Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
ПРОДУКТИВНЫЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СВИНЕЙ С ИНТЕГРИРОВАННЫМ В ГЕНОМ ЧУЖЕРОДНЫМ ГЕНОМ РЕЛИЗИНГ-ФАКТОРА СОМАТОТРОПНОГО ГОРМОНА
ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология
Автореферат диссертации по теме "ПРОДУКТИВНЫЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СВИНЕЙ С ИНТЕГРИРОВАННЫМ В ГЕНОМ ЧУЖЕРОДНЫМ ГЕНОМ РЕЛИЗИНГ-ФАКТОРА СОМАТОТРОПНОГО ГОРМОНА"
На пра«ах рукописи
Чабан Иван Михайлович
ПРОДУКТИВНЫЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СВИНЕЙ С ИНТЕГРИРОВАННЫМ В ГЕНОМ ЧУЖЕРОДНЫМ ГЕНОМ РЕЛИЗИНГ - ФАКТОРА СОМАТОТРОПНОГО . Г-
ГОРМОНА
03.00.23. - Биотехиолопи
автореферат
лагорпшмн їм совсмаии« учтм сг«им*
■ук
Дубромщы Моспжю! обЛАСТВ ' ' 2000 г. '
Дмссертаюкжнаа («бот» выполнена » отдел« бнотехнаяогнм житных Всероссийского научно-исследовательского института шктшчктм (ВИЖ).
Научный руководимы*
доктор ссльскохозаЛственных Наук, академик РАСХН Л.К.Эр«ит
ОфшутюншФяямюяшы
Шор биологических наук ИГ, Букароа кандидат биологических наук BJL Рабьи
Всероссийски! ацчннюлммпмкаш!
.Защита jHccqmwm состтогтсі II ним 2000 г. » 10 часов на заседании диссертационного Смета ДДОО. 16.02 при Всероссийском научно-исследовательском иастнтуте животноводства.
Адрес: 142132, Московская область. Подольский район, пос. Дубровицы
( . . ! ■ -
■ I І
і , 1 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.
Автореферат разослан ЭI мая 2000 г.
і
Ученый секретарь диссертационного
П. Губане
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ' •.>,' ,:r; vV;.
АктуяльqtyfTfr.Ttl4i Совершенствование н создание новых вьдокопродухтив- : Aux пород свиней тралнцнопнымн методами селекции является делом долговремеп* i ним к труд«мним. Современная биологическая паука свели» пробыв к тгоч вопросе ив основе использования методов генной и клеточной инжеиерин, разработка метод»-! ку изменения наследственной природы, путем нитрации чужеродных геям в геном-животного (Муромиев Г.С. и др., 1990, Эрнст Л.К. и др., I99J>. \
Оаним ю наиболее впуальных направлений биотехнологнческоП науки »идя-етс* кшенение генома эукярио? (в том числе сельскохозяйственных животных) мсто- ' ■ дами генетической инженерии с целью придания км желательных качеств.' 7
В последнее десятилетие развернут широкий фронт исследования по созданию транстемиых животных с конечной целью повышения продуктивности^ использования их как продуцентов биологически активных,веществ* получения транстенних животных с повышенной устойчивостью к инфекционным заболевадоям, применения эти* животных в качестве биомоделей ■ мелншме, я также для ксеттрянсплактации орта-' '. нов итканей (Эрнст Л К. ндр., 1994, Валя Р. и др.-, 1992*.^ „I
• Применение такого подхода сделало гкпчожнт юучепм алпяпня различных petyjUTOpHUX элементов па уровень и псвнеспсиифичностъ экспрессии »нов и вы»о
' некие влияния экспрессии иктегрнров&ииих тениоккженериих конструкции на орга-. низы животного (Ерем Г к дрч 1991, ГдоссерА. и да, 1986. Пялыилер Р. и др.. 1983).
* Эксперименты по получению н изучению транс генных животных проводятся ' во многих странах мира. Однако, несмотря на многочисленность и многообразие этих -исследований, многие факторы,' определяющие эффективность экспрессии ч>-*сродных генов а клетках животного реципиента целостного организма остаются недостаточно доученными. В связи с этим, юученис экспрессии введенных чужеродных генов н изучение их взаимосвязи с фнзиолого-морфологнчсскнми признаками у трансгеа- -них свиней является актуальной залвчеЯ как в биотехнологии. так и селекции сель-
. I
скохоэлйственнмх животных.
I 'С ¡ТРАЛЬНАЯ
С¡ОТЕКА Uj^:;. ^кадомии
'-•t К. A. Xn-'-JtPiKOJ ИНО Ï^Q.X
yitj^. Minyiqtif Целыо настоішей работа налилосъ «учение.
ітрод>ттшіостн, обмой веществ, їііергин и качества vmco-cMwwft продукции у растущих • откармливаемых тринсгекных na релюииг-ф актору гомона роста сышеЙ IV поколота. В задачи исследований «ходило оіфедеякгь:
*) дкнамнкусрсдпесуточных привесов при откорме свиней « 25 до lift к с 50 до ІбОкгжняоП массы; \':- .-.'■'. - ■.,"! '
б) переваримость основные питательных »«шесть, обмен юот», углероде И ' шергмн приживой мессе свыше 100 кг;
в)>мсо-сАяьную продуктивность при убое еьиней по достижения 160 и tlO ur живой массы, морфологическийсоставтут.развитиевнутреннихорганов;
г) химический солю н энергетическую ценность мяо и шла санней; . д) биохимический состав кропи; .
«>а>тіаіюстьгс»о»рР1Жпосле)*ммумнміши; .
*) жнрнокмслотеыЯ состав «амюго жира. ■ ■-'.■■■. , -
flavywftfi попит«, дибруц. її результате проведенных исследовании определи ни продуктивные н Сиодошчсскне качества у растущих- откарыляшемих свиней, траж генных по рслкзкнг-фаїтору гормоне роста челом« МТ- IhCRF.
рауЧіїо-пркісгичесуа» ^HafKMoCTft p^^OTMi Результат» исследований Диот возможность объективно судить о сохранении шшанші тггегрнроаанной генной струп і>ш MT-IhGRF а геноме свиней четвертого поколения.
. О^новны» положен«. выносимые на >«шкту. Ближние нкгегркромнного в («ном чужеродного гена релнэннг-фактора соматотропного горкой« на продуггкание н биологические особенности евнней IV покалено«. ■ :'■: >
. Дцр9<і«цня р»6отц- Материалы диссертации были доложены на заседании от-даяа биотехнологии ВИЖа (198?, 1999 тг.),н* ммесггдельской конференции ВИЖа
(2000г.). < {-'v
: Публикация. По материалам диссертации опубликовав« две работы.
1 Сгруїсгур^ и обчч р»6угы, Диссертация сосгонт ю введения, обзора литера-рту. материалов н методов исследований, результатов собственных нсслсдопаинП, ^включення. выводов, практических предложений, списка литературы. Днсеертвния ■ доложена на 141 стрях ниє машинописного текста, включает 42 таблицы, 6 рисунков, 14 фотографий. Список литераторы включает 127 источников, в том числе 64 ни иностранных языках. .V
МАТЕРИАЛ М МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ -
Для изучения влияния интегрированного в геном гена релнэинг-факгора соматотропного гормон* человека на продуктивные и биологические особенности свиней IV поколения было проведено два опите на двух группах откармливаем их трансгенных свиней и кх аналогах в первом опыт« с 50 до 160 кгжнвоП мессы по 10 голов в кяждоД и во втором с 15 до НО кг по 5 голов в каждой. Олиш проведены по схеме 1.
Первый опыт проводили с 50 до 160 ы1« второй с 25 до 100-110 кг живой массы, Свиньи были получены отделом биотехнологии в ЭХ"Кпеиово-Чегодасаоч, * '' ' ' ■ Гру ппы были подобраны по принципу однетиездовик аналогов с учетом шивоЙ массы, возраста н пола, 1 _ -
В ходе первого опыт« « голов свинок (по 4 головы т каждой группы) по достижении половой зрелости были отправлены в ЭХКяеново-Чегодаево" для осеменения к получения животных для второго опыта методом близкородственного раз ведения с целью выявления тмгеолиднрованных. признаков чужеродного гена. -
Интеграцию чужеродного гена определяли с помощиб полнмершиой цепной реакции. Для ПЦР геномную ДНК выделяли т кусочка ушной раковины родившихся поросят. Тестирование проводили совместно с сотрудниками ВПЖа Поповым А.Н. и ЭнноаьевойН.А.(1998). ^ ; • ' ■
В течение опытов кормление свиней было индивидуальным полнораннокиым ... ' » і " комбикормом СК-5 по нормам, погане іп автопоилок. Температура в евннирннке находилась в пределах <гг +10 до 20°С. В период1 они гв ежедневно учитывали п<) труп: пом количество скармливаемых кормов и их ¿оедасмоегь, контролировали фюноясД і ■ ■ ■ ■ . - ■ і ' ■ ..(..-- ліческое состояние животных, два раза в месяц поросят взвешивал». -
При достижении подопытиимк свиньями жмвой и»сси 100 кг на трех живот-
ных ю каждой группы билн проведены олити ив изучению переваримости питательных мществ рационов и обмену азоте, углерода и энергии, а при достижении сикнш-
ми живой массы 160 кг в первом опыте и 100-110 кг во втором был проведен кон- . тролшый убой пет животных с детальным изучением разактия внутренних органов И анатомо-ыорфплогнческого состава туш. Обмен энергии изучали в респирашюниых камерах.
Химический ссклъв кормов, кала, мочи, продуктов у бо», крови и изучения ак-\ тианостч rttioa рРМК у свяней іюсле нммуннмішн проводили общепринятыми мето* ликами. В кормач н экскрементах определили: содержание общей влаги - млолом высушивания а термостате до постоянной величины ; сырую золу- сухим озанеиисм • муфельной печи; общий азот - ло Къепьдалю; сырой жир - по Соксклету, сырую клет- ■ чатку • но Геннебергу и UitoKMBify; uiuiuft • трнлопометрнческнм методом; фосфор ло Фнске-Сиб(>прау; энергию - калориметрическим мствдом; углерод - но метолу Тюрина в модификации Л у кашек. Содержание кислорода и углекислого гам - їм газо--анализаторах "Manioc" н "Урос" фирмы Хартмаи к Враун (ФРГ). Обмен энергии и ',. энергетическую шгтательность рашюноа определял» прямым методом в респнраци* : онных опытах на свиньях. Баланс энергии, отложение жира и белка втеле свиней рас- . считывали по константам и уравнениям, рекомендованным первым Международным . симпозиумом по энергии. D мясе н длішнейіией мьиик спины определял» содержа-tute вопы. бедка, жира, эопы. В пробах крови определяли 'содержание: белка в сыворотке - рефрактометрическим методом; мочеаниы • ло реакции с днацетмлмонокнемо-сом в присутствии тиосемнкарбошша; общих липилоа, фосфолинндов и холестерин ♦ • по Покровскому: фосфора • но методу Бригса в модификации Усовича; активность амниотражфераэ (ACT и АЛТ) - ло Насхиной. Содержание жирных кислот * методом * іиюжндкостноП хроматоірафин метиловых зфнро» жирных кислот на хроматографе ,' -цвет-»-. ; 4 -./■' '.v'V'ï
Качество мяса к принадлежность х той или иной группе (PSE, DFD и N) оценп-. вали по величине рН мышечной ткани через 1 м 24 часа после убоя животных при од- s повременном определении температуры и визуальной оценке цвета мяса; влагоудер-' ' ткиваїмцме «юйства мяса определяли методом лргссоаанмя по Грау н Хамлгу в модификации ВШШМПа (1953;; реологические свойства мяса ♦ методом пенетрации на' длиннейшей и полусухожильной мышце. ,' ' ;
Влагу в мясе определяли метсиом высушивания до постоянной величины. -VЧ Л Для изучения активности генов рРНК свиней иммунизировали вакциной против-; классической чумы 2-х-кратнос интервалом черсі 14 дней с профилактической доэой. ¿ ' Показатели; полученные в результате исследований, были обработаны бвомег- • . рич'ескими методами по малой выборке по автору ЕіС.МерхурьсаоП (1970) с помощью
-■ ; , ■ .г . - . L -" 1 ; ^ ,' Т * -.-in,
персонального компьютера IBM, ' ' ;
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Жив** масса м срсднмрочят дрммы свиней.
Одннм кз основных показателей мродукпшпостп «аллетси прирост ж и кой мае- : cu. Динамика живоП массы, среднесуточных привесов и затрагы кормов tía прирост . индивидуально tío животным и по группам а дорастнои аспекте к » целом м опт приведены атаблице I.
• • Г<ийн,ца /
Живая масса, среднесуточные прнмы ■ татрагы кормов на прирост трансгенних гвиней u ni аналоге» (в целом ио опытам)
Транетемные ешм Контрольном (ВЧМВМ
»•на масс* Сртам- Затраты м жмм маге* Срелва* Затраты
«амгаы! в «ачаа* •вита в KOBB«. Факта tpöi-■ы* ■■ аравас, г карма «а 1 кг ttpapof та. кг KKM1' . вы* • веча.* •aura в ■ KBBMf авыта еутач-' au* арнис, г ворма м 1 кг врарис ta, trr
/ опыт
Боро*«и
1593 1601 1543 1713 1915 32.0 48,6 56,2 45,0 48,0 166,0 143,2 168,1 154,4 176.0 644 534 632 618* 723 4,8 5.5 4,8 4.6 4,3 1535 1715 1545 1720 1698 47,7 48,6 63,3 45,6 44,0 172.4 166,0 166,0 166,4 »70.0 705 663 580 ' Ш 7)2 4,7 4.6 5.3 4.7 4,6
В среднем 50,0 161,5 630 49,8 168 Л 669 4¿
Свннхи
1572 1716 1574 1570 52.4 43.5 50.2 51,0 112.6 109,0 113,4 пи 621 675 652 622 4,5 4,1 4,3 4.4- 1576 1518 1524 1506 52,0 41,0 50.4. 42.2 107.6 105.7 110,6 110,2 573 667 6ÍI 701 4,8' 4,2 4,6 4.0-
Всреднем 49,3 111,6 64.2 4,3 46,4 108Д 640 > 4,4
И опыт -
$о;ю*ки
1035 1034 1031 1038 1093 31,6 35,0 17,9 16,8 • 19.5 110.0 115,8 •95,4 95,* 97,7 560 577 482 564 559 4,1 ' 4.4 4*3 3.9 4.1 1037 1091 1096 1033 10Я9 32.6 26 2 28.1 21,5 ' 16.7 110.0 И0.6 114,0 101,8 93,2 553 603 614 574 546- 4.1 4.2 1.3.7 . 3.9 4.1
В средне« 26 X 102,» 548 4 Д 25,0 Ю5.9 378 4,0
В среднем noli ' опытам, кг 4Ц I26J 605 4,4'- 40,0 128,9 .628 ■ 4,4
* ■ ' . ■.
Выршцимние поросят било шпеисканим. Срелнееугочние привесы кис у траяегтнних порос*г, так и у кх аналогов, находились на уровне 500-700 г в сутки. В целом, м период аиращнваиия и откорм» в первом опыте с 50 до 163-167 мсреднесуточные привесы состав «пи у трамсггниык боровкоа 630 г, у свинок • 642 г и ко «горой опыте с 25 до НО кг принес составил у трииегенних свиней 54й г, а у их аналогов, соответственно а I и II опытах 669 и 640 г и 578 г, 1ю ути различия били не достоверны--ми.
' Переваримость питательных »«шеста рационов, обмен мот» а эмергяи., ■
* Трансгениые свиньи переваривали органическое вещество иа 71,9%, прэтеин -80.3%, жир - 8,), клетчагку - 21,9, ЬЭВ - 84,5. а кх аналога соответственно иа 78,!Н; 79,5; 12.0; 14,5 « 85,1%, т.е. раглкчиа между ними были недостоверными. Среднесуточное отложение азота у траисгенных свиней составляло 23,8 г, а у кх аналогии 2,1,4 г, т.е. почти равное количество. Результата исследований по обмену энергии у транс* генных свиней м их аналогов приведены а таблице 2. -
■ . Т<а6*нча2 ■
Обме* энергии у траиегсяиых сакмеЙ м ах аналогов
Л Потреблено " Отложено а теле Тепло-
жмоткых . обменной - энергии, ■ ваше а роду кат,
энергии, МДж мл* белка* I жира МДж
Тронсгенны* елчн^и
1543 36,61 12ДЗ .151 . 217 -23,38.
" .1593 . 36,04 , 9,119 146 : 161 26.1$
1601 34.36 13.51 97 • 2« 20,85
В Среднем 35,67 ± 0,83 п,и±и 131*21,1 220142^ 23,46 ±1.87
Аналоги
1545 .. 35,54 ' 13,31 1 158 '239 У'МДО .
1715 35,61 10,55 13*. . 182 23,06
Б среднем 35,60 * 0,01 11.93*0.5» 148*10,61 211 ±М9 22,7 ±0.69
. Различна между тражгеннымн свиными и кх аналогами по эффективности ис-гкмиоаанш прннггой в корме энергии, ее обмену н </гложсни»м в теле а виде белка и жира были незначительными, в среднем, трашгеиные. свиньи использовали энергию' корма иа сшлсэ а теле белка н жира с эффективностью 24,7%, а кх аналоги - 24,9%; в теле трыкгенних евмней в сутки отклалыаалос», 131 г белка и 220 гжнра, а у нх ана-■ лого* 148 к 213 г, т.е. потгн равное количество. Количество теплопродукции было -также почти равным: 23,46 н 22.70 МДж/суткн на голову. - у'
Етишичмк«« itutMOUNH* кром.
Биохимические показателям кроен: общий белок, альбумины, ACT, АЛТ, глюком, креатинин, С*. Р, мочсашіа, общие лнпиди кроен, фосфолипнды крови и хочс-стерин находились • пределах физиологаческой нормы и существенно не различались. . . • ■
Изучение активности геио* рРНКу сямкей поел* иммунизации. -Были изучены особенности функционирпвїишя ЛОР у трамспмшыя животных, ли изучения возможности «cno.ii.waan и« оценки активности гиков рРНК в качестве тсет-енстеыы, характерюуюшсЙ интенсивность обменных процессов и органи ше.
Результаты исследований - приволен и в та&пню 3. Оказалось, что ни момент постановки опыта наибольшая активность ядрышек была у траисгенных жнвотных. tía 30 день после нммуннзацнн по всем группам наблюдалась чіпкая тенденция к увеличению числа активных ядрышек. К 60 дню а «ой группе наблюдается снижение числа активных ядрышек я клетке, при Практически стабильном уровне их активности в контроле, в результате чего происходит сгр выравнивание по труппам.
■'■■"' ' 1 ■ • ■'." * ■ ' 'ГийлюыІ
; Частота интерфазных клеток с различный числом активных ідрмімк в .
группа» обследовании» свіщуй
Группы г- . Среднее число илры-' ник на клітку Дела клеток с числим активных ядрышек 3 м боле* íeV.»
. до иммхниыции ■"• ' • ' ' •
Трансгенлыс 1,8110,)) 14,012,00
Контроль " 1,68 і 0.07
' " ■ 30 день после имч)мі<іцш ---". . .
Трансгетше : > 2.05 ±0.12 і ' 26.0 ±2,53 : '
Контроль " • • 1,86 ¿0,08 . > . 18,4 ±1,73, ,
60 день поел* иммунизации ... .,'..-,
Трансгенные 1.87 ± 0,14 22,012,39
Контроль * l.VQ10,09 -'21,611,84-
Статистический анализ, проведенный на основе критерії* согласия; показал существование достоверных различий между" трансгснными и контрольными животными в подготовительный период и первый пернод.опыта (р<0,05). Показано достоверное повышение активности генов рнбосомноЛ РНК'к ЭХ) дкю опыта к группе іранс-генных животных (р<,0,01) и контрольных группах (р<0,05). К 60 дню различия меж* ду труппами нивелировались в результате достоверного снижения числа активных
ядрышек у транстснов (р<0,05). Данное явление, очевидно, обменяете* гем, что у трансгенных животных процесс синтеза рРИК, етапного с иммунным отымош, шли более активно.
Полученные результаты укаїьіішот на то. чго уровень активности тснои рибо* couitoft РНК, »предел«смыП по числу окрашенных серебром адрмшек, сиидстельству-ст о рили чип к а интенсивности обмена веществ, на что указывает появление юсі о к с дополнительными активными ЯОР у трансгашых ж »&о тих. В таком случае нонятш акгнвацкя этнх ivttoa под дсПспиісм вакцины. Поскольку шучеиме активности рибосом ных генов осуществлялось в нмму некомпетентны ч метках, стимул *iot* и и му ни-Teta естественно привела к активации я них обменных процессов.
Масная продукти ви ость н качество туиа тринсггішиї и коп і рил ън их сам* ;
ней.
При достижении свиньями живой массы 160 кг а нервом опыте и 100-110 кг во втором опыте были проведены котрольные убой всех животных.
Показательным критерием оценки полномясностп туш является "индекс мас. кости" - соотношение а них тканеЯ мясо/кость н "индекс ностноспГ- мяса/жир. Полученные данные сандетельег&уют о том, что туши опитых животых были более полном ясными и более постными а сравнении с контрольными.
Как видно из данных таблицы 4, живая масса составляет в среднем в нервом опыте по контрольной группе 168.1 кг, а опытной * 161.5 кг. Do втором опыте животные контрольной группы превосходили животных опытной группы по живой массе; (на 2 хгХ массе туш (tu 2,67 кг), выходу мяса на костях н выходу жира-сырца, в сред-. 'немна 1,18 н 1,29%. . , . '
' Таблица V
Характеристика туш еамней «пыткой м контрольной групп (по опытам)
Предубобная каш масса, ... Кг Масса туши, кг Вы*а& туш», ■ " % • ' 41 " É Масса . . внутреннего менра. кг . : Выгод -внутреннего жира, %
/ опыт і
Транс*'енные слиньи
161,516,4 114.9 * 4.9 71,11 ±0,87 ¡ 4,7 ±0.4 і 4,0 ±0.2
Свиньи - аналоги ' :
168,1 ± 1,4 119,6 ± 1.5 I 7t.ll ±0.63 5,8 ±0,5 4,8 ±0,4
... U опыт •
. TvOHCfeHHUt свиньи ''
106.5*3,5 71.0 ±2.7 , 66,7110.52 1.7 ±0.3 2,4 ±0.4
. ■ г Свиньи - лиаіЛчі
108.5 ±З.Т t 73.7 ±2,7 -- I 67,89±0Л141 Р - 2,7±0,4Ї' 3.7 ar0,5xi
х)-Р<0,95 -
Результаты толшнны ішінкд приведены в таблице 5.1) среднем в опытной гр>"П-пе свиней »о всех трех точках толщина шпик* била ниже, чем в коїггрольной, при ■этом разиииа в первом опыте в 1-Й, 2-й н 3-й точках составляла соответственно 0,7; 0,6 н 0,8 см, а во вгором - 0,2; 0,4 и 0,1 см.
ТабшуаЗ
Ппом»р" туш свиней (но опытям>
.Л ' ' Толщина шпика в точке. ем
ММШМ1 1 2 ■ 3
1 опыт
' ' Транс.ънны* гвії/іьч .
1543 . Э.6 - 43 5,7
1915 4.9 3,8 6.4-
1593 2.4 ' 2.8 . 5.7
1713 3.1 3.1 ' 3.2
• 1601 4.9 3,2 5.4.
11 среднем - 3,810.5 3.41 03 5.3 ±0,6
Слиньи • йнатл.ч*
1545 5.4 3,6 6.3
1535 5.1 4,6 7,4
1715 4,2 3.8 • ' .. 5,9
1691 43 43 .7,8
1730 3,9, 3,7 ' ' 2.6
В среднем 4,6 ±0.3 4,0 ± 0,2 ~ 6,0 ±1,0
' ¡/опыт
.Трансгенные еюнъи
1034 3,0 2,5 • 3,5
1035 і 33 23 3,8 ■ 1
1093 . 4.0 ■ 2.4 3.7
103« 34 2.4 ' • зз
1031 2.1 1.4 ■ 2.8- ■
В среднем 3.1 ±0.3 2.3 ± 0,2 3.4 ±03
С«чньч - он'июги ■
1091 3.1 ■2.4. 3.6
1037 3.6 " 3,0 3.7
1033 зз 2.8 . ' - 3.8 .
1089 . 3.0 ' 23 3.1
1096 ■■■■• . 33 2.9 3.4
В среднем 3,3 ±1.1 2,7 ±0.1 33±0.1
: " . Примечание: Толщина шпика в точке: '*.''"
' | «между3-4 крестовыми позвонками^ . ■ 2 ■ над остистыми отросгквми позвонков между 3-4 ребрвми .
■' Э-ива остистыми огростквмя цоіваиков между 6-7 ребрами * 5 Результаты изучения морфологического состява туш трвксгенмых евнней и их
. «налогов покати, что в первом опыте в них содержалось соответственно: мясв •.
54,02 н 53,024; сала - 31,2 н 32,7Н; костей - 10,06 it 9,4%; шкуры - 4,68 к 4,881'. и ал втором опыт«: млс» - 57,3 и І5,3%; саде - 25,7 и 28,6%; коеггй • 11,3м 11,1% и шкуры ♦ 5.3 и 5,0»/.. '
D таблице 6 показано содержание жира а тушах у трапстшых свшкП и нх аналогов. 13 тушак кмггрольиых свиней больше жира наружного, внутреннего н а гкрном опыте достоверно больше собственного жира на 7,6 кг или 4.2*,* (р<0,95).
' ' ■. Ти&гицаб
Содержание жира я маса » туша* с яиутрепинм жиром (беї костей) трансгениы» свиней и и« аналогов (по апытам)
M Всего в туш* а том числе собственно жира
кавотных маса, кг - V.
¡опыт
Транс.ънны* с*инь и
1543 - Ю7Л 48,8 433
' 1915 111,91 56.3 50.3
1593 104,9 49.2 46.«
1713 92.1 42.1 45,7
1601- 91,9 44.3 48,3
В среднем 102,0 ±4,1 48,1 ±2,4 47,3 ±0,9
Свиньи • аначоги
1535 ПОД 60.3 . 54,6
1715 103,1 52,1 49.6
1543 109,1 . .-.-. 48.9 ' * 44,9
1720 103,5 55,4 52,5
1698 110.7 61.» , - 55.9
В среднем 108,0 ± U 55,7 ± 2,4lf * 51,5±2,0°
И опыт •
Тра*сг*нны* cttiHbU '
1035 61Д 24.4 38,6 .
1034 «д - 26,5 • 40.0
1031 '■■ 54,t 17,5 32,0
103« 58,4 19,S - 33,9
1093 57,0 -32,5 : • 36,8 1
В среднем ■ 59,9 ±2.43 І 22.1 ±1.6 36,8 ±1,61
Сеоман * tíHWÚxm
юзт ■ 63.6-.' V ' -.'25,3 39,7
1091 - . 66.6 • ■ ¡31,4 V-:- ' ' 47Д;..-;* '
1096 68,5 26.1 38,1 ; ■"'■
1033 . 59.0 ...,-/■ ¡ 21,8 37,0 : -
1089' * 58,1 • • : 23,4 ■ ' 1 40,2' ' -
8 среднем 63,2 ±2.04 • 25,6*1^: 40,4 ±1,8
. Данные контрольного убоя свидетельствуют о нормальном развіпнн внутрен-' пего оршноа как у траясгешсык саішей, та* н у их аяадо«>». По <5ол «динстпу орпшои
существенных различий не обнаружено. Однако тс органы, которые свямты с сиігтс- . эоч внутреннего сала, проаьіяют сущсствешюе раалнчне. Так, л нерном опыте вес сальника у контрольных животных на I *.2% больше, чем у транаенных евнней. Вес внутреннего сала у контрольных особсА выше на 46,3% а сравнении с іраішеиами. При этом різниці а весе брызжсПкн статистически достоверна <P<0,9S).
По химическому codany средней пробы мясабмлн отмечены некоторые рам ft-ч»я: s масс трансі ємних еншіей в перлом опыте было больше воли на 1,66*4 к меньше жира на 1,93%'пр« практически рапном содержании белка: 13,5 и 13,6%, Некоторые различия были н по химическому составу ерелисП пробы сила: у трансгенных ' свиней в сале содержалось больше воды на 1,34 м меньше белка на 0,35% при равном содержании собственно жира: 85,0 н 85,8%. Во втором опыте различия были только по содержанию волы и жира а средней пробе сала. В силе трансгенных свиней воды содержал оська 2.08% бо.-iuue, а жира на 2,56% меньше, чем у их аналогов. .;
Физико-химические характеристики и химический состав мышечной тка-ин свиней. ■ ■ •
Содержание белка несколько ниже в полусухожильной мишіїе при одновре-' менном более высоком содержании в ней жира; I tec колько меньшее содержание жира отмечено у животных оныгной ipynnu, более wmcthoo а стучае полусух ожнльной ' мышцы. Однако анализируя полученные результаты химического состава мыши, нельзя констаїировать достоверное различие между контрольными и опытными жи- . вотнымн по изученным параметрам (рН, содержание влаги, жира н белка} из-за больших колебаний между показателями в пределах ірумпм.
Нежность мяса • одна из важнейших характеристик структурно-механических свойств мясного сырья и готовой прочукіїнн - показатель их качества.
- Средине значення результатов исследований приведены а таблице Т.
■., Таблнщ ? t
' '- • - Реологически»свойств* маеа ірансгениьіх свиней и нх аналогов -
Группы • животных'' Направление і им еро а, величины пенетрацин
*■ д.тннейшам иышцо
Опытные вдоль волокон . поперек волокон 222,1 ±33.9 N3.2 ±11,4
Контрольные ■■ *' . .. ■ ■. вдоль волокон -поперек волокон ■ 222,9 ±18,5 152,$ ±25,8-
■ ■ • па пчухожюъная мышца
Опытные ; вдоль волокон - f; поперек ВОЛОКОН 249.2tl8.9- . ■ • 137,4± 18,2
Копролыше вдоль волокон.J >. . . , поперек волоком . . .. 272.5 ±48,У ■ 151,1 ±25,5 ■
■ : Анализируя поаш«лн пенетрашш длиннейшей н лолусухожидьной мышц при измерении поперек волокон, следует отметил, «га ыясо животных контрольной группы н» 6,45% нежнее'мае« опытных животных и на 9,46% нежнее при измерении т. •етіїепЛіпеиі. Это можно объяснить большим содержанием жир» и мага в мясе животных контрольной группы.
. ■ При измерении вдоль волокон длиннейшей мыишы различий в показателях пс-нетрвцн* между контрольной н опытной группами не установлено. При измерении полусухожильной мышцы, что мясо животных контрольной группы на 10,93% нежнее опытной,
В целом, следует отметить, что мясо траисгснных свиней н их аналогов имеет достаточно высокие показатели нежности с небольшим преимуществом котрольноЦ группы.
ЖвраокаслФТиыйсоставеввногожира. . . ч*.
' Аііализ средней пробы свиного жира изучаемых свиней показал, что каких-либо достоверных различий между трансгенными свиньями н их аналогам» не вы»в-дою, У трангсенных сакнсй первого опыта можно отметить большее содержание в емшом жире лмнолевой кислоты и суммы пеиасыюениых жирных кислот. У транс* генных свиней во втором опыте выявили больше ненасыщенных жирных кислот и достоверно большее содержание линолевой кислоты (Р<0,95). ■
ВЫВОДЫ
I. У трансгснных по гену релнімнг-фактора соматотропного гормона свиней IV поколения отсутствуют достоверные различия по среднесуточному приросту живой массы, затратам кормов на единицу прироста жнвой массы, переваримости питательных веикста, обмену азот« н энергии. ''>
X Туши трансгенных животных были более полпоылеными и постными. Толщина шпика у трансгенных свиней существенно ниже, в сравнении с контролем (при ; живой массе 107-109 кг контроль превосходит трансгенных по средней толщине шпика на 7.8%, а при 162-168 кг • на 15%; количество'жира в туше больше у контрольных на 4,8% н 15% (Р<0,95), коэффициент мясности.^г трансгенов выше на 15,5 и8,0% в обеих весовых гапегориях). . ? - ' , .' ■ \ '. . >
3. При анализе средней пробы свиного жира на содержание высших жирных. кислот установлено, что траисгепные свиньи достоверно превосходят аналогов по с^ держанию линолевой кислоты (Р<0,99}.
, ', 1t - ■ .
; . ; 4. Усгаїювнли боло« »ысокпЯ виход основных субітродуктоь І категории (пече- ; ни, почек, сердца) у траисгашьи шыотных в сравнении с иетра»сгеиньши.
5. Не »ыаилено различий а протекании посмертных биохкмичесхнх процессов в
• мышечной ткани. ■■ V Y "■-' . ■ , , >..
• 6. По химическому составу: .' • '.";■'■ '■,
а) не выявлено существенных различий по содержанию влага в изученных мышцах как дм отдельных жнвогаых' внутри группы, та* м у животных опытной к контрольной групп; * • ' v
• ' , б) установлено несколько большее содержание внутримышечного жира в контрольной группе, наиболее вмраженное в полусухожилмгой мышце.
7, По ынкроструктурньш показателям: ■ '
а) отмечены несколько большие размеры мышечных волокон в длиннейшей мышце спины и лолусухожклшоП мышие опытных жнвотиих по сравнению с тако- . аыми же мышцами у животных контрольной группы; '
• в. При иммунизации зкспернмешильных свиней вакинной против классической чумы повышается уровень активности генов рРНК в лимфоцитах свиней, наибольшая. активності, отмечена у трансгенных саихсП на 30 день после иммунизации. -
.'.'". 9, Показатели пскетрашм длиннейшей кполусухожильной мышц (при нзмерс-. нин поперек волокон) с видетел ьствуюг о том, что масо контрольних животных к еж- . нее соответственно на 6,45 ц 9,46% в сравнении С мясом опытных животных іі па' 10,93% при измерении вдоль іюлоконполусухожшіьной мышцы.
. ПРЕДЛОЖЕНИЕ
Рекомендуем Э\Х «Клеиово-Чегодвевої» «оздакиа ішнкй трансгенных cbiumii с ' интегрированным геном релизинг-фактора соматотропного гормона MT-lhORF для использования трансгенных животных в научных и седетшонных целях. '
у Списокра&от,опубликовании!патемедпсс*ртвцнн; - -V - і-'
і 1. Эрнст Л^Кч Лисицын А.БЧ Тазулов Ю.ВЧ Чабан U.M., ШатвЛло В,Н. Генно« , инженерная селекция свиней Н Мясііая индустрия.- 1999,- №.3,- С.П-14. ;2. Чабан И.М., Шатайло D.H., Клсновнциий П.М. Изменение активности генов / рРНК у свиней после иммунизации // Совершенствование племенных и продуктивных .
• качеств животных и птиц. Материалы конференции МГА ветер, медицины и биотехнологии ни. К Л Скрябина. М,, 1999,- С.9І-96. '. , ,
lltoU^f- ' у
Зак.УвІ тярЛОрчкв^ ij.fi.xІ ' î«t, ГНИИ ШЮ "Луч**?. Подольск H .
- Чабан, Иван Михайлович
- кандидата биологических наук
- Дубровицы, 2000
- ВАК 03.00.23
- СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ И ПРОДУКТИВНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ СВИНЕЙ, ТРАНСГЕННЫХ ПО ГЕНУ РЕЛИЗИНГ-ФАКТОРА ГОРМОНА РОСТА, 3-ГО И 9-ГО ПОКОЛЕНИЙ
- Особенности липидного обмена у трансгенных растущих свиней
- Сравнительное исследование биологических и продуктивных особенностей свиней, трансгенных по гену релизинг-фактора гормона роста, 3-го и 9-го поколений
- Влияние интеграции генных конструкций MT1-GRF и WAP-hGH на биологические и хозяйственно-полезные признаки трансгенных свиней разных поколений
- Продуктивные и биологические особенности свиней с интегрированным в геном чужеродным геном релизинг-фактора соматотропного гормона