Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Распространение возбудителей урогенитальных инфекций у обезьян и их роль в патологии беременности и родов

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Распространение возбудителей урогенитальных инфекций у обезьян и их роль в патологии беременности и родов"

На правах рукописи

АРШБА ИЛОНА МУРМАНОВНА

РАСПРОСТРАНЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕН УРОГЕНИТАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ОБЕЗЬЯН И ИХ РОЛЬ В ПАТОЛОГИИ БЕРЕМЕННОСТИ И РОДОВ

03 00.07 - Микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

□□3 164213

Сочи -2008

003164213

Работа выполнена в Государственном Учреждении Научно-исстедовательском институте медицинской приматологии РАМН, г Сочи

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, профессор Джикидзе Этери Капитоновна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Митрохин Сергей Дмитриевич Доктор биологических наук Осипова Ирина Григорьевна

Ведущая организация: Государственное образовательное

учреждение высшего профессионального образования Российский университет дружбы народов

Защита состоится « ¿> » 2008 г в часов

на заседании диссертационного совета Д 208 046 01 при Федеральном государственном учреждении науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им Г Н Габричевского» по адресу 125212, г Москва, ул Адмирала Макарова, д 10

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им Г Н Габричевского»

Автореферат разослан «. » 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук Комбарова С Ю

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема урогенитальных инфекций человека, их связь с патологией беременности и родов - одна из актуальных задач современной медицины В настоящее время известно более 20 инфекционных агентов, относящихся к разным классам и таксономическим группам микроорганизмов (бактерии, вирусы, простейшие), вызывающих заболевания, передающиеся половым путем (311ГШ) В последние годы резко возрос интерес к изучению роли хламидий, микоплазм и уреаплазм в этиологии воспалительных заболеваний урогенитального тракта человека [АристоваИМ с соавт, 2000, ЛобзинЮВ с соавт.,2003, DomeikoМ, Hallen A et al, 2002, Razin S et al, 1998, Yoshida Takashi et al, 2002]. Они получили, повсеместное распространение и являются серьезной угрозой для репродуктивного здоровья населения, вызывая у 25% инфицированных бесплодие, разнообразные виды патологии беременности и родов (ранние аборты, мертворождения, эктопическую беременность, патологию плода и новорожденных) [Арестова И М с соавт, 2000, Малкова Е М с соавт, 2005, Abele-Horn М , Wolff Ch et al, 1997, Alfa M.J , Embree J E, 1995, Mäher С F , Ншап MV, 1994] В настоящее время доказано, что генитальные инфекции проявляются не только местной воспалительной реакцией, но и сопровождаются иммунологическими, морфологическими, ферментативными и гормональными сдвигами, приводят к нарушению важнейших защитных барьеров половой системы, изменениям специфических функций организма [Арестова И М с соавт, 2000, Афанасьев С С , Онищенко Г Г, Алешкин В А с соавт, 2005]

Всемирная Организация здравоохранения уделяет большое внимание борьбе с ЗППП, выделяет большие средства на изучение их этиологии, патогенеза и эпидемиологии, а также на разработку методов ранней

диагностики, эффективной терапии и специфической профилактики этих инфекций [ВОЗ, 2002].

В этой связи особенно актуально получение адекватных моделей на лабораторных животных в целях дальнейшего использования модельных систем для решения кардинальных проблем борьбы с заболеваниями урогениталыгого тракта (УГТ) - оценки различных методов лечения и профилактики

Обезьяны, ближайшие эволюционные родственники человека и составляющие наряду с человеком единый отряд приматов, с давних пор используются для экспериментального изучения инфекционных заболеваний антропонозного и зоонозного происхождения [Лапин Б А, Джикидзе Э К , Крылова Р И, Стасилевич З.К, Яковлева JIА , 2004]. Следует указать, что многие спонтанные болезни обезьян бактериального, вирусного и паразитарного происхождения являются аналогами соответствующих заболеваний человека как по клинико-морфологическим проявлениям, так и по характеру этиологических агентов [Лапин Б А , Джикидзе Э К, Фридман ЭП, 1987] У этих животных при содержании и разведении в условиях неволи довольно высока частота патологии беременности и родов (ранние аборты, мертворождения), а также послеродовые воспалительные осложнения

В литературе сведения об естественной инфекции УГТ обезьян, вызванной хламидиями, ограничиваются исследованиями в НИИ МП РАМН, которые начаты относительно недавно [Кебу Т И, Джикидзе Э К , с соавт, 2005] Есть ряд наблюдений о спонтанном инфицировании микоплазмами и уреаплазмами верхних дыхательных путей и урогенитального тракта обезьян [Марантиди А.Н, 1982; Kochimizu К et al, 1975, 1977, Madden DL, Hildebrandt R.J et al, 1970] Имеются сообщения о попытках экспериментального воспроизведения урогенитальных инфекций указанной этиологии у обезьян путем их заражения инфекционными агентами, выделен-4

ными у людей с воспалительными заболеваниями органов малого таза, уретритами, эпидидимитами [Козлова В И, Пухнер А Ф , 2003, Марантиди АН, 1982, Прозоровский СВ, Раковская ИВ, Вульфович ЮВ, 1995, Kochiirnzu К, Magaribuchi Т et al, 1981]

Систематических, целенаправленных исследований для выяснения естественной (вне экспериментального воздействия) инфицированности возоудителями урогенитальных инфекций (УГИ) и распространения их среди обезьян различных видов практически нет, равно как нет сведений о воз ножной роли хламидий, микоплазм и уреаплазм в патологии беременности и родов, а также в развитии бесплодия

Цель настоящего исследования

Определение естественного распространения возбудителей УГИ (С trachomatis, Mhommis, U urealyticum) у низших обезьян разных видов и выяснение роли этих микроорганизмов в патологии беременности и родов

Задачи исследования

1 Изучить частоту распространения С trachomatis, Mhommis, U urealyticum у взрослых здоровых обезьян разных видов и выяснить связь этого фактора с возрастом животных

2 Определить распространенность С trachomatis, Mhommis, U urealyticum у клинически здоровых обезьян, страдающих бесплодием

3 Изучить частоту распространения С trachomatis, Mhommis, U urealyticum у обезьян при патологии беременности и родов и воспалительных заболеваниях УГТ

4 Определить инфицированность хламидиями, ми ко плазмами и уреаплазмами детенышей обезьян, рожденных от матерей - носителей С trachomatis, М homims, U urealyticum

Научная новизна

Впервые получены уникальные данные по разносторонней характеристике носительства возбудителей УГИ у обезьян Выявлено естественное распространение возбудителей УГИ {С trachomatis, М hominis, U urealyticum) у низших африканских и азиатских обезьян, наиболее часто используемых в медико-биологических экспериментах

Показано, что распространение возбудителей УГИ различно у обезьян разных видов и составляет не менее 28,3%, различаясь у клинически здоровых (49,5%) и больных особей (86,8%)

Показано, что инфицированность обезьян возбудителями УГИ не зависит от пола животных (50% - самцы, 49,3 - % самки) Наименьшая инфицированность выявлена у молодых особей обезьян, с возрастом отмечено нарастание инфицированное™ и увеличение частоты микст-форм

Серологические исследования подтверждают частоту распространения возбудителей УГИ у обезьян

Выявлена связь бесплодия обезьян с носительством возбудителей

УГИ

Показана высокая частота инфицированности детенышей обезьян, рожденных от матерей-носителей С trachomatis, Мhominis, U urealyticum, установлены пути передачи УГИ и ее влияние на жизнеспособность потомства

Практическая значимость работы

Полученные данные об естественном распространении возбудителей УГИ {С trachomatis, М hominis, U urealyticum) у обезьян разных видов и разных возрастов, независимо от пола, и связи этого фактора с патологией беременности и родов дают основание рекомендовать проведение обязательных бактериологических и серологических обследований обезьян при формировании производственного стада, а также при отборе животных 6

для моделирования патологии УГТ, обусловленной другими возбудителями УГИ

Апробация работы.

Апробация диссертационной работы проведена на заседании Ученого Совета ГУ НИИ Медицинской Приматологии РАМН 25 июля 2007 г

Результаты исследования доложены на всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье» (Суздаль, 19-22 мая 2005г), всероссийской научной конференции «Перспективные направления использования лабораторных приматов в медико-биологических исследованиях» (Сочи-Адлер, 8-10 августа 2006г), всероссийской V научно-практической конференции молодых ученых и студентов юга России «Медицинская наука и здравоохранение» (Анапа, 23-26 апреля 2007 г) Основные положения работы представлены на международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах на обезьянах» (Сочи-Адлер, 19-22 сентября 2007 г )

Положения, выносимые на защиту

1 Возбудители УГИ (С trachomatis, М hominis, U urealyticum) широко распространены среди клинически здоровых обезьян разных видов Бессимптомное носительство возбудителей УГИ в 22,7% случаев сопровождается бесплодием

2 При патологии беременности и родов возрастает инфицированность УГТ обезьян возбудителями УГИ при одновременном нарастании частоты микст-форм

3 Детеныши, рожденные от инфицированных матерей, относятся к группе обезьян с повышенным риском развития патологических процессов, вы ¡ываемых возбудителями УГИ

Публикации

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, в том числе 2 в журналах, рекомендованных ВАК

Объем и структура диссертации Диссертационная работа изложена на 104 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы Работа иллюстрирована 17 таблицами и 8 рисунками Библиографический указатель включает 134 источника (79 - отечественных и 55 -иностранных авторов)

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В настоящей работе все обследованные обезьяны, являются акклиматизированными и содержатся в открытых вольерах площадью 200-1000м2 по 30 - 50 особей или в групповых клетках по 5-7 голов Вольеры и клетки имеют зимние домики с центральным отоплением и водоснабжением Обезьяны получают гранулированные корма, сбалансированные по всем ингредиентам, а также овощи и фрукты

Объектом исследования служили 346 низших африканских (павианы гамадрилы, павианы анубисы, зеленые мартышки) и азиатских (макаки яванские, макаки резусы, макаки лапундеры) обезьян обоего пола и различного возраста (от нескольких дней и до 25 лет), наиболее часто используемые в экспериментальных медико-биологических исследованиях

Из обследованных обезьян разных видов, были составлены следующие группы

1) группа здоровых обезьян (без клинических симптомов урогенитальной патологии) разных видов распределена по полу,

2) группа больных (живых) и погибших самок с патологией беременности и родов (аборты, патологические роды, мертворождения);

3) группа погибших детенышей с различной патологией (пневмопатия, пневмония, гипотрофия) (табл.1).

По заключению клинико-ветеринарного отдела с диагностической лабораторией к здоровым обезьянам (без клинических симптомов урсгенитальной патологии) были отнесены активные животные, хорошо поедающие предлагаемую пищу, с блестяшим шерстным покровом, розовыми видимыми слизистыми, с нормальными показателями функций сердечнососудистой, дыхательной систем и желудочно-кишечного тракта.

Таблица 1

Группы обследованных обезьян

Виды обезьян Общее кол-во Здоровые •?; г: 5 С патологией беременности и родов дстены ши

Больные Погибшие

Макаки резусы 122 53 18 22 8 21

Макаки яванские 87 33 4 27 10 13

Макаки лапундеры 35 25 - 7 2 1

Зеленые мартышки 16 9 5 - - 2

Павианы гамадрилы 83 40 13 9 6 15

Павианы анубисы 3 - - - - 3

Всего 346 160 40 65 26 55

Материалом дня исследования служили соскобы из уретры самцов, соскобы эпителиальных клеток влагалища здоровых самок и самок с урогенитальной патологией, а также соскобы, взятые из цервикального отдела и полости матки погибших самок У погибших детенышей исследовали соскобы из конъюнктивы глаза, задней стенки глотки и паренхиматозные органы (легкое, печень, селезенка, почка) В ряде случаев для серологического исследования использовали сыворотки крови здоровых и больных обезьян

При осмотре и взятии материала для исследования у самцов и самок с патологией беременности и родов использовали транквилизаторы (калипсол, кетамин)

При выполнении исследования руководствовались правилами гуманного обращения с лабораторными животными (2003 г)

МЕТОДЫ

Метод полимеразной цепной реакции (ПНР) Дня подготовки и проведения метода ПЦР использовали коммерческие наборы производства НПФ «Литех» и «Биоком» (г Москва), гарантирующие высокую диагностическую эффективность, особенно при персистентных инфекциях Данная реакция состоит из трех этапов экстракция ДНК из исследуемого материала, постановка ПЦР - амплификация участков ДНК и электрофоретического анализа продуктов ПЦР, которые проводили строго по указанному протоколу, с обязательным набором контрольных образцов

Методом прямой иммунофлюоресцениии ШИФ) проводили прямую идентификацию антигенов хламидий и микоплазм, с помощью тест-систем ХлаМоноСкрин, МикогомоФлюоСкрин и УреагениФлюоСкрин, выпускаемых в Москве ЗАО «Ниармедик плюс» при институте им НФ Гамалеи, по прилагаемой инструкции Данная реакция флюоресцирующими

моноклональными антителами в люминесцентном микроскопе представляет собой высокочувствительный и специфический тест, отличается простотой и воспроизводимостью

Реакцию агрегат-гемагглютинации (РАГА) разработанную лабораторией микоплазм и Ь-форм бактерий при институте им Н Ф Гамалеи, использовали для выявления антигенов микоплазм в сыворотке крови больного в концентрации 0,001-0,0001 мкг/мл (по белку) Особенность РАГА заключается в том, что для стабилизации эритроцитов и агрегированных белков иммунной сыворотки использовали глутаровый альдегид (ГЛА), при этом антитела вводятся в состав трехмерных белковых комплексов, вследствие чего часть активных центров антител отделяется от поверхности эритроцита и становится более доступной для детерминант антигена Реакцию ставили в планшетах микротитратора «Такаччи» с У-образными лунками Учет полученных результатов производили по 4-х крестной системе Титр при неспецифическом взаимодействии обычно не превышает 1 А Минимальный диагностический титр 1 8

Реакцию непрямой гемагглютииации (РИГА), для определения хламидийных антител у обезьян, проводили с помощью хламидийного эритроцитарного диагностикума производства ФГУП НПО «Микроген» МЗ РФ' В составе набора - ампулы с диагностикумом хламидийным, с дидгностикумом контрольным и хламидийной антисывороткой РНГА проводили микрометодом в планшетах для иммунологических реакций одноразового использования Минимальный диагностический титр 1 80

Реакцию пассивной гемагглютииации (РПГА). разработанную лабораторией микоплазм и Ь-форм бактерий при институте им Н Ф Гамалеи, использовали для выявления специфических антител к микоплазмам Для постановки реакции используют стабилизированные и активированные глутаровым альдегидом эритроциты человека, имеющего 0 (1) группу крови резус-отрицательную, сенсибилизированные растворимым антигеном

11

микоплазм, который представляет собой центрифугат ультразвукового дезинтегратора биомассы микоплазм (2><108 КОЕ/мл) Постановку реакции осуществляли в планшетах микротитратора «Такаччи» Учет полученных результатов производили по 4-х крестной системе Диагностический титр -1 32

Иммуноферментный анализ (ИФА) проводили с помощью тест-системы ООО «Ниармедик плюс» (г Москва) для выявления иммуноглобулинов IgG и IgM к антигенам микоплазм, которая основана на применении непрямого иммуноферментного анализа на твердой фазе с использованием пероксидазы хрена в качестве маркерного фермента. Подготовка реагентов, проведение иммуноферментного анализа и учет результатов производили строго по инструкции и регистрировали с помощью спектрофотометра, измеряя оптическую плотность (ОП) на длине волны 492 нм

При выполнении данного исследования было проведено 1127 анализов 70 бактериологических, 642 молекулярно-генетических, 215 иммунофлюоресцентных, 200 серологических проб

Статистическую обработку полученных данных проводили в соответствии с общепринятыми методами по Ашмарину И П и Воробьеву А А При статистическом анализе выполняли межгрупповые сравнения с использованием критериев Фишера Результаты считали достоверными при р<0,01

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Распространение возбудителей у рогениталыгых инфекций у здоровых

обезьян.

На первом этапе исследования была определена спонтанная инфицированность урогенитального тракта клинически здоровых обезьян возбудителями УГИ Обследовано 200 здоровых обезьян (160 самок и 40 самцов) в возрасте от 3 до 24 лет, без клинических симптомов урогенитальной патологии Из 200 здоровых обезьян методом ПЦР у 99 (49,5%) в соскобах из влагалища и уретры обнаружены 3 вида возбудителей инфекций, передающихся половым путем С trachomatis, Мhominis, U lirealyticum (табл 2)

Как следует из табл 2, у всех видов взрослых здоровых обезьян чаще обнаруживались С trachomatis и М hominis (44,5% и 20% соответственно) и реже U urealyticum (7,5 %) Частота распространения возбудителей УГИ у обезьян была различной у рода макак составила от 47,8 до 64,8%, мартышек 78,5%, павианов 28,3% Несмотря на столь высокий процент обнаружения возбудителей, клинические проявления заболеваний у этих животных не отмечены, что совпадает с аналогичными наблюдениями у людей

Проведенными исследованиями выявлена достаточно высокая инфицированность клинически здоровых обезьян возбудителями УГИ

Таблица 2

Частота обнаружения возбудителей УГИ у здоровых обезьян разных

видов методом ПЦР

Кол-во и виды обезьян Общее кол-во инфицированных обезьян .Г • ; . . Число обезьян с обнаружением возбудителей УГИ но видам

Слгаско-таШ М.ЬотЫЫ и.шеЫу- (¡сит

абс. | % I ЦОС. ! абс. % ' абс. %

Макаки резусы (п=71) 34 47,8 31 44,0 16 22,5 5 7,0

Макаки яванские (п=37) 24 64,8 21 56,7 13 35,1 4 10,8

Макаки лапундеры (п=25) 15 60,0 12 48,0 9 36,0 1 4,0

Зеленые мартышки (п=14) 11 78,5 10 71,4 2 14,3 2 14,3

Павианы гамадрилы (п=53) 15 28,3 15 28,3 0 0 3 5,6

Всего (п=200) 99 49,5 89 44,5 40 20 15 7,5

Таблица 3

Обнаружение возбудителей УТИ у самок и самцов

Распределение обезьян по полу Кол-во обследованных обезьян Количество инфицированных особей

абс. %

9 - самки 160 79 49,3

в - самцы 40 20 50

Всего 200 99 49,5

Частота обнаружения возбудителей УГИ у самцов и самок (табл.3) в среднем была на одинаковом уровне (50,0% - самцы и 49,3% - самки), что дает основание в равной степени использовать в экспериментах обезьян обоего пола.

Инфицированность здоровых обезьян обусловлена преимущественно одним из видов возбудителей УГИ (62.7% - моноинфекция), чаще всего это С. trachomatis, либо М. hominis. Однако в ряде случаев наблюдается микст-инфекция, представленная сочетаниями двух видов возбудителей УГИ (37,3%).

При анализе распространения возбудителей УГИ в зависимости от возраста обезьян установлено, что у особей 1-года жизни возбудители УГИ практически не обнаружены, у неполовозрелых животных (2-Зг) степень зараженности несколько ниже (25%), чем у половозрелых (4-6 лет, молодые самки) (30%). С возрастом (8-15 лет и более) число инфицированных самок и самцов возрастает (до 52%), при этом постепенно увеличивается число животных, инфицированных ассоциациями возбудителей УГИ -С. trachomatis и M.hominis и U.urealylicum. У старых здоровых обезьян микст-инфекция встречается в 20% случаев.

По данным зоотехнических учетных карточек, в которых ведутся записи о беременности и родах у обезьян, 18 (22,7%) из 79 здоровых носителей (без клинических признаков патологии УГТ) оказались бесплодными, несмотря на то, что они находились с половозрелыми самцами в общих клетках или вольерах. Все 18 обезьян в возрасте от 6 до 24 лет принадлежали к роду макак. Представленные данные свидетельствуют о естественном инфицировании обезьян С.trachomatis, М. hominis и U.urealyticum, что является одной из причин нарушения детородной функции, так называемых здоровых носителей.

C.trachomatis M.hominis U.urealyticum

Рис. 1. Инфицированность УГТ возбудителями УГИ здоровы* и бесплодных самок

При сравнении групп половозрелых самок с нормальной детородной функцией и бесплодных самок было установлено, что U.urealyticum определяются в 2 раза, a M.hominis и C.trachomatis - в 1.5 раза чаше у страдающих бесплодием. Таким образом, у бесплодных инфицированность возбудителями УГИ выше, чем у самок с нормальной детородной функцией (рис.1).

Инфицированность возбудителями УГИ у обезьян е патологией беременности и родов.

Следующим этапом исследования являлось обследование больных и погибших обезьян с патологией беременности и родов. У 79 самок из 91 обнаружены изучаемые нами возбудители УГИ, что составило 86,8% (табл.4).

При разных видах патологии у 91 особи возбудители УГИ I обнаруживались с частотой: С.trachomatis - 71,4%, M.hominis - 61,5%, U.urealyticum - 47,2%. По сравнению со здоровыми животными в этих группах преобладала смешанная инфекция (72,1%), реже регистрировалась мопоинфекция (27,8%).

Таблица 4

Обнаружение возбудителей УГИ у обезьян при разных видах патологии беременности и родов методом ПЦР

Чисто обезьян с раз ными видами литологии Кол-во инфицирован ных обезьян Число Обезьян с обнаружением возбудителей УГИ по видам

Ctracho-mat it M.hominis U. urealy-:' ticitm

абе %: абс. % абс % • ' • ' абс %

Аборты (п=31) 28 90,3 25 80,6 19 61,2 12 38,7

Патологические рэды (п=28) 23 82,1 21 75,0 19 67,8 15 53,5

Мертворождени Я (11=16) 15 93,7 10 62,5 10 62,5 9 56,2

Воспалительные осложнения (п=16) 13 81,2 9 56,2 8 50,0 7 43,7

Всего (п=91) 79 86,8 65 71,4 56 61,5 43 47,2

Частота обнаружения данных патогенов в зависимости от характера патологии была различной (табл4) Наиболее часто возбудители УГИ обнаруживались при мертворождениях (93,7%) и реже при воспалительных заболеваниях (81,2%)

При абортах возбудители УГИ встречались как у молодых обезьян (4-7л), так и в средней возрастной группе (8-15лет) Частота одновременного носительства возбудителей УГИ в различных ассоциациях (58,0%) превалировала над моноинфекцией (29,0%) В виде микст-инфекции чаще встречались сочетания двух возбудителей С trachomatis и М hominis или С trachomatis и U urealyticum Моноинфекции, обусловленные С trachomatis, U urealyticum или М hominis, регистрировались реже

Патологические роды, в частности, неполное отделение плаценты, предлежание плаценты, 2 случая кесарева сечения, встречались, в основном, у молодых (4-7лет) особей Так, из 18 молодых самок, большинство которых исследовано постмортально, у 7 в урогенитальном тракте обнаружены все три возбудителя, что составило 25% В остальных случаях микст - инфекция (42,8%) обусловлена 2-мя видами возбудителей С trachomatis и М hominis, С trachomatis и U urealyticum или М hominis и U urealyticum, то есть в различных сочетаниях В 17,8% случаяев регистрировалась моноинфекция, обусловленная либо С trachomatis, либо М hominis

Высокого уровня достигает инфицированность обезьян при мертворождениях. Практически все исследуемые самки относятся к средней (10-13 лет) и старшей возрастной (17-22 г ) группе обезьян Возбудители УГИ чаще встречались в различных ассоциациях (68,7%), а моноинфекция регистрировалась в 25,0% случаев Интересно отметить, что у павианов гамадрилов ассоциация М hominis и U urealyticum встречалась чаще, чем у других видов У большинства обезьян этой группы отмечены неоднократные мертворождения (2-6 раз) в течение жизни

Послеабортные и послеродовые воспалительные осложнения, как правило, были связаны с развитием эндометрита. Воспалительные осложнения чаще наблюдали у средней возрастной группы самок, реже - у молодых. Смешанные инфекции, вызванные С.trachomatis и M.hominis, C.trachomatis и U.urealyticum, M.hominis и U.urealyticum, были обнаружены у 56,2% исследованных особей. В 25,0% случаев регистрировалась моноинфекция, обусловленная U.urealyticum, C.trachomatis или M.hominis.

Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о более высокой частоте обнаружения возбудителей УГИ (р<0,001) у обезьян с разными видами патологии беременности и родов по сравнению со здоровыми особями (рис.2).

C.trachomatis M.hominis U.urealyticum

Рис.2. Частота обнаружения возбудителей УГИ среди здоровых и

больных обезьян

моноинфекции микстинфекции

Рис. 3. Частота обнаружения возбудителей УГИ в виде моноинфекции и микст-инфекции среди здоровых и больных обезьян

Частота ассоциаций возбудителей УГИ в виде микст-инфекции у больных обезьян с патологией беременности и родов оказалась достоверно выше (р<0,001), чем у здоровых (рис 3).

Результаты серологического обследования обезьян на наличие антигенов и антител к С. trachomatis, М. hominis, U. urealyticum.

Известно, что одним из достоверных показателей распространения тех или иных возбудителей УГИ является обнаружение специфических антител в сыворотке крови обследуемых. В настоящей работе представлены данные серологического обследования здоровых (без клинических признаков) и больных (с патологией беременности и родов) обезьян. В сыворотке крови разных видов обезьян определяли антигены и антитела к М. hominis u U. urealyticum (51 обезьяна) и С. trachomatis (24 обезьяны).

Для обнаружения антигенов и антител к возбудителям УГИ (М.hominis и LI.urealyticum) использовали сыворотки 51 обезьяны двух видов (43 макаков резусов, 8 макаков яванских). В общее количество

обследованных особей входило самок - 41 (28 здоровых и 13 с патологией УГ Т) и 10 самцов

В табл 5 приведены сведения об обнаружении антител классов Ig G- и Ig М- к М hominis и U urealyticum методом ИФА и общих специфических антител методом РПГА, а также антигенов данных микроорганизмов в пробах сыворотки крови здоровых обезьян и с патологией бер еменности и родов с помощью метода РАГА

Как следует из табл 5, Ig М антитела к М hominis выявляли в большем проценте случаев, чем Ig G антитела (42,0% и 31,3% соответственно) При этом у 8 обезьян антитела этих двух классов были обнаружены одновременно В ИФА титры Ig G антител колебались в пределах 1 400-1 3200, Ig М антител - 1 800-1 1600

Частота обнаружения антител классов Ig G- и Ig М к U urealyticum составила 62,7% и 58,5% соответственно При этом в 22 случаях были выявлены антитела этих двух классов Титры антител класса Ig М колебались в пределах от 1-800 до 1 1600, Ig G 1 200 - 1 3200 Антигены U urealyticum были выявлены в РАГА в 43,1% случаев

Следует отметить, что частота обнаружения антител к U urealyticum достоверно выше (р<0,01), чем к М hominis

Высокая частота обнаружения антител класса Ig М, как к М hominis так и к U urealyticum, может свидетельствовать о недавно начавшемся инфекционном процессе у обезьян, течение которого в большей части случаев не имеет выраженных клинических симптомов

В РПГА специфические антитела обнаруживали в 15,6% случаев, т е чувствительность этой реакции была значительно ниже чувствительности ИФА

В РАГА антигены микоплазм были обнаружены у 16 животных, уреаплазм - у 22 Выявление антигенов (33,3% к Мhominis и 43,1 %

и.игеа1уИсит) является показателем широкого распространения возбудителей УГИ среди обезьян.

Таблица 5

Данные серологического обследования обезьян (п=51) на наличие

антигенов и антител к М. НоттЫ и V. игеа1уИсит

Выявлены ■ • Методы ■■ ... исследования Количество обезьян в сыворотке крови которых обнаружены

антитела к V/. №«ШШ антитела к V. игеакйсит

абс. % абс. %

антитела ИФА: ¡6 31,3±6,4 32 62,7±6,4

ИФА: ^М 21 42,0±6,9 30 58,8±6,8

РИГА 8 15,6±5,0 8 15,6±5,0

антигены РАГА 16 33,3±6,6 22 43,1±6,8

Из всех серологически обследованных самок (41 обезьяна) у 13 в анамнезе были спонтанные аборты, мертворождения, патологические роды и др. Остальные 28 обезьян были клинически здоровы. В табл. 6 представлены результаты их обследования.

Таблица 6

Обнаружение ^би^М антител в сыворотке крови здоровых и больных обезьян (самок) методом ИФА

Группы обезьян Кол-во особей, имевших антитела к

М. кот1тв : у ■ V. игеа1уйект

... <; 1§0 . .. гё м ГёО 18 М

абс. абс. % абс. % абс. ' %

Здоровые (п =28) 6 21,5 ±7,6 12 42,8 +9,2 14 50 ±9,4 11 35,7 ±8,6

Больные (п=13) 7 53,8 ±13,6 6 46,1 ±13,6 11 84,6 ±9,8 12 92,3 ±23,1

Показано, что антитела классов в и М чаще обнаруживали у больных, чем у клинически здоровых самок, У 10 из 13 больных самок выявлялись одновременно антитела классов ^ О и М к 1].игеа1уйсит.

На предмет обнаружения общих специфических хламидийных антител были исследованы сыворотки крови 24 обезьян (17 самок и 7 се.мцов). 12 обезьян были здоровыми и 12 - с патологией беременности и родов (аборт, патологические роды, внутриутробная гибель плода). Антитела к хламидиям определяли в РНГА (табл 7). В 12 из 24 проб сывороток (50%) актитела были обнаружены в диагностических титрах (1:80 - 1:160). Полученные данные, в зависимости от клинического состояния обезьян, показали, что частота обнаружения антител у клинически здоровых животных несколько ниже, чем у обезьян с патологией беременности и родов - 41,6% и 58,3% соответственно.

Таблица 7

Выявление специфических хламидийных антител в сыворотке крови здоровых и больных обезьян

Группы обезьян ' Количество обезьян с обнаружением антител

абс. ; , %

Здоровые (п=12) 5 41,6±2,1

Больные (п=12) 7 58,3±1,4

Всего (п =24) 12 50±1,02

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о частоте распространения представителей класса МоШшеэ iM.hom.inis, \J.urealyticum) среди обезьян, что подтверждается обнаружением специфических антител и антигенов в сыворотке крови, как у клинически здоровых (бессимптомных)

носителей, так и у обезьян с патологией урогенитального тракта Серологические исследования подтверждают высокую степень инфицированное™ УГТ обезьян хламидиями

Этиологическая роль возбудителей УГИ в неонатальной патологии

обезьян.

Для выяснения этиологической связи возбудителей УГИ с патологией новорожденных были обследованы детеныши разных видов обезьян, рожденные от инфицированных и здоровых самок Всего обследовано 55 детенышей, в том числе 17 мертворожденных и 38 погибших в течение 1 месяца жизни после рождения К таковым относятся. 21 макаков резус, 13 макаков яванских, 2 зеленые мартышки, 1 макак лапундер, 15 павианов гамадрилов, 3 павиана анубиса

Образцами для исследования являлись кровь из сердца, мазки из конъюнктивы глаз и задней стенки глотки (60 образцов), а также отпечатки органов (легкое, печень, селезенка, почка - 68 образцов), итого от 55 обезьян исследовано 128 проб материала В 60 образцах, исследованных методом ПЦР, в 18,3 % случаев обнаружены возбудители УГИ Из 68 образцов отпечатков, исследованных методом прямой иммунофлюоресценции, в 52 случаях (76,4%) были определены возбудители УГИ, в том числе Mhominis в 30,8% случаев, U urealyticum в 27,9% и С trachomatis в 17,6%

По данным патоморфологического исследования, из 38 детенышей, погибших в течение первого месяца жизни, 28 погибли от пневмопатий и пневмоний , 4 - с признаками гипотрофии , 4 - вследствии травм, 2 - при патологии желудочно-кишечного тракта (ЖКТ)

Из 55 исследованных детенышей у 26 обнаружены возбудители УГИ (С trachomatis, Mhominis и Uurealyticum), что составило 47,2% (табл 8)

Как видно из табл 8, число инфицированных возбудителями УГИ при пневмопатии составило 53,8%, при гипотрофии 50%, у мертворожденных -35,2%

Таблица 8

Инфицированность детенышей обезьян возбудителями УГИ при различных патологических состояниях

■f , >С Виды патологии Кол-во* детенышей »Число инфицирйванньк де-; , тенышей <• ,

абс. % -

мертворождение 17 6 35,2

пневмопатия 26 14 53,8

пневмония 2 2 100

гипотрофия 4 2 50

травмы 4 2 50

патология ЖКТ 2 0 0

Всего 55 26 47,2

У 6 из 17 мертворожденых обезьян разных видов методом им-мунофлюоресценции практически во всех паренхиматозных органах определяли наличие возбудителей УГИ (С trachomatis, Мhominis, U urealyticum), что свидетельствует о генерализации инфекционного процесса На основании этих данных мы предполагаем, что мертворождения связаны с внутриутробным инфицированием плода Возбудители УГИ регистрировались как в виде моноинфекции, обусловленной С trachomatis, так и смешанной, обусловленной М hominis и U urealyticum

В группе погибших от пневмопатии так же как и у мертворожденных, мы наблюдали диссеминацию возбудителей УГИ в паренхиматозные органы (легкие, почки, печень, селезенку)

Заслуживает упоминания обнаружение U urealyticum в легких детенышей двух обезьян, погибших от пневмонии в первую неделю после рождения, что может указывать на вероятность внутриутробного заражения

Обнаружение Ctiachomatis на конъюнктиве глаза в 2х случаях и U urealyticum на задней стенке глотки в - одном, дает основание предполагать возможность заражения при прохождении через родовые пути Эти детеныши погибли в сроки от недели до одного месяца после рождения

При сопоставлении результатов исследования материалов от матерей (8 особей) и 8 их погибших детенышей было установлено совпадение возбудителей УГИ При исследовании соскобов эпителиальных клеток из влагалища и полости матки матерей обнаружены С trachomatis, Мhominis, U urealyticum методом ПЦР, преимущественно в виде микст-инфекции В пробах от детенышей методами ПЦР и ПИФ были определены те же возбудители

Обнаружение возбудителей УГИ в отпечатках паренхиматозных органов погибших новорожденных детенышей является объективным доказательством внутриутробного инфицирования Эти данные подтверждают как антенатальный, так и интранатальный путь инфицирования плода, что соответствует наблюдениям у людей [Цинзерлинг А В , Вуду Г А, 1989; Малкова Е М, Гавалов С М с соавт, 2005] Таким образом, наши исследования показали, что детеныши, рожденные от инфицированных самок, относятся к группе обезьян с повышенным риском заражения возбудителями УГИ

Результаты проведенных исследований обосновывают необходимость строгого контроля обезьян на носительство возбудителей УГИ как при формировании производственного стада, так и при использовании этих животных в медико-биологических экспериментах

выводы

1 Обследование 346 африканских и азиатских обезьян на носительство озбудителей УГИ выявило широкое распространение С trachomatis, hominis, U urealyticum у обезьян разных видов (павианы гамадрилы, авианы анубисы, зеленые мартышки, макаки яванские, макаки резусы, акаки лапундеры)

Высокая частота носительства возбудителей УГИ отмечена у обезьян рода акак (макаки яванские 64,8%, макаки лапундеры 60,0%, макаки резусы 7,8%), меньшая инфицированность выявлена у павианов гамадрилов 28,3%), что не зависело от пола животных (50,0% - самцы и 49,3% - самки) . Показано, что частота носительства возбудителей УГИ у клинически доровых обезьян значительно ниже (49,5%), чем у обезьян с урогенитальной атологией (86,8%) У здоровых особей преобладает мононосительство озбудителей УГИ (27,8%), тогда как микст-носительство чаще свойственно собям с патологией УГТ (72,1%) С возрастом животных частота осительства С trachomatis, М hominis, U urealyticum и выявления микст-форм арастает.

Выявлена этиологическая связь бесплодия клинически здоровых обезьян с осительством возбудителей УГИ (22,7%)

Серологические исследования подтверждают широкое распространение озбудителей УГИ как у обезьян с патологией УГТ, так и у клинически доров ых особей

Обьаружена высокая частота инфицированное™ С trachomatis, М hominis, urealyticum детенышей обезьян, рожденных от матерей - носителей этих икрос рганизмов

Обезьяны с естественным носительством возбудителей УГИ, могут быть екомевдованы в качестве модели для изучения вопросов патогенеза и форм нения УГИ у человека, а также для доклинического испытания

эффективности новых методов терапии, новых вакцин и иммунобиологических препаратов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Аршба ИМ, Кебу ТИ Естественная инфекция возбудителями ИППП у обезьян в условиях неволи // Материалы всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье» Суздаль, 2005-С 131-132

2. Аршба И М, Джикидзе Э К, Кебу Т И, Чикобава М.Г Инфи-цированность обезьян некоторыми возбудителями, передающимися половым путем и их роль в патологии беременности и родов// Материалы всероссийской научной конференции «Перспективные направления использования лабораторных приматов в медико-биологических исследованиях» Сочи-Адлер, 2006. - С 107-112

3. Кебу Т И , Джикидзе Э К, Чикобава М Г, Аршба И М Спонтанная урогенитальная инфекция у обезьян рода макак // Жури микробиол, 2006, №7 - С. 91-94.

4. Аршба И М Роль возбудителей ЗШШ в патологии новорожденных обезьян //Материалы всероссийской V научно-практической конференции молодых ученых и студентов юга России «Медицинская наука и здравоохранение». Анапа, 2007, - С 8-10

5 Аршба И М, Джикидзе Э К Роль возбудителей заболеваний, передающихся половым путем в урогенитальной патологии обезьян // Материалы международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах на обезьянах» Сочи-Адлер, 2007 -С 141-148

6 Аршба И М, Джиквдзе Э К, Раковская И В , Горина Л Г, Гончарова С А Иммунологические показатели инфицированности обезьян «урогенитальными миколлазмами» // Журн микробиол, 2007, №5 -С 87-90

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

НИИ МП РАМН - государственное учреждение научно-исследовательский институт медицинской приматологии Российской академии медицинских наук

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ЖКТ — желудочно-кишечный тракт

ЗППП - заболевания передающиеся половым путем

ИФА - иммуноферментный анализ

ПИФ - прямая иммунофлюоресценция

ПЦР — полимеразная цепная реакция

РАГА - реакция агрегатгемагглютинации

РИГА - реакция непрямой гемагглютинации

РПГА - реакция пассивной гемагглютинации

УГ И - урогенитальные инфекции

УГТ - урогенитальный тракт

^ С - иммуноглобулины класса в

^ М- иммуноглобулины класса М

Ь-формы - бесстеночные формы бактерий, в частности микоплазмы

Подписано в печать 31 01 08 г Формат 60x84/16 Тираж 100 экз Заказ 112

Отпечатано в службе множительной техники ГУ НИИ МП РАМН 354376, Сочи-Адлер, Весёлое-1

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Аршба, Илона Мурмановна

ВВЕДЕНИЕ стр.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль урогенитальной инфекции в патологии человека.

1.2. Биологические особенности семейства Chlamydiaceae.

1.3. Биологические особенности класса Mollicutes.

1.4. Хламидиозы и микоплазмозы среди животных и птиц.

1.5. Обезьяны — как модель в медико-биологических исследованиях.

1.6. Методы лабораторной диагностики урогенитальных инфекций.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы.

2.2.Метод ы.

2.2.1. Молекулярно-генетический метод ПЦР - полимеразная цепная реакция.

2.2.2.Метод флюоресцирующих антител

ПИФ — прямая иммунофлюоресценция.

2.2.3. РНГА — реакция непрямой гемагглютинации, для серологического исследования.

2.2.4. РАГА — реакция агрегатгемагглютинации, для определения антигенов.

2.2.5. РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, для определения антител.

2.2.6. ИФА — иммуноферментный анализ, для определения антител.

2.3. Статистическая обработка.

ГЛАВА 3. РАСПРОСТРАНЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ЗДОРОВЫХ ОБЕЗЬЯН

3.1. Инфицированность урогенитального тракта возбудителями урогени-тальных инфекций клинически здоровых обезьян.

3.2. Инфицированность возбудителями урогенитальных инфекций у обезьян с патологией беременности и родов.

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ СЕРОЛОГИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ ОБЕЗЬЯН НА НАЛИЧИЕ АНТИГЕНОВ И АНТИТЕЛ К С. trachomatis,

M.hominis, U.urealyticum.

4.1. Определение антител и антигенов в сыворотке крови обезьян к микоплазмам и уреаплазмам.

4.2.0пределение хламидийных антител в сыворотке крови обезьян.

ГЛАВА 5. ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ В НЕОНОТАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ

ОБЕЗЬЯН.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Распространение возбудителей урогенитальных инфекций у обезьян и их роль в патологии беременности и родов"

Актуальность проблемы. Проблема урогенитальных инфекций человека, их связь с патологией беременности и родов - одна из актуальных задач современной медицины. В настоящее время, известно более 20 инфекционных агентов, относящихся к разным классам и таксономическим группам микроорганизмов (бактерии, вирусы, простейшие), вызывающим заболевания, передающиеся половым путем (3111111). Эти заболевания, поражающие мужчин и женщин, особенно в период наибольшей половой активности, стали большой социальной и экономической проблемой. Они получили широкое, повсеместное распространение и являются серьезной угрозой для, репродуктивного здоровья населения, вызывая у 25% инфицированных бесплодие, разнообразную патологию беременности и родов (ранние аборты, мертворождения, эктопическую беременность, патологию плода и новорожденных). Среди причин, вызывающих неблагоприятный исход беременности, ведущее место отводится именно* инфекционным заболеваниям урогенитального тракта [6, 36, 45, 80, 81].

В этой связи в последние годы резко возрос интерес к изучению роли микоплазм и хламидий в этиологии воспалительных заболеваний урогенитального тракта человека. Удельный вес заболеваний микоплазменной, хламидийной этиологии и их сочетаний (ассоциированных и моноинфекций) повысился на фоне успехов в борьбе с другими бактериальными и протозойными инфекциями.

За последние годы повысилась частота и значение роли урогенитальных микоплазменных инфекций в патологии, мочеполовых органов, как у мужчин, так и у женщин: Характерной особенностью уреаплазменной инфекции является существование латентной формы и микоплазмоносительство в мочеполовых органах у мужчин и женщин. Отмечено, что уреаплазмы чаще вызывают заболевания урогенитального тракта у мужчин, реже у женщин и встречаются у 46-53% больных, нередко сочетаясь с гонореей, трихомонозом, хламидиозом. Урогенитальным хламидиозом в мире поражено более 50 млн. человек. В нашей стране заболеваемость урогенитальным хламидиозом в 2003 год была зафиксирована на уровне 100 новых случаев на 100 тыс. населения, что, по мнению специалистов, не отражает истинной, более неблагоприятной ситуации [7, 36, 43].

Всемирная Организация здравоохранения уделяет большое внимание борьбе с заболеваниями, передающимися половым путем, выделяет большие средства на изучение этиологии, патогенеза и эпидемиологии, а также на разработку методов ранней диагностики, эффективной терапии и специфической профилактики этих инфекций [ВОЗ, 2002]. Большое внимание уделяется изучению вышеназванных вопросов в эксперименте, в частности получению адекватных моделей на лабораторных животных в целях дальнейшего использования модельных систем для решения кардинальных проблем борьбы с заболеваниями урогенитального тракта — оценке различных методов лечения и профилактики.

Обезьяны, ближайшие эволюционные родственники человека и составляющие наряду с человеком единый отряд приматов, с давних пор используются для экспериментального изучения инфекционных заболеваний антропонозного и зоонозного происхождения. Благодаря использованию обезьян в экспериментах получены уникальные данные по этиологии, патогенезу и профилактике многих инфекционных заболеваний человека. Следует указать, что многие спонтанные болезни обезьян бактериального, вирусного и паразитарного происхождения являются аналогами соответствующих заболеваний человека, как по клинико-морфологическим проявлениям, так и по характеру этиологических агентов [39, 40]. У этих животных при содержании и разведении в условиях неволи довольно высока частота патологии беременности и родов (ранние аборты, выкидыши, мертворождения), а также послеродовые воспалительные осложнения.

Несмотря на то, что нозологический профиль инфекционной патологии разных видов обезьян хорошо изучен, как в НИИ МП РАМН, так и в других приматологических учреждениях мира, практически нет сведений о характере и частоте урогенитальных инфекций, их причастности к патологии беременности и родов, а также бесплодию.

Сведения о естественной инфицированности урогенитального тракта низших (африканского и азиатского происхождения) обезьян возбудителями заболеваний, передающимися половым путем, наиболее распространенными среди людей - микоплазмами, уреаплазмами, хламидиями, гарднереллами, трихомонадами практически отсутствуют. Имеются лишь сообщения о попытках экспериментального воспроизведения урогенитальных микоплазмозов, хламидиозов у обезьян путем заражения названными инфекционными агентами, выделенными у людей с воспалительными заболеваниями органов малого таза, уретритами, эпидидимитами [36, 58].

Систематических, целенаправленных исследований для выяснения естественной (вне экспериментального воздействия) инфицированности возбудителями УГИ и распространения их среди обезьян различных видов практически нет, равно как нет сведений о возможной роли хламидий, микоплазм, уреаплазм в патологии беременности и родов, а также в развитии бесплодия.

Настоящее исследование является продолжением работы, начатой в лаборатории инфекционной патологии ГУ НИИ МП РАМН по изучению естественной инфицированности возбудителями УГИ обезьян разных видов и установлению возможной этиологической связи их с патологией беременности и родов [33].

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью настоящего исследования является определение естественного распространения возбудителей УГИ (С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum) у низших обезьян разных видов и выяснение роли этих микроорганизмов в патологии беременности и родов.

Для выполнения исследования были поставлены следующие задачи: 1.Изучение частоты распространения С .trachomatis, M.hominis, U.urealyticum у взрослых здоровых обезьян разных видов и выяснить связь этого фактора с возрастом животных.

2.Определение распространенности С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum у клинически здоровых обезьян, страдающих бесплодием.

3.Изучение частоты распространения С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum у обезьян при патологии беременности и родов и воспалительных заболеваниях УГТ.

4.Определение инфицированности хламидиями, микоплазмами и уреаплазмами детенышей обезьян, рожденных от матерей — носителей С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые получены уникальные данные по разносторонней характеристике носительства возбудителей УГИ у обезьян. Выявлено естественное распространение возбудителей УГИ {С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum) у низших африканских и азиатских обезьян, наиболее часто используемых в медико-биологических экспериментах.

Показано, что распространение возбудителей УГИ различно у обезьян разных видов и составляет не менее 28,3%, различаясь у клинически здоровых (49,5%) и больных особей (86,8%).

Показано, что инфицированность обезьян возбудителями УГИ не зависит от пола животных (50% - самцы, 49,3 - % самки). Наименьшая инфицированность выявлена у молодых особей обезьян, с возрастом отмечено нарастание инфицированности и увеличение частоты микст-форм.

Серологические исследования подтверждают частоту распространения возбудителей УГИ у обезьян.

Выявлена связь бесплодия обезьян с носительством возбудителей УГИ.

Показана высокая частота инфицированности детенышей обезьян, рожденных от матерей-носителей C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum, установлены пути передачи УГИ и ее влияние на жизнеспособность потомства.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Полученные данные свидетельствуют о том, что среди обезьян Адлерского питомника широко распространено естественное носительство возбудителей УГИ {C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum).

Полученные данные об естественном распространении возбудителей УГИ у обезьян разных видов и разных возрастов, независимо от пола, и связи этого фактора с патологией беременности и родов дают основание рекомендовать проведение обязательных бактериологических и серологических обследований обезьян при формировании производственного стада, а также при отборе животных для моделирования патологии УГТ, обусловленной другими возбудителями УГИ.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Возбудители УГИ (С.trachomatis, M.hominis, U.urealyticwn) широко распространены среди клинически здоровых обезьян разных видов. Бессимптомное носительство возбудителей УГИ в 22,7% случаев сопровождается бесплодием.

2. При патологии беременности и родов возрастает инфицированность УГТ обезьян возбудителями УГИ при одновременном нарастании частоты микст-форм.

3. Детеныши, рожденные от инфицированных матерей, относятся к группе обезьян с повышенным риском развития патологических процессов, вызываемых возбудителями УГИ.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Аршба, Илона Мурмановна

выводы

1. Обследование 346 африканских и азиатских обезьян на носительство возбудителей УГИ выявило широкое распространение C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum у обезьян разных видов (павианы гамадрилы, павианы анубисы, зеленые мартышки, макаки яванские, макаки резусы, макаки лапундеры).

2. Высокая частота носительства возбудителей УГИ отмечена у рода макак (макаки яванские 64,8%, макаки лапундеры 60,0%, макаки резусы 47,8%), меньшая инфицированность выявлена у павианов гамадрилов (28,3%), что не зависело от пола животных (50,0% - самцы и 49,3% -самки).

3. Показано, что частота носительства возбудителей УГИ у клинически здоровых особей значительно ниже (49,5%), чем у обезьян с урогенитальной патологией (86,8%). У здоровых особей преобладает мононосительство возбудителей УГИ (27,8%), тогда как микст-носительство чаще свойственно особям с патологией УГТ (72,1%).С возрастом животных частота носительства C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum и выявления микст-форм нарастает.

4. Выявлена этиологическая связь бесплодия клинически здоровых обезьян с носительством возбудителей УГИ (22,7%).

5. Серологические исследования подтверждают широкое распространение возбудителей УГИ как у обезьян с патологией УГТ, так и у клинически здоровых особей.

6. Обнаружена высокая частота инфицированности C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum детенышей обезьян, рожденных от матерей -носителей этих микроорганизмов.

7. Обезьяны с естественным носительством возбудителей УГИ, могут быть рекомендованы в качестве модели для изучения вопросов патогенеза и форм течения УГИ у человека, а также для доклинического испытания эффективности новых методов лечения, вакцин и иммунобиологических препаратов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Аршба, Илона Мурмановна, Сочи

1. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем // М. Мед. книга, 1999, 413с.

2. Аджигитов Ф.И., Алибекова Т.С. Урогенитальные хламидиозы. Заболеваемость, терапия, профилактика // Махачкала, 1992, 23с.

3. Аджигитов Ф.И., Цыганок И.М. Заболевания передаваемые половым путем (ЗППП) // Ростов-на -Дону, 1999, 27с.

4. Алексеева Л.В. Полицикличность размножения у приматов и антропогенез // Москва, 1977, 195с.

5. Ануфриев Г.А., Першина С.И., Фролов Н.С. Хламидиоз свиней // Ветеринарный консультант. №5, 2004, с. 14-16.

6. Арестова И.М., Занько С.Н., Русакевич П.С. Генитальные инфекции и беременность//М. Мед. л-ра, 2000, 170с.

7. Афанасьев С.С, Онищенко Г.Г., Алешкин В.А и др. Интерфероновый статус, препараты интерферона в лечении и профилактике инфекционных заболеваний и реабилитации больных // М., Триада-Х, 2005, 766с.

8. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы микробиологических исследований // Л., Изд-во Медгиз, 1962, 178с.

9. Балабанов Д.И., Раковская И.В., Горина Л.Г., Гончарова С.А., Гамова Н.А., Бархатова О.И. Сравнительная оценка методов диагностики ми-коплазменных инфекций урогенитального тракта // Журн. микробиол., 2006, №4, с.82-85.

10. Вард М. Е. Современные данные об иммунологии хламидийной инфекции //ЗППП, 1996, №6, с.3-6.

11. Викулов М.А., Гнездилова JI.A. Специфическая диагностика хламидиоза КРС // Ветеринарный консультант, 2006, №16, с.9-10.

12. Вульфович Ю.В., Раковская И.В. Лабораторная диагностика микоплаз-моза и уреаплазмоза у урологических и гинекологических больных // Журн. микробиол., 1995, №5, с.97-100.

13. Гаффаров Х.З. Инфекционные болезни крупного рогатого скота хламидийной, микоплазменной и вирусной этиологии, разработка диагностических и лечебно-профилактических препаратов // Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук. Казань, 1986, 40с.

14. Гнездилова Л.А., Викулова М.А. Трансплацентарный путь передачи возбудителя хламидиоза у овец // Ветерин. консульт.№21, 2004, с.4.

15. Горчакова Л., Плаксина Г. Хламидийная инфекция у детей // Мед. газета, №44, 11.06.04.

16. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавание патологических последствий // Л., Медицина, 1978, 296 с.

17. Гусман Б.С., Непомнящая Е.М. Роль микоплазменной инфекции в детской патологии // Архив патологии, 1980, №7, с.78-82.

18. Джикидзе Э.К. Изучение на лабораторных приматах инфекционные болезни человека // Материалы симпозиума Лабораторные приматы для решения актуальных проблем медицины и биологии. М., 2004, 20-21 октября, с.33-35.

19. Джикидзе Э.К., Крылова Р.И. Спонтанные микоплазмозы обезьян // БЭБиМ, 2001, том 132, №12, с.678-684.

20. Дмитриев Г. А. Лабораторная диагностика бактериальных урогениталь-ных инфекций // М., Мед. книга, Нижний Новгород, 2003, 331с.

21. Дмитриев Г. А., Киселев В. И., Орлова О.Е. и др. Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза // Пособие для врачей, М., 1999, 19с.

22. Дмитриев Г.А. Урогенитальная хламидийная инфекция. Подходы к диагностике и терапии // Инфекции, передаваемые половым путем, 2002, №2, с. 21-24.

23. A.JI. Антиапоптозная активность хламидий // Вестник РАМН, №1, 2005, с.34-37.28.3откин Г.В., Сочнев В.В., Косорлукова З.Я., Авзалов Ф.З. Стратегия и тактика борьбы с хламидиозом КРС // Ветеринарный консультант, 2006, №10, с.8-10.

24. Ивашков Е.А. Диагностика урогенитальной хламидийной инфекции // Пособие для врачей, Хабаровск, 2003, 76с.

25. Ильин И.И., Делекторский В.В. Хламидийные и микоплазменные заболевания мочеполовых органов // Кожные венерические болезни. М., Рук-во для врачей, т.4, 1996, с.219-262.

26. Калашникова Е.П., Танаков А.И., Зубжицкая Л.Б., Бобков В.М. Морфология плаценты при генитальном микоплазмозе // Архив патологии, 1993, №6, с.48-54.

27. Кебу Т.И., Джикидзе Э.К., Чикобава М.Г., Стасилевич З.К., Калашникова

28. B.А. и др. Изучение распространения возбудителей заболеваний, передающихся половым путем, среди обезьян методом генной диагностики // БЭБиМ, 2005, том 139, №2, с.215-218.

29. Кисина В.И. О тактике терапии урогенитального хламидиоза // Вести, дермат. и венерол., 1998, №3, с. 12-16.

30. Кисина В.И., Загребина О.С., Пешков В.В, Современное состояние вопроса о значении U.urealyticum в генезе урогенитальных инфекций // ИППП, 2002, №1, с.9-12.

31. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий // Руководство для врачей, издание 6-е, обновленное и дополненное. М., Триада-Х, 2003, 438с.

32. Кротов С.А., Кротова В.А., Бурбик Н.Н., Малахова А.В. Микоплазменные инфекции и их диагностика // ИППП, 2001, №2, с.7-12.

33. Лапин Б.А., Джикидзе Э.К., Крылова Р.И., Стасилевич З.К., Яковлева JT.A. Проблемы инфекционной патологии обезьян // М. Издательство РАМН, 2004, 136с.

34. Лапин Б.А., Джикидзе Э.К., Фридман Э.П. Руководство по медицинской приматологии//М., Медицина, 1987, 188с.

35. Лобзин Ю.В., Волжанин В.М., Позняк А.Л. Новое в диагностике и лечении распространенных форм мочеполового хламидиоза // Вестник РАМН, 2003, №10, с.29-31.

36. Лобзин Ю.В., Ляшенко Ю.И., Позняк А.Л. Хламидийные инфекции // Рук-во для врачей, Санкт-Петербург, 2003, 395с.

37. Мавров И.И. Социальные и медицинские аспекты урогенитальных хлами-диозов и микоплазмозов // Вест. Дерматол., 1987, №2, с.31-34.

38. Малкова Е.М., Гавалов С.М., Гришаева О.Н. Хламидийная инфекция у новорожденных детей // Кольцово-2005, 48с.

39. Марантиди А.Н. Частота выделения ахолеплазм у обезьян и их биологическая характеристика // Автореферат к.б.н., М., 1982, 23с.

40. Машкиллейсон А.Л., Гомберг М. А., Соловьев А. М. К проблеме урогенитального хламидиоза // ЗППП, 1995, №5, с.28-33.

41. Меныпиков В.В. Клиническая лабораторная аналитика // М., Медицина, том 4, 2003, с.608-622.

42. Миллер Г.Г. Роль ассоциаций микроорганизмов в инфекционной патологии // ЗППП, 2000, №2, с. 19-20.

43. Митрофанов М.П. Хламидийные инфекции животных и птиц // Чебоксары, 2004, 303с.51 .Митрофанов М.П. Хламидиозы животных как типичные иммуноком-плексные болезни // Ветеринария, №3, 2005, с. 17-20.

44. Митрофанов П.М Генитальный хламидиоз и бесплодие быков. //Ветер.консультант, №7, 2007, с. 11-16.

45. Немченко О. И., Плиева 3. А., Уварова Е.В. Урогенитальный хламидиоз у девочек//Гинекология, том 6, №1,с.4-10.

46. Обухов И.Л., Шипулин Г.А., Груздев К.Н. Молекулярно-генетический подход в диагностике хламидиозов животных и птиц на основе полиме-разной цепной реакции // Сельскохоз. биология, 1996, №4, с.17-24.

47. Охлопкова К.А., Суслова О.В., Скирда Т.А. и др. Роль атипичных возбудителей в этиологии заболеваний нижних отделов респираторного тракта у детей раннего возраста // Проблемы инфекционных болезней. М., 2000, ч.2, 136с.

48. Пилинг Р.В., Брунэм Р.С. Методы молекулярной биологии для лабораторной идентификации Chlamydia trachomatis // ЗППП, 1994, №6, с.5-10.

49. Прилепская В.Н., Абуд И.Ю. Урогенитальный микоплазмоз // РМЖ, 1998., №6, с. 295-300.

50. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Вульфович Ю.В. Медицинская мико-плазмология//М. Медицина, 1995. 286с.

51. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Горина Л.Г., Вульфович Ю.В. Перси-стенция микоплазм в инфицированном организме: наблюдения, причина и механизмы, диагностика//Журн. микробиол., 1997, №4, с.47-51.

52. Равилов Р.Х. Хламидиоз плотоядных животных (этиология, диагностика, профилактика и меры борьбы) // Автореферат диссертации доктора ветеринарных наук, Казань, 1988,28с.

53. Раковская И.В. Микоплазмы и микоплазмозы человека // Рук-во для врачей, М., 1999,140с.

54. Ремезов А.П. Клинико-иммунологическое прогнозирование течения и особенности терапии хронического хламидиоза // Инфекц.болезни, №4, 2003, с. 16-19.

55. Савенкова М.С. Хламидийная и микоплазменная инфекции в практике педиатрии //Педиатрия, Журн. практик, врачей, 2005, №1, с. 10-18.

56. Савичева A.M., Башмакова М.А. Урогенитальный хламидиоз у женщин и их последствия //Н. Новгород, Изд-во НГМА, 1988, 182с.

57. Салугина С. О., Шайков А. В., Солдатова С.И., Мовсесян Г. Р. Частота встречаемости хламидийной инфекции у больных ювенильным хроническим артритом // Детская ревматология, 1996, №3, с.33-38.

58. Серов В.Н., Тютюнник В.Л. //Применение кларитромицина при урогени-тальной инфекции // Ж. Фарматека , 2004, №1, с.8-10.

59. Стрельников А.П., Гольцов С.В., Бушин Е.В., Ермакова А.В. Хламидийная инфекция урогенитального тракта // М., Мед. книга, 2005, 151с.

60. Терских И.И. Орнитоз и другие хламидийные инфекции // М., Медицина, 1979, 224с.

61. Тютюнник В.Л Подготовка к беременности при инфекционной патологии репродуктивной системы женщины //РМЖ, 2002, т. 10, №18, с. 816-819.

62. Хамаганова И. Урогенитальный хламидиоз // Мед. газета, №32, 27.04.05.

63. Цинзерлинг А.В. Хламидиозы: диагностика, роль в патологии человека // Архив патологии, 1989, №1, с 3-9.

64. Цинзерлинг А.В., Вуду Г.А. Внутриутробный микоплазмоз // Кишинев, 1986, 189с.

65. Чалян В.Г., Мейшвили Н.В., Лапин Б.А. Разведение обезьян в питомниках и заказниках // Материалы симпозиума Лабораторные приматы для решения актуальных проблем медицины и биологии, М., 2004, 20-21 октября, с.31-32.

66. Шалепо К.В. Валидация методов лабораторной диагностики инфекций, вызывающих Ch.trachomatis // Автореферат, С-П., 2003.

67. П1аткин А.А., Мавров И.И. Урогенитальные хламидиозы // М., 1983, 198с.

68. Эшбаев И.У. Характер взаимодействия микрофлоры с клетками организмахозяина при урогенитальном уреаплазмозе // Автореф.дисс. канд. М., 1990.

69. Abele-Horn М., Wolff Ch., Dressel P., et.al. Association of Ureaplasma urea-lyticum biovars with clinical outcome for neonates, obstetric patients, and gi-necological patients with pelvic inflammatory disease // J.Clin.Microb. 1997, p. 1199-1202.

70. Alfa M.J., Embree J.E. Transmission of Ureaplasma urealyticum from mathers to full and preterm infants // Pediatr infect. Dis. J., 1995, vol.14, p.341-345.

71. Bai H., Во N. Prevelence of genital Chlamydia trachomatis infection in selected populations in China // Sexually transmitted diseases, 1995, vol.22, p.383-384.

72. Bannantine J.P., Rockey D.D. Use of a primate model system to identify Chlamydia trachomatis protein antigens recognized uniquely in the context of infection// Microbiology, 1999, vol.145, p.2077-2085.

73. Boom R., Sol C., Beld M., Weel J., et.al. Improved silica-guanidiniumthiocy-anate DNA isolation procedure based on selective binding of bovine alpha-casein to silica particles // J.Clin.Microbiol. 1999 Mar; vol. 37, p.615-9:

74. Carratelli C.R., Rizzo A., Catania M.R. Galle F., Losi E. et al Chlamydia pneumoniae infections prevent the programmed cell death on THP-1 cell line // FEMS Microbol. Lett., 2002, vol.215, p.69-74.

75. Cassel G.H., Waites K.B. Ureaplasma urealyticum intrauterine infection: role in prematurity and disease in newborn // CI. Microbiol. Rev., 1993, vol.6, p.69-87.

76. Centers for Disease Control: Sexually transmitted diseases. MMWR 1998, vol.28, p.61-3.

77. Chan E.L., Brandt K., Horsman G.B. A 1-year evaluationof Syva Microtrak Chlamydia enzyme immynoassay with selective confirmation by direct fluorescent-antibody assay in a high-volume laboratory // J. Clin. Microbiol., 1994, vol.32, P.2208-2211.

78. Domeiko M., Hallen A., Karabanov L., Chudominova A., Cruler F., Unzeitig V., Poder A. et.al. Chlamydia trachomatis infections in eastern Europe: legal aspects, epidemiology, diagnosis and treatment // Sex transm. Infect., 2002, 78, p.l 15-119.

79. Everett K.D. et al. Phylogenic analyses of the coding genes the new chlamydial taxonomy // 4-th European Chlamydia Congress "Chlamydia 2000". Abstract book, Helsinki, 2000; 42p.

80. Fisher S.F., Schwarz C., Vier J., Hacker G. Characterization of antiapoptotic activities of Chlamydia pneumoniae in human cells // Infect. Immun., 2001, vol. 69, p.7121-7129.

81. Fridman E.P. Medical primatology (history, biological foundations and applications) // Taylor x Francis, 2002, p. 258-266.

82. Gabridge M.G., Cohen L.J. Development of an animal model for Mycoplasma-related reproductive failure // Lab. Anim. Sci., 1976, vol.26, p. 206-10.

83. Geng Y., Shane R. В., Berencsi K., Gonczol E. Zaki M.H. et. al. Chlamydia pneumoniae inhibits apoptosis in human peripheral blood mononuclear cells through induction of IL-10 // J.Immunol., 2000, vol.164, p.5522-5529.

84. Harland Caldwell, Scott Stewart, Shirley Jonson, et.al. Tear and serum antibody response to Chlamydia trachomatis antigens during acute Chlamydial conjunctivis in Monkeys as determined by immunobloting // Infect. And Immun, 1987, p.93-98.

85. Kellog J.A., Seiple J.W. et al. Direct fluorescent-antibody conformation of chlamydial antigen below the detection threshold of the Chlamydiazyme enzyme- linked immunosorbent assay // J. Clin. Microbiol., 1990, v.31, p.1646-1647.

86. Kochimizu K., Magaribuchi Т., Ito M., Kotani H., Ogata M. Distribution of ureaplasmas in various laboratory animals // Vet Rec., 1981, vol.108, p. 108114.

87. Koshimizu K., Macaribuchi T. et al. Characterization of Mycoplasmas isolated from imported Nonhuman Primates // Exp.Aniaf., 1975, 24, p. 95-101

88. Krause D. C., Taylor-Robinson D. Mycoplasmas which infect humans // Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis / Eds. J. Maniloff et al. Washington et al., 1992, p. 417-444.

89. Krull M., Klucken A.C., Wuppermann F. N., Fuhrmann O., Magerl C. et. al. Signal transduction pathways activated in endothelial cells following infection with Chlamydia pneumoniae // J. Immunol., 1999, vol.162, p.4834-4841.

90. Kundsin R.B., Leviton A. Ureaplasma urealyticum infections of the placenta in pregnancies that ended prematurely // Obstet. Gynegol., 1996, Jan; vol.87, p. 122-127.

91. Kundsin R.B., Rowell Т., Shepard M.C., Parreno Angeles Lunceford C.D. T-strains mycoplasmas and reproductive failure in monkeys // Lab. Anim.Sci., 1975, vol.25, p.221-224.

92. Kuppeveld F.J.M., Logt J.T.M., Angulo A.F., et.al. Genus- and species-specific identification of Mycoplasmas by 16s rRNA amplification // Applied and Enviromental Microbiol., 1992, p.2606-2615.

93. Lin J.S.Human mycoplasmal infections: serologic observations // Rev Infect Dis., 1985, vol.7, p 216-231.

94. Madden D.L., Hildebrandt R.J., Monif G.R. et.al The isolation and identification of Mycoplasma from Macaca mulatta // Lab Anim Care, 1970, vol.20, p.467-70.

95. Madden D.L., Hildebrandt R.J., Monif G.R. et.al. The isolation and identification of Mycoplasma from Cercopithecus aethiops // Lab Anim Care, 1970, vol.20, p.471-3.

96. Maher C.F., Haran M.V. Ureaplasma urealyticum chorioamnionitis //Aust.N.L.J. Gyn., 1994; vol.34, p.447-449.

97. Miller J.M., Martin D.H. Treatment of Chlamydia trachomatis infections in pregnant women // Drugs. 2000, vol.60, p. 597- 605.

98. Mooler B.R., Mardt P.A. Animals models for the study of Chlamidial infections of urogenital tract // 1992, vol.32, p. 103-108.

99. Paavonen J., Eggert-Kruse W. Chlamydia trachomatis: impact on human reproduction//Human Reproduction Update, 1999, vol. 5, p.433-447.

100. Palvin N.L, Gunn J.M, Parker R., Fairley C.K. and Hocking J. Implementing Chlamydia screening: what do women think? A systematic review of the literature // BMC Public Health, 2006, vol.6, p.221-232.

101. Puolakainen MI, Linnanmaki E., Leinon M. Circulating immune complexes containing chlamydial lipopolysaccharide in pelvic inflammatory disiease // In: Chlamydial infections/ Ed. By W. R.Bowie, H.D.Caldwell, R.PJones et al. Cambridge, 1990, p.319-322.

102. Rajaligam K., Al-Younes H., Muller A. Meyer T.F. Epithelial cells infected with Chlamydophila pneumoniae are resistant to apoptosis // Infect. Immun., 2001, vol.69, p.7880-7888.

103. Razin S., Yogev D., Nart F. Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas //Microb.Biol.Rev. 1998, vol.62, p. 1094-1156.

104. Schachter J. Chlamydia trachomatis: epidemiology and disease spectrum // Sexually transmitted diseases-3, Edinburgh, 1986, p.39-58.

105. Schachter J. The intacellular life of Chlamydia. Current topics in microbiol and immunol. Intracellular bacteria // Ed. Golbel W., Berlin, 1988, p.109-139.

106. Schifer H.G. Enteropathogenitat von Chlamydien // Dtsch.med. Wochenschr., 1994, Bd.l 19, N117, s.1637-1638.

107. Shimada M., Kotani Т., Ohtaki S., Sameshima H. et.al. Clinicobacteriological studies on the nine cases with upper genital tract Mycoplasma hominis infection //Kansenshogaku Zasshi. 1999, vol.73, p.646-51.

108. Slaney L, Chubb H, Ronald R. In vitro activity of azithromycin, ciprofloxacin and norfloxacin. Neisseria gonorroeae, Haemophilus ducreyi, Chlamydia trachomatis // J Antimicrob Chemother, 1990, vol.25, p. 1-5.

109. Smith J.W., Rogers R.E., Katz B.P. et al. Diagnosis of chlamydial infection in women attending antenatal and gynecologic clinics // J. Clin. Microbiol., 1987, vol. 25, p.868-872.

110. Sollecito D., Midulla M., Bavastrelli M. et al. Chlamidia trachomatis in neonatal respiratory distress of very preterm babies: biphasic clinical picture // Acta Paediatr., 1992, vol.81, p.788-791.

111. Stemke G.W., Robertson J.A. Problems associated with serotyping strains of. Ureaplasma urealyticum // Diagn. Microbiol. Infect. Dis., 1985, vol.3, p.311-320.

112. Storz J., Tad W. J., Schnorr K.L. Chlamydial infection: breach of host cellular barriers. In virulence mechanisms of bacterial pathogens // Ed. J. Roth. Washington, USA, 1988, p.161-183.

113. Sweet R.L., Schachter J., Landers D. V. Chlamydial infections in obstetrics and ginecology // Clin. Obstet. Gynecol., 1983, vol.26, p.143-164.

114. Sweet Rl, Gibbs Rs. Chlamydial infections. In: Infectious diseases of the female genital tract // Williams&Wilkins, Baltimore, USA, 1995, p.87-102.

115. Taylor-Robinson D., Furr P.M. Genital mycoplasma infections // Wien Klin. Wochenschr, 1997, Aug. 8; vol.109, p.578-583.

116. Taylor-Robinson D., Purcell R.H., London W.T., Sly D.L. et.ah Microbiological, serological and histopathological features of experimental Ch.trachomatis uretritis in chimpanzees // Br.J.Vener.Dis., 1978, vol.57, p.36-40.

117. Taylor-Robinson D., Somerson N.L., Turner H.C., Chanock R.M. Serological retionships among of Human Mycoplasmas as shown by Complement fixation and gel diffusion//Journ. ofBacter., 1963, vol.85, p.1261-1273.

118. Thomsen A.C. The isolation of Micoplasma primatum during an autopsy studi of the mycoplasma flora of the human urinary tract // Acta Pathol Microbiol Scand, Microbiol Immunol. 1974, vol.82, p.653-6.

119. Tully J.G., Taylor-Robinson D., Cole R.M., Rose D.L. A newly discovered mycoplasma in the human urogenital tract // Lancet. 1981, vol. 13, p. 1288-91.

120. Williams L.P. Ir Review ot the epidemiology of chlamidiosis in the United States//! Am Vet Med Assoc.,, 1989, vol.195, p.l 518-1521.

121. Yoshida Takashi, Shin-Ichi Maeda, Takashi Deguchi and Hiroaki Ishiko. Philogeny-Based rapid identification of mycoplasmas and ureplasmas from urethritis patients // J. of Clin. Microb., 2002, vol.40, p. 105-110.