Структурные изменения в головном мозге у мышей при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном

Гусева, Екатерина Васильевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Структурные изменения в головном мозге у мышей при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Структурные изменения в головном мозге у мышей при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном"

на правах рукописи

ГУСЕВА Екатерина Васильевна

СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ У МЫШЕЙ ПРИ КАНДИДОЗНОМ МЕНИНГОЭНЦЕФАЛИТЕ И ИХ ЛЕЧЕНИИ КОМПОЗИЦИЕЙ АМФОТЕРИЦИНА В С ОКИСЛЕННЫМ ДЕКСТРАНОМ

03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология 14.03.02 - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

НОВОСИБИРСК-2011

4841805

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения РАМН и ГОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава (Новосибирск)

Научные руководители:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Шкурупий Вячеслав Алексеевич

доктор медицинских наук, профессор Надеев Александр Петрович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Обухова Лидия Александровна

доктор медицинских наук Волков Александр Михайлович

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт региональной патологии и патоморфологии Сибирского отделения РАМН

Защита состоится «26» апреля 2011 г. в 10 часов на заседании Диссертационного Совета Д 001.048.01 при Научном центре клинической и экспериментальной медицины СО РАМН по адресу: ул. Тимакова, 2, г. Новосибирск, 630117 Тел/факс 8 (383) 333-64-56

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НЦКЭМ СО РАМН.

Автореферат разослан «_> марта 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Пальчикова Н.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Значительный рост заболеваемости поверхностными и глубокими формами кандидоза, отмечающийся в последние годы (Wisplinghoff H., 2004; Castón-Osorio J.J. et al., 2008), связан с тем, что эта инфекция, являясь оппортунистической, поражает, прежде всего, ослабленный организм (Джавадов С.С., 2007; Ruhnke M., 2006; Algar V., Novelli V., 2007; Badiee P., Kordbacheh P. et al., 2009), что свидетельствует о снижении резистентности к данной инфекции в популяции человека. За последние годы наблюдают тенденцию к росту числа случаев инвазивного кандидоза (Venkatesan P. et al., 2005; Pfaller М.А., 2007; Metcalf S.C., Dockrell D.H., 2007). Это связано с рядом факторов: усиление иммуносупрессии у больных злокачественными опухолями вследствие интенсификации программ химиотерапии (DiNubile M.J. et al., 2005), увеличение числа больных с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД) (Kontoyiannis D. et al., 2003), расширение трансплантации органов и гемопоэтических стволовых клеток (Pfaller М.А., Diekema D.J., 2007; Muñoz P., 2008), проведение активной, на высокотехнологичном уровне, терапии выхаживания (Кулько А.Б., Митрохин С.Д., 2005), прежде всего больным в отделениях интенсивной терапии (Vincent J.L. et al. 1998; Pauw В., 1998; Edmond M. et al., 1999; Trick W.E. et al., 2002), недоношенным новорожденным (Castro B.A., 2008). Наибольшей проблемой являются кандидозы центральной нервной системы (ЦНС), составляющие 14,9% всех случаев инфекционного поражения ЦНС у новорожденных, в том числе недоношенных детей, летальность от которых достигает 50-56% (Сорокина М.Н. и др., 2000; Романюк Ф.П. и др., 2003; Castro В.А., 2008).

Внутриклеточное персистирование грибов в вакуолярном аппарате макрофагов сопряжено с формированием гранулем, состоящих преимущественно из клеток системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ) (Струков А. И., Кауфман О. Я., 1989; Шкурупий В. А., 2007; Boros D. L., 2003). Поступление гранулемогенных факторов, равно как и клеток СМФ, в головной мозг ограничено в связи с наличием в нем гемато-энцефалического барьера (ГЭБ) (Hawkins В. T., Davis Т. Р., 2005). Вместе с тем, защитная способность ГЭБ в отношении грибов, очевидно, не абсолютна, поскольку менингоэнцефалиты, особенно при иммунодефицитных состояниях, обусловленные проникновением в головной мозг С. albicans (Castro В.А., 2008), наблюдают в клинической практике. В головном мозге имеются клетки микроглии, которые относят к представителям СМФ (Струков А. И., Кауфман О. Я., 1989), однако, нет ясных представлений о том, в какой мере они способны участвовать в гранулемообразовании при условии проникновения в головной мозг гранулемогенных факторов.

Терапия микотических поражений ЦНС, в частности, кандидозного менингоэнцефалита, затруднена в связи с ограничением транспорта лекарственных препаратов через ГЭБ. Решение проблемы его преодоления может состоять в применении высокомолекулярных лизосомотропных носителей лекарственных

средств, в частности, декстранов, которые обладают тропностью к рецепторным системам фагоцитов и клеток эндотелия ГЭБ, к вакуолярному аппарату макрофагов и могут быть использованы для доставки и концентрации в них лекарственных средств (В.А. Шкурупий и др., 1991, 1993, 1994, 1997), что обусловило бы эффективность лечения при микозах головного мозга. Ранее было выполнено большое количество работ по изучению влияний комплекса изониазида с окисленным декстраном молекулярной массой 35 и 60 кД на развитие генерализованного хронического туберкулезного гранулематоза в эксперименте (Шкурупий В.А. и др., 1991; Чернова Т.Г., 1993; Филимонов П.Н., 1996; Козяев М.А., 1999; Потапова О.В., 2003; Шкурупий В.А., 2007).

Учитывая большое сходство туберкулезных и микотических гранулем, обусловленное феноменом внутривакуолярной персистенции возбудителей, была создана новая антимикотическая лизосомотропная композиция из амфотерицина В и окисленного декстрана. Получены свидетельства большей терапевтической эффективности этой композиции, по сравнению со свободной формой амфотерицина В, при лечении хронического системного кандидоза, в частности, в лимфатических узлах (Шкурупий В. А. и др., 2005), печени (Травин М. А., 2006), почках (Приставка А. А. и др., 2008). Однако остается неизученной эффективность данной композиции в отношении кандидозного менингоэнцефалита, что является актуальной проблемой при поиске и выборе лекарственных препаратов для лечения микозов с поражением ЦНС.

Цель исследования. Исследовать структурные особенности повреждения сосудов гемато-энцефалического барьера, вещества головного мозга и проявлений гранулематоза у мышей-самцов линии СВА при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном.

Задачи исследования:

1. Методом морфометрии изучить структурную организацию сосудов гемато-энцефалического барьера и вещества головного мозга у мышей-самцов линии СВА в норме;

2. Исследовать морфологические изменения головного мозга мышей-самцов линии СВА после субдурального инфицирования С. albicans, на фоне введения циклофосфана.

3. Изучить структурные проявления С. albicans-энцефалита после субдурального инфицирования мышей-самцов линии СВА на фоне введения циклофосфана, и их лечения амфотерицином В, композицией амфотерицина В с окисленным декстраном,

4. Исследовать характер структурных преобразований в головном мозге и висцеральных органах мышей-самцов линии СВА, микотических гранулемах, после гематогенного инфицирования мышей С. albicans.

5. Методами морфологии изучить эффективность лечения генерализованного кандидоза у мышей-самцов линии СВА амфотерицином В и композицией амфотерицина В с окисленным декстраном.

Научная новизна результатов исследования. Впервые методами морфометрии изучены количественные характеристики клеток вещества головного мозга разных типов и сосудов гемато-энцефалического барьера у интактных мышей-самцов линии СВА.

Впервые в эксперименте с субдуральным инфицированием мышей-самцов линии СВА на фоне введения циклофосфана показано, что клетки микроглии мозга не участвуют в образовании микотических гранулем. Но при этом отсутствие гранулем не сопряжено с редукцией патоморфологических проявлений кандидозного менингоэнцефалита. При вышеуказанном способе инфицирования С. albicans не преодолевают гемато-энцефалический барьер, что не исключает поражения печени метаболитами грибов.

Впервые в рамках одного эксперимента, проведено сопоставление гранулемобразования и клеточного состава гранулем в головном мозге, печени, почках и легких у мышей-самцов линии СВА после их внутривенного инфицирования С. albicans. По клеточному составу гранулем в головном мозге и этих органах обнаружены отличия, обусловленные различными стадиями гранулемообразования, в конкретные периоды после инфицирования, в связи с местом введения инфекта. Показано, что гемато-энцефалический барьер существенно ограничивает проникновение С. albicans и макрофагов/моноцитов в головной мозг, что определяет меньшую концентрацию гранулем в мозге, чем в легких и почках.

Впервые методами морфологии и по показателям летальности показано, что окисленный декстран при лечении кандидозного энцефалита при внутривенном инфицировании С. albicans мышей-самцов линии СВА обладает самостоятельным лечебным эффектом.

Впервые, согласно данным морфологического исследования головного мозга у мышей-самцов линии СВА, инфицированных гематогенным путем С. albicans, и показателей летальности, показано, что композиция амфотерицина В с окисленным декстраном более эффективна, как средство лечения системного кандидоза в эксперименте, чем амфотерицин В.

Научно-практическое значение работы. Полученные данные о большей терапевтической эффективности композиции амфотерицина В с окисленным декстраном, по сравнению со свободной формой амфотерицина В, и самостоятельном лечебном эффекте окисленного декстрана, при лечении кандидозного энцефалита, могут послужить основой для создания противогрибкового препарата в качестве средства лечения системных микозов (кандидозов), в том числе кандидозных менингоэнцефалитов.

Результаты морфометрического исследования структурной организации гемато-энцефалического барьера и вещества головного мозга уточняют известные сведения о строении этих структур в головном мозге, в том числе у мышей-самцов линии СВА, и могут быть использованы при преподавании гистологии в разделах «Нервная система», «Гемато-энцефалический барьер» и внесены в периодические специализированные издания, публикующие сведения о лабораторных линейных (инбредных) животных. Результаты исследования структурных изменений в головном мозге при гематогенном инфицировании С. albicans и в условиях иммунодефицита могут быть использованы для преподавания курса общей патологической анатомии в разделах «Воспаление» и «Общие вопросы инфекционных заболеваний», «Перинатальные инфекции», клинической фармакологии в разделе «Антибиотики и противогрибковые средства».

Положения, выносимые на защиту:

1. При гематогенном инфицировании мышей-самцов линии СВА С. albicans в головном мозге концентрация кандидозных гранулем существенно меньше, чем во внутренних органах (почки и легкие), что определяется ограниченным проникновением грибов и клеток системы мононуклеарных фагоцитов через гемато-энцефалический барьер. Кандидозные гранулемы в головном мозге, печени, легких и почках сходны по клеточному составу, но имеют некоторые отличия по их количественному представительству. Клетки микроглии не участвуют в формировании микотических гранулем. Отсутствие гранулем в головном мозге при субдуральном инфицировании, однако, не сопряжено с редукцией патологических проявлений кандидозного менингоэнцефалита.

2. При лечении кандидозного менингоэнцефалита композицией амфотерицина В с окисленным декстраном достигается более выраженный терапевтический антимикотический эффект, чем при лечении амфотерицином В. Это проявлялось существенно меньшей летальностью животных, и, по данным морфологического исследования, уменьшением масштабов гранулематозного воспаления, повреждения сосудов ГЭБ, отечно-деструктивных изменений вещества головного мозга, что обусловлено самостоятельным терапевтическим эффектом окисленного декстрана в составе композиции, усиливающего антимикотические свойства амфотерицина В.

Апробация диссертации. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: 3-й Всероссийской конференции «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов (Новосибирск, 2007), 2-м Съезде микологов России (Москва, 2008), Всероссийской научной конференции, посвященной 150-летию кафедры патологической анатомии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург, 2009), Научно-практической конференции по медицинской микологии (XII Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2009), III съезде Российского общества патологоанатомов (Самара 2009), IV Всероссийской научно-практической конференции с международным участием

«Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительиых процессов» (Новосибирск, 2009), Научно-практической конференции по медицинской микологии (XIII Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2010), Республиканской научно-практической конференции ВГМУ (Витебск, 2010).

Публикации. По материалам исследования опубликовано 10 научных работ, 2 из которых - статьи в рецензируемых научных журналах, определенных ВАК РФ для опубликования материалов диссертационных исследований.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 181 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы, приложения. Диссертация иллюстрирована 53 рисунками, из них 13-ю микрофотографиями, 13 таблицами. Указатель литературы включает 105 работ отечественных и 253 работы зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на 390 двухмесячных мышах-самцах линии СВА массой 20-25 г., полученных из питомника НИИ цитологии и генетики СО РАН (г. Новосибирск).

Работа проведена в 2 экспериментах.

Эксперимент 1.

Моделировали состояние лейкопении у мышей путем двухнедельного, внутримышечного введения циклофосфана в дозе 30 мг/кг массы тела в режиме 2 раза в неделю, до инфицирования, и далее - у этих же мышей, после их инфицирования С. albicans до 56-х суток в том же режиме (Хмельницкий О. К, Котович В.М, 1995).

На этом фоне моделировали кандидозный менингоэнцефалит путем однократного введения взвеси суточной культуры низковирулентного штамма C.albicans (АТСС24433) в изотоническом растворе NaCl (lxlO9 микробных тел в 1 мл), объемом 0,05 мл в субдуральное пространство. Низковирулентная культура C.albicans индуцирует гранулемогенный эффект (Шкурупий В.А. и др., 2007). Кроме того, ее использовали с целью избегания высокой летальности животных от самой процедуры внутричерепного введения, которая могла увеличиться деструктивными эффектами метаболитов грибов (Лисовская С. А. и др., 2007).

Для верификации лейкопении, как проявления иммунодефицита, в камере Горяева подсчитывали общее количество лейкоцитов в периферической крови.

На фоне кандидозного процесса применяли препараты амфотерицин В и композицию амфотерицина В с окисленным декстраном.

Амфотерицин В (АмВ) вводили интраперитонеально в дозе 250 ЕД/кг массы тела в 0,2 мл 5% раствора глюкозы в весовом соотношении 5 мкг амфотерицина В к 10 мг глюкозы.

Комплексную композицию амфотерицина В с окисленным декстраном (КАД) получали путем смешивания окисленного декстрана молекулярной массой 30-40 кД с

амфотерицином В, в весовом соотношении 5 мкг амфотерицина В к 5 мг окисленного декстрана. КАД вводили интраперитонеально в дозе 250 ЕД/кг массы тела в 0,2 мл окисленного декстрана.

Препараты вводили на следующие сутки после инфицирования. Курс составил 10 инъекций в режиме «через день», в утренние часы.

Экспериментальные животные были разделены на 7 групп. Первую группу составили интактные мыши. У мышей 2-7-й групп моделировали лейкопению. Мышам 3-й группы на этом фоне вводили окисленный декстран. У животных, 4-й и 5-й, 6-й и 7-й групп моделировали грибковый менингоэнцефалит. Животных 4-ой группы не лечили. Мышам 5-ой группы вводили амфотерицин В. Мышам 6-ой группы вводили композицию амфотерицина В с окисленным декстраном (КАД). Животные 7-й группы получали окисленный декстран.

Для морфологического исследования в каждой группе использовали по 8-10 мышей. Животных выводили из эксперимента путем дислокации позвонков в шейном отделе под эфирным наркозом. Объектами исследований служили головной мозг и печень. Образцы органов для светооптического исследования получали на 10, 28 и 56 сутки.

Для светооптического исследования образцы головного мозга (фронтальный срез через теменную область) и печени (край правой доли) фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в парафин (Меркулов Г.А., 1969; Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1971). На ротационном микротоме «Microm» (Germany) готовили гистологические срезы толщиной 5 мкм. Препараты печени окрашивали гематоксилином и эозином, головного мозга - гематоксилином и эозином, ШИК-реактивом, по Нисслю. С эндотелием сосудов вещества головного мозга проводили иммуногистохимическую реакцию с моноклональными антителами CD34 (маркер эндотелиальных клеток) («Abcam», USA) с дополнительным окрашиванием гематоксилином Майера. Препараты заключали в среду Био-Маунт на предметных стеклах. От каждого животного получали по 5-6 гистологических срезов.

Эксперимент 2.

Генерализованный кандидоз моделировали путем однократного введения взвеси суточной культуры высоковирулентного штамма C.albicans (РКПГУ-1129/13, полученного из НИИ медицинской микологии СПбМАПО, г. Санкт-Петербург) в дозе 12,5x106 микробных тел в 0,5 мл изотонического раствора NaCl, в латеральную хвостовую вену.

На фоне кандидозного процесса применяли препараты амфотерицин В, окисленный декстран и комплексную композицию амфотерицина В с окисленным декстраном в дозах и режиме, аналогичных таковым в первом эксперименте.

Животные были разделены на 5 групп. Мышам 1-й (контрольной) группы, однократно, внутривенно вводили 0,5 мл изотонического раствора NaCl. У мышей 2-

й, 3-й, 4-й и 5-й групп моделировали генерализованный кандидоз путем введения взвеси суточной культуры C.albicans в латеральную хвостовую вену. Мыши 2-й группы были нелеченными. Животным 3-й группы вводили амфотерицин В, мышам

4-й группы вводили композицию амфотерицина В с окисленным декстраном; мышам

5-й группы - окисленный декстран.

Для морфологического исследования в каждой группе использовали по 8-10 мышей. Животных выводили из эксперимента дислокацией позвонков в шейном отделе под эфирным наркозом. Образцы органов для светооптического исследования получали на 3, 7, 10, 28 сутки после инфицирования. Объектами исследований были головной мозг, печень, почки и легкие. Готовили гистологические препараты по методике, описанной в первом эксперименте. Препараты печени, почек, легких окрашивали гематоксилином и эозином, головного мозга - гематоксилином и эозином, ШИК-реактивом, по Нисслю. Окрашенные срезы заключали в среду Био-Маунт на предметных стеклах. От каждого животного получали по 5-6 гистологических срезов. Для выявления сосудов и астроцитов вещества головного мозга проводили иммуногистохимическую реакцию с моноклональными антителами CD34 (маркер эндогелиальных клеток) и, соответственно, GFAP (кислый фибриллярный белок астроцитов) («Abcam», USA) с дополнительным окрашиванием гематоксилином Майера.

В обоих экспериментах проводили морфометрическое исследование головного мозга, а так же гранулем в печени, легких и почках мышей в соответствии с рекомендациями (Автандилов Г.Г., 1990). Светооптическое исследование образцов головного мозга, печени, легких и почек проводили на микроскопе Carl Zeiss Axio Imager AI, с помощью программы AxioVision 6.0 и окулярной сетки из 100 точек.

В первом эксперименте подсчитывали численную плотность (Nai) и объемную плотность (Vv) поперечно и тангенциально срезанных сосудов в веществе головного мозга в тестовой площади 6,76x104 мкм2, объемные плотности (Vv) зон перицеллюлярного и периваскулярного отека, нейронов, астроцитов и клеток микроглии.

Во втором эксперименте в головном мозге, помимо выше описанных параметров, подсчитывали численную плотность (Nai) гранулем в тестовой площади 6,76x104 мкм2 и их клеточный состав. Печень, почки и легкие исследовали для подсчета численной плотности гранулем и их клеточного состава.

Статистическую обработку результатов проводили в соответствии с принципами вариационной статистики, изложенными в работах Г.Г. Автандилова (1990), С. Гланца (1999). Вероятность достоверности различий средних величин в сравниваемых группах по различным признакам определяли на основании критериев Стьюдента (при условии нормальности распределения величин исследуемых параметров в выборке) и Колмогорова-Смирнова. Различия считали достоверными при р<0,05. Данные в таблицах и на рисунках приведены как М±т, где М - среднее

арифметическое, m - ошибка среднего.

Статистическую обработку данных морфометрического исследования проводили на компьютере с использованием программы Microsoft Office Excel, SPSS Statistics.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Результаты морфометрического исследования клеточного строения головного мозга мышей-самцов линии СВА в норме

В работе были изучены структурные особенности и клеточный состав вещества головного мозга, а так же сосуды микроциркуляторного русла интактных инбредных животных - мышей-самцов линии СВА: величины объемных плотностей астроцитов, нейронов и клеток микроглии, численная и объемная плотности поперечных и тангенциальных срезов микрососудов головного мозга.

Таблица 1.

Результаты морфометрического исследования клеточного строения головного мозга

мышей-самцов линии СВА в норме (М±т)

А Е £ Р- Исследован- Исследованные параметры

ные группы Численная Объемная Объемная Объемная Объемная

мышеи, плотность плотность плотность плотность плотность

S условия сосудов сосудов астроцитов нейронов микроглии

эксперимента (Nai) (Vv),% (Vv),% (Vv),% (Vv),%

1 Интактные 16,56±0,66 3,52+0,23 10,88+0,53 1,86±0,29 0,92+0,10

Лейкопения, выявленная при подсчете общего количества лейкоцитов в периферической крови мышей-самцов линии СВА, подтверждала наличие иммунодефицита у животных после введения циклофосфана, вне зависимости от условий эксперимента. В указанных условиях окисленный декстран не обладал способностью стимулировать костномозговое кроветворение.

2. Структурные изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА при субдуральном инфицировании С. albicans

При морфологическом исследовании оболочек головного мозга у инфицированных животных, начиная с 10 суток после инфицирования, были выявлены отек мягкой мозговой оболочки, полнокровие сосудов, единичные лимфоциты. При исследовании срезов ГМ у субдурально инфицированных мышей не было обнаружено ни инфильтратов, ни гранулем, характерных для С. albicans -гранулематоза. В печени клеточных инфильтратов и гранулем также не было, но наблюдали вакуольную дистрофию, некроз гепатоцитов.

Кандидозное поражение вещества головного мозга проявлялось застойным полнокровием, тромбозом, десквамацией эндотелия и фибриноидными изменениями стенок сосудов ГЭБ, их деструкцией. Распространенные гемоциркуляторные нарушения, развившиеся в результате воздействия протеаз и фосфолипаз возбудителя

на эндотелий церебральных микрососудов, приводили к развитию периваскулярного и перинеллюлярного отека и деструкции вещества ГМ.

Деструкция сосудов приводила к уменьшению их количества. В группе нелеченных животных численная плотность сосудов (концентрация сосудов в единице площади среза вещества головного мозга) на 10-е и 28-е сутки наблюдения не отличалась от величины таковой в 1-й (интактной) и 2-й (циклофосфан) группах, однако, к 56 суткам отмечено уменьшение величины данного показателя в 3,6 раз по сравнению с таковой на 10 сутки (рис.1), что, помимо деструкции, отчасти, связано с разрежением вещества головного мозга вследствие нарастающего перицеллюлярного и периваскулярного отека, деструкцией сосудов в зонах некротических изменений вещества ГМ и сдавлением части сосудов отечной жидкостью. В то же время объемная плотность сосудов к 56 суткам наблюдения была равна величине аналогичного параметра у интактных животных (рис.2), очевидно, в связи с застойным полнокровием сосудов.

N3! 20

10 сутки 28 сутки 56 сутки

D 1. Интактные Ш 2. Циклофосфан Е14. Циклофосфан+кандидоз, нелеченные мыши I. 2,4 — группы мышей

Рис. 1. Численная плотность (Nai) сосудов головного мозга мышей-самцов пинии СВА при субдуральном способе инфицирования С. albicans

□ 1. Интактные П 2. Циклофосфан ЕЗ 4. Циклофосфан+кандидоз,нелеченные мыши ], 2, 4 - группы мышей

Рис. 2. Объемная плотность (Vv) сосудов головного мозга мышей-самцов линии СВА при субдуральном способе инфицирования С. albicans

Данные особенности динамики изменений численности и объемной плотности сосудов свидетельствовали о нарастании процессов деструкции и фибриноидных изменений стенок сосудов и их застойном полнокровии на 56-е сутки после инфицирования и, как следствие, о состоянии гипоксии, приведшей к деструкции клеток вещества головного мозга, нарастанию выраженности перицеллюлярного и

периваскулярного отека. Объемная плотность зон отека нарастала, и к 56 суткам была большей в 2 раза, чем после введения циклофосфана (рис.3).

10 сутки 28 сутки 56 сутки

Ш 2. Циклофосфан □ 4. Циклофосфан+кандидоз, нелеченные мыши

2,4- группы мышей

Рис.3. Суммарная объемная плотность (Vv) зон перицеллюлярного и периваскулярного отека в головном мозге мышей-самцов линии СВА при субдуральном инфицировании С. albicans на фоне введения циклофосфана

При морфологическом исследовании ГМ нейроны были подвержены процессам вакуольной дистрофии и некрозу, что было обусловлено цитопатическим действием грибковых фосфолипаз и протеаз, а так же гипоксией и ишемией. Объемная плотность нейронов на 28-е сутки после инфицирования была меньшей, чем в контрольных группах, что свидетельствовало о «пике» их деструкции в этот период. На 56 сутки величина данного показателя была равна таковому в контрольных группах, что обусловлено процессами вакуольной дистрофии в «выживших» нейронах, выраженной в большей степени, чем на 10-е сутки эксперимента (рис.4).

% 2,5 и

10 сутки 28 сутки 56 сутки

□ 1. Интактные Q 2. Циклофосфан СП 4. Циклофосфан+кандидоз, нелеченные мыши

1, 2, 4 - группы мышей

Рис. 4. Объемная плотность (Vv) нейронов в веществе головного мозга мышей-самцов линии СВА при субдуральном способе инфицирования С. albicans

Одной из целей данного исследования было изучить структурные изменения клеток микроглии и их причастность к гранулемообразованию. Для этого, кроме гистологического изучения, исследовали объемную плотность этих клеток. Введение циклофосфана существенно не влияло на величину объемной плотности клеток микроглии. Но после инфицирования животных С. albicans она, в период с 10 по 28 сутки от начала инфицирования увеличивалась, по-видимому, в связи с эндоцитозом клетками микроглии продуктов деструкции клеток вещества ГМ. Поскольку гранулем не было выявлено ни в один из периодов патологического процесса, а костный мозг «блокирован» циклофосфаном, что резко ограничивает участие костномозговых

предшественников в формировании гранулем, и объемная плотность микроглии не уменьшалась, можно полагать, что клетки микроглии в образовании гранулем не участвовали.

Таким образом, при субдуралыюм инфицировании С. albicans, клетки вещества головного мозга были подвержены процессам вакуольной дистрофии и некрозу, что косвенно было обусловлено гипоксией и ишемией как следствие поражения сосудов ГЭБ и прямым цитопатическим действием грибковых метаболитов. Это отражалось в увеличении их объема. Кроме того, учитывая отсутствие гранулем в веществе головного мозга во все периоды исследования, на фоне лейкопении, обусловленной введением циклофосфана, можно полагать, что клетки микроглии не участвовали в. формировании гранулем.

3. Морфологическая характеристика С. albicans-индуцированного гранулематозного воспаления в головном мозге мышей СВА при гематогенном инфицировании

При внутривенном заражении мышей С. albicans (штамм РКПГУ-1129/13) развивалась кандидозная инфекция, проявлявшаяся неврологической симптоматикой у большинства животных и их 100% гибелью на 18-20 сутки после инфицирования.

В 1-е сутки после инфицирования в веществе ГМ наблюдали крупные, преимущественно нейтрофильные инфильтраты, с неупорядоченным, сравнительно рыхлым расположением клеток, в их центре обнаруживали вегетирующие формы гриба и апоптотические тельца. Начиная с 3-их суток выявлено формирование макрофагальных гранулем, расположенных диффузно, преимущественно периваскулярно, отдельно и с тенденцией к их слиянию. На 7-е и 10-е сутки после инфицирования в гранулемах, наряду с макрофагами, увеличивалась доля эпителиоидных клеток. Периферию гранулем составляли макрофаги и лимфоциты, нейтрофилы встречались сравнительно редко.

Несмотря на высокую вирулентность используемого штамма, количество гранулем в ГМ резко уменьшалось на 10 сутки (рис. 5). Это свидетельствует об успешной элиминации С. albicans макрофагами гранулем вне условий лейкопении. На 28 сутки этот параметр и клеточный состав гранулем не исследовали, поскольку 100% нелеченных животных погибло в период между 18 и 20 суткам.

После внутривенного инфицирования мышей С. albicans, гранулемы так же обнаруживали в легких, печени, почках и головном мозге, что свидетельствовало о генерализации кандидозного воспаления. Количество гранулем в почках и легких с 3 по 10 сутки после гематогенного инфицирования было существенно большим (рис, 6), а в печени несколько меньшим, чем в головном мозге. Эти данные свидетельствуют о достаточно высокой барьерной функции ГЭБ как в отношении С. albicans, так и моноцитов, макрофагов.

Nai 1.2 -i

0,8 -0,6 0,4 -0,2 0

Nai 5 4 3

2 1 O

р щ

— i i tr §

i. - ; ^__

3 сутки

10 сутки

1 сутки 3 сутки 7 су-пси 10 сутки 28 сутки

Q легкие Н почки Ш печень В головной мозг

«*» - нелеченные животные погибли в период с 18 по 20 сутки после инфицирования

Рис. 5. Численная плотность (Nai) Рис. 6. Численная плотность (Nai) гранулем

гранулем в головном мозге мышей-самцов в легких, почках, печени и головном мозге

линии СВА после их внутривенного мышей-самцов линии СВА после их

инфицирования С. albicans внутривенного инфицирования С. albicans

Так как поступление агентов инфекционной природы в кровоток сопровождается их захватом клетками системы мононуклеарных фагоцитов (Шкурупий В.А. и др., 1999), большее, чем в головном мозге, количество гранулем в легких и почках могло быть связано с высокой концентрацией в этих органах резидентных макрофагов, захвативших из крови большую часть введенных грибов. Меньшее количество гранулем в печени определялось способом инфицирования (в хвостовую вену). В этом случае изначально С. albicans попадали в почки, легкие и головной мозг, а затем в печень. В более же поздние сроки количество гранулем в печени было наибольшим (Травин М. А. и др., 2005) в связи с наибольшей концентрацией в ней резидентных макрофагов - центров гранулемообразования.

По клеточному составу гранулем в исследованных органах это были типичные микотические гранулемы с соответствующим их строением и составом клеток в определенные периоды их формирования и «диссоциации». Существенные отличия по этим параметрам обнаружили лишь в легких, где количество нейтрофилов на 10-е сутки было примерно в 10 раз большим, чем в ГМ, а количество эпителиоидных клеток наименьшим. Возможно, что это связано с различными временем начала, скоростью и «местными» условиями гранулемообразования в связи с органными особенностями их кровоснабжения.

После внутривенного инфицирования, так же как и в первом эксперименте, наблюдали деструктивные изменения вещества ГМ, нарастающие на фоне дисциркуляторных нарушений периваскулярный и перицеллюлярный отек, фибриноидные изменения стенок сосудов и их застойное полнокровие, тромбоз, что выражалось в увеличении объемной плотности сосудов, при величине численной плотности, равной таковой в контрольной группе.

При морфометрическом исследовании клеток головного мозга, объемная плотность клеток микроглии увеличивалась на 10-е сутки, видимо, также как и в первом эксперименте в связи с эндоцитозом ими продуктов деструкции вещества головного мозга, что приводило к увеличению их объемов. Эти данные также можно рассматривать как свидетельство того, что клетки микроглии не участвовали в формировании гранулем, т.к., в данном случае, объемная плотность клеток микроглии должна была уменьшиться. Вместе с тем, эти данные дают основание предполагать, что клетки микроглии можно рассматривать как потенциальные мишени для депонирования в ГМ крупномолекулярных веществ или корпускулярных объектов.

С 3 по 10-е сутки были выявлены дистрофические изменения астроцитов, которые развивались вследствие ишемии и повреждения их мембран фосфолипазами и протеазами С. albicans. Это проявлялось отеком их тел, что выражалось в увеличении их объемной плотности, и, в частности, в увеличении объемной плотности отростков астроцитов что могло способствовать ограничению проницаемости гемато-энцефалического барьера. Деструктивные изменения в веществе головного мозга мышей, инфицированных С. albicans, проявлялись так же вакуольной дистрофией и некрозом нейронов.

4. Структурные изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА после их субдурального инфицирования С. albicans и при лечении препаратами амфотерицина В и окисленным декстраном

При лечении АмВ мышей-самцов линии СВА, после их субдурального инфицирования С. albicans, численная плотность сосудов к 56 суткам была в 3 раза большей, чем у нелеченных мышей, что могло свидетельствовать о терапевтическом эффекте АмВ, проявившемся к 56 суткам после инфицирования уменьшением цитотоксического отека вследствие снижения концентрации метаболитов грибов за счет их элиминации и «открытием» просветов сдавленных в результате разрежения вещества головного мозга мелких церебральных капилляров. Однако у мышей, леченных АмВ, не происходило полного восстановления величины этого параметра до его значения в контрольной группе. У мышей, леченных КАД, величина этого параметра на 56-е сутки увеличивалась и была большей в 3,3 раза, чем у нелеченных животных (рис. 7). Такое увеличение численности микрососудов на позднем сроке исследования могло так же быть обусловлено активацией неоангиогенеза (подтвержденной при ИГХ-исследовании с эндотелиальным маркером CD34). Видимо, это отражает способность окисленного декстрана, входящего в состав КАД, стимулировать пластические и репаративные процессы (Шкурупий В.А. и др., 2008). При этом наблюдали уменьшение объемной плотности сосудов у леченных мышей, наиболее выраженное в группе животных, леченных КАД, лечение которым приводит к ослаблению цитотоксического влияния метаболитов возбудителя на сосуды микроциркуляторного русла (за счет фунгицидного действия АмВ, входящего в состав композиции).

28 сутки

56 сутки

10 сутки

□ 1. Интактные

Ш 2. Циклофосфан

■ 3. Циклофосфан+окисленный декстран

■ 4. Циклофосфан+кандидоз, нелеченные мыши

S 5. Циклофосфан+кандидоз+лечение амфотерицином В

Ш 6. Циклофосфан+кандидоз+лечение композицией амфотерицина В с окисленным декстраном

ШЗ 7. Циклофосфан+кандидоз+лечение окисленным декстраном

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 - группы мышей Рис.7. Численная плотность (Nai) сосудов головного мозга у мышей-самцов линии СВА после субдурального инфицирования С. albicans и их лечения

Наиболее выраженная антимикотическая активность при применении КАД проявилась так же в уменьшении степени перицеллюлярного и периваскулярного отека в веществе головного мозга на 56-е сутки эксперимента (рис. 8). Возможно, антимикотический эффект реализовался в связи с лучшим преодолением композицией гемато-энцефалического барьера.

Ш ТП G

28 сут.

56 сутки

10 сутки

□ 2. Циклофосфан

□ 3. Циклофосфан+окисленный декстран

■ 4. Циклофосфан+кандидоз, нелеченные мыши

□ 5. Циклофосфан+кандидоз+лечение амфотерицином В

Щ 6. Циклофосфан+кандидоз+лечение композицией амфотерицина В с окисленным декстраном

Ш 7. Циклофосфан+кандидоз+лечение окисленным декстраном

2, 3,4, 5, 6, 7 - группы мышей Рис. 8. Суммарная объемная плотность (Vv) зон перицеллюлярного и периваскулярного отека в веществе головного мозга мышей-самцов линии СВА после введения циклофосфана, субдурального инфицирования С. albicans и лечения препаратами амфотерицина В

При этом при лечении только окисленным декстраном объемная плотность зон отека была равна величине аналогичного показателя в группе мышей, леченных АмВ. Эти данные дают основание предполагать у окисленного декстрана наличие самостоятельного лечебного эффекта, усиливающего действие АмВ в составе композиции. Этот эффект можно объяснить свойством ОД повышать окислительно-метаболическую функцию макрофагов, а так же стимулировать завершенность фагоцитоза посредством стимулирования фагосомо-лизосомального слияния (Шкурупий

В.А. и др., 1997). Кроме того, возможно, ОД мог конкурировать с грибами за маннозные рецепторы эндотелиоцитов, не позволяя проникать возбудителю через ГЭБ.

5. Морфологические проявления генерализованного кандидозного гранулематоза в головном мозге мышей-самцов линии СВА, леченных препаратами амфотерицина В и окисленным декстраном

При лечении мышей-самцов линии СВА после их гематогенного инфицирования в группе инфицированных, нелеченяых мышей, погибли 100% животных в период между 18 и 20 сутками после заражения. У животных, леченных ОД к 28 суткам после инфицирования погибло лишь 40% животных.

На 3-й сутки от начала лечения мышей амфотерицином В, количество гранулем было равно таковому у нелеченных животных, тогда как у леченных ОД и КАД оно было значительно меньшим. На 7-е сутки после инфицирования концентрация гранулем у мышей, леченных препаратами амфотерицина В и ОД- уменьшалась в несколько раз и была равной во всех группах. На 10-е сутки количество гранулем было равным у мышей всех групп и чрезвычайно малым, а к 28 суткам у выживших животных гранулем не наблюдали (рис. 9).

3 сутки 7 сутки 10 сутки 28 сутки

□ 2. Кандидоз, нелеченные мыши ■ 3. Кандидоз+лечение амфотерицином В

Н 4. Кандидоз+лечение композицией амфотерицина В с окисленным декстраном Ш 5. Кандидоз+лечение окисленным декстраном

2, 3,4, 5 - группы мышей;

«*» - нелеченные животные погибли в период с18 по 20 сутки после инфицирования, у леченных животных

гранулем не наблюдали

Рис. 9. Численная плотность (Nai) гранулем в головном мозге мышей-самцов линии СВА после их гематогенного инфицирования С. albicans и лечения различными формами амфотерицина В

Полученные данные свидетельствуют о том, что лечебный эффект амфотерицина В в головном мозге, судя по количеству инфильтратов и гранулем, еще не реализовался на 3-й сутки от начала лечения, а окисленный декстран, с учетом показателей летальности и концентрации гранулем, обладает самостоятельным, ранее, чем у амфотерицина В проявляющимся, лечебным эффектом, усиливающим таковой у амфотерицина В в составе композиции.

Изменения просвета сосудов ГЭБ в совокупности с упомянутыми изменениями могут быть рассмотрены как показатель их повреждения и степени успешности лечебных воздействий. Так, на 3-й сутки у мышей, получавших АмВ или КАД, величины объемной плотности сосудов были меньшими, чем у нелеченых животных. Но

уже с 7-х суток наименьшей объемная плотность просветов сосудов была у мышей, леченных КАД (рис. 10), что указывает на больший эффект КАД в отношении уменьшения деструктивных изменений в стенках сосудов. На 28-е сутки величины объемной плотности сосудов в группах, леченных АмВ и КАД были больше величины аналогичного показателя в контрольной группе, что могло быть вызвано токсическим эффектом амфотерицина на эндотелий сосудов.

% 6 -

7 сутки

10 сутки

28 сутки

3 сутки 13 1. Контроль

■ 2. Кандидоз, нелеченные мыши Н 3. Кандидоз+лечение амфотерицином В

S 4. Кандидоз+лечение композицией амфотерицина В с окисленным декстраном □ 5. Кандидоз+лечение окисленным декстраном

1, 2, 3,4, 5 - группы мышей

Рис. 10. Объемная плотность (Vv) сосудов в головном мозге мышей-самцов линии СВА после их гематогенного инфицирования С. albicans и лечения различными формами амфотерицина В

Объемы зон перицеллюлярного и периваскулярного отека - следствие повреждения сосудов и повышения их проницаемости - так же были меньшими у животных, леченых АмВ и КАД, во все периоды исследования (рис. 11), что свидетельствовало об эффективности элиминации возбудителя и уменьшении выраженности цитотоксического воздействия его метаболитов на клетки вещества головного мозга и эндотелий сосудов при применении АмВ и, в частности, КАД.

10 сутки

28 сутки

3 сутки 7 сутки

В 2. Кандидоз, нелеченные мыши □ 3. Кандидоз+лечение амфотерицином В

СЭ 4. Кандидоз+лечение композицией амфотерицина В с окисленным декстраном В 5. Кандидоз+лечение окисленным декстраном

2, 3, 4, 5 - группы мышей

Рис. 11. Суммарная объемная плотность (Vv) зон перицеллюлярного и периваскулярного отека вещества головного мозга мышей-самцов линии СВА после их гематогенного инфицирования С. albicans и лечения препаратами амфотерицина В Таким образом, в результате анализа морфологических и морфометрических данных, полученных при исследовании образцов головного мозга, в эксперименте с

моделированием иммунодефицитного состояния, при субдуральном инфицировании мышей-самцов линии СБА С. albicans, было установлено, что, наряду с ним, фактором, лимитирующим гранулемообразование в головном мозге, являлось неучастие клеток микроглии в формировании гранулем и, прежде всего, в качестве центров гранулемообразования. Отсутствие гранулем было обусловлено ингибированием эффекторных функций клеточного звена иммунитета в результате повреждения циклофосфаном клеточных элементов костного мозга, что привело к уменьшению числа дифференцированных фагоцитирующих клеток.

Отсутствие микотических гранулем не является препятствием для формирования патологических изменений в головном мозге, проявившихся диффузным поражением церебральных микрососудов в следствие цитопатического действия грибковых метаболитов, что приводило к развитию отечно-деструктивных изменений. Это дает основание охарактеризовать исследуемую патологию как менингоэнцефалит, поскольку мозговые оболочки неизбежно вовлекались в процесс в связи с субдуральным введением взвеси культуры С. albicans, хотя таковые не были объектом данного исследования.

При изучении особенностей гранулемообразования в головном мозге мышей после их инфицирования С. albicans через латеральную хвостовую вену, установлено, что ГЭБ лимитирует проникновение грибов в головной мозг, несмотря на высокую вирулентность используемого штамма. Кроме того, быстрое уменьшение количества гранулем уже к 10 суткам после инфицирования свидетельствовало об успешной элиминации С. albicans макрофагами сформировавшихся гранулем вне условий лейкопении (иммунодефицита).

После внутривенного инфицирования мышей, как и в случае субдурального инфицирования, выявлены выраженные отечно-деструктивные изменения в веществе головного мозга, которые были обусловлены как цитотоксическим воздействием грибковых метаболитов на клетки ГМ, так и развитием гипоксии вследствие распространенных деструктивных изменений сосудов и гемоциркуляторных нарушений, развившихся в результате воздействия литических ферментов возбудителя на эндотелий церебральных микрососудов.

После внутривенного инфицирования мышей С. albicans, генерализация кандидозного воспаления подтверждалась наличием гранулем в легких, печени, почках, а так же деструктивно-воспалительных изменений в их паренхиме и строме. При этом меньшая концентрация гранулем в головном мозге, по сравнению с таковой в почках и легких свидетельствовала о достаточно высокой барьерной функции ГЭБ как в отношении С. albicans, так и моноцитов, макрофагов.

По клеточному составу в головном мозге и иных органах это были достаточно типичные микотические гранулемы, с соответствующим их строением и клеточным составом. Отличия по клеточному составу гранулем в легких, почках и печени, в конкретные периоды наблюдения, были обусловлены способом введения возбудителя

- в латеральную хвостовую вену, и, следовательно, неодновременным «прохождением» ими различных стадий гранулемообразования.

Полученные на двух экспериментальных моделях кандидозного менингоэнцефалита результаты морфологического и морфометрического исследований головного мозга свидетельствуют о большем антимикотическом эффекте композиции АмВ с окисленным декстраном по сравнению со свободным АмВ. Это проявлялось меньшим повреждением микрососудов гемато-энцефалического барьера и уменьшением зон отечно-деструктивных изменений в веществе головного мозга. Во втором эксперименте о высокой терапевтической эффективности КАД свидетельствовало так же уменьшение численной плотности гранулем, существование которых обусловлено наличием в центре гранулем (резидентном макрофаге) живых С. albicans. Уничтожение грибов сопряжено со снижением хематтракгантного потенциала, формируемого возбудителем и клетками микроокружения (моноцитами, макрофагами, эпителиоидными клетками). Это сопряжено с феноменом «диссоциации» гранулем.

На основании морфологических и морфометрических данных установлено, что, при лечении кандидозного менингоэнцефалита, окисленный декстран обладает самостоятельным лечебным эффектом, на что указывает меньшие, чем без лечения, летальность и концентрация гранулем в головном мозге животных после его применения на фоне инфицирования. При этом эффективность окисленного декстрана проявилась раньше, чем у амфотерицина В, и сопоставима по уменьшению отечного синдрома в веществе ГМ с эффективностью амфотерицина В. Кроме того, окисленный декстран усиливает эффект амфотерицина В в составе композиции. Это подтверждалось большим, по сравнению с эффектами амфотерицина В, увеличением численной плотности сосудов (их новообразованием), меньшей выраженностью отечного синдрома, а так же в более ранним редуцированием кандидозных гранулем.

ВЫВОДЫ

1. Клетки микроглии не участвуют в гранулемообразовании, что установлено на модели субдурального инфицирования мышей-самцов линии СВА С. albicans на фоне введения циклофосфана, отсутствие микотических гранулем в головном мозге не сопряжено с редукцией проявлений микотического воспаления в нем.

2. Образование кандидозных гранулем в головном мозге после гематогенного инфицирования C.albicans мышей-самцов линии СВА лимитировано гемато-энцефалическим барьером в отношении С. albicans и клеток, формирующих гранулемы в головном мозге. Это проявилось меньшим количеством гранулем в головном мозге, по сравнению с другими органами.

фагоцитирующих клеток при внутривенном инфицировании и, следовательно, неодновременным «прохождением» различных стадий гранулемообразования, определяющих эти отличия.

4. Терапевтическая эффективность композиции амфотерицина В с окисленным декстраном при лечении кандидозного менингоэнцефалита у мышей-самцов линии СВА после субдурального и гематогенного инфицирования, по данным морфологического и морфометрического исследований, была существенно большей, по сравнению со свободным амфотерицином В. Это проявлялось меньшим повреждением сосудов гемато-энцефалического барьера и уменьшением количества гранулем, выраженности отечно-деструктивных изменений в веществе головного мозга.

5. Окисленный декстран обладает собственным и рано проявляющимся антимикотическим эффектом, сопоставимым со свободным амфотерицином В. Это проявилось существенным снижением величины показателя летальности животных при его применении, чем у нелеченных мышей, о чем судили по более быстрому уменьшению проявлений гранулематозного микотического воспаления.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Структурная организация и содержание стероидных гормонов в надпочечниках мышей при системном кандидозе и его лечении композицией амфотерицина В с диальдегиддекстраном / Е.В. Гусева, H.A. Пальчикова, В.Г. Селятицкая, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий II Сибирский консилиум - 2007. - №7 (62). - С. 102.

2. Гусева Е.В. Экспериментальная модель кандидозного менингоэнцефалита / Е.В. Гусева, В.А. Шкурупий // Современная микология в России: Материалы 2-го Съезда микологов России. - М„ 2008. - Т.2. - С. 488.

3. Патоморфологические особенности сосудистого русла головного мозга при кандидозном менингоэнцефалите и его лечении композицией амфотерицина В с диальдегиддекстраном в эксперименте / Е.В. Гусева, О.В. Потапова, А.П. Надеев,

B.А. Шкурупий // Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 150-летию кафедры патологической анатомии Военно-медицинской академии им.

C.М. Кирова. - СПб, 2009. - С.38-40.

4. Патоморфология поражения головного мозга мышей при кандидозном менингоэнцефалите и его лечении композицией амфотерицина В с диальдегиддекстраном / Е.В. Гусева, О.В. Потапова, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий // Проблемы медицинской микологии - 2009.-Т.11- №2 - С.68.

5. Морфологические особенности кандидозного менингоэнцефалита у мышей на фоне иммунодефицита и лечения комплексной композицией амфотерицина В / Е.В. Гусева, А.П. Надеев, C.B. Позднякова, В.А. Шкурупий II Материалы III съезда Российского общества патологоанатомов, Самара 2009. - Т.2. - С. 130-131.

6. Гусева Е.В. Реакция глиальных клеток у мышей при интрацеребральном инфицировании Candida albicans / Е.В Гусева, О.В Потапова, А.П. Надеев // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: IV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием -Новосибирск, 2009. - С. 64-65.

7. Гранулемогенез при экспериментальном кандидозном энцефалите и при применении композиции амфотерицина В с окисленным декстраном / Е.В. Гусева, А.П. Надеев, О.В. Потапова, В.А. Шкурупий // Проблемы медицинской микологии -2010.-Т.12- №2- С.81-82.

8. Структурная организация головного мозга при церебральном кандидозе у мышей, леченных композицией амфотерицина В с окисленным декстраном / Е.В. Гусева, В.А. Шкурупий, А.П. Надеев, О.В. Потапова // Сибирское медицинское обозрение - 2010. - № 6 - С. 25-28. (Из списка ВАК)

9. Особенности гранулематоза при кандидозном энцефалите и его лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном / Е.В. Гусева, А.П. Надеев, О.В. Потапова, В.А. Шкурупий // Актуальные вопросы морфологической диагностики заболеваний: Материалы Республиканской научно-практической конференции. -Витебск: ВГМУ, 2010 - С. 160-163.

10. Морфологические изменения в головном мозге мышей, леченных композицией амфотерицина В с окисленным декстраном, при генерализованном кандидозе / В.А. Шкурупий, Е.В. Гусева, О.В. Потапова, А.П. Надев // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. -2011.-Т. 151, № 1. - С. 107-111. (Из списка ВАК)

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АмВ -амфотерицин В

ГМ -головной мозг

ГЭБ -гемато-энцефалический барьер

КАД -композиция амфотерицина В с окисленным декстраном

ОД -окисленный декстрт

СМФ -система мононуклеарных фагоцитов

ЦНС -центральная нервная система

Соискатель Гусева Е.В.

Отпечатано в типографии Новосибирского Государственного технического университета 630092, г.Новосибирск, пр. К. Маркса, 20, Тел./факс (383) 346-08-57 Формат 60 х 84/16. Объем 1,0 пл. Тираж 100 экз. Заказ 249. Подписано в печать 16.03.2011 г.

1ь

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Гусева, Екатерина Васильевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Сруктура и функции гемато-энцефалического барьера.

1.2. Общее представление о грибах рода Candida.

1.2.1. Морфология грибов рода Candida spp.

1.2.1.1. Антигенный состав С. albicans.

1.2.2. Факторы патогенности С. albicans.

1.2.2.1. Способы проникновения С.albicans в клетки различного гистогенеза и факторы, его обусловливающие.

1.3. Особенности иммунного ответа при кандидозе.

1.4. Понятие глубоких (системных) микозов.

1.4.1. Морфология кандидозного поражения внутренних органов.

1.4.2. Особенности кандидозного поражения центральной нервной системы.

1.5. Средства и способы лечения системных микозов.

1.5.1. Принципы адресной доставки лекарственных препаратов через гемато-энцефалический. барьер и факторы микроанатомического и цитологического обусловливания этого процесса.

1.5.2. Лизосомотропизм.

1.5.3. Преимущества декстрановой матрицы противогрибковых средств для внутривенного применения.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ

ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Результаты морфометрического исследования клеточного строения головного мозга мышей-самцов линии СВА в норме.

3.2. Структурные изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА при субдуральном инфицировании С. albicans.

3.2.1. Морфологические изменения микроциркуляторного русла головного мозга мышей после субдурального инфицирования С. albicans? на фоне введения циклофосфана.

3.2.2. Отечно-деструктивные изменения в головном мозге при субдуральном: инфицировании С. albicans на- фоне введения циклофосфана.

3.2.3. Морфологические изменения клеток вещества головного; мозга мышей-самцов линии СВА при субдуральном инфицировании С. albicans на фоне введения циклофосфана.

3.3. Структурные изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА после: их субдурального 1 инфицирования С. albicans и при лечении окисленным, декстраном и препаратами! амфотерицина В;:.IV

3.3.1. Морфологические: изменения? микроциркуляторного русла головного мозга мышей-самцов линии» СВА после их субдурального: инфицирования С. albicans и введения: циклофосфана; леченных окисленным декстраномипрепаратами/амфотерицинаВ.

3.3.2. Отечно-деструктивные.изменения;в^головном мозге мышей-самцов линии СВА после: их субдурального инфицирования О. albicans- на фоне введения циклофосфана и при лечении мышей препаратами амфотерицина В и окисленным-'декстраном:.

3.3.3. Морфологические изменения глиальных клеток головного мозга мышей-самцов линии СВА после субдурального инфицирования С. albicans на фоне - введения циклофосфана и при лечении препаратами амфотерицина В и окисленным декстраном:.80?

3.3.4. Морфологические: изменения^ нейронов головного мозга мышей-самцов линии СВА после субдурального инфицирования С. albicans на фоне введения циклофосфана, при их лечении препаратами амфотерицина В.

3.4. Морфологическая характеристика С. albicans-индуцированного гранулематозного воспаления в головном мозге мышей-самцов линии СВА при гематогенном инфицировании.

3.4.1.Морфологические изменения сосудов микроциркуляторного русла головного мозга мышей-самцов линии СВА при генерализованном кандидозном гранул ематозе.

3.4.2. Отечно-деструктивные изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА вследствие гематогенного инфицирования C.albicans.

3.4.3. Морфологическая характеристика клеток головного мозга мышей-самцов линии СВА при генерализованном кандидозном гранулематозе.

3.5. Морфологические проявления генерализованного кандидозного гранулематоза в головном мозге мышей-самцов линии СВА, леченных препаратами амфотерицина В.

3.5.1. Морфологические изменения сосудов микроциркуляторного!русла головного мозга мышей-самцов линии СВА при генерализованном кандидозном воспалении и их лечении препаратами амфотерицина В.

3.5.2. Отечно-деструктивные изменения м головном мозге мышей-самцов линии СВА при гематогенном инфицировании С. albicans и их лечении препаратами амфотерицина В.

3.5.3. Морфологическая характеристика нейронов головного1 мозга мышей-самцов линии СВА при генерализованном кандидозном гранулематозе и терапии препаратами амфотерицина В.

3.5.4. Морфологическая характеристика глиальных клеток головного мозга мышей-самцов линии СВА при генерализованном кандидозном гранулематозе и терапии препаратами амфотерицина В.

3.5.5. Патоморфологические изменения в головном мозге мышей-самцов линии СВА после их гематогенного инфицирования С. albicans и лечения окисленным декстраном.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурные изменения в головном мозге у мышей при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном"

Актуальность проблемы. Значительный рост заболеваемости поверхностными и глубокими формами кандидоза, отмечающийся в последние годы (Wisplinghoff H., 2004; Caston-Osorio J J. et al., 2008), тяжесть клинических проявлений и высокая летальность (Blot S.I., Vandewoude К.Н. 2003; Marchetti О. et al., 2004; Bougnoux M.E. et al., 2008), связаны с тем, что эта инфекция, являясь оппортунистической, поражает, прежде всего, ослабленный организм (Джавадов С.С., 2007; Ruhnke M., 2006; Algar V., Novelli V., 2007; Badiee P., Kordbacheh P. et al., 2009), что свидетельствует о снижении резистентности к данной инфекции в популяции человека. За последние годы наблюдают тенденцию к росту числа случаев инвазивного кандидоза (Venkatesan P. et al., 2005; Pfaller М.А., 2007; Metcalf S.C., Dockrell D.H., 2007). Увеличение частоты инвазивных микозов связано с рядом факторов, наиболее значимые из них -усиление иммуносупрессии у больных злокачественными опухолями вследствие интенсификации программ химиотерапии' (DiNubile MJ. et al., 2005), увеличение числа больных с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД) (Kontoyiannis D. et al., 2003), расширение трансплантации солидных органов и гемопоэтических стволовых клеток (Pfaller М.А., Diekema D.J., 2007; Munoz P., 2008), проведение активной, на высокотехнологичном уровне, терапии выхаживания (Кулько А.Б., Митрохин С.Д., 2005), прежде всего больным в отделениях интенсивной терапии (Vincent J.L. et al. 1998; Pauw В., 1998; Edmond M. et al., 1999; Trick W.E. et al., 2002), недоношенным новорожденным (Castro В.A., 2008). Установлено, что Candida spp. находятся на пятом месте среди возбудителей инфекционных осложнений у больных в отделениях реанимации и интенсивной терапии (Пестова Л.А., 2004; Гельфанд Б.Р. и др., 2003; Bar W., Hecker H., 2002; Trick W.E. et al, 2002; Eggimann P. et al., 2003; Guery B. et al., 2008).

В настоящее время наблюдают отчетливое увеличение этиологической роли грибов рода Candida в развитии инфекционно-воспалительных заболеваний новорожденных, наибольшую значимость среди которых приобрели заболевания кожи, слизистых, желудочно-кишечного тракта и центральной нервной системы (ЦНС) (Хмельницкий О. К., 1984; Белянин В. Л., 1990; Самсыгина Г.А., Буслаева Г.Н., 1998; Буслаева Г.Н. и др., 1995, 2001; Chapman R.L., Faix R.G., 2003; Groll А.Н., Walsh T.J., 2003). При этом кандидоз ЦНС составляет 14,9% всех случаев инфекционного поражения ЦНС у новорожденных, в том числе недоношенных детей, а летальность достигает 5056% (Сорокина М.Н. и др., 2000; Романюк Ф.П. и др., 2003; Castro В.А., 2008).

Известно, что внутриклеточное персистирование в вакуолярном аппарате макрофагов бактерий, грибов, иного корпускулярного медленно- или небиодеградируемого материала сопряжено с формированием гранулем, г состоящих преимущественно из клеток системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ) (Струков А. И., Кауфман О. Я., 1989; Шкурупий В. А., 2007; Boros D. L.; 2003). Для этого необходимы: наличие в органах резидентных макрофагов — центров гранулемообразования (их количество детерминирует концентрацию гранулем в органе), а также активация костного мозга, для обеспечивая гранулемообразования клетками СМФ. Общепринято рассматривать образование гранулем как защитную реакцию организма, направленную на изоляцию и элиминацию гранулемогенного фактора (Струков А. И., Кауфман О. Я., 1989; Boros D. L., 2003). Однако эта т.н. защитная реакция, в своих проявлениях имеет своего рода «издержки». Они обусловлены усиленной продукцией макрофагами активированных кислородных метаболитов (АКМ) (Takao S. et al., 1996; Chinen T. et al., 1999) после поглощения гранулемогенных лизосомотропных объектов (Шкурупий и др. 1999). Это предполагает лабилизацию мембран лизосом, и секрецию лизосомальных гидролаз в окружающее пространство, что вместе с АКМ может обусловливать деструкцию окружающих клеток, помимо патогенных эффектов самих гранулемогенных факторов. Поступление гранулемогенных факторов, равно как и клеток СМФ, в интерстиций тканей различных органов, но не в головной мозг (Hawkins В. T., Davis T. P., 2005) осуществляется через лимфатические и затем кровеносные капилляры. В головном мозге этот процесс более сложен в связи с наличием в нем кровеносной капиллярной системы с особой структурной организацией. Она, в совокупности с окружающими капилляры астроцитами и их отростками (Paspalas С. D., Papadopoulos G. С., 1996), получила название гемато-энцефалического барьера (ГЭБ). Имеются многочисленные подтверждения роли ГЭБ в защите головного мозга от проникновения патогенных и ксенобиотических факторов молекулярной и корпускулярной природы (Risau W. et al., 1990; Grubb S. E. W. et al., 2008). Вместе с тем, защитная способность ГЭБ в отношении грибов, очевидно, не абсолютна, поскольку менингоэнцефалиты, особенно при иммунодефицитных состояниях, обусловленные проникновением в головной мозг С. albicans (Castro В.А., 2008), наблюдают в клинической практике. В. головном мозге имеются клетки микроглии, которые ряд авторов относят к представителям СМФ (Струков А. И., Кауфман О. Я., 1989), однако, нет ясных представлений о том, в какой мере они способны участвовать в гранулемообразовании при условии проникновения в головной мозг гранулемогенных факторов.

Терапия микотических поражений ЦНС, в частности, кандидозного менингоэнцефалита, затруднена в связи с ограничением транспорта лекарственных препаратов через гемато-энцефалический барьер. Кроме того, ГЭБ, видимо, может быть препятствием проникновению моноцитов и макрофагов в головной мозг для осуществления защитной реакции организма в виде образования гранулем из них.

Решение проблемы преодоления гемато-энцефалического барьера может состоять в применении высокомолекулярных лизосомотропных носителей лекарственных средств, в частности, декстранов, которые обладают тропностью к вакуолярному аппарату макрофагов и могут быть использованы для доставки и концентрации в них лекарственных средств (В.А. Шкурупий и др., 1991, 1993, 1994, 1997). Кроме того, данные носители должны обладать тропностью к рецепторным системам эндотелия, в том числе входящего в состав гемато-энцефалического барьера, что обусловило бы перенос средств лечения при микозах головного мозга. Так, было выполнено большое количество работ по изучению влияний комплекса изониазида с окисленным декстраном молекулярной массой 35 и 60 кД на развитие генерализованного хронического туберкулезного гранулематоза в эксперименте (Шкурупий В.А. и др., 1991; Чернова Т.Г., 1993; Филимонов П.Н., 1996; Козяев М.А., 1999; Потапова О.В., 2003; Шкурупий В.А., 2007).

Учитывая большое сходство туберкулезных и микотических гранулем, обусловленное феноменом внутривакуолярной персистенции возбудителей, была создана новая антимикотическая лизосомотропная композиция из амфотерицина В и окисленного декстрана, способствующая более успешной терапии системных кандидозов. Получены свидетельства большой терапевтической эффективности этой композиции из амфотерицина В и окисленного декстрана по сравнению со свободной формой амфотерицина В при лечении хронического системного кандидоза, в частности, в лимфатических узлах (Шкурупий В. А. и др., 2005), печени (Травин М. А., 2006), почках (Приставка А. А. и др., 2008). Однако остается неизученной эффективность данной композиции в отношении кандидозного менингоэнцефалита, что является актуальной проблемой при поиске и выборе лекарственных препаратов для лечения микозов с поражением ЦНС.

Задачи исследования: 1. Методом морфометрии изучить структурную организацию сосудов гемато-энцефалического барьера и вещества головного мозга у мышей-самцов линии

СБА в норме;

Научная новизна результатов исследования

Впервые методами морфометрии изучены количественные характеристики клеток вещества головного мозга разных типов и сосудов гемато-энцефалического барьера у интактных мышей-самцов линии СВА.

Научно-практическое значение работы

Полученные данные о большей терапевтической эффективности композиции амфотерицина В с окисленным декстраном, по сравнению со свободной формой амфотерицина В, и самостоятельном лечебном эффекте окисленного декстрана, при лечении кандидозного энцефалита, могут послужить основой для создания противогрибкового препарата в качестве средства лечения системных микозов (кандидозов), в том числе кандидозных менингоэнцефалитов.

Положения, выносимые на защиту

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Гусева, Екатерина Васильевна

ВЫВОДЫ

3. По количественным параметрам клеточного состава кандидозные гранулемы в головном мозге несколько отличаются от таковых в печени, почках и легких, что обусловлено различными условиями проникновения в них C.albicans и фагоцитирующих клеток при внутривенном инфицировании и, следовательно, неодновременным «прохождением» различных стадий гранулемообразования, определяющих эти отличия.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, в результате анализа морфологических и морфометрических данных, полученных при исследовании образцов головного мозга, в эксперименте с моделированием иммунодефицитного состояния, при субдуральном инфицировании мышей-самцов линии СВА С. albicans, было установлено, что, наряду с ним, фактором, лимитирующим гранулемообразованин в головном мозге, являлось неучастие клеток микроглии в формировании гранулем и, прежде всего, в качестве центров гранулемообразования. Отсутствие гранулем было обусловлено ингибированием эффекторных функций клеточного звена иммунитета в результате повреждения циклофосфаном клеточных элементов костного мозга, что привело к уменьшению числа дифференцированных фагоцитирующих клеток.

Отсутствие микотических гранулем не является препятствием для формирования патологических изменений в мозге, проявившихся диффузным поражением церебральных микрососудов в следствие цитопатического действия грибковых метаболитов, что приводило к развитию отечно-деструктивных изменений. Это дает основание охарактеризовать исследуемую патологию как менингоэнцефалит, поскольку мозговые оболочки неизбежно вовлекались в процесс в связи с субдуральным введением взвеси культуры С. albicans.

После внутривенного инфицирования мышей С. albicans, генерализация кандидозного воспаления подтверждалась наличием гранулем в легких, печени, почках, а так же деструктивно-воспалительных изменений в их паренхиме и строме. При этом меньшая концентрация гранулем в головном мозге по сравнению с почками и легкими свидетельствовала о достаточно высокой барьерной функции ГЭБ как в отношении С. albicans, так и моноцитов, макрофагов.

Полученные на двух экспериментальных моделях кандидозного менингоэнцефалита результаты морфологического и морфометрического исследований головного мозга свидетельствуют о лучшем фунгицидном эффекте композиции АмВ с окисленным декстраном по сравнению со свободным АмВ. Это проявлялось меньшим повреждением микрососудов гемато-энцефалического барьера и уменьшением зон отечно-деструктивных изменений в веществе головного мозга. Во втором эксперименте о терапевтической эффективности КАД свидетельствовало так же уменьшение численной плотности гранулем, существование которых обусловлено наличием в центре гранулем (резидентном макрофаге) живых С. albicans. Уничтожение грибов сопряжено со снижением хематтрактантного потенциала, формируемого возбудителем и клетками микроокружения (моноцитами, макрофагами, эпителиоидными клетками). Это сопряжено с феноменом «диссоциации» гранулем.

На основании морфологических и морфометрических данных установлено, что, при лечении кандидозного менингоэнцефалита, окисленный декстран обладает самостоятельным лечебным эффектом, на что указывает меньшая летальность животных после его применения на фоне инфицирования и меньшая концентрация гранулем в головном мозге. При этом эффективность окисленного декстрана проявилась раньше, чем у амфотерицина В, и сопоставима по уменьшению отечного синдрома в веществе ГМ с эффективностью амфотерицина В. Кроме того, окисленный декстран усиливает эффект амфотерицина В в составе композиции. Это подтверждалось большим, по сравнению с эффектами амфотерицина В, увеличением численной плотности сосудов, меньшей выраженностью отечного синдрома, а так же в более ранним редуцированием кандидозных гранулем.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Гусева, Екатерина Васильевна, Новосибирск

1. Автандилов Г. Г. Медицинская морфометрия: рук. / Г. Г. Автандилов — М.: Медицина, 1990. С. 384.

2. Агеева Т. А.: Протективный эффект лизосомотропного препарата реополиглюкина при лечении железодефицитной анемии сахаратом железа / Т. А. Агеева, В. А. Шкурупий // Бюл. эксперим. биол. мед. 1994. - №7. - С. 4043.

3. Акулинин В. А. Закономерности и структурно-функциональные механизмы реорганизации дендритов нервных клеток головного мозга в постишемическом периоде : автореферат дис. . доктора медицинских наук : Омск, 2004.-39 с.

4. Аравийский Р. А., Белянин В. Л. Патоморфология микозов у иммуносупрессированных больных // Пробл. мед. микологии. 2002. - №3. - С. 7-23.

5. Архипов С. А. Результаты исследования in vitro активности противотуберкулезного препарата на пролонгированной декстрановой матрице / С. А. Архипов, В. А. Шкурупий / Научная сессия сотрудников НМИ: тез. докл. -Новосибирск, 1995.-Ч. 1.-С. 134.

6. Ахмедова С. А., Донин И. М., Буслаева Т. Н. Исходы грибкового поражения ЦНС у детей первого года жизни. // Пробл. мед. микологии. 2001. -Т.З, №2.-С. 54-55.

7. Бакланова О. В. Моделирование и экспериментальная химиотерапия кандидозной инфекции мышей, вызванной интрацеребральным заражением: автореф. дис. . канд. мед. наук / О. В. Бакланова. — Москва, 1995. 21 с.

8. Бакланова О. В., Падейская Е. Н. Химиотерапевтическая активность кетоконазола, амфоглюкамина и микогептина на модели кандидоза центральной нервной системы белых мышей//Химико-фармацевтический журнал. 1987. - №8. - С. 955-959.

9. Бакланова О. В., Скосырева А. М., Падейская Е. Н. Сравнительная характеристика активности кетоконазола, итраконазола и 5- фторцитозина на модели кандидозного энцефаломенингита мышей // Химико-фармацевтический журнал. 1992. - №26 (9-10). - 20-24.

10. Белянин В. Л. Механизмы клеточной защиты организма при кандидозе //Архив патологии. 2000. - Т. 62., №6 - С. 10-13.

11. Белянин В. Л. Морфологические проявления кандидоза новорожденных в условиях иммунодефицита / В. Л. Белянин, М. Г. Индикова, В. М. Котович // Арх. патологии. 1990. - № 11. - С. 10-13.

12. Белянин В. Л. О морфогенезе кандидозной гранулемы / В. Л. Белянин, Р. А. Аравийский, А. В. Элиас // Арх. патологии. 1984. - №12. - С. 20-26.

13. Белянин В. Л., Аравийский Р. А. Значение специфического и неспецифического звена иммунитета в развитии оппортунистических микозов // Пробл. мед. микологии. 2001. - №2. - С. 33-38.

14. Буслаева Г. Н. Кандидоз ЦНС как нозокомиальная инфекция у детей первого года жизни// Пробл. мед. микологии. 2001 - Т.З, №2. - С. 53-54.

15. Буслаева Г. Н. Рациональное использование антимикотиков в педиатрии // Педиатрия. 1999. - № 6. - С. 71-78.

16. Быков В. JI. Гистологический, гистохимический и ультраструктурный анализ развития кандидозных гранулем / В. Л. Быков, С. Е. Хохлов, Е. Н. Омова // Арх. патологии. 1990. - №8. - С. 52-56.

17. Быков В. Л. Дискуссионные вопросы развития кандидозных гранулем в печени / В. Л. Быков // Арх. патологии. 1991. - №6. - С. 66-67.

18. Быков В. Л. Патогенез и морфогенез кандидоза / В. Л. Быков // Арх. патологии. 1984. - №12. - С. 75-82.

19. Быков В. Л. Патогенез и морфогенез кандидоза при иммунодепрессии / В. Л. Быков // Арх. патологии. 1990. - №11. - с. 67-70.

20. Быков В. Л. Цитоморфологический анализ адгезии грибов рода Candida к эпителиальным клеткам человека и животных / В. Л. Быков, Е. В. Величко // Известия АН СССР. Сер. Биология. 1990. -№1. - С. 45-51.

21. Вейбель Э. Р. Морфометрия легких человека. М.: Медицина, 1970. - 176 с.

22. Владимиров Ю.А. // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: материалы международной научной конференции Минск: Тонпик, 2002.

23. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии и гистологической техники//М.: Медицина, 1971.-301 с.

24. Гельфанд Б. Р., Гельфанд Е. Б. Грибковая инфекция в абдоминальной хирургии. Антибактериальная терапия абдоминальной хирургической инфекции/ Гельфанд Б. Р., Гельфанд Е. Б.; под ред. В. С.Савельева, Б. Р. Гельфанда. Москва, 2003. - С. 131-155.

25. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. — М., Практика, 1998. —459 с.

26. Глушко Н. И. Антигенные и аллергические свойства маннопротеидного аллергена Candida albicans/ Р. Л. Смирнова, Е. В. Агафонова, В. П. Нефедов//

27. Современная микология в России. 1 съезд микологов. М.: Изд-во «Национальная академия микологии», 2002. — С. 354-355.

28. Гольдберг Е. Д., Масная Н. В., Чурин А. А. Показатели иммунитета у мышей разных линий // Бюл. эксперим. биол. мед. 2005. — Т. 140, №8. — С. 189-191.

29. Джавадов С. С. Грибковые осложнения у детей, больных лейкемией // Пробл. мед. микологии. 2007. - Т. 9, № 3. - С. 24-25.

30. Заславская М. И., Маянский А. Н. Нейтрофилстимулирующая активность дрожжевой и гифальной форм Candida albicans (ROBIN) BERKHOUT // Пробл. мед. микологии. 2006. - Т.8, №3. - С. 40-43.

31. Калуев A.B. К проблеме окислительных процессов в ишемическом мозге/ А. В. Калуев// Биохимия. 1996. - Т. 61, № 5. - С. 939-941.

32. Квитницкий-Рыжов Ю.Н. Современное учение об отеке-набухании головного мозга. Киев, 1988. - 184 с.

33. Климко Н. Н. Перспективы использования новых системных противогрибковых препаратов в педиатрии (обзор литературы) / Н. Н. Климко, А. С. Колбин // Пробл. мед. микологии. 2005. - Т.7., №3. - С. 3-11.

34. Козяев М. А. Эффективность лечения хронического гранулематозного туберкулезного воспаления пролонгированной формой изониазида (морфологическое исследование): автореф. дисс. . канд. мед. наук / М. А. Козяев. Новосибирск, 1999. - 24 с.

35. Кудрявцев В. И. Систематика дрожжей / АН СССР. Ин-т микробиологии. М.: Изд-во АН СССР, 1954. - 427с.

36. Кулько А. Б. Лабораторная диагностика грибковых инфекций легких у больных туберкулезом / А. Б. Кулько, С. Д. Митрохин // Пробл. мед. микологии. 2005. - Т. 7., №3. - С. 25-29.

37. Курилин В. В. Влияние лизосомотропной формы амфотерицина В на функциональное состояние фагоцитов при экспериментальном кандидозе/ В. В.

38. Курилин, М. А. Саперова, Е. А. Ефанов, Д.Д. Цырендоржиев, В. А. Шкурупий // Бюл. эксперим. биол. мед. — 2008. приложение №1. - С. 13-15.

39. Курилин В. В. Функциональное состояние фагоцитов в динамике С. albicans индуцированного гранулематозного воспаления/ В. В. Курилин, X. Ц. Далаева, М. А. Травин, Д. Д. Цырендоржиев// Пробл. мед. микологии. - 2004. -Т.6, №2. - С.90.

40. Лебедева М. Н. Химиотерапевтическая модель экспериментальной дифтерийной токсинемии у белых мышей / М. Н. Лебедева, Д. М. Гольдфарб // Журнал микробиологии. 1944. -№6. - С. 17-21.

41. Лебедева Т. Н. Иммунитет при кандидозе (обзор) // Пробл. мед. микологии. 2004. - Т.6., №4, - С. 8-16.

42. Лебедева Т. Н. Патогенез аллергии к Candida SPECIES (обзор). // Пробл. мед. микологии. 2004. - Т.6., №1. - С. 3-8.

43. Лесовой В. С. Микозы центральной нервной системы (обзор) / В. С. Лесовой, А. В. Липницкий // Пробл. мед. микологии. 2008. - Т. 10, №1. - С. 37.

44. Лисовская С. А. Адгезивные свойства штаммов Candida albicans при кандидозах различной локализации / С. А. Лисовская, Н. И. Глушко, Е. В. Халдеева // Пробл. мед. микологии. 2007. - Т.9, №1. - С. 26-29.

45. Майская М. Ю. Патоморфогенез экспериментального криптококкоза головного мозга: автореф. дисс. . канд. мед. наук/ М.Ю. Майская. С-Пб., 2007. - 22 с.

46. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Издательство Новая Волна», 2006. - 1200 е.: ил.

47. Маянский А. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А. Н. Маянский, Д. Н. Маянский. Новосибирск: Наука. 1983. -256 с.

48. Маянский Д. Н. Клетка Купфера и система мононуклеарных фагоцитов / Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, Сиб. Отд., 1981. - 172 с.

49. Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники / Г.А. Меркулов. Л.: Медицина, 1969. - 645 с.

50. Надеев А. П. Генетическая детерминация особенностей кандидозного воспаления в эксперименте/ А. П. Надеев, В. А. Шкурупий, И. Я. Извекова, М.

51. A. Травин, М. А. Сыпко// Пролемы медицинской микологии. 2004. - Т.6, №2. -С. 102.

52. Надеев А. П. Особенности ответа системы мононуклеарных фагоцитов у мышей оппозитных линий при экспериментальном туберкулезе / А. П. Надеев,

53. B. А. Шкурупий, Т. А. Уварова, С. В. Позднякова // Бюл. эксперим. биол. мед. -2005. Т. 140, №8. - С. 227-230.

54. Отек головного мозга// Под ред. Г. И. Мчедлишвили. Тбилиси: Мецниереба, 1986. 156 с.

55. Пестова Л. А. Кандидемия и острый диссеминированный кандидоз у больных в отделениях интенсивной терапии: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Л. А. Пестова. Санкт-Петербург, 2004. - 21 с.

56. Пинегин Б. В., Маянский А. Н. Нейтрофилы: структура и функция / Иммунология. 2007. - № 6. - С. 374-382.

57. Потапова О. В., Шкурупий В. А. Влияние диальдегиддекстрана на структурные изменения в печени и легких при хроническом БЦЖ-гранулематозе/ Бюл. эксперим. биол. мед. 2008. - прилож. № 1 - С. 113-115.

58. Приставка А. А. Терапевтическая эффективность композиции амфотерицина В с диальдегиддекстраном при поражении почек у мышей разных линий с системным кандидозом/ А. А. Приставка, А. П. Надеев, М. А.

59. Травин, В. А. Шкурупий // Бюл. эксперим. биол. мед. 2008. - прилож. №1. -С. 76-79.

60. Романюк Ф. П. Микозы у детей, вызываемые условно-патогенными грибами: автореф. дисс. докт. мед. наук. JI.,1998. -44 с.

61. Романюк Ф. П. Микозы центральной нервной системы у детей / Ф. П. Романюк, А. С. Иова, Н. В. Петрова// Пробл. мед. микологии. 2003. -Т.5, №2. -С. 25.

62. Самсыгина Г. А. Эпидемиология инфекционно-воспалительных заболеваний и роль грибов рода Candida у новорожденных детей / Г. А. Самсыгина, Г. Н. Буслаева // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - №8. - С. 23-27.

63. Семченко В. В. Ультраструктурные изменения органелл астроцитов коры большого мозга собаки в постишемическом периоде (морфометрический анализ)/ В. В. Семченко, А. С. Хижняк // Морфология. 2001. - Т. 119, №2. -С. 15-19.

64. Сергеев А. Ю. Иммунитет при кандидозе // Иммунопатология, инфектология, аллергология. 1999. - № 1. - С. 91-99.

65. Сергеев А. Ю. Кандидоз. Приода инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение / А. Ю. Сергеев, Ю. В. Сергеев. М.: Триада - X, 2001. - 472 с.

66. Соколова Г. А. Кандидоз у больных с эндокрнными заболеваниями/ Г. А. Соколова, В. Б. Антонов, Ф. П. Романюк и др. //СПб: СПб МАЛО. 1998. - С. 46.

67. Сорокина М. Н. Микст-бактериально-микотические менингиты у детей/ М. Н. Сорокина, Ф. П. Романюк, Т. Н. Трофимова, Т. В. Злотникова, А. С. Иова, С. М. Игнатьева. // Пробл. мед. микологии. 2000. - Т. 2, №4 - С. 21-26.

68. Степанов С. С. Система субсинаптических единиц межнейронных синапсов головного мозга в норме, при ишемических состояниях и ввосстановительном периоде: автореф. дисс. . докт. мед. наук/ С. С. Степанов. Новосибирск, 1999. — 32 с.

69. Струков А. И., Кауфман О. Я. Гранулематозное воспаление и гранулематозные болезни. -М.: Медицина, 1989. 181 с.

70. Травин М. А. Структурная организация печени у мышей разных линий при хроническом системном кандидозе и их лечении комплексной лизосомотропной формой амфотерицина В: автореф. дисс. . канд. мед. наук / М.А. Травин. Новосибирск, 2006. - 22 с.

71. Федорова Т. Н. Перекисное окисление липидов при экспериментальной ишемии мозга / Т. Н. Федорова, А. А. Болдырев, И.В. Ганнушкина// Биохимия. -1999.-№ 1. С.94-98.

72. Физиология гистогематических барьеров: Руководство по физиологии/ Под ред. Я. А. Росина. М.: Наука, 1977. - 480 с.

73. Филимонов П. Н. Морфологические особенности развития хронического диссеминированного воспаления в печени и легких при лечении лизосомотропной пролонгированной формой изониазида: автореф. дисс. . канд. мед. наук /П. Н. Филимонов. Новосибирск, 1996. - с.

74. Фрейдлин И. С. Система мононуклеарных фагоцитов. М.: Медицина, 1984.-272 с.

75. Хмельницкий О. К. Особенности течения кандидозного инфекционного процесса в условиях комплексного воздействия лекарственных препаратов/ О. К. Хмельницкий, В. М. Котович// Бюл. эксперим. биол. мед. — 1995. — №11. с. 506-510.

76. Хмельницкий О. К. О моделировании оппортунистической инфекции, вызываемой условно патогенными грибами рода Candida/ О. К. Хмельницкий,

77. B. JI. Белянин// Архив патологии. 1993. - №1. - С. 82-85.

78. Хмельницкий О. К. Кандидоз. Патологическая анатомия, химиотерапия, лечебный патоморфоз / О. К. Хмельницкий, Р. А. Аравийский, О. Н. Экземпляров. JI: Медицина, 1984. -200 с.

79. Хмельницкий О. К. Патологическая анатомия и некоторые вопросы патогенеза висцерального кандидоза: автореф. дисс. . докт. мед. наук/ O.K. Хмельницкий. Ленинград, 1963. - 23 с.

80. Хмельницкий О. К. Патоморфогенез висцерального кандидоза/ O.K. Хмельницкий. Л.: Медицина, 1963. - 102 с.

81. Ходоров Б.И. Механизмы дестабилизации кальциевого гомеостаза нейрона при гиперстимуляции глутаматных рецепторов / Б. И. Ходоров, В. Г. Пинелис, И. В. Викторов// Вестник Российской Академии медицинских наук. -1998.-№8.-С. 41-46.

82. Чернова Т. Г. Морфологические изменения в печени при хроническом генерализованном туберкулезном процессе и лечении пролонгированным препаратом изониазида в эксперименте: автореф. дисс. . канд. мед. наук/ Т. Г. Чернова. — Новосибирск, 1993. — 20 с.

83. Чехонин В. П., Жирков Ю. А., Дмитриева Т. Б. Направленная доставка лекарственных средств в мозг// Вестник Российской Академии медицинских наук. 2006. - №8. - С. 30-37.

84. Шкурупий В. А. Влияние инфузий декстрана на деструктивные процессы в паренхиме печени при синдроме длительного сдавления/ В. А. Шкурупий, Е.

85. C. Лукьянова, А. В. Ефремов// Бюл. эксперим. биол. мед. 1998. - №5. - С. 592595.

86. Шкурупий В. А. Структурные преобразования в гепатоцитах при введении мышам реополиглюкина и последующем воздействии стресса/ В. А. Шкурупий //Бюл. эксперим. биол. мед. 1988. — №5. - С. 613-616.

87. Шкурупий В. А. Избирательное накопление реополиглюкина и латекса в клетках печени и характер ответа ее паренхимы на острое отравление СС14 /

88. B.А. Шкурупий // Бюл. эксперим. биол. мед. 1986. - №9. - С. 362-365.

89. Шкурупий В. А. Влияние комплексного препарата изониазида на мононуклеарные клетки в туберкулезной гранулеме/ В. А. Шкурупий, Т. Г. Чернова, Ю. Г. Курунов // Бюл. эксперим. биол. мед. 1996. - №5. - С. 559-561.

90. Шкурупий В. А. Влияние декстрана на ультраструктуру клеток Купфера при синдроме длительного сдавления/ В. А. Шкурупий, Е. С. Лукьянова, А. В. Ефремов// Бюл. эксперим. биол. мед. 1999. - №6. - С. 705-707.

91. Шкурупий В. А. Влияние окисленных декстранов на окислительно-метаболическую функцию перитонеальных макрофагов мышей in vitro и in vivo/ В. А. Шкурупий, Д. Д. Цырендоржиев, В. В. Курилин и др.// Бюлл. эксп. биол. мед. 2008. - прилож. №1. - С. 39-41.

92. Шкурупий В. А. Лизосомотропизм проблемы клеточной физиологии и медицины / В. А. Шкурупий, Ю. Н. Куру нов, Н. Н. Яковченко. - Новосибирск: НГМА, 1999. -289 с.

93. Шкурупий В. А. Ультраструктура эпителиоидных клеток типа А при БЦЖ-гранулематозе и введении лизосомотропной формы изониазида/ В. А. Шкурупий, М. А. Козяев, А. П. Надеев// Бюл. эксперим. биол мед. 2006 - Т. 141, №4-С. 474-477.

94. Шкурупий В. А. Изменения гранулемы при лечении туберкулеза пролонгированной формой изониазида в эксперименте/ В. А. Шкурупий, Т. Г. Чернова, Ю. Н. Курунов// Пробл. туберкулеза. 1993. - №1. - С. 38-41.

95. Шкурупий В. А. Ультраструктура эпителиоидных клеток в динамике формирования туберкулезной гранулемы / В. А. Шкурупий, Ю. Н. Курунов, Т. Г. Чернова // Пробл. туберкулеза. 1994. - №1. - С. 40-42.

96. Шкурупий В. А. Антибактериальная эффективность пролонгированной лекарственной формы изониазида в эксперименте/ В. А. Шкурупий, Ю. Н. Курунов, С. А. Архипов// Пробл. туберкулеза. 1997. — №2 - С. 54-56.

97. Шкурупий В. А. Морфологическое исследование эффективности композиций из изониазида и диальдегиддекстрана при лечении мышей с БЦЖ-гранулематозом/ В. А. Шкурупий, М. А. Козяев, О. В. Потапова// Бюл. эксперим. биол. мед. 2008. - Прилож. №1. - С. 105-108.

98. Шкурупий В. А. Сравнительная оценка влияния нанолипосом с окисленными декстранами на перитонеальные клетки т vit.ro/ В. А. Шкурупий, С. А. Архипов, А. В. Троицкий и др.// Бюл. эксперим. биол. мед. 2008. -№1 -С. 123-126.

99. Шкурупий В. А. Туберкулезный гранулематоз. Цитофизиология и адресная терапия. М., Издательство РАМН, 2007. -536 е., ил.

100. Шкурупий В. А. Ультраструктура эпителиоидных клеток типа А при БЦЖ-гранулематозе и введении лизосомотропной формы изониазида/ В. А. Шкурупий, М. А. Козяев, А. П. Надеев// Бюл. эксперим. биол. мед. — 2006. — Т. 141, №4. С. 474-477.

101. Шкурупий В. А. Эффекты модифицированного амфотерицина при системном кандидозе в эксперименте/ В. А. Шкурупий, В. Г. Селятицкая, Д. Д. Цырендоржиев и др.// Бюл. эксперим. биол. мед. 2007. - Т. 143. - №4. — С. 367-369.

102. Штерн Л. С. Непосредственная питательная среда органов и тканей. -Избр. тр. М: Изд-во АН СССР, 1960. 133 с.

103. Abbott N. J. Astrocyte-endothelial interactions and blood-brain barrier permeability// J. Anat. 2002. - Vol. 200. - P. 629-638.

104. Abbott N. J. Astrocyte-endothelial interactions at the blood-brain barrier/ N. J. Abbott, L. Ronnback, E. Hansson// Nat. Rev. Neurosci. 2006. - Vol. 7. - P. 41-53.

105. Akashi T. The role of the cytoskeleton in the polarized growth of the germ tube in Candida albicans/ T. Akashi, T. Kanbe, K. Tanaka// Microbiology. 1994. - Vol. 140, №2.-P. 271 -80.

106. Alam M. I. Strategy for effective brain drug delivery/ M. I. Alam, S. Beg, A. Samad, S. Baboota, K. Kohli, J. Ali, A. Ahuja, M. Akbar// Eur. J. Pharm. Sci. 2010. -Vol. 40, №5.-P. 385-403.

107. Algar V. Infections in the immunocompromised host/ V. Algar, V. Novelli// Paediatrics and child health. 2007. - Vol. 17, №4. - P. 911-2.

108. Aloisi F. Immune Function of Microglia// Glia. 2001. - Vol. 36, №2. - P. 165-179.

109. Anderson J. M. Differences in actin localization during bud and hypha formation in the yeast Candida albicans/ J. M. Anderson, D. R. Soil// J. Gen. Microbiol. 1986. - Vol. 132, №7. - P. 2035-47.

110. Avila-Aguero M. L. Risk factors for Candida infections in a neonatal intensive care unit in Costa Rica/ M. L. Avila-Aguero, A. Canas-Coto, R. Ulloa-Gutierrez, M. A. Caro, B. Alfaro, M. M. Paris// Int. J. Infect. Dis. 2005. - Vol. 9. - P.90-95.

111. Baddley J. W. Invasive mold infections in a allogeneic bone marrow transplantation recipients/ J. W. Baddley, T. P. Stroud, D. Salzman, P. G. Pappas// Clin. Infect. Dis. 2001. - Vol.32. - P. 1319-24.

112. Badiee P. Study on invasive fungal infections in immunocompromised patients to present a suitable early diagnostic procedure/ P. Badiee, P. Kordbacheh, A.

113. Alborzi// International Journal of Infectious Diseases. 2009. - Vol. 13, №1. - P. 97102.

114. Balabanov R. Role of the CNS microvascular pericyte in the blood-brain barrier/ R. Balabanov, P. Dore-Duffy// J. Neurosci. Res. 1998. - Vol. 53. - P. 637644.

115. Bär W. Diagnosis of systemic Camdida infections in patients of intensive care unit. Significance of serum antigens and antibodies/ W. Bär, H. Hecker// Mycoses. -2002.-Vol. 45.-P. 22-28.

116. Barres B. A. The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease// Neuron. 2008. - Vol. 60, №3. - P. 430-40.

117. Bartnicki-Garcia S. Mathematical analysis of the cellular basis of fungal dimorphism. In: Vanden Bossche et al., eds. Dimorphic Fungi in biology and medicine/ S. Bartnicki-Garcia, G. Gierz//NY: Plenum Press, 1993. — P. 133—144.

118. Beal M. F. Do defects in mitochondrial energy metabolism underlie the pathology of neurodegenerative diseases?/ M. F. Beal, B. Hyman, W. Korochetz// Trend Neurosci. 1993.-Vol. 16, №4.-P. 125-131.

119. Behmanesh S. Mechanisms of endothelial cell swelling from lactacidosis studied in vitro/ S. Behmanesh, O. Kempski// Amer. J. Physiol. 2000. - Vol. 279, №4.-P. 1512-1517.

120. Belanger P. H. Endocytosis of Candida albicans by vascular endothelial cells is associated with tyrosine phosphorylation of specific host cell proteins/ P. H. Belanger, D. A. Johnston, R. A. Fratti// Cell. Microbiol. 2002. - Vol. 4, №12 - P. 805-812.

121. Bellocchio S. The contribution of the Toll-like/IL-1 receptor superfamily to innate and adaptive immunity to fungal pathogens in vivo/ S. Bellocchio, C. Montagnoli, S. Bozza// J. Immunol. 2004. -Vol. 172. - P. 3059-3069.

122. Ben-Abraham R. Predictors of adverse outcome from candidal infection in a tertiary care hospital/ R. Ben-Abraham, N. Keller, N. Teodorovitch// J. Infect. -2004. Vol. 49. - P.317-323.

123. Benchekroun A. Urinary candidiasis revealed by ureteral obstruction: report of 2 cases/ A. Benchekroun, M. Alami, M. Ghadouan// Ann. Urol. 2000. - Vol.34, №3. - P.171-174.

124. Beno D. W. Growth inhibition of Candida albicans hyphae by CD8+ lymphocytes/ D. W. Beno, A. G. Stever, H. L. Mathews// J. Immunol. 1995. - Vol. 154, №10.-P. 5273-81.

125. Birze C. Molecular Genetics and Dimorphism in Candida albicans. In: Bennet J et al., eds. New Strategies in Fungal Disease/ C. Birze, W. Fonzi, S. Saporito -Edinburgh: Churchill Livingstone. 1992. - Vol. 22. - P. 7 - 11.

126. Bjorkhem I. Brain cholesterol: long secret life behind a barrier/1. Bjorkhem, S. Meaney// Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. - № 24. - P. 806-815.

127. Blanco J. L. Immune response to fungal infections/ J. L. Blanco, M. E. Garcia// Veterinary Immunology and Immunopathology. 2008. - Vol. 125. - P. 47-70.

128. Blot S. I. Estimating attributable mortality of candidemia: clinical judgement vs matched cohort studies/ S. I. Blot, K. H. Vandewoude// Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2003. - Vol. 22, №2. - P. 132-3.

129. Borg M. Demonstration of fungal proteinase during phagocytosis of Candida albicans and Candida tropicalis/ M. Borg, R. Ruchel// J. Med. Vet. Mycol. 1990. -Vol. 28.-P.13—14.

130. Boros D. L. Granulematous infections and inflamations: cellular and molecular mechanisms/ ed. D.L. Boros Washington.: ASM Press. - 2003. - 330 p.

131. Borro J. M. Efficiency and safety of inhaled amphotericin B lipid complex (Abelcet) in the prophylaxis of invasive fungal infections following lung transplantation/ J. M. Borro, A. Sole, M. de la Torre// Transplant Proc. 2008. -Vol.40, №9.-P. 3090-93.

132. Boucher H. W. Newer systemic antifungal agents : pharmacokinetics, safety and efficacy/ H. W. Boucher, A. H. Groll, C. C. Chiou, T. J. Walsh // Drugs. 2004. -Vol.64, №18.-P. 1997-2020.

133. Braun B. R. Control of filament formation in Candida albicans by the transcriptional repressor TUP1/ B. R. Braun, A. D. Johnson// Science. 1997. - Vol. 277.-P. 105-109.

134. Brightman M. W. Junctions between intimately apposed cell membranes in the vertebrate brain/ M. W. Brightman, T. S. Reese// J. Cell. Biol. 1969. - Vol. 40. - P. 648-677.

135. Brock M. Physiology and Metabolic Requirements of Pathogenic Fungi Human and Animal Relationships// 2nd Edition The Mycota VI. 2008.

136. Brown A. D. Compatible solutes and extreme water stress in eukaryotic microorganisms// Adv. Microb. Physiol. 1978. - Vol. 17. - P. 181-242.

137. Brown A. J. Morphogenetic signaling pathways in Candida albicans. In: Calderone RA, eds. Candida and Candidiasis Washington, DC: Am. Soc. Microbiol. -2001.-P. 95- 106.

138. Budd S. L. Mechanisms of neuronal damage in brain hypoxia/ischemia: focus on the role of mitochondrial calcium accumulation// Pharmacol. Ther. 1998. - Vol. 80, № 2. - P. 203-229.

139. Burudi E. M. Identification and functional characterization of the mannose receptor in astrocytes/ E. M. Burudi, S. Riese, P. D. Stahl// Glia. 1999. - Vol. 25, № 1.-P. 44-55.

140. Burudi E. M. Regional and cellular expression of the mannose receptor in the post-natal developing mouse brain/ E. M. Burudi, A. Regnier-Vigouroux// Cell Tissue Res. 2001. - Vol.303, №3. - P.307-17.

141. Candela P. Physiological pathway for low-density lipoproteins across the blood-brain barrier: transcytosis through brain capillary endothelial cells in vitro/ P. Candela, F. Gosselet, F. Miller// Endothelium. 2008. - Vol.15, №5-6. - P. 254-64.

142. Caston-Osorio J. J. Epidemiology of invasive fungal infection/ J. J. Caston-Osorio, A. Rivero, J. Torre-Cisneros// International Journal of Antimicrobial Agents. 2008. - Vol. 32, №2. - P. 103-109.

143. Castro B. A. The immunocompromised pediatric patient and surgery// Best Practice & Research Clinical Anesthesiology. 2008. - Vol. 22, No. 3. - P. 611626.

144. Chapman R. L. Invasive Neonatal Candidiasis: An Overview/ R. L. Chapman, R. G. Faix// Seminars in Perinatology. 2003. - Vol 27, №5. - P. 352-356.

145. Chattaway F. W. Changes in the cell surface of the dimorphic forms of Candida albicans by treatment with hydrolytic enzymes/ F. W. Chattaway, S. Shenolikar, J. O'Reilly, A. J. Barlow// J. Gen. Microbiol. 1976. - Vol. 96, №2. - P. 335—47.

146. Chen T. L. Clinical characteristics, treatment and prognostic factors of candidal meningitis in teaching hospital in Taiwan/ T. L. Chen, H. P. Chen, C. P. Fung// Scand. J. Infect. Dis. 2004. - Vol. 6, №2. - P. 124-130.

147. Coleman D. C. Importance of Candida species other than Candida albicans as opportunistic pathogens/ D. C. Coleman, M. G. Rinaldi, K. A. Haynes// Med. Mycol. 1998.-Vol. 36, №1.-P. 156-65.

148. Colina A.R. Evidence for degradation of gastrointestinal mucin by Candida albicans secretory aspartyl proteinase/ A.R. Colina, F. Aumont, N. Deslauriers, P. Belhumeur, L. de Repentigny// Infect. Immun. 1996. - Vol.64, №11. - P. 4514-9.

149. Colon M. D. Antifungal and cytokine producing activities of CD8 + T lymphocytes from HIV-1 infected individuals/ M. D. Colon, N. Toledo, C. L.// Valiente Bol. Asoc. Med. 1998. - Vol. 90, №1-3. - P. 21-6.

150. Dammert P. Treatment of cryptococcal meningitis in Peruvian AIDS Patients using amphotericin B and fluconazole/ P. Dammert, B. E. Ticona, A. Llanos-Cuentas, L. Huaroto, V. M. Chavez, P. E. Campos// Journal of Infection. 2008. - № 57. - P. 260-265.

151. Denora N. Recent advances in medicinal chemistry and pharmaceutical technology-strategies for drug delivery to the brain/ N. Denora, A. Trapani, V. Laquintana// Curr. Top. Med. Chem. -2009. Vol.9, №1. - P. 182-96.

152. Dongari-Bagtzoglou A. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor responses of oral epithelial cells to Candida albicans/ A. Dongari-Bagtzoglou, H. Kashleva// Oral Microbiol. Immunol. 2003. - Vol.18. - P. 165-170.

153. Edmond M. B. Nosocomial bloodstream infections in United States hospitals: a three-year analysis/ M. B. Edmond, S. E. Wallace, D. K. McClish// Clin. Infect. Dis. 1999. - Vol. 29, №2. - P. 239-44.

154. Eggimann P. Management of Candida species infections in critically ill patients/ P. Eggimann, J. Garbino, D. Pittet// Lancet Infect. Dis. 2003. - Vol.3, №12.-P. 772-85.

155. Engelhardt B. The blood-central nervous system barriers actively control immune cell entry into the central nervous system// Curr. Pharm. Des. —2008. — Vol. 14, №16.-P. 1555-65.

156. Engelhardt B. Regulation of immune cell entry into the central nervous system// Results Probl. Cell. Differ. 2006. - Vol. 43. - P. 259-80.

157. Engervall P. Infections in neutropenic patients I: Aetiology/ P. Engervall, M. Bjorkholm// Medical Oncology. 1995. - Vol. 12. - P. 251-256.

158. Erb-Downward J. R. Characterization of Prostaglandin E2 Production by Candida albicans/ J. R. Erb-Downward, M. C. Noverr// Infection and Immunity. -2007. Vol. 75, № 7. - P. 3498-3505.

159. Espada R. Efficacy of alternative dosing regimens of poly-aggregated amphotericin B/ R. Espada, S. Valdespina, G. Molero, M. A. Dea, M. P. Ballesteros, J. J. Torrado// International Journal of Antimicrobial Agents. 2008. - Vol. 32. - P. 55-61.

160. Fadok V. A. A receptor for phosphatidylserine specific clearance of apoptotic cells/ V. A. Fadok, D. L. Bratton, D. M. Rose// Nature. 2000. - Vol. 405. - P. 8590.

161. Faix R. G. Central nervous system candidiasis in the high-risk neonate/ R. G. Faix, R. L. Chapman// Semin. Perinatol. 2003. - Vol.27, №5. - P. 384-92.

162. Filler S. G. Candida-host cell receptor-ligand interactions// Curr. Opin. Microbiol. 2006. - P. 9333-339.

163. Filler S. G. Fungal invasion of normally non-phagocytic host cells/ S. G. Filler, D. C. Sheppard// PLoS Pathog. 2006. - Vol. 2, №12. - P. 129-40.

164. Filler S. G. Penetration and damage of endothelial cells by Candida albicans/ S. G. Filler, J. N. Swerdloff, C. Hobbs, P.M. Luckett// Infect. Immun. 1995. - Vol. 63, №3. — P. 976-83.

165. Fitzner N. Human skin endothelial cells can express all 10 TLR genes and respond to respective ligands/ N. Fitzner, S. Clauberg, F. Essmann// Clin. Vaccine Immunol.-2008.-Vol. 15, №1.-P. 138-146.

166. Fonzi W. A. PHR1 and PHR2 of Candida albicans encode putative glycosidases required for proper cross-linking of beta-1,3- and beta-l,6-glucans// J. Bacteriol.- 1999.-Vol. 181.-P. 7070-7079.

167. Fotedar R. Comparison of phospholipase and proteinase activity in Candida albicans and C. dubliniensis/ R. Fotedar, S. S. A. Al-Hedaithy// Mycoses. 2005. -Vol. 48. - P. 62-67.

168. Frattarelli D. A. C. Antifungals in systemic neonatal candidiasis/ D. A. C. Frattarelli, M. D. Reed, G. P. Giacoia// Drugs. 2004. - Vol. 64, №9. - P. 949-68.

169. Fratti R. A. Gamma interferon protects endothelial cells from damage by Candida albicans by inhibiting endothelial cell phagocytosis/ R. A. Fratti, M. A. Ghannoum, J. E. Edwards, S. G. Filler// Infect. Immun. 1996. - Vol. 64, №11. - P. 4714-8.

170. Fridkin S. K. Changing incidence of Candida bloodstream infections among NICU patients in the United States: 1995-2004/ S. K. Fridkin, D. Kaufman, J. R. Edwards// Pediatrics. 2006. - Vol. 117. - P. 1680-1687.

171. Gabathuler R. Approaches to transport therapeutic drugs across the blood-brain barrier to treat brain diseases// Neurobiol. Dis. 2010. - Vol. 37, №1. - P. 48-57.

172. Gafter-Gvili A. Treatment of invasive candidal infections: systematic review and meta-analysis/ A. Gafter-Gvili, L. Vidal, E. Goldberg // Mayo Clin. Proc. 2008. -Vol. 83, №9. -P. 1011-21.

173. Gale E.F. Nature and development of phenotypic resistance to amphotericin B in Candida albicans// Adv. Microb. Physiol. 1986. - Vol. 27. - P. 277—320.

174. Gasque P. Role of the complement system in human neurodegenerative disorders: proinflammatory and tissue remodeling activities/ P. Gasque, J. W. Neal, S. K. Singhrao// Mol. Neurobiol. 2002. - Vol. 25, №1. - P. 1-17.

175. Gehrmann J. Microglia: intrinsic immuneffector cell of the brain/ J. Gehrmann, Y. Matsumoto, G. W. Kreutzberg// Brain Research Reviews. 1995. - Vol. 20, №3. -P. 269-287.

176. Giese H. Effect of MK-801 and U83836E on a porcine brain capillary endothelial cell barrier during hypoxia/ H. Giese, K. Mertsch, I. E. Blasig// Neurosci. Lett.- 1995.-Vol. 191.-P. 169-172.

177. Glee P. M. Inhibition of hydrophobic protein-mediated Candida albicans attachment to endothelial cells during physiologic shear flow/ P. M. Glee, J. E. Cutler, E. E. Benson// Infect. Iramun. 2001. - Vol. 69. - P.2815-2820.

178. Gonzalez-Mariscal L. Tight junction proteins/ L. Gonzalez-Mariscal, A. Betanzos, P. Nava, B. E. Jaramillo// Prog. Biophys. Mol. Biol. 2003. - Vol. 81. - P. 1-44.

179. Gow N. A. A hyphal-specific chitin synthase gene (CHS2) is not essential for growth, dimorphism, or virulence of Candida albicans/ N. A. Gow, P. W. Robbins, J. W. Lester//Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1994. - Vol.91, №13. - P. 6216-20.

180. Groger M. Dermal microvascular endothelial cells express the 180-kDa macrophage mannose receptor in situ and in vitro/ M. Groger, W. Holnthoner, D. Maurere// J. Immunol. 2000. - Vol. 165. - P. 5428-5434.

181. Groll A. H. Fungal infections in the pediatric patient / In: Anaissie E. J., McGinnis M. R., Pfaller M. A., editors/ A. H. Groll, T. J. Walsh// Clinical mycology. 1 st ed. New York: Churchill Livingstone. - 2003. - P. 417-42.

182. Groll A. H. Posaconazole: clinical pharmacology and potential for management of fungal infections/ A. H. Groll, T. J. Walsh// Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2005. - Vol. 3, №4. - P. 467-87.

183. Grubb S. E. W. Candida albicans-Endothelial Cell Interactions: a Key Step in the Pathogenesis of Systemic Candidiasis/ S. E. W. Grubb, C. Murdoch, P. E. Sudbery// Infect. Immun. 2008. - Vol.76, №10. - P. 4370-4377.

184. Guery B. Management of invasive candidiasis and candidemia in adult non-neutropenic intensive care unit patients: Part I. Epidemiology and diagnosis/ B. Guery, M. C. Arendrup, G. Auzinger// Intensive Care Med. 2009. - Vol. 35, №1. -P. 55-62.

185. Haseloff R. F. In search of the astrocytic factor(s) modulating blood-brain barrier functions in brain capillary endothelial cells in vitro/ R. F. Haseloff, I. E. Blasig, H. C. Bauer, H. Bauer// Cell Mol. Neurobiol. 2005. -Vol. 25, №1. - P. 2539.

186. Hauwel M. Innate (inherent) control of brain inflammation and brain repair: role of microglia, astrocytes, «protective» glial stem cells and stromal ependymal cells/ M. Hauwel, E. Furon, E. Canova// Brain Res. Rev. 2005. - Vol. 48, №2. - P. 220-233.

187. Hawkins B. T. The blood-brain barrier/neurovascular unit in health and disease/ B. T. Hawkins, T. P. Davis// Pharmacol. Rev. 2005. - Vol. 57. - P. 173185.

188. Hendriks L. Phylogenetic analysis of five medically important Candida species as deduced on the basis of small ribosomal subunit RNA sequences/ L. Hendriks, A. Goris, Y. Van de Peer// J. Gen. Microbiol. 1991. - Vol. 37, №5. - P. 1223-30.

189. Hohl T. M. Immunity to fungi/ T. M. Hohl, A. Rivera, E. G. Pamer// Current Opinion in Immunology. 2006. - Vol. 18. - P. 465-472.

190. Holash J. A. Re-evaluation the role of astrocytes in blood-brain barrier induction/ J. A. Holash, D. M. Noden, P. A. Stewart// Dev. Dynam. 1993. - Vol. 197.-P. 14-25.

191. Hope W. W. Effect of neutropenia and treatment delay on the response to antifungal agents in experimental disseminated candidiasis/ W. W. Hope, G. L. Drusano, C. B. Moore// Antimicrob. Agents. Chemother. 2007. - Vol. 51. - P. 285295.

192. Jennings D. B. Roles for mannitol and mannitol dehydrogenases in active oxygen-mediated plant defense/ D. B. Jennings, M. Ehrenshaft, D. M. Pharr, J. D. Williamson//Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1998. - Vol. 95. - P. 15129-15133.

193. Jouault T. Candida albicans phospholipomannan is sensed through Toll-like receptors/ T. Jouault, S. Ibata-Ombetta, O. Takeuchi, P. A. Trinel, P. Sacchetti, P. Lefebvre, S. Akira, D. Poulain// J. Infect. Dis. 2003. - Vol. 188. - P. 165-172.

194. Kalin M. Clinical and laboratory diagnosis of invasive infection in neutropenic patients/ M. Kalin, B. Petrini// Medical Oncology. 1996. - Vol. 13. - P. 223-231.

195. Kaminishi H. Degradation of humoral host defense by Candida albicans proteinase/ H. Kaminishi, H. Miyaguchi, T. Tamaki, N. Suenaga, M. Hisamatsu, I. Mihashi, H. Matsumoto, H. Maeda, Y. Hagihara// Infect. Immun. 1995. - Vol. 63, №3. - P. 984 -8.

196. Kauffnann S. H. E. Heat shock proteins and the immune response// Immunol. Today. 1990.-Vol. 11.-P.129-136.

197. Kimelberg H.K. Current concepts of brain edema. Review of laboratory investigations// J. Neurosurg. 1995. - Vol. 83. - P. 1051-1059.

198. Kirazl N. Phenotypic variation and antifungal susceptibility patterns of Candida albicans strains isolated from neutropenic patients/ N. Kirazl, Ö. Ang, Y. Akgün, Z. Erturan// Mycoses. 2000. - Vol. 43. - P. 119-123.

199. Kirkpatric C. H. Chronic mucocutaneous candidiasis// J. Am. Acad. Dermatil.-1994. №31.-P.514-517.

200. Kitz D. J. The effect of a mannose binding protein on macrophage interactions with Candida albicans/ D. J. Kitz, P. D. Stahl, J. R. Little// Cell. Mol. Biol. 1992. -Vol. 38, №4.-P. 407-12.

201. Klingspor L. Deep Candida infection in children with leukaemia: clinical presentations, diagnosis and outcome/ L. Klingspor, G. Stintzing, J. Tollemar // Acta Padiatr. 1997. - Vol. 86. - P. 30-6.

202. Klotz S. A. Adherence and penetration of vascular endothelium by Candida yeasts/ S. A. Klotz, D. J. Drutz, J. L. Harrison, M. Huppert// Infect. Immun. 1983. -Vol. 42.-P. 374-384.

203. Koh A. Y. Mucosal damage and neutropenia are required for Candida albicans dissemination/ A. Y. Koh, J. R. Kohler, K. T. Coggshall, N. Van Rooijen, G. B. Pier// PLoS Pathog. 2008. - Vol.4. - P. 35-40.

204. Kontoyiannis D. Systemic mycosis in the immunocompromised host: an update in antifungal therapy/ D. Kontoyiannis, E. Mantadakis, G. Samonis// J. Hosp. Infec. 2003. - Vol. 53. - P. 243-258.

205. Kretschmar M. Activated CD8+ T cells are involved in elimination of Candida albicans from the livers of mice/ M. Kretschmar, C. Jung, E. Fontagnier, B. Quade, T. Nichterlein, H. Hof// Mycoses. 1997. - Vol. 40, №1-2. - P. 41-6.

206. Kretschmar M. Inefficient T cell memory in the brain of mice infected with Candida albicans/ M. Kretschmar, A. Hem, G. Geginat et al.// J.Neuroimmunol. -2000.-Vol. 105, №2.-P. 161-168.

207. Kruppa M. The histidine kinases of Candida albicans: regulation of cell wall mannan biosynthesis/ M. Kruppa, M. A. Jabra-Rizk, T. F. Meiller, R. Calderone// FEMS Yeast Research. 2004. - Vol. 4. - P. 409-416.

208. Kumamoto C. A. Vinces Contributions of hyphae and hypha-co-regulated genes to Candida albicans virulence/ C. A. Kumamoto, M. D. Vinces// Cellular Microbiology.-2005.-Vol. 7, №11.-P. 1546-1554.

209. Lackner H. Management of brain abscesses in children treated for acute lymphoblastic leukemia/ H. Lackner, P. Sovinz, M. Benesch, F. Smolle-Jüttner, M. Mokry, W. Schwinger, A. Moser, C. Urban// Pediatr. Blood Cancer. 2009. - Vol. 52, №3 -P. 408-11.

210. Lanternier F. Liposomal amphotericin B: what is its role in 2008?/ F. Lanternier, O. Lortholary// Clin Microbiol Infect. 2008. - Vol. 1, №4. - P. 71-83.

211. Lindner A. Magnetic resonance image findings of spinal intramedullary abscess caused by Candida albicans: Case report/ A. Lindner, G. Becker, M. Warmuth-Metz, B. C. Schalke, U. Bogdahn, K. V. Toyka// Neurosurgery. 1995. -Vol. 36.-P. 411-2.

212. Liu H. Co-regulation of pathogenesis with dimorphism and phenotypic switching in Candida albicans, a commensal and a pathogen// Int. J. Med. Microbiol. 2002. - Vol. 292. - P. 299-311.

213. Liu H. Transcriptional control of dimorphism in Candida albicans// Curr. Opin. Microbiol. -2001. Vol. 4. - P. 728-735.

214. Lo H. J. Nonfilamentous C. albicans mutants are avirulent/ H. J. Lo, J. R. Kohler, B. Di Domenico, D. Loebenberg, A. Cacciapuoti, G. R. Fink// Cell. — 1997. -Vol. 90.-P. 939-949.

215. Lockhart S. R. Natural defenses against Candida colonization breakdown in the oral cavities of the elderly/ S. R. Lockhart, S. Joly, K. Vargas, J. Swails-Wenger, L. Enger, D. R. Soil// J. Dent. Res. 1999. - Vol. 78, №4. - P. 857-68.

216. Lossinsky A. S. Structural pathways for macromolecular and cellular transport across the blood-brain barrier during inflammatory conditions. Review/ A. S. Lossinsky, R. R. Shivers// Histol. Histopathol. 2004. - Vol. 19, №2. - P. 535-64.

217. Love S. Oxidative stress in brain ischemia// Brain Pathol. — 1999. — Vol. 9, №1. P. 119-131.

218. Ludviksson B. R. Candida albicans meningitis in a child with myeloperoxidase deficiency/ B. R. Ludviksson, O. Thorarensen, T. Gudnason, S. Halldorsson// Pediatr. Infect. Dis. J. -1993. Vol. 12, №2. - P. 162-4.

219. Maesaki S. Drug delivery system of anti-fungal and parasitic agents// Curr. Pharm. Des. 2002. - Vol. 8, №6. - P. 433-40.

220. Magistretti P. J., Pellerin L. Regulation by neurotransmitters of glial energy metabolism // Adv Exp Med Biol. 1997. Vol. 429. - P. 137-43.

221. Mahmoudabadi A. Z. Comparison of polar lipids from yeast and mycelial forms of Candida albicans and Candida dubliniensis/ A. Z. Mahmoudabadi, D. B. Drucker// Mycoses. 2006. - Vol. 49. - P. 18-22.

222. Marodi L. Mechanisms of host defense against Candida species. I. Phagocytosis by monocytes and monocyte-derived macrophages/ L. Marodi, H. M. Korchak, R. B. Johnston// J. Immunol. 1991. - Vol. 146, №8. - P. 2783-9.

223. Marodi L., Tournay C., Kaposzta R., Johnston R.B., Moguilevsky N. Augmentation of human macrophage candidacidal capacity by recombinant human myeloperoxidase and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor/ L. Marodi,

224. C. Tournay, R. Kaposzta, R. B. Johnston, N. Moguilevsky// Infect. Immun. 1998. -Vol.66, №6.-P. 2750-4.

225. Martin D. Candida species distribution in bloodstream cultures in Lyon, France, 1998-2001/ D. Martin, F. Persat, M. A. Piens, S. Picot // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2005. - Vol. 24. - P. 329-333.

226. Martins L. F. Lithium-mediated suppression of morphogenesis and growth in Candida albicans/ L. F. Martins, M. Montero-Lomeli, C. A. Masuda, F. S.A. Fortes, J. O. Previato, L. Mendonca-Previato// FEMS Yeast Res. 2008. - Vol. 8, №4. - P. 615-21.

227. Metcalf S. C. Improved outcomes associated with advances in therapy for invasive fungal infections in immunocompromised hosts/ S. C. Metcalf, D. H. Dockrell// Journal of Infection. 2007. - Vol. 55. - P. 287-299.

228. Moen M. D. Liposomal amphotericin B: a review of its use as empirical therapy in febrile neutropenia and in the treatment of invasive fungal infections/ M.

229. D. Moen, K. A. Lyseng-Williamson, L. J. Scott// Drugs. 2009. - Vol. 69, №3. - P. 361-92.

230. Mogensen E. C02 Sensing and Virulence of Candida albicans Human and Animal Relationships/ E. Mogensen, F. A. Mühlschlegel// 2nd Edition The Mycota VI.-2008.

231. Moody D. M. The blood-brain barrier and blood-cerebral spinal fluid barrier// Semin. Cardiothorac. Vase. Anesth. 2006. - Vol.10, №2. - P. 128-31.

232. Moraes-Vasconcelos D. Characterization of the cellular immune function of patients with chronic mucocutaneous candidiasis/ D. Moraes-Vasconcelos, N. M. Orii, C. C. Romano// Clin. Exp. Immunol. 2001. - Vol.123, №2. - P. 247-253.

233. Moylett E. H. Neonatal Candida meningitis// Semin. Pediatr. Infect. Dis. -2003.-Vol.14, №2.-P. 115-22.

234. Mühlschlegel F.A. PHR2 of Candida albicans encodes a functional homolog of the pHregulated gene PHR1 with an inverted pattern of pHdependent expression/ F. A. Mühlschlegel, W. A. Fonzi// Mol. Cell. Biol. 1997. - Vol. 17. - P. 5960-5967.

235. Muñoz P. Treatment of invasive fungal infections in immunocompromised and transplant patients: AmBiLoad Trial and other new data./ P. Muñoz, J. Guinea, M. T. Narbona, E. Bouza// Int. J. Antimicrob. Agents. 2008. - №32. - P. 125.

236. Nadir E. Images in clinical medicine. Candida albicans in a peripheral-blood smear/ E. Nadir, M. Kaufshtein. -N. Engl. J. Med. 2005. - Vol. 353, №9. - P. 3423.

237. Nakagawa S. A new blood-brain barrier model using primary rat brain endothelial cells, pericytes and astrocytes/ S. Nakagawa, M. A. Deli, H. Kawaguchi,

238. T. Shimizudani, T. Shimono, A. Kittel, K. Tanaka, M. Niwa// Neurochem. Int. -2008.-Vol. 7.-P. 760-4.

239. Nakayama H. Histopathological study of candidal infection in the central nervous system/ H. Nakayama, K. Shibuya, M. Kimura, M. Ueda, S. Iwabuchi Nippon Ishinkin Gakkai Zasshi. 2010 - Vol. 51, № 1. - P. 31 -45.

240. Navarro-Garcia F. Virulence genes in the pathogenic yeast Candida albicans/ F. Navarro-Garcia, M. Sanchez, C. Nombela, J. Pia// FEMS Microbiology Reviews. -2001.-Vol. 25.-P. 245-268.

241. Nehls V. Heterogeneity of microvascular pericytes for smooth muscle type alpha-actin/ V. Nehls, D. J. Drenckhahn// Cell Biol. 1991. - Vol. 113. - P. 147154.

242. Netea M. G. Toll-like receptors and the host defense against microbial pathogens: bringing specificity to the innate-immune system/ M. G. Netea, C. A. Van Der Graaf, J. W. M. Van der Meer, B. J. Kullberg// J. Leukoc. Biol. 2004. -Vol.75.-P. 749-755.

243. Nicolazzo J. A. Drug Transport Across the Blood-Brain Barrier and the Impact of Breast Cancer Resistance Protein (ABCG2)/ J. A. Nicolazzo, K. Katneni// Curr. Top. Med. Chem.-2009.-Vol.9, №1.-P. 130-47.

244. Niewerth M. Candida albicans and the principle of opportunism. An essay/ M. Niewerth, H. C. Korting// Mycoses. 2002. - Vol. 45. - P. 253-258.

245. Niewerth M. Phospholipases of Candida albicans/ M. Niewerth, H. C. Korting// Mycoses. 2001. - Vol.44. - P. 361-367.

246. Okuda T. Myeloperoxidase deficiency as a predisposing factor for deep mucocutaneous candidiasis: a case report/ T. Okuda, T. Yasuoka, N. Oka// J. Oral. Maxillofac. Surg. 1991. - Vol.49, №2. - P. 183-6.

247. Opitz B. Extra- and intracellular innate immune recognition in endothelial cells/ B. Opitz, S. Hippenstiel, J. Eitel, N. Suttorp// Thromb. Haemost. 2007. - Vol. 98.-P. 319-326.

248. Palma-Carlos A. G. Chronic mucocutaneous candidiasis revisited/ A. G. Palma-Carlos, M. L. Palma-Carlos// Mayo Clin. Proc. 2000. - Vol.75, №8. - P. 853-855.

249. Pappas P. Guidelines for treatment of candidiasis/ P. Pappas, J. Rex, J. Sobel// Clin. Infect. Dis. 2004. - Vol. 38. - P. 161-89.

250. Pardridge W. M. Blood-brain barrier biology and methodology// J. Neurovirol. 1999.-Vol.5.-P. 556-569.

251. Paspalas C. D. Ultrastructural relationships between noradrenergic nerve fibers and non-neural elements in the rat cerebral cortex/ C. D. Paspalas, G. C. Papadopoulos// Glia. 1996. - Vol. 17. - P. 133-146.

252. Patel M. M. Getting into the brain: approaches to enhance brain drug delivery/ M. M. Patel, B. R. Goyal, S. V. Bhadada, J. S. Bhatt, A. F. Amin// CNS Drugs. -2009. Vol.23, №1. - P.35-58.

253. Patel R. Amphotericin B colloidal dispersion// Expert. Opin. Pharmacother. -2000. Vol.1, №3. - P. 475-88.

254. Pathan S. A. CNS drug delivery systems: novel approaches/ S. A. Pathan, Z. Iqbal, S. M. Zaidi, S. Talegaonkar, D. Vohra, G. K. Jain, A. Azeem, N. Jain, J.R. Lalani, R.K Khar., F.J. Ahmad// Recent. Pat. Drug. Deliv. Formul. 2009. - Vol.3, №1.-P. 71-89.

255. Paulson O. B. Does the release of potassium from astrocyte endfeet regulate cerebral blood flow?/ O. B. Paulson, E. A. Newman // Science. 1987. - № 237. - p. 896-898.

256. Pauw B. Epidemiology and frequency of systemic fungal infections In book: Serious Candida infections: diagnosis, treatment, and prevention Ed B.Pauw, G.Bodey Health Communications Press. 1998. - P. 1-3.

257. Pfaller M. A. Clinical evaluation of a frozen commercially prepared microdilution panel for antifungal susceptibility testing of seven antifungal agents, including the new triazoles posaconazole, ravuconazole, and voriconazole/ M. A.

258. Pfaller, D. J. Diekema, S. A. Messer, L. Boyken, H. Huynh, R. J. Hollis// J. Clin. Microbiol. 2002. - Vol. 40, №5. - P. 1694-7.

259. Pfaller M. A. Epidemiology of invasive candidiasis: a persistent public health problem/ M. A. Pfaller, D. J. Diekema// Clin. Microbiol. Rev. 2007. - Vol. 20. - P. 133-163.

260. Phan Q. T. Role of hyphal formation in interactions of Candida albicans with endothelial cells/ Q. T. Phan, P. H. Belanger, S. G. Filler// Infect. Immun. 2000. -Vol. 68.-P. 3485-3490.

261. Pollack J. H. The role of glucose in the pH regulation of germ-tube formation in Candida albicans/ J. H. Pollack, T. Hashimoto// J. Gen. Microbiol 1987. -Vol.133, №2.-P. 415—24.

262. Proia L. A. New Antifungal Therapies// Clinical Microbiology Newsletter. -2006. V. 28, № 22. - P. 169-173.

263. Ray T. L., Payne C. D. Scanning electron microscopy of epidermal adherence and cavitation in murine candidiasis: a role for Candida acid proteinase/ T. L. Ray, C. D. Payne// Infect. Immun. 1988. - Vol. 56, №8. - P. 1942—9.

264. Reese T. S. Fine structural localization of a blood brain barrier to exogenous peroxidase/ T. S. Reese, M. J. Karnovsky// J. Cell Biol. 1967. - Vol. 34. - P. 207217.

265. Richardson M. D. Enhanced phagocytosis and intracellular killing of Candida albicans by GM-CSF-activated human neutrophils/ M. D. Richardson, C. E. Brownlie, G. S. Shankland// J. Med. Vet. Mycol. 1992. - Vol.30, №6. - P. 433-41.

266. Romani L. Immunity to Candida albicans: Thl, Th2 cells and beyond// Curr. Opin. Microbiol. 1999. - Vol.2, №4. - P. 363-367.

267. Rubin L. L. The cell biology of the blood-brain barrier// Annu. Rev. Neurosci. -1999.-Vol. 22.-P. 11-28.

268. Ruhnke M. Epidemiology of Candida albicans infections and role of non-Candida-albicans yeasts// Curr. Drug Targets. 2006. - Vol. 7. - P. 495-504.

269. Ruiz-Herrera J. Molecular organization of the cell wall of Candida albicans and its relation to pathogenicity/ J. Ruiz-Herrera, M. Victoria Elorza, E. Valent'm, R. Sentandreu// FEMS Yeast Res. 2006. - Vol. 6. - P. 14-29.

270. Rupp S. Transcriptomics of the Fungal Pathogens, Focusing on Candida albicans Human and Animal Relationships// 2nd Edition The Mycota VI. 2008.

271. Saporito-Irwin S. M. PHR1, a pH-regulated gene of Candida albicans, is required for morphogenesis/ S. M. Saporito-Irwin, C. E. Birse, P. S. Sypherd, W. A. Fonzi// Mol. Cell. Biol. 1995.-Vol.15.-P. 601-613.

272. Schaller M. Hydro lytic enzymes as virulence factors of Candida albicans/ M. Schaller, C. Borelli, H. C. Korting, B. Hube// Mycoses. 2005. - Vol. 48. - P. 365377.

273. Schaller M. Hydrolytic enzymes as virulence factors of Candida albicans/ M. Schaller, C. Borelli, H. C. Korting, B. Hube// Mycoses. 2005. - Vol. 48. - P. 365377.

274. Schroppel K. Suppression of type 2 NO-synthase activity in macrophages by Candida albicans/ K. Schroppel, M. Kryk, M. Herrmann, E. Leberer, M. Rollinghoff, C. Bogdan// Int. J. Med. Microbiol. 2001. - Vol. 290, №8. - P. 659-68.

275. Shepherd V. L. Ingestion of Candida albicans down-regulates mannose receptor expression on rat macrophages/ V. L. Shepherd, K. B. Lane, R. Abdolrasulnia// Arch. Biochem. Biophys. 1997. - Vol.344, №2. - P. 350-6.

276. Shoham S. The immune response to fungal infections/ S. Shoham, S. M. Levitz// British Journal of Haematology. 2005. - Vol. 129. - P. 569-582.

277. Silva G. A. Nanotechnology approaches to crossing the blood-brain barrier and drug delivery to the CNS// BMC Neuroscience. 2008. - Vol.9.- P. 2463-75.

278. Sims C. R. Invasive Candidiasis in Immunocompromised Hospitalized Patients/ C. R. Sims, L. Ostrosky-Zeichner, J. H. Rex// Archives of Medical Research. 2005. - Vol. 36. - P. 660-671.

279. Singh N., Husain S. Infections of the central nervous system in transplant recipients/ N. Singh, S. Husain// Transpl. Infect. Dis. 2000. - Vol.2, №3. - P. 10111.

280. Soni N. Fungal infection/ N. Soni, A. Wagstaff //Current Anaesthesia & Critical Care. 2005. - Vol.16. - P. 231-241.

281. Staub F. Swelling and death of neuronal cells by lactic acid/ F. Staub, B. Mackert, O. Kempski, J. Peters, A. Baethmann// J. Neurol. Sci. 1993. - Vol.119, №1. - P. 79-84.

282. Stein M. Interleukin 4 potently enhances murine macrophage mannose receptor activity: a marker of alternative immunologic macrophage activation/ M. Stein, S. Keshav, N. Harris, S. Gordon// J. Exp. Med. 1992. - Vol.176, №1. - P. 287-92.

283. Stevenson B. R. The tight junction: Morphology to molecules/ B. R. Stevenson, B. H. Keon// Annu. Rev. Cell Dev. Bi. 1998. - Vol.14. - P. 89-109.

284. Stewart P. A. Early structural changes in blood-brain barrier vessels of the rat embryon/ P. A. Stewart, K. Hayakawa// Dev. Brain Res. 1994. - Vol.78. - P. 2534.

285. Sudbery P. The distinct morphogenic states of Candida albicans/ P. Sudbery, N. Gow, J. Berman// Trends Microbiol. 2004. - Vol.12. - P. 317-324.

286. Suzuki S. Immunochemical study of mannan, the antigenic polysaccharide of pathogenic yeasts in man of genus Candida// Yakugaku Zasshi. 1995. - Vol.115, №4. - P. 280-94.

287. Suzuki S. Immunochemical study of mannans of genus Candida. I. Structural investigation of antigenic factors 1, 4, 5, 6, 8, 9, 11, 13, 13b and 34// Curr. Top. Med. Mycol.- 1997. -Vol. 8, №1. P. 257-70.

288. Sykova E. Diffusion in brain extracellular space/ E. Sykova, C. Nicholson// Physiol. Rev. 2008. - Vol.88, №4. - P. 1277-340.

289. Szabo I. Modulation of macrophage phagocytic activity by cell wall components of Candida albicans/ I. Szabo, L. Guan, T. J. Rogers// Cell. Immunol. -1995.-Vol.164, №2.-P. 182-8.

290. Takao S. Role of reactive oxygen metabolites in murine peritoneal macrophage phagocytosis and phagocytic killing/ S. Takao, E. H. Smith, D. Wang, C. K. Chan, G. B. Bulkley, A. S. Klein// Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 271. - P.1278—84.

291. Tavares D. Increased resistance to systemic candidiasis in athymic or interleukin-IO-depleted mice/ D. Tavares, P. Ferreira, M. Arala-Chaves// J. Infect. Dis. 2000. - Vol. 182, №1. - P. 266-273.

292. Thomas S.A. The entry of D-penicillamine2,5enkephalin into the central nervous system: saturation kinetics and specificity/ S. A. Thomas, T. J. Abbruscato, V. J. Hruby, T. P. Davis // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1997. -Vol. 280. - P. 12351240.

293. Tontsch U. Glial cells and neurons induce blood-brain barrier related enzymes in cultured cerebral endothelial cells/ U. Tontsch, H. C. Bauer// Brain Res. 1991. — Vol. 539.-P. 247-253.

294. Torrado J. J. Amphotericin B formulations and drug targeting/ J. J. Torrado, R. Espada, M. P. Ballesteros, S. Torrado-Santiago// J. Pharm. Sci. 2008. - Vol.97, №7. -P. 2405-25.

295. Trick W. E. Secular trend of hospital-acquired candidemia among intensive care unit patients in the United States during 1989-1999/ W. E. Trick, S. K. Fridkin, J. R. Edwards, R. A. Hajjeh, R. P Gaynes// Clin. Infect. Dis. 2002. - Vol.35. - P. 627-30.

296. Tsuchiya T. Serologic aspects on yeast classification/T. Tsuchiya, Y. Fukazava, M. Taguchi, T. Nakase, T. Shinoda// Mycopathol. Mycol. 1974. - Vol. 53,№1.-P. 77-91.

297. Tsukita S. Structural and signalling molecules come together at tight junctions/ S. Tsukita, M. Furuse, M. Itoh// Curr. Opin. Cell Biol. 1999. - Vol.11. - P. 628633.

298. Urban C. F. Neutrophil extracellular traps capture and kill Candida albicans yeast and hyphal forms/ C. F. Urban,U. Reichard, V. Brinkmann, A. Zychlinsky// Cellular Microbiology. 2006. - Vol.8, №4. - P. 668-676.

299. Vázquez-Torres A. Macrophages in resistance to candidiasis/ Vázquez- A. Torres, E. Balish// Microbiol. Mol. Biol .Rev. 1997. - Vol.61, №2. - P. 170-92.

300. Vazquez-Torres A. Nitric oxide enhances resistance of SCID mice to mucosal candidiasis/ A. Vazquez-Torres, J. Jones-Carson, T. Warner, E. Balish// J. Infect. Dis. 1995.-Vol.172, №1.-P. 192-8.

301. Venkatesan P. Evaluation and management of Fungal infections in Immunocompromised patients/ P. Venkatesan, J. R. Perfect, S. A. Myers// Dermatologic Therapy. 2005. - Vol. 18. - P. 44-57.

302. Villar C.C. Role of Candida albicans polymorphism in interactions with oral epithelial cells/ C. C. Villar, H. Kashleva, A. Dongari-Bagtzoglou// Oral Microbiol. Immunol. 2004. - Vol. 19. - P. 262-269.

303. Vojdani A. Immunological cross reactivity between Candida albicans and human tissue/ A. Vojdani, P. Rahimian, H. Kalhor, E. Mordechai // J. Clin. Lab. Lmmunol. 1996. - Vol. 48. - P. 1-15.

304. Vokoyama K. The role of microfilaments and microtubules in apical growth and dimorphism of Candida albicans/ K. Vokoyama, H. Kaji, K. Nishimura, M. Miyaji// J. Gen. Microbiol. 1990. - Vol.136, №6. - P. 1067—75.

305. Wang Y. Cytokine Involvement in Immunomodulatory Activity Affected by Candida albicans Mannan/ Y. Wang, S. Li, A. Moser, K. Bost, J. Domer// Infect. Immun.- 1998.-Vol. 66.-P. 1384—1391.

306. Weiss N. The blood-brain barrier in brain homeostasis and neurological diseases/ N. Weiss, F. Miller, S. Cazaubon, P.O. Couraud// Biochim. Biophys. Acta.- 2009. Vol. 1788. - P. 842-857.

307. Wells T. Vesicular osmometers, vasopression secretion and aquaporin-4: a new mechanism for osmoreception// Molecular and Cellular Endocrinology. 1998. -Vol. 136, №2. -P.103-107.

308. Whiteway M. Candida morphogenesis and host-pathogen interactions/ M. Whiteway, U. Oberholzer// Curr. Opin. Microbiol. 2004. - Vol.7. - P. 350-357.

309. Xu J. Studies of the ultrastructure and permeability of the blood-brain barrier in the developing corpus callosum in postnatal rat brain using electron dense tracers/ J. Xu, E. A. Ling// J. Anat. 1994. - Vol. 84. - P. 227-237.

310. Zumbuehl A. Antifungal hydrogels/ A. Zumbuehl, L. Ferreira, D. Kuhn, A. Astashkina, L. Long, Y. Yeo, T. Iaconis, M. Ghannoum, G. R. Fink, R. Langer, D. S. Kohane// Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 2007. Vol. 104, №32. - P. 12994-8.

Информация о работе

Гусева, Екатерина Васильевна
кандидата медицинских наук
Новосибирск, 2011
ВАК 03.03.04

Диссертация

Структурные изменения в головном мозге у мышей при кандидозном менингоэнцефалите и их лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы