Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка состава и исследование ректральных суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Разработка состава и исследование ректральных суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином"

рГБ ОД

1 6 пнп 1сг';

Министерство здракоохрапента а исдацинскон прокиЕшеписста Российской Федерации

Рязапскнй гссудярстпенпый иедащшсагЗ увкверептет имс-ик лулдсипкз ЦГХПаалока

На щкяах рукетия

ЗДК 615.454Л:612М5.6:577.164

КОВАЛЕНКО Татьяна Аяександротя

РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ИССЛЕДОВАНИЕ РЕ1СГЛЛЬНЫХ СУППОЗИТОРИЕВ МВТАЗИДА И МЕТЛЗИДА С РИБОФЛАВИНОМ

ОЗ-ОЭ.«. БИОХИМИЯ

15.00.01 • ТЕХГЮЛОгаЯЛЕКАГСТВ-и ОРГАНИЗАЦИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ДЕЛА

АВТОРЕФЕРАТ

ДИССЕРТАЦИИ НА ООИСКАШШ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

№

№

РЯЗАНЬ 19 9 4

Диссертационная работа выполнена на кафедрах технология лекарств и биологической химии Рязанского государственного медицин -ского университета шаю! академика И.П, Павлова.

Научшз руководители: доктор медицинских наук, профессор, академик РАН Е.А.Строев кандидат, медицинских наук,, доцент Б.В.Сошга

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Д.Г.Узбекова кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник НИИ фармации Л.В.Соллотуб

Ведущая организация: Московская медицинская академия

шлеки ИJM.Сеченова

Защита диссертация состоится "_и_ 1995 г.

в_часов на заседании Диссертационного Совета Д 034.67.02" прй

Рязанском гссударствснксгл медицинском университете.имени академика И.П.Павлова по адресу:;.39X000, г. Рязань, ул. Высоковольтная, 9.

С диссертацией г>:э;хно ознакомиться в библиотеке зхязерсстета.

Автореферат разослан _199а т,.

Ученый секретарь Диссертационного Совета кандидат биологических наук

Е.А.Рязанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОШ

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. По литературным данным, з настоящее время в Российской Федерации наблюдается рост заболеваемости туберкулезом. Среди множества причин, предопределзвшях этот нззслателышЛ процесс, одной из вакгахх является низкая эффективность лечения. Побочные явления при правке препаратов изониазкдового ряда к, кап следствие, их плохая переносимость делазт актуальной проблему разработки новых эффективных лекарственных фор;« отнх препаратов.

Для предупренденпя и устранения осложнении со стороны нервной систем! при лечении препаратами ПИК рекомендуется назначать витамин 3g /А.Е.Рабухпн, 1970; В.К.Лепахия, Ю.Б.Белоусов, В.С.Шисеев, 1988; М.Д.МааяозскиЗ, 1908; А.Я.Кудрнн, 1991 ;D.E.Snider, 13S0; LiW.VJheithouse, 1983; J. Br end t, K.Kultis, B.H.Rœaacïc, 1990; ll.îiicsar, S.ïîatfcin, R.C.Buoknal et ol., 1930/.

За рубежом выпускается комбинированный препарат ШИК с витамином Bg /R.K.Haheshwari, B.D.Gupta» 1991/.

Согласно литературным данным, в метаболизме пирядоксина функционирует флавинкоиоауклеотид- и фдаванадзнивдинуклеотид- запиепкае ферменты, а недостаточность рибофлавина призоднт к нарушению обмена витамина Bg /Ю.З.Букии, tSGSî Е.А.Строев, П.Т.Казакова, 1980; В.М.Коденцова, О.А.Вртесккская, Б.В.Спирячев, 1S92; J.n.Atki::s,i932/.

Таким образом, является актуальной задачей создание комбинированных лекарственных препаратов ГИНК с рибофлавином.

Значительное снижение фармакологической активности препаратов 1ИПС при пероральном применении в результате "эффекта первичного прохода" через печень послужило определягтам фактором в выборе вида разрабатываемой лекарственной фора - ректальных суппозиториев.

В качестве препарата ГИНК бил использован котазид, обладающий высокой избирательной активностью в отновении кикобактерий тубер-

кулеза и иенее токсичный по сравнению с ГШ5Х.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящего исследования яви -лось биохимическое обоснование состава и разработка технологии ректальной лекарственной форш метазида и комплексной ректальной ле -яарственной фор/лы метазида с витамином Bg.

Для достижения поставленной цели было необходимо решать следующие задача:

- научить влияние фармацевтических факторов на высвобождение кета-зпда из суппозиториев в опытах in vitro ;

- разработать ращгокальнуя технологию суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином и изучить их технологические характеристики;

- провести блохаыческае 'доследования по выяснению влияния мета -зида на обман витаминов Bg и Bg, а также по определению взаимного влияния указанных вптаилнов при их применении в составе суппозиториев с метазидоы;

- провести сравнительное изучение"биодоступностп метазида из суппозиториев и таблеток в опытах in vivo ;

- изучить токсическое п местнораздражавдее действие суппозиториев ыегазаца и ыетазада с рабофлавикоы;

- разработать норлативно-техническую документацию на ректальные суппозитории кетазида и метазида с рибофлавином.

НАУЧНАЯ НОБ'ЛЗНА. В результате биохьтаческих экспериментов впервые получены данные о влиянии противотуберкулезного препарата, производного ШК, метазида на обмен витамина Bg. Результаты исследований показала, что метазид вызывает дефицит вжгагяша Bg. который мокно предупредить посредством назначения профилактических доз этого витамина. Впервые были получены данные о том, что Уровень исходной обеспеченности организма витамином Bg ®3ffis&» йа возыож -

ность развития дефицита витамина Bg. На фоке нормальней обеспеченности витамином Bg не наблюдается дефицита витамина Bg. Прг: нэдо -статочности вятакина В2 введение кетазида приводи к ухудзе;ст обеснеченносга вигаг.гяком Bg, который модно предупредить введэяяем профилактических доз рибофлавина и ппрздоксина гиарохворяда.

Впервые научно обоснованы и разработаны состав и технология суппозиториев метаэида и кетазида с рибофлавином. Разработаны методики количественного определения лекарственных всцеств кря сов -местном врзсутствии в указаниях суппозиториях.

ПРАКШШКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАЕЛН. На основании проведенных ясслв-ддваний разработаны проекта BSG т рекгальннз суппсзкгортг мегагв-да по 0,3 г и ме^лзтаа со 0,3 г с рибофлавином по 0,002 г, а татке лабораторию регламенты яа производство указаниях лвкврмжешиж форд. йар^тавко-техгатаекая документация на предлст.енгав препарате направяека в Российсгяй госуяарствэзянй а&ятр зяеяертнза лекарств кд цред?ют разрвасяаг к клзЕЯчесяязс асшикшпЗ.

Фраукзнтн работа внедрены в учебняа процесс кафедр бзодогачао-кой хтдш а технология лекарств Рязанского -:оуо *« '-;.глн-

¿кого укзвэрагеега экевз аЕЗлемгка iLILBassose«

АЩСШШ РАНЛН» Оспоаша результата работа догохокя »a зднрю-праадаеаюй жовфарего®, посвяазвйэа соввршйсгв&^адга» гжмвдогг* з anrer-sssx учреакзаязх в на фаредезякеском врояе^засга?. /Ея^аа», 1969/. &>ec0BSJS03 щтгаой ясяфврзявш "С&врдаюзкв» дагрда-ления создавая а сценка готовых язгарстаекЕнх препаратов гжге&зта-и» и антамакрсбных веяэив" /Каозаа, 1980/, ВвесоязноЗ научной конфарзкда ШШ '*В5иг&д кзлодах учвнвх в ротенве npe&raa фарйадал 1991/,

ЩБ&ЗШШ. По теме диссертации опубликовано 5 п^п^н«?* рабе?, . тащшш, ЙЩЗТАШЕ JTA ЗЩШ". На зздту 5»?тягся: ряэуг»

таты исследований по обоснованию оптимального состава и технологии ректальных суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином, .материалы по разработке методик количественного определения метазида и метазида с рибофлавином при совместном присутствии в суп -позиториях, а такие данные биохимических, биологических, биофар -:.:ацевт;*ческих и физико-химических исследований указанных суппозиториев.

ОБЪЕЛ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертационная работа состо -кт из введения, обзора литературы / глава 1 /, экспериментальной части / главы 2-5 /, общих выводов, списка литературы, приложений и содержит 144 страницы машинописного текста, 22 таблицы и 16 рисунков. Библиографический указатель включает 273 источника, из которых 64 на иностранном языке*

Во введении обоснована актуальность тема исследования, определены его основная цель и задачи.

В первой главе / обзор литература / дани физико-химические характеристики метазида, рибофлавина и пиридоксина гидрохлорида, пшведен анализ фармакологических и фармацевтических факторов в разработке новых лекарственных форм метазида.

Во второй главе описаны материалы и методы исследования, приведены разработанные нагла методики количественного определения в суппозиториях метазида и метазида с рибофлавином при совместном присутствии.

В третьей глава изложены результаты экспериментальных исследований по разработке состава и технологии ректальных суппозиториев метазида, определению их стабильности, местнораздражавщего действия, токсичности и биологической доступности.-

Четвертая глава содержит результаты биохимических исследовав няй суппозиториев метазида, метазида с рибофлавином, метазида с пиридоксина гидрохлоридом, кетазвда с пиридоксина гидрохлоридстл и

рябофяавином.

■ В пятой главе приведены экспериментальные данные по разработке состава и технологии ректальных суппозиториев метазида с рибофлавином, определению их стабильности, местнораздрагсавщзго действия, токсичности и биологической доступности.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТУ

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЗДОВАКШ

В качестве объектов исследования были забраны лекарст. чнные вещества: метазпд /ГФ X, ст. 400 /, рибофлавин / Г© X, ст. 635 /, пиридоксина гидрохлорид / X, ст. 566 /, вспомогательные вещества: полявинилппрролидои м.м. 12600 - 2700 / 42-1134-78 /, масло какао / X. сг. 474 /, твердая яир типа А /31С 42-1117-73 /. витепсол Н-15 / Т7 В 3-89 /, жировая основа / ФС 42-836-73 /, ю-ностеарат глицерина / ТУ 18-16-126-83 /, тзза-80 / ВФС 43-163-72/% лекарственные фора;и: суппозитория метазида по 0,3 г и суппозитории метазида по 0,3 г п рибофлавина по 0,002 г.

Суппозитории готовили методом валяванкя по талу суспензт с учетом обратного коэффициента закезекгя, рассчитанного кьда и разного 0,83.

ФЕЭИво-химяческие я сгруктурко-го.тахпческко свойства суппозиториев / температуру плавления, зрзмя пслноЗ дефорнаапи, кислотное» йодное .и- перекисное числа / определяли в соохвегстгш! -г ?лйгод«ка?«, приведенными з Г5 Х1, вып. 1.

Количественное определение в суппозиториях метазида н кетачг-да с рибофлавином при совместном присутствии проводили по разработанной нами методике спектрофотокетричзским катодом. На с с ко на --вании сравнительного изучения спектральных характеристик метазида и рибофлавина в 0,1 коль/л хлоркстоаадвродной ккслотэ забраны

вей водя е каксамалышм поглощением для каждого лекарственного вещества, пра которых Еоглозрех только одно из них. Результаты

иеслздованпя прздстазлеш на pso. 1.

- ^ /ш/

210 2оО 290 330 370 410 450 Рис. 1. Спехтры поглощения 0,002$ растворов изтазида /1/ с

рибофлавина а 0,1 коль/я хлористоводородной кислоте /2/

Как вэдно бз рис. 1, кетаззд имеет один максимум поглощения при длине волны 251 см, что почти совпадаем с максимумом поглощения рибофлавина / 2S7 ни /. Однако, УЖ охйзалось, при радведе-кяи. использускок при определении йахаззда / 40G00 /, поглощение рибофлавина при дякяе волны 261 па равно цуаю» Что позволяет он-редглягь кзтазид при этой длине волка бзз учета поглощения рибофлавина.

В еяышой части спектра ттааад cossa ко поглощает, причем при длине волны 445 е::г соответсмзуздей i¿акешдуыу поглощения рибофлавина, поглощение ыатазида равно нулю.

В результате проведенных исследований для количественного определения иетазяда была выбрана длина волна 261 Ш-, для ркбо -флавана - 445 ш:.

Расчет количественного содержания метазйда йрЬизводили с уче-

гса поглощения стандартного растгорг вргвар-э?а, рхбо^лагала ~ удельно те К0эфт;ш1гген?а погло;дз;стя.

Кинетику высвобождения кетаззда пз сувзозпторпп® сгрвд^дгв: котодаиа диффузии в агар и дизжл чврзз

Биодостугшоеть иехазвда из суппознгорпг-з опоел&^ШЕ по дшш» основанной на реакции с п-диаггззагдшоСепгадыгетогс:! -хогэ ~ элсзтроколорлыетрпческзм методом.

Количественное определение рзбо$д-авяна в мгла* оргажх з тканях проводшгасъ кетодсм, осковадажк пз свэсейгзск! .ргбз§а.згхй-связыващего балка яри взагоюдеёсувяи о ркбо1х^авкг;о*? ггягл флуоресценция.

Количественное содержание 4-пирндоксилокоЗ кяогст-? с определяли флуоресяентпта методом.

Кагппестзпнкзе содерпйше пирядодааяя г лагк'1 сягак^» «й -редвяяли ВЗВХ методой по модЕфкцпрээа^;о5 •«видаке ¿/и^гжкжк-нни превращением эатваероа В8 ь сзотЕзхстауЕ-г;^ ус-

тойчивые на евету и якеядае солее шоехчь. г:- —'лей «чг«;; пенена.

йсгатанге- ва »шфсбгалегпчесггук грсэдд?»

• лось аоявчесхаваяна евределепиек ^»«екоес^^а: л .

а ганке по заяваекаэ бантвр*! осаейвявз . НЕ^згв^ео^в?!»«^ , 51ар'ау1оаессиэ шгеиз,. Рявцйствпкв ••,еги%"!Лг *

СОКдНИВ Я ЯЕЩЯДОВ сшшгокш*

Пряг разработке состава я тзхйаззгг^ ¡^аж^р^т «г. -г.?,--изучает влйяеиэ степени дизвервнооги .яреляттеа, »яогй, . мкю вовврквоетда-авишак в .внссадягшгеяужг?, -¿г .

веществ на фармацовгачосяуп доонушгоета кэ

Форш.

Схепеаь дкеззрежхяв образцов яеигиедъчзкнего я кязеж.течк*/» в.стуаае цетазада. евредвзяяя ззизренкзм'час^й!; гтора^'ч» зал, яжрв-

скссок Бнсушр / 200 измероЕйй /. Результаты исследования показали, ^го образец кеизвшьченного йзхазвда содержи? частица размером до 83. ш! / кэаифавда кздьчайшвй оорода» /; образец измельченного кгя&ззвв- еодарквг частяда р10 каш / квалификация наг -мельчгДйай яоризог /.

Ойраделзшз зызвобозданзя кэхаззда кз оушюзиториев, яровз -даюе мэгсдса далека в ггарсзйй гель, показано:

- Д2ама?ра скрагваннг аок дя* сувяозвхораеэ на основах шело каяхс, тавргзй жзр таза А, агтапсол И-15 щжеркэ равны к сосхаа-лкэх 64-63 ш» в 2С2 ра&а бше, чем для сушюзнхориев на за-оодааоЗ ;шроеай сенеге, .-где дагааагр окрасевдой зона бщ равен все- • гс 29 га:

- ч£2сользг.-~ зйсзвйоадааке иейдадается из суппозиториев с гз-

мадмеиьш вравшзнад разгззров даакехров окрааенных зон

дая сшзогг/к-^сз с кзкеяьчекззм гжхвжцом над хевоааш с непзиель-пекдаг вйрьирусг ох 1-2 ка для заг-едсшй хшровоЭ основы, витепсола Я-45 к якдаж» зира к&а А до 15 ш дуга касла какао.

лзшшзоюйш» глотала дгалига через деда^ая, нра котором еон-гакирзцйк шызада шгошчувсхвгхашаш спшсрофохо-

киразезачи .кегода;«, с сдгг;! атсрош Еодхгердило взяучешшэ• результат л увечна®» за с- друхгй»,

Даздкад« эишок айсссрдаига бггхо Ешшание -влияния поверх-¡гк»-&1яаак ведвзх» кд кюьобэадензэ шхаздда "из сукаозитора-ев. резудысак йрсдаесгвуадзг отахов, исследование прово-

дилось хошю з всаользогзайгФ!' взугльченюго ксгазвда: Шлучашаге рйгуяы&зз йредсхааяепк в кабя. 1» Каа гэдю пз табл. 1, ерадав результата ао Ейсвоболденза мзхздмда из - изученных в дашаг Эйсве-. пкеят» суааозаюршх сснэг ах кэзко рашнмших:» а ворвда© ушвь-зеная в след^ей Еооледовагальнасхя: твердый жир ш А» твив-50. гордый гапа А * Т2* «азао, мааяз-КЕзаа 4 То,

Таблица 1.

' Результаты диализа кзгазпда т суяаозяторазв в заввсймоста от наличия поЕерхноотло-егставкшс «гщзех-в / 3 ® 6, Р гх 95^ /

й • Взд основы • 'Содержав^' кгтазэдз. а айазнз-

| * ной аадзосяи з ет / м г ы /

—• I -----, _______________ , „

и Масло какао 200, - 25,00

2. г,'дело какао * 5.« То 197,05 £ 23,20

3. Твердый жир тана к 156,25 ? 25,58

4. Твердый жзр гота А + 2% Т2 - 263,21 5 31,32

5. Твердый жир типа А -9- \% тгин-80 410,83 г 44,8?.

б. Заводская жировая основа 123,03 ^ 25,18

7. Заводская мировая основа +5,"4 513г33 £ 19,70

3. .Заводская жировая основа 1.67,90 £ 17,52

+ \% 723Я-80

заводская акровая основа 1% твшьвО, «'^рдей гчр ш Л, сказ жаровая осаова. зазодедая ш&шя. ытт *■ Щ

$аяловпзгелыша экигса асшмлокигш за рм^&зза» ессъ-.з» теззшоггщ супнозкдариев метазгжй й£Ж> Езученас ^г-вавя? Ж: 12300? 2700 ка гкевойоащзнзе орззаратб аз аздатяфзк. далоя з сост§з лекарежзвш'ой $орааг язи«. езоссЗ&едг г» г^хияв.«* чеейзЗ смэдж и з вада сухей суса'ШК» «кгзадп*» ПЙП с квтазкдом-гзтозЕйи яутзи :=зг^азаь «

2055 водам растзорса ИШЬ шивдгяда* заеузгГ'Длк^ юзг^-еЭ сг з сугаяанои яра «кйгг^'сур» ТС''^ л «ечсаг.?

часов / до т®«гоянно10 веса / а лэиеяьчедесч. Впгиалв .'^г.й еуг?.. позитории, аод^вшз ЩЙ! и к8«»8д в вядй »етанглаозд!! ^шся. Результате иссд&вййиш крвдогазлеяя э ггбд, 5, вяд^о ез тамЗл.Н, оптимальным соодаееи. далязкя ^омпозшда 2 к % всчупкг

Таблица 2.

Результаты диализа кетазвда ьз суппозиториев, содержащих мз'хазвд к Ш м.м» 12600 * 2700 в виде механической смеси / Е = в» Р = 9э% /

: Ей основа ■Ыстазид ! ПШ :Содержание метазцда б 1/части/ :/чася|/:даализной жвдкости в ист /Игх/ • » •

1. ^асло какао 1 2 502,70 ± 28,33

о 1 1 474,83 £ 21,93

3. 1 0,5 342,74 ± 26,53

'а » Твардьй ыф 1 2 400,50 ? 25,34

тика &

б. 1 1 381,50 £ 20,21

я 1 0,5 275,82 1' 32,71

ко-гаацда к ПБП расшз 1+1. Васзсбсзденае катазвда из ука-оакгд.~ когпозищга в, чья иг 3 3 в 5, но достоверно не нлке, чы пг £ 1 я 4 ща езиьсгм содержании вспомогательного вещества ю срагкзнза с последам.

Исхода рггушдеяоэ данного эксперимента, соотношение ие-к 033 1 + 1 бадо всдользовано для заготовления сухой сус-ьеятав эъыг кскакжгцтса. Вра Езучегзгп шсвобогдеьгя метазцда из

.з

оуанозлторяе.е с 1азс2 сусвекзязм било вкяалоно, что содержание -лйяа,}Згс«яусго вгшесхва в даалпзатс составило; 70-1,20 - 62.55 ияг / ¿11Я озкош каслс. какао / н ЬВ1 ,оо - 53,83. ьшс / для основа твер-ззр пай к /, Еэлучаняьа величина цревнкаэт такезаз для суп-возятарнез, содехаащгз: в аналопгчасй пропорции кзханвческуо скесь мзтззкда '¡; Ш. и 1,48 к 1,52 раза соответственно.

Сухая сусяензия кетазада с ГШ в соошопенпг 1 + 1 была изучена с по'жеьз оязхтрояисЕ аякрофогографиа, которая показала, что ПВП в виде сфсрй'чесЕах обраээьанай рзссолоаея межцу кристаяяаиа

кетазвда. Очевидно, ПЕП как гидрофильное вещество способствует лучшей смачиваемости и, следовательно, растворимости гидрофобного, малорастворимого метазида.

При сравнении результатов диализа из суппозиториез,. содерза-ших сухую суспензию метазида с ПЕП, и из суппозиториев метазида. с поверхностно-активными веществами / табл. t / сказалось, что первые для основы масло какао выше в 3,5 раза, а для основы твердый, жар 1кта А с твина-80 различия статистически недостоверны. Однако, принимая во внимание тот факт, что лекарственное вещество вводится в состав суппозиториев по типу суспензии" и что' ДВП как высокомолекулярное соединение способствует -повышают) седиментацз— ояной устойчивости гетерогенных систем, сухая суспензия была выбрана как оптимальная" и для основы твердый жир типа А.

Таким образом, в результате проведенных исследований по разработке состава и технологии суппозиториев метазида были выбрана основы твердый жир типа А и масло какао, а такке ПВП м.м. 12600 -2700. введенный в состав лекарственной формы в виде сухой суспензии с измельченным метазндом в соотношении 1 + 1.

На основании проведенных исследоваши! предложен состав суппозиториев метазида: метазида - 0,3 г

ПВП м.м. 12600 - 2700 - 0,3 г масла какао пли

твердого жира типа А. - достаточное количество для получения

суппозитория- средней массой 1,off г

Изучение технологических- свойств суппозиториев метазида по -казало, что они соответствуют требованиям Г5 XI издания, прэдъ-являегает it данной лекарственной форме.

Оценку стабильности суппозиториев иетазкда изучали в естественных условиях при комнатной температуре / 20 - 2°С / и температуре холодильника / 3 - 5°С / в течение 1 года хранения. По ре -зультатам проведенных исследований количественное содержание мета-зида находилось в пределах допустимых по НТД корм / 0,285-0,315г/; температура плавления и время псшвой деформации такие остались в пределах требований Н1Д, хотя к несколько возросли: прирост показателя для температуры плавления составил 0,3-1°С, а дая времени полной деформации 2-3 минуты; кислотное, йодное и лерекисное чис= ла не претерпели существенных изменений. При сопоставлении результатов исследования суппозиториев, хранившихся ара рззлкчпкх пературных режимах, следует отметить тенденщрэ & фгдадеб стабильности у суппозиториев, хранившихся при температуре 3-5°С.

Продукты разложения метазвда / формальдегид _ и ГКНК / определяли по методике Г3> X издания, от, 400, а т^кае хроматографичес-кш! методом на пластинках салуфол г системе растворителей бензол: этанод:диметилфордамид в соотношении 20:30:5 / проявители - УФ .лучи в 0,15? раствор ванадата ажония /. В результате проведенных исследований была выявлена цолрдат&чьная реакция с нитритом натрия на иодкрахмальвой о~/&ге ш отрицательная - с фуксаксерштстэй кислотой, а такке валячке тощео одного пятна из суппозитория ка хроматограше / рис. 2 /, соответствующего метазпду-евзи;етел£ с = 0,45, что говорит об. отсутствии продуктов разложения метази-

да.

Микробиологические щоттъэшя сушгозитсраев кегазшг пока--зали их соответствие тр^ощвшг Н1Д. Местнораздракакдее действие в токсичность супюг^тещев, метадяда в опытах на крысах не были выявлены.

»

Исследование бмщдв^туяяооти.метазида из суппозиториев проводам в оестйх на иролвнах массой 2,0-2,5 кг. Ь'етазкд

Рис. 2. Хроматограмма из суппозитория метазида:- 1. 2, 3 - свидетели / соответственно /: формальдегид, ИНК, ме-зид; 4 - раствор лекарственного ве -щества из суппозитория.

вводила в дозе 100 мкг на 1 иг веса животного. В качестве стандартной лекарственной форма использовали таблетки метазида. Сравни -тельное изучение изменений концентраций метазида в крови проводили спустя 1,2,4,6 и 8 часов после введения лекарственных форм. Пробы крови в количестве 2 мл забирали из краевой вены уха кроликов. По результатам проведенных исследований были построены фар -накокинетические кривые / рис. з /.

дз §•

и*

О)

о

60 -50 -

40

30

20

10

' -> Ь /час./

Рис.3 . Динамика концентрации метазида в крови кроликов после применения его в составе- суппозиториев /1/ М таблеток /2/.

Как видно из рис.3 , илсшадъ под кривой, отражающей кинетику метазида из суппозиториев, превосходит таковую из таблеток. Следовательно, суппозитории метазида обеспечивав? всасывание в кровь лекарственного вещества лучше, чем таблетки. Степень биологичес -' кой доступности метазида в форгге суппозиториев по отношению к таблеткам равна:

228,55

С.Б.Д.=- . 100 = 124,33»

. 183,60

■ При введении метазида в суппозиториях его максимальная кон -цениззацик в 2,14 раза выше, 'чем после введения таблеток. По времени достижения максимальной концентрации / 1 час./ исследуемые суппозитории равноценны таблеткам.

БйоаШЧКЖИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ СУШОЗатОРИЕЗ МЕТАЗИДА,

ЖГАЗВДА С ЛИРЗДОКСШ ХЩКШЮРВДОМ,

1ЕТАЗИДА. С РИБОФЛАВИНОМ Ж

МЕТАЗИДА С 1ШЩШША ЩР0Х1ШЩШ И РИБ0Ф1АШН0М

Эксперимент проводили на белых крысах кассой 180-200 г.- Пири-доксина гидрохлорид и рибофлавин вводили из расчета 100 мкг на крысу / что соответствует физиологической суточной потребности животных /„ метазид — ¿ir на 100 i веса животного.

Было поставлено два эксперимента на секи группах еиеотк^х. В течение 10 суток животным вводили ректально / за Ескхшвнгзы контрольных крыс / но 1 суппозиторих) в день.

Л первом Бксперименте бшго три группа животных: первая.группа получала суппозитории кетаэвда, вторая - оушозиториз метазида

.с лиридоксина хедрохлоридом, -третью группу составили лнтактные жи-

% _

вотные — контроль.

Зо втором эксперименте было четыре гц&щш еивоткых: первая труппа получала суппозитории кетааида» "Вторая — суппозитории ¡¿г-

тазида с рибофлавином, третья - суппозитории метазида с рибофлавином и пирадоксина гидрохлоридом, четвертуй группу составили интактные животные - контроль*

Для оценка обеспеченности крыс витамином ^ определяли суточную экскрецию рибофлавина с мочой, содержание свободного рибофлавина в плазме крова и общего витамина В9 в печени. Обеспеченность животных витамином Вд определяли по содержании пиридоксаля в печени а су?очйой экскредаи 4-пяридоксиловой кислота с мочой. Ре -зуйьтаты проведенных исследований представлены в табл. 3 и 4.

Как видно из табл. 3 и в соответствии с литературными данными, крысы имела умеренный дефявдт витамина Вно были адекватно обеспечены витамином Вд.

Введение метазида крысам с недостаточностью витамина В2 приводит к ухудшению обеспеченности витамином Вд, что проявляется в достоверном увеличения экскреции 4-пиридоксиловой кислоты с мочой в 1,6 раза и тенденции к снижению содержания пиридоксаля в печени.

Введение суппозиториев с комбинированным препаратом метазида с пирадоксина ГиДрохлоридом характеризовалось резким возрастанием экскреция 4-пириДокскловой кислоты с мочой и некоторым увеличением содержания пиридокйаля в печени / табл. 3 /.

Введение метазида йрыййй з умйр'ённшл дефицитом рибофлавина уже через 10 суток приводилб к дальнейшему углублению недостаточности витамина В^ в организме, что проявлялось в достоверном снижении на 15% его содержания в печени до уровня, характерного для выраженного дефицита этого витамина, и тенденции к снижению концентрации свободного рибофлавина в плазме крови / табл. 3 /. Суточная экскрвикз рибофлавина с мочой при этом увеличивалась в три раза.

Введе:Я5 комбинированного препарата метазида с пиридоксином не восстанавливает со£?Шаййё рйбъфлавина в печени до уровня

Таблица 3.

Суточная экскреция с мочой и содержание в печени и плазме крови витаминов группы В у крыс с умеренным дефицитом витамина В2 при ректальном введении в суппозиториях метазида и его комбинированного препарата с пирвдоксином / М - к /

Показатель : Контроль : Метазид . Метазид. +-

Суточная экскреция

с мочой, ыкг

рибофлавин 1,4±0,2 4,4т0,8а 7,1±0,9<3

/п=10/ /п=Ю/ /п=10/

4-пиридоксиловая 11,1*0.9 18,1±1,1а.. 48,0±2,.1а'6

кислота /п=Ю/ /п=10/ ■ /п=10/

Содержание в печени.

мкг/г

рибофлавин 24,6*1.1 21,01±1 ,За 21,7±1,0

\ /п=10/ " /п=10/ ' /п=9/

пиридоксаль 1,20^0,08 1,07*1,0 1,50±0,05а'6

/п=У/' ' /п=10/ /п=8/ ••

Содержание в плазме.

нг/мл

рибофлавин 14.1—1,0 11,1-1,2 16,бгЧ,Зб

/п=6/ /П=8/ /п=8/

Примечание. Здесь и в табл. 4: •

а - достоверное' отличие1 от контрольной группы, б - достоверное отлиЧй'е-' от-'группы, получавшей метазид:

Таблица" Ъ

Суточная экскреция с мочой, и содержание в печени и плазме крови витаминов группы В у крыс, обеспеченных витамином В2. при рек -тальном введении суппозиториев метазида и его комбинированных препаратов с рибофлавином и пиридоксином / М - м /

Показатель Г Контроль • Метазид : Метазид : ! + в2 : Метазид + В2 + В6

Суточная экскреция с мочой, мкг

рибофлавин 3,1*0,7 2,8*0,2 37.2*0,9а'6 33,1*1,6а'6

4-пиридоксило- 15,7*0,7 13,8*1,2 19.8±2,4б 115,1±19,2а«6

вая кислота /п=6/ /п=8/ /п=8/ /п=8/

Содержание в печени, мкг/г

рибофлавин 35,1*0,9 31,9*1,1а 36,4*2,0 37,9*1 г5б

пиридоксаль 1,17±0,09 1,25*0,07 1,5С±0,О9а- ---и. . . Я Л 1 ,77-0,11 — -

/п=7/ /п=8/ /п=8/ /п=7/

Содержание в плазме, яг/л

рибофлавин 25,2*3,2 16,3*2,0а 39,9*4,1а><3 37,6*7,2б

/п=4/ /п=6/ /п=7/ /п=6/

контрольных животных.

Аналогичное ухудшение обеспеченности рибофлавином наблюдалось при введении метазида животным с исходной оптимальной обеспечен -ностью этим витамином / табл. 4 /. На фоне не изменившейся экскреции с мочой его содержание как в плазме, так и в печени достоверно снижалось на 35 и соответственно. На фоне нормальной обес -печенности витамином В^ нарушения обмена витамина В^ при введении метазида не наблюдается.

Для предотвращения развития недостаточности витамина В2 в со~-став суппозиториев вводили рибофлавин в дозе, соответствующей су^ точному потреблению крысы, а также рибофлавин с пиридовдино».. В соответствии с данными, представленными в табл. 4, рибофлавин, введенный ректадьно в составе суппозиториев метазида с рибофлавин ном, хорошо усваивается организмом, о чем свидетельствует его увеличенная по сравненшо с контролем концентрация в плазме и гкркре-шя его избытка с мочой. Применение комплексного препарата мета -зида с рибофлавином полностью предотвратило развитие дефгщдта витамина!^ у крыс: содержание его свободной фоде* в плазме и обще-» го г гсчекн бнло достоверно повышено по с^вненис с группой, по — лучавпей метазид. Одновременно наблюдалось достоверное увеличение концентрации шридоксалк в иечещ^ зкркреции 4-пирэдсокскдоэой кислоты с мочой / табл. 4/.

Введение суппозиториев, сдаивавших метазид с рибофлавином и пиридоксина гидрохдарщо«,. возвращало к норме содержание рибофлавина в печени, уведанрздто: содержание пиридоксадя в печени в 1,5 раза V выведенце, избытка пиридоксина в виде 4-пиридоксшговой кислоты.

СОЗДАНИЕ И ИССВДОВШЕ СУППОЗИТОРИЕВ МЕТАЗИДА. С РИБОФЛАВИНОМ

При разработке состава г технологии суппозиториев метазида с рибофлавином были учтены результаты собственна исследований по

суппозиториям метазйда» а также литературные дацные по суппозиториям рибофлавина, оказалось, масло какао и твердый жир типа А обеспечиваю? макййлал&йое высвобождение обоих препаратов из суп -позиториев. Так как биохимические исследования суппозиториев ме-тазида с рибофлавином показали, что.рибофлавин предотвращает развитие дефицита витамина В^ в дозе, соответствующей рекомендуемому суточному потреблению, поэтому в состав разрабатываемой лекарст -венной формы он был включен в соответствующей для человека дозе: 2и.

Технология суппозиториев.метазида с рибофлавином аналогична таковой для суппозиториев -метазида. Рибофлавин вводили в состав лекарственной формы в виде порошка наимельчайшей степени дисперсности, смешивая с сухой оугягевдией метазида с ПВП м.м. 12600 * 2700 в соотношении 1*1.

На основании проведеяша исследований предложен состав суп -

позиториев метазида с рабвфйаванош

метазида . - 0,3 £

ПШ м.м. 12600 ? 2700 « <5,3 ?

рибофлавина " - 0|008 Г масла какао или

твердого жира типа А « дое?а^чно# Количество для получения

суйпОзйКЗрйЗ йрёдййй кассой 1,58 г

Суппозитории метазида с ряФофй&ВйнбМ иЗбЛбдовались в течение 1 года хранения при .комнатной тбшвратурё / 20 ± 2°С / и темпера-турз холодильника / 3 - 5°С /. Проведенные йосЛЗДО&нйя показали: технологические свойства супшэаюриев соответ'йтЗуйг Требованиям ГФ XI издания; количественное содержание метазида й рбофавййа находится в пределах требований Г2 X издания /6,285=0,-31§ и 0,0018-0,0022г соответстзенно;продуктов разложения мётйзвда Я рй^ бофлавина обнаружено не было / методом тонкослойной хроматографе .

проведенной аналогичным для суппозиториев метазвда способом, из суппозитория было получено два пятна: с 0,45 и = 0,32, соответствующих ыетазиду и рибофлавину свидетелям / рис. 5 / /.

Рис. 5. Хроцатограмма суппозитория метазвда с рибофлавином: 1,2,3,4 - свидетели / соответственно / : формальдегид, ГИНК, метазид. рибофлавин; 5 - раст -вор лекарственных веществ из суппозитория.

Кислотное, йодное и перекисное числа суппози'ториев ыетазида о рибофлавином в течение одного года хранения согласно результа. -там проведенных исследований не претерпели существенных изменений. При сопоставлении результатов исследования суппозиториев, хранившихся "при различных температурных режимах, следует отметить тен -

" 1 ч

денцшз к большей стабильности у суппозиториев, хранившихся при температуре 3-5°с.

Исследование биологической доступности суппозиториев метазвда

0 рибофлавином проводилось тавзе, как и суппозиториев метазкда. Результаты проведенных исследований показали, что изучаемая лекарственная форма по времени достижения максимальной концентрации -

1 час — соответствует таблеткам метазида, а по ее величине пре -восходит последние в 2,03 раза. Степень биологической доступности метазида из суппозиториев метазвда с рибофлавином по отношении к таблеткам равна: ''

. 100 = 121,14$

1оо,70

G

G О

е ©

Q ' ----

1 2 3 4 5

Микробиологические исследования суппозиториев метазида с рибофлавином показали их соответствие требованиям Г5. XI издания.

Местнораздраяавдее действие и токсичность метазида и рибо -флавша в суппозиториях не были выявлены.

ВЫВОХН

1. На основании биохимических исследований определены состав и технология ректальных суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином. Показано, что для изучаемых суппозиториев оптимальными фармацевтическими факторами являются: основы масло какао п твердый кир типа А и сухая суспензия метазида с ПВП м.м. 12600 ~ 2700 в соотношении 1+1. Установлено, что ректальные суппозитории ме-. тазида с рибофлавином в дозе, составляющей суточную потребность в этом витамине, полностью предотвращают дефицит витамина &> и . нормализуют обмен витамина Вц.

2. Разработаны методики снектрофотометрического количественного определения метазида в суппозиториях, а также метазида с рибофлавином при совместном присутствии в суппозиториях.

3. Язутона стабильность суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином в процессе естественного хранения.

4. Доказана микробиологическая чистота изучаемых суппозиториев, отсутствие местнораздрахаицего и токсического действия этих лекарственных форм. .

5. Изучена биологическая доступность метазида из суппозиториев метазида и метазида с рибофлавином. Доказано превосходство изучаемых лекарственных фора над таблетками по величине максимальной концентрации и степени биологической доступности.

6. Разработаны проекта В32 и лабораторнне регламента на ректальные суппозитории метазида по 0,3 т и ректальнне суппозитории метазида по 0,3 г и рибофлавина по 0,002 г.

-227. В Российский государственный центр экспертизы лекарств

представлена нормативно-техническая документация на ректальрц? суппозитории метазида по 0,3 г и ректальные суппозитории мйтеайва по 0,3 г и рибофлавина по 0,002 г на предмет разрешения их клинических испытаний.

Основное содержание диссертации отражено в работах:

1. Коваленко Т.А.', Сонин Е.В. Исследование в области технологии парентеральных суспензий метазвда // Современные направления создания и оценки качества готовых лекарственных препаратов

и антимикробных веществ: Тез. докл. Всесоюз. конф.-М,,1990,-С,80,

2. Коваленко Т.А., Сонин Б.В. Исследование влияния подившдал-пирролидона и декстрана на биологическую доступность метазида из парентеральной суспензии // Резервы совершенствования лекарственного обеспечения населения РСФСР: Тез. докл. науч.-практ. конф.-Владимир, 1991 .-0.19-20.

3.Коваленко Т.А. Разработка состава суппозиториев с метази-дом / Рязан. мед. ин-т им. акад. И.Д.Павлова.-М.,1991,-5'С. — Деп. в ШО "Ссшзмединформ" 11.09.91 № Д-21726.

4. Коваленко Т.А., О-'яин Б.В. Технологические аспекты со -здания инъекционной суспеикиа метазида // Успехи в области изу -чения и производства антибиотиков.-М., 19Э2.-С.93-97.-/Тр. та-та/ ВНИИ антибиотиков; Т. 23: Лекарственные формы антибиотиков.

5. Метазидандувдруеыая недостаточность витамина.]^ У крыс и ее предотвращение / В.М.Коденцова, Т.А.Коваленко, О.А.Вржесинская и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология.-1993.-

№ 6.-С. 46-47.

Лзд.код М 0£(РЪ)

| Рязкедииститут. Ротапринт. Заказ 1*516'¡99*/г. Тирчк<$$ э?з.