Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Морфологические и биохимические мутанты и их использование в селекции септориозостойчивых сортов пшеницы

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Морфологические и биохимические мутанты и их использование в селекции септориозостойчивых сортов пшеницы"

РТ6 ОД

7 Н'ОИ МАСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА _ ( РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

КАЗАХСКИЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

УДК 632.43/49

ГЕРЦОГ Надежда Михайловна

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ МУТАНТЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В СЕЛЕКЦИИ СЕПТОРИОЗОУСТОЙЧЙВЫХ СОРТОВ ПШЕНИЦЫ

Специальность 06.01.11 — защита растений от вредителей и болезней

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

алматы 1!)0у

Диссертационная работа выполнена в научно-исследовательск сельскохозяйственном институте министерства сельского хозйс: Республики Казахстан.

Научный руководитель: кандидат биологических наук, доцент Г. И. Кобылъский.

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук

В. Ф. Фирсов,

кандидат биологических наук Н. Н. Альмуратов.

Ведущее предприятие: Казахский научно-исследовательский инсти земледелия им. В. Р. Впльямса.

Защита диссертации состоится « в часов на заседании специализированного Созета К 120.(57

по присуждению ученой степени кандидата сельскохозяйствен!! наук при Казахском сельскохозяйственном институте по адре* 480021, г. Алматы, пр. Абая, 8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат разослан « ^ » 1993 г.

Ученый секретарь специализированного Совета, кандидат сельскохозяйственных наук,

доцент Т. С. РАХИМБЕК

■■■••. 3 ■ OHStó ШАЙТЕРИСТИКА РАБОТЫ

.1,1. АКТУАЛЫЮСТЬ ТЕЩ Септориоз является одам из шроко распространенных заболеваний пшеницы и других зерновых культур. В 50 ^трапах мира септориальнш грибы внзывавд апифитотки,. которые привозят к потерям 10-15% уролая пшеница (Shtpton et.al. ,1971). "Сеоториоз «асто наблюдается в. предгорных районах Северного Кавказа, в западных яластях Украины, в Белорусски, Прибалтике; Северном Казахстан©, Си-5ири (KamißeroB, 1969; • Дереча, Михайлова, 1977; Взресигоеин, Кова-еевко,1978; Васецкая и др. ,1983; Кухаятаева, 19В7; Чигкрев, Басец-«ая, 1989). На юге Казахстана на1Я5олеё распространенным возбудителем гепторирэа является Septorm nodorum (Судникоса и .др., 1990).

■ /Септориальные гркбы-кеобьгаайно пластичная ^ группа несовершенных 'рибоз, характеризующаяся высоким уровней: продуцирования фгакологи-кска активные веществ,которые определяют потенциальные приспссойи-»льньа возможности популяций. Такова« вепестваыи. югут являться jepitenrá (Nagar et" al;., 1984),фитогормокьг (Уинов и др., 1981;. !гтг,1984) и фитотоксшн (йз0;чязва,1982; . Хаснро, 1985). Для изучения »таболизка этих соединений необходима коллекцая штаммов, маркг'ро-айных по различным признакам. Этот аспект имеет и прикладное значена, связанное с^ идентификацией кзолятов гриба Saptori а, с использо-аякеы мутантов.для создания икфекциоянжг фонов при селекции септо-иозоустойчиЕых сортов, а так?» изучения последствия влияния пестиков, обладая^ ыутагеккыми свойствами, ка вирулентное и патоген-ые . свойства возбудителя. Многие из этих вопросов изучены недоста-очно, некоторые не раскрыты зообез,. в частности,!. эффективность ействая мутагенных факторов для получения мутантов с измеяеЕяыми Еойстваш; взаимосвязь шжду; патогеннсстыо и метаболизмом икдолил-3 уксусной кислоты С ШЮ* В этой связи изучение особенностей мутаци-иного процессам использование полученных ыут&тгов в качестве мар-аров в биохимических, а в перспективе, и в генетическ.гх ксследсва-йях, представляетуйушшй-'яГфакт!г«сн?й imepec/:.; ^ ^

; 1*2. Цель я задачи исследований^. Цель» работы ч'бню:.йзу«внт swarcpsÄ аспектов патогенеза септорисза на основе; рантов гркйа sptbria 'Задвя»';' йояучекае-V;HsrtáácoB,-'; ^радованных ■ *яо мЬрфмо->-культуралмш (дзету, консястенпии коляий, строению и окраске щелия, кнтенскйности спорообразования). биохимическим (по у'актпа;-узяя фер^нгоз, по способности; синтезщзрпать ЙУй, фйтс^окршщ), фн-

' 4 . /

апологически-,; С по чувствительности к антибиотикам, по патогенности, Екруданткости и агрессивнооти); изучение-роли некоторых ферментоз ( толиталаотуронззы, Су: -к-С1-целлюлаз, ^-глшзэйдаэы, ксшакаэы, зстераяи к нероксидазк) в патогенезе сеаториоза; исследование КУК ix« зозшаясго фактора патогеннее?;! гриба септсрия; определение рол фитотокеячкш; метаболитов (ФГ--1,' ФГ-2, ФГч-з, «Г-4-и ФГ-5) в реакции взайкойейзкзия -патогена и растения-хозяина. '

■1.3. Научная новизна работы. Бзказаяа возможность получения мутантов гриб?. Septem, различающихся по морфодого-культурапьнш, би-ox>r*iij4öcsiJiM, физиологическим признакам, применения их селекционно! практике. Выявлено ¡значение некоторых гидролитических ферментов (по-лигалакл-уроназы, /¡-глюкозидазы, Cl-и Сх -целлюлаз, ксиланааы, эсте-разы), окислительных (пероксидааы), фктогормона ИУК и фэтотоксичкьп метаболитов в патогенезе.септориоза

1.4. Практическая ценность работы. Получено 28 мутантов каолят; 85-254 rpv.öa Soptoria nodorum, предатазляэдк собой селекциояво-ми-ко,югн"эсккй материал для фятопатодогических и фюислого-бкохимтчес-ких исследований. На основе проверки кшецйхся разработок и экенери-иентальних данных подготовлены и утверждены: "Методика получеки мут&лтэЕ гриба Septorla nudorum Bark", • "Мзюдика количественного определения фэтогормоков на примере граба Soptoria nodorua Berk с помощью ¡кидаастиой хроматографии высокого давления", "Рекомендаций по напразяекному ситезу фунгидадов, предназначенных для борьба с сеп ториээзи1*. '

.1.Апробация работы. Ссшвнш разделы-. диссертации доложены н юбадйиой конфёр«>тт ■ ШЮКК .ШХ. СССР (пгт. Гвардейский, 1988), вееео мной. научт-пракпкеской конференция "Флэюлого-бйохимические и го кцгккс-секщшшшз основы иммунитета сельскохозяйственных растея;: к грибнум Солееням" (г.Уфа, 1990).. ; , '

1.6. .Публикации. По материалам дассертащш опубликовано 8 раба

1.7, Cöiöm и структура диссертации. Материал диссертации иэйо жн на.'ISO. страницах;' содерзш 24 таблицу,- 15 рисунков и состоит у введения, обзора литературы, иатериалов и методов, обсуждения рхз еультатоэ„ списка нспользонаяиой литература, вавдашня, кьгводов щйцагения. * Список литературы вклззчает. i 38 наикмвованкй, на mer li 'на русском яэans и Т1щ шостранкых -Яшках..- ■

/■

. Сйлкаюг »следований быяи врарб^вш иасшты гриба $.' nodorur

Б

S. trítici и S. avenas, выделенные на территории Казахстана и Сибири и любезно г.ре до ставленные лабораторией "Биологии ■ сеп-гориальных гри-5ов" ККСЖ Изоляты различались по происхождению: месту сборе, и сорту пшеницы, с которого были выделены. В течение ряда лет они образа-гывались различными мутагенами:. УФ-лучаш, •китрозо-1-метзтШ5В}:яой :НМЫ), N-метил-И -нитро-К-шгсрозогуаивдином (НГ) с целью получения .(утантов (Ю опытов в 3-х кратной.иовторности ьа каядай ивсллт и та <адцый мутаген). Частоту появления мутантов (R) расчитывали по фор-луле: R - М / н, где М - число мутачтлнх колоний; Н - обкэе число зыросших колоний. (

Наиболее мутабилькьм оказался '/.золят 85-254.. гркба S. nodorm, юэтому данные; полученные ка этой кзоляте, легли в основу предстзв-гяемой работы. ':..-'..•

Шэдили следующее обозначение для вариантов:- 65-25х - ис-:однкй таолят 85-254-, 85-254/1- ыутаитй вариант N1, 85-25-1/2 - ут-'знтнкй вариант N2 й т. д. .

' Получение мутантов проводили на основе проверки еущэствумзЕс ¡етодов экспериментального мутагенеза к с уютом собственных модифа-зций. В работе использовали пикноепоры и мщелкальнь» -протопласта, олучаекие при действии улиточного фериэята желудочного сока зиног-аднсй улитки í;.$ltz pcrratía. Ляофизйрованньй фермент хранили в генетически закрытой.посуде при температуре -15°С. При выделения про-опластов -за основу брали схему, из'.оконную в работе L Р. Яковлевой ч .Г. Дяазахия (1981) для Р.огуггэ,_ в которую иы внесли некоторые кз-ененкя (Кобылызкая, Герцог,19S0).

В завксим.сти от цели эксперимента культуру гркба выравдзаяи з гационарньк условиях в термостате и з' климатической камере Sheror" с освещенностью 12-15 тыс люкс и 16-часовом фотоперкодо« ул температуре +20-22°С, л:Со нз качалке с частотой 120 качаний гшуту при комнатной текпературе .в тешоте в течение 3, 5,7,1СД4Д? 20 суток.

Гриб выркцивата. для определегля. спорулнрукгд^ способности,' из-гненкя бцсиассы в процессе роста - на картсфельно-декстрезноы агаре ШСШ, 1SSJ), для определения, белка и активности ферментов, W&, йи->токснноз в споровом шгериале-на сыпучей среде (ЕИОХЙДОвб); для гредедзния активности КУК в мицелии и культурельной среде-на гздоЯ нательной среде. (НКСХЕ(Д98б), для определения ^итотокеинов даце-[И и-культуральиой среде-на.кадкой, .среде. Фряэа (ШТОСИ, 1990). . - : 'Изучение спорулядш!, удельной скорости . рома/ прорастаэчоетн

... е..... л _

спор» ' величины пякнид и опер . '.проводом обгзэпризятши способам (Перт, 1978; Еи^ай, 1982)¿'используя микроскоп МБй-3 (окуляр.7Х,.Об1г ектиз Юх), контроль за выходок протопластов - МБР-3 (окуляр 7х, объектив 40х). . - •Л/ у'.;: :

Содержание; бедка ' (мт/г : сухого вещества) определяли по йэури; активность ферментов-по прошюям,_ изложенным в справочнике под ред. Е 31 Вилай (198?) • и моаифщирозанным в. лаборатории "Шлекулярной ®г-олгж ЖЖй" А, А.Ахматовым к Г. К.Кобшьскиы (1920). В качестве субстратов для шлигелактуроназы, С-х-цеадшлаэы к. ксаланазк использоваш соответственно 12-ные раствори пеганка, На-соли карбокеиметющеллю-довы и 22-иый. раотзер ксилаяа. Об активности этих ферментов судклй по приросту редущруздих Сахаров в инкубационной среде. Субстратов для С-1-цедлшазы служило обеэвощэнкое хлопковое волокно, для _р-глх>~ козидазы - раствор п-нитрофейкл-^-Л-глкясопираноэида. В основе определения активности перокендаза было окисление беьзидина перекисы водорода Электрофорез проводили по Мауеру (1971), локализации иао-ферметов перокещааы - с помощь» оОв$з принятых гистохимических реакций. Субстратом для определения зстераэы бьш пара-нитрофенилацета! (Чагрин,1б?'б).

Для вовлеки» ст&пенп порэяания ппгеницьг растения вырагщвали н ¡шэ/атичаско« камере "БЬэгег" и в. тепличном боксе , для чего использовали законы на 0,6-1,0 л по 15-30 растений з каждое В фазе двр листьев растевдя ине^лйровааи споровой суспензией из расчета 10-2С на з вазона при кот^рацки ю^сяор/ш, на сутки помещали вс . вявдэт^кашру с температурой 20-22. за»ем выотавлядг^лкбо в кди-.иатадаекую- кадар?*«вйдаьй' боя»,:, где. яоддейишадя температуру 18-82* С, ь.тадаосгь до 702. Контролем служили растения, обработать водой, ■-Отмечай» появление первых сеигориальных пятен и черен 14 суток определяй степень поршения по проценту зараженной поверхности (ШС31,Н'8б),' Для олредед®ящ биохншпеских показателей; иаоку-лирозакзне листья с^еаали на 3,:. 7, ю. сутвн и фкекровали лщкт езотои,- хрэдущ в холодильнике .яри .температуре -25°а Иатогенност! стреляли таюкэ на изолированных, листьях гтеэшшу различных сорго! (Йг>л,''юва, Карасева, 1985). Бее опыты, по определенна степени поражений провслилз в трехл1с®торност8х на. сортах: Альбидум 43, Алмаз, Ка-раЗаддача-^у йалтгая» Саратовская Саратовская 33, Саратовская , 45,Саратовская Бб,. ?оссияё|а;; сорт Каштан ®>:данным лайорадори "Шояопш сеп-гориг^ий^р^в'^Ш^Хй яв^ется отаосете^шно. уетойЧ! . гыы к сьпхориозу. Нэсевной гатеризд прйдагрхггедьпо проверяли. нг '^схожей«»* .й:^да{с«аншГ^'на":прорастеаьвсть'епор. ;Уу у гу'-у"

Рафтатиот-ва в 1985~Ш1гт.: по ^ плановой тематике НИР ГОКШ

3.: РЕЗУЛЬТАТЫ КССЛЕДОВАЕШ!

3.1. Шрфо лго- kjлътурадытые особенности. к патогенность . >,<утантов гриба Sep tori а .'

Зпервь:? сделана попытка индашроватБ мутанты приролниг азотов

гриба Sc-ptoria, выделенных на территории Казахслапа,

Установлено, что наиболее- мутабильнш га исследовании: является изслят 85-25-4 (23 мутантов) гркба Septoria nodorum Berk Еостзнайской популяции, Шззго опадать, что язолэты этой, популяции предрасполагая« к споктаннш мутациям, при зтон повниается рктА шявдаяия. новых, потенциально опасных' высоковируяентшгх $эрм, которое могут прк благоприятных условиях вызывать массовое поражение ппзкицы.

Обличительней особенностью УФ-облученкя,' по 'нашм дгяккм, является нестабильность аидашаящихеа вариантов, к-с последухЕдя роверопя к исходному кзоаату-после повторных п&ссазюй. й. А. Захаров (1S£Q) объясняет это наличием фотореактйй)гру5Щ>го фермента, воестал^лггаа^-щгго летальные и .мутагенные повреждения. йш избеяакгл фотореактива-ади, УФ-оОлучэнке . проводили в темном боксе, а рассев при краевом свете. С увеличением ¿рамени У$-облучения процент мутззтоз, отлнчвюс от- типичного, увеличивается по crips деленного уровня, а затеи снижется. Для пикнссяор - вто 7 ьпгнут, для протопластов - б. Ц'тзлтк, полученные при УФ-облучения, морфологически отличаются от-исходного: при УФ*облучения пикноспср они еветлсокраЕккы, приподняты.зад cps-Лой,. гофркроваяы; при • .облучении протопластов. - 2 типа .утаптов: с«;ладчатыэ, г.э'цвету близкие.к типичному, и, /абсолютно черные ео сиояиетш блеском в виде рассыпанного песка.." Тагосе черноскралмнт« колошт 5 природных кзолятах нами не. встречались. Согласно литературным данным (Взкчуто'ла я лр-. 1G87), пигментные мутации подобие .ш типа рецессивны. Излучение рецессивных мутаций у S. nodorum, т&кжэ, кал: я у P. oryzaa, гшег-их трехклоготакз конидии, затруднено та-за маскирования этих мутаций адлеляю! немутировавших клеток исходного типа, поэтому,-для выявления рецессивных мутаций целесообразно ми-целгальные протопласты S. nodorum подвергать ' УО-облучению. Следует отметить, что обработка протопластов хкшчееккмн мууагенами приводила к летальности. - .Вероятно, . для протопластов, лишэнньк клеточной оболочки,- любые концентрации НМИ, НГ токсичны, летальны, а У£-облучение- стимулирует-митоткческие процессы б-клетке..

Й5терёсным было влияние НШ. на выход мутаций. Только две -дез« эказанас!.. эффективны: низкая(250 ыкт/мл) и высокая-,(,БОО .шг/шО»

' 3 5

стабкльцьв колоти .вздаялгшсь -при дейсявни последней. Кванты» по-^гч^кныз яри действии Б.Ш," иыэди лэлтуя' окраску, нартргансй спорооб-разаёанка, ы&лккэ' сяорц.. л деформировзкнш пшжлды. Шоркая доза 2Ш ИНГпО^ровалз роат мицелия. и вызывала поазлеязэ колоний складчатого тип*-с шрябшкзтоа- повзрхносгт Таете мутащша, как правило,' корре-х-груЬг с'вознккповенйеи устойчивом» к ан^кбйоягое&с (Захаров, 1980). Пе.':н для гягхохного иаотага угеетащэй дозой лезомициша. и сгрепммк-цин& оало 20 шг/ул, 70 для ед^шса 83-254. П угнетение роста набло-дазя прк дозах свыгге 300 ьяг/ыл. Го днературным яаяши, наиболее ппфок5;й спектр мутантов, устойч>2ых к акткбистикаы, получен под дейсгиием Ы2.1 {.Дьяков, Выпгннзнкая,1973), Н»1,3х10"^ Некоторые авторы вида? практическую ценность стрэптошция устойчивых рантов в возможности их использования б различных прогрэлшах по соматической гибридизации (Нагг.Ш оЪ а1.',1985).

В результате обработки споровой суспензии НГ замечено, что этот мутаген вкушает значительную ыорфологкчэскую изнэичквосгь изолята 85-254. При этой НГ индуцирует больше морфологически из ^кенных вариантов в пределах эквивалентной вшигаемости. Б бояъшшстзе случзсв формировались колонии складчатого типа, приподнятые над средой на О, 5-1,0 см, Каибольаее тесло вариантов было получено при обработке споровой суспензии концентрацией 200-250 ыкг/мл, выдазаекость спор при которой составила 51,3-45,22, Щактивность воздействие низких • доз ЦТ косила линейный характер, с увеличением дозы линейность исчезала.' Шд действие« НГ было получено 20 предполагаемых мутантных варианта. ' . • --.-.'*

Пигментированный (оливковый, что характерно для большинства казахстанских популяций гриба Б. пойошт) иаолят 65-254 под влиянием му-гагепов.ввдеплял светлые клони, число кх в рассевах доминировало. ■ Появлялись гладкие, моризашетыз,. со снопообразными выростами мадо-лзгя, "пороаистого" или бугорчатого типа. Прк последущж пассажах светлые колонки постоянно обнаруживала нестабильность, образовывая пипйнгнровакные.' СЕе^лай опаска, споруякрувдк структур' (от розовой до ораюгэвэй)" вависят; от о&шя каротиновдов, пришиакщх на себя роль свеюгащкткого экрана и антиоксвдаята, принадлежа^» у темноок-■'рашипя колония иелащшу, При нарушении синтеза меланияа гриб час-тачно.терггет сатсгенны&'.свойства (©щ;ова и др, ,1976). одним из вах-выу направлеизй! исдольаозьаЕиа : слабопатогешшх .мутантов ыо»»т быть •йя^зизашя ■ яма растений для• индуцщюЕанад зальных реакций у ясс-дадннх (Садорова, Ш8; Дгаеахяа и др,, 1367). Провздерлгые нами исс-ледеданкв. позволяют сделать ир-удволоизнке о таком зффгкте слабопато-

•" - "• -.,* .О../.-...'.' \ • -.■ -' '

генного мутанта, Которое выражается в ослаблении болезни после предварительной, инокуляции. Через 3 суток после обработки ПЕеннца слабопатогенными варианта!,и провели инокуляцию сильнопатогенньш. Степень поралэиия пшеницы снижалась на 40-50%.

В течение ряда лет варианты изучались с целью • выявления каких-

либо закономерностей наследования морфологических признаков. Особое внимание обращалось на рост, споруляцгаэ и патог^нность. Исследования показали, что - почти у всех вариантов; наиболее интенсивный рост происходит в первые 10 сутки культивирования и остается на таком уровне до 17 суток, затем рост гриба стабилизируется, после чего наблюдается снимание биомассы. Накопление биоыгссы у мутантов идет такта, кан 'л у природных изолятов по Батонам простой периодической культуры, в первые 1о суток культивирования - по логаркфгаческой • кривой, что согласуется с литературным! данными (Кобыяьекий. Ахкетов, 1959). Пэ-твлениэ спор отыечено уже на З.сутки, максимум споруляцин приходится 1а 10 сутки.. Основную маеоу (12) составляют варианты, счрая масса галощй которых, как и у исходного,' составляет 6,1-7,0 г; .5 ьариан-:ов росли более активно; 11-напротиз, . отставала в росте; особенно <э дленный" роет найладалк у варианта 85-254/4, -.полученного при УФ-об-[учешш протопластов.- Большинство ¿¿утаятов является активно споруди-•ущиш. Наиболее' сильная споруляцкя отмечена у исходного кзолята и утантов 85-254/5» 85-254 /15, 65-254/21 И 83-254/27 (2х1С?- 4x1 С5 пор). Следует отметить, что в числе слабопатогеннкх оказались слз- ~ оспорулирущие, однако говорить, о полной корреляции нельзя, так как реди слабопатогенных есть варианты с корьсишноа опоруяяцней. Из 28 ариантов толгга 6 но патогеиности по отнокенот к восприимчивому сору Саратовская 29 были равнозначны исходному, остальные превосходили.

Из варкантоз, характеризующихся относительно стабильными свойс-ваьм в течение 1988-1991 гг после кногократннх пассакэй на КДА и истьях пшеницы выделили две характерные группы; слабопатогенкуя (85 254/2, 85-254/8, 85-254/13) - степень поражения сорта Саратовская 3: 2,8-6,5%, сильнопатогенкую (85-254/15, 85-254/ 23, 80-254/ 27) -гепень поражения соответственно: - 57,0-80, 42, (у исходного кзолята >-254:14,2%),: которые я явились объектом Сиохяынческих кеследовя-!Й. '• '■■ ■ ',. ■.' '. V •■-

По агресскзиостк из всех полученных вариантов, 85-264/15 отлился от остальных и от исходного: первые енштеш при инфкцирозанш; ! появлялись на всех задействованных сортах, : .кроме Катана, на 2-е тки,, на сорте Казтан - на- 4-е (при;вараяюшга исходным и всеми дру-

гкг.И'Е2фйагг?зш на сорте Вааяган. г на' 7-е сутки,, на остальных - на* 5-е сутки). Вариант 85-254/15. характеригуетсг складчатой текстурой к красной окраской колоний., В>. яитередурнш данным. (Захаров,' 1980?, накопление красного пигмента - продукта полимеризации &\зкоикидазол- •. риОозида, связано'с- потребностью мутантов'" в адешще. Мутант 85-254/15 при выращивании на минимальной среде давал небольшие, ограниченней-в росте колонии (1,5 см б диаметре против 6,5 см при 'зы-'ра^пшии' на полной среде). Еа среде Хоялидея с добавка«! ростовых' во^ств нормальный-рост мутант проявлял на среда:-: е аденином (1-я и 7-я комбинация), это мутант с неполным блоком определенной стадия биосгатега адзяиза, й»2х10"".й Считается, что биохимические мутанты с полной или частичной потребность» а ахсдюкислотах, азотистых основа-виях, авирулентны (Оииа, бггЬег, 1960), Однако, есть данные противоположного характера, когда мутанты с дефектом аминокислот и азотистых основании' не отличались по валентности от исходного типа, что объясняется авторами различием условий, при которых выращивались растения (Левнтк.,, 1986). 1Ь миени» Д. В. Ызтлникого (\9?б), корреляция у.,-щу .гарулентностъю и потребностью в азотисых основаниях примени® ли» к системе бнотрофнУй организм - растение, т. е, когда высокая степень социализации делает патоген 'зазисимам от ¡теавхыш ъя&юь растения. В'случав с мутантом 85-254/15 с частично нарушн-иш синтезом аденина, . вероятно, наблядаатся переключение на образований каких-либо других физиологически активных соединений, позволяла;« грибу сохранять высокую патогенаость.

Сравштегьноо изучение морфологических признаков" у природных 553ояя®о» и. 1шдушф0ванаых-варншйюв (ушивались теге© . данные по. другим даовдом, . которнз бьаи вадайогвовагш 'каш) показывает, что как-в прадедах: изолятов,, так ш.рантов юшо обнаружить шэгообра-вие ыорЗояогическнх приайавов, особенно среда спеизра индуцированных .мутегяов. 'Сходство значительно по таким признакам,' как плоские (расп-ростер-тые; , гладкие), гранулированнкз {й виде песка, представляющего собой .кояййш,' выводящие па поверхность колоний) колонии*, наличие субстратного' и возданного .щелка; - оливкового/ .серого«. розового, телесного цвета толокий. Вероятно, мутанта, несугие гтй признаки, наи-.белое..«ддятйвш:к естествзиом .условиям,поскольку.они встречается-. -сг/;дй приро^ш иарлятав'гр^г .септория.- '•-•Дэдвхяяись- варкздтй, яа

' ШрЬЧЩШй В ;ГОрЩГЧН0-ЗЙЛГШ,:-голубы»;

; 5?пг/?Ш;.ц«дарэ^гсноЬообразн'ьз® '¿¿рос-га-.

т.» (аа;1сй)'.,; приподнягш. над :срвдо<1 •

' 11 '

3. 2. Активность ферментов у мутантов гриба Зе^Лопа гоЗогии, • разлетающихся по патогегтаости - .

Гидролитическим ферментам отводится ведущая роль в процеоса проникновения через клеточную- мембрану растопи.?-хозяйка ' (Бэккер, 1983). В процессе изучегшя пекто-и цэллюлолитических ферментов установлено, что сильнопатогенкые мутанты обладает ьысокоактив?г^<и поли-галактуроназой и ^-глккозидазсй; по активности С1-и-Схцеллялаз не отличается от слабоиатогенкых и уступают ш по активности ксилэназы С табл.3.1.). .Мутант 85-254/15, превосходящий по патогенности-и аг-¡»ссивности все остальные'¿¡утакты и исходный изолят, имеет- оаькй высокий уровень активности полигалактуроказы и-^-тлкзкозндазы. Усиление 1атогеннкх и агрессивных свойств у некоторых фнтопатогеноз сопровождается, по., мнению- аТ, Дьякова (1931), повышением активности этих ферментов. - Ферменты, запасенные' 6 -покоящихся итоуктурах, декретируется в среду инкубации, где'их активность в й-4 раза -выше, что мо.уйт 1четв определявшее значение оря' гщорастаяия спер на жс?ыгх рглтвшя -.хозяина.- Завксиыостя меаду .устойчивостью, шюницы-к септоркоэу к ак-гквностьа' 'исследованные пекто-я.деляюлолктлчееких ^ерменгсз в кок-наназы в дисгьях- гоеиипч, по'нашш данным, не существует. йНфядаро-1ание не приводит, к достоверно аиаишм разлрщ.% з • активности этих зерментов в. листьях растения-хозяина."

, Определяли активность зстераа, гкдролизпрующях зфн;',^ Фенслкар-¡оновцх. кислот.- Активность фзрмен!-а в покоящихся, прорастаздих сяо->ах и среде инкубации низкая, 20-40 ед/мг белка ьроткв 100-500 эд/мг ¡елка в растениях. Уровень накопления зстераэ зависит от природы па-■огена: • сильнопатргешшз содержат меньше,- а елабопатогешшз - бель-й; г—0,80. ' "

Определение активности зстераз-в контрольных растениях кэ выдало зависимости--между устойчивость» к с'епториозу и-активностей фер-¡ента в незаралзяннх листьях. инфзаэдгавание.- ведет к и^кененя» зсте-азной активности, уровень ' которой зависит от природы паа-огьь'з и астения-хозяина (рис.3.1-3.2). Сильяопатогеиные мутанты индуцярею-и активность зст-ераз; г-0,65. . Увеличение .активности наблюдается у орта Калган при заражении исхо/.-ккм йзолятон и мутантами 85 -?Л4/15, 5-254/23. и '85-254/27 на -3-й сутки, на 7-е-10-е - суткл'крк аакайэг Ш1 85-2М/Я, . 85-254/8 к 85-254/13. '6я7ос.аельная устойчивость соряа аиган сог'говохдается тчдаельньм|- в 1,5 раза яо?н2»ккзм. /роз-я .активности' "аегераан яа проталинки. з^пг-фд^енгампсто'- т угг-

ожэт быть сяязако с. проявлением "зёяотздх м-эхан"ьмов у .-этого сор^?.-

Таолзда з. 1 •

. «Сй^Раяй; ШЗ^и счх фермегтсз прр поорастаьиш спор мутантов изолята 85-25.1=

V.'• ... } • Удеаьиая акгавноеть ферментов ( ед/ш'белка) .

\ ^утаит"

1полягахакту- ! Сх-целладазы ! С1-целзшжаэы ! ^-глюкозидазы ! ксилалазы

-»: :■ .■.•' f роразы - . 1 ? ! • 1

гб -254/исх . Шкоягщйся спора , ; 1,85+0,17 0,83+0,13 1,65+0,14 2,17+0,25 4,12+0,02

Прсрастаадкз споры 0.95+0,15 1,14+0,33 0,62+0,£2 2,8310,49 2,63+0,31

з'\ '"*" ' Среда инкуяации 3,65+0,29 2,65+0,17 0,03+0,15 4,37x0,46 10,15+2.46

35-254/ 2 Йжоясдася • споры . 0,57+0,05 1,83+0,18 1,76+0,45 1,15+0,09 ■ 6,34+0,26

. Прорастадзде споры , 0,45+0,.04 0,76+0,22 . 1,15+0,20 2,61+0,72 •2,14+0,22

„л."-: Среда гожубацик :: , • 4,2710, Й5 6,34+0,50 1,51+0,09 4,1510,95 18,1810,51

55-254/ е; ,■■ Покоякреся споры 0,94+0,17 2,11+0,25 0,94+0,15 1,40+0,25 7,13+0,78 ^

„ . _ , ' ' Прорастахгцле споры 0,76+0,05 1,11+0,26 0,85+0,18 2,24+0,65 4,4110,13 го

Среда инкубации 5,4.5+0,27 4,35+0,04 1,25+0,13 3,21+0,87 10,17+0,22

33-254/13'' Кокояззкеся споры : 1 ,'12+0,16 2,17+0,26 0,88+0,15 1,64+0,15 5,17+0,62

Прорастающие споры 0,06+0,21 0,95+0,15 1,24+0,13 2.22+0,20 13,88+0,54

Среда инкубации ; • 4,29+0,09 5,4410,00 1,89+0,11 5,1340,18 12,43+0,64

{-ю-254/1!? . . Шкояшзеея спори *' .4,12+0,45 0.6540,05 0,9340,05 5.43+0,30 2.04+0.28

Прораетшодие споры 1,15+0,12 0,97+0,14 0,38+0,18 2,08+0,15 0,59+0,05

■ . Среда инкубации ,'.:'.'■ 8,65+0,39 3,94+0,60 2,16+0,34 10,35+0,47 2.46+0,10

86-254/23 Покояадеся споры 3,17+0,29 2,00+0,15 0,91+0,27 4,13+0,29 6,17+0,21

. СрорастащЕю споры. 1,65+0,15 1.Х6¿0,07 1,36+0,14 2,25+0,21 0,90+0,24

Среда швдбацин 6,52+0,27 8,47+0,28 1,72+0,16 9,85+0,45 4,13+0,35

85-854/27 . Шкоящнеся споры 4,05+0,18 1,6910,22 1,00+0,25 3.70+0,30 2,37+0,15

Прорастающие споры 1,36+0,20 1,35+0,10 1,15+0,11 2,10+0,18 1,13+0,26

Среда инкубации 8,79+0,34 3,85+0,47 2,24+0,43 7,50+0,50 4,56+0,43

ол о 'ед/мг.' белка'

со, с

7

11

I

+1

:;.ЛГ г КСХ 2 8 13 15 КЗ 27

конт исх 2 8 13 15 23 27

¡сон? псх 2 8 13 15 23 27

}:•':. Г). 1. йганепие содеряайи?' зсторагн в листьях пшеницы Саратовская- 29/ инфицированной кзолятом

ъб-йб4 и его мутанташ (Л-З-и сутки, Б-7-е сутки, В-10-сутки после заражения) '•.-.л.:: Ва рис. 3.1-3.б вгеде»« сдедутаке обозначения: коит-конт'рольине,- исх-инфивдрозашке исходным

'яаолятои ¿5-2."4, 2-кнфицирсвадгш^е мутантом 85-254/&, 8-ш;фицлроааш/уе «утзитоа 65-254/8 и т.д.

*».-. / .. к GCO. О ед/ыг белка ,'.

500.0

то. с

.800.0

200.0,

too. о

:

-i-

г*"

Л.

КОИТ исг 2 8 13 1Б 23 27

конт исх Z 8 13 15 23 27

конт ксх г в 13 15 S3 27

Ряс. à 2, Изменение содердаотя эстеразы в листьях шееяида Каштан, инфицированной изолятом 85-254 к его мутантам (Л-З-к сутки, Б-7-е сутки, Б-10-сутки после заражения)

_""'.".' \ ; ■' 15 . ■"• ; я отсутствием, ют более -слаЬт проявлением т сорта Саратовская 29. Гот факт, что язшяение активности фермента наступает после установления контакта мезкду растением-хозяином и патогеном, позволяет сжигать, что ' Ьно имее'т непосредственное отношение к ответной ре&теи. Вещества феяольной прйродн и родственные км соединения играют еал?у» роль в устойчивости растений к фетгопагогенян»- грибам (Чкгрин и ф. ,1976)..

3.3. йпдолил-З-уксусная кислота и ее роль, з патогенное™ Septoria nodorun

Есжгую, если не ведупую роль з этих вэаимоотновениях играет-да-золил-з-уксусяая кислота (Пэгг,1984).. Такзк данных относительно сеп-гориальти грибов,, э доступной литературе мы не обнаружили.

Исследования показали,, что-рост .гриба S.nodorun и его мутагг. з i отстой культуре- сопровождается синс-тезом индодьных аукекьов. а 'астности ИУК. Набладаотсп тенденция к усилению синтеза ИУК на 7-е и LO-e сутки. Первое появление спор отмечается на 3-й сутки, резкое усиление споружругаэй активности па 7-е, а максилсум - на 10-е. Б :вяэи с этгмо;^о предположить, что увеличение содержания КУК у 10-' ;и суточной культуры связало с усиленней! форйирааакиеи пнккид и сг.с-зообразоваякем. Шкносггоры содержат 3-16 нг гормона на гракм снр^й /лесы, что в' несколько • раз преакпзет. урозепь эгб в неинфжвдреванных вютьязс пшеницы. Э1о ,?указываег на вадможзоть привнесения йУК в рас-геиие грибом. Инфицирование;. оказывало на сорта различное воздействий :ркс. S. 3-3.4). Б-листьях- относительно устойчивого сорта уровень КШ ia 3 сутки. не изменяется, на 7-10,увеличивается относительно кок-г-зодьных з 1,5 -2,0 рааа, тогда как а янстзях восприимчивых сортов возрастает почти в 2,0 раза на 3 сутки заражения.

Мицелий слабзпатогенян» вариантов накапливав! а свкратнруэ?- з откубациоиную среду в процессе роста a развития а несколько раз 5ольте ИУК, чем склыюпэтогонньи при схсдяж значениях в готасепс-рак. )лабопатоге!шнз варианты - сввтлоокразаяда йоеожщ о-наружной пигментацией мицелия. , Сеногной причиной хепатогеннссти. (или сл&бсй гта-рогениости) тг-кнх мутантов,. считают В. Г. Дгивахия и др. (1987), являйся блокирование биосинтеза ыэлаяина, при зтси скорость роста тахза гариантов но изменялась 4 удельная скорость роста вариантов: 8&-2S4/ !. - 1,8-1,9%" Ч,""1 85-264/8 - 2,0-2,1Z Ч? ~ 8,0-2,2% *i"t

JS-254 /ясх - 2,1 -2,22 ч">. М&ланиндефйфотвз-■ татог сохрани**? .опс-¡обность инлугофотзатъ у растения-хозяина заздгвкэ рйакцяи,'.' ЕызкЕап

;.г/г сыэой массу

!

; ?

I

i

. п-

» г.

/й.г мех 2 8 13 15 23 27

r-í-

í-f-f-

КОНТ иск 2 8 13.16'23.27

rf-

кон? ксх 2 8 13 15 23 27

Кэд/еяешэ сокориания ИУК в устьях пшейицн Саратовская 29, га&здированной изолятом

(д-ч-м r-trrim. Vi-7-п nvTKH. B-10-cvT!fK íiocjo заражения)

rrt^ OTT 4

—ï—

. О, яг/г сырой lîaccii

r-i-rï-

в

в

-4-

кял У.СХ г 8 13 15 23 27

КОН? ЦСХ Z 3 13 16 23 27

ico UT ИСХ 2 8 13 15 23 27

•¡к. iL 4. 'Щтпащв содержания ЙУК в яистъах пшщу Кашгаи, инфицированной изодятоа

B5--ZH и его й/^тгшл (л-з-и сутки. сутки, В-Ю-сууки поме заршшш)

18 ■' заболевание на фоне -низкой активности: ■ у них пбдигалакгуронагн и в-глжкозидазы. Механизмом проявления вирулентных свойств этих мутантов, а равно и природных изолятоб, - вероятно, служит ЕУК, которая б конечном счете, влияет на развитие симптомов у . растения-хозяина, также облегчает определение способности патогена конкурировать с другими и вшивать в природных'популяциях. ■

Повышение уровне ИУК. в инфицированных.тканях,' совпадающее по р;>ьк«нк с млжккалъной скоростью накопления грибной массы, свидетельствует о важной роли ИУК в'создании.благоприятных условий для г ьедреки« и дальнейшего развития гриба S. nodorura.

Устояччвче растения способны ин&чтивировать секретируеыый гри-'••>м гормон с участием ряда ферментов," одним аз'которых' мозяэт быть пйронс.-^зз*, уровень .которой в устойчивых .тканях в 2 раза-выше-, чем ь ьсггрлмчирых (рис.а Б-3..6*. • -изменения в пероксидазной активности с появлением или исчезновением изоферментов (Савич, 1.989). Ум-нь^кие числа изоферментов с 17. до 14. при кнфииировааяк еильнопа-тогенчкм мутантом 85-254/1Б сорта Саратовская 23 и'увеличение с 9 до 10 у сорта.Какган ка 3-й сутки позволяет предположить,, что перокси-' r-i-, доыплекс служит индикатором стрессового .состояния растений. Тс мнению КХБ. Гйруаиекото и Т. Л Тахибаезой (1987), Селковш маркеры зарекомендовали себя как объективные' факторы устойчивости к разносортным изменениям среды. ..

3 4. Характеристика мутзнтов Septona oodorum ло их-, способности к токсинообразовакии -

Определенный вклад в развитие болезни вносят токсины. •" Фитоток-еини имеется в мицелии,_ накапливаются в кудьтуральной с.реде, где их содержание выше, чем в мицелии. Это 'можко. объяснить тем, что синтез <|йг,- -.токсинов eovposoxmßtßs -активной .секрецией их в среду, что ыожэт нк'.-ть большое значение в процессе .патогенеза..- Достоверно установлено, что с увеличением возраста культуры от 14 -до 21 суток, количество г.Г-одуцируеыых фитотскскнов.вка'аггельйр возрастай?, _ 'Содержание -отдельных $ктотоксинов в значительной. мере-вавкскт от природы мутанта, '."-.к, количество. ©М'. колеблется от 0,072 '(.85-254/2) до 0,305 ( 85-254 ;); ФТ-2 с? 0,45Ö (85-254/13). ДО 3,Ш.Х85-254/21);\<&~S от 1,395 Д5 5,33В (63-254/22) •,; Ф'Ь4. ОТ 0,32С (Е5-254/£1) ДО 4,690 , '-.<0.1 -/;»СХ); 01-5 о? О»008 '.(85-254Л&) .'.до ^84? <В5: 264/24); сер.

с/ ¿,Н0- (BS-^iW&d)'ДО. -'4 ЧвМйЧ/ЯОХ) S ЖЛ>- О'); ..0,057 /ЩКДС.О,^ (iK-goi/lISS) ЫР/Г СУХОГО föili^Sfi X 10"!

pst

Г

С

i

ta

1

и

о ¡

il

'л о

t,

«э

H

о t-,

т .1-,

.tL.

£

lá

О -J>.

о. «

о

Cvj

&

сз w

ю

чн

га

чН

СЗ M X

S £

а

я

о

H

о

сз

о

II

II

к 05

а>

О

о

M

N ►îi s ÏJ П

«• о

t. о

S3 « 1 о

к} т-<

ю . О à

те 1 «

4-1 i...

00 О S

СМ a >v О

к w Si

сз ■ y-t i

f* 7\ f»

Sir гЬ

Й

1 Щ

я> ■ Я

s¡-

ю,

•• « '

тч

а

Ц »

H ^ К i

о

о «

Щ á

я - % - -Щ-й

■ ?4 &

»t. -

■8 ? • щ

«

Й Г

i* :

0 ■ :

*

л

. 0. ус Л. «Д/Г С!фОЙ шсом

4.0

•'О.

2.0

1,0.

гант йсх.2 8 13 15 2.3 27

КОЙТ ЙСХ 2 8 16 16 23 27

КОНТ ИСХ г 8 13 15 23 27

■?»!с;3.б. Изменение содержания пероксидазы в листьях птсеницы Каштан,..инфицированной иэолятоы 35-254 и его ыутантачи (Л-3-й сутки, Б-7-е сутки, В-10-сутки после ¿заражения)

■ ■ ■ •

У мутантов наблюдаются сильные изменения как в сварном сздьр-аякя фктотоксинов, так и' отдельных Щ • представителей,- что позволяет ать дополнительную характеристику мутанту в . виде убывагдаго ряда: 85-254/ИСХ:ФТ-З >. ФГ-4 >С2р,0.31 > ФГ-5-> .МФК >■ ФТ-2 > ФГ-1 85-254/ 2: ЗГ-4 > «Г-3 > ФГ-5 > ФТ-2 > сер. 0.34 > ФГ-1 > Шй 85-254/13: ФГ-5 > (ГТ-З > Ф7-4 > СТ-2 > сер. 0,34 > > УЖ 85-254/15: <5Т-3 > ФГ-4 > <УГ-2 >. ЗТ-5 > сер.0.34 > !£Й > ОТ-1 85-254/21: СТ-2 > ФГ-3 > ФТ-5 > сер.0.34 > ©Г-4 > ФГ-1 > ЦК 85-254/22: ФГ-5 > ФГ-3 > ОТ-4 > '¿1-2 > сэр. 0.34 > СТ-1 > «ГК 85-254/23: <ЭТ-5 > <2Г-3 > 5Т-2 > 51-4 > сер.0.34 > ФГ-1 > 1ЙК 85-254/24: ЗУГ-5 > ФГ-3 > ФТ-4 > ФГ-2 > ФГ-1 > сэр. 0.34 > 85-254/27: ФТ-5 > ФТ-2 > ФГ-З > ФГ-4 > сер.0.34 > ШК > ЗТ-1. Если у исходного иэодята одним из оскозтгх з количестве кном от-ошзнии является фитотокснн &Т-3, то у мзогих мутантов таковым явлг-тся ФТ-5. Шньгга всего синтезируется ФГ-1, 1Я>Х и сер. 0,34.. По угарному содержанки фитотоксииов мутанты шзяо .разделить на две руппы, одна та которых превосходит, а другая уступает исходному золяту. - 85-254/24 > 85-254 /13 > 85-264/22 35-254/27 > 85-254/ СХ > 85-254/23 > 85-254/21 > 85-254/15 > 85-254/2. Эгкн вакокомэр-остам подчиняются и остальные таланта Макстшьнсо количество фи-отоксинов обнаружено у мутанта 85-254/24 С 38,480), а минимальное у 5-254/2 (4,667 мг/г сухого гящслия х 10}'. СильнопатогенниЯ (85-25-1/ 5) и слабопатогенный (85-254/2) гиганты стоя? в этой ряду близко руг к другу и значительно правее исходного изолятз. -Еороятно, пато-внные свойства гриба определяют 1-2 каких-то фитотоксина (гшрйнэр, ?-3, ОТ-4 и Ш-5), а остальные создав определенный Фон.

©гготоксшы присутствуй з по$соадшзя,-. прорастаадяс спорах, в рзде инкубации.- Споры сйлыюпатогеннСХ мутантов споссовы к более ятенсйвко5<<у синтезу и секреции Фятотокошюв, особенно ФГ-3, ФТ-4 и Г-5, чем сцоры исходного изолята (85-254/15 - ЙТ-З: покояшиео* споры 428,5- ыкг/г сырой ыасси, среда жкубащм-1С5,0 мкг/г гчроа мпсеа; Г-4: покоящиеся спорн-0,е$ мкг/г сырой массы, срсда инкуба;.^;-49,1 . «•/г сырой массы; СГ-5: вокозияеся спори-0,4 »кг/г сырой массы, прела акуС'Шдаи-220, 8 кет/г сырой млсеч; 85-£54/5*52 - ФТ-3: поксяен«ся спо-¿{-0,6 мкг/г СЫрЙЙ М1ЛСи, Ср9Да янкуйнщт»-С,8 мхг/г скрой кассм; : покоящиеся епсрь^!, 0 мкг/г сырой кассы,. среда инкусодаи-»3,0 тг/г арой массы-, ФТ-5: покояпиеся споры-на -оонар^г-ан, ере®», ж<бацда*'53,Ч <г/г -сирой массн). Учитывая этот фаег, а такая то, что при прср-ах)-яяии спор, в течение суток яаблюдзеуйя г«уагвл$яэв уве«чен?£-.К!>ж-гствафитотоксмнов и накопление'их в среде изкуйада, йожя© яргдягу--

додать; что связь ыезду содеркзякеы фгсотоксинов и патогенное кутачтов ой нарушается на ранних этапах патогенеза - этапе. • прораг '.!аклп спор. у ..''•"

. В Ы В О Д Ы

1, С помоцьс индуцированного иутагекэва (УС-облучение, нятрозг --метклуочевина, И-ыетил-К -нитро-Н-шярозогуаяидин) у природно

85-254 гриба Бер1опа гкхЗогшп получеяо 28 мутантов, отлкчэи ст исходного по морфологическим (структура к окраска мицовш

и консистенция колонки, ровтовыз • характеристики, интенсивное т.зрооСразо&звия), биохимическим (активность' Фер«знтов, -способное •..¡'нтеэирогать индолил-З-уксусвую. кислоту," фгкисеждай), физиолог: ■йсга« (чувствительность к- антибиотикам, патогенноегь, вкрулен »ость. агрессивность).

2. Установлено, что высокопатогеяные мутанты Е5-254/15,- 85- 2 /ГЗ. 85-2&4/27 превосходят .сдабопаТогекные .65-254/2, 35-254/ е.г1-1'.глпъ по актизности полигадактуроназы,' .р-глякозкдазк.- Усилен патогенных свойств коррелирует с активностью этих .фэриеятов.

й. Закономерности ыезцду устойчивостью к-, септориозу к акти костью исследованных гидролаз (пэлигалактурсназа, ^-глэкозкдаэа, С -у. п-х-црллшазы. коилзваза, • гзстераза) в иеинфшрровайнад: • -юадь пшеницы восприимчивого сорта Саратовская 29 к относительно устсЯч ьеге сорта Каштан не обнаружено; в инфицированных такая вавкою,те наблюдается для эстеразы, активность которой в 2 раза вьей в листь пшеницы сорта Каштан. . .

4. Мицелий- -слабопатогенных вариантов накапливает к сокретиру в культуральнуп среду в 5-10 раз больше индолил-З-укоусной кисло! чем сильнспатогешшх, что позволяет первш. при. равнозначной-уделы: скорости роста, на фоне низкой.активности'йолигзлакгуронааы к.р-г: козидазн, вызывать заболевание к индуцировать вазиные реакции рг тения-хозяина- - -

5. На ранних стадиях патогенеза в.сови^стижй комбинации воз( дятелл септоркоза и растений лшепицм на&идается увеличение конце! рации КУК, б песовмзсгикой - шактявощ-ш пркгпоскшй гркСной ШХ счет функционирования ваядеяой систем.растения/. $ий>кайз»е раавж

у.ба в иафихирсБвкник тканях ¡еосщгкимчгйух еоргов ведет к нзкоп; <мя ИУК, , аттрагирущей питательные -Бегства, в вену развития .-пзто; -'ч Кслоде. у® .этого ¿эдиологическая щчъ КУК зр1шэ нрослеа-явае: при создании -ЬщщюихЩ -условий аиедоягфиуся; патогену.

б.. ТЁроксидаза,' активность. которой в 2 раза выэ? в етигеггехьво стойчивом сорте Каигай. иэтиз^тег.гйлролггаческие фритта ггатйге-а и инактивирует трибнуа.индодил-Э-уксусяуи кислоту, пс-гагаг.. тех амым устойчивость пивниды к септоркоэу.

■•„ 7» 11редварйтельяая обработка шзеншда слабопатогеннзк иугант^ча посяеяухтя обработка еильнопатогеннымя стегает ка 40-5СГ степень сражения.

8. Мутагенез дзет возшяность замены прзродныг пзолятсн загскс-етивнши мутантами - продуцентами ферзвэнтов и фаготсястсз в кз-естве селектирущих агентов п специфических антигенов в селэкдасн-ых работах по выведение сортов, устойчивых к релзпнкм аболевапиям.

9. Повышенная активность .некоторых 'гндрадктнчэсгоа ферыекгоз атогена (полигнлактуроназы, ^-глюкозндазы), эстеразн и перонсиг~:л истьев пшеницы, способность патогена.к усиленному продуцироЕг- о-вдолил-3-уксусной кислоты и фнзиологЕческк-аетнвннх вегеегв (Ф1-Э. Г-4, ФГ-5) и секреция этих соединенней б янкубадазкнув среду, редставдяет собой перечень биохимических показателей, Китсраз по тделькости иди. в совокупности шгуг быть яспользозанч для отбора ктизных шташюв возбудителей септорвоза шазницн, . нэобхедша&а в унологических работах и в селекции септорновоустойчквых сортов.

; . : - ПРАКТИЧЕСКИЙ ГВДШШПИВ'

1. Использовать прэдложннуо штодик? подучеотг уутактншЕ ага!*-ов гриба БерЬонз для работ -по создания тжусстазннг«) провмев^огг-ого фона г фдаснатолог-^чгсккх неезздовакяях по вывагаяз сеятсразгз-стойчиаых сортов. .• :

2. йлюльаовагь ' . в ■ качеств® " - селекционно-мкко лзгкчаскс'го атеригла для фетиолого-биохимических исследований позучгтгьз наки В иугантоа корлята. 8о-Е54 гриба Нерюпа пойогиа, йарегестрярозат-их и принятых на хранвююв: юедеядазнЕои отделе ШШК -

а Использовать полученные нема еызоксакзивкш ¡гтг^&аг гргба (я родушрута ты токеккы) дла ксс^еддват® тзэ -вогкозноиу прй*®з-}5.*е» х в качестве актороннстов вредвдаг оргааявша,"« та:-«® -гаигеков дая/двагдамикя-еиио^^

' 4. Использовать высокоактивные гр^Зз к«- преду-датл -%р-

мггов и ф;гготоксиноа для нуэя клеточной с«акгиа а э-профилактичесюа сывороток. - ' •

Список опубликованных работ по материалам диссертации

1 Герцог Н. М. , Кобыдьский Г. И. , Хобыльская Г. Н .Выделение н ре-генирзция протопластов из мицэлиятриба Борюпа пскЗогит Вегк/Вонрос ааздитк сельскохсгяйстзеняых растений и животных от болезней, чЛ. -Алма-Ата,1СЗЗ. - С. 87-89.

2. Еобшгьский Г. К. , Аяхпб31ссв О. -А. , Герцог IIЫ. Биосинтез индолн-уксусьои кислоты фитопатогекньш грибом Берега псхЗогит -Вегк/Взстню сельксхсзяйственной науки Казахстана - Алма-Ата,159С, N 8.- С. 37-29.

3. йобыльекий Г. Е , Герцог К М. Морфолого- куяьтуральзые особенности мутантов грибаЗэрЬэпа помогши В$гк/Вгстш*к сельскохозяйственной науки Казахстана- Алма-Ата, 1891,N 8.- 0,53-57.

4. Борзкояов Е Д., Кобкльский Г. й., Кобыльскап Г. а , Ахметов А. А., Герцс-г а м. Изучение Ьиоыолокуляр-иой природы патогекности Еозбудите-аэй септориоза нигницы /Отчет о НИР.(накл. 1986-1990 гг) . Инв. М 160.-пгт. Гвардейский, 1690. - 158с.

5. Ворэионов В. Д., Коб-Агаскии Г. И.. КоОыяьская. Г. а , Бочарова Е. К , Герцог Н. К., Дпрохоьа Е. Г. Изучение фитотохекков фитопатогекнш грибов и их роль в патогенезе /Отчет о НИР (Закл. 1936-199С гг).Инв. N 1Ы.- П'Т Гвардейский,1990.118с. .

6. У,с5ш2>ская Г. Е , Герцог Е К Ьйтодика получения мутантов, гр! ба БорЬопа поосгит Вегк. - пгт. Гвардейский, 1990. - 8с. . -

7. Кобальский Г. К , Кобыльскзя Г. К ,. Ахкето'в А. А., . Бочарова Е. I Герцог К. },1 Методические рекомендаций по направленному синтезу фук-гяашов, предказначэнных' • для борьбы с сеоториозом . зерновых. - шт.Гвардейский, 1990.- 21с.

3. Ворзяояон В. Д.. Герцог'ЕИ., Кобшаский Г. К. Штодикз количественного определения фитогорюнов на . призере- гркба Бер.лгт г.ос!о] Вегк п налосйп дндкоегкеа хреьгатографии высокого давлений, -пгт. Гвар-деЛский, 1692 - 13с. ■ >