Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительная эффективность антигельминтной терапии на моделях трихоцефалеза и ниппостронгилеза

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительная эффективность антигельминтной терапии на моделях трихоцефалеза и ниппостронгилеза"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ И ТРОПИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ им. Е. И. МАРЦИНОВСКОГО

На правах рукописи УДК: 616.995.1—085

РАШИД Вали Мохаммад

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ АНТИГЕЛЬМИНТНОЙ ТЕРАПИИ НА МОДЕЛЯХ ТРИХОЦЕФАЛЕЗА И НИППОСТРОНГИЛЕЗА

03.00.19 — Паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 1991

Работа выполнена в Институте медицинской паразитология и тропической медицины им. Е.И.Марциновского Минздрава СССР.

Научный руководитель - доктор медицинских наук,

профессор Б.А.Астафьев

Официальные оппоненты - доктор биологических наук,

член-корреспондент АМН СССР, профессор Ю.К.Богоявленский

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Э.В.Переверзева

Ведущая организация - Центральный ордена Ленина

институт усовершенствования врачей

Защита, состоится " № " . и/-о и Я 1991 г. -в час. на заседании специализированного совета Д.074.39.01 в Институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского Министерства здравоохранения СССР по адресу: 119435, г.Москва, ул. Малая Пироговская, 20.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института.

Автореферат разослан "_" _1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета

кандидат медицинских наук • • А.А.Фролова

сш'я^:

. v | ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Акту^Ц'Нооть проблемы. В настоящее время в мире болеют трихоцефалезом более 500 млн. человек ( tdr/stao - 12/90.5) и,по данным комитета экспертов ВОЗ (1987), около 900 млн. поражены аякилостомвдозами. В СССР для лечения трихоцефалеза широко применялись нафтамон и дяфезил с эффективностью $0-40% и 40-60$ соответственно (Озерецковская H.H. и др., 1985). Курс лечения мебендазолом (вермоксом) в течение 3-4-х дней подряд дает 96-100%-ое излечение, но препарат не производится отечественной промышленностью.

В 1989 году в СССР был налажен промышленный выпуск нового эффективного отечественного противонематодного средства - ыедамина. Однако вопросы действия препарата на разных стадиях развития возбудителя и повышения его эффективности путем оптимизации схем назначения оставались недостаточно изученными.

Перспективным препаратом оказался также альбендазол. Он обладает поливалентной антигельминтной, в том числе противо-нематодной активностью. Однако оптимальные схемы его назначения на разных стадиях развития паразита не разработаны. Представляет интерес проблема повышения эффективности аль-бендазола и ыедамина как посредством разработки оптимальных схем их использования, так и в комплексе с иммуномодулирую-щими средствами, применение которых, как явствует из работ И.А.Макаровой (1989), Ф.С.Бекировой (1989), Л.В.Холтобиной (1989), Д.А.Темирбекова (1989), Т.К.Раисова (1991) и других авторов, оказывает весьма положительный эффект в комплексной терапии гельминтозов.

Настоящая диссертационная работа выполнялась по планам НИР ИМПиТМ им. Е.И.Марциновского "Изучение причин паразито-логической и клинической неэффективности антигельминтной терапии и разработка методов ее рационализации" (19881990 гг.), Л гос.регистрации 01.8.80 003424, а также "Создание отечественных альтернативных противогельминтных препаратов и рациональных комбинаций" (I99I-I994 гг.), № гос. регистрации 01.9.10 003031.

Цель исследования - повышение•эффективности антигельминтной терапии при трихоцефалезе, анкялостомядозах и три-хостронгилидо зах.

В плане исследования стояли задачи:

1) на модели Nippostrongylus brasiliensis мышей (экспериментальная модель анхилостомидозов и трихостронгилядозов) изучить чувствительность гельминта на разных стадиях его развития к альбендазолу и медамяну;

2) исследовать особенности моделирования Trlohooephalue mûris (штамм Гельминтологического института Словацкой АН, г.Кошице, Чехословакия) на инбредных и аутбредных мышах;

3) на экспериментальных моделях нишгастроягилеза и три-хоцефалеза мышей исследовать эффективность разных схем введения альбендазола и медамина и определить оптимальные;

4) исследовать влияние препаратов, обладающих иммуно-модулируицим действием, на эффективность химиотерапии аль-бендазолом и медамином лабораторных мышей, экспериментально зараженных T.mûrie.

Научная новизна. Впервые:

- установлено, что чувствительность (определяемая по ED(.n ) к противогельминтным препаратам - альбендазолу или

ыедамину - личиночных и половозрелой стадий N.brasiliensia может отличаться в десятки-сотни раз;

- установлен узкий диапазон вариаций в чувствительности разных особей популяции N.braailiensis на половозрелой стадии к альбендазолу или медамяну ( ED9Q : ED10 = 1,40 -1,45) и чрезвычайно широкий на стадии 2-дневной личинки

( EDgo : ED10 = 12,4 - 117,7);

- эффективность курса лечения альбендазолом повышается с увеличением кратности его введения в течение суток; эффективность медашша существенно не зависит от кратности его введения в течение суток;

- иммуномодулятор ортофен и препараты, обладающие имму-номодулирующим действием (пентоксил, артемизинин), в иммуностимулирующих дозах способствуют самопроизвольной элиминации T.mûris у мышей при высокоинтенсивных инвазиях. При относительно низкой интенсивности инвазии они оказывают положительное действие на гельминта, повышая его жизнеспособность;

- с помощью иммуномодулятора ортофена и препаратов, обладающих иммуномодулируххдим действием (пентоксила, левамизо-ла, артемизинина), используемых в иммуностимулирующих дозах, можно достичь более высокой интенс-эффективности альбевдазо-ла или медамина при их назначении в низких суточных дозах, что особенно ваяно при высокоинтенсивных инвазиях и лечении ослабленных хозяев.

Практическая значимость работы. Выявлены новые свойства отечественного противогельминтного препарата медамина и аль-бендазола, в том числе при их комбинировании с препаратами, обладающими иммуномодулирующим действием.

Стадиеспецифическую чувствительность N.braoiliensis и 2- fC73

T.mûrie к антигельминтикам медамину я альбендазолу и различия в чувствительности к ним в зависимости от возраста половозрелых гельминтов необходимо учитывать в экспериментальных химиотерапевтических исследованиях.

Описаны особенности моделирования т.mûris (штамм Гельминтологического института Словацкой АН, г.Кошице, Чехословакия) на аутбредных лабораторных мышах и инбредных линиях, имеющихся в питомниках лабораторных животных в СССР.

Положения, выносимые на защиту:'

- существуют значительные возрастные различия в чувствительности к медамину или альбендазолу как у N.brasilien-sis, так и у T.murisj

- с помощью иммуномодулятора ортофена и препаратов, обладающих иммуномодулирующим действием, - пентоксила, артеми-зинина можно достичь более высокой интенс-эффективностя аль-бендазола или медамина при их назначении в низких суточных дозах, а также при лечении животных с высокоинтенсивной инвазией.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на собрании отдела синтеза и доклинического изучения противопара-..зитарных препаратов ИМПиТМ им. Е.И.Марциновского (26.04.91г.) и на заседании специализированной комиссии по предварительной экспертизе диссертаций при ИмПиТМ им. Е.И.Марциновского с приглашением сотрудников отдела эпидемиологии и экологии нетрансмиссивных паразитарных болезней и отделения экспериментальной химиотерапии (29.04.91 г.).

Публикации. Основные положения диссертации изложены в четырех статьях, одна из которых принята в печать ("Мед. паразитология", 1991, № 4), а три - сданы в печать.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 5 глав собственных исследована, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Объем диссертации 200 страниц машинописного текста, включает 30 таблиц, 4 графика. Библиографический указатель содержит 227 источников литературы (120 отечественных и 107 иностранных).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. Материал и методы исследования. В опытах использовано 1228 белых аутбредных мышей, 1353 мышей линии . DBA/2, 156 - линии ОВАДао, 66 - гибридов F.J ( CBA/Lao х 057В1/6). Для заражения T.mûris использовали в основном мышей-самцов линии DBA/2, которые, по данным Tomaáovlgová и соавт. (1988), характеризуются наибольшей восприимчивостью к этой инвазии. Используемая в опытах культура T.mûris была получена из Гельминтологического института Словацкой АН (г.Кошя-це, Чехословакия). Яйца T.muris для последующего культивирования получали из фекалий зараженных мышей. Инвазионную дозу яиц Т.muría вводили в 0,5 мл физиологического раствора в пищевод с помощью шприца с насаженной на него специальной канюлей. С 26-го по 38-й день инвазии мышей оболедоваля коп-рогельминтоовоскопически с использованием метода нативного мазка (с просмотром до 3-4 мазков в случаях отрицательного результата) о целью выявления заразившихся T.muris мышей.

Для заражения N.braslllensls использовали белых аутбредных мышей. Личинки ниппостронгилюса культивировали по методу Корнвелла ( Oornwell), модифицированному А.И.Кротовым (1984). Зрелость личинок контролировали под бинокулярной

лупой. Инвазионных личинок вводили мышам подкожно в 0,2 мл физиологического раствора.

Для химиотерапевтического исследования использовали альбендазол и медамин отечественного производства (Опытного производства Института химии растительных веществ АН УзССР) и вермокс фирмы Гедеон Рихтер А.О. В качестве имадуномодуля-торов применяли официнальные формы пентоксила, левамизола, ортофена, индометацина, а также артемизинина (производство ИХРВ АН УзССР). Все антигельминтики и иымуномодуляторы вводили per оа в виде суспензии в 1% растворе крахмала из расчета: необходимая доза препарата в 0,5 мл раствора.

С целью контроля результатов лечения животных, зараженных T.muris, убивали на 4-7 сутки, а зараженных Н.ЪгавШеп-sis - на 3-4 сутки после окончания лечения. Если животных лечили на личиночной стадии развития гельминта, их вскрывали в более поздние сроки, когда можно было оценить интенсивность инвазии по половозрелым формам гельминта. При этом на наличие T.muris исследовали всю толстую кишку, a N.brasl-llensie - всю тонкую кишку, поместив ее в компрессорий. Рассчитывали экстенс-эффективность (ЭЭ) и интенс-эффектявность (ИЭ) препаратов. Статистическую обработку результатов опытов производили по Л.С.Каминскому (1959). Оценку эффективных доз антигельминтиков проводили по методу Литчфилда-Уилкоксона (1949) (Беленький М.Л., 1963).

2. Результаты исследований и их обсуждение

2.1. Сравнительное изучение антигельминтного действия вермокса, альбендаоола и медамина на моделях N.brasiiiensis аутбредных и линейных мышей

Исследовали эффект антигельминтиков широкого спектра

действия (вермокс, альбендазол, медамин) на личиночной (2-4-ый дни инвазии) и половозрелой (6-16-ый дни инвазии) стадиях ниппостронгилеза мышей. 3 семи опытах использовали 1096 белых аутбредных мышей, 35 мышей-гибридов ?1 (свАДас х х 057В1/6 ) и 40 мышей линии БВА/2. пЛышей заражали подкожно по 100-500 инвазионных личинок И.Ъгаа111епз1з. Антигель-минтики начинали вводить в соответствии со схемой лечения на 2-16-е сутки инвазии. При двукратном введении антигелъмннти-ка в течение суток интервалы между ни:ли составляли 7-8 часов, при трехкратном - 3-4 часа.

Наиболее эффективным оказался вермокс. На 2-ые сутки инвазии аутбредных мышей препарат в суточной дозе 10 мг/кг при двухразовом введении в течение суток и трехдневном курсе давал почти 100%-ую ИЭ (99,57-1,89^). При использовании той же схемы, но в суточной дозе 25 мг/кг достигался 100>о-ый эффект. Однако в суточных дозах свыше 75 мг/кг массы тела в наших опытах вермокс часто вызывал гибель подопытных животных.

Подобный, 100^-ый, эффект невозможно получить при использовании альбендазола или медамина. Этот вывод можно сделать на основании рассмотрения рисунка. Из него видно, что график нарастания (болограмма) интенс-эффективности медамина при лечении мышей, инвазированных 2-дневными личинками Н.Ъгаз±11епз1э, расположен очень полого. Отношение ВБд0 к ЕП10 достигает 117,7. Однако остается еще "хвост" (от до Е0100 ), ликвидировать который можно, более чем на порядок увеличив дозу медамина. Это практически невозможно. Да и в этом нет необходимости. Из графика ясно, что достаточно

начать лечение не на 2-ые, а на 4-ые сутки илзазли, когда -?- !с /Л

0.01

0.5 1,0 2,5 5,0 ю 25 50 100

Рис. Гра<|ик чувствительности N.t>raeilienela к антигельминтикам при их введении аутбредным мышам в разные сроки инвазии

250 5со то

ДОЗЫ МГ/КГ

- медамин

----- альбендазол

2«4,7 - день инвазии - начало лечения *и

чувствительность паразита к препарату резко повышается, или же после достижения паразитом половозрелой стадии (после 6-го дня инвазии), для того чтобы получить хороший эффект при использовании меньших доз препарата. Это положение подтверждают данные таблицы. Отношение медамина на 2-ые сутки инвазии к на 4-ые сутки инвазии равно 10,8, а отношение еб90 этого препарата на 2-ые сутки к ев^0 на 4-ые сутки - 31,1. Аналогичный вывод вытекает из результатов изучения действия альбендазола. Правда, отношение ви^д к еб10 у этого препарата значительно меньше (при лечении на 2-ые сутки инвазии - 12,4), а отношение ЕБд0 альбендазола на 2-ые сутки к В1)90 на 4-ые сутки - 9,80.

Таблица

Суммарная таблица эффективностей альбендазола и медамина на разных стадиях развития Н.Ъгав111епв1о

Стадия развития ниппо-стронгилюса Альбендазол (в мг/кг) Медамин (в мг/кг)

ED50 ED10 ED90 ED90 ED50 ED10 ED90 ed90

2-дневные личинки 19,3 5,4 67,0 12,4 68,0 6,2 730,0 117,7

4-дневные личинки 3,25 1,55 6,85 4,4 6,25 1,55 23,5 15,2

7-дневный гельминт (половозрелая форма) 484,0 408,0 570,0 1.4 382,0 317,0 460,0 1,45

По-видимому, большой вариационный разброс особей по какому-либо признаку на ранних стадиях развития паразита - это общее явление, присущее и другим видам, что подтверждают наши исследования на модели T.murla. Из этого следует, что не располагая исключительно эффективным средством, можно доби-

- 12 -

ться положительного эффекта лечения, если назначать препарат на поздней личиночной или на имагинальной стадиях развития гельминта. Поскольку в практической медицине часто невозможно установить срок заражения, то целесообразно назначать курс лечения медамяном или альбендазолом, состоящий из 2-3-х последовательных циклов с интервалами меньшими, чем срок достижения паразитом половозрелой стадии. В случаях возможного развития внутрикишечных аутосуперинвазий (как это может иметь место при стронгилоидозе или гименолепидозе) повторные циклы лечения должны предупреждать их возникновение.

На этом же рис. видно, что на 7-ые сутки инвазии боло-граммы интенс-эффективностей медамияа и альбендазола имеют направление близкое к вертикальному. Это указывает на узкий диапазон вариации чувствительности половозрелых особей и.Ъгав111епв1в к антигельминтикам. Это, казалось бы, позволит добиться высокой ИЭ при назначении относительно "монотонных доз". Однако на практике обычно это не наблюдается, что объясняется разной чувствительностью к антигельминтикам различных популяций гельминтов, а нередко развитием лекарственной резистентности у некоторых из них (Астафьев Б.А., 1989). Эффективность терапии зависит также от резистентности организма хозяина и ряда других факторов.

На личиночных стадиях развития Н.Ъгав111епв1в медамин менее эффективен, чем альбендазол. Это вытекает из сравнения ВБ(-0 этих препаратов на стадиях как 2-дневной, так и 4-дневной личинки. ес50 медамина при лечении мышей,инвазированных двухдневными личинками, равнр 68,0 мг/кг, а альбендазола -19,3 мг/кг, т.е. более чем в 3,5 раз меньше. При лечении мышей, инвазированных 4-дневными личинками,БОс,, соответствен-

-13 -

но равны 6,25 и 3,25 мг/кг, т.е. ЕВ50 альбендазола в этом случае также ниже, но в 1,9 раза (табл). Таким образом, имеется четкая зависимость эффективности химиотерапии от стадии развития гельминта. Так, таблица демонстрирует, что отношение на 7-ые сутки инвазии к еб50 на 4-ые сутки инвазии при лечении мед амияом равняется 61,1, а то же отношение при воздействии альбендазолом - 148,9.

Кроме того, и на имагинальной стадии развития эффективность антигельминтного действия альбендазола и медамина повышается по мере старения паразита. Например, ИЭ при назначении альбендазола в суточной дозе 400 мг/кг, однократно в сутки, составила на 7-ые сутки инвазии 7,50±7,50$, на 8-ые сутки - 47,47-16,65$, а на 16-ые - 96,39±6,22$. Аналогичная картина наблюдается при лечении животных медамином. Так, при введении мышам дважды диспергированного медамина в суточной дозе 400 мг/кг однократно ИЭ составила на 7-ые сутки инвазии 0$, а яа 16-ые сутки - 96,90-5,78$.

Таким образом, чем моложе популяция 11.Ъгав111епв1а, тем выше ее адаптивные возможности по отношению к стрессовым факторам за счет наиболее отклоненных, т.е. наиболее стойких по отношению к антигельминтикам особей. Наоборот, половозрелая популяция гельминта в целом значительно более устойчивая к обоим испытанным антигельминтикам, в общем характеризуется крайней ригидностью, о чем свидетельствует отношение к

ЕП10 , равное всего 1,40 - 1,45.

Наши исследования показали также, что большое 'значение в плане эффективности антигельминтной терапии имеет схема назначения альбендазола или медамина. Так, у мышей, которым на вторые сутки инвазии суточную дозу альбендазола 300 мг/кг

- 14 -

вводили однократно, в кишечнике было обнаружено 21,55-10,29 ниппостронгилюсов, а при трехкратном введении - 6,10^3,30 гельминтов. При применении медамина такой же четкой зависимости эффективности лечения от кратности введения препарата в течение суток мы не отметили. Эффективность лечения этими препаратами возрастала с увеличением длительности курса химиотерапии.

2.2. Изучение особенностей моделирования штамма Т.muría, полученного из Гельминтологического института Словацкой АН (Чехословакия), на аутбредных и линейных мышах

В связи с тем, что начало работы по теме диссертации по

времени совпало с получением ИМПиТМ им. Е.И.Марциновского в

штамма т.mûris из Гельминтологического института Словацкой АН (г.Кошице, Чехословакия), предстояло изучить особенности ведения этой культуры на отечественных линиях экспериментальных мышей и при' необходимости адаптировать паразита к лабораторным животным-хозяевам.

Всего было поставлено 5 опытов, в которых были использованы мыши линий DBA/2 (408 животных), OBA/Lao (156 голов), гибрида (OBA/Lao х 057В1/6 ) (31 мышь) и белые аут-бредные мыши (132 головы). По нашим данным, у мышей линии DBA/2 препатентный период развития T.mûris колеблется от 29 до 37 суток. Причем через 37 суток яйца гельминта выделяли все 100? мышей-самцов. Самки заражаются не столь равномерно. Высокий уровень инвазии у мышей этой линии сохраняется до 57-го дня после заражения (срок наблюдения). Отдельные особи T.mûris могут жить до 270 дней. У мышей линии 0BA/Lac препатентный период развития T.mûris составляет 33-37 суток, но

- '15 -

интенсивность инвазии намного ниже. Белые аутбредные мыши отличаются выраженной неравномерностью инвазии, в связи с чем их использование для химиотерапевтических исследований является нецелесообразным. Таким образом, показано, что линия мышей DBA/2 является оптимальной для моделирования '

î.mûris.

2.3. Сравнительное изучение антигельминтного действия вермокса,альбендазола и медамина на модели T.mûris мышей линии ПВА/2

В семи опытах использовали 430 мышей линии DBA/2 (389 самцов и 41 самку). В разных опытах мышей заражали по 50,80, 100 или 160 яиц T.mûris. Препараты вводили по разным схемам на трех стадиях развития власоглава: личиночной (10-12-й дни инвазии), преимагияальной, или юной (20-22-й дни инвазии), и половозрелой (30-55-й дни инвазии). На личиночной и преима-гинальной стадиях развития власоглава трехдневное, однократное в сутки введение вермокса в дозах 5 или 10 мг/кг приводило к полному излечению всех экспериментальных животных. Такой же эффект наблюдается на имагинальной стадии паразита (3740-й дни после заражения). Эффективность препарата в этих дозах постоянно была ЮО^-ной, при колебании среднего количества гельминтов в контрольных группах от 16,83-3,04 до 88,11-13,44. При сокращении курса лечения до двух дней эффективность действия вермокса практически остается столь же высокой.

Альбендазол и медамин были более эффективны на ранних стадиях развития T.muris (личиночной и преимагинальной), чем на половозрелой. С увеличением" срока инвазии (до момента достижения паразитом половозрелой стадии) устойчивость

T.muría к антигельминтику постепенно нарастала. Так, в случаях введения альбендазола в суточной дозе 25 мг/кг массы тела, вводимого трехкратно в течение одного дня на 12-е сутки инвазии, ИЭ составила 100$, на 18-й день - 85,65^8,50$, а на половозрелой стадии (30-44-й день инвазии) - лишь 16,29^8,70$. Даже увеличение суточной дозы альбендазола до 75 или 100 мг/кг при ее дробном введении 3 раза в день и в течение трех суток не позволило достичь 100$-ой эффективности (ИЭ - 68,38-13,42$ и 88,89-9,07$, соответственно).

Медамин на ранних стадиях развития Т.muría в суточных дозах 150 мг/кг массы тела действует в основном со 100$-ным эффектом. На стадии половозрелого власоглава (30-55-й дни инвазии) введение медамина в низких суточных дозах (50, 100 или 150 мг/кг) при использовании любой схемы назначения было мало- или неэффективно. Для излечения мышей от трихоцефалеза, когда возбудитель находится на половозрелой стадии, требуется увеличение суточной дозы медамина более чем в 3 раза (500 мг/кг).

На имагинальной стадии Т.muría с увеличением возраста паразит становится более чувствительным к антигельминтикам. Так, при лечении мышей 3-дневным курсом медамина (дробное, трехразовое введение суточной дозы 300 мг/кг) на 39-41-ые сутки инвазии ИЭ составила 80,51-9,61$, а на 51-53 сутки инвазии - 98,06-5,21 или 100$.

Эффективность лечения медамином мышей, зараженных т.mûris, повышалась с увеличением кратности введения разовых доз (от I до 3-х) в течение суток. К примеру, в группе мышей, леченных трехдневным курсом, начиная с 37-го дня инвазии, ИЭ составила 16,98^8,85$ при одноразовом введении суточной дозы

препарата и 49,61-12,13$ при трехразовом ее введении в течение суток.

2.4. Влияние иммуяомодуляторов и препаратов, обладающих иммуномодулирунцим действием, на эффективность антигельминтной терапии

В четырех опытах использовали 475 мышей линии пвА/2, < зараженных Т.шиПв. В качестве иммуномодуляторов применяла ортофен и индометацин, а препаратов, обладающих яммуномоду-лирующим действием, - пентоксил, левамизол и артемизинин. В качестве антигельминтиков - альбендазол и медамин. "Иммуно-модуляторы" назначали разными схемами и с таким расчетом, чтобы завершить курс лечения за одни сутки до начала лечения аятигельминтиком. Причем к лечению антигельминтиком приступали в период достижения паразитом половозрелой стадии. Мэ-дамин и альбендазол вводили в низких дозах, позволяющих зарегистрировать положительный эффект иммуномодулирующих препаратов.

Исследования показали, что пентоксил, ортофен, артемизинин, вводимые в сроки, непосредственно предшествующие курсу лечения медамином или альбендазолом, существенно повышают их антигельминтный эффект.При этом оптимальными оказались схемы введения ортофена в суточной дозе 1,5 мг/кг массы тела I раз в сутки в течение 3, 5 или 7 дней подряд (7-дневный курс эффективнее 3- или 5-дневного), артемизинина в суточной дозе 10 мг/кг ежедневно в течение 5 дней, пентоксила в суточной дозе 20 мг/кг пять раз в течение 9-ти дней с интервалами между приемами по 48 часов, левамизола в суточной дозе 5 мг/кг I раз в сутки двумя трехдневными циклами с интервалами между ними 3 дня. Впечатляющие результаты получены при

- 18 -

лечении ыедаминоы в суточной дозе 250 мг/кг трехкратно з течение трех дней, не имеющем никакого эффекта (ИЭ - 0%) при введении одного ыедамина и показавшим отчетливый положительный эффект в комплексе с ортофеном по указанной схеме (ИЭ -72,00-12,00%) или левамизолом (ИЭ - 77,32±П,6]$). При лечении животных альбендазолом в низких, неэффективных суточных дозах (25 мг/кг в течение двух дней с двухразовым введением суточной дозы) предварительная терапия животных параллельных групп иммуномодулирующими препаратами пентоксилом или ортофеном позволила получить хороший терапевтический эффект с ИЭ до 73,17-11,84$ и 88,33-8,58$, соответственно.

Особого внимания заслуживают результаты опытов с применением имцуномодулйрующей терапии при двух значительно отличающихся степенях инвазии. При высокой интенсивности инвазии (111,17^6,26 гельминтов) введение лишь одного ортофена или пентоксила снизило интенсивность инвазии в 1,6-2,9 раза. При относительно низкой интенсивности инвазии (21,43^6,14 гельминтов) применение этих же препаратов, напротив, статиотиче-ски достоверно снизило скорость спонтанной элиминации паразитов и, следовательно, привело к улучшению приживаемости гельминтов. Эти данные хорошо сочетаются с доказательствами зависимости феномена "самоосвобождения" от иммунного статуса организма хозяина (Kelly, Dineen, 1972). Таким образом, наши опыты позволили обнаружить очень интересный с практической и научной точек зрения феномен опосредованного (через организм хозяина) антигельминтного действия препаратов, обладающих имцуномодулируюцим действием, при высокоинтенсивных и тяжело протекающих кишечных инвазиях.

Обработка результатов по методу Литчфилда-Уилкоксона

-•19 -

показала, что на фоне комплексной терапии с иммунноактивным

пентоксилом и иммуномодулятором ортофеном ев,л медамина

50

снизилась в 2,44 раза по отношению к ео50 одного медамина, вводимого по той же схеме. Вместе с тем ер^ медамина в комплексе с препаратами, обладающими иммуномодулирующими свойствами, во много (8,6-37) раз превосходят таковую одного медамина. Следовательно, с помощью препаратов, обладающих иммуномодулирующими свойствами, можно добиться более высоких результатов при использовании недостаточно эффективных доз аятигельминтиков. Такой комплекс целесообразен, так как, во-первых, позволяет поднять иммунный статус организма хозяина, а во-вторых, резко снизить интенсивность инвазии.

ВЫВОДЫ

1. Эффективность альбендазола или медамина при экспериментальном ниппостронгилезе мышей в сильной степени зависит от стадии развития возбудителя. ер50 медамина для 7-дневного гельминта (имагинальная стадия) в 61,12 раз выше, чем для 4-дневного гельминта (личинка 4-й стадии) и в 5,62 раза выше, чем для 2-дневного гельминта (личинка 3-й стадии). е^0 альбендазола для 7-дневного гельминта в 148,92 раза выше, чем для 4-дневного гельминта, и в 25,08 раза выше, чем для 2-дневного гельминта.

2. Если для половозрелой стадии П.ъгаа111епв1в характерен узкий диапазон колебаний в чувствительности к противо-гельминтным препаратам у различных особей популяции, то на ранних (личиночных) стадиях он чрезвычайно широк. Так, для 7-дневного гельминта отношение Ео^д к еэ10 медамина равно 1,45, для 4-дневных личинок - 15,2, а для 2-дневных личинок

- 117,7. Отношение EDgo к ed1q альбендазола для этих же стадий N.brasiliensis соответственно равно 1,40; 4,4; 12,4.

3. Альбендазол и медамия являются высокоэффективными противонематодными средствами, особенно надежно действующими на стадии 4-дневных личинок и половозрелой стадии N.brasiliensis и менее эффективно - на 2-дневных личинок. Эффективность курса лечения альбендазолом повышается о увеличением кратности введения суточной дозы. Эффективность медамина существенно не зависит от кратности его введения в течение суток. Эффективность этих антигельминтиков возрастает с увеличением длительности курса лечения.

4. Сравнительное изучение особенностей развития T.mûris у мышей линий DBA/2, CBA/Lac и у аутбредных мышей показало, что оптимальной для экспериментального моделирования этой инвазии является линия мышей dba/2.

5. Терапевтическое действие альбендазола и медамина при трихоцефалезе мышей прямо пропорционально суточной дозе ан-тигельминтика, длительности курса лечения и кратности его введения в течение суток.

6. На личиночной стадии развития власоглава полное излечение достигается с помощью относительно небольших доз альбендазола и медамина, а на половозрелой стадии для достижения такого же эффекта требуется 2-4-кратное повышение доз этих антигельминтиков. Особенно значительна возрастная устойчивость власоглава к этим антигельминтикам в начальный период выделения яиц.

7. При высокоинтенсивной инвазии T.mûris мышей линии dba/2 иммуномодулятор ортофен и препараты, обладающие имму-номодулирующим действием, - пентоксил, артемизинин (все - в

иммуностимулирующих дозах, а артемизияин в дозе, не оказывающей антигельминтного эффекта) в 1,6-2,9 раза снизили интенсивность инвазии.

8. С помощью препаратов, обладающих иммуномодулирущтп свойствами, можно достичь значительно более высоких результатов химиотерапии при использовании низких доз антигельминтиков.

Практические рекомендации

1. Стадиеспецорическую чувствительность И.Ъгав111епя1в и т.тиг±в к антигельминтикам необходимо учитывать в экспериментальных химяотерапевтических исследованиях.

2. При комплексировании с препаратами, обладающими им-муномодулирующими свойствами, можно получить хороший химио-терапевтический эффект с помощью альбендазола или медамина, назначаемых в низких лечебных дозах.

Внедрение результатов исследования в практику

Рекомендация диссертация по экспериментальной химиотерапии на моделях трихоцефалеза и ниппостронгилеза используются в практике лабораторных исследований в ИМПиТМ им. Е.И.Марцяяовского (имеется акт о внедрении).

Работы, опубликованные по теме диссертации

1. Рашвд В.М. "Сравнительное изучение эффективности вермок-са, альбендазола и медамина на экспериментальной модели трихоцефалеза мышей" // "Мед.паразитология". - 1991. -

№ 5. .

2. Рашид В.М. "Изучение эффективности вермокса и альбенда-

- 22 -

гола на экспериментальной модели нштостронгилеза мышей". Сдана в печать.

3. Рашид В.М., Астафьев Б.А. "Испытание различных схем назначения медамнна на разных стадиях развития Шрров'Ьгопву-1ив Ъгев111е1^8п. Сдана в печать.

4. Астафьев Б.А., Рашид В.М. "Влияние препаратов, обладающих иммуномодулярующим действием, на эффективность антигель-минтной терапии". Сдала в печать.

03.00.19 I Рашид Вали Мохаммад "Сравнительная эффективность антигельминтной терапии на моделях трихоцефалеза и ниппостронгилеза".

Объем I п.л. Тирах 100 экземпляров

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тип. ОХО Миннефтегазпрома СССР Зак.1073 Тир.101)