Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Состояние глюконеогенеза и мочевинообразования при экспериментальном гепатите и циррозе печени и их коррекция аминокислотами

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Состояние глюконеогенеза и мочевинообразования при экспериментальном гепатите и циррозе печени и их коррекция аминокислотами"

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН ИНСТИТУТ БИОХИМИИ

РГ6 од

' -'н// }£)■' пРавах рукописи

ХАЛ И КО В Кахор Мирзаевич

УДК 616.36-002-004:599.323.4: 612.015.32/33-

Состояние глюконеогенеза и мочевинообразования при экспериментальном гепатите и циррозе печени и их коррекция аминокислотами

03.00.04—Биологическая химня

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой стецени кандидата медицинских наук

Ташкент—1994 г.

Работа выполнена на кафедре бполег ическон химия Самаркандского государственного ордена Дружбы народов медицинского института имени академика II. II. Павлова.

Научный руководитель:

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор В. А. БЛИНОВ"

доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки Республики Узбекистан Н. X. ЛБДУЛЛАЕВ

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор А. А-. АБИДОВ

доктор медидинскнх наук, профессору. К. ИБРАГИМОВ

Ведущее учреждение: институт.

П-Ташкентский медицинский

Защита диссертации состоится « ам^А-, '1994 г. в часов на заседании специализированного ученого

совета Д 01516.21 по присуждению ученой степени доктора наук в Институте биохимии аН.Республики Узбекистан по адресу: 700143, Ташкент, пр. X. Абдуллаева, 56.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ин-ституа биохимии АН Республики Узбекистан.

Автореферат разослан » (\vVYi-e~v_Js 1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор биологических наук

С. А. БУРХАНОВ.

СЕГОЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ

Ауггадьноптъ аооблемч. 2 яастсянгез время so многих странах аира наметмась тендэншя к узелгчеядю частота заболеваний аечена (О.Я.Картэшоеа, 1937; 2,3К.Ласдяг, 1368,- 3.3.Серов, I5S9; 3ai-toli:u et a 1. 1Э84). Это. наряду с недостаточней язучев-

ностьщ патогенеза обуслаз.яизаэт, с однаЗ стороны, з-лтузльясот-Ъ пробке.1,ы, а с другоЗ ~ обежшквает необходимость лгысй:шля нозыгс аодзесдол для дзучаагя острьк. з хрокачасаас забалззаа-й дадеал.

лз нлх ¿язаг б*кь .-зучеаде специогч^сгг-: £"ЗЛ12!2 аэтеяд, з .сс'герч^ сткося" мо^е-зплс-обрэзевазяа я сгнтаз г.тсяо.-зк аеуглазод-зых ооедкаечнЛ - зл:длок::слот, гдапергна, лзктата, ларуза?а, ¿оейз-т;яоз я jp. Синтез г.кко'Ы d-з .-¡ого детально лзу-тэн npv. злеяз— ■гвоглзкадх яогообраголоЕдя:: {З.С.1апсг» З.д.Злиис.?, 1275; A.C2i5?ro, 1353)г сахарном даайбте (Л.Е.Хзшшщ,. 1985; J.lil -;Ч1, JDSI) 2 неяотерк:: другдх Пй?ологтгэсгд2 сос?о.«Н£-:х. 'Змасга о г*«»

зад ^ня^ызя'гальичй чродеег, поди^ртлз«--^^! яср^сглл-зеияэ, госяодаадкй деейглд шбалгзовяаяого -г.такегчка, -рагтдхрзэ-дай пул лроматгтточрьа" совднзан'аа ут'лезодаоге, лжзадногс я азотистого ouMina, гозраетажлЗ ирг ряда '¿лэпологачеслях ссстсянлЗ: (бер~-кенноегг, нащдааянея '¡тзтнгя работа» стовос) з аго~

текаэдггЛ, а осповеоу, в дечаня, прч заболеваниях этого органа пр-зя-тшесха не с следован. 3 атом отясесвзц имеются липь едзяячннз работа клинической аагграаленйостз (Е.3»3д2нсяа, ISSc; ¿г.Р.?1Шяз, Х974; 2.3nlthlai3s, 1372). Сдяакз a наг .as-оснащен боль гной круг вопросов (взаимооачзь углесодного и азотногого обмена на уровне глюкоаэогенезэ, роль сантззэ глтаза da пата з освовенх параметрах метаболизма углезодаз, яг;мех'.енлг активности злотевше ферментов- гдялонэогелеза» аретшущестаеннач роль субстратов з.синтезе глюкоза а т.д.), имекгзх ярямоа отиотленде х лоялмяажо новых сторон патогенеза острых а хрогачасгах заболававгй лечордг. 3 полной мера отавчеяное вша относится а ж готевшюобразойатзльпоЗ дуакгзд печени.

Метлу тем, анпенаааэ азменешй глаконвогвавза л мочззжюоора-зованая может раскрыть аовкэ аэрелоятзвх ааг а азучеяак лам гад аза зги т.--аелих заболеваний двдени, та« а дсмочь з разработка обьен-тзеных д23^вреадаальЕ0-д23ГН0ст2'1ес1ас: крлтеряав, з оденяа эф^ея-тзваоста лвчнеш и з лзЕеаялзи сатогеге^етес-чг корректно сбссяс— ааанш; 'гарапйЕТнчёекзд гавропралтай. Исхода дз этого» азучадав.

Г

углеголного, азотистого обмена, глюкокеогенно£ ж шчезиаообразовэ-тельной функций печенг цре острых г хронических заболеваниях печ&НЕ представляется актуальной задачей.

Вел? ксследования заключалась в динамичном изучение состояния некоторых сторон углеводного, азотистого обмена,'глюконеогенноЁ ж моченинообразовательвой функций печени у крыс, затравленных татра-глорыетаяом к в ваяскена: роли отдельных аминокислот (аланан, тцро-зин,. в коррекции нарушенного метаболизма.

, рдсле/'~ззв_Е% :

1. Установить lr ^"о е -in vitro количественные а качественные различая угл-зволнсч-с», азотистого обмена, глюконеогенноЁ е моче2гнообразо2£тась.Еэ£ йгекдай пе^зна яззду злорсвюзи крвсаик я EpKOEiE с остры.'.:, хроническим токсическим гепатитом к циррозом пе~

"ЗеШа.

2. Опекать взаимосвязь ыочевпносбразозания е скорости синтеза глюкоза ЙБ г-0""" в организме крас, затравленных тетрахаормсганой.

3. Установить субстратную аяг^мостз глакогеаной (ь-злавин), глако—кетогенвох i ^ -ГЕрозан) 2 кгтогвнЕо2 ( X. -лейниз) аминокислот е г-'^конеогснез£ п шяегинообразованак в печена у крыс с острым х хроническая порагенае:; печена.

Каурая кэвазна. ¡¿оквзэас, "что с зарастанием тяжести поражения печена ь кровв у арке снЕкзегся Koia-sEipaoZK .raososs, в ххеччва уменьшается содерканас тяакогека, поыспается г.ораг чувствительности периферических ткане£ к .глюкозе, в т.ч. глзкокеогенЕого геказа. Впервые установлено, что в печена у подопытных крас снижается айтаэ-еость двух еяэтевш: ферментов глаковеогенеза: глзкозо-б-фосфзтазы е фруктозе—1,6-дафосфатгзы, которая потаи коррелирует с укеныаенавк содержания глюкозы в крова г глахсгеЕ- з печена. Оснозные нарушения азотистого обмана у крыс с острим .а хроническим горазенаом печена проявляются в виде гаперагионаовшна, относительной недостаточности обезБракЕвзная избытка аккаакг б вила кочепаяк, но не гдутамань.

В раооте впервые обнаружено, что з печака у крас с токсическим гепатитом z цгррозои аланвн на 51,8-50,2?, а тирозин - на 37,3-

менее автевсавнее трансформируется в глюкозу, чек у здоров-к животных. В то ss гремя, у подопытных крыс нагрузка указанными аминоклелотагей приводила к бслыпвх.'у, чек в норие, повышению в крови уровня аиыаака, глутамаяа а аргакана. Еапротив, концентрация -лоче-ваны, орнитана z активность сывороточной аргиназы у них была понв-sshhoa. Инкмг словаыа, благодаря нагрузке аггикокеслоташ у крыс с

поранением лвченд огтатлиззв проявляются сзовбразные нартлвная мочеЕДЗСобразовзтельаой и гижонеогеняоЗ функций язчачл. ЛаЗдин, а этом отношении, сказался индифферентной аминокислотой.

В яечана дододктшсс крыс ослаблен сантзз гдвнозн <*э пато аа только зз экзогрзякх, ео а из эндогенных науглаводных предзес-тзвЕнаясв, з сролзем. на 2I.S/S. Посла введеязя з пер'Зузат даченя ала ига а и тарсзлнз, синтез глюкоза аз нях Zm одананоз з качественном отдошанал у здоровых я додсдытных крыс. В ксддчестз еяном отзоевеяд за у =хрнс а дсра..;вндзм деченя i- ri.tie дз злаЕяяа д тирозааа всегда образовывалось глюкозы de пото есстзагстзенко з 1,73 а 2.23 раза меньше, чем в норме.

"доздтзао-дратгдчедггая значимость работы. Раскрыта некоторое новые стороны дзтогенеза дора^ендЗ дечевз, вызванных тетрзхлормэта-зоа. Она выра^а;отся з то.ч, что дед остром, хронзческси токсачеезоа гедгтата и дярроза изменяются две сяеязфачесхяа фушшиз лэченл: глгжснеогеяная и мачезинообразозательаая, Сншсяавв глюдонаогзнлсй •хундщга печена. празоддт s умендшеядв содаетанзя глвясзн з арсьа а глпхогена з лечена л является следстздам подавления, актаззэстз гяыкозо-б-$ос$£тззн а фртятсзо-1,5-дп^ос5атззз, У додспнтннд крыс дзвыаен дорог чузстзл.тельнсстд дерг^крЕлесяРх тканей г глюкозе, что является яошхенсаторяо-дртспособительянм актом, воззнкагкдм в зтвэт на достоянное сняаззка концентрации гдшоза а кровз. Б дрзктаческом плана зслученяыз давние ддкттет необходимость стдмуляцал гдшсзео— геяаза, яасздоаае оргаядзма углеводам нзвна, дальнейшего ялаязь-чаского дзучендя субстратной и гормональноS нндузсза сантвэг гдниоза

■1э novo .

Глубоки дарушенаг азотистого обмена у крыс о острка а дронд— чеекзм порааензюм дечези, проявляющееся гиварзммоаноеыаей, Д2Ес— ураоеизей, псзнЕзяаем в крозя содеряэзля глутзмика а аргинина, сщь» леняем актявностя сывороточной арганазн а содзрззндя з креза орнв-- пка » соответствующие дараллелл, благодаря гягкоьаогеявзу о утле-зоднкм обменов ряслгываат ранее не .извастныэ /лвханззш возкзкно— зеяия, течения указанной патологии и могут служить з хлинянэ оснозой для разработал доаолаительянх ди^йерэЕДиально-дзагностотасякх г^п^тзепзз

Исводьзовандэ нагрузок раалачнниЕ аианодаслотзмг s опытах in tl-tù я in.vitro дозволалз четко заявить сгрытаэ аарузеигд 7Глеяоднсго я ззотдетого обмана. Зм дозволяет оагомендозать ах для дедольоезлдля з кдгквка а аачвстзз аэтвдз знаадавая мезззаметэнх

ЗГ

нарукегцй кзтзболг.зка при остршс е хроЕсчесгЕх поражениях печенЕ. Пслучевкве данное раскрывает коше возмсжносте для формирован»! ЕатогенетЕческЕ оправданного леченая, в частности, дието£.

Агр?бепия Р8с^тк. Основные лоложеняя диссертации доложены на у^еСно-иетодичесяоь' oobg~eeke заведуэщкх кафедрами Окохигаж Респуб-хеке Узбекистан (г.СакаркбЕД, IS32), ее научное конференции аспирантов к ЕлиЕЕчесг.ш: ординаторов Сак£<',И "Ероблекы аедишшк", посвя-шеяно£ II годовщине hcssbkcej/.cctz Республики Узбекистан (г.Самарканд, 1993}, ее неучаоЕ конференция молодое учеша СакШ" "Актуальные Богрсск творв-ггческоР г глЕвгчеснсЁ ыедецинк" (г.Самарканд, 12ЭЗ), на ввутсаЁ еоехеренхши, посвященной 75^estee ТвшНИИВС {г.Тзе-. иеЕт, 12&Б),.вв обьздаензок заседании кафедр сеохккеи, общей г óe0prahetiece0íi хлшее, нормальной сеэеодогее, судебной медицины CeiáCI С199-;}.

РезулаУБты исследований включены в лекпиоЕЗЕй гурс до сдалогЕ^ейЕСЁ xeüee Ca.i.7/.. "УсасренныЕ метод вызывания Бкспекщегтг^ыда; гепЕТигов в цирроза дечеЕь у крыс" внедрен на кафедрах биохимии, Еоркапъйой физиологии, датодоггчйСЕо£ анатомы: СвЙШ {ЕротсЕСл MI от 13 иерта I9S2 г.). Зарегистрировано рацкоса-лизаторское предлежэнке: "üoeeíekshee способа вызывания острых, хро-еечесеед гепатитов ж циррозе пячеЕЕ у крыс* заданное БРКЗ Cst&H 27 января IS93 г., й JOB,

Цублгкааш:. По. диссертации опубликовано 4 научкне работы е сделано одно рацгснализаторсЕое предложение. -

Рбъем г стг-уггтге работы. Диссертация изложена на ,140 страницах ыааиноЕисЕ, состоит es введения, 5 глав, обсуждения результатов, выводов, cueces литературы, вгдучашего 221 источников. Диссертация Еалвсгргроваиа 23 тасшщаш в 16 рисунками.

:i''»TeDKSJb' е метогк исследования, Эксперименты проведены на 345 белых беспородных крысах-саазах, aacoofe 245,8 - 3,67 г, Все контрольные е подопытные хивотыые.были разделены на две основше группы, у которых исследуемые параметры определитесь ta vivo еле tí tro . Доражение начеяи -у крыс вызывали по кетоду

(IS82) в на®е£ келзфшещкл. Для этого ши лодкоено вводов BD% кзслето£ раствор четкреххлористого углерода, ез расчета 0,4 кг на IQO r кассы животного, через каждые 72 ч. По истечегдя 30. 63 и 90 днеЁ. со дЕ". качала введение четыредхяорнстого углерода в'крова у гивотных определяли содержание рлда псказЕгелаЙ углеводного к азотистого обмена, ь печени - содержание гликогена (c-.H.Good et el., 1ЭЗЗ), е 2 Г.СЧЕ1.Л е корковом слое почек - акнвввоеть глшлозо-б-

фосфатаэы (3.1,2.9, Д-SwaEson , 1955) а Йруктозо-1,3-Д2фос<$агазн (3.1.3.II, G.vitbev et al., IS53). Содержавse балка определяла до иетоду о. Lorry et al» (1351). Ди азучезля in rlvo антеь-oraaocra процесса сязтеза гдааозн ¿э здоровни а подопытным

крысам ?ег оз яводала ь-адаана, ii-rspoaas яги ^-лаЗдая в дозе 71,4 ыг/1"0 г массы злвотяого. В ошгах ¿л -ritra аслааьзовала недель пер«|узару2ис5 печена ярые..(л.Нэвз et al., I3SS) з некоторой isодяфигают (Е.А.Едгяов х др., IS85). Через кагдаз 20 iras а течевас IC0 маз в дерфузачэ определяла с оде рх акав глюкозы, ашаазз, иочавкза, глугеняна, ойсазоэагяяхся аз эндогенных соедашеязЗ зля посла экзогенного зведазня ysaaasaic: гмааскааяот а.доза: алзаказ а ■¡дрозда - по Г a,"/ICO «а, а лайпдна - 4 :й/100 ¡¿х ( з.Гтеад.?, I979j ■3.Сотая al., 1980s К.О.таг» *t al. IS82).

3 перайардчае-тоа zpoaa алж в иерфугатв определяла содержала глэкозн в система гззкозосксидаза-пброкс^аса-о-тслздея {3..5„Гсролец-Z2?, 137S5, мочгаг.нн - унгфдцарованнкм дгзцстзлмонооясааоннм катодом (s.s.^evicor, I54¿5, эимизяа s глу?ашяа - до ¿.Я.Садзковой д асавг. (1362); з сазсротха «рек* определяла аовдвЕтрашл аргиназа - гсдг4'-'-дарсае?дыи катодам 3.1.1р?лтозэ с соамг. (I2SG), орзжгкна а азтзаностг -авороточдсЯ аргзназх - по В.АЛраксгу л др. (IS73).

Все результата опатов otípaiíOT^si отатастачеока до оавдггльао составленной nporpajisa яа 22У M CûIO-ùI "Элвггропглэ" с астользо-занлэя тоатчрия дсстоаерясеткСгьадезта, а таазй коаД^пщант ; коррв-ДЯП2Ж ('Л.1.сазлн, I3SG; Я.П.1шмарзя, IS62; J.G.SasnacKö, I2S4; Г.(5.йасзн, ISSO}.

газгавша швлвяшвиа а нх'сбоаШнв

Мор^ологичесяа установлено, что за 30 день доела зэвдаягя тв7рах£ор«гтава печеночная траада дез шшеяендЗ:» деитральанв ванн дояаоврован, гелатодатн ишют аайухшуа цетоплазку, ядра гжпохреаны, аекоторне аз нлг увалэтенк з 2-3 раза» S 60. дни опыта гепатопатя лиела гадертрофарогаявнв ядра, отмвчадасъ ах явно зыракенная адрозая а алздофальазд дистрофия с неяротячэскгяа ааменщшши. Между центральной я дераферачвоишв зонакя далак доязлгыас* соединят альн -таагнав тага. К. 30 дня ааОлзлг^няя встречалась даллогднна ггяатопатя, бала эвражена ах белковая а ваяуокьчая ддетрофда, отсутствуя* Игя-зстая структура печена. Совдиазтельаотданкка тяня масеяваы, нзфаряз-рсвааа фвЗросиастама и гзтеаоцзгзги.

с

Согласно вашаы данный, подучекшш ia vi^o введение тетра-хлормзтава приводит г. снижении кончентрацай глюкозы в периферической крова крыс, особенно г 90 дно опыта, когда уровень сэ был на 11,4? анзв, чем у здоровых жлзотяых. Одновременно с этам в пече„а у. подопытных крыс по мере увеличения сроков эксяераиента неуклонно снижалось содержание гликогена; к 9Э да» опыта оно составляло 59,1* от исходного уровня. Эта результата согласуется с данными А.К.Венгеровского а др. (IS87); В.В.Сырова а др. (I93G); Б.В.Давыдоза а дги (1990) Е могут быть следствием у-салаачаго глккогеналазз. Не исключено такхз, чю у XZEOTHHX под вдкяла«« тетрахлорметака ослабляется синтез гликогена пз глюкозы хяаьоавегэнзэто генеза, т.е. у них чохет бить ослаблен глюкокесгензз. Дея проверки этого предположения ш изучал: у здоровых а подопытных крыс азмзнвняя некоторых показателей азотис-того обмена и активность, s лечаиг г корковом cares печек двух глз>~ чевш: фтрментов сактеза глюкозы ¿з novo (рис. I).

Вначале &ас установлено, что содерглнае вм'^зка з крозг у еодэпытеюс крыс всегда превышало (C,D5>FcDr0uï) норку. Е литературе нет единого мнения о причина",: этого явления. Одза азторы очатгет, что гапераыиовеаак - следствие усаленного катаболаака белков а деэ-аЮЕнаровааля ьманэкаслот, другле - следствие снаженая иочеванообрэ-зовательней фувнааи аечена СН.Б.Ьпшсва, 19SS; lî.Tiletrup, В.Зисаег, B.Kroy,' ISS2; Î-." K.Hbiiacrsob, Л .T.^ulenwiâer, 1990)»

По вазаа дачным это иол*, г быть результатов угнетения орнатаясвого пакла ыочевинообразованая. Действительно, а 33-33:деяи опыта кондез-трацая мочевины в хрозг у нах составляла соответственно 3,25 - 0,12; 3,15 » 0,19 а 3,24 - С,II кьдодь/д, что на 20,7-23,2Î меньше, чем б Еорна (4,10 - Q,I5 киоль/л). £л.г белее глубокого азученая состояния мочеванообразовательно* фуакпаа печена у здоровых а зодоантных кр::с Еаиа было исследовано в крова у нах содержание орнатаьа a аргинина, как арокежуточных продуктов орнатанового цикла, в также гггквпссть сывороточной аргавазы. Установлено, что концентрадая ораазааг ь опытной группе всегда оказывалась более Еазко£, че.ч у здоровых крыс, в 1,16-1,37 раза. Б •арставоаолакносгь гъс-к?, в крови у «pas, зэтраь-деянях тегрехлорметако!^ содержание аргапана всегда древкзало норку в 1,15-1,24 раз2, б аетавность ергангзн Сила нахв es. Эта данные свадетельствуст с той, -сто у подопытных крыс затадлена скорость ареврапения арг-нана ь орнатЕЬ и мэчевазу.

Что касается глутвшша, как другого соединения, хграгтерпзуь-сего детоксакацаз asKsaass, то содержание его ь крови у подзаитшд:

кснс да 60 день оасдерамантз Ливзкзадз норглу на 12%, а к 90 дая -за 2С$. Сдяако отепс.чь усиленной детокздкздид алмаака только а системе глутзмазоэал клолотз-глутза'лч у яях оказывается недостаточной для яориалазацдч з хроэз урса^л весьма токсического аммаакз.

Затем нала рчервн» азучоко дзыеаекде зктазаоста дзух аяетааах ферментов гдаксчаогенезз а чечена а коркоаом слое ясчея крыс, затравленных твтрахлорааузнсм,- Сначала было устзаовлеяо, что а корчовоу слое почек у здоровы:-: крыс актазность глвкозз-5-фзс5атззы а фруятозс-1,5-дд.1:оафзтззь: былэ солей высокоЗ, чем з даче^я. Кроме того, как з даче ах, гак и а яоркгзса слое дочек здорсаых крыс зктазаооть $руктозо-1,З-ддфосгзта-д всегда ар«выдала, з I,2j.I,40 рэза, аятшз-лсстз т.тодозс-Т-'сс^зтз-ы. Подобное ззмвнэяае спектра ¿ермеитзз сказалось не хзрзктзраыи для яодсдытязсг хлзоткых. У нах, с уззлд-ей дом лро::э заедэягя ?зтрахлср«зтааэзрсд-ходат белее значительнее дадечпе зктазяссгл -Jpy д-тозо-1,6-ди$осфатззы, чем г;дг.<оз.>-6-фэс;$гтаиу, т.а. лз.чеяя5тгл :i>: со-этазсзаяе. Через X даай от начала опыта аатаз-"•ocTi гл.с::ооз дачанд кр»г с остры..» то:;::лчаониу гзяз-тдтом сказалась та.тоЗ д-з, как у здорозих зл¿отдых. ^ псглад/лдйда срока СсО д SC днд} знтигассть узазаяаогз зызз ¿ораектз глгкояео--йлэзз очазизздэсо ндзе нораз, ссагэетстззйно з 1,36 л 1,51 раза (32.2 - 2.1 л 27,S t 2,7, дротдз 44,5 - 4,5 мкМ Р/г ^елка/мая/'ЗГ5 С). Что касается ±рукгозг~1,3-д:'фосфатэ2ы, то зктавяссть этого фераз.чта зо всех трех дояодытаах груддах была низе, чем у здоровых животных, соотзетстзелао з 1,21; 1,.5Л д 2,25 ¿.азз (С,С5>?^0.,0С1). Ввсьиа янтересна» является д то, что зктаэяость. обо«. фермеатов -глзжояео-гэз^за з корасасн слов почек крыс под: задаваем тетрахлормвтзяз на снияалась». ¡йымя слозааи, в кордово« слов почек ахтаавость ферментов, за сравнена» с дачззьзз» оказалась, более резистентной к дейетзяв токсического ai „ата, что связано, видимо,, с особенностями компарт-мектзлазадаг указанных ферментов. (В.С.Еапог,. 1973? З.С.Шавот, Б.А.Бла-дов,-IQ75).

Итак,, уменьианав яондентрапта глюкозы а кропи у подопытных нсдс (особенно к 30-30 дням опыта) являлось аяадстздеа яа -¡только дзиепеаая -згатеза и ряс да за кшсогзяа з дечеая, на, гзззгзм зезудьтзт-.-л ¡гдаеяля ( г --:,S7" х-:те.чсазкоста глгжзаеогэд^за. Иодоо-чде зезу.тътатд разе?, аз аздестдд, сддада, зш äx датврарета-ре-ат- граиедлтел&нз я длзндяз, то ска, аз пая взгляд, раскрывает аовае.подходы в псаамаааа патогеяеза хроначесгах аораавнай пзчваа, а' также лх леченая, в частно от Д. ддетоЗ-

№

70 100

00 -б о.

40 .

гон

А

4г 1 1

4-

I

1

м

I. Нэчоншшэ активности• (я%) г.чвкозо-й-[ос,[атази (а )

I! '¡'руктозс-I,б-д(!1 ос¿атаэ« ( И )"в печзни (.Л) и почках (Б) крус, затр-дрлеинчх тетрахлормотаиои. I, I и С. - соответственно 30, »50 к 00 днеЦ квельчи« СОЦ, Линия/ иаръчледьиая оси абсцисс - лктшлюзть Лермонтов

• -здоровых Крис, ПрИ1!ЯТа)1 %

О

Учитывая Еанюсп» высзэ2г-.тых положений, з дальнейшем шг изучили влияние разных типов а мне кислот (1« -аланина, ь —тирозина а 1-лейцина) на указанные вышэ параметры как у здоровые, так а подопытных крыс. Было установлено,"что после введения аланина рег оа к первому часу наблюдения }оозепь глюкозы в крови у здоровых крнс Еозрос нз 42,8%, возвращаясь к яорыэ л третьему часу опыта. У подопытных крыс яе в аналогичных условиях повышение содер-зания новообразованной глюкозы оказалось менее значительной. Например, к 90 дня дхсперагентс повышение её состазило всаго 20%. Беоьаа существенно, что к 3 часу исследования у подопытных крыс не огясчздссь Еозэрата уровня глюкозы к ¿сходному. Зто связано у них с поаизенпси? толерантности герг^ераческах тканей к глзкозе глизензогенноге гзнеза. Действительно, к 30, 60 л 30 дняа опыта у подопытные крыс она была равна соответственно 0,15; 0,20 и 0.23 ммаяз/л, но в 5-3 рзз ешо, чем у здоронах жязотшас (0,03 иетль/л). Следовательно, полученные данные пеззояязя считать, что у крыс о. тоясячесвиа гопа-?атом ч лгрроаси сечвчз ослаблена трансформация •глг1кина э гдгкс27 а гллзегсчеоЕзэ грязни у ни араобргетзт дзабетогеяг-^З хараггз? (И.Н.Коннлова, 1ЭЭ4; А.Ргеес, Ь.АХгог-аг^е с1; 1ЭЕ8; 2:"-

^Ьешхаяя, 5'-'.1989), кзк следствие повыпшная порогз чузстзи-

тежгоотд периферических ткачей к глюкоза глюконеогевного геячза. Далее бнло уст2ланлв.!0, что введение. аланина индуцировало активность обоих ферментов в печвял а корковом олоа почек здоровыг крыс (0,01>Р<0,001). Ечовь активность '2руктозо-1,6-д24осфатаз11. всегда бала болез высокой, чега глвкозо-З-фссфатазы. Что касается подопытных крыс, то получеявыа нами данные саидетег-зтвузт о способности аланина ивдуцировать в печени .«ивотных активность глюкозо-б-фэсфатазы» хотя ц в несколько .меньшей степени. Аналогичная закономерность устзноэ-лено наш я ддр Зруктозо-1,6-ди$осфзтазн. Б корковом слое почек крыс затравленных тетрахлорл;етаном алания существенно на индуцировал активность обоих ферментов (0,5-«?>0,2).

Ааалоггччуз, з качественном стнспанип, картину мы наблюдала а после введения ре*1 оа с по.тадья металлического зонда ^лвотвы:л I-тпрозкяа. Однако з количественном отнеззнии результаты оказались несколько иными. Гак, пед влиянием тирозина у здоровых ливотяых уровень глзскозы з крови повышался менее значительно, чем после приеыа алаяин?. У подопытных крыс же увеличение содержания глзакозы з крови, оказалось з 1,15-1,20 раза манвгэ. чах посла ¿ведения, аланина. В то да врс:'-', ео назгл дзягчм, таро зга .усиливая; пронакгозенза гдвксэы

ь Е-ргфергческие ткани. В самок деле, толерантность периферических тканей: к глюкозе у здоровых животных была равна С,07 ммоль/л, а у подопытных t3Q, 60, 90 дни опыта) соответственно 0,10; 0,14 в 0,24 -кмодь/л. Это существенно меньше, чем после введения таким животным аланнва. Кроме того, результаты изучения активности ферментов глюко-Еесгекеза через 3 часа после введения крысам тирозина показали, что степень индукции обеих ферментов тирозином была ыгчьше, чам после введения аланина. После введения per os здоровым и подопы-'нык крысам леЁцнна до не небдвдали у них каких-либо" изменений в указаний: параметра;-: углеводного обиеза, что согласуется с дашшме литературы ( K.Octtt: et ai.,- ' 1932). ' •

В воследзтаел; сдвиги углеводного л азотистого обмена у здоровых крыс 2 крыс с остры;.: к ;:роавчеслик аора-ексед» печекд езученн лаю: на иоделс дегазируемо!; печени. Зто, с одной стороны, дозволило исключить 1.гогочисленк«е влияния целостного оргагшзыа на синте:-! глюкоз» Ьь .now , а с другой сгоровы - в адекватных условиях, изучить сдался углеводного z азотистого обмена, иочевикообразовзг-телькугз ¡i гдсЕоавсггануе суееции печени у крыс, затравленных «е5рг~

Earn установлено, что в пар£уз$;руемэ£' печени здоровых крыс эффективно протекает синтез глзлеазк из эндогенных аеугдеводЕкз соедЕКйЕЕЁ. Так, если в рециркулнрушей еидкости Езначальао глзжззг не определялась, то к ICO мин перфузии её содержание составило 55,20 - 1,76 ккК/ICO «к. Одновременно е nepjyaairs.увеличивалась концентрация емьгака,' мочевины и глутамикв. К кокду опыта содержание • зтих соединений составило соответственно 55,63 - 1,48; 60,73 ¿ 1,21 и 13,0 - 0,60 мй.1/100 кл. Иныии словадж, во ьреыя перфузии честь зндогбдегх соединений являлась предаепгвеЕнгкадх, с однс£ оторопи, углеродного скелета глюкозы, е с дру.оЁ - кскеч:-¡ыд сродуетол азотистого обмена. Подобные наблюдения хорошо сом&суггся с данными зарубегЕкх исследователей С в.2те£1р, IS79; J.c.Scwas et tz., 1ЭБ0).

У подопытных крыс (100 кие опыта) к 30 , 60 и 33 дням есследс— • ьания концентрация новообразованно*; глюкозы ь перфузате составляла соответственно 52,12 - 1,15; 47,?? - 2,32 и 44,74 ~ 1,50 tó'VIOD iffi, т.е. всегда оказывалась меньше .(0,05>P«C 0,001), чел: у здорс-Екг крыс. Уже зти данные достоверно странаит подавление дгокоаеогенеза как процессе в печени крыс, затраваеянкт хетрахяоркзтаЕОк. B.-iecse с тем у подопытных-.кивотшх вабладается усиленное,' по сравнении со здоровыми крысами, образование аммиака. Так, к 100 ¡сн опыта

гл

Учитывая важность вызаэсг^яых подсаекий. з дальнейшем ¿аг изучили влияние разных типов акняскаслот (-алааина, ь-тирозина а X-лейцина) на указанные выше параметры как у здоровые, так а подопытных крыс. Было установлено,-что посла введения аланака per оз к пеовоглу часу наблюдения уровень глюкоза в кроза у здоровых крыс Еозрос на'42,8$, возвращаясь я норма а третьему часу опыта. 7 подопытных крыс яе в аналогичных условиях повышение содержания новообразованной глюкозы оказалось менее значительной. Например, к 9G дню янсперзментс повышение её составило всого 20!?. Бесьма существенно, что а 3 часу исследования у подопытных крыс не отмечалось, возврата уровня глюноса н асхсдночу. Это связано у них с гсназенаад толерантности гера^арачесяах тканей к глзтозе глвзсвесгензого генеза. Действительно, я 30, 60 л 20 дала опыта у подопытных крыс она была равна соответственно 0,15; 0,20 ж 0.23 мыапь/л, ;то в 5-3 раз вше, чем у здоровых жсотзнх (0,03 :«олъ/л), Следовательно, вояучснные данные позволяют считать, что у крыс с. тсксаческая гчпа-татом я дгррозом аечонл ослаблена трзЕСфорглашг злйнана э глгкссу а гдакр'^а^есЕаз ?i** чах дпг^Зя"*г^

(ИЛ.Копнлава, I3S4; Л.Сгэсс, L.Aitotamte et al. 1Э88; 2!аи Shensiarj;, 5!.'.IS63), язк гтздствао повыдеаяя порога чувства—

телтьноота лераферачосяах тканей .ч глвкозе гляконеогеяного генеза. Далее бадо установлено» что введение.аланана андуцирезало активность обоих ферментов з печена а норковом ^тоа аочех здоровых ярые (0,01>Р< 0,001). Еяовь активность ~^руктозо-1«6-ди$зсфатазы всегда была бодез высокой» чем глшазо-5-<5ссфатазн. Что касается подсаытзых нрнс, то аолучеяныз наги данные свидетагзтвувт о способности аданзна индуцировать в печена .енвотннх активность глззкозо-б-фосфагазы» хотя а в несколько меньшей степени. Аналогичная закономерность установлена наш а дая йруатозо-1,6-дафосфатазн. 3 корковом слое почек арке затравленных тетрахлоркетаяоа алгаан существенно не индуцировал .активность обоих ферментов '0,5-<?>0,2).

Ааалогзчяуз, в качеств енно»л стнсшеяаа, картину ш на б лед ала а после введения per os с помощью металлического зонда зивотным Ь-тарозаяа. Однако з количественном отнезенаа результата оказалась несколько анкма. Тан, дс-д влиянием тарозана у здоровых .тавотных уровень глгкозы в крова повышался менее значательно, чэа после праеш аданинг. 7 подопытных крыс зе увеличение содерааная глюкозы в крози оказалось в 1,15-1,20 раза менькз. чем. после ¿ведения алаяяаа» В то да вракз, по назпа даяани, тзроззз .усиливал гтронакэоззяаа гдгкезн -

б п-рафергчеекве ткавд. В самок дала, толерантность первферичес&шс ткане2 к глшоэе j здоровых животных была равна С,0? мкаль/л, а у подопытных {30, 60 , 90 дни опыта) соответственно 0,10; 0,14 и 0,24 .. кмзль/л. Это судестзенно меньше, чем после введения такгч животным аланкна. Кроме того, результата изучения активности ферментов глоко-неогеяеза через Ъ часа после введения крысгш тирозина доказала, что степень икдухциг обеих ферментов тирозгйок была ычъше, чем после введения алааиЕа. Несла введения р"- os здородым и подош..'ш«й хрисгц леЁДЕЕэ мы не неблвдадд у ндх «аккх-лгбо изменений в указанных параметрах углеводного о&меав, что согласуется о даннша литературы ( E.Ocet* et al./ 1982). "

8 доследушеи сдвиге углеводного д а ¡¿отпетого обмена у здоровых крцс.Е крыс с остри:: i: хронически« аора^енгеа печенн ггученк веки на- иоделд гер^уздруемоС веченд. Это, с одной стороны, дозволдло исключить ¡.а- сгочислеянь е нзгянкя целостного оргашама на сантеь глюкоз^ óe r.omci f е 0 дгг-toS стороны - в едедватыгх условиях, доучить сдзЕГЕ углеводного z азотдетого обмена, шчевккообразозэ-тельнуг д глЕконеоггннуг- дуккцид лечева у крыс, затравленных тетра-длоркгтгдод:. Нами укаковгеао, что в перфузируеетЁ аечеса адорокгх крыс дрот ¿¡дзет синтез глюкозы дз зядегеннзх неуглеводных

соеднн«знк£. Так,, если в педдркулнруешей жидкости гзначалхзс глекозе не определялась, то £ ICO инн пер^узгк её содернадне составило 55,20 - 1,76 iadí/100 из. Одновременно г перзузатг увеличивалась коЕцентрадЕЕ акылака, асчеЕКВв к глутамина. К конду оаыта содержание > зтех соединена состбеело соответственно 35,53 ¿ 1,48; 60,73 - 1,21 z 13,0 - О,SO ьа-й'./ЮЗ кд. йны*ш СЛ0Б31Ж, х.о вреая перфузии часть зндогбдкдх соединенна являлась предшественникам, с одной стероид, углеродного скелета глюкозе, в с - -конечных продуктов сзо~

тдетого обмена. Подобные наблвдендя хсрезо согласуется с данвддд: зарубегнше исследователей ( в. iré dtp, 197Э; J.C.Oottzs et el., 1930).

У подопытных крыс (100 kzz опыта) к 30 , 60 д SO лея»? гселедс- -енеея концентрация новообразованной глюкозд ь дероузате составляла соответственно 52,12 - 1,15; 47,?? ¿ 2,32 д 44,74 ~ I,5j uxú/IDQ ta, т.е. всегда оказывалась меньне (С,05>Р<0,001), чеь: у здорс-вдд дрдс. Ук.е эти даннне достоверно отражают подавление глпконеогенеза кек процесса з леченд крыс, затравленных тетрахлормзтенок. Бресте с тек у псдош-а'Еых- животных наблюдается усиленное, по сравнении со здороьыкЕ крысамд, образование емгжвка. Так, г. 100 iíi'e опита

содержание его в яерфузате этих крыс (30-90 дни) раваясось соответственно 51,02 - 3,4В; 78,09 £ 3,44 а 112,22 - 5,41 акМ/100 шс, '.при норме - 33,63 - 1,48 кгК/ЮО мя (0,05>Р<0,001). Урозень мочэ-вавы же у hex. в дер|узате оказывался, напротив, якже нор«а в 1,21,7 раза (0,02>В<-0,001). Обнзруженаое нама снаженае мочевгнообрь-зовандя несколько коглпевскровалось дзйыточнсй продукцией глутаглза - как одного ез факторов детокскквциг ашшааа, Есторай преЕшал воруу е 1,37-1,64 раза. Итак, нала впервые показано, что в печена у крыс с острый, хроническим гепатитом и циррозом печени ослаблеи синтез глвксзы лз эндогенных ооединендй. Причея, ■ это яесшгря на возрэстаяке катабояз.з»гз азстдстых соединений. Подученные ze ранее данные о сштеенЕИ аятдвноста .котчезкх йермзвтов глгегонеогевеза, воззолдют считать, что у лодошллых spue ослаблена трансформация углеродного скалета азотяеткх соединений в глюкозу. Иннжи олова®, у крыс, затравленных тзтрахлор&зтаЕом,развевается дгекоардянапш дгух тесно связанных в норме процессов - глкжовеогенеза а ио^енидо-образовавйя.

В дальне;5шег4, в енадогдчной последовательности, -ваш. кзучено влййнев физиологических концентраций трех амянокислот на измекеняя углеводного 2 азотистого обмена в перфузате яаченк здоровнх к подопытных крыс. Оказалось, что после введения ъ-алаздна у здоровых крыс в аерфузатг вз 76,2? возрос уровень новообразованно* гдтгагз, ¿год одновременном шленда ( г=-0,97) концентрации адаагва, которая Сказалась да 43,4%. Расчетные данные покззалн, что для синтеза I кг глюкозы у здоровых крыс рг подуется 7,51 ssr викноласлотн, I иг свободного акикзда образуется за счет - 0,572, глутаьЖЕа - 0,44^ ж . кочевдгн - 2,432 ашвегрулд, азрасходозанного в ходе яар^узяа ала-ненз. Зтд результаты согласуется с адялогнчнккз данкныа ■

(1979), v.Zaleati et al., (IS73), согласно лоторни скорость глаковеогенеза вредстазлнгт собой лнае£нуг> фунлшш воздгятргдкз аланана. Что каерзтея крыс с экспериментальным острым а хрэннчэскки гьдзтгтоа, а также хгррэзогл лечезл, то подобные ееследованна рзаве не проводились»

По нзеяй данным, через 30 дней посла затрззка ярые тетрвллор-метаном в перйузаруеио.? язчени у внх под влнязгеи аяанг-а к 100 kze опита глюкозы образовывалось за II,4% ккшзе, чек у соответствующей груши здорс-ssx ядвотных. Б зто2 группе гюЕЦЭнтрадпя аландна е I0D лен сгэгг щнзагась на 25tE%, а для синтеза I ит'глвкозк гепохь-зоволось 7,98 ггт израсходованного адандаа. . . .

Степень исследованных- наш биохимических сдвигов ещ| более увеличивалась, если крыс ззтраа.лвага тетрахлорыатаном в течение 60 и 90 дней. Так, ухе на 20 мин опыта концентрация глюкозы в пар-фузате печени крыс была соответственно в 1,73 и 2,19 раза низе, чем у здоровых зшвотных и а 1,39 и 1,74 раза ниже, чем у крыс, которым тетрахлорметан вводили в течение 30 дней. Подобная закономерность была прослежена ваш до конца опыта. Насколько медленее у этих двух серий крыс снижалась в лет^узате концентрация аланина; к конлу опыта ояа снизилась соответственно на 28,6 и 26,4«. В этих опытах I мг глюкозы образовывался за счет распада соответственно 6,12 и 6,35 мг израсходованного азганнна. Итак, у крыс с хроническим гепатитом и циррозом печена подавлена субстратная индукстя глюконеогенеза из неуглеводных соединений.

Далее оказалось, что у крыс с хроническим токсичаским гепатитом и циррозом уровень амшака в пер^узате печени превышал аналогичные данные здоровых крыс (20-1С0 кгн сш-та) соответственно в 1,13-1,48 м в 1,25-1,72 раза (Р<0,001). Полученные данные обратно коррелировали (Г =-0,81) со снижением конпэнтрацил мочааины в пер-фузате. Что касается глуташна, то его концентрация, напротив, возрастала в 1,67 и 2,14 раза, по сравнении со здоровыми животными. Расчеты показали, что у крыс к 60 и 90 днях опыта использовалось для образования свободного аммиака соответственно 0,67 и 0,ЕС%, мочевины - 2,04 а 1,69? и г^утамина - 0,30 и 1,43^ аминогрупп влаята, израсходованного в процессе пврфузиг. Если зта данные сравнить с результатами здоровых крыс» то окажется, что, действительно, у подспытаых животных в результате распада аланина повы-иается концентрация свободного аммиака, ослаг5ляется синтаз мочевины и возрастает обезвреживаний, ашшака в виде глуташна (рис. 2).

3 шслгдуыдем, в подобной направленности в опытах, ш изучили влияние тирозина на показатели углеводного я азотистого обмена у здоровых а подопытных крыс. Установлено, что у здоровых кры~ -тирозин стимулировал биосинтез глюкозы из эндогенных предзестзенникоз, однако, на 27,1-41,1% меаъша, чей аланин. При острой токсическом гепатита (30 дней) содержание глюкозы в перфуза-.е под влиянием тирозина изменялось аналогична со здороеыия .-гнаотныли. На 60 и 90 дни после затравка тетрахдосгдатаном гллкозы из тирозина образовывало« у ндх в 1,31 я 1,42 раза ыаяьше, чем у здоровых животных. Опасалось» что это связано с постепенным уманызанием исзэльзозания углзродзогв сяазвгз тирозина. В самом дала, ддя. синтеза аозообва-

содержание его в дерфузате этих крыс (30-90 дни) равняйтесь соответственно 51,02 - 3,4В; ?В,09 ± 3,44 и 112,22 ^ 5,41 икМ/ЮО т, '.яри норме - 35,63 - 1,48 мкК/ЮО лиг (0,05>Р<0,001)„ Уровень кочэ-ваны же у них в аерфузате оказывался, напротив, ниже нормы в 1,21,7 раза (0,02>Р< 0,001). Обнаруженное наш снижение мочевинообра-зоваяая несколько компенсировалось избыточной продукцией глутамана - как одного аз факторов детоксинацив аммиака, ксторый превышал норму в 1,37-1,64 раза. Итак, нами впервые доказано, что в печени у крыс с острым, хроническим гепатитом и циррозов лечеш ослаблен синтез гликозы из эндогенных соединений. Причем,-это несмотря на возрастание катаболизма азотистых соединений. Полученные ев ранее данные о снижении активногта ключевых ф'зрмзнтов гдзконеогеаезар позволяют считать, что у дэдодыаыых крыс ослаблена трансформация углеродного скелета азож-ткх соединении в глюкозу, йныки ояозами, у крыс, затравленных тетрахдориетаком, сазз"взется даскоордаяагия дгух тесно связанных в норме процессов - глклолеогенега а л?очекило-обра зовавая. Г■•

Б дальвзйием, е аналогичной последовательности, ваш изучено влияние фи экологических концентраций трех амавокаслст нн изменения углеводного а азотистого обмена в перфузате печеЕи здоровых и подопытных крыс. Оказалось, что после введения Х-азанина у здоровых крыс в дерфузате на 76,2? возрос уровень новообразованной глгжоза, йра одновременном дадеяаа. ( г =-0,97) концентрации аланава, которая снизалась на 43,4?. Расчетные данные докззала, что для синтеза I кг гзваоаы у здоровых крыс ргсходуется 7,51 ¡а еианодаслотн, I „ет свободного акавака образуется за счет - 0,57%, глутамана - а : .кочеваны - 2,43? аканогрупп, израсходованного з ходе аер^угна глэ~ ВЕна. Эта результаты согласуется с аналогичные даншгс! г.гг.ги (1979), ».ге.геп]г1 е^ &1М (1973),, согласно которой скорость глэконеогенеза представлягт собой линейную функции коядгятраакз еланана. Что кас?ется кркс с экспериментальным остром а хроническая гепатитом, а такге циррозом печена, то подобные асследоваэая ранее не проводилась.

По нзшам данным, через 30 дней после затравка крыс тетраалор-метанси в пер£узаруел;о5 сечена у них под влиянгеи 2яана.:а к 100 кан опыта глюкозы образовывалось на 11,4* тоньше, чек у соответствушей грушш здоровых глвотккх. 3 этой группе концентрация алзнана а 100 кан спзте снизалась на 25еБ%, а для синтеза I кг глэтозн использовалось 7,93 иг азрасходсгаплого аланааа.

Степень исследованных- наш биохимических сдвигов ещё' более увеличивалась, если крыс затравливали тетрахлорметакоа в тачение 60 и 90 дней. Так, уае на 20 мин опыта концентрация глниозы в пер-фузате печени крыс была соответственно в 1,73 а 2,19 раза ниже, чем у здоровых жиеотных и а 1,39 и 1,74 раза нижа, чем у крыс, которьш тетрахлорматан вводили в течение 30 дней. Подобная закономерность была прослежена ваш до конца опыта. Несколько мадленее у этих двух серий крыс снижалась в пе^узате концентрация аланина; к концу опыта она снизалась соответственно на 28,6 и 26,В этих опытах I мг ' глюкозы образовывался за счет распада соответственно 6,12 я 6,35 мг израсходованного аланина. Итак, у крыс с хроническим гепатитом и циррозом печени подавлена субстратная кндукгяя глюконеогенеза из неутлеводных соединений.

Далее оказалось, что у крыс с хроническим токсичэским гепатитом и циррозом уровень аммиака в персузате печени превызал аналогичные денные -здоровых крыс (20-100 мин сш'та) соответственно в 1,13-1,45 и в 1,25-1,72 раза (Р< 0,001). Полученные данные обратно коррелировали (г =-0,81) со снижением концзнтрации мочевины в пер-фузате. Что касается глутамияа, то его концентрация, напротив, возрастала в 1,67 а 2,14 раза, по сравнению со здоровыми животными. Расчеты показала, что у крыс к 60 и 90 дня», опыта использовалось для образования свободного аммиака соответственно 0,67 и 0,£-"?, мочевины - 2,04 и 1,69? и г^утамина - 0,90 а 1,43? аминогрупп азанива, израсходованного в процесса парфузиг. Если зти данные сравнить с результатами здоровых крыс, то окажется, что, действительно, у подсштаых животных в результате распада аланина по вы- , кается концентрация свободного аммиака, осда.1яяется сивтаз шчевины и возрастает обезвреживание, аммиака в виде глутадана (рис. 2).

В поелздувдем, в подобной направленности в опытах, ш изучили влияние тирозина на показатели углеводного-и азотистого обмена у здоровых а подопытных крыс. Установлено, что у здоровых кры^ -тирозин стимулировал биосинтез глюкозы из эндогенных предшественников, однако, на 27,1-41,1? меньаз, чем аданин. При остром токсическом гепатите (30 дней) содеряааие глюкозы в перфуза-.а под влиянием тирозина изменялось аналогична со здоровыми лиаотвыма. На 60 и 90 .дна посла затравки-тетрахлорыатавом глюкозы из тирозина образовывалось у нгх в 1,31 а 1,42 раза меньше, чел у здоровых ливотннх. Оказалось, что это связано с паст еденным, умеаызанивк использования углеродного скал эта тирозина. £ сашм дала, ддя. синтеза аоЕзобаа-

мкИ 100 мл

Рис. ¿. 1'зу.е«еня2 содержавкя.гяекозц (I, .5), аммиака и, 61, кочг-;кны чЗ, 7) к гдутамина (А, 5) под ь-екянийц аланкна (,5 Л) з перуузяруекоЗ печени здоровых крыс им) и крас с циррозом (50 .день азедения СС1^).

зояаяяоЗ глюкозы у здоровых а подопытных крыс (30, 60 я S0 дна) нсполь задалось соответственно 8,г7; '7,56; 7,3& и S,7L,¡ от общего количества тиразана, израсходованного а течение все& пзр$узЕД. /лак, тарозан оказался менее эффективные предшественников глюкозы, чей элазлн как у здоролых, так а пододытннх крыс д сто маре уеедд-чз.чая creaaaai тяжеста поражен?л печена тарозан хуже транофор.-лдро-зале я л глюкозу.

7 здороанх крыс взе^э.чле тарозана в перфузаг дргаода,тэ s E08?ra?Hzx) уровня аммиака, мечэвнаы г гдутамддз по сравяазз» с антзкт-гшмг ддаотнимя. У- подапнтнкх животных хе амаигка образовывалось s 1,24-1,56 раза болыа, чем в поеме. 2:лест с тем, у нас возрастало з 1,0-2,1 раза, содержание глутзмднз, тогда .-а:-: :.:очгз;;га образовывалось з 1,1-3-1,22 ръзз меньза, чем у ззсрод*гс ждаотаах. Доут^ля дозами, прнндядаально магабеллзм тирозина у крыс с острим а хро-аачесхы порз-кеназа печени ¿зало отлдчзетсл от ллаланз. йдяадо, в холачестззанэа отаосанаа аз тлрезааз 7 аах 'уне оару зошаалась глюкоза, балык появлялась сеоос.тнсгс зкмаака, катара м^-.ее raaso детоксипдрозался з заде аочезааи 7. тдутаета;

В налах опытах у здоровых к содоаатных крдо лзгцан б asp^y-заруешй азчени не трасфсрмиразялся а гдэкозу а не йэкйня! содер-га аде аимаака, ¿лчевины л глутя.\ана. • ?ажшд образом, злервыё проведанные нама дослал «алая ас-эззла,

что 'iva в ir- vitro ара-острых si хронических порзяанаях. аечеаи,-вызванных тетрахлорматааом у кр^с раз-чзаются глубокие нарушения углеводного, азотистого обмена» мочевинссбоазоззтельной я глхжонаогенноЗ функгхнй печени. У подопытных '.«явотйых уменьшается осдар.адале глекозн в крови, гликогена в печена, снижается толерантность' парафераческнх ткэнеХ к глюкозе "таконеогеиногс генеза. Прачем, имеется прямая корреляция между степень» пораятаия печени я аарунеанеи метаболизме- углеводов. Согласно катам данный расстройства углеводного обмена у крыс а токсическим гепатитен я етр"озсм связаны с. уменысанлем в печени у них актаааоота двух елячвю»х .$с-р-aesros глюгонзогенеза: глюкозс-б-чрооратазы а фауктозо-Г,6-дк$сс-£а-газк. Надо указать, что у пояоаатикх крис г.алоол^з значительно псцавдявтся активность фрухтозт-1,6-дкфос$атзза. В то мз время

ЭД^та» киряоьзго здка почек год дгДствдад: гекатсурсл-¿огс- аганта .<-.-: грвт^вввала каагс-дайо азаен<галй.

Результата гпучзаяя указанна;: показателей азотистого обмена сзгдатальствуят о той, что у крыс с ос-раи н хрояаадс.ч-дм поражений.*

печена быстрее и глубже нарушается обезвреживание а шлака в виде . мочезакы, но пе глутамина.

Наконец. в наших опытах наиболее эффективным субсчетом иядухцяа глшонеогенеза являлся аланян. Однако его действие всегда оказывалось слабее у к^ыс с острым, хроническим токсически« гепатитом и циррозом печена. Что касается тирозина, то он, помимо осеозеого участия в реакциях глэконеогенвза, снижал толерантность периферических тканей к глюкозе, в т.ч. глскокесгенного геяеза.

ВЫВОДЫ

1. Степень тяжести псраженяя мче"к крыс тетрахлораетано!: прямо корр елируе.т с ума вывеяна« содержания, глюкозы в крови, глляогенз в ясчеяи н довьшаниеы порога чувсткгг ельностг периферических i-кааеР ;; углеводам, е ток числе и к глюкозе г.шнонеэ-

геиного генеза.

2. Нзруийвие углеводного обмея.ч ( res?, гдаовеогенеза) у крыс с текслгтсокля гепатитом и циррозом лечена обусловлены

' снижением в печени, в 1,2-2,3 раза, активностей двух ключевых ферментов глекснеогенезз - глнжозо-б-фосфатазы и фруктсзо-1,5-дифосфатазы. Лрячеи авгиаировави'о фруктозс--1,о-дяфосфатазк всегда оказывается солеа значительны» (в среднем ка 10,5%), чек гликозо-G-фосфатазы. Под влиянием теграхлоркетана активность этжх ¿рериектов в корковом слое почек крыс не иаыенязгся.

3. При острых и хронических поражениях лечена глубокие изменения претерпевает азотистый оби.ев. У подопытных крыс в крови возрастает содержание ашгивка, глутеиияа и аргннилг, прл одно-вра«генвок снихенин уровня мочевины, орнатана и активности сывороточной аргиназы, что сввдетельс'жвуат о полавленак коче-винс-Зразозательнсй функции лечена и недостаточно! эффективности детоксикацяи ашиака в пиле чсчевта, яо не глутаиива.

4. У екестных с острым И хронических ясражениеа сечена глике.\з ~.е cigic кривые глвконеогениого геавза игеи? ддабетогенны£ характер. 7 полопнткых крыс алашш на 51.8-60,2%, а тирозин -на 37,3—Ei слабее трансформируется з глюкозу, чем в норме. Нагрузка аминокислотами отчетливо црочвляат скрытые нарушения азотистого метаболизма у подогштшл: крас.

5« Установлено, что в пвр&гзируеюй печена краг с токсическим гепзглхолг в. циррозом значит ялшо ослаблен сизтез глокозц из эазоганних неуглеводдых соеди№;:Яй, тогда как .распад

оздогенлых азотистых соединена® у них, напротив, усилен.

б. Нарушения гдвховеаген-за а мочевянообразоиняя у к рас с острим и хронжчесаам тораканаам печени отчетливо проявлялась доела введения в перфу-аониу» жвдзастъ адасана и тарозааа. 7 нях аминокислоты в Г,4 раза хуже превращаются в гллкс.ту, быстрее катабалазяруззт, а аммиак.недостаточно эффективно 0бгзвре.£зшается в виде конечных продуктов азотистого обмена. У подопытных крыс аланан э<$фохтшЕев, чем тирозин превращается в глхшозу 4s r.cvo . Лейцин не является преднестзенником глгаозы как у здоровых крыс, так г ярые с острил я хроническим'поражением печена.

' СПИСОК РАБОТ ООШЖйБАНШХ ПО TESE ДЙССЕРТАЩИ

1. Блинсв B.A., Хглкксв K.M. Роль тирозина и леацаза в синтезе новообразованной глакозы // Научные труды Москоесгой медицинской галдежи ам„ И.М.Сеченова а ученых Узбекистана "Проблемы морфологии и паразитологии". - Москва. - 1993. - С. 91.

2. ¿аланов K.M. Изменение некоторых показателей азотистого обмена у крыс с циррозом печени // Актуально вопросы теоретачаской

и клинической медицины: Тезисы докл. молодых ученых СамМИ.

- Самарканд. —1992. - С. '109.

3. Халикон K.M. Скорость гликонасгеназз е.« эндогеннях предшественников у крыс с токсическим поражением пзчека // Те^гса докл. научно! конференции аспарактов и клинических ординаторов СадШ. - Самарканд. - 1993. - С. 32.

4. Халикоз K.M. Некоторые особенности углеводного а азотистого обмена у крыс с циррозом печени. 3 об: "Проблемы биотехнологии, микробиология, авидеаиаяогии, врофилазтдки ла^еказоянюс заболеваний" ыЗидейяоЗ научной конференции ТааНШВС. - Ташкент.

- ISS3. - С. Пи.

Рацаоналазаторсзоа арвджшенае

I. Халаков K.'J. Модификация способа вызывания острых, хронических гел?тнтов а цирроза печени, у крнс // Удостоверение на рационализаторское предложение ä SIG от 27 января 1ЭЭЗ г., выдано БРИЗ СакШ.

КДСКАЧА ИЛйСА

.ЗКСПЕРУМША! ГЕПАТИТ ВА ЖИГАР ЦИРРОЗЙДА rjEr'.OHSGISiSS ж С'Л&ЯКШ БУШИ 1РШИ ЗА 7ЛШТИ АШИЖИСЛОТАЛА?

ÍPüAifflEA КОРРЕКцИЯСЙ

хсдпдоб к.к.

la vivo ва ¿a -vitrc шароитидз утказилгак »ажрибадар

шунп куриатдики, калааушэргз углерод гурт хлорид ССС!,) сбавил ёули билан ча^рилган уткир, сурункали гензтитдзр ва гитар гхрро-зида углевод, азот алмзаанузи, жигаркинг глаконеогек ва синдикчил ^ооил г(2лли зазнфзлари сезиларли дераняда издан чив;£ди. Тадриба каламуагзр зеннда глюкоза, жзгарида гликоген микдсри xaí-stizazzz, тукималарншг? глюконеогенагда х,оеил булган глскозага кзсбатан талерзятлигининг сусзйишшш к>рсатдп ва ужбу ^олатнинг яигср шикаетлакиши даракэсига кучли бсгликлкги аки!;ланди. Гыигтит ва . жигар циррози еа^ирид-'ан калакуииарда углевод алкашинуъгниЕГ курсатадгнв узгаримарига сабаб глшонеогенез гзраёнининг издан чиеданлигидир. Ушбу хулосагз глюкозанинг Je <rovо шароитиза хрсил булкшЕнинг икки асосий ферменти,- глюкозо-б-фосфатаза еэ фруктозо-1,в-дифосфатазалар актизлигияи урганкш йулп бклен келиндп. Аникландики, тетрахлорг*гтан билан захарланган кала^уплар жпгарндз увбу икки фермент активлиги сасаяди за 6у шароитдз фруктозе-!,6-" дифосфнтаза активлиги куч..ирок дасаяди- Еуйрак дустлок кисмидаги ферментларнинг активлиги эса, тетрахлорметян таьснрдда узгарядга . учрамагаялиги 1;айд этидди.

Азот алмаиинувинк урганис буйичэ бизнинг натижалар суки кур-сатдики, &игарк уткир ва сурункали шикаотланган каламупазрде аммиакнинг сейеекчил турида захароизланизи издан чикади ва сп-сш--чил синтези камагди. Ушбу хрлатда аммиакни захарснздончи иккинчи £уналиш, яъни глутаьзчн кислотаси-глутамин tk3Jü¿u кучли

■Бутун организм ва нигар иерфузияси тагриоахари шуни курсат-дики, учта аминокнслотадан (аланин, тирозин- лейиик) аланин глшонеогенез гзраёнининг энг жадал утмшсдойларидандир. Зиро:-;, китара уткир ва сурункали шикаотланган кала;.-гзлардэ соглоы калэ-мушларга висбатен аланиннинг глшозага айлакиии сусаяди. ELy билзн бирга, тирозин тукшаалгрнинг глскоззга нисбатан толерантлигини дасайтиршзи кузатилди.

Т7

' 3 V a E A-2. T

aa'C0Z;2C(53í3SIS AK3 'JR3AP0IBSXS 3X33aXUBZTXL HSPAKTIS AJTO LI71Í?. im-.H0SI3 Ü7D TESTS WITH. AJOTQACEDS

Khalikov K.lI.

I- vivo and in vitro sxperir-er.ta showed deep cfcangfis o* carbc-virata, nitrogenous metabolism, gluconeogenic and ureapoietic function c- ."liver in an acuta chronic to:cic iepatitia and liver cirrho-» JÍ3 induced in rats by (COL«./. Concentration oí blood glucosa, liver ¡¡-iyccgen •.■••srs reduced in erperiiental aniaals. Tolerance oí se-ri-hsric xiarrues to 3lnconeo;;3rtic glucosa dscrsised anddirsctly ■:3~?lsiad upun ti¿a decree oi liver inpaira&.ir. Ctazzsa of errbo¿y¿-rata i-.stGiolisn in ratj v?ith toxic hepatitis c,r.d liver cirrhc -ri.i rssulted because of slucorsoseneain 3Uoprss3ica and this fact is :rLznsr,.-.ec ".:y decreesins activity of two clue sazyaei! of glue 36 syn-chsaia de novo - jjlucose-i-p-ioachatase and rructoae-I.S-diphoapha-

Tiia .-soar rignificact suppres3ia? fructc3e-I.6-<iiphs?phr.tase activity observad in these experiments. At the saae ti»e the a"oov3-sentioned enzyaes in renal cortex layer oí rata under effect of t3tracilorr.ethane(;cX¿) hay« not been aignificwatly chancee?.

Our find inga or carbohydrate setabcUsa provide evidence ','ont is raca TTiti. acute and chronic liver impairment urea synthesis is sir^rificantly low and aamocia dttaxication is decreased in the fom of urea acid without glutacicB.

Bsperir.enta in. the whole organism said in perfused rat livor revealed alanine to be the Boat afficiant precursor of sluconeogens-sia aaon«; three aainoacida(alanine, ti.'osine, leucine).

nevertheless substrate induction of glucose synthesis de novo ia rats with acuta and chronic liver impairment- under, influence of *lanirs oc-urred leaa significant than In. noraal state. It ~raa also' íceu-^ñnted that tirosine in experimental rat3 had decreased tolerance peripheric tissue to glucone »a well as gluccneogsr.ssiE..

U j „¿V Cc2c::a?s.:a» XaswoB KJi. X.

ta