийная стадия, функционально-нормативный тип реакции).

• Разнонаправленное, небольшое по модулю изменение скорости СРО. При этом активность антиоксидантов выходит на плато (близко или же несколько выше контрольных значений) - 2-ой уровень стрессированности (стадия относительной компенсации, функционально-паранормативный тип реакции).

• Истощение антиоксидантного пула с резким спадом активности. При этом возможно как усиление СРО, так и его спад - 3-ий уровень стрессированности (стадия стойких функциональных отклонений, стабильно-гетеростазный тип).

У молодых самцов наиболее чувствительным к воздействию оказался мозжечок и промежуточный мозг, а у молодых самок - большие - полушария^промежуточный мозг и-мозжечокгт.к. их реакция в ответ на токсикант соответствует стабильно-гетеростазному типу. Следующие по стрессорной устойчивости - это большие полушария, средний и продолговатый мозг у молодых самцов и средний и продолговатый - у молодых самок. Их состояние соответствует функционально-паранормативному типу реакции). Спинной мозг, независимо от половой принадлежности, оказался самым устойчивым, т. к. после 1,5-месячного хронического воздействия ССГ его состояние по изучаемым показателям соответствовало функционально-нормативному типу реакции.

Свободнорадикальная теория старения связывает возрастные функциональные отклонения с усилением продукции активных форм кислорода на фоне снижения активности антиоксидантной защиты, что приводит к накоплению продуктов окислительного повреждения. С возрастом происходит снижение адаптивных возможностей организма при разных скоростях снижения резистентности отдельных органов и тканей. Вышеуказанные процессы углубляются на фоне вредных внешних воздействий. Очевидно, что устойчивость к различного рода воздействиям различна у молодых и старых животных как на уровне целостного организма, так и на уровне отдельных органов и тканей. У старых животных, вне зависимости от пола наиболее уязвимыми к оксидативному стрессу, вызванному газообразным токсикантом, оказались все изучаемые отделы ЦНС, кроме спинного мозга.

Нам представляется, что анализ структуры и выраженности типов реакций со стороны отдельных органов или систем при стресс-индуцирующих воздействиях имеет прогностическое и отчасти диагностическое значение. Последнее находит выражение в определении уровня стрессорного повреждения и установлении того или иного типа реакции. Использование показателей, характеризующих уровень свободнорадикальных процессов и активность антиокислительных систем в -качестве—индикаторов -выраженности стрессорного процесса (острога -и— хронического) и его прогнозирования, является перспективным направлением. Эти исследования позволяют понять роль свободнорадикальных реакций в развитии самого стресса, его последствий и наметить пути его коррекции. Состояние свободнорадикальных реакций и активности антиокислительных систем (ферментативных и неферментативных) может быть одним из объективных критериев оценки надежности биосистем и состояния адаптивных механизмов на разных уровнях организации живой материи.

У высших животных и человека механизмы генерации АКМ и антиоксидантной защиты достаточно сложны, и, как правило, увеличением потребления только одного природного антиоксиданта не удается существенно усилить мощность антиоксидантной защиты или устойчивость организма к прооксидантным воздействиям. При этом, как правило, повышение концентрации одних антиоксидантов приводит к снижению содержания других. Кроме того, вследствие функционирования АКМ в качестве важных физиологических интермедиатов искусственно созданные гиперантиоксидантные ситуации могут оказаться вредными -например, снизить устойчивость организма к бактериальным инфекциям и действию токсических веществ. Однако в условиях нарастающего воздействия неблагоприятных экологических факторов (загрязнение окружающей среды продуктами жизнедеятельности человека, психологические стрессы, электромагнитные воздействия и т. д.) человечество вынуждено искать активные пути защиты, в том числе антиоксидантной (Меныцикова Е.Б., 2008).

В живых организмах отдельные антиоксиданты действуют не сами по себе, а формируют антиоксидантные цепи, эффективность работы которых определяется работой всех компонентов (Шинкаренко Н.В. и др., 1982). Существенное увеличение экзогенным введением концентрации одного компонента антиоксидантной цепи может привести к инверсии переноса электронов. — — - - --------—

Для эффективного действия антиоксидантные препараты прежде всего должны легко поступать в мозг, проникать через гематоэнцефалический барьер, не нарушая его функций. Они должны быть хорошо растворимы в воде, что обеспечит быстроту их доставки в пораженные участки мозга и взаимодействие с АФК (активные формы кислорода), растворенными в крови, межклеточной и внутриклеточной жидкости, содержащимися в стенке сосудов, плазматических мембранах клеток. С другой стороны, желательно, чтобы антиоксидантный препарат был растворим и в жирах, что обеспечит его эффективность в отношении и липидных перекисей, эпоксидов, липидных радикалов. Таким образом, максимальной эффективностью должен обладать АО-препарат с промежуточной растворимостью, что редко сочетается в одном препарате. а-Токоферол - жирорастворимый антиоксидант биогенной природы начинает эффективно функционировать лишь после встраивания в структуру мембран, т.е. через 18-24 ч. после введения. Поэтому для защиты мозга применяют антиоксиданты, способные проникать в мозг или по крайней мере накапливаться в его микроциркуляторном русле (Зозуля Ю.А. и др., 2000). Несмотря на широкий спектр физиологического действия а-токоферола и эмоксипина, совпадающего по некоторым аспектам, механизмы их действия не могут быть одинаковыми, и как следствие, наблюдаемые эффекты после их применения с целью корррекции СРО на фоне воздействия сероводородсодержащего газа Астраханского месторождения, не совпадают по временным параметрам и неравноценны для разных тканей организма.

Анализируя полученные данные о возможности коррекции СРО антиоксидантами на фоне токсического воздействия ССГ, следует отметить, что во всех отделах ЦНС повышенное содержание ОМБ в опытной группе под действием антиоксидантов снижалось, что определяет возможность предотвращения окислительных повреждений а-токоферолом и эмоксипином на -начальной стадии окислительных деструкций. Учитывая, что продукты окислительной модификации белков, также как и продукты ПОЛ, обладают цитотоксическим действием, можно заключить, что исследованные антиоксиданты предотвращают не только инициацию СРО, но и каскад окислительных изменений, вызванных конечными продуктами окисления мембранных компонентов.

Как а-токоферол, так и эмоксипин проявили себя как достаточно сильные антиоксиданты. Однако, сравнивая значения ОВП после коррекции антиоксидантами, можно заключить, что эмоксипин во всех отделах ЦНС (кроме мозжечка и продолговатого мозга молодых самцов) приводит к значимому снижению этого показателя по сравнению с животным, получавшими ССГ. Токоферол, в некоторых случаях, даже превысил значение ОВП по сравнению с опытной группой. Повышение ОВП при действии ССГ и последующем введении а-токоферола было зафиксировано в больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге, мозжечке молодых самцов и среднем мозге молодых самок, что может быть косвенным доказательством напряжения антиоксидантной системы в перечисленных отделах ЦНС.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что ткань мозга более чутко реагирует на действие а-токоферола, чем на эмоксипин. Это проявляется в модуляции ПОЛ на фоне снижения ОМБ у молодых животных. Введение антиоксидантов на фоне ССГ у старых крыс приводит к более выраженному антиоксидантному эффекту во всех изучаемых нами отделах ЦНС и плазме крови, что говорит о своевременности и целесообразности антиоксидантной коррекции на этом этапе. Таким образом, если эмоксипин проявляет антиоксидантное действие практически во всех исследованных нами тканях, то действие а-токоферола обладает большей половой и тканевой спецификой и оказывает модулирующее действие на СРО, что объясняется присутствием в его спектре физиологических эффектов не только антиоксидантной и антирадикальной составляющих, но, в том числе, и-витаминной.

Результаты наших исследований выявили половые и тканевые различия у молодых животных, которые проявились в более высоком уровне ТБК-рп у самок, чем у самцов, в больших полушариях, промежуточном и продолговатом мозге. Интересен установленный факт разнонаправленного изменения этого показателя у животных разного пола: у самцов повышение, а у самок - понижение, и факт отсутствия возрастных изменений активности исследуемых антиоксидантов в продолговатом мозге. Основываясь на результатах нашего эксперимента можно заключить что, чем филогенетически более древний отдел ЦНС, тем в меньшей степени появляются половые различия у интактных молодых животных в уровне свободнорадикальных процессов и исследуемых звеньев антиоксидантной защиты.

Введение витамина Е и эмоксипина интактным крысам разных возрастных групп вцелом не изменяет АОА, т.к. происходят компенсаторно-регуляторные изменения в ферментативном и неферментативном антиоксидантном пуле нервной ткани. Эти сдвиги более выражены у молодых животных, что позволяет сохранять их антиоксидантный статус на стационарном уровне. В ходе старения, на фоне снижения общей метаболической активности, увеличения проницаемости ГЭБ потребность животных в антиоксидантах усиливается. По вектору и степени реагирования на введение антиоксидантов наиболее сходны между собой промежуточный и средний, продолговатый и спинной отделы мозга.

Эмоксипин нередко не оказывал ожидаемого антиоксидантного действия у интактных молодых животных, однако в случае возрастных изменений ПОЛ, вносил существенный вклад в стабилизацию СРО.

Результаты по исследованию влияния серосодержащего газа Астраханского месторождения показали, что реакция разных отделов ЦНС на токсикант хотя и неодинакова, однако своевременное применение антиоксидантов может способствовать нормализации многих характеристик СРО.- -Однако антиоксиданты—могут—привести к разнонаправленному (как положительному, так и отрицательному) эффекту.

Результаты наших экспериментальных исследований свидетельствуют о необходимости поддержания физиологического окислительно-восстановительного гомеостаза в достаточно узком интервале. Поэтому как повышение, так и снижение СРО могут повлечь необратимые изменения в структуре клеточных и внутриклеточных мембран и, как следствие, изменение их физико-химических характеристик.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Мажитова, Марина Владимировна, Астрахань

1. Абрамова, Ж.И. Сера и ее соединения Текст. / Ж.И. Абрамова, З.Х. Черный // Вредные вещества в промышленности /Под ред. Н.В. Лазарева, И.Д. Гадаскиной.- 7-е изд.- Л.: Химия, 1977. Т. 3. - С.49-74.

2. Абрамова, Ж.И. Человек и противоокислительные вещества Текст. / Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер // Ленинград: Наука, 1985.- 232 с.

3. Агаджанян, H.A. Экологические аспекты генеза токсического отека легких Текст. / H.A. Агаджанян, И.Н. Полунин, H.H. Тризно // Астрахань, 1-996. - 180 с. - - - — -----

4. Анисимов, В.Н. Возрастные изменения активности свободнора-дикальных процессов в тканях и сыворотке крови крыс Текст. / В.Н. Анисимов, A.B. Арутюнян, Т.И. Опарина // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1999. - Т. 84. - С. 502-507.

5. Анисимов, В.Н. Эволюция концепций в геронтологии Текст. / В.Н. Анисимов, М.В. Соловьев // СПб.: Эскулап, 1999. 130 с.

6. Н.Арутюнян, A.B. Механизмы свободнорадикального окисления и его роль в старении Текст. / A.B. Арутюнян, JI.C. Козина // Успехи геронтологии, 2009.-№ 1- С. 104-116.

7. Аскарова, Э.А. Генерация супероксидных радикалов и текучесть мембранных липидов Acholeplasma laidlawii при старении культуры клеток Текст. / Э.А. Аскарова, А.Б. Капитанов, В.К. Кольтовер и др. // Биофизика. 1987. - Т. 32. - С. 95-99.

8. Асфандияров, Р.И. Острые отравления серосодержащими газами Текст. / Р.И. Асфандияров, В.Н. Бунин, А.Е. Лазько и др. // Астрахань. 1995.- 156 с.

9. Ахалая-, М.Я. Кратковременное---охлаждение повышаетантиоксидантный статус и общую устойчивость организма Текст. / М.Я. Ахалая, А.Г. Платонов, A.A. Байжуманов // Бюллетень экперим. биологии и медицины. 2006. -Т.141. -№1. - С. 31 - 35.

10. Барабой, В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов Текст. / В.А. Барабой // Успехи современной биологии.- М.: Наука, 1991. Т. 111, вып. 6. - С.923-931.

11. Барабой, В.А. Биологические функции, метаболизм и механизмы действия селена Текст. / В.А. Барабой // Успехи современной биологии.- М.: Наука, 2004. Т. 124, вып. 2. - С. 157 - 168.

12. Безруков, B.B. Хроническая электрическая стимуляции латеральной гипоталамической области старых крыс Текст. / В.В. Безруков, Т.А. Дубилей, Ю.Е. Рушкевич // Науч. труды I Съезда физиологов СНГ (1923 сентября 2005 г.). 2005. - Т. 1. - С. 168.

13. Текст. / М.В. Биленко // М: Медицина, 1989. 368 с.

14. Богданов, Г.Н. Стресс как биологическая модель для оценки антиоксидантного статуса in vivo Текст. / Г.Н. Богданов // Биоантиоксидант: Тезисы докладов VIII Международной конференции. Москва, 4-6 октября 2010 г. -М.: РУДН, 2010. С. 54-56.

15. Боев, В.М. Сернистые соединения природного газа и их действие на организм Текст. / В.М. Боев, Л.Р. Сетко // М.:Медицина. 2001 - 216с.

16. Бойко, О.В. Содержание вредных веществ в воздушной среде центральной заводской лаборатории Астраханскогогазоперерабатывающего завода Текст. / О.В. Бойко, В.И. Бойко, Ю.И. Доценко // Гигиена и санитария. 2011. - № 3. -С.33-38.

17. Боровкова, Г.И. Фосфолипидный спектр, уровень токоферола и аскорбата в эритроцитах после острой кровопотери Текст. / Г.И. Боровкова, Н.Мт Титова // Научные труды I съезда-физиологов СНГ, Т.2. Сочи, Дагомыс 19-23 сентября 2005. С. 10.

18. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. Текст. / Я. Буреш, О. Бурешова, Дж.П. Хьюстон // М: Высшая школа. 1991. - 399 с.

19. Бурлакова, Е.Б. Связь изменений структуры и функций мембран с окислительными реакциями в липидах Текст. / Е.Б. Бурлакова // Тезисы симпоз. Рига: Зинатне, 1974. С. 184.

20. Бурлакова, Е.Б. Влияние синтетических антиоксидантов на функциональное состояние головного мозга крыс после звукового раздражения Текст. / Е.Б. Бурлакова, Г.В. Архипова, А.Ф. Семиохина и др. // Докл. АН СССР. 1981. Т. 256. -№ 3. -С. 746 - 749.

21. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты Текст. / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. 1986.-Т. 54.-№9.-С. 1540-1558.

22. Бурлакова, Е.Б. Модуляция перекисного окисления липидов биогенными аминами в модельных ситемах Текст. /Е.Б. Бурлакова, А.Е. Губарева, Г.В. Архипова и др. // Вопр. мед. химии. 1992. - № 2. -С. 17-20.

23. Бурлакова, Е.Б. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов Текст. / Е.Б. Бурлакова, С.А. Крашаков, Н.Г. Храпова // Черноголовка, 1992. 56 с.

24. Вартанян, Л.С. Мембраны субклеточных органелл как источник супероксидных радикалов при ишемии печени Текст. / Л.С. Вартанян, Ю.Э. Рашба, Л,Г. Наглер-и др. //-Бюл. экеперим. биол. и медт— 1990. -№6.-С. 550-552.

25. Визель, М.А. Влияние углеводородов нефтепродуктов на функциональное состояние системы кровообращения Текст. / М.А. Визель // Гиг. труда и проф. заболев. 1982. - № 7. - С. 37-38.

26. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах Текст. / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков // М.: Наука. -1972.-252 с.

27. Владимиров, Ю.А. Хемилюминесценция клеток животных Текст. / Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев // Итоги науки и техники. Серия Биофизика. 1989. -Т. 24.

28. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах Текст. / Ю.А. Владимиров // Сорос, образоват. журнал 2000. - № 12 -С. 13-19.

29. Вольский, H.H. Влияние супероксидного радикала на пролиферацию лимфоцитов, стимулированную митогеном Текст. / H.H. Вольский, Н.В. Кашлакова, В.А. Козлов // Цитология. 1988. - Т. 30. - № 7. - С. 898-902. . - - -

30. Воскресенский, О.Н. Биоантиоксиданты облигатные факторы питания Текст. / О.Н. Воскресенский, В.Н. Бобырев // Вопр. мед. химии. -1992.-№4.-С. 21-26.

31. Гадаскина, И.Д. Использование фармакологических тестов для анализа механизма действия промышленных ядов Текст. / И.Д. Гадаскина, Ж.И. Абрамова // В кн.: Актуальные проблемы гигиенической токсикологии. М., 1980. С. 17-72.

32. Гацура, В.В. Кардиопротекторные свойства некоторых синтетических антиоксидантов Текст. / В.В. Гацура, Л.Д. Смирнов // Химико-фармацевтический журн. 1992. - № 11-12.-С.10-15.

33. Герасимова, Е.В. Сравнительный анализ действия H2S и его донора NaHS на вызванную секрецию медиатора Текст. / Е.В. Герасимова, О.В. Яковлева, A.B. Яковлев // Научные труды I съезда физиологов СНГ, Т.1. Сочи, Дагомыс 19-23 сентября 2005. - С.51.

34. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия Текст. / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов // АМН СССР. Л.: Медицина. -1986.-280 с.

35. Голиков, А.П. Свободнорадикальное окисление и сердечно-сосудистая патология: коррекция антиоксидантами Текст. / А.П. Голиков, С.А. Бойцов, В.П. Михин и др. // Лечащий врач. 2003. - № 4. - С. 70-74.

36. Григорьева, И.В. Особенности регуляции перекисного окисления лииидов при острой пневмонии и при острой пневмонии в сочетании с сахарным диабетом Текст. / И.В. Григорьева, Д.Р. Ракита, В.Я. Гормаш // Терапевтический архив. 1993. - № 3. - С. 27-31.

37. Гродзинский, Д.М. -Надежность -и--старение- биологических- систем- — Текст. / Д.М. Гродзинский, В.П. Войтенко, Ю.А. Кутлахмедов и др. // Киев: Наукова думка, 1987. 172 с.

38. Губарева, Е.А. Состояние системы антиоксидантной защиты у больных с острым инфарктом миокарда на фоне ТЭС-терапии / Е.А.Губарева, А.Х. Каде, И.М.Быков и др. // Астраханский медицинский журнал. -Т.З.-№3.-2008.-С. 156- 158.

39. Губский, Ю.И. Влияние витамина Е на структурно- функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном Текст. / Ю.И. Губский, Е.Л. Левицкий, Р.Г. Примак и др. // Биополимеры и клетка. 1993. - № 3. - С. 27-34.

40. Губский, Ю.И. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях Текст. / Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев, Е.Л. Левицкий и др. // Современные проблемы токсикологии. 2005. - № 3. - С. 20-27.

41. Гуревич, К.Г. Оксид азота: биосинтез, механизмы действия, функции Текст. / К.Г. Гуревич, Н.Л. Шимановский // Вопросы биол., мед. и фарм. Химии. 2000. - №4. - С 16-22.

42. Гусев, В.А. Свободнорадикальная теория старения в паредигме геронтологии Текст. / В.А. Гусев// Успехи геронтологии. 2000. -Вып. 4.-С. 41-49.

43. Гуськова, Т.А. Медико-биологические аспекты применения антиоксидантов эмоксипина и мексидола (экспериментальное и клиническое изучение). Текст. / Т.А. Гуськова // 1992. С. 44-45.

44. Дрогичина, Э.А. Профессиональные болезни нервной системы Текст. / Э.А. Дрогичина // Л.Медицина. 1982. - 207 с.

45. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения Текст. / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров, Д.А. Ходов // Вопросы мед. химии. 1995. -№ 1.-С.24-26.

46. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков плзмы крови больных психическими расстройствами (депрессия, деперсонализация) Текст. / Е.Е. Дубинина, М.Г. Морозова, Н.В. Леонова и др. // Вопр. мед. химии. -2000. №4. - С. 52-57.

47. Дубинина, Е.Е. Свободнорадикальные процессы при старении, нейродегенеративных заболеваниях и других патологических состояниях Текст. / Е.Е. Дубинина, A.B. Пустыгина // Биомедицинская химия. 2007. - № 4. - С. 351-371.

48. Дюмаев, K.M. -Антиоксиданты в профилактике и терапии патологии

49. ЦНС Текст. / K.M. Дюмаев // М.: Ин-т биомед. химии РАМН. -1995.1. С. 7-29.

50. Ерин, А.Н. Свободнорадикальные механизмы в церебральной патологии Текст. / А.И. Ерин, Н.В. Гуляева, Е.В. Никушкин //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1994. - Т. 10. - С. 343-347.

51. Журавлев, А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии Текст. / А.И. Журавлев // М.: Наука. Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. 1982. - С. 3-37.

52. Журавлев, А.И. Спонтанная биохемилюминесценция животных и тканей Текст. / А.И. Журавлев // М.: Наука. Биохемилюминес-ценция 1983. С. 3-30.

53. Зенков, Н.К. Фенольные биоантиоксиданты Текст. / Н.К. Зенков, Н.В. Кандалинцева, В.З Ланкин и др // Новосибирск, 2003. 328 с.

54. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга Текст. / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Стуковой // М.: Знание. М, 2000. - 344 с.

55. Ибатуллина, Р.Б. Защитно-восстановительный эффект антиоксидантовпри эксперементальной. интоксикации хлорфенолами Текст. / Р.Б.

56. Ибатуллина, В.А. Мышкин // Медицина труда и промышленная экология. 2008. - № 5. - С. 28-31.

57. Ивонина, Т.Н. Состояние сердечно-сосудистой системы у рабочих производства элементарной серы Текст. / Т.Н. Ивонина, Ф.С. Кузьмина, Т.Н. Киселева // Вопр. гигиены труда и соц.- экон. развития урал. пром. региона. Свердловск, 1987. - С. 54-58.

58. Кабак, Я.М. Основные методы экспериментально эндокринологических исследований.// М. 1968. 275 с

59. Каминская, Т.О. Оксид азота его биологическая роль и участие в патологии органов дыхания Текст. / Г.О. Каминская // Проблемы туберкулеза. - 2004. - № 6. - С.3-11.

60. Каминская, Л.Ю. Влияние донатора NO нитрозотиола глутатиона на уровень окислов азота и малонового диальдегида в крови крыс Текст. / Л.Ю. Каминская, A.A. Жлоба, Л.А. Александрова и др. // Артериальная гипертензия. 2005. - Т. 11. - №1. - С. 5-9.

61. Капелько, В.И. Активные формы кислорода, антиоксиданты и профилактика заболеваний сердца Текст. / В.И. Капелько // Русский медицинский журнал. 2003. - Т. 11. - № 21. - С. 1185 -1188.

62. Караш, Ю.М. Нормобарическая гипоксия в лечении, профилактике и реабилитации. Текст. / Ю.М. Караш, Р.Б. Стрелков, А .Я. Чижов // М.: Медицина, 1988. 352 с.

63. Кипиани, В.А. Изменение про- и антиоксидантного статуса тканей при паранеопластических процессах Текст. /В.А. Кипиани, К.Г. Гамбашидзе, Н.Д. Бежиташвили и др. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. Т.141.-№1.-2006.-С 27-31.

64. Киясова, В.И. Роль антиоксидантов в процессе адаптации клеток Текст. / В.И. Киясова, Л.И. Бикбулатова // Тез.докл. II Всесоюз. конф. «Биоантиоксиданты». M.-h Наука. - 1986. - Т- II. —С. 103. - —

65. Клебанов, Г.И. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеинов Текст. / Г.И. Клебанов, И.В. Бабенкова, Ю.О. Теселкин // Лабораторное дело. 1988.-№ 5.-С.59-62.

66. Клебанов, Г.И. Антиоксидантные свойства производных 3-оксипиридина: мексидола, эмоксипина и проксипина Текст. / Г.И. Клебанов, О.Б. Любицкий, О.В. Васильева и др. // Вопросы медицинской химии. Т. 47. -№ 3. -2001. - С. 288-300.

67. Клейн, A.B. Влияние хронического комплексного воздействия оксида серы и промышленной пыли на центральную нервную систему / А.В.Клейн, Т.И. Ивонина // Тез. Докл. Науч. Конф. ЦНИЛ Свердловского мед. Института. Свердловск. - 1989. - С. 68-69.

68. Коган, А.Х. Свободнорадикальные перекисные механизмы патогенеза ишемии и инфаркта миокарда и их фармакологическая регуляция Текст. / А.Х. Коган, А.Н. Кудрин, Л.В. Кактурский и др. // Патол. Физиология и эксперим. терапия. 1992. - № 2. - С. 5- 15.

69. Козак, М.В. Морфофункциональное состояние гонадотропоцитов аденогипофиза на ранних этапах возрастной инволюции Текст. / М.В. Козак, Д.Л. Теплый // Успехи геронтологии. 2007. -№ 4. - С.25-30.

70. Колесниченко, Е.В. Исследование перекисного окисления липидов и уровня мозгового нейротрофического фактора у больныхшизофренией Текст. / E.B. Колесниченко, В.Б. Вильянов // Неврологический вестник. 2008. - Т. XL. - вып. 3. - С. 47 - 50.

71. Колосова, Н.Г. Гормоноподобные эффекты токоферола Текст. / Н.Г. Колосова, В.Ю. Куликов, Р.Н. Матаев // Тез.докл. II Всесоюз.конф. «Биоантиоксиданты». М.: Наука. - 1986. - Т. II. - С. 220-221.

72. Кольтовер, В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы Текст. /В.К. Кольтовер // Успехи геронтологии. 1998. - Вып. 2. - С. 37-42.

73. Кольтовер, В.К. Свободнорадикальная теория старения: -исторический очерк-Текст.-/ В.К. Кольтовер, // Успехи геронтологии-.2000.-Вып. 4.-С. 33-40.

74. Константинов, Ю.М. Дисфункция митохондрий при нейродегенеративных заболеваниях Текст. / Ю.М. Константинов, В.А. Бывальцев, С.Б. Никифоров и др. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова, 2010. -№ 9. С. 87-91.

75. Копанев, В. А. Метод вероятностной оценки токсического эффекта Текст. / В.А. Копанев, В.А. Гинсбург, В.Н. Семенова // Новосибирск: Наука. 1988. 234 с.

76. Коркушко, О.В. Эффективность периодических гипоксических тренировок у пожилых людей с ишемической болезнью сердца Текст. / О.В. Коркушко, В.Б. Шатило, В.А. Ищук // Успехи геронтологии. 2010. -№ 3. - С.476-482.

77. Королюк, М.А. Метод определения активности каталазы Текст. / М.А. Королюк, Л.И. Иванов, М.Г. Майорова и др. //Лаб. дело.-1988.-№1- С. 16 -19.

78. Корякина, Е.В. Особенности патогенетических механизмов эндогенной интоксикации у больных ревматоидным артритом Текст. / Е.В. Корякина, С.В. Белова // Научно-практическая ревматология. 2001. № 1. - С. 9-17.

79. Косарев, В.В. Клинико-бронхологическая характеристика хронического бронхита, обусловленного воздействием фиброгенной пыли и продуктов хлорорганического синтеза Текст. /В.В. Косарев,

80. B.C. Лотков, С.А. Бабанов // Гигиена и санитария. 2008. - № 1. - С. 33-38.

81. Котельников, A.B. Роль витамина Е в регуляции проницаемости гистогематических барьеров на -разных- этапах -постнатального онтогенеза Текст. / A.B. Котельников // М.: Изд-во «Академия Естествознания». 2005. - 148 с.

82. Котляров, A.A. Исследование влияния мексидола, эмоксипина и димефосфона на электрофизиологические эффекты нибентана Текст. / A.A. Котляров, Н.В. Куркина, Л.Э. Смирнова и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология Т.65. №2. - 2002.1. C. 27-30.

83. Кочетов, Г.А. Практическое руководство по энзимологии. Текст. / Г.А. Кочетов // М.: Высшая школа. 1980. - С. 57-60.

84. Красновская, И.А. Состояние некоторых центров гипоталамуса в условиях кратковременного охлаждения крыс Текст. / И.А. Красновская, Т.В. Тавровская // Бюл. эксперим биологии и медицины. -1980,-№9.-С. 228-230.

85. Крушинский, J1.B. Исследование по феногенетике признаков поведения у собак Текст. / J1.B. Крушинский // Биол. журнал. 1983. -Т. 7. -№ 4. - С.869 - 891.

86. Крыжановский, Г.Н. Дизрегуляционная патология //М.: Медицина 2002. - 632 с.

87. Кузин, А. М. Радиотоксины как регуляторы роста и развития Текст. / А. М. Кузин // Лучевые реакции. М: Наука, 1987.-С.113-123.

88. Лабори, А. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты) Текст. / А. Лабори // М.: Медицина, 1970. 383 с.

89. Ланкин, В.З. Роль перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза Текст. / В. 3. Ланкин, А. М. Вихерт, А. К. Тихадзе // Вопр. мед. химии. 1989. -№ 3. - С. 18-23.

90. Ланкин, В.З. Коэнзим Q10: физиологическая функция и перспективы использования в комплексной терапии заболеваний сердечно-сосудистой системы: пособие для врачей Текст. / В.З.

91. Панкин, В.И. Капелько, Э.К. Руге и др. // М.: МЕДПРАКТИКА-М, 2008.-22 с

92. Ларский, Э.Г. Процессы биоэнергетики и структурно-функциональные свойства биологических мембран в норме и в условиях патологии Текст. / Э.Г. Ларский, Н.Б. Полянский, Т.С. Коршунова, Т.В. Рясина // Саратов 1987. С. 37-40.

93. Ларский, Э.Г. Способ лечения нарушений мозгового кровообращения Текст. / Э.Г. Ларский, A.A. Шведова, Т.В. Рясина и др. //А. с. N 1734755 СССР от 22.01.92 с приоритетом от 22.08.86. Бюл. изобрет. 1992; 8. ----- ---- ----- --

94. Лейдерман, И.Н. Синдром гипнрметаболизма универсальное звено патогенеза критических состояний Текст. / И.Н. Лейдерман, И.Н. Руднов, В.А. Клейн и др. // Вестн. интенсив, терапии. - 1997. - № З.-С. 17-23.

95. Ленинджер, А. Основы биохимии Текст. / А. Ленинджер // в 3-х томах. Пер. с англ. М.:Мир. - 1985. - 1056 с.

96. Ломтева, H.A. Тканеспецифические и возрастные особенности перекисного окисления липидов у самок крыс в разные фазы эстрального цикла Текст. / H.A. Ломтева, Д.Л. Теплый // Тез. докл. Всерос. конф. с междунар. участием «Нейроэндокринология-2003».

97. Санкт-Петербург, 2003. С. 197-198.

98. Лудевич, Р. Острые отравления Текст. / Р. Лудевич, К. Лос //Под ред. Е.В. Гембицкого: М.: 1983. - 560 с.

99. Лурье, Ю.Ю. Справочник по аналитической химии: Текст. / Ю.Ю. Лурье // Справ.изд. М.: Химия, 1998. - 448 с.

100. Мажуль, Л.М. Некоторые показатели липидного обмена у больных с гастродуоденальной патологией Текст. / Л.М. Мажуль, К.К. Далидович, В.В. Гулько // Вопросы мед. химии. 1991. -№ 4.-С.10-11.

101. Макарова, Н.П. Синдром эндогенной интоксикации при сепсисе Текст. / Н.П. Макарова, И.Н. Коничева // Анестезиология и реаниматология. 1995. - № 6. - С. 4-6.

102. Малышев, И.Ю. Гипоксия и оксид азота Текст. / И.Ю. Малышев, Е.А. Монастырская, Б.В. Смирин, и др. // Вестник РАМН. 2000. - № 9. С.44-48.

103. Маркель, А.Л. К оценке основных характеристик поведения крыс в тесте «открытое поле» Текст. / А.Л. Маркель //Журнал высшей нервной деятельности. 1981. - Т.36. - № 2. - С.801-807.

104. Маркель, А.Л. Факторный анализ поведения крыс в открытом поле» Текст. / А.Л. Маркель, Ю.К. Галактионов, В.М. Ефимов // Журнал высшей нервной деятельности. 1988. - Т.38. - №5. - С. 855863.

105. Марков, Х.М. Эндогенные ингибиторы оксида азота и их значение в патологии Текст. / Х.М. Марков // Российский педиатрический журнал. 2005. - № 6. - С. 31-35----------------

106. Матюшин, А.И. Сравнительная оценка антирадикальной и антиоксидантной активности эстрогенов и их нитропроизводных Текст. / А.И. Матюшин, В.М. Гукасов, В.М. Ржезников и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. Т. 65. - №3. - 2002. - С.25-27.

107. Матюшин, А.И. Антиаритмические свойства эстрогенов Текст. / А.И. Матюшин, Н.В. Каверина, Н.Л. Шимановский, А.И. Турилова //Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2006 - Т. 141.-№3.-С. 312 -315.

108. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: Текст. / М.Д. Машковский // М.: Новая Волна. 2010. - 1216 с.

109. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге Текст. / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский // Новосибирск: Наука, 1989. 344 с.

110. Маянская, H.H. Некоторые механизмы вовлечения лисозом в процессы тканевого повреждения Текст. / H.H. Маянская, J1.E. Панан, Ю.А. Николаев и др. // Вопр. мед. химии. 1990. - № 6. - С. 5-8.

111. Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных // Ланималогия. 1993. №1. - С.29.

112. Меньшикова, Е.Б. Метаболическая активность гранулоцитов при хронических неспецифических заболеваниях легких Текст. / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Терапевт, архив. 1991. - № 11 С. 85-87.

113. Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меныцикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков и др. // М.: Фирма «Слово», 2006. 556 с.

114. Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков, В.З. Ланкин и др. // Новосибирск: APTA. 2008. - 284 с.

115. Метельская, В. А. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке Текст. / В.А. Метельская, Н.Г. Туманова // Клиническая лабораторная диагностика. 2005. - № 6. - С. 15-18.

116. Могош, Г. Острые отравления. Диагноз. Лечение Текст. / Г. Могош //Бухарест: Медицинское издательство. 1984. - 579 с.

117. Муфазалова, H.A. Применение тактивина, миелопида и токоферола для коррекции иммунотоксических эффектов гербицида 2,4-ДА Текст. / H.A., Муфазалова, З.А. Ахметченко, Ф.Х. Камилов и др. // Окружающая среда и здоровье человека: Материалы II Санкт

118. Петербургского международного экологического форума, в 2-х частях; Санкт-Петербург, 1-4 июля 2008/Под ред. Академика РАМН Г.А. Софронова СПб.:ВМедА. - 2008. - Часть I. - С. 98-99.

119. Надиров, Н.К. Токоферолы и их использование в медицине и сельском хозяйстве Текст. / Н.К. Надиров // М.: Наука, 1991. 336 с.

120. Нейфах, Е.А. Большие радиопатогенные нагрузки детей от "малых доз" техногенной хронической радиации Текст. / Е.А. Нейфах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. - Т. 43. - № 2. -С.193-196.

121. Николайчик, В.В. «Средние молекулы» образование и способы определения Текст. / В.В. Николайчик, В.В. Кирковский, В.М. Моин // Эфферентная терапия. - 1989. -№ 8. - С. 31-33.

122. Нилова, Н.С. Перекисное окисление липидов в срезах обонятельной коры головного мозга крыс при дыхательной потенциации Текст. / Н.С. Нилова, JI.H. Полежаева // Физиол.журн.им. И.М.Сеченова. 1994. - Т. 80. - № 8. - С. 43-47.

123. Обухова, J1.K. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов Текст. / JI.K. Обухова, Н.М. Эмануэль // Успехи химии. 1983. - Т. 32. - С. 353-372.

124. Ойвин, И. А. О механизме физиологического действия сероводородных (Мацестинских) ванн Текст. / И.А. Ойвин, А.И. Гунина, В.А. Тихонравов // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб.физ.культуры. -1955. № 2. - С. 13-20.

125. Павловская, Н.Е. Антиоксиданты в явлениях апоптоза и некроза Текст. / Н.Е. Павловская, К.Н. Козявина, А.Ю. Гагарина и др. // Биоантиоксидант: Тезисы докладов VIII Междунар. конф. Москва, 4-6 октября 2010 г. -М.: РУДН, 2010. С. 90-101.

126. Паранич, A.B. О влиянии слабого СВЧ-излучения на содержание жирорастворимых витаминов А и Е в тканях крыс Текст. / A.B. Паранич, JI.A. Чайкина, А.Г. Трохименко // Биофизика. 1996. - Т. 41. -вып. 2.-С. 517-519.

127. Перепелкин, C.B. Нарушение функции высших отделов ЦНС при воздействии сероводородсодержащего газоконденсата и их коррекция Текст.-/ C.B. Перепелкин-// Автореф. дис.-.-канд.-мед. наук.-Оренбург. 1992.- 25 с.

128. Пестряева, J1.A. Лабораторная оценка тяжести аутоиммунного эндотоксикоза при беременности, осложненной гестозом Текст. / Л.А. Пестряева, Л.Н. Юрченко, Е.А. Шипицина и др // Клин. лаб. диагностика. 2000. - № 10. - С. 7.

129. Петров, Б.А. Гигиена труда в производстве газовой элементарной серы Текст. / Б.А. Петров // Автореф. дис. . канд. мед. наук. -Свердловск, 1979. 16 с.

130. Петросян, Э.А. Диагностическая ценность оценки проницаемости мембран эритроцитов в качестве критерия интоксикационного синдрома Текст. / Э.А. Петросян, H.A. Неделько // Клин. лаб. диагностика. 2001. - № 8. - С. 5.

131. Плецитый, К.Д. Витамины и иммунитет: витамин Е Текст. / К.Д. Плецитый. // Вопросы питания. 1997. - № 4. - С. 9-12.

132. Поберезкина, Н.Б. Биологическая роль супероксиддисмутазы Текст. / Н.Б. Поберезкина, Л.Ф. Лосинская // Укр. Био-хим. Журн. -1989.-Т. 61. -№ 2. С. 14-27.

133. Покровский, В.И. Оксид азота, его физиологические и патофизиологические свойства Текст. --/ ВтИ. Покровский, H.A. Виноградов // Терапевтический архив. 2005. - №1. - С. 82-87.

134. Полунин, И.Н. Токсический отек легких при остром отравлении сеоводородсодержащим газом Текст. / И.Н. Полунин, Р.И. Асфандияров, H.H. Тризно // Астрахань. 1999. - 219 с.

135. Попов, С. А. Активность глутатионовой антиоксидантной системы при гипертиреозе и при действии мелатонина Текст. / С.А. Попов, А.Н. Пашков, Т.Н. Попова и др. // Проблемы эндокринологии 2008.-Т. 54. -№3. С. 47-51.

136. Правила лабораторной практики в Российской Федерации: приложение к приказу МЗ РФ № 267 от 19.06.2003.

137. Прокопенко, В.М. Свободнорадикальное окисление в тканях плода при недоошеной беременности Текст. / В.М. Прокопенко, A.B. Арутюнн, Т.У. Кузьминых и др. // Вопросы мед. химии. 1995. - Т. 41. -С. 53-56.

138. Растинг, Р.Л. Почему мы стареем? Текст. / Р.Л. Растинг // В мире науки. 1993. - № 2-3. - С. 76-86.

139. Райзе, Т.Е. Содержание и обмен фосфоинозитидов в коре большого мозга крыс при аноксии и в раннем периоде реоксигенации Текст. / Т.Е. Райзе, М.О. Самойлов // Бюллетень эксперим. биологии и медицины. L994. =-№-6. С. 569-57-1.

140. Резаев, A.A. Некоторые показатели ПОЛ при остром отравлении газоконденсатом Текст. / A.A. Резаев, В.А. Пушкарев, A.C. Пушкарев // Влияние антропогенных факторов на морфогенез и структурные преобразования органов. Астрахань. - 1991. - С. 131132.

141. Ронин, B.C. Руководство к практическим занятиям по методам клинических лабораторных исследований. Текст. / B.C. Ронин, Г.М. Старобинец // М., 1989. 320 с.

142. Садовникова, И.П. Влияние геропротекторов- антиоксидантов на иммунные реакции Текст. / И.П. Садовникова // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М.: 1986. - С.69-109.

143. Самойлов, М.О. Реакции нейронов мозга на гипоксию. Текст. / М.О. Самойлов // Л.: Наука, 1985.- 190 с.

144. Саноцкий, И.В. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм. Текст. / И.В. Саноцкий, Н.В. Фоменко // М. -1979.- 186 с.

145. Сарин, М.И. К вопросу об острой интоксикации сероводородом Текст. / М.И. Сарин, Н.В. Сарина, Н.Д. Тополянский // Клиническая медицина. 1972. - № 1. - С. 99-101.

146. Сейфулла, Р. Д. Проблемы фармакологии антиоксидантов Текст. / Р.Д. Сейфулла, И.Г. Борисова // Фармакология и токсикология. 1990. - Т. 53. - № 6. - С.3-10.

147. Семенова, М.А. Роль половых гормонов в кардиоваскулярной----чувствительности -к -атропину—у -крыс в—условиях -покоя- -и стресса

148. Текст. / М.А. Семенова, O.A. Климова, Т.Г. Анищенко // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 2006. - Т. 141. - № 3. - С.270-274.

149. Сергеев, П.В. Стероидные гормоны М.: Наука, 1984. - 240 с.

150. Сидорик, Е.П. Биохемилюминесценция клеток при опухолевом процессе Текст. / Е.П. Сидорик, Е.А. Баглей, М.И. Данко // Киев: Наукова Думка, 1989. 220 с.

151. Синицкая, Н.С. Роль пептидов в свободнорадикальном окислении и старении организма Текст. / Н.С. Синицкая, В.Х. Хавинсон // Успехи совр. биол. -2002. -Т. 122. №6. - С. 557-568.

152. Сипров, A.B. Применение эмоксипина для коррекции гематотоксичности циклофосфана в эксперименте Текст. / A.B.- Сипров, Ю.А. Кинзирская //-Бюллетень зкспериментальной-биологии и --медицины. 2008. - Том 146. - №7. - С. 72-75.

153. Ситдикова, Г.Ф. Газообразные посредники в нервной системе Текст. / Г.Ф. Ситдикова, A.JI. Зифиров // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова Т. 97. № 7. - 2006. - С. 872-882.

154. Соколовский, В.В. Антиоксиданты в профилактике и терапии заболеваний Текст. / В.В. Соколовский // Международные медицинские обзоры. 1993. - № 1. - С. 11-14.

155. Солнышкова Т.Г. Демиелинизация нерных волокон центральной нервной системы при хроническом воздействии природного сероводородсодержащего газа Текст. / Т.Г. Солнышкова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. - № 10. - С. 374378.

156. Сорокина, И.В. Роль фенольных антиоксидантов в повышении устойчивости органических систем к свободно-радикальномуокислению: Аналитический обзор. Текст. / И.В. Сорокина, А.П. Крысин, Т.Б. Хлебникова и др. // Новосибирск. 1997. - С. 68.

157. Стальная, И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты Текст. / И.Д. Стальная, Т.Т. Гаришвили // Современные методы в биохимии. М.: Медицина -1977.-С. 66-68.

158. Строев, Е.А. Практикум по биологической химии Текст. / Е.А. Строев, В.Г. Макарова // М.: Высшая школа. 1986. - 230 с.

159. Струнина, Ю.З. Влияние эмоксипина на дисфункцию эндотелия в комплексной терапии больных ХОБЛ с легкой и средней степени тяжести Текст. / Ю.З. Струнина, Н.В. Вертинская // Научные труды I съезда физиологов СНГ, Т.1. Сочи, Дагомыс - 2005 - С. 158.

160. Сурай, П.Ф. Биохимические методы контроля метаболизма в органах и тканях птиц и их витаминной обеспеченности Текст. /П.Ф. Сурай, И.А. Ионов // Харьков. 1990. - 138 с.

161. Сурай, П.Ф. Биологическая роль витамина Е в размножении человека и животных: 2. Самки сельскохозяйственных птиц Текст. / П.Ф. Сурай, И.А. Ионов, С.Н. Лысенко // Биологический вестник. -1998.-Т. 2.-№2.-С. 3-7.

162. Суслина, З.А Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте Текст. / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова и др. // Журнал неврологии и психиатрии. 2000. - № 10. - С. 34-38.

163. Тарусов, Б.Н. Физико-химические механизмы биологического действия ионизирующих излучений Текст. / Б.Н. Тарусов // Успехи современной биологии. 1957. - Т. 44, вып. 2. - С. 171-185.

164. Теплый, Д.JI. К механизму влияния витамина Е на проницаемость гемато- энцефалического барьера Текст. / Д.Л. Теплый // Физиологический журнал СССР. 1979.- Т. 65. -№ 10. - С. 1506-1512.

165. Теплый, Д.Л. Исследование влияния витамина Е на функциональные системы организма (эколого- физиологический аспект): Дис.докт.биол.наук: 03.00.13-Защищена 03.83.

166. Теплый, Д.Л. Нейрофизиологические эффекты витамина Е Текст.: монография / Д.Л.Теплый. Астрахань: ООО «Леон», 2008. -310с.

167. Титов, С.Н. Роль ориентировочного и оборонительного компонентов в поведении белых крыс в условиях открытого поля Текст. / С.Н. Титов, A.A. Каменский // Журнал высшей нервной деятельности. 1980. - Т. 30. - № 4. - С. 704-709.

168. Тиунов, Л.А. Основные механизмы метаболизма ксенобиотиков в организме человека и животных Текст. / Л.А. Тиунов // Итоги науки и техники. Токсикология. -М., 1981. Т. 12. - С. 5-64.

169. Торчинский, Ю.М. Сера в белках Текст. / Ю.М. Торчинский // М.: Наука. 1977.-265 с.

170. Тризно, H.H. Эколого-физиологические механизмы токсического отека легких при ингаляции сероводородсодержащего газа Текст. / H.H. Тризно // Автореф. Дис. докт. мед. наук. Астрахань. -1996.-37 с.

171. Трубников, Г.А. Характеристика пневмопатий и их генез при остром отравлении природным газом- -с—высоким- содержанием сероводорода Текст. / Г.А. Трубников, В.Э. Вальтер, H.H. Тризно и др. // Пульмонология. 1994. № 11. - С. 50.

172. Угрюмов, М.В. Мозг в роли эндокринной железы во взрослом и развивающемся организме Текст. / М.В. Угрюмов // Росс. Физиолю журню им. И.М. Сеченова. 2004. -Т.90.-№ 5.-С. 625-637.

173. Федоров, С.А. Структурно-функциональная организация гематоэнцефалического барьера Текст. / С.А. Федоров, И.Б Ушаков, А.Н. Корденко и др. // Тез. докл. АН СССР. М., 1989. - № 1.-С.24-34.

174. Федорова, Т.Н. Перекисное окисление липидов при экспериментальной ишемии мозга Текст. / Т.Н. Федорова, A.A. Болдырев, И.В. Ганнушкина // Биохимия. -1999. Т. 64.-№1.-С. 94-98.

175. Федорова, Т.Н. Применение хемилюминесцентного анализа для сравнительной оценки антиоксидантной активности некоторых фармакологических веществ Текст. / Т.Н. Федорова //

176. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66. - № 5.-С. 56-58.

177. Федотова, Ю.О. Влияние дефицита гормонов периферических эндокринных желез на процессы поведения, обучения и памяти Текст. / Ю.О. Федотова // Журнал ВНД. 1999. - Т.49. - Вып. 1. - С. 39-47.

178. Филиппова, Е.Б. Влияние фаз эстрального цикла на функциональную межполушарную асимметрию у крыс Текст. / Е.Б. Филиппова //Журнал ВНД. 1996. - Т. 46. - вып. 4. - С. 753-761.

179. Флеров, М.А. Перекисное окисление липидов в гиппокампе, стриатуме-и гипоталамусе при стрессе Текст.- / М.А. Флеров, И.А. Герасимова // V Всеросс. Конф. «Нейроэндокринология-2000» 18-20 апреля 2000 года. Спб, 2000. - С130-131.

180. Флеров, М.А. Влияние пренатального стресса на свободно-радикальное окисление липидов головного мозга в постнатальном онтогенезе Текст. / М.А. Флеров, И.А. Герасимова, A.B. Вьюшина // // Нейрохимия. 2005. - Т. 22. - № 2. - С. 102-107.

181. Фролькис, В.В. Стресс-возраст-синдром Текст. / В.В. Фролькис // Физиол. журн. 1991. - Т. 37. - № 3. - С. 3-11.

182. Хавинсон, В.Х. Свободнорадикальное окисление и старение Текст. / В.Х. Хавинсон, В.А. Баринов, А.В Арутюнян и др. // СПб: Наука.-2003.-327 с.

183. Хмелевский, Ю.В. Витамин Е и его синтетические аналоги при экспериментальной сердечно- сосудистой патологии Текст. / Ю.В. Хмелевский, Н.Б. Поберезкина, О.В. Задорина и др. // Вопросы медицинской химии 1992. - № 5. - С. 30-33.

184. Чевари, С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / С. Чевари, И. Чаба, Й. Сокей // Лаб. дело. 1985. - № 11. -С. 678-681.

185. Чукаев, С.А. Влияние половых гормонов на уровень перекисного окисления липидов in vitro Текст. / С.А. Чукаев, А.Н. Караченцев // Бюллетень эксперим. биологии и медицины. 1997. - Т. 124. - № 7. -С. 73-76.

186. Шандра, A.A. Влияние токоферола на разные формы эпилептической активности Текст. / A.A. Шандра, J1.J1., Годлевский Р.Ф. Макулькин // Тез. докл. II Всесоюз.конф. «Биоантиоксиданты». -М.: Наука. 1986. - Т. И. - С.113.

187. Шаронов, Б.П. Антиокислительные свойства и деградация белков сыворотки активными формами кислорода, генерируемыми стимулированными нейтрофилами Текст. / Б.П. Шаронов, Н.Ю. Говорова // Биохимия. 1988. - Т.53. - вып. 5. - С. 816-825.

188. Шаяхметов, С.Ф. Оценка профессионального рисканарушения здоровья работников предприятий -химической—промышленности — Текст. /С.Ф. Шаяхметов, М.П. Дьячков, Н.М. Мещаков//Мед. труда-2008. №8. - С.27-33.

189. Шинкаренко, Н.В. Химические свойства сингл етного молекулярного кислорода и значение его в биологических системах Текст. / Н.В. Шинкаренко, В.Б. Алексовский // Успехи химии. 1982. -Т.51. -№ 5.-С. 713-735.

190. Шишкина, Т.А. Действие сероводородсодержащего газа Астраханского месторождения на систему дыхания Текст. / Т.А. Шишкина, М.А. Шубина // Актуальные проблемы педиатрии: Сб. науч. трудов. Астрахань, 2006. С. 283-285.

191. Шишло, М.А. О значении митохондрий в реакциях организма на действие сероводорода Текст. / М.А. Шишло // Науч. труды центр. НИИ курортологии и физиотерапии. 1975. - Т. 29. - С. 25-28.

192. Эммануэль, Н.М. Антиоксиданты в пролонгировании жизни Текст. / Н.М. Эммануэль // Биология старения. Л.:Наука. 1982 - С. 569-585.

193. Якутова, Э.Ш. Образование свободных радикалов при взаимодействии гипохлорита с ионами железа Текст. / Э.Ш. Якутова, Е.С. Дремина, С.А. Евгина и др. // Биофизика. 2004. - Т. 39. - вып. 2. - С. 275-279.

194. Яппаров, Р.Н. Критериальная значимость свободнорадикального окисления для оценки опасности производственных загрязнений Текст. / Р.Н. Яппаров // Астраханский медицинский журнал. Т. 3. -№3.-2008.-С. 294-297.

195. Abe, К. The possible role of hydrogen sulfide as an endogenous neuromodulator Text. / K. Abe, H. Kimura // J. Neurosci. 1996. - V. 16. -P. 1066-1071.

196. Adachi, T. Heparin-stimulated expression of extracellular-superoxide dismutase in human fibroblasts Text. / T. Adachi, H. Нага, H. Yamada, et- al.-//Atherosclerosis. 2001. - V. 159. -№2,- P. 307-312.

197. Adams, J. D. Jr. Oxygen free radicals and Parkinson's disease Text. / J. D. Jr. Adams, I. N. Odunze // Free Radic. BioJ. Med. 1991. - V. 10. - P. 161-169.

198. Agarwal, S. Relationship between aging and susceptibility to protein oxidative damage Text. / S. Agarwal, R.S. Sohal // Biochem. Biophys. Res. Comraun. 1993. -V. 194. - P. 1203-1206.

199. Alabarse, P.V. Oxidative stress in the brain of reproductive male rats during aging Text. /P.V/ Alabarse, F.S. Hackenhaar, T.M. Medeiros et al. // Exp. Gerontol.-201 l.-V. 46.-№4.-P. 241-248.

200. Alcaraz, M. Liposoluble antioxidants provide an effective radioprotective barrier Text. / M. Alcaraz, C. Acevedo, J. Castillo // Br J Radiol. 2009. V. 82. - № 979 - P. 605-609.

201. Amarnani, S.H. Early evaluation of potential worker exposure problems associated with the Claus-type sulfur recovery process Text. / S.H. Amarnani, R.W. Powell // Am Ind Hyg Assoc J. 1982. - V. 43. - № l.-P. 49-53.

202. Ames, B.N. Mitochcondrial decay in aging Text. / B.N. Ames, M.K. Shigenaga, T.M. Hägen // Biochem. Biophys. Acta-1995. V. 1271. - P. 165-170.

203. Ames, B.N. Optimal micronutrients delay mitochondrial decay and age-associated diseases Text. / B.N. Ames // Mech Ageing Dev. 2010. V. 131.-№7-8.-P. 473-479.

204. Andeau, F.M. Hydrogen sulfide poisoning: accociated with pelt processing Text. / F.M. Andeau, C. Gnanaharan, R. Davey // N Z Med J. -1985. Vol. 98. - № 774. - P. 145-147.

205. Babior, B.M. Biological defense mechanisms. The production by leukocytes of superoxide, a potential bactericidal agent Text. / B.M. Babior, R.S Kipnes., J.T. Carnutte // J. Clin. Invest 1973. - Vol. 52. - P. 741-744.

206. Bast, A. Oxidative stress and antioxidants in interstitial lung disease. Text. / A. Bast, A.R. Weseler G. R. Haenen et al. // Curr Opin Pulm Med. -2010.-Sep. V. 16.-№5.-P. 516-520.

207. Bayir, H. Neuronal NOS-mediated nitration and inactivation of manganese superoxide dismutase in brain after experimental and human brain injury Text. / H. Bayir, V.E. Kagan, R.S. Clark et al. // J Neurochem. 2007. V. 101.-№ l.-P. 168-181.

208. Berry, E.M. The effects of nutrients on lipoprotein susceptability to oxidation Text. / E.M. Berry // Current Opinion in Lipidology. 1992. - V. 3. -№ l.-P. 5-11.

209. Biernacki, K Regulation of Thl and Th2 Lymphocyte migration by human adult brain endothelial cells Text. / K Biernacki, A. Prat, M. Blain et al. // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2001. - V. 60. - № 12. - P. 1127-1136.

210. Borras, C. Mitochondria from females exhibit higher antioxidant gene expression and lower oxidative damage than males Text. / C. Borras, J. Sastre, D. Garcia-Sala et al. // Free Radical Research. 2003. - V. 34. - № 5.-P. 546-552.

211. Borras, C. Mitochondrial oxidant generation is involved in determining why females live longer than males Text. / C. Borras, J. Gambini, J. Vina // Front Biosci. 2007. - № 12. - P. 1008-1013.

212. Borras, C. Direct antioxidant and protective effect of estradiol on isolated mitochondria Text. / C. Borras, J. Gambini, R. Löpez-Grueso et al. // Biochim Biophys Acta. 2010. - V. 1802. - № 1. - P. 205-211.

213. Bourre, J.M. Function of dietary polyunsaturated fatty acids in the nervous system Text. / J.M. Bourre, M. Boneil, M. Clement et al. // Prostaglandins Leukotrieness and Essential Fatty Acids. 1993. - V. 48. -P. 5-15.

214. Bowry, V.W. Vitamin E in human low-density lipoprotein. When and how this antioxidant becomes a pro-oxidant Text. / V.W. Bowry, K.U. Ingold, R. Stocker // Biochem J. 1992. - V. 288. - P. 341-344.

215. Braidy, N. Age related changes in NAD+ metabolism oxidative stress and Sirtl activity in wistar rats Text. / N. Braidy, G.J. Guillemin, H. Mansouret al. // PLoS One. 2011. - Apr 26. - V. 6. - № 4:el9194.

216. Bregere, C. Detection and characterization of in vivo nitration and oxidation of tryptophan-residues-in proteins- Text. / C. Bregere, It Rebrin, R.S. Sohal // Methods Enzymol. 2008. - V. 441. - P. 339-349.

217. Brigelius-Flohe, R. Vitamin E and drug metabolism Text. / R. Brigelius-Flohe // Biochem Biophys Res Commun. 2003. - V. 305. - № 3 -C. 737-740.

218. Bruneiii, R. Estradiol enhances the resistance of LDL to oxidation by stabilizing apoB-100 conformation Text. / R. Bruneiii, G. Mei, E.K. Krasnowska // Biochemistry. 2000. - V. 39. - № 45. - P. 13897-13903.

219. Bruno, R.S. Vitamin E biokinetics, oxidative stress and cigarette smoking Text. / R.S. Bruno, M.G. Traber // Pathophysiology. 2006. - V. 13. -№ 3. - P. 143-149.

220. Burdon, R.H. Released active oxygen species as intercellular signals: their role in regulation of normal and tumour cell proliferation Text. / R.H. Burdon // Biol. Chem. 1992. - V. 373. - P. 739-740.

221. Cadet, J. Oxidative damage to DNA: formation, measurement and biochemical features Text. / J. Cadet, T. Douki, D. Gasparutto // Mutat Res. 2003.-V. 531.-№ 1-2.-P. 5-23.

222. Carg, G. Protective Role of Natural Antioxidants Text. / G. Carg, J. Wilmott, A. Znaiden // Cosmetics & Toiletries. 1987. V. 102. - P. 37-46.

223. Cerutti, P. Pathophysiological mechanisms of active oxygen Text. / P. Cerutti, R. Larsson, G. Krupitza et al. // Mutat. Res. 1989. - V. 214. - P. 81-88.

224. Cheung, K. Luminol-dependent chemiluminescence produced by neutrophils stimulated by immune complexes Text. / K. Cheung, A. Archibald, F. Robinson // Austr. J. Exp. Biol, and Med. Sei. 1984. - Vol. 62.-P. 403-419.

225. Chiueh, C. Induction of antioxidative and antiapoptotic thioredoxin supports neuroprotective hypothesis of estrogen Text. / C. Chiueh, S. Lee, T. Andoh et al. // Endocrin. 2003. - Vol. 21. - P. 27-31.

226. Cimen, M.Y. Free radical metabolism in human erythrocytes Text. / M.Y. Cimen // Clin Chim Acta. 2008. - V. 390. - № 1-2. - P. 1-11.

227. Comporti, M. Lipid peroxidation and cellular damage in toxic liver injury Text. / M. Comporti // Lab. Invest. 1985. - V. 53. - P. 599-623.

228. Conklin, K.A. Coenzyme qlO for prevention of anthracycline-induced cardiotoxicity Text. / K.A. Conklin // Integr Cancer Ther. 2005. - V. 4. -№2. -P. 110-230.

229. Conrad, M. Physiological role of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase in mammals Text. / M. Conrad, M. Schneider, A. Seiler et al. // Biol Chem. 2007. - V. 388. - № 10. - P. 1019-1025.

230. Cordero, M.D. Coenzyme Q10 and alpha-tocopherol protect against amitriptyline toxicity Text. / M.D. Cordero, A.M. Moreno-Fernández, J.L. Gomez-Skarmeta et al. // Toxicol Appl Pharmacol. 2009. - V. 235. - № 3. -P 329-337.

231. Cortina-Puig, M. Determination of the antioxidants' ability to scavenge free radicals using biosensors Text. / M. Cortina-Puig, B. Prieto-Simón, M. Campás et al. // Adv Exp Med Biol. 2011. -V.698.-P.222-233.

232. Cross, A.R. Enzymic mechanisms of superoxide production Text. / A.R. Cross, O.T.G. Jones // Biochim. et biophys. Acta. 1991. - V. 3- P.- 27=32. - - ----- - - - - ------- -

233. Cutler, R.G. Human longevity and aging: possible role of reactive oxygen species Text. / R.G. Cutler // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1991. - V. 621.-P. 1-28.

234. Darr, D. Adaptation to oxidative stress in young, but not in mature or old, Caenorhabditis elegans Text. / D. Darr, I. Fridovich. // Free Radie Biol Med. 1995.-V. 18.-№2.-P. 195-201.

235. Dean, R.T. Free radical damage to proteins: the influence of the relative localization of radical generation, antioxidants, and target proteins Text. / R.T. Dean, J.V. Hunt, A.J. Grant et al. // Free Rad. Biol. Med. -1991.-V. 11.-№ 12. P. 161-165.

236. Demaret, D. Les intoxications par l'hydrodene sulfure dans une raffinerie de gas naturel Text. / D. Demaret, I. Fialaire //Europ. J.Toxicol -1974. -V.7. -№ l.-P. 32-36.

237. Di Domenico, F. Oxidative damage in rat brain during aging: interplay between energy and metabolic key target proteins Text. / F. Di Domenico,

238. M. Perluigi, D.A. Butterfield et al // Neurochem Res. 2010. V. 35. - № 12. -P. 2184-2192.

239. Dinesen, B. Changes in the activity of nuclear RNA-polymerase in the liver and brain of the rat as consequences of deficiency of vitamin E and linoleik acid Text. / B. Dinesen, J. Clausen // Acta agr. Scand. 1973. -Vol. 23.-№ 19.-P. 142-151.

240. Dolle, M.E.T. Rapid accumultaion of genome rearrangements in liver but not in brain of old mice Text. / M.E.T. Dolle, H. Giesse, G.L. Hopkins et al. // Nat. Genetics. 1997. - V. 17. - P. 431^134.

241. Dukan, S. Protein oxidation in response to increased transcriptional"or translational errors Text. / S. Dukan, A. Farewell, M. Ballesteros et al. // Proc Natl Acad Sei USA.- 2000. V. 97. - №. 11. - P. 5746-5749.

242. Dutta, A. Vitamin E and its role in the prevention of atherosclerosis and carcinogenesis: A review Text. / A. Dutta, S.K. Dutta // J. Am. Coll. Nutr. 2003. - V. 22. - P. 258-268.

243. Eaton, J.W. Catalases and peroxidases and glutathione and hydrogen peroxide: mysteries of the bestiary Text. / J.W.Eaton // J Lab Clin Med. -1991.-V. 118.-№ l.-P. 3-4.

244. Ehrenbrink, G. Antioxidant enzymes activities and protein damage in rat brain of both sexes Text. / G. Ehrenbrink, F.S. Hakenhaar, T.B. Salomon et al. // Exp Gerontol. 2006. V. 41. - № 4. - P. 368-371.

245. Fand, I. Whole-body localization of 14C-tocopheryl acetate in the rat following oral administration Text. / I. Fand, W.P. McNally //. Arch Int Pharmacodyn Ther. 1981.-V. 250.-№ l.-P. 4-17.

246. Faraci, F.M., Protecting against vascular disease in brain. Text. / F.M. Faraci // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2011. - V. 300. - № 5. -P. H1566-H1582.

247. Faulkner, M.J. Peroxide stress elicits adaptive changes in bacterial metal ion homeostasis Text. / M.J. Faulkner, J.D. Helmann // Antioxid Redox Signal.-201 l.-V. 15.-№ l.-P. 175-189.

248. Fidelius, R. K. The generation of oxygen radicals: A positive signal for lymphocyte activation Text. / R.K. Fidelius // Cell. Immunol. 1988. -V. 113.-P. 175-182.

249. Filser, -N. Quantification of wild-type mitochondrial-DNA and- its 4.8kb deletion in rat organs Text. / N. Filser, C. Margue, C. Richter // Biochem Biophys Res Commun. 1997. -V. 233. -№ 1. - P. 102-107.

250. Finkel, I. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing Text. / I.Finkel, N.J. Holbrook // Nature. 2000. - V. 408. - № 6809. - P.239-247.

251. Fleming, A.J. Chemical health hazards Text. / A.J. Fleming // Modern Occupftional Medicine.- Philadelphia. 1954.- 333 p.

252. Floyd, R.A. Oxidative stress in brain aging. Implications for therapeutics of neurodegenerative diseases Text. / R.A. Floyd, K. Hensley // Neurobiol Aging. 2002. - V. 23. - № 5. - P. 795-807.

253. Finkel, T. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing Text. / T. Finkel, N.J. Holbrook // Nature. 2000. - V. 408. - P. 239-247.

254. Forman, H.J. Oxidant production and bactericidal activity of phagocytes Text. / H.J. Forman, M.J. Thomas // Ann. Revs. Physiol. -1986.-V. 48.-P. 669-680.

255. Förstermann, U. Nitric oxide and oxidative stress in vascular disease Text. / U. Förstermann // Pflugers Arch. 2010. -V.459.-№ 6.-P.923-939.

256. Fridovich, I. Superoxide dismutases: anti- versus pro- oxidants? Text. / Anticancer Agents Med Chem. 2011. - V. 11. - № 2. - P. 175-157.

257. Giulivi, C. Tyrosine oxidation products: analysis and biological relevance Text. / C. Giulivi, N.J. Traaseth, K.J.A. Davies // Amino Acids.2003.-V. 25.-P. 227-232.

258. Gomi, F. Effects of oxygen inhalation on the antioxidant capacity of lungs, livers, and brains in normal and vitamin E-defi-cient rats at various ages Text. / F. Gomi, M.M. Dooley, M. Matsuo // J. Nutr. Sei. Vitaminol. 1995. - V. 41. -P. 139-149.

259. Gonca, A.K. Differential effects of pharmacological doses of melatonin on malondialdehyde and glutathione levels in young and old rats

260. Text./ A.K. Gonca, B. Gonul, H, Akbulut-// Gerontology. —1-999. —V. 4-5. № 2. - P. 67-71.

261. Gong, Q.H. A new hope for neurodegeneration: possible role of hydrogen sulfide Text. / Q.H. Gong, X.R. Shi, Z.Y. Hong et al. // J Alzheimers Dis. 2011. - V. 24. - P. 173-182.

262. Gorsky, L.D. On the stoichiometry of the oxidase and monooxygenase reactions catalyzed by liver microsomal cytochrome P-450. Products of oxygen reduction Text. / L.D. Gorsky, D.J.L. Koop, M.J. Coon // J. Biol. Chem. 1984. - V. 259.-P. 6812-6817.

263. Gosselin, R., Hydrogen sulphide. Clinical Toxicology of Commercial Product Text. / R. Gosselin, H. Hodge, R. Smith et al. // The williams and Wilkins Co. 1976. - Baltimore. - P. 169-173.

264. Gotoh, N. Rates of interactions of superxide with vitamin E, vitamin C and related compounds as measured by chemiluminescence Text. / N. Gotoh, E. Niki // Biochim. Biophis. Acta. 1992. V. 1115. - P. 201-207.

265. Green, P.S. Neoroprotective effects of estrogens: potential mechanisms of action / P.S. Green, J.W. Simpkins // Int. J. Dev. Neurosci. 2000. - V. 18. - P. 347-358.

266. Groemping, Y. Activation and assembly of the NADPH oxidase: a structural perspective Text. / Y. Groemping, K. Rittinger // Biochem. J.2004. V. 38. № 6. - P. 401-416.

267. Grüne, T. Selective degradation of oxidatively modified protein substrates by theproteasome Text. / T. Grüne, K. Merker, G. Sandig et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. - Vol. 305. - P. 709-718.

268. Gsell, W. Decreased catalase activity but unchanged superoxide dismutase activity in brains of patients with dementia of Alzheimer type Text. / W. Gsell, R. Conrad, M. Hickethier et al. // J. Neurochem. 1995. -Vol. 64.-P. 1216-1223.

269. Guo, G. Manganese superoxide dismutase-mediated gene expression in radiation-induced adaptive responses Text. / G. Guo, Y. Yan-Sanders, -B.D.-Lyn-Cook-et al, // Mol Cell Biol. -2003, V--23. - № 7t- Pt 2362- - -2378.

270. Halliwell, B. Free radicals in biology and medicine Text. / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge // Oxford: University Press. 1999. - 936 p.

271. Halliwell, B. Free Radicals in the Brain Aging. Neurological and Mental Text. / B. Halliwell // Disordes. -Berlin; New York: SpringerVerlag. 2001. - P. 41-43.

272. Haramizu, S. Aging-associated changes in physical performance and energy metabolism in the senescence-accelerated mouse Text. / S. Haramizu, N. Ota, T. Hase et al. // J Gerontol A Biol Sei Med Sei. — 2011. — V. 66.-№6. -P. 646-655.

273. Harrison, R. Structure and function of xanthine oxidoreductase: where are we now? Text. / R. Harrison // Free Radic. Biol. Med. 2002. - V. 33. - P. 774-797.

274. Harman, D. Free-radical theory of aging. Increasing the functional life span Text. / D. Harman // Ann. N. Y. Acad. Sei. 1994. -V.717.-P. 1-15.

275. Harman, D. Free radical theory of aging Text. / D. Harman // Mutat. Res. 1992. - V. 275. - P. 257 - 266.

276. Hayashi, T. Effect of estrogen on isoforms of nitric oxide synthase: possible mechanism of anti-aterosclerotic effect of estrogen Text. / T.

277. Hayashi, K. Yamada, T. Esaki et al. // Gerontology. 1997. - V. 43. - P. 24-34.

278. Herman, E.H. Use of cardiac troponin T levels as an indicator of doxorubicin-induced cardiotoxicity Text. / E.H. Herman, S.E. Lipshultz N. Rifai et al. // Cancer-Res. 1998. - V. 58. - № 2. - P. 195 - 197.

279. Hertz, L. Ion and energy metabolism of the brain in the cellular level Text. / L. Hertz, A. Schousboe //Intern. Rev. Neurobiol. 1975. - V. 18. -P. 141-211.

280. Ho, Y.S. Mice Lacking catalase develop normally but show differential sensitivity to oxidant tissue-injury Text. / Y.S. Ho,~Y. Xiong, W. Ma et al. // J. Biol. Chem. 2004. - V. 279. - P. 32804-32812.

281. Hoffman, M.E. Correlation between cytotoxic effect of hydrogen peroxide and the yield of DNA strand breaks in cells of different species Text. / M.E. Hoffman, A.C. Mello-Filho, R. Meneghini // Biochim. Biophys. Acta. 1984. -V. 781. - P. 234-238.

282. Hogg, N. The oxidation of a-tocopherol and trolox by peroxynitrite Text. / N. Hogg, J. Joseph, B. Kalyanaraman // Arch. Biochem. Biophys. -1994.-V. 314.-P. 153-158.

283. Horie, M. Evaluation of acute oxidative stress induced by NiO nanoparticles in vivo and in vitro Text. / M Horie, H. Fukui, K. Nishio et al. // J Occup Health. -2011. V. 53. - № 2. - P. 64-74.

284. Hosoki, R. The possible role of hydrogen sulfide as an endogenous smooth muscle relaxant in synergy with nitric oxide Text. / R. Hosoki, N. Matsuki, H. Kimura // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. - V. 237. -№ 3. - P. 527-531.

285. Hosomi, A. Localization of a-tocopherol transfer protein in rat brain Text. / A. Hosomi, K. Goto, H.Kondo et al. // Neurosci. Lett. 1998. - V. 256.-P. 159-162.

286. Hunt, J.V. Hydroxyl radical production and autooxidative glycosylation Text. / J.V. Hunt, R.T. Dean, S.P. Wolff // Biochem. J. -1988.-V. 256.-P. 205-212.

287. Hwang, J. Ascorbic acid enhances 17ß-estradiol-mediated inhibition of oxidized low density lipoprotein formation Text. / J. Hwang, H. Peterson, H.N. Hodis et al. // Atherosclerosis. 2000. - V. 150. -P.275-284.

288. Ignarro, L.G. Endothelium-derived relaxing factor produced and released from artery and vien in nitric oxide Text. / L.G. Ignarro, G.M. Buga, K.S. Wood et al. // Proc.Natl. Acad. Sei USA. 1987. - V. 84. - P. 9265=9269. - - - - -

289. Iida, S. Vascular effects of a common gene variant of extracellular superoxide dismutase in heart failure Text. / S. Iida, Y. Chu, R.M. Weiss, et al. // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2006. - V. 291. - № 2. - P. H914-H920.

290. Itoh, S. Novel mechanism for regulation of extracellular SOD transcription and activity by copper: role of antioxidant-1 Text. /S. Itoh, K. Ozumi, H.W. Kim et all // Free Radic Biol Med. 2009. - V. 46. - № 1. -P. 95-104.

291. Jansen, E.H.J.M., Effect of iron chelates on luminol chemiluminescence in the presence of xanthine oxidase Text. / E.H.J.M. Jansen, R.H. Van Den Berg, J.J. Bergman // Anal. Chim. Acta. 1989. - V. 227-P. 57-63.

292. Jeney, V. Supression of hemin-mediated oxidation of low-density lipoprotein and subsequent endothelial reactions by hydrogen sulfide (H(2)S) Text. / V. Jeney, E. Komodi, E. Nagy et all // Free Radic Biol Med. 2009. - V. 46. - № 5. - P. 616-623.

293. Jishage, K. a-Tocopherol transfer protein is important for the normal development of placental labyrinthine trophoblasts in mice Text. / K. Jishage, M. Arita, K. Igarashi et al. // J. Biol. Chem. 2001. - V. 276. - P. 1669-1672.

294. Johnson, F. Superoxide dismutases and their impact uron human health Text. / F. Johnson, C. Giulivi // Mol. Aspects Med. 2005. - V. 26. -P. 340-352.

295. Johnson, M.A. Challenges and new opportunities for clinical nutrition interventions in the aged Text. / M.A. Johnson, J.T. Dwyer, G.L. Jensen // J Nutr. -2011. V. 141. -№3. -P. 535-541.

296. Jomova, K. Advances in metal-induced oxidative stress and human disease Text. / K. Jomova, M. Valko // Toxicology. 2011. - V. 283. - № 2-3.-P. 65-87.

297. Junod, A.F.-Effects of oxygen—intermediates on -celluar -functions Text. / A. F. Junod // Amer. Rev. Respir. Dis. 1987. - V.135.-P.532-535.

298. Kagan, V.E. Coenzyme Q: its role in scavenging and generation of radicals in membranes Text. / V.E. Kagan, H. Nohl, P.J. Quinn // Handbook of antioxidant / Eds. E. Cadenas, L. Packer. N.Y.: Marcel Dekkex, Inc., 1996.-P. 157—201.

299. Kangas, J. Exposure to hydrogen sulfide, mercaptans and sulfur dioxide in pulp industry Text. / J. Kangas, P. Jappinen, H. Savolainen // Amer. Ind. Hyg. Assoc. J. 1984. - V. 45. - № 12. - P. 787-790.

300. Kanvah, S. The sacrificial role of easily oxidizable sites in the protection of DNA from damage Text. / S. Kanvah, G.B. Schuster // Nucleic Acids Res.-2005.-V. 33.-№ 16.-P. 5133-5138.

301. Karla, J. Effect of oxygen free radicals, hypoxia and pH on the release of liver lysosomal enzymes Text. / J. Karla, A. K. Chaudhary, K. L. Massey et al. // Mol. And Cell. Biochem. 1990. - V. 94 - P. 1-8.

302. Kasai, H. Fomiation of 8-hydroxyguanine moiety in cellular DNA by agents producing oxygen radical and evidence for its repair Text. / H. Kasai, P.F. Crain, Y. Kuchino et al. // Carcinogenesis. 1986. - V. 7. - P. 1849-1851.

303. Kasama, T. Production of interleukin 1 -like factor from human peripheral blood monocytes and polymorphonuclear leucocytes by

304. Superoxide anion: The role of interleukin 1 and reactive oxygen species in inflammed sites Text. / T. Kasama, K. Kobayashi, T. Fukushima et al. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1989. -V. 66. - P. 1321-1327.

305. Khanna, P. Antioxidant enzymatic system in neuronal and glial cells enriched fractions of rat brain after aluminum exposure Text. / P. Khanna, B. Nehru // Cell Mol Neurobiol. 2007. - V. 27. - № 7. - P. 959-969.

306. Klents, R.D. Hydrogen Sulfide: Effects on avain respiratory control and intrapulmonary CO2 receptors Text. / R.D. Klents, M.R. Fedde // Rep. Physiol. 1978. - V. 32. - № 3. - P. 355-367.

307. Kobayashi, T. Ultrastructural localization of superoxide dismutase in human skin Text. / T. Kobayashi, N. Saito, N. Takemori et al.// Acta Derm. Venerol. 1993. - V. 73. - P. 41-45.

308. Kojda, T. Interactions between NO and reactive oxygen species: pathophysiological importance in atherosclerosis, hypertension, diabetes and heart failure Text. / T. Kojda, D. Harrison // Cardiovasc. Ree. 1999. - V. 43.-P 562-571.

309. Koningsberger, J.C. Copper,zinc-superoxide dismutase and hydrogen peroxide: a hydroxyl radical generating system Text. / J.C. Koningsberger, B.S. van Asbeck, E. van Faassen et al. // Clin. Chim. Acta. 1994. - V. 230. -P. 51-61.

310. Koster, J.F. Is increased tissue ferritin a risk factor for atherosclerosis and ischaemic heart disease? Text. / J.F. Koster, W. Sluiter // Br. Heart. J. -1995.-V. 73.-P. 208-209.

311. Laganiere, S. Anti-lipoperoxidative action of food restriction Text. / S. Laganiere, B.P. Yu // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. -V. 145. -№ 3 . -P. 1185-1191.

312. Larrick, J.W. Cytotoxic mechanism of tumor necrosis factor-a Text. / J.W. Larrick, S.C. Wright // FASEB J. 1990. - V. 4. - P. 3215-3223.

313. Lasheras, C. Independent and interactive association of blood antioxidants and oxidative damage in elderly people Text. / C. Lasheras,- J.M. Huerta, SvGonzalezetal. // Free Radical Research. ^ 2002, V. 36. -№8.-P. 875-882.

314. Levrat, C. Tumour necrosis factor induces activation of mitochondrial succinate dehydrogenase Text. / C. Levrat, J.W. Larrick, S.C. Wright // Life Sei. 1991.-V. 49.-P. 1731-1737.

315. Lennon, S.V. Dose-dependent induction of apoptosis in human tumour cell lines by widely diverging stimuli Text. / S.V. Lennon, S.J. Martin, T.G. Cotter // Cell. Prolif. 1991. - V. 24. - P. 203-214.

316. Levine, R.L. Carbonyl modified proteins in cellular regulation, aging, and disease Text. / R. L. Levine // Free Radic. Biol. Med. 2002. - V. 32. - P. 790-796.

317. Liochev, S.I. Mechanism of the peroxidase activity of Cu, Zn superoxide dismutase Text. / S.I. Liochev, L.Fridovich // Free Radic Biol Med. 2010.-V. 48.-№ 12.-P. 1565-1569.

318. Liu, K.J. Synthesis of Cr(IV)-GSH, its identification and its free hydroxy 1 radical generation: a model compound for Cr(VI) carcinogenicity

319. Text. / K.J. Liu, X .Shi, N.S. Dalai // Biochem Biophys Res Commun. -1997.-V. 235. -№ l.-P. 54-58.

320. MacMillan-Crow, L.A. Does more MnSOD mean more hydrogen peroxide? Text. / L.A. MacMillan-Crow, J.P. Crow // Anticancer Agents MedChem. -2011.-V. ll.-№2.-P. 178-180.

321. Maiorino, M. Prooxidant role of vitamin E in copper induced lipid peroxidation Text. / M. Maiorino, A. Zamburlini, A. Roveri, et al. // FEBS Lett. 1993. - V. 330. - P. 174-176.

322. Manda, K. AFMK, a melatonin metabolite, attenuates X-ray-induced oxidative damage to DNA, proteins and lipids in mice Text. / Manda K, Ueno M, Anzai K // J Pineal Res. 2007. - V. 42. - № 4. - P. 386-393.

323. Manni, M.L. Extracellular superoxide dismutase in macrophages augments bacterial killing by promoting phagocytosis Text. / M.L. Manni, L.P. Tomai, C.A. Norris et al. // Am J Pathol. 2011. - V. 178. - № 6. - P. 2752-2759.

324. Matsuo, M. Food restriction suppreesses an age-dependent increase in the exhalation rate of pentane from ratis: a longitudinal study Text. / M. Matsuo, F.Gomi, K. Kuramoto et al. // J. Gerontol. 1993.-V.48.-P.133-138.

325. Melov, S. Animal models of oxidative stress, aging, and therapeutic antioxidant interventions Text. / S. Melov // Int. J. Biochem. Cell Biol. -2002. V. 34. - P. 1395-1400.

326. Meneghini, R. Iron homeostasis and oxidative DNA damage Text. / R. Meneghini, M. S. Benfato, C. R. Bertoncini et al. // Cancer J. 1995. -V. 8.-P. 109-113.

327. Mongkolsuk, S. Regulation of inducible peroxide stress responses Text. / S. Mongkolsuk, J.D. Helmann // Mol. Microbiol. 2002. - V. 45. -P. 9-15.

328. Moncada, S. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology Text. / S. Moncada, R.M.J. Palmer, E.A. Higgs // Pharmacol. Rev. 1991.-V. 43.-P. 109-142.

329. Montilla, P. Hyperlipidemic nephropathy induced by adriamycin in ovariectomized rats: role of free radicals and effect of 17-p-estradiol administration Text. / P. Montilla, I. Tunez, M.C. Munoz et al. // Nephron. -2000. V. 85.-P. 65-70.

330. Mooradian, A.D. Age-related changes in the antioxidative potential of cerebral microvessels Text. / A.D. Mooradian, A. Ukoeninn // Brain Res. -1995.-V. 671.-№ l.-P. 159-163.

331. Moore, P.K. Hydrogen sulfide: from the smell of the past to the mediator of the future? Text. / P.K. Moore, M. Bhatia, S. Moochhala // Trends Pharmacol Sei. 2003. - V. 24. - № 12. - P. 609-611.

332. Moosman, B. The antioxidant neuroprotective effects of estrogens and phenolic compounds are independent from their estrogenic properties Text.

333. B. Moosman, C. Behl // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - V. 96. - P. 8867-8872.

334. Morin, B. The protein oxidation product 3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA) mediates oxidative DNA damage Text. / B. Morin, M.J. Davies, R.T. Dean // Biochem J. 1998. - V. 330. - №3. - P. 1059-1067.

335. Mullarkey, C.J. Free radical generation by early glycation products: a mechanism for accelerated atherogenesis in diabetes Text. / C.J. Mullarkey, D. Edelstein, M. Brownlee // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990. -V. 173.-P. 932-939.

336. Murphy, J.K. Modulation of the alveolar macrophage respiratory burst by hydroperoxides Text. / J.K. Murphy, C.R. Hoyal, F.R. Livingston et al. // Free Radic Biol Med. 1995. - V. 18.-№ l.-P. 37-45.

337. Musavi, S. Diazepam induced early oxidative changes at the subcellular level in rat brain Text. / S. Musavi, P. Kakkar // Mol. Cell. Biochem. 1998.-V. 178.-№ 1-2.-P. 41^6.

338. Nagababu E. Heme degradation by reactive oxygen species Text. / E. Nagababu, J.M. Rifkind // Oxygen Radicals in Biology and Medicine.-Antioxid Redox Signal. 2004. - V. 6. - № 6. - P. 967-978.

339. Nagano, T. Chemical and biochemical studies on reactivities, formations and toxicities of reactive oxygen species Text. / T. Nagano // Yakugaku Zasshi. 1991.-V. lll.-№2.-P. 103-119.

340. Nakanishi, S. The molecular diversity of glutamate receptors Text. / S. Nakanishi // Prog Clin Biol Res. 1994. - V. 390. - P. 85-98.

341. Nakazawa, H. Is superoxide demonstrated by electron spin resonance spectroscopy really superoxide? Text. / H. Nakazawa, C. Ichirnori, Y. Shinozaki et al. // Am. J. Physiol. 1988. - V. 255. - P. H213-H215.

342. Ngo, J.K. Importance of the Ion protease in mitochondrial maintenance and the significance of declining Ion in agingText. / J.K. Ngo, K.J. Davies // Ann N Y Acad Sci. 2007. - V. 1119. - P. 78-87.

343. Nicholls, P. The effect of sulphide on cytochromt aa3. Isoterie and allosteric shifts of the reduced a-peac Text. / P. Nicholls // Biochim. Biophys. Acta. 1975. - V. 396. - P. 24-28.

344. Nohl, H. Are mitochondria a spontaneous and permanent source of reactive oxygen species? Text. / H. Nohl, L. Gille, A. Kozlov et al. // Redox Rep.-2003.-V. 8. -№ 3. P. 135-141.

345. Noh, S.J. SP-8203 reduces oxidative stress via SOD activity and behavioral deficit in cerebral ischemia Text. / S.J. Noh, S.H. Lee, K.Y. Shin et al. // Pharmacol Biochem Behav. 2011. - V. 98. - № 1. - P. 150-154.

346. Nuttall S.L. Increased oxidative stress in ageing and age-related diseases Text. / S.L. Nuttall, U. Martin, T. Hutchin et al. // Age and Ageing. 1998. - V. 27. - (Suppl. 1).-P. 34.

347. Orta?, E. Low hair selenium and plasma glutathione peroxidase in children with chronic renal failure Text. / E. Orta?, O. Ozkaya, R. Saraymen et al. // Pediatr Nephrol. 2006. - V. 21. - № 11. - P. 17391745.

348. Ouchi, A. Kinetic study of the prooxidant effect of alpha-tocopherol. Hydrogen abstraction from lipids by alpha-tocopheroxyl radical Text. / A.- Ouchiy M^Ishikura, K. Konishi //Lipids.-2009. --Vr44.^№10.^P.935=943.

349. Ouchi, A. Tunneling effect in regeneration reaction of vitamin E by ubiquinol Text. / A. Ouchi, S. Nagaoka, K. Mukai // J Phys Chem B. -2010. V. 114. - № 19. - P. 6601-6607.

350. Palmer, R.M.J. Nitric oxide release accounts for the biological activityof endothelium-derived relaxing factor Text. / R.M.J. Palmer, A.G. Ferrige, S. Moncada // Nature. 1987. - V. 327. - P. 524-526.

351. Pandey, K.B. Plasma protein oxidation and its correlation with antioxidant potential during human aging Text. / K.B. Pandey, M.M. Mehdi, P.K. Maurya // Dis Markers. 2010. V. 29. - № 1. - P. 31-36.

352. Pani, G. Mitochondrial superoxide dismutase: a promising target for new anticancer therapies Text. / G. Pani, R. Colavitti, B. Bedogni et al. // Curr Med Chem. 2004. - V. 11. - № 10. - P. 1299-1308.

353. Papa, S. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging Text. / S. Papa, V.P. Skulachev // Mol. Cell. Biochem. 1997. - V. 174. -P. 305-319.

354. Peng, T.I. Oxidative stress caused by mitochondrial calcium overload Text. / T.I. Peng, M.J. Jou // Ann N Y Acad Sei. 2010. - V. 1201. - P. 183-188.

355. Peng, X. Naturally occurring inhibitors against the formation of advanced glycation end-products Text. / X. Peng, J. Ma, F. Chen et al. // Food Funct. 2011. - V. 2. - № 6. - P. 289-301.

356. Peterson, L. S. The effect of inhibitors on the oxygen kinetics of cytichrome C oxidase Text. / L. S. Peterson // Biochm. Biophys. Acta. -1977. V. 460. - №2. - P. 299-305.

357. Poda, G.A. Hydrogen sulfide can be handled safely Text. / G.A. Poda // Arch.Environ Health. 1966. - V. 12. - № 6. - P.795-800.

358. Pou, S. Generation of superoxide by purified brain nitric oxide synthase-Text.7 S. Pou, W.S. Pou, D:S7Bredt etal. //J. Biol: Chem.- 1992.- ~ V. 267.- P. 24173-24176.

359. Prat, A. Glial cell influens on the human blood-brain barrier Text. / A. Prat, K. Biernacki, K. Wosik et al. // Glia. 2001. - V. 36. - № 2. - P. 145-155.

360. Pronai, L. 5,5-dimethyl-l-pyrroline-N-oxide alone enhaces the spontaneous superoxide generation by primaquine Text. / L. Pronai, K. Ichimori, Y. Saigusa et al. // Arch. Biochem. and Biophys. 1991. - V. 288. -P. 276-281.

361. Pry or, W.A. Free radical biology and medicine: it's a gas, man! Text. / W.A. Pryor, K.N. Houk, C.S. Foote et al. // Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2006. - V. 291. - № 3. - P. 491-511.

362. Rao, G. Effect of age on the expression of antioxidant enzymes in male Fischer 344 rats Text. / G. Rao, E. Xia, A. Richardson // Mech. Ageing and Dev. 1990. -V. 53. - № i. p. 49-60.

363. Ren, J.C. Cytochrome c oxidase loses catalytic activity and structural integrity during the aging process in Drosophila melanogaster Text. / J.C. Ren, I. Rebrin, V. Klichko et al. // Biochem Biophys Res Commun. 2010. -V. 401.-№ l.-P. 64-68.

364. Richards, D.M. C. Membrane proteins are critical targets in free radical mediated cytolysis Text. / D.M.C. Richards, R.T. Dean, W. Jessup // Biochim. Biophys. Acta. 1988. - V. 946. - P. 281-288.

365. Rikans, L.E. Sex-dependent differences in aging on antioxidant defense mechanisms of rat liver Text. / L.E. Rikans, D.R. Moore, C.D. Snowden // Biochim. Et Biophys Acta. Gen. Subj. 1991. - V. 1074. - № 1. -P. 195-200.

366. Rubanyi, C.M. Vascular effects of oxygen-derived free radicals Text. / C.M. Rubanyi // Free Radical Biol, and Med. 1988. - V. 4. - P. 107-121.

367. Ruiz-Larrea, M.B. Antioxidant activities of estrogens against aqueous and lipophilic radicals; differences between phenol and catechol estrogen Text. / M.B. Ruiz-Larrea, C. Martin, R. Martinez et al. // Chem. Phys. Lipids. 2000. - V. 105.-P. 179-188.

368. Rybka, J. Age-related changes in an antioxidant defense system in elderly patients with essential hypertension compared with healthy controls Text. / J. Rybka, D. Kupczyk, K. K^dziora-Kornatowska et al. // Redox Rep.-2011.-V. 16. -№ 2. P. 71-77.

369. Samukawa, K. Protective effect of ginsenosides Rg(2) and Rh(l) on oxidation-induced impairment of erythrocyte membrane properties Text. / K. Samukawa, Y. Suzuki, N. Ohkubo et al. // Biorheology. 2008 - V. 45. -№ 6. - P. 689-700.

370. Savitha, S. Mitochondrial membrane damage during aging process in rat heart: potential efficacy of L-carnitine and DL alpha lipoic acid Text. / S. Savitha, C. Panneerselvam // Mech Ageing Dev. 2006. - V. 127. - № 4. -P. 349-355.

371. Sawada, H. Estradiol protects mesencephalic dopaminergic neurons from oxidative stress-induced neuronal death Text. / H. Sawada, M. Ibi, T. Kihara et al. // J. Neurosci. Res. 1998. - V. 54. - P. 707-719.

372. Schneider, C. Chemistry and biology of vitamin E Text. / C. Schneider // Mol. Nutr. Food Res. 2005. - V. 49 - P. 7-30.

373. Shacter, E. Quantification and significance of protein oxidation in biological samples Text. / E. Shacter // Drug Metab. Rev. 2000. - V. 32. -P. 307-326.

374. Shigenaga, M. K. Oxidative damage and mitochondrial decay in aging Text. / M.K. Shigenaga, T.M. Hogen, B.N. Ames // Proc. Natl. Acad. Sei. -1994.-V. 91.-P. 10771-10778.

375. Sies, H. Oxidative stress From basic research to clinical application Text. / H. Sies // Am. J. Med. - 1991. - V. 91, Suppl. 3C. - P. S31-S38.

376. Simson, R.E. Fatal hydrogen sulfide poisoning associated with industrial waste exposure Text. / R~E. Simson, G.R. Simpson // Med.J. Aust. -1971. -V. l.-P. 331-334.

377. Shibanuma, M. Importance of mitochondrial dysfunction in oxidative stress response: A comparative study of gene expression profiles Text. / M. Shibanuma, A. Inoue, K. Ushida, et al. // Free Radic Res. 2011. - V. 45. -№ 6. - P. 672-680.

378. Shwaery, G.T. Antioxidant protection of LDL by physiological concentrations of 17ß-atradiol: requirement for estradiol modification Text. / G.T. Shwaery, J.A. Vita, J.F. Keaney // Circulation. 1997. - V. 95. - P. 1378-1385.

379. Skwaery, G.T. Antioxidant protection of LDL by physiologic concentration of estrogens is specific for 17-beta-estradiol Text. / G.T. Skwaery, J.A. Vita, J.F. Keaney // Atherosclerosis. 1998. - V. 138. - P. 255-262.

380. Siesjo, B.K. Glutamate, calcium, and free radicals as mediators of ischemic brain damage Text. /B.K. Siesjo, Q. Zhao, K. Pahlmark et al. // Ann. Thorac. Surg. 1995. - V. 59.-P. 1316-1320.

381. Sinha, B.K. Free radicals and anticancer drug resistance oxygen free radicals in the mechanisms of drug cytotoxicity and resistance by certain tumours Text. / B.K. Sinha, E. G. Mimnough // Free radic. Biol. Med. -1990.-V. 8.-P. 567-581.

382. Sjöodin, B. Biochemical mechanismsfor oxygen free radical formation during exercise Text. / B. Sjöodin, Y. H. Westing, F. S. Apple // Sports Med. 1990. - V. 10. - P. 236-254.

383. Smith, R.P. Hydrogen sulfide poisoning Text. / R.P. Smith, R.E. Gosselin // J. Occup. Med.- 1979.- V. 21. №. 2. - P. 93- 97.

384. Sobocanec, S. Differential response to lipid peroxidation in male and female mice with age: correlation of antioxidant enzymes matters Text. / S. Sobocanec, T. Balog, B. Kusic et al. // Biogerontology. 2008. - V. 9. - № 5.-P. 335-343.

385. Sohal, R.S. Superoxide anion radical production in different animal species Text. / R.S. Sohal, I. Svensson, B. H. Sohal, U.T. Brunk // Med. Ageing and Develop. 1989. - V. 49. - P. 129-135.

386. Song, Y. Inhibition of superoxide generation from neuronal nitric oxide synthase by heat shock protein 90: implications in NOS regulation Text. / Y. Song, A.J. Cardounel, J.L. Zweier et al. // Biochemistry. 2002. -V. 41.-P. 10616-10622.

387. Speckmann, B. Induction of glutathione peroxidase 4 expression during enterocytic cell differentiation Text. / B. Speckmann, H.J. Bidmon, A. Pinto // J Biol Chem. 2011. V. 286. - № 12. - P. 10764-10772.

388. Speakman, J.R. The free-radical damage theory: Accumulating evidence against a simple link of oxidative stress to ageing and lifespan Text. / J.R. Speakman, C. Selman // Bioessays. 2011. - V. 33. - № 4. - P. 255-259.

389. Spiteller, G. The relation of lipid peroxidation processes with atherogenesis: a new theory on atherogenesis Text. / G. Spiteller //Mol Nutr Food Res.-2005.-V. 49.-№ 11.-P. 999-1013.

390. Stadtman, E.R. Reactive oxygen-mediated protein oxidation in aging and disease Text. / E.R. Stadtman, B.S. Berlett // Chem. Res. Toxicol. -1997.-V. 10.-P. 485-494.

391. Stone, R.W. Quinolinic acid: a potent endogenous excitant at amino acid receptors in the CNS Text. /R.W. Stone, M.N. Perkins // Europ. J. Pharmacol. 1998. - V.72. - P. 411-412.

392. Strälin, P. Multiple cytokines regulate the expression of extracellular superoxide dismutase in human vascular smooth muscle cells Text. / P. Strahn, S.L. Marclund // Atherosclerosis. 2000. -V.151.-№ 2.-P.433-441.

393. Suzuki, Y.J. Inhibition of Ca2+- ATPase^of vascular smooth muscle sarcoplasmic reticulum bu reactive oxygen intermediates Text. / Y.J. Suzuki, G.D. Ford // Amer. J. Physiol. 1991. - V.261. - P H568-H574.

394. Suzuki, T. Effects of base excision repair proteins on mutagenesis by 8-oxo-7,8-dihydroguanine (8-hydroxyguanine) paired with cytosine and adenine Text. / T. Suzuki, H. Harashima, H. Kamiya // DNA Repair (Amst). 2010. - V. 9. - № 5. - P. 542-550.

395. Szabo, C. Hydrogen sulphide and its therapeutic potential Text. / C. Szabö // Nature Reviews. 2007. - № 6. - 917-935.

396. Tailor, S.L. Sensitive fluorometric method for tissue tocopherol analysis Text. / S.L. Tailor, M.P. Lambden, A.L. Tappel // Lipids. 1976. -V. 11.-№7.-P. 530-538.

397. Tatarkova, Z. Effects of aging on activities of mitochondrial electron transport chain complexes and oxidative damage in rat heart Text. / Z. Tatarkova, S. Kuka, P. Racay et al. // Physiol Res. 2011. - V. 60. - № 2. -P. 281-289.

398. Telci, A. Oxidative protein damage in early stage Type 1 diabetic patients Text. / A. Telci, U. Cakatay, S. Salman et al. // Diabetes Res Clin Pract. 2000. - V. 50. - № 3. - P. 213-223.

399. Tetik, S. Determination of oxidant stress in plasma of rheumatoid arthritis and primary osteoarthritis patients Text. / S.Tetik, S. Ahmad, A.A. Alturfan et al. // Indian J Biochem Biophys. 2010. - V. 47. - № 6. - P. 353-358.

400. Tian, L. Alterations of antioxidant enzymes and oxidative damage to macromolecules in different organs of rats during aging Text. / L. Tian, Q. Cai, H. Wei // Free Radic Biol Med. 1998. - V. 24. - № 9. - P. 14771484.

401. Tomino, Y.T. AGE-RAGE interaction and oxidative stress in obesity-related renal dysfunction Text. / Y.T. Tomino, S. Hagiwara, T. Gohda // Kidney Int.-201 l.-V. 80.-№2.-P. 133-135.

402. Trivedi, P.P. Cardioprotective Effects of Hesperetin against Doxorubicin-Induced Oxidative Stress and DNA Damage in Rat Text. / P.P. Trivedi, S. Kushwaha, D.N. Tripathi et al. // Cardiovasc Toxicol. 2011. -V. 11.-№3.-P. 215-225.

403. Tsuchihashi, H. Action of P-carotene as an antioxidant against lipid peroxidation Text. /H. Tsuchihashi, M. Kigoshi, M. Iwatsuki et al. // Archives of Biochem. and Biophys. 1995. - V. 323. - № l.-P. 137-147.

404. Uchida, K. 4-Hydroxy-2-nonenal: a product and mediator of oxidative stress Text. / K. Uchida // Prog. Lipid Res. 2003. - V. 42. - P. 318-343.

405. Upritchard, J.E. Oxidation of heprin-treated low density lipoprotein by peroxidases Text. / J.E. Upritchard, W.H. Sutherland // Atherosclerosis. -1999.-V 146.-P. 211-219.

406. Uyesaka, N. Effects of superoxide anions on red cell deformability and membrane proteins Text. / N. Uyesaka, S. Hasegawa, N. Ishioka et al. // Biorheology. 1992. - V. 29 - P. 217-229.

407. Vaarmann, A. Dopamine induces Ca2+ signaling in astrocytes through -----reactive-oxygen species generated -by—monoamine-oxidase Text. / A.-

408. Vaarmann, S. Gandhi, A.Y. Abramov // J Biol Chem. 2010. - V. 285. - № 32.-P. 25018-25023.

409. Valencia, A. Role of oxidative stress in the apoptotic cell death of cultured cerebellar granule neurons Text. / A. Valencia, J. Morän // J Neurosci Res. 2001. - V. 64. - № 3. - P. 284-297.

410. Valles, S.L. Estradiol or genistein prevent Alzheimer's disease-associated inflammation correlating with an increase PPAR gamma expression in cultured astrocytes Text. / S.L. Valles, P. Dolz-Gaiton, J. Gambini//Brain Res.-2010.-V. 1312.-P. 138-144.

411. Vanasbeck, B. S. Involvement of oxygen radicals and blood cells in the pathogenesis of ARDS by endotoxin and hyperoxia Text. / B. S. Vanasbeck // Appl. Cardiopulm. and Pathopysiol.-1991.-V. 4.- P. 127-138.

412. Varga, S. L. The influence of antioxidants on the oxidative stress of red blood cells Text. / S.L Varga, Z. Novak, L. Pataki et al. // Clin. Chim. Acta. 1992. - V. 205. - P. 241-244.

413. Verbeke, P. Modulating cellular aging in vitro: hormetic effects of repeated mild heat stress on protein oxidation and glycation Text. / P. Verbeke, B. Clark, S. Rattan // Exp. Gerontol. -2000. -V. 35. № 6-7. -P. 787-794.

414. Vercellotti, G. M. A balanced budget evaluating the iron economy. Text. / G.M. Vercellotti // Clin. Chem. - 1996. - V.42.-P. 657.

415. Viña, J. Mitochondrial biogenesis in exercise and in ageing Text. / J. Viña, M.C. Gomez-Cabrera, C. Borras et al. // Adv Drug Deliv Rev. 2009. =-V. 61.-№ 14.-P. 1369-1374,—

416. Viña, J. Women live longer than men: understanding molecular mechanisms offers opportunities to intervene by using estrogenic compounds Text. / Viña J, Borras C. // Antioxid Redox Signal. 2010. - V. 13. -№ 3. - P. 269-278.

417. Ward, P.A. Oxidative stress: acute and progressive lung injury Text. / P.A. Ward // Ann N Y Acad Sei. 2010. - V. 1203. - P. 53-59.

418. Weitzel, F. Selenoenzymes regulate the activity of leukocyte 5-lipoxygenase via the peroxide tone Text. / F. Weitzel, A. Wendel // J Biol Chem. 1993. - V. 68. - № 9. - P. 6288-6292.

419. Winterbourn, C.C. Reconciling the chemistry and biology of reactive oxygen species Text. / C.C. Winterbourn // Nat Chem Biol. 2008. - V. 4. - № 5 - P. 278-286.

420. Winyard, P.G. Action of free radical generating systems upon the biological and immunological properties of ceruloplasmin Text. /P.G. Winyard, J. Lunec, S.B. Brailsford et al. // Int. J. Biochem. 1984. - V. 16. -P. 1273-1278.

421. Yagi, K. Inhibitory effect of female hormones on lipid peroxidation Text. /K. Yagi, S. Komura // Biochem. Int.-1986-V.13.-P. 1051-1055.

422. Yagi, K. Female hormonesact as natural antioxidants a survey of our research Text. / K.Yagi // Acta Biochim. Polonica. - 1997. - V. 44. - P. 701-709.

423. Yargicoglu, P. The effects of codmium and experimental diabetes on VEP spectral data and lipid peroxidation Text. / P. Yargicoglu, A. Agar, M. Edremitloiglu et al. // Int. J. Neurosci. 1998. - V. 93. - № 1-2. - P. 63-74.

424. Yildirim, Z. The role of oxidative stress and antioxidants in the pathogenesis of age-related macular degeneration Text. / Z.Yildirim, N.I. Ucgun, F. Yildirim // Clinics (Sao Paulo). 2011. - V. 66.-№5.-P.743-746.

425. Yoo, J.H. Oxidative status in iron-deficiency anemia Text. / J.H. Yoo, H.Y. Maeng, Y.K. Sun et al. // J Clin Lab Anal. 2009. - V. 23. - № 5.-P. 319-323.

426. Yorulmaz, H. Effect of Vitamin E on blood-brain barrier permeability in aged rats with PTZ-induced convulsions Text. / H. Yorulmaz, F. Burcu Seker, B. Oztas // Neurophysiology. 2011. - V. 42. - №. 5. - P. 418^123.

427. Yoshuda, Y. Interaction of a-tocopherol with copper and its effect on lipid peroxidation Text. / Y. Yoshuda, J. Tsuchiya, E. Niki // Biochim. Biophys. Acta. 1994. - V. 200. - P. 85-92.

428. Yusnita, Y. Mutations in mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 1 (mtNDl) gene in colorectal carcinoma Text. / Y. Yusnita, M.D. Norsiah, A.J.Rahman // Malays J Pathol. 2010. - V. 32. - №2.-P. 103-110.

429. Zahrt, T. C. Reactive nitrogen and oxygen intermediates and bacterial defenses: Unusual adaptations in Mycobacterium tuberculosis Text. / T.C. Zahrt, V. Deretic // Antioxid. Redox Signal. 2002. - V. 4. - P. 141-159.

430. Zäinäl,~T.A. Caloric restriction of rhesus monkeys-lowers -oxidative-damage in skeletal muscle Text. / T.A. Zainal, T.D. Oberley, D.B. Allison et al. // FASEB J.-2000.-V. 14.-P. 1825-1836.