Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Стратегии размножения и поддержания жизнеспособности Phytophthora infestans в Иранском Голестане и Москве при применении фунгицидов и растительных экстрактов

ВАК РФ 06.01.07, Плодоводство, виноградарство

Автореферат диссертации по теме "Стратегии размножения и поддержания жизнеспособности Phytophthora infestans в Иранском Голестане и Москве при применении фунгицидов и растительных экстрактов"

На правах рукописи

ЗОЛФАГАРИ АМИР

СТРАТЕГИИ РАЗМНОЖЕНИЯ И ПОДДЕРЖАНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ РтТОРНтОВА 1ШЕ$ТА№ В ИРАНСКОМ ГОЛЕСТАНЕ И МОСКВЕ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ФУНГИЦИДОВ И РАСТИТЕЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ

Специальности: 06.01.07 - защита растений 03.02.12 - микология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 4 ('ЮН 2012

Москва-2012

005045785

005045785

Работа выполнена в Российском государственном аграрном университете - МСХА имени К.А. Тимирязева

Доктор биологических наук, профессор кафедры защиты растений РГАУ-МСХА имени К.А.Тимирязева Смирнов Алексей Николаевич

Доктор сельскохозяйственных наук, заведующая отделом защиты растений и грибов ГНУ ВПО ВНИИ овощеводства

Алексеева Ксения Леонидовна

Кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела защиты картофеля от болезней и вредителей ГНУ ВПО ВНИИ картофельного хозяйства имени А.Г. Лорха

Деревягина Марина Константиновна

Ведущая организация Российский университет дружбы народов

Защита диссертации состоится 28 июня 2012 г. в 13 — на заседании диссертационного совета Д 220.043.04 при Российском государственном аграрном университете - МСХА имени К.А. Тимирязева по адресу: 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 49. Учёный совет РГАУ - МСХА, тел/факс 8(499) 976-24-92.

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной библиотеке имени Н.И. Железнова РГАУ - МСХА имени К. А. Тимирязева.

Автореферат разослан «25» мая 2012 г.

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Учёный секретарь _.

диссертационного совета, д.б.н., профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. В Иране оомицет Phytophthora infestons (Mont.) de Вагу способен вызывать потери урожая картофеля от фитофтороза 20%, в эпифитотийные годы- до 80% (Zargarzadeh et al., 2008). Тем не менее, о фитофторозе в Иране почти ничего не известно, поэтому изучение фитофтороза картофеля и томата в этой стране имеет существенное значение также как и для России. В Иране необходимо уточнять инфекционный цикл патогена, его вредоносность по сравнению с другими болезнями картофеля и томата для оптимизации защитных мероприятий. Для России полученные в жарких Иранских условиях данные могут использоваться как модельные, чтобы оценивать фитофторозную опасность в годы с аномально жарким климатом.

В настоящее время во многих развитых и развивающихся странах приходят к выводу о необходимости экологизации защиты растений. Применение биопестицидов растительного происхождения может быть очень перспективно в этом направлении.

Новизна. Впервые показано, что у Иранских полевых популяций возбудителя реализуются бесполые стратегии размножения с различной интенсивностью образования зооспорангиев и проявления агрессивности. Впервые для Ирана выявлены оба типа спаривания патогена Ph. infestons, методики введения и поддержание их в чистой культуре. Усовершенствована методика определения и классификация ооспор Ph. infestons типичной и нетипичной морфологии по размеру, толщине клеточной стенки, наличию антеридия, форме оогония. Впервые обоснована высокая биологическая (до 90,11%) и хозяйственная (до 82,72%) эффективность против фитофтороза экстрактов из растений семейства Маковые (чистотела большого и мачка купноцветкового).

Практическая ценность работы. Эстракты чистотела большого и мачка крупноцветкового на 27,4—53,9% снижают развитие фитофтороза. Предложенная методология оценки стратегий размножения и агрессивности полевых популяций возбудителя фитофтороза позволяет оптимизировать применение средств защиты на посадках картофеля в России и Иране.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на 4-ой международной научной конференции «Микология, Микотоксикозы и Микозы» (апрель, 2011 г., Сербия, г. Нови Сад), на международной научной конференции молодых ученных и специалистов РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева (июнь, 2011 г.), на научной практической конференции в РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева «Проблемы развития АПК и сельских территорий в XXI веке» (декабрь, 2011 г.) и на 2-ом научно-практическом совещании «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля» в МГУ (март, 2012).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

-1-

Объём и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей главы «Материалы и методы», «Результаты и их обсуждение», «Заключение», «Выводы» и «Список литературы» (53 источника - на русском языке, 74 источника - на английском языке, 43 источника - на фарси и других языках). Общий объем рукописи 239 стр., содержит 51 таблицу, 54 рисунка.

Цель работы — определение стратегий размножения и поддержания жизнеспособности оомицета Ph. infestons на территории Иранского Голестана и лаборатории защиты растений (JI3P) РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева для оптимизации защитных мероприятий против фитофтороза картофеля и томата. Для установления поставленной цели решали следующие задачи:

1. Определить стратегии размножения и поддержания жизнеспособности полевых популяций Ph. infestons на картофеле и томате в Иранском Голестане, против которых применяли фунгициды Equation Рго (ВДГ), Ридомил Голд (СП, ВДГ), Манкоцеб (СП) и Хлорокись меди (СП).

2. Определить типы спаривания, способность к формированию ооспор различной морфологии, устойчивость к металаксилу и агрессивность изолятов Ph. infestons в Иранском Голестане.

3. Провести оценку эффективности экстрактов из растений семейства Маковые чистотела (Chelidanium majus) и мачка (виды рода Glaucium) на посадках картофеля в ЛЗР от фитофтороза.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Рассмотрены основные болезни картофеля и томата в Иране, с учетом географических и климатических особенностей провинций этой страны. Подробно проанализированы жизненный и инфекционный циклы Ph. infestons на картофеле и томате. Даны критерии оценки морфологии половой стадии -ооспор. Приведены данные по применению экстрактов растений из семейства Маковые для защиты картофеля от фитофтороза.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Материалы и методы. Места сбора образцов. В 2009-2011 годах всего 3 255 образцов листьев картофеля и томата, поражённых фитофторозом (2 450 картофельных и 805 томатных листьев), собрали с полей (0,4—4 га) 7 районов в провинции Голестан в Иране (рис. 1,2).

АФГАНИСТАН

Рисунок 1. Распространение фитофтороза картофеля в провинциях Ирана; Г - Голестан; А - Ардебиль; X - Иранский западный Азербайджан, город Хой; Д - Хузестан, город Дизфуль.

Рисунок 2. Карта провинции Голестан в Иране. Районы распространения фитофтороза картофеля и томата указаны красными кругами. У - Yassaghi, К -Ка&Ь§т, в - Оо^ап, в - БогкЬапкаЫе, V - УаЦкаЬаё, К - Раге1аЬа<1, А -АПаЬаё. У , К - регионы распространения фитофтороза томата; в, Б, V, р, А -регионы распространения фитофтороза картофеля

(http://en.wikipedia.0rg/wiki/File:G0lestan_Map.gif).

В 2011 г. 360 образцов листьев картофеля, поражённых фитофторозом, собрали в полевых мелкоделяночных исследованиях на территории лаборатории защиты растений РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева.

Для оценки влияния растительных экстрактов на возбудителя

фитофтороза картофеля в исследовании использовали 4 экстракта, полученные из видов растений семейства Papaveraceae (Маковые) - Cheîidonium majus L. (чистотел большой), Glaucium grandiflorum Boiss. et Huctt (глауциум (мачок) крупноцветковый), G. contortuplicatum Boiss. (русского названия нет), G. oxylobum Boiss. et Buhse (глауциум остролопастный) в 2009 г. в Иране.

Полевые методы. Маршрутные обследования на картофельных и томатных полях проводили 3 раза за вегетационный период: 1) в период бутонизации (смыкания ботвы в рядках); 2) в конце цветения; 3) перед уборкой урожая. Наблюдения на стационарных участках в Голестане и на территории лаборатории защиты растений (JI3P) РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева в 2011 г. проводили систематически в течение вегетационного периода растений, через каждые 10 суток. В провинции Голестан на картофельных полях - с 1 апреля по 1 июня и на томатных полях - с 1 мая по 1 июля. Результаты учёта фитофтороза картофеля и томата выражали унифицированно в следующих общепринятых показателях: распространённость болезни (Р); развитие болезни или индекс развития болезни (ИР).

Влияние растительных экстрактов из чистотела (CA. majus) и мачка (G. grandiflorum) на возбудителя фитофтороза картофеля изучали на территории JI3P РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева в 2011 г. на сортах картофеля Ильинский и Удача на естественном фоне патогена (значительном на территории JI3P). В качестве контроля использовали варианты без обработки экстрактами. Для сравнения использовали сходные данные М.Н.С. Аль-Саади с использованием экстрактов Psiadia arabica (растения из сем. Asteraceae; Аль-Саади М.Н.С, 2009). Определяли распространённость (Р) и развитие (индекс развития болезни, ИР). Для опытных вариантов определяли биологическую и хозяйственную эффективность (Попкова К.В. и др., 1976).

Лабораторные методы. Для определения встречаемости ооспор и зооспорангиев Ph. infestons в листьях картофеля и томата, а также плодах томата использовали метод по обесцвечиванию тканей (Смирнов А.Н., Кузнецов С.А., 2006). Подсчитывали индексы встречаемости зооспорангиев (ИЗ) и ооспор (ИО) в полевой популяции патогена.

Приготовление исходных водных экстрактов из указанных растений проводили по апробированной методике (Narwal S.S., Tauro P., 1996; Narwal S.S., 1999). Полученный экстракт использовали для экспериментов в концентрациях 25%, 50%, 100% и 0% (контроль).

Для определения типов спаривания (типов совместимости) изолятов Ph. infestons использовали общепринятую методику (Shaw D.S., 1987) с использованием тестерных штаммов с известными типами спаривания - Al и А2.

Оценку морфологии и частоты встречаемости ооспор в скрещиваниях in vitro на агаризованных средах проводили на основании критериев,

предложенных в работе А.Н. Смирнова и С. А. Кузнецова (2001). Анализировали морфологию таких признаков как диаметр ооспор, толщина стенки ооспор, наличие антеридия, форма оогония. Для каждого го 4 признаков определяли градации.

Определение устойчивости изолятов Ph. infestons к металаксилу (д.в. системного действия фунгицида Ридомил, используется как зависимый популяционный маркер) in vitro проводили по методике Р. Шаттока (Shattock R.C., 1988). Выявляли: 1) чувствительные (S), включая малоустойчивые (S/R); 2) среднеустойчивые (R/S); 3) устойчивые (R) изоляты патогена.

Учёты лабораторных опытов по определению компонентов и итогового индекса агрессивности изолятов Ph. infestons проводили в лаборатории сектора фитопатологии кафедры защиты растений РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева.

По методике (Троицкая Ю.С., 2007; Смирнов А.Н., 2010, Смирнов А.Н., Антоненко В.В., 2011) определяли компоненты агрессивности: 1) РН (размер некроза); 2) ИС (интенсивность спороношения); 3) ИП (инкубационный период); 4) ЛП (латентный период или период споруляции). На основе этих показателей подсчитывали ИИА (итоговый индекс агрессивности): ИИА = (РН х ИС) / (ИП х ЛП).

Лабораторно-полевые методы. Индекс агрессивности (ИА) полевой популяции Ph. infestons подсчитывали на основе показателей: распространенность (Р), развитие или индекс развития (ИР), а также индекс образования зооспорангиев (ИЗ) по формуле: ИА = (Р х ИР х ИЗ) / 10 000.

Определение стратегий размножения (CP) и поддержания жизнеспособности (СПЖ) полевых популяций Ph. infestons проводили на основе работы А.Н. Смирнова и С.А. Кузнецова (2006). Стратегии размножения характеризовались следующими распределениями значений индекса образования зооспорангиев (ИЗ): С (слабые) (0,1—20,0), Б (бесполые) (20,1-100). Подстратегии размножения характеризовались следующими распределениями значений индекса образования зооспорангиев (ИЗ): Cl (0,1-20,0), Б1 (20,1-40,0), Б4 (40,1-60,0), Б7 (60,1-100). Стратегии поддержания жизнеспособности характеризовались следующими распределениями значений индекса агрессивности (ИА): H (неагрессивные) (0-10,0), А (агрессивные) (10,1-100). Подстратегии поддержания жизнеспособности характеризовались следующими распределениями значений индекса агрессивности (ИА): HI (0-10,0), Al (10,1-25,0), A4 (25,1-50,0), А7 (50,1-100).

Статистистическую обработку (дисперсионный и корреляционный анализ) полученных данных проводили посредством программ PASW-SPSS (версия 18), MINITAB (версия 16), STRAZ (версия 2.1). Построение дендрограмм (кластерный анализ) проводили посредством программ PASW-SPSS (версия 18), STATISTICA (версия 8.0.550).

-5-

Результаты и обсуждение исследований

Стратегии размножения и поддержания жизнеспособности Ph. infestans в Иранском Голестане. В результате проведения исследований выявлено, что все изученные показатели: распространённости болезни (Р), индекс развитии болезни (ИР), индекс образования зооспорангиев (ИЗ) и индекса агрессивности (ИА) в полевых популяциях Ph. infestans в провинции Голестан в Иране вариьировали от небольших до значительных значений: Р (19,06-72,92), ИР (15,80-79,02), ИЗ (5,98-98,11), ИА (0,23-41,60) (табл. 1).

Все обследованные полевые популяции Ph. infestans в Иранском Голестане размножались бесполым путём и имели разные уровни формирования зооспорангиев - от слабого потенциала до очень значительного (табл. 1). Ооспор не обнаружили, индекс образования ооспор (ИО) был равен нулю, хотя обнаружили оба типа спаривания А1 и А2 (см. ниже).

Максимальные показатели зарегистрировали для необработанных фунгицидами полевых популяций патогена на картофеле и томате. Особенно высоким был (ИА) для полевых популяций Ph. infestans на американском сорте томата Early Girl. Напротив, значения (ИА), полученные для полевых популяций Ph. infestans на картофеле из разных регионов, обработанных фунгицидами Equation pro и Ридомил Голд, были очень низкими (табл. 1).

Кластерный анализ по встречаемости стратегий/подстратегий размножения ясно свидетельствует о присутствии трёх типов полевых популяций Ph. infestans в Иранском Голестане (рис. 3).

Первый тип полевых популяций характеризовался слабой стратегией размножения, подстратегией С1 и включал в себя популяции Ph. infestans на картофеле разных регионов (год сбора, место и сорт). Все эти популяции были обработанные фунгицидами Ридомил Голд (Металаксил и Манкоцеб, СП, ВДГ) или Equation pro (Famoxadone и Cymoxanil, ВДГ).

Второй тип полевых популяций характеризовался сочетанием очень слабой стратегией размножения подстратегией С1 и подстратегиями бесполого размножения Б1 и Б4 в различных соотношениях. Этот тип полевых популяций включает в себя популяции Ph. infestans на картофеле разного происхождения (район, год сбора материала, место и сорт). Все популяции данного типа не обработывали фунгицидами Ридомил Голд или Equation pro. При анализе этой группы можно различать подкластер с двумя группами популяций, которые обрабатывали фунгицидами Манкоцеб (Марганец и Цинк, СП) и ХОМ (Хлорокись меди, СП).

Третий тип полевых популяций характеризовался сильной подстратегией бесполого размножения Б7 и включал в себя только популяции Ph. infestans на томате.

Таблица 1. Характеристики мест сбора образцов листьев сортов картофеля и томата, индексы и стратегии (подстратегии), характеризующие исследуемые полевые популяции Рк. т/ез1ат из разных регионов Иранского Голестана

Характеристики Индексы Подстратегии

размножения (CP) поддержания жизнеспособности (СПЖ)

Год / РХ Район Сорт фунгицид Число ПО- ny- ЛЯ-ЦИЙ P, % ИР, % из, % ИА типы % типы %

2009 / картофель Sorkha-nkalatc Сан-тэ Equation pro 10 34,66 43,04 12,53 1,98 CI 100 HI 100

Gorgan Атрия Ридомил Голд 10 53,48 51,02 15,67 4,37 CI 100 HI 100

Aliabad Сак-сон Манкоцеб 10 53,61 62,31 23,74 7,94 CI Б1 20 80 HI 100

Valika-bad Мар-фона Обработк и нет 10 70,51 76,96 35,87 19,56 Б1 Б4 90 10 Al 100

Fazela-bad Мар- фона Обработк и нет 10 72,92 79,02 37,57 21,82 Б1 Б4 60 40 Al A4 80 20

2009 / томат Kafsh-giri Early girl Обработк и нет 13 60,30 70,31 98,11 41,60 Б7 100 A4 lOO

Yassag-hi Cheff Обработк и нет 17 52,22 62,43 86,08 28,44 Б7 100 A4 Al 59 41

2010 / картофель Sorkha-okatate Драга Equation pro 10 37,29 38,77 12,80 1,87 CI 100 HI 100

Gorgan Аг-рия Ридомил Голд 5 44,29 46,55 15,20 3,16 CI 100 HI 100

Aliabad Сак-сон хом 5 53,54 59,99 20,88 6,76 CI Б1 20 80 HI 100

Valika-bad Мар-фона Обработк и нет 5 63,49 66,81 30,66 13,24 Б1 100 Al HI 80 20

Fazela-bad Мар-фона Обработк и нет 8 69,88 77,07 34,43 18,71 Б1 Б4 75 25 Al 100

2011 / картофель Valika-bad Конкорд Equation pro 15 19,06 18,64 6,10 0,29 CI 100 HI 100

Fazela-bad Мар-фона Equation pro 15 30,89 36,19 11,59 1,36 CI 100 HI 100

Sorkha-nkalate Сан- тэ Equation pro 10 22,68 15,80 5,98 0,23 CI 100 HI 100

НСР,,В 2Д18 2,852 2,343 1,877 - - - -

Tree Diagram for 15 Variables Ward's method Euclidean distances

2009 Potato Sorkhankalate Sante Equation Pro

2009 Potato Gorgan Agria Ridomil gold

2010 Potato Sorkhankalate Draga Equation Pro

2010 Potato Gorgan Agria Ridomil Gold 2011 Potato Valikabad Concord Equation Pro 2011 Potato Fazelabad Marfona Equation Pro

2011 Potato Sorkhankalate Sante Equation Pro

2009 Potato Aliabad Saxon Mancozeb 2010 Potato Aliabad Saxon Copravit

2009 Potato Valikabad Marfona No fungicides

2010 Potato Valikabad Marfona No Fungicides

2009 Potato Fazelabad Marfona No Fungicides

2010 Potato Fazefabad Marfona No Fungicides 2009 Tomato Kafshgiri Early girl No Fungicides 2009 Tomato Yassaghi Endemic № Fungicides

0 100 200 300 400 500 600 700 800 Linkage Distance

Рисунок 3. Дендрограмма для групп полевых популяций Рк т/езгат в соответствии с их стратегиями размножения (СР).

Tree Diagram for 15 Variables Ward's method Euclidean distances

2009 Potato Sorkhankalate Sante Equation Pro

2009 Potato Gorgan Agria Ridomil gold 2009 Potato Aliabad Saxon Mancozeb

2010 Potato Sorkhankalate Draga Equation Pro

2010 Potato Gorgan Agria Ridomil Gold 2010 Potato Aliabad Saxon Copravit

2011 Potato Valikabad Concord Equation Pro 2011 Potato Fazelabad Marfona Equation Pro

2011 Potato Sorkhankalate Sante Equation Pro 2009 Potato Valikabad Marfona No fungicides

2010 Potato Fazelabad Marfona No Fungicides

2009 Potato Fazelabad Marfona No Fungicides

2010 Potato Valikabad Marfona No Fungicides 2009 Tomato Kafshgiri Early girl No Fungicides 2009 Tomato Yassaghi Endemic No Fungicides

0 100 200 300 400 500 600 700 800 Linkage Distance

Рисунок 4. Дендрограмма для групп полевых популяций РН. т/еяГапя в соответствии с их стратегиями поддержания жизнеспособности (СПЖ).

Все обследованные полевые популяции Рк. т/е8(ат имели относительно разные уровни агрессивности. Полевые популяции со слабыми и агрессивными стратегиями поддержания жизнеспособности показаны в табл. 1. Кластерный анализ по встречаемости стратегий/подстратегий поддержания

-8-

жизнеспособности ясно свидетельствует о присутствии двух типов полевых популяций Ph. infestons в Иранском Голестане (рис. 4).

Первый тип полевых популяций характеризовался слабой стратегией HI и включал в себя популяции Ph. infestons на картофеле разного происхождения (район, год сбора, место и сорт). Все посадки картофеля с данными популяциями Ph. infestons обрабатывали фунгицидами.

Второй тип полевых популяций характеризовался сочетанием слабой стратегией HI и подстратегий А1 и A4 в различных соотношениях. Этот тип включал в себя популяции Ph. infestons на картофеле разного происхождения (регион, год сбора, место и сорт). Все посадки картофеля с данными популяции Ph. infestons не обрабатывали фунгицидами.

Кроме того, очень важно, что импортный сорт томата (Early Girl) по сравнению с местным сортом томата Cheff значительно больше поражался фитофторозом.

В целом, можно сказать, что исследованные Иранские полевые популяции Ph. infestons были г-стратегами. Они характеризовались разными подстратегиями в рамках бесполого размножения и проявления агрессивности, корректируемыми применением фунгицидов. Признаков К-стратегии (для Ph. infestons определяемых в основном образованием гибридных ооспор) не обнаружено.

Морфологические типы ооспор Ph. infestons, полученные при скрещиваниях in vitro. При анализе скрещиваний Иранских и Российских изолятов Ph. infestons обнаружили 19 морфологических типов ооспор. Морфологические различия выявили по градациям всех четырёх критериев -диаметр ооспор, толщина их клеточной стенки, наличие антеридия и форма оогония (табл. 2, рис. 5).

Установлено, что наиболее часто встречались морфологические типы ооспор 2.1.1.2а, 3.1.1.2а , примерно в 2 раза реже - 3.1.2.2а и 3.3.1.2Ь. Остальные морфологические типы ооспор встречались ещё реже.

Далее в нашем исследовании мы изучили некоторые закономерности формирования ооспор in vitro при скрещиваниях между Иранскими и Российскими изолятами патогена.

Только 7 морфологических типов ооспор 2.1.1.2а (Т-типичной морфологии, см. ниже), 2.1.1.2b (Т), 2.1.2.2а (НТ-нетипичной морфологии, см. ниже), 2.1.2.3а (HT), 2.1.2.2b (HT), 2.2.1.2b (Т), 4.3.2.2b (HT) достоверно описали в предшествующем исследовании (Смирнов А.Н., Кузнецов С.А., 2001), остальные морфологические типы ооспор выявили только в текущем исследовании. Это может быть связано с тем, что: 1) исследовали материал разного географического происхождения; 2) исследовали материал, полученный in vitro и in vivo; 3) при использовании методики обесцвечивания нарушалась целостностность некоторых признаков ооспор.

-9-

Таблица 2. Градации морфологических признаков, морфологических типов и встречаемости ооспор, а также размер зоны совместимости, обнаруженных при

скрещиваниях Иранских и российских изолятов РИ. т{е$1ат

Скрещиваемые изоляты Диаметр ооспоры мкм Толщина стенки ооспоры (согласно критериям) Наличие антеридия Наличие и структура оогония (согласно критериям) Форма ооспор (согласно критериям) Оценка встречаемости ооспор (согласно критериям) Зона совместимости (мм)

Р70><Р70 _ _ - - - - 0

Р70ХР72 _ _ - - - - 0

Р70ХР73 _ _ - - - - 0

Р70ХУ72 _ _ - - - - 0

Р70х8т* 2,3 1 1 2а Т Ч 0

Р70х86* 2.3 1 1 2а Т Ч 0

Р70хЗЗ* 2,3 1 1 2а,2Ь,За т,нт ч 0

И70х37 - - - - - 0

Р72*¥72 _ _ - - - - 3

Т72*¥73 _ _ - - - - 3

?72*У72 _ - - - - - 3

Р72х5т» 2,3 1 1 2а т У 6

Р72х56* 2,3 1 1 2а т У 6

¥72^33* 2,3 1 1 2а,За т,нт ч 0

¥72x37 _ - - - - - 0

¥73*Т73 _ _ - - - - 3

Р73хУ72 _ - - - - - 4

Р73х5т* 2,3 1 1 2а т У 0

Р73х86* 2,3 1 1 2а т У 0

Р73х33* 2,3 1 1 2а,За т,нт ч 0

И73х37 _ - - - - - 0

У72хУ72 _ - - - - - 4

У72хБт* 3 3 1 2Ь т У 0

У72х8б* 3 3 1 2Ь т У 0

У72хЗЗ* 2,3 1 1,2 2а,2Ь,За т,нт ч 7

У72х37 _ - - - - - 5

8т*х8т* 2,3 1 2 2а т р 4

8т*х8б* _ _ - - - - 7

8т*х33* 2,3,4 1 2 2а т,нт р 3

8т»х37 2,3 1,2,3 1,2 2а,2Ь т ч 4

86**86* 2,3 1 2 2а т р 4

86*хЗЗ* 2,3,4 1 2 2а т,нт р 3

56*х37 2.3 1,2,3 1 2а,2Ъ т ч 6

032*хУ72 3,4 3 1,2 2Ь т,нт р 2

в70*хУ72 3,4 3 1,2 2Ъ т,нт р 2

А32*хУ72 4 3 1,2 2Ъ НТ р 3

А70*хУ72 4 3 1,2 2Ъ НТ р 3

33*х33* _ - - - - - 4

37x37 _ _ - - - - 5

33*х37 2.3 1.2 1 2а, 2Ь т ч 8

Примечание к табл. 2. Изоляты, отменённые звёздочкой, имеют тип спаривания А1, 33 - штамм-тестер с типом спаривания А1, 37 - штамм-тестер с типом спаривания А2, Т - ооспора с типичной морфологией, НТ - ооспора с нетипичной морфологией, Ч - ранг частой встречаемости ооспор, У - ранг умеренной встречаемости ооспор, Р - ранг их редкой встречаемости.

2.1.1.2а (Т)

2.1.1.2Ь (Т)

2.1.2.2а (НТ)

3.1.1.3а (НТ)

Начало рисунка 5.

2.1.2.2Ь (НТ)

2.1.2.3а (НТ)

2.2.1.2а (Т)

2.2.1.2Ь (Т)

3.1.1,2Ь (Т)

3.1.2.2а (НТ)

3.1.2.3а (НТ)

3.2.1.2а (Т)

3.3.1.2Ь (Т)

3.3.2.2Ь (Т)

4.1,2.2а (НТ)

4.3.1.2Ь (НТ)

4.3.2.2Ь (НТ)

Рисунок 5. Морфологические типы ооспор. Цена деления 2,4 мкм.

Частота встречаемости ооспор и размер зоны вегетативной совместимости между колониями также были различными (табл. 3; рис. 6). Корреляции между ними не обнаружено, значение коэффициента корреляции Пирсона составило 0,027±0,160.

Таблица 3. Частота встречаемости ооспор и размер зоны несовместимости, формирующихся при скрещиваниях Иранских изолятов РН. т/е$1ап5

Скрещивание изолятов с типами спаривания Частота встречаемости ооспор и размер зоны несовместимости (мм)

А1 х А2 Редко (2, 3), Умеренно (0, б), Часто (0,4,6, 7, 8)

А1 х А1 Редко (3,4) -* (4, 7)

А2 х А2 -*(0,3,4, 5)

Примечание: —* ооспоры не обнаружены

Также мы провели большой объём работы, направленной на уточнение существующих методик по разграничению основных градаций морфологических типов ооспор — прежде всего, ооспор нетипичной и типичной морфологии (табл. 4) (Смирнов А.Н., 2003).

Таблица 4. Оценка морфологии ооспор по уточнённым градациям

Позиция признака Признак Градации признака

Первая Диаметр 1. не более 20 мкм 2. 21-30 мкм 3. 31^10 мкм 4. более 40 мкм

Вторая Толщина стенки 1. тонкая однослойная, до 1,5 мкм 2. средней толщины, одно-двухслойная, возможно с наслоениями, от 1,5 мкм до 3,5 мкм 3. толстая, более, чем двухслойная, с наслоениями, от 3,5 мкм

Третья Наличие антеридия 1. есть 2. нет

Четвёртая Наличие и структура оогония 1. нет 2.а. есть, шаровидный, периплазмы почти нет 2.Ь. есть, шаровидный, периплазма хорошо выражена 3.а. есть, разнообразной, но не шаровидной формы, периплазмы почти нет З.Ь. есть, разнообразной, но не шаровидной формы, периплазма хорошо выражена

Прежде всего, эти результаты удалось выразить в удобной табличной форме (табл. 5 ). В исходную таблицу добавили размерность в мкм по толщине оболочек ооспоры, позволив надежнее определять градации второго признака -толщины клеточной стенки.

Рисунок 6. Зоны вегетативной совместимости между колониями при скрещивании изолятов Р1г. т/езкгт с определёнными типами спаривания - А1 и А2.

Таблица 5. Оценка признаков ооспор для определения градаций их морфологических типов

Признаки

Диаметр Толщина стенкн Наличие антеридия Наличие и структура оогоння Морфологический тип ооспор

1/4 все градации все градации все градации

2/3 1 2 все градации Нетипичные

все градации все градации все градации За/ЗЬ

2/3 1/2/3 1 1 /2а/2Ь Типичные

2/3 2/3 2 1/ 2а/2Ь

Примечание: красным выделены градации признаков, указывающие на нетипичную морфологию ооспор.

Ооспоры стандартного размера от 20 до 40 мкм (градации 2 и 3 первого признака), имеющие тонкую стенку (градация 1 второго признака) и не имеющие антеридия (градация 2 третьего признака) могут указывать на нетипичную морфологию. Это объясняется тем, что ооспоры без антеридия -это уже достаточно зрелые сформировавшиеся ооспоры, которые должны иметь как минимум умеренную или даже толстую стенку. Если это не произошло по мере достижения такого размера, то это значит, что при развитии ооспоры произошли отклонения и соответственно она имеет нетипичную морфологию.

Исходя из вышесказанного, можно заключить формулу ооспор нетипичной морфологии: [1/4, (1, 2), За/ЗЪ]. Данная формула выражает распределение градаций четырёх признаков, характерных именно для ооспор нетипичной морфологии и их отличие от ооспор типичной морфологии по комбинации этих признаков. Отличие ооспор типичной и нетипичной морфологии помогает анализировать происхождение ооспор - в результате гибридизации, самооплодотворения и партеногенеза. А это очень важно, так как различные по происхождению ооспоры имеют различное эпидемиологическое значение (Смирнов А.Н., 2010).

Для проверки правильности выделения морфологических типов ооспор типичной и нетипнчной морфологии применили кластерный анализ (рис. 7). По сходству кластеризовали все выявленные в нашем исследовании 19 морфологических типов ооспор. При анализе дендрограммы (сверху вниз) обнаружили 4 основных кластера.

Tree Diagram for 19 Cases Ward's method Euclidean distances

2.1.1.2a(T)" 2.1.1.2b(T) 2.2.1.2afT) 2.2.1.2b(T) 3.1.1.2a(T)" 3.1.1.2b(T) 3.2.1.2a(T) 3.2.1.2b(T) 2.1.2.2a(HT) 2.1.2.2b(HT) 3.1.2.2a(HT)* 4.1.2.2a(HT) 2.1.2.3a(HT) 3.1.2.3а(НТ) 3.1.1 .За(НТ) 3.3.1.2Ь(ТГ 3.3.2.2Ь(Т) 4.3.1.2Ь(НГ) 4.3.2.2Ь(НТ)

0 1 2 3 4 5 6 7

Linkage Distance

Рисунок 7. Дендрограмма сравнения морфологических типов ооспор по их сходству (Т - морфологические типы ооспор типичной морфологии, НТ -морфологические типы ооспор нетипичной морфологии). Звездочкой помечены наиболее частые морфологические типы ооспор.

Первый кластер включал в себя морфологические типы ооспор типичной морфологии, второй и третий, объединяющиеся в один гиперкластер, -морфологические типы ооспор нетипичной морфологии, четвертый -морфологические типы ооспор как типичной, так и нетипичной морфологии. В целом, кластерный анализ подтверждает деление морфологических типов ооспор на типичные и нетипичные (Смирнов А.Н., Кузнецов С.А., 2001).

Полученные данные помогают анализировать генезис ооспор: динамику их образования и происхождение. Нетипичные ооспоры образовывали гиперкластер из двух кластеров. Большинство из них образовывалось при контакте мицелиев с типом спаривания Al, но не А2. Они почти никогда (за одним исключением) не имели антеридия, но имели значительный диаметр при тонкой клеточной стенке. Наличие периплазмы и форма оогония у них варьировали. Крупные тонкостенные ооспоры без антеридия образовывались в результате партеногенеза, такие ооспоры находили и in vivo (Смирнов А.Н., Кузнецов С.А., 2001; Смирнов А.Н., 2003). Ооспоры с отклонением в

морфологии, но имеющие антеридий, скорее всего образовывались в результате самооплодотворения (если антеридий функционировал) или партеногенеза (если антеридий не функционировал), так как отклонения в морфологии у гибридных ооспор с антеридием предельно редки. В четвёртом кластере все ооспоры, образовывались при половом процессе, в результате как гибридизации (чаще, до 40 мкм), так и при самооплодотворении (реже, более 40 мкм).

Типы спаривания, устойчивость к металаксилу и проявление агрессивности изолятов Ph. infestons, выделенных в 2010 г. в Иранском Голестане. В Иранском Голестане выявили оба типа спаривания - и А1, и А2. Все обследованные изоляты давали значительное количество ооспор типичной морфологии с соответствующим штаммом-тестером и не образовывали их с другим штаммом-тестером. Самофертильных и самостерильных изолятов Ph. infestons, а также изолятов, образующих ооспоры со штаммами-тестерами и не образующих их в контроле, не обнаружили.

Почти все обследованные изоляты Ph. infestons из Иранского Голестана были чувствительны к Металаксилу, лишь изолят F73 демонстрировал среднюю устойчивость, F72 и V72 - слабую (рис. 8, табл. 6).

F70 F72 F73 V72 Sm S6

Рисунок 8. Развитие изолятов Рк. ¡^езШпь на агаризованной среде с металаксилом с концентрациями 0 (контроль), 1, 10, 100 мкг/мл на 15 сутки инкубирования.

0

мкг/мл (контр оль)

мкг/мл

10

мкг/мл

100

мкг/мл

Таблица 6. Типы спаривания, устойчивость к металаксилу и итоговый индекс агрессивности (ИИА) на клубневых дисках сортов картофеля Ильинский и Удача у исследуемых иранских изолятов РЪ. т/е^ат

Изолят Сорт Обработка фунгицидом Тип спаривания Устойчивость к металаксилу, ранги ИИА (Ильинский) ИИА (Удача)

F70 Марфона - А2 S 2,8 2,8

F72 Марфона - А2 S (S/R) 2,1 . 2,8

F73 Марфона - А2 R/S 2,1 2,8

V72 Марфона - А2 S (S/R) 2,5 2,8

Sm Драга Equation Pro Al S 1,8 1

S6 Драга Equation Pro Al S 1,5 1

А32 Саксон ХОМ Al HT* 0,5 0,1

А70 Саксон ХОМ Al HT 0,5 0,1

G32 Агрия Ридомил Голд Al HT 0,1 0

G70 Агрия Ридомил Голд Al HT 0,1 0

Примечание: нт* - изолят не протестирован из-за потери жизнеспособности

Отсутствие устойчивости в данном тесте хорошо согласуется с предшествующими результатами о высокой способности фунгицида Ридомил Голд подавлять развитие фитофтороза в Иранском Голестане.

Все исследованные Иранские изоляты с типом спаривания А2 (F70, F72, F73 и V72) оказались агрессивными к сортам картофеля, а с типом спаривания Al - малоагрессивными (G32, G70, А32 и А70) или умеренно агрессивными (Sm и S6) (табл. 6). Это можно объяснить действием на агрессивность внешних стрессовых факторов, влияющих на исследуемые изоляты патогена in vivo и по ходу выделения в Иране и Москве. Так, только у изолятов с типом спаривания А2 обнаружили устойчивость к металаксилу, не смотря на то, что их выделили с полей, не обработанных фунгицидами.

Влияние экстрактов из чистотела и мачка на фитофтороз картофеля Лабораторные исследования. Результаты лабораторных исследований (рис. 9; табл. 7) свидетельствуют о том, что экстракты Ch. majus, G. grandiflorum, G. contortuplicatum, G. oxylobum значительно подавляли развитие всех изолятов Ph. infestons - в концентрации 25% очень существенно, в концентрации 50% почти полностью, в концентрации 100% полностью. Полученный результат соответствует эталонным данным по Psiadia arabica и даже несколько превышает их.

Концентрация экстракта, %

СИ. тсуш

в. ^апсИ-/1огит

в. соШог-ШрИсаШт

& оху1оЬит

Рисунок 9. Клубневые диски сорта Ильинский, предварительно обработанные экстрактами СИ. тсдш, & '¿гапд'фогит, & сопЮНирИсаШт, & оху1оЬит в разных концентрациях через 5 суток после заражения иранским изолятом РЪ. 1г\[е$1ат ¥12.

Четырёхфакторный дисперсионный анализ не выявил существенных различий между действием экстрактов на Рк т/^ат. Наиболее существенным фактором в лабораторном эксперименте была концентрация экстракта. Сорта и изоляты Рк. ифйитз влияли на ход эксперимента значительно меньше (табл. 7).

Таблица 7. Влияние экстрактов растений из семейства Маковые в разных концентрациях на проявление агрессивности (по значениям ИИА - итогового индекса агрессивности) исследуемых изолятов РИ. т/^ат на клубневых дисках сортов картофеля Удача и Ильинский

Фактор Градации FcJ» HCP (a = 0,05)

Экстракт Ск. ma-jus С. р-ап-<Я- гит G. соп-lortu-plica-tum G. oxylo-bum (1,532) HC 0,1268

0,47 0,47 0,49 0,50

Концентрация, % 0 25 50 100 (4909,566)*** 0,1268

1,87 0,05 0,01 0

Изолят F 73 Р 72 F 70 Sm S6 V72 (53,461)*** 0,1035

0,54 0,55 0,60 0,35 0,32 0,54

Сорт Ильинский Удача *** (229,208) 0,1793

0,58 0,38

Примечания: НСР (а_о - для частных различий: 0,2535 не = не существенны (а = 0,05,

Рф^Об), = существенны (а = 0,05), = очень существенны (а = 0,01), *** = очень сильно существенны (а = 0,001)

Полевые испытания на ЛЗР. Результаты полевых мелкоделяночных испытаний (табл. 8) свидетельствуют о том, что экстракты СИ. та}Ш и б. ^апсИ/1огит подавляли развитие РИ. \nfestans примерно в 5 раз, и бесполое спороношение в 10-20 раз (в зависимости от сорта), а агрессивность примерно в 1000 раз. Существенно, что экстракты не провоцировали образование ооспор патогена. Отметим, что уменьшение всех вышеупомянутых показателей было значительным, существенным и вполне сравнимым с действием современных фунгицидов, применяемых против фитофтороза картофеля (Смирнов А.Н., 2010), при условии не очень значительного развития патогена.

Таблица 8. Значения распространенности (Р), индекса развития (ИР), индекса образования зооспорангиев (ИЗ), индекса образования ооспор (ИО), индекса агрессивности (ИА) РИ. ¡п/еяЮпя (естественный фон) для сортов картофеля Ильинский и Удача, обработанных экстрактами из растений

Экст ракт Сорта картофеля

Вид растения Концентрация, % Ильинский Удача

Р, % ИР, % ИЗ, % ИО, % ИА Р, % ИР, % ИЗ, % ИО, % ИА

Ch. majus 0 52,1 63,6 27,5 0 9,11 39,8 41,3 13,0 0 2,13

25 10,3 12,8 3,2 0 0,04 6,6 5,4 1,3 0 0,01

50 8,52 9,7 1,7 0 0,01 4,1 4,1 0,9 0 0,001

G. grandi-florum 0 52,1 63,6 27,5 0 9,11 39,8 41,3 13,0 0 2,13

25 23,9 25,7 4,8 0 0,30 22,7 20,0 4,0 0 0,18

50 19,4 16,2 4,5 0 0,14 15,6 13,9 3,3 0 0,70

Экстракты из растений семейства Маковые были способны изменять стратегию размножения полевой популяции РИ. т/ез1ап$ с бесполой (Б1) до слабой (С1) только на сорте Ильинский, но не на Удаче (табл. 9).

Таблица 9. Стратегии размножения (СР) и поддержания жизнеспособности (СПЖ) Рк. \nfcstans (естественный фон) для сортов картофеля Ильинский и Удача, обработанных экстрактами из растений СИ. та]ш и (?. %гапсЧАогит

Экстракт Сорта картофеля

Вид растения Концентрация, % Ильинский Удача

CP СПЖ CP СПЖ

Ch. majus 0 Б1 Н1 С1 Н1

25 С1 Н1 С1 Н1

50 С1 Н1 С1 Н1

G. grandi-florum 0 Б1 Н1 С1 Н1

25 С1 Н1 С1 Н1

50 С1 Н1 С1 Н1

Вероятно, это связано с более значительным вкладом полевой устойчивости последнего сорта. Однако изменения стратегии поддержания жизнеспособности не зарегистрировали (табл. 9).

Анализ урожайности показал, что в вариантах с обработкой экстрактами урожайность была выше и на сорте Ильинский, и на сорте Удача, чем в контрольных вариантах (табл. 10).

Таблица 10. Биологическая (БЭ) и хозяйственная (ХЭ) эффективность применения растительных экстрактов для защиты картофеля от фитофтороза (ЛЗР, естественный фон)

Экстракт Сорта ка| ггофеля

Вид растения Концентрация, % Илышскнй Удача

БЭ* % ХЭ** % БЭ % ХЭ%

С!и majus 25 79,94 76,67 86,99 74,12

50 84,75 82,72 90,11 81,03

G. grandiflorum 25 59,64 70,83 51,44 64,52

50 74,50 79,26 66,46 70,67

P. arabica (эталон) 50 50,30 52,30 60,70 7,30

Анализ данных по биологической и хозяйственной эффективности применения экстрактов из растений видов Ch. majus и G. grandiflorum выявил, что эти показатели превышали эталонные значения по P. arabica (табл. 10).

ВЫВОДЫ

1. В Иранском Голестане стратегии размножения полевых популяций Ph. infestons на разных сортах картофеля и в большей степени на томате были направлены на развитие бесполого спороношения и агрессивности в течение вегетационного сезона с разной интенсивностью (диапазоны значений индекса образования зооспорангиев - от 5,98 до 98,11, значений индекса агрессивности - от 0,23 до 41,60). Наибольшие показатели по интенсивности образования зооспорангиев и агрессивности зарегистрировали для томатных популяций патогена.

2. После применения в Иране фунгицидов Equation pro и Ридомил Голд зарегистрировали низкие значения диапазонов индексов образования зооспорангиев (5,98-15,67) и агрессивности (0,23-4,37) полевых популяций Ph. infestons, в то время как при отсутствии обработок диапазоны значений этих индексов были значительно выше - 30,66-37,57 и 13,24-21,82 соответственно. Диапазоны значений индексов образования зооспорангиев и агрессивности полевых популяций Ph. infestons после обработок Манкоцебом и Хлорокисыо меди составили 20,88-23,74 и 6,76-7,94 соответственно.

3. Выявлены иранские изоляты Ph. infestons с картофеля с типами спаривания А1 (6 изолятов) и А2 (4 изолята). При скрещиваниях их in vitro обнаружено 19 морфологических типов ооспор. Различия между ооспорами типичной и нетипичной морфологии определяются их размерами, формой оогония, а также толщиной клеточной стенки при наличии/отсутствии антеридия. Ооспоры, образованные А1 или А1 и А2 с нетипичной морфологией были более 40 мкм или менее 20 мкм в диаметре, имели уклоняющуюся от

шаровидной форму оогония, тонкую клеточную стенку при диаметре от 20 до 40 мкм при отсутствии антеридия.

4. Изоляты Ph. infestons из Иранского Голестана характеризовались разной агрессивностью на клубневых дисках сортов картофеля Ильинский и Удача - от пониженной до высокой. Все наиболее агрессивные изоляты имели тип спаривания А2 и были собраны с картофеля, не обработанного фунгицидами. Менее агрессивные и неагрессивные изоляты имели тип спаривания А1 и были собраны с картофеля, обработанного фунгицидами. Все исследованные изоляты были чувствительны к металаксилу, и только один (с типом спаривания А2) - среднеустойчив.

5. Экстракты из растений из семейства Маковые: чистотел большой (Chelidonium majus) и мачок (виды рода Glaucium: G. grandiflorum, G. contortuplicatum, G. oxylobum), собранных в Иране, показали высокую эффективность при испытаниях in vitro на клубневых дисках, а также при защите посадок картофеля от фитофтороза (биологическая эффективность до 90,11, хозяйственная эффективность до 82,72). В опытах на территории JI3P они существенно влияли на стратегии размножения, уменьшая интенсивность образования зооспорангиев, но не существенно влияли на стратегии поддержания жизнеспособности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В годы с низким и умеренным ожидаемым развитием фитофтороза в приусадебных и фермерских хозяйствах можно использовать экстракты чистотела большого как экологически безопасное средство для защиты картофеля от фитофтороза. Для получения эффекта подавления фитофтороза концентрированные экстракты из этих растений (10% по сухой массе растительного сырья) следует применять не менее 3 раз в течение вегетационного сезона на картофеле в фазы бутонизации и цветения.

2. В Иране рекомендуется совершенствовать систему фитосанитарного мониторинга фитофтороза как очень опасного заболевания для избежания эпифитотий фитофтороза. Для этого целесообразно рекомендовать министерству сельского хозяйства Ирана методологию оценки способов размножения и агрессивности полевых популяций возбудителя фитофтороза картофеля и томата, апробированную в данной работе в провинции Голестан.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Золфагари А. Фитофтороз и альтернариоз картофеля и томата при аномальных погодных условиях в Московской области / А. Золфагари, В.В. Антоненко, Д.В. Зайцев, A.A. Игнатенкова, А.Г. Мамонов, Р.В. Пенкин, А.Ю. Поштаренко, А.Н. Смирнов // Защита и карантин растений - 2011. - № 12. -С. 40-42.

2. Золфагари А. Влияние экстрактов из чистотела и мачка на возбудителя фитофтороза картофеля / А. Золфагари, А.Н. Смирнов // Известия ТСХА. -2011.-Вып. 6-С. 69-77.

3. Zolfaghary A. Strategies of reproduction and viability support of oomycete Phytophthora infestons in Iran (Стратегия размножения и поддержания жизнеспособности оомицета Phytophthora infestons в Иране) / A. Zolfaghary, A.N. Smirnov // Izvestiya TSKhA. - 2012. - Special issue. - P. 116-123.

4. Antonenko V.V. Effectiveness of fungicide-free approaches to the protection of potato and tomato against late blight (Эффективность безфунгицидных обработок для защиты картофеля и томата против фитофтороза) / A.N. Smirnov, V.V. Antonenko, A. Zolfaghary, M.N. S. Al-Saadi, A.G. Mamonov, G.V. Kondratyeva,

A.A. Ignatenkova, M.A. Shishurjak // Proceedings for Natural Science, Matica sprska, Novi Sad, 2011. - № 120 - C. 137-144.

5. Золфагари А. Развитие фитофтороза на различных сортах картофеля в Иране // А.Н. Смирнов, А. Золфагари // Сборник тезисов второго научно-практического совещания «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля. — Москва, биофак МГУ имени М. В. Ломоносова, 2012. - С. 12.

6. Смирнов А.Н. Роль сорта в защите картофеля от фитофтороза и альтернариоза / А.Н. Смирнов, А. Золфагари, Р.В. Пенкин, С.А. Кузнецов,

B.В. Антоненко // Сборник тезисов второго научно-практического совещания «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля. - Москва, биофак МГУ имени М.В. Ломоносова, 2012. - С. 20.

7. Золфагари А. Основные грибные болезни картофеля в Иране // А. Золфагари, А.Н. Смирнов // Сборник трудов международной конференции молодых ученых РГАУ-МСХА, 2011. - В печати.

Отпечатано с готового оригинал-макета

Подписано в печать 24.05.2012 г. Формат 60Х84'/,6 Усл.печ.1,4. Тираж 100 экз. Заказ 237.

Издательство РГАУ - МСХА 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44 Тел.: (499) 977-00-12, 977-26-90,977-40-64

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Золфагари Амир

ВВЕДЕНИЕ.

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЙ.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ.

АПРОБАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ПУБЛИКАЦИЯ.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Материалы.

2.2. Методы.

2.2.1. Полевые методы.

2.2.2. Лабораторные методы.

2.2.3. Лабораторно-полевые методы.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Стратегии размножения и поддержания жизнеспособности

Ph. infestons в Иранском Голестане.

3.2. Морфологические типы ооспор Ph. infest ans, полученных при скрещиваниях in vitro.i.

3.3. Типы спаривания, устойчивость к металаксилу и проявление агрессивности изолятов Ph. infestons, выделенных в 2010 г. в Иранском Голестане.

3.4. Изучение агрессивных свойств Иранских изолятов Ph. infestons in vitro.

3.5. Влияние экстрактов из чистотела и мачка на фитофтороз картофеля.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Стратегии размножения и поддержания жизнеспособности Phytophthora infestans в Иранском Голестане и Москве при применении фунгицидов и растительных экстрактов"

Фитофтороз - опаснейшая болезнь картофеля и томата повсеместно. Соответственно, и в научном, и в прикладном аспектах возбудитель заболевания изучен очень значительно. Ему посвящено очень много публикаций, сыгравших огромную роль в становлении и развитии фитопатологической науки. Каждый месяц выходят новые публикации. Тем не менее, в мире еще сохраняются регионы, в которых фитофтороз картофеля и томата изучен недостаточно. В основном, это страны Азии «и Африки. Один из таких проблемных регионов - Иран. В значительной степени, это связано с недостатком квалифицированных специалистов-микологов и фитопатологов. Также это связано с тем, что, не смотря на значительное выращивание картофеля и томата в отдельных провинциях Ирана, считают, что из-за жаркого > климата вредоносность болезни не может быть высокой. Эту- позицию' нельзя признать надежной. Достоверной можно считать информацию, основывающуюся- на конкретных фактах, а.> не на предположениях, хотя и кажущихся очевидными. В некоторых отдельных соседних регионах потери картофеля и томата от фитофтороза доказаны, особенно при ирригационных мероприятиях. Соответственно, наше исследование, основывающееся на апробированных подходах исследований фитофтороза, направлено на восполнение обозначенных выше пробелов, получение надежных данных по развитию этой болезни в условиях Ирана.

Кроме того, из-за сложной агроэкологической обстановки для защиты картофеля необходимо отрабатывать экологически чистые технологии. Эта необходимость представляется нам очевидной.

Химические фунгициды в настоящее время надежно защищают посадки картофеля от фитофтороза и других болезней. Но проблемы резистентности и загрязнения окружающей среды все в большей степени дают о себе знать, игнорировать их становится невозможно. В нашей работе мы также попытались найти научно-обоснованные экологизированные способы защиты картофеля, идущие от «народных» технологий и в России, и в Иране.

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ

В Иране оомицет Phytophthora infestons (Mont.) de Вагу способен вызывать потери урожая картофеля от фитофтороза 20%, в эпифитотийные годы -до 80% (Zargarzadeh et al., 2008). Тем не менее, о фитофторозе в Иране почти ничего не известно, поэтому изучение фитофтороза картофеля и томата в этой стране имеет существенное значение также как и для России. В Иране необходимо уточнять инфекционный цикл патогена, его вредоносность по сравнению с другими болезнями картофеля и томата для оптимизации защитных мероприятий. Для России полученные в жарких Иранских условиях данные могут использоваться как модельные, чтобы' оценивать фитофторозную опасность в годы с аномально жарким климатом.

В настоящее время во многих развитых и развивающихся странах приходят к выводу о необходимости экологизации защиты растений. Применение биопестицидов растительного происхождения может быть очень перспективно в этом направлении.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЙ

Впервые показано, что у Иранских полевых популяций возбудителя реализуются бесполые стратегии размножения с различной интенсивностью образования зооспорангиев и проявления агрессивности. Впервые для Ирана выявлены оба типа спаривания патогена Рк. 1п/е51апь\ методики введения и поддержание их в чистой культуре. Усовершенствована методика определения и классификация ооспор Рк т/ез1ат типичной и нетипичной морфологии по размеру, толщине клеточной стенки, наличию антеридия, форме оогония. Впервые обоснована высокая биологическая (до 90,11%) и хозяйственная (до 82,72%) эффективность против фитофтороза экстрактов из растений семейства Маковые (чистотела большого и мачка купноцветкового).

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ

Цель работы - определение стратегий размножения и поддержания жизнеспособности оомицета Ph. infestans на территории Иранского Голестана и лаборатории защиты растений (ЛЗР) РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева для оптимизации защитных мероприятий против фитофтороза картофеля и томата. Для установления поставленной цели решали следующие задачи:

1. Определить стратегии размножения и поддержания жизнеспособности полевых популяций Ph. infestans на картофеле и томате в Иранском Голестане, против которых применяли фунгициды Equation Pro (ВДГ), Ридомил Голд (СП), Манкоцеб (СП) и Хлорокись меди (СП).

2. Определить типы спаривания, способность к формированию ооспор различной морфологии, устойчивость к металаксилу и агрессивность изолятов Ph. infestans в Иранском Голестане.

3. Провести оценку эффективности экстрактов из растений семейства Маковые чистотела (Chelidonium majus) и мачка (виды рода Glaucium) на посадках картофеля в ЛЗР от фитофтороза.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эстракты чистотела большого и мачка крупноцветкового на 27,4—53,9% снижают развитие фитофтороза. Предложенная методология оценки стратегий размножения и агрессивности полевых популяций возбудителя фитофтороза позволяет оптимизировать применение средств защиты на посадках картофеля в России и Иране.

АПРОБАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Материалы диссертации доложены на 4-ой международной научной конференции «Микология, Микотоксикозы и Микозы» (апрель, 2011 г., Сербия, г. Нови Сад), на международной научной конференции молодых ученных и специалистов РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева (июнь, 2011 г.), на научной практической конференции в РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева «Проблемы развития АПК и сельских территорий в XXI веке» (декабрь, 2011 г.) и на 2-ом научно-практическом совещании «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля» в МГУ (март, 2012).

ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей главы «Материалы и методы», «Результаты и их обсуждение», «Заключение», «Выводы» и «Список литературы» (53 источника - на русском языке, 74 источника - на английском языке, 43 источника - на фарси и других языках). Общий объём рукописи 239 стр., содержит 51 таблицу, 54 рисунка.

Заключение Диссертация по теме "Плодоводство, виноградарство", Золфагари Амир

выводы

1. В Иранском Голестане стратегии размножения полевых популяций Ph. infestans на разных сортах картофеля и в большей степени на томате были направлены на развитие бесполого спороношения и агрессивности в течение вегетационного сезона с разной интенсивностью (диапазоны значений индекса образования зооспорангиев - от 5,98 до 98,11, значений индекса агрессивности - от 0,23 до 41,60). Наибольшие показатели по интенсивности образования зооспорангиев и агрессивности зарегистрировали для томатных популяций патогена.

2. После применения в Иране фунгицидов Equation pro и Ридомил Голд зарегистрировали низкие значения диапазонов индексов образования зооспорангиев (5,98-15,67) и агрессивности (0,23-4,37) полевых популяций Ph. infestans, в то время как при отсутствии обработок диапазоны значений этих индексов были значительно выше - 30,6637,57 и 13,24-21,82 соответственно. Диапазоны значений индексов образования зооспорангиев и агрессивности полевых популяций Ph. infestans после обработок Манкоцебом и Хлорокисью меди составили 20,88-23,74 и 6,76-7,94 соответственно.

3. Выявлены иранские изоляты Ph. infestans с картофеля с типами спаривания А1 (6 изолятов) и А2 (4 изолята). При скрещиваниях их in vitro обнаружено 19 морфологических типов ооспор. Различия между ооспорами типичной и нетипичной морфологии определяются их размерами, формой оогония, а также толщиной клеточной стенки при наличии/отсутствии антеридия. Ооспоры, образованные А1 или А1 и А2 с нетипичной морфологией были более 40 мкм или менее 20 мкм в диаметре, имели уклоняющуюся от шаровидной форму оогония, тонкую клеточную стенку при диаметре от 20 до 40 мкм при отсутствии антеридия.

4. Изоляты Ph. infestans из Иранского Голестана характеризовались разной агрессивностью на клубневых дисках сортов картофеля Ильинский и Удача - от пониженной до высокой. Все наиболее агрессивные изоляты имели тип спаривания А2 и были собраны с картофеля, не обработанного фунгицидами. Менее агрессивные и неагрессивные изоляты имели тип спаривания А1 и были собраны с картофеля, обработанного фунгицидами. Все исследованные изоляты были чувствительны к металаксилу, и только один (с типом спаривания А2) - среднеустойчив.

5. Экстракты из растений из семейства Маковые: чистотел большой (Chelidonium majus) и мачок (виды рода Glaucium: G. grandiflorum, G. contortuplicatum, G. oxylobum), собранных в Иране, показали высокую эффективность при испытаниях in vitro на клубневых дисках, а также при защите посадок картофеля от фитофтороза (биологическая эффективность до 90,11, хозяйственная эффективность до 82,72). В опытах на территории JI3P они существенно влияли на стратегии размножения, уменьшая интенсивность образования зооспорангиев, но не существенно влияли на стратегии поддержания жизнеспособности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В годы с низким и умеренным ожидаемым развитием фитофтороза в приусадебных и фермерских хозяйствах можно использовать экстракты чистотела большого как экологически безопасное средство для защиты картофеля от фитофтороза. Для получения эффекта подавления фитофтороза концентрированные экстракты из этих растений (10% по сухой массе растительного сырья) следует применять не менее 3 раз в течение вегетационного сезона на картофеле в фазы бутонизации и цветения.

2. В Иране рекомендуется совершенствовать систему фитосанитарного мониторинга фитофтороза как очень опасного заболевания для избежания эпифитотий фитофтороза. Для этого целесообразно рекомендовать министерству сельского хозяйства Ирана методологию оценки способов размножения и агрессивности полевых популяций возбудителя фитофтороза картофеля и томата, апробированную в данной работе в провинции Голестан.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Antonenko V. V. Effectiveness of fungicide-free approaches to the protection of potato and tomato against late blight (Эффективность безфунгицидных обработок для защиты картофеля и томата против фитофтороза) / А. N. Smirnov, V. V. Antonenko, A. Zolfaghary, М. N. S. Al-Saadi, A. G. Mamo-nov, G. V. Kondratyeva, A. A. Ignatenkova, M. A. Shishuijak // Proceedings for Natural Sck nee, Matica sprska, Novi Sad, 2011. - № 120 - С. 137-144.

2. Золфагари A. / А. Золфагари А., В. В. Антоненко, Д. В. Зайцев, А. А. Игнатенкова, А. Г. Мамонов, Р. В. Пенкин, А. Ю. Поштаренко, А. Н. Смирнов // Защита и карантин растений - 2011. - № 12. - С.40-42. (Журнал из списка ВАК).

3. Золфагари А. Влияние экстрактов из чистотела и мачка на возбудителя фитофтороза картофеля / А. Золфагари, А. Н. Смирнов // Известия ТСХА. - 2011. - Вып. 6. - С. 69-77. (Журнал из списка ВАК).

4. Zolfaghary A. Strategies of reproduction and viability support of oomycete Phytophthora infestans in Iran / A. Zolfaghary, A. N. Smirnov // Izvestija TSHA. - 2012. - No . - P. (Журнал из списка ВАК).

5. Золфагари А. Развитие фитофтороза на различных сортах картофеля в Иране // А. Н. Смирнов, А. Золфагари // Сборник тезисов второго научно-практического совещания «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля. -Москва, биофак МГУ имени М. В. Ломоносова, 2012. - С. 12.

6. Смирнов А. Н. Роль сорта в защите картофеля от фитофтороза и альтернариоза / А. Н. Смирнов, А. Золфагари, Р. В. Пенкин, С. А. Кузнецов,

В. В. Антоненко // Сборник тезисов второго научно-практического совещания «Генетические и агротехнологические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля. - Москва, биофак МГУ имени М. В. Ломоносова, 2012. - С. 20.

7. Золфагари А. Основные грибные болезни картофеля в Иране // А. Золфагари, А.Н. Смирнов // Сборник трудов международной конференции молодых учёных и специалистов РГАУ-МСХА, 2011. - В печати.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Золфагари Амир, Москва

1. Аль-Саади М.Н.С., Смирнов А.Н., Помазков Ю.И. Влияние экстрактов растительного происхождения на возбудителя фитофтороза картофеля // Журнал «Известия ТСХА».-2009-Вып. 1.-С. 136-144.

2. Амини Дж. Усовершенствование приемов защиты томата от фузариозного увядания // Авт. Дисс. на соиск. канд. биол. наук.

3. ТСХА- Москва.- 2004.- С. 2-3.

4. Анисимов Б.В. Выращивание сортов картофеля в России // Москва: Росинформагротех 1999.-116 с.

5. Антоненко В.В. Особенности развития фитофтороза и альтернариоза картофеля в Московской области летом 2010 года // Научно-практический Журнал «Защита картофеля».- 2011.- № 2, С. 9-13.

6. Антоненко В.В., Смирнов А.Н. Влияние регуляторов роста растений (Новосил, Лариксин, Терпенол) на бесполое спороношение РкуШрЫИога щрейХат II Журнал «Микология и Фитопатология»— 2011. Т. 45, Вып. 6, С. 548-555.

7. Ахатов А.К., Джалилов Ф.С., Белошапкина О.О., Стройков Ю.М., Чижов В.Н., Трусевич A.B. Защита овощных культур и картофеля от болезней // Москва.- 2006,- С. 114-271.

8. Белякова Г.А., Дьяков Ю.Т., Тарасов K.JI. Ботаника, Учебник в четырёх томах: Водоросли и грибы // Издательский центр «Академия».- 2006.-Т. 2. 320 е.- С. 35-43.

9. Богуславская Н.В., Филиппов A.B. Распространение возбудителя фитофтороза картофеля в почве // Микология и Фитопатология. -1976.—Т. 10- Вып. 4.- С. 316-317.

10. Бордукова М.В. Зимовка Phytophthora infestans (Mont.) de Вагу в условиях Московской области // Вест. с.-х. Науки.-1940.-№ 3 С. 13-19.

11. Воловик A.C., Глез В.М., Замотаев А.И. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков // Москва: Агропромиздат 1989205 с.

12. Гарибова JI.B., Лекомцева, С.Н. Основы микологии: Морфология и систематика грибов и грибоподобных организмов Учебное пособие // Москва: Товарищество научных изданий КМК - 2005 - 220 с-С. 13-41.

13. Дмитриева З.А., Забара М.Г., Войтовская A.A. Справочник картофелевода//Мн.: Урожай-1989 -304 с.

14. Дьяков Ю.Т., Сергеев Ю.В. Новое в систематике и номенклатуре грибов // Москва: Национальная академия микологии Медицина длявсех-2003-496 е.-С. 10-105.

15. Дьяков Ю.Т., Еланский С.Н. Популяционная генетика Phytophthora infestans. // В кн.: Микология сегодня. Т. 1. Под ред. Дьякова Ю.Т., Сергеева Ю.В. М.: Национальная академия микологии-2007-С. 107-139.

16. Дьяков Ю.Т., Озерецковская О.Л., Джавахия В.Г., Багирова С.Ф. Общая и молекулярная фитопатология: Учебное пособие // Москва: Изд. Общество фитопатологов.-2001.-302 с.

17. Дьяков Ю.Т. Фитофтороз глобальные и внутрироссийские проблемы //Журнал природа-2002-№ 3 -С. 20-21.

18. Дьяков Ю.Т., Шнырева A.B. Сергеев А.Ю. Введение в генетику грибов: Учебное пособие для Студ. высш. учеб. Заведений // Изд. центр «Академия»-2005 304 е.- С. 64—65.

19. Иван. ок В.Г., Банадысев С.А., Журомский Г.К. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков // Минск: «Белппинт».-2005.-696 с.

20. Ивашин Д.С., Катина З.Ф., Рыбачук И.З., Иванов B.C., Бутенко JT.T. Лекарственные растения Украины // Авт. Дисс. на соиск. канд. биол. наук. Киев: «Урожай».-1971 24 с.

21. Кабунин A.A., Лысенко Ю.Н., Смирнов А.Н. Толковые советы картофелеводу // Пенза-2001- 32 с.

22. Каталог сортов картофеля. Российская академия сельскохозяйственных наук, Гасударственное научное учреждение // ВНИИКХ им. Лорха.- 2007.-30 с.

23. Кваснюк Н.Я., Гуревич Б.И., Жеребцова Л.Н., Филиппова Е.И. Некоторые особенности защиты картофеля от фитофтороза // Защита и карантин растений-2006- № 6 С. 64-67.

24. Кучеров Е.В., Гуфранова И.Б. Дикорастущие лекарственные растения в районах Южного Урала и перспективы их использования // В кн.: Дикорастущие и интродуцируемые полезные растения в Башкирии. Вып. 2. Казань, Изд. Казанск. Ун-та.-1968.-437 с.

25. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири // Новосибирск: Изд. Наука-1970-348 с.

26. Наумова H.A. Фитофтора картофеля // Ленинград Москва: Сельхозиздат-1961- 184 с.

27. Никифорова H.A. Фитофтороз картофеля в условиях Сахалина // Москва: Изд. Академии Наук СССР.-1958- 71 с.

28. Попкова К.В. Практикум по сельскохозяйственной фитопатологии (Учебники и учебные пособия для высш. с.-х. Учебных заведений) // Москва: Изд. Колос.-1976.- 336 е.- С. 310-333.

29. Попов С.Я., Дорожкина Л.А., Калинин В.А. Основы1 химической защиты растений Учебное пособие // Москва: Арт-Лион-2003-208 с.-С. 76-107.

30. Попов М.Г. Чистотел- Chelidonium L. // Флора СССР. М- Л. Изд. АН СССР-1937 Т. 7.

31. Рогожин А.Н., Филиппов A.B. Распределение и жизнеспособность конидий Phytophthora infestans (Mont.) de Вагу в атмосфере над поражёнными посадками картофеля // Микология и Фитопатология. -1983.- Т. 17. Вып. 3.- С. 225-227.

32. Салиев А. Географии Ирана, Справочник // Институт стратегического анализа и прогноза (ИСАП).-2010 -168 с.

33. Сатарова Т.Г. Экологически безопасные биологические способы защиты картофеля от фитофтороза при вегетации и хранении // Дисс. на. соиск канд. биол. наук. Ульяновск, Специальность: Экология.-2009.-115 с.

34. Симаков Е.А., Анисимов Б.В., Еланский С.Н., Зейрук В.Н., Кузнецова М.А., Мальцев C.B., Пшеченков К.А., Склярова Н.П., Спиглазова С.Ю., Яшина И.М. Сорта картофеля, возделываемые в России, Ежегодное справочное издание //Москва: Агроспас. -2010128 с.

35. Смирнов А.Н., Еланский С.Н. Образование ооспор в полевых популяциях гриба Phytophthora infestans в Московской области // Журнал «Микология и фитопатология». Российская академия наук. Изд. Наука, Санкт Петербург-1999-Т. 33.- Вып. 6.- С. 421-425.

36. Смирнов А.Н., Кузнецов, С.А. Встречаемость и морфология ооспор в природных популяциях Phytophthora infestans в московской области // Москва: Известия ТСХА.-2001- № 4.- С. 116-133.

37. Смирнов А.Н., Кузнецов С.А. Определение стратегий размножения и жизнеспособности полевых популяций Phytophthora infestans II Известия ТСХА. 2006. - Вып. 4. - С. 28-41.

38. Смирнов А.Н. Определение происхождения ооспор в полевых популяциях гриба Phytophthora infestans II Москва: Известия ТСХА-2001.-№ 1- С.141-153.

39. Смирнов А.Н. Оценка происхождения ооспор в природных популяциях Phytophthora infestans московской области // Москва: Известия ТСХА.- 2003а.- № 4.- С. 87-95.

40. Смирнов А. H. Ооспоры Phytophthora infestans. Журнал «Микология и фитопатология». Российская академия наук // Санкт Петербург: Изд. Наука.-2003Ь-Т. 37.-Вып. 1.-С. 3-21.

41. Смирнов А.Н. Популяционная структура фитопатогенного псевдогриба Phytophthora infestans (Mont.) de Вагу в Московской области в 1991-1996 гг. // Дисс. на соиск. Конд. биол. наук-Москва МГУ, Биол. Фак.-1996 - 209 с.

42. Смирнов А.Н. Характеристика мексиканских штаммов Phytophthora infestans из долины Толука. I. Агрессивность // Журнал «Микология и Фитопатология»-2007 Т. 41, Вып. 1.- С. 89-103.

43. Смирнов А.Н., Кузнецов С.А., Еланский, С.Н. Встречаемость и морфология ооспор, обнаруженных в природных популяциях Phytophthora infestans по Московской области в 1999 году // Известия ТСХА.-2001.- № 1. С. 141-153.

44. Спиглазова С.Ю. Вредоносность и патогенные свойства возбудителя фитофтороза картофеля Phytophthora infestans (Mont.) de Вагу в различных регионах Российской Федерации // Авт. Дисс. на соиск. канд. биол. наук Большие Вяземы.-2004 - 37 с.

45. Троицкая Ю.С., Смирнов А.Н. Влияние фунгицидов на развитие фитофтороза картофеля в условиях КХ Новгородской области // Журнал «Известия ТСХА».-2007.- Вып. 2., С. 113-115.

46. Троицкая Ю.С. Чувствительность к фунгицидам и агрессивность изолягов Phytophthora infestans в зависимости от типов спаривания игеографического происхождения // Авт. Дисс. на соиск. канд. биол. наук.-Москва- РГАУ МСХА имени К.А. Тимирязева-2007 - 20 с.

47. Филиппов А.В. Фитофтороз картофеля // Защита и карантин растений-2005 № 4.

48. Филиппов А.В., Рогожин А.Н., Кузнецова М.А., Спиглазова С.Ю., Дьяков Ю.Т. Защита картофеля от фитофтороза. Программа действий//Москва: Центр «Общество фитопатологов».-2001- 16с.

49. Филонов М. М. Второй хлеб мира // Журнал: Питание и общество.-2010.-№ 1.-С. 24-25.

50. Черепанова Н.П. Систематика грибов, Учебное пособие, Второе издание//Изд: С.-Петербургского университета-2005 С. 51-52.

51. Ahmadi М., Hayatzadeh М. Potato cultivation in Iran // Newsletters of national association of Iranian potatoes-2011-Vol. 2 № l.-Pp: 25. (in Persian with English summary)

52. Ahoon-Manesh A., Bahar M. Principles of plant diseases control // Iran: Isfahan University Press.-2008.- Pp: 158-163.

53. Alexopoulos C.J., Mims C.W., Blackwell M. Introductory mycology, 4th edition // New Yourk: Pub. John Wiley & Sons Inc., USA.-1996.-Pp: 537-580.'

54. Ashkan M. Introductory mycology // Iran: Pub. Aeezh, Tehran-2008-Pp: 169-180.

55. Azimi H., Sharif! K. Effects of potato pre-emerging tubers on Rhizoctonia disease of potato. 18th Iranian Plant Protection Congress, Iran,Tehran 2008.-Pp: 103. (in Persian with English summary)

56. Behdad E. Phytopathology and important plant diseases in Iran // Iran: University'of Isfahan, Isfahan.-2010.-Pp: 297-303.

57. Behfam A. The history of potato in Iran // Iran: pub. Journal ofBehfam company, Bonab.-2010.-Pp: 118:

58. Cavalier-Smith T., Chao E.E-Y. Phylogeny and megasystematics of phagotrophic Heterokonts (Kingdom Ghromista) // Journal of Molecular Evolution.-2006.-Vol. 62.- Pp: 388-420.

59. Cavalier-Smith T. Only six kingdoms of life.// The Royal Society Journal; University of Oxford, UK —2004;— № 271.-Pp: 1251-1262.

60. Cullen J. Papaveraceae // Flora Iranica (ed. Rechinger, K.H). Graz-Austria.-1966 № 34-Pp: 1-7.

61. Elahinia A. Vegetable' diseases and their control // Iran:. University of Guilan press.-2006.-Pp: 320-343.

62. Ershad DJ. Contribution to the knowledge^^of^Phytophthora species in Iran and' their phytopathogenic importance // Mitt. Biol; Bundesanst. Land. U Forstw.-1971.-P: 84-85. (in Persian with English summary)

63. Ershad DJ. Fungi of Iran // Iran, Tehran: Iranian Research Institute of Plant Protection.-l997.- Vol. 10, Pp: 358-364.

64. Ershad DJ. Phytophthora species in Iran (Isolation, Purification, Identification) // Iran: Agriculture Research Organization-1992 215 p.

65. Erwin D.C., Ribeiro O.K. Phytophthora diseases world wide // USA, St. Paul, Minnesota: APS Press-1996.-Pp: 152-157.v 72. Erwin D.C., Ribero O.K. Phytophthora diseases world wide // USA:

66. University of California Press-1996 562 p.

67. Etebarian H.R. Vegetable diseases and their control. 4th Edition, University of Tehran press (UTP), Iran.-2011.-Pp: 285-301.

68. Etebarian H.R. Studies of Fusarium wilt of tomato and' its chemical control in Varamin area // Iranian Journal of Agricultural sciences-1992.-Vol. 23-Pp: 114. (in Persian with English summary)

69. Farahvash F., Iranbakhsh A. Effects of tuber size and date of stem cuttingon yield and yield components of Agria potato variety in East Azerbaijan // Journal of Horticulture and Forestry.-2009.-Vol. l-№ 4.-Pp: 57-60; (in Persian with English summary)

70. Fry W.E., Shaw D.S. Laboratory manual for Phytophthora infestans work at CIP-QUITO // Cornell University, Department of plant pathology, USA.-1997.-Pp: 41.

71. Galindo J., Gallegly M.E. The nature of sexuality in Phytophthora infestans // Phytopathlogy.-1960.-Vol. 50-Pp: 123-128.

72. Gallegly M.E., Galindo J. Mating types and oospores of Phytophthora infestans in nature in Mexico // Phytopathlogy- 1958.-Vol. 48-Pp: 274-277.

73. Ghassemipoor S. Extraction and determination of alkaloids Glaucium grandiflorum from Kermanshah region of Iran // Tehran University of Medical Sciences. Ph.D dissertation.-2009.-Pp: 331. (in Persian with English summary)

74. Ghobadi M., Jahanbin Sh., Parvizi Kh., Matlabi, R. Effect phosphorus biofertilizer on yield and yield components of potato. 11th Iranian congress on crop production and plant breeding Sciences-2010-Pp: 28. (in Persian with English summary)

75. Grum /aid N.J., Flier W.G. The biology of Phytophthora infestans at its center of Origin // Annu. Rev. Phytopathol.-2005.-Vol. 43 Pp:171-190.

76. Habibi J., Hadjianfar R., Mirkamali H. Major pests, diseases and weeds of potato in Iran and their integrated management // Iran Ministry of agriculture.-2010.-Pp: 84-103.

77. Hassani-Moghaddam M., Azimi H., Aijmandian A., Sohili B., Sharifi K. Estimate of the economic damage of the potato stem canker. 18th Iranian Plant Protection Congress, Tehran, Iran.-2008.-Pp: 68. (in Persian with English summary)

78. Hu T., Wang S., Cao K., Forrer H.R. Inhibitory effects of several Chinese medicinal herbs against Phytophthora infestans II Acta Horticulture. Netherlands-2009 -№. 834.-Pp: 205-210.

79. Jalili A., Jamzad Z. Red data book of Iran: A preliminary survey of endemic, rare and endangered plant species in Iran // Research Institute of Forest and Rangelands. Tehran, Iran.-1999.-Pp: 389-390.

80. Jing C., Yan-zhi M. Screening on Inhibitory Effect of Plant Extracts Against Phytophthora Infestans // Journal of college of agricultural science, Liaocheng university, Liaocheng, Shandong. -2009-Pp: 108-119.

81. Jiskani M.M., Pathan M.A., Wagan K.H., Imran M., Abro H. Studies on the control of tomato damping-off disease caused by Rhizoctonia solani Kuhn // Pakistan journal of botany.-2007.-Vol. 39- № 7,-Pp: 2749-2754.

82. Jones J.P., Jones J.B., Stall R.E., Zitter T.A. Compendium of tomato diseases // USA, St. Paul, Minnesota: APS Press.-1991.- Pp: 65-84.

83. Krantz F.A., Eide A.E. Potato breeding in the United States // Pflanzenzuecht.-1948.-Yol. 29-№ 3.-Pp: 372-382.

84. Majidi I., Davi D. Mass production of potato microtubers in periodical bioreactor // Iranian journal of crop sciences.-2004.-Vol. 5.- № 4-Pp: 302-315. (in Persian with English summary)

85. Manzoori P. Antifungal effects of plants to Yazd region of Iran in vitro // Tehran University of Medical Sciences. Ph.D dissertation-2009-Pp: 358. (in Persian with English summary)1. Fi

86. Mohseni S., Tajik Ghanbari M. A., Abbasi M. Isolation and identification' of Rhizoctonia spp. from cultivated soil in Mazandaran province // Iranian journal of plant pathology-2012-Vol. 47 № 4.-Pp: 447-453. (in Persian with English summary)

87. Montealegre J., Valderrama L., Sanchez S., Herrera R., Besoain X., Perez, L.M. Biological control of Rhizoctonia solani in tomatoes with Trichoderma harzianum mutants // Electronic journal of biotechnology,

88. University of Valparaiso, Chile.-2010.-Vol. 13 № 2.-Pp: 6.

89. Morteza-semnani K., Saeedi M., Hamidian M. Anti-inflammatory and analgesic activity of the topical preparation of Glaucium grandiflorum II Fitoterapia, Elsevier.-2004.-Vol. 75.-Pp: 123-129. (in Persian with English summary)

90. Motiee-Langroodi H. Geography of Iran (Agriculture, Industry, Services) // Mashhad University Press, Iran.-2011.-Pp: 384. (in Persian with English summary)

91. Muto M., Takahashi H., Ishihara K., Yuasa H., Huang J.W. Antimicrobial activity of medicinal plants used by indigenous people in Taiwan // Plant Pathology Bulletin.-2005.-Vol. 14-Pp: 13-24.

92. Najafikani A. An introduction to the natural geography of Iran // Geographic Organization of Iran's armed forces.-2008.-Pp: 141.

93. Najm A., Hadi M., Fazeli F., Darzi M.T. Study the effect of manurelevels and nitrogen fertilizer levels on yield and yield components of th

94. Agria potato. 11 Iranian congress on crop production and plant breeding Sciences.-2010.-Pp: 13. (in Persian with English summary)

95. Narwal S.S. Mechanism of action of allelochemicals as natural pesticides II Canada: Lakehead University, Second World Congress on Allelopatgy.-1999.-Pp: 298-304.

96. Parvu M., Cracium C., Barbu-Tudoran M:, Tamas M. Antifungal activities of Chelidonium majus L. extract on Botrytis cinerea in vitro and ultrastructural changes in its conidia // Journal of phytopathology.-2008i-Voli 156:-№9.-Pp: 550-552.,

97. Rajabi A., Eghtcdari O. Tomato diseases // University publishing center, Iran, Tehran.-2004.-Pp: 352.

98. Rajabi A: Potato diseases // University publishing center, Iran, Tehran-2002.-Pp: 141-157.

99. Rakhshani E., Taheri A; Principles of agricultural toxicology // Zabol University Press, Iran.-2009.-Pp: 11-45.

100. Reader J. Propitious Esculent: The Potato in World History 11 William Heinemann publisher, UK-2008.-Pp: 320.

101. Rezaee A., Soltani A. Introduction to potato production // University publishing center, Iran, Mashad.-2002.-Pp: 179.

102. Rubin E., Baider A., Cohen Y. Phytophthora infestans produces oospores in fruits and seeds of tomato // Phytopathology-2001.-Vol. 91-Pp: 1074-1080.

103. Sadravi M. Improtant field crops diseases of Iran. Pub // Gorgan university of agricultural sciences and natural resources, Gorgan, Iran-2008.-Pp: 208.

104. Sadravi M., Setayesh Mehr F. Fungal diseases of tomato in north Khorasan province and the reaction of four commercial cultivars to their pathogens // Iranian journal of plant pathology-2009-Vol. 44 № 4-Pp: 355-361. (in Persian with English summary)

105. Safaee D., Sheikholeslami M., Alampour L. The first report of powdery mildew on tomato and bell pepper in Kermanshah province. 18th Iranian Plant Protection Congress, Tehran, Iran.-2008.-Pp: 170. (in Persian with English summary)

106. Schober-Butin B., Rullich G. Oosporenbildung von Phytophthora infestans (Mont.) de Bary // Journal «Potato Research».-1986 Vol. 29-Pp: 395-398.

107. Sharili K., Zare R., Rees-George J. Vegetative compatibility groups among Fusarium solani isolates causing potato dry rot // Journal of biological sciences.-2008.-Vol. 8.- № 2.-Pp: 374-379. (in Persian with English summary)

108. Shattock R.C. Studies on the inheritance of resistance to metelaxyl in Phytophthora infestans II Journal «Plant Pathology».-1988 Vol. 37-Pp: 4-11.

109. Shaw D.S. The breeding system of Phytophthora infestans: the role of the A2 mating type. Genetics arid pathogenesis. Ed. Day, P.R. & Jellis, G.L. Oxfoid // Blackwell Scientific Publications.-1987.-Pp: 161-164.

110. Stephen D., Schmitt A., Martins Carvalho S., Seddon B., Koch E. Evalu ition of biocontrol preparations and plant extracts for the control of Phytophthora infestans on potato leaves // European journal of plant pathology.-2005.-№ I12.-Pp: 235-246.

111. Stevenson W.R., Loria R., Franc G.D., Weingartner D.P; Compendium of potato diseases, second edition // APS Press.-2001.-Pp: 144.

112. Taheri-Ardestani S., Sharifiiabi B., Zare R., Abasi-moghadam A. Alternaría spp. related to tomato early blight in Isfahan province. 18th Iranian Plant Protection Congress, Tehran, Iran.-2008.-Pp: 209. (in Persian with English summary)

113. Taheri-Ardestani S., Sharifiiabi B., Zare R., Abasi-moghadam A. Alternaría interriipta, a new pathogen causing potato early blight in Iran // Rostaniha Iranian journal of botany-2009-Vol. 10-Pp: 139-140. (in Persian with English summary)

114. ThenM., Szentmihaaiyi K., Sarkzi A. Examination on antioxidant activity in the greater celandine (Chelidonium majus L.) extracts by FRAP method-2003 Vol. 47 (l-4).-Pp: 115-117.

115. Turkensteen L.J., Flier W.G., Wanningen R., Mulder A. Production, survival and infectivity of oospores of Phytophthora infestans II Plant Pathology.-2000.-Vol. 49.-Pp: 688-696.

116. Whittaker S.L., Assinder S.J., Shaw D.S. Inheritance of mitochondrial DNA in Phytophthora infestans // Mycol. Res-1994-Vol. 98- № 5.-Pp: 569-575.

117. Yarnia M., Khorshidi M.B., Alizade R. Effect of defloration and N distribution on potato yield and yield components. Ill Balkan symposium on vegetables and potatoes, ISHS Acta Horticulture, Bursa, Turkey .-2007.-Vol. l.-Pp: 729.

118. Yazdi-samadi B. Agriculture in Iran, Handbook // University of Tehran Press, Iran.-2008.-Pp: 85.

119. Zaag D.E. vander, The potential demand for seed potatoes: a world perspective//PotatoResearch-1986-Vol. 29-Pp: 541-548.

120. Автор выражает глубокую благодарность своему научному руководителю, доктору биологических наук, профессору Смирнову А.Н., а также своей супруге Гран Афсанех за постоянную поддержку в жизни и аспирантуре кафедры фитопатологии.