Роль АТФ и пуринорецепторов в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

Зверев, Алексей Анатольевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль АТФ и пуринорецепторов в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Роль АТФ и пуринорецепторов в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе"

На правах рукописи

ЗВЕРЕВ АЛЕКСЕЙ АНАТОЛЬЕВИЧ

правах рукоп

^ггГТ), ии^45244Э

РОЛЬ АТФ И ПУРИНОРЕЦЕПТОРОВ В СОКРАТИМОСТИ МИОКАРДА КРЫС В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ.

03 00.13-физиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 о

Казань-2008

003452449

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет».

Научный руководитель - кандидат биологических наук, доцент

Аникина Татьяна Андреевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Азин Александр Леонидович

доктор биологических наук, профессор

Нигматуллина Разина Рамазаиовна

Ведущая организация - ГОУ ВПО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова» (г. Москва)

Защита состоится «1 2008 г. в » часов на заседании диссертационного

Совета Д 212.078.02 при ГОУ'ВПО «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет» по адресу: 420021, г. Казань, ул. Татарстана, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет» по адресу: 420021, г. Казань, ул. Татарстана, 2.

Автореферат разослан «2& » РЛЦЯ'Ш^^

2008 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета доктор медицинских наук, профессор Т.Л. Зефиров

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования

За последнее время накопилось много данных о том, что АТФ кроме внутриклеточной роли макроэргического соединения, может принимать участие в межклеточной передаче сигналов, где выступает в качестве трансмиттера или котрансмиттера (Burnstock G, 1983,1989, 2006; Ralevic V., Burnstock G.( 1991). Сейчас является совершенно очевидным, что физиологическое значение пуринов не ограничивается их непосредственным участием во внутриклеточных процессах. Не менее важным является способность АТФ модулировать и регулировать многие жизненно - важные процессы в клетке посредством влияния на различные рецепторы (Гиниатуллин P.A. 1998; Зиганшин А.У. и др., 1999; Шакирзянова 2005; Pelleg А. 1997, McQueen D.S. 1998; Silhnsky Е.М. 2000).

Неослабевающий интерес к изучению влияния АТФ на деятельность сердечно -сосудистой системы и сердца в частности основывается на различных, нередко противоположных результатах, полученных разными исследователями в экспериментах как m vivo, так и in vitro Исследования Hollander P.B. (1996), Vassort G. (2001) показали, что АТФ оказывает дозозависимый эффект и в небольших дозах вызывает кратковременную тахикардию, а высоких замедляет работу сердца, вызывая атриовешрикулярный блок. При использовании метода перфузии изолированного сердца по Лангендорфу, действие АТФ вызывает ускорение сердечного ритма (R. Takikawa, 1990)

Применение АТФ при заболеваниях сердечно-сосудистой системы связывали с продуктом его гидролиза аденозином, который вызывает гипотензивное, отрицательное хронотропное и инотроппое действие (Елисеев В. 2001; Burnstock G. 1983; Neumann J, Meissner A., et al. 1999). На сегодняшней день известно, что АТФ и без распада до аденозина влияет на собственные Р2-рецепторы оказывая хронотропные, инотропные и аригмогенные эффекты на сердце. В настоящее время появился целый ряд исследований, посвященных влиянию АТФ и его производных на сердечно - сосудистую систему (Ralevic V. et al., 1998; Vassort G., 2001; Burnstock G., 2006, и др.).

Первые предположения о модулирующей роли АТФ в холинергической передаче в сердце было высказано Турпаевым Т.М. (1965г). Более поздние исследования подтвердили, что чувствительность холинорецепторов может регулироваться экзогенным АТФ (McQueen, 1998)

Онтогенетический аспект пуринергической регуляции сердца практически не изучен, и рассматривался только на взрослых организмах и в период их неонатального развития (Browse, 2003). Можно предположить, что модулирующие влияния АТФ па эффекты основных медиаторов определяются созреванием центральных, эфферентных симпатических и парасимпатических регуляторных влияний на сердце, его рецепторным аппаратом, т е зависят от этапов биологического созревания организма.

Наличие синтезированных в последнее время агонистов и антагонистов рецепторов АТФ дают возможность более детального исследования влияния АТФ и его производных на сократимость миокарда, одну из основных функций сердца в раннем посгнаталыюм онтогенезе.

Цели и задачи исследования

Целью исследования является изучение прямого и модулирующего влияния АТФ и его аналогов на сократимость миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе. В соответствии с этой целью были сформулированы следующие задачи:

1. Изучить влияние АТФ и его стойкого аналога - 2-метилтио-АТФ разной концентрации на сократимость миокарда крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста.

2. Определить влияние 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда на фоне блокады Р2Х -и Р2У-рецепторов.

3. Изучить влияние селективного агониста Р2Х1-пуринорецепторов Р, у-метиленАТФ на сократимость миокарда крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста

4. Определить влияние р, ?-метиленАТФ на сократимость миокарда на фоне блокады P2Xi-, Р2Х3-, Р2Х2з-рецепгоров TNP-ATP.

5. Исследовать модулирующее влияние 2-метилтио-АТФ на эффекты карбахолина в сократимости миокарда крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста

Основные положения, выносимые на защиту

1. Увеличение сократимости миокарда АТФ и его аналогами связано с активацией Р2Х-пуринорецепторов имеющих выраженные возрастные особенности.

2. АТФ модулирует холинергическую регуляцию сократимости миокарда разнонаправлено на разных этапах раннего постнатального онтогенеза крыс.

Научная иовизпа

В настоящем исследовании впервые установлено, что у крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста АТФ и его производные вызывают положительный инотропный эффект в разных концентрациях. Стойкий аналог АТФ - 2-метилтио-АТФ, селективный агонист P2Xi-рецепторов - р, у-метиленАТФ оказывают дозозависимое увеличение сократимости

предсердий и желудочков у 14-100-суточных крыс. Впервые установлено, что чувствительность Р2Х-рецепторов миокарда к АТФ и его производным, снижается в постнатальном онтогенезе. Использование селективных блокаторов Р2Х - и Р2У-рецепторов позволило определить семейство пуринорецепторов, участвующих в положительном инотропном эффекте на 2-метилтио-АТФ. Применение селективного агониста и блокатора Р2Х-пуринорецепторов доказало, что в положительном инотропном эффекте принимают участие Р2Х|- рецепторы. Впервые показано, что функциональная активность Р2Х-пурипорецепторов на разных этапах онтогенеза различна и от 14- к 100-суточному возрасту в предсердиях снижается, а в желудочках возрастает.

Совместное действие агонистов Р2-рецепторов 2-метилтио-АТФ и М2-холинорецепгоров карбахолина на сократимость миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе показало, что активация Р2-рецепторов может усиливать или ослаблять эффекты карбахолина в зависимости от возраста животных. У 14-суточных крыс 2-метилтио-АТФ усиливает угнетающий эффект карбахолина, а у 21-суточных крысят активация Р2-рецепторов снижает отрицательный эффект карбахолина на сократимость миокарда. Активация^ М2-холшюрецепторов ингибирует инотропный эффект пурина во всех возрастных группах.

Паучно - практическая значимость Полученные данные расширяют представление о роли пуринергических соединений в инотропной деятельности крыс в онтогенезе. Результаты проведенного исследования позволяют по - новому взглянуть на роль АТФ в качестве нейромодулятора сердечной деятельности на разных этапах раннего поспнатального онтогенеза крыс. Изученные нами возрастные особенности чувствительности Р2Х-рецепторов сердца крыс могут представлять интерес для фармакологов Материал исследований заслуживает внимания со стороны специалистов по возрастной и нормальной физиологии, педиатрической фармакологии и кардиологии.

Апробация работы

Материалы исследований доложены на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава, молодых ученых и специалистов Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (2005-2008); па 8 Всероссийском научном симпозиуме «Растущий организм: адаптация к физической и умственной нагрузке» (Казань, 2006); на XX съезде Физиологического Общества им. И. П. Павлова (2007); на школе-конференции по физиологии кровообращения ФФМ МГУ имени М.В. Ломоносова (Москва, 2008); на VI Сибирском физиологическом съезде (Барнаул 2008), на 9 Всероссийской научно-теоретической конференции «Физиологические механизмы адаптации растущего организма»

(Казань 2008); на заседаниях кафедры анатомии и физиологии Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (Казань, 2005-2008).

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания организации и методов юследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 141 страницах машинописного текста, содержит 19 рисунков и 33 таблицы. Список литературы включает 235 работ, из них 175 иностранных авторов

Список используемых сокращений

АХ - ацетилхолин, АТФ - аденозин 5Чрифосфорная кислота, исх - исходное значение показателя, КХ- карбахолин, М - моль, мл - миллилитр, мин - минута, рис. - рисунок, с -секунда, сут.-сутки, табл. - таблица, п - количество животных, PPADS - пиридоксальфосфат-6-азофенил-2'4'-дисульфоновая кислота, Rb-2- реактив голубого-2, TNP-ATP-(2',3'-o-(2, 4, 6-тринлрофенил) аденозин-5'-трифосфат, 2-м-АТФ-2-метилтио-аденозин 5'-трифосфорная кисгота

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследования проводили на 568 разнополых лабораторных беспородных белых крысах. Исследовали 4 возрастные группы животных: 14-, 21-, 56-, и 100-суточного возраста. В качестве наркоза использовали 25% раствор уретана из расчета 1,2 г/кг массы животного, котарый вводился внутрибрюшинно. Сократительную активность миокарда в эксперименте in vitro изучали на полосках правого предсердия и правого желудочка на установке "PowerLab" ("Annstruments") с датчиком силы "MLT 050/D" ("ADInstruments"). Определение реакции сокращтельной функции миокарда на действие агонистов проводили в трех последовательно возрастающих концентрациях. Полоски стимулировали через платиновые электроды. Запись кривой регистрировали на персональном компьютере при помощи программного обеспечения "Chart 5 Г.

Расчитывали абсолютные значения силы изометрического сокращения в граммах и общую длительность сокращения полосок миокарда предсердий и желудочков в секундах, а также оценивали изменения на влияние агониста в процентах от исходных показателей. Исходные значения сокращения принимали за 100%.

Результаты представлены в таблицах в абсолютных и относительных значениях Достоверность различий проводили с использованием непараметрического парного и непарного t-кратерия Стьюдента (* - р<0,05, ** - р<0,01).

В экспериментах использовали следующие вещества - аденозинтрифосфорная кислота (ATФ), 2-метилтио-АТФ, р, у-металенАТФ, PPADS, реактив голубой-2, TNP-ATP, карбахолин. Все препараты производства фирмы «Sigma».

Влияние АТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе.

В первой серии экспериментов в качестве агониста Р2-пуринорецепторов был выбран АТФ. Известно, что АТФ является нестойким веществом, под действием экто-АТФаз распадается до аденозина, вызывая отрицательный хронотропный и инотропный эффект (Елисеев, 2001). Серия экспериментов по определению дозозависимого эффекта АТФ на сократимость миокарда была проведена у животных 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста Исследовали действие АТФ в диапазоне концентраций КГ'-Ю^М.

Основным результатом данной серии экспериментов является выявление дозозависимого положительного инотропного эффекта экзогенного АТФ на сократимость миокарда крыс (рис. 1) У 14и21 суточных крыс к увеличению силы сокращения приводит АТФ в концентрации 10" 7М. У крыс 56 и 100 суточного возраста положительный инотропный эффект наблюдается при добавлении АТФ в концентрации 10"6М. Увеличение концентрации агониста до 10"5 и снижает сократимость миокарда желудочков на 34,6% и 15,2% соответственно, что вызвано активацией Р1-рецепторов

Эффективное» влияния АТФ на сократимость миокарда зависит от возраста животных. Сила сокращения миокарда желудочков у 14-суточных животных увеличивалась на 14,9%, у 21-сугочных на 31,4%, у 56-суточных на 25,6%, у 100-суточных на 32,8%.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

5Cf4

-50

Ig, концентрации

—■ — 14дней —21 дней - Л- 56дней • ЮОдней

Рис I Влияние АТФ на сократимость миокарда желудочков растущих крыс Примечание.* - достоверность по сравнению с исходным значением р<0,05

Влияние АТФ па показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора Р1-пуринорецепторов 8-фснилтеофеллина.

Неселективным блокагором Р1-пуринорецепторов является 8-фенилтеофеллин При блокаде Р1 рецепторов отрицательный сократительный эффект, вызванных АТФ Ю^М, 10"5М и Ю^М не сохраняется (рис. 2). АТФ на фоне блокады 8-фенилтеофеллина вызывает только положительный инотропиый эффект миокарда желудочков за счет активации Р2-пуринорецепторов

Рис 2. Влияние АТФ на сократимость миокарда желудочков крыс при блокаде PI пуринорецепторов 8-фенилтеофеллином

Примечание:* - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

Влияние 2-метилтио-АТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

Агонист Р2-рецепторов 2-метилтио-АТФ - является стойким аналогом АТФ и агонистом как Р2Х, так и P2Yi-peuenropoB сердца (Rubmo А 1992, Ralevic V. 1998)

Аналог АТФ - 2-метилтио-АТФ в концентрации 10'10-1(Г6М вызывал дозозависимое сокращение миокарда предсердий и желудочков. У 14-суточных крысят 2-метилтио-АТФ в концентрации 10"8М увеличивал силу сокращения желудочков на 25,8±6,1% и предсердий на 22,4±2,1% При этом длительность сокращения желудочков и предсердий уменьшилась на 14,8±4,6% и 14,8±0,3% соответственно (рис 1, табл.1)

У 21-суточных крысят агонист Р2 рецепторов увеличивал сократимость миокарда предсердий и желудочков в концентрации 10"7М. Максимальный сократительный эффект желудочков и предсердий составил 31,4±1,2% и 31,1±0,8% соответственно. При этом наблюдалось достоверное увеличение длительности сокращения на 15±1,0% и на 15±0,9%

У 56-суточных крысят 2-мстилтао-АТФ в концентрации 10'9М вызывал максимальное увеличение сократимости желудочков на 13,3±0,9%, а предсердий на 11,6±0,6%. У 100 суточных животных 2-метилтао-АТФ в концетрации 10"8,10"7,10"® и 10"3М не изменял силу и длительность сокращения миокарда предсердий и желудочков (рис. 3; табл.1).

Увеличение концентрации агонистов Р2-пуринорецепторов АТФ и 2-метилтио-АТФ, вызывающих положительный инотропный эффект от 14 к 100-суточному возрасту, указывает на высокую чувствительность Р2-рецепторов миокарда в раннем постнатальном онтогенезе Эффективность влияния агониста 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда зависит от возраста животных. Максимальная реакция сократимости миокарда желудочков на 2-метилтио-АТФ была у 21-суточных животных и составила 31%, у 14-суточных -24%, у 56- суточных-12% и у 100-сугочных - 6,5% (рис. 3; табл.1)

Рис 3 Дозазависимый эффект 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда желудочков (А) и предсердий (Б) растущих крыс.

Примечание- * - достоверность по сравнению с исходным значением- р<0,05

Таблица 1.

Изменение силы (§) сокращения миокарда крыс 14-100-суточного возраста при добавлении 2-мстилтио-АТФ

возраст концентрация VI исх Ишах Процент от исходной

14 ю^м желудочек 0,06400±0,00100 0,07900±0,00489* 125,816,2*

предсердия 0,02890±0,00300 0,035374±0,00074* 122,4±2,1*

21 10"'М желудочек 0,1413740,00285 0,18581±0,00424* 131,4±7Д*

предсердия 0,10120±0,00200 0,11638±0,00593* 115±5,1*

56 1СГМ желудочек 0,14230±0,00436 0,16133±0,00543* 113,6±0,9*

предсердия 0,11186=Ш,00402 0,12483±0,00075* Ш.бЙ.б»

100 ю4^ желудочек 0,12978±0,01441 0,13834*0,01542 106,3*0,2

предсердия 0,06187^0,00745 0,06588±0,00792 106,4±0,9

Примечание- * - достоверность по сравнению с исходным значением р<0,05

Таблица 2.

Изменение длительности (сек.) сокращения миокарда крыс 14-100-сугочного возраста при добавлении 2-метилтио-АТФ

возраст коыцешрацня Тисх (сек) 'Гмах (сек) Процент от исходной

14 желудочек 2,21140±0,015000 1,8628010,08757* 85,214,7*

предсердия 0,6482510,01490 0,5522610,01200* 84,310,3*

21 Ю'М желудочек 1,45158±0,07765 1,90302±0,014082* 131,1±7,4*

предсердия 1,3469510,014407 1,54337±0,06482* 115±4,2*

56 ю-*м желудочек 0,4063410,07002 0,45347±0,00272* 111,6*0,6*

предсердия 1,18140*0,13050 1,05329±0,11900 89±1,17*

100 IO-°M желудочек 1,2044410,03365 1.28272Ю,002950 106,510,23

предсердия 0,0194010,00299 0,01981±0,00305 100,210,9

Примечание * - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

Влияние 2-метшггио-АТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора Р2У-пуринорецепторов реактива голубого-2

AM. Hopwood в 1987 на сердце крысы, изолированном по Лангендорфу, подтвердил существование эффективной блокады P2Y - рецепторов, осуществляемой реактивом голубым-2 (Hopwood А.М. 1987). На фоне блокатора добавляли концентрацию агониста, вызывающего максимальный сократительный эффект. При блокаде Р2У-рецепторов 2-метилтио-АТФ увеличивал силу сокращения предсердий и желудочков во всех возрастных группах, что подтверждает участие в реализации положительного инотропного эффекта Р2Х-рецепторов, однако их функциональная активность на разных этапах онтогенеза различна. В наших экспериментах 2-метилтио-АТФ при блокаде Р2У-рецепторов проявил разную эффективность на сократимость миокарда в зависимости от возраста животных. Так, у 21-суточных крысят сила сокращения предсердий и общая длительность их сокращения на действие агониста при блокаде Р2У-реце1тгоров достоверно выше, чем у 100-сугочных (р<0,05) У 56- и 100-суточных животных сила сокращения желудочков на действие агониста при функционально активных Р2Х- рецепторов достоверно выше, чем у 14-суточных (р<0,05) (рис. 4). Следовательно, роль Р2Х-рецепгоров в положительном инотропном эффекте при действии аналога АТФ от 14- к 100-суточному возрасту в предсердиях снижается, а в желудочках возрастает

.p^cyn..)

Рис 4. Влияние 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда желудочков (А) и предсердий (Б) растущих крыс при блокаде Р2У рецепторов реактивом голубым-2 Примечание: * - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

Влияние 2-мегилтио-АТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне блокагора Р2Х-пурииорсцепторов PPADS

PPADS является блокатором Р2Х-рецепторов за исключением P2Xi, P2X« и P2Y| (Vassort G. 2001). На фоне блокатора добавляли концентрацию агониста, вызывающего максимальный сократительный эффект. PPADS практически полностью предупреждал влияние 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда 14-, 21-, 56-суточных крысят. У 100-суточных сила сокращения предсердий увеличилась на 4±0,2%, желудочков на 21±0,9%(р<0,05). Длительность сокращения предсердий и желудочков возросла на 2,4±0,1% и на 13±1,5%(р<0,05) соответственно (рис. 5).

Следовательно, при блокаде Р2Х-рецепторов и добавлении агониста пуринорецепторов 2-метилтио-АТФ только у 100-суточных животных проявляется положительная реакция сократимости миокарда желудочков (рис. 5).

14 21

□ исходные

58 100

12-метилтио-АТФ

□ исходные

32-метилтио Ъф

Рис 5. Влияние 2-метилтио-АТФ на сократимость желудочков (А) и предсердий (Б) сердца растущих крыс при блокаде Р2Х рецепторов PPADS Примечание:* - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

Влияние (I, у-метиленАТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем пост натальном онтогенезе

Влияние селективного агониста P2Xi- рецепторов бета, гамма-метилелАТФ на сократимосггь миокарда изучалось в диапазоне концентраций 10"15- Ю^М У 14- и 21-суточных животных добавление р, у-метиленАТФ вызывает положительный инотропный эффект в концентрации 10"'3 и 10"12М в желудочках и 10"12М в предсердиях. У 56-суточных крыс увеличение силы сокращения происходило при добавлении (3, у-мегиленАТФ в концентрации 10"12 и 10"ПМ в желудочках и в концентрации 10"ПМ в предсердиях У 100-суточных (3, у-метиленАТФ в концентрации Ю'10М вызывал положительный инотропный эффект, как в предсердиях, так и в желудочках (рис 6). Увеличение концентрации агониста, вызывающего положительный инотропный ответ от 14 к 100-суточяому возрасту, подтверждает высокую чувствительность Р2Х1-пуринорецепторов сердца к агонистам в раннем постнатальном онтогенезе. Отрицательный эффект высоких концентраций (Î, у-мегиленАТФ на сократимость миокарда предсердий вызван его распадом до аденозина, который оказывает эффект через свои Р1-рецепторы.

У 14-и 21-суточных животных сократимость желудочков и предсердий увеличилась на 31,2±4,7% и 12,1±1,7%, и на 24,5±3,3% и 4,4±0,9% соответствешю. Наибольший сократительный эффект желудочков и предсердий у крыс 56-суточного возраста составил 21,4±3,8% и 7,7±1,5% У 100-суточных животных максимальный сократительный эффект составил 13,б±1,8% в желудочках и 5,3%±0,8% в предсердиях.

Реакция Р2Х1-рецепгоров на р, у-метиленАТФ достоверно выше в желудочках, по сравнению с предсердиями во всех возрастных группах животных, что указывает на разную функциональную активность Р2Х1-пуринорецепгоров в разных отделах миокарда.

Влияние р, у-мстиленАТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора пуринорецепторов TNP-ATP

TNP-ATP является производным АТФ и является сильным антагонистом P2Xi-, Р2Хм -и Р2Х3- пуринорецепторов (Vassort G, 2001; Honore P. et al., 2002; Xu J. et al, 2004) Использование данного блокатора позволит подтвердить участие Р2Х|-подпита пуринорецетгторов в положительном инотропном эффекте миокарда крыс. В экспериментах с данным блокатором для каждого возраста крыс использовали наиболее эффективные концентрации р, у-метиленАТФ.

Селективный антагонист TNP-ATP в концентрации Ю^М (Xu J et al, 2004) полностью предупреждал влияние р, у-метиленАТФ на сократимость миокарда желудочков и предсердий во всех возрастных труппах.

Таким образом, полученные нами результата подтверждают, что реализация положительного инотропного эффекта, вызванного р, у-метапенАТФ, осуществляется через активацию Р2Х( рецепторов.

—■—14 —21 - А - 56 —»—100

Рис 6. Влияние бета, гамма- метиленАТФ на сократимость желудочков растущих крыс Примечание: * - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05 Совместное влияние карбахолина и 2-метилтио-АТФ на силу сокращения миокарда крыс в раннем постнатальиом онтогенезе.

Влияние карбахолина на силу сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе. Влияние стойкого агониста преимущественно М2-холинорецепторов карбахолина на сократимость миокарда изучали в диапазоне концентраций 10"7М -104М. Установлено, что карбахолин в концентрации 10"5М вызывал отрицательный инотропный эффект миокарда у крыс 14-, 21-, 56- и 100-суточного возраста.

I Карбахолин в концентрации 10"5М снижал сократимость миокарда желудочков и предсердий у 14-сут. крыс на 19,4±4,3% и на 15,4±4,3%, у 21-сут. на 37,0±4.2% и 39,1*5,2%, у 56-сут. на 36±8,0% и 30,5±5,8% и у 100-сут. животных на 36±2,9% и на 25,0*5,7% соответственно.

В наших экспериментах на изолированных полосках предсердий и желудочков карбахолин проявляет разную эффективность в зависимости от возраста животных, что позволяет судить о функциональной активности М2-холинорецепторов в онтогенезе. Так, реакция М2-холинорецепторов, определяющих сократимость предсердий и желудочков при действии карбахолина в концентрации 10°М снижается от 14 к 100-сут возрасту и является наименьшей у 14-сут крысят, и максимальной у 21-суточных животных по сравнению с 100-сут (рис. 7).

Возраст (сутки)

Возраст (суши)

Рис 7. Влияние карбахолина на сократимость миокарда желудочков (А) и предсердий (Б) при действии карбахолина в концентрации 10"5М

Примечание: * - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

Совместное влияние карбахолина и 2-метилтио-АТФ на силу сокращении миокарда крыс в раннем лостнатальном онтогенезе. Для изучения возможного влияния АТФ на эффекты карбахолина изучали влияние последовательного введения стойкого агониста Р2Х- и Р2Уг реценгоров- 2-метилтио-АТФ, который добавляли на фоне развивающегося угнетающего изотропного действия карбахолина - агониста М2-холинорецепторов. Так же проводились эксперименты с обратной последовательностью подачи веществ, когда карбахолин добавлялся на фоне развивающегося положительного инотропного эффекта агониста Р2-пуринорецепторов.

У 14-суточных крысят в контроле карбахолин уменьшает сократимость предсердий на 15,4±4,3% и желудочков на 19,4±4,3%. Добавление 2-метилтио-АТФ в концентрации 10~8М усиливает отрицательное действие карбахолина на сократимость до 31,5±5,2% и 43,6±5,3% соответственно, что достоверно больше его эффекта в контроле. Наблюдаемый эффект значительно превышает угнетающее действие одного карбахолина. В контроле 2-метилтио-АТФ в концентрации 10" М увеличивает силу сокращения предсердий на 15,3±2,0%, желудочков на 25,8±6,2%. При добавлении сгойкого аналога АТФ, эффект карбахолина усиливается приблизительно на 54%. Развивается отрицательный инотропный эффект карбахолина, который на фоне 2-метилтио-АТФ у 14-суточных составил 20,9±1,9% в предсердиях и 19,3±2,3% в желудочках, достигая контрольных значений карбахолина к 20 минуге (рис.8).

У 21-суточных крыс в контроле карбахолин уменьшает сократимость предсердий на 39,1±2,7% и желудочков на 37,0±4,2%. Агонист Р2-рецепторов в концентрации 10"7М усиливает сократимость миокарда предсердий и желудочков в контроле приблизительно на

31,3%. Добавление 2-метшпио-АТФ уменьшает эффект карбахолина в предсердиях на 29,0±1,2% и в желудочках на 28,4±3,4%, что достоверно меньше его эффекта в контроле. При обратной последовательности подачи веществ на фоне ашниста Р2-пуринорецепторов угнетающий эффект карбахолина на сократимость миокарда составляет всего +3,6±1,7% в предсердиях и -7,7±1,4% в желудочках, что достоверно меньше эффекта карбахолина в контроле (рис. 9).

У 56-суточных крыс в контроле карбахолин угнетает силу сокращений предсердий на 30,5±5,8% и желудочков на 36,0±8,1%. Агонист Р2-рецепторов в концентрации 10"9М увеличивает сократимость миокарда предсердий и желудочков в контроле на 12,6%. Добавление 2-метилтио-АТФ усиливает отрицательный инотропный эффект карбахолина до 35,0±2,6% в предсердиях и до 41,3±3,6% в желудочках соответственно. На фоне положительного действия агоииста Р2-рецепторов добавление карбахолина приводит к развитию угнетающего эффекта карбахолина, который проявляется с первой минуты после его добавления и в течение 5 минут достигает эффекта карбахолина в контроле.

У 100-суточных животных в контроле карбахолин ингибирует сократимость миокарда предсердий и желудочков на 25,0±5,8% и на 36±2,9% соответственно. Добавление 2-метилтио-АТФ усиливает эффект карбахолина до 30,9±1,7% в предсердиях и снижает до 25,7±2,3% в желудочках, не достигая кошрольных значений. При обратной последовательности подачи веществ карбахолин уменьшает сократимость миокарда предсердий до 19,4±1,5% и желудочков до 24,йь2,5%(р<0,05), что достоверно ниже эффекта карбахолина в контроле.

Таким образом, эффект совместного влияния агонистов Р2-рецепторов 2-метилтио-АТФ и М2-холинорецепторов карбахолина на сократимость миокарда может быть усиливающим или ослабляющим в зависимости от возраста крыс. Активация Р2-рецепторов усиливает угнетающий эффект карбахолина на сократимость миокарда предсердий и желудочков у 14-сут. крысят и сократимость желудочков у 100-суточных крыс У 21 -суточных крысят активация Р2-рецепторв снижает отрицательный эффект карбахолина на сократимость миокарда. Карбахолин ингибирует положительный инотропный эффект 2-метилтио-АТФ во всех возрастных группах.

Рис 8 Изменение сократимости миокарда желудочков (Л) и предсердий (Б) у крыс 14 суточного возраста

Примечание'* - достоверность по сравнению с исходным значением. р<0,05

Рис 9. Изменение сократимости миокарда желудочков (А) и предсердий (Б) у крыс 21 да возраста.

Примечание:* - достоверность по сравнению с исходным значением: р<0,05

ВЫВОДЫ

1. АТФ в концентрации 10"7М увеличивал сократимость желудочков у 14-, 21-сугочных крысят, а в концентрации Ю^'М у 56-и 100-сугочных крыс. Длительность сокращения желудочков уменьшалась у 21-и 56-суточных крысят.

2. Антагонист Р1-рецепторов 8-фенилтеофеллин устраняет отрицательный инотропный эффект, вызванный большими концентрациями АТФ у крыс 21-, 56- и 100-суточного возраста.

3. Стойкий аналог АТФ - 2-метилтио-АТФ оказывает дозозависимое увеличение сократимости предсердий и желудочков у 14-суточных в концентрации 10"8М, у 21-суточных - 10"?М и 56-суточным - 10"9М

4. При добавлении 2-метшгтио-АТФ на фоне селективного антагониста Р2У-рецепторов реактива голубого-2 положительный инотропный эффект сохраняется у крыс всех возрастных групп, что указывает на активацию Р2Х-рецепторов сердца.

5. У 21-суточных крысят при блокаде Р2У-рецегтгоров сила сокращения предсердий и общая длительность сокращения на 2-метилтио-АТФ выше, чем у 100-суточных, что указывает на разную функциональную активность Р2Х-рецепторов на разных этапах онтогенеза.

6. На фоне селективного антагониста Р2Х-реце1ггоров РРА1)8 2-метилтио-АТФ сохраняет положительный инотропный эффект в миокарде желудочков крыс 100-сушчного возраста.

7 Селективный агонист Р2Х1-рецепторов р, у-метиленАТФ вызывает положительный инотропный эффект миокарда предсердий и желудочков у 14-и 21-суточных крыс в концентрации 10'12М, у 56-суточным -10"ПМ и 100-суточных -1О"|0М.

8 Селективный блокагор Р2Х-рецепгоров ТЫР-АТР устраняет положительный инотропный эффект, вызванный (3, у-металенАТФ у крыс всех возрастных групп

9. 2-метилтио-АТФ усиливает угнетающий эффект карбахолина на сократимость миокарда у 14-и 100-сугочных крыс У 21-суточных крысят активация Р2-рецепторв снижает отрицательный эффект карбахолина на сократимость миокарда

10. Карбахолин ингибирует положительный инотропный эффект 2-метилтио-АТФ во всех возрастных группах

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зверев A.A. Влияние 2-мстилтио-АТФ на сократимость полосок миокарда крыс в онтогенезе / Аникина Т.А., Снтдиков Ф.Г., Зверев A.A. // Тез. 8 Всероссийского научного симпозиума. Растущий организм- адаптация к физической и умственной нагрузке: 2006г -Казань: 2006.-С. 39

2. Зверев A.A. Участие Р2Х-рецепторов в сердечной деятельное™ крыс в онтогенезе / Ситдиков Ф Г., Аникина Т. А., Билалова Г А., Хамзина Е.Ю, Зверев А.А // Тез XX съезда Физиологического Общества им И П Павлова - Москва: 2007. С 11

3. Зверев A.A. Роль Р2Х- и Р2У-рецепторов в сократимости миокарда крыс в онтогенезе / Аникина Т.А, Билалова Г.А, Ситдиков Ф.Г., Зверев A.A. // Бюлл. эксперим. Биол. и мед -2007. № 6. - С. 637-640

4. Зверев A.A. Влияние АТФ и его аналогов на сократимость миокарда крыс в онтогенезе / Аникина Т.А, Билалова Г.А., Зверев А.А, Ситдиков Ф Г. // Бюлл. эксперим. Биол. и мед.-2007 К»7.-С.7-10

5. Зверев A.A. Участие Р2Х-рецепторов в положительном ииотропном эффекте миокарда крыс в онтогенезе / Зверев A.A., Аникина Т А., Ситдиков Ф.Г. //Бюлл. эксперим. Биол. и мед.-2008. №2.-С. 133-135

6 Зверев А.А Участие Р2Х1, Р2Х2, Р2Х2/3 в сократимости миокарда растущих крыс / Зверев A.A. Тез. Четвертой всероссийской с международным участием школы-конференции по физиологии кровообращения.- ФМГУ им. М В.Ломоносова, Факультет фундаментальной медицины :2008.-С 32-33

7. Зверев A.A. Участие Р2Х1, Р2Х2 пуринорецепторов в хронотропной и инотропной функции сердца крыс в рашем постнатальном онтогенезе / Ситдиков Ф.Г., Аникина Т.А., Зверев А.А, Хамзина Е Ю. Тез VI Сибирского физиологического съезда.-Барнаул: 2008 -С. 53

8. Зверев A.A. Пуринорецепторы сердца в онтогенезе I Ситдиков Ф.Г., Аникина Т.А., Зверев А А. Тез Четвертой всероссийской с международным участием школы-конференции по физиологии кровообращения. - ФМГУ им. М В.Ломоносова, Факультет фундаментальной медицины..2008 -С.90

9. Зверев A.A. АТФ модулирует холинергические влияния на сократимость миокарда в зависимости от возраста крыс / Аникина Т.А, Зверев A.A., Ситдиков Ф Г, Трофимова И А. // Тез 9 Всероссийской научно-теоретической конференции. Физиологические механизмы адаптации растущего организма. 2008.-С 17

10 Зверев А.А Функциональная активность Р2Х-реепторов крыс в раннем постнатальном онтогенезе / Зверев А.А, Аникина Т.А, Ситдиков Ф.Г, Билалова Г.А. // Тез. 9 Всероссийской научно-теоретической конференции. Физиологические механизмы адаптации растущего организма. 2008 -С 51

11 Зверев A.A. Пуринергическая регуляция деятельности сердца крыс в онтогенезе / Ситдиков Ф.Г, Аникина Т.А, Зверев А.А, Билалова Г.А, Хамзина ЕЮ. // Жур. Онтогенез -2008. № 5 С.333-339

Подписано в печать 20.10.08 г. Форм.бум. 60x80 1/16. Печ. л.1,25. Тираж 120. Заказ № 436. Отпечатано с готового оригинал - макета в ООО «Вестфалика» г. Казань, ул. Б. Красная, 67. Тел.: 250-30-42

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Зверев, Алексей Анатольевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие сведения об АТФ

1.2. Классификация пуринорецепторов

1.3. Общая характеристика Р2-пуринорецепторов

1.4. Характеристика основных агонистов и антагонистов Р2Х-пуринорецепторов

1.5. Р2-рецепторы в сердце

1.6. Влияние АТФ на сердечную деятельность

1.7.Модулирующее влияние пуринов на эффекты, оказывемые ацетилхолином в сердечно-сосудистой системе

ГЛАВА 2. ОРГАНИЗАЦИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объект исследований

2.2. Организация и методика экспериментов

2.3. Методика регистрации сократимости полосок миокарда

2.4. Методика фармакологических воздействий

2.5. Статистическая обработка результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние АТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

3.2. Влияние АТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора Р1-пуринорецепторов 8-фенилтеофеллина

3.3. Влияние 2-метилтио-АТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

3.4. Влияние 2-метилтио-АТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора

Р2У-пуринорецепторов реактива голубого

3.5. Влияние 2-метилтио-АТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне блокатора Р2Х-пуринорецепторов PPADS

3.6. Влияние р, у-метиленАТФ на показатели сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

3.7. Влияние (3, у-метиленАТФ на показатели сокращения миокарда растущих крыс на фоне селективного блокатора пуринорецепторов TNP-ATP

3.8. Совместное влияние карбахолина и 2-метилтио-АТФ на силу сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

3.8.1. Влияние карбахолина на силу сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе

3.8.2. Совместное влияние карбахолина и 2-метилтио-АТФ на силу сокращения миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе 100 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 111 ВЫВОДЫ 115 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список используемых сокращений

АХ - ацетилхолин

АДФ - аденозин 5'-дифосфорная кислота АМФ — аденозин 5'-монофосфорная кислота АТФ — аденозин 5'-трифосфорная кислота исх - исходное значение показателя НА - норадреналин М - моль мин - минута мл - миллилитр рис. - рисунок

РНК - рибонуклеиновая кислота с - секунда сут-сутки табл. - таблица цАМФ - циклический аденозинмонофосфат п - количество животных

PPADS - пиридоксальфосфат-6-азофенил-2'4'-дисульфоновая кислота Rb-2- реактив голубого

TNP-ATP-(2\ 3' -о-(2,4,6-тринитрофенил)аденозин-5"-трифосфат Р, у-мАТФ - бета, гамма-метеленаденозин 5!-трифосфорная кислота 2-м-АТФ-2-метилтио-аденозин 5'-трифосфорная кислота

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль АТФ и пуринорецепторов в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе"

За последнее время накопилось много данных о том, что АТФ кроме внутриклеточной роли макроэргического соединения, может принимать участие в межклеточной передаче сигналов, где выступает в качестве трансмиттера или котрансмиттера (Burnstock G., 1989, 2006; Ralevic V., Burnstock G., 1991). Сейчас является совершенно очевидным, что физиологическое значение пуринов не ограничивается их непосредственным участием во внутриклеточных процессах. Не менее важным является способность АТФ модулировать и регулировать многие жизненно - важные процессы в клетке посредством влияния на различные рецепторы (Гиниатуллин Р.А. 1998; Зиганшин А.У. и др., 1999; Шакирзянова Н. 2005; Pelleg А. 1997; McQueen D.S. 1998; Sillinsky Е.М. 2000).

Применение АТФ при заболеваниях сердечно-сосудистой системы связывали с продуктом его гидролиза аденозином, который вызывает гипотензивное, отрицательное хронотропное и инотропное действие (Елисеев В. 2001; Burnstock G. ang Meghjip 1983; Neumann J, Meissner A., et al 1999). На сегодняшней день известно, что АТФ и без распада до аденозина влияет на собственные Р2-рецепторы и АТФ оказывает хронотропные, инотропные и аритмогенные эффекты на сердце. В настоящее время появился целый ряд исследований, посвященных влиянию АТФ и его производных на сердечно - сосудистую систему (Ralevic V. et al 1998; Burnstock G., 2006; и др.)

Неослабевающий интерес к изучению влияния АТФ на деятельность сердечно — сосудистой системы и сердца в частности основывается на различных, нередко противоположных результатах, полученных разными исследователями в экспериментах как in vivo, так и in vitro. АТФ проявляет множество эффектов в сердечно-сосудистой системе, включающие положительный хронотропный и инотропный эффект, возбуждение входа кальция в сердечном миоците (Olsson R.A. et al 1990; Ralevic V. et al 1991;

Scamps 1996). АТФ в небольших концентрациях вызывает кратковременную тахикардию, а в высоких замедляет работу сердца, вызывая атриовентрикулярную блокаду (Vassort G. 2001).

Пуринорецепторы по выполняемым ими функциям можно отнести к рецепторам-модуляторам, определяющих действие пуринов на функцию других рецепторов. Следует отметить, что при стимуляции парасимпатических нервов выделяется как классический медиатор ацетилхолин, так и котрансмиттер АТФ (Smith 1991; Sillinsky, Redman 1996). В последнее время получены данные о способности АТФ модулировать хронотропные и инотропные эффекты ацетилхолина (Нага Y., Nakaya Н. 1997).

Можно предположить, что модулирующие влияния АТФ на эффекты основных медиаторов определяются созреванием центральных, эфферентных симпатических и парасимпатических регуляторных влияний на сердце, его рецепторным аппаратом, т.е. зависят от этапов биологического созревания организма.

Онтогенетический аспект пуринергической регуляции сердца практически не изучен, и рассматривался только на взрослых организмах и в период их неонатального развития (Webb ТЕ 1996 et al; Shacher J.B. Browse, 2003).

Цели и задачи исследования Целью исследования является изучение прямого и модулирующего влияния АТФ и его аналогов на сократимость миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе. В соответствии с этой целью были сформулированы следующие задачи:

2. Определить влияние 2-метилтио-АТФ на сократимость миокарда на фоне блокады Р2Х - и Р2У-рецепторов.

3. Изучить влияние селективного агониста Р2Х]-пуринорецепторов (3, у-метиленАТФ на сократимость миокарда крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста.

4. Определить влияние (3, у-метиленАТФ на сократимость миокарда на фоне блокады Р2ХГ, Р2Х2-, Р2Х2/3-рецепторов TNP-ATP.

5. Исследовать модулирующее влияние 2-метилтио-АТФ на эффекты карбахолина в сократимости миокарда крыс 14-, 21-, 56-, 100-суточного возраста.

Основные положения, выносимые на защиту

Научная новизна

В настоящем исследовании впервые установлено, что у крыс 14-, 21-, 56-и 100-суточного возраста АТФ и его производные в разных концентрациях вызывают положительный инотропный эффект. Стойкий аналог АТФ - 2-метилтио-АТФ, селективный агонист P2Xi-рецепторов - (3, у-метиленАТФ оказывают дозозависимое увеличение сократимости предсердий и желудочков у 14-100-суточных крыс. Впервые установлено, что чувствительность Р2Х-рецепторов миокарда к АТФ и его производным, снижается в раннем постнатальном онтогенезе. Использование селективных блокаторов Р2Х - и Р2У-рецепторов позволило определить семейство пуринорецепторов, участвующих в положительном инотропном эффекте на 2-метилтио-АТФ. Применение селективных агонистов и блокаторов Р2Х-пуринорецепторов доказало, что в положительном инотропном эффекте принимают участие P2Xj-рецепторы. Впервые показано, что функциональная активность Р2Х-пуринорецепторов на разных этапах онтогенеза различна и от 14- к 100-суточному возрасту в предсердиях снижается, а в желудочках возрастает.

Совместное действие агонистов Р2-рецепторов 2-метилтио-АТФ и М2-холинорецепторов карбахолина на сократимость миокарда крыс в постнатальном онтогенезе показало, что активация Р2-рецепторов может усиливать или ослаблять эффекты карбахолина в зависимости от возраста животных. У 14-суточных крыс 2-метилтио-АТФ усиливает угнетающий эффект карбахолина, а у 21-суточных крысят активация Р2-рецепторов снижает отрицательный эффект карбахолина на сократимость миокарда. Активация М2-холинорецепторов ингибирует инотропный эффект пурина во всех возрастных группах.

Научно - практическая значимость

Полученные данные расширяют представление о роли пуринергических соединений в инотропной деятельности сердца крыс в раннем постнатальном онтогенезе. Результаты проведенного исследования позволяют по - новому взглянуть на роль АТФ в качестве нейромодулятора сердечной деятельности на разных этапах постнатального онтогенеза крыс. Изученные нами возрастные особенности чувствительности Р2Х-рецепторов сердца крыс могут представлять интерес для фармакологов. Материал исследований заслуживает внимания со стороны специалистов по возрастной и нормальной физиологии, педиатрической фармакологии и кардиологии.

Апробация работы

Материалы исследований доложены на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава, молодых ученых и специалистов Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (2005-2008), на XX съезде Физиологического Общества им. И.П. Павлова, на 8 Всероссийском научном симпозиуме «Растущий организм: адаптация к физической и умственной нагрузке», (Казань, 2006); на школе-конференции по физиологии кровообращения, ФФМ МГУ имени М.В. Ломоносова (Москва, 2008), на VI Сибирском физиологическом съезде (Барнаул, 2008), на 9 Всероссийской научно-теоретической конференции «Физиологические механизмы адаптации растущего организма» (Казань, 2008); на заседаниях кафедры анатомии, физиологии и охраны здоровья человека Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (Казань, 2005-2008).

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания организации и методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 141 страницах машинописного текста, содержит 19 рисунков и 33 таблицы. Список литературы включает 235 работ, из них 175 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Зверев, Алексей Анатольевич

выводы 7

1. АТФ в концентрации 10" М увеличивал сократимость желудочков у 14-, 21-суточных крысят, а в концентрации 10"бМ у 56-и 100суточных крыс. Длительность сокращения желудочков уменьшалась у 21-и 1

56-суточных крысят.

2. Антагонист Р1-рецепторов 8-фенилтеоффелин устраняет отрицательный инотропный эффект, вызванный большими концентрациями АТФ у крыс 21-,56- и 100-суточного возраста.

3. Стойкий аналог АТФ - 2-метилтио-АТФ оказывает I дозозависимое увеличение сократимости предсердий и желудочков у 14-суточных в концентрации 10"8М, у 21-суточных - 10"7М и 56-суточным - 10" 9М.

4. При добавлении 2-метилтио-АТФ на фоне селективного антагониста Р2У-рецепторов реактива голубого-2 положительный инотропный эффект сохраняется у крыс всех возрастных групп, что указывает на активацию Р2Х-рецепторов сердца.

5. У 21-суточных крысят при блокаде Р2У-рецепторов сила сокращения предсердий и общая длительность сокращения на 2-метилтио-АТФ выше, чем у 100-суточных, что указывает на разную функциональную активность Р2Х-рецепторов на разных этапах онтогенеза.

6. На фоне блокады Р2Х-рецепторов PPADS 2-метилтио-АТФ сохраняет положительный инотропный эффект в миокарде желудочков крыс 100-суточного возраста.

7. Селективный агонист Р2Х1-рецепторов (3, у-метиленАТФ вызывает положительный инотропный эффект миокарда предсердий и желудочков у 14-и 21-суточных крыс в концентрации 10'12М, у 56-суточным -10"ПМ и 100-суточных -Ю"10М.

I I

8. Селективный блокатор Р2Х-рецепторов TNP-ATP устраняет положительный инотропный эффект, вызванный (3, у-метилен АТФ у крыс всех возрастных групп.

9. 2-метилтио-АТФ усиливает эффект карбахолина на сократимость миокарда у 14-и 100-суточных крыс. У 21-суточных крысят активация Р2-рецепторв снижает отрицательный эффект карбахолина на сократимость миокарда.

Ю.Карбахолин ингибирует положительный инотропный эффект 2-метилтио-АТФ во всех возрастных группах.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наше исследование посвящено изучению влияния АТФ и его аналогов на сократимость миокарда крыс разного возраста. За последние годы накопилось много данных о том, что АТФ кроме внутриклеточной роли макроэргического соединения может принимать участие в межклеточной передаче сигналов, где выступает в качестве трансмиттера или котраснмиттера (Ralevic, 1991). Особенностью нашего исследования было изучение эффектов, оказываемых АТФ на сократимость миокарда в раннем постнатальном онтогенезе.

Известно, что внеклеточный АТФ реализует свои эффекты через Р2-рецепторы. В синоатриальном узле и сарколемме кардиомиоцитов сердца обнаружено несколько подтипов Р2-рецепторов. В сердце крыс также описаны рецепторы P2Y- семейства (G.Burnstock, 1999;G.Vassort G., 2001). Следует отметить, что онтогенетический аспект пуринергической регуляции сердца практически не изучен, и рассматривался только на взрослых организмах и в период их неонатального развития (Browse, 2003). В литературе показано, что экспрессия Р2У-рецепторов меняется в онтогенезе и на зрелых кардиомиоцитах для P2Y1-, P2Y2 и PY6-penenTopoB она усиливается (Ralevic, 2001). Сведений о возрастных особенностях функциональной активности Р2Х-рецепторов сердца в доступной нам литературе мы не нашли.

Р2Х- и P2Y-penenTopbi отличаются не только особенностями молекулярной структуры, но и чувствительностью к действию различных производных пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Известно, что АТФ и 2-метилтио-АТФ являются агонистами всех подтипов Р2-рецепторов. Однако действие АТФ как агониста Р2-рецепторов очень кратковременно вследствие быстрого разрушения внеклеточными нуклеотидазами. Выбор препарата 2-метилтио-АТФ определялся тем, что он являлся стойким аналогом АТФ и агонистом как Р2Х- так и P2Y-penenTopoB сердца, р, у-метиленАТФ оказывает свое преимущественное действие на

Ill

Р2Хгпуринорецепторы сердца. Использование этих фармакологических препаратов одновременно с селективными блокаторами Р2-рецепторов позволило определить семейство и подтип Р2-пуринорецепторов сердца, участвующих в положительном инотропном эффекте. Результаты экспериментов показали, что в положительной сократительной реакции при действии пуринов проявляют активность Р2Х- и Р2У-рецепторы, которые обладают различной функциональной активностью на разных этапах онтогенеза. Роль Р2Х-рецепторов в положительной инотропной реакции предсердий снижается, и является максимальной у 14 и 21-суточных крыс. Роль Р2У-рецепторов на действие 2-метилтио-АТФ в сократимости миокарда предсердий и желудочков на ранних этапах онтогенеза незначительна.

В нашей работе показано, что все используемые агонисты Р2-рецепторов вызывают дозозависимое увеличение сократимости миокарда предсердий и желудочков у растущих животных. Повышение концентрации всех используемых агонистов, приводящих к положительному инотропному эффекту с увеличением возраста указывает на высокую чувствительность к агонисту Р2Х-рецепторов миокарда в раннем постнатальном онтогенезе. Наблюдаемые явления могут быть связаны с гетерохронностью созревания рецепторного аппарата сердца и, как следствие, со снижением чувствительности, изменением функциональной активности и количества разных типов рецепторов, участвующих в сократимости миокарда у животных, находящихся на разных этапах биологического развития.

Пуринорецепторы по выполняемым ими функциям можно отнести к рецепторам-модуляторам, определяющих действие пуринов на функции других рецепторов. Известно, что АТФ находится в везикулах вместе с ацетилхолином или норадреналином и участвует в передаче нервных импульсов, выделяясь из нервных окончаний вместе с основными медиаторами, т.е. является котрансмиттером (Kennedy С., Burnstoc G. 1985). Исследования подтверждают наличие совместной секреции норадреналина, ацетилхолина и АТФ1 из симпатических и парасимпатических нервов и способность АТФ модулировать нервную передачу в сердце (Chevalier В., ■ ' Mansier P., Callens E.I., et al; 1991Hardouin S., Mansier P;, Bertin В., et al , 1997), увеличивая^ или ослабляя эффекты, производимые классическими , '.; медиаторами. ■'' ■ ■'."•.,'; ■■!■:.'''' '/V-'' ' ;' • АТФ считается одним . из наиболее филогенетически ■ древних нейромедиаторов. Известно, что пуринорецепторы появляются! одними! из первых- в онтогенезе. Внеклеточные рецепторы к АТФ, наряду с М-холинорецепторами являются первыми функционально активными , мембранными рецепторами;, выявляемыми; в период формирования зародыша (Shacher J.B.; Sromek 1997). Можно предположить, что прямые и ■ модулирующие эффекты АТФ определяются созреванием центральных, : эфферентных симпатических и парасимпатических регуляторных влияний на сердце, его рецепторным аппаратом. ^ > . ! г \ По нашим данным, реакция сократимости миокарда на карбахолин меняется в постнатальном онтогенезе.: Реакция М2-холинорецспторов при , действии карбахолина снижается от 14 к 100-суточному возрасту. У 14- : : суточных крысят она является наименьшей. Согласно мнению ;; многих исследователей с возрастом- снижается не только количество, но и функциональная активность М2-холинорецепторов, что подтверждается уменьшением их плотности в сердце на протяжении постнагалыюго онтогенеза (Brodde О.Е., Konschak, 1997; BroddeOiE:, Konschak, 1998).

Подтверждением являются и данные об изменении количественного соотношения популяции разных подтипов М-холинорецепторов в разные . периоды постнагального развития (Зефиров Т!Л. йг^р. 2007). Плотность мускариновых рецепторов в миокарде зависит от концентрации ' ацетилхолина в тканевой жидкости. Установлено отсутствие полноценной системы иннервации сердца не только у плодов крыс, но и у крысят первого i! месяца постэмбрионального развития. Некоторые исследователи считают, ! ' что парасимпатические влияния выражены у новорожденных крысят слабо. и начинают усиливаться с 3 по 10 неделю постнатального онтогенеза, что подтверждается экспериментальными данными нашей кафедры (Ситдиков Ф.Г., 1998 и др.; Ситдиков Ф.Г., Зефиров Т.Л., 2006). По нашим результатам у 14-суточных крысят, на фоне развивающегося отрицательного инотропного действия карбахолина добавление 2-метилтио-АТФ приводит к усилению угнетающего действия карбахолина, который значительно превышает действие одного карбахолина.

У 21-суточных крысят инотропная реакция миокарда на карбахолин была максимальной по сравнению с другими возрастными группами. Следует отметить, что с 3 по 6 неделю постнатального онтогенеза происходит становление симпатической регуляции сердца и в этом возрасте у крыс зафиксировано первое и максимальное повышение частоты сердечных сокращений (Ситдиков Ф.Г., Зефиров Т.Л., 2006). Симпатическая иннервация миокарда, характерная для взрослых животных, у крысят формируется к 3-4-недельному возрасту (Крохина Е.М.,1973). Можно предположить что, повышение функциональной активности М2-холинорецепторов происходит компенсаторно, в ответ на активацию симпатической нервной системы. Добавление агониста Р2-пуринорецепторов уменьшает отрицательный инотропный эффект карбахолина, что подтверждается и при обратной последовательности подачи веществ.

Таким образом, АТФ может модулировать эффекты карбахолина и совместное влияние агонистов Р2-пуринорецепторов 2-метилтио-АТФ и М2-холинорецепторов карбахолина на сократимость миокарда может быть усиливающим или ослабляющим в зависимости от возраста крыс, т.е. определяться уровнем созревания и активности симпатических, парасимпатических и нейрогуморальных регуляторных каналов сердца.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Зверев, Алексей Анатольевич, Казань

1. Адольф Э.Ф. Развитие физиологических функций / Адольф Э.Ф. -М.: Мир, 1971.- 192с.

2. Аршавский И.А. Очерки по возрастной физиологии / Аршавский И.А. М.: Медицина, 1967.-476с.

3. Аршавский И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития / Аршавский И.А. М.: Наука, 1982.- 270с.

4. Аухадеев Э.И. К вопросу о механизмах взаимоотношения между симпатическими и парасимпатическими нервами сердца: Автореф. . канд. биол. наук / Аухадеев Э.И. Казань, 1969. - 24с.

5. Батрак Г.Е. Дозирование лекарственных средств экспериментальным животным / Батрак Г.Е., Кудрин А.Н. М.: Медицина, - 1979.-167с.

6. Бернсток Дж. Основания для разграничения двух типов пуринергических рецепторов // рецепторы клеточных мембран для лекарств и гормонов: Междисциплинарный поход / Под ред. Р.У. Штрауба, JL Болис. -М.: Медицина, 1983.-С. 120 132.

7. Бернсток Дж. Пуринергические синапсы и эволюция / Бернсток Дж // Сравнительная фармакология синаптических рецепторов. Л.: Наука, 1977. С.26 - 33.

8. Бернсток Дж. Адренергические нейроны: их организация, функция и развитие в периферической нервной системе / Бернсток Дж., Коста М. Минск, 1979. - С.228

9. Билалова Г.А. Возрастные особенности чувствительности сердца крыс на стимуляцию симпатического ганглия: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Билалова Г.А. — Казань, 2000. 21с.

10. Гиниатуллин Р.А. Модулирующая роль АТФ в нервно -мышечном синапсе / Гиниатуллин Р.А, Соколова Е. М. // Рос. Физиол. Журн. им. И.М. Сеченова. -1998. Т.84.- №10. - С.1132 - 1139.

11. Голубинская В.О.Вариабельность артериального давления у крыс: роль медиаторов симпатической нервной системы норадреналина и АТФ и локальных механизмов регуляции: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Голубинская В.О. Москва, 2000. - 19с.

12. Глебов Р.Н. Крыжановский Г.Н. Функциональная биохимия синапсов / Глебов Р.Н. Крыжановский Г.Н. // Москва.: Медицина 1978. 325с.

13. Елисеев В.В. Роль аденозина в регуляции сердечно сосудистой системы / Елисеев В.В. // Хим.-фарм. журнал. - 1987. - №8. - С.910 - 919.

14. Елисеев В.В. Роль аденозина в регуляции физиологических функций организма / Елисеев В.В, Полтавченко Г.М. Санкт - Петербург: Наука, 1991.

15. Елисеев В.В. Аденозин и функции миокарда. / Елисеев В.В. // . -Санкт-Петербург: Наука, 2001, 160с.

16. Западнюк И.П. Лабораторные животные. Развитие содержание, использование в эксперименте. Учебное пособие для студентов биол. вузов/ Западнюк И.П, Западнюк И.В, Западнюк Б.В. Киев, 1983. - 383с.

17. Зефиров T.JI. Нервная регуляция сердечного ритма крыс в постнатальном онтогенезе: дисс. док. мед. наук / Зефиров Т.Л.- Казань. -1999.- С.535.

18. Зефиров Т.Л. Вегетативная система модулирует влияние аденозина на сердце / Зефиров Т.Л, Зиятдинова Н.И, Гайнуллин А.А. // «Нейрогуморальные механизмы регуляции сердца». Материалы всероссийской конференции. Казань, 2004. - С.59-66.

19. Зефиров Т.Д. Становление парасимпатической регуляции сердца крыс / ЗефировТ.Л., Сайфундинова JI.P., Зиятдинова Н.И. // Науч. Труды 1 съезда физиологов СНГ.- 2005.- С. 76-77.

20. Зиганшин А.У. Перспективы клинического применения средств, воздействующих на рецепторы АТФ Р2-пуринорецепторы / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е. // Каз. Мед. Журнал. - 1996. -№2. - С.134 - 136.

21. Зиганшин А.У. Фармакология рецепторов АТФ / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е. Гэотар медицина, Москва, 1999. - 209с.

22. Зиганшин А.У. Фармакологическая характеристика рецепторов АТФ / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е., Бернсток Дж. // Хим. Фарм. Журнал. - 1997а. - №1. - С.3-8.

23. Зиганшин А.У. Экто-АТФазы и рецепторы АТФ / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е., Бернсток Дж. // Эксп. Клинич. Фармакол. 19976. -№3. - С.78-82.

24. Зиганшин А.У. Р2-рецепторы: теоретические предпосылки клинического воздействия / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е., Бернсток Дж. // Бюлл. экспер. биол. и мед. -2002. Т. 134.- №10. - С.365 - 369.

25. Косицкий Г.И. Афферентные системы сердца / Косицкий Г.И. -М.: Наука, 1975.-207 с

26. Косицкий Г.И. Регуляция деятельности сердца / Косицкий Г.И. // XIV съезд Всесоюз. физиол. о-ва. Баку: 1983. - Т. 2. - С. 27-28.

27. Косицкий Г.И. Регуляция деятельности сердца / Косицкий Г.И. -М.: МЗ РСФСР, 1980.-24с.

28. Косицкий Г.И. Экстракардиальная и интракардиальная нервная регуляция сердца / Косицкий Г.И. // Вестн. АМН СССР. 1984. - № 4.- С.29-32.

29. Крохина Е.М. Функциональная морфология и гистохимия вегетативной иннервации сердца / Крохина Е.М. // М.: Медицина, 1973. -229с.

30. Курмаев О.Д. Механизмы нервной и гуморальной регуляции деятельности сердца / Курмаев О.Д Казань, 1966. - 179с.

31. Марченко С.М. Ацетилхолин и АТФ гиперполяризуют эндотелий, активируя различные типы Са -активируемых К -каналов / Марченко С.М. // Бюлл. экспер. биол. и мед. -2002. Т.134,- №11. - С.490 -493.

32. Махинько В.И. Константы роста и функциональные периоды развития в постнатальной жизни белых крыс / Махинько В.И., Никитин В.Н. // Молекулярные и физиологические механизмы возрастного развития. — Киев: Наукова думка, 1975. С.308 -325.

33. Нигматуллина P.P. Показатели сердечного выброса у крыс разного возраста при блокаде oti и (3 адренорецепторов / Нигматуллина P.P., Абзалов Р.А., Миннибаев Э.Ш. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1999.- №6. -С.638-642.

34. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы / Ноздрачев А.Д. Л., - 1983. - 296с.

35. Просер JL, Браун Ф. Сравнительная физиология животных. / Просер Л., Браун Ф // Москва: 1967. 767с

36. Раевский В.В. Онтогенез функциональных систем / Раевский В.В. //Науч. труды I съезда физиол. СНГ. -2005.- т.1. С.165-166.

37. Розанова В.Д. Очерки по экспериментальной и возрастной фармакологии / В.Д.Розанова Л.: Медицина, 1968.- 223 с.

38. Савин В.Ф. Экстра- и интракардиальные механизмы регуляции частоты сердечного ритма в постнатальном онтогенезе: Автореф. дис. . канд. биол. наук/ Савин В.Ф. -Казань, 1988. 19с.

39. Самойленкова Н.С. Защитный эффект прекондиционированияIпри фокальной ишемии мозга; Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Самойленкова Н.С. Москва, 2008. - 149с.

40. Селизарова Н.О. Гемодинамические эффекты пуриновых нуклеозидов на локальную ишемию и реперфузию / Селизарова Н.О., Елисеев В.В. // Кардиология. 1992. - Т.32. - С.84 - 87.

41. Сергеев П.В. Рецепторы / Сергеев П.В., Шимановский H.JL, Петров В.И. Москва Волгоград, 1999. - 639с.

42. Ситдиков Ф.Г. Взаимоотношение адренергических и холинергических механизмов регуляции сердца при адаптации / Ситдиков Ф.Г. // Двигательная активность и симпато-адреналовая система в онтогенезе. Казань, 1987.— С.137- 140.

43. Ситдиков Ф.Г. Механизмы и возрастные особенности адаптации сердца к длительному симпатическому воздействию: Дисс. . д-ра. биол. наук / Ситдиков Ф.Г. Казань, 1974. - 312с.

44. Ситдиков Ф.Г. Адренергические и холинергические факторы регуляции сердца в онтогенезе у крыс / Ситдиков Ф.Г., Аникина Т.А., Гильмутдинова Р.И. // Бюлл. экспер. биол. и мед. -1998. №9. С.318 - 320.

45. Ситдиков Ф.Г. Динамика статистических показателей сердечного ритма белых крыс в онтогенезе / Ситдиков Ф.Г., Савин В.Ф. // Вегетативные показатели адаптации организма к физическим нагрузкам. -Казань, 1984. С. 100 - 109.

46. Ситдиков Ф.Г., Зефиров T.JI. Лекции по возрастной физиологии сердца. // Ситдиков Ф.Г., Зефиров Т.Л. // учебное пособие, Казань изд-во ТГГПУ 2006 102 с.

47. Скок В.И. Физиология вегететивных ганглиев / Скок В.И. Л, 1970.-238с.

48. Смирнов В.М. Симпатическая нервная система не участвует в развитии ваготомической тахикардии / Смирнов В.М. // Бюл. экспер. биол. и мед. 1995. - №8. - С.125-128.

49. Соколова Е.М. Пуринергическая регуляция нервно-мышечной передачи. Дисс. канд. биол. наук / Соколова Е.М. Казань, 1999. - 140с.

50. Тарасова О.С. Влияние дезипрамина на нейрогенные ответы изолированной хвостовой артерии крысы / Тарасова О.С, Зотов А.В, Родионов И.М, Голубинская В.О, Боровик А.С. // Методология флоуметрии. -2000. -№ 4. с.121-138.

51. Тарасова О.С. Пуринергический компонент симпатической регуляции системного артериального давления: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Тарасова О.С.- Москва, 2005 20с.

52. Турпаев Т.М. Медиаторная функция ацетилхолина и природа холинорецепторов / Турпаев Т.М. // -М, Изд-во АН СССР. 1962. - 140с.

53. Удельнов М.Г. Физиология сердца. М.: Изд-во МГУ, 1975 / Удельнов М.Г. // -363с.

54. Фролькис В.В. Возрастные особенности нейрогуморальной регуляции // Возрастная физиология / Фролькис В.В. Л.: Наука, 1975. -С.375-383.

55. Чинкин А.С. О состоянии холинергических процессов в тренированном организме. —В кн.: Физиол. роль медиаторов / Чинкин А.С, Курмаев О.Д // -Казань, 1972. -С.252 253.

56. Хамзина Е.Ю. Роль Р2Х-пуринорецепторов в сердечной деятельности крыс в: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Хамзина Е.Ю. -Казань, 2006. 149с.

57. Abbracchio М.Р. Purinoceptors: Are there families of P2X b P2Y purinoceptor? / Abbracchio M.P, Burnstock G. // Pharmacol. Ther. 1994.- Vol. 64.- P.445-475.

58. Abbracchio M.P. Purinoceptor nomenclature. A status report /

59. Abbracchio M.P., Cattabeni F., Fredholm B.B., Williams M. // Drug Dev. Res.i1993. V.28-P.207-213.

60. Auchampach J.A. Adenosine receptor subtypes in the heart: therapeutic opportunities and challenges / Auchampach J.A., Bolli R. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.-1999.-V.276(3). P. 1113 - 1116.

61. Benham CD, and Tsien RW. A novel receptor-operated Ca2+-permeable channel activated by ATP in smooth muscle. / Benham CD, and Tsien RW//Nature : 275-278, 1987

62. Bennett G. The effect of nucleotides and adenosine on stimulus-evoked glutamate release from rat brain cortical slices / Bennett G., Boarder M. // Br. J. Pharmacol.- 2000. -V. 131. P.617 - 623.

63. Bidet M. Extracellular ATP increases CA2+.i in distal tubule cells. I. Evidence for a P2Y2 purinoceptor / Bidet M., Renzis G., Martial S., Rubera I., Tauc Т., Poujeol P. // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2000. - V. 279. - P.92-101.

64. Во Ни P2X Receptors in Trigeminal Subnucleus Caudalis Modulate Central Sensitization in Trigeminal Subnucleus Oralis / Bo Hu, Chiang C., Hu J., Dostrovsky J., Sessle B. // J. Neurophysiol. 2002. - V.88. - № 4. - P.1614 -1624.

65. Во X. A P2X purinoceptor cDNA conferring a novel pharmacological profile / Во X., Zhang Y., Nassar M., Burnstock G., Schoepfer R. //FEBS Lett. -1995.-V. 375. P.129-133.

66. Boehm S. Fine tuning of sympathetic transmitter release via ionotropic and metabotropic presynaptic receptors / Boehm S., Kubista H. // Pharmacol. Rev.- 2002. V. 54. - № 1. - P.43-99.

67. Boehm S. Fine Tuning of Sympathetic Transmitter Release via Ionotropic and Metabotropic Presynaptic Receptors / Boehm S., Kubista H. // Pharmacol. Rev. -2002. V.54 (1). - P.43 - 99.

68. Boyer JL Identification of competitive antagonists of the P2Yj receptor. / Boyer JL, Romero-Avila T, Schachter JB, and Harden TK. // Mol Pharmacol 50: 1323-1329, 1989

69. Bradley E. Effects of varying impulse number on cotransmitter contributions to sympathetic vasoconstriction in rat tail artery / Bradley E., Law A., Bell D., Johnson C. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.- 2003. V.284. -№ 6.- P.2007-2014.

70. Brodde O.E., Konschak U., Becker K., Ruter F., Poller U., Jakubetz J., Radke J., Zerkowski H.R. / J. Clin. Invest. 1998. V.101(2) P.471-478

71. Brouns I. Intraepithelial vagal sensory nerve terminals in rat pulmonary neuroepithelial bodies express Р2Хз receptors / Brouns I., Adriaensen D., Burnstock G ., Timmermans J.P. // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 2000. -V.23. P.52-61.

72. Browse D.J. The role of ATP and adenosine in the control of hepatic blood flow in the rabbit liver in vivo / Browse D.J., Mathie.R., Benjamin I., Alexander В. // Сотр. Hepatol. 2003. -V. 2. - P.9-12.

73. Burnstock G. Purinergic nerves / Burnstock G. // Pharmacol. Rev. -1972.-V.24.-P.508-581.1 ' . ' ■ ' '1 ' ' . ! / 1 .' ( ' ' ' ' ." , ' ,

74. Burnstock G. Distribution and roles of purinoceptor subtypes / Burnstock G. // Nucleos. Nucleot. 1991. - V. 10. - P.917-930.

75. Burnstock G. Noradreline and ATP as cotransmetters in sympathetic nerves / Burnstock G. // Neurochem. Int. 1990b.-V. 17. - P.357 - 368. 'i,'.

76. Burnstock G. Classification and characterization of purinoceptors / Burnstock G. // Purines in cellular Signalling Targets for New Drug / Eds. Jacobson K.A., Daly J.W., Manganiello V. - New York: Springer- Verlag, 1990. -P.241-253. . , ■ '";Г 1;

77. Burnstock. G. , Purinergic signaling / Burnstock G. // Brit. J. Pharmacol. 2006. -V.147. - P. 172-187. . \

78. Burnstock G. Numbering of cloned P2 purinoceptors / Burnstock G., Kind B.l;. // Drug. Dev. Res. -1996. V.38. -P.67-71. s i

79. Burnstock G. Vascular control by purines with emphasis on the coronary system/ Burnstock G.// Eur. Heart J; 1989. V. 10. P. 15-21.'

80. Burnstock G. and Meghjip P. The effect of adenyl compounds on the rat heart / Burnstock G. and Meghjip P/ // Br J.Pharmacol: P. 211-218, 1983

81. Champe. Lippincott's Illustrated Reviews. / Champe //Biochemistry. Third edition, 2004, 127 p.

82. Chapman B.I. Measurement of the cardiac output in the rat by impedance cardiography / Chapman B.I., Chen C.F., Munday K.A // J. Physiol (Lond.). 1977. - Y.270. -P.234-241.

83. Chen Z.-P. Nucleotides as extracellular signaling molecules / Chen Z.-P., Levy A., Lightman S.L. // J. Neuroendocrinol. 1995. - V.7. - P. 83-96.

84. Chen C.C. A P2X purinoceptor expressed by a subset of sensory neurons Chen C.C., Akoplian A.N., Sivilotti L. Colquhoun D., Burnstock G / Nature: 428-431, 195

85. Christie A, Sharma YK, and Sheu SS. Mechanism of extracellular ATP-induced increase of cytosolic Ca2+ concentration in isolated rat ventricular myocytes. / Christie A, Sharma YK, and Sheu SS. // J Physiol (Lond): 369-388, 1992

86. Chizh В. P2X Receptors and Nociception / Chizh В., Illes P. // Mol. Pharmacol. 2001. - Y.53. - P.553-568.

87. Churchill P. C. Pharmacological characterization of the renovascular P2 purinergic receptors / Churchill P. C., Ellis V.R. // J. Pharmacol. Exp. Ther. -1993a.-V. 265. -P.334-338.

88. Collo G. Cloning of P2X5 and P2X6 receptors and the distribution and properties of an extended family of ATP-gated ion channels. / Collo G, North RA, Kawashima E, Merlo-Pich E, Neidhart S,, Surprenant A, and Buell G J // Neurosci: 2495-2507, 1996

89. Cuiling L. Extracellular ATP facilitates flow-induced vasodilatation in rat small mesenteric arteries / Cuiling L., Mather S., Huang Y., Garland C., Xiaoqiang Ya // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2004. -V.286. - PI 6881695.

90. Denniston I.С. Measurement of cardiac output by electrical impedance at rest and during exercise / Denniston I.C, Makes J.T, Reeves J.T. et al // J. Apll. Physiol. 1976. - V.40, №1. - P.91-95.

91. De Young M.B. ATP receptor-induced Ca2+ transients in cardiac myocytes: sources of mobilized Ca2+ / De Young M.B, Scarpa C. // Am. J. Physiol. -.1989. V.257 (4). - P.750-8.

92. Dorigo P. Negative and positive influences exerted by purine compounds on isolated guinea pig atria. / Dorigo P, Gaion RM, and Maragno I. // J Auton Pharmacol: 191-196, 1988

93. Drury A.N. The physiological activity of adenine compounds with special reference to their action upon the mammalian heart / Drury A.N, Szent-Gyorgyi A. // J. Physiol. (London). 1929. -V.68. -P.213-237.

94. Ennion S. The role of positively charged amino acids in ATP recognition by human P2Xi receptors / Ennion S, Hagan S, Evans R.J. // J. Biol. Chem. -2000. V. 275. - P. 29361-29367.

95. Erlinge D. Characterisation of an ATP receptor mediating mitogenesis in vascular smooth muscle cells / Erlinge D, You J, Wahlestedt C, Edvinsson L. //Eur. J. Pharmacol. 1995. -V. 289. -P.135-140.

96. Favale S. Effect of adenosine and adenosine-5'-triphosphate on atrioventricular conduction in patients / Favale S, Di Biase M, Rizzo U, Belardinelli L, Rizzon P//J. Am. Coll. Cardiol.-V. 5 (5).-P. 1212-1219.

97. Fleetwood G. Purinoceptors in the rat heart / Fleetwood G, Gordon J. // Br. J. Pharmacol.- 1987. -V.90 (1). P.219-227.

98. Fleetwood G. Kinetics of adenine nucleotide catabolism in coronary circulation of rats / Fleetwood G, Coade SB, Gordon JL, and Pearson JD. // Am J Physiol Heart Circ Physiol: P1565-1572, 1989

99. Freedholm B.B. Receptor nomenclature / Freedholm B.B., Burnstock G., Harden Т.К., Spedding M. // Drug Dev. Res 1996 - V.39.- P.143-156.

100. Freedholm B.B. Towards a revised nomenclature for PI and P2 receptors / Freedholm B.B., Abbracchio M.P., Burnstock G., Dubyak R.R., Harden Т.К., Jacobson K.A., Schabe U., Williams M. // Trends Pharmacol. Sci. -1997.- V.18.- P.79-82.

101. Freedholm B.B. Nomenclature and classification of purinoceptors / Freedholm B.B., Abbracchio M.P., Burnstock G., Daly J.W., Harden Т.К., Jacobson K.A., Leff P., Williams M. // Pharmacol. Rev. -1994. Y.46. P.143-156.

102. Froldi G. P2X-purinoceptors in the heart: actions of ATP and UTP. / Froldi G., Yarani K, Chinellato A, Ragazzi E, Caparrotta L, and Borea PA // Life Sci: 1419-1430, 1997

103. Forrester T. Release of ATP from heart / Forrester T. //Biological Actions of Extracellular ATP / Eds. Dubyak G.R., Fedan J.S. New York: N. Y. Acad. Sci.-1990.-P.335-352.

104. Gillespie JH. The biological significance of the linkages in adenosine triphosphoric acid. / Gillespie JH. // J Physiol (Lond): 345-359, 1933

105. Gordon J.L. Extracellular ATP: effects, Sources and fate / Gordon J.L //Biochem. J. -1986. Y.233. -P.309-319.

106. Grosman C. Mapping the conformational wave of acetylcholine receptor channel gating / Grosman C., Zhou M.s Auerbach A. // Nature (Lond) -2000.-V. 403. P.773-779.

107. Haines W. Properties of the novel ATP-gated ionotropic receptor composed of the P2Xi and P2X5 isoforms / Haines W., Torres G., Voigt M., Egan T. // Mol. Pharmacol. 1999. - Vol. 56. - № 4. - P. 720-727.

108. Hamilton S.G. ATP as a peripheral mediator of pain / Hamilton S.G., McMahon S.B // J. Auton. Nerv. Syst. 2000. V. 81. - P. 187-194.

109. Hansmann G. Characterization by antagonists of P2-receptors mediating endothelium-dependent relaxation in the rat aorta / Hansmann G.,

110. Biiltmann R., Tuluc F., Starke K. // Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol . -1997.-V.356. -P.641-652.

111. Hara Y. and Nakaya H. Dual effects of extracellular ATP on the muscarinic acetylcholine receptor-operated K+ current in guinea pig atrial cells / Hara Y. and Nakaya H. // Eur J Pharmacol: 295-303, 1997

112. Hohl C.M. Vascular and contractile responses to extracellular ATP: studies in the isolated rat heart / Hohl C.M., Hearse D.J. // Can. J. Cardiol. -1985. V.l(3). -P.207-16.

113. Hollander PB, and Webb JL. Effects of adenine nucleotides on the contractility and membrane potentials of rat atrium. / Hollander PB, and Webb JL. // Circ Res: 349-353, 1957

114. Hopwood A.M. ATP mediates coronary vasoconstriction via P2X-purinoceptors and coronary vasodilatation via P2Y- purinoceptors in the isolated perfused rat heart / Hopwood A.M., Burnstock G. // Eur. J. Pharmacol. 1987. V.136 (1). - P.49-54.

115. Horiuchi T. Comparison of P2 Receptor Subtypes Producing Dilation in Rat Intracerebral Arterioles / Horiuchi Т., Dietrich H.H., Hongo k., Dacey Jr. // Stroke. 2003. - V.34 (6). -P. 1473 - 1478.

116. Horiuchi T. Analysis of purine- and pyrimidine-induced vascular responses in the isolated rat cerebral arteriole / Horiuchi Т., Dietrich H.H., Tsugane S., Dacey Jr. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2001. -V. 280 (2) -P.767 - 776.

117. Hoyle C.H.V. A review of the pharmacological activity of adenine dinucleotides in the periphery: possible receptor classes and transmitter function / Hoyle C.H.V. // Gen. Pharmacol. 1990. - V.21. -P.827 - 831.

118. Hoyle C.H.V. Transmission: Purines / Hoyle C.H.V. // Autonomic Neuroeffector Mechanisms / Eds. G. Burnstock, Hoyle C.H.V. Chur: Harwood Academic Pudlishers, 1992. - P.367-407.

119. Hugel S. Presynaptic P2X receptors facilitate inhibitory GABAergic v transmission between cultured rat spinal cord dorsal horn neurons / Hugel S.,

120. Л ' Schlichter R. //J. Neurosci. 2000. V.20. P.2121-2130. "'V^;' ; " ; , '

121. Humphrey P.P. P2X Receptors, in The IUPITAR Compendium of Receptor Characterization and Classification (International Union of Pharmacology Committee on Receptor Nomenclature and Drug Classification) / V '

122. Humphrey P.P., Khakh B.S., Kennedy C., King B.F., Burnstock G. // IUPHARv.' Media, London. 1998. - P. 195-208. v,.'J';.1 ■ ■' ;;■ , '?'r■!:"■ 'V': ^'.'.': ■'; ! , : , , ' 129. Illes P. Signaling by, extracellular nucleotides and nucleosides / Illes

123. P., Klotz K.-N., Lohse M.J. //Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 2000. : . / •

124. Ь'' •"'.'V -V. 362.- P.295-298. / ' ;"/ 'Я ' ' ' ;

125. Illes P. Molecular physiology of P2 receptors in the central nervous .

126. V system / Illes P., Ribeiro J: // Eur. J. Pharmacol. 2004. - V.483. - P.5-17. ,

127. Liver Physiol. 2000- ^279(4).' -P.740 - 747./;:• j'/Л г':;;'!:/ Л ■ ',-.V■ /

128. Jarvis M. Modulation of BzATP and formalin induced nociception: . ' у , i attenuation by the P2X "receptor antagonist, TNP-ATP and enhancement by the, P2X3 allosteric modulator, cibacron blue / Jarvis M., Wismer C., Schweitzer E., ; v.;

129. Yu H., Biesen Т., Lynch K:, Burgard E., Kowaluk E. // Br. J. Pharmacol.- 2001. ;f;/. V. 132. P.259 - 269. ' ■' \'v/ : ^ -'Vr/v•'■".;'135. Jianhua L. Heart Failure Modulates the Muscle Reflex / / Janhua L., '•

130. Lawrence S. //Cur. Card. Rew. -2005. V.l. № 1. -P.7-16. ' ■ ':-.v'"'v/.

131. Jones С.A. Functional characterization of the P2X4 receptor orthologues / Jones C.A, Chessell I.P, Simon J, Barnard E.A, Miller K.J, Michel A.D, Humphrey P.P.A. // Br. J. Pharmacol. -2000. V. 129. -P.388-394.

132. Katchanov G. Electrophysiological-anatomic correlates of ATP-triggered vagal reflex in the dog. / Role of cardiac afferents / Katchanov G, Xu J, Hurt C.M, Pelleg A. //Am. J. Physiol. 1996. -P. 1785-1790.

133. Katsuragi T, Tokunaga T, Ohba M. et al Implication of ATP released from atrial, but not papillary, muscle segments of guinea-pig by isoproterenol and forskolin // Life Sci. 1993. V.53. -P.361-367.

134. Kennedy C. P2-purinoceptors mediate both vasodilation (via the endothelium) and vasoconstriction of the isolated rat femoral artery / Kennedy C., Delbro D., Burnstock G. // Eur. J. Pharmacol. -1985. -V. 107. -P.161-168.

135. Khakh B. ATP Receptor-Mediated Enhancement of Fast Excitatory Neurotransmitter Release in the Brain / Khakh B, Henderson G. // Mol. Pharmacol. -1998. V. 54. - № 2. - P. 272-378.

136. Kichenin К. Cardiovascular and pulmonary response to oral administration of ATP in rabbits / Kichenin K., Decollogne S., Angignard J., Seman M. // J. App.l Physiol. 2000. - V. 88. - N. 6. - P. 1962-1968.

137. King B. Investigation of the effects of P2 purinoceptor ligands on the micturition reflex in female urethane-anaesthetized rats / King В., Knowles I., Burnstock G., Ramage A. // Br. J. Pharmacol.- 2004. -V.142. P.519 - 530.

138. Kitchen M. Mechanisms mediating NTS P2X receptor-evoked hypotension: cardiac output vs. total peripheral resistance / Kitchen M., Collins H., DiCarlo S., Scislo Т., O'Leary D. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. -2001. -V. 281. P. 2198 - 2203.

139. Knight G.E. The effects of purine compounds on the isolated aorta of the frog Rana temporaria / Knight G.E ., Burnstock G. // Br. J. Pharmacol. -1996. -V. 117. -P.873-878.

140. Kurz A.K. Release of ATP in rat vas deferens: origin and role of calcium / Kurz A.K., Bultman R., Driessen b., von Kugelgen I., Starke K. // Naunyn-Schiedeberg's Arch. Pharmacol. 1994. V.350. P.491-498.

141. Leff P. Suramin is a slowly-equilibrating but competitive antagonist at P2X-receptors in the rabbit isolated ear artery / Leff P., Wood B.E., O'Connor S.E. //Br. J. Pharmacol. -1990. V.101. -P.645-649.

142. Li P. P2x receptors and sensory synaptic transmission between primary afferent fibers and spinal dorsal horn neurons in rats / Li P., Calejesan A.A., Zhuo M. //J. Neurophysiol.- 1998. -V.80 (6). P.3356-3360.

143. Liu C. Extracellular ATP facilitates flow-induced vasodilatation in rat small mesenteric arteries / Liu C., Mather S., Huang Y., Garland C.,Yao X. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. -2004. -V. 286. -P.l688-1695.

144. Liu S.F. Evidence for two P2-purinoceptor subtypes in human small pulmonary arteries / Liu S.F., McCormack D.G., Evans T.W., Barnes P J. // Br. J. Pharmacol. -1989. V.98 (3). 1014 -1020.

145. Liu Qu-Yi. Stimulation of cardiac L-type calcium channels by extracellular ATP / Liu Qu-Yi, Rosenberg R. // Am. J. Physiol. Cell Physiol. -2001.-V.280.-P.1107-1113.

146. Mantelli L. Blockade of adenosine receptors unmasks a stimulatory effects of ATP on cardiac contractility / Mantelli L. Amerinis, Flippi S., Ledda F // Br J. Pharmacol 1993: H 1268-1271

147. Mahmod S.M. Purinergic modulati on of spontaneous activity and of responses to high potassium and acetylcholine in rat ileal smooth muscle / Mahmod S.M., Huddart H // Сотр. Biochem. Physiol .C. 1993. - V.106 (1). -P.- 79-85.

148. M. Farias III. Plasma ATP during exercise: possible role in regulation of coronary blood flow / M. Farias III, Gorman M. W., Savage M. V., Feigl E. О // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2005. -V.288 (4). -P.1586 -1590.

149. McFedzean I. The developing relationship between receptor -operated and store operated calcium channels in smooth muscle / McFedzean I., Gibson A // Br. J. Pharmacol.- 2002. -V.135. - P.l - 13.

150. McKitrick D.J. Intrathecal injection of ATP decreases heart rate in anasthetised rats / McKitrick D.J., Powers K., Arnolda L.F. // Br. J. Pharmacol. -1999. V.76. - P.l 18-126.

151. McLaren G.J. Evidence that ATP acts at two sites to evoke contraction in the rat isolated tail artery / McLaren G.J., Burke K.S., Buchanan K.J., Sneddon P., Kennedy C. // Br. J. Pharmacol. 1998. - V. 124. P.5-12.

152. McMillan M. R. Vasodilatation of intrapulmonary arteries to P2-receptor nucleotides in normal and pulmonary hypertensive newborn piglets / McMillan M. R., Burnstock G., Haworth S. G. // Br. J. Pharmacol. 1999. V.128 (3).-P. 543 -548.

153. McQueen D.S. Activation of P2X receptors for adenosine triphosphate evokes cardiorespiratory reflexes in anaesthetized rats / McQueen D.S, Bond S. M, Moores C, Chessell I, Humphrey P. P. A, Dowd E. // J. Physiol. 1998. - V.507. - No. 3. -P. 843-855.

154. Mei Q. P2 purinergic receptor activation enhances cardiac contractility in isolated rat and mouse heart / Mei Q, Liang В // Am. J. Heart Physiol. Circ. Physiol.- 2001. V.281. -P.334-341.

155. Mironneau J. Calcium signalling through nucleotide receptor P2X1 in rat portal vein myocytes / Mironneau J, Coussin F, Morel J.L, Barbot C, Jeyakumar L.H, Fleischer S, Mironneau C. // J. Physiol. 2001. - V.536 (2). -P.339 - 350.

156. Mori M. Fast synaptic transmission mediated by P2X receptors in CA3 pyramidal cells of rat hippocampal slice cultures / Mori M, Heuss C, Gahwiler B, Gerber U. // J. Physiol. 2001. - V.535. - P. 115-123.

157. Neri S. Coexpression of mRNAs for P2X1, P2X2 and P2X4 receptors in rat vascular smooth muscle: an in situ hybridization and RT-PCR study / Nori S, Fumagalli L, Во X, Bogdanov Y, Burnstock G. // J. Vase. Res. 1998.-V. 35(3).-P.179-185.

158. Nicke A. Biochemical and functional evidence for heteromeric assembly of P2Xj and P2X4 subunits / Nicke A, Kerschensteiner D, Soto F. // J. Neurochem. 2005. - V. 92. - No 4. - P.925.

159. North A.R. The P2X3 subunit: A molecular arget in pain therapeutics / North A.R. // Cur. Opinion Invest. Drugs. 2003. - V.4 (7). P.833-840.

160. Olearczyk J. J. Heterotrimeric G protein Gi is involved in a signal :;• transduction pathway for ATP release from erythrocytes / Olearczyk J. J.,; ; , ;!

161. Stephenson A. H., Lonigro A. J., 1 Sprague R. S.// Am. J. Physiol. Heart Circ. ,, s ' Physiol.-2004.-V.286(3).-P.940-945, V,^ 4'У

162. Olsson RA; and Pearson JD. Cardiovascular purinoceptors. /: Olsson ; ^ м

163. RA, and Pearson JD. // Physiol Rev 70: 761-845, 1990 ; ; , ; / У;У'ё;'• У;

164. Osborn B.E. The electrocardiogram (ECY) of,the rat / Osbom B.E. // , , л Rat Electrocardiogram Pharmacol and Toxucol; Proc. Int.: Workshop, Hannover, Oxfrorde.a. 1981.-P. 15-28. '' --.л ^ ':\''-^.v У'.',<: ; 'У

165. Parker K.E. ATP-activated nonselective cation channel in guinea pig : , ventricular myocytes I Parker K.E., Scarpa A II Am. J. Physiol. - 1995. - V.269 , , , ; , (3). - p.789-97. ; л У У, Уо'У' :УУуУ '^УУ У УЛ:!,У<::'. У'.1'1.';'У;У;

166. Pelleg A. Vagal component in the chronotropic and dromotropic actions of adenosine and ATP / Pelleg A., Mitsuoka Т., Mazgalev Т., Michelson. //Prog. Clin. Biol. Res. 1987. - V.230. -P.375-384.

167. Pelleg A. ATP shortens atrial action potential duration in the dog: role of adenosine, the vagus nerve, and G protein / Pelleg A., Hurt C.M., Hewlett E.L. // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1996. - V.74 (1).- P.15-22.

168. Pelleg A. Purinergic modulation of neural control of cardiac function / Pelleg A., Katchanov G., Xu J.// J/ Auton/ Pharmacol. 1996. - V.16 (6). -P.401-405.

169. Pelleg A. Autonomic neural control of cardiac function: modulation by adenosine and adenosine 5' triphosphate / Pelleg A., Katchanov G., Xu J. // Am. J. Cardiol. - 1997. V.79 (12A). - P.l 1-14.

170. Pelleg A. Electrophysiological-anatomic correlates of ATP-triggered vagal reflex in dogs / Pelleg A., Hurt J.M., Soler-Baillo., Polansky M. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 1993. V.265. -№ 2. P.681-690.

171. Pelleg A. Mechanism of action ATP on canine pulmonary vagal С fibre nerve terminal / Pelleg A., Hurt C.M. // J. Physiol. -1996. V.490. P.265-275.

172. Podrasky E, Xu D, and Liang ВТ. A novel phospholipase C- and cAMP-independent positive inotropic mechanism via a P2 purinoceptor. / Podrasky E, Xu D, and Liang ВТ.// Am J Physiol: H2380-H2387, 1997.

173. Ralevic V. Receptors for Purines and Pyrimidines / Ralevic V., Burnstock G // Pharmacol. Rev. -1998. -V. 50. No 3. - P.413-492.

174. Ralevic V. Roles of P2-purinoceptors in the cardiovascular system / Ralevic V., Burnstock G // Circulation. -1991. -V. 84. P. 1-14.

175. Rubino A; Amerini S; Ledda F; Mantelli L // ATP modulates the efferent function of capsaicin-sensitive neurones in guinea-pig isolated atria. Br J Pharmacol 1992 Mar; 105(3): p516-20.

176. Sasaki N. ATP consumption by uncoupled mitochondria activates sarcolemmal KAtp channels in cardiac myocytes / Sasaki N, Sato T, Marban E, O'Rourke B. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2001. -V. 280. -P. 18821888.

177. Scamps F. The mechanism of positive inotropy induced by adenosine triphosphate in rat heart. / Scamps F. Legssyer A, Mayoux E, and Vassort G. // Circ Res: 1007-1016, 1990

178. Scamps F. Modulation of L-type Ca channel activity by P2-purinergic agonist in cardiac cells. / Scamps F, Nilius B, Alvarez J, and Vassort G Pflugers // Arch: 465-471, 1993

179. Scamps F. A Gs protein couples P2-purinergic stimulation to cardiac Ca channels without cyclic AMP production. / Scamps F. Rybin V, Puceat M, Tkachuk V, and Vassort G // J Gen Physiol: 675-701, 1992.

180. Scamps F. and Vassort G. Effect of extracellular ATP on the Na+ current in rat ventricular myocytes. / Scamps F. and Vassort G // Circ Res: 710717, 1994.

181. Scamps F, and Vassort G. Pharmacological profile of the ATP-mediated increase in L-type calcium current amplitude and activation of a nonspecific cationic current in rat ventricular cells. / Scamps F, and Vassort G. // Br J Pharmacol: 982-986, 1994

182. Scislo T.J. Purinergic mechanisms of the nucleus of the solitary tract and neural cardiovascular control / Scislo T.J, O'Leary D.S. // Neurol. Res. -2005. V.27 (2). - P. 182-194.137 , i

183. Shacher J.B., Sromek S.M, Nicholas A.A., et al Human embryonic kidney cells endogenously expess the P2Y1 and P2Y2 receptoss // Europharmacology. 1997. - V.36. - P. 1181-1187

184. Shinozuca K. Release of endogenous ATP from the caudal artery in rats with arterosclerosis / Shinozuca K., Kitagawa S., Kunitomo M., Yamaguchi Y., Tanabe., Fujiwara M., Hattori K. // Eur. J. Pharmacol. -1994. V.292. -P.l 15-118.

185. Sillinsky E.M. Gtrzanich V. ATP mediates excitatory synaptic transmission in mammalian neurons / Sillinsky E.M. Gtrzanich V. Vanner S. M. // Br. J. Pharmacol. 1992, P. 762-763.

186. Simonsen U. Involvement of ATP in the non-adrenergic non-cholinergic inhibitory neurotransmission of lamb isolated coronary small arteries / Simonsen U., Garci'a-Sacristan A., Prieto D. // Br. J. Pharmacol. -1997. V.120. -P.411-420.t

187. Sneddon P. ATP as a co-transmitter in rat tail artery / Sneddon P., Burnstock G.//Eur. J.Pharmacol.-1984. -V. 106.- P.149-152.

188. Soltoff S.P. Cantley L.C. Bljcade of ATP binding site of P2 purinoceptors in rat parotid acinar cells by isotiocyanate compounds / Soltoff S.P., McMillian M.K., Cantley L.C // Biochem. Pharmacol. -1993-V.45- P.1936-1940.I

189. Soto F. P2X4: An ATP-activated ionotropic receptor cloned from rat brain / Soto F., Garcia-Guzman M., Gomez-Hernandez J., Hollmann M., Karschin C., Stuhmer W. // Neurobiol. 1996. -V. 93- No. 8. -P. 3684-3688.

190. Spedding M. Antagonism of adenosine 5" -triphosphat-induced relaxation by 2-2"-pyridylisatogen in the taenia of guinea-pig caecum / Spedding M,, Sweetman A.J., Weetman D.F.// Brit. J. Pharmacol. 1975. -V.53. -P.575-583.

191. Sprague R. S. Extracellular ATP signaling in the rabbit lung: erythrocytes as determinants of vascular resistance / Sprague R. S., Olearczyk J.

192. J., Spence D. M., Stephenson A. H.5 Sprung R. W., Lonigro A. J. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2003. - V.285 (2). - P.693 - 700.

193. Stoner HB, Green HN, and Threlfall CJ. Bodily reactions to trauma. A possible role of nucleotides in cardiac ischaemia. / Stoner HB Green HN, and Threlfall CJ. // Br J Exp Pathol 29: 419-446, 1948

194. Surprenant A P2X receptors bring new structure to ligand-gated ion channels. / Surprenant A, Buell G, and North RA. // Trends Neurosci: 224-229, 1995

195. Takikawa R. Adenosine-5'-triphosphate-induced sinus tachycardia mediated by prostaglandin synthesis via phospholipase С in the rabbit heart. / Takikawa R Kurachi Y, Mashima S, and Sugimoto T. // Pflugers Arch: 13-20, 1990

196. Talukder M. A. Comparison of the vascular effects of adenosine in isolated mouse heart and aorta / Talukder M. A., Morrison R. R., Mustafa S. J. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.- 2002. V.282 (1). - P.49 - 57.

197. Tereza-Miras M. P2D Purinoceptors. / Tereza-Miras M. Enrique Castro, Jesus Mateo, Jesus Pintor // Ciba Foundation symposium 198-P2 Purinoceptors: Localization, Function and Transduction Mechanisms. 28 sep. 2007.

198. Thapaliya S. ATP released from perivascular nerves hyperpolarizes smooth muscle cells by releasing an endothelium-derived factor in hamster mesenteric arteries / Thapaliya S., Matsuyama H., Takewaki T. // J. Physiol. -1999.-V.521 (1). -P.191 199.

199. Todorov L. Inhibitory and facilitatory effects of purines on transmitter release from sympathetic nerves / Todorov L., Bjur R.A., Westfall D.P. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994. -V.268. - P.985-989.

200. Trezide D.J. Characterization of purinoceptors mediating depolarization of rat isolated vagus nerve / Trezide D.J, Kennedy I, Humphrey P.P. // Br. J. Pharmacol.- 1993. -V.l 10 (3). P. 1055-60.i

201. Tsuda M. Evidence for the involvement of spinal endogenous ATP and P2X receptors in nociceptive responses caused by formalin and capsaicin in mice / TsudaM, Ueno S, Inoue К // Br. J. Pharmacol.- 1999. -V.128. P.1497 -1504.

202. Tsuzuki K. TNP-ATP-resistant P2X ionic current on the central terminals and somata of rat primary sensory neurons / Tsuzuki K, Ase A, SeguelaP, NakatsukaT, WangC, She J, Gu J. // J. Neurophysiol. -2003, V.89. -P. 3235-3242.

203. Valera S. Presinaptic receptors / Michel A.D, Lundstrom K, Buell G.N, Surprenant A, , Humphrey P.P. // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1998. V.38. -P.201-2271 , i

204. Vassort G. Adenosine 5'-Triphosphate: a P2-Purinergic Agonist in the Myocardium /.Vassort G. // Physiol. Rev. -2001. V. 81. - No. 2. - P. 767806.

205. Virginio С Effects of divalent cations, protons and calmidazolium at the rat P2X7 receptor. / Virginio C, Church D, North RA, and Surprenant A. // Neuropharmacology: 1285-1294, 1997.

206. Virginio С Calcium permeability and block at homomeric and heteromeric P2X2 and P2X3 receptors, and P2X receptors in rat nodose neurones. / Virginio C, North RA, and Surprenant A. // J Physiol (Lond): 27-35, 1998

207. Von Kugelgen I. P2-purinoceptor-mediated inhibition of noradrenaline release in rat atria / Von Kugelgen I, Stoffel D, Starke K. // B.r J. Pharmacol. 1995. - V.l 15. -P.247-254.

208. Voogd Т.Е. Recent research on the biological activity of suramin / Voogd Т.Е., Vansterkenburg E.L.M, Wilting J, Janssen L.H.M. // Pharmacol. Rev. -1993. -V. 45. -P.177-203.

209. Wickman К. and Clapman D.E. Physiol Rev 75 -1995 P. 865-885

210. Webb Т.Е. Molecular biology of P2y purinoceptors: Expression in heart / Webb Т.Е., Boluyt M.O., Barnard E.A. // J. Auton. Pharmacol. 1996. -V.16. -P.303-307.

211. White T.D. Characteristics of neuronal release of ATP / White T.D. // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 1984. -V.8. - P.487-493.

212. White T.D., McDonald W.F. Neural release of ATP and adenosine //Biological Actions of extracellular ATP / Eds. Dubyak G.R., Fedan J.S. New York: N.Y.Acad.Sci. - 1990. - P.287-299.

213. Wu S.N. Activation of muscarinic K+ channels by extracellular ATP and UTP in rat atrial myocytes/ Wu S.N., Liu S.I., Hwang T.L. // J. Cardiovasc. Pharmacol.-1998. V.31(2) / - P.203-211.

214. Yamada M. P2-purinoceptor activation stimulates phosphoinositide hydrolysis and inhibits accumulation of cAMP in cultured ventricular myocytes // Yamada M., Hamamori Y, Akita H, and Yokoyama M. Circ Res: 477-485, 1992

215. Zhong Y. Guinea-pig sympathetic neurons express varying proportions of two distinct P2X receptors / Zhong Y., Dunn P.M., Burnstock G. // J. Physiol. (Lond). -2000. -V. 523 -P.391-402.

216. Zimmermann H. Signaling via ATP in the nervous system / Zimmermann H.// Trends Neurosci. 1994.-V.17. - P.420-426.

217. Zimmermann H. Extracellular metabolism of ATP and other nucleotides / Zimmermann H. // Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol. -2000.-V. 362. -P.299-309.

Информация о работе

Зверев, Алексей Анатольевич
кандидата биологических наук
Казань, 2008
ВАК 03.00.13

Диссертация

Роль АТФ и пуринорецепторов в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы