Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Применение пробиотика субалин на пушных зверях семейства Canidae
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Применение пробиотика субалин на пушных зверях семейства Canidae"

На правах рукописи

005053Л'®

СЮТКИНА АННА СЕРГЕЕВНА

Применение пробиотика субалин на пушных зверях семейства Сапісіае

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

18 октті

Н.Новгород - 2012

005053375

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» и ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства (ВНИИОЗ) имени профессора Б.М. Житкова» Российской академии сельскохозяйственных наук

Научный руководитель:

Доктор ветеринарных наук, профессор, директор ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им. проф. Б.М. Житкова» Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Киров

Официальные оппоненты:

Доктор ветеринарных наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная • академия», доцент кафедры эпизоотологии, паразитологии и ветсан-экспертизы,

Кандидат ветеринарных наук, ст.научный сотрудник, ученый секретарь ГНБУ НИВИ НЗ РФ Россель-хозакадемии

Ведущая организация: Государственное научное учреждение Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева Российской академии сельскохозяйственных наук.

Защита состоится «01 » ноября 2012 г. в 1100 часов на заседании диссертационного совета Д 220.047.02 при ФГБОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» (603107, г. Н. Новгород, пр. Гагарина, д. 97).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО НГСХА (603107, г. Н. Новгород, пр. Гагарина, д. 97).

Автореферат разослан « 28 » сентября 2012 г.

Домский Игорь Александрович

Куликова Ольга Леонидовна

Гладкова Надежда Алексеевна

Ученый секретарь диссертационного совета

А.В.Пашкин

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В последнее время для профилактики, лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта и повышения продуктивности животных широко применяют пробиотики. Их использование - один из простых и эффективных способов в процессе технологии выращивания разных видов животных, основанный на экологически безопасных механизмах поддержания высокого уровня колонизационной резистентности кишечника (Овод А.С., 2007; Бовкун Г,Ф., 2008; Злобин С.В., 2008; Tournot J., 1989; Isolauri Е., 1994; Bio-urge V., 1998; Cavazzoni V., 1998; Rowland I., 1999; Kyriakis S.C., 1999; Hoa N.T., 2000; Rolfe R.D., 2000; Dalmin G, 2001; Nikoskeíai-nen S,, 2001; Jadamus A., 2002 Alexopoulos C., 2004). Пробиотики обеспечивают физиологическую целостность многих систем .организма, связанных с формированием иммунной, гормональной, эндокринной и др. систем (Сидоров М.А., 2000; Стегний Б.Т., 2005). Их широко применяют при проведении лечебно-профилактических мероприятий, для борьбы с дисбактериозами различного происхождения, для профилактики стрессов, а также в качестве стимуляторов роста для животных (Красочко П. А., 2006; Rolfe R.D., 2000; Dalmin G, 2001; Nikoskelainen S., 2001; Jadamus A., 2002).

В настоящее время пробиотики на практике применяют:

- в скотоводстве для коррекции микрофлоры, повышения живой массы, стимуляции иммунобиологической реактивности телят, стимуляции продуктивности дойных коров, лечения эндометритов (Тараканов Б.В., 2002; Епишин BIA., 20Q4; Каврус М.А., 2005; Гордеева И.В., 2008; Данилевская Н.В., 2008);

- в свиноводстве для повышения темпов роста поросят, их жизнеспособности, профилактики желудочно-кишечных болезней (Малик Н.И., 2002; Белявский В.Н., 2005; Грязнева Т.Н., 2005; Злобин С.В., 2008; Fuller R., 1978; Jasek S., 1998; Kyriakis S.C. 1999; Jada-mus A., 2002; Alexopoulos C. 2004);

- в птицеводстве пробиотики применяют наиболее широко, их используют на курах, гусях, перепелах, утках для усиления естественной резистентности, коррекции кишечного микробиоценоза, профилактики диарей и стресса, активизации роста мышечной ткани (Белявская В.А., 2001; Егоров И.А., 2004; Оганов Э.О., 2004; Тараканов Б.В., 2004; Филоненко В., 2004; Гласкович М.А., 2005; Данилевская Н.В., 2005; Крюков О., 2005; Мартыненко С., 2005; Тараканов Б.В., 2005; Брылин А.П., 2006; Иванова А.Б., 2007; Ноздрин Г.А., 2007; Cavazzoni V. 1998 и др.);

- в рыбоводстве для профилактики инфекционных болезней и направленного формирования микробиоценоза личинок на ранних стадиях эмбрионального развития, (Асадчан Р.Л., 2005; Бурлачеико И. В., 2007; Nicoskelainen S., 2001).

В целях развития российского пушного звероводства в первую очередь необходимо обратить внимание на совершенствование технологических приемов содержания, кормления и профилактики инфекционных болезней пушных зверей (Домский И.А.,2003). В по-

следнее время все чаше появляется информация о применении про-биотиков в звероводстве. По данным Лоенко H.H. (2002) применение иробиотических препаратов на основе бифидобактерий, оказывают благоприятное воздействие на сохранность щенков песца. Барабаш Б. (2002) оценивал результаты использования пробиотиков в кормлении нутрий по влиянию на активность пищеварительных ферментов, жизнеспособность молодняка и прирост массы тела зверей.: -

По данным Тинаева H.H. и Ёмельяненко П.А. (2006), пробиотики оказывают положительное влияние на воспроизводительную способность самок норок, плодовитость, увеличение выхода щенков в расчете на одну самку. Дорошева А.М. (2009) проводила пробиотиком фармакокоррекцию микрофлоры песцов больных токсокарозом.

Во всех случаях получен положительны» результат, но вся информация по их применению представлена только отдельными публикациями, характеризующими действие разных пробиотических препаратов.

Таким образом, получение новых комплексных данных о воздействии пробиотиков на организм зверей является актуальным направлением исследований, способствующих получению новых научных данных и практических результатов.

Цель работы. Изучить влияние пробиотика субалин на организм пушных зверей семейства Canidae и дать предложения по его практическому использованию в звероводстве.

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи: ,-.■.■■

1. изучить микрофлору ЖКТ пушных зверей семейства Canidae и ее изменения после применения пробиотика;

2. изучить влияние пробиотика на сохранность молодняка, его рост и развитие;

3. изучить влияние пробиотика на иммунные процессы в организме после вакцинации зверей вирусными и бактериальными антигенами;

4. дать рекомендации по внедрению препарата в ветеринарную и зоотехническую практику звероводства.

Научная новизна. Впервые получены комплексные данные по влиянию пробиотика субалин на организм разных видов пушных зверей (енотовидной собаки, красной лисицы и серебристого песца), а именно:

- изучена нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта пушных зверей семейства Canidae, получены данные по влиянию пробиотика на ее изменение в период применения препарата;

- установлено, что субалин способствует увеличению темпов

роста молодняка и повышению сохранности пушных зверей;

- изучено влияние пробиотика субалин на поствакцинальные процессы после иммунизации песцов против чумы плотоядных и сальмонеллеза.

Практическая значимость. На основании проведенных исследований разработана схема применения пробиотика субалин для пушных зверей семейства Canidae. Даны рекомендации по его ис-

пользованию в ветеринарной практике звероводства, что обеспечивает практическую целесообразность и экономическую эффективность его применения. Подготовлены дополнения для внесения в наставление по применению субалина на пушных зверях.

Апробация материалов диссертации. Материалы диссертации доложены и обсуждены:

- на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и фармакологии, ФГОУ ВПО ВГСХА протокол № 2 от 9 октября 2007 г,

- на седьмой научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знание молодых», Вятская ГСХА, 2007 г., г.Киров;

- на восьмой научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знание молодых», Вятская ГСХА, 2008 г., г.Киров;

- на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и фармакологии, ФГОУ ВПО ВГСХА протокол № 3 от 20 ноября 2008 г;

- на Ученом совете факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО ВГСХА, протокол X» 2 от 27 ноября 2008 п

- на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения П.Г. Петского, Вятская ГСХА, 2009 п, г.Киров;

- на Международной научно-практической конференции «Современные научно-практические достижения в ветеринарии», посвященной 80-летию Вятской государственной сельскохозяйственной академии, ВГСХА, 2010 г., г. Киров; '

- на Международной научно-практической конференции: «Современные научно-практические достижения в ветеринарии», ВГСХА, 2011 г., г. Киров;

- на расширенном заседании кафедры морфологии и микробиологии ФГБОУ ВПО ВГСХА протокол № 4 от 25 января 2012 г.

Основные положения, выносимые на защиту:

- микроорганизмы Bifidobacterium, Lactobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, бактерии рода Proteus, Clostridium, Salmonella sp. —являются основными составляющими энтероценоза молодняка пушных зверей семейства Canidae;

- применение пробиотика субалин молодняку пушных зверей нормализует их энтероценоз, снижая относительное количество микроорганизмов группы стафилококков, стрептококков, эшерихий, обеспечивая полную элиминацию клостридий, сальмонелл и протея, способствует активному размножению пристеночной облигатно-анаэробной резидентной микрофлоры более чем на 90% представленной бифидо - и лактабактериями;

- применение субалина на молодняке пушных зверей повышает уровень их популяционного здоровья и хозяйственно-товарной полезности.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в которых изложены основные результаты проведенных исследований. Работы опубликованы в научных изданиях, в т.ч. 3 работы в журналах, рекомендованных ВАК, 3 работы в сборниках материалов международных научных конференций.

Объем и структура работы:

Диссертационная работа изложена на 140 страницах машинописного текста, состоит из ведения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и производственных испытаний, обсуждения, выводов и практических предложений, списка использованной литературы, включающего 189 источников, из них 58 на иностранных языках, приложений. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 22 рисунками.

1. Материалы и методы

Научные исследования выполнены в период с 2007 по 2011 г. на кафедре морфологии и микробиологии ФГБОУ ВПО Вятская ГСХА, в лаборатории ветеринарии ГНУ ВНИИОЗ им. проф. Б.М. Житкова Россельхозакадемии. Экспериментальную часть работы на зверях проводили на базе ООО «Зверохозяйство Вятка» и звероферме ООО «Велюр» (Кировская область).

Материалы

Животные. Для проведения исследований использовали пушных зверей семейств Сатс1ае: песцы (А1орех ^ория) от 2 до 8 месячного возраста - 400 голов; красные лисицы (УШреэ уи1рев) от 2 до 8 месячного возраста - 100 голов; енотовидные собаки (Кус1егеи1еБ рго-суошмёев) в возрасте 2,5 до 7 месяцев - 200 голов. Опытные группы зверей сформированы по методу аналогов.

Биопрепараты и штаммы микроорганизмов. В работе использован пробиотик субалин, изготовленный ГНЦ «Вектор» по ТУ 9383004-00479379-98 серия 020906, годен до 12. 2010. В основе препарата использован штамм Вас. зиЫШз 2335 (105) ВКПМ В4759.

Схемы применения препарата.

Презентацию пробиотика щенкам пушных зверей проводили в течение 3-4 циклов, начиная с 1,5 — 2,5 месячного возраста (период отсадки и перехода на основной рацион) по следующей схеме: 5 дней давали субалин в дозе 100-200 *106 КОЕ/кг, затем 10 дней перерыв.

Для изучения влияния пробиотика на иммунные процессы его давали зверям за 2 дня до вакцинации и 2 дня после нее.

Вакцинацию щенков песца проводили живой вакциной против чумы плотоядных «Бионор - О», изготовленную Биоцентром по ТУ 9384-008-11525378, сери^ 07,„контроль 02, годен до 09. 2010 г..

Для вакцинации против сальмонеллеза пущных зверей использовали опытную серию живой вакцины из аттенуированных штаммов:

Salmonella typhimurium № 3, Salmonella dublin № 6, Salmonella chole-rasuis № 9 по ТУ 9484-041-00494189-01. Вакцинации проводили, согласно инструкции по применению препаратов.

Вирулентный штамм сальмонелл: Salmonella typhimurium № 371 использовали для постановки БАСК, ОФР.

Все вакцинные штаммы, используемые в работе, депонированы в России и получены из Федерального государственного учреждения Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ФГУ «ВГНКИ») г. Москва.

Методы исследований

Общеклинические. У зверей отмечали наличие аппетита, анализировали все случаи отклонения от нормального физиологического состояния: снижение активности, угнетение, заболевание, гибели и др. Выборочно измеряли температуру тела. В течение всего периода следили за изменением живой массы тела животных. Не менее 30% зверей всех групп через каждые 14 дней взвешивали согласно методикам, принятым в зоотехнической практике звероводства (Берестов В.А., 2002).

Гематологические. Отбор проб крови у зверей проводили через 5 дней после применения пробиотика. Для этого у щенков кровь брали из вены бедра задней конечности (v. saphena). Показатели крови определяли на гематологическом анализаторе PCE — 90. Подсчет лейко-граммы проводили согласно общепринятой методике (Берестов В.А., 2002). Проведено 350 гематологических исследований, из них 170 на гематологическом анализаторе.

Биохимические и иммунологические. Определение фракций белка в сыворотке крови (альбуминов, a-, ß-, у- глобулинов) проводили нефелометрическим методом (Кондрахин И.П., 1985), определение общих иммуноглобулинов (по Барановскому II.В. и Данильшину B.C., 1983), определение общего белка рефрактометрическим методом (Кондрахйн И.П., 1985); Выполнено 180 биохимических исследований.

Определение бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) проводили по методу Кузьминой Т.А. и Смирновой О.В. (1966). Фагоцитарную активность нейтрофилов изучали в опсонофа-гоцитарной реакции (Лабинская A.C., 1978). Проведено более 800 исследований

Серологические. Реакцию агглютинации использовали для изучения динамики образования специфических антител-агглютининов к возбудителям сальмонеллеза (Антонов В.Я., 1971). Реакцию нейтрализации и иммуноферментный анализ использовали для изучения

динамики образования специфических антител к вирусу чумы плотоядных (Сюрин В.Н., 1984; Троценко Н.И., 1999).

Бактериологические. Микрофлору желудочно-кишечного тракта исследовали по методике «Бактериологическая диагностика дисбак-териоза» (Казань, 1989). Исследовано 200 проб, выполнено более 6400 бактериологических посевов.

Определение антагонистической активности пробиотического штамма к выделенным из кишечника зверей микроорганизмам проводили по методикам Бергера М.О., (1983), Воронина Е.С., (2002). Проведено 150 исследований.

Товароведческую оценку качества шкур лисицы проводили согласно ГОСТу 2790-88 - Шкурки лисицы клеточного разведения невыделанные.

Статистическая обработка массовых цифровых материалов проводилась на персональном компьютере IBM с использованием пакета статистических программ «BioStat». Использовали общепринятые методы математической статистики (Ашмарин И.П., 1962), оценку достоверности некоторых статистических показателей производили по критерию Стыодента.

Благодарности. Автор выражает искреннюю благодарность и признательность за помощь в выполнении диссертационной работы сотрудникам лаборатории ветеринарии ГНУ ВНИИОЗ: старшим научным сотрудникам, кандидатам ветеринарных наук Бельтюковой З.Н., Окуловой И.И., кандидату биологических наук Беспятых О.Ю.; сотрудникам кафедры морфологии и микробиологии ФГОУ В ПО Вятской ГСХА: доктору медицинских наук, профессору Романову В.Е, доктору ветеринарных наук, профессору Тетереву И.И., кандидату ветеринарных наук, доценту Тимошенко Т.А., декану факультета ветеринарной медицины, кандидату ветеринарных наук, профессору Копылову С.Н. за методическую помощь и научные консультации при проведении лабораторных исследований; а также, главному ветеринарному врачу Филатовой М.С. ветеринарному врачу Тюфякову С.Н., бригадиру Леоновой З.С. ООО «Зверохозяйства «Вятка» за организацию работы в производственных условиях и практическую помощь в сборе биоматериала.

2. Результаты собственных исследований.

2.1. Влияние пробиотика субалин на состав кишечной микрофлоры пушных зверей. ^

Изучение количественного и качественного состава микрофлоры ЖК'Г у щенков енотовидной собаки, красной лисицы, серебристого песца проводили следующим образом: были изучены показатели микрофлоры у зверей в возрасте 1,5-2,5 месяцев при содержании их

на стандартном рационе. В результате бактериологических исследований выделены следующие основные группы микроорганизмов, которые являются постоянными (резидентными) или транзиторными обитателями ЖКТ: Bifidobacterium, Lactobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, бактерии рода Proteus, Clostridium, Salmonella sp. и В.subtilis (рис. 1, 2, 3).

ы

s

5

14

12 10 8 6

4 -

2 -

V 1 1-І--1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

группа микроорганизмов

□ Контроль ■ до применения □ через 1 день

П через 5 дней ■ через 10 дней

1 - Bifidobacterium,

2 - Lactobacillus,

3 - Staphylococcus,

4 - Streptococcus,

5 - E.coli,

6 - сероводород образующие E.coli,

7 - Clostridium,

8 - Proteus,

9 - дрожжи,

10 - В. subtilis,

Рис. 1. Результаты исследования микрофлоры желудочно-кишечного тракта и ее изменения после применения субалина у щенков енотовидной собаки

□ Контроль ■ до применения □ через 1 день

□ через 5 дней ■ через 10 дней

1 23 4567 89 10 11 группа микроорганизмов

1- Bifidobacterium,

2- Lactobacillus,

3- Staphylococcus,

4- Streptococcus,

5- E.coli.

6- сероводород образующие E.coli,

7- Clostridium,

8- Proteus,

9 -дрожжи ,

10 - В.subtilis,

11 -Salmonella.

Рис. 2. Результат исследования микрофлоры желудочно-кишечного тракта и ее изменения после применения субалина у щенков красной лисицы

3456789 10 11 грнуппы микроорганизмов

О Контроль ■до применения □ через 1 день

О через 5 дней И черен 10 дней

1- Bifidobacterium,

2- Lactobacillus,

3- Staphylococcus,

4- Streptococcus,

5- E.coli,

6- сероводородоб-разующие E.coli,

7-Clostridium,

8- Proteus, 9 —дрожжи, 10- В.subtilis,

11 - Salmonella.

Рис. 3. Результат исследования динамики микрофлоры желудочно-кишечного тракта у щенков серебристого песца

В результате проведенных исследований нами установлено, что при введении в рацион молодняка пушных зверей субадина происходит коррекция микрофлоры ЖКХ. Результаты бактериологических исследований микробного состава ЖКТ щенков енотовидной собаки, красной лисицы и серебристого песца аналогичны. Нами установлены следующие закономерности: во всех опытных группах зверей наблюдается снижение в ЖКТ уровня стафилококков, стрептококков, эшерихий; происходит элиминация (полное вытеснение) анаэробных бактерий рода Clostridium, а так же условно-патогенных бактерий рода Proteus и Salmonella; увеличение количества представителей резидентной микрофлоры: бифидо- и лактобактерий; полная элиминация из ЖКТ штамма входящего в состав пробиогика субалин происходит на 5 день после окончания применения. Видовую принадлежность выделенных из кишечника культур микроорганизмов не определяли.

2.2. Определение антагонистической активности субалина к штаммам микроорганизмов выделенных из кишечника зверей.

Исследование антагонистического действия культуры пробиоти-ческого штамма проводили в отношении выделенных групп микроорганизмов из ЖКТ пушных зверей, а именно в отношении следующих групп бактерий: Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, бактерии рода Proteus, Salmonella sp.

Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты изучения антагонистической активности пробиоти-ческого штамма в отношении микроорганизмов, выделенных из ЖКТ пушных зверей.

Культуры микроорганизмов Диаметр зоны подавления роста микробов в опыте с выделенными от зверей штаммами, мм (М±т)

Енотовидная собака Красная лисица Песец

Стафилококк 15±0,01 17±0,01 19±0,01

Стрептококк 25±0,012 22±0,01 24±0,02

E.coli 15±0,01 19±0,01 25±0,012

Proteus 17±0,012 25±0,012 25±0,01

Salmonella 19±0,012 20±0,012 20±0,01

В ходе работы установлена способность пробиотического штамма подавлять рост условно-патогенной микрофлоры - стафилококков, стрептококков, а так же возбудителей кишечных инфекций (E.coli, Proteus s.p, Salmonella sp) выделенных из желудочно-кишечного тракта пушных зв-ерей. Более чувствительными к пробио-тическому штамму во всех исследованиях были стрептококки.

2.3. Влияние пробиотика субалин на иммунные процессы после введения вирусных и бактериальных антигенов песцам.

2.3.1. Вакцинация против сальмонеллеза.

Установлено, что после двукратного перорального введения живой вакцины против сальмонеллеза а опытной и контрольной группах зверей происходят следующие изменения биохимического состава крови.

На 7 день после вакцинации щенков песца установлено, что уровень у-глобулинов в опытной группе зверей был на 43% выше, чем в контрольной группе (рис.4). В результате дальнейших исследований отмечалось увеличение количества у-глобулинов к 14 дню, в опытной группе этот показатель был выше на 34%, чем в контрольной. К 21 дню исследований установлено увеличение количества у-глобулинов в опытной группе на 45,9% (р<0,05). При последующих исследованиях происходило незначительное снижение уровня у-глобулинов в сыворотке крови в обеих группах.

опытная контрольная

_______группы

а 7 день ■ 14 день □ 21 день □ 28 день

Рис. 4 Динамика количества у-глобулинов после вакцинации щенков серебристого песца против сальмонеллеза

80

£ 70 а

% 60 50 40 30 20 10 0

контрольная

группы

Рис. 5 Динамика бактерицидной активности сыворотки крови у песцов после вакцинации против сальмонеллеза

Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) на 7 день у зверей опытной группы была выше на 64,1%, чем в контрольной (рис.5). К 14 дню происходит увеличение БАСК и составило 65,3% в опытной группе, а в контрольной группе - 27%. На 21 день исследований БАСК в опытной группе зверей была 74,4%, что 35,6% больше, чем в контроле. При дальнейших исследованиях происходило незначительное снижение БАСК в обеих группах.

В результате определения фагоцитарной активности нейтрофи-лов (рис.6) установлено, что на 7 день после вакцинации в опытной группе щенков показатель опсонофагоцитарной реакции (индекс Штритера) на 32,8% выше, чем в контрольной группе. На 14 день не-

опытная

а 7 день К 14 день □ 21 день П28день

следования этот показатель в обеих группах повышается, однако в опытной он достоверно выше и достигает 42,2%. Затем к 21 дню происходит снижение индекса Штритера в обеих группах, но в опытной группе он остается выше на 29,8 %, чем в контроле.

Рис. 6. Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов у песцов после вакцинации против сальмонеллеза

Установлено, что выделение вакцинных штаммов сальмонелл из кишечника щенков начинается через 2-3 дня после первой вакцинации. Элиминация вакцинных стрептомицинустойчивых штаммов сальмонелл из желудочно-кишечного тракта щенков в контрольной группе в 80% случаев проходила через 14-21 день после ревакцинации. У зверей опытной группы элиминация сальмонелл происходила значительно быстрее, и через 7-10 дней выделение из кишечника вакцинных штаммов сальмонелл прекращалось.

Определение титров антител-агглютитинов проводили в отношении 3 штаммов сальмонелл, применяемых для вакцинации щенков: Salmonella dublin № 6, Salmonella typhimurium № 3, Salmonella cholera suis № 9 (рис. 7, 8, 9).

В результате исследования установлено, что до вакцинации щенков опытной и первой контрольной группы (без субалина) ко всем вакцинным штамма сальмонелл агглютинация наблюдалась в разведении 1:20.

Затем, на 7 день после иммунизации в опытной группе щенков происходит увеличение титров антител до 1:160, а это в 2 раза выше, чем в контрольной группе.

до 7 день 14 день 21 лень 28 день

вакцинации

■опытная (вакцинированные + субалии) "»"контрольная (вакцинированные без субалииа)

"контрольная 2 (кевакцинированные)

Рис. 7. Динамика титров антител в сыворотке крови песцов к штамму Salmonella dublin № 6 после вакцинации против сальмонел-леза

Нарастание титров продолжалось к 14 дню после иммунизации зверей в обеих группах, однако, в опытной группе к этому периоду достигало 1:480, в контрольной - 1:200. К 21 дню происходит снижение титров, в опытной группе - 1:320, однако, этот показатель выше, чем в контрольной группе 2 раза. К 28 дню исследования продолжается постепенное снижение титров: до 1:160 - в опытной и 1:80 - в контрольной группе.

до

вакцинации

7 день

14 лень

21 день

28 день

•опытная ( вакцинированные + субалин) "контрольная 2 (мевакцинированные)

"контрольная (вакцинированные без субалина)

Рис. 8. Динамика титров антител в сыворотке крови песцов к штамму Salmonella typhimurium № 3 после вакцинации против саль-монеллеза

При исследовании сывороток крови песцов на наличие антител к штамму Salmonella typhimurium № 3 на 1 день после вакцинации отмечено увеличение титров в опытной группе щенков до 1:140, а в контрольной - 1:100. К 14 дню продолжается нарастание количества антител в обеих группах: 1:480 - в опытной, 1:400 - в контрольной группах. Однако к 21 дню исследований наблюдается снижение титров в обеих группах зверей, в опытной - до 1:320, в контрольной -1:160. Снижение титров антител продолжается к 28 дню исследований. Однако, в опытной группе этот показатель остается в 2 раза выше, чем в контрольной.

При определении ти гров к штамму Salmonella cholera suis № 9 отмечено, что на 7 день после иммунизации происходит увеличение специфических антител в опытной и контрольной группах 1:120 и 1:54 соответственно (рис. 9).

К 14 дню происходит повышение тигров в опытной группе до 1:480, в контрольной - 1:320, после чего к 21 дню наблюдений отмечается снижение титров в опытной группе - 1:450, а в контрольной до 1:160. Затем, при определении специфических антител на 28 день исследований установлено, что в опытной группе щенков снижение титров продолжается до 1:160, в контрольной группе - 1:80.

о. 600 h

ДО 7 день 14 день 21 день 28 день

вакцинации

'опытная (вакцинированные + субялин) —контрольная (вакцинированные без субалина)

'контрольная 2 (»'.'вакцинированные)

Рис. 9. Динамика титров антител в сыворотке крови песцов к штамму Salmonella cholerasuis № 9 после вакцинации против саль-монеллеза.

В качестве второго контроля исследовали сыворотку крови, полученную от невакцинированных щенков, у которых в течение всего периода исследования тигры антител находились на уровне 1:20.

Следует отметить, что и в опытной, и в контрольной группе зверей максимальное увеличение титров специфических 'антител наг блюдалось на 14 день после вакцинации, однако в опытной группе щенков эти показатели выше.

2.3.2. Вакцинация против чумы плотоядных.

В результате исследований установлено, что уровень у - глобулинов на 7 день после вакцинации зверей в опытной группе на 14,8% выше, чем в контрольной группе (рис. 10).

Рис. 10. Динамика уровня у-глобулинов у песцов после вакцинации против чумы плотоядных

К 14 дню исследований уровень у-глобулинов составил 11,5%, что на 47,8% выше, чем в контрольной группе. К 21 дню после иммунизации этот показатель в опытной группе достигал 23,64%, что на 58,5% выше, чем в контрольной (р<0,05).

Бактерицидная активность сыворотки крови в опытной группе зверей на 7 день после вакцинации была в 4 раза выше, чем в контрольной группе (рис. 11)

опытняе __контрольная

■ 7 день ■ 14 день 021 день 028 день

Рис. 11. Результаты определения БАСК у песцов после вакцинации против чумы плотоядных

На 14 день исследования происходит увеличение БАСК в опытной группе - 78,87%, в контрольной группе - 42,4%. К 21 дню исследования происходит снижение БАСК в опытной группе - 72,6%, в контрольной группе - 26,6% (р< 0,05).

■опытная '

'контрольная

В результате определения фагоцитарной активности нейтрофи-лов (рис.12) установлено, что на 7 день после вакцинации в опытной группе щенков показатель опсонофагоцитарной реакции (индекс Штритера) на 40,3% выше, чем в контрольной группе.

я

£ 40

я

а ь 30

Я

20

І*

ч в 10

0

до вакцинации 7дснь 14день 21 день

срок исследования

Рис. 12. Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов у песцов после вакцинации против чумы плотоядных

На 14 день исследования индекс Штритера в обеих группах повышается, однако в опытной он достоверно выше. К 21 дню происходит снижение индекса Штритера в обеих группах, но в опытной группе он остается выше, чем в контрольной.

При определении уровня антител методом ИФА (рис. 13) установлено, что на 7 день после иммунизации в опытной группе происходит увеличение количества антител на 18%, на 14 день - 23%, на 21 день - 8,7%, по сравнению с контрольной группой

Рис. 13. Динамика титров антител, в сыворотке крови песцов вакцинированных против чумы плотоядных (метод ИФА).

Результаты исследования динамики титров антител, в сыворотке крови песцов вакцинированных против чумы плотоядных в реакции нейтрализации отражены на рис. 14.

3 опытная ■ контрольная

21 28

срок исследования (дн.)

Рис. 14. Динамика титров антител, в сыворотке крови песцов вакцинированных против чумы плотоядных (в РН).

В результате исследований установлено, что применение субалина при вакцинации песцов против чумы плотоядных происходит достоверное увеличение титров антител в опытной группе: на 7 день исследований титр составил - 1:8, на 14 день происходит повышение титров до 1:16, на 21 день отмечено снижение до 1:8, в дальнейшие сроки исследования на 28 и 35день - снижение до 1:4, в контрольной группе титры антител в РН достоверно ниже.

3. Результаты производственного испытания пробиотика субалин.

3.1. Влияние субалина на сохранность пушных зверей. Учитывали сохранность зверей опытной и контрольной групп енотовидной собаки (п=200). В результате исследований установили, что сохранность щенков опытной группы составляла 100%, контрольной -98% соответственно.

В результате исследования субалина на молодняке красной лисицы (п=100) установлено, что сохранность зверей опытной группы составляла 100%, контрольной - 92%.

В период проведения исследований на молодняке серебристого песца (п=400) установлено, что сохранность зверей опытной группы составляла 100%, контрольной - 96,7%.

Гибель животных контрольных групп происходила по причине заболеваний желудочно-кишечного тракта, сопровождающихся диареей и истощением, в некоторых случаях булимией, тимпанней и разрывом желудка; заболеванием дыхательного тракта — ларингит, бронхит и пневмония.

3.2. Влияние субалина на динамику роста пушных зверей.

В результате учета прироста живой массы молодняка пушных зверей, установлено, что в период применения пробиотика субалин

в опытных группах происходит повышение темпов роста животных, которое наиболее ярко наблюдается к 42 дню исследования (рис. 15). У молодняка енотовидной собаки в опытной группе к этому периоду отмечено достоверное (р<0,05) увеличение массы тела на 7,2%, а на 56 день эта разница составляла 8,2 %.

Перед убоем проводили контрольное взвешивание щенков опытной и контрольной групп, установлено, что средняя масса зверей в опытной группе к 8 месячному возрасту достигала 1 1,24±0,26, что на 18,1% выше, чем в контрольной группе. Разница полученных результатов достоверна (р< 0,05).

У щенков серебристого песца к 42 дню исследований также происходило достоверное увеличение прироста массы тела в опытной группе и составляло 3,86±0,26 кг, что на 7,3 % выше, чем в контрольной группе. Перед убоем установлено, что средняя масса щенков опытной группы к 8 месячному возрасту достигала 8,7±0,3, что на 11,5% выше, чем в контрольной группе. Разница полученных результатов достоверна (р< 0,05).

енотовидная енотовидная красная лисица красная лнспиа серебристый песен серебристый песен

собака(опыт) собака (контроль) (опыт) (контроль) (опыт) (контроль)

И до применении Ш 14 день Я 28 день □ 42 день й 56 день □ 8 мес

Рис. 15. Динамика средней массы молодняка пушных зверей

В результате исследований, проведенных на молодняке красной лисицы, установлено, что наибольший прирост живой массы в опытной группе зверей отмечен на 42 день применения субалина. Средняя масса тела у щенков опытной группы составляла 5,5±0,35 кг, что на 22,1% выше, чем в контрольной группе. Разница полученных результатов достоверна (р<0,05).

Обобщая результаты исследования на разных видах пушных зверей семейства Сат<3ае, получавших пробиотик -в течение 3 - 4 кур-

сов, следует отметить, что происходит достоверное увеличение массы тела, как в период применения, так и после окончания применения субалина. При этом наиболее высокие показатели прироста наблюдали у молодняка красной лисы.

3.3. Товароведческие методы оценки качества шкур лисицы.

По результатам комплексной оценки шкурок молодняка красной лисицы (п=50) получены следующие данные: средняя площадь шкур опытной группы - 21,3 дм2 , контрольной группы - 20,48 дм . С учетом размера, цвета и дефектности шкурок зачет по опытной группе составил 116%; в контрольной - 109,08%.

Согласно прайс-листу за 2009 год ООО «Зверохозяйство «Вятка» цена за 1 дм2 невыделанной шкурки лисицы красной «Огневка Вятская» составляла 125 руб.

В- итоге средняя стоимость шкурки из опытной группы составляет - 3088,5 рублей, стоимость шкурки из контрольной группы -2810,88, что на 277, 62 рублей меньше.

С учетом стоимости препарата, которая в 2008 году составляла 18 руб за 1 дозу. 1 доза препарата рассчитана на 50 кг живой массы. В результате исследований установлено, что затраты препарата на 1 щенка на 3 курса применения в среднем составляют 2 дозы.

В результате производственных испытаний пробиотика Субалин на щенках красной лисицы получен реальный экономический эффект (241,62 руб за 1 дм2 шкурки).

Выводы:

1. Микроорганизмы Bifidobacterium. Lactobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, сероводородобразующие и лактозонегативные E.coli, дрожжи, бактерии рода Proteus, Clostridium, Salmonella sp. -являются основными составляющими энтероценоза молодняка пушных зверей семейства Canidae.

2. Использование пробиотика субалин на пушных зверях приводит к снижению ЖКТ количества стафилококков, стрептококков, эшери-хий, полной элиминации клостридий, протея и сальмонелл, а также способствует активному размножению пристеночной облигатно-анаэробной резидентной микрофлоры, более чем на 90 % представленной бифидо - и лактобактериями.

3. Установлено, что штамм, составляющий основу пробиотическо-го препарата, обладает высокой антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов желудочно-кишечного тракта пушных зверей.

4. Полное выведение пробиотического штамма из организма пушных зверей происходит через 5 дней после окончания его применения.

5. После применения субалина установлены следующие закономерности в изменении гематологических показателей пушных зверей: эритроцитоз, повышение уровня гемоглобина.на 12%, снижение лейкоцитов до 28%, сдвиг лейкограммы вправо (снижение нейтро-филов, увеличение количества лимфоцитов).

6. В сыворотке крови у щенков пушных зверей происходит снижение уровня альбуминов, но значительно повышается количество общих иммуноглобулинов, особенно у-глобулинов.

7. При вакцинации зверей вирусными и бактериальными антигенами пробиотик стимулирует иммунный ответ. Отмечено практически 2- кратное увеличение титров специфических антител, увеличение бактерицидной активности сыворотки крови повышении фагоцитарной активности нейтрофилов. ; '

; 8. Применение субалина на молодняке пушных зверей обеспечивает высокий уровень сохранности щенков во всех опытных группах животных, получавших препарат.

9. Применение пробиотика субалин способствует увеличению массы тела у молодняка пушных зверей: у енотовидной собаки - на 7,2%, песца - на 7,3%. Наиболее высокие показатели отмечены у щенков красной лисицы - на 22,1%,.

10. По результатам оценки качества шкур лисицы установлено, что применение пробиотика субалтж способствует увеличению площади шкур зверей опытной группы на 0,82 дм2, повышению качества пушно-мехового сырья. Средняя стоимость шкурки опытных зверей на 241, 62 рублен больше, чем в контроле, что обеспечивает реальный экономический эффект.

. ,, ,, Практические предложения

В целях повышения эффективности звероводства:, ;;

- подготовлено дополнение к наставлению по применению субалина на пушных зверях;

- даны рекомендации по применению пробиотика субалин в ветеринарной и зоотехнической практике звероводства; ■

- результаты исследований используются в учебном процессе факультета ветеринарной,.медицины по специальности «Ветеринария» в курсе «Ветеринарная микробиология и иммунология».

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Соловьева A.C. Пробиотики и перспективы применения их в звероводстве / И.А. Домский, A.C. Соловьева //Науке нового века - знание молодых: Материалы докладов 7-й научной конферен-

ции аспирантов .и соискателей: Сборник научных статей. - Киров, 2007 с. 73-75 (ветеринарные науки).

2. Соловьева A.C. Эффективность применения пробиотика «Субалин» на щенках енотовидной собаки / А.С.Соловьева, И. А. Домский // Науке нового века-знания молодых: Сборн. Статей 8 научной конференции аспирантов и соискателей. Часть 2 Киров 2008 с. 28-31.

3. Соловьева A.C. Влияние пробиотика «Субалин» на состав микрофлоры енотовидной собаки/ A.C. Соловьева // Достижения Ветеринарной науки и практики/ Киров 2008 с. 137-140.

4. Соловьева A.C. Результаты применения пробиотика Субалин на молодняке енотовидной собаки и красной лисы / А.С.Соловьева, И.А.Домский II Современные научно-практические достижения в ветеринарии. / Сборник статей'Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию Вятской государственной сельскохозяйственной академии 15-16 апреля 2010 года /Выпуск 1, Киров. - 2010. - с. 188-190.

5. Соловьева A.C. Влияние пробиотика Субалин на состав кишечной микрофлоры серебристого песца / A.C. Соловьева, И.А.Домский // Современные научно-практические достижения в ветеринарии. / Сборник статей Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию Вятской государственной сельскохозяйственной академии 15-16 апреля 2010 года / Выпуск 1, Киров. - 2010. - с.190-192.

6. Соловьева A.C. Эффективность применения пробиотика «Субалин» при вакцинации щенков песца против сальмонеллеза. / A.C. Соловьева, И. А Домский., З.Н. Бельтюкова, И.И Окулова./ Актуальные проблемы биологии в животноводстве. / Материалы 5 Международной конференции, посвященной 50-летиб ВНИИФБиП/ Боровск 2010 с. 219-220.

7. Соловьева A.C. Коррекция микрофлоры желудочно-кишечного тракта серебристого песца пробиотиком «Субалин»/ A.C. Соловьева, И.А. Домский, З.Н. Бельтюкова, Т.А. Тимошенко / Аграрная наука евро-северо-востока № 1, 2011 с. 57-62.

8. Соловьева A.C. Эффективность применения Субалина при вакцинацин щенков песца против чумы плотоядных // A.C. Соловьева, H.A. Домский, З.Н. Бельтюкова, О.Ю. Беспятых// Ве-геринарняй медицина ЛЬ 1, 2011 с 25-27.

9. Соловьева A.C. Эффективность применения Субалина при вакцинации щенков песца против сальмонеллеза // A.C. Соловьева, H.A. Домский, З.Н. Бельтюкова, Ю.С. Овсянников // Ветеринарная медицина № 3-4, 2011 с 122-124.

Сготкина Анна Сергеевна

Применение пробиотика субалин на пушных зверях семейства Сашс1ае

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Корректор

Компьютерный набор и верстка А.С. Сюткина

Подписано в печать : Формат 60/90 1/16. Печать трафаретная. Бумага офсетная. Объем. Печ.л. - 1,0. Тираж - 100 экз. Захаз КгЯЗЬ

Типография НГСХА, 603107, Н. Новгород, пр. Гагарина,97

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Сюткина, Анна Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Пробиотики, классификация и механизм их действия

1.2. Нормальная микрофлора животных и ее коррекция 20 пробиотиками

1.3. Изменения в крови животных после применения пробиотиков

1.4. Влияние пробиотиков на иммунные процессы

1.5. Применение пробиотиков в звероводстве

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы, методы и объемы исследований

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Влияние пробиотика субалин на кишечную микрофлору 52 пушных зверей

2.2.1.1. Изучение энтероценоза у молодняка енотовидной 52 собаки, его динамика после применения субалина

2.2.1.2. Изучение энтероценоза у молодняка красной лисицы, 57 его динамика после применения субалина

2.2.1.3. Изучение энтероценоза у молодняка серебристого 61 песца, его динамика после применения субалина

2.2.2. Определение антагонистической активности субалина на 70 штаммы микроорганизмов, выделенных из кишечника пушных зверей

2.2.3. Изучение изменения гематологических, биохимических 72 иммунологических показателей крови пушных зверей в результате применения пробиотика субалин

2.2.3.1. Исследования на молодняке енотовидной собаки

2.2.3.2. Исследования на молодняке красной лисицы • 75

2.2.3.3. Исследования на молодняке серебристого песца

2.2.4. Влияние субалина на иммуногенные процессы у песцов 82 после вакцинации вирусными и бактериальными антигенами

2.2.4.1. Вакцинация против сальмонеллеза

2.2.4.2. Вакцинация против чумы плотоядных

2.2.5. Результаты производственного испытания пробиотика 100 субалин

2.2.5.1. Влияние на сохранность пушных зверей

2.2.5.2. Влияние пробиотика субалина на рост и развитие молодняка пушных зверей

2.2.5.2.1. Исследования на молодняке енотовидной собаки

2.2.5.2.2. Исследования на молодняке красной лисицы

2.2.5.2.3. Исследования на молодняке серебристого песца

2.2.5.3. Влияние на качество пушно-мехового сырья

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Применение пробиотика субалин на пушных зверях семейства Canidae"

Актуальность темы. В последнее время для профилактики, лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта и повышения продуктивности животных широко применяют пробиотики. Их использование - один из простых и эффективных способов в процессе технологии выращивания разных видов животных, основанный на экологически безопасных механизмах поддержания высокого уровня колонизационной резистентности кишечника (Овод A.C., 2007; Бовкун Г.Ф., 2008; Злобин C.B., 2008; Tournot J., 1989; Isolauri Е., 1994; Biourge V., 1998; Cavazzoni V., 1998; Rowland I., 1999; Kyriakis S.C., 1999; Hoa N.T., 2000; Rolfe R.D., 2000; Dalmin G., 2001; Nikoskelainen S., 2001; Jadamus A., 2002 Alexopoulos C., 2004). Пробиотики обеспечивают физиологическую целостность многих систем организма, связанных с формированием иммунной, гормональной, эндокринной и др. систем (Сидоров М.А., 2000; Стегний Б.Т., 2005). Их широко применяют при проведении лечебно-профилактических мероприятий, для борьбы с дисбактериозами различного происхождения, для профилактики стрессов, а также в качестве стимуляторов роста для животных (Красочко П.А., 2006; Rolfe R.D., 2000; Dalmin G., 2001; Nikoskelainen S., 2001; Jadamus A., 2002). В настоящее время пробиотики на практике применяют: - в скотоводстве для коррекции микрофлоры, повышения живой массы, стимуляции иммунобиологической реактивности телят, стимуляции продуктивности дойных коров, лечения эндометритов (Тараканов Б.В., 2002; Епишин В.А., 2004; Каврус М.А., 2005; Гордеева И.В., 2008; Данилевская Н.В., 2008); в свиноводстве для повышения темпов роста поросят, их жизнеспособности, профилактики желудочно-кишечных болезней (Малик Н.И., 2002; Белявский В.Н., 2005; Грязнева Т.Н., 2005; Злобин C.B., 2008; Fuller R., 1978; Jasek S., 1998; Kyriakis S.C. 1999; Jadamus A., 2002; Alexopoulos C., 2004);

- в птицеводстве пробиотики применяют наиболее широко, их используют на курах, гусях, перепелах, утках для усиления естественной резистентности, коррекции кишечного микробиоценоза, профилактики диарей и стресса, активизации роста мышечной ткани (Белявская В.А., 2001; Егоров И.А., 2004; Оганов Э.О., 2004; Тараканов Б.В., 2004; Филоненко В., 2004; Гласкович М.А., 2005; Данилевская Н.В., 2005; Крюков О., 2005; Мартыненко С., 2005; Тараканов Б.В., 2005; Брылин А.П., 2006; Иванова А.Б., 2007; Ноздрин Г.А., 2007; Cavazzoni V., 1998 и др.);

- в рыбоводстве для профилактики инфекционных болезней и направленного формирования микробиоценоза личинок на ранних стадиях эмбрионального развития, (Асадчан Р.Л., 2005; Бурлаченко И.В., 2007; Nicoskelainen S., 2001).

Чаще всего используют препараты на основе споровых микроорганизмов, такие как Субтилис, Ветом 1, Ветом 3.3, Споробактерин, целлобактерин, Биоспорин, субалин и др. Так же используют препараты на основе бифидо- и лактобактерий (Бифифлор, Бифидум СЖК, Лактобифадол, Лактоаминоварин и др.). В свиноводстве и скотоводстве (чаще на телятах, коровах) применяют пробиотики на основе лактобактерий, бифидобактерий (Бифидумбактерин, Зоонорм), а также споровых микроорганизмов (Биод - 5, Субтилис, Целлобактерин и др.).

В целях развития российского пушного звероводства в первую очередь необходимо обратить внимание на совершенствование технологических приемов содержания, кормления и профилактики инфекционных болезней пушных зверей (Домский И.А.,2003). В последнее время все чаше появляется информация о применении пробиотиков в звероводстве. По данным Лоенко H.H. (2002), применение пробиотических препаратов на основе бифидобактерий, оказывают благоприятное воздействие на сохранность щенков песца. Барабаш Б. (2002) оценивал результаты использования пробиотиков в кормлении нутрий по влиянию на активность пищеварительных ферментов, жизнеспособность молодняка и прирост массы тела зверей.

По данным Тинаева. H.H. и Емельяненко П.А. (2006), пробиотики оказывают положительное влияние на воспроизводительную способность самок норок, плодовитость, увеличение выхода щенков в расчете на одну самку. Дорошева A.M. (2009) проводила пробиотиком фармакокоррекцию микрофлоры песцов, больных токсокарозом.

Во всех случаях получен положительный результат, но вся информация по их применению представлена только отдельными публикациями, характеризующими действие разных пробиотических препаратов.

Таким образом, получение новых комплексных данных о воздействии пробиотиков на организм зверей является актуальным направлением исследований, способствующих получению новых научных данных и практических результатов.

Цель исследований. Изучить влияние пробиотика субалин на организм пушных зверей семейства Canidae и дать предложения по его практическому использованию в звероводстве.

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. изучить микрофлору ЖКТ пушных зверей семейства Canidae и ее изменения после применения пробиотика;

2. изучить влияние пробиотика на сохранность молодняка, его рост . и развитие;

3. изучить влияние пробиотика на иммунные процессы в организме после вакцинации зверей вирусными и бактериальными антигенами;

4. дать рекомендации по внедрению препарата в ветеринарную и зоотехническую практику звероводства.

Научная новизна. Впервые получены комплексные данные по влиянию пробиотика субалин на организм разных видов пушных зверей (енотовидной собаки, красной лисицы и серебристого песца), а именно: 7

- изучена нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта пушных зверей семейства Сашс1ае, получены данные по влиянию пробиотика на ее изменение в период применения препарата;

- установлено, что субалин способствует увеличению темпов роста молодняка и повышению сохранности пушных зверей;

- изучено влияние пробиотика субалин на поствакцинальные процессы после иммунизации песцов против чумы плотоядных и сальмонеллеза.

Практическая значимость. На основании проведенных исследований разработана схема применения пробиотика субалин для пушных зверей семейства Сатёае. Даны рекомендации по его использованию в ветеринарной практике звероводства, что обеспечивает практическую целесообразность и экономическую эффективность его применения. Подготовлены дополнения для внесения в наставление по применению субалина на пушных зверях.

Апробация материалов диссертации. Материалы диссертации доложены и обсуждены:

- на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и фармакологии, ФГОУ ВПО ВГСХА протокол № 2 от 9 октября 2007 г;

- на седьмой научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знание молодых», Вятская ГСХА, 2007 г., г.Киров;

- на восьмой научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знание молодых», Вятская ГСХА, 2008 г., г.Киров;

- на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и фармакологии, ФГОУ ВПО ВГСХА протокол № 3 от 20 ноября 2008 г;

- на Ученом совете факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО ВГСХА, протокол № 2 от 27 ноября 2008 г;

- на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения П.Г. Петского, Вятская ГСХА, 2009 г., г.Киров;

- на Международной научно-практической конференции «Современные научно-практические достижения в ветеринарии», посвященной 80-летию Вятской государственной сельскохозяйственной академии, ВГСХА, 2010 г., г. Киров;

- на Международной научно-практической конференции: «Современные научно-практические достижения в ветеринарии», ВГСХА, 2011 г., г. Киров;

- на расширенном заседании кафедры морфологии и микробиологии ФГБОУ ВПО ВГСХА протокол № 4 от 25 января 2012 г.

Основные положения, выносимые на защиту:

- микроорганизмы Bifidobacterium, Lactobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, бактерии рода Proteus, Clostridium, Salmonella sp. -являются основными составляющими энтероценоза молодняка пушных зверей семейства Canidae;

- применение пробиотика субалин молодняку пушных зверей нормализует их энтероценоз, снижая относительное количество микроорганизмов группы стафилококков, стрептококков, эшерихий, обеспечивая полную элиминацию клостридий, сальмонелл и протея, способствует активному размножению пристеночной облигатно-анаэробной резидентной микрофлоры более чем на 90% представленной бифидо - и лактабактериями;

- применение субалина на молодняке пушных зверей повышает уровень их потенциального здоровья и хозяйственно-товарной полезности.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в которых изложены основные результаты проведенных исследований. Работы опубликованы в научных изданиях, в т.ч. 3 работы в журналах, рекомендованных ВАК, 3 работы в сборниках материалов международных научных конференций.

Объем и структура работы:

Диссертационная работа изложена на 140 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и производственных испытаний, обсуждения, выводов и практических предложений, списка использованной литературы, включающего 189 источников, из них 53 на иностранных языках, приложений. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 22 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Сюткина, Анна Сергеевна

Выводы:

1. Микроорганизмы Bifidobacterium, Lactobacillus, Staphylococcus, Streptococcus, E.coli, сероводородобразующие и лактозонегативные E.coli, дрожжи, бактерии рода Proteus, Clostridium, Salmonella sp. -являются основными составляющими энтероценоза молодняка пушных зверей семейства Canidae.

2. Использование пробиотика субалин на пушных зверях приводит к снижению ЖКТ количества стафилококков, стрептококков, эшерихий, полной элиминации клостридий, протея и сальмонелл, а также способствует активному размножению пристеночной облигатно-анаэробной резидентной микрофлоры, более чем на 90 % представленной бифидо - и лактобактериями.

3. Установлено, что штамм, составляющий основу пробиотического препарата, обладает высокой антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов желудочно-кишечного тракта пушных зверей.

4. Полное выведение пробиотического штамма из организма пушных зверей происходит через 5 дней после окончания его применения.

5. После применения субалина установлены следующие закономерности в изменении гематологических показателей пушных зверей: эритроцитоз, повышение уровня гемоглобина на 12%, снижение лейкоцитов до 28%, сдвиг лейкограммы вправо (снижение нейтрофилов, увеличение количества лимфоцитов).

6. В сыворотке крови у щенков пушных зверей происходит снижение уровня альбуминов, но значительно повышается количество общих иммуноглобулинов, особенно у-глобулинов.

116

7. При вакцинации зверей вирусными и бактериальными антигенами пробиотик стимулирует иммунный ответ. Отмечено практически 2- кратное увеличение титров специфических антител, увеличение бактерицидной активности сыворотки крови повышении фагоцитарной активности нейтрофилов.

8. Применение субалина на молодняке пушных зверей обеспечивает высокий уровень сохранности щенков во всех опытных группах животных, получавших препарат.

9. Применение пробиотика субалин способствует увеличению массы тела у молодняка пушных зверей: у енотовидной собаки - на 7,2%, песца - на 7,3%). Наиболее высокие показатели отмечены у щенков красной лисицы - на 22,1%,.

10. По результатам оценки качества шкур лисицы установлено, что применение пробиотика субалин способствует увеличению площади шкур зверей опытной группы на 0,82 дм , повышению качества пушно-мехового сырья. Средняя стоимость шкурки опытных зверей на 241, 62 рублей больше, чем в контроле, что обеспечивает реальный экономический эффект.

Практические предложения

В целях повышения эффективности звероводства:

- подготовлено дополнение к наставлению по применению субалина на пушных зверях;

- уточнена доза, разработана схема применения препарата,

- даны рекомендации по применению пробиотика субалин в ветеринарной и зоотехнической практике звероводства; результаты исследований используются в учебном процессе факультета ветеринарной медицины по специальности «Ветеринария» в курсе «Ветеринарная микробиология и иммунология».

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Сюткина, Анна Сергеевна, Нижний Новгород

1. Акимочкин А. И., Грязнева Т. Н. Пробиотик Биод 5 для профилактики и лечения коров при послеродовых эндомитритах // Ветеринарная медицина. 2005. № 5. С. 40.

2. Александровская О. В., Радостина Т. Н., Козлов Н. А. Цитология, гистология и эмбриология // М., 1987. С. 122-135.

3. Алямкин Ю. Пробиотики вместо антибиотиков это реально // Птицеводство. 2005. № 2. С. 17-18.

4. Антагонистическая активность биоспорина — В / Е. С. Воронин, и др. // Ветеринарная медицина / Агровет. М., 2002. № 1. С. 15.

5. Антивирусная активность пробиотиков из бацилл / Н. В. Чудновская и др. // Доклады АН Украины. 1995. № 2. С. 124-126.

6. Антонов В. ЯБлинова П. Н. Лабораторные исследования в ветеринарии. М. : Колос, 1971. 640 с.

7. Асадчая P.JI. Использование пробиотиков для профилактики бактериальных болезней рыб // Весщ Нацыянальнай акадэмп навук Beiapyci, 2005. №5. С. 183-185.

8. Ашмарин И. П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л., 1962. 180 с.

9. Белявская В. А. Рекомбинантные проботики // НИКТИ БАВ : сборник научных трудов. Бердск, 1996. С. 190-197.

10. Белявский В. Н., Кот Н. И., Арабкович А. А. Использование пробиотика «Эстуре» для повышения жизнеспособности поросят-гипотрофиков // Сельское хозяйство проблемы и перспективы : сборник научных трудов. Гродно. 2005. Т. 4, Ч. 2. С. 15-18.

11. Бергер М. О. Методы общей бактериологии / под ред. М. О. Бергера. М., 1983. С. 23-56.

12. Бергер М. О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследований / под ред. М. О. Бергера. М., 1982. С. 23-234.

13. Берестов В. А. Звероводство. М., 2002.- 480 с.

14. Берестов В. А. Лабораторные методы оценки состояния пушных зверей. Петрозаводск, 1981. 150 с.

15. Биологические эффекты интерферона, продуцируемого рекомбинантными бактериями препарата пробиотика субалина / В. А. Белявская и др. // Микробиология, эпидемиология, иммунология. 2002. № 2. С. 24-31.

16. Бондаренко В. М., Белявская В. А. Конструирование генно-инженерных препаратов пробиотиков и их безопасность - Опубликовано в Интернете на сайте http:// www.sastroportal.ru/.

17. Брылин А. П. Эффективный пробиотик в интенсивном птицеводстве // Ветеринария. 2006. № 10. С. 16-17.

18. Бурлаченко И. В., Малик Е. В. Применение пробиотиков на ранних стадиях эмбрионального развития ленского осетра // Ветеринария. 2007. № 3. С. 47-52.

19. Влияние пробиотического препарата с иммунорегуляторным компонентом на некоторые иммунологические показатели у лабораторных животных / А. П. Панин и др. // ВГНКИ : сборник научных трудов. М. 1996. С. 139-143.

20. Волков М. Ю. Современные биотехнологии ветеринарных препаратов // Ветеринария. 2006. № 10. С. 16-17.

21. Выживание B.subtilis ВКПМ 7092 в желудочно-кишечном тракте крупного рогатого скота / Е. А. Ставский и др. // Ветеринария. 2006. № 12. С. 18-22.

22. Газизов В. 3., Жданов С. Л., Бояринцев Л. Е. Физиологические и зоогигиенические основы повышения продуктивности пушныхт зверей клеточного содержания. Киров. 2007.912 с.

23. Гайдамака А. В. Исследование иммунологического статуса свиней в промышленных комплексах в связи с вакцинопрофилактикой сальмонеллеза : автореф. дис. . канд. биол. наук. Харьков, 1999. 21 с.

24. Гласкович М. А. Показатели естественной резистентности цыплят-бройлкров при применении «Биофлора» // Сельское хозяйство -проблемы и перспективы : сборник научных трудов. Гродно. 2005. Т. 4, ч. 2. С. 170-172.

25. Гордеееа И. В. Пробиотики в лечение болезней репродуктивных органов коров / под ред. Л. Г. Демчик // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 2. С. 46-50.

26. Грязнева Т. Н. Применение пробиотика Биод-5 в рационах кормления поросят-отъемышей // Зоотехния. 2005. № 8. С. 15.

27. Данилевская Н. В. Фармакологические аспекты применения пробиотиков / Н.В. Данилевская // Ветеринария. 2005. № 11. С. 6-9.

28. Данилевская Н. В., Кудилкин Р. С. Влияние пробиотика лактобифадол на продуктивность и сохранность поросят мясных пород на подсосе и доращивании // Ветеринария сельскохлозяйственных животных. 2008. № 4. С. 56-58.

29. Данилевская Н. В., Кудилкин Р. С. Влияние пробиотика лактобифадол на продуктивность поросят мясных пород на подсосе и доращивании // Ветеринария и кормление. 2005. № 3. С. 16-17.

30. Данилевская Н., Субботин В. Лактобифадол для стимуляции продуктивности дойных коров // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 12. С. 49-52.

31. Данилевская И., Субботин В., Тишкин Н. Пробиотик: действие на перепелов разных пород // Птицеводство. 2005. № 8. С. 14-15.

32. Домский И. А. Новые средства и методы специфической профилактики сальмонеллеза, чумы плотоядных и аденовирусных инфекций пушных зверей : автореф. дис. . д-ра вет. наук. М., 2003. 41*с.

33. Доронин-Доргеленский Е. А., Егорова Г. Г., Несчисляев В. А.

34. Лечебно-профилактические аспекты применения пробиотиков в ветеринарии // Фармокологические и экологические аспекты ветеринарной медицины : материалы науч.-практ. конф. фармакологов РФ. Троицк. 2007. С. 84-90.

35. Доромееа A. M. Фармакокоррекция кишечной микрофлоры пробиотиком «Ветом 1.1» у песцов, больных токсаскаридозом // Ветеринарная медицина. 2009. № 3. С. 36-41.

36. Жаров А. В., Зимина Е. В. Влияние Т- и В- активинов на крыс при экспериментальном сальмонеллезе // Ветеринария. 2001. № 9. С. 23-26.

37. Запруднов А. М. Мазанкова JI. Н. Микробная флора кишёчника и пробиотики : методическое пособие. М. 2001. 32 с.

38. Злобин С. В. Пробиотики серии Субтилис в интенсивном свиноводстве // Зоотехния. 2008. № 11. С. 21-22.

39. Иммуностимулирующее влияние перорального введения бифидобактерий различных штаммов в эксперименте / Э.Н. Трушина и др. // Вопросы питания. 2006. Т. 75. № 5. с. 70-74.

40. Использование пробиотика при откорме гусят на мясо / Б. Тараканов и др. // Птицеводство. 2004. № 5. С. 24-25.

41. Использование пробиотиков для профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта и терапии животных / П.А. Красочко и др. // 2006. С. 3-55.

42. Использование пробиотических препаратов для коррекции иммунобиологической реактивности у телят / М. А. Каврус и др. // Сельское хозяйство проблемы и перспективы : сборник научных трудов. Гродно. 2005. Т. 4, ч. 2. С. 147-150.

43. Карамян К. Новые аспекты профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта норок // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 9. С. 48-53.

44. Каширская Н. Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры // Русский медицинский журнал. 2000. № 13. С. 14.

45. Консорциум лактобацилл для защиты пищи от бактериальной контаминации / Тулемисова Л. А. и др. // Биотехнология состояние и перспективы развития : материалы I Междунар. конгресса (Москва, 14-18 октября 2002 г.). М. : ЗАО «ПИК Максима», 2002. С. 168.

46. Коррекция нарушения микробиоценоза чаловека с помощью пробиотиков / М. Ю. Волков и др. // Вопросы питания. 2006. № 4. С. 32-34.

47. Крюков О. Коррекция кишечного микробиоценоза у бройлеров // Птицеводство. 2005. № 5. С. 33-34.

48. Кузьмина Т. А., Смирнова О. В. Определение бактерицидной активности крови методом фотонефелометрии // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1966. № 4. С. 8-11.

49. Литвяков Н. В. Иммунологические механизмы антибластомного и химиомодулирующего действия рекомбинантного пробиотика субалина // Студент и научно-технический прогресс: материалы

50. XXXVII Междунар. студенческой конф. Новосибирск, 1999. Ч. 1 : Биология. http://www.nsu.m/conf/issc/99/biol2/index.htm.

51. Лыкова Е. А., Бондаренко В. М., Изачик Ю. А. Коррекция пробиотиками микроэкологических и иммунных нарушений при гастродуаденальной патологии у детей // Микробиология, эпидемиология, иммунология. 1996. № 2. С. 88-91.

52. Майорова А. С. Влияние пробиотиков с антитоксической активностью на продуктивность кроликов : автореф. дис. . канд. вет. наук. Родники, 2007. 23 с.

53. Малик Н. И., Панин А. Н. Ветеринарные пробиотические препараты // Ветеринария. 2001. № 1. С. 046-48.

54. Малик Н. И., Панин А. Н., Вершинина И. Ю. Пробиотики: теоретические и практические аспекты // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2006. № 5. С. 58-62 ; № 6. С. 48-50.

55. Малое В. А. Нозокоминальная инфекция, вызванная Clostridium difficale // Доктор. 1997. № 1. С. 41-45.

56. Мартыненко С., Сипайлова О. Пробиотик споробактерин // Птицеводство. 2005. № 1. С. 25.

57. Медицинские лабораторные технологии : справочник / под ред. А. И. Карпищенко. СПб. : Интермедика. 2002. Т. 2. 600 с.

58. Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой энтеробактериями. М., 1999. 4 с.

59. Микроэкологические изменения кишечника и их коррекция с помощью лечебно-профилактических препаратов / В. М. Бондаренко и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колонопрактологии. 2003. № 20 (Приложение). С. 66-76.

60. Мухамадьярова А. Л. Влияние пробиотика Реалак на становление кишечного биоценоза телят // Современные научно-практические достижения в ветеринарии. Киров, 2010. Вып. 1. С. 130-134.

61. Новые пробиотические препараты для животноводства / Р. Г. Шайдуллина и др. // Аграрная Россия. 2000. № 5. С. 64-69.

62. Нормобиоценоз и дисбактериоз молодняка / Бовкун Г. Ф.и др. // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 2. С. 12-17.

63. Овод А. С., Мосейчук В. В. Профилактика диарей новорожденных телят пробиотиками // Ветеринария. 2007. № 2. С. 6-7.

64. Овсянников Ю. С. Оценка биологических свойств культур лактобактерий и сенной палочки // Ветеринарная медицина. 2009. № 1-2. С, 51-54;

65. Овсянников Ю. С. Пробиотики в ветеринарии // Ветеринарная медицина. 2009. № 1-2. С. 66-68.

66. Овчинников А. А., Пластинина Ю. В., Ишимов В. А.

67. Эффективность применения пробиотиков в рационах цыплят-бройлеров // Фармакологические и экологические аспекты ветеринарной медицины : материалы науч.-практ. конф. фармакологов РФ. Троицк, 2007. С. 216-218.

68. Овчинников А. А., Пластилин Ю. В., Басков В. Н.

69. Эффективность использования пробиотика и сорбента в рационах цыплят-бройлеров // Фармакологические и экологические аспекты ветеринарной медицины : материалы науч.-практ. конф. фармакологов РФ. Троицк, 2007. С. 219-221.

70. Оганов Э. О., Жунушов А. Т. Воздействие пробиотика СБА на рост уток // Ветеринария. 2004. № 12. С. 46-47.

71. Окулова И. И. Иммуноморфогенез у песцов, вакцинированных против сальмонеллеза : автореф. дис. . канд вет. наук. СПб., 2009. 18 с.

72. Панин А. И., Малик Н. И. Пробиотики неотъемлемый компонент рационального кормления животных // Ветеринария. 2006. № 7. С. 3-6.

73. Панин А. П., Мягких Ф. Ф. Современные пробиотики -высокоэффективные средства повышения сохранности молодняка в звероводстве // БИО. 2004. № 6 С. 36-37.

74. Применение лекарственного средства «Баксин-вет» в песцеводстве / И. В. Тихонов, и др. // Ветеринарная медицина. М. : Агровет, 2008. № 4. С. 3-6.

75. Пробиотик «Сахарабактисубтил» в профилактике и лечении диарейных заболеваний телят и поросят : методические рекомендации / Н. П. Тарабукина и др. // Якутск, 2003. С. 11-12.

76. Пробиотик «Субтилис» полезен для цыплят-бройлеров // В.Филоненко и др. // Птицеводство. 2004. № 2. С. 21-22.

77. Пробиотик Зоонорм при эндометрите коров / В. А. Епишин и др. // Ветеринария. 2004. № 7. С. 33-34.

78. Пробиотик лактоамиловарин стимулирует рост цыплят / И. Егоров и др. // Птицеводство. 2004. № 8. С. 32-33.

79. Пробиотическая профилактика и терапия дисбактериозов / Бовкун Г. Ф. и др. // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. №4. С. 28-31.

80. Разработка способов стабилизации биомассы при изготовлении128лекарственных форм лактобактерина / Н. Н. Чугунова и др. // Микробиология, эпидемиология и иммунобиология. 1997. № 2. С. 102-104.

81. Роль бифидогенных факторов в профилактике и терапии дисбактериозов. / Бовкун Г. Ф. и др. // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 10. С. 51-55.

82. Сидоров М. А., Субботин В. В. Нормальная микрофлора животных и ее коррекция пробиотиками // Ветеринария. 2000. № 11. С. 1722. •

83. Смирнов В. В., Коваленко Н. К Пробиотики на основе живых культур микроорганизмов // Микробиология. 2002. № 1. С. 53-58.

84. Смирнов В. В., Резник С. Р., Василевская И. А.

85. Спорообразующие аэробные бактерии-продуценты биологически активных веществ. Киев : Наукова Думка, 1982. 278 с.

86. Смирнов В. В., Резник С. Р., Сорокулова И. Б. Дискуссионные вопросы создания и применения бактериальных препаратов для коррекции микрофлоры теплокровных // Микробиологический журнал. 1992. № 6. С. 8294.

87. Смирнова Н. Н. Гомеостаз енотовидных собак клеточного разведения : автореф. дис. . канд. биол. наук. Л., 1987. 18 с.

88. Сорокулова И. Б. Влияние пробиотиков из бацилл на функциональную активность макрофагов // Антибиотики и химиотерапия. 1998. №2. С. 20-23.

89. Спасская Т. А. Экологическая биотехнологическая129альтернатива: Пробиотики вместо антибиотиков // Экология и охрана окружающей среды : тез. докл. 4-й Междунар. (7-й Всерос.) научн.-практ. конф., Рязань, 28-30 сент. 1998 г. Рязань, 1998. С. 201-202.

90. Специфическая профилактика сальмонеллеза сельскохозяйственных животных / Б. Ю. Шустер и др. // Ветеринария. 1994. №2. С. 11.

91. Субботин В. В. Желудочно-кишечные болезни поросят с симптомокомплексом диареи: причины, профилактика и терапия // Ветеринария и кормление. 2005. № 3. С. 12-13.

92. Субботин В. В. Профилактика и терапия инфекционных болезней желудочно-кишечного тракта животных (экологические аспекты) // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. № 4. С. 18-21.

93. Сюрин В.Н., Фомина Н.В., Белоусова Р.В. Частная ветеринарная вирусология. М.: Колос, 1984. 472с.

94. Тараканов Б. В., Николичева Т. А., Мухина А. И. Микрофлора и продуктивность бычков при применении целлобактерина // Ветеринария. 2002. № 2. С. 42-47.

95. Тараканов Б., Никулин В., Палагина Т. Новый пробиотик микроцикол // Птицеводство. 2005. № 2. С. 19-20.

96. Тараканов В. Б. Использование пробиотиков в животноводстве // Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимиии питания сельскохозяйственных животных Российской академии сельскохозяйственных наук: сборник. Калуга. 1998. С. 5-6.

97. Тараканов В. БНиколичева Т. А. Новые биопрепараты для ветеринарии // Ветеринария. 2000. № 7. С. 45-50

98. Тимербаева P. X. Усовершенствование технологии производства лактобактерина // Актуальные вопросы разработки, производства и фармацевтических препаратов : материалы Всерос. конф. Уфа : РИО ГУП «Иммунопрепарат», 2000. С. 193-198.

99. Тинаев Н. Н., Емельяненко П. А. Эффективность применения пробиотиков нового поколения в норководстве // Звероводство и кролиководство. 2006. № 4. С. 5-6.

100. Тихонов И. В., Анохина О. В. Пробиотики нового поколения // Международное сотрудничество и развитие биотехнологии в Кировской области : сб. науч. трудов. Киров : Экспресс, 2008. С. 6-7.

101. Тихонов И. В., Анохина О. ВВолков М. Ю. Новые пробиотические препараты с гепатопротективной активностью // X Юбилейный Международный Славяно-Балтийский научный форум «Гастро 2008» : сб. науч. тр. СПб. : ООО «Гастро», 2008. № 2-3. С. 5-6.

102. Тихонов И. В., Гаврилов В. А. Проблемы и перспективы биотехнологии // Ветеринарная медицина / Агровет. М., 2003. № 3. С. 26-27.

103. Тихонов И. В., Черкасов Н. А., Ковтун А. Л. Технология приготовления оральной (таблетированной) формы вакцины против чумы // Актуальные вопросы профилактики опасных инфекционных заболеваний. Киров, 1991. С. 90-91.

104. Тихонов И.В. Совершенствование технологии производства пробиотика "Биод-5" и методов его контроля // Ветеринарная медицина. М : Агровет, 2004. № 4. с. 3-6.

105. Трещанина Н. А., Серых М. М., Фролов Ю. П. Выделение чистой культуры бактерий. Изучение свойств выделенных штаммов // Техника микробиологического исследования. Самара : Восход, 1997. 76 с.

106. Тро цепко Н.И., Белоусова Р.В., Преображенская Э.А.

107. Практикум по ветеринарной вирусологии // 2-е издание перераб. и доп. М. : Колос, 1999.-272 с.

108. Тхруни Ф. Н. Исследование антибактериальных свойств новых штаммов // Биотехнология состояние и перспективы развития : материалы I Междунар. конгресса (Москва, 14-18 октября 2002 г.). М. : ЗАО «ПИК Максима», 2002. С. 345-346.

109. Урсова Н. И. Итоги и перспективы использования Хилак®форте в пратической медицине // Трудный пациент. 2005. № 2. http://www.t-pacient.ru/archive/n2-2005/n2-2005 4.html.

110. Учайкин В. Лечение острых кишечных инфекций у детей с использованием пробиотиков // Медицинская газета. 2002. № 79. С. 10.

111. Ушакова Е. А. Роль пробиотиков в гастроэнтерологии // Фарматека. 2007. № 6. С. 18-25.

112. Ферментативный пробиотик : два в одном / Ш. Игматулов и др. // Птицеводство. 2004. № 7. С. 10-11.

113. Фещенко В. М. Применение Ветома 4 для лечения поросят, больных гастроэнтеритом // Студент и научно-технический прогресс : материалы XXXVII Междунар. студенческой конф. Новосибирск, 1999. Ч. 1 : Биология. С. 101-102.

114. Цогоева Ф., Кизииов Ф., Темираев Р. Селен и токоферол на фоне пробиотика // Птицеводство. 2005. № 10. С. 21-22.

115. Шевелева С. А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса // Вопросы питания. 1999. № 2. С. 32-39.126 .Шевелуха В. С., Калашникова Е. А., Воронин Е. С.

116. Шкурки лисицы клеточного разведения невыделанные : ГОСТ 2790-88. М., 1988. 8 с.

117. Шляхов Э. Н. Иммунология, иммунодиагностика инфекционных . болезней. Кишинев : Картя Молдовеняскэ, 1977. 423 с.

118. Шустер Б. Ю. Вакцины из аттенуированных штаммов сальмонелл : автореф. дис. . д-ра вет. наук. М., 1988. 36 с.

119. Электронный ресурс http: disbac.ru Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека http://www.disbac.ru/php/concept.php?id=567//

120. Эффективность лечения острых кишечных инфекций, хронических болезней желудочно-кишечного тракта и вирусного гепатита В большими дозами отечественного бифидумбактерина форте / Н.М. Грачева и др. // Военно-медицинский журнал. 1999. № 5. С. 51-57.

121. Ющук Н.Д., Бодров JI.E. Острые кишечные инфекции: диагностика и лечение // Медиуина. 2001. С.244-253. http://www.eurolab.ua/encyclopedia/565/46065//

122. A review on the use of microorganisms as probiotics / B. Gomes-Gil et al. // Reviews Latin-American Microbiology. 1998. Vol. 40. No. 3-4. P. 166172.

123. Adams Martin R. Safety of industrial lactic acid bacteria // Biotechnol. 1999. Vol 68. No. 2-3. P. 171-178.

124. AT oligonucleotides inducing В lymphocyte activation exist in probiotic Lactobacillus gasseri / H. Kitacawa et al. // International journal Food Microbial. 2001. Vol. 65. No. 3. P. 149-162.

125. Berg R. D. Probiotics, prebiotics, or conbiotics // Treds microbial. 1998. Vol. 6. P. 89-92.

126. Bergogne-Berezin E. Treatment and preventation of antibiotic associated diarrhea // International journal Antimicrobials Agents. 2000. Vol. 16. No. 4. P. 521-526.

127. Bmer G. W., Farland L. W., Surawicz C. M. Bioterapeutuc Agents and Infection Diseases. Human Press. 1999. P. 316.

128. Cavazzoni V., Adami A., Castrovilli C. Performance of broiler chickens supplemented with Bacillus coagulans as probiotic // British Poultry Sciencel998. Vol. 39. No. 4. P. 526-529.

129. Chaitov L., Trenev N. Probiotics. Thorsons Publishing Group, Northampton shire, England 1990.

130. Characterization of Bacillus 8. Species Used for Oral Bacteriotherapy and Bacterioprophylaxis of Gastrointestinal Disorders / N. T. Hoa et al. // Applied and Environmental Microbiology.2000. Vol. 66. No. 12. P. 5241-5247.

131. Characterization of the Properties of Human and Dairy-Derived Probiotics for Prevention of Infectious Diseases in Fish / S. Nikoskelainen et al. // journal Applied and Environmental Microbiology.2001. Vol. 67. No. 6. P. 24302435.

132. Cheng C.C., Nagasava T. Effect of peptides and amino acid produced by Lactobacillus casei in milk on the production of bifidobacteria // Japanese J. Zootechnical Science. 1984. No. 55(5). P. 339-349.

133. Collins M. D., Gibson G. R. Probiotics, prebiotics, and synbiotics: approaches for modulating the microbial ecologi of the gut //journal Clinical Nutrition 1999. Vol. 69. No. 5. P. 1052-1057.

134. Dalmin G., Kathiresan K., Purushothaman A. Effect of probiotics on bacterial population and health status of shrimp in culture pond ecosystem // Indian journal Experimental Biology. 2001. Vol. 39. No. 9. P. 939-942.

135. De Simone C., Ciardi A., Grassi A. Effect of. Bifidobacterium longum and Lactobacillus acidophilus on gut mucosa and peripheral blood B-lymphocytes // Immunopharmacol. 1992. Vol. 14. No. 1-2. P. 41-43.

136. Elkins C. A., Savage D. C. Identification of genes encoding conjugated bile salt hydrolase and transport In Lactobacillus johnsonii 100-100 // journal Bacteriology. 1998. No. 180. P. 4344-4349.

137. Fuller R. Probiotics in man and animals // journal Applied Bacteriology. 1989. Vol. 66. No. 5. P. 365-378.

138. Fuller R. A growth industry // Pig farming, 1990.-38.-10.- P. 50.

139. Fuller R., Barrow P. A., Brooker B. E. Bacteria associated with the gastric epithelium of neonatal pigs // journal Applied and Environmental Microbiology. 1978. Vol. 35. No. 3. P. 582-591.

140. Gissen A. S. Off probiotics, prebiotics and synbiotics // ISS VRP'S Inc. Vit Res. Prod. Newsletters. USA. 1995. P. 111-117.

141. Green D. H. Characterization of two Bacillus probiotics // journal Applied and Environmental Microbiology. 1999. Sept. P. 4288-4291.

142. Gupta M., Kaur M., Gupta K. Lytic effect of Bacillus subtilis elastase on gram-positive and negative bacteria // Indian journal Experimental Biology. 1992. Vol. 30. No. 5. P. 380-383.

143. Inhibition of in vitro growth of enteropathogens by new Lactobacillus isolates of human intestinal origin / L. Drago et al. // FEMS Microbiol. Lett. 1997. No. 153 (2). P. 455-463.

144. Interactions between epithelial cells and bacteria / J. I. Gordon et al. // Science. 1997. No. 276. P. 965.

145. Jasek S., Knecht D. Efektywnosc stosowania Toyoceryny w zywieniu loch i prosiat. Toyoceryna szansa dla mlodych zwierat // Informator Paszowy. 1998. No. 8. P. 32-39.

146. Kullen M. J., Klaenhammer T. R. Genetic modification of intestinal lactobacilli and bifidobacteria // Currient Issues Molecular Biology. 2000. Vol. 2. No. 2. P. 41-50.

147. Macfarlane G.N. Probiotics and prebiotics: can regulatiny the activités'of intestinal bacteria benefit health? // British Medical Journal. 1999. Vol. 318. No. 7189. P. 999-1003.

148. Maruta K. Probiotics or antibiotics // World Poultry. 1999. No. 3. P.112-12

149. Morishita Y. The effects of various dietary substances on the intestinal microflora // Journal Germfree Life Gnotobiologyl991. Vol. 21. No. 1. p. 344-346.

150. Mucosal immune responses and protection against tetanus toxin after intranasal immunization with recombinant Lactobacillus plantarum / C. Grangette et al. //• Infect Immun. 2001. Vol. 69. No. 3. P. 1547-1553.

151. Mulder R. W. Probiotics as a tool against Salmonella contamination // World Poultry. 1991. Vol. 7. No. 3. P. 36-37.

152. Mc Far/and L. I. G. W. Elmer Biotherapeutic agents: past, present and future // Microecology Ther. 1995. No. 23. P. 46-73.

153. Oral bacteriotherapy for viral gastroenteritis / E. Isolauri et al. // Digestive Diseases and Sciences. 1994. Vol. 39. P. 2595-2600.

154. Parker R.B. Probiotics, the other half of the antibiotic story / Animal Natural Health / 1974.-29. P. 4-8.

155. Probiotic bacteria enhance murine and human intestinal epitelial barrier function / K. Madsen et al. // Gastroenterology. 2001. Vol. 121. No. 3. P. 580-591.

156. Tannock, G.W. 1999a. "Probiotics A Critical Review." Horizon Scientific Press, Norfolk, England. Tannock, G.W. 1999b. The intestinal microflora. In "Probiotics A Critical Review," ed. G.W. Tannock, pp. 5-14, Horizon Scientific Press, Norfolk, England.

157. Probiotics: from myth to reality. Demonstration of functionality in animal models of disease and human clinical treans / C. Dunne et al. // Antonie Van Leewwenhoek. 1999. Vol. 76. P. 279-292.

158. Renner E. Role of cultured and culture-containing dairy foods in health. In: Imerntl. Dairy Federal // Cultural Dairy Products in Human Nutritional Bull of the IDF. 1987. No. 195.

159. Rolfe R. D. The role of probiotic cultures in the control of gastrointestinal health //journal Nutrition 2000. Vol. 130. No. 2 (Suppl). P. 39654025.

160. Rowland I. Probiotics and benefits to human health the evidence in favour//Environ. Microbiol. 1999. Vol. 1. P. 375-382.

161. Salminen S., Isolauri E., Salminen E. Clinical uses of probiotics for stabilizing the gut mucosal barrier: successful strains and future challenges // Antonie Van Leeuwenhoek. 1996. Vol. 70. P. 347-358

162. Salmonella enterica infections: an emerging infectious disease / P. L. McDonough et al. //journal Clinical Microbiology 1999. No. 37. P. 2418-2427.

163. Selective stimulation of bifidobacteria in the human colon by oligofructose and inulin. / G. R. Gibson et al. // Gastroenterology. 1995. No. 108. P. 975-82.

164. Smith B.R. Immunity to Salmonella infections in cattle and application of vaccines // WHO. Munich. 1986. 13-17 October.

165. Tannock G.W. Normal microflora: an introduction to microbes inhibiting the human body. // New York: Chapman& Hall. 1995. 278 p.

166. Tannock G. W. Analysis of the intestinal microflora: A renaissance// Antonie van Leenwenhoek. 1999. No. 76. P. 265-278.

167. The effect of probiotic LSP 122 on the control of post-weaning diarrhoea syndrome of piglets / S. C. Kyriakis et al. // Reviews Veterinary Science 1999. Vol. 67. No. 3. P. 223-228.

168. The use of probiotics in the diet of dogs / V. Biourge et al. // journal Nutrition 1998. Vol. 128. No. 12 (Suppl). P. 2730S-2732S.

169. Tournot J. Applications of probiotics to animal husbandry // Reviews Science Technology off Int Epizootology. 1989. Vol. 8. P. 551-566.

170. Wiestel L., Rehm //., Bisping B. Improvement of tempe fermentations by application of mixed cultures consisting of Rhizopus sp. and bacterial strains // Apply microbial a biotechnology 11 1997. Vol. 47. No. 3. P. 218-225.