Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Борисова, Анна Аркадьевна

Введение

1.1 Актуальность проблемы

1.2 Цель и задачи исследования

1.3 Научная новизна работы

1.4 Практическая значимость работы

1.5 Структура диссертации

1.6 Публикации и апробация 9 Обзор литературы

2.1 Распространение L-аспарагиназ и противоопухолевая 11 активность

2.2 Биосинтез фермента у микроорганизмов

2.2.1 Локализация аспарагиназы

2.2.2 Регуляция образования аспарагиназы у микроорганизмов

2.2.2.1 Катаболитная репрессия глюкозой как основной механизм 16 регуляции биосинтеза

2.2.2.2 Биосинтез субстратов L-аспарагиназы

2.2.2.3 Биосинтез углеродных предшественников L-аспарагина и 18 L-глутамина в метаболических путях ЦТК

2.2.2.4 Ассимиляция аммония у бактерий

2.3 Механизм ферментативной реакции

2.4 Физико-химические свойства и строение бактериальных 27 L-аспарагиназ

2.4.1 Оптимум рН и температуры действия

2.4.2 Изоэлектрическая точка

2.4.3 Субъединичное строение

2.4.4 Кинетическая характеристика аспарагиназ

2.5 Выделение и очистка L-аспарагиназ

2.6 Характеристика L-аспарагиназ Erw. carotovora и Е. coli

2.7 Оптимизация культивирования и синтеза рекомбинантных 39 белков

2.8 Гетерологическая экспрессия L-аспарагиназ

2.9 Использование бактериальных L-аспарагиназ в онкологии

2.10 Модифицированные (иммобилизованные) препараты 50 аспарагиназ

Материалы и методы исследования

3.1 Квалификация реактивов

3.2 Среды и антибиотики

3.3 Штаммы микроорганизмов

3.4 Определение аспарагиназной активности

3.4.1 Метод прямой несслеризации

3.4.2 Качественное определение аспарагиназной активности в бактериальных клетках

3.5 Определение концентрации белка

3.6 Определение концентрации глюкозы

3.7 Выращивание продуцентов L-аспарагиназы

3.7.1 Культивирование штаммов Erw. carotovora и Е. coli

3.7.2 Индукция экспрессии L-аспарагиназы

3.8 Выделение и очистка фермента

3.8.1 Ультразвуковая дезинтеграция клеток

3.8.2 Фракционирование сульфатом аммония

3.8.3 Освобождение от сульфата аммония хроматографией на колонке с Сефадексом G

3.8.4 Хроматография на колонках с SP- или СМ-Сефарозой

3.8.5 Концентрирование фермента

3.8.6 Лиофилизация препарата

3.9 Электрофорез в ПААГ/ДСН

ЗЛО Изоэлектрофокусирование

3.11 Определение N-концевой аминокислотной последовательности

3.12 Изучение кинетических параметров L-аспарагиназы

3.13 Масс-спектрометрический анализ L-аспарагиназы

Результаты исследования и их обсуждение

4.1 Оптимизация культивирования рекомбинантных штаммов

Е. coli - продуцентов L-аспарагиназы Erw. carotovora

4.2 Выделение и очистка рекомбинантной L-аспарагиназы

Erwinia carotovora

4.2.1 Выделение L-аспарагиназы Erwinia carotovora из дикого штамма

4.2.2 Выделение рекомбинантной L-аспарагиназы Erwinia carotovora

4.3 Физико-химическая характеристика L-аспарагиназы Erwinia carotovora

4.4 Кинетическая характеристика фермента

4.5 Результаты доклинического изучения рекомбинантной

L-аспарагиназы на лабораторных животных

Введение Диссертация по биологии, на тему "Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства"

1.1. Актуальность проблемы

Ферменты представляют собой уникальные лекарственные средства, используемые в медицине для лечения заболеваний различной этиологии (Holcenberg J.C., 1982; Goldberg D.M., 1992), что в первую очередь связано с их высокой специфичностью и мощным воздействием на различные стороны метаболизма в организме. L-Аспарагиназа (L-аспарагин-амидогидролаза; КФ 3.5.1.1.), относящаяся к треониновым амидо гидролазам, катализирует гидролитическое расщепление L-аспарагина с образованием аспарагиновой кислоты и аммиака, является одним из ключевых ферментов, осуществляющих взаимосвязь азотистого и углеродного обмена у про- и эукариотических организмов и представляет собой, пожалуй, единственный пример практического использования ферментов в онкотерапии. В течение более 30 лет бактериальные L-аспарагиназы широко и эффективно применяются в комбинированной химиотерапии острых лимфобластных лейкозов, лимфо- и ретикулосарком (Fiere D., Danaila С., 1996; Kantarjian Н.М., 1994). В последнее время появились сообщения о попытках использования L-аспарагиназы для лечения острого миелобластного лейкоза (Perel Y. et al., 2002), болезни Ходжкина и не-Ходжкинской лимфомы (Kobrinsky N.L. et al., 2001), меланосаркомы и множественной миеломы (Taylor et al., 2001). Ведутся клинические испытания по применению ПЭГ-аспарагиназы (Oncaspar) для лечения лимфом, связанных со СПИДом (AvramisV.I. et al., 2001; Gill P.S. et al., 1987; Gisselbrecht C. et al., 1993). Выявлен противовирусный эффект L-аспарагиназы против трех ДНК-содержащих вирусов: вируса коровьей вакцины, миксома вируса и вируса простого герпеса.

Механизм противоопухолевого действия L-аспарагиназы связан со снижением в тканях концентрации L-аспарагина, что приводит к ослаблению (или прекращению) синтеза мембранных белков, в первую очередь в быстроделящихся лейкозных клетках, что сопровождается значительным уменьшением числа опухолевых клеток в периферической крови и костном мозге, и, в конечном счете, происходит регрессия опухоли. Противоопухолевый эффект L-аспарагиназы обусловлен также и крайне низкой активностью в чувствительных к ферменту опухолевых клетках человека аспарагинсинтетазы, в связи с чем, введение L-аспарагиназы вызывает быструю и устойчивую регрессию развития заболевания (Wriston J.С., 1985; Keefer J.F. et al., 1987). В последние годы появились работы, указывающие на то, что в основе вызываемой ферментом гибели опухолевых клеток может лежать механизм апоптоза (Story M.D. et al., 1993; Ueno Т. et al., 1997).

Противоопухолевым действием обладают далеко не все L-аспарагиназы бактериального происхождения. Так противолейкозную активность проявляют L-аспарагиназы Escherichia coli, Erwinia carotovora, Erwinia chrysanthemi, Vibrio succinogenes, Proteus vulgaris и некоторых других микроорганизмов. В случае присутствия в клетках нескольких изоферментов L-аспарагиназы, терапевтическим действием обладает лишь один из них. В настоящее время в лечебной практике используются препараты L-аспарагиназы Erwinia chrysanthemi (ERW, Erwinase, Crisantaspase), выпускаемые фирмой ("Porton", Англия), нативные (ASP, Elspar, Kidrolase Asparaginasum и др.) и иммобилизованные на ПЭГ (PEG-Asparaginase, Oncaspar) препараты Е. coli, производимые фирмами "Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals, Inc." (RPR), "Medac GmbH", "Baxter Healthcare Corporation", "Grindex" и др. Среди препаратов L-аспарагиназы наименее токсичными являются ферменты, полученные из различных штаммов Erwinia (Соколов Н.Н. и др., 2000).

На сегодняшний день в нашей стране практически отсутствует производство лекарственных препаратов L-аспарагиназ, необходимых для лечения большого контингента больных, главным образом детей, острыми лимфобластными лейкозами. В 1994 году L-аспарагиназа была внесена в список основных жизненно важных лекарственных средств России. Этими обстоятельствами, а также все более широким использованием в энзимотерапии рекомбинантных лекарственных препаратов (Wolf В.А., 1996) и объясняется важность и актуальность настоящего исследования.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Борисова, Анна Аркадьевна

Выводы

1. Оптимизированы условия биосинтеза рекомбинантной L-аспарагиназы Erw. carotovora, экспрессированной в клетках E.coli. Накопление фермента в бактериальных клетках достигало 11-12% от тотального растворимого белка, что существенно превышает уровень экспрессии описанных в литературе рекомбинантных L-аспарагиназ.

2. Разработан лабораторный способ очистки в близком к гомогенному состоянию L-аспарагиназы Erw. carotovora, продуцируемой рекомбинантным штаммом Е. coli BL 21 (DE3). Метод позволяет получить фермент с удельной активностью около 600 МЕ/мг белка и выходом до 75% (Е. coli!pACYC) и 67% (Е. coli/pBAD).

3. Доклинические биологические испытания выделенного нами рекомбинантного фермента указывают на его высокую противолейкозную активность в отношении линий опухолевых клеток ЛИО-1 и L 1578 Y и низкую цитотоксичность.

4. Разработан простой, быстрый и высокочувствительный экспресс-метод определения активности L-аспарагиназы в колониях бактериальных клеток, который позволяет проводить эффективный отбор клонов, обладающих аспарагиназной активностью.

5. Изучение физико-химических свойств и строения L-аспарагиназы Erw. carotovora показало их полное соответствие таковым ферментов из диких штаммов Erw. carotovora и Erw. chrysanthemi.

6. Выделенный препарат L-аспарагиназы Erw. carotovora обладает низкой L-глутаминазной активностью, что делает фермент перспективным для использования в онкологической практике.

105

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Борисова, Анна Аркадьевна, Москва

1. Abeles R.H., Frey P.A., Jencks W.P. Biochemistry. - Jones & Barnett, Boston MA, 1992, 383 p.

2. Adams G.D., Ramsay J.R. Optimizing the lyophilization cycle and the consequences of collapse on the pharmaceutical acceptability of Erwirtia L-asparaginase//J. Pharm. Sci., 1996, vol. 85(12), p. 1301-1395.

3. Aghaiypour K., Wlodawer A., Lubkowski J. Structural basis for the activity and substrate specificity of Erwinia chrysanthemi L-asparaginase // Biochemistry, 2001, vol. 40(19), p. 5655-5664.

4. Arens A., Rauenbusch E., Irion E. et al. Isolation and properties of L-asparaginases from Escherichia coli II Hoppe Seyler's Z. Physiol. Chem., 1970, vol. 351, p. 197-205.

5. Arima K., Sakamoto Т., Araki C., Tamura G. Production of extracellular L-asparaginase by microorganisms // Agr. Biol. Chem., 1972, vol. 36(3), p. 356-361.

6. Aronson J.N. Ammonia assimilation and glutamate catabolism by Bacillus thurigiensis II Microbiology, 1976. P. 444-449.

7. Atkinson A., Minton N.P., Gilbert H.J. Production of L-asparaginase. 1993, Патент США № EP211639-A1.

8. Auger E.A., Bennett G.N. Temperature optimization of in vivo expression from the E. coli trp and trp:lac promoter // Biotechnol. Lett., 1987, vol. 8, p. 157-162.

9. Bagert U., Rohm K.H. On the role of histidine and tyrosine residues in E. coli asparaginase. Chemical modification and lH-nuclear magnetic resonance studies // Biochem. Biophys. Acta, 1989, vol. 999, p. 36-41.

10. Barnes W.R., Vela G.R., Dorn G.I. Physiology of L-asparaginase synthesis in recombinants of Escherichia coli A-1 //Appl. Environmental Microbiol., 1978, vol. 35, p. 766-770.

11. Batt C.A., O'Neill E., Novak S.R., Ко J., Sinskey A. Hyperexpression of Escherichia coli xylose isomerase // Biotechnol. Prog., 1986, vol. 2, p. 140-144.

12. Bentenbaugh M.J., Dhurjati P. A comparison of mathematical model predictions to experimental measurements for growth and recombinant protein production in induced culture of Escherichia coli // Biotechnol. Bioeng., 1990, vol.36, p. 124-134.

13. Bently W.E., Davis R.H., Kompala D.S. Dynamic of CAT Expression in E. coli// Biotecnol. Bioeng., 1991, vol. 38, p. 749-760.

14. Bently W.E., Mirjalili N., Anderson D.C., Davis R.H., Kompala D.S. Plasmid encoded protein: the principal factor of "metabolic burden" associated with recombinant bacteria // Biotechnol. Bioeng., 1990, vol. 35, p. 668-681.

15. Billett A.L., Carls A., Gelber R.D. et al. Allergic reactions to Erwinia asparaginase in children with acute lymphoblastic leukemia who had previous allergic reactions to Escherichia coli asparaginase // Cancer, 1992, vol. 70, p. 201-206.

16. Bonthron D.T. L-asparaginase II of Escherichia coli K-12: cloning, mapping and sequencing of the ansB gene//Gene, 1990, vol. 91, p. 101-105.

17. Borkotaky В., Bezbaruah R.L. Production and properties of asparaginase from a new Erwinia sp II Folia Microbiol. (Praha), 2002, vol. 47(5), p. 473-476.

18. Boyd J., Phillips A.W. Purification and properties of L-asparaginase from Serratia marcescens II J. Bacterid., 1971, vol. 106(2), p. 578-587

19. Buck P.W., Elsworth R., Miller G.A. et al. The batch production of L-asparaginase from Erwinia carotovora // J. Gen. Microbiol., 1971, vol. 65, p. 1-10.

20. Callow D.S., Capell S.J., Evans C.G.T. Experimental continuous culture production of the enzyme L-asparaginase by Erwinia carotovora II J. Gen. Microbiol., 1971, vol. 65, p. ii.

21. Cammack K.A., Marlborough D.I., Miller D.S. Physical properties and subunit structure of L-asparaginase isolated from Erwinia carotovora // Biochem J., 1972, vol. 126(2), p. 361-79.

22. Campbell H.A., Mashburn L.T. L-asparaginase EC-2 from E. coli. Some substrate specificity characteristics // Biochemistry, 1969, vol. 8(9), p. 37683775.

23. Campbell H.A., Mashburn L.T., Boyse E.A., Old L.J. Two L-asparaginases from E. coli B. Their separation, purification and antitumor activity II Biochemistry, 1967, vol. 6(3), p. 721-730.

24. Carrier J.E., Nugent M.E., Tacon W.C.A., Primrose S.B, High expression of cloned genes in E. coli and its consequences // Trends. Biotechnol., 1983, vol. l,p. 109-113.

25. Cedar H., Schwartz J.H. Localization of the two L-asparaginase in anaerobically grown E. coli II J. Biol. Chtm., 1967, vol. 242(16), p. 3753-3755.

26. Cedar H., Schwartz J.H. Production of L-asparaginase II by E. coli II J. Bacteriol., 1968, vol. 96(6) p. 2043-2048.

27. Chabner B.A. Cancer Chemotherapy: Principles and practice. 1990, Chabner B.A. and Collins J.M. eds., Philadelphia, Lippincote, 545 p.

28. Chalmers J.J., Kim E., Telford J.N., Wong E.Y., Tacon W.C., Shuler M.L., Wilson D.B. Effects of temperature on Escherichia coli overproducing P-lactamase or human epidermal growth factor // Appl. Environ. Microbiol., 1990, vol. 56, p. 104-111.

29. Chou C-H., Bennett G.N., San K-Y. Effect of modified glucose uptake using genetic engineering techniques on high level recombinant protein production in Escherichia coli dense cultures // Biotechnol. Bioeng., 1994, vol. 44, p. 952-960.

30. Citri N., Zyk N. Stereospecificity of the catalytic reaction of L-asparaginase // Biochemistry, 1972, vol. 11(11), p. 2103-2109.

31. Clavell L.A„ Gelber R.D., Cohen H.J. et al. Four-agent induction and intensive asparaginase therapy for treatment of childhood acute lymphoblastic leukemia // N. Engl. J. Med., 1986, vol. 315(11), p. 657-63.

32. Davidson L., Burkm M., Ahn S., Chang Lie-Ching, Kitto B. L-asparaginases from Citrobacter freundii II Biochim. Biophis. Acta., 1977, vol. 480(1), p. 282-294.

33. Derst С., Henseling J., Rohm K.H. Probing the role of threonine and serine residues of E. coli asparaginase II by site-specific mutagenesis // Protein Eng., 1992, vol. 5, p. 785-789.

34. Derst C., Wehner A., Specht V., Rohm K.H. States and functions of tyrosine residues in Escherichia coli asparaginase II // Eur. J. Biochem., 1994, vol. 224, p. 533-540.

35. Derst C., Henseling J., Rohm KH. Engeneering the substrate specificity of Escherichia coli asparaginase II. Selective reduction of glutamiase activity by amino acid replacements at position 248 // Protein Science, 2000, vol. 9(10), p. 2009-2017.

36. Distasio J.A., Niederman R.A., Kafkewitz D., Goodman D. Purification and characterization of L-asparaginase with anti-lymphoma activity from Vibrio succinogenes II J. Biol. Chem., 1976, vol. 251, p. 6929-6933.

37. Donovan R.S., Robinson C.W., Glick B.R. Optimizing inducer and culture condition for expression of foreign protein under the control of the lac promoter//J. Ind. Microbiol., 1996, vol. 16, p. 145-154.

38. Dorr R.T., Fritz W.L., eds. Cancer Chemotherapy Handbook. 1980, New York: Elsevier Science Publishing Co. Inc., p. 230-237.

39. Dunlop P.C., Meyer G.M., Ban R.J. Characterization of two forms of asparaginase in Saccharomyces cerevisiae II J. Biol. Chem., 1978, vol. 253(4), p. 1297-1304.

40. Dunlop P.C., Meyer G.M., Roon RJ. Nitrogen catabolite repression of asparaginase II in Saccharomyces cerevisiae II J. Bacterid., 1980, vol. 143(1), p. 422-426.

41. Durden D.L., Distasio J.A. Characterization of the effects of asparaginase from Escherichia coli and a glutaminase-free asparaginase from Vibrio succinogenes on specific ell-mediated cytotoxicity // Int.J. Cancer, 1981, vol. 27, p. 59-65.

42. Eden OB, Shaw MP, Lilleyman JS, Richards S. Non-randomised study comparing toxicity of Escherichia coli and Erwinia asparaginase in children with leukaemia. //Med. Pediatr. Oncol., 1990, vol. 18(6), p. 497-502.

43. Ehrman M., Cedar H., Schwartz J.H. L-asparaginase II of Escherichia coli. Studies on the enzymatic mechanism of action // J. Biol. Chem., 1971, vol. 246, p. 88-94.

44. Feinberg W.M., Swenson M.R. Cerebrovascular complications of L-asparaginase therapy //Neurology, 1988, vol. 38, p. 127-133.

45. Fiere D., Danaila C. Treatment of acute lymphoid leukemia in adults // Rev. Prat., 1996, vol. 46, p. 55-61.

46. Filpula D., Nagle J.W., Pulford S., Anderson D.M. Sequence of L-asparaginase gene from Erwinia chrysanthemi NCPPB 1125 // Nucleic Acids Res., 1988, vol. 16(21), p. 10385.

47. Flechter V.R., Hanson R.S. Regulation of citrate synthase from different bacteria. A comparison of the citrate sinthase from different bacteria // Biochim. Biophys. Acta., 1970, vol. 222(2), p. 253-263.

48. Frank B.H., Pekar A.H., Veras A.J., Ho P.K. Crystalline L-asparaginase from E. coli HI. Biol. Chem., 1970, vol. 245(14), p. 3716-3724.

49. Gilbert H.J., Blazek R., Bullman H.M., Minton N.P. Cloning and expression of the Erwinia chrysanthemi asparaginase gene in Escherichia coli and Erwinia carotovora //J. Gen. Microbiol., 1986, vol. 132(Ptl), p. 151-160.

50. Gill P.S., Levine A.M., Krailo M., Rarick M.U., Loureiro C., Deyton L., Meyer P., Rasheed S. AIDS-related malignant lymphoma: results of prospective treatment trials // J. Clin. Oncol., 1987, vol. 5, p. 1322-1328.

51. Glick B.R. Metabolic load and heterologous gene expression // Biotechnol. Adv., 1995, vol. 13, p. 247-261.

52. Glick B.R., Whitney G.K. Factors affecting the expression of foreign proteins in Escherichia coli // J. Ind. Microbiol., 1987, vol. 1, p. 277-282.

53. Glossman H., Bode W. L-asparaginase A from E. coli II Hoppe-Seyler's Ztschr. Physiol. Chem., 1971, Bd 352(2), s. 132-136.

54. Goldberg D.M. Enzymes as agents for the treatment of disease // Clin. Chim. Acta, 1992, vol. 206, p. 45-76.

55. Goward C.R., Stevens, G.B., Tattersall, R., and Atkinson, T. Rapid large-scale preparation of recombinant Erwinia chrysanthemi L-asparaginase // Bioseparation, 1992, vol. 2, p. 335-341.

56. Goward C.R. Method for the purification of Erwinia L-asparaginase. 1994. Патент США №5310670.

57. Harcum S.W., Bentley W.E. Response dynamics of 26-, 34-, 39-,54-, and 80-kDA proteases in induced cultures of recombinant Escherichia coli II Biotechnol. Bioeng., 1993, vol. 42, p. 675-685.

58. Harms E., Wehner A., Aung H.P., Rohm K.H. A catalytic role for threonine-12 of E. coli asparaginase II as established by site-directed mutagenesis // FEBS Lett., 1991, vol. 285, p. 55-58.

59. Harms E., Wehner A., Jennings M.P. et al., Construction of expression systems for Escherichia coli asparaginase II and two-step purification of therecombinant enzyme from periplasmic extracts // Protein Purif. Express., 1991, vol.2, p. 144-150.

60. Harrison A., Gibbins L.N. The isolation and characterization of a temperate phage Y46/E2, from Erwinia herbicola Y46 // Canad. J. Microbiol., 1975, vol. 21(3), p. 937-944.

61. Haskell C.M. ed. Cancer Treatment 3 rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Co. 1980, 130 p.

62. Herrmann V, Rohm KH, Schneider F. On the substrate specificity of L-asparaginase from E. coli// FEBS Lett., 1974, vol. 39(2), p.214-217.

63. Но P.P.K., Milikin E.B., Bobbitt J.L. et al. Cristalline L-asparaginase // J. Biol. Chem., 1970, vol. 245, p. 3708-3715.

64. Hodgson J. Expression systems: a user's guide // Bio/Technology., 1993, vol. 11, p. 887-893.

65. Holcenberg J. S., Teller D.C. Physical properties of antitumor glutaminase-asparaginase from Pseudomonas 7 A // J. Biol. Chem., 1976, vol. 251(17), p. 5375-5380.

66. Holcenberg J.S. Enzyme therapy: problems and solutions // Ann. Rev. Biochem., 1982, vol. 51, p.795-812.

67. Holcenberg J.S., Ericsson L., Roberts L. Amino acid sequence of the diazooxonorleucine binding site of Acinetobacter and Pseudomonas 7A glutaminase—asparaginase enzymes //Biochemistry, 1978, vol. 17, p. 411-417.

68. Holcenberg J.S., Roberts J. eds. Enzymes as Drugs. 1981, New York: Wiley-Intersi. p. 22-57.

69. Holle L.M. Pegaspargase: an alternative? // Ann. Pharmacother., 1997, vol. 31, p. 616-624.

70. Holmquist N.D. Effect of normal sera of several related rodents on 6C3HED lymphoma in vivo // Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 1963, vol. 113, p. 444-447.

71. Howard J.B., Carpenter F.H. L-asparaginase from Erwinia carotovora. Substrate specificity and enzymatic properties // J. Biol. Chem., 1972, vol. 247. p. 1020-1030.

72. Inada Y., Furakawa M., Sasaki H., Kodera Y. et al., Biomedical and biotechnological applications of PEG- and PM-modified proteins // Trend Biotechnol., 1995, vol. 13, p. 86-91.

73. Itai A., Yonei N., Matsui Y., Iitaka Y.J. Crystallographic study on the orthorhombic crystal of L-asparaginase from Escherichia coli HAP // J. Mol. Biol., 1976, vol. 105, p. 321-325.

74. Itakura K., Hirose Т., Crea R., Riggs A.D. Expression in Escherichia coli of a chemically synthesized gene for the hormone somatostatin // Scince, 1977, vol. 198, p. 1056-1063.

75. Jaskolski M., Kozak M., Lubkowski J., Palm G., Wlodawer A. Struction of two highly homologous bacterial L-asparaginase: a case of enantiomorphic spase groups // Acta Crist., 2001, D57, p. 369-377/

76. Jean-Francois J., D'Urso E.M., Fortier G. Immobilization of L-asparaginase into a biocompatible poly(ethylene glycol)-albumin hydrogel: evaluation of performance in vivo // Biotechnol. Appl. Biochem., 1997, vol. 26 (Pt 3), p. 203-212.

77. Jennings M.P., Beacham, I.R. Analysis of the Escherichia coli gene encoding L-asparaginase II, ansB, and its regulation by cyclic AMP receptor and FNR proteins//J. Bacteriol., 1990, vol. 172, p. 1491-1498.

78. Jerlstrom P.G., Bezjak D.A., Jennings M.P., Beacham I.R. Structure and expression in Escherichia coli K-12 of the L-asparaginase I-encoding ansA gene and its flanking regions // Gene, 1989, vol. 76, p. 37-46.

79. Jorge J.C., Perez-Soler R., Morais J.G., Cruz M.E. Liposomal palmitoyl-L-asparaginase: characterization and biological activity // Cancer Chemother. Pharmacol., 1994, vol. 34, p. 230-234.

80. Kane J.F. Effects of rare codon clusters on high level expression of heterologous proteins in Escherichia coli II Curr. Opinion. Biotechnol., 1995, vol. 6, p. 494-500.

81. Kantarjian H.M. Adult acute lymphocytic leukemia: critical review of current knowledge // Am. J. Med., 1994, vol. 97, p. 176-184.

82. Keating M.J., Holmes R., Lerner S. Ho D.H. L-asparaginase and PEG asparaginase—past, present, and future // Leuk. Lymphoma, 1993, vol. 10, p. 153-157.

83. Keefer J.F., Moraga D.A., Schuster S.M. Comparison of glycine metabolism in mouse lymphoma cells either sensitive or resistant to L-asparaginase // Biochem. Pharmacol., 1985, vol. 34, p. 559-565.

84. Kennel D., Reizman H. Transcription and translation initiation frequencies of Escherichia coli lac operon // J. Mol. Biol., 1977, vol. 114, p. 1-21.

85. Khosla C., Curtis J.E., Bydalek P., Schwartz J.R., bailey J.E. Expression of recombinant proteins in Escherichia coli using an oxygen-responsive promoter //Bio. Technology., 1990, vol. 8, p. 554-558.

86. Kikuchi M. Application of genetics for strain improvement in industrial microorganisms//Biotechnol. Bioeng., 1980, vol. 22(1), p. 195-208.

87. Killander D., Dohlwitz A., Engstedt L., Franzen S., et al. Hypersensitive reactions and antibody formation during L-asparaginase treatment of children and adults with acute leukemia// Cancer, 1976, vol. 37, p. 220-228.

88. Kirschbaum J., Wriston J.C., Ratych O.T. Subunit structure of L-asparaginase from E. coli В //Biochim. Biophys. Acta, 1969, vol. 194(1), p. 161-169.

89. Kitto G.B., Smith G., Theit Т.О. et al. Tumor inhibitory and non-inhibitory L-asparaginase from Ps. geniculata H J. Bacteriol., 1979, vol. 137(1), p. 204-212.

90. Kozak M., Borek D., Janowski R., Jaskolski M. Crystallization and preliminary crystallographic studies of five cristal forms of Escherichia coli L-asparaginase II (asp90Glu mutamt) // Acta Cryst., 2002, D58, p. 130-132.

91. Krebs H. The evolution of metabolic pathways // In: Molecular and cellular aspects of microbial evolution. 32nd symp. Cambridge, Univ. Press., 1981, p. 215-228.

92. Kristiansen Т., Einarson M., Sundberg L., Porath J. Purification of L-asparaginase from E. coli by specific adsorption and desorbtion // FEBS Lett., 1970, vol. 7, p. 294-298.

93. Kronberg H.L. The role and mechanism of the tricarboxylic acid cycle in Escherichia coli II Brit. Biochim. Past a. Present Brit. Soc. Symp., 1970, N 30, p. 155-171.

94. Laboureur P., Langlois C., Labrousse M. et al. L-asparaginases d' Escherichia coli. 1. Proprietes des formes natives // Biochimie, 1971, vol. 53(11/12), p. 1147-1156.

95. Law A.S., Wriston J. Purification and properties of Bacillus coagulans L-asparaginase//Arch. Biochem. Blophys., 1971, vol. 147(2), p. 744-752.

96. Lee S.M., Wroble M.H., Ross J.T. Large-scale recovery and purification of L-asparaginase from Erwinia carotovora // Appl. Biochem. Biotechnol., 1986, vol. 12, p. 229-247.

97. Lee S-M, Ross J.T. and Wroble M.H. Process for manufacture of L-asparaginase from Erwinia chrysanthemi. 1988. Патент CIIIA № 4729957.

98. Lee S.M., Wroble M.H., Ross J.T. L-asparaginase from Erwinia carotovora. An improved recovery and purification process using affinity chromatography // Appl. Biochem. Biotechnol., 1989, vol. 1, p. 1-11.

99. Liu F.S., Zajic J.E. Purificatin and properties of L-asparaginase of Erwinia aeroideael/C anad. J.Microbiol., 1972, vol. 18(12), p. 1953-1957.

100. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem., 1959. vol. 193, p. 265.

101. Lubkowski J., Palm G.J., Gilliland G.L. et al. Crystal structure and amino acid sequence of Wolinella succinogenes L-asparaginase // Eur. J. Biochem., 1996, vol. 241, p. 201-207.

102. Lubkowski J., Wlodawer A., Ammon H.L., Copeland T.D., Swain A.L. Structural characterization of Pseudomonas 7 A glutaminase-asparaginase // Biochemistry, 1994, vol. 33, p. 10257-10265, (a).

103. Ma N.T., Wang Y.F., Roe B.A., Harrison R.G. Fusion protein of L-asparaginase E. coli with Na-uretic peptide // Biotechnol. and Bioengineering, 1995, vol. 47, p. 483-491.

104. Magasanik В., Prival M.J., Brenchey L.E. Glutamine synthetase, regulator on synthesis of glutamate forming enzymes // In: Enzymes of glutamine metabolism. New York; London., 1973, p. 65-70.

105. Maita Т., Matsuda G. The primary structure of L-asparaginase from Escherichia coli II Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem., 1980, vol. 361, p. 105-117.

106. Maladkar N.K., Singh V.K., Nath S.R. Fermentative production and isolation of L-asparaginase from Erwinia carotovora, EC-113 // Hinsustan Antibiot. Bull., 1993, vol. 35, p. 77-86.

107. Manna S., Sinha A., Sadhukhan R., Chakrabarty S.L. Purification, characterization and antitumor activity of L-asparaginase isolated from Pseudomonas stutzeri MB-405 // Curr. Microbiol., 1995, vol. 30, p. 291-298.

108. Mashburn L.T., Wriston J.C. Tumor inhibitory effect of L-asparaginase from Escherichia coli II Arch. Biochem. Biophys., 1964, vol. 105, p. 450-452.

109. Meister A., Levintow L., Greenfield R.E., Abendschein P.A. Hidrolysis and transfer reaction catalyzed by omega-amidase preparation // J. Biol. Chem., 1955, vol.215, p. 441-447.

110. Miller D.S., Marlborough D.J., Cammack K.A. Physical properties and subunit structure of L-asparaginase isolated from Erwinia carotovora MRE 604 // Colloq. Intern. CNRS., 1971, vol. 197, p. 55-71.

111. Miller M., Rao J.K.M., Wlodawer A., Gribskov M.R. A left-handed crossover involved in amidohydrolase catalysis. Crystal structure of Erwinia chrysanthemi L-asparaginase with bound L-aspartate // FEBS Lett., 1993, vol. 328, p. 275-279.

112. Minton N.P., Bulhman H.M., Scawen M.D., et al. Nucleotide sequence of the Erwinia chrysanthemi NCPPB 1066 L-asparaginase gene // Gene, 1986, vol. 46, p. 25-35.

113. Moola Z.B., Scawen M.D., Atkinson Т., Nicholls D.J. Erwinia chrysanthemi L-asparaginase: epitope mapping and production of antigenically modified enzymes I I Biochem. J., 1994, vol. 302, p. 921-927.

114. Muller H.J., Boos J. Use of L-asparaginase in childhood ALL // Crit. Rev. Oncol. Hematol., 1998, vol. 28, p. 97-113.

115. Nakamura N., Fujio Т., Tanaka M. On the productivity and properties of L-asparaginase from Escherichia coli A-l-3 // Agr. Biol. Chem., 1972, vol. 36(12), p. 2251-2253.

116. Nalepka E.R., McCue B.A., Norton S.J. Regulation of L-asparaginase in Lactobacillusplantarum II Texas J. Sci., 1981, vol. 33(2/4), p. 87-101.

117. Neubauer P., Hofman K., Hoist O., Mattiason В., Kruschke P. Maximizing the expression of recombinant gene in Escherichia coli by manipulation ofinduction time using lactose as inducer // Appl. Microbiol. Biotechnol., 1992, vol. 36, p. 739-744.

118. North A.C.T., Wade H.E., Cammack K.A. Physicochemical studies of L-asparaginase from Erwinia carotovora //Nature, 1969, vol. 224, p. 594-595.

119. Ohnuma Т., Berget F., Bray R.C. Enzymes in cancer. Asparaginase from chicken liver//Biochem. J., 1967, vol. 103(1), p. 238-245.

120. Old L.J., Boyse E.A., Campbell H.A., Daria G.M. Leukaemia-inhiibiting properties and L-asparaginase activity of sera from certain South American rodents //Nature, 1963, vol. 198, p. 801-804.

121. Paice M.G., Bernier R., Jurasek L. Viscosity-enhancing bleaching of hardwood kraft pulp with xylanase from a cloned gene // Biotechnol. Bioeng., 1988, vol. 32, p. 235-239.

122. Pajdak E., Szafran Z. Purification and properties of L-asparaginase from E. coli 055:B5 // Acta Biochim. Pol., 1977, vol. 24(1), p. 53-58.

123. Palm G.J., Lubkowski J., Derst C., Schleper S., Rohm K.H., Wlodawer A. A covalently bound catalytic intermediate in Escherichia coli asparaginase: crystal structure of a Thr-89-Val mutant // FEBS Lett., 1996, vol. 390, p. 211-216.

124. Pastan I., Perlman R. Cyclic adenosine monophosphate in bacteria // Science, 1970, vol. 169(3943), p. 339-344.

125. Paul J. H., Cooksey K.E. Regulation of L-asparaginase in Chlamydomonas species in response to ambient concentration of combined nitrogen // J. Bacteriol., 1981, vol. 147(1), p. 9-12.

126. Pauling K.D., Hann J.E., Jones G.E., Asparaginase II of Saccharomyces cerevisiae. Characterization of mutation that expression in rapidly growing cells//J. Gen. Microbiol., 1980, vol. 119(2), p. 539-542.

127. Peterckofsky A., Gasder C. Glucose inhibition of adenylate cyclase in intact cells of E. coli // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1974, vol. 71(6), p. 2324-2328.

128. Peterson R.E., Ciegler A. L-asparaginase production by Erwinia aroideae II Appl. Microbiol., 1969, vol. 18(1), p. 64-67.

129. Peterson R.G., Richards F.F., Handschumacher R.E. Structure of peptide from active site region of Escherichia coli L-asparaginase // J. Biol. Chem., 1977, vol. 252, p. 2072-2076.

130. Priest J.R., Ramsay N.K., Steinherz P.G. et al. A syndrome of thrombosis and hemorrhage complicating L-asparaginase therapy for childhood acute lymphoblastic leukemia// J. Pediatr., 1982, vol. 100, p. 984-989.

131. Pritsa A.A., Kyriakidis D.A. L-asparaginase of Thermus thermophilus\ purification, properties and identification of essential amino acids for its catalytic activity // Mol. Cell Biochem., 2001, vol. 216(1-2), p. 93-101.

132. Pui C.H., Burghen G.A., Bowman W.P., Aur R.J. Risk factors for hyperglycemia in children with leukemia receiving L-asparaginase and prednisone // J. Pediatr., 1981, vol. 99, p. 46-50.

133. Pulman D., Johnson B. The enzymes of ammonia assimilation and their control members of the genus Erwinia II J. Gen. Nicrobiol., 1978, vol. 106(1), p. 137-143.

134. Qian G., Zhou J., Ma J., Wang D., He B. The chemical modification of E. coli L-asparaginase by N,0-carboxymethyl chitosan // Artif. Cell Blood Substit. Immobil. Biotechnol., 1996, vol. 24, p. 567-577.

135. Raibound E., Stanssens P., Fiers F.W. Plasmid vectors for high efficiency expression controlled by the pL promoter of coliphage lambda // Gene, 1981, vol. 15, p. 81-93.

136. Reznikoff W.S., Abelson J.N. The lac promoter I I In: The Operon. (Miller J.N., Reznikoff W.S., eds), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY., 1980, p. 221-224.

137. Ritschel W.A., Foruza H. Introduction to gene technology // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol., 1994, vol. 16, p. 453-467.

138. Roberts J. Division of Microbial and Biochemical Technology, American Chemical Society Annual Meeting, Wash. D. C., Paper MCBT-55. 1983.

139. Roberts J., Holcenberg J.S. Isolation, crystallization, properties of Achromobactereacea, glutaminase-asparaginase with antitumor activity // J. Biol. Chem. (Enzymology), 1972, vol. 247(1), p. 84-90.

140. Rohm KH, Van Etten RL. The 180 isotope effect in 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy: mechanistic studies on asparaginase from Escherichia coli II Arch Biochem Biophys., 1986, vol. 244(1), p. 128-136.

141. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Appendix A: Bacterial media, antibodies, and bacterial strains // In: Molecular cloning: a Laboratory Manual, 2nd edn, Cold Spring Laboratory, Cold Spring Harbor, NY, 1989, p. A.1-A.13.

142. Sargeant K., Wade H.E. The production of L-asparaginase from Erwinia carotovora II Abh. Akad. Wiss. DDR. Abt. Math., Naturwiss., Techn., 1981, Bd.3,s. 393-397.

143. Sedmak G.G., Grossbery S.E. A rapid, sensitive and versative assay for protein using Coomassie brilliant blue G-250 // Annal. Bioch., 1977, vol. 79, p. 544-552.

144. Shibui Y., Nagahari K. Secretion of functional Fab fragment in Escherichia coli and influence of culture conditions I I Appl. Microbiol. Biotechnol., 1992, vol. 37, p. 352-357.

145. Schmid F.A., Roberts J. Antineoplastic and toxic effects of Acinetobacter and Pseudomonas glutaminase-asparaginases 11 Cancer Chemother. Rep., 1974, vol. 58, p. 829-840.

146. Schwartz J.H. Asparaginase II of Escherichia coli: Bacterial physiology and enzymatic mechanism of action // In: Intern, symp. L-asparaginase. Paris, 1970, N 197, p. 79-85.

147. Soru E., Zaharia O. L-Asparaginase from the BCG strain of Mycobacterium bovis. Chemical characterization // Rev. Roum. Biochim., 1973, vol. 10(2), p. 145-153.

148. Spiers A.S.D., Wade H.E. Bacterial glutaminase in treatment of acute leukaemia//Br. Med. J., 1976, vol. 1, p. 1317-1319.

149. Staerk J., Zwister O., Ronneberger H. A comparison of L-asparaginase from Erwinia aroideae and from Escherichia coli'. biochemical and biological properties // Experientia, 1971, vol. 27(3), p. 250-252.

150. Stemmer W.P. Rapid evolution of a protein in vitro by DNA shuffling // Nature, 1994, vol. 370(6488), p. 389-391.

151. Stern M.L. Physical properties of L-asparaginase from Serratia marcescens H J. Bacterid., 1976, vol. 125(2), p. 719-727.

152. Story M.D., Voehringer D.W., Stephens L.C., Meyn R.E. L-asparaginase kills lymphoma cells by apoptosis // Cancer Chemother. Pharmacol., 1993, vol. 32, p. 129-133.

153. Summer D.K. Kinetics of plasmid loss // Trends. Biotechnol., 1991, vol. 9, p. 273-278.

154. Swain A.L., Jaskolski M., Housset D., Rao J.K.M., Wlodawer A. Crystal structure of Escherichia coli L-asparaginase, an enzyme used in cancer therapy // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, vol. 90, p. 1474-1478.

155. Taguchi T. Recent advances in L-asparaginase studies // Gan To Kagaku Ryoho., 1988, vol. 15, p. 1815-1825.

156. Taylor C.W., Dorr R.T., Fanta P., Hersh E.M., Salmon S.E. A phase I and pharmacodynamic evaluation of polyethylene glycol-conjugated L-asparaginase in patients with advanced solid tumors // Cancer Chemother. Pharmacol., 2001. vol. 47(1), p. 83-88.

157. Tosa Т., Sano R., Yamamoto K. et al. L-Asparaginase from Proteus vulgaris. Purification, crystallization and enzymatic properties // Biochemistry, 1972, vol. 2(2), p. 216-222.

158. Tyler B. Regulation of the assimilation of nitrogen compounds // Ann. Rev. Biochem., 1978, vol. 47, p. 1127-1162.

159. Ueno Т., Ohtawa K., Mitsui K., Kodera Y., Hiroto M., Matsushima A., Inada Y., Nishimura H. Cell cycle arrest and apoptosis of leukemia cells induced by L-asparaginase//Leukemia, 1997, vol. 11, p. 1858-1861.

160. Umbarger H.E., Davis B.D. Pathways of amino acids biosynthesis // In: Bacteria. New York, Acad. Press., 1962, vol. 3, p. 168-271.

161. Uren J.R., Hargis B.J., Beardsley P. Immunological and pharmacological characteristics of poly-DL-alanyl-modified Erwinia carotovora L-asparaginase // Cancer Research., 1982, vol. 42(10), p. 4068-4071.

162. Wade H.E. Synthesis and functions of microbial asparaginases and glutaminases. // In Payne, J.W. (Ed.), Microorganisms and Nitrogen Sources, Wiley, Chichester, 1980, p. 563-575.

163. Wade H.E., Extraction of asparaginase from bacterial culture. 1972, Патент США №3660238.

164. Wade H.E., Philips B.P. Automated determination of bacterial asparaginase and glutaminase //Anal. Biochem., 1971, vol. 72, p. 248.

165. Wehner A., Harms E., Jennings M.P., et al., Site-specific mutagenesis of Escherichia coli asparaginase II. None of the three histidine residues is required for catalysis. // Eur. J Biochem., 1992, vol. 208, p. 475-480.

166. Whitney G.K., Glick B.R., Robinson C.W. Induction of DNA ligase in recombinant strain of Escherichia coli II Biotechnol. Bioeng., 1989, vol. 33, p. 991-998.

167. Winograd E., Pulido M.A., Wasserman M. Production of DNA-recombinant peptides by tac-inducible vectors using micro concentration of IPTG // Biotechnics, 1993, vol. 14, p. 886-887.

168. Wolf B.A. Overview of therapeutic drug monitoring biotechnologic drugs // Ther. Drug Monit., 1996, vol. 18(4), p. 402-404.

169. Wriston J.C., Yellin Т.О. L-Asparaginase // Adv. Enzymol., 1973, vol. 39, p. 185-248.

170. Wriston J.G. Asparaginase. //Methods Enzymol., 1985, vol. 113, p. 608-618.

171. Yabuta M., Onai-Miura S., Ohsuye K. Thermo-induction expression of a recombinant fusion protein by Escherichia coli repressor mutant // J. Biotechnol., 1995, vol. 39, p. 67-73.

172. Zabin I., Fowler A.V. P-Galactosidase, the lactose permiase protein, and thiogalactoside transacetilase // In: The Operon. (Miller J.N., Reznikoff W.S., eds), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY, 1980, p. 89-121.

173. Березов T.T., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия 1982, Москва, Медицина. 280с.

174. Вина И.А., Блума Р.К., Бароне Д.Э., Жагат Р.А. О некоторых ингибиторах L-аспарагиназы Е. coli // Изв. АН ЛатвССР. Сер. хим., 1974, № 6, с. 701-704.

175. Гарьковая Л.Ф. L-аспарагиназа Erwinia carotovora 286. Образование и свойства. Дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. Рига, 1978, 166 с.

176. Гершанович В.Н. Репрессия катаболитами в бактериальной клетке // Успехи совр. Биологии., 1970, т. 69(1), с. 49-71.

177. Гершанович В.Н. Роль циклического аденозин-3',5'-монофосфата в регуляции транкрибирования бактериальных генов // Изв. АН СССР. Сер. биол., 1977, № 3, с. 429-439.

178. Грачева И.М., Грачев Ю.П., Мосичев М.С. и др. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов. Уч. Пособие для ВУЗов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982, 240 с.

179. Доман Н.Г., Феденко Е.П. Биологическая роль АМФ // Успехи биол. химии., 1976, т. 17, с. 63-101.

180. Еременко, В.В., Соколов, Н.Н. Условия выращивания E.coli АТСС 9637 с высокой аспарагиназной активностью // Прикл. биохим. и микробиол., 1974, т. 10(1), с. 52-57.

181. Иванов В.Н. Экзо- и эндо-трофия клетки Киев, Наукова думка., 1990, 104 с.

182. Коваленко Н.А, Цветкова Т.А. Николаев А.Я. Некоторые данные о субстратной специфичности, ингибиторах и кинетике дезамидазы АГ (аспарагиназы-глутаминазы) из Pseudomonas fluorescens АГ // Вопр. мед. химии., 1977, т. 23(5) с. 618-622.

183. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики. Пер. с англ. М.: Мир, 1979,280 с.

184. Кретович B.JL, Евстигнеева З.Г., Карякина Т.И. и др. Молекулярные механизмы усвоения азота растениями. М.: Наука, 1983, 263 с.

185. Мардашев С.Р., Козлов Е.А., Соколов Н.Н., Ковачевич И.В., Горбатенко J1.B. Выд еление кристаллической L-аспарагиназы из Esc herichia со li II Вопр. мед. химии, 1972, т. 18(3), с. 318-321.

186. Мардашев С.Р., Николаев А .Я., Соколов Н.Н., Козлов Е.А., Куцман М.Е Выделение и свойства гомогенного препарата L-аспарагиназы из Pseudomonas fluorescens АГ // Биохимия, 1975, т. 40(5), с. 984-989.

187. Мецлер Д. Биохимия, пер. с англ. М., 1980, т. 2, 606 с.

188. Николаев А .Я. Аспарагиназа и глутаминаза у микроорганизмов. Распространение, регуляция биосинтеза, выделение и свойства. Автореф. дис. на соиск. учен. степ, д-ра биол. наук. М., 1971, 24 с.

189. Николаев, А.Я., Козлов, Е.А., Соколов, Н.Н. Кондратьева Н.А., Добрынин Я.В., Мардашев С.Р. Физико-химические свойства и противолейкозная активность кристаллической L-аспарагиназы Escherichia coli II Вопр. мед. химии, 1974, т. 20(3), с. 272-276, а.

190. Николаев, А.Я., Соколов, Н.Н., Мардашев, С.Р. О механизме индукции синтеза аспарагиназы и глутаминазы аспарагиновой и глутаминовой кислотами у Ps. fluorescens АГ // Биохимия, 1971, т. 36(3), с. 643-648, б.

191. Озолинь Р.К., Гривинь П.П., Герцберг З.В. и др. Способ получения L-аспарагиназы. А.с. № 649746, СССР // Открытия, изобретения, пром. Образцы, товарные знаки, 1979, № 8, с. 15.

192. Озолинь Р.К., Гривиня П.П., Савенкова Л.Ф. и др. Аспарагиназа и сериндегидратаза микроорганизмов: Продуценты, регуляция и свойства // Рига, Зинатне, 1985,150 с.

193. Основы биохимии, п/р Ленинджера. Москва, Мир, 1985, 233-235.

194. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами, «Наука», 1983. — с. 304

195. Соколов, Н.Н., Николаев, А.Я. Сульфгидрильные группы L-аспарагиназы А из Pseudomonas fluorescens AT // Биохимия, 1976, т. 41(4), с. 747-751.

196. Соколов Н.Н., Занин В.А., Александрова С.С. Бактериальные L-аспарагиназы и глутамин(аспарагин)азы: некоторые свойства, строение и противоопухолевая активность // Вопр. мед. химии., 2000, т. 46(6), с. 531-548

197. Соколов, Н.Н., Николаев, А.Я., Мардашев, С.Р. Влияние альбициина на рост и индуцированный синтез аспарагиназы, глутаминазы иглутаминсинтетазы у Ps. fluorescens АГ // Микробиология, 1971, т. 40(4), с. 631-637.

198. Тюльпанова Э.С., Еременко В.В. Регуляция аминокислотами образования L-аспарагиназы у Bacillus mesentericus // Микробиология, 1976, т. 45(2)6 с. 259-266.