Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ СПЕРМЫ ХРЯКОВ. ПОДВЕРГНУТЫХ ОДНОКРАТНО ГАММА-ОБЛУЧЕНИЮ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ СПЕРМЫ ХРЯКОВ. ПОДВЕРГНУТЫХ ОДНОКРАТНО ГАММА-ОБЛУЧЕНИЮ"

А-М 931

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НШНСЬ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ : ХЙЬОТНОЮДСТВА (ИСТ) ;

На правах рукописи НАКОНЕЧНАЯ•Елена Борисовна

УДК 6Э6. 4.062.454. 052 '

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПЩЮВ СПЕРМЫ ХРЯКОВ. ПОДВЕРГНУТЫХ ОДНОКРДТНЭ ГАММА- ОЕЛУЧЕКЙО

03,00.13 - физиология человека и животных ■

Аьторефера т диссертации аа соискание ученой степени кандидата . биолог иче СКИ7,, наук

ДУЕРОВИЦИ, Московская область

1991

Работа выполнена а отделе биотехнологии Всесоюзного научно-исследовательского института животноводства.

Научные руководители:

- доктор биологических наук, профессор |0. К. СМИРНОВ, 1

- доктор биологических наук Е а КОШШВ.

Официальные ОППОБеНТЬЕ

- доктор биологически! наук, профессор Ю. Л МДКСИЮВ,

- кандидат биологических наук А. Г. НДРИЖШП

Ведущее учреждение - £Ш разведения и генетики

сельсяохзэяйственных тавотных

Зашита состойся ■■*•_ - ШО&Л 1991г. а часов на заседании специализированного СоветаД.0ЕС.15.02 Всесоюзного научно-исследовательского института животноводства.

Адрес института 142012, Шсковская область., ШдольскиЙ раЯон. ДуСрввицы, ВИ21

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всесоюзного паучко-иссдедовательсного института животноводства.

Автореферат разослан 1991 г.

Ученый секретарь Специализированного совета* кандидат биологических, наук

И. И. ШМЫГИН

1.. СЕЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА' РАБОТЫ

1.1.' АКТУАШЮСТЬ РАБОТЫ.;,В связи с широким применением в сельском хозяйстве метода искусственного осеменения; позволяющего 'получать многократно увеличенной число потомков, роль самцов, в ¿«произведении животных Выходит на первый план» Вместе с тем, репродуктивная функция'производителей одна вэ самых., чувствительных ко всякого рода внешни«; воздействиям » особенно к облучению. Интенсивное развитие атомной промышленности, создание и' использование мощных электронных ускорителей, радиационных установок,

_ растущее производство радионуклидов и накопления радиоактивных -отходов обуславливают про'грессируиций рост суммарной' мощности . разнообразных.источников'ионизирухвдей радиации.' Такая ситуация особенно,усугубляется в экстремальных условиях, например,•при ' авариях и катастрофах на АЭС. Таким образом, возникает необходимость предвидеть■последствия воздействий радиации на животных и ■ в частности для воспроизводительной.функции хряков-производитеТ. лей, особенно для биологической' полноценности их' семяяродукции.

. Среди структур сперматозоидов, которые-первично подвергаются разрушающему действию радиации; особое-м?сто^занимают липиды. Перекисное окисление липидов (.ШЛ ) может , быть тестом, который Аифактеризует уровень патологических изменений в сперматозоида* -и соответственно их биологическую полноценность.

1.2. .ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. , В комплексных исследованиях выяс ■ нить последствия тотального гамма - облучения для воспроизводи- -тельной функции хряков пород.крупная белая и ландрас, а такжэ'пре дельно допустимые при этом дозы. в

; Задачи исследования: . . ■ .-

■1. Шяснить изменения окислительно-восстановительных.процессов в семени хряков под воздействием разных доз облучения. 2. Изучить влияние облучения на воспроизводительные'способности . хряков.. '■■■". '*. ■ ..

3., Исследовать влияние облучения на качество приплода.'-,

1.3. НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые выявлены отклонения в процессе" пе-рекисного окисления липидов, под влиянием разных доз гамма-обдуче вия на протяжении 1 года, в значительной мере харакгеризухше Сио

-логическую полноценность сперматозоидов.-Установлены последствия-от разных доэ облучения для воспроизводительной функции хряков. ,'

ЦЕНТРАЛЬНАЯ .

Ручная библиотека »«оси- сапьсксхоз. академии I

• - 2 -

1.4. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Полученные данные позволяют предвидеть нарушения и сроки восстановления воспроизводительной функции хряков воя влиянием гамма-облучения и планировать возможность использования животных. ■ . . *

1.5. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.. Результаты исследований доложены на 42-й, . 43-й научно-методической конференции аспирантов и молодых ученых по теме>» ~ Проблемы интенсификации животноводства "( 1989, 1990, ДуОровицы); IX Всесоюзной научно-практической конференции молодых: ученых и специалистов." Резервы увеличения производства сельскохозяйственной продукции ",( Оренбург, 1990г.); з-ей Всесо-опзной конференции по сельскохозяйственной радиологии, ( Обнинск, 1990); Бсееоюзном,совещании ** Проблемы развития Биотехнологии в животноводстве ".С 9-10 октября 1990 г.); 1-ой Республиканской научной конференции " Биотехнологические достижения и перспективы их развития" .( Львов, .1990). • ....

,, По результатам исследований опублико^'^р 4 -научные работы.

1.6. ОБЪЕМ РАБОТН Т^ссертация изложена Ка145 страницах машинописного текста,- в том числе 34 таблицы и 48 рисунков. Она состоит из введения, обзора литературы.' разделов: материалы и методы, результаты исследований,, обсуждение, выводу,, практические предложения « приложения.. Список литературы включает 143 источника отечественных и ЗВ зарубежных. авторов.

^ л . *

- г. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ' "

Исследования выполнены на свиноводческой ферме экспериментального хозяйства ЕИЖа ** Кленово- Чегодаево ** и в отделе биотехнологии ШЖа в период 1937-1990 гг. по схеме на рис. 1» Работа проводилась с хряками пород крупная белая, и ландрас по 26 голов соответственно. Отбор.и подготовка опытных групп животных осуществлялись из.хрячков 3-ех месячного возраста. Животные-находились одинаковых.условиях кормления, ухода и содержания. Получали -гсгабдоерм, сбалансированный:по всем питательным веиествам в соответствии с детализированными нормами. Окончательна контрольная и 4 опытных-группы били сформированы из хрячков 8-ми месячного возраста, аналогов по. породе., происхождению и жичой массе.

. • - з - •;■'-

ПОДГОТОВИТЕЛЬНЫЙ ПЕРИОД .

Хрнки 3-ех недельного возраста пород

Крупной белой • * 1 ' Ландрас

. ЭКСПЕРИМЕНТ АЛЬНЫЯ ПЕРИОД '

.Хряки 12-ти месячного возраста пород

Крупной белой Ланлрас

26 животных 1 - 26 животных

1 Гр. 2 Гр. 3 Гр. 4гр. ¿гр.

О Р 4 хр. 100 Р 4 хр. 200 Р 5 хр. 300 Р 6 хр. .400 Р 7 Хр.

І

Ежемесячные биохимические исследования в-течение б-ти месяцев после облучения

Убой части животных спустя 6,месяцев после облучения. Продолжение работы с оставшимися жйвотныуи.:; Проведение, биохимических-исследования, через 9 и 12 месяцев ' посіє облучения каддого животного ' '

■ I

) Крупная белая порода [

1гр. £гр. Згр. 4гр. Ьгр; -

0 Р Зхр. 100 Р Зхр. 200 Р Зхр. 300 Р 4хр. 400 Р 4хр.

Т

I Порода ландрас I . --

1гр. 2 гр. Згр. 4гр. 5гр

0 Р ■ Зхр.1 100 Р Зхр. 200 Р 4хр. 300 Р 4хр. 400? Ахр.

Т

Убой-всех оставшихся животных, спустя 12 месяцев ___после облучения ■ ■■ . ■

Рис. і Схема опыта .

В возрасте одного года хряки были подвергнуты внешнему однократ-нону гаммз-облученкю при мощности. дозы 1О0 Р/ч, источник цезий -■ 137 во Ш35ИСехьскохозяйетьенной радиологии, по методике этого . ' института,' Дозы облучения были выбраны исходя из развой степени :'лучевой.болезни: легкой, средней, и тяжелой. Взятие зякудятов для исследоззетга производиди в последнюю недели перед облучением -;(исходный 'уровень), первые полгода после облучения ежемесячно, : а газ«» - в 9 и 12 месяцев.

.-'/.' Для оценки биологической полноценности семени интактных и . облучвииш хряков проводили осеменение основных свиноматок тремя ивсггнымяшродыландрася двумя - крупной белой породи. Оеменем одного хрзка осеменяди ло три свиноматки. Учитывали результаты по опоросам/многоплодию и качёству потомков. . Осеменение проводили три -раза: через 2, 6 и 12 і^ісяцєв. после облучения.

' Условия содержания, кормления cynopofíftot свиноматок соот- . ветствовали оСпргттаятым зоотехническим и : ветеринарным нормам.

:.■■'■ Динамику изменения окислительных и зосстаяовгсгельных процессов в дидидах сперматозоидовопределяли как показано на рис. 2 го следтицим гоказатёлям: в сушарных липидах концентрацию ВДА ( дафовые основании и. продукты, реагирующие с ' тиобарбитуровой кислотой ); к .Стальной IL Д. 1 Гурашвили Т. Г. (1977) .скорость пероксадашв — по разниц» коваентрациивобразцах. подвергнутых часовой инї^бааии при t-37*C и без нее по Левицкому A.IL и др. (1987);в нейтральных липидах - концентрации первичных перекисей ( диеновых коньюгатов) по Ноеухину А. В.. .. Ашетовой Б. С. (1887), вторичных перекисей ( : триеновых кояьагатов) по Косухину • а. В. и др. (1987). по сумме нейтральных'липидов по Бабижаеву Н А., Дееву а. и. ( Î987) ; концентрации редуцирупцих Сахаров по Судакову H.A. и#др.,( 1975),аскорбиновой кисжггы поДебедеву &Т.". и др, SH-соединений по Рыжкову В.А. ¿Сабировой ДМ. (1379).

. '..' • • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1; 0киовительно-восстановительные процессы в сперматозоидах

шЛакгных и облученных хряков. " .

С селью"оненки непосредственного,влияния гамма-облучения на сперматозоиды хряков мы определяли "фоновые,*анач011ия. показа-,

- б - .■■-.•■' - ■ ■. ■:;;,.■■.

те лей в норме. Для этого отобрали эякулята от всех 52 хряков до . облучения ( т. е. "О" -точгл) и далее/отборы по методике, по уже от хряков только контрольной группы. Выяснив "фон^в течение года и наложив его на графики показателей от;хряков опытных групп.-мы. тем самым отсекли сезонные, индивидуальные и другие различия, что позволите вам учитывать отклонения вызванные облучением.

Рис. 2. Схема исследований. ;

3.1,1. Субстраты и продукты,.характеризуквде ГОЛ

Результат« влияния облучения на перекисные процессы в сперматозоидах представлены нэ графиках, гюстсроенныхпо каздой группе животных определенной породы. , - ■■■-■■'

■;. 1ШЮШБЫЙ ДИАЛЬЯЕГИД (ЫДА) Диапазон концентраций МДА, полученных в течение года в

; / ■ ' > „■ - б - :■; у /"; ■■■■'■,

сперматозоидах необяученных хряков, лежит в пределах 0,040-0,118 мг! 7 животных юроды крупной белой я О,tM5-0,110 wrZ - порода лаядрас. • >'_ /

■ "'Волнообразный характер изменения ЦДЛ во времгни отчетливо проявляется во всех случаях < рис.3 ). Минимумы всегда остаются в области фоновых значений концентраций. В отличие от этого все максимумы, Кромеыаксикума кривой дляхряков породы лаадрас при дозе 100 Р, достоверно превыпвюг границу: фоновых концентрат дай ВДА, К 0,001. Число таких максимумов н их величины растут с увеличением дозы облучения ливотню! При этой первый максимум кривых, относяшаса к животным крупной белой порода, смеЕэется В сторону ранних сроков при величинах доз 300 и 400 Р и фикси- / руется на 1-ом месяце после облучении. В остальных случаях он приходится на второй месяц.' Второй и третий'маусимумы появляются синхронно у обеих пород животных, а именно на 4-ом я 9-ом месяцах соответственно. причем третий максинум обнаруживается только при дозах 4u0 Р. . . v

'--.' 'Вреш пострадиационного восстановления окислительного процесса зависит от'величины дозы облучения и ве зависит от'породы животных,\ исключая вариант 100 F при облучении хряков крупной ■ .белой сорода < концентрации «ДА не выходят за пределы' норад ).

^ Увеличение концентрации МИД в спермах от величины дозы показана, на 4-ый месяц после облучения. хряков в виде графиков, приведенных, на рис.- 4.

■ ■ "О; Зависимость концентрации ЦДА от дозы на 4-ый "месяц, после облучения тюю Кфаэитъследуюцими уравнениями:

.•'•• > УС-а Об+ЯбХ; ■' .V --'.■.'-

. Ул-ао4*ках. ,V-V : ,-Y ''V

где У концентрация U3A, мгХ , ■ "

И,йг~угловы6^ж по-

род зфулвая белая и хандрас,

.Та- величина дозы, Р. *■: '. ■

Следовательно, с увеличением дозы растет интенсивность не- . рбкиского,;окислеяия. Как и в. других случаях видно, что уровень / процессов'ШД у обличенных хряков породы ландрас, выше, чем у : гракоъ крупной белой породы.

нг/.

ом

01

01«

1

А\ • А

13 ' ш$е ойиш^ —-1

' . 3 'мен, Ъо^о&шчтя, * ■Ч "Л -+-6 *7

Ряо, 8. йэшвввив конце вгрвции ИДА у жививьи пород: а) крулввя б) лэв-

дото. Зсловвыв осозвачвнвя: 1-конгролъ-0 Р, 2-довв 100 Р.З-дозв £00 Р,4-довв 300 Р» 5-дозв 400 Р, 6-иивимвльноа фоновое зввчта* ?-Н8ХСИишвов фоновое

8 ВЗ 49 ВИЗ* '

' неслось сИошения* ' 3 5 '«С Ьше

—| -*-! -»-4 ' -+-5 —( -•-» -»-•

Ряо. 5. Изкаввниа скорости пароксидщии у жввоюых пород: в] кр^ввая <*шя( б) лавдрвс.Уоловвыа обозавчевня те м, что ж рио, 3.

I

1

—1 -1-ї

Том,?

Рво'. *. Намнеш ковмкрецаи НіЦ s tniWIIMi n H8 4 MQflga посів овщчааіЯі I) породе кругам Сэ-ия, 2) породе жвидрао.

авчніа мршмй г »вмоиовн « доги as г ивояча now* оЛіучвввщ I) nor ■роде одпввя Свлвп, 2) породе даадрео.

- 9 - . - '

СКОРОСТЬ ПЕРОКСШШ1И ■ ■ >

Скорость пероксидаши, определяемая как изменение концентрации МДА после часа инкубации образца сперматозоидов.при 37 С. (исходная температура - комнатная); показана в виде графиков на рис. 5. \ .

ООласти:»онсвых концентраций для хряков породы крупной белой и ландрас составляю величины 0,008 - 0.12 и 0.02 - 0.17 мгХ, соответственно.' Динамические кривые, описывающие скорость перок- -сидацки при разных дозах облучения, пшют волнообразный характер. Эти кривые не пересекают нижний уровень диапазона фоновых ; концентраций. Пики достоверно (Р< 0,05) отличаются от фоновых . - значений.

Анализ приведенных данных показывает, что скорость перокси-дации.зависит от дозы облучения. Увеличивается также и время нормализации процесса образования МДА. При дозах 100 и 200 Р это время составляет приблизительно 6-7 мес., а при догах 200 и 400 Р - 9 - 10 мес.

. ЛИЕНОВЫЕ КОНЫСГАТЫ (ПЕРВИЧНЫЕ ПЕРЕКИСИ) ЛШВДОВ Динамика концентрации первичных перекисей липидов в сперматозоидах облученных хряков'представлена в виде графиков зависимости концентрации от пострадиационного периодах рис.6 ). Видно, что во всех случаях наблгадается волнообразный ход кривых. Такая немонотонность наиболее слабо выражена У хряков контроль- .. ной группы. В этом случае содержание первичных перекисей в течение наблюдаемого времени колеблется в пределах 0,25 - 0,32 иг! у породы ландрас и 0,23 - 0,28 ыгХ - у породы крупная белая.' На. »том же уровне находится содержание определяемых веществ у жи- ■ вотных всех опытных групп до облучения, а также спустя год после облучения. В промежутках межщгдвумя, крайними точками.( О и 12 мес. ) характер кривых неодинаков. Амплитуды растут с увеличением доз облучения (рс.0,05). При повышении доз облучения ( 300 и 400 Р) имеет место смещение максимумов в более ранние сроки после облучения, а также увеличение количества экстремумов. Так у животных породы крупная бэлая вместо двух появляется три пика. Однако у животных породы ландрас1. при дозах облучения 300-400 Р.:.■ минимум между двумя пиками Еыше уровня верхнего предела фоновой величины соответствующих ъёиу>с7в. Это позволяет считать, что по-

■ I —t -»-4 —i -*-t - s -* і г

; too. S* Уізктш ягсцшраця ю^пщ варвю«! у от в от и ых пород: в) вкггавя 6ax8nf 3) «видрво. Ісаюявд сбвтчпя te sí, что и ряо'. З.

. ; Feo* 3 . йзusвавин коаодвіра ешз егоречашс глрзкисвй ; гввганшс породі , о) агапввв балея, б) лав^рво. їсяозегш сбоавзчзшя te ta, чїо в ряс. 3«

- и - ' ■ .V";

ютезныЯ характер продасссв образования первичных перекисей про- . исходят £ пределах от 1 до и мес-.- после :облучения животных/.

. Зависимость концентрации первичных перекисей от дозы (рис, 7) на 2-м месяш после облучения меняю ■ выразить сдедухтеими уравнениями: ■ . л ■

Уб-о. ':'. ";'

ул-аге+ках,.-где У - концентрация первичных перекисей,', мгг; :

, йб.Кп - угловые коэффициенты^ соответственно для пород крупная белая и ландрас; ■ ■ " • X - величина дозы, Р.

Разные величины коэффициентов Кб и Кл, видимо, указывают на.; породдые различия» процессе образования превичных перекисей. . , , ' ТРИЕНОВЫЕ КОНЬКГАТЫ С ВТОРИЧНЫЕ ПЕРЕКИСИ) .

Диапазон колебаний концентраций вторичных перекисей в сперматозоидах необлученных животных изменялся в течение года'в пределах от 0,0097 - 0,047 единиц ооптической плотности у ПОРОДЫ крупная белая и от 0,013 до 0,055 у породы ландрас ( рис.8 ).В этом диапазоне укладываются величины концентраций вторичных перекисей в течение года после облучения животных в дозах 100,. 200 и 300 Р (см. рис. 8 ). Однако при дозе 400 Р наблюдается достоверное ( Р< 0,05 ) превышение верхних пределов фоновых величин у хряков породы крупная белая на 3-Я, 4,5-5,5 мес., а у хряков -ландрас - на £-3 мес. и 5,5-7,5 мес. Анализ-представленных данных показывает, что более глубокие-процессы образования вторим-'. еых перекисей имеют место у хряков породы ландрас.. Однако у. них время "нормализации" данных процессов.наступает быстрее, чем у хряков породы крупная белая. ■ ; — .

■ суммарные нейтральные липиды .'.;'';,. 1" Диапазон фоновых' величин концентраций составляет для хряков пород крупной бедой я ландрас 0,20 - 0,41 и 0,22 - 0,43 ед. оптической плотности, соответственно. КриБые, относящиеся к животным породы крупной белой, во всех'случаях, т. е. как после облучения, так и у контрольных хряков, лежат в пределах фоновых концентраций. Аналогичное положение занимают кривые,дописывающие содержание липидов у хряков порода ландрас. .Однако в этом случае имеет место превышение рассматриваемых величин только у животных

Pee* 9. Иаюваш bobадигреш cjiiuapata нватршшл аіпідов у нвивнх пород: э) крупная Салвя, о) ламфво. їсяоваїя ейоанвчэвшмв se, «о в poo. 8.

. д

; .. . \ / >0\ V \

» • — • • * •• • - ■ :.-■ 1 ■'■""'.'- .....■ Т' 1 '

* * ' W/iíwe аЬтнйл -i -«-* —I./M —S -Л -*-Т

Pee» JO. Изюяаод кошийтревди ....., . -......„

• Сшя» Ó) леадрас. Условные ойозввчввяя се ха, что и pao. 8.

t і -< -i -совшвивйу іявивнх пород: а) крупная

м M

I

- 13 - ..... . .

облученных в доз$ -400 р (рис. 9>, Соответствухшя кривая имеет 'г максимума ( 0.05} на 3-ем л в-ом месяцах.

Приведенные данные позволяют .предположить, что изменения в . липидном обмене облученных хряков йсследусшх пород;в'пострадиа* .ционный период неодинаковы.'Более чувствительна хряки породы * ландрас. На это указывают,. не только максимума, превшая©*«1'Sep* хние фоновые величины концентрация при гоэе 400 но й то,.что все кривые, описывашпе животных порода ландрас,'.лежат существенно выэе таковых, представленных, для хряков породы крупная белая. ■ : _ ."." . ■ . ' ,.'.■■.' ■ ' _ ' " - НЕНАОЬгЗЕННЫЕ КШШ ККСЛОТЫ '' Изучение изменений концентрации жирных кислот ъ сперматозоидах контрольных и облученных хряков породы ланлрас а дозах 200 и. 400 Р показывает, что в пробах сперматозоидов присутствуют, три насыщенные кислоты: С14;О, С16:0 и С16:0 и семь ненасшеншх..." жирных,кислот: С1& 1,. С18.-2, 020:3, С£2:4,, С£2; 8,: С22!6.

Шкасыщенкые кислоты обладают повышенной уявйимоетыа для ионкзируодего излучения, поэтому нами анализировался именно их спектр. ■ "

В результате проведенных исследований," (табл. 1), выяснили, vfo качественный состав НИК сохраняется постоянным. Однако, изменяется концентрация кислот во времени', происходит их перераспределение. Причем характер этих изменений одинаков как при левах 200 Р,; так и при 400 Р. ■ С 1-го по 4-й месяцы после облучения происходит регкое увеличение конурнтрации КНК. , ".

особенно это хорош, видно у долине настенных кислот С22:4, С22: 5 и С22: 6. Кислоты С18:1, С18*. 2 и С20:3 в этом отношении занимают промежуточное, положение, Возврат^ концентрации НЩЯ к'урос-пю нормы зависит от дозы облучения: при 200 F- это происходит ■ через 6 мес. , а при дозе 400 Р лишь к 12 мес.

3.1.2. ВОССТАНОВИТЕЛИ. УЧАСТВУЙТЕ В ПЕРЕКИСНЫХ ПРОЦЕССАХ Явления перекисного окисления лкпидов обычно сопряжены С резервом различных антиоксидантов. В связи с этим мы проанализировали также влияние облучения животных на динамику отдельных восстановителей в.пострадиационный период. - ',:'■.,-".■

í .'■ л•.• . 7. V ;7\. ' ' ТлОлкца 1 ■

• '. г - ; • ' ^ ; ' Действии» гамма-{чдаэдии на южцёитрадию.Ш в саермятоаоидах. :

; • : ; /... . ' • • КоїіЦ-їнтрзда НКК в сперматозоидах ( % )••"•' /'V--. 3 .1'- ,37.:-

pire ч7-у - -У ■;.'-'-V у'-л-У'" : v.. Уу-'-'-- "

}.v¡a- Контроль О öiea roo Р - ' " . ■ . . 400 Р :7-'

tí тече- В уече- /Периоды после облучения ( мес.) - ' В тече-., Леркоди после облучения" ( мес. ) ниє года : mft гояд: -','■ "у; ' " ■'■.'•■ ;' :■;' -"у-у\ - ' ■■ • иие' госи '

12

у. 7у7;7у-:У:; я 7 о у.77 -9 ■.. 0,6 б ; . g

Сів-л 5,9Ц,</ 9,7il,£,14,3il,8' 10,9il,0f 7,9 ' .: 6,0+іУ 3,212,6 R,Sl2,4 tl,9t4,9# 8,6+1,0* 7,/¿l,і M8:2 2,010,4' l,7t0,7' O,0iO,4 ■ 0,3i0;£' 2,7i0,l 2,9it,2? . 2,-in,7. 2,7l0,7 2,2+0,8 2,6+0,5 2,2+0,; »20:3 1,2і0,4 0;7Ю,3 0,3i0,2 0,4i0.2 1,0+0,3 ' 1,1+0,tí .1,7+0,0 Z,0i0,4*. 0,7і0,5 ;. Mi0,4 1.2*0,6 Ï20-.A І.біО.5* 1,4+0,5 .1,0і0,4 0,7Ю,3 2,3+0,2 ■ l,Cií),8 1,7+0,5 ; ' 2,ЗіО.б 1,0і0,6: 2,310,4 1,1+;0,£ CS2Í4 'v.2,710,5* 1,Оі0.Б''0,3+0,2f 0,610,2' 1,3+0,2* І,7±0,9^''0,5і0,я j следи' следи І.С±0,б' „1,010,4*

aSíS 17,5*2, Iі 11,812,6 -'6.311.1* 7,311, і' 16,9+2,8* 1б,6і4Д* lí»9¿2,7 ; 13,8l3,2#.-8,Si3tCÍ í3,8l2,i* IS,ltf.i*

С226 29,013,2*1?,714,4* 12,0±С,if 11,712,?/ 23,5+0,3* 23,610.2* 19,5>і5,7' 1б,0±5,3* 16,9+5,9* 16,1±3,'іг 25,9tfM

# -достоверно'с F<0,05 ; ' .' Г ■ З 7 -7 • . v '''. ■■'■■ 3.,; ;у7.-

. 7 ¡7 7. " V."-- 3;y. - ' ■■ ■■■.■■ y" '73'. -/Л'ЗЗ V-'.' ■-■■' "'■'■' - .'■' 3-.v 37 37' 7. *

- IS -

СУЛЬаГКЕРИЛЬШЕ СОЕДИНЕНИЯ Диапазон фоновых концентраций SK-соединений составляет для хряков пород крупной бедой и-ландрас IS,0-32,0 и 13,6-24,7 игХ соответственно (рис. lib У хряков1 крутой б^лой породы превышения . верхнего уровня фоновых концентраций Ьыгс только при дозе 400 а минимумы об аруживались при дозах 100, 200 и 300 Р. Причем время их появления увеличивается с ростом пострадиационного периода (2,5: 6,5 и 9,5 мес.). . ..-..„■.'

У хряков породы ландрас превышение верхнего уровня Сока имеет место при всех доээх облучения, Приэто'м видна тенденция его роста с увеличением доза Обнаруживается и 2-й максимум, ■■■ приходящийся, видимо, на 12-й месяц.';. Минимум обнаруживается только при дозах облучения 100 и 200 Р.

Все эти данные позволяют утверждать, что интенсивность синтеза сульфгидрильных соединений-в ответ на облучение.животных-пород ландрас и крупной , белой, не. одинакова. У хряков породы лан- , драс эта способность выше и растет с увеличением дозы бблучея-, ия, причем независимо от дозы ", нормализация" : не достиґа- . ^ етсй даже к концу года после облучения. Пониженна.концентрации _ <-; ^ьфгилрильных соединений ( ниже фоновой нормы) обнаружено при -. дозах 100, 200 и 300 .Р у хряков породы, крупная белая.', У хряков ; породы ландрас этот недостаток обнаружен■только при дозах 100 и . 200 Р ( Р <0,05).. Іїричем.его количественный уровень ниже; чем у ■ хряков породы крупная белая.. При дозах 300 и 400 Р недостатка -зтих соединений не обнаружено.; Ви&шо'в данном случае включаются соответствующие регуляториие механизмы синтеза сульфгид-рилёных соединений.- '■'■■ :-'.,' , • . - . - "

РЕДШРУПКЕ САХАРА V . : -

В соответствии с опытными данными, .полученными для иеобду-... . ;ченных животных опытных групп и хряков контрольной ■ группы,вели-, чины фоновых концентраций редуцирующих Сахаров в сперматозоидах' .составляют, для породы крупная белая -62,0-155,0 и ландрас - ■ ;'100-145 мгЗЕ (рисЛО ). 'Диапазон разброса величин определяемых ве-

v:- 16 - ■ ■

.даств в спермих хряков порода ландрас более вирок, чек у хряков породы крупная белая. На некоторых участках кривые достоверно Р<0,05) выходят за пределы верхней фонолой концентрации (145 мгХ) - Анализ данных показывает, что смешение' концентраций сахара -в.семени за пределы фона»:после облучения дозой 200 Р происходит , вскоре воздействия. Появление второго пика характерно при дозах 300 и 400 Р. Наблюдается тенденция увеличения штопали пиков с росток доз облучения. Время "нориализгчми" содержания ре-дуюФУтаих сахаров также зависит от величины дозы и происходи? в ■ период от 0 до 12 МЄС. :

."''"' ; аскорбиновая кислота

Диапазон фоновыхконцентраций аскорбиновой^кислоты, содерш-: врйся в сперматозоидах хряков:породы ландрас и іфупной белой, . составляет 7,0-14,0 мгХ и 6,0-13,0 мгх соответственно. В течение всего месячного- гострадиащокнного периода превышение верхнего уровня фоновых концентраций не наблюдалось ( рис.12 >. Наобо рот, имеет место достоверное ( Р<0,05) снижение концентрации. Бремт обнаружения минимумов динамических криюгх, соответствую®« максимальному недостатку аскорбиновой кислоты, приходится на . 1-» я г1» маг-щй после облучения в дозах 100 и 200 Р и дополнительно на ^й - при дозах 300 и 400 Р.

а2. ВЛИЯНИЕ ГАШЙ-ИЗЛУЧЕНИЯ НА ВОСШШЗЭОДЙТЕЛЬЯГО ФУНКЦИЮ .

.хряков \

. Ясмечной оценкой качества'сперш является ее оплодотворяет : пея способность и передача наследственных признаков.. В связи с этим ш изучал»:воспроизводительные качества хряков.в разные сроки после облуч'ения - через 2, б и 12 мес. Результаты этого эксперимента приведены в табд- 2v

- Яанное тайхнцы 2 покаэыващ. • что результаты осеменения сви-нома&£к хряками крупной белой породы, :были вида и стабильнее, чем от семени ландрасов. Это наблюдали на всех этапах осеменения. По результатам 1-го и Г го осеменения можно сделать вывод, что имезт'мссто тенденция к уменьшению процента супоросности у •; свиноматок, осемененных хряками зероды ландрас в зависимости от ■ величины, дозы,- Однако,-через год этот показатель выравнивается .

рио. ІІ. Лгмвввеие ксшшірвция рвдуцщшіх csxspos J xisoittux аоролі. ' s) кдгпвея белея, б) ландрас. їлознш ооозав«ивия te », «о в pao, 8.

Ряс* іг. Изипввя» ковцаагршв аокорбановоя вісіяи у іввивісс пород:, я) кипвея белея, ö) двндрво. їсловшм ооознвчввяя хе se, wo a pao* S.

Таблица 2

Действие гамма-облучения хряков на результы осеменения: .... свиноматок

Порода * Период от Доза,' Осемене- . Из них опоросилось

хряков¿ облучения но маток-

..; до - осеш- ■ / число X X по ■ отноше-

нения, (иес.) НИИ к конт-

ролю.

0. 9 5 ■ее. 100

л • 2 ■ 200 9 4 " 44; 60

А 400 - . - 9 ' > 33 60

Н

Л. 0 ' 9 " 6 67 100

р. б 200 9 . 5 56 83

А Л • ' - 11 - ■ : ■ ' - 400 9 44 67

U о.; 9 5 56 100 ■

12 200 . 9 4 44 80 '

400 9 4- 44 80 ■

к .0 б 4' 67 100

р: 2 200. ■".. 6 4 . 67 100

' 400 ■ -' 6 4 67 100

. ". - * 0 е .' 4; . 67 100

Б 200 .. б 4. ' 67 100

Б' б 3 50 - 72

- л : * ■

А . -о; б і . 67 100

■Я., '■■•¿ос 6 4' 67 100

■ к(С> б 4 67 : 100

для групп облученных животных и равен 801 - по отношении к конт-

рало. В тоже;врем» достоверных'различий между группами свинома-

ток. покрытых облученными С в дозах £00 Р и 400 Р) хряками круп-

, ■ ; ' - is - ■■:"■ ■ /■.,•-

ной белой породы не было обнаружено (Р<0,05).

В опьгге зарегистрировали'единичные случал рождения мертвых ■ поросят, что было характерно!для животных обеих пород. Количество не превышало естественный уровень, наблюдаемый в различных-стадах, Р< 0,05. '■

. \ Полученгче данные достоверно доказывает, что облучение хря-;ков отрицательно влияет на многоплодие свиноматок ( табл.3 ). ' ; ^ степень этого влияния зависит как от породы хряков, которыми • покрывали^свиноматок, так и от времени-с момента облучения. Однако через 12 мес. после.облучения , то есть в 3-ем осеменении. >' влияние радиации на многоплодие устраняется, статистически достоверные различия мееду группами контрольной и экспериментальны-; ми отсутствуют, :Р< 0,05.'Ї, Необходимо отметить, что имеют место породные различия по данному показателю в зависимости от величины дозы и срока после облучения хряков.

Изучая распределение потомков, у облученных и контрольных .. хряков обеих, пород, мы не.смогли.установить влияние гамма-излу- ■: чения на соотношения полов потомства, ( табл.' 4,5),' Поэтому счита ем,' что. радиация не оказывает влияние на пол потомков. . '■;

Вместе с исследованием воздействия на многоплодие представ- ' ляет интерес анализ развития потомков в э мбриональныя пе рио д от -облученных хряков. . т :

; это развитие оценивали по данным нивой массы поросят от об--лученных хряков при рождении, табл. 6. Из анализа их видно, что гамма-обучение хряков в дозах 20CPF и 400 Р не'оказывает отрииа- -тельного влияния на живую массу новорожденных поросят. Таким об- -раьом,' поросята развивались нормально. Огнано,'в некоторых слу-'-чаях увеличение,живой массы поросят от облученных хряков обуй- • ловденно тем, что.у свиней снижение ьтоголлодия сопровождается , повышением массы тела при рождении. Эхо наглядно видно во всех. * опоросах. '.';■;■■..'

В. результате- проведенных исследований установили,' что обду- :' чение хряков в дозах 200 и 400 Р отрицательно влияет на воспро-игвсдительные качества животных. Это в первую очередь сказывается на опдодотворяемости свино«аток. заяем на свияекии многопдо- : дия, - Однако, уменьшение данных показателей зависело от породы . хряков и срока после облучения. Через год после воздействия на „'■-."

таблица 3

Действие гамма-облучения хряков на мвогопло-:, дие свиноматок, осемененных ихсеменем

Парода хряков

Период .от ■ облучения■ до осеме- : нения (мвс.)

Дэза, Р

Многоплодие;

■ всего

живых

л . 0 11,0+0,6 ■ 11,0+0,6

А - 2 ■ .■.■■ :Е00 8,6+0,7/. 8,8+0,7#

н ■ 400 8.7+0,7> 8,3+0,8Д

Д " ■'.'.' - -

Р :. ../.,■ 0 . 10,8+0,4' " .' 10,7+0,'6

А -.V; ' 6 200 9,¿1,5". 9,2+1,2

с ■■; ,400 ..; ■ 8,3+0, /7,511,1-*

0 11,8+0*8 ; 11.8+0,8

■'-' ¿2 . 200 .: 10,5+1.1 10,3+0,9

."-'■"'■г'- 400 10,5+0,9 10,311,1.

К : о ■■■ 11,0+0,4 11,0+0,4

Р. ... 2 _ . 200 10,5+1,2 10,0+0,6

.400.' 10,0+0,7 9,310,

О 10,8+0,9 ■ 10,3+1,1

В ■': 6 . ... 200 10,0+1,9 '. 9,3+0.8

' Е 400 " 10,7+1.3 10,310,6

л .' л ;...., : ■'.;. ■'■ -.", "■.■ '

'."-..■ ■ а'-" - о ; 11.8+0,6 ' - ■"' 11,8+о,б

■ ■ Я ."■ ; ; 12 : 20и ■ 10,8+0,9 - / 10,5+0,6

: , . - ■ 400 • 11,0+0,8" 10,8+0,4 в - достоверно с Р< 0,05

Таблица 4

Распределение поросят по полу, полученных от семени облу-■ ченных и контрольных хряков породы дандрас

'Родилось поросят

Период от

; Лоза,

- . хрячков

свинок

до осеме- ■■ р живых мертвых всего■ . ЖИВЫХ мертвых всего

нения, (мес.)

чис . чис ./";'.

г 2 ло X ■ X : ■X 'ло г ■ .

о ■ 47 0 £6 47' КЗ 0 29 53 .

200 60 0 -Г 21 60 40 ' /0- 14 40 .

400 50 ■ -' 4 14 54 ■■ 46 * 0 12 46.

0 53 ; 2 :.:'■''. 36 55 45 0 •29 45 ■

, б;. 200 39 2 20 41 55 - 4 ' 29 59

40С , 52 ■: 0 '. ^ 17.52; 41 ■ 8 16 49

0 .43 0 25 43 57 \ у ;о ■33 Е7 : ■

12 . 200 V 69 2 30 71 29 ■ 0 12 29

400' ' - v 57 : о 24 57 40 . .3 18 43 '

_.\7 ."■', ""-*■■ '..■■-- Таблица 5 .. ..;. .

Распределение поросят по поду, полученных от. семени облу-. . чеяшлс и контрольных; хряков крупной белой породы

.■ - ■' ■. " ■ , Кчоигась поросят1 .

ШрВОД ОТ" ■'...■• • хрячков ■. V свинок

облучения~ ■: Доза, ' • " " "■ " -■-....•■

- до* осеме- -■ р ■■' живых мертвых' всего ■ЖИВЫХ мертвых всего

вевиэ, (иес.) :■ /■-■'" ' - • ' - '_• • ' • "

чис до X V - I" чис ло X

+ ■ *

0 41 .'".' . 0 18 59". . 0 26.59

200 . 60 2 26 62 . , 36 ■. . 2 ..' 16 38

400 ' ■ • 5 ,20 '50. . ." 47 3. "20 50

0 81 / 5 37 > 86 14: ' 0 6 14

200 . .46' г 13 48; 48 ' 5„' 21 53

400 , бб. о : 19 59' ; 42..". :: 0 13 42

0 -. 72 0 •ч 3* 72 , 28 " , 0 ■ 13 28

200 - 59 ' 2 26 61.'.-- 40. "о 17 40

400 : : ■лет'' -: г ' 26 61 : ■41 ' 0 , : 18 41.

хряк^ Залицо восстановление воспроизводительных-функций, что подтверждается данными по осемвкению и многоплодию.

' ВЫВ ОДЫ

Воздействие гамма-облучения в дозах 100-400 Р на хряков шрод «фупная бедзг и ландрэс отрицательно влияет на их воспро-

Таблица б -Живая масса тела-поросят при рождении от облученных.хряков '.'.■".. породы ландрас"

Порода Период от хряков облучения до осеменения (мес.)

Доза, ■п Р

хрячки

масса тела, г

. свинки ,

масса тела, т

Л А Н.

д р

А С

о 200 400

26 21 14

О 35 200 20 400 . 17

1310+50 1400+40 1650+40

1450+40 1500+50 1580+40

29 1300+40 .14: - 1550+50 12 1600+40

29 29 16

1400+40 1400+50 1550+30

12

О 25 200 30 400 24

1350+50 1430+60 1400+30

33 12 18

1300+40 1500+50 1510+40

К Р.

О 200 400

18 26 20

1350+40 :1400+50 1480+40

26 16 20

1300+40 1450+50 1400+50

Б £ Л А Я

6

О 200 400

37 19 19

О 34 200 26 400 26

1300+50 1600+60 1500+40

1500+60'.

1450+50

1480+50

. 6 21 13

13 17 18.

13302.40 1500+50 1650+40

1400+50 1410+60 1400+40

24 - . ,.,-. V/ -' ИЗВОДИТеЛЬНуЮ ФУНКЦИЯ. ; .,:' ■■' ■

2. Облучение в дозах 100-400 Р вызывает сусрственныг- биохимические" изменения ГОЛ в семени'животных. . : . ;

3. Установлены породные различия в реакции животных на гамма-излучение. Хряка породы ландрас более чувствительны по;срав- ;г нению схрякамипороды крупная белая при оценке качества семени .по всем изученным показателям. : ' :;

^ качество спермы хряков, облученных одксжратно тотально гамма-излучением ( при мощности дозы 100 Р/ч и энергии О.Б6 Мэв), восстановилось в течение 9 нес. при дозах 100 Р и 200 Р. К 12 : месяцам восстановление наблюдалось у всех ливотных, кроме. ландрасов,* облученных si дозе 400 Р- . ■

' ' 5L В продолжительный пострадиационный период от 1 до 12 ме- ■ сяце&1шеет место процесс ШЛ, интенсивность которого зависит от ■ гамма-излучения. ;f -у

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕН^

'у.1..Биологическую полноценность семени после, тотального га»-.. ш-обдучения хряков целесообразно оценивать по перекисному окис- : яению липидов (ГШ) по предложенным пай ■ показателям.

2. Хрякоч.облученныхв дозе 200 Р через:1 год с момента облученияi ¿южно использовать для осеменения свиноматок. .

' /'а,, ЭДдаазв,.облученных в дозе'400 Р в качестве производителей ве рекомендуется использовать в практике искусственного осеме нения. . '■■ -■ -. \ ' I.-./ V'

Основные положения диссертации опубликованы' в следующих работах: ■ V

1. Наконечная Е. Б. Изучение перекисного окисления липидов

в дельвом эякуляте и сперматозоидов х^ков в норме и при воздействии вне)жих неблагоприятных факторов //; Тезисы докладов IX ВсессГЕной научно-практичёской.конференции молодых ученых■ ^специалистов "Резервы увеличения производства сельскохозяйственной. ПРОДУКЦИИ^, Оренбург 1990, . с. 14-15. " ■ ^-'V; ; •

2. Наконечная fc. Е , Влияние гамма-излучения на процессы переписного окисления липидов (ПОЛ) спермы хряков //Тезисы докла- ' ДОВ 3-й Всесоюзной конференции ПО с-х радиологии, Обьлнск 1990.

т. 2. с. 124-125.

а Найдина Я П. , Терепрнко А. II, Наконечная Е. Е.. Вэвикова О.Е Влияние тотального гаыиз-излучения на пострадиационный дар-яокислотный состав сперматозоидов хряков // Тезисы докладов 3-Я Всесоюэноой конференции по с-1 радиологии, Обнинск 1990. т.2, с. 123-124. " \ Г.

4. ^конечна Б. Б. Змі на окислювально-в і дновних процесів У сперматозоїдах віл гамма-опроміненних кнурів // Тези доповідей і Республіканська наукова конференція 16-18 язвтня 1990 р, "Біотехвологічні дослідження і перспекивн іх развктку". Львів, с. 29.

пяштно К ЛЕЧА« 5.05 Л991г

зша '«6» ягой too »н

, * €ВЪШ 1,0 у*.* ПИП BOA.