Сравнительный анализ метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени

Безбородкина, Наталья Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Сравнительный анализ метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительный анализ метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени"

На прааах рукописи

БЕЗБОРОДКИНА Наталья Николаевна

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТАБОЛИЗМА ГЛИКОГЕНА В ГЕПАТОЦИТАХ НОРМАЛЬНОЙ И ЦИРРОТИЧЕСКОЙ ПЕЧЕНИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 2006

Работа выполнена в Институте цитологии РАН, Санкт-Петербург

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Кудрявцев Борис Николаевич

Официальные оппоненты: локтор биологических наук, профессор

Бродский Всеволод Яковлевич Институт биологии развития РАН, Москва

доктор медицинских наук, профессор Шявловский Михаил Михайлович Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Ведущая организация: Институт эволюционной физиологии

и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт- Петербург

Зашита состоится «26» мая 2006 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 002 230.01 при Институте цитологии РАН по адресу: 194064, Санкт-Петербург, Тихорецкий пр, 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института цитологии РАН (194064, Санкт-Петербург, Тихорецкий пр., 4)

Автореферат разослан «24» апреля 2006 года.

Ученый секретарь диссертационного совета.

кандидат биологических наук

Е.В. Каминская

¿OQgft-

&4SA

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Печень млекопитающих играет центральную роль в поддержании концентрации глюкозы в крови в узких границах, что имеет первостепенное значение для жизнедеятельности организма. Выполнение печенью глюкостатической функции достигается за счет способности клеток ее паренхимы (гепатоцитов) синтезировать гликоген из глюкозы, поступающей с пищей, и расщеплять его после завершения пищеварения, а также синтезировать глюкозу из веществ неуглеводной природы. Исходя из важности глюкостатической функции, следует ожидать, что любые поражения печени неизбежно приведут к ее серьезному нарушению.

Хронические гепатиты различной этиологии относятся к числу наиболее распространенных заболеваний человека. Постепенно развиваясь, хронический гепатит переходит в свою завершающую и опасную для жизни стадию - цирроз печени. Цирроз характеризуется потерей дольковой структуры печени, замещением части паренхимы соединительной тканью, перестройкой сосудистого русла, гепатоцеллюлярной недостаточностью и рядом других нарушений. В результате этих изменений оставшиеся клетки печени вынуждены выполнять свои функции в условиях значительной гипоксии и недостаточного снабжения различными субстратами (Подымова, 1999; Шерлок, Дули, 2002).

Глюкоза и фруктоза являются основными компонентами пищи человека и животных. Глюкоза - важнейший источник энергии для многих тканей, а для некоторых из них она является единственным источником получения энергии. Фруктоза в печени превращается в глюкозу, которая затем используется другими тканями, или метаболизируется в различные промежуточные продукты. При этом поступление фруктозы в клетки печени и регуляция ее метаболизма значительно отличаются от таковых для глюкозы. В отличие от глюкозы, абсорбция фруктозы печенью не зависит от инсулина. Поэтому считается, что инфузия фруктозы больным циррозом печени и диабетом, позволяет избежать ряда нежелательных эффектов, которые наблюдаются при использовании глюкозы (Daly et al., 1997; Dirlewanger et al., 2000; Elliott et al., 2002). Полагают также, что введение фруктозы по сравнению с глюкозой вызывает более быстрое и интенсивное накопление гликогена в печени.

РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ' БИБЛИОТЕКА i

Однако данные, имеющиеся на этот счет, противоречивы (Nilsson, Hultman, 1974; Niewoehner et al., 1984).

Показано, что углеводный обмен при циррозе претерпевает значительные изменения. В целом, для больных циррозом характерен метаболизм, который наблюдается у здоровых людей при длительном голодании. Отличительными чертами такого метаболизма являются: образование энергии преимущественно за счет окисления липидов, а не углеводов, как у здоровых людей; продукция глюкозы после ночного голодания происходит, главным образом, за счет глюконеогенеза, а не гликогенолиза, как в нормальной печени; увеличенный кетогенез и т.д. (Kruszynska, 1999). Показано также, что углеводный обмен при циррозе приобретает ряд черт, свойственных диабету, основным признаком которого является интолерантность ряда тканей к глюкозе (Petrides, 1994; Mion et al., 1996; Bouche et al., 2004). Полагают, что одной из причин интолерантности больных циррозом к глюкозе может быть снижение способности печени синтезировать гликоген (Riggio et al., 1997; Kruszynska, 1999).

По сравнению с нормальной печенью, метаболизм гликогена и особенности его регуляции в цирротической печени изучены недостаточно, а имеющиеся данные противоречивы. Поэтому цель настоящей работы состояла в сравнительном исследовании метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс и человека. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1) Провести морфометрический анализ паренхимы и определить уровни плоидности и сухую массу гепатоцитов в нормальной и цирротической печени крыс.

2) Провести морфометрический анализ митохондриального аппарата в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс.

3) Исследовать активность ключевых ферментов углеводного обмена и уровни гликогена в нормальной и цирротической печени крыс при голодании и затем через разные интервалы времени после перорального введения животным глюкозы или фруктозы.

4) Исследовать скорость накопления гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки нормальной и цирротической печени крыс после введения

голодным животным глюкозы или фруктозы.

5) Исследовать зависимость активности гликогенсинтазы и гликогенфосфорилазы от содержания гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс.

6) Исследовать активность некоторых ферментов углеводного обмена в мышцах и надпочечниках крыс с нормальной и цирротической печенью.

7) Определить содержание гликогена и активность ключевых ферментов его метаболизма в печени больных хроническим гепатитом различной этиологии на стадии до цирроза печени и при циррозе.

Научная новизна. Ряд результатов, полученных при исследовании метаболизма гликогена в нормальной и цирротической печени крыс и человека, являются приоритетными. В частности, впервые установлено, что развитие цирроза в печени крыс сопровождается снижением концентрации внутренних мембран митохондрий в гепатоцитах. С помощью цитофотометрических и биохимических методов впервые показано, что, в отличие от нормальной печени, накопление гликогена в гепатоцитах цирротической печени после перорального введения моносахаров голодным крысам начинается после 20-30 минутной задержки, а его скорость ниже, чем в норме. Кроме того, скорость накопления гликогена в перипортальных гепатоцитах нормальной и цирротической печени оказалась выше, чем в гепатоцитах центральной зоны дольки печени. Впервые установлено, что накопление гликогена в цирротической печени происходит на фоне низкой активности гликогенфосфорилазы а. Используя данные биохимического и цитофотометрического анализа содержания гликогена в печени, впервые показано, что предел накопления гликогена у большей части гепатоцитов нормальной печени составляет 240-250 пг. Однако при циррозе доля клеток с содержанием гликогена выше 240-250 пг увеличивается вследствие ослабления его деградации.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Пусковыми механизмами нарушений метаболизма глюкозы и гликогена в цирротической печени являются интенсификация перекисного окисления липидов в гепатоцитах, гипоксия и снижение скорости синтеза белков в клетках.

2. Фруктоза, при ее пероральном введении голодным крысам, вызывает более быструю активацию гликогенсинтазы, чем глюкоза.

3. Общий оборот гликогена возрастает, а удельный оборот снижается по мере его накопления в печени, но при циррозе оборот гликогена практически не отличается от нормы.

4. Необходимым условием для инициации синтеза гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени является низкая активность гликогенфосфорилазы а.

5. Снижение продукции глюкозы цирротической печенью из-за резкого снижения активности глюкозо-6-фосфатазы отчасти компенсируется усилением скорости глюконеогенеза и продукции глюкозы в надпочечниках.

6. Развитие цирроза приводит к более глубоким структурным и функциональным перестройкам в печени человека, чем у крыс.

Теоретическая и практическая значимость. Работа имеет фундаментальную направленность. Бе результаты важны, прежде всего, для понимания механизмов нарушения метаболизма глюкозы и гликогена при хронических поражениях печени. Уровни активности ключевых ферментов углеводного обмена гликогенфосфорилазы а, глюкозо-6-фосфатазы, глюкокиназы, фосфофруктокиназы и фруктозо-1,6-дифосфатазы и содержание гликогена в гепатоцитах после ночного голодания могут служить показателем степени поражения печени при циррозе и компенсированное™ патологического процесса в органе, а также использоваться для прогноза этого заболевания. Полученные в работе данные могут быть использованы в курсах лекций для студентов и аспирантов медицинских ВУЗов.

Апробация работы. Материалы работы были представлены на XIII Международном конгрессе фармакологов (Мюнхен, Германия, 1998); 6-м Конгрессе Европейского общества аналитической клеточной патологии (Гейдельберг, Германия, 1999); Втором фармакологическом конгрессе (Будапешт, Венгрия, 1999); XI Международном конгрессе гистохимии и цитохимии (Йорк, Англия, 2000); XIII Гейдельбергском симпозиуме по цитометрии (Гейдельберг, Германия, 2000); 7-м Конгрессе Европейского общества аналитической клеточной патологии (Каен, Франция, 2001); XIV Гейдельбергском симпозиуме по цитометрии (Гейдельберг, Германия, 2001); Первой национальной конференции «Информационно-вычислительные технологии в решении фундаментальных научных проблем и

прикладных задач химии, биологии, фармацевтики, медицины» (Москва, 2002); Общероссийской конференции с международным участием «Проблемы морфологии (теоретические и клинические аспекты)» (Сочи, 2002); Конференции «Клеточная и тканевая инженерия растений и животных» (Москва, 2002)

Финансовая поддержка работы. Работа выполнена с использованием оборудования ЦКП «Материаловедение и диагностика в передовых технологиях», при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проекты 01-04-49115, 02-04-06714) и Санкт-Петербургского конкурса персональных грантов для студентов, аспирантов, молодых ученых и специалистов в области гуманитарных, естественных, технических и медицинских наук (гранты М00-2.6К-401, М01-2.6К-593).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 работ, из них 11 статей в рецензируемых журналах (6 - в отечественных и 5 - в международных журналах), а также тезисы 8 докладов на всероссийских и международных конференциях, совещаниях и симпозиумах.

Структура диссертации. Диссертация состоит из следующих глав: Введение, Обзор литературы, Материал и методы, Результаты, Обсуждение, Выводы и Список цитируемой литературы.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объекты исследования. Исследования проведены на 112 белых беспородных крысах-самцах, вес которых в начале опыта составлял 130-140 г, а в конце (через 6 мес) - 250-300 г. Для получения экспериментальной модели цирроза печени животных одной группы (опытной) подвергали хроническому ингаляционному воздействию СС14 в специальной камере по 20 мин 3 раза в неделю в течение 6 мес. Животных другой группы использовали в качестве контроля. Через 1 нед после прекращения отравления по 5 крыс из опытной и контрольной группы после ночного голодания (постабсорбтивный период) подвергались декапитации. Полученный материал (кровь, печень, поперечно-полосатые мышцы бедра и надпочечники) использовали для биохимических, цитофотометрических и электронно-микроскопических (печень) исследований. Для изучения динамики накопления

гликогена в печени животные из обеих групп подвергались голоданию в течение 48 ч (вода ad libitum). Материал (кровь и печень) получали от голодавших животных и затем через 10, 20, 30, 45, 60, 75, 90 и 120 мин после введения перорально 30%-ного раствора глюкозы или фруктозы (4 г/кг веса). Помимо этого, в работе использовали биопсийный материал печени и кровь больных хроническим гепатитом и циррозом печени (всего 50 чел), полученные в клинике внутренних болезней № 2 СПбГМА им. И.И. Мечникова. В качестве контроля использовали группу доноров (30 чел.), печень которых по клиническим, биохимическим и гистологическим показателям не отличалась от нормы.

Методы приготовления препаратов. Для цитофотометрических исследований приготавливали мазки изолированных гепатоцитов, используя методику М.В. Кудрявцевой с соавт. (1974, 1983). Субклеточные фракции печени для биохимических исследований активности ферментов выделяли с помощью дифференциального центрифугирования. Гистологические срезы печени, приготовленные по стандартной методике, окрашивали гематоксилин-эозином по Романовскому или пикрофуксином по Ван-Гизону (Пирс, 1962). Относительный объем соединительной ткани и паренхимы на срезах печени крыс определяли по методу Вайбеля (Weibel, 1979), используя окулярную сетку (16x16), объектив 25 х 0.50 и окуляр 8х.

Морфометрический анализ митохоидриального аппарата гепатоцитов крыс. Измерения длины крист, количества митохондрий на единицу площади клетки и объемной плотности митохондрий в гепатоцитах производили на электроннограммах, отснятых при увеличении 8000х или 20000х. Образцы печени для электронно-микроскопического исследования подготавливали по общепринятой методике (Комаров, 1987). Фотографическую съемку препаратов производили с помощью электронного микроскопа "GEM-100 СХ" (Япония). Для измерений различных параметров митохондрий использовали анализатор изображений "Видеотест" (ООО Иста-Видеотест, Санкт-Петербург). Концентрацию внутренних мембран митохондрий (КВВМ) определяли путем измерения длины крист на постоянной площади клетки при увеличении 20000х, используя формулу: КВВМ = (р +21) п, где р - средний периметр митохондрий, 1 - средняя длина крист в одной

митохондрии, n - количество митохондрий на единицу площади клетки. В этих исследованиях использовали по 5 животных из контрольной и опытной группы, у каждого из которых было проанализировано по 20 гепатоцитов.

Цитохимические методы. Для определения содержания гликогена и его фракций - легкодоступной и труднодоступной - в гепатоцитах крыс и человека использовали окрашивание препаратов с помощью флуоресцентного варианта PAS-реакции (Кудрявцева и др., 1974). В качестве контроля использовали препараты гепатоцитов обработанные а-амилазой (Rosa, Johnston, 1967). При измерении уровней гликогена в гепатоцитах на срезах печени крыс и человека применяли окрашивание препаратов с помощью обычной PAS-реакции в модификации М.В. Кудрявцевой с соавт. (1974). Для определения содержания ДНК в ядрах гепатоцитов препараты окрашивали по Фёльгену, используя реактив типа Шиффа аурамин-БСЬ (Кудрявцев, Розанов, 1974). Окраску гепатоцитов нафтоловым желтым S на общий белок проводили по стандартной методике (Deitch, 1965).

Цитофотометрические методы. Содержание гликогена в гепатоцитах (по 100 клеток от каждого животного) измеряли с помощью цитофлуориметра ЛЮМАМ ИУФ-3 (JIOMO, Ленинград), используя объектив 20x0.40. Для исключения влияния размеров клеток на полученный результат, содержание гликогена в гепатоцитах относили к содержанию общего белка в клетках. Фотографирование клеток, окрашенных с помощью флуоресцентной PAS-реакции, производили с помощью микроскопа ЛЮМАМ И-1 (ЛОМО, Санкт-Петербург) при использовании объективов 90x1.25 или 20x0.40.

Содержание ДНК в гепатоцитах измеряли с помощью цитофлуориметра РИФ-1 (Папаян и др., 1974; Кудрявцев и др., 1979), используя объектив 40x0.65. На каждом препарате измеряли по 300 гепатоцитов. Среднюю плоидность клеток расчитывали по формуле g= £nj х 21 (Делоне и др., 1987), где n¡- относительное число гепатоцитов i-того класса плоидности (i=0- диплоидный класс, i=l- тетраплоидный и т.д.). Для выделения света, возбуждающего флуоресценцию (405, 436 нм), при измерениях содержания ДНК и гликогена в клетках, использовали светофильтры ФС-1 (8 мм) и СЗС-24 (4 мм), а для выделения света флуоресценции = 526-528 нм)

использовали светофильтры ЖС-18 (1 мм) и ЖЗС-19 (1 мм).

При измерениях содержания белка в гепатоцитах использовали анализатор микроизображений «Морфоквант» (К-Цейсс, Йена), работающий в режиме сканирующего цитофотометра. Измерения проводили в монохроматическом свете с длиной волны 475 нм.

Измерение содержания гликогена в гепатоцитах различных зон дольки печени проводили на срезах, окрашенных с помощью обычной PAS-реакции, при использовании анализатора изображений "Видеотест", позволяющего сочетать цитофотометрический анализ содержания вещества в клетке с определением ее точной локализации в ткани (Штейн и др., 1998; Кудрявцева и др., 2001). На каждом срезе измеряли по 100 гепатоцитов в портальной и центральной зонах дольки печени.

Сухую массу гепатоцитов крыс на препаратах-мазках измеряли по методике, описанной ранее (Бродский, 1966; Завадская и др., 1989). Измерения разности хода лучей при заключении препаратов в глицерин проводили с помощью интерференционного микроскопа МБИН-4 (ЛОМО, Ленинград), используя компенсатор Сенармона. Площадь клеток определяли с помощью анализатора изображений "Видеотест".

Биохимические методы. Активность глюкокиназы, фосфофруктокиназы и фруктозо-1,6-дифосфатазы определяли спектрофотометрически по прибыли или убыли окисленных и восстановленных форм НАД и НАДФ (Tejwani et at., 1976; Ueyda, 1979). Активность гликогенфосфорилазы, гликогенсинтазы и глюкозо-6-фосфатазы определяли с использованием меченых субстратов (Berteloot et al., 1991; Vardanis, 1991). Общий белок определяли по методу Брэдфорда (Bradford, 1976). Количество гликогена в печени и в поперечно-полосатых мышцах бедра у крыс определяли с использованием глюкозооксидазного метода (Вилкова, 1982). Результаты определения содержания гликогена в печени и мышцах выражали в мг% на мг общего белка.

Статистическая обработка полученных результатов. Статистическую обработку результатов наблюдений проводили с помощью i-критерия Стьюдента и регрессионного анализа, используя стандартные пакеты программ для персонального компьютера IBM - OriginPro 7.0 и SigmaPlot for Windows 9.0. Данные в таблице представлены как среднее и его ошибка (x±sx).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Гистологическое и цитологическое исследование нормальной и патологически измененной печени человека и крысы. Результаты проведенного исследования показали, что хроническая интоксикация крыс СС14 в течение 6 мес вызывает цирроз печени, при котором происходят значительные изменения в гистоструктуре органа и популяции гепатоцитов сходные с циррозом печени у человека. Доля паренхимы в цирротической печени крыс снижалась на 5% по сравнению с нормой, в то время как доля соединительной ткани увеличивалась в 4.2 раза. Средний уровень плоидности гепатоцитов крыс опытной группы возрастал на 9.3 % по сравнению с нормой. Сухая масса гепатоцитов крыс при циррозе увеличивалась по сравнению с нормой на 21% и достигала 1154 ± 68 пг. Количество гепатоцитов в 1 г нормальной печени крыс составляет 2.48 х 108 клеток, а цирротической - 1.94 х 108 клеток. Таким образом, хроническое отравление крыс СС14 в течение 6 мес приводит к уменьшению числа гепатоцитов в печени на 21%, которое, однако, полностью компенсируется повышением плоидности клеток и гипертрофией их цитоплазмы. Морфометрия митохондриалъного аппарата гепатоцитов нормальной и цирротической печени крыс. Электронно-микроскопическое исследование выявило значительный плеоморфизм митохондрий в гепатоцитах цирротической печени и увеличение их размеров. Несмотря на увеличение объемной плотности митохондрий в гепатоцитах цирротической печени, концентрация внутренних мембран митохондрий снижалась почти в 1.5 раза, а общая протяженность внутренних мембран на митохондрию уменьшалась примерно вдвое. Поскольку внутренние мембраны митохондрий содержат специфические белки, необходимые для осуществления процесса окислительного фосфорилирования, с помощью которого производится большая часть АТФ в клетке, полученные данные предполагают, что скорость дыхания и образования АТФ в гепатоцитах цирротической печени снижена. Исследование динамики накопления гликогена в гепатоцитах голодных крыс контрольной и опытной группы после перорального введения глюкозы или фруктозы. Исследование, проведенное с помощью биохимического метода, показало, что содержание гликогена в нормальной и цирротической печени крыс

О 20 40 во 80 100 120 140 0 20 40 вО 80 100 120 140

время после введения глюкозы, мин время после введения фруктозы, мин

после 48 ч голодания находится на очень низком, но примерно одинаковом уровне.

Введение глюкозы или фруктозы голодным крысам контрольной и опытной группы стимулировало быстрое накопление гликогена в печени (рис. 1). Однако его скорость в цирротической печени была на 26% ниже, чем в нормальной (Безбородкина и др., 2003).

Рис. 1. Динамика накопления гликогена (мг%мг белка') в печени крыс контрольной и опытной групп после введения голодным животным глюкозы (а) или фруктозы (б).

Расчеты показали, что в интервале 0-30 мин после начала рефидинга, когда синтез гликогена в печени значительно преобладал над его деградацией, минимальная скорость присоединения остатков глюкозы к растущим молекулам гликогена в нормальной печени составляет 5.43 х 103 х мин"1 - 7.00 х 103 х мин '. В среднем она равна 6.28 х 103 остатков глюкозы в минуту, означая, что максимальное время образования 1 гликозидной связи в молекуле гликогена составляет около 10 миллисекунд, а одна (3-частица гликогена образуется примерно за 8 мин.

Во избежание ошибок, связанных с гетерогенностью клеточной популяции, проведено цитофлуориметрическое исследование содержания гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени на различных этапах рефидинга крыс глюкозой или фруктозой (рис. 2). В результате было установлено, что, несмотря на крайне низкое содержание гликогена в печени крыс после 48 ч голодания, гликоген присутствует в большей части клеток нормальной и цирротической печени, причем в некоторых гепатоцитах его содержание достигало 160 пг. Пероральное введение моносахаров контрольным крысам стимулировало быстрое накопление гликогена в подавляющем большинстве гепатоцитов. В результате, уже через 10 мин клетки, не содержащие гликоген, исчезали из популяции. В отличие от контроля,

значительная часть гепатоцитов в цирротической печени была не способна начать синтез гликогена после введения глюкозы голодным крысам. Гепатоциты, не содержащие гликоген, присутствовали в циррозной печени на протяжении 45 мин после начала рефидинга, хотя доля таких клеток постепенно снижалась (рис. 2).

I 4

| э

О о

—О— контроль

-А- ОПЫТ Я А / А ^Чс* X)

а а-®

О 20 40 во 80 100 120 140 время после введения глюкозы, мин

О 20 40 во во 100 120 140 время после введения фруктозы, мин

Рис. 2. Динамика накопления гликогена в гепатоцитах крыс контрольной и опытной группы после введения голодным животным глюкозы (а) или фруктозы (б).

По сравнению с глюкозой, фруктоза вызывала более интенсивное отложение гликогена в гепатоцитах контрольных крыс (рис. 2). После введения фруктозы голодным крысам опытной группы, как и в случае введения глюкозы, наблюдалась значительная задержка синтеза гликогена. Таким образом, накопление гликогена в гепатоцитах цирротической печени начиналось после 20-30 мин задержки, а его скорость была на 32-37% ниже, чем в клетках нормальной печени (Безбородкина и др., 2003).

Результаты, представленные на рис. 3, свидетельствуют о том, что в нормальной печени введение глюкозы или фруктозы приводило к быстрому накоплению гликогена в клетках обеих зон дольки. В результате, через 120 мин гепатоциты портальной и центральной зоны дольки печени содержали примерно в три раза больше гликогена, чем при голодании. При этом на всех этапах рефидинга гепатоциты портальной зоны содержали больше гликогена, чем гепатоциты центральной зоны дольки печени (рис. 3). Отношение содержания гликогена в клетках портальной зоны к его содержанию в клетках центральной зоны (ПЗ/ЦЗ) превышало 1.0 и, в среднем, составило 1.101 ± 0.002 для глюкозы и 1.157 ± 0.003 - для фруктозы.

В отличие от нормальной печени, заметное накопление гликогена в клетках

обеих зон дольки цирротической печени после введения моносахаров начиналось после 20-ти мин задержки (рис. 3). Однако в дальнейшем накопление гликогена в гепатоцитах происходило достаточно быстро. В результате, через 120 мин клетки обеих зон содержали примерно втрое больше гликогена, чем клетки голодных крыс. Отношение ПЗ/ЦЗ в течение рефидинга составило 1.073 ± 0.002 и 1.067 ± 0.004 для глюкозы и фруктозы соответственно.

центральная зона

портальная зона

0 20 40 во во 100 120 140 время после введения глюкозы

0 20 40 во 80 100 120 140 время после введения глюкозы

0 20 40 во 80 100 120 140 время после введения фруктозы

0 20 40 вО 80 100 120 140 время после введения фруктозы

Рис. 3. Динамика накопления гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зоны дольки печени у крыс контрольной и опытной группы после введения голодным

животным раствора глюкозы или фруктозы (мин). По оси ординат -содержание гликогена (усл.ед.).

Исследование активности ферментов углеводного обмена в нормальной и цирротической печени крыс в ходе рефидинга крыс глюкозой или фруктозой. Пероральное введение глюкозы контрольным крысам, голодавшим в течение 48 ч, стимулировало быстрое нарастание активности гликогенсинтазы (ГС) в печени. Уже через 10 мин активность фермента возрастала на 95% по сравнению с его активностью у голодных животных (рис. 4). В дальнейшем активность ГС продолжала увеличиваться и через 75-90 мин после начала рефидинга она достигала максимума, который превышал исходный уровень в 2.3-2.5 раза.

0,8

Рис. 4. Активность гликогенсинтазы (-Г-6-Ф/+Г-6-Ф) в

печени крыс контрольной и

опытной групп через различные

интервалы времени после введения

0,1

голодным животным

О 20 40 60 80 100 120 140 0 20 40 60 80 100 120 140 ГЛЮКОЗЫ (а) ИЛИ

время после введения глюкозы, мин время после введения фруктозы, мин фруктозы (б).

По сравнению с глюкозой введение фруктозы голодным крысам вызывало оолее быстрое и более сильное повышение активности ГС. Через 10 мин после введения фруктозы она увеличилась на 194%. Активность ГС после введения фруктозы достигала максимума раньше, чем после введения глюкозы, примерно через 20 мин после начала рефидинга (рис. 4).

В цирротической печени введение глюкозы также стимулировало быструю активацию ГС, однако она была более слабой, чем в контроле. При циррозе активность фермента через 10 мин после начала рефидинга увеличивалась только на 63% (рис. 4), а контрольных уровней активность ГС достигала спустя 1.5-2 ч после начала рефидинга. Введение фруктозы голодным крысам опытной группы, как и в нормальной печени, вызывало более быстрое и сильное повышение активности ГС, а также более раннее достижение максимума активности фермента, чем после введения глюкозы (рис. 4). В среднем, активность ГС в цирротической печени была на 14% ниже, чем в нормальной.

Активность гликогенфосфорилазы а (ГФа) в нормальной печени после перорального введения крысам глюкозы быстро падала и уже через 20 мин она составляет около 50% от активности фермента в печени голодных животных (рис. 5). В интервале 0-30 мин динамика активности ГС и ГФ была реципрокной. Однако в дальнейшем, несмотря на сохранение высокой активности ГС, активность ГФа увеличивалась до исходного уровня, свидетельствуя о том, что на поздних этапах рефидинга (>60 мин) накопление гликогена в печени происходило при высокой активности обоих ферментов (рис. 5).

О 20 40 во 80 100 120 140 время после введения глюкозы, мин

Рис. 5. Активность гликоген-фосфорилазы а (нмольмин'мг белка'1) в печени крыс контрольной и опытной групп через различные интервалы времени после введения голодным животным глюкозы О 20 40 60 80 100 120 140 (а) ИЛИ фРУКГ03Ы (б).

Л \

Х> --й

—О— контроль

-А- ОПЫТ

время после введения фруктозы, мин

Изменение активности ГФа в нормальной печени при пероральном введении голодным крысам фруктозы было идентичным тому, которое наблюдалось при введении глюкозы (рис. 5).

Активность ГФа после перорального введения опытным крысам глюкозы или фруктозы, за исключением небольшого подъема активности фермента на 75 мин рефидинга, оставалась на столь же низком уровне, как в печени голодных крыс (рис. 5). В результате, инициация синтеза гликогена и его дальнейшее накопление в цирротической печени проходили при постоянно низкой активности ГФа, составлявшей около 50% от значений нормы. Важно также отметить, что при циррозе наблюдалось снижение уровней не только активной формы ГФ, но также и общей ГФ (рис. 5), что свидетельствует об ослаблении синтеза фермента в циррозной печени.

Многие авторы предполагали, что между содержанием гликогена в печени и активностью ключевых ферментов его метаболизма гликогенсинтазы и гликогенфосфорилазы существует тесная взаимосвязь (Chen et al., 1992, 1993; Laurent et al., 2000; Shearer et al., 2001). Однако, конкретные данные, подтверждающие наличие такой связи, практически отсутствовали. Поэтому в данной работе мы попытались экспериментально показать существование зависимости между содержанием гликогена в гепатоцитах и активностью гликогенсинтазы и гликогенфосфорилазы а и установить наличие или отсутствие предела в накоплении гликогена в клетках. Чен с соавт. (Chen et al., 1993) установили, что концентрация глюкозы в форме гликогена свыше 275-325 мкМ/г сырого веса печени приводит к ингибированию активности ГС. Кроме того, повышение концентрации гликогена в печени вызывало повышение активности ГФа. Результаты нашей работы показали,

что в нормальной печени во время интенсивного накопления гликогена, основную массу гепатоцитов составляют клетки с содержанием гликогена 80-160 пг, которое, при пересчете на количество клеток в 1 г сырого веса печени, соответствует 100-200 мкмолям глюкозы в форме гликогена (рис. 6). Некоторые гепатоциты содержали 300 мкМ гликогена и более, причем доля таких клеток варьировала от 0.7 до 12.9% (в среднем 3.4%) в случае ведения глюкозы и от 0.3 до 21.7% (в среднем 11.0%) при введении фруктозы. Максимальное содержание гликогена в гепатоцитах после введения глюкозы или фруктозы составляло 495.1 мкМ (60 мин) и 607.5 мкМ (75 мин) соответственно. При циррозе основная масса гепатоцитов имела большее содержание гликогена, чем в норме: 150-250 мкМ для глюкозы и 200-300 мкМ - для фруктозы. Гепатоциты с содержанием гликогена >300 мкМ в интервале 45-120 мин составляли в цирротически измененной печени 1.3 -12.9% (в среднем 7.1%) после введения глюкозы и 2.3-35.0% (в среднем 18.7%) - после введения фруктозы (рис. 6). Однако, максимальное содержание гликогена в гепатоцитах цирротической печени после введения глюкозы или фруктозы, составлявшее 504.3 мкМ (45 мин) и 600.0 мкМ (75 мин) соответственно, было таким же, как в гепатоцитах нормальной печени.

Таким образом, наши данные подтвердили результаты, полученные Ченом с соавторами (Chen et al., 1993) и показали, что содержание гликогена в гепатоцитах, составляющее около 300 мкМ глюкозы в форме гликогена, может не только ингибировать активность ГС, но и активировать гликогенфосфорилазу. По сравнению с глюкозой, фруктоза в нормальной печени приводит к увеличению доли клеток с содержанием гликогена выше 300 мкМ (рис. 6), по-видимому, за счет более быстрой активации ГС. Появление значительного числа клеток с содержанием гликогена выше 300 мкМ при циррозе (рис. 6) связано, прежде всего, с нарушением деградации гликогена из-за низкой активности ГФа.

Существование предела в накоплении гликогена в гепатоцитах, который для подавляющего большинства клеток составляет 240-250 пг (или 300-310 мкМ глюкозы в форме гликогена в 1 г сырой печени), а также одновременно высокая активность ключевых ферментов гликогенеза и гликогенолиза ГС и ГФа во время интенсивного накопления гликогена в печени свидетельствуют о высокой скорости его оборота.

КОНТРОЛЬ

опыт

100 200 ЭОО 400 500 600

100 200 300 «О 500 600

100 200 300 «О 500 «Я

Рис 6 Гистограммы распределения и'паюци гай но содержанию гликогена у Крыс контрольной и опы гной ¡руины, юлоданших 48 ч и через 30,120 мин после введения голодным животным раствора глюкозы (а) или фруктозы (б). По оси абсцисс - содержание гликогена, мкМ/г сырого веса ткани; по оси ординат - число к легок.

Низкая активность ГС и высокая активность ГФа в печени голодных крыс и высокая активность обоих ферментов в интервале 60-120 мин после начала рефидинга (рис. 4, 5), когда содержание гликогена в печени все более приближается к максимальному (рис. 1, 2), свидетельствуют о повышении общего оборота гликогена при переходе от голодания к сытости. Однако удельная скорость оборота гликогена (в расчете на единицу содержания гликогена) по мере накопления гликогена в печени резко падает.

Рис. 7. Активность глюкокиназы (нмольмин'мг белка"1) в печени крыс контрольной и опытной групп через различные интервалы времени после введения голодным

животным глюкозы

0 20 40 60 80 100 120 140 0 20 40 60 80 100 120 140 (а) ИЛИ

время после введения глюкозы, мин время после введения фруктозы, мин фруктозы (б).

Пероральное введение глюкозы контрольным крысам уже через 10 мин

приводило к 20% -ному повышению активности глюкокиназы (ГК) по сравнению с

уровнем фермента в печени голодных животных (рис. 7). Уровни ГК возрастали

примерно вдвое через 60 мин после начала рефидинга глюкозой, а спустя еще 60

мин они начинали снижаться. Сходная динамика активности ГК наблюдалась и

после введения голодным крысам фруктозы. Однако после введения фруктозы

наблюдалась несколько более быстрая и сильная активация фермента, чем после

введения глюкозы. По сравнению с нормальной печенью, активность ГК при

циррозе очень низка. В печени голодных крыс она составляет лишь 16-17% от

активности фермента в печени контрольных животных, что подтверждает данные

других авторов (Krahenbuhl et al., 1991; Lowes et al., 1998; Petersen et al., 1999).

Увеличение активности ГК в цирротической печени крыс после введения глюкозы

или фруктозы происходило с задержкой (около 10 мин). Несмотря на повышение

уровней ГК после введения голодным крысам моносахаров, ее максимальная

активность в цирротической печени в течение 2 ч оставалась примерно в 3.5 раза

ниже, чем в нормальной печени (рис. 7). Полученные данные свидетельствуют о значительном и стабильном снижении скорости фосфорилирования глюкозы в циррозной печени.

В нормальной печени активность глюкозо-6-фосфатазы (Г-6-Фазы) после введения глюкозы или фруктозы голодным крысам медленно увеличивалась в течение 60 мин, но после достижения максимума, который на 30-35% выше активности фермента в печени голодных крыс, возвращалась к исходному уровню (рис. 8).

Полученные данные указывают на продолжающийся глюконеогенез и продукцию глюкозы в течение рефидинга. В отличие от нормальной печени, активность Г-6-Фазы в цирротической печени через 45 мин после начала рефидинга начинала резко снижаться (рис. 8). В результате, через 120 мин после введения глюкозы или фруктозы активность этого фермента достигала значений, которые примерно в 3 раза ниже, чем у голодных крыс.

Рис. 8. Активность глюкозо-6-фосфатазы (нмоль-мин'мг

белка"1) в печени крыс контрольной и опытной групп через различные интервалы времени после введения голодным

_ животным глюкозы (а)

0 20 40 60 80 100 120 140 " 0 20 40 60 80 100 120 140 ИЛИ фруКТОЗЫ (б), время после введения глюкозы, мин время после введения фруктозы, мин

В ряде работ было найдено, что при некоторых условиях фосфорилирование глюкозы в печени происходит не с помощью глюкокиназы или гексокиназы, а при участии Г-6-Фазы (Nordlie, 1979; Arion, Walls, 1982; Mechin et al., 2000). В связи с этим, можно предположить, что в цирротической печени, в условиях, когда из кишечника поступает большое количество глюкозы, а активность ГК резко снижена, функцию фосфорилирования глюкозы берет на себя Г-6-Фаза. Трансформация гидролазной функции Г-6-Фазы в трансферазную может представлять собой адаптивный ответ на крайне слабую фосфорилирующую способность ГК при циррозе.

Результаты, представленные на рис. 9, свидетельствуют о том, что активность фруктозо-1,6-дифосфатазы (Фр-1,6-дФазы) в нормальной печени голодных крыс была в 3 раза ниже, чем в цирротически измененном органе. Введение глюкозы или фруктозы голодным животным приводило к повышению активности фермента в печени крыс обеих групп. Однако на протяжении всего эксперимента, активность Фр-1,6-дФазы в нормальной печени была примерно вдвое ниже, чем в цирротической (рис. 9).

Рис. 9. Активность в фруктозо-1,6-

дифосфатазы (нмоль-мин"'-мг белка'1) в печени крыс контрольной и опытной групп через различные интервалы времени после введения голодным животным О 20 40 60 80 100 120 140 | 0 20 40 60 80 100 120 140 ГЛЮКОЗЫ (а) ИЛИ

время после введения глюкозы, мин " время после введения фруктозы, мин фруктозы (б).

Активность фосфофруктокиназы (ФФК) в нормальной печени голодных

крыс, также как и активность Фр-1,б-дФазы, была значительно ниже, чем в

цирротической (примерно в 2.8 раза). Введение глюкозы или фруктозы голодным

крысам вызывало в печени контрольных животных более быстрое увеличение

активности фермента (рис. 10). В течение первых 10 мин после введения

моносахаров активность ФФК в нормальной печени возрастала на 63-64%, а в

цирротической - на 30-35%. Рис. 10.

Активность б фосфофрукто-

киназы (нмоль-мин"1 мг белка"1) в печени крыс контрольной и опытной групп через различные интервалы времени после введения голодным животным

0 20 40 во 80 100 120 140 ГЛЮКОЗЫ (а) ИЛИ время после введения фруктозы, мин фруктозы (б).

Затем, в течение примерно 60 мин после начала рефидинга, активность фермента в

0 20 40 60 80 100 120 140 время после введения глюкозы, мин

печени контрольных и опытных животных не изменялась. В конце эксперимента (120 мин) активность ФФК в цирротической печени по сравнению с предыдущим сроком возрастала на 45%, в то время как в нормальной печени снижалась на 58% (рис. 10).

Полученные данные свидетельствуют о том, что в нормальной и

цирротической печени одновременно протекают процессы гликолиза и

глюконеогенеза, но при циррозе скорость этих процессов значительно выше.

Некоторые показатели углеводного обмена в мышцах и надпочечниках крыс

контрольной и опытной группы в постабсорбтивном периоде. Результаты

определения содержания гликогена в скелетных мышцах крыс с циррозом печени

показали, что оно было на 24% ниже, чем у животных контрольной группы.

Активность ГС в мышцах была на 28% ниже, чем в контроле, тогда как активность

ГФа в мышцах крыс с циррозом печени не отличалась от контрольных значений

(таблица). Полученные данные свидетельствуют о том, что синтез гликогена в

мышцах крыс с циррозом печени, по-видимому, ослаблен. Таблица. Содержание

гликогена (мг%) и активность ферментов его метаболизма (нмоль-мин'-мг белка'1) в печени, мышцах и надпочечниках контрольных и опытных крыс в постабсорбтивном

1 2 3 Достоверно отличается от значения в контроле периоде.

(■р<0.05,2р<0.01, Зр<0.001)

Результаты, представленные в таблице, свидетельствуют о том, что по

сравнению с контролем активность Г-б-Фазы в цирротической печени снижалась

почти в 4 раза, в то время как в надпочечниках крыс с циррозом печени активность

этого фермента возрастала примерно в 2.3 раза. Эти данные позволяют

предположить, что увеличение скорости глюконеогенеза и продукции глюкозы

надпочечниками представляют компенсаторную реакцию на снижение продукции

глюкозы цирротической печенью.

Сравнительный анализ содержания гликогена и активности ферментов его

Контроль Опыт

Содержание гликогена в печени 2.83 ±0.65 5.09 ± 0.722

Активность ГС печени 0 53+001 0 57+0.011

Активность ГФа печени 145.2±5.3 127.1±8.2

Общая активность ГФ печени 213.7±3.8 151.5+3.33

Активность Г-б-Фазы печени 77 2±3 6 20 1±8.1'

Содержание гликогена в мышцах 0.34 ±0.06 0.26 ±0.02'

Активность ГС в мышцах 0.50±0.01 0.36±0.041

Активность ГФа мышц 77 4±2.0 78.1 ±3.4

Активность ГбФазы надпочечников 27.3 ±3.2 63.4 ±5.12

метаболизма в нормальной и цирротической печени человека и крыс в постабсорбтивном периоде. Результаты цитофотометрического определения содержания гликогена и его фракций в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс показали, что при циррозе содержание суммарного гликогена и его легкодоступной (ЛД) фракции в клетках увеличивалось в 3.2 и 2.3 раза соответственно. Доля труднодоступной (ТД) фракции гликогена, составляющая в норме около 16%, в гепатоцитах крыс опытной группы увеличивалась в 8 раз (КисЬ-уау^уа е1 а!., 1999; Киёгуау^уа е1 а1., 2003).

Биохимический анализ показал, что содержание гликогена в цирротической печени на 180% превышало его содержание в нормальном органе. Активность ГФя и общая активность этого фермента при циррозе были соответственно на 14 и 38% ниже, чем в норме. В то же время активность ГС в цирротической печени на 7.5 % превышала активность фермента в печени контрольных животных (Ки<1гуау15еуа е1 а1., 1999; Кис1гуауи>еуа е1 а1„ 2003).

Результаты морфофункционального анализа печени больных хроническим гепатитом показали, что хронический воспалительный процесс в печени человека сопровождается не только перестройкой дольковой структуры органа, изменениями клеточного состава его паренхимы, но и постепенным накоплением гликогена в гепатоцитах по мере усиления тяжести поражения печени (Кудрявцева и др., 2002). Содержание гликогена в гепатоцитах больных хроническим гепатитом (ХГ) на стадии до цирроза печени превышало норму на 88%, а в клетках больных ХГ на стадии цирроза печени - на 160%. Доля ЛД-фракции гликогена в гепатоцитах пациентов I группы (контрольной) составляла 85%, а ТД-фракции -14%. По мере развития патологического процесса в печени доля ЛД-фракции снижалась. У пациентов II группы она составляла 80%, а у больных ХГ на стадии цирроза печени (III группа) - 67%. Соответственно увеличивалась доля ТД-фракции гликогена (Кудрявцева и др., 2002).

Результаты определения содержания гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки нормальной и цирротической печени человека показали, что содержание гликогена в гепатоцитах обеих зон дольки печени у больных циррозом, независимо от его этиологии, возрастало по сравнению с нормой. У

больных с циррозом вирусной этиологии содержание гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки печени увеличивалось на 23 и 45 % соответственно (Кудрявцева и др., 2000; КиЛуа^ввуа й а1., 2001). При алкогольном циррозе содержание гликогена в гепатоцитах портальной зоны повышалось на 23 %, а в гепатоцитах центральной зоны дольки печени - почти на 90%. В результате, отношение содержания гликогена в гепатоцитах портальной зоны к его содержанию в клетках центральной зоны (ПЗЩЗ) значительно снижалось по сравнению с нормой. В нормальной печени отношение ПЗ/ЦЗ составляло 1.264, при вирусном циррозе - 1.030, а при алкогольном - 0.815, свидетельствуя о том, что в ходе развития патологического процесса в перицентральных гепатоцитах происходило более интенсивное накопление гликогена, чем в перипортальных гепатоцитах (Кудрявцева и др., 2000; КиЛ-уаугвеуа е1 а1., 2001).

Как следует из данных, представленных на рис. И, общая активность

гликогенфосфорилазы и ее активной ¿/-формы в печени больных хроническим

гепатитом на стадии до цирроза печени снижена в 1.7 раза по сравнению с нормой.

При циррозе наблюдалось дальнейшее снижение, как общей активности ГФ, так и

ее а-формы. Активность общей фосфорилазы в цирротической печени была в 2.2

раза, а активность ее а-формы - в 3.0 раза ниже, чем в нормальной печени

человека (Кудрявцева и др., 2002).

Рис. 11. Активность глюкозо-6-фосфатазы (Г-6-Фаза), общей гликогенфосфорилазы (ГФ) и ее а-формы (ГФа) (нмольмин'мг белка'1) в нормальной печени человека (I группа) и в печени больных ХГ на стадии до цирроза печени (II группа) и на стадии цирроза печени (III группа).

Увеличение отложения гликогена в гепатоцитах больных хроническим гепатитом сопровождалось снижением активности Г-6-Фазы (рис. 10). Активность ГбФазы в печени больных хроническим гепатитом снижалась в 1.4 раза, а при циррозе - в 4.1 раза по сравнению с нормой. В отличие от гликогенфосфорилазы и глюкозо-6-фосфатазы развитие патологического процесса в печени человека не влияло на активность гликогенсинтазы (Кудрявцева и др., 2002).

Выводы

1. Хроническое воздействие на крыс ССЦ в течение 6 мес приводит к резкому снижению активности глюкокиназы и гликогенфосфорилазы а в цирротической печени голодных животных (в 6 и 2 раза соответственно), а также увеличению втрое активности фрутозо-1,6-дифосфатазы и фосфофруктокиназы по сравнению с нормальной печенью. Активность гликогенсинтазы и глюкозо-6-фосфатазы при этом не отличается от нормы.

2. Скорость накопления гликогена в гепатоцитах цирротической печени после перорального введения крысам глюкозы или фруктозы ниже, чем в нормальной печени.

3. Для инициации накопления гликогена в нормальной печени крыс необходимо снижение активности гликогенфосфорилазы а, в то время как в цирротической печени синтез гликогена, который начинается с 20-30-минутной задержкой, происходит при постоянно низкой активности гликогенфосфорилазы а.

4. Рефидинг голодных крыс глюкозой или фруктозой приводит через 60 мин после его начала к резкому снижению активности глюкозо-6-фосфатазы в цирротической печени, которое, по-видимому, связано с переключением гидролазной активности фермента на трансферазную из-за низкой активности глюкокиназы (в 3.5 раза ниже, чем в нормальной печени).

5. Интенсивность накопления гликогена в перипортальных гепатоцитах нормальной и цирротической печени выше, чем в гепатоцитах, расположенных в центральной зоне дольки печени.

6. Содержание гликогена в гепатоците, соответствующее, при пересчете на количество клеток в 1 г сырого веса печени, примерно 300 мкмолям глюкозы в форме гликогена, ингибирует гликогенсинтазу и активирует гликогенфосфорилазу а.

7. Предел накопления гликогена в гепатоцитах нормальной печени составляет 240-250 пг (300-310 мкмолей глюкозы в форме гликогена на 1 г сырого веса печени), но в цирротической печени он повышается из-за ухудшения деградации гликогена.

8. Развитие цирроза приводит к уменьшению концентрации внутренних мембран

митохондрий на единицу площади гепатоцита и количества крист на митохондрию в 1.5 и 2 раза соответственно. 9. Увеличенное содержание гликогена в гепатоцитах цирротической печени человека и крысы в постабсорбтивном периоде связано с ослаблением скорости деградации гликогена вследствие низкой активности гликогенфосфорилазы а.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Kudryavtseva M.V, Emelyanov A.V, Sakuta G.A., Bezborodkina N.N.j Kudryavtsev B.N. 1998. Glycogen-forming function of hepatocytes in the rat regenerating cirrhotic liver after a partial hepatectomy. Tissue and Cell 30,1-7.

2. Кудрявцева M.B., Безбородкина H.H., Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н. 1999. Состояние гликогенообразовательной функции гепатоцитов цирротически измененной печени крыс после воздействия хорионическим гонадотропином. Цитология 41,488- 498.

3. Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N.N., Kudryavtsev B.N. 1999. Restoration of the glycogen-forming function of hepatocytes in rats with liver cirrhosis is facilitated by a high-carbohydrate diet. Brit. J. Nutrition 81,473-480.

4. Кудрявцева M.B., Безбородкина H.H., Радченко В.Г., Оковитый С.В., Иванова О.И., Кудрявцев Б. Н. 2000. Анализ содержания гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки печени больных циррозом вирусной и алкогольной этиологии. Цитология 42, 550-555.

5. Кудрявцева М. В., Безбородкина Н. Н., Нилова В. К., Кудрявцев Б. Н. 2001. Влияние частичной гепатэктомии на уровень гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки цирротически измененной печени крыс. Цитология 43, 674-680.

6. Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N. N., Kudryavtsev В. N. 2001. Glycogen-forming function of hepatocytes in cirrhotically altered rat liver after treatment the chorionic gonadotropin. Exp. Toxic. Pathol. 53, 57-63.

7. Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N. N., Radchenko V. G., Okovity S. V., Kudryavtsev B. N. 2001. Metabolic heterogeneity of glycogen in hepatocytes of patients

with liver cirrhosis: the glycogen content of the liver lobule zones in cirrhosis. Europ. J. Gastroenterol, and Hepatol. 13, 693-697.

8. Кудрявцева M.B., Безбородкина H.H., Оковитый C.B., Иванова O.B., Кудрявцев Б.Н. 2002. Особенности влияния бемитила на метаболизм гликогена в гепатоцитах патологически измененной печени человека. Цитология 44,668-675.

9. Kudryavtseva M.V., Bezborodkína N.N., Okovity S.V., Kudryavtsev B.N. 2003. Effects of the 2-ethylthiobenzimidazole hydrobromide (bemithyl) on carbohydrate metabolism in cirrhotic rat liver. Exp. Toxic. Pathol. 54, 339-347.

10. Безбородкина H.H., Кудрявцева M.B., Оковитый C.B., Нилова B.K., Кудрявцев Б.Н. 2003. Динамика содержания гликогена в нормальной и цирротически измененной печени после введения глюкозы голодным крысам. Цитология 45,1019-1026.

И. Кудрявцева М.В., Безбородкина H.H., Оковитый C.B., Кудрявцев Б.Н. 2004. Влияние гепатопротектора 2-этилтиобензимидазола гидробромида (бемитила) на содержание гликогена в гепатоцитах цирротически измененной печени, находящихся в различных условиях микроокружения. Цитология 46, 735-739.

СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Безбородкина H.H., Кудрявцева М.В., Оковитый C.B., Нилова В.К., Кудрявцев Б Н. 2003. Цитология. 45, 1019-1026. - Бродский В.Я. 1966. Трофика клетки. М., Наука, 354 стр. -Вилкова В.А. 1982 В кн ■ Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен). Л., Изд. Ленинградского университета, 234-240. - Делоне Г.В., Урываева И.В., Корецкий В.Ф., Бродский В.Я. 1987. Онтогенез. 18, 304-307. - Завадская Е Э., Кудрявцева М.В , Кудрявцев Б.Н., Смирнова С.А., Скорина А.Д. 1989. Цитология. 25, 447-451. - Комаров С.А. 1987. Цитология. 29, 845-848. - Кудрявцев Б.Н., Кудрявцева М.В., Шалахметова Т.М., Завадская Е Э., Иоффе В.А., Барский И.Я , Папаян Г В. 1979 Цитология. 21, 218-221. - Кудрявцев Б.Н., Розанов Ю.М. 1974. В кн.: Методы биологии развития. М., Наука, 497-500. - Кудрявцева M В., Безбородкина H.H., Оковитый C.B., Иванова О В, Кудрявцев Б.Н. 2002. Цитология 44, 668-675 - Кудрявцева M В, Безбородкина H.H., Рааченко В Г., Оковитый C.B., Иванова О.И., Кудрявцев Б. Н. 2000. Цитология 42, 550-555 - Кудрявцева М. В., Завадская Е. Э., Скорина А. Д., Смирнова С. А., Кудрявцев Б. H 1983. Лабораторное дело. 9, 21-22. - Кудрявцева М. В., Кудрявцев Б. Н„ Розанов Ю. М. 1974. Цитология. 16, 851-858. - Папаян Г.В., Иоффе В.А., Виноградова Г.Н., Барский И.Я 1974 Цитология.16, 395-398. - Пирс Э 1962 Гистохимия. Теоретическая и прикладная. М., Иностр. лит, 962 стр. - Подымова С.Д. 1999. Болезни печени. М., Медицина, 704 стр. - Шерлок Ш., Дули Дж. 2002. Заболевания печени и желчных путей. М., ГЭОТАР-Мед, 859 стр. - Штейн Г.И, Пантелеев В.Г, Поваркова A.B., Кудрявцев Б.Н. 1998. Цитология. 40, 913-916. - Arion W.J., Walls Н.Е. J. Biol. Chem. 1982 257, 11217-20.-Berteloot A., Vidal H., Werve G. 1991. J. Biol. Chem. 266, 5497-5504. -Bouché С., Serdy S, Kahn C.R. and Goldfme A.B. 2004 Endocrine Reviews 25, 807-830. -Bradford M.M. 1976. Anal. Biochem. 72, 248-254. - Chen С., Williams P.F., Caterson I.D.

1993. Am. J. Physiol. 265, E743-E751. - Chen C„ Williams P.F., Cooney G.J., Caterson I.D. 1992. Int. J. Obes. 16,913-921. - Daly M.E., Vale C„ Walker M, Alberti K.G.M.M., Mathers J.

1997 Am. J. Clin. Nutr. 66, 1072-1085. - Deiteh A.D J. Histochem. Cytochem. 1965. 13, 1718. - de Kalbermatten N., Ravussin E., Maeder E., Geser C., Jequier E., Felber J.P. Metabolism. 1980 29, 62-7 - Dirlewanger M., Schneiter P, Jequier E, Tappy L. 2000 Am J. Physiol 279, E907-E911. - Elliott S.S., Keim N.L., Stern J.S., Teff K„ Havel P.J. 2002. Am. J. Clin. Nutr. 76, 911-922. - Huijing F. Clin Chim Acta. 1970. 30, 567-72. Krahenbuhl S, Weber F.L, Brass E.P. 1991. Hepatology. 14, 1189-1195 - Kruszynska Y.T. 1999. In: Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford: Oxford University Press, 257-286. - -Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N N, Kudryavtsev B.N. 1999 Brit. J. Nutrition 81,473-480. - Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N. N., Radchenko V. G., Okovity S. V., Kudryavtsev B. N. 2001. Europ. J. Gastroenterol, and Hepatol. 13, 693-697. - Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N.N., Okovity S.V., Kudryavtsev B.N. 2003. Exp. Toxic Pathol. 54, 339-347. - Laurent D., Hundal R.S., Dresner A., Price T.B., Vogel S M., Petersen K.F., Shulman G I. 2000. Am J Physiol Endocrinol Metab. 278, E663-E668. - Lowes W„ Walker M., Alberti K.G., Agius L.

1998 Biochem. Biophys. Acta. 1379,134-142. - Mechin M.C., Atmabi B., Pegorier J.P., van de Werve G. 2000. Metabolism. 49, 1200-1203. - Mion F., Galoun A., Agosto E., Minaire Y. 1996. Hepatology 23, 582-588 - Niewoehner CB, Gilboe DP., Nuttall FQ 1984. Am J. Physiol. 246, E89-E94. - Nilsson L.H, Hultman E. 1974. Scand J Clin Lab Invest. 33, 5-10. -Nordlie R.C., Johnson T.W., Comatzer W.E., Twedell G.W. 1979. Biochem. Biophys. Acta. 585, 2-23 - Petersen K.F, Krssak M., Navarro V, Chandramouli V., Hundal R., Schumann W C„ Landau B.R., Shulman G.I. 1999. Am. J. Physiol. 276, E529-E535. - Petrides A.S., Vogt Ch., Schulze-Berge D., Matthews D , Strohmeyer G 1994. Hepatology. 19, 616-627 - Riggio O., Merli M., Leonetti F., Giovannetti P., Foniciello M., Folino S., Tamburrano G., Capocaccia L. 1997. Metabolism. 46, 840-843. - Shearer J., Marchand I., Tamopolsky M.A., Dyck D.J., Graham TE 2001 J Appl Physiol 90,880-888 - Tejwani G A , Pedrosa F O , Pontremoli S , Horecker B.L. 1976. Arch. Biochem. Biophys. 177, 253-264. - Uyeda K. 1979. Adv. Enzymol. 48, 193-244 - Vardanis A 1992 Biochem Cell. Biol. 70, 523-527. - Weibel E.R. 1979. Stereological methods. London, Academic Press, 245 p.

(

Подписано в печать 18.04.2006. Печать цифровая. Тираж 100 экз.

Отпечатано с готового оригинал-макета, предоставленного автором, в Копировальном центре «Восстания I».

Санкт-Петербург, ул. Восстания д.1.

Тел.: 579-57-70

¿QQ& ft

8m Ш

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Безбородкина, Наталья Николаевна

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Печень и ее роль в организме млекопитающих.

2.2. Глюкостатическая функция печени и особенности ее регуляции.

2.3. Гетерогенность гепатоцитов и ее роль в углеводном метаболизме печени.

2.4. Структурно-функциональные изменения печени при циррозе.

2.5. Хроническое повреждающее действие четыреххлористого углерода, как модель экспериментального цирроза печени.

2.6. Метаболизм глюкозы и гликогена при циррозе печени.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Объекты исследования.

3.2 Методы приготовления препаратов.

3.3 Методы количественной цитохимии.

3.4. Метод определения сухого веса гепатоцитов.

3.5 Гистологические исследования.

3.6 Морфометрия митохондриального аппарата гепатоцитов крыс.

3.7 Биохимические методы.

3.8 Методы статистической обработки.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ.

4.1 Морфо-функциональное исследование печени и гепатоцитов крыс контрольной и опытной группы.

4.1.1 Морфометрия паренхимы, уровни плоидности и сухая масса гепатоцитов.

4.1.2. Морфометрия митохондриального аппарата гепатоцитов нормальной и циррозной печени крыс.

4.1.3. Активность систем микросомального и перекисного окисления нормальной и цирротически измененной печени крыс.

4.2. Биохимические показатели крови крыс контрольной и опытной группы.

4.2.1. Уровни глюкозы, активности Ал AT, АсАТ, общего белка и некоторых продуктов катаболизма в крови крыс контрольной и опытной группы.

4.2.2. Концентрация глюкозы в крови крыс контрольной и опытной групп на разных этапах после введения глюкозы или фруктозы голодным животным.

4.2.3. Активность про- и антиоксидантных систем в крови крыс контрольной и опытной группы

4.3. Концентрация гликогена и активность ферментов углеводного обмена в нормальной и цирротически измененной печени крыс на разных этапах после введения глюкозы или фруктозы голодным животным.

4.3.1. Концентрация гликогена.

4.3.2. Активность гликогенфосфорилазы и гликогенсинтазы.

4.3.3. Активность глюкозо-6-фосфатазы и глюкокиназы.

4.3.4. Активность фруктозо-1,6-дифосфатазы и фосфофруктокиназы. 105 4.4 Исследование содержания гликогена в гепатоцитах, изолированных из нормальной и цирротической печени, через разные интервалы времени после введения голодным крысам глюкозы или фруктозы.

4.4.1. Цитофлуориметрия содержания гликогена в изолированных гепатоцитах крыс контрольной и опытной группы.

4.4.2. Анализ распределения гепатоцитов по содержанию гликогена в нормальной и цирротически измененной печени на разных этапах рефидинга крыс глюкозой или фруктозой.

4.5. Динамика накопления гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки нормальной и цирротически измененной печени после введения глюкозы или фруктозы голодным крысам. ф 4.6. Цитофотометрическое определение содержания гликогена и активности глюкозо-6-фосфатазы в гепатоцитах портальной и центральной зонах дольки печени крыс контрольной и опытной группы.

4.7. Некоторые показатели углеводного метаболизма в печени, мышцах и надпочечниках крыс контрольной и опытной группы в постабсорбтивном периоде.

4.8. Сравнительная морфометрическая оценка печени больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

4.9. Биохимические показатели крови больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

4.9.1. Активность Ал AT, АсАТ, концентрация глюкозы, общего белка и некоторых продуктов катаболизма в крови больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

4.9.2. Активность про- и антиоксидантных систем в крови больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

4.10. Цитофлуориметрическое определение содержание гликогена в гепатоцитах больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

4.11. Количественный анализ содержания гликогена в гепатоцитах разных зон дольки нормальной и цирротически измененной печени человека.

4.12. Активность гликогенсинтазы, гликогенфосфорилазы и глюкозо-6-фосфатазы в печени больных хроническим гепатитом и циррозом печени.

5. ОБСУЖДЕНИЕ.

6. ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сравнительный анализ метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени"

Живые организмы - системы открытого типа, требующие постоянного притока энергии в виде питательных веществ. Углеводы, на долю которых приходится около 75% от пищи, поступающей в течение суток и более 50% от суточного количества калорий, требуемых для выполнения многочисленных функций в организме, представляют основной компонент пищи человека. При этом глюкоза и фруктоза являются наиболее распространенными углеводами, входящими в состав пищи как в свободном виде, так и в виде олигосахаридов, полисахаридов, гликозидов и других производных.

Печень млекопитающих играет ключевую роль в метаболизме глюкозы и фруктозы. Глюкоза является важнейшим источником энергии для многих тканей, а для некоторых из них (мозг, семенники, клетки крови и др.) она является единственным источником получения энергии. Способность печени синтезировать гликоген из глюкозы, поступающей с пищей, и расщеплять его после завершения пищеварения, а также синтезировать глюкозу из веществ неуглеводной природы позволяет поддерживать концентрацию глюкозы в крови в достаточно узких границах. Фруктоза в печени превращается в глюкозу, которая затем используется другими тканями, или метаболизируется в различные промежуточные продукты. Поступление фруктозы в клетки печени и регуляция ее метаболизма значительно отличаются от таковых для глюкозы. Исходя из биологической важности глюкозы и фруктозы, можно ожидать, что любые поражения печени приведут к серьезным нарушениям метаболизма этих моносахаров.

Хронические гепатиты различной этиологии - наиболее распространенные заболевания печени человека. Постепенно развиваясь, хронический гепатит переходит в свою завершающую и наиболее опасную для жизни стадию - цирроз печени. Цирроз приводит к значительной перестройке архитектоники органа, которая выражается, прежде всего, в потере дольковой структуры паренхимы, замещении части паренхимы соединительной тканью, перестройке сосудистого русла и ряде других нарушений. В результате этих изменений клетки печени вынуждены выполнять свои функции в условиях гипоксии и недостаточного снабжения различными субстратами (Подымова, 1999; Шерлок, Дули, 2002). Показано, что метаболизм глюкозы и гликогена при циррозе претерпевает значительные изменения. В целом, для больных циррозом характерен метаболизм, который наблюдается у здоровых людей при длительном голодании. Отличительными чертами такого метаболизма являются: образование энергии преимущественно за счет окисления липидов, а не углеводов, как у здоровых людей; продукция глюкозы после ночного голодания происходит, главным образом, за счет глюконеогенеза, а не гликогенолиза, как в нормальной печени; увеличенный кетогенез и т.д. (Schneeweiss et al., 1990; Greco et al., 1998; Kruszynska, Mclntyre, 1991; Kruszynska, 1999). Показано также, что углеводный обмен при циррозе приобретает ряд черт свойственных диабету, основным признаком которого является интолерантность ряда органов к глюкозе и инсулину (Shmueli et al., 1993; Petrides, 1994; Mion et al., 1996). Полагают, что одной из причин интолерантности больных циррозом к глюкозе может быть снижение способности печени синтезировать гликоген (Riggio et al., 1997; Kruszynska, 1999).

В отличие от глюкозы, абсорбция фруктозы печенью не зависит от инсулина. Поэтому считается, что инфузия фруктозы больным циррозом печени и диабетом, позволяет избежать ряда нежелательных эффектов, которые наблюдаются при использовании глюкозы (Daly et al., 1997; Dirlewanger et al., 2000; Elliot et al., 2002). Полагают также, что введение фруктозы по сравнению с глюкозой вызывает более быстрое и интенсивное накопление гликогена в печени. Однако имеющиеся на этот счет данные противоречивы (Nilsson, Hultman, 1974; Niewoehner et al., 1984).

Углеводный метаболизм в печени осуществляется с помощью многих ферментов, активность которых регулируется различными гормональными, нервными, субстратными и другими механизмами (Matsuhisa et al., 2000; Roach, 2002; Алейникова, Воробьева, 2005). Помимо них, важную роль в регуляции углеводного обмена в печени играют различные тканевые и клеточные факторы. Показано, что активность ферментов углеводного обмена, содержание гликогена и направление основных субстратных потоков в гепатоцитах в значительной мере зависят от локализации клеток в дольке печени, степени их плоидности, а также фазы клеточного цикла, в которой они находятся (Кудрявцев и др., 1980; Майтесян, 1983; Jungermann, 1997). В отличие от нормальной печени, метаболизм гликогена и особенности его регуляции в цирротически измененной печени изучены крайне недостаточно, а имеющиеся данные довольно противоречивы. Противоречивость данных об углеводном обмене в цирротической печени связана главным образом с тем, что они получены на материале с разной степенью выраженности патологических изменений в органе и на разных стадиях пищеварительного цикла животных и человека.

Цель настоящей работы состояла в сравнительном исследовании метаболизма гликогена в нормальной и цирротической печени крыс на различных стадиях после перорального введения глюкозы или фруктозы голодным животным. Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

1. Провести морфометрический анализ паренхимы нормальной и цирротической печени крыс.

2. Определить уровни плоидности и сухую массу гепатоцитов в норме и при циррозе печени.

3. Провести морфометрический анализ митохондрий в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс.

4. Исследовать активность ключевых ферментов углеводного обмена и уровни гликогена в нормальной и цирротически измененной печени крыс при голодании и затем через разные инервалы времени после введения животным глюкозы или фруктозы.

5. Исследовать скорость накопления гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки нормальной и цирротической печени крыс после введения голодным животным глюкозы или фруктозы.

6. Исследовать зависимость активности гликогенсинтазы и гликогенфосфорилазы от содержания гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени крыс.

7. Определить содержание гликогена и активность ключевых ферментов его метаболизма в печени больных хроническим гепатитом различной этиологии на стадии до цирроза печени и при циррозе печени.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Безбородкина, Наталья Николаевна

6. ВЫВОДЫ

1. Хроническое воздействие на крыс CCI4 в течение 6 мес приводит к резкому снижению активности глюкокиназы и гликогенфосфорилазы а в цирротической печени голодных животных (в 6 и 2 раза соответственно), а также увеличению втрое активности фрутозо-1,6-дифосфатазы и фосфофруктокиназы по сравнению с нормальной печенью. Активность гликогенсинтазы и глюкозо-6-фосфатазы при этом не отличалась от нормы.

3. Для инициации накопления гликогена в нормальной печени крыс необходимо снижение активности гликогенфосфорилазы а, в то время как в цирротической печени синтез гликогена, который начинается с 20-30-ти минутной задержкой, происходит при постоянно низкой активности гликогенфосфорилазы а.

5. Интенсивность накопления гликогена в перипортальных гепатоцитах нормальной и цирротической печени выше, чем в гепатоцитах расположенных в центральной зоне дольки печени.

8. Развитие цирроза приводит к уменьшению концентрации внутренних мембран митохондрий на единицу площади гепатоцита и количества крист на митохондрию в 1.5 и 2 раза соответственно.

9. Увеличенное содержание гликогена в гепатоцитах цирротической печени человека и крысы в постабсорбтивном периоде связано с ослаблением скорости деградации гликогена вследствие низкой активности гликогенфосфорилазы а.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Безбородкина, Наталья Николаевна, Санкт-Петербург

1. Авдеева Л.В., Воробьева С.А. Гормональгая регуляция обмена веществ и функций организма// Биохимия. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. с. 545-616.

2. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки, т. 1. М.: Мир, 1994. 515 с.

3. Алейникова Т.Л., Воробьева С.А. Обмен углеводов // Биохимия. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. с. 297-370.

4. Анацкая О.В. Межвидовая вариабельность уровня плоидности гепатоцитов и кардиомиоцитов млекопитающих и птиц и ее причины. Автореф. канд. дис. СПб., 1999. 22 с.

5. Афанасьева Ю.И., Кузнецова С.Л., Юрина Н.А. Гистология, цитология и эмбриология. М.: Медицина, 2004. 766 с.

6. Белобородова Е.И. Всасывательная функция кишечника при циррозах печени // Клин. мед. 1978, 56: 61-65.

7. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 2004. 704 с.

8. Берсенев А.В., Сипливый В.А., Мельникова С.М., Череватова С.Х. Прогнозирование печеночной недостаточности у больных с циррозом печени при хирургическом лечении портальной гипертензии // Клиническая хирургия 1993, 11:38-40.

9. Билич Г.Л., Крыжановский В.А. Универсальный атлас (цитология, гистология, анатомия человека). М.: ОНИКС, 2005. 1007 с.

10. Блюгер А.Ф. Вирусный гепатит. Рига: Звайгзне, 1978. 398 с.

11. Блюгер А.Ф., Новицкий И.Н. Практическая гепатология. Рига: Звайгзне, 1984. 405с.

12. Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука, 1966.

13. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. М.: Наука, 1981. 259 с.

14. Бродский В.Я., Цирекидзе Н.Н., Арефьева A.M. ДНК и белок в постнатальном росте кардиомиоцитов мыши // Цитология 1983, 25: 434-439.

15. Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Чучалин B.C., Саратиков А.С. Роль перекисного окисления липидов в механизме пролифирации фиброзной ткани при экспериментальном хроническом гепатите // Пат. Физиол. Экстр. Терапия 1996,2:37-39.

16. Верин В.К. Дивергентная дифференцировка гепатоцитов и холангиоцитов в эмбриональном и репаративном гистогенезе печени // Дисс. докт. наук. Л.: ВИЭМ, 1984. 280 с.

17. Верин В.К. Печень // Руководство по гистологии, т.2. Спб.: СпецЛит, 2001. с. 64-78.

18. Вилкова В. А. 1982. Определение содержания и интенсивности обмена глюкозы и гликогена в тканях // Методы биохимических исследований. Л.: Изд. ЛГУ, 1982. с. 234-240.

19. Высоцкая Р.А., Логинов А.С., Варванина Г.Г., Пиленицын А.Ю. Значение аденилатциклазной системы печени в развитии ее хронических поражений // Бюл. Эксп. Биол. Мед. 1998, 125: 450-453.

20. Гайер Г. Электронная гистохимия. М.: Мир, 1974. 523 с.

21. Гилберт С. Биология развития, т. 1. М.: Мир, 1993. 228 с.

22. Голенченко В.А., Силаева С.А. Биосинтез нуклеиновых кислот ибелков (матричные биосинтезы). Основы молекулярной генетики // Биохимия. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. с. 140-227.

23. Гулак П.В., Дудченко A.M., Зайцев В.В, Лукьянова Л.Д. и др. Гепатоцит: Функционально-метаболические свойства. М.: Наука, 1985. 270 с.

24. Делоне Г.В., Урываева И.В., Корецкий В.Ф., Бродский В.Я. Анализ постнатального роста печени мыши на основе учета числа гепатоцитов, их массы и плоидности // Онтогенез 1987, 18: 304-307.

25. Држевецкая И.А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы. М.: ВШ, 1994. 255 с.

26. Дубинина Е.Е., Сальникова JI А., Ефимова Л.Ф. Активность и изоферментный спектр супероксиддисмутазы эритроцитов и плазмы крови человека//Лаб. дело 1983, 10: 30-33.

27. Емельянов А.В. Некоторые особенности метаболизма гликогена в гепатоцитах при хронических поражения печени. Автореф. канд. дис. СПб., 1997. 22 с.

28. Завадская Е.Э. Цитологические механизмы репаративного роста печени в условиях ее хронического повреждения и частичной гепатэктомии: Автореф. канд. дис. Л., 1989. 22 с.

29. Завадская Е.Э., Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н., Смирнова С.А., Скорина А.Д. Сухой вес изолированных гепатоцитов человека в норме и при хроническом гепатите // Цитология 1983, 25: 447-451.

30. Заварзин А.А. Синтез ДНК и кинетика клеточных популяций в онтогенезе млекопитающих. Л.: Наука, 1967. 195 с.

31. Змызгова А.В. Вирусные гепатиты. М.: Медицина, 1999. 154 с.

32. Карташева О.Я. Экспериментальная патология печени. Рига: Зинатне, 1985. 148 с.

33. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия. М.: Мир, 2000. 469 с.

34. Комаров С.А. Кинетика индекса меченых ЗН-тимидином ядер в развивающихся мышечных волокнах личинок тутового шелкопряда // Цитология 1987, 29: 845-848.

35. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. М.: Дрофа, 2004. 639 с.

36. Косенко Е.А., Каминский Ю.Г. Углеводный обмен, печень и алкоголь. Пущино, 1988, с.7-30.

37. Кудрявцев Б.Н., Курявцева М.В., Завадская Е.Э., Смирнова С.А., Скорииа А.Д. Полиплоидия в печени человека в норме и при заболевании гепатитом // Цитология. 1982. Т.24. С.436-444.

38. Кудрявцев Б.Н., Кудрявцева М.В., Сакута Г.А., Скорина А.Д., Штейн Г.И. Исследование полиплоидизации гепатоцитов при некоторых хронических заболеваниях печени у человека // Цитология 1993, 35: 70-83.

39. Кудрявцев Б.Н., Кудрявцева М.В., Завадская Е.Э., Шалахметова Т.М., Комаров С.А., Комарова Н.И. Метод определения в одной и той же клетке содержания гликогена, ДНК, Н-тимидиновой метки и сухого веса // Цитология 1980,21: 79-84.

40. Кудрявцев Б.Н., Кудрявцева М.В., Сакута Г.А., Штейн Г.И. Кинетика клеточной популяции паренхимы печени человека в течение постнатального развития, в период стабилизации роста и при старении // Цитология 1991, 33: 95-107

41. Кудрявцев Б.Н., Кудрявцева М.В., Шалахметова Т.М., Завадская Е.Э., Иоффе В.А., Барский И.Я., Папаян Г.В. Цитофотометрическое исследование содержания гликогена в гепатоцитах различной плоидности у взрослых крыс // Цитология 1979, 21:218-221.

42. Кудрявцев Б.Н., Розанов Ю.М. Цитофлуориметрия. Общие принципы // Методы биологии развития. М.: Наука, 1974. С.497-500.

43. Кудрявцева М.В. Гликогеноз клеток печени при хроническом гепатите у человека и его диагностическое значение // Успехи гепатологии 1987, 13: 201-211.

44. Кудрявцева М. В., Безбородкина Н. Н., Нилова В. К., Кудрявцев Б. Н. Влияние частичной гепатэктомии на уровень гликогена в гепатоцитах портальной и центральной зон дольки цирротически измененной печени крыс // Цитология 2001, 43: 674-680.

45. Кудрявцева М. В., Безбородкина Н. Н., Оковитый С. В., Кудрявцев Б. Н. Исследование влияния бемитила на углеводный обмен цирротически измененной печени крыс // Цитология 2002, 44: 166-174.

46. Кудрявцева М. В., Безбородкина Н. Н., Радченко В. Г., Оковитый С. В., Иванова О. В., Кудрявцев Б. Н. Метаболическая гетерогенность гликогена в гепатоцитах больных циррозом печени // Цитология 2000, 42: 550-554.

47. Кудрявцева М.В., Безбородкина Н.Н., Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н. Состояние гликогенообразовательной функции гепатоцитов цирротически измененной печени крыс после воздействия хорионическим гонадотропином // Цитология 1999, 41: 488- 498.

48. Кудрявцева М.В., Емельянов А.В., Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н. Гликогенообразовательная функция гепатоцитов в условиях регенерации циррозной печени крыс после частичной гепатэктомии // Цитология 1996, 38: 934-948.

49. Кудрявцева М.В., Емельянов А.В., Сакута Г.А., Скорина А.Д., Слепцова JI.A., Кудрявцев Б.Н. Цитофлуориметрическое исследование содержания гликогена и его фракций в гепатоцитах больных циррозом печени различной этиологии//Цитология 1992,34: 100-107.

50. Кудрявцева М.В., Завадская Е.Э. Цитофлуориметрическое исследование содержания гликогена и его фракций в клетках печени крыс в условиях его синтеза и распада // Цитология 1982, 24: 777-783.

51. Кудрявцева М.В., Завадская Е.Э., Иванов В.А., Кудрявцев Б.Н. Влияние хронической интоксикации крыс СС14 и частичной гепатэктомии патологически измененного органа на уровень гликогена в гепатоцитах // Цитология 1986, 28: 607-614.

52. Кудрявцева М.В., Завадская Е.Э., Скорина А.Д., Смирнова С.А., Кудрявцев Б.Н. Метод получения изолированных клеток печени из материала прижизненных пункционных биопсий // Лаб.дело. 1983, 9: 21-22.

53. Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н., Розанов Ю.М. Влияние продолжительности окисления периодатом на интенсивность и специфичность PAS-реакции с обычным реактивом Шиффа и реагентом типа Шиффа аурамином SO2// Цитология. 1972. Т.14. С. 1357-1362.

54. Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н., Розанов Ю.М. О двух фракциях гликогена в клетках печени крыс (цитофлуориметрическое исследование) // Цитология 1974, 16: 851-858.

55. Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н., Розанов Ю.М. Определение количества гликогена в клетках печени крыс с использованием флуоресцентного красителя аурамина 00//Цитология 1970, 12: 1060-1067.

56. Кудрявцева М.В., Сакута Г.А., Штейн Г.И., Кудрявцев Б.Н. Динамика синтеза гликогена в гепатоцитах различных зон долек печени крыс // Цитология 1990, 32: 1010-1018.

57. Кудрявцева М.В., Скорина А.Д., Кудрявцев Б.Н. Цитофлуориметрическое исследование фракций гликогена в клетках печени больных хроническим вирусным и хроническим алкогольным гепатитом // Цитология 1988, 30: 705-709.

58. Кудрявцева М.В., Скорина А.Д., Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н. Цитофлуориметрическое исследование содержания гликогена в гепатоцитах больных при различных формах алкогольного поражения печени // Цитология 1989,31: 1044-1049.

59. Кудрявцева М.В., Смирнова С.А., Скорина А.Д., Завадская Е.Э., Кудрявцев Б.Н. Цитофлуориметрическое исследование содержания гликогена в клетках паренхимы печени больных гепатитом // Цитология 1980, 22:428-433.

60. Ленинджер А. Основы биохимии, т. 2. М.: Мир, 731 с. Логинов А.С., Высоцкая Р.А. Простагландины при хронических заболеваниях печени // Вестн. Рос. Ак. Мед. Наук 1995, 12: 32-38.

61. Логинов А.С., Матюшин Б.Н. Внутриклеточная активация кислорода и молекулярные механизмы автоокислительного поврежедния печени // Вестн. Рос. Акад. Мед. Наук 1994, 5: 3- 17.

62. Луфт В.М., Костюченко А.Л. Клиническое питание в интенсивной медицине: Практ. руководство. СПб, 2002.176 с.

63. Майтесян Е.С. Сравнительный анализ функциональной активности гепатоцитов различных классов плоидности. Автореф. канд. дис. Л., 1983. 22 с.

64. Мамырбаева З.Ж., Шалахметова Т.М., Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н. Влияние Cd2+ и Sr2+ на содержание гликогена в гепатоцитах крыс разного возраста// Цитология 1998,40: 432-444.

65. Мансуров Х.Х., Кутчак С.Н. Биопсия печени. Душанбе: Изд-во АМН СССР, 1964. 138 с.

66. Марри Р., Греннер Д., Мейерс П., Родуэлл В. Биохимия человека, т.1. М.: Мир, 1993.384 с.

67. Маянский Д.Н. Клетка Купфера и система мононуклеарных фагоцитов. Новосибирск: Наука, 1981. 172 с.

68. Маянский Д.Н., Виссе Э., Декер К. Новые рубежи гепатологии. Новосибирск: Изд-во РАМН, 1992. 266 с.

69. Маянский Д.Н., Зубахин А.А. Клеточно-молекулярные механизмы формирования цирроза печени // Рос. журн. гастр. гепатол. колопр. 1998, 6: 313.

70. Михайлов М. И., Шахгильдян И. В., Должанская Н. А., Романенко В. В. Вирусные гепатиты и наркотики (распространение и профилактика) // Вирусные инфекции на пороге XXI века: эпидемиология и профилактика. СПб., 1999. с. 71-72.

71. Муслимов С. А. Морфологические аспекты регенеративной хирургии.

72. Уфа: Башкортостан, 2000. 166 с.

73. Неворотин А.И., Юкина Г.Ю. Модернизация методов определения НАДН-диафоразы и глюкозо-6-фосфатазы на светооптическом уровне // Цитология 1997, 30: 755-758.

74. Ни В.В. Полиплоидия и устойчивость клеток печени к действию повреждающих агентов. Автореф. канд. дис. JI., 1989. 22 с.

75. Ньюсхолм Э., Старт К. Регуляция метаболизма. М.: Мир, 1977. 407 с.

76. Огородникова Л.Г. Глюкозо-6-фосфатаза и ее физиологическая роль. Л.: Наука, 1986. 123 с.

77. Осадчая Л.М. Выделение гладких и шероховатых микросом из ткани печени // Методы биохимических исследований. Л.: Изд. ЛГУ, 1982. 272 с.

78. Папаян Г.В., Иоффе В.А., Виноградова Г.Н., Барский И.Я. Двухлучевой импульсный микрофлуориметр с цифровым отсчетом // Цитология 1974, 16: 395-398.

79. Пирс Э. Гистохимия. Теоретическая и прикладная. М.: Изд-во иностр. лит., 1962. 962 с.

80. Подымова С. Д. Болезни печени. Руководство для врачей. М.: Медицина, 1999. 704 с.

81. Покровский В.М., Коротько Г.Ф. Физиология человека. М.: Медицина, 2003. 656 с.

82. Розанов Ю.М., Кудрявцев Б.Н. Метод флуоресцентной цитофотометрии для количественного определения ДНК// Цитология 1967, 9: 361-367.

83. Розенфельд Е.А., Попова И.А. Врожденные нарушения обмена гликогена. М.: Медицина, 1989. 240 с.

84. Романова Л.А., Стальная И.Д. Определение гидроперекисей липидов с помощью тиоцианата аммония // Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. с. 64-66.

85. Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н. Клеточные механизмы регенерации циррозной печени крыс. I. Соотношение процессов пролиферации,полиплоидизации и гипертрофии клеток после прекращения хронического воздействия СС14//Цитология 1996,38: 1158-1171.

86. Сакута Г.А., Кудрявцев Б.Н., Клеточные механизмы регенерации цирротически измененной печени крыс. II Влияние частичной гепатэктомии на пролиферацию, полиплоидизацию и гипертрофию гепатоцитов // Цитология 2005, 47: 379-387.

87. Сапин М.Р. Анатомия человека, т. 1. М.: Медицина, 1993. 544 с.

88. Саркисов Д.С., Пальцын А.А., Попова И.В., Бадикова А.К., Втюрин Б.В. О влиянии ритма действия повреждающего агента на характер репаративной регенерации печени // Арх.патол. 1975, 37: 80-87.

89. Северин Е.С. Биохимия. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. 779 с.

90. Серов В.В. Морфология дистрофических процессов // Итоги науки и техники. Сер. "Патологическая анатомия", т. 2. М.: ВИНИТИ, 1980.

91. Серов В.В., Дрозд Т.Н., Лебедев С.П., Попова И.А., Попов М.С. Цирроз печени // Клиническая морфология заболеваний печени, т. 6. М.: ВИНИТИ, 1987. с.77-132.

92. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло // Рос. журн. гастр. гепатол. колопрокт. 1999, 1: 12-18.

93. Солопаев Б.П. Регенерация нормальной и патологически измененной печени. Горький: Волго-Вятское книжн. изд-во, 1980. 240 с.

94. Солопаев Б.П. Сравнительное изучение регенерации нормальных и патологически измененных органов// Сравнительные аспекты изучения регенерации и клеточной пролиферации, 4.2. Горький, 1985. с. 279-281.

95. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. СПб.: Теза, 1998. 325 с.

96. Ткаченко Б.И. Физиология человека. СПб.: Ассоциация преподавателей высших учебных заведений, 1996. 424 с.

97. Трифонов Е.В. Психофизиология организма. Толковый русско-английский словарь. 1997.

98. Туманишвили Г.Д. О биологическом значении и причинах возникновения полиплоидных клеток печени // Цитология 1973, 15: С. 635642.

99. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии, т. 2. М.: Мир, 1981.617 с.

100. Фактор В.М., Урываева И.В. Полиплоидизация гепатоцитов мыши при многократных воздействиях СС14// Бюл.эксперим.биол.мед. 1980, 81: 11: 614616.

101. Хэм А., Кормак Д. Гистология, т. 4. М.: Мир, 1983. 245 с.

102. Шалахметова Т.Н., Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н. Содержание белка в гепатоцитах разной степени плоидности у крыс в постнатальный период развития // Цитология 1981, 23: 674-681.

103. Штейн Г. И., Пантелеев В. Г., Поваркова А. В., Кудрявцев Б.Н. Возможности анализатора изображений «Видеотест» для проведения микрофотометрических исследований в цитологии. Цитология 1998, 40: 913916.

104. Шулутко Б.И. Болезни печени и почек. СПб.: Изд. Ренкор, 1995. 479 с.

105. Agius L, Peak М, Newgard СВ, Gomez-Foix AM, Guinovart JJ. Evidence for a role of glucose-induced translocation of glucokinase in the control of hepatic glycogen synthesis // J. Biol. Chem. 1996, 271: 30479 -30486.

106. Agius L., Tosh D. Acinar zonation of cytosolic but not organelle-bound activities of phosphoenolpyruvate carboxykinase and aspartate aminotransferase in guinea-pig liver // Biochem J. 1990, 271: 387-91.

107. Agius L. Hexokinase and glucokinase binding in permeabilized guinea-pig hepatocytes// Biochem J. 1994, 303: 841-846.

108. Aiston S., Andersen В., and Agius L. Glucose 6-Phosphate regulates hepatic glycogenosis through inactivation of phosphorylase // Diabetes 2003, 52: 13331339.

109. Aiston S., Hampson L., Gomez-Foix A.M., Guinovart J.J., Agius L. Hepatic glycogen synthesis is highly sensitive to phosphorylase activity: evidence from metabolic control analysis //J. Biol. Chem. 2001, 276: 23856 -23866.

110. Alberts В., Bray D., Lewis J., Raff M., Roberts K., Watson J.D. Molecular biology of the cell. NY: Garland Publishing, 1983. 756 p.

111. Al-Habori M. Macromolecular crowding and its role as intracellular signalling of cell volume regulation. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2001, 33: 844-64.

112. Alonso M.D., Lomako J., Lomako W.M., Whelan W.J. A new look at the biogenesis of glycogen // FASEB J. 1995, 9:11 26-1137.

113. Alonso M.D., Lomako J., Lomako W.M., Whelan W.J. Tyrosine-194 of glycogenin undergoes autocatalytic glucosylation but is not essential for catalytic function and activity // FEBS Lett. 1994. Vol.342. P.38-42.

114. Andersen В., Zierz S., Jungermann K. Alteration in zonation of succinate dehydrogenase, phosphoenolpyruvate carboxykinase and glucose-6-phosphatase in regenerating rat liver// Histochemistry 1984, 80: 97-101.

115. Andersen В., Zierz S., Jungermann K. Perinatal development of the distribution of phosphoenolpyruvate carboxykinase and succinate dehydrogenase in rat liver parenchyma//Eur.J.Cell.Biol. 1983,30: 126-131.

116. Anthoni P.P., Ishak K.G., Naya K.N.C. The morphology of cirrhosis. Recomendations of definition nomenclature and classification by a working group sponsored by WHO // J.Clin.Pathol. 1978, 31: 395-414.

117. Aon M.A., Curtino J.A. Protein-bound glycogen is linked to tyrosine residues // Biochem. J. 1985, 229: 269-272.

118. Arai M., Leo M.A., Nakano M., Gordon E.R., Lieber C.S. Biochemical and morphological alterations of baboon hepatic mitochondria after chronic ethanol consumption // Hepatology 1984,4: 165-174.

119. Arias I.M., Popper H., Schachter D., Shafritz D.A. The liver: Biology and pathobiology. NY: Raven Press, 1994. 1009 p.

120. Arosio В., Santambrogio D., Gagliano N., Annoni G. Changes in expression ш of the albumin, fibronectin and type I procollagen genes in Ccl4-induced liverfibrosis: effect of pyridoxol L,2-pyrrolidon-5 carboxylate // Pharmacol.Toxicol. 1993,73:301-304.

121. Arion W.J., Schulz L.O., Lange A.J., Telford J.N., Walls H.E. The characteristics of liver glucose-6-phosphotase in the envelope of isolated nuclei and microsomes are identical // J. Biol. Chem. 1983, 258: 12661-12669.

122. Babcock M.B., Cardell R.R. Hepatic glycogen patherns in fasted and fed rats // Amer. J. Anat. 1974, 140: 299-338.

123. Barford D., Hu S.H., Johnson L.N. Structural mechanism for glycogen phosphorylase control by phosphorylation and AMP // J. Mol. Biol. 1991, Vol.218. P.233-237.

124. Ф Barnes K., Ingram J.C., Porras O.H., Barros L.F., Hudson E.R., Fryer L.G.et al. Activation of GLUT1 by metabolic and osmotic stress: potential involvement of AMP-activated protein kinase (AMPK) // J. Cell. Sci. 2002, 115: 2433-2442.

125. Barrett E. J., Bevilacqua S., DeFronzo R. A., Ferrannini E. Glycogen turnover during refeeding in the postabsorptive dog: implications for the estimation of glycogen formation using tracer methods // Metabolism. 1994, 43: 285-292.

126. Basciano H., Federico L., Adeli K. Fructose, insulin resistance, and metabolic dyslipidemia // Nutr Metab (Lond). 2005, 2: 5.

127. Bates E.J., Heaton G.M., Taylor C., Kernohan J.C., Cohen P. Debranching enzyme from rabbit skeletal muscle; evidence for the location of two active centres on a single polypeptide chain //FEBS Lett. 1975, 58: 185.

128. Baumann C.A., Ribon V., Kanzaki M., Thurmond D.C., Mora S., Shigematsu S., Bickel P.E., Pessin J.E., Saltiel A.R. CAP defines a second signalling pathway required for insulin-stimulated glucose transport// Nature. 2000, 407: 202-207.

129. Bedoya F., Matschinsky F.M., Shimizu Т., O'Neil J.J., Appel M.C. Differential regulation of glucokinase activity in pancreatic islets and liver of the rat//J. Biol. Chem. 1986, 261: 10760-10764.

130. Beeckmans S., Van Driessche E., Kanarek L. Clustering of sequential enzymes in the glycolytic pathway and the citric acid cycle // J. Cell Biochem. 1990. Vol.43. P.297-306.

131. Belfiore F., Romeo F., Iannello S., Salamone C. The glucose-6-phosphatase/glucokinase ratio in the liver of obese-diabetic subjects // Biochem. Med. Metab. Biol. 1989, 41: 77-80.

132. Bell G.I., Burant C.F., Takeda J., Gould G.W. Structure and function of mammalian facilitative sugar transporters // J. Biol. Chem. 1993, 268: 1916119164.

133. Benedetty A., Casini A., Ferrali M., Comporti M. Studies on the relationships between carbon tetrachloride-induced alterations of liver microsomal lipids and impairment of glucose-6-phosphatase activity // Exp. Mol. Pathol. 1977, 27: 309-323.

134. Beresford G.W., Agius L. Epidermal growth factor counteracts insulin-induced expression of glucokinase in hepatocytes // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994, 201: 902-908.

135. Beringer A., Thaler H. Uber quantitative untersuchungen des glykogengehaltes der leber bei gesunden und kranken menschen // Wien. Klin. Wschr. 1964, 76:627-631.

136. Berteloot A., Vidal H., Van de Werve G. Rapid kinetics of liver microsomal glucose-6-phosphatase // J. Biol. Chem. 1991, 266: 5497-5507.

137. Bezerra R.M., Ueno M., Silva M.S., Tavares D.Q., Carvalho C.R., Saad M.J. A high fructose diet affects the early steps of insulin action in muscle and liver of rats // J. Nutr. 2000, 130: 1531-1535.

138. Biorn A.C., Graves D.J. The ami no-terminal tail of glycogen phosphorylase is a switch for controlling phosphorylase conformation, activation, and response to ligands // Biochemistry 2001, 40: 5181 -5189.

139. Bioulac-Sage P., Le Bail В., Balabaud C. Liver and biliary-tract histology // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press, 1999. p. 13-23.

140. Bircher J., Benhamou J-P., Mclntyre N., Rizzetto M., Rodes J. Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press, 1999. 1086 P

141. Bois-Joyeux В., Chanez M., Peret J. Age-dependent glycolysis and gluconeogenesis enzyme activities in starved-refeed rats // Diabete & Metabolism (Paris) 1990, 16: 504-512.

142. Bollen M., Keppens S., Stalmans W. Specific features of glycogen metabolism in liver// Biochem. J. 1998,336: 19-31.

143. Bondy P.K. Abnormalities in liver disease // Amer. J. Med. 1958, 24: 428436.

144. Bouche C., Serdy S., Kahn R.C., Goldfine A.B. The Cellular Fate of Glucose and Its Relevance in Type 2 Diabetes // Endocrine Reviews 2004, 25: 807-830.

145. Bradford M.M. A rapid and simple method for quantitation of microgram quantities of proteins utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem. 1976, 72:248-254.

146. Britton R.S., Bacon B.R. Role of free radicals in liver diseases and hepatic fibrosis // Hepatogastroenterology. 1994, 41: 343-348.

147. Brodsky V.Y., Uryvaeva I.V. Cell polyploidy: its relation to tissue growth and function // Intern.Rev.Cytol. 1977, 50: 275-332.

148. Brown K.S., Kalinowski S.S., Megill J.R., Durham S.K., Mookhtiar K.A. Glucokinase regulatory protein may interact with glucokinase in the hepatocyte nucleus // Diabetes 1997, 46: 179-186.

149. Burcelin R., Eddouks M., Kande J., Assan R., Girard J. Evidence that GLUT-2 mRNA and protein concentrations are decreased by hyperinsulinaemia and increased by hyperglycaemia in liver of diabetic rats // Biochem. J. 1992, 288: 675-679.

150. Burchell A., Burchell B. Stabilization of glucose-6-phosphatase activity by a 21000 dalton hepatic microsomal protein // Biochem. J. 1985, 230: 489-495.

151. Burchell A., Burchell B. Stabilization of partially-purified glucose-6-phosphatase by fluoride. Is enzyme inactivation caused by dephosphorylation? // FEBS Lett. 1980, 118: 180-184.

152. Burchell A., Hume R. The gIucose-6-phosphatase system in human development//Histol. Histopathol. 1995, 10: 979-993.

153. Burchell B. Reconstitution of purified Wistar rat liver bilirubin UDP-glucuronyltransferase into Gunn-rat liver microsomes // Biochem. J. 1982, 201: 653-656.

154. Buschiazzo A., Ugalde J.E., Guerin M.E., Shepard W., Ugalde R.A., Alzari P.M. Crystal structure of glycogen synthase: homologous enzymes catalyze glycogen synthesis and degradation // EMBO J. 2004, 23: 3196-3205.

155. Cadefau J., Bollen M., Stalmans W. Glucose-induced glycogenesis in the liver involves the glucose-6-phosphate-dependent dephosphorylation of glycogen synthase //Biochem J. 1997, 322: 745-50.

156. Calder P.C., Geddes R. Digestion of protein associated with muscle and liver glycogen//Carbohydr. Res. 1986, 148: 173-177.

157. Calder P.C., Geddes R. Heterogeneity of glycogen synthesis upon refeeding following starvation // Int. J. Biochem. 1992, 24: 71-77.

158. Campbell J.A., Davies G.J., Bulone V., Henrissat B. A classification of nucleotide-diphospho-sugar glycosyltransferases based on amino acid sequence similarities // Biochem. J. 1997, 326: 929-939.

159. Canturk N.Z., Canturk Z., Utkan N.Z., Yenisey C., Ozbilim G., Gelen Т., Yalman Y. The protective effect of vitamin E on gastric mucosal injury in rats with cirrhosis of the liver// Chin Med J (Engl). 1999, 112: 56-60.

160. Cardell R.R., Cardell E.L. Heterogeneity of glycogen distribution in hepatocytes // J. Electr. Micro. Tech. 1990. Vol.14. P. 126-139.

161. Caro J.F., Triester S., Patel V.K., Tapscott E.B., Frazier N.L., Dohm G.L. Liver glucokinase: decreased activity in patients with type II diabetes // Horm. Metab. Res. 1995,27: 19-22.

162. Castilla-Cortazar I., Prieto J., Urdaneta E., Pascual M., Nunez M. et al. Impaired intestinal sugar transport in cirrhotic rats // Gastroenterology 1997, 113: 1180-1187.

163. Caudwell F.B., Cohen P. Purification and subunit structure of glycogenic branching enzyme from rabbit skeletal muscle // Eur. J. Biochem. 1980, 109: 391394.

164. Cavallo-Perin P., Cassader M., Bozzo C., Bruno A., Nuccio P., DalFOmo A.M., Marucci M., Pagano G. Mechanism of insulin resistence in human liver cirrhosis. Evidence of a combined receptor and postreceptor defect // J. Clin. Invest. 1985, 75: 1659-1665.

165. Cheatham B. GLUT4 and company: SNAREing roles in insulin-regulated glucose uptake // Trends Endocrinol. Metab. 2000, 11: 356-361.

166. Chen C., Williams P.F., Coey G.J., Cateronson I.D. Diurnal rhythms of glycogen metabolism in the liver and skeletal muscle in gold thioglucose induced-obese mice with developing insulin resistance // Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord.1992, 16:913-921.

167. Chen C., Williams P.F., Cateronson I.D. Liver and peripheral tissue glycogen metabolism in obese mice: effect of a mixed meal // Am. J. Physiol.1993, 265: E743-E751.

168. Chen M.F., Hwang T.L. The regeneration of cirrhotic liver after partial hepatectomy: a study using the rat carbon tetrachloride-induced cirrhotic model // Proc Natl Sci Counc Repub China B. 1994, 18: 71-5.

169. Chen К., Katz J. Zonation of glycogen and glucose synthesis but not of glycolysis in rat liver//Biochem. J. 1988. Vol.255. P.99-104.

170. Cherrington A.D., Williams P.E., Shulman G.I., Lacy W.W. Differential time course of glucagon's effect on glycogenolysis and gluconeogenesis in the conscious dog // Diabetes. 1981,30: 180-187.

171. Chiang S.H., Baumann C.A., Kanzaki M., Thurmond D.C., Watson R.T., Neudauer C.L., Macara .IG., Pessin J.E., Saltiel A.R. Insulin-stimulated GLUT4 translocation requires the CAP-dependent activation of TC10 // Nature 2001, 410: 944-948.

172. Chock P.B., Rhee S.G., Stadtman E.R. Interconvertible enzyme cascades in cellular regulation//Ann. Rev. Biochem. 1980,49: 813-843.

173. Cignoli E., Castro J. Lipid peroxidation, necrosis and the in vivo depression of liver glucose-6-phosphatase by carbon tetrachloride // Exp. Mol. Pathol. 1971, 14: 43-56.

174. Ciudad C.J., Massague J., Salavert A. Synthesis of glycogen from fructose in the presence of elevated levels of glycogen phosphorylase in rat hepatocytes // Mol. Cell. Biochem. 1980. Vol.30. P.33-38.

175. Clarke J.F., Young P.W., Yonezawa K., Kasuga M., Holman G.D. Inhibition of the translocation of GLUT1 and GLUT4 in 3T3-L1 cells by the phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor, wortmannin // Biochem. J. 1994, 300: 631-635.

176. Coerver K.A., Gray S.M., Barnes J.E., Armstrong D.L., McCabe E.R. Developmental expression of hexokinase 1 and 3 in rats // Histochem. Cell. Biol. 1998, 109: 75-86.

177. Collip P.J., Carsten A., Chen S.Y. Molecular weight of microsomal glucose-6-phosphatase of rat and human liver // Biochem. Med. 1974, 10: 312-319.

178. Cornish-Bowden A., Cardenas M.L. Hexokinase and glucokinase in liver metabolism // Trends Biochem. Sci. 1991, 16: 281-282.

179. Creutzfeldt W., Frerichs H., Sickinger K. Liver disease and diabetes * mellitus // Progress in liver disease 1970, 3: 371-407.

180. Croset M., Rajas F., Zitoun C., Hurot J.M., Montano S., Mithieux G. Rat small intestine is an insulin-sensitive gluconeogenic organ // Diabetes 2001, 50: 740-746.

181. Cross D.A., Alessi D.R., Cohen P., Andjelkovich M., Hemmings B.A. Inhibition of glycogen synthase kinase-3 by insulin mediated by protein kinase В // Nature 1995,378: 785-789.

182. Czech M.P., Corvera S. Signaling mechanisms that regulate glucose transport//J. Biol. Chem. 1999, 274: 1865-1868.

183. Daly M.E., Vale C., Walker M., Alberti K.G.M.M., Mathers J.C. Dietary carbohydrates and insulin sensitivity: a review of the evidence and clinical » implications // Am. J. Clin. Nutr. 1997, 66: 1072-1085.

184. David H., Reinke P. Die Heterogenitat der Leber und das Konzept der "Perisinusoidalen Funktionseinheit" // Sitzungsberichte der Akademie der Wissenschaften der DDR. Berlin: Academie-Verlag, 1987. H.6. S.60.

185. David M., Petit W. A., Laughlin M. R., Shulman R. G., King J. E., Barrett E. J. 1990. Simultaneous synthesis and degradation of rat liver glycogen. An in vivo nuclear magnetic resonanse spectroscopic study. J. Clin. Invest. 86: 612-617.

186. De Groote J., Fevary J., Lepoutre L. Long-term follow up of chronic active hepatitis of moderate severity // Gut. 1978, 19: 510-513.

187. DeLissio M., Goodyear L.J., Fuller S., Krawitt E.L., Devlin J.T. Effects of treadmill exercise on fuel metabolism in hepatic cirrhosis // J. Appl. Physiol. 1991, 70:210-215.

188. Desmet V.J., Van Eyken P., Roskams T. Embryology of the liver and intrahepatic biliary tract // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press. 1999. p. 51-65.

189. Devos P., Bandhuin P., Van Hoof F., Hers H.-G. The alpha-particulate liver glycogen//Biochem. J. 1983,209: 159-165.

190. De Wulf H., Stalmans W., Hers H.-G. The effect of glucose and of a treatment by glucocorticoids on the actiovation in vitro liver glycogen synthase // Eur. J. Biochem. 1970, 15: 1-8.

191. Dirlewanger M., Schneiter P., Jequier E., Tappy L. Effects of fructose on hepatic glucose metabolism in humans // Am. J. Physiol. 2000, 279: E907-E911.

192. Ehsani-Zonouz A., Golestani A., Nemat-Gorgani M. Interaction of hexokinase with the outer mitochondrial membrane and a hydrophobic matrix // Mol. Cell. Biochem. 2001, 223: 81-7.

193. Ekdahl K.N., Ekman P. Fructose-1,6-biphosphatase from rat liver // J. Biol. Chem. 1985, 266: 14173-14178.

194. Elliott S.S., Keim N.L., Stern J.S., Teff K., Havel P.J. Fructose, weight gain, and the insulin resistance syndrome. Am. J. Clin. Nutr. 2002, 76: 911-922.

195. Ellis R.J., Minton A.P. Cell biology: join the crowd // Nature 2003, 425: 2728.

196. Engelmann G.L., Richardson A., Katz A., Fierer J.A. Age-related changes in isolated rat hepatocytes. Comparison of size, morphology, binucleation, and protein content // Mech. Ageing Dev. 1981, 16: 385-95.

197. Epstein Ch.J. Cell size, nuclear content and the development of polyploidy in the mammalian liver // Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1967, 57: 110-125.

198. Ercan N., Gannon M.C., Nuttall F.Q. Liver glycogen synthase, phosphorylase, and the glycogen concentration in rats given a glucose load orally: a 24-hour study // Arch. Biochem. Biophys. 1994, 315: 35-40.

199. Erlinger S., Benhamou J-P. Cirrhosis: clinical aspects // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press. 1999. p. 629-645.

200. Evans I.H. Polyploidization in the rat liver: the role of binucleate cells // Cytobios. 1976, 16: 115-124.

201. Davies D.R., Detheux M., Van Schaftingen E. Fructose-1-phosphate and the regulation of glucokinase activity in isolated hepatocytes // Eur. J. Biochem. 1990, 192:283-289.

202. Fang Y., Bird C., Nakamura K., Davis G., Lan D. Hepatocyte proliferation as an indicator of outcome in acute alcoholic hepatitis // Lancet 1994, 343: 820823.

203. Farrell G.C., Zaluzny L. Hepatic heme metabolism and cytochrome P-450 in cirrhotic rat liver// Gastroent. 1985, 89: 172-179.

204. Felig P., Brown V., Levine R., Klatskin G. Glucose homeostasis in viral hepatitis // New Engl. J. Med. 1970, 283: 1436-1440.

205. Felig P., Wahren J., Hendler R. Influence of oral glucose ingestion on splanchnic glucose and gluconeogenic substrate metabolism in man // Diabetes. 1975, 24:468-475.

206. Fernandez-Checa J.C., Hirano Т., Tsukamoto H., Kaplovitz N. Mitochondrial glutathione depletion in alcoholic liver disease // Alcohol 1993, 10: 469-475.

207. Fernandez-Novell J.M., Arino J., Vilaro S., Bellido D., Guinovart J.J. Role of glucose 6-phosphate in the translocation of glycogen synthase in rat hepatocytes // Biochem. J. 1992,288: 497-501.

208. Ferrannini E., Bjorkman O., Reichard G.A., Pilo A., Olsson M., Wahren J., De Fronzo R.A. The disposal of an oral glucose load in healthy subjects: a quantitative study// Diabetes. 1985, 34: 580-588.

209. Ferrara C.M., Cushman S.W. GLUT4 trafficking in insulin-stimulated rat adipose cells: evidence that heterotrimeric GTP-binding proteins regulate the fusion of docked GLUT4-containing vesicles // Biochem J. 1999, 3: 571-577.

210. Foster D.W. Banting lecture 1984. From glycogen to ketones—and back // Diabetes 1984,33: 1188-99.

211. Francavilla A., Jones A.F., Starzl Т.Е. Cyclic AMP metabolism and adenylate cyclase concentration in patients with advanced hepatic cirrhosis // Gastroenterology 1978, 75: 1026-1032.

212. Frederiks W.M., Slob A., Schroder M. Histochemical determination of histone and non-histone protein content in rat liver nuclei // Histochemistry 1980, 68:49-53.

213. Fukumura A., Tsutsumi M., Tsusciscima M., Takase S. Alcohol Clin. Exp. Res. 2003,27: 12S-15S.

214. Gahan P.B., Middleton I. Euploidization of human hepatocytes from donors of different ages both sexes compared with those from cases of Werner's syndrome and progeria // Exp. Gerontol. 1984, 19: 355-358.

215. Gaub J., Fanerholdt L., Keiding S., Kondrup J., Peterson P., Langewantsin G. Cytophotometry of liver cells from ethanol-fed rats: ethanol causes increased polyploidization and protein accumulation // Eur.J.Clin.Invest. 1981, 11: 235-237.

216. Gebhard R. Metabolic zonation of the liver: regulation and implications for liver function // Pharmacol. Ther. 1992, 53: 275-354.

217. Geddes R. Glycogen: a metabolic viewpoint // Biosci. Rep. 1986, 6: 415428.

218. Geddes R. Glycogen: a structural viewpoint // The polysaccharides. N.Y. 1985,3: 283-336.

219. Geddes R., Chow J.C.K. Glycogen size analysis by minigradients //

220. Carbohydr. Res. 1994, 261: 79-90.

221. Giardina M.G., Matarazzo M., Sacca L. Kinetic analysis of glycogen sunthase and PDC in cirrhotic rat liver and skeletal muscle // Am. J. Physiol. 1994, 267: E900-E906.

222. Gibby O.M., Hales C.N. Oral glucose decreases hepatic extraction of insulin //Br. Med. J. 1983,286: 921-923.

223. Gitzelmann R., Steinmann В., Van den Berghe G. Disorders of fructose metabolism // Metabolic basis of inherited disease. N.Y.: McGraw Hill, 1989. p. 399-424.

224. Glaser Т., Matthews K.E., Hudson J.W., Seth P., Housman D.E., Crerar M.M. Localization of the muscle, liver and brain glycogen phosphrylase genes onlinleage maps of mouse chromosomes 19, 12 and 2, respectively // Genomics 1989, 5:510-521.

225. Gomis R.R., Ferrer J.C., Guinovart J.J. Shared control of hepatic glycogen synthesis by glycogen synthase and glucokinase // Biochem J. 2000, 351: 811-6.

226. Goncalves I., Yermans D., Chretien D., Rustin P., Munnich A et al. Mitochondrial respiratory chain defect: a new etiology for neonatal cholestasis ans early liver insufficiency // J. Hepatol. 1995, 23: 290294.

227. Goss R. Hypertrophy versus hyperplasia//Science. 1966, 153: 1615-1620.

228. Glouert A., Glouert R. Araldite as embedding for electron microscopy // J. Biophys. Biochem. Cytol. 1958,4: 191-194.

229. Goyette M., Petropoulos C.J., Shank P.R., Fausto N. Expression of a cellular oncogene during liver regeneration // Science. 1983, 219:510-512.

230. Greenway C.V., Lautt W.W. Hepatic circulation. In: Handbook of Physiology. The Gastrointestinal System. Motility and Circulation. Bethesda, MD: Am. Physiol. Soc. 1989, sect. 6, vol. I, pt. 2, p. 1519-1564.

231. Gregory R.B., Berry M.N. On the thyroid hormone-induced increase in respiratory capacity of isolated rat hepatocytes // Biochim. Biophys. Acta 1991, 1098,61-67.

232. Gressner A.M., Schuppan D. Cellular and molecular pathobiology, pharmacological intervention, and biochemical assessment of liver fibrosis // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press, 1999. p. 607-629.

233. Gressner A.M., Bachem M.G. Molecular mechanisms of liver fibrogenesis -a homage to the role of activated fat storing cells // Digestion 1995, 56: 335-346.

234. Grisham J.W. A morphologic study of deoxyribonucleic acid synthesis andcell proliferation in regenerating liver; autoradiography with thymidine-H^ // Cancer Res. 1962, 22: 842-849.

235. Gudnerson H.M., Nordlie R.C. Carbamyl phosphate glucose phosphotransferase and glucose-6-phosphate phosphohydrolase of nuclear membrane // J. Biol. Chem. 1975, 250: 3552-3559.

236. Guidotti J.-E., Bregerie O., Aude R., Pascale D., Brechot C., Chantal D. Liver Cell Polyploidization: A Pivotal Role for Binuclear Hepatocytes // J. Biol. Chem. 2003, 278: 19095-19101.

237. Hallfrisch J. Metabolic effects of dietaiy fructose // FASEB J. 1990, 4: 2652-2660.

238. Harvey P.J., Gready G.E., Hickey K.M., Le Couteur D.G., McLean A.J. 3IP and 1H NMR spectroscopic studies of liver extracts of carbon tetrachloride-treated rats//NMR Biomed. 1999, 12:395-401.

239. Hatase O., Tokuda M., Itano T. Purification and characterization of calmodulin from rat liver mitochondria // Biochem. J. 1982, 204: 365-368.

240. Hegedus G. Pathology of alcoholic liver disease // Orv.Hetil. 2000, 141: 331-336.

241. Hemet J., Dubois J.-P., Lemoine F. Aspects morphometriques de la tractehepatocytaire du foie humain normal // Biol. Cell. 1983, 47: 239-242.

242. Hems D. A., Whitton P. D., Taylor E. A. Glycogen synthesis in the perfused rat liver of the starved rat // Biochem. J. 1972, 129: 529-538.

243. Henderson J.M., Scott S.S., Merrill A.H., Hollins В., Kutner M.H. Vitamin B6 repletion in cirrhosis with oral pyridoxine // Hepatology 1989, 9: 582-588.

244. Henderson M.J. Anatomy of the portal venous system in portal hypertension // Oxford textbook of clinical hepathology. Oxford, UK: Oxford University Press. 1999. p. 645-653.

245. Hers H.-G. Mechanisms of blood glucose homeostasis // J. Inherit. Metab. Dis. 1990, 13:395-410.

246. Hers H.-G., Hue L. Gluconeogenesis and related aspects of glycolysis // Ann. Rev. Biochem. 1983, 52: 617-653.

247. Holman G.D, Sandoval I.V. Moving the insulin-regulated glucose transporter GLUT4 into and out of storage // Trends Cell. Biol. 2001, 11: 173-179.

248. Hoffman A.L., Rosen H.R., Ljubimova J.U., Sher L., Podesta L.G., Demetriou A.A., Macowka L. Hepatic regeneration: Current concepts and clinical1 implications // Semin.Liver Dis. 1994, 14:190-209.

249. Holman G.D., Sandoval I.V. Moving the insulin-regulated glucose• transporter GLUT4 into and out of storage // Trends Cell Biol. 2001, 11: 173-179.

250. Hotta K., Nakajima H., Yamasaki Т., Hamaguchi Т., Kuwajima M., Noguchi Т., Tanaka Т., Kono N., Tarui S., Rat-liver-type phosphofructokinase mRNA. Structure, tissue distribution and regulation. // Eur. J. Biochem. 1991, 202: 293298.

251. Huijing F. A rapid enzymic method for glycogen estimation in very small tissue samples // Clin Chim Acta. 1970. Vol.30. P.567-572.

252. James J., Bosch K. S., Zuyderhoudt F. M. Z., Houtkooper J. m., Gool J. Van. 1985. Histophotometric estimation of volume density of collage as an indication of• fibrosis in rat liver. Histochemistry. 85: 129-133.

253. James J., Tas J., Bosch K.S. Growth patterns of rat hepatocytes during postnatal development// Europ. J. Cell. Biol. 1979, 19: 222-226.

254. Jeejeebhoy K.N., Ho J., Greenberg G.R. et al. Albumin, fibrinogen and transferring synthesis in isolated rat hepatocytes suspensions // Biochem J. 1975, 146: 141-155.

255. Jhun B.H., Rampal A.L., Liu H., Lachaal M., Jung C.Y. Effects of insulin on steady state kinetics of GLUT4 subcellular distribution in rat adipocytes. Evidence of constitutive GLUT4 recycling//J. Biol. Chem. 1992, 267: 17710-17715.

256. Johansson U., Wahren J., Eriksson L.S. Splanchnic and peripheral glucose metabolism in cirrhosis // J. Hepatol. 1994, 20: 760-767.

257. Johnson L.N., Barford D. Glycogen phosphorylase // J. Biol. Chem. 1990, 265: 2409-2412.

258. Joost H.G., Bell G.I., Best J.D., Birnbaum M.J., Charron M.J., Chen Y.T. et al. Nomenclature of the GLUT/SLC2A family of sugar/polyol transport facilitators. Am. J. Physiol. 2002, 82: E974-E976.

259. Joost H.G., Schmitz-Salue C., Hinsch K.D., Schultz G., Rosenthal W. Phosphorylation of G-protein alpha-subunits in intact adipose cells: evidence against a mediating role in insulin-dependent metabolic effects // Eur. J. Pharmacol. 1989, 172: 461-469.

260. Jungermann K. Dynamics of zonal hepatocyte heterogeneity. Perinatal development and adaptive alterations during regeneration after partial hepatectomy, starvation and diabetes // Acta Histochem.Suppl. 1986, 32: 89-98.

261. Jungermann K. 1987. Metabolic zonation of liver parenchyma: significance for the regulation of glycogen metabolism, gluconeogenesis and glycolysis. Diabetes Metab. Rev. 3: 269-293.

262. Jungermann K., Katz J. Functional specialization of hepatocytes // Physiol. Rev. 1989, 69:718-745.

263. Jungermann K., Katz N. Functional hepatocellular heterogeneity // Hepatology 1982, 2: 385-395.

264. Jungermann К., Katz N. Metabolism of carbohydrates // Regulation of hepatic metabolism. New York: Plenum Press, 1986. p. 211-232.

265. Jungermann K., Kietzmann T. Role of oxygen in zonation of carbohydrate metabolism and gene expression in liver // Kidney Int. 1997, 51: 402-412.

266. Jungermann K. Role of intralobular compartmentation in hepatic metabolism // Diabete a Metabolisme. 1992. Vol.18. P.81 -86.

267. Johnston G.W. Six years experiance of oesophagel varices, using a circular stapling gun // Gut. 1982, 23: 770-773.

268. Jungermann K., Sasse D. Heterogeneity of liver parenchymal cells // Trends. Biochem. 1978,3: 198-202.

269. Jungermann K., Thurmann R.G. 1992. Hepatocyte heterogeneity in the metabolism of carbohydrates. Enzyme. 46: 33-58.

270. Kahn B.B. Lilly lecture 1995. Glucose transport: pivotal step in insulin action // Diabetes. 1996. Vol.45. P.1644-1654.

271. Kanai K., Watanabe J., Asaka Y., Fujimoto S., Kanamura S. Postnatal changes in sublobular distribution of NADPH-cytochrome P-450 reductase in rat liver// Histochem J. 1992, 24: 957-63.

272. Katz J., Golden S., Wals P.A. Glycogen synthesis by rat hepatocytes // Biochem. J. 1979. Vol.180. P.389-402.

273. Katz L.D., Glickman M.G., Rapoport S., Ferrannini E., DeFronzo R.A. Splanchnic and peripheral disposal of oral glucose in man // Diabetes. 1983, 32: 675-679.

274. Katz N., Teutsch H.F., Jumgermann K., Sasse D. Perinatal development of the metabolic zonation of hamster liver parenchyma // FEBS Lett. 1976, 69: 23-28.

275. Katz N., Teutsch H.F., Jumgermann K., Sasse D. Heterogenous reciprocal localization of fructose-1,6-bisphosphartase and glucokinase in microdesected periportal and perivenous rat liver tissue // FEBS Lett. 1977, 83: 272-276.

276. Keller U., Sonnenberg G.E., Burckhardt D., Perruchoud A. Evidence for an augmented glucagon dependence of hepatic glucose production in cirrhosis of the liver//J. Clin. Endocrinol. Metab. 1982, 54: 961-968.

277. Kelly D., Mitrakou A., Marsh H. Skeletal muscle glycolysis, oxidation and storage of an oral glucose load // J. Clin. Invest. 1988, 81: 1563-1571.

278. Kennedy L.D., Kirkman B.R., Lomako J., Rodriguez I.R., Whelan W.J. Membranes and muscle // Oxford: ICSU Press/IRL Press, 1985. pp. 65-84.

279. Kim H.J., Odend'hal S., Bruckner J.V. Effect of oral dosing vehicles on the acute hepatotoxicity of carbon tetrachloride in rats // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1990, 102: 34-49.

280. Kimura H., Sugaya K. and Cook P. R. The transcription cycle of RNA polymerase II in living cells // The Journal of Cell Biology. 2002, 159: 777-782.

281. Kirchner G., Harbers M., Bunsch A., Seitz H.J., Hoppner W. Zonation of glucokinase in rat liver changes during postnatal development // FEBS Lett. 1993, 328: 119-24.

282. Kitamura O., Hidaka Т., Ashihara Т., Takeoka O., Kagawa K., Okuda K., Takahashi Т., Takino T. Age-related changes in ploidy classes of liver cells in human and rats as studied by the Feulgen-DNA cytofluorometry // Jap.J.Gastroenterol. 1979, 76: 223-230.

283. Knox W.E. Enzyme pattern in fetal, adult and neoplastic rat tissues. 2nd ed. Basel: S.Karger, 1976. 324 p.

284. Kohno H., Kashimura K., Katon S., Ohkubo I. Changes in transglutaminase activity in carbon tetrachloride-damaged rat liver // Experientia. 1991, 72: 70-75.

285. Koike Y., Suzuki Y., Nagata A., Furuta S., Nagata T. Studies on DNA content of hepatocytes in cirrhosis and hepatoma by means of microspectrophotometry and radioautography// Histochemistry 1982, 73: 549-562.

286. Krahenbuhl L., Ledermann M., Lang C., Krahenbuhl S. Relationship between hepatic mitochondrial function in vivo and in vitro in rats with carbon tetrachloride-induced liver cirrhosis // J. Hepatol. 2000, 33: 216-223.

287. Krahenbuhl S., Reichen J. Decreased hepatic glucose production in rats with carbon tetrachloride-induced cirrhosis//J. Hepatol. 1993, 19: 64-70.

288. Krahenbuhl L., Talos C., Reichen J., Krahenbuhl S. Progressive decrease in tissue glycogen content in rats with long-term cholestasis // Hepatology 1996, 24: 902-907.

289. Krahenbuhl L., Lang C., Ludes S., Seiler C., Shafer M., Zimmermann A., Krahenbuhl S. Reduced hepatic glycogen stores in patients with liver cirrhosis // Liver Int. 2003,23: 101-109.

290. Krahenbuhl S., Weber F. L., Brass E. P. 1991. Decreased hepatic glycogen content and accelerated response to starvation in rats with carbon tetrachloride-induced cirrhosis. Hepatology 14: 1189-1195.

291. Krisman C.R., Barengo R. A precursor of glycogen biosynthesis: alpha-1,4-glucan-protein // Eur J Biochem. 1975, 52: 117-123.

292. Kruep D.A., Dunaway G.A. Properties of the phosphofructokinase regulatory factors//Arch. Biochem. Biophys. 1984, 235: 512-520.

293. Kruszynska Y. T. Carbohydrate metabolism // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press, 1999. p. 257-286.

294. Kruszynska Y.T., Harry D.S., Fryer L.G., Mclntyre N. Lipid metabolism and substrate oxidation during intravenous fructose administration in cirrhosis // Metabolism. 1994,43: 1171-1181.

295. Kruszynska Y.T., Mclntyre N. Carbohydrate metabolism // Oxford textbook of clinical hepatology. Oxford, UK: Oxford University Press, 1991. p. 129-143.

296. Kruszynska Y.T., Meyer-Alber A., Darakshan F., Home P.D., Mclntyre N. Metabolic handling of orally administrated glucose in cirrhosis // J. Clin. Invest. 1993,91: 1057-1066.

297. Kruszynska Y.T., Williams N., Perry M., Home P.D. The relationship between insulin sensitivity and skeletal muscle enzyme activities in hepatic cirrhosis//Hepatology. 1988,8: 1615-1619.

298. Kudryavtseva M.V., Bezborodkina N. N., Kudryavtsev B. N. Glycogen-forming function of hepatocytes in cirrhotically altered rat liver after treatment the chorionic gonadotropin // Exp. Toxic. Pathol. 2001a, 53: 57-63.

299. Kudrjavtseva M.V., Sakuta G.A., Stein G.I., Kudrjavtsev B.N. The metabolic zonation of glycogen in the rat liver cells in the course of its resynthesis //Tissue and Cell. 1992, 24:31-35.

300. Kus I., Colakoglu N., Pekmez H., Seckin D., Ogeturk M., Sarsilmaz M Protective effects of caffeic acid phenethyl ester (CAPE) on carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in rats // Acta Histochem. 2004, 106: 289-297.

301. Page R.N., Cheeseman K.H., Osman N., Slater T.F. Lipid peroxidation in purified plasma membrane fractions of rat liver in relation to the hepatoxicity of carbon tetrachloride // Cell. Biochem. Funct. 1988, 6: 87-99.

302. Rumeur E., Beaumont C., Guillouzo C., Rissel M., Bourel M., Guillouzo A. All normal rat hepatocytes produce albumin at a rate related to their degree of ploidy // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1981, 101: 1038-46.

303. Madar Z. Pyruvate dehydrogenase and glycogen synthase activity at transition from fasted to fed state // Biochem. Med. Metab. Biol. 1989. Vol.41. P.93-104.

304. Magnuson MA Glucokinase gene structure. Functional implications of molecular genetic studies // Diabetes 1990, 39: 523-527.

305. Magnusson I., Rothman D.L., Gerard D.P., Katz L.D., Shulman G.I. Contribution of hepatic glycogenolysis to glucose production in humans inresponse to a physiological increase in plasma glucagon concentration // Diabetes 1 1995,44: 1323-1327.

306. Magnusson I., Rothman D. L., Jucker В., Cline G. W., Shulman R. G., Shulman G. I. Liver glycogen turnover in fed and fasted humans. Am. J. Physiol. 1994,266: E796-E803.

307. Magnusson, I., Rothman, D. L., Katz, L. D., Shulman, R. G., and Shulman, G. I. Increased rate of gluconeogenesis in type II diabetes mellitus. A 13C nuclear magnetic resonance study// J. Clin. Invest. 1992, 90: 1323-1327.

308. Majumdar S.K., Shaw G.K., Aps E.J., Offerman E.L., Thompson A.D. Blood vitamin status (Bl, B2, D6 and В12) in patients with alcoholic liver disease // Int. J. Vit. Nutr. Res. 1982, 52: 266-271.

309. Manners D.J. Recent developments in our understanding of glycogen 41 structure // Carbohydrate polymers. 1991, 16: 37-41.

310. Marchenisi G., Bianchi G.P., Cassarani S., Dondi C., Zoli M. Relationship of carbohydrate and aminoacid metabolism in patients with liver cirrhosis // Advances in hepatic encephalopathy and urea cycle diseases. Basel: Karger, 1984. p. 634-644.

311. Martines D., Martines V., Pasini M., Cocco G., Lora L., Varnier M., Venier G.B., Sammartano G., Naccarato R. Carbohydrate-induced thermogenesis in liver cirrhosis: glucose vs. fructose // Nutrition 1994, 10: 521-526.

312. Matschinsky F.M., Glaser В., Magnuson M.A. Pancreatic beta-cell glucokinase: closing the gap between theoretical concepts and experimental realities // Diabetes 1998, 47: 307-315.

313. Matsuhisa M., Yamasaki Y., Shiba Y., Nakahara I., Kuroda A., Tomita Т., Iida M., Ikeda M.,'Kajimoto Y., Kubota M., Hori M. Important role of the hepaticvagus nerve in glucose uptake and production by the liver // Metabolism 2000, 49: 11-6.

314. Matsumoto Т., Kawakami M. The unit-concept of hepatic parenchyma. Are-examination based on angioarchitectural studies // Acta Pathol. Jpn. 1982, 32: 285314.

315. Maurer W., Gerhard H., Schultze B. Quantitatives Modell der Regeneration der CCI4 Leber der Maus // Virchow's Arch. Abt.B. 1973, 14: 361-371.

316. Mechin M.C., Annabi В., Pegorier J.P., van de Werve G. Ontogeny of the catalytic subunit and putative glucose-6-phosphate transporter proteins of the rat microsomal liver glucose-6-phosphatase system // Metabolism. 2000. Vol.49. P.1200-1203.

317. Meier R., Hemmings B.A. Regulation of protein kinase В // J Recept Signal Transduct Res. 1999, 19: 121-128.

318. Melchiorri C., Bolondi L., Chieco P., Pagnoni M., Gramatiery L., Barbara L. Diagnostic and prognostic value of DNA ploidy and cell nuclearity in ultrasound guided liver biopsies // Cancer 1994, 74: 1713-1719.

319. Melchiorri C., Chieco P., Ledda A.I., Coni P., Ledda-Columbano G.M., Columbano A. Ploidy and nuclearity of rat hepatocytes after compensatory regeneration or mitogen-induced liver growth // Carcinogenesis 1993, 14: 18251830.

320. Melendez R., Melendez-Hevia E., Canela E.I. The fractal structure of glycogen: a clever solution to optimize cell metabolism. Biophys. J. 1999, 77: 1327-1332.

321. Menard D. Ultrastructural localization of intestinal glucose-6-phosphatase activity during the postnatal development of the mouse // Histochemistry. 1980, 67: 53-64.

322. Merli M., Eriksson L.S., Hagenfeldt L., Wahren J. Splanchnic and leg exchange of free fatty acids in patients with liver cirrhosis // J. Hepatol. 1986, 3: 348-355.

323. Meyer-Alber A., Hartmann H., Stampel F., Creutzfeldt W. Mechanism of insulin resistence in CC14-induced cirrhosis of rats // Gastroenterology. 1992, 102: 223-229.

324. Minassian C., Ajzannay A., Riou J.P., Mithieux G. Investigation of the mechanism of glycogen rebound in the liver of 72-hour fasted rats // J. Biol. Chem. 1994, 269: 16585-16588.

325. Minassian C., Montano S., Mithieux G. Regulatory role of gIucose-6-phosphatase in the repletion of the liver glycogen during refeeding in fasted rats // BBA 1999, 1452: 172-178.

326. Mion F., Galoun A., Agosto E., Minaire Y. Carbon tetrachloride-induced cirrhosis in rats: influence of the acute effects of the toxin on glucose metabolism // Hepatology. 1996, 23: 582-588.

327. Mithieux G., Rajas F., Gautier-Stein A. A novel role for glucose 6-phosphatase in the small intestine in the control of glucose homeostasis // J. Biol. Chem. 2004, 279: 44231 -44234.

328. Mitrakou A., Kelley D., Veneman Т., Jenssen Т., Pangburn Т., Reilly J. Gerich J. Contribution of abnormal muscle and liver glucose metabolism to postprandial hyperglycemia in NIDDM//Diabetes. 1990, 39: 1381-1390.

329. Moorman A.F., de Boer P.A., Charles R., Lamers W.H. Pericentral expression pattern of glucokinase mRNA in the rat liver lobulus // FEBS Lett. 1991,287: 47-52.

330. Mu J., Roach PJ. Characterization of human glycogenin-2, a self-glucosylating initiator of liver glycogen metabolism // J. Biol. Chem. 1998, 273: 34850-34856.

331. Mu J., Skurat A.V., Roach P.J. Glycogenin-2, a novel self-glucosylating protein involved in liver glycogen biosynthesis // J. Biol. Chem. 1997, 272: 2758927597.

332. Nadal C., Zajdela F. Polyploidie somatique dans le foie de rat. I. Le role des cellules binuclees dans la genese des cellules polyploides // Exp.Cell.Res. 1966, 42: 99-116.

333. Narabayashi H., Lawson R., Uejeda K. Regulation of phosphofructokinase in perfused rat heart. Requirement for fructose-2,6-biphosphate and a covalent modification // J. Biol. Chem. 1985, 260: 9750-9759.

334. Newgard C.B., Brady M.J., O'Doherty R.M., Saltiel A.R. Organizing glucose disposal: emerging roles of the glycogen targeting subunits of protein phosphatase-1 //Diabetes 2000, 49: 1967-1977.

335. Newgard C.B., Fletterick R.J., Anderson L.A., Lebo R.V. The polymorphic locus for glycogen storage disease VI (liver glycogen phosphorylase) maps to chromosome 14 //Amer. J. Hum. Genet. 1987, 40: 351-364.

336. Newgard C.B., Foster D.W., McGarry J.D. Evidence for suppression of hepatic glucose-6-phosphatase with carbohydrate feeding // Diabetes. 1984, 33: 192-195.

337. Newgard C.B., Hwang P.K., Fletterick R.J. The family of glycogen phosphorylases: structure and function // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1989, 24: 69-99.

338. Newgard С. В., Moore S. U., Foster D. W., McGarry J. D. Studies on the mechanism by which exogenous glucose is converted into liver glycogen in the rat // A direct or indirect pathway? J. Biol. Chem. 1983, 258: 8046-8050.

339. Newsholme E.A. Role of the liver in integration of fat and carbohydrate metabolism in alcoholics // The progress in liver diseases. New York: Grune Stratton, 1976, 5: 197-227.

340. Niculescu, L., Veiga da Cunha M. and Van Schaftingen,E. Investigation on the mechanism by which fructose, hexitols and other compounds regulate the translocation of glucokinase in rat hepatocytes // Biochem. J. 1997, 321: 239-246;

341. Niewoehner C.B., Gilboe D.P., Nuttall F.Q. Metabolic effects of oral glucose in the liver of fasted rats // Amer. J. Physiol. 1984a. Vol.246. P.E89-E94.

342. Niewoehner C.B., Gilboe D.P., Nuttall G.A., Nuttall F.Q. Metabolic effects of oral fructose in the liver of fasted rats // Amer. J. Physiol. 19846, 247: E505-E512.

343. Niewoehner С. В., Nuttall F. Q. 1988. Relationship of hepatic glucose uptake to intrahepatic glucose concentration in fasted rats after glucose load. Diabetes. 37: 1559-1566.

344. Nilsson L.H., Hultman E. Liver and muscle glycogen in man after glucose and fructose infusion // Scand. J. Ciin. Lab. Invest. 1974, 33: 5-10.

345. Noel L.E., Newgard C.B. Structural domains that contribute to substrate specificity in facilitated glucose transporters are distinct from those involved in kinetic function: studies with GLUT-l/GLUT-2 chimeras // Biochemistry 1997, 36: 5465-5475.

346. Nordlie R.C., Johnson T.W., Cornatzer W.E., Twedell G.W. Stimulation by polyamines of carbamylphosphate: glucose phosphohydrolase activities of multifunctional glucose-6-phosphatase // Biochem. Biophys. Acta. 1979, 585: 223.

347. Nordlie R.C., Jorgenson R.A. Latency and inhibitability by metabolites of glucose-6-phosphatase of permeable hepatocytes from fasted and fed rats // J. Biol. Chem. 1981,256:4768-4771.

348. Nouspikel Т., Iynedjian P.B. Insulin signalling and regulation of glucokinase gene expression in cultured hepatocytes // Eur. J. Biochem. 1992, 210: 365-73.

349. Nuttall F.Q., Gannon M.C. An improved assay for hepatic glycogen synthase in liver extracts with emphasis on synthase R // Anal. Biochem. 1983, 178: 311-319.

350. Nuttall F.Q., Theen J.W., Niewoehner C. Response of liver glycogen synthase and phosphorylase to in vivo glucose and glucose analogues // Amer. J. Physiol. 1983, 245: E521-E527.

351. Ohgi N., Hirayama C. Vitamin B6 status in cirrhotic patients in relation to apoenzyme of serum alanine aminotransferase // Clin. Biochem. 1988, 21: 376370.

352. Ohnishi K., Chin N., Sugita S., Saito M., Tanaka H., Terabayashi H., Iida S., Nemura F., Okuda K. Quantitative aspects of portal-systemic and arterio-venous shunts within the liver in cirrhosis // Gastroent. 1987, 93: 129-134.

353. Ohyashiki Т., Kamata K., Takeuchi M., Matsui K. Contribution of peroxidation products to oxidative inactivation of rat liver microsomal glucose-6-phosphatase//J. Biochem. 1995, 118: 508-514.

354. Okazaki I., Maruyama K. Formation of liver fibrosis to cirrhosis from the aspect of collagen degradation // Exp. Pathol. 1985, 28: 137-138.

355. Olson A.L., Pessin .JE. Structure, function, and regulation of the mammalian facilitative glucose transporter gene family // Annu Rev. Nutr. 1996, 16: 235-256.

356. Onori P., Morini S., Franchitto A., Sferra R., Alvaro D., Gaudio E. Hepatic microvascular features in experimental cirrhosis // J. Hepatol. 2000, 33: 555-563.

357. Ortega M.A., Torres M.I., Fernandez M.I., Rios A., Sanchez-Pozo A., Gil A. Hepatotoxic agent thioacetamide induces biochemical and histological alterations in rat small intestine//Dig. Dis. Sci. 1997,42: 1715-1723.

358. Owen O.E., Reichle F.A., Mazzoli M.A., Kreulen I. Hepatic, gut and renal substrate flux in patients with hepatic cirrhosis // J. Clin. Invest. 1981, 68: 240-252.

359. Pagliassotti M.J., Prach P.A., Koppenhafer T.A., Pan D.A. Changes in insulin action, triglycerides, and lipid composition during sucrose feeding in rats // Am. J. Physiol. 1996, 271: R1319-1326.

360. Pelkonen R., Kallio H., Snoranta H., Karonen S.L. Plasma insulin, C-peptide and blood glucose in portal, hepatic and peripheral veins in liver cirrhosis. Effect of intravenous tolbutamide // Acta Endocrinol. 1981, 97: 496-502.

361. Petersen К. F., Krssak M., Navarro V., Chandramouli V., Hundal R., Schumann W. C., Landau B. R., Shulman G. I. 1999. Contributions of net hepatic glycogenolysis and gluconeogenesis to glucose production in cirrhosis. Am. J. Physiol., 276: E529-E535.

362. Petrides A.S., Vogt Ch., Schulze-Berge D., Matthews D., Strohmeyer G. Pathogenesis of glucose intolerance and diabetes mellitus in cirrhosis // Hepatology. 1994, 19: 616-627.

363. Pieniazek D., Pronicka E., Cabalska В., Pawlovska J. Glikogenoza typu VI i • Via // Pediat. Pol. 1985, 60: 489-496.

364. Piniewska D.M., McCulloch A.J., Bramble M.G., Taylor R., Record C.O., Alberti K.G. Glucose turnover in compensated hepatic cirrhosis // Horm. Met. Res. 1986, 18: 834-837.

365. Pontremoli S., Meloni E., Michetti M. On the mechanism of inhibition of fructose-1,6-biphosphatase by fructose-2,6-biphosphate // Arch. Biochem. Biophys. 1982,218: 609-613.

366. Pozefsky Т., Tancredi R.G., Moxley R.T., Dupre J., Tobin J.D. Effects of brief starvation on muscle amino acid metabolism in nonobese man // J. Clin. Invest. 1976, 57: 444-449.

367. Proctor E., Chatamra K. High yield micronodular cirrhosis in the rat // Gastroenterology 1982, 83: 1183-90.

368. Proietto J., Alford F.P., Dudley F.J. The mechanism of carbohydrate intolerance of cirrhosis//J. Clin. Endocrinol. Metab. 1980, 51: 1030-1036.

369. Prothero J. Organ scaling in mammals: the liver // Сотр. Biochem. Physiol.1 1982. 71 A: 567-577.

370. Quistorff В., Romert P. High zone-selectivity of cell permeabilization following digitonin-pulse perfusion of rat liver. A re-interpretation of microcirculatory zones // Histochemistry, 1989. 92: 487-498.

371. Radziuk J, McDonald T.J., Rubenstein D., Dupre J. Initial splanchnic extraction of ingested glucose in normal man // Metabolism. 1978, 27: 657-679.

372. Rajas F., Bruni N., Montano S., Zitoun C., Mithieux G. The glucose-6 phosphatase gene is expressed in human and rat small intestine: regulation of expression in fasted and diabetic rats // Gastroenterology 1999, 117:132-9.

373. Rajas F., Croset M., Zitoun C., Montano S., Mithieux G. Induction of PEPCK gene expression in insulinopenia in rat small intestine // Diabetes 2000, 49: 1165-1168.

374. Rand E.B., Depaoli A.M., Davidson N.O., Bell G.I., Burant C.F. Sequence, tissue distribution, and functional characterization of the rat fructose transporter GLUT5 //Am. J. Physiol. 1993, 264: G1169-1176.

375. Rappaport A.M., Borowy Z.J., Lougheed W.M., Lotto N. Subdivision ofhexagonal liver lobules into a structural and functional unit // Anat. Rec. 1954, 119: 11-34.

376. Rappoport A.M. The acinus-microvascular unit of the liver // Hepatic circulation in health and disease. N.Y.: Raven Press, 1981. p. 175-192.

377. Rath V.L., Ammirati M., LeMotte P.K., Fennel K.F., Mansour M.N., Danley D.E. et al. Activation of human liver glycogen phosphorylase by alteration of the secondary structure and packing of the catalytic core // Mol. Cell. 2000, 6: 139148.

378. Recknagel R.O., Grende E.A. Carbon tetrachloride hepatotoxicity: an example of lethal cleavage // GRC Crit. Rev. Toxicol. 1973, 2: 263-297.

379. Reczek P.R., Villee C.A. Jr. A purification of microsomal glucose-6-phosphatase from human tissue // Biochem Biophys Res Commun. 1982, 107: 1 158-1165.

380. Reichen J., Arts F., Schafroth U., Zimmermann A., Heltner Th. В., Zysset T. 1987. Aminopyrine N-Demethilation by rats with liver cirrhosis. Gastroenterology. 93: 719-726.

381. Reichle F.A., Owen O.E., Golsorkhi M., Kreulen T. Hepatic metabolism in patients with alcoholic cirrhosis // Surgery 1978, 84: 33-36.

382. Riggio O., Merli M., Leonetti F., Giovannetti P., Foniciello M., Folino S., Tamburrano G., Capocaccia L. 1997. Impaired nonoxidative glucose metabolism in patients with liver cirrhosis: effects of two insilin doses. Metabolism. 46: 840843.

383. Rizza R.A., Mandarino L.J., Gerich J.E. Effects of growth hormone on insulin action in man. Mechanisms of insulin resistance, impaired suppression of glucose production, and impaired stimulation of glucose utilization // Diabetes. 1982a, 31:663-669.

384. Roach P.J. Glycogen and its metabolism // Curr. Mol. Med. 2002, 2: 101120.

385. Roden M., Perseghin G., Petersen K. F., Hwang J.- H., Cline G. W., Gerow K., Rothman D. L., Shulman G. I. The roles of insulin and glucagon in the regulation of hepatic glycogen synthesis and turnover in humans // J. Clin. Invest. 1996, 97: 642-648.

386. Rodnick K.J., Piper R.C., Slot J.W., James D.E. Interaction of insulin and exercise on glucose transport in muscle // Diabetes Care 1992, 15: 1679-1689.

387. Rojkind M., Rojkind M. H., Cordero-Hernandez J. 1983. In vivo collagen synthesis and deposit in fibrotic and regeneration rat liver. Collagen Rel. Res. 3: 335-347.

388. Romero J.R., Fresnedo O., Isusi E., Barrionuevo J., Ochoa B. Hepatic zonation of the formation and hydrolysis of cholesteryl esters in periportal and perivenous parenchymal cells // Lipids 1999, 34: 907-13.

389. Romert P., Quistorff В., Behnke O. Histological evaluation of the zonation of colloidal gold uptake by the rat liver // Tissue Cell. 1993, 25: 19-32.

390. Rose M, Scholler G, Klapp B. F. Biopsychological relationships and prediction of the course of acute viral hepatitis // Psychother. Psychosom. Med. Psychol. 1997, 47:435-445.

391. Rossetti L., Shulman G.I., Zawalich W., DeFronzo R.A. Effect of chronic hyperglycemia on in vivo secretion in partially pancreatectomized rats // J. Clin. Invest. 1987. Vol.80. P. 1073-1044.

392. Rothman D.L., Magnusson I., Katz L.D., Shulman R.G., Shulman G.I. Quantitation of hepatic glycogenolysis and gluconeogenesis in fasting humans with 13CNMR// Science 1991,254:573-6.

393. Rowen D.W., Meinke M., LaPorte D.C. GLC3 and GHA1 of Saccharomyces cerevisiae are allelic and encode the glycogen branching enzyme // Mol. Cell. Biol. 1992, 12: 22-29.

394. Rybicka K.K. Glycosomes—the organelles of glycogen metabolism // Tissue Cell. 1996, 28: 253-265.

395. Sasse D. Dynamics of liver glycogen. The topochemistry of glycogen synthesis, glycogen content and glycogenolysis under the experimental conditions of glycogen accumulation and deplection // Histochemistry. 1975. Vol.45. P.237-254.

396. Sasse D. Liver structure and innervation. In: Regulation of Hepatic Metabolism. New York, London: Plenum, 1986, p. 3-25.

397. Sasse D., Spornitz U.M., Maly I.P. Liver architecture // Enzyme 1992, 46:832.

398. Schafer J.R.A., Fell D.A., Rothman D., Shulman R.G. Protein phosphorylation can regulate metabolite concentrations rather than control flux: The example of glycogen synthase // PNAS. 2004. Vol.101. P.1485-1490.

399. Schmidt U., Schmid H., Guder W. Liver cell heterogeneity; the distribution of fructose-bisphosphatase in fed and fasted rats and in man // Hoppe-Seyler's Z.Phisiol.Chem. 1978,359: 193-198.

400. Schneiter P., Gillet M., Chiolero R., Jequier E., Tappy L. 1999. Hepatic nonoxidative disposal of an oral glucose meal in patients with liver cirrhosis. Metabolism. 48: 1260-1266.

401. Schreiber G., Urban J., Z„hringer J., Reutter W., Frosch U. The secretion of serum protein and the synthesis of albumin and total protein in regenerating rat liver//J.Biol.Chem. 1971, 246: 4531-4538.

402. Scow R.L., Cornfield J. Quantitative relations between oral and intravenous glucose tolerance curves // Am. J. Physiol. 1954, 179: 435-446.

403. Seglen, P. O. DNA ploidy and autophagic protein degradation as determinants of hepatocellular growth and survival // Cell Biol. Toxicol. 1997, 13: 301-315.

404. Seldak J., Lindsay R.M. Estimation of total proteinbound and nonprotein sulfhydryl group in tissues with Ellmans reagent // Anal. Biochem. 1968,25: 192-195.

405. Sell S. Heterogeneity and plasticity of hepatocyte lineage cells // Hepatology 2001, 33: 738-750.

406. Senoo H. Structure and function of hepatic stellate cells // Med Electron Microsc. 2004,37:3-15.

407. Shearer J., Marchand I., Tarnopolsky M.A., Dyck D.J., Graham Т.Е. Pro-and macroglycogenolysis during repeated exercise: roles of glycogen content and phosphorylase activation //J. Appl. Physiol. 2001, 90: 880-888.

408. Sherwin R.S., Fisher M., Bessoff J., Snyder N., Hendler R., Conn H.O., Felig P. Hyperglucagonemia in cirrhosis: altered secretion and sensitivity to glucagon//Gastroenterology 1978, 74: 1224-1228.

409. Sherwin R.S., Sacca L., Eigler N. Influence of glucoregulatory hormones and blood glucose per se on the regulation of hepatic glucose production // Carbohydrate metabolism. Chichester, U.K.: John Wiley & Sons. 1981. p.127-152.

410. Shimamura J. Hepatic key carbohydrate metabolizing enzymes in bening liver disease and hepatocellular carcinoma // J. Med. Assos. Okayama. 1987, 99: 261-272.

411. Shiota M., Jackson P.A., Bischoff H., McCaleb M., Scott M., Monohan M., Neal D.W., and Cherrington A.D. Inhibition of glycogenolysis enhances gluconeogenic precursor uptake by the liver of conscious dogs // Am. J. Physiol. 1997, 273: E868-E879.

412. Shiratori Y., Hongo Sh., Hikiba Y., Ohmura K., Nagura Т., Okano K.„ Kamii К., Tanaka Т., Komatsu Y., Ochiai Т., Tsubouchi H., Omata M. Role of macrophages in regeneration of liver// Dig. Dis. Sci. 1996, 41: 1939-1946.

413. Shmueli E., Walker M., Alberti G., Record C.O. Normal splanchnic but impaired peripheral insulin-stimulated glucose uptake in cirrhosis // Hepatology 1993, 18:86-95.

414. Siegel E.G., Seidenstucker A., Galwitz В., Schmitz F., Kloppel G., Folsch U.R., Schmidt W.E. Insulin secretion defects in liver cirrhosis can be reversed by glucagons-like peptide-1 //J. Endocrinol. 2000, 164: 13-19.

415. Sikuler E., Kravetz D., Groszmann RJ. Evolution of portal hypertension and mechanisms involved in its maintenance in a rat model // Am. J. Physiol. 1985, 248: G618-G625.

416. Simpson F., Whitehead J.P., James D.E. GLUT4~at the cross roads between membrane trafficking and signal transduction // Traffic. 2001, 2: 2-11.

417. Smythe C., Cohen P. The discovery of glycogenin and the priming mechanism for glycogen biogenesis // Eur. J. Biochem. 1991, 200: 625-631.

418. Sokal E.M., Trivedi P., Portmann В., Mowat A.P. Adaptative changes of metabolic zonation during the development of cirrhosis in growing rats // Gastroenterology. 1990. Vol.99. P.785-792.

419. Sokal E.M., Trivedi P., Portmann В., Mowat A.P. Developmental changes in the intra-acinar distribution of succinate dehydrogenase, glutamate dehydrogenase, • glucose-6-phosphatase, and NADPH dehydrogenase in the rat liver // J. Pediatr.

420. Gastroenterol. Nutr. 1989, 8: 522-7.

421. Spivey H.O., Ovadi J. Substrate channeling // Methods 1999, 19: 306-21.

422. Stalmans W., De Wulf H., Hue L., Hers H.-G. The control of liver glycogen synthase phosphatase by phosphorylase // Eur. J. Biochem. 1971, 18: 582-587.

423. Standaert M.L., Bandyopadhyay G., Galloway L., Soto J., Ono Y., Kikkawa U., Farese R.V., Leitges M. Effects of knockout of the protein kinase С beta gene on glucose transport and glucose homeostasis // Endocrinology. 1999, 140: 44704477.

424. Staples J.F., Koen E.L., Laverty T.M. Futile cycle' enzymes in the flight 9 muscles of North American bumblebees // J. Exp. Biol. 2004, 207: 749-754.

425. Steiner D. F., King J. 1964. Induced synthesis of hepatic uridine diphosphate glucose-glycogen glucosyltransferase after administration of insulin to alloxan-diabetic rats. J. Biol. Chem. 239: 1292-1299.

426. Stewart A., Johnson D.G., Alberti K.G., Nattrass M., Wright R. Hormone and metabolite profiles in alcoholic liver disease // Eur. J. Clin. Invest. 1983, 13: 397-403.

427. Stoker E., Wullstein H.K., Brou G. Zur Regenerationskapazitut des Leberepithels junger, wiederholt teilhepatectomierter Ratten. Autoradiographische3

428. Untersuchungen nach kontinuierlicher Dauerinfusion von H-Thymidin // Virch.Arch.Abt.B. Zellpath. 1973, 14:93-103.

429. Stratton R.J., Green C.J., Elia M. Desease-Related Malnutrition: an Evidence-Based approach to treatment. CABI Publishing, 2003. 824 p.

430. Sugden M. C., Watts D. I., Palmer T. N., Myles D. D. Direction of carbon flux in starvation and after refeeding in vitro and in vivo effects of 3-mercaptopropionate // Biochem. Int. 1983, 7: 329-337.

431. Taketa K., Shimamura J., Ueda M., Shimada Y., Kosaka K. Profiles of carbohydrate-metabolizing enzymes in human hepatocellular carcinomas and preneoplastic livers// Cancer Res. 1988, 48: 467-474.

432. Taketa K., Tanaka A., Watanabe A., Takesue A., Aoe H., Kosaka K. Undifferentiated patterns of key carbohydrate-metabolizing enzymes in injured livers. Acute carbon-tetrachloride intoxication of rat// Enzyme 1976, 21: 158-173.

433. Tal M., Liang Y., Najafi H., Lodish H.F., Matschinsky F.M. Expression and function of GLUT-1 and GLUT-2 glucose transporter isoforms in cells of cultured rat pancreatic islets//J Biol Chem 1992, 267: 17241-17247.

434. Tappy L. Regulation of hepatic glucose production in healthy subjects and patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus // Diabetes Metab. 1995, 21: 233-240.

435. Taylor R., Heine J., Collins J. Insulin action in hepatic cirrhosis: in vivo and in vitro studies // Hepatology. 1985, 5: 64-71.

436. Tejwani G.A., Pedrosa F.O., Pontremoli S., Horecker B.L. The purification of properties of rat liver frucnose-1,6-biphosphatase // Arch. Biochem. Biophys. 1976, 177:253-264.

437. Teutsch H.F. Regionality of glucose-6-phosphate hydrolysis in the liver lobule of the rat: metabolic heterogeneity of "portal" and "septal" sinusoides // Hepatology. 1988,8:311-317.

438. Teutsch H.F., Schuerfeld D., Groezinger E. Three-dimensional reconstruction of parenchymal units in the liver of the rat // Hepatology 1999, 29: 494-505.

439. Teutsch H.F. The modular microarchitecture of human liver // Hepatology 2005,42:317-25.

440. Thorens B. Glucose transporters in the regulation of intestinal, renal, and liver glucose fluxes//Am. J. Physiol. 1996, 270: G541-553.

441. Thurman R.G., Ji S., Lemasters J.J. Lobular oxygen gradients: possible role in alcohol-induced hepatotoxicity // Regulation of hepatic metabolism. N.Y.: Plenum Press, 1986, p. 293-320.

442. Thurman R.G., Forehand B.J., Apel E.D., Lemasters J.J. Role of oxygen in hepatic carbohydrate metabolism and ethanol toxicity // Biomedical and social aspects of alcohol and alcoholism. Amsterdam: Elsevier, 1988. p. 171-176.

443. Tiedge M., Lenzen S. Regulation of glucokinase and GLUT-2 glucose-transporter gene expression in pancreatic 6-cells // Biochem. J. 1991, 279(Pt 3): 899-901.

444. Tongiani R., Lopek N., Puccianelli E. Hepatocyte population dynamics during hydrocortisene and thioacetamide treatment // Histochemistry 1976, 47: 1-21.

445. Tounian P., Schneiter P., Henry S., Jequier E., Tappy L. Effects of infused fructose on endogenous glucose prodaction, gluconeogenesis, and glycogen metabolism//Amer. J. Physiol. 1994, 267: E710-E717.

446. Toyoda Y., Miwa I., Kamiya M., Ogiso S., Nonogaki Т., Aoki S., Okuda J. Evidence for glucokinase translocation by glucose in rat hepatocytes // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994, 204: 252-256.

447. Toyoda Y., Miwa I., Kamiya M., Ogiso S., Nonogaki Т., Aoki S., Okuda J. Tissue and subcellular distribution of glucokinase in rat liver and their changes during fasting-re feeding// Histochem. Cell. Biol. 1995, 103: 31-8.

448. Tsanev R. Cell cycle and liver function // Results and problems in cell differentiation. Berlin; New York: Springer, 1975,7: 197-248.

449. Ueda M., Taketa K., Shimamura J., Kosaka K. Hepatic hexokinase isozyme in liver diseases // Clin. Chim. Acta. 1974, 53: 381-383.

450. Uchigama M., Michera M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thyobarbituric acid test // Anal. Biochem. 1978, 866: 271-278.

451. Uyeda K. Phosphofructokinase // Adv. Enzymol. 1979, 48: 193-244.

452. Vanhaesebroeck В., Alessi D.R. The PI3K-PDK1 connection: more than justa road to PKB // Biochem J. 2000, 346: 561-576.

453. Van Schaftingen E., Detheux M., Veiga da Cunha M. Short-term control of glucokinase activity: role of a regulatory protein // FASEB J. 1994, 8: 414-419.

454. Vardanis A. Particulate glycogen of mammalian liver: specificity in binding phosphorylase and glycogen synthase // Biochem. Cell. Biol. 1992, 70: 523-527.

455. Varin P., Huet P.M. Hepatic microcirculation in the perfused cirrhotic rat liver//J. Clin. Invest. 1985, 76: 1904-1912.

456. Verly W.C. 1976. The control of liver growth. New York: Chalones, 112 p.

457. Waddel I.D., Burchell A. Transverse topology of glucose-6-phosphatase inrat hepatic endoplasmic reticulum//Biochem. J. 1991,275: 133-137.

458. Walker R.P. Regulation of liver glycogen metabolism by the portal blood glucose concentration in rats adapted to controlled feeding schedules // Int. J. Boichem. 1977, 8: 555-556.

459. Watanabe Т., Tanaka Y., Kimula Y. A cytophotometrical study on the centenarian hepatocyte // Virchows Arch. B. 1984, 46: 265-268.

460. Watford M. Is the small intestine a gluconeogenic organ // Nutr Rev. 2005, 63: 356-360.

461. Watson R.T., Pessin .JE. Subcellular compartmentalization and trafficking of the insulin-responsive glucose transporter, GLUT4 // Exp. Cell. Res. 2001, 271: 75-83.

462. Wei Y., Pagliassotti M.J. Hepatospecific effects of fructose on c-jun NH2terminal kinase: implications for hepatic insulin resistance // Am. J. Physiol. 2004, 287: E926-E933.

463. Weibel E.R., Staubli W., Gnagi H.R. Correlated morphometric andbiochemical studies on the cell. I. Morphometric model, stereologic methods and normal morphometric data for rat liver // J. Cell. Biol. 1969, 42: 68-91.

464. Welt K., Weiss J., Martin R., Dettmer D., Hermsdorf T et al. Ultrastrucure, immunohistochemical and biochemical investigations of the rat liver exposed to experimental diabetes and acute hypoxia // Exp. Toxicol. Pathol. 2004, 55: 331345.

465. Whelan W.J. The initiation of glycogen synthesis // BioEssays. 1986, 5: 136-140.

466. Wheatley D.N. Binucleation in mammalian liver // Exp.Cell Res. 1972, 74: 455-465.

467. White R.C., Nelson Т.Е. Analytical gel chromatography of rabbit muscleamylo-1,6-glucosidase/4-alpha-glucanotransferase under denaturing and non-denaturing conditions// Biochim Biophys Acta. 1975,400: 154-161.

468. Williams M.R., Arthur J.S., Balendran A., van der Kaay J., Poli V., Cohen P., Alessi D.R. The role of 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 in activating AGC kinases defined in embryonic stem cells // Curr. Biol. 2000, 10: 439-48.

469. Wimmer M., Luttringer C., Colombi M. The development of the acinar heterotopic pattern of phosphoenolpyruvate carboxykinase activity in the newborn rat // Histochemistry 1990, 94: 55-9.

470. Wimmer M., Pette D. Microphotometric studies on intraacinr enzyme distribution in rat liver// Histochemistry. 1979, 64: 23-33.

471. Woodgett J.R., Cohen P. Multisite phosphorylation of glycogen synthase. Molecular basis for the substrate specificity of glycogen synthase kinase-3 and casein kinase-II (glycogen synthase kinase-5) // Biochim Biophys Acta. 1984, 788: 339-47.

472. Wright E.M. Renal Na(+)-glucose cotransporters // Am. J. Physiol. Renal. Physiol 2001, 280: F10-F18.

473. Wu J.A., Danielsson A. Detection of hepatic fibrogenesis: a review of available techniques // Scand. J. Gastroenterol. 1995, 30: 817-825.

474. Wu C., Okar D.A., Kang J., Lange A.J. Reduction of hepatic glucose production as a therapeutic target in the treatment of diabetes // Current Drug Targets Immune, Endocrine & Metabolic Disorders. 2005, 5: 51-59.

475. Wu C., Okar D.A., Newgard C.B., Lange A.J. Increasing fructose 2,6-bisphosphate overcomes hepatic insulin resistance of type 2 diabetes // Am. .J Physiol. Endocrinol. Metab. 2002, 282: E38-E45.

476. Yamaguchi, Y., Wada Т., and Handa H. Interplay between positive and negative elongation factors: drawing a new view of DRB// Genes Cells. 1998, 3: 9-15.

477. Yang S., Tan T.M., Wee A., Leow C.K. Mitochondrial respiratory function and antioxidant capacity in normal and cirrhotic livers following partial hepatectomy // Cell. Mol. Life. Sci. 2004, 61: 220-229.

478. Yki-Jarvinen H., Young A.A., Lamkin C., Foley J.E. Kinetics of glucose disposal in whole body and across the forearm in man // J Clin Invest. 1987, 79: 1713-1719.

479. Zhai L., Schroeder J., Skurat A.V., Roach P.J. Do rodents have a gene encoding glycogenin-2, the liver isoform of the self-glucosylating initiator of glycogen synthesis? // IUBMB Life. 2001, 51: 87-91.

480. Zimmerman H.J. Hepatotoxicity. N.Y.: Appleton-Centary Crofits, 1978.530 p.

481. Zimmerman C.P., Gold A.M. Isolation and characterization of glycogen branching enzyme from rabbit liver// Biochemistry. 1983, 22: 3387-3392.

482. Автор выражает глубокую благодарность доктору биологических наук, профессору Борису Николаевичу Кудрявцеву за предоставление темы и руководство диссертационной работой.

Информация о работе

Безбородкина, Наталья Николаевна
кандидата биологических наук
Санкт-Петербург, 2006
ВАК 03.00.25

Диссертация

Сравнительный анализ метаболизма гликогена в гепатоцитах нормальной и цирротической печени - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы