Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Прорастание, хранение и химический состав конидий Aspergillus niger V. Tieghem - продуцента лимонной кислоты

ВАК РФ 03.00.24, Микология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Морозова, Елена Владимировна

Общая характеристика работы.

Обзор литературы.

Современные представления о спорах грибов, их прорастании и изменениях в процессе хранения.

1. Покоящиеся клетки (споры) в цикле развития грибов.

2. Типы споруляции клеток.

3. Два вида покоя клеток в цикле развития грибов.

4. Химический состав покоящихся клеток грибов.

4.1. Содержание воды.

4.2. Особенности липидного состава покоящихся клеток грибов.

4.3. Состав углеводородов покоящихся клеток грибов.

Современные представления о прорастании спор грибов.

Роль ингибиторов и стимуляторов, контролирующих выход клеток из состояния покоя.

1. Прорастание спор грибов.

2. Изменения в химическом составе спор в процессе хранения.

Экспериментальная часть.

Глава 1. Материалы и методы исследования.

Глава 2. Особенности экзогенного покоя и процесса прорастания конидий A. niger.

2.1. Морфология конидий A. niger.

2.2 Особенности прорастания конидий A. niger.

2.3. Влияние физико-химических факторов на прорастание конидий

2.3.1. Влияние кислотности среды и длительности хранения спор.

2.3.2. Влияние температуры.

2.3.3. Термостабильность спор.

2.3.4. Влияние источников углерода и азота.

2.3.5. Влияние токсических веществ.

2.3.6. Влияние антиоксидантов и жирных клеток.

2.4. Химический состав (липидный и углеводный) покоящихся конидий A. niger.

2.5. Влияние температуры на химический состав конидий A. niger.

Глава 3. Изменения в липидном и углеводном составе конидий A. niger в процессе прорастания.

Глава 4. Изучение изменений в липидном и углеводном составе конидий в процессе хранения и установление химических критериев, определяющих всхожесть спор.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Прорастание, хранение и химический состав конидий Aspergillus niger V. Tieghem - продуцента лимонной кислоты"

Актуальность темы

Вступление человека в XXI век совпало с особым интересом к биотехнологии. Эта отрасль науки была официально объявлена Организацией Объединённых Наций ведущим направлением среди технологий нового столетия. А основными продуцентами, которые будут использоваться в новых биотехнологиях, оказались грибы .

Интерес биотехнологов к грибам объясняется не только их способностью образовывать почти 70-80% биологически активных веществ, получаемых в настоящее время ( Феофилова, 1997). Грибные производства можно сделать высокотехнологичными. Им свойственна полная контролируемость биотехнологического процесса, использование дешёвого, не пищевого сырья, например, лигно-целлюлозных отходов, краткосрочность ферментации, процесс производства может быть замкнутым или полузамкнутым, что отвечает современным экологическим требованиям. Безотходность современных грибных биотехнологий означает многоцелевое использование мицелия и культуральной жидкости для получения нескольких (до 10) конечных продуктов, например, органических кислот, липидов, белков, пигментов, биогенных элиситоров и других биологически активных веществ и структурных компонентов клеточной стенки грибов полисахаридной природы. Q

Одним из ведущих направлений современной биотехнологии XXI века является изучение биологических свойств посевного спорового материала, используемого при ферментациях. Известно, что большинство спор, используемых как посевной материал, находится в особом «переживающем» состоянии, называемым экзогенным покоем [Sussman, Halvorson, Mandels, 1981; Osherov, May, 2001]. С теоретических позиций изучение свойств покоящихся клеток грибов, сохранение их жизнеспособности и активация прорастания связаны с такими ключевыми проблемами биологии как онтогенетический анабиоз, цитодифференцировка, устойчивость к стрессовым воздействиям, образование стрессовых белков и др. [Феофилова, 1997; Neven et.al., 1993; Hoch, 1996; Wessels, 1996, Yakovlev et.al., 2002].

В то же время эти исследования имеют большую практическую значимость для биотехнологических производств. Так, чем быстрее споры выйдут из состояния покоя и начнут прорастать, тем экономичнее процесс ферментации и ниже стоимость конечного продукта. Экономичность ферментации связана также с умением длительное время поддерживать посевной материал в условиях, обеспечивающих синхронную «всхожесть» и высокое качество конечного продукта. Например, при производстве лимонной кислоты в России в качестве инокулята используют конидии Aspergillus niger ВКПМ F-790, которые выращивают на сусловом агаре, собирают вакуумным способом и хранят при комнатной температуре в течение 6 месяцев. Однако, некоторые партии конидий (особенно весенне-летнего сезона) очень быстро, иногда в течение нескольких дней, теряют всхожесть, что приводит к значительным убыткам при получении лимонной кислоты.

Цель и задачи работы

Учитывая теоретическую и практическую значимость изучения биологических свойств и химического состава конидий в процессе хранения и прорастания, в настоящей работе были поставлены следующие задачи:

1. установить тип покоя конидий A. niger;

2. изучить условия, способствующие выходу конидий из состояния покоя;

3. определить некоторые физико-химические свойства конидий (термостабильность, изменения в липидном и углеводном составе) в процессе хранения и прорастания;

4. на основании данных о химическом составе конидий установить критерии, позволяющие определить способность конидий к про- / растанию; ч-<" /

5. разработать биологический экспресс-метод, позволяющий опре- ; делять жизнеспособность конидий и их пригодность для использования в процессе получения лимонной кислоты.

Научная новизна работы.

Показано, что конидии A. niger прорастают в бидистиллированной воде и имеют экзогенный тип покоя. Установлены стимуляторы и ингибиторы прорастания и обнаружено, что для перехода во вторую фазу этого процесса наибольшее стимулирующее действие оказывают азотсодержащие соединения. На основании этих данных и результатов изучения термостабильности конидий установлен новый вид экзогенного покоя. Впервые определены изменения в составе углеводов и липидов в процессе хранения конидий и установлено, что происходит снижение содержания маннита и увеличение уровня трегалозы, определяющее жизнеспособность конидий. Впервые пока- 9 зано, что повышение уровня арабита в конидиях сможет свидетельствовать о -j-. потере их всхожести. На основании изменений в липидном составе сделан вывод о том, что жизнеспособность конидий определяется соотношением массивных фосфолипидов мембран - фосфатидилэтаноламина и фосфати-дилхолина.

Изучен липидный и углеводный состав конидий A. niger в процессе прорастания. На основании изменений в соотношении фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина, свободных жирных кислот и стеринов можно определить стадию прорастания. Дополнительную информацию об особенностях процесса прорастания дают также данные об углеводном составе конидий, в частности о содержании глицерина, маннита и трегалозы. Практическая значимость работы. ,

На основании изучения липидного и углеводного состава конидий впервые найдены биохимические критерии, которые могут свидетельствовать о «всхожести» конидий и дают возможность определить фазу их прорастания. Разработан биологический экспресс-метод определения жизнеспособности спорового посевного материала в условиях завода, на который получен патент РФ № 2177993, 2002 г.

Апробация работы.

Материалы диссертации обсуждены на семинаре лаборатории «Экспериментальной микологии» ИНМИ РАН и заседании кафедры микологии и альгологии МГУ им. М.В. Ломоносова. Результаты работы докладывались на первом съезде Микологов России (Москва, 11-13 апреля 2002 г), на конференции по физиологии и биохимии культивируемых грибов (Саратов, 6-8 июня 2002 г.). Структура и объем работы.

Диссертационная работа изложена на 102 страницах машинописного текста и состоит из введения (общая характеристика работы), обзора литературы, экспериментальной части, включающей объекты и методы исследования и 5 глав результатов исследования, обсуждения и выводов. Работа содержит 11 рисунков, 10 таблиц. Список литературы включает 144 публикации.

Заключение Диссертация по теме "Микология", Морозова, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ

I. На модели конидий A. niger установлены физиолого-биохимические особенности клеток, находящихся в стадии онтогенетического анабиоза - в экзогенном покое. Показано, что для таких покоящихся клеток:

1. свойственно низкое содержание резервных соединений: липиды составляют 6-8%, углеводы - 10-11%, характерный состав липидов: значительное преобладание ФХ, высокое содержание ТАГ и насыщенные гликоли-пиды (СН - 0,58).

2. характерен уровень термостабильности, лежащий в узком пределе до 45°С, наличие в популяции конидий гетерогенных по термоустойчивости фракций и способность некоторых конидий сохранять жизнеспособность при прогревании при 121°С. ! i>. Нарушение состояния покоя (прорастание) конидий A. niger:

1. зависит в первую очередь от оводненности конидий. При наличии воды начинается прорастание, но без добавления экзогенных источников углерода и азота процесс останавливается на I фазе - набухании. Стимуляторами прорастания являются глюкоза, D-глюкозамин, мезо-инозит, L-пролин и пептон (последний стимулирует прорастание в 5 раз по сравнению с контролем. Оптимальная температура прорастания - 32-34°С, рН-3-5. В отличие от эндогенно покоящихся клеток конидии A. niger не требуют для выхода из состояния покоя обработки токсическими веществами, антиоксидантами и липидами;

2. сопровождается изменениями в липидном и углеводном составе конидий: значительным снижением уровня ФХ и ТАГ, увеличением содержания ФЭА, ФС, СЖК и СТ. В составе углеводов цитозоля резко возрастает уровень глицерина, снижается содержание трегалозы и арабита на фоне циклических изменений в уровне маннита.

Ш- Практическая значимость результатов исследования состоит в том, что:

1. анализы химического состава партий конидий A. niger, способных к прорастанию и утративших всхожесть показали, что они различаются по содержанию ФХ и арабита. Конидии, неспособные прорастать, имеют много арабита и низкий уровень ФХ. Эти критерии можно использовать как маркеры при определении "всхожести" конидий.

2. данные, полученные при изучении прорастания конидий, дают также возможность определить стадию этого процесса по следующим критериям: содержание ФЭА, глицерина и трегалозы.

3. Способность конидий к прорастанию наряду с указанными выше биохимическими критериями предлагается также контролировать биологическим способом - специально разработанным экспресс-методом, который запатентован и прошел апробацию на заводе.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Морозова, Елена Владимировна, Москва

1. Ашмарш И.П., Воробьёв А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях, Л. 1962.

2. Билай В.И. Фузарии.1977.АН УССР. Киев. «Наукова Думка». 431с.

3. Бробст К.М. //В: Методы исследования углеводов, под ред. Хорлина Ф.Я. 1975. М: «Мир». С.9-13.

4. Головин Ю.И. Вода и лед знаем ли мы о них достаточно? // Соросовский Образовательный Журнал. 2000. Т.6. № 9. С.66—72.

5. Горленко М.В., Гарибова Л.В., Сидорова И.К, Успенская Г.Д., Все о грибах ( под редакцией Горленко М.В.) .М. Лесная промышленность. 1985. 280 с.

6. Горленко М.В. Курс низших растений. М.: Высшая школа. 1981. 520 С.

7. Горнова КБ., Михайлова М.В., Феофилова Е.П. О длительности действия светового сигнала в онтогенезе мицелиальных грибов // Прикл. Биохим. Микробиол. 1991. Т. 27. В. 4. С. 616-622.

8. Горнова И.Б., Феофилова Е.П., Терёшина В.М., Головина Е.П., Кроткова КБ., Холодова В.Г. Влияние углеводного состава спор Aspergillus japonicus на их способность к хранению и прорастанию // Микробиология. 1992. т.61. вып.4. С. 549-554.

9. Грязнова М.В. Образование липидов и экзогенный покой клеток в цикле развития мукорового гриба Cunninghamella japonica // Дисс. . канд. биол. наук. 1988. Москва: Институт микробиологии АН СССР. С. 57. 7982.

10. Дернголъц В.Ф. Мир воды. М.: Наука. 1979. 252 с.

11. Дуда В.И. Анабиоз бактериальных спор // В: Торможение жизнедеятельности клеток. 1987. Под ред. Бекер М.Е. Рига: Зинанте. С. 155-159.

12. Кейтс М. Техника липидологии. 1975. М.: Мир. 322 с.

13. Клюшникова Е.С. Экспериментальное и цитологическое изучение двуспоровой формы культурного шампиньона //Ученые записки МГУ. В.36. Ботаника. 1940. №1. С.136—170.

14. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран. 1981. М: Наука. 339с.

15. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. 1975. М: Наука. 210с.

16. Курсанов JT.H. Микология. М.: Изд-во Наркомпрос. РСФСР. 1940. 480 с.

17. Михайлова М.И., Феофилова Е.П.,Шумская Г.Г.,Шевцов В.К. Изменения в составе липидов в процессе цитодиффекенцировки грибов порядка Agaricales II Прикл.Биохим.Микробиолю 1993. Т.29.Вып.2. С. 315-319.

18. Олескин А.В. Биополитика. Политический потенциал современной биологии. М.: Институт философии РАН. 2001. 423 с.

19. Поглазова М.Н., Феофилова Е.П., Алексеева В.М. Труды конференции, посвященной специальным методам микроскопии для микробиологического производства // Микробиология. 1966. Т. 35. В. 2. С. 378-379.

20. Полотебнова М.В., Феофилова Е.П.,Шадрина Н.А., Машковцева А.В. Влияние физико-химических факторов на прорастание конидий C.japonica // Микробиология. 1987. № 3. С.381-386

21. Писаревская И.В Изменения в углеводном и липидном составе клеточной стенки Absidia coerulea в связи с процессом репродукции // Дисс. канд. биол. наук. М: 1985. ИНМИ АН СССР. 163 с.

22. Пронин С.В. Роль молекулярного кислорода и энергетического метаболизма в начале прорастания Bacillus cereus // Микробиология. 1987. Т. 56. №. 4. С. 558-559.

23. Пузырь А.П., Могильная О.А., Крылова Т.Ю., Попова Л.Ю. Аномальное строение бактериальных колоний Bacillus subtilis //Докл. РАН. 2001. Т.378. №2. С.262—264.

24. Пушкарь К.Е., Белоус A.M. Введение в криобиологию. Киев: Наукова Думка. 1978.

25. Рапопорт А., Пузыревская О.М., Саубекова М.Г. Полиолы и устойчивость дрожжей к обезвоживанию // Микробиология. 1988. Т. № 2. С.329—331.

26. Ротенберг B.C. Адаптивная функция сна, причины и проявления ее нарушения. М.: Наука. 1982. 120 с.

27. Сурнакова Н.Е., Феофилова Е.П., Круглякова К.Е. Способ определения жизнеспособности зооспорангиев возбудителя опухолей картофеля//А.С. № 1014880. 1981.

28. Татаренко Е.С. Терпикова И.П. 1960. Развитие плесневых грибов в дистиллированной воде //Научные Доклады высш. Школы. Биолог. Науки. №2, С. 91-95.

29. Терешша В.М., Феофилова Е.П. Морфологические особенности двух типов спороношения у мукорового гриба Blakeslea trispora // Микробиол. 1995. Т.64.№ . С.734-740

30. Терешина В.М., Феофилова Е.П. О биологической функции двух типов спороношения у мукорового гриба Blakeslea trispora // Микробиология. 1996.Т.65. № 6. С. 777-781.

31. Терешина В.М., Меморская А. С., Конкина Г.А., Феофилова Е.П. Покоящиеся клетки в цикле развития Blakeslea trispora: отличия в углеводном и липидном составе //Микробиол. 2002. Т. 71. № 6 (в печати).

32. Уоттерсон Д.Г. Роль воды в функциях клетки // Молекулярная биофизика. 1991. Т.36. № 1. С.5—28.

33. Ушатинская Р.С. Скрытая жизнь и анабиоз. М. Наука. 1990. 182с.

34. Феофилова Е.П. Клеточная стенка грибов. М. Наука. 1974. 247с.

35. Феофилова Е.П., Писаревская И.В. Биохимические особенности онтогенетического анабиоза мукоровых мукоровых грибов // Вторая Всесоюзная Конференция по анабиозу. Рига: Зинатне. 1984. С.31—32.

36. Феофилова Е.П., Волохова М.В., Величко Б.А., Полотебнова М.В., Тереишна В.М., Широкова Е.А., Дараган-Сущова М.В. Способ получения посевного материала для культивирования грибов рода Aspergillus, продуцирующих экзоферменты. // А.С. № 1449584. 1988.

37. Феофилова Е.П. Липиды мицелиальных грибов и перспективы развития микробной олеобиотехнолдогии // Биол. Науки. 1990. N11. С.5-26

38. Феофилова Е.П., Ложникова В.И., Горнова И.Б., Михайлова М.В., Дудка И Д., Чайлахян М.Х. Действие зеленого света на прорастание кониий и образование регуляторов роста у мицелиального гриба Aspergillus japonicus //ДАН СССР. 1991. Т. 319. № 1.С. 235-237.

39. Феофилова Е.П. Биохимическая адаптация грибов к температурному стрессу // Микробиология. 1994. Т.63. № 5. С.757—776.

40. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Горнова И.Б. Изменения в углеводном составе клеток грибов в связи с адаптацией к температурному стрессу // Микробиология. 1994. Т.65. № 5. С.792—798.

41. Феофилова Е.П. Прогресс в области экспериментальной микологии как основа для создания современных биотехнологий // Микробиология. 1997. Т. 66. № 3. С. 302-309.

42. Феофилова Е.П., Горнова И.Б., Меморская А. С., Гарибова JJ.B. Липидный состав плодовых тел и глубинного мицелия Lentinus edodes (Berk) Sing Lentinula edodes (Berk) Pegler // Микробиология. 1998. Т.67. № 5. С.655-659.

43. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Хохлова Н.С., Меморская А.С. II О различных механизмах биохимической адаптации мицелтальных грибов к температурному стрессу : изменения в составе углеводов цитозоля // Микробиология. 2000. Т.69. № 5. С. 605-611.

44. Феофилова Е.П., Терешина В.М.,Меморская А.С.,Хохлова Н.С. II О различных механизмах биохимической адаптации мицелтальных грибов к температурному стрессу : изменения в составе липидов // Микробиол. 2000. Т.69. №5. С. 612-619.

45. Хочачка А., СомероД. Биохимическая адаптация. Изд-во «Мир».1988. 568с.

46. Швалева А.Л. Состояние воды и его влияние на функциональные характеристики мембран в семенах пшеницы и проростках при различных физиологических условиях // Автор.дисс.доктор.биол. наук. 2001. Москва. МГУ. 32 с.

47. Aaronson L.R., Sehnston А. V., Martin С. Y. The effect of temperature accumulation on membrane sterol and phospholipids of Neurospora crassa // Biochim. Biaphys. Acta. 1982. V. 713. N 2. P. 456-461

48. Abro H., Crowther H.N.M., Lawson C.J., Dick M. W. Polyols of the fungus Zoophagus insidans И Biochem. Sys. Ecol. 1989. V.17. N 6. P.439— 441.

49. Ballio A., Vittorio V., Russel S. The isolation of trehalose and polyols from the conidia of Penicillium chrysogenum Thom // Arch. Biochem. Biophys. 1964. V.107. P. 177-183.

50. Batrakov S. G., Nikitin D.J. Lipid composition of the phosphatydilcholine-producing bacterium Hyphomicrobium vulgare N P-160 I I Biochim. Biaphys. Acta. 1996. V. 1302. P. 129-137.

51. Ben-Amotz A.,Avron M. The role of glycerol in the osmotic regulation of the hallophilic alga Dunaliella parva II Plant Physiol. 1973. V.51. P.875-878

52. Blumental N.J., Roseman S.ll J. Bacteriol.l967.V.74.P.222-225.

53. Blumental N.J. Reserve carbohydrates in fungi // In: The filamentous fungi. V. 2. 1976. Eds: Smith L.E., Berry D.R. London: Edward Arnold P. 292307.

54. Borchert R. Uber die Acetat-Activirung der Sporangiosporen von P.blakesleeanus // Beitr. Biol. Pflanz. 1962. B.38. S.31.

55. Bossche H. V. Importance and role of sterols in fungal membranes //Biochemistry of cell walls and membranes of fungi. 1990. Springer-Verlag. Berlin. Heidelberg. Tokyo. P. 135—153.

56. Campbell L.L. Spores IV11 Ann. Soc. Microbiol. Bethesda: Md. 1969. 201 p.

57. Campbell L.L. Fine structure and physiology of colonial germination in Aspergillus fumigatus //Trans. Br. Mycol. Soc. 1971. V.57. P.393—402.

58. Carrillo-Rayes E., Garcia-Soto J., Martinez-Cadena S. The adenyl cyclase from dormant spores of Phycomyces blakesleeanus is a type 1-like enzyme // Microbiol. Rev. 1999. V. 103. N 8. P. 943-948.

59. Cavalier-Smith T. A revised six-kingdom system of life 11 Biol. Rev. 1998. V.73.P.203—266.

60. Cauwelaert F.H., Verbeke M.N. Differential scanning calorimetric observation concerning the activation mechanism of spores of Phycomyces blakesleeanus // Biochem. Biophys. Res. Com. 1979. V. 89. P. 414-419.

61. Cerda-Olmedo E., Lipson E.D. 11 Phycomyces . 1987. CSH laboratory Press.N.-Y.247 p.

62. Chidthaisong A.,Rosenstock B., Conrad R. Measurement of monosaccharides and conversion of glucose to acetete in anoxic rice fild soil // Appl.envir.microbiol.,1999,V.6, N 6, P.2350-2355

63. Chidthaisong A.,RosenstockВ.,ConradR. Measurement of monosaccharides and conversion of glucose to acetate in anoxic rice fild soil // Appl.envir.microbiol.,1999,V.6, N 6, P.2350-2355

64. Clegg D., Seitz P.,Halzewood C. Cellular responses to extreme water-replacement hypothesis //Criyobiol. 1982. V.19. P.306-318.

65. Cotter D.A. Spore activation // In: The fungal spore: morphogenetic controls, Eds.: Turian G., Hoch H. London: Academia. P. 427-487.

66. Crowe J.H., Hoekstra F.A., Crowe J.M. Anhydrobiosis // Annu. Rev. Physiol. 1992. V. 54. P. 549-599.

67. Dahlberg K.R., Etten J.L. Physiology and biochemistry of fungal sporulation 11 Ann.Rev.Phytopathol. 1982.V.20.P.281-301

68. Deiling J.P.,Kidby D.K. Sterol composition of ungerminated and germinated spores of the mycorhizal fungus Glomus caledonis 11 Lipids. 1980. V.15, P.375-378

69. Dijkema C., Kester H.S.P., Visser J. 13C NMR studies of carbon metabolism in the hyphal fungus Aspergillus nidulans // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1985. V. 82. P. 14-18.

70. Dillon R., Carnley K. A technique for acceleration and synchronising germination of conidia of the entoomopathogenic fungus Metazhizium anisoplie // Microbiol. 1985 .V. 142.P.204-206

71. Dobbs C.G. The life history and morphology of Dicranophorafidva Schrot//British Mycol.Soc. 1936. V.20. №3. P. 1167-191.

72. Duda V.J., Lebedinsky A. V., Mushegian M.S., Mitjushina L.L. A new anaerobic bacterium, forming up to five endospores per cell Anaerobacter gen. etspec. nov. // Arch. Microbiol. 1987. V.148. N 2. P.121—127.

73. Dtitsch G.A., Rast D. Biochemische Deziehung zwischen Mannitbildung und Hexosemonophosphatzyklus in Agaricus bisporus II Phytochemie. 1972. Bd.ll. S.2677—2681.

74. Elliott C.G. Steroll in fungi: their function in grrowth and r eproduction I I Adv. Microbial.Physioll.l 977. V.15. P. 121-173.

75. Ellis S. W., Grindle M., Lewis D.H. Effect of osmotic stress on the yield and polyol content of the decarboximide-sensitive and -resistant strain of Neurospora crassa // Mycol. Res. 1991. V.95. P.457—464

76. Evans L. W., Callow J.A., Callow M.E. Parasitic red algae: an appraisal // In: Modern approach to the taxonomy of red and brown algae. 1972. Eds.: Ervine D.B., Price J.H. Academia: London. P. 87-107.

77. Folch J., Lees M., Sloane-Stanley G.A. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // J. Biol. Chem., 1957. V. 226. p. 497.

78. Furch B. On the water potential pressure and velocity of water uptake of dormant spongiospores of P. blakesleeanus IIZ. Pflanzenphysiol. 1978. V.5. P.269—272.

79. Furch B. Spores germination. Heat mediated event // The fungal spores. Morphogenic comtents ( Eds. G.Turian and Hohl H.R.) 1981. 413 p. Academ.Press. N.-Y.

80. Gekko K., Kuwana Y., Sasaki Т., Makino S. Polyol-induced stabilization of a cold-labile protein // Agric. Biol. Chem. 1991. V.55. N 6. P.1663—1664.

81. Gooday G. W., Cow N, Brown J.P., Schofield D. Dinamics of chitin synthesis and breakdown in fungal walls // Proc. Int. Simp. Fungal cells and biodefense mechanisms. Jap. 1997. P. 239-245.

82. Hallsworth J., Magan N. Effect of carbohydrate type and concentration on polyhydroxy alcohol and trehalose content of conidia of three enthomopathogenic fungi //Microbiol. 1994 V. 140. P. 2705-2713.

83. Hallsworth J., Magan N. Culture age, temperature, and pH affect the polyol and trehalose contents of fungal propagules // Appl. Environ. Microbiol. 1996. V.62. N 7. P.2435—2442.

84. Hawker L.E., Madelin M.F. The Dormant spore // In : The Fungal spore. Ed-s Weber D.J., HessW.M. N.Y., London, Sydney, Toronto : Wiley and Sons, 1976, p. 1-72.

85. Hoekstra F.A., Golovina Т.A., Aelst A.C., Hemminga M.A. Imbibitional leakage from anhydrobiotes revisited // Plant Cell Envir. 1999. V.22. P.1121-1131

86. Hoch H.C. (a) Influence of physical and chemical stimuli on spore germination, cell growth and differentiation // Proc. Vl-th Int. Fungal Conf. Konstanz Univer., Germany. 1996. P. S2.

87. Hoch H.C. (b) Dependency of physical contact as a precondition for spore germination // Proc. Vl-th Int. Fungal Conf. Konstanz Univer., Germany. 1996. P. S2.

88. Hottiger Т., Schmutz P., Wiemker A. Heat-induced accumulation and fuitile cycling of trehalose in scerevisiae //J. Bacteriol. 1987. V.109. №12.P.518—522.

89. Kawahara H., Li J., Griffith M, GlickB. Relationship between antifreeze protein and freezing resistance in Pseudomonas putida GR 12-12 // Current Microbiol. 2001. V.43. P.365—370.

90. Keilin D. The problem of anabiosis or latent life history and current concepts // Proc. Roy. Soc. London. 1959. V.150. P.149—191.

91. Loomis W.F. Development of Dictyostelium. N.-Y.: Acad. Press. 1982. 120 p.

92. MacDougald D., Rice S.A., Weichart D., Kjelleleberg S. Non-culturability : adaptation or debilitation //FEMS.Microbiol.Ecol.l998.V.25 . P. 1-9.

93. Magan N. Physiological manipulation of polyol in spores of biological control agents for improuved competence in the environment // Vl-th Int. Fungal Spore Conference. 1996. Konstanz, Germany P. 78.

94. Mandels G.R., van Laere A. Cyclic AMP trehalase aand germination of P.blakesleeanus //J.Gen.Microbiol. 1984. V.150. P.541-551

95. Mandels G.R. Biochemische aspecten von kiemingsinductiv van sporangiosporen van P.blakesleeanus Burgeff I I Ph.D. thesis.Katolieke Universitet.Leuven. 1984.

96. Mandels G.R Compartmentation of metabolic system in the regulation dormancy in fungal spores // Exper.Mycol. 1981. V.5. P. 278-291.

97. Mangenot F. Reisinger O. Form and Function of Conidia as Related to Their Development // In: The fungal spore. 1976. Ed-s Weber D.J., Hess W.M. N.Y, London, Sydney, Toronto: Wiley and Sons. P. 789-849.

98. Masco V. Inhibitors and stimulators of spore germination and infection structure formation fungi // Sporulation and germination. Proc. VIH-th Int. Spore Conf. Massachusetts 1981. P 566.

99. Mishima O., Stanley E. The relationship between liquid, supercooled and glassy water // Nature. 1998. V.396. P.329—335.

100. Nevel M.J., Jorge J.A., Francois J.M., Terenzi H. Effect of head schok on the level of trehalose and glycogen,and on the induction of thermotolerance in N. crassallFEBS Lett. 1991. V.283. №1. P. 19—22.

101. Neves M.J., Jorge J.A, Francois J.M., Terenzi H. Effect of heat schok on the level of trehalose and glycogen and on the induction of thermotolerance in Neurospora crassa// FEBS Lett. 1991. V. 283. N. l.P. 1922.

102. Neven L.G., Hackell D. IK, HofigA. Li Q., Guy C.L. Characterization of spinach gen responsiv to low temperature and water stress //Plant. Mol. Biol. 1993. V. 21. P. 291-305.

103. Noventa-Jardao K, Lourdes M., Polizeli T.M., Bonini B.M., Jorge J., Terenzi H.I. Effect of temperature shifts on the activities of Neurospora crassa glycogen synthase, glycogen phosphorilase and trehalose-6-phosphate synthase // FEMS Microbiol. Lett.

104. Osherov N. May G. Conidial germination in Aspergillus nidulans requires RAS signaling and protein synthesis //Genetic. 2000. V.155.P.647— 656.

105. Osherov N. May G. The molecular mechanisms of conidial germination // FEMS Microbiol, Lett. 2001. V.199. P. 153—160.

106. Pfyffer G.E., Pfyffer B. U., Rast DM The polyol pattern, chemotaxonomy, and phylogeny of the fungi // Sydowia. 1986. V.39. P. 160— 201.

107. Pfyffer G > Borashi-Gala C., Weber В., Hoesch L., Orpin G, Rust D. A further report on the occurence of acyclic sugar alcohols in fungi // Mycol. Res. 1990. V.94. N 2. P.219—222.

108. Pharr D.M., Stoop J.M.H., Williamson M.E., Stufler M. O. et al. The dual role of mannitol as osmoprotectant and photoassimilate in celery // Hort. Sci. 1995. V.30.N6.P.1182—1187.

109. Postgate J.R., Crumpton J.E., Hunter J.R The measurement of bacterial viabilities by slide culture // J. Gen. Microbiol. 1961. V. 24. P. 15-24.

110. Rast D., Stussi H., Zobrist P. Self-inhibition of the A.bisporus spores by C02 and/or y- glutaminil ф - hydroxybenzen and у - glutamil - 3 -4-benzoquinone: a biochemical analysis //Physiol. Plant. 1979. V.46. P.227—234.

111. Reisner H. J. Lipid metabolism of fungal spores during sporogenesis and germination//In: The Fungal spore. Ed-s Weber D.J., Hess W.M. N.Y., London, Sydney, Toronto: Wiley and Sons, 1976, P. 165-181.

112. Russell N.J. Mechanism of thermal adaptation in bacteria: blueprints for survival // TIBS.1984. V.9. P.108-112.

113. Saier M.M., Jacobson G.R. The molecular basis of sex and differentiation. N.-Y., Berlin, Heidelberg, Tokyo: Springer-Verlag. 1984.

114. Schmit J.C., Brody S. Biochemical genetics of Neurospora crassa conidial germination // Bact. Rev. 1976. V.40. P.l—15.

115. Shu P., Tanner K.C., Ledinham C.A. Studies on the respiration of resting and germinating uredospores of wheet stem rast // Can. J. Bot. 1954. V. 32. P. 16-23.

116. Somogui M. Determination of blood sugar // J. Biol.Chem.1945. V. 160. P. 69.

117. Spector F.F., YorekM.A. Membrane lipid composition and cellular fumction // J.Lipid Res. 1985. V.26. P.1015-1055

118. Stephens K., Hegeman G.D., White D. Pheromone produced by the myxobacterium Stigmatella aurantiaca 11 J. Bacteriol. 1982. V.149. P.739— 747.

119. Sugumoto H.H., Barbosa A.M., Dekker R., Castro-Romez R. Veratryl alcohol stimulates fruiting body formation in the oyster mushroom Pleurotus ostreatus //FEMS Microbiol. Lett. 2001. V.199. P.235—238.

120. Sussman A.S., Halvorson И.О. Spores, their dormancy and germination. L, N.-Y.: Harper a. Row. 1966. 245 p.

121. Sussman A.S. Activation of fungal spore germination // In: The Fungal spore. Ed-s Weber D.J., Hess W.M. N.Y., London, Sydney, Toronto: Wiley and Sons, 1976, P. 101-139.

122. Sussman A.S., Douthit H.A. Dormancy in microbial spores //Annu. Rev. Plant Physiol. 1979. V. 24. P. 311-353.

123. Tan Y.H., Moore D. High concentrations of mannitol in the shiitake mushroom Lentinula edodes I I Microbiosis. 1994. V.79. P.31—35.

124. Tanaka S., Kojirow, Katayama M., Marumo S. Sporogen Aol, a sporogenic substance from Aspergillus oryzae // Agr. Biol. Chem. 1984. V. 48. N 12. P. 3189-3194.

125. Trinci A.P.J. Filamentous fungi in biotechnology // VH-th Int. Congress of mycology Division. 1994. Prague. Czech Republic. P. 10-12.

126. Trione E.L.,Leach C.M., Mutch Y. Sporogenic substances isolated from fungi //Nature. 1966.V.212.№ 5058. P. 163-164.

127. Trione С. J., Leach С. W. Light induced sporulation andsporogenic substanses in firngi // Phytochem. 1969. V. 59. P. 1063-1077.

128. VanLaere A. Biochemistry of spore germination of Phycomyces II FEMS Microbiol. Lett. 1986. V.32. P. 189--198

129. Van Laere A. J., Assche J.A. The sporangiospore: dormancy and germination / /Phycomyces. Eds.: Cerda-olmeda E., Lipson E.D. Cold spring Harbor, 1987.

130. Van Laere A. J., Hulsman E. Water potential, glycerol synthesis, and water content of germinating Phycomyces spores // Arch. Microbiol. 1987. V.147. P. 257-282.

131. Van Schaftinger E., Van Laere A.J. Glycerol formationafter the germination of Phycomyces blakesleeanus spores // J. Gen. Microbiol. 1984. V.148. P. 399-404.

132. Verbeke M.N., Van Laere A. On the role of the spore cell wall in the activation of Phycomyces blakesleeanus spores // Exp. Mycol. 1982. V. 6. P. 313-320.

133. Wada M., Fukunaga N., Sasaki S. Effect of growth temperature on phospholipid and fatty acid composition in psychrophtropic bacterium Pseudomonas sp. strain E-3//Plant. Cell Physiol. 1987. V.28. N.7. P.1209—1212

134. Watson Temperature and lipids // The Yeasts. 1987.V.2. Eds:. Rose aa.h.,Harrison Y.S. London,Orlando : Acad.Press. 135 p.

135. Weber D.J., Hess V.M. Diverce spores of fungi // In: Spore Vl-th Amer. Soc. Microbiol. 1975. P. 97-111.

136. Weete J.D. Lipid in fungal growth and reproduction // In: The fungal spore: morphogenetic controls, Eds.: Turian G., Hoch H. London: Academia. P. 386-427.

137. Wessels J.G.H. Spore formation and spore germination // Proc. Vl-th Int. Fungal spore conference. 1996. Univer. Konstanz, Germany. P. 135.

138. Reissner H.J. Lipid metabolism in fungal spores // The Fungal Spores: Form and Function. 1976. Eds.: Weber D.J., Hess W.M. N.Y.: Wiley. P. 155181.

139. Witteveen F.B., Vissen J. Polyol pools in Aspergillus niger // FEMS Microbiol. Lett. 1995. V.134. P,57—62.

140. Yo S.Q., Trione E.J. Biochemical determination of the viability of fungal spores and hyphae // Mycologia. 1984. V. 76. N. 4. P. 608-613.А