Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Состояние антиокислительной системы печени при холестазе на фоне хронического алкогольного отравления

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Состояние антиокислительной системы печени при холестазе на фоне хронического алкогольного отравления"

ЧЕЛЯБИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ!

На правах рукописи

л 1 О -V:

7 ГЕТТЕ

_ , Ирина #ёдорозна

УДК 612.331.I:61б.36-038.5:616.15:591.436

СОСТОЯНИЕ ЖГ;'ОКЙСЛЙТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ПЕЧЕНИ ПРИ ХОЛЕСТАЗЕ НА ^СПЕ ХРОНИЧЕСКОГО АЛКОГОЛЬНОГО ОТРАВЛЕНИЯ

03.00.04 - биологическая хи:-н*я

/ В Т О Р Е л Е Р А Т ц;'бсергации не соискание ученой з^спе".;! кандидата биологических наук

Челябинск, 1590 г.

. -Ч ч, ч

Работа ршотгнена в бяохишческом отделе WA'ßJ Свеоялэвско1 ^ельцинского институт?.

Н'чуин:-'" руководитель - иоктоо мв'тт'нскгх каук,профессор

ГЛСТОВ H.A.

Off и чп о .ть вы е оппоненту:

ног тор мецряяпскп* рачгк, поо-^ессоо ГРУ5Л5ВА Tî.ïï.

1TOKTOO t-re7ч;штнск.1х нчук, стзочк" ^учку? оотпулнпк ТСКАЧ: "

Be^yiçat» .^анпззипв - Хенинговяскк? го^тпопстввйВы1'* .унизвг

состоите В___»»со* __" _

н? зясеганвя Зпе'шэлпзгоовчнного уо"-ото го-етч R.V^.Oe.v

челябинского госупчостЭвННОГО "зл'гц^нокого '/hctutvt3

Sipe с: 45409?, Челябинск, ул. Ззоорокого,

С nnccr'?£iiî"eî! уо^но зэнак О'*"тьо? в (Чтбпяотз»^ Чзлрбчнск мел;'икнсгг)',,о института.

Уччнуй секретарь

Спепиа тткяиоо вз нного Совета К.М.Н., лопент

ПСРТНАЯ Л.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Высокая частота встречаемости холеста-за как осложнения заболеваний гепатобклипрясй системы и сочетание этой патологии в ряде случаев с хроническим воздействием эта. нола определяют актуальность темы диссертационной работы. Злоупотребление спиртными напитками л хронический алкоголизм остаются распространёнными явлениями. По данным разных авторов от 2 до 3% лиц общей популяции больны алкоголизмом, а k—7% составляю? группу патологического потребления этанола /Красик ¿.Д., Москвитин П.М., 1988;Booker P.M. е.а- , 1583/. У 2.3% больных хроническим алкоголизмом обнаруживают заболет ч печени и желч-нь:х путей / Ashley M.J. г 1"31/, нередко у таких больных развивается желтуха обструкционного типа /Логинов A.C. и соазт., 1987/. Хроническое употребление алкоголя мочгет оказывать влияние на острые воспалительные процессы, например, лолестаз, развивающийся при осложнённом теченаи распространённого заболевания - желчнокаменной болезни, при опухолях гепатосанкреодуоде-нальной зоны и других, и дающий высокую леталько; 'ь (до ЗО/0при хирургическом лечении /Bhansalis S.K» > 1985; Anüt-iarii т. е. а. » 1586/, Общеизвестным является гепатотоксическое действие как алкоголя /Никитин 1С.П. и соаьт., 1935/, так и холестаза /Коган A.C., Непомнящих H.A., 1987/. Согласно современным представления'!, од!:;;"; пенлг-ннх механизмов повреждения ткпнел является нарушение структуры и функций бмомембран - связанное с усилением п^рекисного окисления липидов (.НОЛ) и снижением янткокис-лительной защиты /Владимиров 1С.А., 1989; ching к* > chow I. , 197У/. Показатели ПОЛ, антиокислительнсй системы (.АОС) и функционального состояния печени привлекают внимание исследователей

в связи с изучением деструктивных процессов в мембранах гепат< тов- при различных гепатобилиарных заболеваниях /Копылова Т.Н., Майоре А,Я», 1979; Пеньков 1987/. Однако встречается ма-

лое число исоледоЕРЧ" й показателей ПОЛ-АОС при холестазе, а п] сочетании?? патология х-гадвксн исследования показателей ГЮj AOw •.• со.« •••• К'ЗмОр я нами в доступной литературе ке с-1пп;. жено. В овла»: с нижеизложенным представляется целссоойразны.1 изучение згогс звена патогенеза,

Цел:- работы - выявление в эксперименте влияния предиес■зу ющ« холестазу хронической алкогольной интоксикации на антиокислительную ак:явность и антиокисл ■■ 'явную защиту мембран эритроц; тов и клеток печени.

^Mälil исследования. I» Изучить состояние ПОЛ и АОС крови и печени в динамике острого хом -;таза, при хронической алкогольной интоксикации и при развитии острого холестаза на фоне хроь ческой алкогольной интоксикации, определяя'показатели ПОЛ - га роперекиси полк ненасыщенных жирных кислот (ГП) и малонозый диад ьдегид чМДА) и показатели АОС - активность каталазы (К), су-пероксиддисиутазы (СОД), глутатиимероксидазы (ГПО), глутаткон редуктазы (ГР), общее содержание гл/татиона чГ) и отношение сс держания его восстановленной формы к окисленной (Гв/То). 2, Оц нить функциональные резервные возможности ткани печени при ост ром холестазе, хронической алкогольной интоксикации и сочетанн патологии на основании определение вышеназванных показателей и активности гамма-глутамилтранспептидазы (ГШ) и лейцинами-нопептидазы (ЛАП). 3. Оценить повреждающее действие ПОЛ на мембраны эритроцитов и клеток печени по изменению общего содер жания фосфолипидов (0#Л), соотношения фракций фосфолипидов и а тивности фосфолипазы Ag (§Ag) п^и вышеназванных патологиях.

Выяеить наиболее информативные показатели для рекомендации определения их в клинике.

Научная новизна.¿первые в эксперименте проведено комплексное исследование при остром холестазе на фоне хронической алкогольной интоксикации динамики1 показателей ПОЛ и АОС, функциональных тестов печени, общего содержания и спектра фосфолипидов, а также актйьности фосфолипазы А^. Проведено сравнение: тех же показателей при сочетанной патологии относительно хронической алкогольной интоксикации и острого холостаза. Выявлены: I) активация всех исследованных ферментов аОС при усилении ПОЛ, наблюдавшиеся после трёхмесячной алкогольной интоксикации и сопровождающиеся увеличением актиг- :оти ГТП и .ЛАП в плазме крови, а также изменением состава фосфочипидов и активацией фосфолипазы А^; ¿Одисбаланс в системе ПОЛ-АОС, сопровождающийся дальнейшим повышением активности ГТП и ЛАП в плазме крови при комбинированном воздействие трёх факторов - алкогольной интоксикации, острого холестаза и раневого повреж ,эния при моделировании холестаза; 3) более высокая скорость утилизации гидроперекисей и более значительное накопление МДА -з крови при сочетанной. патологии по сравнению с холеста-зом; 4) бее; эффективная антиокислительная защита в печени, ющая место при сочетанной патологии по сравнению с холестазом в средние сроки после операций; 5) однонаправленные изменения фракционного состава фосфолипидов в опытных группах, достоверно не отличающиеся в этих группах; 6"! значительные отклонения от

уровня контроля с-чти *чс2ги ГГ'1 ; ' 4П при сочетанной патологии по сравнению .. преет.".'

Практическая ценность работы. Комплексное исследование показателей ПОЛ-АОС, (осфолипидного состава мембран и тестов не функциональное состояние печени выявило ранее неизвестные механизмы

адаптации организма, подвергавшегося хронической алкогольной v токсик.ации, к кратковременному воздействию острого холестаза, также начинающейся дезадаптации при переходе острой обтурации подосгрую. Результаты исследований могут бкть использованы в ч лии и хирургии для коррекции метаболических процессов, а так-i" для установления резервных возможностей антиочислительной заи^ Для оценки индивидуально для каждого больного тяжести состоянх могут быть предложены два наиболее информативных и независимых казателя - активность глутатионпероксидазы и ЛАП или отношение держания го> становленного глутатиона к окисленному и ЛАП в крс Долояениг., выдвигаемые на защиту. I. Трёхмесячная алкоголь^-интоксикация вызывает усиление ¡ЮЛ к компенсаторную активации АОС. Бал ¡.не процессов ГЮЛ-auc свидетельствует о наличии ре;и;рз ных возможностей антиокислительной защиты печени, но не предот ращает изменения состава мембран эритроцитов и клеток печени, также повышения активности функциональных печёночных тестов в плазме крогч. 2. Развитие острого холестаза после трёхмесячной алкогольной интоксикации сникает резервные функциональные возможности ткани печени по сравнению с алкогольной интоксикацией что сопровождается дальнейшим увеличением активности функциона ных тестов в плазме крови при сочетанной патологии. 3. Дисбала в системе ПОЛ-ADC при 3-5-суточной обтурации, отягощенной пред шествующей алкоголизацией, выражен в меньшей степени, чем при самом холестазе, за счёт активации ДОС в печени, при этом сост яние печени при сочетанной патологии в эти сроки оценивается к менее тяжёлое по сравнению с холестазом. 4. Защитное действие тивации АОС печени, вызванное предшествующей алкоголизацией, к ковременно, что в дальнейшем, при более значительном накоплена МДА в крови и истощении запасов восстановленной формы глутатиа

\

на, ухудшает прогноз сочетанной патологии по сравнению с холес-тазом.

Апробация и публикации. Основные положения диссертации доложены на научных сессиях Свердловского медицинского института /Свердловск, 1986,1987/, на областной медицинской конференции молодых учёных /Свердловск, 1988/, на заседаниях биохимического общества Свердловского медицинского института /Свердловск, 1987,1589/, на научно-практической конференции "Актуальные вопросы внедрения НИР в практику здравоохранения" /Тюмень, 1988/ и на III йсесоюз-ной конференции "Влоантиоксидант" /Москва, 1989/, Опубликовано 7 научных работ.

Внедрение результатов работы осуществлено в учебный процесс в Свердловском медицинском институте, предложенные методические рекомендации используются при изучении темы ""Биохимия алкоголизма".

Структура и объём диссертации. Диссертация представлена на 12У страницах машинописи, содержит 17 таблиц и 4 рисуька, состоит из введения, обзора литереауры, результатов исследования и их обсуждения, выводов и списка литературы (III отечественных и 127 зарубежных источников).

Эксперименты выполнены в биохимическом отделе ЦниЛ Свердловского мединститута, данные обсуждены с зав. биохимическим отделом ст.научным сотрудником, кандидатом медицинских наук Л.Т..Шмелёвой/ Статистическая обработка результатов проводилась на оазе крЯе^ры физики СГМИ при консультации .кандидата технических наук Л. Козина, я. также в отделе медкибернетихи ЦКЛД..

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. Опыты проведены на 205 белых беспородных крысах-самцах массой 220-380 г в осенне-зимний период,

животных содержали на обычном виварном рационе. Ьсех животных де лили на 5 экспериментальных групп.

1. Животные с хронической алкогольной интоксикацией (группа А).

2. Еизотные с острым холестаэом (группа X).

3. Животные <, .острым холестаэом на фоне хронической алкогольной интоксикации или сочетанная патология (группа ХА).

Ложнооперированные животные (группа Ji). 5. йнтактные животные (группа К).

Животным, подвергавшимся алкоголизации, внутрижелудочно вводили ЗС;4-ный раствор этанола из расчёта Зг/кг массы тела один раз в сутки в течение трёх месяцев. Эта доза в 3 раза превыаала биологическую норму потребления этанола - количество, метаболизирун-щееся по у^седнённым данным за 10 часов /Baum-Beiciisr с-Доза этанола для алкоголизации животных соответствовала среди--ij потреблению алкоголя взрослыми мужчинами, страдав илми хроническим алкоголизмом второй стадии с развившейся толерантностью,Г:' классификации заболевания, принятой многими авторами /Портнова A.A., Пятницкря И.Н., 1973; Мансуров Х.Х., 1976/. Часть алкого-лизированных и интактных животных подвергались операции для воспроизведения модели острого холеста'за по методике /Hut-terer" Гегеле- е°а« , 1973/. Острый холестаз моделировали наложением двух лигатур на желчный проток под эфирным наркозом и рассечением протока между ними. Животных забивали декапитацлей через б часов, 1,3,5,10 суток после операции. Контролем служили ложно-оперированные животные, которых забивали в те же сроки после лапаротомии.

В безбелковом'экстракте крови и печени определяли содержание ГП методом Романовой Л,А. и Стальной И.Д. /1977/ и МдА /Стальная И.Д., Гари^вили Т.Г., 1977/, а также содержание окисленного

и восстановленного глутатиона /Романова Л.А., Стальная И.Д.,1977 В гемолизатах цельной крови и гомогенатах печени определяли активность каталазы (Ш I.II.1.6) методом Баха A.M. и Зубков ой ѻР/1937/. ß гемолизатах эритроцитов и гомогенатах печени определяли активность СОД (Hi I.I5.I.I) методом / Beauchomp ch. ,

Priaovich J. , 1971/, ГГ10 (H§ 1.11.1.9) методом. Петровича Ю.П. и Подорокной Р.П./1981/ л Mills о. / /1959/ в модификации Шм левой Л.Т. /1983/, активность ГР (К§ 1.6.4.2) методом paglia i.

Yalc-ntinae "й-lij» > /1967/. В плазме крови к гомогенатах ткани определяли активность ГТП (К§ 2.3,2.1) по тест-наборам ЛАХЕМА (ЧССР), а также активность ЛАП (К? 3.4.II.I) по наоорам фирмы ФЕРМОГНОСТ (ГДР), В эритроцитах и печени определяли содержание фссфолипидов и .их фракционный состав методом Сергеева С.А. и со-авт. /1977/ и активность оссфолкпазы Ag (КФ 3.1.IА) методом Ту-жилина С»А., Салуэнья А.И. /1975/. При обработке полученных данных использовались, стандартные программы для микрокалькулятора "Электроника мК CI" и персонального компьютера ДВК-2!»!.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

После трёх месяцев алкогольной интоксикации наблюдается достоверное увеличение гидроперекисей и мДА и активация всех исследованных ферментов АОС в крови и печени опытнйх животных относительно контроля, при этом особенно высока активность ГПО в печени (табл. I). Активация всех исследованных ферментов АОС в нашем эксперименте является, вероятно, следствием состояния организма на начальных этапах алкоголизации, описанного в литературе как гиперметаболическое состояние /Кондратенко В.Г., 1980; Пятницкая H.H., 1988/. Баланс в системе ПОЛ-АОС после трёхмесячной алкогольной интоксикации позволяет предположить наличие резерв-

Показатели ПОЛ-АОС у интактнах животных. О'О и у животных с хронической алкогольной интоксикацией (А)

Показе

В к

1 и

МДА 0,34+0,04

ГП 33+3

к 14,6+2,2

СОД 138+22

ГПО 0,23+0,07

ГР 3,10+0,85

Г 0,75+0,08

Гв/Го • 10,8+2,5

:ОВИ

А

в печени ---т------

А •

61+4 ХЙ 29,4+2,0 х* 385+26 кх О,39+0,07 хх 6,80+1,09 * 0,84+0,09 7,1+1,2

0,73+0,04 | 1,43+0,07 х

55+3 | 102+8 к

1,59+0,22 3,20+0,42' х

110+13 | 334+31 *

0,17+0,05 | 2,03+0,53 а

~~ ! 3,8+0,9 I 7,5+1,4 а

5,63+0,21 } 6,65+0,23 к

11,2+1,5 \ 10,1+0,9 *

Примечание: различия с группой интактяых достоверны при а - • р-с0,05, ¡4» - р<0,01. Содержание МДА выражали в '10

-5

молг./я

крови и з .10" моль/г влажного веса печени; ГП в условных единицах экстинкции; К - в ммоль гем°глобина крови или бе, печени за минуту; СОД - в усл.ед./'г гемоглобина гемолизата эри роцитов или белка печени за минуту; ГПО - в ммоль ^О^/ггемогл' на гемолизата эритроцитов или гомогената печени \белка) за мин; ГР - в мкмоль НДД®Н/г гемоглобина гемолизата эритроцитов или б! ка гомогената печени за минуту; Г - в ммоль/л крови или в ммол: печени.

ных возможностей актиокислительной зациты в крови и печени животных в эти сроки. Наблюдается компенсаторное увеличение количества глутатиона в печени (табл. I), а отношение восстановленной формы глутатиона к окисленной уменьшается, что отражает потребность в -восстановленной форме глутатиона. Как видно из таблицы 2, несколько снижается урозень общих фосфолипидов и изменяется фракционный состав фосфолипидов эритроцитов и клеток печени у животных с хронической алкогольной интоксикацией, что,

функциональные тесты, активность фосфолипазы ^ и содержание фосфолипидов у интактных животных и в группе А

Показа-

В крови

В печени

тели И ! 1 И 1 • ' А

ГТП 23,64-3,4 ¡36,7+4,2 к 7,4+^,5 : . 4,5+р,-

ЛАП 32,7+5,1 ;86,5+2,5 3,^+0,6 9,3+1,1

ФА2 0,136+0,01 ;0,324+0,из тгХ 0,10+0,01 0,19+0,01 **

ОФЛ 2,53+0,11 | 2,05+0,06 Гт^г 28,0+0,9 19,7+1,2 **

ЛФЛ 10,1+0,8 !13,4+0,3. ** 11,1+0,7 13,1+0,5 к-

ФЭА 15,3+1,3 ¡14,0+0,6 ГСЛ ' 16,4+0,7 15,5+0,6

Примечание: активность ФА^ выражали в усл.еда/мг гемоглобина гемолизата эритроцитов или белка гомогената печени за чес; активность ГТП в икмоль пара-нитроанклина на литр плазмы или на грамм белка го:;огената печени за минуту; ЛАП - в мкмоль гидразина на литр плазмы кроги или грамм белка гомогената печени за минуту; ОФЛ - в мкмоль неорганического фосфора на ил эритроцитов или на грамм влажного веса печени; содержание лизофосфолнпидов (ДФЛ) и фосфатидилэтаноламина (С-ЗА) - в % от ОФЛ. Различия достоверны к- - при р<0,05 й при х* - р<0,01.

вероятно, связано с усилением свободнорадикалькых реакций и активацией ФА2. В составе фосфолипидов' эритроцитов и печени животных группы А накапливаются лкзоформц и уменьшается ссдержание йосфатидилотаноламина. Несмотря на.динамическое равновесие процессов ПОД-АОС, длительная алкоголизация приводит, вероятно, к определённым ♦нарушениям- структуру мембран ч изменениям ткани печен^, что подтверждается изменением спектра фосфолишлдов и.увеличением активности ГТП и- ЛАП в плазме крови опытных животных 'относительно контроля (табл.2). Активность ГТП в печени уменьшается к концу эксперимента, что, возможно, связано с ухудшени-

ем белоксинтетической функции печени у алкоголизированнах животных или с компенсаторным угнетением распада глутатиона. В пользу последнего предположения свидетельствует существенно возрастающая при тех же условиях активность ЛАП в печени животных. Таки1-: образом, полученные данные подтверждают известное положение о проокскдантном действии хронической алкогольной интоксикация /Копылова Т.Н., Майоре 1979/.

Данные о динамике показателей ПОЛ-АОС при остром холестазе на фоне хронического алкогольного отравления по сравнению с алкогольной интоксикацией представлены в таблицах 3,4. Развитие- хо-лестаза на фоне хронической алкогольной интоксикации сопровождается элиминацией гидроперекисей при накоплении МДА к 3-5 суткам после операции, но это не приводит к дальнейшему увеличению алтмности антиоккслительннх ферментов в крови и печен:, животных по сравнению с группой А. Тенденция при сочетанной патологии к уменьшению уровня показателей АОС относительно группы алкого-лизировечных животных характерна также для активности ФА^ и содержания глутатиока, при этом наблюдается глубокое снижение отношения Г в/Г о на 3-5 сутки в крови и печени (табл.3,4). У животных с острым холестазои, отягощенным хронической алкоголизацией, при сохраняющемся высоком уровне МЛА относительная "нормализация" активности ферментов АОС по сравнению с теми же показателями группы А является неблагоприятным признаком, свидетельствующим о нарушении баланса в системе ПОЛ-АОС, исчерпании компенсаторных возможностей ферментов АОС и снижении резервных возможностей антиокислительной защиты в крови и печени. .

Незначительные изменения фракционного состава фосфолипидов мембран при сочетанной патологии относительно тех же показателей группы А, вероятно, связаны с изменением активности ФА-,,

— ±с —

Таблица 3

Показатели в крови животных с острым холестазом на фоне хронической алкогольной интоксикации (ХА) и в группе А

Показа толп Л t f t 1 XA в разнче с роки 3c после операции

:бЧ Ic 5o 1С с

МЛ А Í267 Í290 263 273 467 257

ГП ¡185 ш ¡161 291»»"" 82 97 п п IC6 И Tt

К ! 201 ¡ 164 179**"" 152 ,.,, ИМ ЛГГ 86 mi 166

СОД 1279 ЛУГ ICO ti П 146»»"" 103 ti tt 122 .... 91 п и

гпо 1169 138 * 71 "" 37 23 148 *

ГР :2I9 55 68*»"" 48 58 66 н""

г 1112 83 94 53 91 99

Гз/Го г 65 22 M II 41 к 10 И II re те 0 67

гтп ¡156 229 a 162»» 141 296 375

ЛАП i 264 j 314 334*54"" 299 273 »» 247

ФА g í 233 i KX j 167 .... и 7T fT 204»» 124 II II 185 »» 157

O'áJí ! 81 1Í% 1 81 91 " 96 II 11 94 92 II

ЛфЛ i 133 i XX J III и ii 123 126 » 123 130 »»

§ЭА ; 73 ** í 85 и 76 * 74 ** 81 77

Примечание: все показатели даны в % от уровня контроля, различия с группой Я достоверны при * - р<0,05, к* - р<0,01; различия в группах А/ХА достоверны при " - р<0,05 и "" - р<0,01.

динамика которой соответствует динамике антиоксидантных ферментов (табл. 3,4). Здесь, вероятно, проявляется двойственное действие- фосфолипазы как фактора, усиливающего ПОЛ при освобождении свободных жирных кислот, проявляющих детергентные свойства и способствующих дальнейшему разрушению мембран, и как фактора, содействующего адаптации мембран к повреждающему действию ПОЛ путём освобождения мембран от продуктов переокислекия / Jan

Показатели в печени животных с острым холестазом на фоне хрс нической алкогольной-интоксикации (ХА) к в группе А

Показа-j А J_ХА в разные сроки после операции

тели г 1 6ч 1с Зс 5с Юс

мДА 183»* 200** 153хх" 212**"" 206**"" 191*5*

ГП !' 186** 102 "" 191** 98 "" 78 "" 98 ''

к [ 201* j 156**" 150**" 150**"" 181** 156**

сод ■ I 305**1 158**"" 92 »» 138* "" 115 "" 123 '

г по 1230** 520** 1347** 395**."" 465**"" 245**

ГР 197**! 89 "" 63*"" 53**"" 63**"" 74

Г ! 118** 95 " 99 86 "" 78*"" 93

Гв /Го 90 57*" 60 " 49*"" 43**"" 65

ГТ11 61** "» 91 "" 28*^"" 92 ч» 97

ЛАП 291** 298** 378**"" 334** 222** 312»

А^ 190** 158* 174** 135*"" 163* 155

01Л 70**; 54**"" 60** 59** 61** 62;.

ЛФЛ ! П8* ! ГЗб*"" 123* 115 114 116

Ф ЗА ■ 1 95 83**" 93 93 90 86*

Примечание то же, что для таблицы 3.

Б.Heek, Checä.ore р. ГагааЫ f 1968/ Ь группе с сочета п£?юлогией дисбаланс процессов ПОЛ-АЭС; возможно, усугубляет менения в пичрнп, о чём свидетельствует увеличение актизност ГТИ ч Л Ml б плазме крови г.о отношению к тем *е показателям г пы Л в'некоторые срок./, после операции (табл. 3). Кстощение к пексаторных возможностей АОС происходит, вероятно, в результ комбинированного действия трёх факторов: хронической алкогол ной интоксикации, острого холестаза и раневого повреждения.

Раневое повреждение в результате лапаротомии в нашем эксперт и— те приводило к увеличению содержания гидроперекисей в крови печени, бистро метаболизирующихся, МДА при это>: к 10 суткам после операции не никалх/в.сгся* выявлены тек.!е кез&Уштельв возрастание активности Зернен 1-ов АОС на 3-5 сутки после ло-;.к опзиацни и некоторые отклонения от уровня контроля ГТ11, Л/а1,(г и состава фосфолилидов, однонаправленные с изменения/и тех .л показателей в других опытных группах. К 10 суткам после опер:' ции почти все исследованные показатели з крози и печени ложно оперированных животных нормализуются. Это позволяет сделать г-— ключение о прооксидантном действии самого холестаза.

а литературе имеются сведения о высокой антиокислительной а.— тивностп и высокой активности ГПО, катал азы, ГР в ранние и лод-ние сроки и резком снижении згих параметров на 3-5 сутки холестаза /Пеньков Л.П., 1557/. По данным того же автора низкий уровень АОС и повыиепле активности ГШ и ЛЛЯ в плазме крози в динамике острого холестаза сопровождались иатоморфологическим,: изменениями стро.-ш и паренхимы печени. Нами показаны фазность изменений активности СОД к выявлены отклонения от уровня контроля общего количества фосфслипидоз и их фракций в' эритроцитах и. печени животных при остром холестазе. Высокое содержание МДА при резком снижении антиокислительной защиты является причиной ярко выраженного дисбаланса на 3-5 сутки обтурации.

Данные о сравнении изменений показателей при холестазе и, со-четанной патологии представлены в таблицах 5,6. Развитие острого холестаза на фоне хронической алкогольной интоксикации приводит к ускоренной элиминация гидроперекисей в крови, более быстрой, чем при холестазе. При этом на 5-10 сутки в крови животных группы ХА накапливается МдД достоверно больше, чем при

Таблица 5

Показатели в крови у животных с острым холестазом (X) по сравнении с показателями группы ХА

Показа-} Групп^_Сроки после операции

тели ! бч 1с Зс 5с Юс

МДА { X А | 290 263 273 467 257

Х ! 146++ 153++ 167++ 200++ 200++

гп | ХА 1 161 291 82 97 106

! X 261+ 246- 303++ 240++ 191+

к ! ХА 164 179 152 86 166

1 х 145 127+ 84++ 183++ 127

сод | ХА Юи 146 103 122 91

X 214++ 221 86 79++ 166

г по ХА 138 71 37 23 148

X 192 167 63 ПО 217

ГР ХА 1 55 68 48 58 66

X ! 109 143 46 57 64

г ХА : 83 94 . 53 91 99

X 47+ 67 36 71+ 81

Гв/Гс ХА 22 41 10 8 67

х 28 14+ 12 28++ 24

ФА2 ХА 167 204 124 185 157

X III ■¿¿'{ 162 194 193

гтп ХА 230 162 141 296 375 ■

X 161 193 264++ 428 541+

м ХА 314 364 299 273 247

X 580++ '735++ 601++ 316 243 .

05Л ХА 1 х. ! 81 9Г '96 ' 94 92

71 57++ 70++ 76 124++

Л'М ХА III 123 126 123 130

■ X 132 131 137 • 124 127

?ЗА ! ;:А 85 76 74 61' 77

1 х : 70 78 79 77 33

Примечание: все значения даны в % к контролю, различия в труп пах достоверны при + - р<0,05, ++ - р-с0,01.

Таблица б

Показатели в печени у животных с острым холестазом (X) по

сравнению с показателями группы ХА Показа-1 Группа}______Сроки_после операции_______

те л и | | бч 1с Зс 5с ГО с

МД А ! ХА 1 200 153 212 206 ГЛ

! V ( 765 169 + 182 186 155

ГП I ХА ] 102 191 93 78 93

г г X ! 165 124 125 135 157

к ; ХА ; 156 150 150 181 • 156

X • 165 170 74++ 144 232

СОД ХА ! 158 92 138 115 123

1 X | 159 233 61++ 129 266++

ГПО I ХА 1520 1347- 395 465 245

» X 154++ 379++ 54+ + 174++ 267

ГР X А 63 53 63 (4

I X 89 205++ 84 71 150+

г> ; ' ХА 95 99 85 78 93

X 106 106 20++ 95+ 79 +

Г в/Го Г ХА 57 60 49 43 65

1 X 71 55 28 69+ , 71

ФАо : ХА :153 174 135 163 155

X 57 197 92 209 210

гти ; ХА 93 90 28 92 97

» X 59 34++ 39 51++ 69

ЛАП : ХА 298 378 334 222 312

1 ! X 403 381 369 505++ 308 •

ОТ-Л { ХА 1 54. 60 59 61 62

' I X ! 68 . 43++ 65 49+ 51

ЛФД 1 ХА | 136 123 115 114 116

Г » г х I 109 116 - 122 112 • 121

ФЭА 1 ХА ; 83 . 93 93 90 86

х \ 97++ 88 89 97 92

Примечание то же , что для таблицы 5 •

остром холестазе. Коэффициенты парной линейной корреляции д ГП и МДА в крови и печени больше по абсолютной величине в г пе с сочетанной патологией, чем в группе с холестазом, и ра -0,53 и -0,95, что свидетельствует о почти функциональной з симости накопления МДА в печени при элиминации гидроперекис в крови и печени в группе ХА_

Как видно из таблицы б, в группе с холестазом на фоне хро1 ческой алкогольной интоксикации имеет место не такое глубок! снижение активности антиокислительных показателей на 3-5 су, после операции, как при холестазе в эти же сроки. Было сделг предположение о том, что предшествующая острому холестазу ш голизация активирует ферменты АОС (в том числе каталазу пече участгупуую в элиминации этанола, и ГПО печени), в результат чего предотвращается резкое снижение антиокишш^елькой зеидит на 3-5 сутки после операции. Изменения общего содержания глу тахиона в печени и фосфолипидов, а также динамика активности ГТП и ЛАП в плазме крови подтверадаэт предположение о з&ситн действии активированной алкогольной интоксикацией АСС печени (табл. 5,6). В печени отклонения от уровня контроля активнее ГТП и ЛАП также больше в группе с холестазом (табл. 6). При лестазе и сочетанной патологии отмечается уменьшение активно ти ГТП в печени, тогда ка'с активность ЛАП в печени возрастае Особенно эти изучения ечч з среднее сроки после опера^:

Значкишио с. «'■кти.эность Г"1П в печени'в те сроки, логд.

умгае^ся ур:хеьъ ь'осс^ансвлепнс'оти х-л^татиона и зосстаног. ние окисленного глу тати она в глутатионреду'ктазной реакции, ч' предположительно может' быть связано с регуляцией обмена глут; тиона. Исключительно высокая активность ГПО при сочетанной ш тологии, определяющая более высокую антиокислительную защиту

сравнению с холестазом, поддерживается, по-видимому, не при участии глутатиона, восстановленного глутатионредуктазой, а за счёт имеющегося количества глутатиона или торможения его распада.

Изменения состава фосфолипидов при холестазе и холестазе, отягощенном длительной алкогольной интоксикацией, происходят в том же направлении, что и при хронической алкогольной интоксикации: наблюдается накопление лизофосфолипидов, уменьшение доли фос^атидилэтаноламина в некоторые сроки после операции. Достоверных различий между этими показателями в одинаковые сроки в этих группах не обнаружено, что, возможно, связано с динамикой ФА^. Изменения активности стого фермента также достоверно не отличаются при холестазе и сочстанной патологии.

При увеличения срокоз обтур-щкн активность аитиокислительных показателей, ЛАП и уровень обь^'х фосфолипидов з группе с холестазом приближаются к значениям тех же параметров при сочетенной патологии, а в некоторых случаях отклонения от нормы показателей в этой группе становятся больше, чем при холестазе. Таким образом, динамика показателей при холестазе и отягощенном предлест-вующей алкоголизацией холестазе олизка, при этом некоторые данные и'ПО,СОД, каталаза в печени, содержание оощих фосфолипидов) подтверждают предположение о менее значительном влиянии отяно-щённого алкогольной интоксикацией холестаза на состояние АОС по сравнению с самим холестазом. Другие показатели (ГР) этого положения не подтверждают.

Для окончательного решения вопроса о влиянии предшествующей • холестазу хронической алкогольной интоксикации на антиокислительную систему в крови и печени была проведена оценка тяжести состояния организма по наиболее информативным и независимым параметрам (Кульбак С., 1567; Славин М.Б., 1989/. Из 14 иссле-

дованных параметров наибольшую величину информативности и ш кие коэффициенты корреляции с остальными параметрами имеют ] в крови и ГПО в крови или ЛАП и отношение содержания восста£ ленного глутатиона к окисленному в кровк. По двум последним метрам была подсчитана величина Т - тяжести состояния орган! связанная с удалением наиболее инфорйативкых и независимых г метров от уровня контроля и позволяющая количественно оцениа пекь выраженности патологии. Значения Т представлены в табл!-

Таблица 7

Величины Г - тяжести состояния по двум параметрам

Группа А ! ХА 1 X

•6ч 1с Зс 5с Юс | 6ч 1с Зс 5с

Т 2,0| 2,7 5,5 2,6 2,3 1,8 | 6,1 7,3 6,2 2,/

По данным таблицы 7 можно сделать вывод о том, что активации АОС, вызванная предшествующей холестазу мэокической алкогол! ной интоксикацией, уменьшает глубину пат1 ^.огическ/.х изменен* в ранние сроки ходестаза. временное защитное действие актнвк роЕанной предшествующей алкоголизацией А0С прекращается в бс лее поздние сроки после операции.

Таким образом, комплексное исследование показателей ПОЛ-АС фосфолипидного состава мембран эритроцитов и клеток печени и тестов на функциональное состояние печени выявило механизмы адепт;1'.:ли организма, подвергавшегося хронической '*яхогаь -му, интоксикации, к острому хслестазу, а а ....же кйч'-'.'южДоя лелг тьции при переходе острой обтурации в подострую.

ВЫВОДЫ

I. Трёхмесячная алкогольная интоксикация вызывает усиление Г и компенсаторную активацию ферментов АОС, что свидетельствуй

_ cíJ

наличии резервных возможностей актиок мительной защиты в этой группе.

■I. Баланс в системе íiOJi-AOC при хроник. .кой алкогольной интоксикации неустойчив, так как не прздот!-> . «т накопления продуктов II ./. л изменения спектра фос*сли.':,:доэ - бр.ж, что cor ^ "-.юядает-ся увеличением активности ' .'• ; j ■ дз:*в кроза. j. Развитие холесгаич ¡шел«, тр--¡ алкогольной интоксикации приводит к д/.соал^нсу р системе ПО,. -АОС -л снижает резервные функциональные возможности ткали п; генл по сравнению с хронической алкогольной лнтокснкацпей. 2т: изменения сопровождаются д - *:.нейаи:/ увеличением алтпзностч ГТП х Л/Л э плазме чрози животных с сочзтелиой патологией по сравнению с хронической алкогольной интоксикацией»

t. Холестаз и сочетаннал патология харалтеризуютоя г. »нами изменениями антиокяслитзльных показателей и активности фоофолн-

5. Дисбаланс в системе ИСЛ-АОС при- 3-5-суточной обт/рации, отя-гоц' иной предаествувщей алкоголизацией, выражен в меныпэй. степени чем при самом холестазе, за счёт активации ГПО, СОД и ка. та,-азу в печени, более высокого содержания глутатиона;. при этом

состояние печени при холестазе в эти ср'жи оценивается как более тяжёлое по сравнению с сочетанной патологией.

6. Защитное действие активации АОС, вызванное предшествующей хо-лестазу алкоголизацией, кратковременно, что, при более значительном накоплении МДА в крови и истощении запасов восстановленного глутатиона, ухудшает прогноз сочетанной патологии по сравнению с холестазом.

7. Наиболее информативными показателями для оценки тяжести состояния при холестазе и сочетанной патологии являются, активность

лейцинаминопептидазы ъ плазме крови и глутатионпероксидазы эритроцитах или первый показатель и отношение восстановлена глутатиона к окисленному в крови.

СПИСОК Р1Б0Т, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТКМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I. Гетте И.§, Антиокси.дантная система крови и печени белых при хронической алкогольной интоксикации/'/Фундаиектальные и прикладные научные исследования практическому здравосхранен Тез.докл. годичной научной сессии медицинского института. -Свердловск, IS87, С. с0-69.

¿. Лисиенко Ü.M., Пмелг-за Л.Т., Пеньков Д.п., Гетте И.©. Ха теристика ферментативны" процессов в крови и печени при обт рационной желтухе в эксперименте// Клиническая хирургия. -1957- 9,- С. 31-32.

3. Гетте М.Ф., Глотов H.A. Некоторые показатели лерекисного ления лкпидов и антиокисли^ельной системы кровк и печени бе дых крыс при остром хояест-зе ка фоне хронического алкоголь отравления// Антиоксидонтные скотомы организма при оксперим тальнон и клинической п-'. • '•чогии: Сб. науч. трупов.- Свердлов 19Ь7. С. I2I-I27.

4. Гетте И.Ф., оорсиилин С.И. Показатели перекисного окисле] ли'тидов v антиоклслительной системы при хронической аякогол ной интоксикации как дифференциально-диагностические тесты/у Актуальные -вопросы внедрения научнс-иссл'• тльсю*¡с ребог в практику здравоохранения: Тез.докл. региональной научно-практической конференции. - Тюмень, 1988. С. 14-16.

5. Гетте И.ф. .Роль глутатконового звени в антиоксидантнсй Sc те при хроническом алкогольном отравлении в эксперименте//