Морфофункциональное значение простатического специфического антигена и высокомолекулярного цитокератина при заболеваниях предстательной железы

Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональное значение простатического специфического антигена и высокомолекулярного цитокератина при заболеваниях предстательной железы
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональное значение простатического специфического антигена и высокомолекулярного цитокератина при заболеваниях предстательной железы"

На правах рукописи

Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр

МОРФОФУНКЦИОНАЛЫГОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПРОСТАТИЧЕСКОГО СПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИГЕНА И ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ЦИТОКЕРАТИНА ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ

ЖЕЛЕЗЫ

03.00.25-гистология, цитология и клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2006 г.

Работа выполнена на кафедре онкологии и рентгенорадиологии медицинского факультета РУДН в ФГУ Российского научного центра рентгенорадиологии МЗ РФ г. Москва.

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор Харченко Владимир Петрович.

Официальные оппоненты:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАЕН доктор медицинских

наук, профессор Автандилов Георгий Герасимович

Доктор биологических наук, профессор Кругликов Павел Павлович

Ведущее учреждение:

Научно-исследовательский институт морфологии человека РАМН

Защита диссертации состоится « Д) » р/пд 2006г. в часов на

заседании диссертационного совета Д 212.203.08 при Российском Университете дружбы народов (117198, ул. Миклухо-Маклауа, медицинский факультет, дом 8, аудитория 224).

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского

Университета дружбы народов

Автореферат разослан « & »_ ОЛ 2006г.

Ученый секретарь диссертационного совета Кандидат биологических наук, доцент Саврова О.Б.

2-öOGk

гог.5"

Актуальность проблемы

Программа обследования пациентов с синдромом уринарной обструкции включает анализ крови на простатический специфический антиген (ПСА) (Wirth М., Otto Т. 1998г.). Простатический специфический антиген является чувствительным маркером рака предстательной железы (РПЖ), однако его низкая специфичность не позволяет избежать ложно-положительных результатов, обусловленных преимущественно доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ), особенно в диапазоне 4-10нг/мл (Любимова Н.В., Кушлинский Н.Е. 1998г.). Однако, существует 15% вероятность рака предстательной железы при низких значениях простатического специфического антигена (<4нг/мл) (Wirth М., Otto Т. 1998г). Морфологическая дифференциальная диагностика доброкачественных железистых гиперплазий, простатических интраэпителиальных неоплазий (ПИН) и высокодифференцированных аденокарцином простаты также нередко затруднительна (Abate Shen С., Shen М.М. 2000г.). Вот почему оптимизация обследования пациентов в алгоритме дооперационной диагностики новообразований предстательной железы является актуальной проблемой.

цель исследования - сравнительная оценка скринингового метода радиоиммунного определения уровня простатического специфического антигена в сыворотке крови с результатами иммуногистохимического анализа экспрессии простатического специфического антигена, высокомолекулярного цитокератина, молекулярно-биологических маркеров в ткани предстательной железы при доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, раке предстательной железы.

1. Провести анализ факторов, влияющих на уровень простатического специфического антигена в сыворотке крови у пациентов с заболеваниями предстательн

Задачи исследования

2. Проанализировать уровни сывороточного простатического специфического антигена при доброкачественных железистых гиперплазиях, простатической интраэпителиальной неоплазии, раке предстательной железы, определить корреляции между ними, зависимость уровня простатического специфического антигена от морфологической характеристики процесса

3. Изучить особенности экспрессии простатического специфического антигена в материале биоптатов пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, раком предстательной железы.

4. Определить возможности экспрессии высокомолекулярного цитокератина в дифференциальной диагностике простатической интраэпителиальной неоплазии и рака предстательной железы в материале биоптатов.

5. Выявить наличие зависимости между экспрессией простатического специфического антигена в биоптатах и продукцией молекулярно-биологических маркеров (Ьс1-2, Ьс1-х, циклин 01), возможности использования их как факторов прогноза для рака предстательной железы.

Научная новизна

Впервые изучены возможности метода радиоиммунного определения уровня простатического специфического антигена в сыворотке крови как показателя, отражающего молекулярно-биологические свойства рака предстательной железы и проведен корреляционный статистический анализ сопоставления клинической стадией опухоли и морфологическими факторами прогноза.

Практическая значимость

определяющий возможности и последовательность выполнения радиоиммунного, морфологического, иммуногистохимического методов диагностики заболеваний предстательной железы.

Иммуногистохимическое окрашивание с антителами к высокомолекулярному цитокератину является высокоинформативным способом диагностики гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы и может стать стандартным исследованием в сложных дифференциально-диагностических случаях. В качестве дополнительных факторов прогноза в материале биопсий при раке предстательной железы обосновано применение моноклональных антител к онкобелку Ьс1-2, циклину .

Основные положения, выносимые на защиту

1. При раке предстательной железы уровень простатического специфического антигена в сыворотке крови коррелирует со стадией опухолевого процесса, наличием регионарных и отдаленных метастазов по классификации ТИМ.

2. У больных с доброкачественной железистой гиперплазии на повышение уровня сывороточного простатического специфического антигена влияют: воспалительные процессы (ПСА 11,78±9,42 нг/мл), злокачественные новообразования, локализованные вне предстательной железы (ПСА 7,02±2,8 нг/мл) и мочекаменная болезнь (ПСА 10,53±4,1 нг/мл)

3. Статистический анализ по методу Стьюдента выявил достоверные различия средних уровней простатического специфического антигена для доброкачественной железистой гиперплазии и рака предстательной железы, простатической интраэпителиапьной неоплазии и рака предстательной железы. Достоверных различий в уровнях простатического специфического антигена при простатической

интраэпителиальной неоплазии и доброкачественной железистой гиперплазией не выявлено.

4. Наличие воспалительной инфильтрации в ткани предстательной железы достоверно коррелирует с повышением уровня простатического специфического антигена (1= 2,25, Р<0,05)

6. Выраженность продукции циклина при раке предстательной железы обратно коррелирует со значением индекса злокачественности по Глисону, являясь дополнительным прогностическим фактором

Апробация работы Состоялась 20 января 2006 года на научно-практической конференции в ФГУ "Российский научный центр Рентгенорадиологии Росздрава"

Публикации

По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в практическую деятельность ФГУ "РНЦРР Росздрава".

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 161 российский и зарубежный источники литературы. Работа иллюстрирована 2 таблицами и 50 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Нами проанализированы результаты определения уровня простатического специфического антигена радиоиммунным методом в сыворотке крови 102 пациентов с заболеваниями предстательной железы, получавших лечение в ФГУ "РНЦРР Росздрава". Во всех случаях использовали наборы ПША^БА, ЬптшкЛесЬ.

Таблица 1 Распределение пациентов по возрасту

Гистологический возраст 41-50 51-60 61-70 71-80 81-90

Диагноз Число Больных

Железистая гиперплазия 34 2 5 11 16 0

Простатическая

интраэпителиальн 20 1 5 5 8 1

ая неоплазия

Аденокарцинома 48 0 И 25 9 3

Всего 102 3 21 41 33 4

Также всем пациентам выполнена трансректальная мультифокальная биопсия предстательной железы под контролем сонографии.

Гистологические заключения давались в соответствии с гистологической классификацией заболеваний предстательной железы, ВОЗ (2002 г). В случае аденокарциномы простаты давалась оценка степени злокачественности с определением индекса злокачественности по Глисону.

Иммуногистохимическое исследование осуществлялось со следующими антителами: Простатический специфический антиген (11Ти-Р8А-28А4,

Novocastra), высокомолекулярный цитокератин (N1553,Dako), bcl-2 (N 1587, Dako), bcl-x (A3535, разведение 1:1500, Dako), Циклин D1 (клон DCS-6, разведение 1:20, Novocastra Laboratories Ltd). В качестве проявочной системы применяли наборы LSAB 2, CSA (Dako). Статистическая обработка выполнена в программе Statistica, StatSoft Inc..

Результаты исследования и их обсуждение

Определение уровня простатического специфического антигена в сыворотке крови у 34 пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии показало, что в 64,7% случаев он находился в т.н. "серой зоне" (4-8 нг/мл) и выше.

Детальный анализ выявил следующие факторы, которые у пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии связаны с высоким уровнем простатического специфического антигена в сыворотке крови: воспалительная инфильтрация в ткани предстательной железы (11,78±9,42 нг/мл), наличие у больных качестве сопутствующих заболеваний мочекаменной болезни (10,53±4,1 нг/мл), злокачественных новообразований, по поводу которых до этого они получали лечение (7,02±2,8 нг/мл).

Статистический анализ показал, что наличие воспалительной инфильтрации в ткани предстательной железы достоверно коррелирует с повышением уровня простатического специфического антигена (t= 2,25, Р<0,05).

Доброкачественная железистая гиперплазия 34 пациента возраст 96 -19 Ш (67,97± 8,19года) ПСА 1,33 - 27 иг/мл (8,44*7,42 иг/ил)

ПСА < 4 нг/мл 12 (35,3%) пациентов возраст 53 - 77 лег 67,1±6,97 года

ПСА » 8-20 нг/мл 7 (20,6%) пациентов возраст 50 - 78 лет б7,14±7,99года

ПСА» 4-8 нг/мл 9 (26,5%) пациентов возраст 51 - 79лег 68,75±9,5 года

ПСА > 20 нг/мл <» (17,7%) пациентов возраст 53 - 77 лет б9±10,03года

Рисунок 1 Распределение пациентов на группы в зависимости от уровня ПСА среди пациентов с ДГПЖ.

Для 20 пациентов с простатической интраэпителиальной неоплазией доля с повышенным уровнем простатического специфического антигена была аналогична доброкачественной гиперплазии предстательной железы (70% случаев). При этом в 35% случаев уровень сывороточного простатического специфического антигена находился в "серой зоне".

Корреляционный анализ не выявил значимых зависимостей между возрастом пациентов и уровнем простатического специфического антигена

Достоверных различий в уровне простатического специфического антигена между простатической интраэпителиальной неоплазии низкой и высокой степени также не выявлено.

ИроС*а*ичеекая интряэпителиальная неоплазм • , , 20 пациентов , ',,,■«

¡1 1 I I ! 1 ! ! I ! » I 1 < ! I I ! 2 1 ! ) 1 I I ! г ! 1

возраст 43-83 лет, среднйй возраст 66,2±9,76 года' ' I ПСАОД-ОДнг/м* нг/мл) '

----ПСА < 4 нг/мл -

: 6 (30 %) па циентов возраст 70- ЗЗлег - " - 76±5,6 гада. -

----ПСА= 4-8 нг/мл . I

; 7 (35%) пациентов ввзрает59-78 лет : " Щ|4±6Д -

Рисунок 2 Распределение пациентов на группы в зависимости от уровня ПСА среди пациентов с простатической интраэпителиальной неоплазией

В группе рака предстательной железы (48 пациентов) уровень простатического специфического антигена только в 10% случаев находился в "серой зоне" (4,17% случаев) и соответствовал нормальным значениям (6,15% случаев). При этом значения простатического специфического антигена превышали 20 нг/мл в 64% случаев.

Статистический анализ с использованием 1-критерия Стьюдента показал, что размеры опухоли (Т, ТЫМ) в группе со значениями простатического специфического антигена до 20 нг/мл достоверно ниже, чем среди пациентов с величиной простатического специфического антигена более 50 нг/мл (1= 4,4, Р<0,05).

Регионарное метастазирование (И, ТЫМ) чаще встречается в группе с высоким уровнем простатического специфического антигена (более 50

- ПСА>-8 нг/мл -. 7 (35%). пациевтов в<?зрагг43- бблет 57^3^7,9 г6да. :"

нг/мл) (t=3,9, р 0,05). Данные группы также достоверно различаются по частоте встречаемости отдаленного метастазирования (t=3,9, р 0,05).

':¡:Рак:bjwcürita**желе^ : ¡: 48 пациентов ' ''

■! бсреднЬи fálftffi^Sforiaj

ПСА= 20-50 нг/мл -ГГ (22,9%У пациентов

возраст 54- 82 лет - -66,8±7,9Í года. ::

ПСА > 50нг/мл - --пациентов

возраст 55- 8Глет 6ó,íl±7,6 года.

-ПСА<20 нг/мл

возраст54- 76 лет 66,82±5,Í5 года.

;; ПС А <4 яг/мл ; -3 (6,25%)пациентов возраст 65 лет. _

П€А4~8н1Умл 2(4,17%) пациентов возраст 65- 7©:лет

ПСА 8- 20 нг/мл 12(25%J пациентов ~ возраст 54- 76 лет _ 67,17±5,-96года.

Рисунок 3 Распределение пациентов на группы в зависимости от уровня

ПСА среди пациентов с РПЖ.

ПСА > 20 нг/мл ПСА > 50 нг/мл

Рисунок 4 Сравнительная оценка групп пациентов с различными уровнями ПСА и стадией опухолевого процесса по классификации ТТЧМ

В группе пациентов с высоким значением простатического специфического антигена (более 50нг/мл ) достоверно выше величина индекса злокачественности по Глисону, чем в группе со значениями простатического специфического антигена (20-50 нг/мл) (1= 2,4, Р<0,05). Аналогичные различия установлены для индекса Глисона и размеров опухоли (1=3,23, р 0,05).

Прямая корреляционная зависимость установлена между степенью злокачественности по Глисону и наличием отдаленных метастазов (г=0,32, р 0,05).

" 11 I — ■

ПСА 20-50 нг/мл ПСА > 50 нг/мл

Рисунок 5 Сравнительная оценка групп пациентов с различными показателями индекса злокачественности по Глисону и стадией опухолевого процесса по классификации ТИМ

При иммуногистохимическом исследовании материала биоптатов доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, рака предстательной железы с моноклональными антителами к простатическому специфическому антигену во всех 102 (100%) случаях установлен позитивный тип окрашивания секреторного эпителия.

При доброкачественной железистой гиперплазии преобладал интенсивный * цитоплазматический тип окрашивания (73,53% случаев). Слабое

цитоплазматическое окрашивание установлено в 2,9% случаев.

При простатической интраэпителиальной неоплазии доля случаев с окрашиванием слабой интенсивности возрастает до 10% случаев.

Рисунок 6. Варианты иммуногистохимического окрашивания эпителиальных клеток при железистой гиперплазии. Антитела к ПСА (11Ти-Р8А-28А4, Коуосавй-а), хромоген- ДАБ. 1- интенсивный цитоплазматический тип окрашивания, 2- очень интенсивное цитоплазматическое окрашивание, 3- умеренная интенсивность окрашивания, 4- окрашивание слабой интенсивности

Рак предстательной железы характеризовался преимущественно мозаичным типом окрашивания железистых структур (83,33% случаев), когда внутри эпителиальной структуры сочетались участки слабой и выраженной интенсивности.

Однако площадь железистых структур в раке предстательной железы намного превышает площадь таковых в доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии.

Статистический анализ не выявил значимых корреляционных связей между уровнем простатического специфического антигена в сыворотке крови и экспрессией простатического специфического антигена в биоптатах рака предстательной железы, предраковых, гиперпластических процессов. Аналогичные данные в отношение анализа операционного материала при раке предстательной железы приведены в литературе.

12 3 4

Рисунок 7 Варианты иммуногистохимического окрашивания клеток рака предстательной железы в зависимости от значения суммы баллов по Глисону Антитела к ПСА, хромоген - ДАБ. 1- интенсивный цитоплазматический тип окрашивания, 2- интенсивное цитоплазматическое окрашивание с умеренно выраженным окрашиванием секрета в просвете желез, 3- умеренный с участками интенсивного окрашивания, 4- умеренная цитоплазматическая экспрессия

Таким образом, анализ экспрессии простатического специфического антигена при иммуногистохимическом исследовании в тканях доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, рака предстательной железы не может считаться дифференциально-диагностическим маркером для данных патологических процессов. Отсутствие корреляционных связей между уровнем простатического специфического антигена в сыворотке крови и его экспрессией в биоптатах гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы не позволяет считать изолированную оценку экспрессии простатического специфического антигена прогностическим фактором.

Чтобы оценить возможности высокомолекулярного цитокератина в качестве дифференциально-диагностического маркера при доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии и раке предстательной железы нами использовались антитела к высокомолекулярному цитокератину (Ш553,1Эако).

При доброкачественной железистой гиперплазии преобладало непрерывное окрашивание базального слоя железистых структур (93,75% случаев). В случае простатической интраэпителиальной неоплазии сочетались железистые структуры с различной долей окрашенных клеток базального слоя.

Рак предстательной железы во всех 48 случаях характеризовался отсутствием экспрессии высокомолекулярного цитокератина в железистых структурах, что позволяет на дооперационном этапе проводить дифференциальную диагностику доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии и рака предстательной железы.

Для поиска дополнительных прогностических факторов проведено исследование с антителами к онкобелку Ьс1-2, являющемуся ингибитором апоптоза.

Он определялся во всех случаях в базальном слое железистых структур простатической интраэпителиальной неоплазии, доброкачественной железистой гиперплазии, что соответствует данным литературы

Нами проанализировано 24 случая рака предстательной железы. Окрашивание с антителами к Ьс1-2 было отрицательным в большинстве умеренно дифференцированных аденокарцином предстательной железы и лишь в одном случае у пациента с Т4ШМ0 стадией опухолевого процесса было положительным.

В секреторном эпителии доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, клетках рака предстательной железы во всех случаях наблюдалось интенсивное цитоплазматическое окрашивание с антителами к онкобелку Ьс1-х.

При окрашивании с моноклональными антителами к циклину 01, регулирующему активность циклин-зависимых киназ в фазе

клеточного цикла и являющегося корепрессором рецепторов андрогена установлено, что позитивное окрашивание установлено преимущественно в опухолях с индексом злокачественности по Глисону 5-6. Когда индекс злокачественности по Глисону увеличивался до 8, экспрессия циклина в опухолевых клетках отсутствовала.

Обнаружено также, что в железистых структурах доброкачественной железистой гиперплазии, сопровождающих рак предстательной железы также присутствует интенсивное ядерное окрашивание секреторного эпителия.

Выраженность продукции циклина при раке предстательной железы обратно коррелирует со значением индекса злокачественности по Глисону, являясь дополнительным прогностическим фактором.

к Я X а! Я Я

О.

ьг о о.

СО &

Г 5-6 Г 6-8

Индекса Глисона

Рисунок 8. Варианты иммуногистохимического окрашивания при раке предстательной железы с моноклональными антителами к циклину Б1, хромоген - ДАБ

Практические рекомендации.

Разработан алгоритм, определяющий возможности и последовательность выполнения радиоиммунного, морфологического, иммуногистохимического методов в дооперационной диагностике заболеваний предстательной железы. В работе доказано, что иммуногистохимическое окрашивание с антителами к высокомолекулярному цитокератину является высокоинформативным способом диагностики гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы и должно стать стандартным исследованием в сложных дифференциально-диагностических случаях. При раке предстательной железы в качестве дополнительных факторов прогноза в материале биопсий обосновано применение моноклональных антител к онкобелку Ьс1-2, циклину Б1.

Выводы

1. Установлено, что средние значения простатического специфического антигена в сыворотке крови при гиперпластических процессах в сочетании с воспалительными процессами в предстательной железе (11,78±9,4 нг/мл), достоверно выше чем при гиперпластических процессах предстательной железы без сопутствующего воспаления (5,94±3,9 нг/мл)(1= 2,25, Р<0,05).

2. Впервые показано, что уровень простатического специфического антигена в сыворотке крови пациентов с раком предстательной железы коррелирует со стадией опухолевого процесса по классификации ТЫМ, ПСА и Т (1=0,51, р 0,05), ПСА и N (г=0,44, р 0,05), ПСА и М (1=0,43, р 0,05) и является дополнительным прогностическим фактором

3. Установлено наличие достоверных статистических различий между средними значениями простатического специфического антигена в сыворотке крови групп пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии (8,44±1,36) и раком предстательной железы (61,53±10,01) (1=4,54), а также простатической интраэпителиальной неоплазии (8,3±1.63) и раком предстательной железы (1=3,64).

4. Выявлено отсутствие статистически значимые корреляционные связи между уровнем простатического специфического антигена в сыворотке крови и экспрессией простатического специфического антигена в ткани доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, рака предстательной железы.

5. Впервые показано, что уровень экспрессии высокомолекулярного цитокератина в эпителии базального слоя железистых структур является ведущим дифференциально-диагностическим критерием в определении характера процесса (простатическая интраэпителиальная неоплазия и рак предстательной железы) в материале биопсии.

6. Обнаружено, что ведущим дополнительным дифференциально-диагностическим маркером в определении характера процесса может

стать реакция на выявление онкобелка bcl-2 в эпителии базального слоя доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии.

7. Установлено, что выраженность продукции циклина D1 при раке предстательной железы обратно коррелирует со значением индекса злокачественности по Глисону, являясь дополнительным прогностическим фактором.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1) Ел-Байуоми А.С.А., Галил-Оглы Г.А, Мельникова Н.В.// Иммуногистохимическая оценка экспрессии простатического специфического антигена (ПСА) и высокомолекулярного цитокератина в эпителии новообразований предстательной железы".-//Вестник РУДН, серия Медицина.-2005.-т.29.-1 .-с.57-59

2) Галил-Оглы Г.А, Ел-Байуоми А.С.А., Берщанская A.M., Чазова H.JI., Мельникова Н.В.//"Возможности морфологической диагностики новообразований предстательной железы"// Современные технологии в онкологии: материалы VI Всероссийского съезда онкологов. - Т.1.- М., 2005.-c.127.

3) Галил-Оглы Г.А, Мельникова Н.В., Ел-Байуоми А.С.А.// "Сравнительная оценка экспрессии простатического специфического антигена (ПСА) и высокомолекулярного цитокератина в эпителии доброкачественных и злокачественных новообразований предстательной железы" "Научно-технический прогресс отечественной лучевой диагностики и лучевой терапии"//Материалы конференции, посвященной 80-летию Российского научного центра рентгенорадиологии Министерства здравоохранения Российской Федерации (1924-2004) Москва, "Вече" 2004 с.64-65.

4) Галил-Оглы Г.А., Мельникова Н.В., Ел-Байуоми А.С.А.//"Сравнительная оценка экспрессии простатического

специфического антигена (ПСА) и высокомолекулярного цитокератина в эпителии доброкачественных и злокачественных новообразований предстательной

жeлeзы'7/http://vestnik.rnclт.ru/vestnik/v3/papers/gagl3_v3.htшl. 5) Галил-Оглы Г.А., Ел-Байуоми А.С.А., Алипченко JI.A., Берщанская A.M., Чазова H.JL, Мельникова Н.В.//"Клинико-морфологическое значение уровня простатического специфического антигена и молекулярно-биологических маркеров при раке предстательной железы"// Материалы Всероссийского научного форума «Радиология 2005».- М., - 2005.-c.89.

Ел-Байуоми А.С.А

Проанализирован гистологический материал игольных биопсий, трансуретральных резекций, радикальных простатэктомий 102 пациентов в возрасте 43-83 лет, полученный в РНЦРР в 2003-2004гг. Во всех случаях определялся уровень ПСА в сыворотке крови пациентов. Иммуногистохимическое исследование с моноклональными антителами к ПСА, высокомолекулярному цитокератину и молекулярно-биологических маркеров (bcl-2, bcl-x, циклин D1), проведено на материале парафиновых блоков иммунопероксидазным методом. В материале биоптатов простаты экспрессия ПСА выявляется иммуноморфологическим методом в эпителиальных клетках доброкачественных заболеваний предстательной железы, простатической интраэпителиапьной неоплазии (ПИН), рака предстательной железы. Иммуногистохимическое исследование с моноклональными антителами к высокомолекулярным цитокератинам выявляется в базальном слое как доброкачественных железистых гиперплазии, так и ПИН, отсутствуя в ацинарных структурах рака предстательной железы, что может служить эффективным дифференциально-диагностическим тестом. При раке предстательной

железы в качестве дополнительных факторов прогноза в материале биопсий обосновано применение моноклональных антител к онкобелку bcl-2, циклину D1.

EI-Bayoumy A.S.A

"Morpho-functional value of prostate specific antigen and high molecular cytokeratin in various prostatic diseases"

Prostate Specific Antigen (PSA) is an extremely useful marker for prostate cancer. Differential diagnosis of adenocarcinoma from other proliferative conditions in the prostate is often problematic. 102 patients were surveyed with various diseases prostate which surgical operation is appointed. Blood was taken and with help of commercial kits concentration of serum PSA was estimated by immunoradiometric assay. During the operation the prostate biopsies have been received, they fixed and with help of commercial kits, the value of PSA and high molecular cytokeratin were estimated in prostate tissue. Immunohistochemistry was carried out by using monoclonal antibodies for PSA, high molecular weight cytokeratin, molecular biological markers (bcl-2, bcl-x, cyclin Dl). High molecular weight cytokeratin specifically present in basal cells of the prostate could clearly demonstrate the presence or absence of these cells in the proliferating glands and thus provide an important clue in cancer diagnosis. The addition of using monoclonal antibodies for onco-proteins bcl-2, cyclin Dl it might be useful for prognosis in biopsy material.

Подписано в печать 02.02.06 Формат издания 60x90 1/16. Тираж 100 экз. Заказ № 002 ООО «Копировальный мир», г.Москва, Ленинский пр-т, дом 6д

IöoQ А

Tôïét^

-3 0 29

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава 1 Современное состояние проблемы

1.1. Роль радиоиммунных методов в дооперационной диагностике гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы

1.2. Морфологическая диагностика доброкачественных и злокачественных новообразований предстательной железы

1.3. Иммуногистохимическая характеристика доброкачественных и злокачественных новообразований предстательной железы

Глава 2 Собственный клинический материал и методы исследования

2.1. Материалы исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Радиоиммунное определение уровня простатического специфического антигена в сыворотке крови

2.2.2. Гистологическое исследование

2.2.3. Иммуногистохимическое исследование

2.4 Статистическая обработка

Глава 3 Результаты радиоиммунного и морфологического исследования гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы

3.1. Радиоиммунная диагностика заболеваний предстательной железы

3.2. Морфологическая диагностика новообразований предстательной железы

3.3. Иммуноморфологическая диагностика новообразований предстательной железы

3.3.1 Оценка экспрессии простатического специфического антигена при гиперпластических, предопухолевых и опухолевых заболеваниях предстательной железы

3.3.2 Значение оценки экспрессии высокомолекулярного цитокератина в эпителии при гиперпластических, предопухолевых и опухолевых заболеваниях предстательной железы

3.3.3 Изучение молекулярно-биологических маркеров при раке предстательной железы

Глава 4 Обсуждение результатов исследования

4.1. Место определения уровня ПСА в диагностике гиперпластических, предраковых процессов и рака предстательной железы

4.2. Значение морфологического исследования в диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований предстательной железы

4.3. Место иммуноморфологического исследования в диагностике новообразований предстательной железы

4.3.1. Оценка экспрессии простатического специфического антигена при гиперпластических, предраковых процессах и раке предстательной железы

4.3.2. Применение высокомолекулярного цитокератина как диагностического маркера при заболеваниях предстательной железы

4.3.3. Молекулярно-биологические особенности рака предстательной железы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональное значение простатического специфического антигена и высокомолекулярного цитокератина при заболеваниях предстательной железы"

Актуальность проблемы

Опухоли предстательной железы являются наиболее распространенной проблемой в онкоурологии, особенно, для мужчин среднего и пожилого возраста [117]. В 2003 году в структуре онкологической заболеваемости мужского населения Российской Федерации рак предстательной железы занимал четвертое место [1]. Улучшение диагностики отражает рост эффективности радикального лечения рака предстательной железы [155].

Летальность на первом году жизни после установления данного диагноза за последнее десятилетие снизилась с 31,6 до 21,2% [1]. Особенно важна точная дифференциальная диагностика предраковых процессов и рака предстательной железы. Простатические интраэпителиальные неоплазии обнаруживаются во всех возрастных группах [17] и составляют 10% среди гиперпластических процессов предстательной железы.

Большинство диагностических программ включает анализ крови на простатический специфический антиген (ПСА) [155].

Однако, будучи органоспецифичным, простатический специфический антиген не является специфическим маркером рака предстательной железы, с чем связано большое число ложноположительных заключений при его использовании в качестве теста для выявления рака [9]. При этом рост уровня ПСА в диапазоне 4-10 нг/мл, т.н. «серой зоне», более чем в 70% случаев обусловлен доброкачественной железистой гиперплазией [155].

Морфологическая дифференциальная диагностика доброкачественных железистых гиперплазий, простатических интраэпителиальных неоплазий (ПИН) и высокодифференцированных аденокарцином простаты также нередко затруднительна. Однако, по данным литературы, при иммуноморфологическом исследовании с антителами к высокомолекулярному цитокератину в эпителии доброкачественных новообразований простаты получено позитивное окрашивание эпителия базального слоя, в противоположность раку предстательной железы[155].

Учитывая вышеизложенное, становится очевидным, что оптимизация дооперационной диагностики новообразований предстательной железы является актуальной проблемой. цель исследования - сравнительная оценка скринингового метода радиоиммунного определения уровня простатического специфического антигена в сыворотке крови с результатами иммуногистохимического анализа экспрессии простатического специфического антигена, высокомолекулярного цитокератина, молекулярно-биологических маркеров в ткани предстательной железы при доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, раке предстательной железы.

Задачи исследования

1. Провести анализ факторов, влияющих на уровень простатического специфического антигена в сыворотке крови у пациентов с заболеваниями предстательной железы

3.Изучить особенности экспрессии простатического специфического антигена в материале биоптатов пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии, раком предстательной железы.

5.Выявить наличие зависимости между экспрессией простатического специфического антигена в биоптатах и продукцией молекулярно-биологических маркеров (bcl-2, bcl-x, циклин D1), возможности использования их как факторов прогноза для рака предстательной железы.

Научная новизна

Практическая значимость

Для повышения эффективности дооперационной морфологической диагностики доброкачественных, предраковых процессов и рака предстательной железы впервые разработан диагностический алгоритм, определяющий возможности и последовательность выполнения радиоиммунного, морфологического, иммуногистохимического методов диагностики заболеваний предстательной железы.

Апробация работы

Состоялась 20 января 2006 года на научно-практической конференции в фру "Российский научный центр Рентгенорадиологии Росздрава"

Публикации

По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ

Основные положения, выносимые на защиту

3. Статистический анализ по методу Стьюдента выявил достоверные различия средних уровней простатического специфического антигена для доброкачественной железистой гиперплазии и рака предстательной железы, простатической интраэпителиальной неоплазии и рака предстательной железы. Достоверных различий в уровнях простатического специфического антигена при простатической интраэпителиальной неоплазии и доброкачественной железистой гиперплазией не выявлено.

4. Наличие воспалительной инфильтрации в ткани предстательной железы достоверно коррелирует с повышением уровня простатического специфического антигена (t= 2,25, Р<0,05)

5. Уровень простатического специфического антигена в серой зоне (4-8нг/мл) установлен у 18 из 102 (17,65%) пациентов, при этом рак предстательной железы выявлен в 11,1% случаев, простатическая интраэпителиальная неоплазия составила 38,9% случаев а доброкачественная железистая гиперплазия - 50% случаев. 6. Выраженность продукции циклина D1 при раке предстательной железы обратно коррелирует со значением индекса злокачественности по Глисону, являясь дополнительным прогностическим фактором

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в практическую деятельность ФГУ "РНЦРР Росздрава".

Объем и структура диссертации

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр

Выводы

2. Впервые показано, что уровень простатического специфического антигена в сыворотке крови пациентов с раком предстательной железы коррелирует со стадией опухолевого процесса по классификации TNM, ПСА и Т (r=0,51, р 0,05), ПСА и N (r=0,44, р 0,05), ПСА и М (r=0,43, р 0,05) и является дополнительным прогностическим фактором

3. Установлено наличие достоверных статистических различий между средними значениями простатического специфического антигена в сыворотке крови групп пациентов с доброкачественной железистой гиперплазии (8,44±1,36) и раком предстательной железы (61,53±10,01) (t=4,54), а также простатической интраэпителиальной неоплазии (8,3±1.63) и раком предстательной железы (t=3,64).

6. Обнаружено, что ведущим дополнительным дифференциально-диагностическим маркером в определении характера процесса может стать реакция на выявление онкобелка bcl-2 в эпителии базального слоя доброкачественной железистой гиперплазии, простатической интраэпителиальной неоплазии.

Практические рекомендации.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр, Москва

1. Аксель Е.М.// Заболеваемость злокачественными новообразованиями мочевых и мужских половых органов в России //"0нкоурология",2005, № 1, http://netoncology.ru/view.php7icH859.

2. Аничков Н.М., Плотникова Н.А. Архив патологии.-2001.-т.63.-№5.-с.44-50.

3. Воробьев А. В., // Обзор важнейших событий в онкоурологии// Пркт. Онк. 2005, Т 6, No 1, с.55-64.

4. Воробьев А. В.// Скрининг мужского населения, стандартное обследование пациентов, классификация рака предстательной железы// Пркт. Онк., 2001, №2 (6) (июнь).

5. Гундорова Л.В.//Дифференциальная диагностика гиперпластических и опухолевых процессов предстательной железы (иммуногистохимичесое и плоидометрическое исследование).// Диссерт.д.м.н. Москва, 2005

6. Каприн А.Д., Ананьев А.П., Амосов Ф.Р., Гафанов Р.А.//Диагностика рака предстательной железы//Вопросы онкологии.- 1999; т.45-№1: с.20-5.

7. Карселадзе А.И., Рытин И.Э., Будунова И.В.// Иммуногистохимическое исследование простатического специфического антигена в раке предстательной железы//Архив патологии.-2004.-т.66.-№2.-с.З-7.

8. Ковыршина Л.А. дисс. к.м.н //Клинико-морфологическая оценка уровней ПСА при заболеваниях предстательной железы// С-Петербург, 2002.

9. Любимова Н.В., Кушлинский Н.Е., Стогова Э.В. и др. //Клиническое значение общего и свободного простатического специфического антигена при раке предстательной железы // Клин. лаб. диагностика. 1998. - №2. -с. 6-9.

10. Медведев В.Л., Мационис А.Э., Медведева Л.А.// Клиническое значение гистологических типов рака предстательной железы// Урология.- 2003.-№6.-с. 10-14.

11. Переверзев О.С., Коган М.Л. // Рак простаты // X.: Факт. 2004. 231 с.

12. Петров С.Б., Харченко П.В.// диагностика локализованного рака предстательной железы// Урология. -2005.-№ 1.-е. 19-22.

13. Пожарисский К.М., Воробьев А.В. // Патоморфологическая характеристика и особенности карциномы предстательной железы. Значение простатической интраэпителиальной неоплазии// Практическая Онкология,- 2001.-т. .-№2(июнь).-с. .

14. Романенко А.В.// гиперплазия предстательной железы, в кн "Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека" под ред. С.В. Петрова и Н.Т. Райхлина- 3-е изд., перераб и доп.- Казань, 2004; с.143-149.

15. Самсонов В.А. //Опухоли предстательной железы в кн. "Патолого-анатомическая диагностика опухолей" т.2 /под ред. Н.А. Краевского, А.В. Смольянникова, Д. С. Саркисова. 4-е изд., перераб и доп.- М.: Медицина, 1993, с.338-348.

16. Ткачева Г.А., Балаболкин М.И., Ларичева И.П. Радиохимические методы исследованиям., "Медицина", 1983.

17. Abate Shen С., Shen М.М. //Molecular genetics of prostate cancer// Genes Dev. 2000 - v. 14. - p. 2410-243.

18. Agus D., Cordon-Cardo C., Fox W., Drobnjak M., Koff A., Golde D., Scher H.// Prostate cancer cell cycle regulators: response to androgen withdrawal and development of androgen independence.// J. Natl. Cancer Inst., 1999, 91;p.l 869-1876.

19. Altay В., Kefi A., Nazli O., Killi R., Semerci В., Akar I.//Comparison of Gleason scores from sextant prostate biopsies and radical prostatectomy specimens.// Urol Int., 2001, v. 67-1; p. 14-8.

20. Amayo A., Obara W.//Serum prostate specific antigen levels in men with benign prostatic hyperplasia and cancer of prostate.// East Afr Med J., 2004;v.81-l(Jan); p 22-6.

21. Amin M.B., Schultz D.S., Zarbo R.J., Kubus J., Shaheen C.//Computerized static DNA ploidy analysis of prostatic intraepithelial neoplasia.//Arch Pathol Lab Med., 1993, v.l 17-8 (Aug); p.794-8.

22. Amin M.B., Schultz D.S., Zarbo R.J.// Analysis of cribriform morphology in prostatic neoplasia using antibody to high-molecular-weight cytokeratins.//Arch Pathol Lab Med., 1994, v.l 18-3 (Mar); p.260-4.

23. Amundson S.A., Myers T.G., Scudiero D., Kitada S., Reed J.C., Fornace A.J. Jr.// An informatics approach identifying markers of chemosensitivity in human cancer cell lines.//Cancer Res., 2000, 1;60-21 (Nov); p.6101-10.

24. Armitage T.G., Cooper E.H.// The value of the measurement of serum prostate specific antigen in patients with benign prostatic hyperplasia and untreated prostate cancer.//Brit. J. Urol.,1988, v. 62; p. 584.

25. Ayala A. G., Troncoso P., Ro J. Y. // Pathology in Incipient Neoplasia / Eds D. E. Henson, J. Albores-Saavedra. Philadelphia, 1993, p. 363-383.

26. Baisden B.L., Kahane H., Epstein J.L //Perineural invasion, mucinous fibroplasia and glomerulations: diagnostic features on prostate needle biopsy// Am J Surg Pathol., 1999, v.23-8 (Aug);p. 918-24.

27. Barnes DM.//Cyclin D1 in mammary carcinoma.// J Pathol., 1997,181; p.267-69.

28. Bauer J.J., Connelly R.R., Seterhenn I.A., et al.,// Biostatistical modeling using traditional variables and genetic biomarkers for predicting the risk for prostate carcinoma recurrence after radical prostatectomy.// Cancer, 1997, v. 79 5; p. 952-962.

29. Bjork Т., Ljungberg В., Piironen T.,et al., // Rapid exponential elimination of free prostate specific antigen contrasts the slow, capacity-limited elimination of PSA complexed to alpha-1-antichymotrypsin from serum.// Urol., 1998, v. 51-1-p. 57-62.

30. Bobrow M., et al. //Catalyzed reporter deposition, a novel method of signal amplification: Application to immunoassays.//J.Immunol.Meth., 1989;p. 125279.

31. Bocking A, Kiehn J, Heinzel-Wach M. //Combined histologic grading of prostatic carcinoma.//Cancer., 1982, v.15;50-2- (Jul); p.288-94.

32. Bonkhoff H, Remberger KM Diagnostic criteria and differential diagnosis of prostatic intraepithelial neoplasia// Pathologe., 1998, v.19-1 (Jan); p.33-41.

33. Bostwick D. G., Algaba F., Amin N. B. et al. //Consensus statement on terminology: recommendation to use atypical adenomatous hyperplasia in place of adenosis of the prostate.//Am. J. Surg. Pathol., 1994,-v. 18; p. 1069-1070.

34. Bostwick D.G., Qian J.//High-grade prostatic intraepithelial neoplasia.// Mod Pathol., 2004;v.l7-3(Mar.); p.360-79.

35. Bostwick D.G.//PSA current role in diagnostic pathology of the prostate.// J. Clin. Pathol., 1994, v. 102; p.531-537.

36. Brawer M.K., Large P.H. // PSA: its role in early detection, staging and monitoring of prostatic carcinoma.// Endourol., 1989, v. 3; p. 227.

37. Cadeddu J. A., Elashry O.M., Snyder O., et al.,// Effect of laparoscopic pelvic lymph node dissection on the natural history of D1 (T1-3, N1-3, MO) prostate cancer.// Urol., 1997, v. 50- 3; p 391-394.

38. Cadeddu J.A., Partin A.W., DeWeese T.L., Walsh P.C.// Long term results of radiation therapy for prostate cancer recurrence following radical prostatectomy.//J. Urol.,1998, v 159-1; p. 173-177, Discussion 177-178.

39. Cadeddu J.A., Stoianovici D., Kavoussi L.R.// Robotics in urologic surgery.// Urol., 1997, v. 49- 4; p. 501:507.

40. Carter H.B., Partin A.W., Oesterling J.E // The use of PSA in the management of patients with prostate cancer, The J. Hopkins experience.// In Clin. Asp. Of prostate cancer, New York, 1989; p. 247-254.

41. Carter H.B., Pearson J.D., Metter E.J., Brant L.J., Chan D.W., Andres R., et al.// Longitudinal evaluation of prostate specific antigen levels in men with and without prostate disease.// JAMA., 1992, v.267; p.2215-2220.

42. Carver B.S., Kattan M.W., Scardino P.T., Eastham J.A.// Gleason grade remains an important prognostic predictor in men diagnosed with prostate cancer while on finasteride therapy.// BJU Int., 2005, v.95- 4(Mar.); p.509-12.

43. Chatterjee В.//The role of the androgen receptor in the development of prostatic hyperplasia and prostate cancer.//Mol Cell Biochem., 2003,; v.253-1-2 (Nov); p.89-101. Review.

44. Cheng L., Paterson R.F., Beck S.D., Parks J.// Prostatic intraepithelial neoplasia: ah update.//Clin Prostate Cancer., 2004, v.3-1 (Jun); p.26-30. Review.

45. Chodak G.W., Kranc D.M., Puy L.A., et al.// Nuclear localization of androgen receptor in heterogeneous samples of normal, hyperplastic and neoplastic human prostate.// J. Urol., 1992, v. 147; p.798-803.

46. Cooner W., Mosly B.R., Rutherford C.// Prostate cancer detection in a clinical urological practice by TRUS, DRE and PSA.// J. Urol.,1990, v. 143; p. 114656.

47. Crane C.H., Rich T.A., Read P.W. et al.,// Pre-irradiation PSA predicts biochemical disease-free survival in patients treated with post-prostatectomy external beam irradiation.// Int. J. Radiation Oncol. Biol. Phys.,1997, v. 39- 3; p. 681-686.

48. Davidson D., Siroky M., Rudders R., et al.,// Prostatic intra-epithelial neoplasia is predictive of adenocarcinoma // Med. Pathol., 1994, v. 7; p.410.

49. Dillioglugil О., Leibamn B.D., Kattan M.W, Seal-Hawkins C., et al.,// Hazard rates for progression after radical prostatectomy for clinically localized prostate cancer.// Urol., 1997, v 50-1; p. 93-99.

50. Dovey Z., Corbishley C.M., Kirby R.S.// Prostatic intraepithelial neoplasia: a risk factor for prostate cancer// Can. J. Urol., 2005,; v. 12 Suppl. 1 (Feb.); p.49-52; discussion 99-100.

51. Epstein J.L. //Diagnostic criteria of limited adenocarcinoma of prostate on needle biopsy. Human Pathology., 1995,v. 26; p. 223-9.

52. Epstein J.L., Grignon DJ, Humphrey PA, et al. //Interobserver reproducibility in the diagnosis of prostatic intraepithelial neoplasia.// Am J Surg Pathol., 1995, v.19; p.873-86.

53. Feyaerts A., Delree A., Lorge F., et al.,// Recidive apres chirurgie radicale pour cancer prostatiques. Analyse des facteurs pronostiques, biologiques, et anatomopathologiques.// Acta Urol. Belg.,1997, v. 65-1; p. 11-18.

54. Fontana G., Governa N., Aime G., et al.,// Transurethral tissue vaporization: indications and limitations of the technique. Our experience in 105 cases.// Minerva Urol. Nefrol.,1997, v 49- 3; p. 173-177.

55. Fowler J.E. Jr., Pandey P., Bigler S.A., Yee D.T., Kolski J.M.,// Trends in diagnosis of stage Tla-b prostate cancer. Comment in: J. Urol. 1997; V158-N 5-P 1859:1860//J. Urol., 1997, v. 158-5; p 1849-1852.

56. Gaeta J.F., Asirwatham J.E., Miller G., Murphy G.P. //Histologic grading of primary prostatic cancer: a new approach to an old problem.//J Urol., 1980, v.123-5 (May); p.689-93.

57. Gleason D.F. Classification of prostatic carcinomas // Cancer Chemother. Rep., 1966,v.50; p. 125-128.

58. Gleason D.F., Mellinger G.T. and the Veterans Administration Cooperative Urological Recearch Group. Prediction of prognosis for prostatic adenocarcinoma by combined histological grading and clinical staging // J.Urol., 1974, v. Ill;p. 58-64.

59. Gleason D.F.//Histologie grading of prostate cancer: a perspective.// Human Pathology, 1992, v.23; p.273-9.

60. Goeman L., Joniau S., Ponette D. et al.// Is low-grade prostatic intraepithelial neoplasia a risk factor for cancer?//Prostate Cancer Prostatic Dis.,2003, v.6-4; p. 305-10.

61. Graves H.C.B., Sensbaugh G.F., Bleke R.T. //Postcoital detection of nonspecific semen protein.// New Engl. J. Med., 1985; p. 312-338.

62. Gumus B.H., Nese N., Gunduz M.I., Kandiloglu A.R., Ceylan Y., Buyuksu C.//Does asymptomatic inflammation increase PSA? A histopathological study comparing benign and malignant tissue biopsy specimens.//Int Urol Nephrol., 2004, v.36-4; p. 549-53.

63. Gupta A., Aragaki C., Gotoh M., Masumori N., Ohshima S., Tsukamoto Т., Roehrborn C.G.//Relationship between prostate specific antigen and indexes of prostate volume in Japanese men.//J Urol., 2005, v. 173-2 (Feb); p.503-6.

64. Habib F.K., Odoma S., Busuttil A., et al. //Androgen receptors in cancer of the prostate. Correlation with the stage and grade of the tumor.// Cancer Res., 1986, v. 47; p.2351-6.

65. Halushka M.K., Kahane H., Epstein J.L.//Negative 34betaE12 staining in a small focus of atypical glands on prostate needle biopsy: a follow-up study of 332 cases.// Hum Pathol., 2004, v.35-1 (Jan); p.43-6.

66. Helpap B.//Future directions in research of prostate carcinoma.//Pathol Res Pract., 1993, v. 189-5 (Jun); p.497-509. Review.

67. Herawi M., Parwani A.V., Irie J., Epstein J.L.// Small glandular proliferations on needle biopsies: most common benign mimickers of prostatic adenocarcinoma sent in for expert second opinion.//Am J Surg Pathol., 2005, 29-7 (Jul); p.874-80.

68. Homma Y., Akaza H., Okada K., et al.,// Pre-operative endocrine therapy for clinical stage A2, B, and С prostate cancer: an interim report on short-term effects./ prostate cancer study group//Int. J. Urol., 1997, v. 4- 2; p.l44-151.

69. Hsieh T.F., Chang C.H., Chen W.C., Chou C.L., Chen C.C., Wu H.C.// Correlation of Gleason scores between needle-core biopsy and radical prostatectomy specimens in patients with prostate cancer.// J Chin Med Assoc., 2005, v.68-4(Apr); p. 167-71.

70. Humphrey P. A.// Gleason grading and prognostic factors in carcinoma of the prostate.//Mod Pathol., 2004, v.17-3 (Mar); p.292-306.

71. Kabalin J.N., Bite G., Doll S., //Neodymium:YAG laser coagulation prostatectomy: 3 years of experience with 227 patients.// J. Urol., 1996, v. 1551 (Jan.); p. 181-185.

72. Kallakury B.V., Sheehan C.E., Ambros R.A., Fisher H.A., Kaufman R.P.Jr., Ross J.S. //The prognostic significance of p34cdc2 and cyclin D1 protein expression in prostate adenocarcinoma.//Cancer (Phila.), 1997, v.80; p.753-763.

73. Keetch D.W., Humphreg P., Stahl K., et al.,// Morphometry analysis and clinical follow up of isolated prostatic intra-epithelial neoplasia in needle biopsy of the prostate //J. Urol., 1995, v. 154; p.347-351.

74. Keshgegian A.A., Johnston E., Cnaan A.//Bcl-2 oncoprotein positivity and high MIB-1 (Ki-67) proliferative rate are independent predictive markers for recurrence in prostate carcinoma.// Am J Clin Pathol., 1998, v. 110-4; p.443-9.

75. Keyser D., Kupelian P.A., Zippe C.D., et al.// Stage Tl-2 prostate cancer with pretreatment prostate specific antigen level 10 ng/ml: radiation therapy or surgery?!// Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys.,1997, v. 38- 4; p. 723-729.

76. Kim H.L., Yang X.J.//Prevalence of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia and its relationship to serum prostate specific antigen// Inter. Braz. J. Urol., 2002, v. 28-5 (sept.- oct.); p. 413-417.

77. Kolaf Z., Murray P.G., Scott K., Harrison A., Vojtcsek B. and Dusek J.//Relation of Bcl-2 expression to androgen receptor, p21WAFl/CIPl, and cyclin D1 status in prostate cancer//J Clin Pathol: Mol Pathol, 2000, v.53; p. 15-18.

78. Kozuka Y., Imai H., Yamanaka M. et al.// Histopathological features of prostate cancer//Nippon Rinsho., 2005, v. 63-2 (Feb.); p.231-6. Review. Japanese.

79. Krajewska M., Krajewski S., Epstein J.L. et.al.,//Immunohistochemical analysis of bcl2, Bax, bclx and mcl-1 expression in prostate cancers.//Am. J. Pathol., 1996, v. 148-5 (May); p. 1567-76.

80. Kruslin В., Tomas D., Cupic H., Belicza M.//Periacinar refraction clefting in prostatic needle core biopsies: an important diagnostic criterion or a simple artefact?// Virch.Archive, 2003, v.443; p.524-7.

81. Kwak C., Ku J.H., Kim Т., Park D.W., Choi K.Y., Lee E., Lee S.E., Lee C.//Effect of subclinical prostatic inflammation on serum PSA levels in men with clinically undetectable prostate cancer.// Urology, 2003, v.62-5 (Nov); p. 854-9.

82. Lelja H. //A kallikrein-like serine protease in prostatic fluid leaves the predominant seminal vesicle proteins. //J. Clin. Invest., 1985, v.76; p. 18992006.

83. Leroy X., Aubert S., Villers A., Ballereau C. et al.//Minimal focus of adenocarcinoma on prostate biopsy: clinicopathological correlations// J.Clin.Pathology, 2003,v.56; p.230-232.

84. Li T.S., Belling C.G. //Isolation and characterization of two specific antigen of human seminal plasma. // Fertie Sterie, 1973, v. 21; p. 174-180.

85. Light D.J., Lange P.H., Ercole C.J., et al.// Serum PSA and the utility of isotopic bone scan (BOS) in the monitoring of patients with carcinoma of the prostate// Pros. Amer. Ass. Clin. Oncol., 1988.

86. Linton H.J., Marks L.S., Millar L. S., et.al.,// Benign Prostate-specific Antigen (BPSA) in Serum Is Increased in Benign Prostate Disease// Clinical Chemistry, 2003, v.49; p.253-259.

87. Lujan Galan M., Paez Borda A., Romero Cajigal I., Gomez de Vicente J.M., Berenguer Sanchez A.// Clinical significance of prostatic intraepithelial neoplasia//Arch Esp Urol., 2000, 53- 3 (Apr); p.227-9.

88. Ma W.X., Li W.//Immunohistochemical detection of prostate carcinoma//Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi., 1989 18- 1 (Mar); p. 37-9. Chinese.

89. Maetman T.J. // The role of prostate specific antigen as a tumor marker in men with advanced adenocarcinoma of the prostate.// J. Urol., 1989, v. 141; p. 1378.

90. Marchal E.C., Caballero A.J., Padilla L.M., Villar A.E., Villalobos J.// Primary transitional cell carcinoma of the prostate. An infrequent tumor.// Actas Urologicas Espanolas.,1997, v. 21- 9; p. 926-930.

91. Marija Drobnjak, Iman Osman, Howard I. Scher, Melissa Fazzari and Carlos Cordon-Cardo//Overexpression of Cyclin D1 Is Associated with Metastatic prostate Cancer to Bone//Clinical Cancer Research, 2000, v. 6, (May); p. 18911895.

92. McDonnell T.J., Navone N.M., Troncoso P., et al. //Expression of bcl-2 oncoprotein and p53 protein accumulation in bone marrow metastases of androgen independent prostate cancer.// J Urol., 1997, v. 157-2; p.569-74.

93. McNeal J.E., Bostwick D.G.,//Intraductal dysplasia: a premalignant lesion of the prostate.//Hum Pathol., 1986, v. 17-1 (Jan.); p.64-71.

94. Miele ME.//Percent free PSA as an additional measure in a prostate cancer screen.//Clin Lab Sci., 2001, v. 14-2 (Spring); p. 102-7.

95. Minardi D., Galosi A., Dell'Atti L. et al// Production of Serum-free and Total Prostate-specific Antigen Due to Prostatic Intraepithelial Neoplasia// Scand. J.of Urol and Nephr., 2002, v. 36- 5 (Nov. 30); p.323 329.

96. Molinie V.// Prostatic intraepithelial neoplasia//Ann Pathol., 2001, v.21-3 (Jun); p.245-54.

97. Montironi R., Hamilton P.W., Scarpelli M., et al.//Subtle morphological and molecular changes in normal-looking epithelium in prostates with prostatic intraepithelial neoplasia or cancer.//Eur Urol., 1999, v.35; p.468-73.

98. Morgan W.R., Zincke A., Rainvater L.// Prostate specific antigen after radical prostatectomy for adenocarcinoma of the prostate: Impact of adjuvant treatment (hormonal and radiation.//J. Urol., 1991, v. 145; p. 319.

99. Morote J., Lopez M., Encabo G., de Torres I.M.//Effect of inflammation and benign prostatic enlargement on total and percent free serum prostatic specific antigen.//Eur Urol., 2000, v.37-5 (May); p.537-40.

100. Morris M.M., Dallow K.C., Zietman A.L., et al.,// Adjuvant and salvage irradiation following radical prostatectomy for prostate cancer.// Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys.,1997, v 38- 4; p. 731-736.

101. Mostofi F.K., Sesterhtnn I.A., Davis C.J.//World Health Organization, Histological typing of prostate tumuors.// 2002 (Jan.).

102. Mostofi F.K.//Grading of prostatic carcinoma.//Cancer Chemother Rep., 1975, v.59-1 (Jan-Feb); p.l 11-7.

103. Moul J.W. //Angiogenesis, p53, bcl-2 and Ki-67 in the progression of prostate cancer after radical prostatectomy. //Eur Urol., 1999, v.35(5-6); p.399-407.

104. Murphy W.M.//Prognostic factors in the pathological assessment of prostate cancer // Hum.Pathol., 1998, v. 29; p. 427-430.

105. Murphy W.M.//The current status of the pathology of prostate cancer // Cancer Control., 1998, v. 5; p. 500-506.

106. Myrtle J.F., Klinley P.G., Ivor L.P., et al.// Clinically utility of PSA in the management of prostatic cancer.//In. Advances in cancer diagnostics. San Diego. CA., 1986.

107. Myrtle J.F.// Normal levels of prostate specific antigen in clinical aspects of prostatic cancer., IN. Catalona D (sd) New York// 1989; p. 183-189.

108. Naz S., Ahmad S., Ghafoor F., Butt N.S., Akhtar M.W.//Free and total prostate specific antigen in benign prostate hyperplasia and prostate cancer.// J Coll Physicians Surg Рак., 2004, v. 14-2 (Feb.); p.69-71.

109. Oesteling J.E., // Using PSA to eliminate the staging radionuclide bone scan: significant economic implications.// Urol. Clin. North Amer., 1994, v.20- 4; p. 705-726.

110. Ohori M., Egma S., Wheebr T.M.// Nodules resembling nodular hyperplasia in the peripheral zone of the prostate gland.// J. Urol. Path., 1994, v.2; p.223-233.

111. Oliai B.R., Kahane H., Epstein J.L.// Can basal cells be seen in adenocarcinoma of the prostate?: an immunohistochemical study using high molecular weight cytokeratin (clone 34betaE12) antibody.// Am J Surg Pathol., 2002, v.26-9 (Sep); p.l 151-60.

112. Oliver R.T., Williams G., Paris A.M., Blandy J.P.// Intermittent androgen deprivation after PSA-complete response as a strategy to reduce induction of hormone- resistant prostate cancer.// Urology, 1997, v. 49-1; p. 79-82. 197.

113. Papsidro L.D., Wang M.C. et al., // A PSA in sera of prostatic cancer patients. // Cancer, 1980, v.40;p. 2428.

114. Planz В., Szska P., Valdor M., et al.,// Detection of circulating prostatic cells during radical prostatectomy.// Urol. Research, 1997, v. 25- 6- p. 385-389.

115. Polito M., Minardi D., Recchioni A., et al.// Serum markers for monitoring of prostatic carcinoma.// Prostate, 1997, v. 33- 3; p. 208-216.

116. Pound C.R., Walsh P.C., Epstein J. I., et al.// Radical prostatectomy as treatment for prostate specific antigen detected stage TIC prostate cancer.// world J. Urology, 1997, v. 15- 6; p. 373-377.

117. Prestigiacomo A.F, Stamey T.A.;// A comparison of 4 ultra sensitive prostate specific antigen assays for early detection of residual cancer after radical prostatectomy.//J. Urol., 1994, v. 152; p.1515-1519.

118. Rubenstein J.H., Katin M.J., Mangano M.M., et al.,// Small cell anaplastic carcinoma of the prostate: seven new cases, review of the literature, and discussion of a therapeutic strategy.// Am. J. Clin. Oncol., 1997, v. 20- 4; p. 376380.

119. Ruij'ter E., van De Kaa C., Miller G. et al. //Molecular genetics and epidemiology of prostate carcinoma// Endocrin. Rev., 1999, v.20; p. 22-45.

120. Shabbir M., Mumtaz F.H.// Benign prostatic hyperplasia.//.! R Soc Health, 2004, v. 124-5 (Sep.); p.222-7. Review.

121. Shelfo S.W., Obek C., Soloway M.S.// Update on bladder neck preservation during radical retro pubic prostatectomy: impact on pathologic outcome, anastigmatic structures, and continence.// Urology, 1998, v. 51-1; p.73-78.

122. Sinha B.K., Yamazaki H., Eliot H.M., Schneider E., Borner M.M., O'Connor P.M.//Relationships between proto-oncogene expression and apoptosis induced by anticancer drugs in human prostate tumor cells.// Biochim Biophys Acta., 1995, v. 1270-1; p. 12-8.

123. Small E.J. //Prostate cancer// Curr Opin. Oncol., 1997, v.9- 3; p.277-286.

124. Stamey T.A., Caldwell M., McNeal J.E., Nolley R., Hemenez M., Downs J.//The prostate specific antigen era in the United States is over for prostate cancer: what happened in the last 20 years 111 J Urol., 2004, v. 172(4 Pt 1) (Oct); p. 1297-301.

125. Stamey T.A., Prestigiacomo A.F, Chen Z.^/Standardization of immunoassays for PSA: a different view based on experimental observations.//Cancer, 1994, v. 74; p.l662-1666.

126. Stamey T.A., Yang N., Hay A.R. et al.,// Prostate specific antigen as aserum marker for adenocarcinoma of the prostate.// N Engl. J. Med., 1987, v. 317; p. 909-916.

127. Strobel S., Smith K., Wolfert R., Rittenhouse H.;//Role of free PSA discoedance across commercial PSA assays.//Clin. Chem., 1996, v.42; p.645-647.

128. Theodorescu D., Broder S.R., Boyd J.C., Mills S.E., Frierson H.F.Jr.//p53, bcl-2 and retinoblastoma proteins as long-term prognostic markers in localized carcinoma of the prostate.//J Urol., 1997, v. 158-1; p. 131 -7.

129. Thorson P., Humphrey P.A.//Minimal adenocarcinoma in prostate needle biopsy tissue.// Am J Clin Pathol., 2000, v. 114-6 (Dec); p.896-909.

130. Thorson P., Vollmer R.T., Arcangeli C. et al.//Minimal carcinoma in prostate needle biopsy specimens: diagnostic features and radical prostatectomy follow-up//Mod.Pathology, 1998, v.l 1, p. 543-51.

131. Tunn U.M.,// Neo-adjuvant hormonal therapy of prostate cancer.// Urol. Res., 1997, v.25-Suppl 2; p. 557-62.

132. Vessella R.L., Lange P.H.;//Issue in the assessment of PSA immunoassays.// Urol. Clin North Am., 1993, v.20; p.607-619.

133. Vessella R.L.// Trends in immunoassays of PSA; serum complexes and ultra-sensitivity.// Clin. Chem., 1993, v.39; p.2035-2037.

134. Weber J.P., Oesterling J.E. Peters C.A.// The influence of reversible androgen deprivention on serum prostate specific antigen levels in men with BPH.// J. Urol., 1989, v.141; p. 987.

135. Wener M.H., Daum P.R., Brawer M.K.//Variation in measurement of PSA: importance of method and lot variability.//Clin. Chem., 1995, v.41; p. 17301737.

136. Wildschutz Т., Janssen Т., Schulman С.// Predictive value of the serum PSA level in patients having undergone neo-adjuvant hormone treatment before radical prostatectomy.// Acta Urologica Belgica, 1995, v. 63-1; p. 79-82.

137. Wilson T.M., Blute M.L. Oesterling J.E. et al., // Evaluation of the suspicious prostate: PSA ultrasonic and digital guided biopsy- what markers a difference (abs 6210)// J. Urol., 1991, v. 145; p.568.

138. Wirth M., Otto Т., Rubben H. Prostatakarzinom // Diagnostische und therapeutische Standards in der Urologischen Onkologie / Hrsg.im Auftr.der Deutschen Krebsgesellschaft.von L.Weisbach und K. Miller, 1998; s.92-126.

139. Xiong Y., Zhang H., Beach D.// D type cyclins associate with multiple protein kinases and the DNA replication and repair factor PCNA.//Cell, 1992, v.71; p.505-14.

140. Yeniyol C.O., Bozkaya G., Cavusoglu A., Arslan M., Karaca В., Ayder A.R.// The relation of prostate biopsy results and ratio of free to total PSA in patients with a total PSA between 4-20 ng/ml //Int Urol Nephrol., 2001, v.33-3; p.503-6.

141. Yu H., Diamandis E.P., Nam R., Trachtenberg J.// Detection of prostate cancer relapse with prostate specific antigen monitoring at levels of 0.001 to 0.1 mic.gr./L//J. Urol., 1997,. V. 157- 3 (Mar.); p. 913-918.

142. Zaviacic.M.//Prostate specific antigen and history of its disco very.//Bratislavske Lekarske Listy., 1997, v. 98 -12; p. 659-662.

Информация о работе

Ел-Байоуми Ахмед Сами Абу-Бакр
кандидата биологических наук
Москва, 2006
ВАК 03.00.25

Диссертация

Морфофункциональное значение простатического специфического антигена и высокомолекулярного цитокератина при заболеваниях предстательной железы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы