Поликомпонентные пробиотические препараты - конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке

Алешкин, Андрей Владимирович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Поликомпонентные пробиотические препараты - конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке
ВАК РФ 03.01.06, Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат диссертации по теме "Поликомпонентные пробиотические препараты - конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке"

На правах рукописи

Алешкин Андрей Владимирович

ПОЛИКОМПОНЕНТНЫЕ ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ -КОНСТРУИРОВАНИЕ, ПРОИЗВОДСТВО И СТРАТЕГИЯ ИХ ПРОДВИЖЕНИЯ НА РОССИЙСКОМ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОМ РЫНКЕ

03.01.06 - биотехнология 03.02.03 - микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва 2011

1 7 ОНЗ 2011

4854456

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Научный консультант: Заслуженный деятель науки,

доктор медицинских наук, профессор Афанасьев Станислав Степанович Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук Ведущая организация:

Федеральное государственное учреждение науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора (п. Оболенск, Московская область).

Защита диссертации состоится Меф^Ь- 2011 г. в часов

на заседании диссертационного совета Д 208.046.01 при Федеральном государственном учреждении науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора по адресу: 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д.10.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора по адресу: 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д.10.

Автореферат разослан «_»_2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук О.Ю. Борисова

Бондаренко Виктор Михайлович

Феклисова Людмила Владимировна Алиева Елена Васильевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

В последнее десятилетие заметно возрос интерес к проблеме поддержания и восстановления микроэкологического статуса человека. Для этих целей все шире используют бактериотерапевтические препараты -пробиотики. Повышенное внимание к пробиотикам вызвано ростом контингента лиц, требующих коррекции аутофлоры, и прогрессом в изучении состава и биологических свойств микрофлоры, заселяющей различные биотопы человеческого организма, ее роли в поддержании здоровья макроорганизма; использованием микроэкологических подходов к раскрытию этиопатогенеза различных заболеваний; выявлением полезных свойств у микроорганизмов, не встречающихся в норме в биоценозах человека (Воробьев A.A., 2004; Грачева Н.М., 2004; Глушанова H.A., 2005; Бондаренко В.М., 2007; Шевелева С.А., 2007; Шендеров Б.А., 2009).

Эффективность бактерийных препаратов определяется совокупностью биологических свойств штаммов, входящих в их состав (Бондаренко В.М., 2003; Шендеров Б.А., 2005; Феклисова JI.B., 2007). Отдельные производители расширили спектр культур, используемых в составе новых пробиотиков, включив в их рецептуру спороносные аэробные бациллы (род Bacillus), энтерококки, пропионовокислые бактерии, аэрококки, сахаромицеты, высшие грибы (Aspergillus, Risopus, Cordiceps) (Минушкин О.Н., 1998; Онищенко Г.Г., 2002; Шендеров Б.А., 2005; Новокшенов A.A., 2007). Другие - пытаются повысить биологическую активность пробиотиков за счет разработки комплексных препаратов на основе специально подобранных композиций штаммов, сочетания компонентов пре- и пробиотического происхождения, а также добавляя продукты метаболизма микрофлоры (Ардатская М.Д., 2002; Алешкин В.А., 2003; Бархатова Т.В., 2003; Шендеров Б.А., 2005; Амерханова A.M., 2009).

С одной стороны, расширение ассортимента пробиотиков способствует удовлетворению все более возрастающих требований клиники в антидисбиозных препаратах. Но, с другой стороны, настораживает увеличение количества пробиотиков, содержащих в своем составе нетипичные для нормофлоры человека микроорганизмы или потенциально патогенные виды факультативной части биоценоза. В этой связи представляется актуальным использование современных методов оценки биосовместимости экзогенных и индигенных микробных штаммов, а также компонентов бактериального и

растительного происхождения в процессе рецептуростроения, технологической отработки и дальнейшего производства новых поликомпонентных пробиотических препаратов.

Современные клинические исследования открывают все новые стороны позитивного воздействия пробиотиков на физическое состояние человека, что позволяет расширить сферу их применения в комплексных лечебно-профилактических мероприятиях при некоторых инфекционных и неинфекционных патологических состояниях, в частности, хеликобактер-ассоциированной язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гемабластозах и солидных опухолях, дислипидемии и ротавирусной инфекции (Сидоренко C.B., 2001; Cats А., 2003; Lebato-Mendizabal Е., 2003; Alimonti А., 2004; Eremina Е. L., 2008). Однако развитие новых клинических направлений подразумевает создание инновационных медицинских технологий, позволяющих в полной мере реализовывать биологический потенциал поликомпонентных пробиотических средств.

По данным маркетинговых исследований ЗАО «Группа ДСМ», проведенных в 2009 году, около 77% отечественного фармацевтического рынка в стоимостном выражении составляет импортная продукция, в то же время, согласно отчету, представленному Контрольным управлением Президента РФ, замещение импортных лекарственных препаратов отечественными возможно более чем по 6000 наименований. В рамках направления, заданного правительством в принятом документе «Концепция долгосрочного социально-экономического развития Российской Федерации на период до 2020 года», одной из актуальнейших задач российского биотехнологического сектора является создание высокотехнологичных производств по выпуску конкурентоспособных пробиотических препаратов, которые по своим потребительским характеристикам не должны уступать импортным аналогам. Основным направлением прикладных исследований в этой связи является создание стандартных условий производства, соответствующих GMP, оптимизация технологических процессов и внедрение инновационных методик получения пробиотиков.

повышения конкурентоспособности с точки зрения теории конкуренции помогает направить усилия по совершенствованию деятельности фирмы в русло правильной, подходящей именно для нее стратегии конкурентной войны (Гурков И.Б., 2006). Новые коммерческие фирмы, такие как «Биокад», «Амфита», «Партнер» в отличие от большинства приватизированных предприятий лучше приспособлены для бизнеса в условиях рыночной экономики. Однако и для них выбор оптимальной стратегии на различных этапах жизненного цикла является «болезненным». В сверхбыстро меняющейся российской экономике (где сегодня выгодно биржевое дело, завтра - импорт автомобилей) укрепиться для получения высоких прибылей в сфере производства лекарственных средств, тем более, производимых с помощью суперсовременных наукоемких биотехнологических методов - серьезная стратегическая цель.

Цель исследования

Разработать теоретические и практические принципы конструирования, производства поликомпонентных пробиотических препаратов, алгоритмы их эффективного применения при инфекционной и неинфекционной патологии и продвижения на российском фармацевтическом рынке.

Задачи исследования

1. Разработать методы и теоретически обосновать необходимость оценки биосовместимости промышленно перспективных пробиотических штаммов при конструировании поликомпонентных синбиотических препаратов.

2. Создать структуру универсального опытно-производственного биотехнологического участка по выпуску поликомпонентных пробиотических препаратов.

3. Разработать синбиотическую конструкцию жидких пероральных иммунобиологических препаратов («Габрифлорин-бифидо» и «Габрифлорин-лакто»). Отработать рецептуру и технологию их производства. Оценить микробиологические, санитарно-гигиенические характеристики, сохранность всех компонентов препаратов для определения гарантийного срока хранения. Осуществить их санитарно-гигиеническую экспертизу и государственную регистрацию на Федеральном уровне.

технологию производства. Оценить микробиологические, санитарно-гигиенические характеристики, сохранность всех компонентов субстанции для определения гарантийного срока хранения. Осуществить их санитарно-гигиеническую экспертизу и государственную регистрацию на Федеральном уровне.

5. Расширить спектр клинического использования и разработать новые алгоритмы применения поликомпонентных пробиотических препаратов в инфекционной и неинфекционной патологии.

6. Сформулировать стратегию развития биотехнологической компании в условиях российского фармацевтического рынка.

Научная новизна исследования

На основе использования современных микробиологических, биохимических и молекулярно-генетических методов, впервые предложены подходы к оценке биосовместимости пробиотических штаммов между собой в консорциуме поликомпонентного препарата и с индигенной микрофлорой человека.

Впервые разработана структура универсального биотехнологического участка по выпуску поликомпонентных пробиотических препаратов и методология оценки соответствия ОМР созданных на нем стандартных условий производства (заявки на изобретение № 2010145025 и № 2010141571).

На базе современного биотехнологического комплекса отработана рецептура и технология получения новых поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм («БАД-субстанция бифидобактерий и/или лактобацилл» ТУ 9197-007-38989935-08, «Габрифлорин» ТУ 9197-00638989935-08).

Совместно с ведущими научно-практическими учреждениями г. Москвы, г. Казани и г. Астрахани разработаны новые алгоритмы клинического применения поликомпонентных пробиотических препаратов при ротавирусной инфекции, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, онкопатологии, а также для профилактики и снижения риска развития сочетанной дислипидемии.

Впервые дано системное обоснование применения и эффективности комплекса маркетинга в соответствии с выбранной конкурентной стратегией биотехнологического предприятия, разработаны методические подходы к формированию ассортимента продукции, определению потенциально перспективных пробиотических ниш, выявлены необходимые с точки зрения потребителя характеристики позиционирующихся на них поликомпонентных препаратов.

Теоретическая значимость работы

Теоретически обоснована необходимость и разработаны методы оценки биосовместимости промышленно перспективных пробиотических штаммов при конструировании поликомпонентных синбиотических препаратов.

Создана научная концепция универсального биотехнологического участка по выпуску поликомпонентных пробиотических препаратов и процедура его валидации.

Разработаны теоретико-методологические основы и методические подходы к формированию стратегии развития биотехнологической компании и повышению конкурентоспособности производственно-сбытовых систем в условиях российского фармацевтического рынка.

Практическая значимость работы

Конструирование поликомпонентных пробиотиков, основанное на изучении биосовместимости производственных штаммов и подборе их синбиотических ассоциаций, позволяет повысить эффективность и безопасность клинического применения разработанных комбинированных иммунобиологических препаратов.

Созданная структура универсального биотехнологического участка позволяет решать широкий спектр производственных задач по выпуску поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм препаратов (СЭЗ на пилотный участок по производству БАД №77.07.16.000.М.290.03.08 от 11.03.2008, СЭЗ на полномасштабный участок по производству БАД №77.07.16.000.М.005908.06.10 от 08.06.2010).

• «Габрифлорин-бифидо» СГР№77.99.23.3.У .5705.6.09 от 09.06.2009;

• «Габрифлорин-лакто» СГР№77.99.23.3.У.5706.6.09 от 09.06.2009;

• «БАД-субстанция бифидобактерий» СГР№77.99.23.3.У.5708.6.09 от

09.06.2009;

• «БАД-субстанция лактобацилл» СГР№77.99.23.3.У.5709.6.09 от

09.06.2009;

• «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл»

СГР№77.99.23.3.У.5707.6.09 от 09.06.2009.

Новые аспекты применения поликомпонентных пробиотических препаратов позволяют повысить эффективность лечения больных и снизить риск развития побочных эффектов при антибиотико- и химиотерапии инфекционных и неинфекционных заболеваний.

Использование разработанной стратегия развития биотехнологической компании позволит повысить конкурентоспособность и эффективность деятельности предприятий отрасли с использованием современных подходов к управлению и комплекса маркетинга.

Внедрение в практику

Зарегистрированные в Федеральном реестре Роспсяребнадзора жидкие препараты-синбиотики нового поколения БАД «Габрифлорин-бифидо» и «Габрифлорин-лакто» выпускаются на производственном участке ООО «НПФ Амфита».

Разработанные «БАД-субстанция бифидобактерий», «БАД-субстанция лактобацилл» и «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл» используются для промышленного получения следующих готовых препаратов: «Бифидум-Мульти 1», «Бифидум-Мульти 2», «Бифидум-Мульти 3», «Нормоспектрум для детей», «Нормоспектрум для взрослых», «Полибактерин».

Новые алгоритмы применения поликомпонентных пробиотических препаратов «Бифидум-Мульти» и «Нормоспектрум» внедрены в лечебно-профилактический процесс ряда учреждений здравоохранения:

• ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии

Минздравсоцразвития РФ, г. Москва;

• Филиал ГОУ ВПО РГМУ Росздрава «НКЦ геронтологии», г. Москва;

• ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет»

Росздрава, г. Казань;

• Правобережная больница ФГУ ЮОМЦ Росздрава, г. Астрахань. Анализ результатов данных исследований приведен в клинических отзывах, актах внедрения, протоколах наблюдений.

Универсальная структура производственного биотехнологического участка и валидационные методики оценки стандартных условий производства включены в разрабатываемый коллективом ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора СанПиН «Требования к размещению, устройству, оборудованию, контролю и эксплуатации асептических и контролируемых объектов».

Созданные на основе разработанной концепции универсального производственного участка ТЗ, исходные данные на проектирование и строительство и проект прошли экспертизу Роспотребнадзора СЭЗ №77.07.16.000.Т.000143.02.10 от 01.02.2010 и признаны удовлетворяющими существующим санитарным нормам и правилам.

Разработанная конкурентная стратегия и конкретный комплекс маркетинговых мероприятий использованы компаниями «Биокад», «Партнер» и «НПФ Амфита» при продвижении новых поликомпонентных пробиотических препаратов на российском фармацевтическом рынке в 2003-2009 гг.

Положения, выносимые на защиту

1. Разработана концепция конструирования пробиотических препаратов, позволяющая усовершенствовать их лечебные свойства, и в связи с этим расширить спектр клинического применения и, в соответствии с предложенным алгоритмом, использовать в схемах лечения инфекционной и неинфекционной патологии.

2. Созданный универсальный биотехнологический участок позволяет наладить выпуск широкого ассортимента конкурентноспособных поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых фармакологических форм.

3. Логичным завершением многоэтапного научного исследования, охватывающего целый ряд задач - от составления рецептуры поликомпонентных пробиотических препаратов, их клинических испытаний, выпуска на созданном универсальном опытно-производственном участке -является разработка стратегии продвижения полученных конкурентноспособных препаратов на российский фармацевтический рынок.

Апробация работы

Диссертация апробирована на заседании Ученого совета ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, протокол №7 от 21.10.2010 г.

Основные результаты исследований доложены и обсуждены на российских и международных конференциях: I Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития», Москва, 2003; 8-ом Российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии», Москва, 2009; 2-ом Международном конгрессе по пробиотикам, Санкт-Петербург, 2009; VI Региональной научно-практической конференции «Педиатрия и детская хирургия в Приволжском Федеральном округе», Казань, 2009; XI Всероссийском конгрессе диетологов и нутрициологов «Питание и

здоровье», Москва, 2009; Совместной конференции врачей Республики Татарстан и Российской гастроэнтерологической ассоциации, Казань, 2010; International Scientific Conference on Probiotics and Prebiotics IPC2010, Kosice, Slovakia, 2010; XVI Российской гастроэнтерологической неделе, Москва, 2010; VII Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность», Москва, 2010.

Публикации

Основное содержание работы отражено в 54 научных публикациях: в статьях, в том числе, в рекомендованных ВАК РФ - 17, в других изданиях - 17, в патентах на изобретение РФ - 18, в монографиях - 2.

Объем и структура диссертации

Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы из 394 наименований, в том числе, 144 зарубежных и 250 отечественных работ. Диссертация изложена на 297 страницах основного текста, содержит 52 рисунка и 74 таблицы.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы, методы и объем проведенных исследований

Исследования выполнены в 2003-2009 гг. в лаборатории биологии бифидобактерий ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора в рамках НИР (Per. номер 01.2.006 08847) и лаборатории проблем фармацевтического менеджмента НИЦ ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова. Объекты и объем проведенных исследований представлены в таблице 1.

Исследования производственных штаммов проводились как традиционными, так и модифицированными микробиологическими методами исследований, разработанными в лаборатории биологии бифидобактерий (Жиленкова О.Г., 2007, 2009).

Подлинность производственных штаммов устанавливали по морфологическим, культуральным, физиологическим и ферментативным признакам. Определение биохимических свойств промышленно перспективных штаммов бифидобактерий и лактобацилл осуществляли параллельно на трех биохимических тест-системах - API-20A (bioMerieux, Франция), API-50CHL (bioMerieux, Франция), АНАЭРОтест 23 (PLIVA-Lachema Diagnostica s.r.o., Чехия). Для исследования антибиотикочувствительности был применен модифицированный в лаборатории биологии бифидобактерий диско-

диффузный метод на основе МУК 4.2.1890-04 «Методические рекомендации по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» и рекомендаций Национального Комитета Клинических Лабораторных Стандартов, NCCL, 2002 г., США. Использовали диски с антибиотиками производства ФГУН НИИЭМ им. Пастера (Россия, Санкт-Петербург).

Видовую идентификацию бифидобактерий и латобацилл проводили молекулярно-генетическими методами на основе амплификации и секвенирования фрагментов двух генов: 16S рибосомальной РНК и трансальдолазы (Карзанова М.Е, Воронина O.JL, 2006).

Для изучения динамики культивирования монокультур и поликомпонентных ассоциаций применяли как стандартные лабораторные и производственные питательные среды, так и обогащенные пребиотическими компонентами, разработанные в лаборатории биологии бифидобактерий ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора.

Определение биосовместимости испытуемых производственно перспективных пробиотических штаммов по отношению к индигенной микрофлоре человека проводили на основании модели определения антагонистической активности, в том числе, модифицированным методом отсроченного антагонизма на плотной питательной среде.

Построенные на основе собственных проектных решений биотехнологические производственные участки (пилотный и полномасштабный) валидировались с помощью оригинальных методик, разработанных вместе с ведущим инженером лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии ФГУН МНИИЭМ им Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора Григорьевым В.В.

Клинические исследования осуществлялись совместно с ведущими специалистами ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии Минздравсоцразвития РФ, г. Москва, Филиалом ГОУ ВПО РГМУ Росздрава «НКЦ геронтологии», г. Москва, ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Росздрава, г. Казань, Правобережной больницей ФГУ ЮОМЦ Росздрава, г. Астрахань.

Статистический анализ клинических данных, полученных в открытых рандомизированных исследованиях, выполнялся с использованием пакета прикладных программ «SAS» и включал следующие его элементы: построение

Раздел работы Объект исследований Объем исследований

I. Маркетинговые исследования • вторичные пробиотические препараты ■S фирмы, позиционирующиеся на пробиотическом сегменте сбор и анализ данных розничного аудита по 40 препаратам

построение конкурентного поля по 37 фирмам

• первичные конечные потребители ■S врачи провизоры 121 анкета, 3 фокус-группы по 8 человек

161 анкета, 3 фокус-группы по 8 человек

113 анкет, 3 фокус-группы по 8 человек

II. Конструирование рецептуры •подтверждение видовой подлинности 11 производственных штаммов бифидобактерий и 6 лактобацилл: Bifidobacterium bifidum 1, Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium bifidum ЛВЛ-3, Bifidobacterium breve 79-88, Bifidobacterium breve 79-119, Bifidobacterium infantis 79-43, Bifidobacterium infantis 73-15, Bifidobacterium longum B379M, Bifidobacterium longum Я-3, Bifidobacterium adolescentis Г7513, Bifidobacterium adolescentis ГО-13, Lactobacillus plantarum 8-PA-3, Lactobacillus fermentum 90-TC-4, Lactobacillus acidophilus К3Ш24, Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus acidophilus 100 aiu, Lactobacillus casei KMH-12 морфология 102 образцов культур S биохимические свойства 85 образцов культур молекулярно-генетическое типирование 17 образцов культур культуральные свойства 85 образцов •S антибиотикочувствительность 51 образца культур к 32 антибиотикам из 16 групп S антагонистические свойства 51 образца культур к тест-штаммам

•изучение межвидового синергизма пробиотических штаммов внутри поликомпонентной ассоциации в процессе культивирования и хранения 25 поликомпонентных ассоциаций бифидобактерий и/или лактобацилл S культуральные свойства 125 многовидовых образцов антагонистические свойства 75 многовидовых образцов культур к тест-штаммам

•оценка взаимодействия пробиотических штаммов с индигенной микрофлорой человека 3 производственных штамма (В.bifidum 791, В.longum В379М, L.acidophilus NK-1) с 12 индигенными штаммами человека из ГКНМ ФГУН МНИИЭИ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора бифидобактерий (ГКНМ 7520, ГКНМ 7538, ГКНМ 7544, ГКНМ 7570, ГКНМ 7587, ГКНМ 7712) и лактобацилл (ГКНМ 124, ГКНМ 125, ГКНМ 126, ГКНМ 127, ГКНМ 128, ГКНМ 132) 108 моделей для определения антагонистической активности

•сохранность производственных микроорганизмов при добавлении пребиотиков, микроэлементов, витаминов и антиоксидантов 5 производственных штаммов бифидобактерий и лактобацил при добавлении Рафтилина, Рафтилозы и Авимина 136 образцов жидкой и сухой биомассы

Таблица 1 (продолжение). Объекты и объем проведенных исследований.

Раздел работы Объект исследований Объем исследований

III. Производство и технология •создание стандартных условий производства проектная документации подготовлена для двух производственных участков и диагностической микробиологической лаборатории

пилотный производственный участок построен и отвалидирован собственными методами

полномасштабный производственный участок построен и отвалидирован собственными методами

диагностическая микробиологическая лаборатория построена и отвапидирована собственными методами

•создание аппаратной цепочки производства технологическое оборудование производственных участков спроектированы и доработаны ферментеры и смеситель

•отработка и масштабирование технологии производства режимы ферментации 174 ферментации

методика концентрирования 50 циклов концентрирования

режимы сублимационного высушивания 126 циклов лиофилизации

IV. Регистрация •продуктовая линейка Габрифлорин нтд рецептура, ТУ, ТИ

опытно-экспериментальные серии БАД изучены санитарно-гигиенические, микробиологические, технологические параметры и сроки хранения 24 серий

•БАД-субстанция бифидобактерий и/или лактобацилл нтд рецептура, ТУ, ТИ

опытно-экспериментальные серии БАД-субстанции изучены санитарно-гигиенические, микробиологические, технологические параметры и сроки хранения 36 серий

V. Клинические испытания •Язва желудка и двенадцатиперстной кишки взрослые двухкратное клинико-лабораторное обследование 60 пациентов

•Реабилитационные мероприятия при онкозаболеваниях дети 127 пациентов

•Дислипидемия у лиц пожилого возраста взрослые 30 пациентов

•Ротавирусная инфекция дети 105 пациентов

VI. Выведение на фармрынок конкурентные стратегии и маркетинговые комплексы Разработаны конкурентные стратегии и маркетинговые мероприятия для выведения на рынок 21 поликомпонентного пробиотического препарата фирм-производителей ЗАО «Биокад», ЗАО «Партнер» и ООО «НПФ Амфита»

гистограмм для визуальной оценки характера распределения; подсчет частот для определения количества наблюдений в каждый день исследования и выявления переменных с большим числом пропущенных значений; расчет средних значений и элементарная статистика для определения основных параметров распределений показателей и проверки их на соответствие нормальному закону распределения; корреляционный анализ для выявления взаимосвязи между параметрами; расчет Т-критерия Стьюдента и непараметрических критериев для определения различий средних значений показателей в сравниваемых выборках.

Емкость пробиотического сегмента российского фармацевтического рынка за исследуемый период рассчитывалась методом розничного аудита.

Идентификацию конкурентных стратегий компаний,

позиционирующихся на пробиотическом сегменте фармрынка, осуществляли на основе модифицированной нами типологии Юданова А.Ю.

Предпосылки создания поликомпонентного пробиотического препарата

Жизненный цикл поликомпонентного пробиотического препарата можно представить в виде многоступенчатого пайп-лайна, где на входе рассматривается сама возможность создания, а на выходе - готовый препарат, удовлетворяющий конкретную потребность общества в улучшении качества жизни посредством коррекции нарушенного микробиоценоза желудочно-кишечного тракта (рис. 1).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Выведение препарата на фармрынок

Клинические ист

Регистрация

111

Производство и технология

Конструирование рецептуры

Предпосылки к созданию оригинального препарата

Рисунок 1. Этапы реализации биотехнологического проекта по созданию поликомпонентного пробиотического препарата.

Организации нового биотехнологического производства предшествует проведение первичных и вторичных маркетинговых исследований. Анализ вторичной маркетинговой медико-биологической информации продемонстрировал высокую частоту возникновения дисбиотических состояний различного генеза среди детского и взрослого населения России, подразумевающих существенную потребность фармацевтического рынка в препаратах, корригирующих микроэкологические нарушения ЖКТ. Применение антибактериальных и химиотерапевтических средств, а также острые кишечные инфекции являются ведущими на сегодняшний день этиологическими факторами дисбактериоза. Развивающиеся на их фоне декомпенсированные формы дисбиотических нарушений требуют разработки новых высокоэффективных средств и методов профилактики и лечения.

Для оценки перспективности создания нового поликомпонентного пробиотического средства с экономической точки зрения нами был проведен анализ существующей емкости данного сегмента российского фармацевтического рынка с помощью метода розничного аудита. Используя динамику продаж лекарственных препаратов в России, распределенных по анатомо-терапевтическим группам, за исследуемый период нами была выявлена наиболее перспективная группа лекарственных средств, применяемых для лечения болезней желудочно-кишечного тракта и при нарушении обменных процессов, составляющая около 20% от всего объема российского фармацевтического рынка (рис.2).

Доля рынка.%

Рисунок 2. Анализ продаж лекарственных и парафармацевтических средств по анатомо-терапевтическим группам в России за 2003-2009 гг.

Существенной частью данной группы являются препараты, относящиеся к классу A07FA по анатомо-терапевтическо-химической классификации -антидиарейные микроорганизмы. Емкость данного сегмента рынка выросла с $17млн в 2002 до $120 млн в 2009 году. Причем, если в 2003 году лишь 40% препаратов данной группы классифицировались как комбинированные, то в 2009 году уже около 70% продаваемых в России пробиотических средств по данным розничного аудита относились к этому разряду (рис.3). Таким образом, нам удалось выделить препарат «дойную корову» пробиотического сегмента фармацевтического рынка, в терминологии матрицы Boston Consulting Group -однокомпонентный «Бифидумбактерин» и «восходящие звезды» - препараты, уровень розничных продаж которых значительно вырос за последнее время -поликомпонентные пробиотические лекарственные и парафармацевтические средства («Линекс», «Нормоспектрум» и др.) (рис.4).

БИОБАКТОН АЦИЛАКТ ТБ АЦИЛАКТ ПОР СПОРОВ АКТЕРИН БИОСПОРИН БИФИДУМБАКТЕРИН ТБ БИФИДУМБАКТЕРИН КАПС КОЛИВАКТЕРИН АЦИЛАКТ СУППОЗ БИФИЛИЗ БИФИДУМБАКТЕРИН СВЕЧИ ПАКТОВ АКТЕРИН ПОР АЦИПОЛ БИФИКОЛ ЭНТЕРОЛ ПРОБИФОР БИФИФОРМ БАКТИСУБТИЛ БИФИДУМБАКТЕРИН ПОР БИФИДУМБАКТЕРИН ФОРТЕ ХИЛАК ФОРТЕ ЛИНЕКС

Доля рынка,%

Э 3

3 □

3 =]

Рисунок 3. Рейтинг продаж бактерийных препаратов на российском фармацевтическом рынке в 2009 г.

Полученные в результате сбора и анализа вторичной маркетинговой информации результаты послужили основой, как для конструирования рецептуры собственного инновационного продукта, так и для выбора целевого сегмента при его выведении на российский фармацевтический рынок.

Доля рынка

Высокий

Экономика в целом

Низкий

Высокая

Низкая

«Звезда» комбинированные препараты: ЛИНЕКС, НОРМОСПЕКТРУМ «Вопросительные знаки» препараты на основе споровых микроорганизмов: БАКТИСУБТИЛ, БИОСПОРИН

«Дойные коровы» БИФИДУМБАКТЕРИН «Собаки» препараты на основе кишечной палочки: КОЛИБАКТЕРИН

Рисунок 4. Бостонская матрица «рост/доля рынка».

Биосовместимость, как основной принцип создания безопасных и эффективных поликомпонентных пробиотических препаратов

На втором этапе - отработке рецептуры, нами были определены основные требования к ингредиентам, входящим в состав поликомпонентного пробиотического препарата, ведущим из которых является биосовместимость (рис. 5).

Рисунок 5. Принцип биосовместимости как основа рецептуростроения поликомпонентных пробиотиков.

Характер роста промышленных штаммов на питательных средах - как бифидобактерий, так и лактобацилл - отличался большим разнообразием формы, цвета и размера колоний, что свидетельствовало о невозможности внутриродовой дифференциации этих культур только по морфологическим признакам.

Для биохимической идентификации отобранных производственно перспективных микроорганизмов применяли стандартные коммерческие тест-системы. Данные по исследованию биохимических свойств бифидобактерий и лактобацилл позволили достовернее различать пищевые потребности ряда производственных штаммов, что послужило основанием при составлении поликомпонентных ассоциаций для совместного культивирования и подбора пребиотических компонентов для обогащения питательных сред.

Определение чувствительности производственных штаммов бифидобактерий и лактобацилл к антибиотикам продемонстрировало, что наиболее широким спектром антибиотикорезистентности на фоне остальных изученных культур обладали штаммы вида В. longum и вид Lactobacillus plantarum 8-РА-З. Выявленные факты резистентности явились предпосылкой для дальнейшего изучения сочетанного применения поликомпонентных препаратов нормофлоры и антибиотиков.

Все изученные штаммы обладали высокой антагонистической активностью. При этом наибольшую антагонистическую активность продемонстрировали: из бифидобактерий - Bifidobacterium adolescentis ГО-13, Bifidobacterium breve 79-88, Bifidobacterium breve 79-119; из лактобацилл -Lactobacillus casei KHM-12.

При исследовании культуральных свойств промышленно перспективных микроорганизмов была подтверждена технологичность всех испытуемых штаммов, о чем свидетельствовало получение биомассы с высоким содержанием КОЕ/мл бактерий (108-109) и активное продуцирование в процессе ферментации органических кислот.

В результате проведенного молекулярно-генетического типирования производственных штаммов показано, что для ряда бифидобактерий -В.adolescentis ГО-13, B.bifidum 791, B.breve 79-119, B.breve 79-88, B.infantis 7315, В.longum B379M результаты секвенирования по двум мишеням - 16S рибосомальной РНК и трансальдолазы - совпали с идентификацией по традиционным характеристикам (морфологическим, биохимическим и т.д.). В то же время B.bifidum JIBA-3 и B.bifidum 1 были идентифицированы как B.breve,

B.longum Я-3 - как B.adolescentis, B.adolescentis Г 7513 - как B.longum. Молскулярно-гепетическая идентификация производственных штаммов лактобацилл по гену 16S рРНК продемонстрировала полное совпадение с фенотипическим у L. plantarum 8-РА-З, в то время как у L. acidophilus (NK-1, К3Ш24, 100 аш) и L. fermentum 90-ТС-4 последовательность 16S рРНК не соответствовала паспортным данным штаммов, полученным традиционными методами. Сравнение нуклеотидной последовательности их 16S рРНК с последовательностями в базе данных GenBank свидетельствовало, что штаммы NK-1 и 100 аш, идентифицированные ранее как L. acidophilus, на самом деле относятся к L. helveticus, штамм L. acidophillus К3Ш24 - к группе L.casei/paracasei, a L. fermentum 90-ТС-4 - к L. plantarum.

Использование методов молекулярно-генетической идентификации штаммов необходимо для осуществления контроля в процессе производства, гарантирует идентичность данной культуры исходному штамму, позволяет контролировать чистоту используемой культуры, повышает безопасность производства.

Полученные результаты по изучению межвидовых взаимодействий пробиотических штаммов внутри поликомпонентной ассоциации в процессе культивирования и хранения свидетельствуют о возможности совместного культивирования различных видов бифидобактерий и лактобацилл, а также синергидном эффекте - более высокой антагонистической активности и большей стабильности при хранении консорциума штаммов, что позволяет решить сложную биотехнологическую задачу получения многокомпонентных пробиотических препаратов, имеющих определенный состав и назначение (табл.2).

При определении биосовместимости методом совместного культивирования на плотной и полужидкой питательной среде, а также методом отсроченного антагонизма (рис. 6) испытуемые производственные штаммы B.bifidum 791, B.longum В379М, L.acidophilus NK-1 в подавляющем числе наблюдений не ингибировали рост индигенных культур основных представителей нормальной микрофлоры.

Изучение влияния пребиотиков - растворимых пищевых волокон на производственные штаммы отразило перспективность использования источников инулина и олигофруктозы («Рафтилина» и «Рафтилозы») в качестве ингредиентов в составе питательных сред для культивирования бифидо- и лактобактерий. Было показано, что эти добавки способствуют

лучшей сохранности препаратов в широком температурном диапазоне. Подтверждена не только биосовместимость, но и рост-стимулирующий эффект на производственные пробиотические штаммы «Рафтилина», «Рафтилозы» и аминокислотно-витаминно-минерального комплекса «Авимин» (табл.3).

Таблица 2. Зоны задержки роста тест-культур (в мм) в присутствии отдельных штаммов бифидо- и лактобактерий и их консорциумов.

Объект исследования S.sonnei 5063 S.flexneri 170 E.coli 157 S. aureus 209 Proteus vulgaris 177

Bifidobacterium bifidum 791 16+3 15+2 15+3 14+1 17+2

Bifidobacterium breve 79-119 30+1 27+2 29+2 30+1 28+1

Bifidobacterium infantis 73-15 12+2 12+1 15+2 13+2 17+2

Bifidobacterium longum B379M 24+2 20+2 23+2 17+3 25+3

Bifidobacterium adolescentis ГО-13 32+2 26+1 29+2 26+1 25+1

Бифидо-консорциум 32+1 28+2 31+2 31+1 28+1

Lactobacillus plantarum 8-PA-3 18+1 19+3 20+1 27+2 21+2

Lactobacillus acidophilus NK-1 27+4 29+1 29+3 22+1 30+2

Лакто-консорциум 31+1 31+3 33+1 32+2 32+1

Таблица 3. Влияние комплекса «Авимин» на динамику роста производственных штаммов бифидо- и лактобактерий в процессе культивирования (контроль - среда, содержащая дрожжевой экстракт, среда 1 -2,5% «Авимина», среда 2 - 5% «Авимина»),

Наименование штамма Число КОЕ/мл после культивирования Значение рН Значение титруемой кислотности, °Т

контроль среда 1 среда 2 контроль среда 1 среда 2 контроль среда 1 среда 2

B.bifidum 791 1,5х108 1,7x108 1,5x108 4,47 4,40 4,44 130 132 121

В.longum B379M 3,0x107 1,7x108 2,1x10s 5,34 4,94 4,83 152 130 169

B.infanlis 79-43 5,5х107 4,0х107 5,5х108 4,76 4,37 4,43 120 144 136

L.casei KHM-12 3,0x108 4,4x10s 5,5x10s 4,23 4,24 4,29 132 118 122

L.plantarum 8-PA-3 5,5х108 4,5x108 6,0x108 4,40 4,37 4,42 114 108 108

Рисунок 6. Результаты полученные методом совместного культивирования при отсроченном подсеве индигенных штаммов человека.

Таким образом, полученные данные по биосовместимости подтвердили перспективность выбранного технологического подхода к конструированию поликомпонентных синбиотических препаратов и субстанций, что позволило нам перейти к третьему этапу пайп-лайна - созданию производства и масштабированию лабораторных рецептур в промышленных объемах.

Концепция создания универсального биотехнологического участка по производству поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм

В процессе создания парафармацевтического цеха нами были сформулированы основные принципы построения биотехнологического участка по выпуску поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм: стандартные условия, универсальность аппаратной цепочки и операционная технологичность производства. Разработанные критерии послужили фундаментом для создания проектной документации, а также

основных положений, касающихся валидационных процедур выполненных общестроительных работ и монтажа вентиляционных систем асептических производственных помещений.

Для каждой серии продукции были достигнуты стандартные условия производства благодаря созданию оптимального уровня поточности комплекса помещений, четко структурированных по технологической и функциональной принадлежности, с соблюдением регламентированных контрольно-аналитических процедур: от подготовки исходного сырья и материалов, через наработку посевного материала и ферментацию, с последующей сублимацией концентрированной биомассы, смешиванием ее, согласно рецептуре, с необходимыми функциональными ингредиентами, до фасовки в различные лекарственные формы и упаковку в потребительскую тару (рис. 7). Все технологические помещения герметично запираемые с отрегулированными при пуско-наладке и еженедельно проверяемыми, обеспечивающими дополнительную надежность перепадами давлений между боксами - как внутри, так и между категорируемыми зонами классов С, Б и К. Автономная от здания приточно-вытяжная вентиляция благодаря внедренной методике контроля герметичности ограждающих строительных конструкций и воздуховодов вентиляционных систем классифицируемых помещений (рис. 8) позволила добиться значений параметров микробного загрязнения воздуха, замеряемых при помощи аппарата Кротова, 0 КОЕ/м3 бактерий и 9 КОЕ микроорганизмов по методу седиментации в течение 4 часов на чашку Петри диаметром 90 мм как в оснащенном, так и в эксплуатируемом состоянии производственных помещений зоны С, что существенно ниже нормативных показателей.

Согласно второму основному принципу создания биотехнологического участка, в выстроенные по критериям вМР помещения была внедрена универсальная производственная цепочка. На сегодняшний день набор технологического оборудования в герметичном исполнении, усовершенствованный в соответствии с асептическими принципами биотехнологии, дает возможность культивировать широкий спектр промышленно перспективных штаммов бифидобактерий и лактобацилл. Ферментационные, сублимационные и фасовочные мощности позволяют получать субстанции и готовые продукты в виде жидких и сухих фармформ с соблюдением основных принципов - непрерывности, согласованности и безопасности проведения всех производственных операций.

Номер по плану

Наименование помещений и основного оборудования

Класс чистоты

Гардероб

Туалет

Коридор

Материальный шлюз

Коридор

Материальный шлюз О/С

Технический коридор

Венткамсра

НКЮ

3 Холодильная камера

4 Помещение для приготовления питательных сред; 4.1,4.2- Пищеварочный котел

5 Весовая; 5.1 - Весы электронные

Моечная; 5а.4 - Аквадистиллятор, 5а.5 - Сухожаровой шкаф

6 Помещение вторичной упаковки

7 Персональный шлюз

8 Стерилизационная; 8.2 - Автоклав

Посевной бокс

Контрольный бокс

Термальная

Персональный шлюз

Ферментационная; 10.1 - Парогенератор, 10.2 - Ферментер

Помещение первичной упаковки; 11.1 - Капсулирующая машина, 11.2 - Укупорочная машина, 11.3 - Дозатор, 11.4 - Смеситель

Помещение лиофилизации; 14.1 - Лиофильная сушилка, 14.2 - Морозильный ларь, 14.3 - Сепаратор

Рисунок 7. Структура полномасштабного биотехнологического участка.

Закрывают регулирующее устройство приточной системы 5. Прибор контроля избыточного давления (разрежения) воздуха 7 подключают к полости асептического помещения 2 через импульсную трубку 8. Включают вытяжную вентиляционную систему 4. Регулирующим устройством 6 устанавливают предельно допустимую расчётную проектную величину разрежения в полости 2. Прибором контроля скорости воздушного потока 9 и его датчиком 10, размещённым в полости вытяжного воздуховода 12, подключённым к прибору контроля 9 импульсной трубкой 8, контролируют объёмную скорость воздуха (Ьвыт). Аналогично контролируют объёмную скорость воздушного потока (Ьприт), поступающего через неплотности закрытого регулирующего устройства 5 в приточном воздуховоде 13.

йфакт = Ьвыт - Ьприт / Боек, причем Офак1 < [Отр], где йфаи. - фактическая удельная воздухопроницаемость воздуха через ограждающие конструкции асептических помещений (кг/м2хчас);

[С4'] - нормативная величина удельной воздухопроницаемости ограждающих конструкций

асептических помещений (0,13 для зон А и В и 0,23 кг/м2хчас для зон С и В) при

избыточном давлении в полости асептического помещения 50 Па;

Ьвыт - количество воздуха прошедшего через вытяжной воздуховод (м3/час);

Ьпрнт- количество воздуха прошедшего через приточный воздуховод (м3/час);

$оск - общая площадь ограждающих строительных конструкций асептических помещений 1

(м2).

Фактическая величина, полученная в результате контроля удельной воздухопроницаемости Офакт не должна превышать нормативную величину [О41]. В случае превышения указной величины воздухопроницаемости, устраняют обнаруженные течи и повторяют испытания. Рисунок 8. Методика контроля герметичности ограждающих строительных конструкций классифицируемых помещений асептических производств.

Третьей необходимой особенностью современного биотехнологического производства является высокая технологичность осуществляемых на нем операций. Инновационные методы совместного культивирования пробиотических штаммов, повышение активности биомассы путем обогащения среды пребиотическими компонентами и последующее концентрирование не только позволили увеличить производительность оборудования, но и открыли перед созданными биотехнологическими участками (пилотным и

полномасштабным) неограниченные возможности по выпуску субстанций бифидо- и лактобактерий широкого ассортиментного перечня. Сырьевая технологичность, позволяющая произвести из единого набора пробиотических субстанций неограниченное по своему разнообразию количество готовых продуктов, открыла перед биотехнологическим комплексом широкие перспективы по собственному и контрактному производству поликомпонентных пробиотических препаратов.

В период с 2007 по 2010 год построены пилотный и полномасштабный биотехнологические участки, полностью удовлетворяющие как собственной концепции универсального производства, так и получившие положительные заключения Роспотребнадзора, разрешающие выпуск пробиотических БАД. Благодаря внедрению инновационных технологий, на созданной аппаратной схеме, по отвалидированному графику выпускаются 11 готовых форм поликомпонентных пробиотиков и более 20 лиофилизированных бифидо- и/или лактосодержащих субстанций различного штаммового состава.

Отработка рецептуры и технологии, государственная регистрация и запуск серийного производства поликомпонентных пробиотических препаратов и субстанций

На основании разработанной концепции поликомпонентного синбиотического продукта и с учетом методик, внедренных на собственном биотехнологическом участке, нами была разработана рецептура и технология, а затем проведена государственная регистрация и запуск серийного производства жидких иммунобиологических продуктов - «Габрифлорин-лакто» и «Габрифлорин-бифидо». Основной идеей при конструировании серии жидких пробиотиков явилось создание рецептуры, сочетающей в себе технологическую воспроизводимость, антагонистическую активность к широкому спектру патогенных микроорганизмов, возможность использования у детей с 3-х месячного возраста, а также более длительный срок хранения относительно существовавших на рынке аналогов (60 против 30-40 суток). Учитывался также и немаловажный фактор экономической рентабельности - производство данного вида продукции исключает дорогостоящую процедуру сублимации.

В состав «Габрифлорин-бифидо» включены штаммы из ГКНМ ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium longum B379M и Bifidobacterium adolescentis ГО-13, в «Габрифлорин-лакто» - Lactobacillus acidophilus 100 аш, Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus acidophilus К3Ш24, Lactobacillus plantarum 8-PA-

3. Данные по исследованию пребиотических и технологических свойств инулина, олигофруктозы и дрожжевого автолиза «Авимин», послужили основанием для обогащения этими ингредиентами препаратов серии «Габрифлорин». Кроме того, в состав этих БАД были включены аскорбиновая кислота, как антиоксидант, и яблочный пектин в качестве естественного сорбента.

Отработанная технология получения готовой формы жидких синбиотиков, благодаря универсальному характеру выстроенной производственной цепочки допускает введение в рецептуру дополнительных видов и штаммов бифидо- и лактобактерий, разнообразных пребиотических компонентов для непрерывного совершенствования существующего продукта.

Разработанные технологические документы с образцами продукции получили положительную оценку экспертов ГУ НИИ питания РАМН, по результатам которой Федеральным центром Роспотребнадзора была проведена их регистрация с занесением в Федеральный реестр биологически активных добавок к пище. Подготовленная техническая документация, контрольно-аналитические мероприятия, а также проведенная в аккредитованном органе добровольная сертификация позволили подтвердить качество выпускаемых поликомпонентных пробиотиков декларацией о соответствии. С июля 2008 года налажен промышленный выпуск данных препаратов на предприятии ООО «НПФ Амфита».

В рамках рассмотренной выше сырьевой технологичности универсального производственного участка были разработаны рецептуры «БАД-субстанция бифидобактерий», «БАД-субстанция лактобацилл» и «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл», способные удовлетворить как собственные потребности по выпуску готовых поликомпонентных пробиотических препаратов, так и обеспечить контрактное производство. Согласно утвержденной в установленном порядке нормативной документации общая номенклатура микроорганизмов для наработки БАД-субстанций составляет 11 штаммов бифидобактерий и 6 лактобацилл (табл. 1 раздел II). На основе данного перечня возможны различные варианты рецептур и сочетаний микроорганизмов.

При производстве БАД-субстанции использовались приемы совместного культивирования штаммов. Полученные жидкие биомассы концентрировались с помощью сепаратора, а затем сублимационно высушивались. Биомасса лактобацилл в процессе изготовления «БАД-субстанции бифидобактерий и

лактобацилл» добавлялась отдельно в соотношении 1:10. Полученная таким образом сухая субстанция фасовалась в герметичную упаковку и подвергалась контрольным мероприятиям в соответствии с существующими нормативными документами. Во всех образцах продукции, протестированных в независимых аккредитованных лабораториях, в процессе длительного хранения бифидобактерии и лактобациллы сохранялись в жизнеспособном состоянии без существенных потерь в течение 12 месяцев (содержание КОЕ/г готовой субстанции не менее 109). На основании полученных результатов разработаны технологические документы, которые вместе с образцами продукции были представлены на экспертизу в Федеральный центр Роспотребнадзора и ГУ НИИ питания РАМН, по результатам которой получены санитарно-эпидемиологическое заключение на ТУ и регистрационные свидетельства на БАД-субстанции. На сегодняшний день из разработанной «БАД-субстанции бифидобактерий» производится линейка поликомпонентных пробиотических препаратов «Бифидум-Мульти», «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл» используется как для производства собственных препаратов серии «Нормоспектрум», так и для контрактного производства таблетированного пробиотика «Полибактерин».

Современные алгоритмы применения поликомпонентных пробиотических препаратов в инфекционной и неинфекционной патологии

В исследования, посвященные пятому этапу жизненного цикла поликомпонентного пробиотического препарата, нами были включены мультицентровые клинические испытания «Бифидум-Мульти» и «Нормоспектрум», проведенные с целью расширения их лечебно-профилактического применения при инфекционных и неинфекционных патологических состояниях, охватившие 322 человека в возрасте от 1-го года до 80 лет.

Используя представленные выше данные по естественной антибиотикорезистентности ряда производственных штаммов бифидобактерий и лактобацилл, входящих в БАД «Нормоспектрум», нами предложен новый алгоритм применения поликомпонентных пробиотиков т vivo при хеликобактер-ассоциированной инфекции на фоне антибиотикотерапии с целью снижения частоты и тяжести возникающих побочных эффектов лечения и уменьшения риска развития микроэкологических нарушений.

«Нормоспектрум» назначался по 1 капсуле 3 раза в день в течение 10 суток. В состав препарата входят штаммы В. bifidum, В. longum и В. adolescentis,

характерные для нормальной микрофлоры взрослого человека, два штамма ацидофильных лактобацилл, а также виды L. plantarum и L. casei, пребиотические компоненты - инулин и олигофруктоза, витаминно-минеральный премикс.

Проведенное исследование выявило преимущество одновременного со стандартной эрадикационной терапией применения поликомпонентного пробиотика «Нормоспектрум» в комплексном лечении язвы желудка и ДПК, выражающееся: 1) в тенденции к увеличению случаев элиминации Н. pylori по данным уреазного теста (89% в основной группе, принимавший «Нормоспектрум» одновременно с эрадикационной терапией и 71% в контрольной группе); 2) в раннем устранении функциональных расстройств работы ЖКТ (боли и тяжесть в области эпигастрия, изжога купировались в основной группе на 3-4 день, а в контрольной - на 6-7 день лечения); 3) уменьшении степени выраженности гиперемии слизистой желудка, по данным гастроскопии (рис. 9); 4) в нормализации содержания бифидобактерий; 5) статистически достоверном увеличении лактобацилл; 6) нормализации уровня типичных эшерихий, по данным исследования кала (рис. 10).

Рисунок 9. Степень выраженности гиперемии слизистой желудка по данным ЭГДС до и после лечения (1-ая группа - стандартная эрадикационная терапия с последующим применением БАД «Нормоспектрум», 2-ая - стандартная эрадикационная терапия с одновременным применением БАД «Нормоспектрум», 3-ья - контрольная - стандартная эрадикационная терапия).

У 127 детей с онкологическими заболеваниями на разных сроках, прошедших с момента окончания специального лечения, нами были проведены исследования состояния микробиоценоза, как одного из важнейших гомеостатических составляющих человеческого организма. В случае обнаружения дисбиотических нарушений, возникших в результате

(а) (б)

(в)

Рисунок 10. Сравнение содержания бифидобактерий (а), лактобацилл (б) и ' типичных эшерихий (в) при микробиологическом исследовании кала до и после лечения.

химиотерапии, для их коррекции проводился короткий 10-ти дневный курс синбиотика «Бифидум-Мульти 2» или «Бифидум-Мульти 3». «Бифидум-Мульти 2» для детей от 3 до 14 лет содержит в своем составе виды В. Ь'фйит, В.ЬгеУе, В. т/апИй и ВЛощит. В рецептуре «Бифидум-Мульти 3», для детей старше 14 лет и взрослых - В. Ы/1с1ит, ВЛоп^т и В.ас1о1е$сегШз. Кроме того, в оба препарата входят пребиотические компоненты: пектин, олигофруктоза и инулин. Степень микробиологических нарушений обследованных детей диагностировалась экспертом по результатам бактериологического исследования кала. Выраженные нарушения микробиоценоза кишечника 2-ой

степени, требующие обязательной коррекции, выявлялись у детей с гемобластозами (рис. 11а) и солидными опухолями (рис. 116) на протяжении всего периода диспансерного наблюдения (до десяти лет и более), 3-ей степени в срок до 5 лет от момента окончания специального лечения.

□ 1 степень ■ 2 степень

□ 3 степень

П1 степень ■ 2 степень □ 3 степень

До 2 лет От 2 - 5 лет Более 5

До 2 пет От 2 - 5 пет Бопее 5 лет

(а) (б)

Рисунок 11. Нарушение микробиоценоза толстой кишки у детей с гемобластозами (а) и солидными опухолями (б) в различные сроки (до 2 лет, от 2 до 5 лет и более 5 лет) после окончания специального лечения.

Согласно представленному дизайну исследования, детям с выраженными I нарушениями микробиоценоза кишечника проводили короткий десятидневный курс синбиотика «Бифидум-Мульти», в результате которого удалось получить I статистически значимое (р<0,05) уменьшение количества дисбиотических нарушений кишечника от 5% (при третьей степени) до 15% (при второй степени). В то же время, достоверное увеличение уровня бифидобактерий и лактобацилл (р<0,05) в кале, корректно принимавших препарат «Бифидум-Мульти», позволяет с уверенностью говорить о возможности продолжения процессов нормализации функционального состояния и микрофлоры ЖКТ детей и после кратковременного воздействия пробиотиком (рис.12).

Дальнейшее клиническое исследование касалось изучения влияния синбиотика «Нормоспектрум» на микрофлору кишечника и липидный обмен у лиц пожилого возраста. Под наблюдением находилось 30 женщин, получавших «Нормоспектрум» по 2 капсулы 2 раза в день перед едой в течение 20 дней.

После проведенного препаратом «Нормоспектрум» курса происходило улучшение клинических и лабораторных показателей состояния микрофлоры кишечника. На этом фоне у пациентов 1 -й возрастной группы (46-65 лет) отмечалось статистически достоверное снижение уровня триглицеридов (с

щкмм

После лечения

лечения

(.'редисе шачение

(в)

Рисунок 12. Коррекция дисбиотических нарушений кишечника у детей с острым лимфобластным лейкозом в период диспансерного наблюдения (а -изменение количества микробиологических нарушений с указанием в таблице средних значений степени дисбиоза, б - сравнение содержания бифидобактерий, в - лактобацилл при микробиологическом исследовании кала до и после лечения).

2,9±0,03 до 2,0±0,23 ммоль/л, р<0,05). У лиц с сочетанной дислипидемией из 2-й группы (66-80 лет) после приема препарата происходило снижение содержания общего холестерина (с 7,1±0,07 до 5,9±0,04 ммоль/л, р<0,05).

Заключительное исследование посвящено клинико-лабораторной оценке эффективности синбиотического препарата «Нормоспектрум» при ротавирусных гастроэнтеритах у 105 детей в возрасте от 1 года до 11 лет. В рамках протокола клинического испытания определяли возможное влияние препарата на купирование симптомов вторичной лактазной недостаточности;

изучали потенциальный санирующий эффект синбиотика (по темпам элиминации вируса из кишечника) при ротавирусной инфекции. Диагноз РВИ подтверждался результатами иммунохроматографического теста.

Изучаемая группа состояла из 45 детей, получавших наряду со стандартной терапией «Нормоспектрум» по 1 мерной ложке (0,5 г) 2 раза в день в течение 5 дней с момента госпитализации и 60 пациентов, которые получали лечение по традиционной схеме: диета, оральная или инфузионная регидратационная терапия. Результаты исследования представлены в таблице 4.

Таблица 4. Сравнительная характеристика клинико-лабораторной эффективности синбиотика «Нормоспектрум» при РВИ у детей.

Клинический показатель Исследуемая Контрольная Р-

группа группа значение

Продолжительность лихорадки, дни 2,93±0,33 3,76±0,48 р<0,05

Продолжительность анорексии, дни 2,02±0,33 2,1 ±0,31

Продолжительность инфекционно-токсического синдрома (вялость, слабость, адинамия), дни 2,33±0,3 2,41 ±0,29

Продолжительность диареи, дни 3,49±0,3 4,88±0,46 р<0,05

Средняя частота стула на 5 день терапии 1,04±0,32 1,73±0,57 р<0,05

Продолжительность жалоб на боли в животе, дни 1,16±0,3 1,42±0,31

Продолжительность метеоризма, дни 1,29±0,29 1,71 ±0,3 6 р<0,05

Продолжительность рвоты, дни 1,69±0,24 2,41±0,42 р<0,05

Продолжительность признаков обезвоживания, дни 1,67±0,25 2,18±0,38 р<0,05

Элиминация антигена РВ на 5 день терапии, % 33,3 11

Лактазная недостаточность на день госпитализации, % больных 52,3 59

Улучшение лабораторных показателей углеводной (лактазной) недостаточности на 5 день, % больных 41,67 4

Отсутствие динамики лабораторных показателей углеводной (лактазной) недостаточности, % больных 41,66 92

Длительность лихорадочного периода как одного из основных показателей инфекционно-токсического синдрома достоверно различалась в сравниваемых группах: у детей получавших «Нормоспектрум», продолжительность лихорадки была примерно на сутки меньше, чем в группе сравнения (р<0,05).

Положительное влияние пробиотических штаммов и цинка, входящих в состав «Нормоспектрума», характеризовалось достаточно быстрой нормализацией стула, уменьшением явлений метеоризма, купированием болей в животе. Общая продолжительность диарейного синдрома составила 3,49 дня в исследуемой группе и 4,88 дня в группе контроля (р<0,05). Применение

«Нормоспектрума» достоверно уменьшало длительность периода болезни, в течение которого у больного регистрировалась рвота, сокращало период проявлений обезвоживания в сравнении с группой контроля.

Полученные данные свидетельствуют о выраженном санирующем эффекте синбиотика. На 5 день от начала терапии у 33,3% больных детей, получавших «Нормоспектрум», антиген ротавируса в фекалиях не определялся, тогда как в группе контроля лишь у 11%.

Лабораторные признаки дисахаридазной недостаточности регистрировались в первые дни госпитализации более, чем у половины больных (52,3-59%). На фоне приема «Нормоспектрума» показатели, характеризующие нарушение переваривания Сахаров, нормализовались у 41,7% детей исследуемой группы и лишь в 4% - в контрольной.

Стратегия развития биотехнологической компании в условиях российского фармацевтического рынка

Последняя по порядку, но одна из важнейших по значимости задач, решаемых в рамках единой концепции разработки поликомпонентного пробиотического препарата - построение стратегии выведения зарегистрированного продукта на фармацевтический рынок.

Для реализации поставленной задачи нами было определено конкурентное поле компаний, позиционирующихся на пробиотическом сегменте российского фармацевтического рынка, идентифицирован тип осуществляемой этими фирмами конкурентной стратегии. Основными конкурентами компаний «Амфита», «Биокад» и «Партнер» на сегодняшний день являются «Lek» с хитом продаж «Линекс» и долей 30% и «Ratiopharm» с метаболическим пробиотиком «Хилак-форте» и долей 21% (рис. 13). Эти

30%

21%

16%

□ ДРУГИЕ

Я BIOCODEX

□ ФЕРМЕНТ ЗАО

□ FERROSAN AG

■ БИОМЕДИМ МЕЧНИКОВА

□ ФГУП МИКРОГЕН

□ AVENTIS PHARMA

□ ПАРТНЕР ЗАО

■ RATIOPHARM

□ LEK

Рисунок 13. Средние за период 2003-2009 гг доли ежегодных продаж (в %) десяти крупнейших производителей бактерийных препаратов на российском фармацевтическом рынке.

организации в соответствии с модифицированной теорией конкурентных стратегий Юданова соответствуют фирмам-«виолентам» (или слонам), основными чертами которых являются: массовый профиль производства, крупный размер компаний, высокий уровень расходов на НИОКР (табл. 5).

В рамках сложившейся ситуации на пробиотическом сегменте российского фармрьшка при разработке стратегии вывода новых конкурентоспособных продуктов на примере исследуемых биотехнологических компаний нами были выработаны следующие рекомендации:

1. Сосредоточиться на выпуске поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых препаратов, непрерывно расширяя линейку выпускаемой продукции как за счет введения в продукты новых пробиотических штаммов и пребиотических компонентов, так и за счет увеличения разновидностей фармакологических форм выпускаемой продукции.

2. При разработке комплекса маркетинга для ЗАО «Биокад» и ООО «НПФ Амфита» уйти от «лобового столкновения» с фармгигантами придерживаться «патиентной» (лисица) нишевой стратегии продвижения. Для ЗАО «Партнер» -использовать все имеющиеся ресурсы «виолентной» стратегии: технологический опыт, навыки обслуживания рынка, завоеванную у потребителей репутацию, накопленные финансовые возможности, чтобы избежать поглощения другой крупной компанией-конкурентом.

3. При выводе новых поликомпонентных пробиотичеких препаратов использовать все 3 составляющие продвижения (сервис для аптек, врачей и дистрибьюторов, содержание медицинских представителей и рекламу, нацеленную на конечного потребителя), а также дополнительно для ЗАО «Партнер» возможности имеющегося у него административного ресурса.

Используя разработанную стратегию, ООО «НПФ Амфита» укрепила свои позиции на пробиотическом сегменте российского фармацевтического рынка. Один из ее основных брэндов - «Нормоспектрум» - вошел в топ-100 самых продаваемых БАДов России за 2009 год. Линейка «Бифистим» успешно выведенная в 2004 на российский фармрынок была в 2006 году продана компании «Биомед» и продолжает занимать одно из ведущих мест по объему продаж среди отечественных пробиотических препаратов. ЗАО «Партнер» за счет выпуска нового поликомпонентного бактерийного лекарственного средства «Флорин форте» в 2007 году укрепил свои позиции крупнейшего российского производителя бифидо- и лактосодержащих препаратов.

ХАРАКТЕРИСТИКА СТРАТЕГИИ ТИПОЛОГИЯ ЮДАНОВА ТИПОЛОГИЯ ГУРКОВА ТИПОЛОГИЯ СТРИКЛЕНДА-ТОМПСОНА ТИПОЛОГИЯ МАЙЛЗА-СНОУ ПРИМЕЧАНИЯ

высокие издержки, низкое качество - низкая потребительская ценность «Неудачник» (высокая цена) «Аутсайдер» (низкая цена) «Реактор» У Портера есть понятие «критической области» на графике доля рынка/рентабельность

высокие издержки, высокая цена, высокое качество - высокая потребительская ценность «Патиент» (лисы) «Защитник качества» «Сфокусированная стратегия дифференциации» (узкий сегмент рынка) «Дефендер» (узкий продуктовый сегмент)

низкие издержки, низкая цена, умеренное качество - умеренная потребительская ценность «Виолент» (львы, слоны, бегемоты) «Защитник издержек» «Стратегия лидерства по издержкам» (большая доля рынка) «Дефендер» (узкий продуктовый сегмент)

сочетание высокой потребительской ценности (высокого качества, не имеющего аналогов) с низкими издержками и ценами «Эксплерент» (ласточки) «Проспектор» «Стратегия оптимальных издержек» («наилучшей стоимости») «Проспектор»

высокая цена, особое качество, низкие издержки «Интегрированный анализатор» «Сфокусированная стратегия низких издержек» «Анализатор» (присутствуют на двух сегментах продуктового рынка) У Юданова — аналог «эксплерента» переходящего к «патиентной» стратегии

средний уровень издержек, цен и потребительской ценности, присутствие на различных сегментах рынка «Коммутант» (мыши) «Диверсифициро ванный анализатор» (обширный набор ключевых компетенций) «Анализатор» (присутствуют на двух сегментах продуктового рынка)

различный уровень качества, высокие компетенции, умеренные издержки, повышенная цена «Монополист» С одной стороны такой тип конкурентной стратегии, противоречит рынку совершенной конкуренции, с другой - «виолент» у Юданова может ненадолго в конкретной отрасли превратиться в монополиста. Возможно также возникновение естественной монополии и картельного сговора

выводы

1. Теоретически обоснована необходимость и разработаны методы оценки биосовместимости промышленно перспективных пробиотических штаммов при конструировании поликомпонентных синбиотических препаратов, позволяющие повысить эффективность и безопасность их применения в клинической практике.

2. Созданная научная концепция, включающая структуру и основные принципы построения современного биотехнологического участка, позволяет решать широкий спектр промышленных задач по выпуску большого ассортимента конкурентоспособных поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых фармакологических форм.

3. Разработанная на основании принципа биосовместимости рецептура и внедренная на производственном участке универсальная технология получения жидких пробиотиков прошли экспертизу ФГУ «Российский центр испытаний и сертификации - Москва» и Федеральной службы Роспотребнадзора с включением новых препаратов-синбиотиков «Габрифлорин-бифидо» и «Габрифлорин-лакто» в Государственный реестр в качестве биологически активных добавок к пище - источников пробиотических микроорганизмов (бифидобактерий и лактобацилл).

4. Созданные по принципу сырьевой технологичности на биотехнологическом производственном участке синбиотические рецептуры «БАД-субстанция бифидобактерий», «БАД-субстанция лактобацилл» и «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл», рекомендованные Роспотребнадзором для использования в пищевой промышленности при производстве биологически активных добавок к пище, способны полностью удовлетворить как собственные потребности по выпуску готовых поликомпонентных пробиотических препаратов (Б АД «Бифидум-Мульти 1», Б АД «Бифидум-Мульти 2», БАД «Бифидум-Мульти 3», БАД «Нормоспектрум для детей от 1 до 14 лет», БАД «Нормоспектрум для детей от 3 до 14 лет», БАД «Нормоспектрум для детей от 14 лет и взрослых», БАД «Нормоспектрум-инулин для детей от 1 до 14 лет», БАД «Нормоспектрум-инулин для детей от 14 лет и взрослых»), так и контрактное производство (БАД «Полибактерин»),

5. Расширен спектр лечебно-профилактического применения поликомпонентных пробиотических препаратов при инфекционных и неинфекционных патологических состояниях: внедрен новый алгоритм одновременного со стандартной эрадикационной терапией применения синбиотика «Нормоспектрум» в комплексном лечении язвы желудка и ДПК; «Бифидум-Мульти» включен в спектр реабилитационных мероприятий для коррекции глубоких дисбиотических нарушений, вызванных полихимиотерапией при онкозаболеваниях у детей в период диспансерного наблюдения; получено клинико-лабораторное подтверждение возможности коррекции поликомпонентным пробиотиком «Нормоспектрум» содержания общего холестерина и триглицеридов у лиц пожилого возраста; использование синбиотика «Нормоспектрум» эффективно купировало основные симптомы ротавирусного гастроэнтерита у детей.

6. Проведенный теоретико-методологический анализ позволил систематизировать существующие подходы к типологиям эталонных конкурентных стратегий, идентифицировать стратегический тип развития основных компаний-конкурентов, позиционирующихся на пробиотическом сегменте российского фармацевтического рынка, сформировать собственную конкурентную стратегию и комплекс маркетинговых мероприятий по выведению новых препаратов-синбиотиков.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При конструировании новых поликомпонентных синбиотических препаратов необходимо использовать современные принципы оценки биосовместимости, включающие подтверждение видовой подлинности отобранных производственных штаммов, синергизма пробиотических штаммов внутри поликомпонентной ассоциации, эффективности и безопасности их взаимодействия с индигенной микрофлорой человека, сохранности при добавлении пребиотиков, микроэлементов, витаминов и антиоксидантов.

аппаратной цепочки и операционной технологичности производства, а также использовать валидационные методики для оценки соответствия заданным проектировочным решениям.

3. Зарегистрированная Федеральной службой Роспотребнадзора серия жидких поликомпонентных пробиотиков «Габрифлорин» может быть использована в качестве лечебно-профилактического средства для коррекции микрофлоры ЖКТ при дисбиотических состояниях у детей (с 3-х месячного возраста) и взрослых.

4. Созданные синбиотические рецептуры «БАД-субстанции бифидобактерий и/или лактобацилл» рекомендуются для использования в пищевой промышленности при производстве широкого спектра готовых форм бифидо- и лактосодержащих биологически активных добавок к пище.

5. Расширение спектра клинического применения поликомпоненгных пробиотических препаратов и разработка новых алгоритмов их использования позволяет рекомендовать:

• одновременное со стандартной эрадикационной терапией применение синбиотика «Нормоспектрум» в комплексном лечении язвы желудка и ДПК, позволяющее избежать побочных реакций, вызванных массивным приемом антибактериальных средств;

• «Бифидум-Мульти» при проведении реабилитационных мероприятий для коррекции глубоких дисбиотических нарушений, вызванных полихимиотерапией при онкозаболеваниях у детей;

• «Нормоспектрум» в схеме коррекции содержания общего холестерина и триглицеридов у лиц пожилого возраста;

• синбиотик «Нормоспектрум» для повышения эффективности лечения ротавирусной инфекции у детей.

6. Рекомендуется использовать разработанную стратегию развития биотехнологической компании с целью повышения конкурентоспособности и эффективности деятельности предприятий фармацевтической отрасли, применяя современные подходы к управлению и комплекс маркетинга.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1 .Серебрянский Ю.Е. Проблемы цитокинотерапии инфекционных заболеваний./ Серебрянский Ю.Е., Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Денисов Л.А., Рубальский О.В., Терентьев A.A., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Алешкин A.B., Степанов A.B. - М. - Москва, 1999. - 108 с.

2.Серебрянский Ю.Е. Проблемы цитокинотерапии инфекционных заболеваний. / Серебрянский Ю.Е., Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Денисов Л.А., Рубальский О.В., Терентьев A.A., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Алешкин A.B., Степанов A.B. - М. - Москва: Типография Учебного центра, 2000. - 106 с.

3.Бойко А. В. Микрофлора влагалища у девочек предпубертатиого возраста./ Бойко А. В., Алешкин В. А., Афанасьев С. С., Воробьев A.A., Богданова Е.А., Хасьяиов Э.А., Рубальская Е.Е., Абдрахимова Н.Р., Ефимова О.Г., Садолина И.В., Алешкин A.B., Афанасьев М.С.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - № 2. - С. 9194.

4Леванова Л. А. Возрастные особенности микробиоценоза кишечника у жителей г. Кемерово./ Леванова Л. А., Алешкин В. А., Воробьев А. А., Афанасьев С.С., Знннн-Бермес H.H., Рубальский О.В., Алешкин A.B.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - № 3. - С. 72-75.

5.Леванова Л. А. Становление микрофлоры кишечника у детей первого года жизни./ Леванова Л. А., Алешкин В. А., Воробьев А. А, Афанасьев С.С., Сурикова Е.В., Рубальский О.В., Алешкин A.B.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии,- 2001.- № 4. - С. 47-50. бЛеванова Л. А. Микробиоценоз кишечника в критические периоды развития ребенка./ Леванова Л. А., Алешкин В. А., Воробьев А. А, Афанасьев С.С., Знннн-Бермес H.H., Алешкин A.B.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - № б. - С. 6974.

7.Леванова Л. А. Состояние нормальной микрофлоры кишечника у детей дошкольного возраста, проживающих в экологически неблагополучном регионе./ Леванова Л. А., Алешкин В. А., Воробьев А. А, Афанасьев С.С., Сурикова Е.В., Алешкин A.B.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002. -№ 1. - С. 64-67.

8.Алешкин В.А. Перспективы использования иммунобиологических препаратов в профилактике и лечении хронического хламидийного и стафилококкового носительства у детей./ Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Лобачев Н.В., Алешкин А.ВЛ Материалы VIII съезда Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., 2002. - С. 135137.

9.Леванова Л. А. Особенности биологических свойств условнопатогенных бактерий, определяющих характер дисбиотических нарушений в составе нормальной микрофлоры толстой кишки./ Леванова Л. А., Алешкин В. А., Воробьев А. А, Афанасьев С.С., Сурикова Е.В., Рубальский О.В., Алешкин A.B.// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002.-№5. -С. 48-52.

10.Алешкин A.B. Бактерийный препарат нового поколения «Споробактерин»./ Алешкин A.B., Афанасьев С.С., Давыдкин В.Ю., Манько Т.Н., Давыдкин И.Ю.// Медицинская картотека. - 2003. - №4. - С.18.

П.Лютов А.Г. Изучение терапевтической эффективности биологически активной добавки «Кипацид»./ Лютов А.Г., Бочкарева С.С., Алешкин A.B., Лукьянова О.Ю., Зуева М.М. // Приложение к журналу «Вестник восстановительной медицины».Сборник материалов научно-практической конференции «Иммуноглобулиновые препараты энтерального и внитривенного применения». - М., 2003. - С. 41-43.

12.Бочкарева С.С. Рынок препаратов внутривенных иммуноглобулинов./ Бочкарева С.С., Лютов А.Г., Алешкин A.B.// Приложение к журналу «Вестник восстановительной медицины». Сборник материалов научно-практической конференции «Иммуноглобулиновые препараты энтерального и внитривенного применения». - М., 2003. - С. 44-45.

13.Петрова М.С. Результаты клинического испытания препаратов «Бифистим» у детей./ Петрова М.С., Москалева Т.Н., Алешкин A.B.// Вопросы детской диетологии. - 2004. - т. 2. - №2. - С.26-29. 14.3апруднов А.М. Оценка эффективности и безопасности биологически активной добавки «Бифистим» у детей./ Запруднов A.M., Харитонова Л.А., Алешкин А.В.//Вопросы современной педиатрии. - 2004. - т. 3. - №4. -С.108-111.

15. Алешкин A.B. Стратегия развития биотехнологической компании «Биокад».// Бизнес медицина. - 2004. - №5. - С.27.

16. Алешкин A.B. Определение значимых характеристик пробиотических препаратов с помощью маркетингового анализа первичной рыночной информации./ Алешкин A.B., Пирлик Г.П.// Новые лекарственные препараты. - 2004. - №3. - С.44-47.

17. Алешкин A.B. Стратегия развития биотехнологической компании «Биокад».// Новые лекарственные препараты. - 2004. - №3. - С.48-51.

18.Алешкин A.B. Разработка концепции вывода новых конкурентоспособных продуктов на российский фармацевтический рынок для компании «Биокад».// Выпускная аттестационная работа. Программа: мастер делового администрирования (MBА). - Москва, 2005. - 90 с.

19.Алешкин A.B. Средства для лечения дисбактериоза кишечника.// Новая аптека. Аптечный ассортимент. - 2005. - №8. - С.26-30.

20.Алешкин A.B. Ввод новинок в ассортимент аптечной сети.// Фармацевтическое обозрение. - 2006. - №5. - С. 16-19.

21.Грачева Н.М. Возможности коррекции дисбактериоза кишечника у детей./ Грачева Н.М., Петрова М.С., Москалева Т.Н., Алешкин A.B., Соловьева А.И., Бочкарева С.С.// Инфекционные болезни. - 2006 - т. 4. -№4. - С.62-66.

22.Галимзянов Х.М. Вопросы функционального использования бактериофагов./ Галимзянов Х.М., Голикова Т.О., Зязин С.Н., Мамонтова Н.С., Рубальский Е.О., Янченко Е.К., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Алешкин A.B., Воропаева Е.А., Афанасьев Д.С., Голикова В.М.// Естественные науки. - 2007. - т.20. - №3. - С. 57-63.

23.Галимзянов Х.М. Перспективы использования бактериофагов в качестве биологически активных добавок к пище./ Галимзянов Х.М., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Голикова Т.О., Зязин С.Н., Мамонтова Н.С., Рубальский Е.О., Янченко Е.К., Алешкин A.B., Беляев Н.И., Амерханова А.М., Афанасьев Д.С.// Астраханский медицинский журнал. -2008.-№1.-С. 83-87.

24.Алешкин В.А. Исследование комплекса бактериофагов с индуцированной вирулентностью, перспективных для коррекции местной антиинфекционной резистентности./ Алешкин В.А., Амерханова A.M., Афанасьев С.С., Алешкин A.B.// Материалы Вероссийской научно-практической конференции «Современные представления об иммунокоррекции». - Пенза, 2008. - С.3-4.

25.Алешкин A.B. Синбиотик Нормоспектрум® в лечении заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки./ Алешкин A.B., Исаев P.P., Рубальский О.В., Амерханова А.М., Панов A.A.// Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2009. - №2. - С.19-22.

26.Алешкин A.B. Новый алгоритм использования поликомпонентных бактерийных препаратов при язве желудка и двенадцатиперстной кишки./ Алешкин A.B., Оленина Л.С., Амерханова A.M., Зязин С.Н., Титов ЕМ.// Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2009. - №4. - С. Ml.

27.Амерханова A.M. Эффективность синбиотика «Нормоспектрум» у пожилых людей с нарушениями липидного обмена./ Амерханова A.M., Алешкин A.B., Чулок Т.А., Терешина Е.В., Серова Л.Д.//Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. -2009. - №4 - С.М1-М2.

28.Шевцов В.В. Значимость изучения отдельных метаболитов микрофлоры толстой кишки у больных раком легких, ассоциированного с дисбактериозом,

на фоне приема препарата-синбиотика «Нормоспектрум»./ Шевцов В.В., Зубкова Е.С., Митрохин С.Д., Забазный НП, Алешкин А.В.//Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2009. - №4. - С.М45.

29.Алешкин A.B. Клиническая эффективность синбиотика «Нормоспектрум»® в комплексной терапии заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки./ Алешкин A.B., Исаев P.P., Рубальский О.В., Кураленко A.A., Амерханова A.M., Панов A.A.// Ремедиум Приволжья. - 2009. - №9. - С.26.

30.Алешкин A.B. Клинико-лабораторная оценка эффективности препарата «Бифидум-Мульти» при диспансерном лечении онкобольных детей./ Алешкин A.B., Амерханова A.M., Воропаева Е.А., Ефимова О.Г., Цейтлин Г.Я., Коновалова М.В.// Медицинский альманах. - 2010. - №1(10). - С.193-195.

31.Амерханова А.М. Роль бифидофлоры в жизнеобеспечении организма ребенка и факторы, определяющие ее формирование./ Амерханова А.М., Воронина ОЛ., Жиленкова О.Г., Алешкин A.B., Лисунова С.А., Зубкова Е.С., Романова A.A., Субботина М.Е., Кунда М.С.//Вопросы детской диетологии. - 2010. - т.8. - №3. - С.22-29.

32.Метельская В.А. Колонизационная резистентность и иммунологическая реактивность слизистых ротоглотки у детей в норме и при бронхолегочных заболеваниях./ Метельская В.А., Алешкин В.А., Воропаева Е.А., Караулов A.B., Несвижский Ю.В., Афанасьев С.С., Матвеевская Н.С., Панурина Р.Л., Бичучер А.М., Гречишникова О.Г., Байракова АЛ., Урбан Ю.Н., Алешкин A.B., Слободенюк В.В., Егорова Е.А. // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2010. - №7. -С.10-15.

33.Халиуллина C.B. Эффективность применения пробиотиков в комплексной терапии ротавирусной инфекции у детей./ Халиуллина C.B., Алешкин A.B., Амерханова A.M., Анохин В.А., Гутор И.А.// Вопросы практической педиатрии. - 2010. - т.5. - №4. - С. 87-90.

34.Алешкин A.B. Технические основы биологической безопасности асептических и контролируемых объектов биотехнологических производств и диагностических лабораторий./ Алешкин A.B., Григорьев В.В.// Сборник материалов VII Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». Москва, 28-29 октября, 2010. - С. 26-28.

35.Алешкин A.B. Коррекция нарушений микробиоценоза желудочно-кишечного тракта у детей с острым лимфобластным лейкозом в период диспансерного наблюдения./ Алешкин A.B., Цейтлин Г.Я., Затевалов A.M., Коновалова М.В., Амерханова А.М., Афанасьев С.С., Селькова Е.П.// Астраханский медицинский журнал. - 2010. - №4. - С. 79-83.

36.Aleshkin A.V. Correction of GIT Microbiocenosis Disorders in Children with Oncological Diseases during Dispensary Observation./ Aleshkin A.V., Tseitlin

G.Ya., Amerhanova A.M., Konovalova M.V.// Proceedings of the International Scientific Conference on Probiotics and Prebiotics IPC2010, Kosice, Slovakia, June 15-17,2010.-P.15.

Изобретения

37. Патент на изобретение № 2125389 С1 Российская Федерация МПК

6 A23L1/305, A23L1/29, А61К38/21, Заявка № 98107888/13 от 24.04.1998, опубликовано 27.01.1999, бюлл № 3/ Биологически активная добавка к пище/ Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Каркищенко H.H., Рубальский О.В., Денисов Л.А., Пчелинцев С.Ю., Воробьев A.A., Серебрянский Ю.Е., Джумагазиев A.A., Хасьянов Э.А., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Каркищенко В.Н., Алешкин A.B., Миронов В.В., Казимирова Е.И.; заявители и патентообладатели Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Каркищенко H.H., Рубальский О.В., Денисов Л.А., Пчелинцев С.Ю., Воробьев A.A., Серебрянский Ю.Е., Джумагазиев A.A., Хасьянов Э.А., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Каркищенко В.Н., Алешкин A.B., Миронов В.В., Казимирова Е.И.

38. Патент на изобретение № 2136314 С1 Российская Федерация МПК 6 А61К39/395, Заявка № 98117175/14 от 16.09.1998, опубликовано 10.09.1999, бюлл № 25/ Суппозиторий на основе иммуноглобулинового препарата/ Алешкин В.А., Алешкин A.B., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Борисова И.В., Ханина Г.И.; заявители и патентообладатели Алешкин В.А., Алешкин A.B., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Борисова И.В., Ханина Г.И.

39. Патент на изобретение № 2144832 С1 Российская Федерация МПК

7 А61К38/19, А61К39/395, А61Р31/00, Заявка № 99109415/14 от 17.05.1999, опубликовано 27.01.2000, бюлл № 3/ Противовирусное, противомикробное и противокандидозное средство / Лобачев Н.В., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Денисов Л.А., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Рубальская Е.Е.; заявители и патентообладатели Лобачев

H.В., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Денисов Л.А., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С., Рубальская Е.Е.

40. Патент на изобретение № 2144294 С1 Российская Федерация МПК 7 A23L1/03, A23L1/305, А61К35/74, Заявка № 99106695/13 от 31.03.1999, опубликовано 20.01.2000, бюлл № 21 Пищевая биологически активная добавка / Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Пилат ТЛ., Рубальский О.В., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.; заявители и патентообладатели Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Пилат Т.Л.,

Рубальский О.В., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.

41.Патент на изобретение № 2146531 Cl Российская Федерация МПК 7 А61К38/21, А61К35/74, А61Р31/00, А61Р37/00, Заявка № 99109416/14 от

17.05.1999, опубликовано 20.03.2000, бюлл № 8/ Способ лечения инфекционных заболеваний / Султанова C.B., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Гришина Т.Н., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.; заявители и патентообладатели Султанова C.B., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Гришина Т.И., Алешкин

A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.

42. Патент на изобретение № 2157646 Cl Российская Федерация МПК 7 A23L1/30, A23D9/00, А61К38/17, А61К38/19, А61К38/21, Заявка №2000101147/13 от 19.01.2000, опубликовано 20.10.2000, бюлл № 29/ Биологически активная добавка к пище/ Павельева Л.Г., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Журавлев A.B., Лунеев Д.Е., Денисов Л.А., Журавлева E.H., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.; заявители и патентообладатели Павельева Л.Г., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Журавлев A.B., Лунеев Д.Е., Денисов Л.А., Журавлева E.H., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.

43.Патент на изобретение № 2161887 Cl Российская Федерация МПК 7 A23D9/00, A23L1/30, А61К9/02, А61К9/06, А61К38/19, А61К38/20, А61К39/395, А23С9/00, Заявка №2000117592/13 от 06.07.2000, опубликовано 20.01.2001, бюлл № 2/ Биологически активная добавка/ Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Давыдкин В.Ю., Рубальский О.В., Давыдкин И.Ю., Ханина Г.И., Гаврин А.Г., Алешкин A.B., Денисов Л.А., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.; заявители и патентообладатели Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Давыдкин В.Ю., Рубальский О.В., Давыдкин И.Ю., Ханина Г.И., Гаврин А.Г., Алешкин A.B., Денисов Л.А., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.

44. Патент на изобретение № 2164765 Cl Российская Федерация МПК 7 A23L1/30, A23D9/00, A23L1/24, А61К9/00, Заявка №2000120944/13 от

11.08.2000, опубликовано 10.04.2001, бюлл № 10/ Биологически активная добавка / Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Давыдкин

B.Ю., Денисов Л.А., Давыдкин И.Ю., Гаврин А.Г., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.; заявители и патентообладатели Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Рубальский О.В., Давыдкин В.Ю., Денисов Л.А., Давыдкин И.Ю., Гаврин А.Г., Алешкин A.B., Афанасьев Д.С., Афанасьев М.С.

45.Патент на изобретение № 2366437 С2 Российская Федерация МПК А61К35/74, А61Р31/04, Заявка №2007139680/15 от 29.10.2007, опубликовано

10.09.2009, бюлл № 25/ Композиция на основе бактериофагов (варианты)/ Алешкин В. А., Рубальский О. В., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Гаврин А. Г., Амерханова А. М., Логунов О. В., Киселёва И. А., Пугачёва Т. Г., Афанасьев Д. С., Рубальский Е. О., Голикова В. М., Давыдкин В.Ю., Давыдкин И. Ю.; заявитель и патентообладатель ООО «Амфита».

46. Патент на изобретение № 2366708 С2 Российская Федерация МПК C12N7/00, А61К35/76, А61Р31/04, Заявка №2007139681/13 от 29.10.2007, опубликовано 10.09.2009, бюлл № 25/ Иммунобиологический бактерицидный препарат (варианты)/ Алешкин В. А., Рубальский О. В., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Гаврин А. Г., Амерханова А. М., Логунов О. В., Киселёва И. А., Пугачёва Т. Г., Давыдкин В.Ю., Афанасьев Д. С., Рубальский Е. О., Голикова В. М., Давыдкин И. Ю.; заявитель и патентообладатель ООО «Амфита».

47. Патент на изобретение № 2373274 С1 Российская Федерация МПК C12N1/00, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128539/13 от 15.07.2008, опубликовано 20.11.2009, бюлл № 32/ Штамм Bifidobacterium breve OV-12, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

48. Патент на изобретение № 2373275 С1 Российская Федерация МПК C12N1/00, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128543/13 от 15.07.2008, опубликовано 20.11.2009, бюлл № 32/ Штамм Bifidobacterium pseudocatenulatum OV-17, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

49. Патент на изобретение № 2373277 С1 Российская Федерация МПК C12N1/00, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128544/13 от 15.07.2008, опубликовано 20.11.2009, бюлл № 32/ Штамм Bifidobacterium angulatum OV-15, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и

косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

50. Патент на изобретение № 2373278 С1 Российская Федерация МПК C12N1/00, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128545/13 от 15.07.2008, опубликовано 20.11.2009, бюлл № 32/ Штамм Bifidobacterium pseudocatenulatum OV-2, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. £., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

51. Патент на изобретение № 2375443 С1 Российская Федерация МПК C12N1/20, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128541/13 от 15.07.2008, опубликовано 10.12.2009, бюлл № 34/ Штамм Bifidobacterium bifidum OV-7, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

52. Патент на изобретение № 2375444 С1 Российская Федерация МПК C12N1/20, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128540/13 от 15.07.2008, опубликовано 10.12.2009, бюлл № 34/ Штамм Bifidobacterium bifidum OV-19, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. Л., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

53. Патент на изобретение № 2375445 С1 Российская Федерация МПК C12N1/20, А23С9/12, А61К35/74, A23L1/29, А61К8/99, Заявка №2008128542/13 от 15.07.2008, опубликовано 10.12.2009, бюлл № 34/ Штамм Bifidobacterium longum OV-20, используемый для получения бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, ферментированных

и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств/ Алешкин В. А., Амерханова А. М., Афанасьев С. С., Алешкин А. В., Жиленкова О. Г., Воронина О. JI., Субботина М. Е., Кунда М. С.; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора.

54. Патент на изобретение № 2393214 С1 Российская Федерация МПК C12N1/20, А61К35/74, С12Р37/00, Заявка №2009102950/13 от 29.01.2009, опубликовано 27.06.2010, бюлл № 18/ Иммунобиологическое противоаллергическое средство (варианты), штамм Lactobaccilius acidophilus NKJC, Lactobaccilius acidophilus JCH, Lactobaccilius acidophilus KAA! Черепанова Ю. В., Поспелова В. В., Алешкин В. А., Афанасьев С. С., Лахтин В. М., Амерханова А. М., Куяров А. В., Рубальский О. В., Ульянова Л. П., Алешкин А. В., Волкова Е. В., Лахтин М. В., Ахминеева А. X., Рубальский Е. О., Куяров А. А., Афанасьев М. С., Афанасьев Д. С; заявители и патентообладатели ООО «ИнноПроб», Алешкин В. А., Афанасьев С. С., Амерханова А. М., Куяров А. В., Рубальский О. В., Алешкин А. В., Ахминеева А. X., Рубальский Е. О., Афанасьев М. С., Афанасьев Д. С.

Список сокращений БАД - биологически активная добавка к пище ДПК - двенадцатиперстная кишка ЖКТ - желудочно-кишечный тракт КОЕ - колониеобразующая единица НТД - нормативно-техническая документация РВИ - ротавирусная инфекция СГР - свидетельство государственной регистрации СЭЗ - санитарно-эпидемиологическое заключение ТЗ - техническое задание ТИ - технологическая инструкция ТУ - технические условия ЭГДС - эзофагогастродуоденоскопия

GMP - Good Manufacturing Practice р - критический уровень значимости величины °Т - градусы Тернера

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Алешкин, Андрей Владимирович

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы. Предпосылки создания современного поликомпонентного пробиотического препарата.

1.1 .Этапы жизненного цикла биотехнологического продукта.

1.2.Современные представления о микробиоте человека и ее влиянии на макроорганизм.

1.3.Нарушение нормобиоценоза ЖЕСТ и способы его коррекции.

Собственные исследования.

Глава 2. Материалы и методы исследований.

2.1 .Производственные штаммы микроорганизмов и среды для их культивирования.

2.2.Методы исследования.

2.3.Объем проведенных исследований.

Результаты исследования и их обсуждение.

Глава 3. Биосовместимость, как основной принцип создания безопасных и эффективных поликомпонентных пробиотических препаратов.

3.1. Видовая идентификация пробиотических штаммов в поликомпонентной ассоциации.

3.1.1. Изучение морфологических свойств.

3.1.2. Идентификация биохимических свойств.

3.1.3. Идентификация производственных штаммов молекулярно-генетическим методом.

3.1.4. Изучение чувствительности производственных пробиотических штаммов к антибиотикам.

3.1.5. Определение антагонистической активности производственно перспективных штаммов бифидо- и лактобактерий.

3.1.6. Изучение культуральных свойств производственных штаммов бифидобактерий и лактобацилл.

3.2.Межвидовые взаимодействия пробиотических штаммов в процессе производства поликомпонентных препаратов.

3.3.Биосовместимость поликомпонентного пробиотического препарата с индигенной микрофлорой человека.

3.3.1. Исследование характера межштаммовых взаимоотношений при совместном культивировании на плотной питательной среде.

3.3.2. Исследование характера межштаммовых взаимоотношений при отсроченном подсеве индигенных культур.

3.3.3 Исследование характера межштаммовых взаимоотношений при совместном культивировании в полужидкой среде.

3.4. Сочетание пребиотических компонентов, витаминов, микроэлементов и антиоксидантов с пробиотическими штаммами в составе синбиотического препарата.

3.4.1 Оценка биосовместимости производственных штаммов с растворимыми пищевыми волокнами.'.

3.4.2. Взаимодействие витаминов, минералов и антиоксидантов с пробиотическими культурами.

Глава 4. Концепция создания универсального биотехнологического участка по производству поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм.

4.1.Принципы построения стандартных условий производства.

4.2.0пределение критериев универсальности технологической цепочки. 134 4.3.Методология увеличения производительности биотехнологического участка.

Глава 5. Отработка рецептуры и технологии, государственная регистрация и запуск серийного производства жидких иммунобиологических препаратов -Габрифлорин-лакто и Габрифлорин-бифидо.

5.1. Разработка рецептуры жидких поликомпонентных пробиотических препаратов.•.

5.2. Построения универсальной схемы технологического процесса получения жидкого поликомпонентного пробиотического препарата.

5.3. Оценка микробиологических, санитарно-гигиенических характеристик жидких поликомпонентных пробиотических препаратов, определения гарантийного срока их хранения. Государственная регистрация и декларирование серии препаратов «Габрифлорин».

Глава 6. Отработка рецептуры и технологии, государственная регистрации и запуск серийного производства сухих поликомпонентных пробиотических субстанций - «БАД-субстанция бифидобактерий», «БАД-субстанция лактобацилл» и «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл».

6.1. Разработка состава поликомпонентных пробиотических субстанций.

6.2. Создание структуры технологического процесса получения сухих поликомпонентных пробиотических субстанций на основе бифидобактерий и/или лактобацилл.

6.3. Оценка микробиологических, санитарно-гигиенических характеристик сухих поликомпонентных пробиотических субстанций, определения гарантийного срока их хранения. Государственная регистрация «БАД-субстанции бифидобактерий», «БАД-субстанции лактобацилл» и «БАД-субстанции бифидобактерий и лактобацилл».

6.4. Примеры использования разработанной «БАД-субстанции бифидобактерий и/или лактобацилл» в качестве исходного сырья для готовых форм поликомпонентных пробиотических препаратов.

Глава 7. Современные алгоритмы применения поликомпонентных пробиотических препаратов в инфекционной и неинфекционной патологии.

7.1. Пробиотические препараты в комплексном лечении язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

7.2. Оценка эффективности включения пробиотиков в комплекс реабилитационных мероприятий при онкозаболеваниях у детей в период диспансерного наблюдения.

7.3. Влияние поликомпонентных пробиотиков на липидный обмен у больных с риском развития атеросклероза.:.

7.4. Особенности применения пробиотических препаратов при ротавирусной инфекции у детей.

Глава 8. Стратегия развития биотехнологической компании в условиях российского фармацевтического рынка.

8.1. Теоретико-методические основы конкурентного поведения биотехнологической компании.

8.2. Ассортиментная политика, методы продвижения и конкурентные стратегии отечественных и зарубежных производителей поликомпонентных пробиотических препаратов, работающих на фармацевтическом рынке России.

8.3. Идентификация типа предпочтительной конкурентной стратегии роста для биотехнологической компании, разработка соответствующей концепции создания и дальнейшего вывода ее новых поликомпонентных пробиотических продуктов на российский фармацевтический рынок.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Поликомпонентные пробиотические препараты - конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке"

Актуальность проблемы

Эффективность бактерийных препаратов определяется совокупностью биологических свойств штаммов, входящих в их состав [40, 219, 233]. Отдельные производители расширили спектр культур, используемых в составе новых пробиотиков, включив в их рецептуру спороносные аэробные бациллы (род Bacillus), энтерококки, пропионовокислые бактерии, аэрококки, сахаромицеты, высшие грибы {Aspergillus, Risopus, Cordiceps) [145, 165, 174, 242]. Другие - пытаются повысить биологическую активность пробиотиков за счет разработки комплексных препаратов на основе специально подобранных композиций штаммов, сочетания компонентов пре- и пробиотического происхождения, а также добавляя продукты метаболизма микрофлоры [6, 8, 18, 26, 237].

Современные клинические исследования открывают все новые стороны позитивного воздействия пробиотиков на физическое состояние человека, что позволяет расширить сферу их применения в комплексных лечебно-профилактических мероприятиях при некоторых инфекционных и неинфекционных патологических состояниях, в частности, хеликобактер-ассоциированной язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гемабластозах и солидных опухолях, дислипидемии и ротавирусной инфекции [200, 151, 239, 288, 301, 343]. Однако развитие новых клинических направлений подразумевает создание инновационных медицинских технологий, позволяющих в полной мере реализовывать биологический потенциал поликомпонентных пробиотических средств.

По данным маркетинговых исследований ЗАО «Группа ДСМ», проведенных в 2009 году, около 77% отечественного фармацевтического рынка в стоимостном выражении составляет импортная продукция, в то же время, согласно отчету, представленному Контрольным управлением Президента РФ, замещение импортных лекарственных препаратов отечественными возможно более чем по 6000 наименований. В рамках направления, заданного правительством в принятом документе «Концепция долгосрочного социально-экономического развития Российской Федерации на период до 2020 года», одной из актуальнейших задач российского биотехнологического сектора является создание высокотехнологичных производств по выпуску конкурентоспособных пробиотических препаратов, которые по своим потребительским характеристикам не должны уступать импортным аналогам. Основным направлением прикладных исследований в этой связи является создание стандартных условий производства, соответствующих ОМР, оптимизация технологических процессов и внедрение инновационных методик получения пробиотиков.

Конкурентоспособность биофармацевтического предприятия зависит от общей эффективности его деятельности и определяется совершенством используемых технологий, умелой постановкой маркетинговой службы, действенным менеджментом и рядом других экономических и технических параметров работы фирмы [247]. Исследование проблемы повышения конкурентоспособности с точки зрения теории конкуренции помогает направить усилия по совершенствованию деятельности фирмы в русло правильной, подходящей именно для нее стратегии конкурентной войны [83]. Новые коммерческие фирмы, такие как «Биокад», «Амфита», «Партнер» в отличие от большинства приватизированных предприятий лучше приспособлены для бизнеса в условиях рыночной экономики. Однако и для них выбор оптимальной стратегии на различных этапах жизненного цикла является «болезненным». В сверхбыстро меняющейся российской экономике (где сегодня выгодно биржевое дело, завтра - импорт автомобилей) укрепиться для получения высоких прибылей в сфере производства лекарственных средств, тем более, производимых с помощью суперсовременных наукоемких биотехнологических методов - серьезная стратегическая цель.

Цель исследования

Задачи исследования

4. Сконструировать комплексную синбиотическую субстанцию с различными сочетаниями пре- и пробиотичеких компонентов в качестве исходного сырья для широкого спектра готовых форм пробиотических препаратов («БАД-субстанция бифидобактерий и/или лактобацилл»). Отработать рецептуру и технологию производства. Оценить микробиологические, санитарно-гигиенические характеристики, сохранность всех компонентов субстанции для определения гарантийного срока хранения. Осуществить их санитарно-гигиеническую экспертизу и государственную регистрацию на Федеральном уровне.

Научная новизна исследования

Впервые разработана структура универсального биотехнологического участка по выпуску поликомпонентных пробиотических препаратов и методология оценки соответствия ОМР созданных на нем стандартных условий производства (заявка на изобретение № 2010145025 и №2010141571).

На базе современного биотехнологического комплекса отработана рецептура и технология получения новых поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых форм («Б АД-субстанция бифидобактерий и/или лактобацилл» ТУ 9197-007-38989935-08, «Габрифлорин» ТУ 9197-00638989935-08).

Теоретическая значимость работы

Проведенные исследования и разработанные на их основе рецептурный состав и нормативная технологическая документация обеспечили прохождение процедуры независимой экспертизы продукции и государственной регистрации Федеральной службой Роспотребнадзора с внесением в Государственный реестр биологически активных добавок к пище: •«Габрифлорин-бифидо» СГР№77.99.23.3.У.5705.6.09 от 09.06.2009; •«Габрифлорин-лакто» СГР№77.99.23.3.У.5706.6.09 от 09.06.2009; •«Б АД-субстанция бифидобактерий» СГР№77.99.23.3.У.5708.6.09 от 09.06.2009;

•«БАД-субстанция лактобацилл» СГР№77.99.23.3.У.5709.6.09 от 09.06.2009; •«Б АД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл»

СГР№77.99.23.3.У.5707.6.09 от 09.06.2009.

Внедрение в практику

Зарегистрированные в Федеральном реестре Роспотребнадзора жидкие препараты-синбиотики нового поколения БАД «Габрифлорин-бифидо» и «Габрифлорин-лакто» выпускаются на производственном участке ООО «НПФ Амфита».

•ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии Минздравсоцразвития РФ, г. Москва;

•Филиал ГОУ ВПО РГМУ Росздрава «НКЦ геронтологии», г. Москва;

•ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Росздрава, г. Казань;

•Правобережная больница ФГУ ЮОМЦ Росздрава, г. Астрахань. Анализ результатов данных исследований приведен в клинических отзывах, актах внедрения, протоколах наблюдений.

2. Созданный универсальный биотехнологический участок позволяет наладить выпуск широкого ассортимента конкурентоспособных поликомпонентных пробиотических субстанций и готовых фармакологических форм.

3. Логичным* завершением многоэтапного научного исследования, охватывающего целый ряд задач — от составления рецептуры поликомпонентных пробиотических препаратов, их клинических испытаний, выпуска на созданном универсальном опытно-производственном участке — является разработка стратегии продвижения полученных конкурентоспособных препаратов на российский фармацевтический рынок.

Апробация работы

Основные результаты исследований доложены и обсуждены на российских и международных конференциях: I Московсковском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития», Москва, 2003; 8-ом Российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии», Москва, 2009; 2-ом Международном конгрессе по пробиотикам, Санкт-Петербург, 2009; VI Региональной научно-практической конференции «Педиатрия и детская хирургия в Приволжском Федеральном округе», Казань, 2009; XI Всероссийском конгрессе диетологов и нутрициологов «Питание и здоровье», Москва, 2009; Совместной конференции врачей Республики Татарстан и Российской гастроэнтерологической ассоциации, Казань, 2010; International Scientific Conference on Probiotics and Prebiotics IPC2010, Kosice, Slovakia, 2010; XVI Российской гастроэнтерологической неделе, Москва, 2010; VII Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность», Москва, 2010.

Публикации

Объем и структура диссертации

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)", Алешкин, Андрей Владимирович

ВЫВОДЫ

1 .Теоретически обоснована необходимость и разработаны методы оценки биосовместимости промышленно перспективных пробиотических штаммов при конструировании поликомпонентных симбиотических препаратов, позволяющие повысить эффективность и безопасность их применения в клинической практике.

3. Разработанная на основании принципа биосовместимости рецептура и внедренная на производственном участке универсальная технология получения жидких пробиотиков прошли экспертизу ФГУ «Российский центр испытаний и сертификации - Москва» и Федеральной службы Роспотребнадзора с включением новых препаратов-синбиотиков «Габрифлорин-бифидо» и «Габрифлорин-лакто» в Государственный реестр в качестве биологически активных добавок к пище — источников пробиотических микроорганизмов (бифидобактерий и лактобацилл).

4. Созданные по принципу сырьевой технологичности на биотехнологическом производственном участке синбиотические рецептуры «БАД-субстанция бифидобактерий», «БАД-субстанция лактобацилл» и «БАД-субстанция бифидобактерий и лактобацилл», рекомендованные Роспотребнадзором для использования в пищевой промышленности при производстве биологически активных добавок к пище, способны полностью удовлетворить как собственные потребности по выпуску готовых поликомпонентных пробиотических препаратов (БАД «Бифидум-Мульти 1», БАД «Бифидум-Мульти 2», БАД «Бифидум-Мульти 3», БАД «Нормоспектрум для детей от 1 до 14 лет», БАД «Ыормоспектрум для детей от 3 до 14 лет», БАД «Нормоспектрум для детей от 14 лет и взрослых», БАД «Нормоспектрум-инулин для детей от 1 до 14 лет», БАД «Нормоспектрум-инулин для детей от 14 лет и взрослых»), так и контрактное производство (БАД «Полибактерин»).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. Создавая биофармацевтическое производство, следует придерживаться разработанной структуры и основных принципов построения современного биотехнологического участка — стандартных условий, универсальности аппаратной цепочки и операционной технологичности производства, а также использовать валидационные методики для оценки соответствия заданным проектировочным решениям.

5. Расширение спектра клинического применения поликомпонентных пробиотических препаратов и разработка новых алгоритмов их использования позволяет рекомендовать:

• «Нормоспектрум» в схеме коррекции содержания общего холестерина и триглицеридов у лиц пожилого возраста;

• синбиотик «Нормоспектрум» для повышения эффективности лечения ротавирусной инфекции у детей.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Алешкин, Андрей Владимирович, Москва

1. Абрамов Н. А. и др. Применение продукта Бифидок для профилактики и лечения дисбактериоза кишечника у детей // Методические рекомендации для врачей. 1997. - 15 с.

2. Авдеев В.Г. Пробиотики и пребиотики в лечении заболеваний желудочно-кишечного тракта.// Клиническая фармакология и терапия.- 2006.- № 15(1).-С.36-40.

3. Агаджанян H.A., Труханов А.И., Шендеров Б.А.//Этюды об адаптации и путях сохранения здоровья.-М:Сирин.- 2002.-156 С.

4. Александрова Х.М. Изучение эффективности антагонистических препаратов в комплексной терапии кишечных инфекций у детей. // Авгореф. дис. .канд. мед.наук.-Москва.- 1972.-15 с.

5. Александрович Н.Ж, Пирогова З.И. Нарушение микробного пейзажа человека и пути их коррекции.//Клиническое питание.-2005.-№ 2.-С.43-46.

6. Алешкин В. А. и др. Полибактерин. Опыт применения // Пособие для врачей. М., 2003,- 23 с.

7. Алешкин В.А., Борисова И.В. Комплексные иммунобиологические препараты (КИП) для орального и ректального применения.// Пособие для врачей. Н-Новгород, 1991. - 212 с.

8. Амерханова А. М. Научно-производственная разработка новых препаратов-синбиотиков и клинико-лабораторная оценка их эффективности. // Автореф. дис. .докт.биол. наук.-Москва.- 2009.- 50 с.

9. Анкирская A.C. Влияние эубиотиков на состав микробиоценоза влагалища у беременных, страдающих истрико-цервикальной недостаточностью.// Медицинские аспекты микробной экологии: Сб.научн.тр. МНИИЭМ им.Г.Н.Габричевского. М.-1991.- С.204-209.

10. Анохин В.А., Тюрин Ю.А. Роль основных представителей анаэробной кишечной микрофлоры в норме и патологии.// Казанский медицинский журнал. 2001.- Т.82.- №2,- С. 149-151.

11. Ардатская М.Д. Диагностическое значение содержания короткоцепочечных жирных кислот при синдроме раздраженногокишечника.// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии.- 2000. № 3,- С. 36-41.

12. Ардатская М.Д. Исследование содержания и профиля низкомолекулярных метаболитов сахаролитической толстокишечной микрофлоры в норме и патологии. // Дисс. канд. мед. наук. М., 1996. - 146 с.

13. Ардатская М.Д., Минушкин О.Н. и др. Способ определения микрофлоры влагалища и способ лечения заболеваний, сопровождающихся нарушениями микрофлоры влагалища.// Патент РФ.-№ 227-447.- приоритет от 09.07.2004.

14. Ардатская М.Д., Сундукова М.Б., Минушкин О.Н. Применение "Биовестина-Лакто" в лечении больных с синдромом раздраженного кишечника.// Материалы IX Российского национального конгресса "Человек и лекарство". Москва, 2002. - С. 26.

15. Арутюнян Э.Э., Ардатская М.Д., Минушкин О.Н. Изучение короткоцепочечных жирных кислот у больных неспецифическим язвенным колитом.// Кремлевская Медицина. 2002. - № 1. - С. 21-25.

16. Бабин В.Н, Минушкин О.Н., Дубинин A.B. и др. Молекулярные аспекты симбиоза в системе хозяин-микрофлора. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — 1998. № 6. - С. 7682.

17. Бабин В.Н., Домарадский И.В., Дубинин A.B., Кондракова O.A. Биохимические и молекулярные аспекты симбиоза человека и его микрофлоры.// Росс. хим. журн. (ЖРХО им. Менделеева). 1994. - т. 38(6). - С. 66-78.

18. Бабин В.Н., Домарадский И.В., Дубинин A.B., Кондракова O.A. Новые подходы к разработке лекарственных средств.// Росс. хим. журн. (ЖРХО им. Менделеева). 1996. - т. 40(2). - С. 125-130.

19. Баженов Л.Г., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А., Огай Д.К. Изучение антагонистического действия лактобацилл на Helicobacter pylori //Журн. микробиол. 1997. - №3. - С. 89-91.

20. Бандоян А.К. и др. Состав регуляторов автолиза бактерий. // Микробиология.- 1984.-Т.53.-№6,- С.942-946.

21. Бандоян А.К., Амерханова A.M., Алешкин В.А. Новые подходы к конструированию препаратов-пробиотиков на основе бифидобактерий. // Сборник статей «Проблемы инфекционных болезней». М. - 2000. - ч.2. -С.284-286.

22. Бархатова Т.В. Создание технологий синбиотических продуктов на основе растительных олигосахаридов // Автореф.дис. . .д-ра технич.наук.-Ставрополь.- 2003.-48 с.

23. Белова И.В. Конструирование нового многокомпонентного пробиотика и использование его в комплексной терапии хеликобактерассоциированных заболеваний.// Автореф.дис. .канд.мед.наук.-Н.Новгород.- 2005.-24 с.

24. Бехтерева М.К., Тихомирова О.В., Железникова Г.Ф. Иммуномодулирующая терапия у детей с иерсиниозной инфекцией. //Детские инфекции. 2003. -№ 2. - С. 40^3.

25. Бигон М., Харпер Дж., Таунсенд К. // Экология. Особи, популяции и сообщества: в 2-х томах.-М.:Мир.-1989. — 667 с.

26. Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве.//Сб.научных трудов.-М.-1986.-208 с.

27. Блинкова Л.П. Бактериоцины: критерии, классификация, методы выявления. // Журн. микробиол.-2003.-№3.-С.109-113.

28. Бовкун Г.Ф., Иванов И.Ю., Поспелова В.В., Алешкин В.А. и др. Биологическая характеристика и перспективы использования в составе пробиотиков нового штамма бифидобактерий. // Вестник Российской АМН.-2006.-№3.- С.26-30.

29. Бондаренко В.М. Молекулярно-генетические и молекулярно-биологические исследования представителей родов Bifidobacterium и Lactobacillus.//Вестник Российской АМН.-2006 №1,- С 18-23.

30. Бондаренко В.М. По поводу нового подхода к классификации фармакопейных лекарственных пробиотических препаратов, биологически активных добавок к пище и продуктов функционального питания. // Фарматека.-2007.-Т.2.-№137.-С.62-64.

31. Бондаренко В.М. Прикладные аспекты молекулярной биологии бифидобактерий и лактобацилл. //Журн. микробиол. -2006.-№2.- С.89-97.

32. Бондаренко В.М. Роль транслокации кишечной бактериальной аутофлоры и ее токсических биомолекул в патологии человека.//Эксперимен. клин.гастроэнтерология.- 2007.-№5.-С.86-93.

33. Бондаренко В.М. Роль условно-патогенных бактерий кишечника в полиорганной патологии человека.// М.- 2007.-63 с.

34. Бондаренко В.М., Боев Б.В., Лыкова Е.А., Воробьев А.А. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта //Росс. журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - №1. - С.66-70.

35. Бондаренко В.М., Воробьев А.А. Дисбиозы и препараты с пробиотической функцией. //Журн. микробиол. -2004.- №1.- С.84-92.

36. Бондаренко В.М., Грачева Н.М. Препараты пробиотики, пребиотики и синбиотики в терапии и профилактике кишечных дисбактериозов.// Фарматека. 2003. - № 7. - С.56-63.

37. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериозы кишечника у взрослых.// КМК Scientific Press. Москва, 2003. - с.224.

38. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В., Воробьев А.А. Микроэкологические изменения кишечника и их коррекция с помощью лечебно-профилактических препаратов.// Журн. гастроэтерол. гепатол. колопроктол. 2003. - № 4. - С. 66-76.

39. Бондаренко В.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериоз кишечника как клинико-лабораторный синдром: современное состояние проблемы. // М:ГЭОТАР. М.- 2007.- 389 с.

40. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П., Аладышева Ж.И., Мацулевич Т.В. Пробиотики и механизмы их лечебного действия. // Эксперим. и клиническая гастроэнтерология.- 2004.- Т.З.- С. 83-87.

41. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П., Воробьева М.А. Механизм действия пробиотических препаратов.// БиоПрепараты. 2003. - № 3. - С. 2-5.

42. Борисова И.В., Алешкин В.А., Холчев Н.В., и др. Комплексные иммуноглобулиновые препараты для перорального и ректального применения.// Иммунобиологические препараты. М., 1989. - С. 5-10.

43. Булатова Е.М., Габрусская Т.В., Нетребко O.K. Питание и формирование здоровой кишечной микрофлоры у детей первых месяцев жизни.// Педиатрия.-2007.-Т.86.-.№3 .-С.85-89.

44. Васильев Б.Я., Васильева Р.И., Лобзин Ю.В. Острые кишечные заболевания. Ротавирусы и ротавирусная инфекция.// СПб.: Лань, 2000. -272 с.

45. Вахитов Т.Я., Момот E.H., Толпаров Ю.Н. Динамика и функции экзометаболитов в процессе роста периодической культуры Escherichia coli М- 17. //Журн. микробиол.-2005.-№1.-С. 16-21.

46. Вахитов Т.Я., Петров Л.Н., Бондаренко В.М. Перспективы создания пробиотических препаратов на основе «чувства кворума» у бактерий. // Журн. микробиол.-2006.-№3С.105-113.

47. Вахитов Т.Я., Яшина О.Ю., Петров Л.Н., Королюк A.M. Изучение действия препарата аутостимуляторов роста Escherichia coli М-17 (препарат «Актофлор») на рост чистых и смешанных культур бактерий. //Журн. микробиол.-2000.-№3.-С.20-24.

48. Вершинина А.Е., Колоджиева, Е.И.Ермоленко и др. Генетическая идентификация как способ выявления патогенных и симбионтных штаммов энтеробактерий. // Журн. микробиол.-2006.-№ 5.-С.83-87.

49. Воеводин Д.А., Розанова Г.Н., Стенина М.А. Дисбактериоз и иммунопатологический процесс.// Журн. микробиол.-2005.-№2.-С.89.

50. Воеводин Д.А., Розанова Г.Н., Стенина М.А., Чередеев А.Н. Роль дисбактериоза в фомировании хронической инфекционной патологии у детей. // Журн. микробиол.-2001.-№6.-С.88-93.

51. Волосникова И.В. Холестерин-модифицирующая активность лактобацилл in vitro.// Сб.трудов МНИИЭМ им.Г.Н.Габричевского. Проблемы медицинской биотехнологии и иммунологии инфекц. болезней. М.-1996.-Т.2.-С. 119-124.

52. Воробьев A.A., Абрамов H.A., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Диебактериозы актуальная проблема медицины. //Вестник Российской АМН.-1997.-№3.-С.4-7.

53. Воробьев A.A., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А. и др. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками. //Вестник Российской АМН.- 2004.- №2.- С.13-17.

54. Воробьев A.A., Гинцбург А.Л., Бондаренко В.М. Мир микробов. // Вестник РАМН.-2000.-№ 11 .-С. 11 -14.

55. Воробьев A.A., Лыкова Е.А., Феклисова Л.В. и др. Использование больших доз пробиотика бифидумбактерин форте в лечении ОРВИ у детей: клинические и иммунобиологические результаты. // Эпидемиология и инфекционные болезни.-2004.-№5.-С.43-46.

56. Воробьев A.A., Несвижский Ю.В., Богданова Е.А. и др. Анализ штаммовой общности пристеночных биотопов желудочно-кишечного тракта. // Вестник Российской АМН.- 2004.- № 6.- С. 15-18.

57. Галкина Л.А., Феклисова Л.В, Казакова С.П., Воропаева Е.А., Афанасьев С.С. Применение иммунобиологических препаратов в лечении мононуклеоза у детей, вызванного вирусом Эпштейна-Барр// Инфекционные болезни. 2007. - Т. 5. - № 1. - С. 54-58.

58. Ганина В.И. Научные и практические основы биотехнологии кисломолочных продуктов и препаратов с пробиотическими свойствами. //Автореф.дис. . .д-ра технич.наук.-М.- 2001.- 48 с.

59. Герасимова Е.В., Несвижский Ю.В., Воробьев A.A., Богданов Е.А. Изучение фекального микробиоценоза человека при экспериментальном моделировании запора. // Вестник Российской АМН.-2006.-№1.-С.15-17.

60. Гинцбург А.Л., Ильина Т.С., Романова Ю.М. «Quorum Sensing» или социальное поведение бактерий.//Журн. микробиол.-2003.-№ 5.- С.86-89.

61. Глушанова H.A. Экспериментальное обоснование новых подходов к коррекции микробиоценоза кишечник// Автореф.дис. .докт.мед.наук.-Москва.- 2005. с.24.

62. Глушанова H.A., Н.Б. Вербицкая, Л.Н.Петров, А.И.Блинов, Б.А.Шендеров. Исследование ауто-, изо- и гомоантагонизма пробиотических штаммов лактобацилл.// Бюллетень ВСНЦ СО РАМН.-2005.- Т.6 (44).- С. 138-142.

63. Глушанова H.A., Шендеров Б.А. Взаимоотношения пробиотических и индигенных лактобацилл в условиях совместного культививрования in vitro. // Журнал микроб., эпидемиол., и иммунобиол. 2005.- №2.- С.56-61.

64. Гончарова В.В. Изучение бифидобактерий, разработка препарата «сухой бифидумбактерин» и его эффективность при кишечных заболеваниях детей первого года жизни. //Автореф.дисс. канд.биол.наук.-Москва. 1970.- 15 с.

65. Гончарова Г.И. Бифидофлора человека, ее защитная роль в организме и обоснование сфер применения препарата бифидумбактерин // Автореф.дис. .д-рабиол.наук.-М.- 1982.-48 с.

66. Гончарова Г.И., Лянная A.M., Козлова Э.П., Семенова Л.П. Роль бифидофлоры в повышении устойчивости организма к инфекции. //В сб.материалов международной конференции «Гнотобиология в теоретической и практической медицине».- М.-1987.-С.62.

67. Горелов A.B. Современные подходы к профилактике антибиотико-ассоциированной диареи у детей// Медицинский вестник. 2007. -№31.-С. 11.

68. Горелов A.B. Терапия острых кишечных инфекций у детей в современных условиях. // Вопросы современной педиатрии.-2004.-Т.З.-№4.-С.72-78.

69. Грачева Н.М., Бондаренко В.М. Пробиотические препараты в терапии и профилактике дисбактериоза кишечника. // Инфекц. болезни. -2004.- Т.2.-№2.-С.53-58.

70. Григоров П.Я., Яковенко Э.П., Яковенко А.П. и др. Лечение обострений хронических заболеваний органов пищеварения //Лечащий врач. 2000. -№5-6. - С.44-49.

71. Гриневич В.Б., Захаренко С.М., Осипов Г.А. Принципы коррекции дисбиозов кишечника// Лечащий Врач. 2008. - № 6. - С. 6-9.

72. Гриневич В.Г.и др. Пребиотики в лечении заболеваний внутренних органов.//Российский медицинский журнал.- 2003.-№ 5,- С.53-56.

73. Грузина В.Д. Коммуникативные сигналы бактерий.//Антибиотики и химиотерапия,- 2003.-Т.48-№10.-С.32-39.

74. Гурков И.Б. Инновационное развитие и конкурентоспособность. Очерки развития российских предприятий. // М.: ТЕИС, 2003. 236 с.

75. Гурков И.Б. Стратегический менеджмент организации. // Учебное пособие. -М.: ТЕИС, 2004. 239 с.

76. Гурков И.Б. Стратегия и структура корпорации.//М.: Дело, 2006 320 с.

77. Денисова И.В. Санитарно-гигеническая и микробиологическая характеристика новых пробиотических препаратов «Соя-бифидум» и «Соя-лактум». //Автореф.дисс. .кандид.мед.наук.- Оренбург,- 2006.- 23 с.

78. Денисова С.Н., Сидоров И.И. Клиническая эффективность смесей с пробиотиками у детей с инфекционными заболеваниями. // Вопросы детской диетологии.-2006.-Т.4.-№5.-С.31-34.

79. Дещекина М.Ф., Коршунов В.М., Демин В.Ф. и др. Изучение формирования микрофлоры кишечника у новорожденных детей при совместном и раздельном пребывании с матерью. // Педиатрия.-1990.-№1.-С.13-17.

80. Дисбиоз кишечника. Руководство по диагностике и лечения / Под ред. Проф. Е.И. Ткаченко, проф. А.Н. Суворова. СПб.: СпецЛит, 2007. С. 238

81. Долинов К.Е. Основы технологии сухих биопрепаратов. // М.: Медицина. 1969.-152 с.

82. Доронин А.Ф.,Шендеров Б.А.Функциональное питание.//М.:Грантъ.-2002. 296 с.

83. Дорофейчук В.Г., Бейер Л.В., Богданович Н.Е., Карасева Г.Н. Дисбактериоз- фактор риска гастроэнтерологических заболеваний //Вопросы детской гастроэнтерологии, Горький, 1983. - С.39-48.

84. Дубинин А.В., Бабин В.Н., Раевский П.М., Шихман А.Р. Механизм патогенеза неспецифического язвенного колита.// Клин. мед. 1991. - № 7. - С. 24-28.

85. Дубровская М.И., Мухина Ю.Г., Кафарская Л.И., Шумилов П.В. Современные представления о механизмах формирования иммунного ответа слизистой оболочки кишечника детей раннего возраста. //Трудный пациент-(гастроэнтерология).- 2006.- Т.4.-№6.-С.9-14.

86. Ерюхин И. А., Шляпников С. А., Лебедев В.Ф., Иванов Г. А. Псевдомембранозный колит и «кишечный сепсис» — следствие дисбактериоза, вызванного антибиотиками.// Вестник хирургии им.И.И.Грекова—1997.- том 156.- N2.- С. 108-111.

87. Ефимов Б.А. Микроэкология кишечника человека, коррекция микрофлоры при дисбиотических состояниях.// Автореф.дис. .д-ра медиц.наук.-М.- 2005.-48 с.

88. Ефимов Е.И., Соколова К.Я. Диагностика и биокоррекция нарушений антиинфекционного гомеостаза в системе «мать-дитя». // Н.-Новгород: НГМА 2004. - 378 с.

89. Запруднов A.M., JI.H. Мазанкова. Микробная флора кишечника и пробиотики.// Приложение к журналу Педиатрия. М., 1999. - 48 с.

90. Звягинцева Т.Д., Сергиенко Е.И. Дисбактериоз кишечника: клиническое значение и перспективы лечения. // Эксперим. клин, гастроэнтерол. 2003. - № 3. - С.70-74.

91. Зорина В.В., Николаева Т.Н., Бондаренко В.М. Модуляция клеток иммунной системы лактобактериями. // Журн. микробиол.-2004.-№6.-С.57-60.

92. Ивашкин В.Т., Шептулин A.A. Синдром диареи. // М.: ГЭОТАР-медицина.- 2000. 135 с.

93. Калмыкова А.И., Селятинская В.Г., Пальчикова H.A., Бгатова Н.П. Клеточные и системные механизмы действия пробиотиков. // Новосибирск, 2007.-279 с.

94. Кардашова Е.В., Горская Е.М., Абрамова C.B. Ингибиторы протеолитических ферментов, продуцируемые лактобациллами. // Проблемы медицинской биотехнологии и иммунологии инфекционных болезней. Сб. тр. МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского.-М.-1996.-Т.2- С.113-118.

95. Карпушина С.Г., Тюрин М.В., Иванов A.A., Митрохин С.Д., Лившиц

96. B.А. Выделение, идентификация и некоторые биологические свойства бифидобактерий из кишечника человека // Биотехнология. 1998. - №2.1. C.28-36.

97. Кафарская Л.И, Володин Н.Н, Афанасьев С.С., Шкопоров А.Н., Ефимов Б.А. Особенности микробной колонизации кишечника новорожденных и недоношенных детей в отделении реанимации и интенсивной терапии. // Вестник Российской АМН.- 2006.- №1- С. 10-15.

98. Кафарская Л.И. Современные подходы к профилактике и лечению гнойно-септических инфекций у плода и новорожденного. // Автореф. дис. .д-ра мед.наук.-М.- 2002.-45 с.

99. Кафарская Л.И., Инжеваткина С.М., Володин H.H., Ефимов Б.А. Терапевтический потенциал пробиотиков: оптимизация иммунного ответа и восстановление экосистемы кишечника. //Вопросы детской диетологии.-2005- Т.З.- №1.- С.72-95.

100. Кафарская Л.И., Постникова Е.А., Донских Е.Д., Ефимов Б.А. Особенности становления микрофлоры у детей раннего возраста. //Детские инфекции.- 2006.- Т.5.- №1.- С. 6-11.

101. Каширская Н.Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры // Русский медицинский журнал.-2000.-Т.8.-№ 13-14.-С.572-575.

102. Коденцова В.М., Вржесинская O.A., Спиричева Т.В. и др. Обеспеченность витаминами детей дошкольного и младшего школьного возраста из группы риска по возникновению нарушений минерализации костной ткани. // Вопросы питания.-2002.-71 (3).- С.3-7.

103. Козлова Э.П. Микрофлора кишечника новорожденных в норме и патологии и восстановление ее бифидумбактерином. // Автореф. дис. .канд. мед.наук.-М.- 1978.-25 с.

104. Кондракова O.A., Бабин В.Н., Грубова Е.А. и др. Комплексная оценка микроэкологических и функциональных нарушений толстого кишечникадля обеспечения этиотропной терапии. // Пособие для врачей.- ГУ МНИИЭМ им.Г.Н.Габричевского.-М.-2003.-33 с.

105. Коновалова Г.Н. Иммуномодулирующий эффект белковых фракций, полученных из бифидобактерий. // Журн. микробиол.-2004.- №2.- С.60-64.

106. Конь И.Я. Пробиотики и кисломолочные продукты в питании детей раннего возраста.// Лечащий врач.-2007.- № 1.- С.8-12.

107. Конь И.Я., Георгиева О.В., Абрамова Е.В. Пребиотики в продуктах детского питания: изучение эффективности каши, обогащенной пребиотиком, в питании детей, первого года жизни. // Вопросы детской диетологии. 2008.-т.1.-Т.1.-№6.-С.66-70.

108. Корнева Т.К. Дисбактериоз кишечника у проктологических больных: микробиологические аспекты. //Рос. журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. -1999. №3. - С.55-60.

109. Коровина H.A., Вихирева З.Н. Профилактика и коррекция нарушений микробиоценоза кишечника у детей раннего возраста.//М.-1995. 32 с.

110. Коршунов В.М., Поташник Л.В., Ефимов Б.А. и др. Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц различных возрастных групп. //Журн. микробиол. 2001.- № 2.- С.57-61.

111. Коршунов В.М., Синицина H.A., Гинодман Г.А., Пинегин Б.В. Коррекция микрофлоры кишечника при химиотерапевтических дисбактериозах с помощью аутоштаммов бифидобактерий и лактобацилл. // Журн. микробиол.-1985.-№9.-С-20-25.

112. Коршунова О.В., Кафарская Л.И., Ефимов Б.А. Применение биотерапевтических препаратов для коррекции микробного статуса у беременных женщин. //Журн. микробиол.-2000.-№5.-С. 69-72.

113. Красноголовец В.Н. Дисбактериоз кишечника.// МгМедицина. 1989. -206 с.

114. Куваева И.Б., Ладо до К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей // М.:Медицина.-1991.- 240 с.

115. Кузнецова Г.Г., Шевелева С.А. Пробиотикограмма новый подход к коррекции дисбиотических отклонений в микробиоценозе толстой кишки. //Здоровое питание населения России: Матер. VII Всерос. Конгресса.-М.-2003.-С.270-273.

116. Курило Л.В. Первичный ацетонемический синдром у детей // Medicus Amicus. 2002. - №5. - С. 4-7.

117. Лазарева Е.Б. Бактериофаги и пектины в коррекции нарушений микробиоценозов при гнойно-воспалительных процессах // Автореф. дис. . .д-ра мед.наук.-М.- 2007.- 50 с.

118. Лахтин В.М., Алешкин В.А., Лахтин М.В., Афанасьев С.С., Поспелова

119. B.В., Шендеров Б.А. Лектины, адгезины и лектиноподобные вещества лактобацилл и бифидобактерий // Вестник Российской АМН.- 2006. № 1 .1. C.28-34.

120. Лахтин В.М., Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Несвижский Ю.В., Поспелова В.В. и др. // Стратегические аспекты конструирования пробиотиков будущего.- Вестник Российской АМН.- 2008.- № 2.-С.ЗЗ-44.

121. Лахтин. В.М., Лахтин М.В., Афанасьев С.С., Алешкин В.А., Несвижский Ю.В., Поспелова В.В. Общие свойства и принципы функционирования лектинов в биосистемах. // Вестник Российской АМН.-№3.-2008.-С.37-42.

122. Леванова Л.А. Микроэкология кишечника жителей Западной Сибири. Коррекция дисбиотических состояний. // Автореф.дис. . .докт.мед.наук.-М.-2003.-48 с.

123. Леванова Л.Л., Алешкин В.А., Воробьев А.Л., и др. Возрастные особенности микробиоценоза кишечника у жителей г. Кемерово. // Журн. микробиол.-2001 .-№3 .-С.72-75.

124. Лизько H.H. Дисбактериозы экстремальных состояний. // Антибиотики и медицинская биотехнология.- 1987.-Т.32.-№3.- С.184-186.

125. Лопатина Т.К., Бляхер М.С., Николаенко В.Н. и др. Иммуномодулирующее действие препаратов-эубиотиков. // Вестник Российской АМН.-1997.-№3 .-С.40-43.

126. Лыкова Е.А., Бондаренко В.М., Парфенов.А.И.и др. Синдром избыточного бактериального роста в тонкой кишке: патогенез, клиническое значение и тактика терапии.//Эксперим. клин, гастроэнтерол.-2005.-№ 6.- С.51-57.

127. Лыкова Е.А., Бондаренко В.М., Сидоренко C.B. и др. Сочетанная антибактериальная и пробиотическая терапия хеликобактерассоциированных заболеваний у детей //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -1999. №2. - С.76-81.

128. Мазанкова Л.Н., Лыкова Е.А. Пробиотики: Характеристика препаратов и выбор в педиатрической практике.// Детские инфекции.-2004.-№1 .-С.18-23.

129. Мазанкова Л.Н., Макарова Е.И., Ермолаева М.Н., Яковлева Г.Ю. Клиническая эффективность пробиотика «Полибактерин» при инфекционных диареях у детей// TERRA MEDICA. 2006. -№ 3. - С. 5-7.

130. Макарова С.Г., Боровик Т.Э., Ладо до К.С. и др. Состояние кишечного микробиоценоза у детей с атопическим дерматитом в зависимости от особенностей клинической картины и формы заболевания. // Педиатрия.-1997. -№2. -С. 19-24.

131. Малкоч В., Бельмер C.B., Ардатская М.Д., Минушкин О.Н. Значение пребиотиков для функционирования кишечной микрофлоры. // Вопросы детской диетологии.-2006.-Т4. -№1.- С.9-12.

132. Мельникова И.Ю., Горюнова М.М., Самсонова М.В. Восстановление микробиоценоза кишечника в комплексной терапии атопического дерматита у детей. // Вопросы современной педиатрии.-2007.-№4.-С.1-11.

133. Минушкин О.Н., Ардатская М.Д., Елизаветина Г.А., Масловский Л.В. Роль "Энтерола" в лечении и профилактике дисбактериоза кишечника. //

134. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и коло- проктологии. -1998.-№5.-С. 292.

135. Минушкин О.Н., Арутюнян Э.Э., Ар датская М.Д. Позволяет ли изучение короткоцепочечных жирных кислот выбрать фармпрепарат для адекватного лечения больных неспецифическим язвенным колитом? // Российский медицинский журнал. 2002. - № 5. - С. 15-19.

136. Минушкин О.Н., Минаев В.И. Комплексная диагностика, лечение и профилактика дисбактериоза (дисбиоза) кишечника в клинике внутренних болезней МЦ УД ПРФ// Методические рекомендации. М., 1997. - 45 с.

137. Минцберг Г., Альстрэнд Б., Лэмпел Дж. Школы стратегий.// СПб: Издательство «Питер», 2000. 336 с.

138. Михайлов И.Б., Корниенко Е.А.Применение про- и пребиотиков при дисбиозе у детей. // Методическое пособие для врачей-педиатров.-СПб, 2004.- 18 с.

139. Михайлова Е.В., Тихомирова О.В., Шульдяков A.A. и др. Ротавирусная инфекция у детей. // Многоцентровое контрольно-сравнительное исследование. СПб: ООО «Семакс», 2007. - 44 с.

140. Михайлова Т.Л., Калинская Т.Ю., Румянцев В.Г. Биопрепараты и пищевые факторы в коррекции дисбактериоза. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии.- 1999. № 3.- С. 6770.

141. Несвижский Ю.В. Изучение изменчивости кишечного микробиоценоза человека в норме и патологии. // Вестник Российской АМН.-2003.-№1.-С.49-53.

142. Нетребко O.K. Пробиотики и пребиотики в питании детей грудного возраста.// Педиатрия.-2007.-Т.86.-№1 .-С.80-87.

143. Нилов Д.Ю., Т.Э.Некрасова. Современное состояние и тенденции развития рынка функциональных продуктов питания и пищевых добавок.// Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки. 2005. - №2. - С. 28-29.

144. Новик Г.И., Самарцев A.A., Астапович Н.И. и др. Биологическая активность микроорганизмов-пробиотиков. // Прикладная биохимия и микробиология.-2006.-Т.42.-№2.-С. 187-194.

145. Новокшонов А. А. и др. Иммунотерапия при ОКИ у детей. Опыт использования нового иммуномодулятора «Гепон» // Детские инфекции. -2003. -№ 1. С. 32-36.

146. Новокшонов А. А. и др. Клиническая эффективность и воздействие на микробиоценоз кишечника пробиотика «Аципол» в комплексной терапии ОКИ у детей //Педиатрия. 2007. - Т. 86. - № 2. - С. 87-92.

147. Новокшонов А. А. и др. Клиническая эффективность иммуномодулятора «Гепон» в комплексной терапии ОКИ вирусной этиологии у детей // Детские инфекции. 2003. - № 4. - С. 32-35.

148. Новокшонов А. А. и др. Лечение ОКИ у детей препаратами бифидумбактерин форте и пробифор // Методическое пособие для врачей. -М., 2001.- 12 с.

149. Новокшонов А. А. и др. Пробиотик Бифиформ альтернатива этиотропной антибиотике»- и химиотерапии ОКИ у детей // Детские инфекции. - 2003. - № 3. - С. 36-40.

150. Новокшонов А. А. и др. Роль иммуномодулятора Гепон в комплексной терапии ОКИ у детей // Лечащий Врач. 2003. - № 6. -С. 76-77.

151. Новокшонов А. А. и др. Эффективность и перспективы использования пробиотика «Споробактерин» в комплексной терапии ОКИ бактериальной этиологии у детей // Детские инфекции. 2004. - № 4.- С. 41-45.

152. Новокшонов А. А., Учайкин В. Ф., Соколова Н. В. Этиопатогенетическая терапия острых кишечных инфекций у детей на современном этапе. // Лечащий врач. 2010. - № 1. - С. 7-13.

153. Новокшонов А. А., Мазанкова Л. Н., Соколова Н. В. Патогенетическое обоснование оптимальной терапии ОКИ у детей // Детские инфекции. -2002. -№ 1.-С. 32-37.

154. Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Ларина Т. С., Бережкова Т. В. Роль энтеросорбентов в составе комплексной терапии ОКИ у детей // Практика педиатра. 2008. - №5. - С. 20-26.

155. Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Ларина Т. С., Учайкин В. Ф. Клиническая эффективность БАД «Бифистим» в составе комплексной терапии ОКИ осмотического и инвазивно-осмотического типа диареи. // Детские инфекции. 2008. - № 4. - С. 56-61.

156. Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Тихонова О. Н., Ларина Т. С. Рациональная этиотропная терапия ОКИ бактериальной и вирусной этиологии у детей на современном этапе // Доктор РУ. 2007. - № 2.- С. 512.

157. Новокшонов А. А.,Тихонова О. Н.,Соколова Н. В. Сравнительная эффективность этиотропной терапии острых кишечных инфекций у детей 5-нитрофуранами//Детские инфекции. 2005. - Т. 4. - №1. - С. 49-53.

158. Новокшонов А. А.,Тихонова О. Н.,Соколова Н. В.,Калмыков А. А. Эффективная этиотропная терапия среднетяжелых форм ОКИ у детей// Consilium medicum. Гастроэнтерология. 2008. - № 1. - С. 68-70.

159. Новокшонов A.A.,Соколова Н.В.,Бережкова Т.В.,Ларина Т.С. Клиническая эффективность пробиотика «Энтерол» в комплексной терапии ОКИ у детей // Детские инфекции. 2006. - Т. 5. - № 2. - С. 43-47.

160. Онищенко Г.Г., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Поспелова В.В. Иммунобиологические препараты и перспективы их применения в инфектологии. // М.: ГОУ ВУНМЦ Минздрава РФ.- 2002.- 608 с.

161. Определитель бактерий Берджи. // под редакцией Дж. Хоулта с соавт. -изд.в 2-х томах.-М:Мир.-1997.-800 с.

162. Осипенко М. Ф. Применение пробиотиков в лечении патологии внутренних органов.// Фарматека. 2005. - №14. - С. 16-20.

163. Осипов Г.А. Хромато-масс-спектрометрическое исследование микроорганизмов и их сообществ. // Автореф. дисс. .док. биол. наук. М. - 1995.-62 с.

164. Осипов Г.А., Демина A.M. Хромато-масс-спектрометрическое обнаружение микроорганизмов в анаэробных процессах.// Вестник Российской АМН.- Т. 13 .-№2.-С.52-59.

165. Отраслевой стандарт 91 500.11.0004-2003.// «Протокол ведения больных. Дисбактериозом кишечника»- М., 2003.- 70 с.

166. Ott В.Д., Мысник В.П., Коваленко Г.Б. и др. Применение мультикомпонентных пробиотиков в профилактике и лечении микроэкологических нарушений у детей. // Методические рекомендации. -Киев, 2001.-26 с.

167. Парфенов А.И. Принципы лечения различных видов диарей. // Consilium Medicum. 2007. -т.5. -№2. - С. 33-35.

168. Парфенов А.И. Клинические проблемы дисбактериоза. // Рос. гастроэнтерологический журнал. 1999. - № 4. - С. 49-55.

169. Парфенов А.И., Осипов Г.А., Богомолов П.О. Дисбактериоз кишечника: новые подходы к диагностике и лечению.// Consilium medicum. 2001. - т.З. - № 6. - С.270-272.

170. Парфенов А.И., Ручкина И.Н., Осипов Г.А. Коррекция микрофлоры кишечника пробиотиками у больных антибиотико-ассоциированной диареи. //Справочник поликлинического врача.-2006.-№2.-СЗ-6.

171. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека. // М.: Медгиз, 1955. 463 с.

172. Петров Л.Н., Бондаренко В.М, Вахитов Т.Я., Воробьев А.А. QS-системы у бактерий и перспективы создания новых метаболитных пробиотических препаратов. // Вестник Российской АМН.- 2006.- №1.-С.38-45.

173. Поспелова В.В., Грачева Н.М. и др. Эубиотики эффективные средства нормализации микрофлоры - и вклад МНИИЭМ в их разработку. // Врач.-1997.-№4.- С.30-31.

174. Продукты пищевые. Продукты пищевые функциональные. Термины и определение. ГОСТ 52349-2005. //М.-2005.-32с.

175. Руководство по лечебному питанию детей. // Под редакцией Ладо до К.С. М.: Медицина. - 2000.-384 с.

176. Румянцев А.Г., Масчан A.A., Самочатова Е.В. Сопроводительная терапия и контроль инфекций при гематологических и онкологических заболеваниях. // Руководство для врачей. — М.: Медпрактика-М, 2006. — 504 с.

177. Рыбальченко О.В., В.М.Бондаренко, Добрица В.П. Атлас ультраструктуры микробиоты кишечника человека.// С-Петербург.-2008.~ 109 с.

178. СанПин 2.3.2.1078-01. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов.// М., 2001,- 269 с.

179. Семенихина В.Ф. Кислотообразующая и антибиотическая активность бифидобактерий //Молочная промышленность. 1967. - №3. - С. 17-20.

180. Семенихина В.Ф., Рожкова И.В., Сундукова М.Б. Кисломолочные продукты нового поколения // Молочная промышленность.- 1999.- №7-С.29-33.

181. Семенихина В.Ф., Сундукова М.Б., Рожкова И.В. Кисломолочные продукты с бифидобактериями:.// «Пробиотики и пробиотическиепродукты в профилактике и лечении наиболее распространённых заболеваний человека: Тез. докл. межд. конф.». М.- 1999. С.44-45.

182. Сидоренко С.В. Диагностика и лечение инфекций, вызываемых Helicobacter pylori //Антибиотики и химиотерапия. 2001. — т.46. - №8. -С.23-31.

183. Симонова Е.В., Пономарева О.А. Роль нормальной микрофлоры в поддержании здоровья. //Сибирский медицинский журнал.-2008.- № 8,-С.21-28.

184. Соколова К .Я., Соловьева И.В. Дисбактериозы: теория и практика.// Н.Новгород.- 1999.-198 с.

185. Тамм А.О., Вия М.П., Микельсаар М.Э, Сийгур У.Х. Метаболиты кишечной микрофлоры в диагностике дисбиоза кишечника. // Антибиотики и медицинская биотехнология. 1987. - т. XXX. - № 3. - С. 191-195.

186. Тец В.В. Справочник по клинической микробиологии. // С-Пб., 1994. -211 с.

187. Тихонова О. Н., Новокшонов А. А., Соколова Н. В. и др. Клиническая эффективность пробиотика «Полибактерин» в комплексной терапии кишечных инфекций бактериальной и вирусной этиологии у детей // Детские инфекции. 2006. - Т. 5. - № 1. - С. 48-51.

188. Ткаченко Е.И. и др. Эрадикационная , терапия, включающая пробиотики: консенсус эффективности и безопасности. // Клиническое питание.-2005.-№1.-С. 14-20.

189. Томпсон А. А., Стрикленд А. Дж. Стратегический менеджмент. Искусство разработки и реализации стратегии. // Учебник для вузов. М.: Банки и биржи, ЮНИТИ, 1998 - 576 с.

190. Украинцев С.Е., Нетребко O.K. Пищевые волокна и пребиотики. // Вопросы детской диетотерапии.-2006.-Т.4.-№5.-С.26-30.

191. Учайкин В. Ф. и др. Место и значение энтеросорбции в этиопатогенетической терапии ОКИ у детей // Педиатрия. 2007. - Т. 86.- № 2. С. 44-50.

192. Учайкин В. Ф. и др. Пробиотики в комплексной терапии кишечных инфекций у детей // Биопрепараты. 2001. - № 1. - С. 2-4.

193. Учайкин В. Ф. и др. Противовирусный препарат «Арбидол» как перспектива этиотропной терапии ротавирусной инфекции у детей // Детские инфекции. 2004. - № 3 (8). - С. 34-39.

194. Учайкин В. Ф. и др. Энтеросорбция эффективный метод этиопатогенетической терапии ОКИ у детей // Детские инфекции. - 2005. -Т. 4. - № 3. - С. 39-43.

195. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А, Гаспарян М. О., Дорошенко Е. О. Применение «Пробифора» при острых кишечных инфекциях у детей // Новые лекарственные препараты. 2004. - Вып. 1. - С. 21-28.

196. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А., Мазанкова Л. В., Соколова Н. В. Острые кишечные инфекции у детей (диагностика, классификация, лечение) // Пособие для врачей. 2003. - 34 с.

197. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Бережкова Т. В. Энтеросорбция. Роль энтеросорбентов в комплексной терапии острой и хронической гастроэнтерологической патологии. // Пособие для врачей. -2008. 24 с.

198. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Корнюшин М. А. Современные подходы к лечению ОКИ у детей. // Педиатрия. 1996. -№ 3.- С. 49-54.

199. Учайкин В.Ф., Харламова Ф.С., Шамшева О.В., Полеско И.В. Инфекционные болезни. Атлас-руководство. //М.:ГЭОТАР-Медиа 2010.384 с.

200. Феклисова Л.В. и др. Клиника, диагностика и лечение инфекционного мононуклеоза у детей// Пособие для врачей. М.- 2004. — с. 23.

201. Филин В.А., Салмова B.C., Вартапетова Е.Е. Современные аспекты этиологии и патогенеза неспецифического язвенного колита //Педиатрия. -2000. №6. - С. 95-99.

202. Филин В.А., Челноков М.М., Супрун О.И. и др. Геликобактериоз и кандидоз синергизм этиологических факторов заболевания органов пищеварения? //Педиатрия. - 1998. - №3. - С .97-98.

203. Хавкин А.И., Жихарева Н.С. Терапия антибиотик-ассоциированного дисбактериоза. // Русский медицинский журнал.-2006.-Т.14.-№19.-С.З-7.

204. Харченко Н.В., Черненко В.В., Родонежская Е.В. Пробиотики в лечении дисбактериоза кишечника //Материалы XIУ съезда терапевтов Украины. К., 1998. - С. 452-454.

205. Харченко Н.В., Черненко Н.В. Современные подходы к коррекции дисбиоза кишечника. // Метод, рекомендации. К., 2000.- 27 с.

206. Хашке Ф., Нетребенко O.K. Функциональное питание: пробиотики и кишечная микрофлора //Рос. педиатрический журнал. 2000.- №5. - С. 5255.

207. Хмель И.А., Мелицкая А.З. Экспрессия Quorum sensing генов — перспективная мишень для лекарств в отношении патогенности бактерий. //Молекулярная биология.- 2006,- №2. С. 40-42.

208. Цветкова Л.Н., Щербаков П.Л., Салмова B.C., Вартапетова Е.Е. Результаты биокоррекционной поддержки у детей, получавших антигеликобактерную терапию.// Детская гастроэнтерология. 2002.-С.482-484.

209. Шатнюк Л.Н. Пищевые микроингредиенты в создании продуктов здорового питания.// Пищевые ингредиенты.Сырье и добавки. 2005. - №2. - С. 18-22

210. Шевелева С.А. Анализ микробиологического риска как основа для совершенствования системы оценки безопасности и контроля пищевых продуктов. // Автореф. дис. . .д-ра мед.наук.-М.- 2007.- 46 с.

211. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса // Вопр. питания. 1999. - № 2. - С. 32-40.

212. Шендеров Б.А. // Медицинская микробная экология и функциональное питании: В 3-х т. -М.:Грантъ 1998-2001.- Т. 1-3. - 286 С.-412 с.-288 с.

213. Шендеров Б.А. Микрофлора пищеварительного тракта важнейший фактор поддержания микроэкологического гомеостаза хозяина. // Клиническое питание.-2005.-№2.-С.2-5.

214. Шендеров Б.А. Молекулярный язык пробиотических микроорганизмов. //Пищевые ингредиенты.-2009.-№ 1.- С48-49.

215. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека. // Рос.журн.гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998.- № 1 - С.61-64.

216. Шендеров Б.А. Современное состояние и перспективы развития концепции «Функциональное питание».// Пищевая промышленность. -2003. №5. - С.4-7

217. Шендеров Б.А. Современное состояние и перспективы развития концепции пробиотики, пребиотики и синбиотики. // Пищевые ингредиенты.-2005.-№2.-С.23-26.

218. Шендеров Б.А. Функциональное питание при гипертонической болезни и хронической сердечной недостаточности.//Лечагций врач.-№3.-2006.-С.14-17.

219. Шендеров Б.А., А.И. Труханов. Продукты функционального питания: современное состояние и перспективы их использования в восстановительной медицине.// Вестник восстановительной медицины. -2002. -№1.-С. 38-42

220. Шендеров Б.А., В.М. Лахтин. Лектины-новая потенциальная категория физиологически активных функциональных пищевых ингредиентов // Вестник востановительной медицины. 2004. - № 1. - С. 33-38.

221. Шендеров Б.А., Манвелова М.А. Микробная экология человека и животных и метаболизм холестерина // Антибиотики и химиотерапия. -1992.-37.-№ 11.- С. 46-54.

222. Шендеров Б.А.Пробиотики, пребиотики и синбиотики. Общие и избранные разделы проблемы.// Пищевые ингредиенты.Сырье и добавки.2005.-№2.-С. 23-26.

223. Шкопоров А.Н., Ефимов Б.А., Володин H.H., Кафарская Л.И. Бифидобактерии: традиционный взгляд и современные генетические исследования. // Вопросы практической педиатрии.- 2007.- т. 2 (5).- С.76-79

224. Шкопоров А.Н., Кафарская Л.И., Афанасьев С.С. и др. Молекулярно-генетический анализ видового и штаммового разнообразия бифидобактерий у детей раннего возраста.// Вестник Российской АМН,2006.-№1.- С. 45-50.

225. Шунько Е.Е., Ханес Г.С., Лакша О.Т. Перинатальный сепсис: эпидемиология, атофизиология, диагностика, клиника, интенсивная терапия, профилактика. // Учебно-методическое пособие. К.: Рутения, 2001.-64 с.

226. Ю.П. Успенский, Е.Б. Валуева, Л.С. Орешко. Коррекция нарушений кишечного микробиоценоза пробиотиком на основе природногоадсорбента. // Методические рекомендации. Санкт-Петербург, 2005. - 14 с.

227. Юданов А.Ю. Концентрационные процессы на фармрынке России. // Ремедиум. 2002. - № 3. - С.4-16.

228. Юданов А.Ю. К общей выгоде (о пользе профессионального исследования рынка). // Ремедиум. 2003. - № 12. - С. 18-19

229. Юданов А.Ю. Конкуренция: теория и практика.// М.: Гном и Д, 2001, третье издание 304 с.

230. Ющук Н.Д., Машилов В.П. Ротавирусный гастроэнтерит (клиника, диагностика, лечение) // Лекции. М. - 1990! - 19 с.

231. Abbad Andaloussi S., Talbaoui H., Marczak R., Bonaly R. Isolation and characterization of exocellular polysaccharides produced by Bifidobacterium longum.//Appl. Microbiol. Biotechnol.-1995.- Vol. 43.-P. 995-1000.

232. Agarwal RK. Probiotics the health friendly gut bacteria.// Indian Pediatr.-2008.- Dec.- Vol. 45(12).-P.953-4.

233. Ahrne, S., Nobaek, S., Jeppson, В., Adlerberth, I., Wold, A.E., and Molin, G. The normal Lactobacillus flora of healthy human rectal and oral mucosa.// Appl. Microb.- 1998.- Vol. 85.-P. 88-94.

234. Allen A, Hutton DA, Pearson JP. The MUC2 gene product: a human intestinal mucin.// Int J Biochem Cell Biol. -1998.- Vol. 30 -P.797-801.

235. Anderson P.M., Schroeder G., Skubitz K.M. Oral glutamine reduces the duration and severity of stomatitis after cytotoxic cancer chemotherapy // Cancer. 1998. - Vol. 83. - P. 1433-1439.

236. Andrea M. Stringer, BAppSc (Hons), Rachel J. Gibson, PhD, Joanne M. Bowen, PhD, Richard M. Logan, BDS, MDS, Ann S-J Yeoh, BMEDSc, and

237. Dorothy M.K. Keefe, MD, FRACP Chemotherapy-Induced Mucositis: The Role of Gastrointestinal Microflora and Mucins in the Luminal Environment. // J Support Oncol. 2007. - Vol. 5. - P.259-267.

238. Arroyo R., Martin V., Maldonado A. et all. Treatment of Infectious Mastitis during Lactation: Antibiotics versus Oral Administration of Lactobacilli Isolated from Breast Milk. // Clin Infect Dis. 2010. - Jun 15. - Vol. 50(12). - P.1551-8.

239. Atherton J. C., Peek R. M., Tham K. T. et al. Clinical and pathological importance of heterogeneity in vacA, the vacuolating toxin of Helicobacter pylori/// Gastroenterology. -1997. Vol. 112. - P. 92-99.

240. Atkinson S.A., Halton J.M., Bradley C. et al. Bone and mineral abnormalities in childhood acute lymphoblastic leukaemia: influence of disease, drugs and nutrition // Int J Cancer Suppl. 1998. - Vol. 11. - P. 35-39.

241. Bavati B., Vescovo M., Torriani S., Bottazzi V.Bifidobacteria: history, ecology, physiology and applications. // Annals of Microbiology. 2000. - Vol. 50.-P. 117-131.

242. Bazzoli F. et al. Vivo Helicobacter pylori clearance failure with Lactobacillus acidophilus. // Gastroenterology. 1992. - Vol. 102. - P. 4.

243. Bengmark S. Immunonutrition: role of biosurfactants, fiber and probiotic bacteria. //Nitrition. -1998. Vol. 14 (7-8). - P.585-594.

244. Bengmark S. Nutrition and Resistance to Disease. // Intestinal Translocation (eds. Heid P.J., Rush V., van der Waaij D., Nieuwenhuis P). Old Herborn University Seminar No.14 2001. - P. 117-132.

245. Benno J., Mitsuoka T. Bifidobacteria and microflora. // Development of intestinal microflora in human and animals. 1986.- Vol.5.- N 1.- P. 13-25.

246. Benno Y, Sawada K, Mitsuoka T. The intestinal microflora of infants: composition of fecal flora in breast—fed and bottle—fed infants.// Microbiol.Immunol. 1984. - Vol.28. - N9. - P.975 - 986.

247. Bernhardt H. and Knoke M. Recent studies on the microbial ecology of the upper gastrointestinal tract. // Infection. 1989. - Vol. 17. - P. 259-263.

248. Bernstein I.L., Webster M.N., Bernstein I.D. Food aversions in children receiving chemotherapy for cancer // Cancer. 1982. - Vol. 50. - P. 2961-2963.

249. Biavati B., Castagnoli P., Crociani F., Trovatelli L. D. Species of the Bifidobacterium in the feces of infants. // Microbiologica. 1984. - Vol. 7. - P. 341-345.

250. Biavati B., Castagnoli P., Trovatelli L. D. Species of the genus Bifidobacterium in the feces of human adults. // Microbiologica. 1986. - Vol. 9. - P. 39-45.

251. Biavati B., Mattarelli P., Alessandrini A., Crociani F., Guerrini M. Survival in fermented milk products of Bifidobacterium animalis and its recovery in human feces. // Mikrookologie und Therapie. 1995. - Vol. 25. - P. 231-235.

252. Biavati B., Scardovi V., Moore W.E.C. Electrophoretic patterns of proteins in the genus Bifidobacterium and proposal of four new species. // Int. J. Syst. Bacteriol. 1982. - Vol. 32. - P. 358-373.

253. Biavati B., Sgorbati B., Scardovi V. The genus Bifidobacterium. / In: Balows A., Truper G., Dworkin M., Harder W., Schleifer K.H., eds. // The Prokaryotes. 2nd edn. - Springer-Verlag, New York, 1991. - P. 816-833.

254. Bjcprkstm B. Evidence of probiotics in prevention of allergy and asthma. // Curr Drug Targets Inflamm Allergy.- 2005.- Vol. 4.- P.599-604.

255. Blaser M. J. Hypothesis: the changing of Helicobacter pylori and humans: implications for health and diseases / M. J. Blaser // J. Infect. Dis. 1999. - Vol. 179.-№6.-P. 1523-1530.

256. Blumental A., Helbling J.The L(+), and D(-) lactic acid concentration in yoghurts of different fat content // Dairy Sci. Abstracts. 1974. - Vol. 36. - P. 331.

257. Bouhnik Y, Alain S, Attar A, et al. Bacterial populations contaminating the upper gut in patients with small intestinal bacterial overgrowth syndrome. // Am J Gastroenterol. May 1999. - Vol. 94(5). - P. 1327-31.

258. Bowen JM, Gibson RJ, Keefe DM, Cummins AG. Cytotoxic chemotherapy upregulates pro-apoptotic Bax and Bak in the small intestine of rats and humans. // Pathology. 2005. - Vol. 37. - P. 56-62.

259. Breed R.S., Murray E.G.D., Smith N.R., eds. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology// 7th edn. Williams & Wilkins, Baltimore, 1957.

260. Brown AC, Valiere A. Probiotics and medical nutrition therapy.// Nutr Clin Care.-2004.- Apr-Jun.- Vol.7(2).-P.56-68.

261. Buchling A., Radun D., Muller W. A. et al. Influence of anti- Helicobacter triple therapy with metronidazole, omeprazole and clarithromycin on intestinal microflora.// Aliment. Pharmacol. Ther. 2001. - Vol. 15. - P. 1445-1452.

262. Cai, Y., Matsumoto, M., and Benno, Y. Bifidobacterium lactis Meile et al. 1997 is a subjective synonym of Bifidobacterium animalis (Mitsuoka, 1969) Scardovi and Frivatelli, 1974. // Microbiol Immunol. 2000. - Vol. 44. - P. 815820.

263. Callaway TR, Edrington TS, Anderson RC, Harvey RB, Genovese KJ, Kennedy CN, Venn DW, Nisbet DJ. Probiotics, prebiotics and competitive exclusion for prophylaxis against bacterial disease.//Anim Health Res Rev.-2008.-Dec.-Vol.9(2).-P.217-225.

264. Charteris W.P., Kelly P.M., Morelli L., Collins J.K. Antibiotic susceptibility of potentially probiotic Bifidobacterium isolates from the human gastrointestinal tract. // Lett. Appl. Microbiol. 1998. - Vol.26. - P. 333-337.

265. Cherbut C., Aube A.C., Blottiere H.M., Galmiche J.P. Effects of short-chain fatty acids on gastrointestinal motility. // Scand. J. Gastro-enterology. 1997. -Vol. 32. - Suppl. 222. - P. 58-61.

266. Collins M.D., Gibson G.R. Probiotics, prebiotics, and synbiotics: approaches for modulating the microbial ecology of the gut. // Am.J.Clin.Nutr. 1999. -Vol.69.-№ 5.-P.1052-1057.

267. Cornelius W. Van Niel, Chris Feudtner, Michelle M. Garrison, et all. Christakis Lactobacillus Therapy for Acute Infectious Diarrhea in Children: A Meta-analysis //Pediatrics. April 2002. -Vol. 109. - No. 4. - P. 678-684.

268. Cremonini F. et al. Effect of different probiotic preparations on antiHelicobacter pylori therapy-related side effects: A parallel group, triple blind, placebo-controlled study // Aliment. Pharmacol. Ther. 2002. - Vol. 16. - P. 703-714.

269. Cremonini F. et al. Effect of different probiotic preparation on antiHelicobacter pylori therapy-related side effects: a parallel group, triple blind, placebo-controlled study. // Amer. J. Gastroent.-2002.-Vol. 97(11). P.2744-2749.

270. Crociani F., Alessandrini A., Mucci M.M., Biavati B. Degradation of complex carbohydrates by Bifidobacterium spp. // Int. J. Food Microbiol. -1994. -Vol. 24.-P. 199-210.

271. Crociani F., Matteuzzi D., Ghazvinizadeh H. Species of the genus Bifidobacterium found in human vagina. // Zentralbl. Bakteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg. Abt.l Orig. Reihe A. 1973. - Vol. 223. - P. 298-302.

272. Cummings J.H., Macfarlane G.T., Englyst H.N. Prebiotics digestion and fermentation. // Am.J.Clin.Nutr. 2001. - Suppl. 73. - P. 415-420.

273. De Vries W., Gerbrandy S.J., Stouthamer A.H. Carbohydrate metabolism in

274. Bifidobacterium bifidum. //Biochim. Biophys. Acta.- 1967. Vol. 136. - P. 415425.

275. Edlund C., Nord C.E. Effect on the human normal microflora of oral antibiotics for treatment of urinary tract infection.// J.Antimicrob.Chemoter.-2000. Vol.46. - Suppl.Sl. - P.41-41.

276. Elmer G.W., Surawicz C.M., McFarland L.V. Biotherapeutic agents. Aneglected modality for the treatment and prevention of selected intestinal and vaginal infections. // JAMA. 1996. - Vol. 275. - P. 870-876.

277. Ezendam J., de Klerk A., Gremmer E.R., van Loveren H. Effects of Bifidobac-terium animalis administered during lactaion on allergic and autoimmune responses in rodents. //Clinical and Experimental Immunology.-2008.- Vol.154.-P.424- 155.

278. Farrell CL, Bready JV, Rex KL, et al. Keratinocyte growth factor protects mice from chemotherapy and radiation-induced gastrointestinal injury and mortality. // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - P. 933-939.

279. Folwaczny C. Probiotics for prevention of ulcerative colitis recurrence: alternative medicine added to standard treatment. // J.Gastroenterol. 2000. -Vol. 38(6). - P. 547-550.

280. Fotiadis CI, Stoidis CN, Spyropoulos BG, Zografos ED. Role of probiotics, prebiotics and synbiotics in chemoprevention for colorectal cancer.//World J Gastroenterol.- 2008.- Vol. 14(42).-P6453-6457.

281. Fuller R. Probiotics in man and animals.// J. Appl. Bacteriol. 1989. - Vol. 66. - P. 365-378.

282. Fuller R. Probiotics: prospects of use in opportunistic infections. // N.Y., 1995.-235 p.

283. Gavini F., Van Esbroeck M., Touzel J.P., Fourment A., Goossens H. (). Detection of fructose-6-phosphate phosphoketolase (F6PPK), a key enzyme of the bifid-shunt in Gardnerella vaginalis. // Anaerobe. 1996. - Vol. 2. - P. 191193.

284. Gibson G.R., Probert H.M., Van Loo J.A. E., Roberfroid M.B. Dietary modulation of the human colonic microbiota: Updating the concept of prebiotics. // Nutr Res Rev. 2004. - Vol. 17. - P. 257-259.

285. Gibson G.R., Roberfroid M.B. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics// J Nutr. 1995, Jun. - Vol. 125 (6).-P. 1401-1412.

286. Gibson G.R., Wang X. Regulatory effects of bifidobacteria on the growth of other colonic bacteria. // J. Appl. Bacteriol. 1994. - Vol. 77. - P. 412-420.

287. Gibson R.J., Keefe D.M. Cancer chemotherapy-induced diarrhea and constipation: mechanisms of damage and prevention strategies. // Support Care Cancer. 2006. - Vol. 14. - P. 890-900.

288. Gill S. R., Pop M., DeBoy R.T. et al. Metagenomic analysis of the human distal gut microbiome. // Science. 2006. - Vol. 312. - P. 1355-1359.

289. Goldin B.R., Gorbach S.L. Anaerobic Infection in Humans. // New York, 1989.-714 p.

290. Gregg CR. Enteric bacterial flora and bacterial overgrowth syndrome.// Semin Gastrointest Dis. Oct 2002. - Vol. 13(4). - P. 200-209.

291. Gwede CK. Overview of radiation- and chemoradiation-induced diarrhea. // Semin Oncol Nurs. 2003. - Vol. 19(suppl 3). - P. 6-10.

292. Haboubi NY, Lee GS, Montgomery RD. Duodenal mucosal morphometry of elderly patients with small intestinal bacterial overgrowth: response to antibiotic treatment. // Age Ageing. Jan 1991. - Vol. 20(1). - P. 29-32.

293. Hadadli M et al. Identification of cultivable Bifidobacterium species isolated from breast-fed infants feces in West-Algeria.// African Journal of Biotechnology.-2005.-Vol.4 (5).- P.422-430.

294. Halton J.M., Atkinson S.A., Barr R.D. Growth and body composition in response to chemotherapy in children with acute lymphoblastic leukaemia // Int. J. Cancer Suppl. 1998. - Vol. 11. - P. 81-84.

295. Hill ID, Mann MD, Househam KC, Bowie MD. Use of oral gentamicin, metronidazole, and cholestyramine in the treatment of severe persistent diarrhea in infants. //Pediatrics. Apr 1986. - Vol. 77(4). - P. 477-481.

296. Hilton E., Rindos P., Isenberg H.D. Lactobacillus GG vaginal suppositories and vaginitis // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33. - P. 1433.

297. Hiton E., Isenburg H.D., Alpenstein P., France K., Borenstein M. Ingestion of yogurt containing Lactobacillus acidophilus as prophylaxis forcandidal vagintis. // Annals of Internal Medicine. 1992. - Vol. 116. - P.353-357.

298. Hoverstad T, Bjorneklett A, Fausa O, Midtvedt T. Short-chain fatty acids in the small-bowel bacterial overgrowth syndrome. // Scand J- Gastroenterol. -May 1985. Vol. 20(4). - P. 492-499.

299. Howarth GS. Inflammatory bowel disease, a dysregulated host-microbiota interaction: are probiotics a new therapeutic option? // J. Gastroenterol Hepatol. -2008.- Dec.-Vol.23(12).-P. 1777-1779.

300. Hsieh M.H, Versalovic J. The human microbiome and probiotics: implications for pediatrics.//Curr Probl Pediatr Adolesc Health Care.-2008.-Nov-Dec.-N.38(10).-P.309-327.

301. Hsu C.A, Yu R.C, Chou C.C. Production of beta-galactosidase by Bifidobacteria as influenced by various culture conditions.// Int J. Food Microbiol.-2005.-0ct.- N. 15.-V. 104(2).-P. 197-206.

302. Ikuno N, Soda H, Watanabe M, Oka M. Irinotecan (CPT-11) and characteristic mucosal changes in the mouse ileum and cecum. // J Natl Cancer Inst. 1995. - Vol. 87. - P. 1876-1883.

303. Ishibashi N., Shimamura S. Bifidobacteria: research and development in Japan. // Food Technol. 1993. - Vol. 47. - P. 126-135.

304. Isolauri E., Arvola T., Sütas Y., Salminen S. Probiotics in the management of atopic eczema. // Clin Exp Allergy.- 2000.- Vol.30.- P.1605-1610.

305. Iwasaki H., Araki Y., Tto E., Nagaoka M., Yokokura T. Structure of macroamphiphiles from several Bifidobacterium strains. // J. Bacteriol. 1990. -Vol. 172.-P. 845-852.

306. Jiang T., Savaiano D.A. Modification of colonic fermentation by bifidobacteria and pH in vitro. Impact on lactose metabolism, short-chain fatty acid and lactose production. // Dig. Dis. Sci. 1997. - Vol. 42. - P. 2370-2377.

307. Keefe DM, Brealey J, Goland GJ, Cummins AG. Chemotherapy for cancer causes apoptosis that precedes hypoplasia in crypts of the small intestine in humans. // Gut. 2000. - Vol. 47. - P. 632-637.

308. Keefe DM, Cummins AG, Dale BM, Kotasek D, Robb TA, Sage RE. Effect of high-dose chemotherapy on intestinal permeability in humans. // Clin Sci (Lond). 1997. - Vol. 92. - P. 385-389.

309. Kilby AM, Dolby JM, Honour P, Walker-Smith JA. Duodenal bacterial flora in early stages of transient monosaccharide intolerance in infants. // Arch Dis Child. Mar 1977. - Vol. 52(3). - P. 228-234.

310. Kim J.Y, Choi Y.O, Ji G.E. Effect of oral probiotics (Bifidobacterium lactis ADO 11 and Lactobacillus acidophilus AD031) administration on ovalbumin-induced food allergy mouse model.//J. Microbiol Biotec.- 2008.- Aug.-Vol.l8(8).-P. 1393-1400.

311. King CE, Toskes PP. Small intestine bacterial overgrowth. // Gastroenterology. May 1979. - Vol. 76(5 Pt 1). - P. 1035-1055.

312. Kligler B, Cohrssen A. Probiotics.//Am. Fam Physician.- 2008.- Nov 1.-Vol.78(9).-P. 1073-1078.

313. Klish WJ, Udall JN, Rodriguez JT, et al. Intestinal surface area in infants with acquired monosaccharide intolerance. // J Pediatr. Apr 1978. - Vol. 92(4). -P. 566-571.

314. Kocoshis SA, Schletewitz K, Lovelace G, Laine RA. Duodenal bile acids among children: keto derivatives and aerobic small bowel bacterial overgrowth. // J Pediatr Gastroenterol Nutr. Sep-Oct 1987. - Vol. 6(5). - P. 686-696.

315. Lahtinen S.J., Boyle R.J., Kivivuori S. et al. Prenatal probiotic administration can influence Bifidobacterium microbiota development in infants at high risk of allergy. // J. Allergy Clin Immunol.- 2009.- Vol. 123. -P. 499-501.

316. Larsen B. Vaginal flora in health and disease.// CLIN. Obstet. Gynecol. -1993. Vol.36. - No. 1. - P.107-121.

317. Leiper K, Campbell BJ, Jenkinson MD, et al. Interaction between bacterial peptides, neutrophils and goblet cells: a possible mechanism for neutrophil recruitment and goblet cell depletion in colitis. // Clin Sci (Lond). 2001. - Vol. 101.-P. 395-402.

318. Lenoir-Wijnkoop I. The intestinal microflora. Understanding the simbiosis. // red.-Mark Yjpkins.- Danonr Vitapole: John Libbey Eurotext.-2003.-48 p.

319. Lin HC. Small intestinal bacterial overgrowth: a framework for understanding irritable bowel syndrome. // JAMA. Aug 2004. - Vol. 292(7). -P. 852-858.

320. Luckey T.D. Overview of gastrointestinal microecology. // Diy. Nahrung. -1987. Vol. 31. - No 5-6. - P. 234-239.

321. Macfarlane G.T., Macfarlane S. Human colonic microbiota: ecology, physiology and metabolic potential of intestinal bacteria. // Scand. J. Gastroenterol. 1997. - Vol. 32 (Suppl. 222). - P. 3-9.

322. Mah K.W., Chin V.I., Wong W.S. et al. Effect of a milk formula containing probiotics on the fecal microbiota of asian infants at risk of atopic diseases. // Pediatr Res. 2007. - Vol. 62(6). - P. 674-679.

323. Mathias JR, Clench MH. Review: pathophysiology of diarrhea caused by bacterial overgrowth of the small intestine.// Am J Med Sci. Jun 1985. -289(6). - P. 243-248.

324. Matsuki T, Watanabe K, Fujimoto J, Takada T, Tanaka R. Use of 16S rRNA gene-targeted group-specific primers for real-time PCR analysis of predominant bacteria in human feces. // Appl Environ Microbiol. 2004.- Vol. 70(12). - P. 7220-7228.

325. Matsuki T. et al. Developmeny of 16S rRNA-genr-targeted group-specific primers for the detection and identification of predominant bacteria in human feces.// Appl.Environ.Microbiol.-2002.- Vol. 68(11). P. 5445-5451.

326. Matsuki T., Watanabe K., Tanaka R., Fukuda M., Oyaizu H. Distribution of bifidobacterial species in human intestinal microflora examined with 16S rRNA-genetargeted species-specific primers.// Appl. Environ. Microbiol. Oct. 1999. -P.4506-4512.

327. Mayer E.L., Reuter M., Dopfer R.E. et al. Energy expenditure, energy intake and prevalence of obesity after therapy for acute lymphoblastic luekemia during childhood // Hormone Res. 2000. - Vol. 53. - P. 193-194.

328. McFarland L.V. Risk factor for antibiotic-associated diarrhea. // Ann.Med.Intern. (Paris). 1998. - Vol.149. - N.5. - P.261-266.

329. Meyers JS, Ehrenpreis ED, Craig RM. Small Intestinal Bacterial Overgrowth Syndrome.// Curr Treat Options Gastroenterol. Feb 2001. - Vol. 4(1).-P. 7-14.

330. Michail SK, Stolfi A, Johnson T, Onady GM. Efficacy of probiotics in the treatment of pediatric atopic dermatitis: a meta-analysis of randomized controlled trials. // Ann. Allergy Asthma Immunol. 2008.- Nov.l01(5).-P.508-516.

331. Mitchell EP, Schein PS. Gastrointestinal Toxicity of Chemotherapeutic Agents. / In: Derry MC, Yabro JW, eds. Toxicity of Chemotherapy. // New York: Grune & Stratton Inc, 1984. P. 269-285.

332. Namba K., Hatano M. at all. Method of detecting Bifidobacterium infantis // United States Patent.- Prior Publication data 14.12.2006.- 22 p.

333. Ozbas Z.Y., Aytac S.A. Behaviour of Yersinia enterocolitica and Aeromonashydrophila in yogurt made with probiotic bacteria: Bifidobacterium infantis and Lactobacillus acidophilus. // Milchwiss. 1995. - Vol. 50. - P. 626629.

334. Pant N., Hultberg A., Zhao Y. et all. Lactobacilli expressing variable domain of llama heavy-chain antibody fragments (lactobodies) confer protection against rotavirus-induced diarrhea. //J Infect Dis. 2006. - Vol. 194(11). - P.1580-1588.

335. Pratt WS, Crawley S, Hicks J, et al. Multiple transcripts of MUC3: evidence for two genes, MUC3A and MUC3B. // Biochem Biophys Res Commun. 2000. -Vol. 275.-P. 916-923.

336. Pusztai A., S.Bardocz. Biological effects of plant lectins on the gastrointestinal tract: metabolic consequences and application. // Trends in Glycoscience and Glycotechnology. 1996. - Vol. 41. - P. 149-165.

337. Reilly J.J., Brougham M., Montgomery C. et al. Effect of glucocorticoid therapy on energy intake in children treated for acute lymphoblastic leukaemia // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - P. 3742-3745.

338. Reilly J.J., Weir J., Mc Coll J.H., Gibson B.E. Prevalence of protein-energy malnutrition at diagnosis in children with acute lymphoblastic leukaemia // J. Pediatr.Gastroenterol. Nutr. 1999. - Vol. 29. - P. 193-197.

339. Reuter, G. Bifidobacteria cultures as components of yoghurt-like products. // Bifidobacteria and Microflora. 1990. - Vol. 9. - P. 107-118.

340. Roberfroid M. Prebiotics: The Concept Revisited. // J.Nutr. 2007. - Vol. 137(3).-P. 830-837.

341. Saavedra J.M., Bauman N.A., Oung I., Perman J.A., Yolken R.H. Feeding of Bifidobacterium bifidum and Streptococcus thermophilus to infants in hospital for prevention of diarrhea and shedding of rotavirus. // Lancet. 1994. - Vol. 344. P. 1046-1049.

342. Saavedra J. M. Use of Probiotics in Pediatrics: Rationale, Mechanisms of Action, and Practical Aspects. // Nutr Clin Pract. June 1, 2007. - Vol. 22(3). -P. 351-365.

343. Saltzman JR, Russell RM. Nutritional consequences of intestinal bacterial overgrowth. // Compr Ther. 1994. - Vol. 20(9). - P. 523-30.

344. Sandbom W.J. Are short-chain fatty acid enemas effective for left-sided ulcerative colitis? // Gastroenterology. 1998. - Vol. 114(1). - P. 218-219.

345. Sartori S, Trevisani L, Nielsen I, Tassinari D, Panzini I, Abbasciano V. Randomized trial of omeprazole or ranitidine versus placebo in the prevention of chemotherapy-induced gastroduodenal injury. // J Clin Oncol. 2000. - Vol. 18. - P. 463-467.

346. Scardovi V., Trovatelli L.D. Bifidobacterium animalis (Mitsuoka) comb, nov. and the "minimum" and "subtile" groups of new bifidobacteria found in sewage. // Int. J. Syst. Bacteriol. 1974. - Vol. 24. - P. 21-28.

347. Simmering R., Blaut M. Pro- and prebiotics the tasty guardian angles? // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2001. - Vol. 55. - P. 19-28.

348. Simpson E.J., Chapman M.A.S., Dawson J. et al. In vivo measurement of colonic butyrate metabolism in patients with quiescent ulcerative colitis. // Gut. -2000. Vol. 46. - P. 73-77.

349. Sklar C.A., Mertens A.G., Walter A. et al. Changes in body mass index and prevalence of over weight in survivors of childhood acute lymphoblastic leukaemia: role of cranial irradiation // Med. Pediatr.Oncol. 2000. - Vol. 35. -P. 91-95.

350. Skolin I., Hursti U.K., Wahlin Y.B. Parent's perception of their child's food intake after the start of chemotherapy // J Pediatr Oncol Nurs. 2001. - Vol. 18. -P. 124-136.

351. Smehilova M., Vilkova E., Nevoral J. Comparison of intestinal microflora in healthy infants and infants with allergic colitis. // Folia Microbiol (Praha). -2008.- Vol. 53(3). P. 255-258.

352. Sonis ST. Mucositis as a biological process: a new hypothesis for the development of chemotherapy-induced stomatotoxicity. // Oral Oncol. 1998. -Vol.34.-P. 39-43.

353. Tyc V.L., Mulhern R.K., Jayawardene D. et al. Chemotherapy-induced nausea and emesis in pediatric cancer patients: an analysis of coping strategies // J Pain Symptom Manage. 1995. - Vol. 10. - P. 338-347.

354. Uderzo C., Rovelli A., Bonomi M. et al. Nutritional status in untreated children with acute lymphoblastic leukaemia as compared with children without malignancy // J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. 1996. - Vol. 23. - P. 34-37.

355. Viele CS. Overview of chemotherapy-induced diarrhea. // Semin Oncol Nurs. 2003. - Vol. 19. - N4 (suppl 3). - P. 2-5.

356. Virally-Monod M, Tielmans D, Kevorkian JP, et al. Chronic diarrhea and diabetes mellitus: prevalence of small intestinal bacterial overgrowth. // Diabetes Metab. Dec 1998. - Vol. 24(6). - P. 530-536.

357. Wadler S, Benson AB 3rd, Engelking C, et al. Recommended guidelines for the treatment of chemotherapy-induced diarrhea. J Clin Oncol. 1998. - Vol. 16. -P. 3169-3178.

358. Wang K.-Y. et al. Effect of ingesting Lactobacillus- and Bifidobacterium-containing yogurt in subjects with colonized Helicobacter pylori // Amer. J. Clin. Nutr. 2004. - Vol. 80. - P.737-741.

Информация о работе

Алешкин, Андрей Владимирович
доктора биологических наук
Москва, 2011
ВАК 03.01.06

Диссертация

Поликомпонентные пробиотические препараты - конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы