Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Перенос генов азотфиксации в бактерии, развивающиеся в растениях

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Козыровская, Наталия Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРА ОТЫ.

1.1. Краткая характеристика основных групп диазотрофов

1.2. Современные аспекты изучения процесса биологической азотфиксации.

1.2.1. Основы биохимии азотфиксации.

1.2.2. Исследование генетики азотфиксации на модельном объекте Klebsiella pneumoniae

1.2.3. Генетический контроль азотфиксации.

1.3. Основные пути решения проблемы обеспечения растений биологическим азотом.

1.4. Бактерии, развивающиеся в растениях, как потенциальные азотфиксаторы.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Номенклатура.

2.2. Виды и штаммы бактерий.

2.3. Питательные среды.

2.4. Методы.

2.4.1. Генетические.

2.4.2. Молекулярно-биологические.

2.4.3. Физико-химические.

2.4.4. Методы фитопатологии.

ГЛАВА 3. ПЕРЕНОС ПЛАЗМИДЫ pRD1 ИЗ Е. coli В ФИТОПАТОГЕННЫЕ

БАКТЕРИИ И ЭКСПРЕССИЯ ЕЕ ДЕТЕРМИНАНТОВ.

3.1. Эффективность конъюгационного переноса плазмиды prdi цри скрещивании е. coli с фитопатогенными бактериями.

3.2. Экспрессия детерминантов антибиотикоустойчивости плазмиды pRDi у трансконъюгантов.

3.3. Исследование ацетиленредуктазной ( нитрогеназной ) активности трансконъюгантов.

3.4. Особенности азотфиксации у трансконъюгантов X. beticola 8717 И Е. aroideae 8947 СО стабильным nif-фенотипом.

3.4.1. Влияние кислорода на ацетиленредуктазную активность.

3.4.2. Изучение гидрогеназной активности.

3.5. Анализ плазмид трансконъюгантов.

ШВА 4. ВЛИЯНИЕ ПЛАЗМИДЫ PRD1 НА ИЗМЕНЕНИЕ НЕ ДЕТЕРМИНИРУЕМЫХ ПЛАЗМИДОЙ СВОЙСТВ ИССЛЕДУЕМЫХ БАКТЕРИЙ.

4.1. Вирулентность и агрессивность трансконъюгантов.

4.2. Культурально-биохимические свойства трансконъюгантов.

4.3. Изучение возможности функционирования nif -генов трансконъюгантов Е. aroideae 8947 при развитии их в растении, вегетирующем в открытом грунте. •

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Перенос генов азотфиксации в бактерии, развивающиеся в растениях"

Превращение и2 в является важным процессом на Земле. Осуществляют этот процесс отдельные прокариотические организмы (свободноживущие или симбиотические), превращая молекулярный азот атмосферы в аммоний, легкодоступный для низших эукариотов и растений.

Биологически связанный азот снабжает растения лишь на 6070 Для обеспечения сельскохозяйственных культур азотом используют минеральные азотные удобрения. Их производство требует значительных энергетических затрат, а применение удобрений приводит к загрязнению окружающей среды и нарушению баланса в экосистемах /Gutschnik, 1980/.

Учитывая вышеизложенное, решение проблемы азотного дефицита возможно путем радикального увеличения вклада биологической азотфиксации. Для этого, црезде всего, необходимо понимание генетики этого процесса и разработка способов переноса генов азот-фиксации (nif) между различными бактериями. Наибольшее количество экспериментов по изучению переноса и экспрессии генов азот-фиксации выполнено с гибридной плазмидой pRDi, сконструированной Диксоном с соавторами на основе плазмцды RP4 и ДНК Klebsiella pneumoniae /Dixon et al., 1976/. С ПОМОЩЬЮ этой плазми-ды созданы новые формы грам-отрицательных и грам-положительных бактерий с nif-фенотипом. Исследование экспрессии ее детерминантов в различных объектах дает возможность установить закономерности выражения генов азотфиксации в неодинаковых условиях, а также изучить их генетическую стабильность.

В данной работе плазмида pRDi использовалась для изучения возможности переноса генов азотфиксации в бактерии Xanthomonas beticola и Erwinia aroideae, развивающиеся в растениях, и в процессе исследования этой проблемы изучалась более детально. Основные вопросы, решаемые в работе, можно сформулировать следующим образом:

1) Осуществим ли перенос плазмиды pRDl в бактерии родов Xanthomonas И Erwinia ?

2) Будет ли происходить экспрессия генов азотфжсации в этих бактериях?

3) Какова судьба ДНК плазмиды pRDl в рецшшентных метках?

4) Какое влияние оказывает введение плазмиды на фенотипи-ческие свойства бактерий?

5) Возможно ли функционирование nif-генов, перенесенных на плазмиде pRDl, в клетках бактерий,.развивающихся in piantа?

Основные результаты, полученные в данной работе, сводятся к следующему:

- плазмида pRDl переходит из Escherichia coli K-12J62 в исследуемые объекты при конъюгации, однако в клетках коныогантов нестабильна и диссоциирует у небольшой части трансконъюгантов X. beticola 8717 сразу после перехода из донора и у большинства трансконъюгантов X. beticola 8717, 7325 И Е. aroideae 8634, 8947 - при пассировании бактерии в неселективных условиях; при этом в первом случае nif -гены интегрируют в хромосому реципиента в результате постконыогационной рекомбинации, в другом -pRDl деградирует с элиминацией nif-генов из ¡слетки (X, beticola 8717, 7325, Е. aroideae 8634, 8947) ИЛИ транспозицией их из плазмиды в хромосому реципиента (Е. aroideae 8947). Во всех случаях "образуются плазмиды меньшей молекулярной массы, идентичной - RP4;

- стабильные по nif-признаку клоны X. beticola 8717(pRDi) и е. aroideae 8947(pRDi) экспрессируют гены, ответственные за азотфиксацию, в аэробных условиях, в отличие от донора nif-генов К. pneumoniae;

- перенос плазмиды pRDi из Е. coli методом конъюгации в X, beticola 8717 сопровождается изменением фенотипических свойств трансконъюгантов и появлением у них признаков, не свойственных родительским штаммам;

- стабильная экспрессия nif-генов К. pneumoniae возможна у трансконъюгантов Е. aroideae 8947 (pRDi) при развитии последних не только на специальной среде, но и непосредственно в ткани растения.

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Козыровская, Наталия Алексеевна

ВЫВОДЫ

1. Плазмида pRDi передается из E.coli в фитопатогенные бактерии X. beticola 8717, 7325 И E.aroideae 8634, 8947 методом конъюгации с частотой - 10""^. Гены, ответственные за азот-фиксацию, перенесенные в составе плазмиды, экспрессируются у этих бактерий, в том числе в аэробных условиях. Уровень нитрогеназной активности трансконъюгантов зависит от локализации nif-генов.

2. Плазмида pRDi нестабильна в клетках-исследуемых бактерий; это проявляется в сегрегации nif-признака и уменьшении молекулы pRDi до размеров RP4. Nif-гены элиминируют из клетки или интегрируют в хромосому реципиента в результате постконыога-ционных событий (X.beticola) или вследствие транспозиции из плазмиды в хромосому при клонировании трансконъюгантов в селективных; условиях (Е. aroideae).

3. Введение плазмиды pRDi методом конъюгации из е. coli в X. beticola и Е. aroideae оказывает влияние на культурально-биохимические и патогенные свойства реципиентов, проявляющееся в усилении агрессивности бактерий по отношению к растениям-хозяевам, появлении у них новых свойств.

4. Доказано полноценное функционирование генов азотфикса-ции у трансконъюгантов Е. aroideae 8947 при развитии последних в тканях: растений и сохранение у них: nif-фенотипа при пассировании in planta.

5. Получение стабильных по nif -фенотипу производных X. beticola И Е. aroideae методом конъюгации С Е. coli K-12J62-1 (pRDi) дает основание считать, что плазмида pRDi может быть использована для конструирования новых азотфиксирующих штаммов бактерий, заселяющих растения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Козыровская, Наталия Алексеевна, Киев

1. Баев A.A., Злотников K.M. Генетика и генетическая инженерия клубеньковых бактерий. - Изв. АН СССР, сер. биол., 1981, №6, с. 805-822.

2. Бактериальные болезни растений / Под ред. В.П. Израильского. Изд. 3-е, перераб. и доп. М.: Колос, 1979. - 288 с.

3. Бельтюкова К.И., Матышевская М.С., Куликовская М.Д., Сидоренко С.С. Методы исследования возбудителей бактериальных болезней растений. Киев: Наук, думка, 1968, с. I0I-III.

4. Беррис Р. Ингибирование. В кн.: Проблемы фиксации азота / Под. ред. Р. Харди, Ф. Боттомли, Р. Берне. М.: Мир, 1982,с. 504-536.

5. Галачьян P.M. Возбудители бактериальных опухолей как стимуляторы роста растений. Ереван: Изд-во АН АрмССР, 1979.153 с.

6. Гвоздяк Р.И., Мурас В.А., Житкевич Н.В. Быстрый метод определения патогенных свойств Xanthomonas beticoia. Микробиоло-гич. журн., 1981, т. 43, вып. 2, с. 253-255.

7. Гершензон С.М. Щутагенное действие ДНК и проблема направленных- 119 .мутаций. Генетика, 1966, т. 2, JS 5, с. 3-13.

8. Горина И.А., Яковлева В.И. Быстрый метод определения содерка-ния белка в клетках микроорганизмов. Прикладная биохимия и микробиология, 1980, т. 17, вып. 6, с. 936-939.

9. Горыишн И.Ю. Одно- и двунитевая конъюгация у Escherichia coli K-I2. Причины гетерогенности потомства: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Киев, 1982. - 23 с.

10. Добрица С.В., Добрица А.П. 0 возможной роли плазмиды Bacillus brevis var G.-B. в диссоциации и спорообразовании. В кн.: Экспериментальное изучение развития микроорганизмов. Путцино, 1978, с. 7-10.

11. Добрица С.В. Плазмидный комплекс в визикулах микросимбионта из азотфиксирующих клубеньков Alnus glutinosa. В кн.: Все-союз. конш. Метаболические плазмиды бактерий (Таллин, окт. 1982 г.) : Тез. докл. Таллин, 1982, с. 81-83.

12. Калакуцкий Л.В., Парийская А.Н. Азотфиксирующие симбионты ак-тиномицетов с растениями. Изв. АН СССР, сер. биол., 1982, №2, с. 255-270.

13. Калининская Т.А., Панкратова Е.М., Хохлова В.Ф. Усвоение молекулярного азота цианобактериями, не образующими гетероцист.-Микробиология, 1981, т. 50, $ 3, с. 550-555.

14. Кононков Ф.П., Умаров М.И., Мирчинк Т.Г. Азотфиксирующие ассоциации грибов с бактериями. Микробиология, 1979, т. 48, с. 734-737.

15. Конюхов В.Ф., Ляйман М.Э., Лиходед Л.Я., Мальцева Л.А. Анализ основных фракций белков внешней мембраны в штаммах Е. coli, различающихся по выживаемости в воздухе. Журн. микро-биол., эпидемиол. и иммунобиол., 1982, J& I, с. 54-58.

16. Кордюм В.А. Биологическая азотфиксация. Проблемы и перспективы. Молекуляр. биология, 1982, вып. 30, с. 45-57.

17. Кордюм В.А., Козыровская H.A. Метод определения азотфиксирую-щей способности аэробных микроорганизмов. В кн.: Методы молекулярной биологии. Киев: Наук, думка, 1979, с. 256-259.

18. Кордюм В.А., Козыровская H.A., Гвоздяк Р.И., Мурас В.А. Перенос маркеров плазмиды BP4-I в Xanthomonas beticola. Докл. АН УССР, сер. Б, 1980, J£ 5, с. 82-85.

19. Кордюм В.А., Козыровская H.A., Гвоздяк Р.И., Ходос С.Ф. Придание способности фиксировать азот атмосферы бактериям Erwinia aroideae. Докл. АН СССР, 1983, т. 271, В I, с. 206-210.

20. Лобанок Т.Е., Песнякевич А.Г., Фомичев Ю.К. Восприятие и передача плазмиды Rts бактериями рода Erwinia. Генетика, 1979, т. 15, В 10, с. 1739-1745.

21. Лычева Т.А., Петровская В.Г. Анализ меродиплоидных штаммов Shigella flexneri, утративших вирулентность. 1Еурн. микро-биол., эпидемиол. и иммунобиол., 1979, №5, с. 72-78.

22. Майсурян А.Н., Баканчикова Т.И., Климачева В.А., Ракитин Л.Ю. Перенос Р-плазмид (pRDi и ВР4) в штаммы Azospirillum Ъга-silense и их влияние на нитрогеназную активность клеток. -Генетика, 1982, т. 18, № 4, с. 588-595.

23. Майсурян А.Н., Погосов В.З., Ракитин. Л.Ю., 1уманов Л.Л. Мутанты Azospirillum brasilense с конститутивным синтезом нит-рогеназы. Генетика, 1982, т. 18, № 4, с. 575-579.

24. Миллер Д. Эксперименты в молекулярной генетике. М.: Мир, 1976. - 436 с.

25. Мишустин Е.Н., Шильникова В.К. Еилогическая фиксация атмосферного азота. М.: Наука, 1968. - 532 с.

26. Неборачко Л.Н., Гвоздяк Р.И., Кордгам В.А. Экспрессия гетеро-логичных плазмид в Erwinia carotovora. Докл. АН СССР,1982, т. 264, В 5, с. 1242-1245.

27. Ничик М.М. Плазмиды рода Rhizobium. Молекуляр. биология, 1980, вып. 26, с. 36-45.

28. Ничик М.М., Лисова Н.Е. Экспрессия генов плазмиды pRDi в: трансконъюгантах Rhlzobium sp. 32LJ. Молекуляр. биология,1983, вып. 35, с. 50-57.

29. Попкова К.В. Учение об иммунитете растений. М.: Колос, 1979,272 с.

30. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Шнек: Вышейша',: школа, 1967. - 328 с.

31. Смирнов С.П., Данилевич В.Н. Интеграция фактора RP4- с хромосомой Escherichia coli K-I2 и образование двух типов Hfr-штаммов. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол., 1979, J£ 7, с. 30-34.

32. Троицкий Н.А. Гетероспецифический конъюгационный перенос генов азотобактера. Молекуляр. биология, 1982, вып. 30, с. 42-45.

33. Хмельницкий М.И., Злотников К.М., Баев А.А. Генетический анализ у Rhizobium japonicum. Докл. АН СССР, т. 256, J£ I,с. I9I-I95.

34. Aba-El-Rehim М.А., AbcLel-Ghaffar A.S., tfawaz Kreaman, Gobti-al W.N. Serological and immunoelectrophoretical relationshipsbetween Rhizobium and Agrobacterium strains. Egypt. J. Soil Sei., 1975, Spec. Issue, p. 471-476.

35. Andersen K., Shanmugam K.T. Energetics of biological nitrogen fixation: determination of the ratio of formation of H2 to NH^ catalysed by nitrogenase of Klebsiella pneumoniae in vivo. J. Gen. Microbiol., 1977, v. 103, N 3, p. 107-122.

36. Andersen K., Tait R., King W. Plasmids required for utilization of molecular hydrogen by Alcaligenes eutrophus. Arch. Microbiol., 1981, v. 129, N 5, p. 384-394.

37. Appelbaum E.R., Kramer R.A. Restriction mapping of deletions in the nif region of the Klebsiella pneumoniae chromosome. -Mol. Gen. Genet., 1980, v. 179, N 2, p. 349-354.

38. Bachhuber M., Brill V/., Ilowe M. Use of bacteriophage Mu to isolate deletions in the his-nif region of Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1976, v. 128, N 3, p. 749-753.

39. Bachmann B.J., Low K.B. Linkage map of Escherichia coli K-12. Edition 6. Microbiol. Rev., 1980, v. 44, N 1, p. 1-56.

40. Baker D., Pengelly Y/., Torrey J. Immunochemical analysis of relationships among isolated Frankiae (Actinomycetales).-Int. J. Syst. Bacteriol., 1981, v. 31, N 2, p. 148-151.

41. Baldanzi E., Bazzicalupo M., Gallori E., Polsinelli M. Trans-ferimento del Plasmide RP41 da Escherichia coli ad Azospiril-lum lipoferum. Atti.Assoc. genet.ital.,1980, N 25, p. 11-12.

42. Banfalvi Z., Sakanyan V., Koncz C., Kiss A., Dusha A., Kondo-rosi A. Location of nodulation and nitrogen fixation geneson a high molecular weight plasmid of Rhizobium meliloti. -Mol. Gen. Genet., 1981, v. 184, N 2, p. 318-325.

43. Barth P.T. Plasmid RP4, with Escherichia coli DNA inserted in vitro, mediates chromosomal transfer. Plasmid, 1979, v. 2, N 1, p. 130-136.

44. Becking J.H., Boer W.E., Howink A.L. Electron microscopy of the endophyte of Alnus glutinosa. Ant. van Leenwerihoek. J. Microbiol. Serol., 1964, v. 30, N 2, p. 343-347.

45. Bergersen P.J., Turner G.L. Nitrogen fixation by the bactero-id fraotion of breis of soybean root nodules. Biochim. Bio-phys. Acta, 1967, v. 141, p. 507.

46. Brill W.J., Steiner A.L., Shah V.K. Effect of molybdenum starvation and tungsten on the synthesis of nitrogenase componentsin Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1974, v. 118, N 3, p. 986-989.

47. Brown C., Seidler R.J. Potential pathogens in the environment! Klebsiella pneumoniae, a taxonomic and ecological enigma. -Appl. Microbiol., 1973, v. 25, N 6, p. 900-904.

48. Bucheitel G., Klingmüller W. In vivo transfer of genes from Escherichia coli to Bacillus subtilis. Eur. J. Appl. Microbiol. and Biotechnol., 1979, v. 7, U1, p. 79-84.

49. Bullen W.A., Burns R.C., Comte J.R. Nitrogen fixation: Hydrosulfite as electron donor with cell-free preparation of Azo-tobacter vinelandii and Rhodospirillum rubrum. Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1965, v. 53, N 3, p. 532-537.

50. Burggraaf A.J., Quispel A., Tak T., Valstar J. Methods of isolation and cultivation of Prankia species from actinorhizes. -Plant Soil, 1981, v. 61, N 1-2, p. 157-168.

51. Campbell A. Episomes. Adv. Genetics, 1962, N 11, p. 101-116.

52. Cannon P.C.,Dixon R.A., Postgate J.R., Primrose S.B. Chromosomal integration of Klebsiella nitrogen fixation genes in Escherichia coli.- J.Gen. Microbiol., 1974, v.80, N 2, p. 227-241.

53. Cannon P.C.,Dixon R.A., Postgate J.R., Primrose S.B. Plasmids formed in nitrogen-fixing Escherichia coli Klebsiella pneumoniae hybrids.- J.Gen. Microbiol., 1974, v.80, N 2, p. 241-277.

54. Cannon P.C., Dixon R.A., Postgate J.R. Derivation and properties of P-prime factors in Escherichia coli carrying nitrogen fixation genes from Klebsiella pneumoniae. J. Gen. Microbiol., 1976, v. 93, N 1, p. 111-125.

55. Cannon P.C., Postgate J.R. Expression of Klebsiella nitrogen fixation genes (nif) in Azotobacter. Nature, 1976, v. 260, N 5548, p. 271-272.

56. Cannon P.C. Cloning of the Klebsiella nitrogen fixation (nif)genes. In: Genetic engineering / Ed. H.Boyer, S. Nicosia. -New York, Oxford, 1978, p. 181-188.

57. Cannon P.C., Riedel G.E., Ausubel P.M. Overlapping sequences of Klebsiella pneumoniae nif DNA cloned and characterized. -Mol. Gen. Genet., 1979, v. 174, N 1, p. 59-66.

58. Cantrell M.A., Haugland R.A., Evans H.J. Construction of Rhi-zobium japonicum gene bank and use in isolation of a hydrogen uptake gene. Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1983, v. 80, N 1, p. 181-185.

59. Carnahan J.E., Mortenson L.E., Mower H.P., Castle J.E. Nitrogen fixation in cell-free extracts of Clostridium pasteuria-num. Biochim. Biophys. Acta, 196p, v. 38, p. 188-189.

60. Chambers C.A., Silver W.S. Acetylen reduction (dinitrogen fixation) by clinical isolates of Klebsiella pneumoniae. J. Clin. Microbiol., 1977, v. 6, N 5, p. 456-460.

61. Chatterjee A., Starr M. Erwinia spp. and other Enterobacteria-ceae of antibiotic resistance carried on R factors. J. Bacterid., 1972, v. 112, N 3, p. 576-578.

62. Chatterjee A., Starr M. Donor strains of the soft-rot bacterium Erwinia Chrysanthemi and conjugational transfer of the pectolytic capacity. J. Bacteriol., 1977» v. 132, N 3,p. 862-865.

63. Chilton M.D., Drummond M.H., Merlo D.J., Sciaky D., Montoya A., Gordon M.P., Nester E.W. Stable incorporation of plasmid DNA into highter plant cellss The molecular basis of crown-gall tumorigenesis. Cell, 1979, N 11, p. 263-271.

64. Corbin D., Ditta G., Helinski D. Clastering of nitrogen fixation genes (nif) in Rhizobium meliloti. J. Bacteriol., 1982, v. 149, N 1, p. 221-228.

65. Datta U.R., Hedges R.W., Shaw E.J., Sykes R.B., Richmond M.H. Properties of R-factor from Pseudomonas aeruginosa. J. Bacteriol., 1971, v. 108, N 3, p. 1244-1249.

66. Davis R.V/,, Simon M., Davidson N. Electron microscope heteroduplex methods for mapping regions of base sequence homology in nucleic acids. In: Methods enzymol./ Ed. L. Grossman,

67. K. Moldave. New York: Acad. Press, 1971, vol. 21D, p. 413-428.79* Dennison S., Baumberg S. Conjugational behavior of N plasmids in Escherichia coli K-12. Mol. Gen. Genet., 1975, v. 138, N 2, p. 323-327.

68. Dixon R.A., Postgate J.R. Genetic transfer of nitrogen fixation from Klebsiella pneumoniae to Escherichia coli. Nature, 1972, v. 237, N 5350, p. 102-103.

69. Dixon R.A., Cannon P.C., Kondorosi A. Construction of P-plas-mid carrying nitrogen fixation genes from Klebsiella pneumoniae. Nature, 1976, v. 260, N 5548, p. 268-271.

70. Dixon R.A., Kennedy C., Kondorosi A., Krishnapillai V., Merrick M. Complementation analysis of Klebsiella pneumoniae mutants defective in nitrogen fixation. Mol. Gen. Genet., 1977, v. 157, N 2, p. 189-198.

71. Dixon H.A., Eady R.R., Espin G. Analysis of regulation of Klebsiella pneumoniae nitrogen fixation (nif) genes claster with gene fusions. Nature, 1980, v. 286, N 5769, p. 128-132,

72. Dixon R.O.D. Hydrogenase in pea root nodule bacteroids. -Arch. Mikrobiol•, 1968, v. 62, N 3, p. 272-283.

73. Dixon R.O.D. Hydrogenase in legume root nodule bacteroids: occurrence and properties. Arch. Mikrobiol., 1972, v. 82, N 2, p. 193-201.

74. Dobereiner J., Marriel J., Nery M. Ecological distribution of Spirillum lipoferum Beijerink. Can. J. Microbiol., 1976,v. 22, p. 1464-1473.

75. Dobereiner J., Boddley R.M. Nitrogen fixation in association rcith Gramineae. In: Curr. Perspect. Nitrogen / Ed. A.H, Gibson, W.E. Newton. Canberra, 1981, p. 305-312.

76. Dye D.W., Lelliot R.A. Genus Xanthomonas. Ins Bergeys Manual of Determinative Bacteriology /Ed. R.E. Buchanan, N.E.Gibbons. 8th ed. Baltimore, 1968, p. 339-345.

77. Eady R.R., Smith B.E., Lowe D.J., Torneley R.N.F., Hawkes T., Dixon R.A., McLean P., Postgate J.R. The structure and function of nitrogenase. Biochem. Sei. Trans., 1981, v. 9, N 2, p. 75.

78. Eady R.R., Kahn D., Buchanan-Wollaston V. Molecular enzymolo-gy of nitrogen fixation. Isr. J. Bot., 1982, v. 31, p. 45-60,

79. Elmerich C., Houmard J., Sibold L., Manheimer J., Charpin N. Genetic and biochemical analysis of mutants induced by bacteriophage Mu DNA integration into Klebsiella pneumoniae nitrogen fixation genes. Mol. Gen. Genet., 1978, v. 165, N 2, p. 181-189.

80. Emerich D.Y/., Ruiz-Argiieso T., Ching Te May, Evans H.J. Hydrogen dependent nitrogenase activity and ATP formation in Rhizobium japonicum bacteroids. J. Bacteriol., 1979, v.137, N 1, p. 153-160.

81. Emerich D.W., Albrecht S.L., Russel S.A., Ching Te May, Evans H.J. Oxyleghemoglobin-mediated hydrogen oxydation by Rhizobium ¿japonicum USDA 122 DES bacteroids. Plant. Physiol., 1980, v. 65, N 4» p. 605-609.

82. Espin G., Merrick M. Glutamine synthetase mutations which affect the expression of the nitrogen fixing (nif) genes in Klebsiella pneumoniae. In: Curr. Perspect. Nitrogen Pixat./ Ed. A.H. Gibson, W.E. Newton. Canberra, 1981, p. 399.

83. Evans H.J., Barber L.E. Biological nitrogen fixation for food and fiber production. Science, 1977, v. 197» N 4304,p. 332-339.

84. Paelen M., Toussaint A. Bacteriophage Mu-1: a tool to transpose and localize bacterial genes. J, Mol. Biol., 1976,v. 104, N 3, p. 525-539.

85. Parrand S.K., Kado C.J., Ireland C.R. Suppression of tumorgenicity by Inc W R plasmid pSa in Agrobacterium tumefaciens. -Mol. Gen. Genet., 1981, v. 181, N 1, p. 44-51.

86. Pay P., Stewart W.D.P., Walsby A.E., Pogg G.E. Is the getero-cyst the site of nitrogen fixation in blue-green algae?

87. Nature, 1968, v. 220, N 5169, p. 810-812.

88. Johnston J.B., Gunsalus J.C. Isolation of metabolic plasmid DNA from Pseudomonas putida. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1977, v. 75, N 1, p. 13-19.

89. Johnston A.W.B., Beynon J.L., Buchanan-Wollaston A.V. High frequency transfer of nodulating ability between strains and speciesof Rhizobium. Nature, 1978, v. 276, N 5688, p. 634-636.

90. Haas D., Holloway B.W. R-factor variants with enhanced sex factor activity in Pseudomonas aeruginosa. Mol. Gen. Genet, 1976, v. 144, N 3, p. 243-248-.

91. Hamilton P.B., Wilson P.W. Nitrogen fixation by Aerobacter aerogenes. Ann. Acad. Sei. Fen., 1955» Ser. A II, v. 60, p. 139-150.

92. Hardy R.W.P., Knight E.J., d'Eustachio A.J. An energy-dependent hydrogen evolution from ditionite in nitrogen-fixing extracts of Clostridium pasteurianum. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1965, v. 20, N 5» p. 539-543.

93. Hardy R.W.F., Holsten R.D., Jackson E.K., Burns R.C. The acetylene-ethyl ene assay for N2 fixation: Laboratory and field evaluation. Plant Physiol., 1968, v. 43, N 5, p. 1185-1207.

94. Hardy R.W.P., Havelka U.D. Nitrogen fixation research: A key to world food? Science, 1975, v. 188, N 4188, p. 633-637.

95. Hausinger R.P., Howard J.B. The amino acid sequence of the nitrogenase iron protein from Azotobacter vinelandii. J. Biol. Chem., 1982, v. 257, N 5, p. 2483-2490.

96. Henneke H., Shanmugam K.T. Temperature control of nitrogen fixation in Klebsiella pneumoniae. Arch. Microbiol., 1979, v. 123, N 3, p. 259-265.

97. Henneke H. Recombinant plasmids carrying nif genes from Rhizobium japonicum. Nature, 1981, v. 291, N 5813, p. 354-356.

98. Hill S., Kavanagh E.P. Roles of nifP and nifJ gene products in electron transport to nitrogenase in Klebsiella pneumoniae. J. Bacterid., 1980, v. 141, N 2, p. 470-475.

99. Hill S., Kennedy C., Kavanagh E.P., Goldbery K.B., Hanau R. Nitrogen fixation gene (nifL) involved in oxygen regulation of nitrogenase synthesis in Klebsiella pneumoniae. Nature, 1981, v. 290, N 5805, p. 424-426.

100. Holmes D.S., Quigley M.A. A rapid boiling method for the preparation of bacterial plasmids. Anal. Biochem., 1981,v. 114, N 1, p. 193-197.

101. Horn S.M., Henneke H.H., Shanmugam K.T. Regulation of nitrogenase biosynthesis in Klebsiella pneumoniae: effect of nitrate. J. Gen. Microbiol., 1980, v. 117, N 1, p. 169-179.

102. Houmard J., Bogusz D. Kinetic study of the expression of Klebsiella pneumoniae nitrogen fixation (NIP) genes under conditions of inhibited transcription. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1981, v. 100, N 3, p. 1237-1244.

103. Gates J.E., Pisher R.W., Candler R.A. The occurrence of cory-neform bacteria in the leaf cavity of Azolla. Arch. Microbiol., 1980, v. 127, N 2, p. 163-165.

104. Giles K.L., Whitehead H.C.M. The transfer of nitrogen fixing ability to a eukaryote cell. Cytobios, 1975, v. 14, N 53,p. 49-61.

105. Giles K.L., Whitehead H.C.M. Reassociation of a modified my-corrhiza v/ith the host plant roots (Pinus radiata) and the transfer of acetylene reduction activity. Plant and Soil, 1977, v. 48, N 1, p. 143-152.

106. Gonzalez C.F., Vidaver A.K. Syringomycin and holcus in maize: Plasmid associated properties. Proc. Amer. Phytopathol. Soc., 1977, v. 4, p. 107.

107. Keller E.B., Calvo J.M. Alternative secondary structures of leader RNA's and regulation of the trp, phe, his, thr and leu operons. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1979, v. 12, N 11, p. 6186-6190.

108. Kleeberger A., Klingmuller Y/. Plasmid-mediated transfer of nitrogen-fixing capability to bacteria from the rhizosphereof grasses. Mol. Gen. Genet., 1980, v. 180, N 3, p. 621-627.

109. Kleiner D. Regulation of ammonium uptake and metabolism by nitrogen fixing bacteria. III. Clostridium pasteurianum. -Arch. Microbiol., 1979, v. 120, N 3, p. 263-270.

110. Klemperer R.M.M., Ismail Nahla T.A.J., Brown M.R.W. Effect of R-plasmid RP1 and nutrient depletion on the resistance of Escherichia coli to cetrimide, chlorhexidine and phenol. J. Appl. Bacteriol,, 1980, v. 48, N 3, p. 349-357.

111. Klingmüller W. Genetic engineering for practical application. Naturwissenseschaften, 1979, N 66, p. 182-189.

112. Knittel M.D. Occurrence of Klebsiella pneumoniae in surface waters. Appl. Microbiol., 1975, v. 29, K 5, p. 595-601.

113. Knowles R., Neufeld R., Simpson S. Acetylene reduction (nitrogen fixation) by pulp and paper effluents by Klebsiella isolated from effluents and environmental situations. -Appl. Microbiol., 1974, v. 28, N 4, p. 603-613.

114. Konze J.R., Elstner E.F. Ethane and ethylene formation by mitochondria as indication of aerobic lipid degradation in response to wounding of plant tissue. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v. 528, N 2, p. 213-221.

115. Lang D. Molecular weights of coliphages and coliphages DNA. III. Contour length and molecular weight of DNA from bacteriophages T^, T^, Trj and from bovine papilloma virus.

116. J. Mol. Biol., 1970, v. 54, N 3, p. 557-565.

117. Lehtinen H., Mantsälä P. Transfer of nitrogen fixation genes into Pseudomonas putida isolated from Pinnish tundra soil. -Antonie van Leeuwehnoek, 1981, v. 47, N 5, p. 405-410.

118. Levin H.A., Farrand S.K., Gordon M.P., Nester E.W. Conjugation in Agrobacterium tumefaciens in the absence of plant tissue. J. Bacteriol., 1976, v. 127, N 3, p. 1331-1336.

119. Lim S., Andersen K., Tait R., Valentine R.C. Genetic engineering in agriculture: Hydrogen uptake (hup) genes. Trends Biochem. Sei., 1980, v. 5, N 6, p. 167-170.

120. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v. 193, N 2, p. 265-275.

121. Maclean P.A., Dixon R.A. Requirement of nif V gene for production of wild-type nitrogenase enzyme in Klebsiella pneumoniae. Nature, 1981, v. 292, N 5824, p. 655-656.

122. MacNeil D., Brill W. Fusion of the Escherichia coli lac structural genes to Klebsiella pneumoniae nif operons. In: 79th Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol.: Abstracts. Loc Angeles, Washington: D.C., 1979, p. 171.

123. MacNeil D., Supiano M.A., Brill W.J. Order of genes near nif in Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1979, v. 138,1. N 3, p. 1041-1045.

124. MacNeil D., Zhu J., Brill W.J. Regulation of nitrogen fixation in Klebsiella pneumoniae: Isolation and characterization of strains with nif-lac fusions. J. Bacterid., 1981, v. 145, N 1, p. 348-357.

125. MacNeil T., MacNeil D., Roberts G., Supiano M., Brill W.J. Pine-structure mapping and complementation analysis of nif (nitrogen fixation) genes in Klebsiella pneumoniae. J. Bacterid., 1978, v. 138, N 1, p. 253-266.

126. Mazur B.J., Rice D., Hacelkorn R. Identification of blue-green algae nitrogen fixation genes by using heterologous DNA hybridization probes. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1980, v. 77, N 1, p. 186-190.

127. Meade H.M., Signer E.R. Genetic mapping of Rhizobium melilo-ti. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1977, v. 74, N 5, p. 20762078.

128. Meade H.M., Long S.R., Ruvkun G.B., Brown S.E., Ausubel P.M. Physical and genetic characterization of symbiotic and auxotrophic mutants of Rhizobium meliloti induced by transposon Tn5 mutagenesis. J. Bacterid., 1982, v. 149, N 1, p. 114122.

129. Megias M., Caviedes M.A., Romero P., Palomares A.J. Potential of plasmids RP1, RP4, R1drdl9 and R68.45 for conjugal transfer and chromosome mobilization in Rhizobium trifolii.-Microbios Lett., 1981, v. 17, N 65, p. 17-22.

130. Mevarech M«, Rice D., Haselkorn R. Nucleotide sequence of cya-nobacterial nifH gene coding for nitrogenase reductase. -Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1980, v. 77, N 11, p. 6476-648O,

131. Natagani H., Shimizu M., Valentine R.C. The mechanism of ammonia assimilation in nitrogen fixing bacteria. Arch. Microbiol., 1971, v. 79, N 1, p. 164-175.

132. Neilson A.H. Nitrogen fixation in a biotype of Erwinia herbi-cola resembling Escherichia coli. J. Appl. Bacterid., 1979, v. 46, N 3, p. 483-491.

133. Nguyen N.D., Goffert M., Singh M., Klingmüller W. Nif-hybrids of Enterobacter cloaceae: Selection for nif-gene intergation with nif-plasmids containing the Mu transposon. Mol. Gen. Genet., 1983, v. 192, N 3, p. 439-443.

134. Nuti M.P., Lepidi A.A., Pracash R.K., Schilperoort R.A., Cannon F.C. Evidence for nitrogen fixation (nif) genes on indigenous Rhizobium plasmids. Nature, 1979, v. 282, N 5738,p. 533-535.

135. Pahel G., Tyler B. A new glnA linked regulatory gene for glutamine synthetase in Escherichia coli. - Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1979, v. 76, N 8, p. 4544-4548.

136. Page W.J. Transformation of Azotobacter vinelandii strains unable to fix nitrogen with Rhizobium spp. DNA. Can. J. Microbiol., 1978, v. 24, N 2, p. 209.

137. Panopoulos N.J., Guimaraes W.V., Hua Sui-Sheng, Resnik S«, Lai M., Shaffer S. Plasmids in phytopathogenic bacteria. -In: Microbiology 1978. Washington, 1978, p. 238-241.

138. Papen H., Werner D. Ng-fixation in Erwinia herbicola. Arch. Microbiol., 1979, v. 120, N 1, p. 25-30.

139. Partridge C.D.P., Walker C.C., Yates M.G., Postgate J.R. The relationship between hydrogenase and nitrogenase in Azotobacter chroococcum: Effect of nitrogen sources on hydrogenase activity. J. Gen. Microbiol., 1980, v. 119, N 2, p.313-319.

140. Pedrosa P.O., Stephan M., Dobereiner J., Yates M.G. Hydrogen-uptake hydrogenase activity in nitrogen fixing Azospirillum brasilense. J. Gen. Microbiol., 1982, v. 128, N 1, p. 161166.

141. Perombelon M.C.M., Boucher C. Developing a mating system in Erwinia carotovora. In: Proc. 4th Int. Conf. Plant Pathol. Bact. Angers, 1978, v. 1, p. 47-52.

142. Pinkwart M., Bahl H., Reimer M., Wölfle D., Berndt H. Activity of the Hg-oxydizing hydrogenase in different ^-fixing bacteria. FEMS Microbiol. Lett., 1979, N 3, p. 177-181.

143. Plazinski J. Tn5-inherited mutant strain of Rhizobium meli-loti with highly increased ability to fix nitrogen for lueerne. Microbiol. Lett., 1982, v. 18, N 71-72, p. 137-142.

144. Polsinelli M., Baldanzi E., Bazzicalupo M., Gallori E. Transfer of plasmid pRD1 from Escherichia coli to Azospirillum brazil ense. Mol. Gen. Genet,, 1980, v. 178, N 3, p. 709-711.

145. Postgate J.R. The acetylen reduction test for nitrogen fixation. Ins Methods in microbiology /Ed. J.R. Norris, D.W.Rib-bons. New York: Acad. Press, 1972, v. 6B, p. 343-357.

146. Postgate J.R, Biological nitrogen fixation. In: Co. Microbiol. Selec. Top, Puther Study. London; New York: Acad. Press, 1978, p. 343-361.

147. Postgate J.R., Krishnapillai V. Expression of Klebsiella nif and his genes in Salmonella typhimurium. J, Gen. Microbiol., 1977, v. 98, N 2, p. 379-385.

148. Puhl er A,, Burckardt H.J., Cannon P.C., Wohlleben W. Spontaneous degradation of pRD1 DNA into unique size classes is recA dependent. Mol, Gen. Genet,, 1979, v. 171, N 1, p. 1-6.

149. Puhler A., Klipp W. Cloning of the entire region for nitrogen fixation from Klebsiella pneumoniae on a multicopy plasmid venicle in Escherichia coli. Mol. Gen. Genet,, 1979, v. 176, N 1, p. 17-24.

150. Piihler A., Klipp W. Pine-structure analysis of gene region for Ng-fixation (nif) of Klebsiella pneumoniae. In: Biology of inorganic nitrogen and sulfur / Ed. H. Bothe, A. Trebst. Berlin; Heidelberg; New York: Spring-Verlag, 1981, p,275-286.

151. Quiviger B., Franch C., Lutfalla G., Rice D., Haselkorn R., Elmerich C. Cloning of a nitrogen fixation (nif) gene cluster of Azospirillum brasilense. Biochimie, 1982, v, 64, N 7, p. 495-502.

152. Rai A.N., Rowell P., Stewart W.D. Nitrogenase activity anddark C02 fixation in the lichen Peltigera aphthosa Willd. -Planta, 1981, v. 151» N 3, p. 256-264.

153. Riedel G.E., Ausubel P.M., Cannon P.C. Physical map of chromosomal nitrogen fixation (nif) genes of Klebsiella pneumoniae. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1979, v. 76, N 6, p.2866-2870.

154. Roberts G.P., MacNeil T., MacNeil D., Brill W.J. Regulation and characterization of protein products coded by the nif (nitrogen fixation) genes of Klebsiella pneumoniae. J. Bacterid., 1978, v. 136, N 1, p. 267-279.

155. Roberts G.P., Brill W.J. Gene-product relationships of the nif regulon of Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1980, v. 144, N 1, p. 210-216.

156. Rosenberg C., Boistard P., Denarie J., Casse-Delbart P. Genes controlling early and late functions in symbiosis are located on a megaplasmid in Rhizobium meliloti. Mol. Gen. Genet., 1981, v. 184, N 2, p. 326-333.

157. Ruvkun G.B., Ausubel P.M. Interspecies homology of nitrogenase genes. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1980, v. 77, N 1, p. 191-195.

158. Ruvkun G.B., Sundaresan V., Ausubel P.M. Directed transposon Tn5 mutagenesis and complementation analysis of Rhizobium meliloti symbiotic nif genes. Cell, 1982, v. 29, N 2, p. 551553.

159. Scotnicki M.L., Rolf B.G. Interaction between the oxidative phosphorylation genes of Escherichia coli K-12 and the nitrogen fixation gene cluster of Klebsiella pneumoniae. Bio-chem. Biophys. Res. Communs, 1977, v. 75, N 3, p. 651-658.

160. Scotnicki M.L., Rolf B.G, Interaction between the nitrate respiratory system of Escherichia coli K-12 and nitrogen fixation genes of Klebsiella pneumoniae. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1977, v. 78, N 2, p. 726-733.

161. Scotnicki M.L., Rolf B.G. Interaction between the fumarate reductase system of Escherichia coli K-12 and nitrogen fixation genes of Klebsiella pneumoniae. J. Bacterid., 1978, v. 133, N 1, p. 415-417.

162. Shubert K.R., Evans H.J. Hydrogen evolution: a major factor affecting the efficiency of nitrogen fixation in nodulated symbionts. Proc. Hat. Acad. Sei. USA, 1976, v. 73, N 3, p. 1207-1211.

163. Schucin H.H., Avdienko I.D., Goldfarb D.M. Plasmid pEa566 from Erwinia aroidae. Plasmid, 1980, N 2, p. 228-230.

164. Shanmugam K.T., Morandi C. Amino acids as repressors of nit-rogenase biosynthesis in Klebsiella pneumoniae. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v. 437, N 2, p. 322-332.

165. Silver W.S., Centifanto G.M., Hiholas D.J.D. Hitrogen fixation by the leaf-nodule endophyte of Psyohotria bacteriophyta. -Hature, 1963, v. 199, H4675, p. 396-397.

166. Silver W.S. Biology and ecology of nitrogen fixation by symbiotic associations of non-leguminous plants. Proc. Roy. Soc. Bact., 1969, v. 172, H 2, p. 389-400.

167. Sistrom V/.R. Transfer of chromosomal genes mediated by plasmid R68.45 in Rhodopseudomonas sphaeroides. J. Bacteriol., 1977, v. 131, H 2, p. 526-530.

168. Skerman V.B.D., McGowan V., Sneath P.H.A, Approved lists of bacterial names. Int. J. Syst, Bacteriol., 1980, v. 30, N 2, p. 225-420.197* Smith B.E. The biochemistry of nitrogen fixation. In:1.otopes Biol. Dinitrogen Fixation. Vienna, 1977, p. 3-25.

169. Smith L.A., Hill S., Yates M.G. Inhibition by acetyleneof conventional hydrogenase in nitrogen fixing bacteria. -Nature, 1976, v. 262, N 5563, p. 203-210.

170. Sparks R.B., Lacy G.H. Purification and characterization of cryptic plasmids pLS1 and pLS2 from Erwinia chrysanthemi. Phytopathology, 1980, v. 70, N 5, p. 369-372.

171. Spitzbarth M., Puhler A., Heimann V/. Characterization of plasmid isolated from Rhizobium meliloti. Arch. Microbiol., 1979, v. 121, N 1, p. 1-7.

172. Stanley J., Dunican L.K. Intergeneric mobilization of Rhizobium nif genes to Agrobacterium and Klebsiella. Mol. Gen. Genet., 1979, v. 174, N 1, p. 211-220.

173. Stephan M., Pedrosa P.O., Dobereiner J. Physiological studies with Azospirillum Sp7. In: Associative N^ fixation/ Ed. P.B. Vose, A.P. Ruschel. Florida: CRC Press, 1982,p. 121-132.

174. Stewart W.D.P. Nitrogen fixation its current relevance and future potential. - Isr. J. Bot., 1983, v. 32, p. 5-44.

175. StJohn R.T., Shah V.K., Brill Y/.J. Regulation of nitroge-nase synthesis by oxygen in Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1974, v. 119, N 1, p. 266-269.

176. StJohn R.T., Jonston H.M., Seidman C., Garfinkel D., Gordon J.K., Shah V.K., Brill Y/.J. Biochemistry and genetics of Klebsiella pneumoniae mutant strains unable to fix Ng,

177. J. Bacterid., 1975, v. 121, N 3, p. 759-765.

178. Streicher S., Shanmugam K.T., Ausubell F., Morandi C., Goldberg R.B. Regulation of nitrogen fixation in Klebsiella pneumoniae. J. Bacteriol., 1974, v. 120, N 2, p. 815-821.

179. Sundaresan V., Ausubell P. Nucleotide sequence of rhe gene coding for nitrogenase iron protein from Klebsiella pneumoniae. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, N 6, p. 2808-2812.

180. Taboada J., Herrera T. Effecto de aminoácidos sobre la fijación de nitrogeno por Agrobacterium azotophilum. An. Inst. Biol. Univ. nac. auton. Méx. Ser. Biol. Exp., 1972, v. 43,1. N 1, p. 35-42.

181. Tortolero M., Santero E., Casadesus J. Plasmid transfer and mobilization of nif markers in Azotobacter vinelandii. -Microbiol. Lett., 1983, v. 22, N 85, p. 31-35.

182. Trinick M.J. Rhizobium symbiosis with a non-legume. In: Proc. 1st Int. Symp. Nitrogen Pixat. Washington: Pullman, 1976, p. 567-617.

183. Trinick M.J. Structure of nitrogen-fixing nodules formed by Rhizobium on roots of Parasponia andersonii Planch. Can. J. Microbiol., 1979, v. 25, N 5, p. 565-578.

184. Tubb R.S. Glutamine synthetase and ammonium regulation ofnitrogenase synthesis in Klebsiella. Nature, 1974, v.251, N 5475, p. 481-485.

185. Tubb R.S., Postgate J.R. Control of nitrogenase synthesis in Klebsiella pneumoniae. J. Gen. Microbiol., 1973, v.79, N 1, p. 103-117»

186. Valentine R.C. Genetic engineering for nitrogen fixation (NIP). In: Genetic engineering for nitrogen fixation / Ed. A. Hollaender. New York: Plenum Press, 1977, p. 495-512.

187. Van den Hondel C.A.M.J.J., Keegstra W., Borrias W.E., Van Arkel G.A. Homology of plasmids in strains of unicellular cyanobacteria. Plasmid, 1979, v. 2, N 3, p. 323-333.

188. Vaisanen 0., Bask L., Haahtela K., Salkinoja-Salonen M. Plas mid association of nitrogen-fixing genes in root-associated bacteria isolated from cold-climate forest grasses. Ins Conf. Metabolic plasmids of bacteria: Abstracts. Tallin, 1982, p. 221-222.

189. Walker C.C., Partridge C.D., Yates M.G. The effect of nutrient limitation on hydrogen production by nitrogenase in continuous cultures of Azotobacter chroococcum. J. Gen. Microbiol., 1981, v. 124, N 2, p. 317-327.

190. Watson B., Carrier T.C., Gordon M.P., Chilton M.D., Nester E.W. Plasmid required for virulence of Agrobacterium tume-faciens. J. Bacterid., 1975, v. 123, N 1, p. 255-264.

191. Willetts N.S., Crowther C., Holloway B.W. The insertion sequence IS21 of R68.45 and molecular basis for mobilization of the bacterial chromosome. Plasmid, 1981, v. 6, N 1,p. 31-52.

192. Zaenen J., van Zarebeke N., Teuchy H. Supercoiled circular DNA in crown-gall inducing Agrobacterium strains. J. Mol.

193. Biol., 1974, v. 86, N 1, p. 109-127.

194. Zhu J., Brill W.J. Temperature sensitivity of the regulation of nitrogenase synthesis by Klebsiella pneumoniae. J. Bacterid., 1981, v. 145, N 2, p. 1116-1118.

195. Zurkowski W. Molecular mechanism for loss of nodulation properties of Rhizobium trifolii. J. Bacteriol., 1982, v.150, N 3, p. 999-1007.

196. Yen H.C., Hu N.T., Marrs B.L. Characterization of the gene transfer agent made by an overproducer mutant of Rhodopseu-domonas capsulata. J. Mol. Biol., 1979, v. 131, N 2, p.157-168.

197. Yu Yeong-biau, Yang Shang Pa. Biosynthesis of wound ethylene. Plant Physiol., 1980, v. 66, N 2, p. 281-285.