Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы

Курилова, Анна Алексеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы"

На правах рукописи

Оис»'

КУРИЛОВА Анна Алексеевна

РАЗРАБОТКА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД НА ОСНОВЕ СЫРЬЯ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ЧУМЫ, ХОЛЕРЫ, СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

-3 ЛЕН 2009

Ставрополь -2009

003486873

Работа выполнена в ФГУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

Научный руководитель: доктор медицинских наук

Таран Татьяна Викторовна.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор , ,, Мануйлов Игорь Михайлович;

Ведущая организация: ФГУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотрсбнадзора.

дарственном университете по адресу: 355009, г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1, корп. 2, комн. 506.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ставропольского государственного университета.

доктор медицинских наук, профессор Пожарская Виктория Олеговна.;

часов на

Автореферат разослан 2009

г.

Ученый секретарь диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Среди особо опасных болезней чума, холера и сибирская язва до настоящего времени имеют немаловажное значение в инфекционной патологии человека (Jakab Z., 2007) и довольно широко распространены, продолжая представлять актуальную проблему здравоохранения и ветеринарии (Витазева С. А., 2009; Ерошенгаз Г. А., 2008; Иванова Ç.M., Новиков Н. Л Фонарева К.С. и др., 2007; Кутырев В.В., 2008; Марамович A.C., Косилко СЛ., ИнокснтьеваТ.И. и др., 2008; Нефедов К.С., 2009; Терешкнна Н.Е., ДевдарианиЗЛ., 2008; Топорков В.П., Величю Л.Н., Щиянова А.Е. и др., 2008; Brachman P.S., 1,970; HauwaertTh., 2002; Hugh-Jones М.Е., 2003; Marandian M.N., Kamali A., 1981; Fini P., 1996; Sirisanthana T., Navachareon N., TTiaravichitkul P. et al., 1984).

Существует вероятность использования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы в качестве биологического оружия (Касина И.В., Саяпина Л.В., Анисимова Т.И. и др., 2006; Нетесов C.B., Сандахмиев Л.С., 2004; Ashford D.A., Whitney Е., Fischer M. et al., 2003; Berche P., 1998; Deroin Ph, 2001; Heselson N„ Guilemin J., Hugh Jones M. et al., 1993; Lamb A., 2001; Nilson S.L., 1991; Perkins В., 2003; Phillips A.P., Dando M.R., 1995).

Актуальными остаются работы по дальнейшему изучению вышеуказанных патогенных микроорганизмов (Агафонова В.В., 2009) и созданий эффективных новых, а также совершенствованию существующих средств диагностики вызываемых ими инфекций и мер их специфической профилактики (БугОркбва С.А., За-думина С.Ю., Бугоршва Т.В. и др., 2008; Коготюва О.И., Тюменцева И.С., Афанасьев ЕЛ. и др., 2006; Маринин Л.И., Тюрин ЕЛ., 2007). Мониторинг и бактериологическая диагностика особо опасных инфекций, генетичесга?е исследования (Srivastava P., Chattoraj D.K., 2007), производство разнообразных медицинских и ветеринарных препаратов - вакцин, диапюстикумов, иммунных сывороток и т.п. (Волох O.A., Шепелев ИЛ., Заднова С.Г1. и др.,. 2008) подразумевает использование большого количества питательных сред. .

В связи с высокой себестоимостью питательных сред из мяса, мясных и рыбных полуфабрикатов возникает необходимость поиска и апробации подходящего для этой цели стандартного и недорогого сырья. Производство полноценных питательных сред на основах, имеющих низкую себестоимость, является актуальным для экспериментальной и практической бактериологии, для выполнения производственных задач. В настоящее время возрастает' востребованность сред, даюших возможность решать конкретные микробиологические задачи; например, увеличивать продукцию определенного метаболита, изменять м0р(|хх'10П!ческие и обнаруживать новые фенотипические свойства, по/ггверисдЛь стабйЛt.iЮсть типовых или селектированных штаммов (Ахалкипа И.Г., 1хшшкова 'Jl.fK, 2001 ).

Требования к сырью, предназначенному Для производства пип'ггсльных основ, включают содержание необходимого количества полноценного белка, ми-

нимальное содержание жира, высокую биологическую ценность, хорошую растворимость, соответствие ГОСТам (Зайцев В.Ф., Маслов СЛ., Комоско Г.В. и др., 2003), экономическую эффективность применения. Растительное сырье отвечает основным предъявляемым требованиям и обладает необходимыми функциональными свойствами.' Белки растений представлены большим «шелом компонентов с различным ^инокйсшотнкм составом (Кретович BJI., 1975). От животного сырья состав раегкгелыюго сырья отличается большей стандартностью, имеющей первостШёнЙое 'значение для воспроизводимости получаемых в экспериментах результатов! Использование гидролизатов растений исключает риск контаминадий'животными патогенами (Трошкова Г.П., Юдин A.B., Сумкина ТЛ. и др., 2003). •' -

Лстуальность работ по изучению возможности применения в качестве питательных основ побочных продуктов и отходов пищевых производств обусловлена й. обострением Экологических проблем, ставящих перед микробиологической отраслью задачи развития малоотходных технологий, рационального использования, и переработки'образующихся отходов (Черкашина Н.В., Щербатова ОЛ., Епанчинцев AJL и др., 1998).

Таким образом, современные требования к качеству и стандартности микробиологических питательных сред для культивирования возбудителей ООИ с одновременным упрощением и удешевлением производства определяют актуальность проведенных исследований.

Цель исследования: получение и оценка рабочих характеристик питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы на основе растительного сырья: картофеля, свеклы, капусты, моркови, солода, сои, соевого молока, мелассы свекловичной (патоки рафинадной).

Осповные задачи исследования.

1. Обосновать перечень сырья растительного происхождения, перспективного для использования в составе питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

2. Получить из растительного сырья и охарактеризовать питательные основы микробиологических сред, приготовленные с использованием различных типов гидролиза (ферментативного, кислотного, щелочного).

3. Разработать рецептуру и методики приготовления питательных сред на основе полученных гидролизатов картофеля, свеклы, капусты, моркови, солода, сои, соевого молока, и мелассы свекловичной (патоки, рафинадной), с использованием различных добавок и стимуляторов роста, для культивирования чумного, холерного и сибиреязвенного микроорганизмов.

4. Дать оценку качественных показателей питательных сред при культивировании на них Yersinia pestis, Vibrio cholerae, Bacillus anthracis.

Научная новизна. Впервые разработаны рецегпура и методики приготовления микробиологических питательных сред (жидких и плотных) для 1упьтивиро-вания возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы (вакцинных и вирулентных

штаммов, НАГ-вибрионов), в качестве основ которых использованы, ферментативные гидролизаты соевых бобов, картофеля и меласса свекловичная (патока рафинадная). Приоритет разработанных методик подтвержден патеI памп РФ на изобретения: № 2260620 «Питательная среда (жидкая) для культивирования чумного микроба вакцинного штамма ЕВ» от 20.09.2005 г., № 2301256 «Питательная среда жидкая для культивирования холерного вибриона» от 20.06.07 г., № 2303630 «Питательная среда плотная для культивирования холерного вибриона» от 27.07.07 г., № 2288950 «Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов» от 10.12.06 г.

Впервые показана возможность использования питательной среды на основе ферментативного гидролизата соевых бобов для длительного хранения (в течение 12 мес) штаммов возбудителей чумы (при +4 °С) и холеры (при +20 °С) в условиях лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора и для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба. ..,,,„

Впервые показана возможность использования питательной среды на основе патоки рафинадной для восстановления жизнеспособности У. рея11$ после длительного хранения на традиционных средах в условиях лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов».

Проведенные исследования могут служить моделью при изучений использования других видов сырья для микробиологических питательных сред.: '

Характеристика спектра химических и физических свойств птнтельных основ микробиологических сред из картофеля, свеклы, капусты, моркови, солода, соевых бобов, соевого молока, мелассы свекловичной может быть использована для дальнейшего изучения исследуемого сырья с целью получения различных специализированных питательных сред и совершенствования методик приготовления питательных основ и питательных сред.

Практическая значимость работы. Полученные жидкие и плотные питательные среды на основе ферментативных гидролизатов сои, картофеля и мелассе свекловичной, обогащенные различными добавками и стимуляторами роста (дрожжевым экстрактом, ферментативным гидролизатом казеина, натрием сер-нистокислым, липоевой кислотой) предназначены для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы в лабораторных условиях (акты испытаний в лаборатории сибирской язвы ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора от 20.04.05 г., в лаборатории питательных сред для культивирования микроорганизмов НУ групп патогенное™ и лаборатории биологического и технологического контроля ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора от 27.04.05 г., в научно-производственной лаборатории препаратов для диагностики особо опасных и других инфекций от 16.05.07 г., в лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» Ф1 УЗ Став11И11ЧИ Роспотребнадзора от 10.10.07 г.). Плотная среда на основе ФПС пригодна для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба (акт испытаний в научно-производственной лаборатории препаратов для диагностики особо опасных и дру-

rax инфекций от >13.01.04 г.). По культуральным свойствам разработанные питательные среды не уступают коммерческим аналогам, приготовленным на ферментативной основе говяжьего мяса (бульону Хотгингера и агару Хоттингера), при этом среды на соевых и картофельных основах в 3,5 раза, а на мелассовых основах в 5 раз: выгоднее экономически.

Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов на основе мелассы свекловичной используется в учебном процессе кафедры микробиологии и вирусологии Ставропольской государственной медицинской академии (акт о внедрении от 15.11.2006 г). Питательные среды на основе растительного сырья, предназначенные для культивирования возбудителей чумы и' жлеры, используются в качестве сред выбора при плановых пересевах музейных штаммов в лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» ФГУЗ СгавНИПЧИ Роспоггребнадзора (акт от 26.032008 г.).

Методики приготовления и рецептура сконструированных питательных сред изложены в 6 методических документах: «Методических рекомендациях по использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативных гидролизагов сои (бобов и соевого молока) для культивирования чумного микроба» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 4 от 27 апреля 2005 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию питательной среды (жидкой) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 11 от 27 декабря 2005 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию питательной среды (жидкой) для культивирования холерного вибриона на основе патоки рафинадной» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 3 от 30 марта 2006 г.), «Методических рекомендациях по технологии приготовления агаровой питательной среды для культивирования микроорганизмов рода Bacillus» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 5 от 29 мая 2007 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативного гцлролизата картофеля для культивирования чумного микроба» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 4 от 30 мая 2008 г.) и «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию плотной питательной среды на основе ферментативного гидролизата картофеля для культивирования холерного вибриона» (протокол заседания Ученого совета СгавНИПЧИ № 5 от 7 июня 2008 г.). 24.04.2009 г. утверждены директором ФГУЗ СгавНИПЧИ Роспотребнадзора после согласования на федеральном уровне 2 нормативных документа: ТУ 9385-002-01897080-2009 на Питательный бульон для культивирования микроорганизмов, готовый к применению (Бульон ХотГингера) и ТУ 9385-004-01897080-2009 на Питательный агар для культивирования микроорганизмов, готовый к применению (Агар Хоттингера), а также Инструкции по применению этих сред, постоянно используемых в ходе проведения исследований в качестве контрольных.

Основные положения, выносимые на защиту.

]. Питательные основы; из растительного сырья пригодны для использования в составе питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

2. По ростовым свойствам в отношении возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы питательные среды на основе растительного сырья (сои и мелассы свекловичной), содержащие добавки и стимуляторы роста микроорганизмов, не уступают питательным средам, приготовленным на мясных основах.

3. Штаммы возбудителей чумы и холеры при культивировании и длительном хранении на соевых питательных средах стабильно сохраняют свои куль-турально-морфологические свойства в течение 12 месяцев (срок наблюдения).

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на VI Межгосударственной 1(аучно-практической конференции государств-участников СНГ «Санитарная охрана территорий государств-участников содружества независимых государств: проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях», 2005 г., на VII Международной конференции «Циклы природы и общества», 2005 г., на научно-практической конференции «Естествознание и гуманизм» в честь 170-летия со дня рождения Г.Н. Потанина, 2005 г., на научно-практических конференциях «Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению саюпцдб-лагополучия и защите прав потребителей, 9-я и 10-я Ежегодные Недели медицины Ставрополья», 2005 и 2006 г.п, Втором съезде военных врачей медико-профилактического профиля вооруженных сил Российской Федерации «Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития», г. Санкт-Петербург, 2006 на научно-практической конференции «Современные аспекты эпидемиологическою надзора за особо опасными инфекционными забоиеваниями на Щге России», 2007 г.

Публикации. По теме диссертации опубликована 21 научная работа, в том числе 1 - в издании,, включенном в перечень ведущих рецензируемых научных журналов, утвержденных ВАК Министерства образования и науки России и рекомендованных для публикации основных научных материалов диссертации на соискание искомой ученой степени, получена в соавторстве 4 патента РФ на изобретение. ,.,,. ,, ,

Днссертациош|ая работа выполнена в рамках плановой научной темы «Изучение возможности использования некоторых щадов. расгщгельного сырья, как основы питательных сред для возбудителей с>сс)бо опасных инфекций», № гос. регистрации - 0120.0 700411, в которой автор являлась ответственным исполнителем,., ........ . ,......г ■>.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 144 страницах компьютерной) текста и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 306 источни-

ков, из них 181 отечественных и 125 — иностранных авторов, приложения. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 10 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МаТериалы и методы. В работе использовали 8 штаммов Bacillus anthracis: В. anthracis СТИ-1, В. anthracis 71/12. В. anthracis 228/8, В. anthracis 228, В. anfhfiieis $\/\,В. anthracis 1262, В. anthracis 645/291, В. cmíhracis 13/39,7 штаммов б.'»«к)р<3дсп1«иных спорообразующих сапрофитов: В. subtilis 3, В. cercas 96, В. cereus 111, B. ökreus 250, В. mesentericus 1024, В. megaterhan 6, В. megaterium 654, 4 вирулентных tïrràkMa возбудителя чумы: Yersinia pestis 461, X pestis С-746, Y. pestis C-763, Y. pestis C-765 и 1 вакцинный штамм Y. pestis EV, 4 вирулентных штамма возбудителя холеры: Vibrio cholerae C-602, V. cholerae C-604, V. cholerae 446 Аз, V. cholerae 712 Аз и 1 авирупентный штамм V cholerae Поп 0\ Р 9741, полученные из лаборатории «Коллекция патогенных микрооргтигизмов» ФГУЗ Ставропольского н^чно-исследовагельского противочумного' ййСТитута Роспот-ребнадзора. Для контроля биологических свойств питательных сред использован набор тест-штаммов, полученный из ФГУН ГИСК им. J1.A. Тарасевича Роспот-рсбНадзора: Shigella flexneri la 8516; Corynebacterium xerosis 1911,- Streptococcus pyogenes Dick 1; Shigella sonnei "S-form"; Pseudomonas aeruginosa 27/99; Serratia plymuthica I' Все штаммы имели типичные морфологические, тинкториальные, кулыуральные и биохимические свойства

В качестве контрольных в работе использовали традиционно применяемые в бактериологии питательные среды: агар Хотгингера, pH 7,2-7,4 и бульон Хот-тингера, pH 7,2-7,4. По соответствующим рецептам готовили 1 % содовый агар, pH 7,2-7,4; пеггшнную воду, pH 7,8 (Биргер М.О., 1982; Козлов ЮЛ., 1950; Ла-бинская A.C., 1978), агар Сладстона-Филдса, pH 7,2-7,4 (Gladstone G.P., Fields P., 1940). В качестве питательных основ в работе использовались классический белковый гидролизат - основной раствор Хотгингера, 20 экспериментальных гидролгоатов растительного сырья и 2 мелассовые основы, полученные нами по собственным методикам.

Жвдкие и плотные питательные среды на основе экспериментальных гидроли-затов готовили параллельно для каждого вида исходного сырья с использованием некоторых добавок и стимуляторов роста микроорганизмов и без них. Объем исходной питательной основы рассчитывали с учетом необходимого и достаточного количества аминного азота. Добавляли натрия хлорид — 0,005 кг, натрия гидрофос-фаг — 0,004 кг. В отдельных случаях, с целью осветления сред, вносили 2 % активированного угля. Для приготовления сред на основе мелассы свекловичной (патоки рафинадной) брали 0,02 л патоки на 1 л среды. Горячие среды разливали во флаконы и стерилизовали в автоклаве при 1 атм в течение 30 мин. Перед постановкой опытов агары разливали в чашки Пефи по 25 мл, бульоны - в пробирки по 10 мл.

Качество приготовленных питательных основ и сред оценивали с помощью физико-химических методов контроля в соответствии с «Методически-

ми указаниями по применению физико-химических методов контроля питательных сред» (1977) и МУК 4.2.2316-08 по следующим показателям: внешний вид (прозрачность, цветность), рН, аминный азот; сухой остаток, содержание хлоридов, температура застудневания, прочность студня, продолжительность плавления, температура плавления, стерильность.

В связи с высоким содержанием белка в сое гидролизаты соевого сырья исследовали на содержание остаточного белка. Содержание микроэлементов (калия, натрия, кальция, железа), белка, глюкозы в исследуемых основах определяли с помощью биохимического анализатора «Stat Fax 1904 Plus» (США). Анализ свободных аминокислот проводили с помощью автоматического аминокислотного анализатора 2 ААА-3 (Чехия).

При оценке критериев пригодности питательных сред по биологическим показателям (чувствительность, показатель прорастания, скорость роста изучаемых микроорганизмов, морфология колоний и клеток в окрашенных препаратах, стабильность основных биологических свойств изучаемых кулыур) руководствовались «Методическими рекомендациями к Контролю питательных сред по биологическим показателям» (1980) и МУ 3.3.2.2124-06.

Полученные результаты обрабатывали статистически. Группировку первичных данных, вычисление средних величин и достоверности различий полученных результатов проводили на персональном компьютере ЮМ PC с использованием пакета программ Excel 7.0 для Windows корпорации Microsoft по методам биометрии (Лакин Г.Ф., 1990).

Результаты исследований и их обсуждение

Получение различными способами питательных основ

микробиологических сред из сырья растительного происхождения, сравнительная характеристика их физико-химических свойств и аминокислотного состава

В результате ферментативного (с помощью суспензии поджелудочной железы крупного рогатого скота) и химических (путем воздействия на сырье соляной кислоты или гидроокиси натрия) способов гидролиза нами были получены ферментативные (ФГ), кислотные (КГ) и щелочные (ЩГ) гидролизаты картофеля (Карт), моркови (Морк), свеклы (Свек), капусты (Кап), солода (Сол) и сои (С), а также ферментативные гидролизаты: соевого молока (ФГСМ) и соевых бобов на соевом молоке (ФГСБМ).

Физико-химические свойства питательных основ представлены в таблице 1. Содержание аминного азота было достоверно выше (р<0,05) в ферментативных основах. В питательных основах, полученных химическими видами гидролиза, уровень аминного азота составлял от (0,04±0,001) % в щелочном гйдроли-зате моркови (ЩГМорк) до (0,07±0,002) % в кислотном гидролизате солода (КГСол). Показатели содержания аминного азота и остаточного белка указывают на ФГСБМ, как на наиболее насыщенную по органическому азоту основу.

Таблица 1 - Физико-химические показатели экспериментальных питательных основ, полученных

различными способами (М±ш) у

Образец гидролиз ата pH АшшныЯ - азот, % Белок, г/л: К, г/л Na, г/л Ca, г/л ■ Fe, мг/л СГ.г/л j Глюкоза, - ! г/л '

ФГСвек 7,5±0,2 0,И±0,030^ * 0,82±0Л0 U4±0,Q5 0,03±0,001 0,59±0,03 0,64±0,06 1,51 ±0,05

КГСвек 7,4±0,1 :. 0,05±0,001" : * : 0,72±0,02 1,18±0,04 0,14±0,020 2,27±0,06 0,34^0.02 5,303=0,26

ЩГ Свек 6,5±0,1 0.05=0.001 ! * . 0.6<>±0,0 1 2,01±0,05 0.03 ¿0.001 0,02±0.001 :0,34±0,04 . 3,24±0,05 Г;62±0,08

ФГКап 6,9±0,2 • 0.14-4:0.030 \ * 0,74±0,01 0,31±0,01 1,50±0,08 0,05*0,01 5.23 ±0,34

КГКан 8,8±0,4 0,04±0,010 I * 0,70±0,01 1.02±0,02: 0,13 ±0,001 0,28±0,04 0,03±0,01 5,30±0,42

ЩГКап 7,2±0,2 0,04±0,010 i * 0,40±0,01 0,46±0.01 0,07±0,003 1,00±0,02 0,59±0,03 0,63 ±0.05

ФГМорк 7.2±0,2 0.11±0,020 | * 0,62±0,02 1.50±0,02 0,02±0,001 1,52±0,08 0,17±0,01 5,30±0,38

КГМо|)К 6,8±0,2 0.04±0.001 S * 0,55±0,01 1,49±0,03 0,23 ±0,020 0,84±0,03 0,03 ±0,01 5,55±0,84

ЩГ Морк 1 б,9±0,3 -0,04±0,001 * : 0,70±0,01 0,91±0.01^ Ö,02±0,ÖÖ1 1,25±0,09 1,07±0,05 0,45±0.06

ФГКарт . ' 7,1 ±0,2 0,17±0,020 * 0,70±0,02 1,0 ПО,02 0,02±0,001 2,51±0,07 0,14 ±0,01 5.41±0,25

КГКарт : 6,4±0,1 0,05±0,010 * 0,93±0,03 0,45±0,03 0,10±0,010 2.52±0,12 0,02±0,01 ^ 6,83±0,77

ЩГКарт , 6,0±0,1 0,04±0.003 * 0,50±0,04 0,79±0,10 0.04±0,002 0,41±0,03 0,98 ±0.02 0,14±0,03

ФГСол 6,8±0,2 0,2б±0.010 I * 0,83±0,02 0.18±0,04 0,02±0,001 1,57±0,06 0,25 ±0,01 j 4,74±0,18

КГСол 6,9±0,3 0.07±0.002 ; * 0,50±0,01 0jl±0,01 0,10±0,020 0,40±0.01 0,07±0,01 ! 7,31 ±0,21

ЩГСол 6,8±0,1 0,04±0,001 * 0.35±0,01 1,5 1±0,01 0.03±0.001 0,42±0,02 0,21 ±0,01 1 5,30±0,15

ФГС 7,2±0,2 0,88±0,030 7,6±0,20 0,75±0,01 5.40±0,25 0,27±0,020 1,61±0.15 0,53±0,20 1 0,84±0,02

ФГСМ 7,2±0,2 0,74±0,040 12,3±0,10 0,75±0,02 5,5 0±0,19 0,01 ±0,001 1,16±0,12 1,01 ±0,04 0,92±0,03

ФГСБМ 7,3±0,1 0,86±0,030 22,5±0.50 0,70±0,01 5.3 8±0,22 0,02±0,001 1,69±0,09 0,88±0,0б 1,20±0,40

КГС 7,2±0,4 0,04±0,001 17,0±0.10 0,36±0,02 3,82±0,14 0,24±0,030 1,10±0,20 3,51 ±0.05 0,89±0,04

ЩГС 7,5±0,1 0,04±0,001 8,2±0Д0 0,45±0,02 4,44±0,20 0,19±0,010 1,И±0,20 0,09±0,01 0,13±0,02

ОМС 7,3±0,1 0,03±0,001 i * 0.66±0,02 2,6 2± 0,08 0,01 ±0,001 - 4,54±0,I6 1 0,04±0,01

ОМСдэ 7,3±0,1 0,09±0,001 ! 4,0±030 0,43±0.01 2,19±0,06 0,02±0,001 - 3,51±0.13 I 0,32±0,0б

Обозначения: виды гидролизатов: ФГ - ферментативный, КГ - кислотный,ЩГ - щелочной; виды сырья: Свек - свекла, Кап - капуста, Морк - морковь, Карт - картофель, Сол - солод, С - соя (бобы), СМ - соевое молоко; СБМ - соевые бобы на соевом молоке, ОМС - основа меласса свекловичная, ОМСдэ - основа меласса свекловичная, обогащенная дрожжевым экстрактом; «*» - не определяли: «-» - не обнаружено.

Изучение химического состава питательных основ показало наличие сопоставимых количеств калия (0,35±0,01)-(0,93±0,03) г/л, кальция (0,01±0,001)-(0,27±0,020) г/л, и более высоких - натрия в соевых гидролизатах (5,38±0,22)-(5,50±0,19) г/л, железа - в кислотном свекольном (2,27±0,06) мг/л, кислотном (2,52±0,12) мг/л и ферментативном (2,51 ±0,07) мг/л картофельных гидролизатах, хлоридов - в щелочном свекольном (3,24±0,05) г/л и кислотном соевом (3,51±0,05) г/л гидролизатах, глюкозы - в кислотной свекольной, ферментативных и кислотных капустных, морковных, картофельных и всех солодовых питательных основах (4,741.0,18>{7,31 ±0,21) г/л.

Наиболее высоким содержанием аминного азота, соответствующим таковому традиционно применяемых белковых основ, характеризовались ферментативные соевые шдролизагы (0,74±0,040)-(0,88±0,030) %.

По сумме аминокислот ферментативный гидролизат сои (ФГС) (33,40±1,64) г/л, ФГСМ (48,90±2,17) г/л, ФГСБМ (67,67±],31) г/л значительно превосходили кислотный и щелочной щдролизаты сои и остальные гидролизаты, независимо от способа их приготовления. Для всех экспериментальных основ отмечено преобладание птутаминовой кислоты.

Полученные гидролизаты, в основном, содержали исследуемые микроэлементы и аминокислоты, количество их зависело от вида сырья и от типа проведенного гидролиза. Ферментативный тип гидролиза имел явное преимущество для большинства сырьевых продуктов. В ферментативных соевых основах отмечено наиболее высокое содержание натрия.

Применение экспериментальных питательных основ в составе-микробиологических сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы

Из экспериментальных основ конструировали питательные среды. Все жидкие среды были прозрачными, без осадка, от светло-желтого (соевые) до темно-коричневого (солодовые) цвета. Плотные среды представляли собой непрозрачный студень от светло-коричневого до темно-коричневого цвета. Определяемые физико-химические показатели сред после стерилизации удовлетворяли требованиям соответствующей методической документации.

По биологическим показателям полностью отвечали критериям пригодности только среды, приготовленные на основе ферментативных соевых и картофельных щдролизагов. Отмечена максимальная чувствительность (10-7) агаровых сред на указанных основах в отношении холерного, чумного, сибиреязвенного микробов и сапрофитных микроорганизмов. Капустные, свекольные и морковные основы в составе питательных сред имели сходные ростовые качества, обеспечивая достаточный рост культур в количественном отношении, но явно недостаточный - в качественном, что проявлялось диссоциацией шлоний и атипичной морфологией клеток в мазках, окрашенных по Граму. При посеве 0,1 мл из споровых взвесей В. ап1Игас'т СТИ-1 и В. яиЬШаЪ, содержащих МО2, МО3 и МО4спор/мл на плотные среды из ферментативного и химических гидролизатов солода на дис-

тиллированной и пшъевой воде, без добавок и с добавлением натрия сернисто-кислого, липоевой кислоты, дрожжевого экстракт роста не бьио. . , _1 Соевые среды с натрием сернистокислым на дистиллированной воде (все •серии) обеспечивали начальный рост типичных колоний холерного вибриона — круглых,, блестящих, с ровными краями, размером 2-3 мм, через 14-16 ч инкубации при температуре ;(37±1) °С штамма НАГ-вибриона Р-9741. Результаты изучения чувствительности и показателя прорастания питательной среды на основе ФГС при культивировании штамма НАГ-вибриона Р-9741представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Изучение чувствительности и показателя прорастания

питательной среды на обнове ФГС. при культивировании холерного вибриона

Показатели Число" посевов Выросло катаний на питательных средах Статистическая достоверность различий

На основе ФГС Щелочной агар

Чувствительность (m,ipocjm .колоний при посеве !0.м.к.) , ^ Показатель прорастания (Мр±т)* колоний выросших из г 1 • 10" м.к.' • -10": 1<5Г~7 ■ S,5±0,7 6,0±1,4 <0,05

48Д±2,5 диаметр колоний 2,5-3 мм 44,7±1,9 диаметр колоний 1,5-2 мм 0,005

1 [римечание: *Мр±ш - процент выросших колоний

Лучшими из пробированных соевых сред были среды, приготовленные на комбинированной основе ФГСБМ с добавками, где из посеянных МО2 м. к. вырастало в среднем (77,4±2,1) колонии щтамма У pestis EV диаметром 2,2 мм с.яркоi выраженной кружевной зоной, сохраняющейся в течение 120 ч (срок наблюдения). Следует отметить, что формирование колоний на этих средах происходило на 3 ч раньше, чем на других соевых средах. Результаты изучения чувствительности и показателя прорастания питательной среды на основе ФГСБМ при культивировании штамма Y pestis EV представлены в таблице 3.

Таблица 3 — Изучение чувствительности и показателя прорастания питательной среды на основе ФГСБМ при культивировании чумного микроба

,, Показатели , Число Выросло колоний Статистическая

посевов на питательных средах достоверность

На основе ФГСБМ контрольная различий, р*

Чувствительность, M.K. 6 3,8±2,3 4,6±1,8 <0,01

Показатель 6 77,4±2,1 63,41=5.0 <0,001

прорастания, % (Mptm) *** !"|! "" .1 .

Скорость роста, ч 6 20-45 2048 >0,01

Примечание: *р -уровень значимости различий; ** Х±т- число выросших колоний; *** Мр±т - процент высёваемости

Среды на ферментативных соевых основах равноценно контрольным (мясным) обеспечивали характерные биохимические реакции культивируемых на них пигменте- и индолообразующих тест-штаммов, что подтверждает полноценность компонентного состава ФГС, ФГСМ и ФГСБМ.

Изучена стабильность биохимических свойств культуры К ры/и ЕУ при выращивании на экспериментальных плотных средах, приготовленных из ферментативных гидролизатов сои со стимуляторами роста и на агаре Хоттингсра. Исследования проводили с использованием (5,0±0,5) мл пепгонной воды с добавлением 1 % сахарозы, дульцита, арабинозы, рамнозы, глюкозы, маннита, маннозы, лактозы и индикатора Андреде. В течение 144 ч наблюдения ферментативная активность чумного микроба не изменялась.

При изучении стабильности сохранения основных свойств чумного микроба и холерного вибриона при длительном хранении в условиях лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» выявлено, что агар, приготовленный на ферментативной основе сои (бобов), оптимально обеспечивал питательные потребности испьпуемых штаммов: К461; С-746; С-763; С-765; У.сНокгае С-602; С-604; 442 Аз; 619 Аз с сохранением культуральпо-морфологических и биохимических свойств указанных пламмов в течение всего срока наблюдения (12 мес).

Изучение физико-химических и биологических свойств питательных сред, .сконструированных на растительных основах, показало значительное преимущество соевых агаров и бульонов над средами из остальных экспериментальных гцдроли-загов. Несколько уступали соевым картофельные питательные среды, однако они тоже соответствовали требованиям Методических указаний 33.2.2124-06.

Изучение возможности применения питательных сред на основе

мелассе свекловичной (патоке рафинадной) для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы

В качестве основы питательной среды для культивирования сибиреязвенного микроорганизма и других бацилл нами предлагается использовать побочный продукт свеклосахарного производства - мелассу свекловичную, ати патоку рафинадную, биологическая ценность которой состоит в наличии углеводов, бишогачески активных веществ, аминокислот; витаминов, микроэлементов. Стоимость 1 кг патоки рафинадной в 6 раз ниже, чем 1 кг мясного сырья. Существенным плюсом предлагаемого сырья являются также его доступность и удобство в применении.

Разработанная нами жидкая питательная среда для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов, содержащая в основе мелассу свекловичную, отличается экономичностью й простотой приготовления. Отсутствует необходимость предварительной Обработки, меласса выступает непосредственно в качестве питательной основы. Кроме того, замена воды дистиллированной на питьевую благоприятно отразилась на ростовых качествах среды и, вместе с тем, позволила исключить временные, энергетические и, соответственно, материальные затраты на дистилляцию воды.

В предварительных пробных высевах было установлено, что ОМС практически уже являлась жидкой питательной средой с минимальными ростовыми свойствами, обеспечивая необходимые питательные потребности возбудителя холеры, сибиреязвенных и сапрофитных бацилл. Однако для возбудителя чумы ростовые качества ОМС оказались недостаточными. Чтобы компенсировать дефицит азотсодержащих компонентов, а именно, низкомолекулярньгх фракций и свободных аминокислот, в состав среды вводили дополнительно питательные факторы, в качестве которых были испытаны дрожжевой экстракт, ферментативный и. кислотный гидролизаты казеина, а также стимуляторы роста натрий сернистокислый и, липоевая кислота.

При изучении ростовых, качеств ОМС с добавлением натрия сернистокисло-го были получены данные,; позволяющие сделать заключение о возможности использования мелассы свекловичной как основы, жидкой питательной среды обогащения для культивирования и выделения холерного вибриона. Чувствительность мелассовой среды составила 107.,

Жидкая питательная, среда для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных еапрофитов на основе мелассы с добавлением дрожжевого экстракта обеспечивала типичный рост штаммов В. anthracis: 81/1; 228; 1262; 645/291; 13/39, не уступая при этом по ростовым свойствам бульону Хот-тингера. Отмечено, что через 24 ч инкубации при 37 °С рост на экспериментальной среде был более выраженным.

Мелассовые основы в виде жидких питательных ерей - базовой ОМС и обогащенной дрожжевым экстрактом ОМСдэ исследовали аналогично с гидролизными основами растительного сырья. ; ч

Добавление 10 г/л дрожжевого экстракта к основе, мелассе повысило содержание аминного азота в 3 раза, в ОМСде было обнаружено (4,0±0,3) г/л остаточного белка Как и у выше охарактеризованных питательных основ, отмечено более высокое по отношению к другим аминокислотам содержание глу-таминовой кислоты. В основе мелассе свекловичной не было выявлено железа.

Ростовые качества плотного варианта ОМСдэ оказались ниже, что объясняется, очевидно, увеличением плотности среды в связи с внесением агара микробиологического. Для компенсации негативного влияния агара нами был добавлен 1 % ферментативного гидролизата казеина.

Полученная среда доя культивирования микроорганизмов рода Bacillus, приготовленная на основе мелассы свекловичной с добавлением ферментативного гидролизата казеина и дрожжевого экстракта, обеспечивала типичный рост штаммов Я anthracis СТИ-1, В. anthracis 71/12, В. subtil is 3, В. mesentericus 1024, В. cereus 96, В. cereus 111, В. cereus 250, В. megaterium 6, В. megaterium654, не уступая при этом по ростовым свойствам, показателю прорастания и стабильности биологических свойств культивируемых микроорганизмов агару Хоггингера.

Питательная среда на основе мелассы свекловичной с добавлением дрожжевого экстракта и ферментативного гидролизата казеина была успешно применена для восстановления жизнеспособности трех штаммов чумного микро-

ба основного и кавказского подвидов с сохранением их фенотипических свойств. Биохимические свойства, чувствительность к бактериофагам. Покровской и Л-413 «С» сохранялись. При дальнейшем культивировании У. раня С-763, С-746, С-765 на традиционно используемом для хранения штаммов ¡апаре Хстпингера наблюдали обильный типичный рост культуры возбудителя; чумьь ил

Для изучения стабильности основных свойств чумного микробам.'холерного вибриона при хранении на экспериментальных средах в условиях лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» готовили среды на ОМ С с добавлением гидролизатов казеина; ферментативного, кислотного; натрия сернисто кислого, дрожжевого экстракта. Все испьпуемые штаммы сохраняли жизнеспособность на основе мелассе свекловичной с добавлением дрожжевого экстракта и кислотного падрализага казеина в течение 6 мес, штамм X 461 сохранился в течение всего срока наблюдения (12 мес) на основе'мелассе свекловичной с добавлением дрожжевого экстракта и кислотного гцдролизата казеина и основе мелассе свекловичной с добавлением дрожжевого экстракта и ферментативного гидролизата казеина. Основные кулыурально-морфологические и биохимические свойства сохранившихся штаммов чумного микроба и холерного вибриона на экспериментальных мелассовых средах оставались неизмененными. Т.к. питательные свойства сред на основе мелассы свекловичной оказались не вполне достаточными для удовлетворения питательных потребностей большинства испытуемых холерных и чумных штаммов при хранении в течение 12 мес,' среды на основе мелассы свекловичной с добавлением кислотного и ферментативного гидролизатов казеина и дрожжевого экстракта или натрия сершстокислого предпочтительнее использовать для бактериологических работ; накопления микробной массы или восстановления жизнеспособности культур после длительного хранения на традиционных питательных средах путем одно- или двухсуточных паБЬажей.

ВЫВОДЫ

1. Изученное сырье растительного происхождения: картофель, свекла, капуста, морковь, солод, соя (бобы и соевое молоко), меласса свекловичная (патока рафинадная), является, перспективным при создании микробиологических питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

2. Экспериментально доказана возможность использования различных типов гидролиза растительного сырья при получении основ питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы. .

3. Получены и охарактеризованы по физико-химическому л аминокислотному составу питательные оснолы с, использованием различных типов гидролиза Показано преимущество ферментативных соевых гидролизатов по аминокислотному составу и содержанию натрия и преимущество по ростовым свойствам для возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы ферментативных соевых и картофельных гидролизатов и мелассы свекловичной (патоки рафинадной) при использовании в качестве основ питательных сред.

4. Впервые разработаны рецептура и методики приготовления плотных и жидких питательных сред, предназначенных для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы, в качестве базовых основ которых использованы ферментативные соевые и картофельные гидролизаты и меласса свекловичная (патока рафинадная).

5. Полученные питательные среды обеспечивают типичный рост возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы, стабильность сохранения их основных биологических свойств и могут быть использованы при культивировании и длительном хранении данных видов микроорганизмов (срок наблюдения 12 месяцев).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Питательные среды на картофельной и соевых ферментативных основах и питательные среды на основе мелассы свекловичной рекомендуется использовать в, лабораторных исследованиях для культивирования вакцинных и вирулентных штаммов pestis, V. cholerae, В. arühracis, для проведения практических занятий со студентами профильных учебных заведений.

2. Рекомендуется применение питательной среды на основе ферментативного гидролизага соевых бобов в качестве среды выбора при плановых пересевах коллекционных штаммов, для длительного хранения (в течение 12 мес) штаммов возбудителей чумы (при +4 °С) и холеры (при +20 °С), а также для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба

3. Питательные среды на основе мелассы свекловичной с добавлением натрия сернисто кислого рекомендуется использовать при проведении бактериологических работ с холерным вибрионом, с добавлением дрожжевого экстракта -при работах с сибиреязвенным и близкородственными сапрофитными микроорганизмами, для обеспечения обильного типичного роста возбудителя чумы рекомендуется внесение в мелассовую основу дрожжевого экстракта и ферментативного гидролизага казеина.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Катунина, JI.C. Растительное сырье для культивирования холерного вибриона / JI.C. Кшунина, OJI. Сгарцева, АА. Курилова, О.В. Малецкая, И.Ю. Борздо-ва, A.M. Бабий, A.A. Борздов // Естествознание и гуманизм: Сб. науч. работ. -Томск, 2005. - Т. 2. - № 1. - С. 40.

2. Курилова, АА. Опыт конструирования питательной среды для спорооб-разуюших микроорганизмов / АА. Курилова // Естествознание и туманизм: Сб. науч. работ. - Томск, 2005. - Т. 2. - № 1. - С. 41-42, -

3. Курилова, A.A. Изучение культуральио-морфологических свойств агаровых сибиреязвенных культур в различные фазы роста / A.A. Курилова // Циклы: Материалы VII Междунар. конф. — Ставрополь: СевКавГТУ, 2005. -Т. 3,-С. 188-189.

4. Курилова, A.A. Определение оптимального базового состава питательных сред для культивирования сибиреязвенного микроба на основах из раститель-

ного сырья / A.A. Курилова, О.В. Малецкая, O.JI. Старцева, Л.С.! Качунина, С.И. Головнева, A.M. Бабий // Санитарная охрана территорий государств' участников содружества независимых государств: проблемы биологической безо- ' пасности и противодействия биотерроризму в современных условиях: Материалы VI Межгосуд. науч.-практ. конф. государств-участников СНГ 13-14 сентября 2005 г. - Волгоград, 2005. - С. 256-257.

5. Курилова, A.A. Изучение возможности использования питательной среды на основе картофельного гидролизата для культивирования сибиреязвенного микроба / A.A. Курилова // Санитарная охрана территорий; Государств участников содружества независимых государств: проблемы бйШгической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях: Материалы VI Межгосуд. науч.-практ. конф. государств-участников СНГ 13-14 сентября 2005 г. - Волгоград, 2005. - С. 254-255.

6. Старцева, ОЛ. Использование питательных сред, приготовленных на ферментативных основах сои и говяжьего мяса в качестве накопительных при культивировании чумного микроба / ОЛ. Старцева, Л.С. Катунина, О.В. Малецкая, A.A. Курилова, AM. Бабий, СЛ. Головнева// Санитарная охрана территорий государств участников содружества независимых государств: проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях: Материалы Vi Межгосуд. науч.-практ. конф. государств-участников СНГ 13-14 сентября 2005 г.-Волгоград, 2005,- С. 290-292.

7. Курилова,' A.A. Изучение ростовых свойств питательных сред на основах из ферментативного и Кислотного морковных гвдролизатов при разных значениях pH / A.A. Курилова, Л.С. Катунина, О.В. Малецкая, О Л. Старцева, С.И. Головнева, A.M. Бабий // Опыт работы учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей «9-я Ежегодная Неделя медицины Ставрополья»: Материалы науч.-практ. конф. - Ставрополь, 2005. - С. 166-169.

8. Курилова, A.A. Культивирование возбудителя сибирской язвы и близкородственных спорообразующих сапрофигов на новой перспективной питательной среде / A.A. Курилова, О.В. Малецкая, В.А. Проскурина, А.Г. Рязанова, ОЛ. Старцева, Л.С. Казунина, A.M. Бабий // Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных болезней: Сб. науч. тр. -Москва, 2006. - Вып. 8. - С. 716-718.

9: Курилова, A.A. О применении питательных сред на основе патоки (мелассы свекловичной) для Выращивания сибиреязвенных и близкородственных им бацилл / A.A. КурштоВа, О.В. Малецкая, Л.С. Катунина, ОЛ. Старцева, Т.В. Таран // Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития. Второй съезд военных врачей ме-дико-профилактич. профиля ВС РФ: Тр. съезда. 7- Веста. Российской воен.-мед. акад.: Приложение. - СПб., 2006.-№ 1 (15). - С. 480-481.

10. Старцева, О Л. Оценка ростовых качеств питательных сред, приготовленных на основе щелочных и кислотных гидролизатов сои (бобов) / ОЛ. Старцева, Л.С. Катунина, О.В. Малецкая, Т.В. Таран, A.A. Курилова, Т.М. Головин-

екая // Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей «10-я Ежегодная Неделя медицины Ставрополья»: Материалы науч.-практ. конф. - Ставрополь, 2006. - С. 146-148.

11. Курилова, A.A. К вопросу совершенствования и удешевления технологии приготовления питательных сред для диагностики возбудителя холеры / A.A. Курилова, О.В. Малецкая, Т.В. Таран, Л.С.-Котунина, О.Л. Сгарцева // Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей «10-я Ежегодная Неделя медицины Ставрополья»: Материалы нгуч.-практ. конф. - Ставрополь, 2006. - С.153-156.

12. Курилова, A.A. Опыт выращивания возбудителя сибирской язвы и близкородственных бацилл на комбинированной агаровой среде из растительных основ / A.A. Курилова // Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей «10-я Ежегодная Неделя медицины Ставрополья»: Материалы науч.-практ. шнф. - Ставрополь, 2006. - С. 159-162.

13. Катунина, Л.С. Разработка питательной основы из растительного сырья для культивирования холерного вибриона / Л.С. Катунина, О.Л. Старцева, A.A. Курилова, Т.В. Таран, Т.М. Головинская // Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей «10-я Ежегодная Неделя медицины Ставрополья»: Материалы науч.-практ. конф. — Ставрополь, 2006. - С. 151-153.

14. Коняева, O.A. Опыт использования питательных сред на основе сои (бобов) и патоки рафинадной для восстановления жизнеспособности чумного микроба / O.A. Коняева, ОЛ. Мухорто ва, Л.С. Катунина, A.A. Курилова, Н.В. Жари-нова, О.В. Малецкая, ОЛ. Старцева, Т.В. Таран // Современные аспекты эпидемиологического надзора за особо опасными инфекционными заболеваниями на Юге России: Материалы науч.-практ. конф. - Ставрополь, 2007. - Ч. 1, — С. 189-190.

15., Курилова A.A. Физиологические особенности сибиреязвенного микроба и его питательные потребности (обзор литературы). — М., 2007. - 33 с. - Деп. в ВИНИТИ 30.01.07, № 86-В 2007.

16. Катунина, Л.С. Разработка новой питательной среды для диагностики чумы / Л.С. Катунина, A.A. Курилова, Т.В. Таран, О.В. Малецкая, Н.В. Жари-нова, Н.С. Царева, О.Н. Мухоргова, O.A. Коняева, О.Л. Старцева, И.В. Савельева // Вестн. Российской воен.-мед. акад.: Приложение. — СПб., 2008. — Ч. I. — №2(22).-С. 209-210.

17. Курилова, A.A. Разработка питательных сред из растительного сырья для культивирования возбудителей особо опасных инфекций / A.A. Курилова, Т.В. Таран, Л.С. Катунина, С.И. Головнева // Проблемы особо опасных инфекций. - 2009. -№ 3. - Вып. 101. - С. 66-68.

; 18. Пат. 2260620 РФ, МПК7 C12N 1/20, C12Q 1/04. Питательная среда (жидкая) для культивирования чумного микроба вакцинного штамма ЕВ / Л.С. Ка-

тунина, О.Л. Старцева, О.В. Малецкая, С.И. Гоповнева, Е.Б. Смирнова, A.A. Ку-рилова (РФ). -№2004104518; Заявлено 16.02.2004; Опубл. 20.09.2005 г. Бюл. № 26; Приоритет 16.02.2004 (РФ).

19. Пат. 2288950 РФ, МПК C12N 1/20, C12Q 1/04. Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов / A.A. Курилова, Л.С. Катунина, О.В. Малецкая, О.Л. Старцева, А.Г. Рязанова, В.А. Проскурина, A.M. Бабий, A.A. Борздов, В.И. Ефременко (РФ). - № 2005119609; Заявлено 23.06.2005; Опубл. 10.12.2006 г. Бюл. № 34; Приоритет 23.06.2005 (РФ).

20. Пат. 2301256 РФ, МПК C12N 1/20, C12Q 1/04. Питательная среда жидкая для культивирования холерного вибриона / Л.С. Катунина, В.И. Ефременко, О .Л. Старцева, О.В. Малецкая, A.A. Курилова, A.M. Бабий (РФ). - № 2006100999; Заявлено 10.01.2006; Опубл. 20.06.2007 г. Бюл. № 17; Приоритет 10.012006 (РФ).

21. Пат. 2303630 РФ, МПК C12N1/20, C12Q 1/04. Питательная среда (плотная) для культивирования холерного вибриона / Л.С. Катунина, В.И. Ефременко, О.Л. Старцева, О.В. Малецкая, A.A. Курилова, AM. Бабий (РФ). -№ 2006101948; Заявлено 24.01.2006; Опубл. 27.07.2007 г. Бюл. № 21; Приоритет 24.01.2006 (РФ).

Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная

Подписано в печать 12.11.2009

Усл.печ.л. 1,1 _Тираж 100 экз._

Уч.-изд.л. 0,85 Заказ 383

Отпечатано в Издательско-полиграфическом комплексе Ставропольского государственного университета. 355009, Ставрополь, ул.Пушкина, 1.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Курилова, Анна Алексеевна

Введение.

Глава 1 Культивирование возбудителей сибирской язвы, чумы, холеры (обзор литературы).

1.1 Характеристика ферментов поджелудочной железы.

1.2 Питательные потребности изучаемых микробов.

1.2.1 Питательные потребности чумного микроба.

1.2.2 Питательные потребности холерного вибриона.

1.2.3 Культивирование и питательные потребности сибиреязвенного микроба и спорообразующих сапрофитов.

Собственные исследования.

Глава 2 Материалы и методы исследования.

2.1 Материалы исследования.

2.1.1 Штаммы микроорганизмов.

2.1.2 Реактивы, сырье.

2.1.3 Лабораторное оборудование.

2.1.4 Питательные основы и питательные среды.

2.2 Характеристика используемого сырья.

2.2.1 Картофель свежий продовольственный (ГОСТ Р 51808-2001).

2.2.2 Свекла столовая свежая (ГОСТ 1722-85; Р 51811-2001).

2.2.3 Морковь столовая свежая (ГОСТ 1721-85).

2.2.4 Капуста белокочанная свежая (ГОСТ Р 51809-2001; 1724-85).

2.2.5 Солод пивоваренный ячменный (ГОСТ 29294-92).

2.2.6 Соя, бобы (ГОСТ 17109-88).

2.2.7 Соевое молоко (ТУ 9146-025-10126558-98).

2.2.8 Меласса свекловичная (ГОСТ Р 52304-2005).

2.3 Методы приготовления питательных сред.

2.4 Методы исследования.

2.4.1 Методы физико-химического контроля питательных основ и сред.

2.4.2 Методы биологического контроля питательных основ и сред.

2.4.3 Методы статистической обработки полученных результатов.

Глава 3 Получение различными способами питательных основ микробиологических сред из сырья растительного происхождения, сравнительная характеристика их физико-химических свойств и аминокислотного состава.

3.1 Методы приготовления питательных основ микробиологических сред.

3.1.1 Получение ферментативных основ микробиологических сред

3.1.2 Получение кислотных основ микробиологических сред.

3.1.3 Получение щелочных основ микробиологических сред.

3.2 Изучение свойств экспериментальных питательных основ микробиологических сред из сырья растительного происхождения.

3.2.1 Характеристика физико-химических свойств экспериментальных основ микробиологических питательных сред.

3.2.2. Изучение аминокислотного состава экспериментальных основ микробиологических питательных сред.

Глава 4 Применение экспериментальных питательных основ в составе микробиологических сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

4.1 Принцип получения микробиологических питательных сред на растительных гидролизных основах.

4.2 Изучение качества питательных сред.

4.2.1 Физико-химические показатели питательных сред.

4.2.2 Определение биологических показателей жидких сред.

4.2.3 Определение биологических показателей плотных сред.

4.2.4 Оценка качества соевых сред по пигменто- и индолообразованию тест-штаммов.

4.2.5 Биохимические свойства чумного микроба, выращенного на питательных средах из ферментативных соевых гидролизатов.

4.2.6 Изучение стабильности сохранения основных свойств чумного и холерного микробов в процессе длительного хранения на соевой питательной среде.

Глава 5 Изучение возможности применения питательных сред на основе мелассе свекловичной (патоке рафинадной) для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

5.1 Методика приготовления микробиологических питательных сред на основе мелассе свекловичной (патоке рафинадной).

5.2 Изучение ростообеспечивающей способности основы мелассы свекловичной на примере сибиреязвенных и сапрофитных бацилл.

5.3 Сравнительная характеристика физико-химических свойств основы мелассы свекловичной (патоки рафинадной) и основы мелассы свекловичной (патоки рафинадной), обогащенной дрожжевым экстрактом.

5.4 Изучение аминокислотного состава мелассовых основ.

5.5 Получение питательных сред на основе мелассы свекловичной (патоки рафинадной) для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

5.5.1 Приготовление питательных сред на основе мелассы свекловичной для культивирования холерного вибриона.

5.5.2 Приготовление питательных сред на основе мелассы свекловичной для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных ему сапрофитов.

5.5.3 Изучение пригодности питательной среды на основе мелассы свекловичной для восстановления утраченных фенотипических признаков чумного микроба.

5.5.4 Изучение стабильности сохранения основных свойств чумного и холерного микроорганизмов в. процессе длительного хранения на мелассовых питательных средах в лабораторных условиях.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы"

Актуальность проблемы. Среди особо опасных болезней чума, холера и сибирская язва до настоящего времени имеют немаловажное значение в инфекционной патологии человека (Jakab Z., 2007) и довольно широко распространены, продолжая представлять актуальную проблему здравоохранения и ветеринарии (Витязева С.А., 2009; Ерошенко Г.А., 2008; Иванова С.М., Новиков H.JL, Фонарева К.С. и др., 2007; Кутырев В.В., 2008; Марамович А.С., Косилко С.А., Инокентьева Т.И. и др., 2008; Нефедов К.С., 2009; Терешкина Н.Е., Девдариани 3.JL, 2008; Топорков В.П., Величко JI.H., Шиянова А.Е. и др., 2008; Brachman P.S., 1970; Hauwaert Th., 2002; Hugh-Jones M.E., 2003; Marandian M.N., Kamali A., 1981; Pini P., 1996; Sirisanthana Т., Navachareon N., Tharavichitkul P. et al., 1984).

Существует вероятность использования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы в качестве биологического оружия (Касина И.В., Саяпина J1.B., Анисимова Т.И. и др., 2006; Нетесов С.В., Сандахчиев J1.C., 2004; Ash-ford D.A., Whitney Е., Fischer М. et al., 2003; Berche P., 1998; Deroin Ph., 2001; Heselson N., Guilemin J., Hugh Jones M. et al., 1993; Lamb A., 2001; Nilson S.L., 1991; Perkins В., 2003; Phillips A.P., Dando M.R., 1995).

Актуальными остаются работы по дальнейшему изучению вышеуказанных патогенных микроорганизмов (Агафонова В.В., 2009) и созданию эффективных новых, а также совершенствованию существующих средств диагностики вызываемых ими инфекций и мер их специфической профилактики (Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Бугоркова Т.В. и др., 2008; Коготкова О.И., Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н. и др., 2006; Маринин Л.И., Тюрин Е.А., 2007). Мониторинг и бактериологическая диагностика особо опасных инфекций, генетические исследования (Srivastava P., Chattoraj D.K., 2007), производство разнообразных медицинских и ветеринарных препаратов - вакцин, диагностикумов, иммунных сывороток и т.п. (Волох О.А., Шепелев И.А., Заднова С.П. и др., 2008) подразумевает использование большого количества питательных сред.

В связи с высокой себестоимостью питательных сред из мяса, мясных и рыбных полуфабрикатов возникает необходимость поиска и апробации подходящего для этой цели стандартного и недорогого сырья. Производство полноценных питательных сред на основах, имеющих низкую себестоимость, является актуальным для экспериментальной и практической бактериологии, для выполнения производственных задач. В настоящее время возрастает востребованность сред, дающих возможность решать конкретные микробиологические задачи, например, увеличивать продукцию определенного метаболита, изменять морфологические и обнаруживать новые фенотипические свойства, подтверждать стабильность типовых или селектированных штаммов (Ахапкина И.Г., Блинкова Л.П., 2001).

Требования к сырью, предназначенному для производства питательных основ, включают содержание необходимого количества полноценного белка, минимальное содержание жира, высокую биологическую ценность, хорошую растворимость, соответствие ГОСТам (Зайцев В.Ф., Маслов С.А., Комоско Г.В. и др., 2003), экономическую эффективность применения. Растительное сырье отвечает основным предъявляемым требованиям и обладает необходимыми функциональными свойствами. Белки растений представлены большим числом компонентов с различным аминокислотным составом (Кретович В.Л., 1975). От животного сырья состав растительного сырья отличается большей стандартностью, имеющей первостепенное значение для воспроизводимости получаемых в экспериментах результатов. Использование гидро-лизатов растений исключает риск контаминации животными патогенами (Трошкова Г.П., Юдин А.В., Сумкина Т.П. и др., 2003).

Актуальность работ по изучению возможности применения в качестве питательных основ побочных продуктов и отходов пищевых производств обусловлена и обострением экологических проблем, ставящих перед микробиологической отраслью задачи развития малоотходных технологий, рационального использования и переработки образующихся отходов (Черкашина Н.В., Щербатова О.Н., Епанчинцев А.Л. и др., 1998).

Основные задачи исследования.

3. Разработать рецептуру и методики приготовления питательных сред на основе полученных гидролизатов картофеля, свеклы, капусты, моркови, солода, сои, соевого молока и мелассы свекловичной (патоки рафинадной), с использованием различных добавок и стимуляторов роста, для культивирования чумного, холерного и сибиреязвенного микроорганизмов.

Научная новизна. Впервые разработаны рецептура и методики приготовления микробиологических питательных сред (жидких и плотных) для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы (вакцинных и вирулентных штаммов, НАГ-вибрионов), в качестве основ которых использованы ферментативные гидролизаты соевых бобов, картофеля и меласса свекловичная (патока рафинадная). Приоритет разработанных методик подтвержден патентами РФ на изобретения: № 2260620 «Питательная среда (жидкая) для культивирования чумного микроба вакцинного штамма ЕВ» от

20.09.2005 г., № 2301256 «Питательная среда жидкая для культивирования холерного вибриона» от 20.06.07 г., № 2303630 «Питательная среда плотная для культивирования холерного вибриона» от 27.07.07 г., № 2288950 «Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов» от 10.12.06 г.

Впервые показана возможность использования питательной среды на основе патоки рафинадной для восстановления жизнеспособности Y. pestis после длительного хранения на традиционных средах в условиях лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов».

Проведенные исследования могут служить моделью при изучении использования других видов сырья для микробиологических питательных сред.

Характеристика спектра химических и физических свойств питательных основ микробиологических сред из картофеля, свеклы, капусты, моркови, солода, соевых бобов, соевого молока, мелассы свекловичной может быть использована для дальнейшего изучения исследуемого сырья с целью получения различных специализированных питательных сред и совершенствования методик приготовления питательных основ и питательных сред.

Роспотребнадзора от 20.04.05 г., в лаборатории питательных сред для культивирования микроорганизмов I-IV групп патогенности и лаборатории биологического и технологического контроля ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора от 27.04.05 г., в научно-производственной лаборатории препаратов для диагностики особо опасных и других инфекций от 16.05.07 г., в лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора от 10.10.07 г.). Плотная среда на основе ФГС пригодна для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба (акт испытаний в научно-производственной лаборатории препаратов для диагностики особо опасных и других инфекций от 13.01.04 г.). По культуральным свойствам разработанные питательные среды не уступают коммерческим аналогам, приготовленным на ферментативной основе говяжьего мяса (бульону Хоттингера и агару Хоттингера), при этом среды на соевых и картофельных основах в 3,5 раза, а на мелассовых основах — в 5 раз выгоднее экономически.

Питательная среда (жидкая) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов на основе мелассы свекловичной используется в учебном процессе кафедры микробиологии и вирусологии Ставропольской государственной медицинской академии (акт о внедрении от 15.11.2006 г.). Питательные среды на основе растительного сырья, предназначенные для культивирования возбудителей чумы и холеры, используются в качестве сред выбора при плановых пересевах музейных штаммов в лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора (акт от 26.03.2008 г.).

Методики приготовления и рецептура сконструированных питательных сред изложены в 6 методических документах: «Методических рекомендациях по использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов сои (бобов и соевого молока) для культивирования чумного микроба» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 4 от 27 апреля 2005 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию питательной среды (жидкой) для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных сапрофитов» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 11 от 27 декабря 2005 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию питательной среды (жидкой) для культивирования холерного вибриона на основе патоки рафинадной» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 3 от 30 марта 2006 г.), «Методических рекомендациях по технологии приготовления агаровой питательной среды для культивирования микроорганизмов рода Bacillus» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 5 от 29 мая 2007 г.), «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативного гидролизата картофеля для культивирования чумного микроба» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 4 от 30 мая 2008 г.) и «Методических рекомендациях по приготовлению и использованию плотной питательной среды на основе ферментативного гидролизата картофеля для культивирования холерного вибриона» (протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ № 5 от 7 июня 2008 г.). 24.04.2009 г. утверждены директором ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспот-ребнадзора после согласования на федеральном уровне 2 нормативных документа: ТУ 9385-002-01897080-2009 на Питательный бульон для культивирования микроорганизмов, готовый к применению (Бульон Хоттингера) и ТУ 9385-004-01897080-2009 на Питательный агар для культивирования микроорганизмов, готовый к применению (Агар Хоттингера), а также Инструкции по применению этих сред, постоянно используемых в ходе проведения исследований в качестве контрольных.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Питательные основы из растительного сырья пригодны для использования в составе питательных сред для культивирования* возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

3. Штаммы возбудителей чумы и холеры при культивировании и длительном хранении на соевых питательных средах стабильно сохраняют свои культурально-морфологические свойства в течение 12 месяцев (срок наблюдения).

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на VI Межгосударственной научно-практической конференции государств-участников СНГ «Санитарная охрана территорий государств-участников содружества независимых государств: проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях», 2005 г., на VII Международной конференции «Циклы природы и общества», 2005 г., на научно-практической конференции «Естествознание и гуманизм» в честь 170-летия со дня рождения Г.Н. Потанина, 2005 г., на научно-практических конференциях «Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению санэпидблагополучия и защите прав потребителей, 9-я и 10-я Ежегодные Недели медицины Ставрополья», 2005 и 2006 г.г., Втором съезде военных врачей медико-профилактического профиля вооруженных сил Российской Федерации «Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития», г. Санкт-Петербург, 2006 г., на научно-практической конференции «Современные аспекты эпидемиологического надзора за особо опасными инфекционными заболеваниями на Юге России», 2007 г.

Публикации. По теме диссертации опубликована 21 научная работа, в том числе 1 — в издании, включенном в перечень ведущих рецензируемых научных журналов, утвержденных- ВАК Министерства образования и науки России и рекомендованных для публикации основных научных материалов диссертации на соискание искомой ученой степени, получено в соавторстве 4 патента РФ на изобретение.

Диссертационная работа выполнена в рамках плановой научной темы

Изучение возможности использования некоторых видов растительного сырья, как основы питательных сред для возбудителей особо опасных инфекций», № гос. регистрации — 0120.0 700411, в которой автор являлась ответственным исполнителем.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 144 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 306 источников, из них 181 отечественных и 125 - иностранных авторов, приложения. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 10 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Курилова, Анна Алексеевна

выводы

1. Изученное сырье растительного происхождения: картофель, свекла, капуста, морковь, солод, соя (бобы и соевое молоко), меласса свекловичная (патока рафинадная), является перспективным при создании микробиологических питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы.

3. Получены и охарактеризованы по физико-химическому и аминокислотному составу питательные основы с использованием различных типов гидролиза. Показано преимущество ферментативных соевых гидролизатов по аминокислотному составу и содержанию натрия и преимущество по ростовым свойствам для возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы ферментативных соевых и картофельных гидролизатов и мелассы свекловичной (патоки рафинадной) при использовании в качестве основ питательных сред.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Питательные среды на картофельной и соевых ферментативных основах и питательные среды на основе мелассы свекловичной рекомендуется использовать в лабораторных исследованиях для культивирования вакцинных и вирулентных штаммов Y. pestis, V. cholerae, В. Anthracis, для проведения практических занятий со студентами профильных учебных заведений.

2. Рекомендуется применение питательной среды на основе ферментативного гидролизата соевых бобов в качестве среды выбора при плановых пересевах коллекционных штаммов, для длительного хранения (в течение 12 мес) штаммов возбудителей чумы (при +4 °С) и холеры (при +20 °С), а также для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба.

3. Питательные среды на основе мелассы свекловичной с добавлением натрия сернистокислого рекомендуется использовать при проведении бактериологических работ с холерным вибрионом, с добавлением дрожжевого экстракта - при работах с сибиреязвенным и близкородственными сапрофитными микроорганизмами, для обеспечения обильного типичного роста возбудителя чумы рекомендуется внесение в мелассовую основу дрожжевого экстракта и ферментативного гидролизата казеина.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Курилова, Анна Алексеевна, Ставрополь

1. Аванян, J1.A. Действие железа на рост чумного микроба / JI.A. Аванян,

2. H.Е. Губина // Тр. Армянской противочумной станцииЕреван, I960. — Вып.1. —С. 149-161.

3. Агафонова, В.В. Закономерности проявления триацилглицероллипазной активности у холерных вибрионов: автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.07 / В.В. Агафонова. Ставрополь, 2009. - 18 с.

4. Адлова, Г.П. Разработка стимуляторов роста бактерий из растений / Г.П. Адлова, С.В. Денисова, А.К. Илиджев и др. // Журнал микробиол. 1998. -№ 1. -С.13-17.

5. Акулова, М.Ф. Модифицированная агаровая среда для дифференциации сибиреязвенных бацилл / М.Ф. Акулова // Микробиология и иммунология особо опасных инфекций: сб. науч. работ противочум. учр. страны. — Саратов, 1964.-С. 254-257.

6. Андрусенко, И.Т. Холерные вибрионы 01 и 0139 серогрупп: чувствительность к антибиотикам в период седьмой пандемии / И.Т. Андрусенко, Ю.М. Ломов, Э.А. Москвитина и др. // Журнал микробиол. 2008. - № 3. - С. 107114.

7. Апарин, Г.П. Микробиология чумы: руководство / Г.П. Апарин, Е.П. Голу-бинский. Иркутск: Изд-во ун-та, 1989. - 91 с.

8. А.с. 1080474 СССР, МПК7 С 12 N 1/14. Способ получения белкового кормового продукта / И.В. Стахеев, В.Г. Бабицкая, A.M. Костина, А.Н. Капич (СССР). -№ 19801257; заявлено 09.07.80; опубл. 27.11.1980, Бюл. № 32. 4 с.110

9. А.с. 900643 СССР, SU 900643 А, С 12 N 1/20. Питательная среда для биосинтеза L-лизина / Н.И. Дерканосов, Е.Д. Фараджева (СССР). № 19772639; заявлено 08.06.77; опубл. 11.10.1977, Бюл. № 26. - 4 с.

10. Ахапкина, И.Г. Питательные среды как искусственная среда роста и развития микроорганизмов / И.Г. Ахапкина, Л.П. Блинкова // Журнал микро-биол. 2001. - № 6. - С. 99-104.

11. Багмет, А.Г. Биопрепараты, приготовленные на горохово-гидролизной среде / А.Г. Багмет // Биопрепараты, вирусы, микробы. — М.: Сельхозгиз, 1956.-Т. VI.-С. 194-197.

12. Багузина, И.В. Опыт выращивания микробов на овощно-пептонной среде / И.В. Багузина, М.А. Качаровская, В.И. Контор // Лаб. дело. 1970. - № 4.1. С. 204-206.

13. Бакулов, И.А. Сибирская язва (Антракс): Новые страницы в изучении «старой» болезни / И.А. Бакулов, В.А. Гаврилов, В.В. Селиверстов. Владимир: изд-во «Посад», 2001. - 284 с.

14. Баронец, Н.Г. Влияние экстрактов лекарственных растений на рост микроорганизмов / Н.Г. Баронец, Г.П. Адлова, В.А. Мельникова // Журнал мик-робиол. 2001. - № 5. - С. 71-72.

15. Бахрах, Е.Э. Зависимость роста чумного микроба от окислительно-восстановительного потенциала питательной среды. Сообщение 2 / Е.Э. Бахрах, Н.И. Шушерова // Тр. ин-та «Микроб». Саратов, 1951. - Вып. 1. - С. 92-98.

16. Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности): Санитарные правила СП 1.3.21285-03 // Бюллетень нормат. и метод, документов Госсанэпиднадзора. М., 2003. - Вып. 3(13). - С.61 - 144.

17. Бибергал, С.И. Овощно-пептонная среда для выращивания различных бактерий / С.И. Бибергал, Л.Я. Калныня // Лаб. дело. 1965. - № 6. - С. 360361.

18. Биргер, М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / М.О. Биргер. М.: Медицина, 1982. - 461 с.

19. Болотов, Н.А. Производство хлебопекарных дрожжей / Н.А. Болотов, Е.Д. Фараджева. — М.: Профессия, 2002. — 167 с.

20. Бондаренко, Л.Н. Оптимизация плотной среды для аппаратного культивирования чумного микроба в бифазной системе: автореф. дис. . канд. мед. наук: 03.00.07 / Л.Н. Бондаренко. Саратов, 1988. - 23 с.

21. Бугоркова, С.А. Комплексный морфологический подход к оценке протек-тивных свойств препаратов для специфической профилактики холеры / С.А. Бугоркова, С.Ю. Задумина, Т.В. Бугоркова и др. // Журнал микробиол. — 2008.-№ 1.-С. 31-34.

22. Бургасов, П.Н. Сибиреязвенная инфекция / П.Н. Бургасов, Г.И. Рожков. -М.: Медицина, 1984. 208 с.

23. Бургасов, П.Н. Сибирская язва / П.Н. Бургасов, Б.Л. Черкасский, Л.М. Марчук, Ю.Ф. Щербак. М.: Медицина, 1970. - 128 с.

24. Вакцина чумная живая сухая: Регламент производства № 1542-04. — Ставрополь, 2004. 256 с.

25. Васильева, З.И. Применение ферментных препаратов высших базидиаль-ных грибов при производстве питательных сред / З.И. Васильева, Н.З. Тро-фименко, А.А. Мохрякова и др. // Журнал микробиол. 1983. - № 11. - С. 111-112.

26. Вахнов, Е.Ю. Совершенствование технологии приготовления нативных культур возбудителя холеры / Е.Ю. Вахнов, Л.Н. Сапрыкина, А.В. Кибирев // Сб. науч. тр., посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. -С. 142.

27. Витязева, С.А. Закономерности формирования иммунного ответа макроорганизма на введение Yersinia pestis в сочетании с иммуномодуляторами: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / С.А. Витязева. Иркутск, 2009. -22 с.

28. Вышелесский, С.Н. Вакцины сибирской язвы и противосибиреязвенная сыворотка, их получение и применение на практике / С.Н. Вышелесский. -СПб., 1911.-186 с.

29. Галаев, Ю. В. Особенности обмена дикарбоновых аминокислот и их амидов у микроорганизмов кишечной группы / Ю. В. Галаев // Журнал микро-биол. 1974. - № 6. - С. 23-26.

30. Гатауллин, А.Г. Свойства выделенных штаммов Bacillus subtilis и их влияние на интестинальную микрофлору экспериментальных мышей / А.Г. Гатауллин, Н.А. Михайлова, Л.П. Блинкова и др. // Журнал микробиол. -2004.-№ 2.-С. 91-94.

31. Горобец, О.Б. Стимулирующее и ингибирующее воздействие Spirulina platensis на микроорганизмы / О.Б. Горобец, Л.П. Блинкова, А.П. Батуро // Журнал микробиол. 2001. - № 6. - С. 20.

32. ГОСТ 26185-84. Водоросли морские, травы морские и продукты их переработки. Методы анализа. — М., 1984. — 54 с.

33. Государственная Фармакопея СССР. Вып. 1. -М.: Медицина, 1968 1080 с.

34. Грачева, И.М. Технология ферментных препаратов / И.М. Грачева, А.О. Кривова. -М.: Элевар, 2000. 512 с.

35. Гюлушанян, К.С. Возможность использования аминопептида при приготовлении комбинированного агара на основе кукурузного экстракта для производства чумной вакцины / К.С. Гюлушанян, С.А. Угрюмов, В.Г. Майский,

36. Л.П. Воропаева // Актуальные вопросы эпидемиологии, профилактики и диагностики особо опасных инфекций: тез. докл. итоговой науч. конф., 21-22 декабря 1989 г. Ставрополь, 1989. - Ч. 1. - С. 77-80. (ДСП).

37. Гюлушанян, К.С. Использование питательной среды на основе кукурузного экстракта в производстве чумной вакцины EV: автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.07 / К.С. Гюлушанян. Саратов, 1994. — 19 с.

38. Дарманьян, Е.Б. Сравнительная характеристика полимерного комплекса клеточных стенок различных тканей корня моркови / Е.Б. Дарманьян // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т.32, № 3. - С. 356-364.

39. Дармов, И.В. Разработка диагностической питательной среды для идентификации возбудителя сибирской язвы / И.В. Дармов, А.А. Лещенко, А.Г. Лазыкин и др. // Сб. науч. трудов, посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С. 26.

40. Дербин, М.И. Получение и изучение сибиреязвенного антигена. Сообщение I. Питательная среда для получения нативного сибиреязвенного протек-тивного антигена / М.И. Дербин, В.В. Михайлов, B.C. Тарумов и др. // Журн. микробиол. 1976. - № 3. - С. 76-81.

41. Диксон, М. Ферменты: в 3 т.: пер. с англ. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982.-Т. 1.-С. 321-329.

42. Домарадский, И.В. Биохимия и генетика возбудителя чумы / И.В. Дома-радский, Е.П. Голубинский, С.А. Лебедева, Ю.Г. Сучков. М.: Медицина, 1974.- 165 с.

43. Домарадский, И.В. Использование соевых бобов для приготовления кислотных гидролизатов / И.В. Домарадский, Н.З. Трофименко, Л.И. Носкова // Производство бактерийных препаратов: бюл. по обмену опытом. Улан-Уде, 1961.-Вып. 1.-С. 7-8.

44. Донская, Т.Н. Холера / Т.Н. Донская, А.С. Васенин, И.А. Касьян // Материалы пробл. комиссии Межвед. науч. совета по сан.-эпид. охране территории РФ. Ростов-на-Дону, 1995.-С. 147-148.

45. Дятлов, И.А. Значение низкомолекулярных пептидов для роста и биосинтеза чумного микроба / И.А. Дятлов, А.Ф. Филиппов, Т.А. Малюкова // Биотехнология, иммунология и биохимия особо опасных инфекций: тр. противо-чум. учр. СССР. Саратов, 1989. - С. 43-49.

46. Дятлов, И.А. Утилизация глюкозы культурами штаммов УВ и К-1 чумного микроба / И.А. Дятлов, А.Ф. Филиппов // Микробиология, иммунология и биохимия особо опасных инфекций: тр. противочум. учр. СССР. — Саратов, 1987. С.23-30.

47. Еременко, Е.И. Биологические и популяционные аспекты патогенности Bacillus anthracis: автореф. дис. . док. мед. наук: 03.00.07 / Е.И. Ерёменко. — Ставрополь, 1997.-45 с.

48. Еременко, Е.И. Потребности сибиреязвенного микроба в факторах роста и новые питательные среды для его культивирования: дис. . канд. мед. наук: 03.00.07 / Е.И. Ерёменко. Ставрополь, 1986. - 181 с.

49. Еременко, Е.И. Прорастание спор возбудителя сибирской язвы / Е.И. Еременко, О.И. Цыганкова, А.Г. Рязанова, Е.А. Цыганкова // Журнал микробиол. 2006. - № 1. - С. 72-74.

50. Ерошенко, Г.А. Основные направления современных исследований биологии холерных вибрионов / Г.А. Ерошенко // Проблемы особо опасных инфекций.-2008.-Вып. 1(95).-С. 37-41.

51. Зайцев, В.Ф. Некоторые направления стандартизации питательных сред из казеина / В.Ф. Зайцев, С.А. Маслов, Г.В. Комоско и др. // Сб. науч. тр., посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С. 143.

52. Инструкция по бактериологическому контролю диагностических питательных сред для холерного вибриона. — Саратов, 1983. — 18 с.

53. Инструкция по контролю ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры. Саратов, 1975. - 19 с.

54. Инструкция по хранению, транспортированию и приемке мелассы на предприятиях Министерства пищевой промышленности СССР. — М.: ВНИ-ИСП. Утв. 19 сентября 1975 г.

55. Исламова, Ф.И. Включение геотермальной воды в состав питательной среды для микобактерий / Ф.И. Исламова, Р.А. Нуратинов, Г.М. Абдурахма-нов // Журн. микробиол. 2008. - № 3. - С. 89-91.

56. Калягина, С.Ю. Создание питательной среды из отходов мясного сырья и оценка ее свойств / С.Ю. Калягина // Журн. микробиол. 2008. - № 3. - С. 91-94.

57. Каменецкий, И.И. Питательные среды из кормовой свеклы / И.И. Каме-нецкий // Лабораторная практика. 1932. - № 8. — С. 4-5.

58. Канчух, А.А. Утилизация аминокислот холерными вибрионами при размножении в накопительной дрожжевой среде / А.А. Канчух, М.А. Хазан, Л.Б. Милютина и др. //Журнал микробиол. 1980. -№ 7. - С. 117-118.

59. Касаткин, Н.Ф. Влияние кукурузного экстракта на качество агара Хоттингера, используемого для выращивания возбудителя чумы / Н.Ф. Касаткин, Н.Г. Ованесова, В.И. Тынянова // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1972. - Вып. 3 (25). - С. 206-208.

60. Касина, И.В. Изучение нового отраслевого стандартного образца вакцины сибиреязвенной живой сухой / И.В. Касина, Л.В. Саяпина, Т.И. Анисимова и др. // Проблемы особо опасных инфекций. 2006. - № 1 (91). - С. 64-66.

61. Катунина, Л.С. Использование липоевой кислоты с целью усовершенствования питательных сред для культивирования чумного микроба: автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.23 / Л.С. Катунина. Ставрополь, 2002. - 20 с.

62. Кивман, Г.Я. Препарат для выявления и стимуляции роста чумных микробов / Г.Я. Кивман, М.Д. Прядкина, Н.М. Гуторова // Журнал микробиол. -1955.-№ 12.-С. 61-66.

63. Князева, В.А. Стимуляция роста чумного микроба фильтратами его бульонной культуры / В.А. Князева // Тр. ин-та «Микроб». Саратов, 1960. — Вып. 4.-С. 157-161.

64. Коблитц, X. Культура изолированных органов, тканей и клеток растений / X. Коблитц.-М.: Наука, 1970.-С. 192-197.

65. Козлов, Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии / Ю.А. Козлов. М.: Медгиз, 1950. - 251 с.

66. Кретович, В.Л. Растительные белки и их биосинтез / В.Л. Кретович. М.: Наука, 1975.- 190 с.

67. Кутырев, В.В. Актуальные проблемы особо опасных инфекционных болезней и санитарная охрана территорий в современных условиях /В.В. Кутырев // Журн. микробиол. 2008. - № 1. - С. 17-23.

68. Лабинская, А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований / А.С. Лабинская. М.: Медицина, 1978. - 480 с.

69. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М., 1990. - 352 с.

70. Лопаткин, О.Н. Питательные потребности сибиреязвенного микроба /

71. О.Н. Лопаткин, Н.П. Буравцева, Ю.В. Солдатова // Микробиология, эпидемиология и профилактика инфекционных заболеваний: тез. докл. — Ставрополь, 1974.-С. 32-35.

72. Марамович, А.С. Чума в Китае. Опасность заноса в регионы Сибири и Дальнего Востока / А.С. Марамович, С.А. Косилко, Т.И. Инокентьева и др. // Журн. микробиол. 2008. - № 1. - С. 95-99.

73. Маринин, Л.И. Микробиологическая диагностика сибирской язвы / Л.И. Маринин и др. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. - 224 с.

74. Маринин, Л.И. Стабильность свойств вакцинного сибиреязвенного штамма СТИ-1 / Л.И. Маринин, Р.И. Миронова // Сб. науч. тр., посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С. 95-96.

75. Мартене, Л.А. Плотные агаровые среды из кислотных гидролизатов ры-бокостной муки / Л.А. Мартене // Микробиология и иммунология особо опасных инфекций: сборник науч. работ противочум. учр. страны. — Саратов, 1964.-С. 290- 293.

76. Машков, А.В. Питательная среда для культивирования палочки сибирской язвы в капсульной форме / А.В. Машков // Лаб. дело. 1960. - № 6. -С.27-29.

77. Методические рекомендации к контролю питательных сред по биологическим показателям. М., 1980. - 80 с.

78. Методические указания по применению физико-химических методов контроля питательных сред. М., 1977. - 18 с.

79. Методы контроля бактериологических питательных сред: Методические указания 4.2.2316-08. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008. - 67 с.

80. Мостов, Е.Г. Ассимиляция углерода NaHC03 питательной среды культурой штамма СТИ-1 / Е.Г. Мостов, B.C. Тарумов, Н.И. Дербин, Н.В. Федорова // Журнал микробиол. 1982. - № 1. — С. 86-91.

81. Найманов, П.И. Новая синтетическая среда для изучения возбудителя сибирской язвы / П.И. Найманов, Е.П. Голубинский, Ю.И. Соркин // Эпидемиология и профилактика особо опасных инфекций в МНР и СССР: сборник науч. трудов Улан-Батор, 1982. - С. 111-113.

82. Найманов, П.И. О питательных потребностях штаммов

83. В. anthracis и особенностях роста штамма СТИ-1 в условиях периодического культивирования на жидких синтетических средах / П.И. Найманов, Е.П. Го-лубинский, Ю.И. Соркин // Журнал микробиол. 1984. - № 6. - С. 55-59.

84. Найманов, П.И. Особенности питания и биологическая характеристика Bacillus anthracis: дис. . канд. мед. наук: 03.00.07 / П.И. Найманов. Иркутск, 1987.- 197 с.

85. Нестерин, М.Ф. Химический состав пищевых продуктов / М.Ф. Несте-рин, И.М. Скурихин. — М.: Пищевая промышленность, 1979. 216 с.

86. Нефедов, К.С. Сравнительный анализ фенотипических и молекулярно-генетических свойств холерных вибрионов Эльтор, выделенных до начала и в период седьмой пандемии холеры: автореф. дис. . канд. мед. наук: 03.00.07 / К.С. Нефёдов. Саратов, 2009. - 24 с.

87. Омаров, С.М. Сухие питательные среды для культивирования пневмококков и менингококков / С.М. Омаров, И.А. Баснакьян, Г.А. Артемьева // Журн. микробиол. 1999. - № 6. - С. 30-33.

88. Онищенко, Г.Г. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики / Г.Г. Онищенко, Н.Т. Васильев, Н.В. Литусов и др. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. - 448 с.

89. Основные требования оценки вакцинных штаммов сибиреязвенного микроба для иммунизации людей: методические указания. М., 2002. - 20 с.

90. Пат. 2161655 РФ, МПК7 C12Q Я, C12N 1/20. Питательная среда для культивирования и количественного учета иерсиний и листерий в объектах внешней среды / Л.С. Бузолева, Г.П. Сомов. № 98120740/13; заявлено 10.11.98; опубл. 10.01.01, Бюл. № 1.

91. Петрухин, И.В. Корма и кормовые добавки: справочник / И.В. Петрухин. М.: Росагропромиздат, 1989. - 526 с.

92. Питательный агар для культивирования микроорганизмов, готовый к применению (Агар Хоттингера): промышленный регламент № ПР 0189708012505.05. Ставрополь, 2005. - 85 с.

93. Плешков, Б.П. Практикум по биохимии растений / Б.П. Плешков. — М.: Колос, 1976.- 255 с.

94. Подзеев, O.K. Бактериологические исследования. Медицинская микробиология / O.K. Подзеев, В.И. Покровский. -М.: Медицина, 1999. 720 с.

95. Подосинникова, JI.C. Изменчивость холерных вибрионов / JI.C. Подо-синникова, И.Я. Черепахина // Проблемы особо опасных инфекций. — Саратов, 1998.-№7.-С. 22-31.

96. Покровский, А.А. Химический состав пищевых продуктов / А.А. Покровский. М.: Пищевая промышленность, 1976. — 354 с.

97. Поляк, М.С. Питательные среды для медицинской микробиологии / М.С. Поляк, В.И. Сухаревич, М.Э. Сухаревич. СПб.: НИЦФ, 2003. - 148 с.

98. Прокофьева, Т.И. Подбор питательных сред для выращивания холерного вибриона / Т.И. Прокофьева // Материалы по обмену опытом. — 1960. № 2 (58).-С. 110-117.

99. Прядкина, М.Д. Методика изготовления препарата манифестатора для стимуляции роста-чумных и дифтерийных микробов // Материалы по обмену опытом. М., 1958'. - Т. 1/53. - С. 353-357.

100. Рогожин, А.З. Экспериментальное обоснование использования сухих питательных сред в производстве препарата «Биод-5» / А.З. Рогожин, П.Г. Васильев, И.В. Тихонов и др. // Сб. науч. тр., посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С. 165-166.

101. Самойлова, JI.B. Чума / JI.B. Самойлова, Т.Н. Донская, В.И. Вейблат и др. // Лабораторная диагностика возбудителей опасных инфекционных болезней. Саратов, 1998. - Т. 1. - С. 3-49.

102. Санцевич, Н.И. Разработка питательных сред для культивирования ре-комбинантных штаммов E.coli / Н.И. Санцевич, В.М. Кадонцев, Р.И. Аминов и др. // Журнал микробиол. 1994. - № 5. - С. 6-10.

103. Сапрыкина, Л.Н. Основные факторы, влияющие на выживаемость холерных вибрионов в природных водных экосистемах / Л.Н. Сапрыкина, А.В. Кибирев, Е.Ю. Вахнов // Сборник науч. трудов, посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С.233-234.

104. Семихатова, Н.М. Микробиология дрожжевого производства / Н.М. Се-михатова, М.В. Малыгина. — М.: Пищевая промышленность, 1970. —149 с.

105. Сенькин, А.В. Использование желточных сред для повышения высевае-мости возбудителя сибирской язвы / А.В. Сенькин, Т.Н. Терентьев, Н.П. Медведев // Сборник науч. трудов, посвящ. 75-летию НИИ микробиол. МО

106. РФ. Киров, 2003. - С. 168.

107. Сибирская язва / Под ред. Н.Н. Гинсбурга. М.: Медицина, 1975. - 160 с.

108. Сибирская язва / Под ред. С.Г. Колесова. М.: Колос, 1976. - 228 с.

109. Смирнова, Е.Б. Исследование ряда механизмов естественной резистентности к микробу чумы у полуденных песчанок / Е.Б. Смирнова, В.И. Ефре-менко, Г.Д. Брюханова и др. // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1998.-С. 153-156.

110. Соболев, A.M. Запасание белка в семенах растений / A.M. Соболев. — М: Наука, 1985.- 1 13 с.

111. Темирханова, З.У. Питательная среда для выделения и культивирования кампилобактерий / З.У. Темирханова, П.Ш. Гамилова, Н.В. Сафонова и др. // Журнал микробиол. 1999. - № 6. - С. 27-30.

112. Терентьева, Л.И. Содержание ионов кальция в питательной среде и их влияние на рост чумного микроба / Л.И. Терентьева // Журнал микробиол. -1967.-№4.-С. 138-139.

113. Терентьева, Л.И. Усовершенствование плотных питательных сред для диагностики холеры / Л.И. Терентьева, А.П. Ермилов, А.Г. Стогова // Материалы VIII науч. конф. противочум. учр. Средней Азии и Казахстана. Алма-Ата, 1974.-С. 406-409.

114. Терешкина, Н.Е. Современное состояние проблемы иммунодетекции возбудителя сибирской язвы / Н.Е. Терешкина, З.Л. Девдариани // Проблемы особо опасных инфекций. 2008. - Вып. 1 (95). - С. 44-48.

115. Тимченко, Н.Ф. Взаимодействие Yersinia, Listeria и Salmonella с растительными клетками / Н.Ф. Тимченко, В.П. Булгакова, Е.В. Булах и др. // Журнал микробиол. 2000. - № 1. - С. 6-9.

116. Тинкер, А.И. Характеристика чумной живой сухой вакцины, приготовленной в экспериментальных условиях на различных питательных средах /

117. A.И. Тинкер, Э.Г. Шпилевая, Н.М. Хорькова и др. // Профилактика чумы и других природноочаговых инфекций: тез. докл. Всесоюз. науч. конф. Ставрополь, 1983.-С. 128-129.

118. Тихонов, Н.Г. Биотехнологические аспекты культивирования пробиоти-ческих антибиотикорезистентных штаммов Bacillus subtilis / Н.Г. Тихонов,

119. B.М. Самыгин, А.В. Липницкий, Л.К. Жога // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 2005. - Вып. 1 (89). - С. 73-75.

120. Томов, А.И. Чувствительность и специфичность комбинированного метода обнаружения сибиреязвенных спор в почве / А.И. Томов, Т. Тодоров // Журнал микробиол. 1966. - № 10. - С. 62-66.

121. Топорков, В.П. Динамика заболеваемости чумой в мире / В.П. Топорков,

122. Л.Н. Величко, А.Е. Шиянова, О.В. Кедрова // Проблемы особо опасных инфекций. 2008. - Вып. 3 (97). - С. 22-25.

123. Трофименко, Н.З. Среды из ферментативных гидролизатов соевых бобов для выращивания чумного микроба / Н.З. Трофименко, Н.И. Колесинская, Л.И. Носкова // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1969. - Вып. 3 (7).-С. 212-213.

124. Феофилова, Е.П. Пигменты микроорганизмов / Е.П. Феофилова. М.: Знание, 1974.- 150 с.

125. Физико-химические, химические, физические и иммунохимические ме-. тоды контроля медицинских иммунобиологических препаратов: фармакопейная статья № 42-3874-99. М., 1999. - 70 с.

126. Харабаджахян, Г.Д. Разработка и экспериментальное изучение дрожжевой питательной основы сред для диагностики особо опасных инфекций: ав-тореф. дис. . канд. мед. наук: 03.00.07 / Г.Д. Харабаджахян. -Саратов, 1990.-23 с.

127. Харькова, Н.М. Влияние ионов железа на рост чумного микроба: дис. . канд. биол. наук: 03.00.07 / Н.М. Харькова. — Ставрополь, 1973. С. 164.

128. Чеботарев, Е.В. Метаболическая активность холерного вибриона / Е.В. Чеботарев, А.В. Кожемяко, Л.Н. Хонина, Н.Н. Зайцева // Сборник науч. трудов, посвящ. 75-летию НИИ микробиологии МО РФ. Киров, 2003. - С. 134.

129. Четина, Е.В. Исследование эпидемической значимости некультивируе-мых форм холерных вибрионов методом полимеразной цепной реакции / Е.В. Четина, А.Л. Гинсбург, Г.М. Грижебовский и др. // Журнал микробиол. -1992. -№3.~ С. 21-25.

130. Шевченко, Ю.Л. Микроорганизмы и человек. Некоторые особенности их взаимососуществования на современном этапе / Ю.Л. Шевченко, Г.Г. Они-щенко // Журнал микробиол. 2001. - № 2. - С. 94-104.

131. Шеремет, О.В. Выращивание бактерий Y.pestis при различных лимитирующих воздействиях в стационарную фазу периодической агаровой культуры / О.В. Шеремет, Л.Д. Карташова, Л.Н. Зинченко, А.Н. Терентьев // Журнал микробиол. 1994. - № 5. - С. 78-79.

132. Шереметьева, Ю.В. Иммунобиологические свойства сибиреязвенных вакцинных штаммов Ланге столетней давности / Ю.В. Шереметьева, Р.Г. Госманов, К.М. Салмаков, Н.Р. Госманов и др. // Журнал микробиол. 2004. - № 2. - С. 87-88.

133. Элошвили, Н.И. Усовершенствование питательной среды для культивирования СТИ-1 / Н.И. Элошвили. М., 1975. - 5 с. - Деп. в ВНИИМИ МЗ СССР 5.10.75, № 651-75.

134. Albuquerque, L. Bacillus isabeliae sp. nov., a halophilic bacterium isolated from a sea salt evaporation pond / L. Albuquerque, I. Tiago, M. Taborda et al. // Int. J. Syst. and Evol. Microbiol. 2008. - № 1 (58). - P. 226-230.

135. Asheshov, J.N. Panain digest media and standardization of media in general / J.N. Asheshov // Canad. Publ. Health J. 1941. - № 32. - P. 468-471.

136. Ashford, D.A. Anthrax bioterrorism, 2001: lessons and the U.S. anthrax bio-terrorism response plan / D.A. Ashford, E. Whitney, M. Fischer et al. // 5th International Conference on Anthrax. Nice, France March 30. April 3, 2003. - P. 38.

137. Balestra, G.M. Increasing the efficiency of the plate counting method for estimating bacterial diversity / G.M. Balestra, I.J. Misaghi // J. Microbiol. Meth. -1997.-Vol. 30, №2.-P. 111-117.

138. Barlass, P.J. Germinition of Bacillus cereus spores in response to L-alanine and to inosine: the roles of gerL and gerQ operons / P.J. Barlass, C.W. Houston, M.O. Clements et al. // J. Microbiology. 2002. - Vol. 148. - P. 2089-2095.

139. Barroetabena, M.F. Obtencion de hidrolizado enzimatico de caseina para me-dios de cultivo / M.F. Barroetabena, M.C. Rodriguez, R. Zhurbenko // Seminario Cientifico del cenic. Ciudad Habana, 1988. - P. 3.

140. Bartkus, J.M. Transcriptional regulation of the protective antigen gene of Bacillus anthracis / J.M. Bartkus, S.H. Leppla // Infect. Immun. 1989. - Vol. 57, № 8.-P. 2295-2300.

141. Battisii, L. Mating system for plasmid transfer among Bacillus anthracis, Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis / L. Battisii, B.D. Green, C.B. Thorne // J. Bact.- 1985.-Vol. 162, №2.-P. 543-550.

142. Berche, P. L'emergence des maladies infectienses on la rorce du destin / P. Berche // Med. Ther. 1998. - Vol. 4, № Ю. - P. 814-823.

143. Biorn, M.I. Influence of iron on yields of exytracellular products in Pseudo-monas aeruginosa cultures / M.I. Biorn, P.A. Sokol, B.H. Iglewski // J. Bacteriol. 1979.-Vol. 138, № 1.-P. 193-200.

144. Boor, A.K. An antigen prepared in vitro effective for immunization agaist anthrax. 1. Preparation and evaluation of crude protective antigen / A.K. Boor, H.B. Tresselt // J. Infect. Dis. 1955. - Vol. 97, № 2. - P. 184-202.

145. Boor, A.K. An antigen prepared in vitro effective for immunization agaist anthrax. 2. Concentration of the protective antigen by chemical fractionation / A.K. Boor, H.B. Tresselt // J. Infect Dis. 1955. - Vol. 97, № 2. - P. 203-206.

146. Borroto, RJ. Ecology of Vibrio cholerae serogroup Ol in aguatic environments / R.J. Borroto // Rev. Panam. Salud. Publ. 1997. - Vol. 1, № 1. - P. 3-8.

147. Boshwitz, H. Effect of inhibitors of trypsin-like proteolitic enzymes on Bacillus cereus T spore germination / H. Boshwitz, J. Milner, A. Keynan et. al. // J. Bact. 1983. Vol. 153, № 2. - P. 700-708.

148. Bouvet, O.M. Temperature-dependent fermentation of D-sorbitol in Esheri-chia coli 0157:H7 / O.M. Bouvet, S. Pernoud, P.A. Grimont // Appl. Environ. Microbiol. 1999. - Vol. 65, № 9. - P. 4245-4257.

149. Brachman, P.S. Anthrax / P.S. Brachman // Ann. N.-Y. Acad. Sci. 1970. -Vol. 174, №2.-P. 577-582.

150. Brewer, C.R. Application of nutritional studies for development of practical culture media for Bacillus anthracis / C.R. Brewer, W.G. McCullough, R.C. Mills // Arch. Biochem. 1946. - Vol. 10, № 1. - P. 77-80.

151. Brewer, C.R. Studies on nutritional reguirements of Bacillus anthracis / C.R. Brewer, W.G. McCullough, R.C. Mills // Arch. Biochem. 1945. - Vol. 10, № 1. -P. 55-75.

152. Brown, E.R. Differential diagnosis of Bacillus cereus, Bacillus anthracis and Bacillus cereus var. mycoides / E.R. Brown, M.D. Moody, E.L. Treece, Ch.W. Smith // J. Bact. 1958. - Vol. 75, № 5. - P. 499-509.

153. Brown, W.C. Interaction between a Bacillus cereus spore hexosaminidase and specific germinants / W.C. Brown, D. Vellom, N. Mitchell, P. McVay // J. Bact. -1982. Vol. 149, № 3. - P. 969-976.

154. Brubaker, R.R. The effect of Ca++ and Mg++ on lysis growth and production of virulence antigens by P. pestis / R.R. Brubaker, M.L. Surgalla // J. Infect. Dis. -1964.-Vol. 114.-P. 13-25.

155. Burdon, K.L. On the differentiation of anthrax bacilli from Bacillus cereus / K.L. Burdon, R.D. Wende // J. Infect. Dis. 1960. - Vol. 107, № 2. - P. 224-234.

156. Burdon, K.L. Useful criteria for the identification of Bacillus anthracis and related species / K.L. Burdon // J. Bact. 1956. - Vol. 71, № 1. - P. 25-42.

157. Cavallo, J.D. Antibiotic susceptibilities of 96 Bacillus anthracis isolated in France between 1994 and 2000 / J.D. Cavallo, F. Ramisse, M. Girardet et al. // An-timicrob. Agents Chemother. July 2002. - P. 2307-2309.

158. Cherif, A. Esterase electrophoretic polymorphism of Bacillus thuringiensisand Bacillus cereus reference strains / A. Cherif, B. Ettoumi, A. Najjari et al. // Ann. Microbiol. 2007. - Vol. 57, № l.-P. 21-27.

159. Coker, P.R. Antimicrobial susceptibilities of diverse Bacillus anthracis isolates / P.R. Coker, K.L. Smith, M.E. Hugh-Jones // Antimicrob. Agents Chemother. 2002. - Vol. 46. - P. 3843-3845.

160. Colwell, R.R. Global climate and infectious disease: The cholera paradigm / R.R. Colwell // Science. 1996. - Vol. 274, № 5295. - P. 2025-2031.

161. Colwell, R.R. Vibrios in the aguatic environment an ecological paradigm / R.R. Colwell // Perspect. Microbiol. Scol., Proc. 4th Intern. Symp. Ljubljana, 1987.-P. 426-434.

162. Conielis, G. Yersinia enterocolitica, a primary model for bacterial invasiveness / G. Cornelis, Y. Laroche, G. Balligand et al. // Rev. Infect. Dis. 1987. -Vol. 9, № l.-P. 64-87.

163. Deroin, Ph. L' Amerigue seveille a la peur du bioterrorisme / Ph. Deroin // Biofutur. 2001. - № 216. - P.6.

164. Dragon, D.C. The ecology of anthrax spores: tough but not invincible / D.C. Dragon, R.P. Rennie // Can. Vet. J. 1995. - Vol. 36, № 5. - P. 295-30L

165. Efthymoiov, C.J. Development of a selective enterococcus medium based on manganese ion deficiency sodium azido and alkaline ph / C.J. Efthymoiov, S.W. Goseph // Appl. microbiol. 1974. - Vol. 28, № 3. - P. 411-416.

166. Fish, D.C. Purification and properties of in vitro produced anthrax toxin components / D.C. Fish, B.G. Mahlandt, J.P. Dobbs, R.E. Lincoln // J. Bact. -1968.-Vol. 95.-P. 907-917.

167. Flambard, B. The contribution of caseins to amino acid suppli for Lactococ-cus lactis depends on the type of cell envelope proteinase / B. Flambard, S. He-linck, R. Jean, J. Vincent // Appl. and Environ. Microbiol. 1998. - Vol. 64, № 6.-P. 1991-1996.

168. Fukushima, H. Growth of Yersinia pseudotuberculosis and Yersinia enteroco-litica biotype 3B serotype 03 inhibited on cefsulodin-irgosan-novobiocin agar / H. Fukushima, M. Gomyoda // J. Clin. Microbiol. 1986. - Vol. 24, № 1. - P. 116120.

169. Gladstone, G.P. Interrelationships between amino acids in the nutrition of B. anthracis / G.P. Gladstone // Br. J. Exp. Pathol. 1939. - Vol. 20. - P. 189-200.

170. Gladstone, G.P. Simple culture medium for general use without meat extract or peptone / G.P. Gladstone, P. Fields // Brit. J. Exp. Pathol. 1940. - Vol. 21. - P. 161-173.

171. Govaerts, A. Jnfluence de calcium sur Г attenuation du charbon par la Metho-da de Pasteur / A. Govaerts // Ann. Inst. Pasteur. 1951. - Vol. 81, № 4. - P. 424429.

172. Groman, N. Effect of metal ions on diphteria toxin production / N. Groman, K. Judge // Infect, and Immun. 1979. - Vol. 26, № 3. - P. 1065-1070.

173. Guinebretiere, M.-H. Ecological diversification in the Bacillus cereus Group / M.-H. Guinebretiere, F.L. Thompson, A. Sorokin et al. // Environ. Microbiol. -2008.-Vol. 10, №4.-P. 851-865.

174. Guirard, B. The amino acids reguirements of microorganisms for growth / B. Guirard // Hand. Microbiol., Cleveland (Ohio). 1974. - Vol. 4. - P. 1-19.

175. Hauwaert, Th. Bacillus anthracis / Th. Hauwaert // Rev. Assoc. Beige tech-nol. Lab. 2002. - Vol. 29, № 1. - P. 22-31.

176. Hayaski, K. Bacteriolytic enzyme produced by streptomyces sp. / K. Hayaski, A. Seino, T. Kasumi //J. Ferment Technol. 1981. - Vol. 59, №4.-P. 319-323.

177. Heckly, R.J. Studies on infection with Bacillus anthracis. 8. The production of an immunizing antigen in vitro / R.J. Heckly, E. Goldwasser // J. Infect. Dis. -1949. Vol. 84, № 1. - P. 92-97.

178. Heselson, N. Offise of Technology Assessment / N. Heselson, J. Guilemin, M. Hugh Jones et al. II United States of Congress. 1993, August. - P. 2.

179. Higuchi, K. Studies on the nutrition and physiology of Pasteurella pestis. I. A

180. Casein hydrolyzate medium for the growth of Pasteurella pestis / K. Higuchi, C.E. Carlin// J. Bacteriol. 1957. - Vol. 73, № 1. - P. 122-129.

181. Hugh-Jones, M.E. Surveillance for emergencies / M.E. Hugh-Jones // J. Vet. Med. Educ. 2003. - Vol. 2, №30. - P. 148-51.

182. Hymowitz, T. Seed weight, protein, oil fatty acid relation. Ships within ge-nue Glycine / T. Hymowitz, R.G. Palmer, H.H. Hadley // Trop. Agric. - 1972. -Vol. 49, № 3. — P. 245-250.

183. Ireland, J.A.W. Amino acid-and purine ribonucleoside-induced germination of Bacillus anthracis ASterne endospores: gerS mediates responses to aromatic ring structures / J.A.W. Ireland, P.C. Hanna // J. Bacteriol. 2002. - Vol. 184, № 5. -P. 1296-1303.

184. Ivanovics, G. Auxotrophs of Bacillus anthracis / G. Ivanovics, I. Varga, E. Maryai // Acta microbial. Acad. sci. hung. 1964. - Vol. 10, № 4. - P. 409-420.

185. Ivanovics, G. Die Virulenz der Purin-Auxotrophen des Bacillus anthracis / G. Ivanovics, E. Maryai // Zbl. F. Bakt. I Orig. 1964. - № 3, Bd 193. - S. 363-375.

186. Ivanovics, G. Problems concerning the phylogenesis of Bacillus anthracis / G. Ivanovics, J. Foldes // Acta microbial. Acad. sci. hung. 1958. - Vol. 5. - P. 89-109.

187. Ivanovics, G. The isolation and study of auxotrophic mutants of Bacillus anthracis with respect to virulence of this pathogen / G. Ivanovics // Ann. Microbiol., Enzimol. 1964. - Vol. 14, № 1/3. - P. 59-68.

188. Jakab, Z. Why a burden of disease study? / Z. Jalcab // Eurosurveillance. -2007. — V.12, № 10-12.-P. 300-301.

189. Jesudason, M.V. Resistance of Vibrio cholerae Ol to nalidixic acid / M.V. Jesudason, R. Saaya // Ind. J. Med. Res. 1997. - Vol. 105. - P. 153-154.

190. Johnson, A.D. Toxin components produced by two strains of Bacillus anthracis / A.D. Johnson, L. Spero // Abstr. Annu. Meet. Am. Soc. Microbiol. 1980. -Vol. 76.-P. 29.

191. Joshi, A.A. Cultivable bacterial diversity of alkaline Lonar lake, India / A.A. Joshi, P.P. Kanekar, A.S. Kelkar et al. // Microbial. Ecol. 2008. - Vol. 55, № 2. -P. 163-172.

192. Kaneko, T. Deoxyribonucleic acid relatedness between Bacillus anthracis, Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis / T. Kaneko, R. Nozaki, K. Aizawa // Jap. J. Microbiol. Immunol. 1978. - Vol. 22. - P. 639-641.

193. Kari, C. Mechanism of the growth inhibitory effect of cystein / C. Kari, Z. Nagy, P. Kovacs, F. Hernadi //J. Gen. Microbiol. 1971. - Vol. 68. - P. 349-356.

194. Kawashima, H. (Кавасима, X.) Изучение питания Bacillus anthracis. II. Стимуляция размножения аллиатиаминами / Н. Kawashima (X. Кавасима) // J. Nippon Med. School. 1955. - Vol. 22, № 10. - P. 920-924.

195. Keller, G.M. Effect of minerals on Staphylococceae enterotoxin B. production / G.M. Keller, R.S. Hanson, M.S. Bergdoll // Infect, and Immun. 1973. - Vol. 20, № l.-P. 158-160.

196. Kenishi, A. Bacillus polygoni sp. nov., a moderately halophilic, nonmotile obligate alkaliphile isolated from indigo balls / A. Kenishi, H. Kikue, M. Toshihide et al./Int. J. Syst. and Evol. Microbiol. 2008.-Vol. 58, № l.-P. 120-124.

197. Kim, H.U. A sporulation medium for Bacillus anthracis / H.U. Kim, J.M. Goepfert // J. Appl. Bacteriol. 1974. - Vol. 37, № 2. - P. 265-267.

198. Knisely, R.F. Selective medium for Bacillus anthracis / R.F. Knisely // J. Bact. 1966. - Vol. 92, № 3. - P. 784-786.

199. Lamb, A. Biological weapons: The facts not fiction / A. Lamb // Clin. Med. -2001.-Vol. 1, № 6. P. 502-504.

200. Larson, D.K. Separation of three exotoxic factors of Bacillus anthracis by segnential immunosorbent chromatography / D.K. Larson, G.J. Calton, S.F. Little et al.//Toxicon. 1988. -Vol. 26, № 10.-P. 913-921.

201. Leighton, P.M. Yersinia hepatic abscesses subseguent to long term iron therapy / P.M. Leighton, H.M. Macsween // J. Amer. med. Ass. 1987. - Vol. 257, №7.-P. 964-965.

202. Leninger, А. (Ленинджер, А.) Биохимия: пер. с англ. / A. Leninger (А. Ле-нинджер). М.: Мир, 1976. - 412 с.

203. Leppla, S.H. Production and purification of anthrax toxin / S.H. Leppla // Methods in Enzymology / Ed. Harskman. San Diego, Acad. Press. - 1988. - Vol. 165.-P. 103-116.

204. Luna, V.A. Use of two selective media and a broth motility test can aid in identification or exclusion of Bacillus anthracis / V.A. Luna, K.K. Peak, W.O. Ve-guilla et al. // J. Clin. Microbiol. 2005. - Vol. 43, № 9. - P. 36-41.

205. Maleszewski, J. Proba zastosowania niektorych antybiotykow i Biseptolu do selectiwnego wyrkrywania laseczek Bacillus cereus / J. Maleszewski, E. Ozdzyns-ka-Olszewska // Med. Vet. 1980. - Vol. 36, № l. - p. 14-16.

206. Marandian, M.H. Meningite charbonneusse: un cas en apparence primitif / M.H. Marandian, A. Kamali // La Nouvelle Presse Medicale. 1981. - Vol. 10, № 21.-P. 1747-1748.

207. Mekalanos, J.J. Cholera: Molecular basis for emergence and pathogenesis / J.J. Mekalanos, E.U. Rubin, M.K. Waldor // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1997. -Vol. 18.-P. 241-248.

208. Merck, E. Culture Media Handbook / E. Merck. Darmstsdt, 1988. - P. 184188.

209. Mesrobeanu, L. (Месробяну, И.Л.) Физиология бактерий /L. Mesrobeanu, E. Paunesku (И.Л. Месробяну, Э. Пэунеску). Бухарест: Медицина, 1963. — 807 с.

210. Meynell, E.W. The role of serum and carbon dioxide in capsule formation by Bacillus anthracis / E.W. Meynell, G.G. Meynell // J. Gen. Microbiol. 1964. -Vol. 34, № l.-P. 153-164.

211. Morio, A. Protein production by yeast in acidic cultural condition / A. Morio, N. Yukinobu, T. Yamada // Agr. and Biol. Chem. 1978. - Vol. 42, № 12. - P. 91-92.

212. Morishita, T. Multiple nutritional reguirements of Lactobacilli: Genetic lesions affected amino acids biosynthetic pathways / T. Morishita, J. Deguchi, M. Jajima et al. // J. Bact. 1981. - Vol. 148, № l.-P. 64-71.

213. Morris, E.J. A selective medium for Bacillus anthracis / E.J. Morris // J. Gen. Microbiol. 1955.-Vol. 13.-P. 450-460.

214. Nacata, H.M. Organic nutrients reguired for growth and sporulation of Bacillus cereus / H.M. Nacata // J. Bact. 1964. - Vol. 88, № 6. - P. 1522-1524.

215. Nilson, S.L. Bracing for biological warfare / S.L. Nilson // Army Times. -1991.-Vol.51, №24.-P. 14.

216. Ochi, K. Initiation of Bacillus subtilis sporulation by stringent response to partial amino acids deprivation / K. Ochi, J.C. Kandala, E. Freese // J. Biol. Chem. 1981. - Vol. 256, № 1. - P. 6866-6875.

217. Oikawa, T. Studies on the amino acid nutrition of Bacillus anthracis. (2) Sulfur reguirements in the amino acids medium / T. Oikawa // Jap. J. Bact. 1967. -Vol.12, №11.-P. 863-865.

218. Oikawa, T. Studies on the amino acid nutrition of Bacillus anthracis. (3) Amino acids composition without valine and isoleucine suitable for the growth of B. anthracis / T. Oikawa // Jap. J. Bact. 1957. - Vol. 12, № 12. - P. 965-967.

219. Pearce, T.W. A selective medium for Bacillus anthracis / T.W. Pearce, E.D. Powell // J. Gen. Microbiol. 1951. - Vol. 5, № 2. - P. 387-390.

220. Perkins, B. Bioterrorism-related anthrax, USA 2001 / B. Perkins // 5 th International Conference on Anthrax. Nice, France March 30 April 3, 2003. - P. 38.

221. Phillips, A.P. Biological and toxin weapons strengthening the arms control regime / A.P. Phillips, M.R. Dando // Intern. Workshop on anthrax. - Winchester. - 1995.-P. 84.

222. Pini, P. Anthrax continues to threaten human health / P. Pini // Lancet. -1996. -№ 9019. -P. 48.

223. Proom, H. The minimal nutritional reguirements of some species in genus Bacillus / H. Proom, B.C. Knight // J. Gen. Microbiol. 1955. - Vol. 13. - P. 474480.

224. Puziss, M. Large-scale production of protective antigen in anaerobic cultures / M. Puziss, L.C. Manning, J.W. Lynch // Appl. Microbiol. 1963. - Vol. 11. - P. 330-334.

225. Puziss, M. Studies on immunity in anthrax. IV. Factor influencing elaboration of the protective antigen of Bacillus anthracis in chemically defined media / M. Puziss, G.G. Wright // J. Bact. 1954. - Vol. 68, № 4. - P. 474-482.

226. Puziss, M. The protective activity of cell-free intracellular extracts of Bacillus anthracis / M. Puziss, M.B. Howard // Bact. Proc. 1961. - P. 138.

227. Racine, F.M. Glucose-triggered germination of Bacillus megaterium spores / F.M. Racine, S.S. Dills, J.C. Vary // J. Bact. 1979. - V. 138. - P. 442-445.

228. Ristroph, J.D. Elaboration of Bacillus anthracis antigen in a new, defined culture medium / J.D. Ristroph, B.E. Ivins // Infect. Immun. 1983. - Vol. 39, № 1. -P. 483-486.

229. Robertson, D.L. Relationships between the calmodulindependent adenylate cyclases produced by Bacillus anthracis and Bordetella pertussis / D.L. Robertson //Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1988. - Vol.157, № 3. - P. 1027-1032.

230. Roland, F.R. Salt-starch lysine deoxycholate agar. A single medium for isolation of sodium and non-sodium dependent enteric gramnegative bacilli / F.R. Roland // Med. Microbiol, and Immunol. 1977. - Vol.163, № 4. - P. 241-249.

231. Rossingol, D.P. L-proline site for triggering Bacillus megaterium spore germination / D.P. Rossingol, J.C. Vary // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1979. -Vol. 89, №2.-P. 547-551.

232. Schivo, Maria L. Culture medium for insolating and typing helicobacteria, in particular Helicobacter pylori / Maria L. Schivo, G. Loi, B. Saddi, C. Serra // Microbiol. S.n.c. - № 98113950.4. - Опубл. 10.03.1999.

233. Scott, T.A. The Incorporation of (14C4) aspartic Acid into Nicotinic Acid N-Glucoside in Nicotiana tabacum / T.A. Scott, A.L. Devonshire // Biochem. J. -1971.-Vol.124.-P. 949-950.

234. Seal, S.C. Hydrolyzate of casein a fluid medium for the growth of Pasteurel-lapestis / S.C. Seal, S.P. Mukherji // Ann. Biochem. Exper. Med. Calcutta, 1950. -Vol.10, №3/4.-P. 79-98.

235. Shutze, H. The oxygen reguirements of P. pestis and Pasteurella Strains / H. Shutze, M.A. Hassanein // Brit. J. Exper. Pathol. 1929. - Vol.10, № 3. - P. 204209.

236. Sirisanthana, T. Ontbreak of oral-oropharyngeal anthrax: An unusual manifestation of human infection with Bacillus anthracis / T. Sirisanthana, N. Nava-chareon, P. Tharavichitkul et al. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1984. - Vol.33, № 1. -P. 144-150.

237. Slamti, L. Specificity and polymorphism of the PlcR-PapR guorum-sensing in the Bacillus cereus group / L. Slamti, D. Lereclus // J. Bacteriol. 2005. — Vol.187, №3.-P. 1182-1187.

238. Smith, H. The uptake of amino acids during the terminal bacteriemia in guinea pigs infected with Bacillus anthracis / H. Smith, D.W. Tempest // J. Gen. Microbiol. 1957. - Vol.l7. - P. 731-738.

239. Smoot, L. Mechanism of sorbate inhibition of Bacillus cereus T and Clostridium botulinum 62 A spore germination / L. Smoot, M.D. Pierson // Appl. Environ. Microbiol. 1981. - Vol.42, № 3. - P. 477-483.

240. Sokhey, S.S. Experimental studies on plague / S.S. Sokhey // Ind. J. med. Res. 1939.-Vol. 27, №2.-P. 313.

241. Sokhey, S.S. Hydrolyzate of casein for the preparation of placue and cholera vaccines /S.S. Sokhey, M.K. Habbu, K.H. Bharucha // Bull. Wld. Health. Org. -1950.-№3.-P. 25-31.

242. Srivastava, P. Selective chromosome amplification in Vibrio cholera / P. Sri-vastava, D.K. Chattoraj // Mol. Microbiol. 2007. - Vol. 66, № 4. - P. 1016-1028.

243. Stephen, G. Anthrax toxin / G. Stephen // Pharm. Ther. 1981. - Vol. 12, № 3.-P. 501-513.

244. Stephens, P.J. Direct inoculation into media containing bile salts and antibiotics is unsuitable for the detection of acid/salt stressed Escherichia coli 0157:H7 / P.J. Stephens // Lett. Appl. Microbiol. 1998. - Vol.27, № 3. - P. 147-151.

245. Tempest, D.W. The effect of metabolite analogues on growth of Bacillus anthracis in guinea pig and on the formation of virulence determining factors / D.W. Tempest, H. Smith // J. Gen. Microbiol. 1975. - Vol. 11. - P. 739-749.

246. Thome, C.B. Capsule formation and glutamyl polypeptide synthesis by Bacillus anthracis and Bacillus subtilis / C.B. Thorne // Bacterial Anatomy Symp. Soc. Gen. Microbiol. 1956. - Vol. 6. - P. 68.

247. Thorne, C.B. Synthesis of glutamic acid and glutamylpolypeptide by Bacillus anthracis. III. Factor affecting peptide production in synthetic media / C.B. Thorne, C.G. Gomez, J.H. Blind // J. Bact. 1953. - Vol.65. - P. 472-478.

248. Thorne, C.B. Transduction in Bacillus cereus and Bacillus anthracis / C.B. Thorne // Bacteriol. Revs. 1968. - Vol. 32, №4.-P. 358-361.

249. Vary, J.C. Kinetics of germination of Bacillus spores / J.C. Vary, H.O. Hal-vorson // J.Bact. 1965. - Vol.80, № 5. - P. 1340-1348.

250. Weber, C.R. Inheritance and interrelation of some agronomic and chemical characters in an inter specific cross in soy beans, Glycine Max x G. ussuriensis / C.R. Weber // Agr. Exp. Stat. Bui. Iowa. 1950. - № 374. - P. 334-351.

251. White, P.J. The nutrition of Bacillus megaterium and Bacillus cereus / P.J. White // J. Gen. Microbiol. 1972. - Vol. 71. - P. 505-514.

252. Wright, G.G. Effect of the method of agitation on the accumulation of protective antigen in cultures of Bacillus anthracis / G.G. Wright, L.H. Angelety // Appl. Microbiol. 1971. - Vol. 22. - P. 157-159.

253. Wright, G.G. Studies on immunity in anthrax. IX. Effect of variation in cultural conditions on elaboration of protective antigen by strains of B. anthracis /

254. G.G. Wright, M. Puziss, W.B. Neely // J. Bacteriol. 1962. - Vol. 83, № 3. - P. 515-522.

255. Wynn, J. Anthrax island. Why worry? / J. Wynn // Nature. 1982. - Vol. 298, №5874.-P. 506.

256. Пат. 7329738 США, МПК7 C12P 21/08, C07K 16/00. Assays for detection of Bacillus anthracis /1. Biosite, B.A. Lee, B.M. Flores, G.E. Valkirs (США). № 10/890083; Заявл. 12.07.2004; Опубл. 12.02.2008; НПК 530/391.1.

Информация о работе

Курилова, Анна Алексеевна
кандидата биологических наук
Ставрополь, 2009
ВАК 03.00.07

Диссертация

Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы