Молекулярные маркеры сифилитической инфекции

Терехова, Юлия Борисовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярные маркеры сифилитической инфекции
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Молекулярные маркеры сифилитической инфекции"

□□3453494

На правах рукописи

Терехова Юлия Борисовна

олекулярные маркёры сифилитической инфекции

0 3.0 0.07 — микробиология

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

2 1 Р.ОЯ 2008

Москва — 2008

003453494

Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И. М. Сеченова.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Андрей Юрьевич Миронов

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Павел Вячеславович Калуцкий

доктор медицинских наук, профессор Виктор Николаевич Царёв

Ведущая организация: ГОУ ВПО Российский государственный

медицинский университет

Защита состоится « »£-2008 года в 1400 часов на заседа-

нии .Диссертационного совета д. 208.04w.08 в ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И. М. Сеченова по адресу: 119992, Москва, Трубецкая ул., 8, строение 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Москов-' ской медицинской академии им. И. М. Сеченова (117998, Москва, Нахимовский проспект, 49). л ^

Автореферат разослан «¡¿О-А&к*^ 2008 года.

Учёный секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Андрей Юрьевич Миронов

Общая характеристика работы Актуальность проблемы: По оценкам ВОЗ в 1999 г. в мире зарегистрировано 12 млн. больных сифилисом. Среди всех причин смертности в мире доля сифилиса составила 0,3%. В течение долгого периода заболеваемость сифилисом в развитых странах находилась под контролем, однако в последние годы наблюдается её рост. В США заболеваемость в течение 40 лет оставалась низкой, а с 2000 года количество новых случаев прогрессивно увеличивается. Аналогичная ситуация наблюдается в Канаде и Европе. Большинство случаев сифилиса зарегистрировано у мужчин-гомосексуалистов, из них 75% инфицированы ВИЧ. Взаимосвязь ВИЧ и сифилиса вызывает особую озабоченность, так как описание клинических случаев позволяет предположить, что у ВИЧ инфицированных пациентов, даже после полноценного лечения, нередко развивается нейросифилис.

По данным К. И. Разнатовского и Т. С. Смирновой (2005) в Санкт-Петербурге, несмотря на статистическое снижение уровня заболеваемости сифилисом, течение этой инфекции в настоящее время имеет угрожающий характер, что определяет неблагоприятный прогноз на ближайшие годы. Увеличивается количество скрытых (43,2%), поздних (2,63%) и серорезистентных форм (6%), нейросифилиса (5,5%), беременных женщин (5,5%) и детей (18%), больных сифилисом. В 4 раза увеличилось количество случаев нейросифилиса, продолжает регистрироваться третичный сифилис.

Проблема ранней диагностики сифилиса и его органных поражений всегда стояла остро, поскольку в большинстве случаев сифилитический процесс в ЦНС протекает бессимптомно и не имеет чётких клинических признаков.

диагностики. Методы молекулярной диагностики и прогноза течения сифилитической инфекции на основе современных технологий и, в частности, ГХ-МС биологического материала от больных сифилисом могут решить сложные зада-' чи диагностики скрытых форм сифилиса и его органных поражений.

В связи с вышесказанным, разработка современных недорогих, высокочувствительных и специфических методов лабораторной диагностики сифилиса является актуальной и имеет важное значение для медицинской науки и практического здравоохранения.

Цель исследования: разработка способа индикации молекулярных маркёров органных поражений при сифилитической инфекции на основе хро-мато-масс-спектрометрического анализа биологических жидкостей организма больного сифилисом.

Задачи исследования. Для достижения указанной цели исследования представлялось необходимым решение следующих задач:

1. Изучить особенности развития сифилитической инфекции с оценкой скрытых форм сифилиса и органных поражений.

2. Отработать лабораторную методику индикации молекулярных маркёров органных поражений при сифилисе в биологических жидкостях организма (сыворотка крови, ликвор, моча).

3. Провести индикацию в биологических жидкостях больных сифилисом методом хромато-масс-спектрометрического анализа молекулярных маркёров поражения ЦНС.

4. Провести индикацию в биологических жидкостях больных сифилисом методом хромато-масс-спектрометрического анализа молекулярных маркёров поражения почек.

5. Провести индикацию в биологических жидкостях больных сифилисом методом хромато-масс-спектрометрического анализа молекулярных маркёров поражения кожных покровов и слизистых оболочек.

6. Провести клинико-хроматографические параллели для оценки эффективности хроматографической индикации молекулярных маркёров при поражени-

ях головного мозга и центральной нервной системы, почек и мочеполовой системы, кожи и слизистых оболочек с уточнением диагноза и локализации поражения, а также определения возможных осложнений.

7. Сравнить хроматографические характеристики биологических жидкостей организма у больных сифилисом и другой инфекционной и паразитарной патологией (туберкулёз, хирургический сепсис, эхинококкоз и др.).

8. Определить диагностическую значимость, диагностическую эффективность и диагностическую чувствительность хромато-масс-спектрометрических методов индикации молекулярных маркёров сифилиса.

Научная новизна полученных результатов:

• Впервые методом газовой хроматографии и масс-спектрометрии проведена индикация молекулярных маркёров органных поражений (ЦНС, почки, кожные покровы и слизистые оболочки) при сифилисе.

• Впервые проведён сравнительный анализ хроматографических характеристик биологических жидкостей у больных сифилисом и больных с другой инфекционной и паразитарной патологией (туберкулёз, хирургический сепсис, эхинококкоз и др.).

• Разработан «Способ лабораторной диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2315303, приоритет от 29 ноября 2006 года).

• Разработан «Способ лабораторной диагностики инфекционной патологии почек при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2327165, приоритет от 29 ноября 2006 года).

• Впервые определена диагностическая значимость, диагностическая эффективность и диагностическая чувствительность хромато-масс-спектрометрических методов индикации молекулярных маркёров органных поражений у больных сифилисом.

Практическая значимость исследований. Работа является фрагментом'

плановой темы НИР кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

ГОУ ВПО Московской Медицинской Академии им. И. М. Сеченова: «Разра-

ботка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований», № госрегистрации 01.2.006.06352.

Положения, выносимые на защиту:

1. Методами хромато-масс-спектрометрического анализа в биологических

жидкостях больных сифилисом обнаружены органные метаболиты — моле' кулярные маркёры поражения органов:

• ЦНС — фосфорная кислота, Б-галактоза, О-трентол (О-треоза и её лактон), пировиноградная кислота; метаболиты серотонина и его производных — индолуксусная и индолмасляная кислоты, изомеры глюкозы — а- и Р-глюкоза), О-мамноза, рибоза, Ы-ацетил-БЬ-триптофан (ацетилированная форма предшественников серотонина), 4-ацетилморфолин;

• почек — уксусная кислота, 1-1-бензодиокси-5-ол, пропионовая кислота, 2-пропанамид, изомаслянная кислота, 1-4-дитозил-2,3-изопропил-Ь-трейтол, маслянная кислота, нитробензен; изовалериановая кислота, 4-4-ацетомидо-2,2,6,6-тетрометил-пиперидино-1-оксил; валериановая кислота, ацетамидо-Ы-аминооксиметил, капроновая кислота, лауриловая кислота; 2-метил-5-(1-метил-этил)-фенол, 4-4-1-метилэтил-бутил-фенол; фенилуксусная, фенил-пропионовая кислоты;

• кожных покровов и слизистых оболочек — И-Н-бис-триметилен-тиурам-дисульфид; глицин-метан-сульфонил-хлорид; 4-4-дигидрокси-сульфонил-сульфон; 1,1-сульфонил-бис(4-хлор)бензен; 3-ацетил-тио-2метил-5-пропановая кислота и Ь-метионин-сульфон.

2. Хроматографические характеристики биологических жидкостей больных сифилисом имеют существенное отличие от биологических жидкостей при других инфекционных и паразитарных заболеваниях (туберкулёз, хирургический сепсис, эхинококкоз).

3. Доказана эффективность хроматографической индикации молекулярных • маркёров поражения головного мозга и центральной нервной системы, почек

и мочеполовой системы, кожи и слизистых оболочек для лабораторной диагностики сифилиса.

4. Определены три группы молекулярных маркёров органных поражений по уровню приоритетности: I группа — метаболиты высокого уровня приоритетности (лактоны, ацетилморфолин, метаболиты триптофана и метаболиты серотонина в ликворе, сернистые соединения в крови, фурановые эфиры бора, фенолы и амиды в моче); II группа — метаболиты среднего уровня приоритетности (хинолоны, липидные компоненты сыворотки крови; сернистые соединения в моче); III группа — метаболиты низкого уровня приоритетности (фенилкарбоновые кислоты и ЛЖК в моче, углеводные компоненты сыворотки крови, изомеры Сахаров в ликворе).

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования

внедрены в учебный процесс на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО ММА им. И. М. Сеченова.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на:

• научной конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО ММА им. И. М. Сеченова;

• II Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность», 26-28 октября 2005 года, Москва;

• симпозиуме «Магнитные поля и здоровье человека», 18-19 декабря 2007 года, Курск;

• II международной научной конференции молодых учёных-медиков, 25-28 февраля 2008 года, Курск;

• V Конференции молодых учёных России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» 19-22 мая 2008 года, Москва;

• IV Научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» 9-12 сентября 2008 года, Краснодарский край, пос. Джеме-

• Национальных Днях лабораторной медицины России — научно-практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» 7-9 октября 2008 года, Москва;

• совместной научной конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО ММА им. И. М. Сеченова и клинико-биохимической лаборатории Института хирургии им. А. В. Вишневского РАМН (31 августа 2007 года, протокол № 9).

Личный вклад автора. Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования, анализе и обобщении полученных результатов. В работах выполненных в соавторстве, вклад автора является определяющим и заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования: от постановки задач, их экспериментально-теоретической и клинико-бактериологической реализации до обсуждения результатов в научных публикациях и докладах и их внедрения в практику.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 15 работ; получено 2 патента РФ на изобретение: № 2315303 «Способ диагностики центральной нервной системы при сифилисе» и № 2327165 «Способ диагностики инфекционной патологии почек при сифилисе».

Структура и объём диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, четырёх глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка цитируемой литературы и приложения. Работа включает 165 страниц текста; 31 таблицу; 19 рисунков. Список литературы содержит 270 источников, из них 214 отечественных и 56 зарубежных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Методами ГХ-МС анализа исследован биологический материал (кровь, ликвор, моча) от 152 больных сифилисом. Распределение больных по возрасту и полу представлено в табл. 1, по основным формам заболевания в табл. 2.

Таблица 1

Распределение больных по возрасту и полу (п=152)

Пол Возраст (лет) Всего

<15 15-20 21-30 31-40 41-50 51-60 >60 п %

мужчины 3 10 19 18 10 7 2 69 45,5

женщины 4 18 30 16 7 8 — 83 55,5

Всего: 7 28 49 34 17 15 2 152 100

Таблица 2

Распределение больных сифилисом по формам заболевания

№ 7 'п Основные формы заболевания Количество больных %

1 Сифилис скрытый ранний 38 25,0

2 Сифилис скрытый поздний 5 3,3

3 Сифилис скрытый не уточненный 3 2,0

4 Сифилис первичный половых органов 16 10,5

5 Сифилис вторичный кожи и слизистых 25 16,5

6 Сифилис вторичный рецидивный 3 2,0

7 Половой и бытовой контакт с больными сифилисом 18 11,8

8 Сероконтроль и обследование 25 16,4

9 Нейросифилис 17 11,2

10 Реинфекция 2 1,3

Всего: 152 100

ГХ-МС исследования периферической крови проведены у 145 больных, мочи — у 72 больных, ликвора — у 17 больных. Из 152 больных положительные серологические пробы (РГ1ГА, РП, РИФ, ИФА) установлены у 121 пациента, отрицательные — у 31 пациента.

Поражения нервной системы (нейросифилис) выявлены у 17 больных (11,2%); поражения мочеполовой системы (циститы, уретриты, пиелонефриты) — у 16 больных (10,5%); поражение кожи и слизистых оболочек — у 25 больных (16,3%).

• В качестве контроля хроматографических методов исследования исследованы хроматографические характеристики биологических жидкостей при других патологических состояниях: хирургический сепсис (27 больных), туберкулёз (21 больной), эхинококкоз печени (15 больных). Исследования проводились на материале ФГУ Институт хирургии им. А. В. Вишневского Росмедтех-нологий в клинико-биохимической лаборатории КДО (руководитель КДО — доктор биологических наук В. С. Демидова, ответственный исполнитель — старший научный сотрудник КДО В. Г. Истратов).

Хроматографические исследования проводились по разработанной схеме ГХ-МС анализа биологического материала больных сифилисом с переводом исследуемых соединений в ТМС-соединения и идентификации с помощью масс-селективного детектора. Использована ГХ-МС система Agilent 6890 MSD-5973 с масс-селективным детектором и идентификацией соединений с помощью химической станции Chem-Station. Схема ГХ-МС анализа биологического материала представлена в табл. 3.

Индикация активаторов «кооперативной чувствительности» микробов — лактонов, хинолонов, фурановых эфиров бора и родственных соединений проводилась с помощью комплекса методов: ГХ-МС анализа с масс-селективным детектором (Agilent 6890 MSD-5973), ВЭЖХ с масс-селективным детектором и метода капиллярного электрофореза.

Для ГХ-МС исследований использован хроматограф НР-6890 с масс-селективным детектором MSD-5973. Линейный динамический диапазон определяемых концентраций для MSD модели 5973 позволяет для пикограммов образца получать масс-спектры, пригодные для библиотечного поиска. Идентификация соединений проводилась с помощью химической станции GS/MSD-Chem/Station.

Схема ГХ-МС анализа биологического материала Биологический материал

Таблица 3

(биоптаты тканей, сыворотка крови, биологические жидкости)

экстрагирование 1 мл гексана

перевод в ТМС-соединения о помощью БЭТТА I

хромато-масс-спекгрометрия

Яипидные компоненты Жирные кислоты Изомеры жирных кислот

Гомогенизация материала

кислотный гидролиз 2,5 N НС1 в течение 6 час при I 37° С

водная фаза 1

перевод в ТМС-соединения с помощью ВЭТРА 1

Оксикислты Аминосахара Моносахара

депротеиншация сульфосалициловой кислотой

выпаривание до сухого остатка

растворение в метаноле

перевод в ТМ С-соединен и я с помощью БЭТТА

хромато-масс-спекгрометрия

Углеводные компоненты Моносахара Аминосахара Субъединицы ЛГТС

Твердофазная экстракция ;

Запись масс-спектра 1

хромато-масс-спекгрометрия

Лактоны Хинолоны Фурановые эфиры

Масс-селективный детектор (MSD) модели 5973 позволяет идентифицировать и количественно определить все компоненты сложных биологических матриц. Он обеспечивает классические спектры электронного удара в режиме полного сканирования и регистрации отдельных ионов.

Для максимального эффективного использования возможностей ГХ-МС системы НР-6890 / MSD-5973 предварительно проводили моделирование процесса идентификации органических соединений с помощью программы фирмы Resteck.

В сложных для идентификации химических соединений случаях (незнакомое химическое соединение или низкий уровень содержания вплоть до следовых количеств) использовали скрининговые масс-спектрометрические исследования с применением селективных ионов (2 или 3 ионов характеристичных).

Для подготовки проб биологического материала использовали методы твёрдофазной экстракции с применением специальных предколонок и твёрдо-фазных картриджей фирмы Agilent.

Статистическую обработку результатов исследования проводили на ПЭВМ Pentium IV. В работе анализировались только статистически достоверные данные. Статистическая обработка данных клинико-лабораторных исследований проводилась с применением многомерной статистики — корреляционного, факторного и кластерного анализов — по программе Гарвардского университета BMDP-2M для биомедицинских исследований. Также использовался пакет прикладных программ Excel версия 7.0, раздел программ «Анализ данных». Различия между сравниваемыми величинами признавались статистически достоверными при уровне значимости р<0,05 по критерию Стьюдента.

При корреляционном анализе использовался коэффициент Юла, который высчитывался с помощью таблицы сопряжённости, а также с помощью корреляционной матрицы программ биомедицинских исследований Гарвардского университета BMDP-2M. Величина коэффициента корреляции указывала на связь между факторами: от 0 до 0,3 — слабой силы, от 0,3 до 0,7 — средней силы, от 0,7 до 0,9 — сильную взаимозависимость, 1 — полную (функциональную) связь.

Для оценки диагностической значимости разработанных хроматографиче-ских критериев, использовали унифицированные критерии пригодности лабораторных тестов для диагностики определенной формы патологии, применённые R. Galen и S. Gambino (1975) и В. В. Меньшиковым (1982) основанные на решении теоремы Байеса (расчёт вероятности распределения результатов исследования).

Диагностическая чувствительность, диагностическая специфичность, диагностическая предсказуемость положительная, диагностическая предсказуемость отрицательная рассчитывались следующим образом:

ДС= И° ,100 ио-лп

ип

ПРпол = ———хЮО ИП-ЛП

ИО

ПРотр =———х\ 00 ИО-ЛО

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Трудности диагностики сифилиса обусловлены широкой распространённостью заболевания, возможностью поражения любых органов и тканей, наличием скрытых форм заболевания, отсутствием диагностических возможностей раннего выявления органных поражений.

Использование ГХ-МС позволяет с высокой степенью достоверности определить ранние признаки сифилитической инфекции и органных поражений в биологических жидкостях организма, наличие поражения органов и систем при отсутствии положительных серологических реакций и клинических проявлений болезни.

Они реализованы для исследования крови, мочи и ликвора.

В крови больных обнаружены липидные и углеводные соединения: высшие жирные кислоты и их изомеры (С|3 0 и изомеры Сп;о; См о и Ci5:0; изомеры Ci60 и С|б.о; С|7о и С180; изомеры С19.0 и С2о:о; С2о.о и Сцл)- Также обнаружен хо-

лестерин и его эфиры, сквален. Среди углеводных компонентов присутствовали изомеры Сахаров и ацетилированных Сахаров — глюко-пираноза, манноза и ман-ноза ацетат; сахароза, ацетил-сахароза и изомеры ацетил сахарозы, а также аце-тилированные амины Сахаров — N-ацетил-маннозамин и N-ацетил-глюкозамин.

Интересно обнаружение в крови сернистых соединений. Идентифицированы: L-метионин-сульфон — модифицированная аминокислота с сульфонильной группировкой; 1-1-сульфонил-бис (4-хлор) бензен с высокой токсичностью хлорированного остатка, ацетилированная 2-метил-5-пропановая кислота с тиогруп-пой и выраженным деструктивным действием, а также 4-4-дигидрокси-дифенилсульфон, N-N-бис-тетраметилен-тиурам-дисульфид и бензен-метан-сульфонилхлорид в минимальных концентрациях. Уровень их содержания был достаточно низок — 0,02±0,003 ммоль/л для минимальных значений и 0,09±0,008 ммоль/л для максимальных. Даже сравнительно невысокое содержание сернистых метаболитов в крови больных обладает достаточно выраженным повреждающим действием, поскольку эти соединения имеют сродство к коллагеновым структурам и способны повреждать ткани с развитием некроза и последующим распадом.

Важное значение имеет идентификация в крови соединений, относящихся к «активаторам кооперативной чувствительности микробов» — бутиролактон; 2,3,б,7-тетрагидро-1-Н-5-Н-бензохинолон, 2,2-бихинолин; N-N-диметил-метамин-тригидро-боран и 2-фуранил-2-пропиеновая кислота. Известно, что генетический механизм реализации «кооперативной чувствительности» позволяет патогенным бактериям рационально использовать свой патогенный потенциал, определяя системой quorum sensing момент включения генов патогенности только после достижения бактериями определенной плотности популяции, при которой синтезирующееся количество факторов патогенности гарантирует успешное развитие инфекционного процесса. Рассматривая сифилитическую инфекцию как септикоподобное состояние, мы предложили использовать наличие активаторов «кооперативной чувствительности» в сыворотке крови для прогнозирования риска генерации инфекции.

При индикации молекулярных маркёров органных поражений использован опыт диагностики возможной локализации поражения при сепсисе с помощью ГХ-МС образцов крови больных [Истратов В. Г., Жуков А. О., 1999; Истратов В. Г. с соавт., 1995; Жуков А. О., 1998].

В моче кроме классических ЛЖК, фенолов и крезолов, идентифицирован ряд сернистых соединений и амидов, которые по нашему мнению, причастны к развитию почечных осложнений у больных сифилисом. С другой стороны, они связаны с вторичной инфекцией, проявляющейся в почечной патологии за счёт нарушения иммунной реактивности.

Исследования ликвора позволили оценить глубокие обменные и функциональные изменения, происходящие в тканях головного мозга при развитии сифилитической инфекции. Обнаружение в ликворе таких соединений, как предшественники и метаболиты окситриптомина позволяют делать выводы о существенных изменениях метаболической активности и функциональных способностях головного мозга. Особо следует обратить внимание на идентификацию естественных морфолиновых структур, обладающих сходными с опиатами частями структурной формы и действующими как транквилизаторы или естественные опиатоподобные структуры. Однако обнаружение такого соединения как тио-морфолин свидетельствует об опасности не только нарушения, но и разрушения определенных структур мозга, учитывая высокую токсичность идентифицированного соединения.

В качестве контроля изучены хроматографические показатели биологических жидкостей больных с инфекционной и паразитарной патологией (хирургический сепсис — 27 больных, туберкулёз — 21 больной и эхинококкоз печени — 15 больных). Молекулярные маркёры характерные для органных поражений при сифилисе при других видах патологии не выявлены.

Содержание активаторов кооперативной чувствительности в периферической крови больных сепсисом в основном совпадало с содержанием этих соединений в крови больных сифилисом, за исключением некоторого повышения содержания фурановых эфиров. Это соответствует нашему представлению о сеп-тикоподобном течении сифилиса с генерализацией инфекции на фоне резкого

снижения системы антиинфекционной резистентности с участием разных как грамположительных, так и грамотрицательных видов микробов.

Спектр липидных соединений в периферической крови больных сепсисом отличался от спектра хроматографических изменений в периферической крови больных сифилисом. У больных сепсисом суммарное содержание ЛЖК составило 2,613±0,486 ммоль/л, а так называемых токсических метаболитов — 6,212±0,689 ммоль/л. В сыворотке больных сифилисом определялось высокое содержание жирных кислот и их изомеров с нечётным числом углеродных атомов,'не определяющиеся в нормальной сыворотке крови.

Содержание маркёров органных поражений в периферической крови больных сепсисом отличалось от маркёров органных поражений у больных сифилисом. Это прежде всего касалось церебротоксических метаболитов — ди- и полиаминов и ароматических аминов, как показателей обширного распада тканей при сепсисе и появлении интоксикационной энцефалопатии в отличие от углеводных компонентов периферической крови больных сифилисом, предшественников и метаболитов триптофана в ликворе больных сифилисом.

Высокое содержание фенолов, крезолов и ароматических жирных кислот в периферической крови больных сепсисом при воспалительном поражении почек соответствовало высокому уровню содержания указанных соединений в моче больных сифилисом при поражении почек и мочеполового аппарата сифилитическим процессом. Определяемые у больных сифилисом в моче с помощью методов селективного ГХ-МС анализа молекулярные маркёры отсутствовали у больных сепсисом.

В группе больных туберкулёзом методами ГХ-МС-анализа в периферической крови обнаруживались микоцирозиновые кислоты и туберкулостеариновая кислота, которые не определялись у больных сифилисом.

В группе больных с эхинококкозом типичным являлось обнаружение метаболитов фарнезола-2-цис, б-транс-фарнезола и 2-транс, 6-транс-фарнезола, а так же оболочечные метаболиты типа изомеров лейцина и изолейцина, что так же не обнаруживалось у больных сифилисом.

Прослежено распределение основных метаболитов по величине удельного веса (по данным факторного анализа). Первые шесть мест заняли метаболиты се-ротонина и триптофана и ацетилморфолин в ликворе, лактоны и сернистые соединения в моче и крови. В первой десятке — фенолы и амиды в моче, хинолоны и изомеры Сахаров в ликворе.

Проведено распределение основных групп метаболитов на I, II и III уровни (молекулярные маркёры высокого, среднего и низкого уровня приоритетности). Критериями распределения были избраны величины удельного веса хроматогра-фических тестов на основании факторного анализа, их сопоставимость с клиническими результатами и, наконец, сведения по диагностической эффективности распределения данных.

К молекулярным маркёрам высокого уровня приоритетности (метаболиты первого уровня) отнесены следующие метаболиты: активаторы кооперативной чувствительности — лактоны; ацетилморфолин в ликворе; метаболиты триптофана в ликворе; метаболиты серотонина в ликворе; сернистые соединения в крови; активаторы кооперативной чувствительности; фенолы в моче; амиды в моче.

Диагностическая эффективность молекулярных маркёров высокого уровня приоритетности составляла по диагностической чувствительности — от 55,9% до 96,7%; по положительной диагностической предсказуемости — от 62,5% до 94,1%. Сопоставимость клинических и хроматографических данных составила от 72,7% до 96,9%, уровень удельного веса — от 0,744 до 0,903 (с 1 по 11 место).

К молекулярным маркёрам среднего уровня приоритетности (метаболиты второго уровня) отнесены следующие метаболиты: активаторы кооперативной чувствительности — хинолоны; липидные компоненты сыворотки крови; сернистые соединения в моче.

Диагностическая эффективность молекулярных маркёров среднего уровня приоритетности составляла: по диагностической чувствительности от 75,0% до 94,5%; по положительной диагностической предсказуемости от 75,0% до 80,9%.

Сопоставимость клинических и хроматографических данных составила от 75,0 до 83,9%; уровень удельного веса (по данным факторного анализа) — от 0,611 до 0,819 (6-14 места).

Таблица 4

Параметры диагностической значимости молекулярных маркёров сифилиса (в %)

ГХ-МС показатели Диагностическая эффективность (%) I

дч ДС ДПпол. ДПотр.

Индикация активаторов «кооперативной чувствительности» микробов Лактоны (бутиролактон) 95,9 44,4 88,9 44,4

Хинолоны (2,3,6,7-тетрагидро-1-н-5-н-бензохинолон) 94,5 61,6 80,9 25,0

Фурановые эфиры бора (Ы-М-диметил-метамин-дигидроборан и 2-фуранил-2пропиеновая кислота) 96,7 50,0 88,1 60,0

Биохимические изменения сыворотки крови Сернистые соединения 88,2 80,0 94,1 60,0

Липидные компоненты 93,3 50,0 80,0 83,3

Углеводные компоненты 69,2 75,0 61,5 33,3

Индикация молекулярных маркёров органных поражений Нервная система (головной мозг) Метаболиты серотонина (индолуксусная и ин-долмасляная кислоты) 75,0 25,0 62,5 50,0

Метаболиты триптофана (ацетшшрованные формы триптофана) 88,8 60,0 77,7 80,0

Ацетилморфолин 80,0 75,0 90,0 50,0

Изомеры Сахаров в ликворе 85,7 20,0 43,2 80,0

Почки Сернистые соединения в моче 75,0 50,0 75,0 50,0

Фенолы и амиды в моче 88,8 80,0 88,8 80,0

Фенилкарбоновые кислоты в моче 71,4 25,0 57,1 50,0

ЛЖК в моче 66,6 45,3 33,6 41,2

К молекулярным маркёрам низкого уровня приоритетности (метаболиты третьего уровня) отнесены следующие метаболиты: фенилкарбоновые кислоты в моче; углеводные компоненты сыворотки крови; изомеры Сахаров в ликворе; ЛЖК в моче.

Диагностическая эффективность молекулярных маркёров низкого уровня приоритетности составила: диагностическая чувствительность — от 66,6 до 85,7%; диагностическая предсказуемость положительная — от 33,6 до 80,0%. Сопоставимость клинических и хроматографических данных составила от 50,0 до 72,2%. Величина удельного веса (по данным факторного анализа) составила от 0,605 до 0,756 (10-15 места). Параметры диагностической значимости молекулярных маркёров сифилиса (в %) представлены в табл. 4.

Предложенные молекулярные маркёры сифилитической инфекции и органных поражений при сифилисе легли в основу «Способа лабораторной диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2315303, приоритет от 29 ноября 2006 года) и «Способа лабораторной диагностики инфекционной патологии почек при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2327165, приоритет от 29 ноября 2006 года).

Выводы:

1. В ликворе больных сифилисом определены молекулярные маркёры поражения ЦНС: Б-галактоза, Б-трентол, пировиноградная кислота; метаболиты се-ротонина и его производных — индолуксусная и индолмасляная кислоты; изомеры глюкозы — а- и (3-глюкоза, О-манноза, рибоза, Ы-ацетил-ОЬ-триптофан (ацетилированная форма предшественников серотонина), 4-ацетилморфолин (ацетилированная форма гетероциклического амина), являющиеся продуктами деградации наиболее активных субстратов ЦНС — фосфатидилинозитола и фосфатидилэтаноламина.

ческие жирные кислоты — фенилуксусная и фенилпропионовая, 1-1-бензодиокси-5-ол, 2-пропанамид; 1-4-дитозил-2, З-изопропил-Ь-трейтол; нит-робензен; 4-4-ацетомидо-2, 2, 6, 6-тетрометил-пиперадино-1-оксил; ацетамид-Ы-аминооксиметил, 2-метил-5-(1 -метил-этил)-фенол, 4-4-1 -метилэтил-бутил-фенол, являющиеся продуктами нарушенного метаболизма углеводов и аминокислот при развитии вторичной инфекции мочеполовой сферы.

3. В крови больных сифилисом определены молекулярных маркёров поражения кожных покровов и слизистых оболочек: сернистые соединения, обладающие высокой токсичностью и тропизмом к коллагену, что и обусловливает поражение кожи и подкожной клетчатки.

4. В крови больных сифилисом определены соединения, которые относятся к группе активаторов «кооперативной чувствительности» микробов и родственные соединения: бутиролактон, 2, 3, 6, 7-тетрагидро-1-Н-5-Н-бензохинолон, М-Ы-диметил-метамин-тригидро-боран, 2,2-бихинолин и 2-фуранил-2-пропиеновая кислота.

5. Хроматографические характеристики биологических жидкостей больных сифилисом существенно отличаются от биологических жидкостей при других инфекционных и паразитарных заболеваниях (туберкулёз, хирургический сепсис, эхинококкоз).

6. Лабораторные диагностические критерии ГХ-МС индикации молекулярных маркёров органных поражений имеют высокий уровень диагностической чувствительности, диагностической специфичности, диагностической предсказуемости положительной и отрицательной.

7. Определены 3 группы молекулярных маркёров по уровню приоритетности: I группа — метаболиты высокого уровня приоритетности — лактоны, ацетил-морфолин, метаболиты триптофана и серотонина в ликворе, сернистые соединения в крови, фурановые эфиры бора, фенолы и амиды в моче; II группа — метаболиты среднего уровня приоритетности — хинолоны, липидные компоненты сыворотки крови, сернистые соединения в моче; III группа — метаболиты низкого уровня приоритетности — фенилкарбоновые кислоты и ЛЖК в моче, углеводные компоненты сыворотки крови, изомеры Сахаров в ликворе.

Практические рекомендации:

1. При обнаружении в моче больных сифилисом методами хромато-масс-спектрометрического анализа молекулярных маркёров 1-1-бензодиокси-5-ол, 2-пропанамид; 1-4-дитозил-2, 3-изопропил- b -трейтол; 4-4-ацетомидо-2, 2, 6, 6-тетрометил-пиперадино-1 -оксил; ацетамидо-М-аминооксиметил, 2-метил-5-(]-метил-этил)-фенол, 4-4-1-метилэтил-бутил-фенол; фенилуксусная и фенил-пропионовая кислоты в количестве: 0,03-0,05ммоль/л; 0,07-0,09 ммоль/л; 0,090,11 ммоль/л; 0,04-0,06 ммоль/л; 0,05-0,07 ммоль/л; 0,07-0,10 ммоль/л; 0,110,13 ммоль/л и 0,13-0,16 ммоль/л соответственно, диагностируют воспалительное поражение почек.

2. При обнаружении в ликворе больных сифилисом молекулярных маркёров: N-ацетил-ОЬ-триптофан; индолуксусную и индолмасляную кислоты и 4,-ацетилморфолин в количестве 0,11-0,13 ммоль/л; 0,08-0,12 ммоль/л; 0,04-0,06 ммоль/л и 0,07-0,09 ммоль/л соответственно, диагностируют поражение ЦНС.

3. При обнаружении в периферической крови больных сифилисом молекулярных маркёров: N-N-бис-тетраметилен-тиурам-дисульфид; глицин-метан-сульфонил-хлорид; 1,1 -сульфонил-бис(4-хлор)-бензен; З-ацетил-тио-2-метил-S-пропановая кислота; L-метионин-сульфон в количестве: 0,017-0,054 ммоль/л, 0,02 ммоль/л, 0,026-0,065 ммоль/л, 0,053-0,089 ммоль/л, 0,035-0,076 ммоль/л и 0,064-0,098 ммоль/л соответственно диагностируют поражения наружных покровов и слизистых оболочек.

4. При использовании в диагностических целях молекулярных маркёров необходимо учитывать их диагностическую значимость по уровню приоритетности: высокий уровень приоритетности — I группа: лактоны, ацетилморфолиц, метаболиты триптофана и серотонина в ликворе, сернистые соединения в крови, фурановые эфиры бора, фенолы и амиды в моче. Средний уровень приоритетности — II группа: хинолоны, липидные компоненты сыворотки крови, сернистые соединения в моче. Низкий уровень приоритетности — III группа: фенилкарбоновые кислоты и ЛЖК в моче, углеводные компоненты сыворотки крови, изомеры Сахаров в ликворе.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А., Терехова Ю. Б. Индикация мо: лекулярных маркёров Treponema pallidum II Тез. докл. II международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». - М., 2005. - С. 193.

2. Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Воробьёв А. А., Осман К. А., Терехова Ю. Б., Романовская Л. М. Индикация молекулярных маркёров Treponema pallidum в лабораторной диагностике сифилиса // Молекулярная медицина. - 2005. - № 4. -С 58-63.

3. Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А., Терехова Ю. Б. Индикация молекулярных маркёров Treponema pallidum. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2005. - № 9. - С. 60.

4. Терехова Ю. Б., Миронов А. 10., Истратов В. Г., В., Осман К. А. Индикация ■молекулярных маркёров нейросифилиса // Курский научно-практический

вестник «Человек и его здоровье». - 2007. - № 2. - С. 59-66.

5. Миронов А. Ю., Терехова Ю. Б. Современные методы диагностики сифилиса II Consilium Medicum. Дерматология. - 2007. - № 1. - С. 34-40.

6. Терехова Ю. Б., Миронов А. Ю., Истратов В. Г. Новые подходы к индикации Treponema pallidum II Труды симпозиума «Магнитные поля и здоровье человека». Курск - 2007. - С. 95.

7. Терехова Ю. Б., Миронов А. Ю. Современные методы лечения сифилиса // Consilium Medicum. Дерматология. - 2007. - № 2.- С. 41-46.

8. Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А., Рубальский О. В., Терехова Ю. Б. Способ лабораторной диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе // Патент РФ № 2315303, приоритет от 29 ноября 2006 года. - Зарегистрирован в Гос. реестре изобретений РФ 20. 01. 2008.

9. Терехова Ю. Б., Миронов А. Ю., Истратов В. Г., В., Осман К. А. Индикация молекулярных маркёров инфекционной патологии почек при сифилисе //Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». - 2007. - № 4. -С. 68-74.

Ю.Терехова Ю. Б., Осман К. А. Молекулярная диагностика сифилитической инфекции // Материалы II международной научной конференции молодых учёных-медиков в 3-х томах.-Курск, 2008.-Т. 1. - С. 212-213.

11 .Терехова 10. Б. Молекулярные маркёры сифилитической инфекции // Вестник РАМН. Приложение - 2008. - № 6. - С. 430.

12.Миронов А. 10., Истратов В. Г., Терехова Ю. Б., Рубальский О. В., Осман К. А. Способ диагностики инфекционной патологии почек при сифилисе // Патент РФ № 2327165, приоритет от 29 ноября 2006 года. - Зарегистрирован в Гос. реестре изобретений РФ 29.06.2008.

1 З.Миронов А. 10., Истратов В. Г., В., Осман К. А., Терехова Ю. Б., Рошо Р. А. Новые диагностические возможности лабораторной диагностики сифилиса мочеполовой системы. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. - № 9.-С.51.

М.Миронов А. 10., Истратов В. Г., В., Осман К. А., Терехова Ю. Б., Рошо Р. А. Инновационные технологии лабораторной диагностики нейросифилиса // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. - № 9. - С. 54.

15.Терехова Ю. Б., Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А. Газожидкостная хроматографиия и масс-спектрометрия в лабораторной диагностике сифилиса // Тез. докл.VII научно-практической конференции «Социально-значимые заболевания в дерматологии. Новые лекарственные препараты в дерматологии и косметологии». - М., 2008. - С. 169.

Список сокращений:

АГ - антиген; АТ - антитело;

АМК - аминокислотные компоненты; АТ - антитело;

ГХ-МС - газовая хроматография-масс-спектрометрия;

ДС - диагностическая специфичность;

ДЧ - диагностическая чувствительность;

ЗППП - заболевания, передающиеся половым путём;

ИО - истинно отрицательные;

ИП - истинно положительные;

ИФА - иммуноферментный анализ;

КСР - комплекс серологических реакций;

ЛК-лактоны;

ЛК - липидные компоненты;

ЛО - ложноотрицательные;

ЛП - ложноположительные;

МПБ - мясо-пептонный бульон;

НС - нервная система;

Протр - предсказуемость отрицательная;

ПРпол - предсказуемость положительная;

ПЦР - полимеразная цепная реакция;

РА - реакция агглютинации;

РИБТ- реакция иммобилизации бледной трепонемы;

РИТ (РИБТ) - реакция иммобилизации бледных трепонем;

РИФ - реакция иммунофлюоресценции;

РМП - реакция микропреципитации;

РПГА- реакция пассивной гемагглютинации;

РПР - реакция преципитации;

РСК - реакция связывания комплемента;

ФЭ - фурановые эфиры;

ХН - хинолоны.

ММА им.И.М.Сеченова Подписано в печать ' 2008 г.

Тираж 100 экземпляров

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Терехова, Юлия Борисовна

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Биологические свойства возбудителя сифилиса

1.2 Лабораторная диагностика сифилиса

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярные маркеры сифилитической инфекции"

Актуальность проблемы: По оценкам ВОЗ в 1999 г. в мире зарегистрировано 12 млн. больных сифилисом. Среди всех причин смерти в мире доля сифилиса составила 0,3%- В течение долгого периода заболеваемость сифилисом в развитых странах находилась под контролем, однако в последние годы наблюдается её рост. В США заболеваемость в течение 40 лет оставалась низкой, но с 2000 года количество новых случаев прогрессивно увеличивается. Аналогичная ситуация наблюдается в Канаде и Европе. Большинство случаев сифилиса зарегистрировано у мужчин - гомосексуалистов, из них 75% инфицированы ВИЧ. Взаимосвязь ВИЧ и сифилиса вызывает особую озабоченность, так как описание клинических случаев позволяет предположить, что у ВИЧ инфицированных пациентов, даже после полноценного лечения, нередко развивается нейросифилис.

По данным К. И. Разнатовского и Т. С. Смирновой (2005) в Санкт-Петербурге, несмотря на статистическое снижение уровня заболеваемости сифилисом —- с 1093 в 2001 г. до 492 в 2004 г. — течение этой инфекции в настоящее время носит угрожающий характер, что определяет неблагоприятный прогноз на ближайшие годы. Увеличивается количество скрытых (43,2%), поздних (2,63%) и серорезистентных форм (6%), нейросифилиса (5,5%), беременных женщин (5,5%) и детей (18%), больных сифилисом. В 4 раза увеличилось количество случаев нейросифилиса, продолжает регистрироваться третичный сифилис.

Причина резкого подъёма заболеваемости сифилисом в последние годы до конца не изучена. Считается доказанной роль неблагоприятных социально-экономических, демографических факторов, а также ослабление противоэпидемических мероприятий. Важную роль играет изменение структуры здравоохранения с увеличением количества частнопрактикующих врачей, оказывающих населению дерматовенерологические услуги, но не занимающихся противоэпидемической работой [Яковлев Н. А. с соавт., 2004]

Чаще всего сифилисом заражаются люди в возрасте 20-29 лет. У мужчин сифилис, особенно первичный, регистрируется в 2-6 раз чаще, чем у женщин, что объясняется более ранним проявлением у них клиники этого заболевания и трудностями распознавания его у женщин [Яковлев Н. А. с соавт., 2004].

Медицина XXI века — молекулярная медицина. Основной постулат молекулярной медицины — положение о том, что для каждой болезни, каждого патологического проявления организма имеется молекулярная мишень, которую можно использовать как для диагностики заболевания, так и для лекарственного воздействия. Использование современных технологических и инструментальных разработок существенно расширяет возможности молекулярной диагностики. Методы молекулярной диагностики и прогноза течения сифилитической инфекции на основе современных технологий и, в частности, ГХ-МС биологического материала от больных сифилисом могут решить сложные задачи диагностики скрытых форм сифилиса и его органных поражений.

В связи с вышесказанным, разработка современных недорогих, высокочувствительных и специфических методов лабораторной диагностики сифилиса является актуальной и имеет большое значение для медицинской науки и практического здравоохранения.

Цель исследования: разработка способа индикации молекулярных маркёров органных поражений при сифилитической инфекции на основе хромато-масс-спектрометрического анализа биологических жидкостей организма больного сифилисом.

6. Провести клинико-хроматографические параллели для оценки эффективности хроматографической индикации молекулярных маркёров при поражениях головного мозга и центральной нервной системы, почек и мочеполовой системы, кожи и слизистых оболочек с уточнением диагноза и локализации поражения, а также определения возможных осложнений.

Научная новизна полученных результатов:

• Разработан «Способ лабораторной диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2315303).

• Разработан «Способ лабораторной диагностики инфекционной патологии почек при сифилисе» (патент РФ на изобретение № 2327165).

Практическая значимость исследований. Работа является фрагментом плановой темы НИР кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И. М. Сеченова: «Разработка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований», № госрегистрации 01.2.006.06352

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Методами хромато-масс-спектрометрического анализа в биологических жидкостях больных сифилисом обнаружены органные метаболиты — молекулярные маркёры поражения органов:

• ЦНС — фосфорная кислота, Б-галактоза, Б-трентол (Б-треоза и её лактон), пировиноградная кислота; метаболиты серотонина и его производных — индолуксусная и индолмасляная кислоты, изомеры глюкозы — а- и (3-глюкоза), Б-манноза, рибоза, 1М-ацетил-ЭЬ-триптофан (ацетилированная форма предшественников серотонина), 4-ацетилморфолин;

• почек — уксусная кислота, 1-1-бензодиокси-5-ол, пропионовая кислота, 2-пропанамид, изомаслянная кислота, 1-4-дитозил-2, 3-изопропил-Ь-трейтол, маслянная кислота, нитробензен; изовалериановая кислота, 4-4-ацетомидо-2, 2, 6, 6-тетрометил-пиперидино-1 -оксил; валериановая кислота, ацетамидо-Ы-аминооксиметил, капроновая кислота, лауриловая кислота; 2-метил-5-(1 -метил-этил) - фенол, 4-4-1-метилэтил-бутил-фенол; фенилуксусная, фенилпропионовая кислоты;

• кожных покровов и слизистых оболочек — 1\Г-М-бис-триметилен-тиурам-дисульфид; глицин-метан-сульфонил-хлорид; 4-4-дигидрокси-сульфонил-сульфон; 1, 1-сульфонил-бис (4-хлор) бензен; 3-ацетил-тио-2метил-8-пропановая кислота и Ь-метионин-сульфон.

3. Доказана эффективность хроматографической индикации молекулярных маркёров поражения головного мозга и центральной нервной системы, почек и мочеполовой системы, кожи и слизистых оболочек для лабораторной диагностики сифилиса.

4. Определены три группы молекулярных маркёров по уровню приоритетности: I группа — метаболиты высокого уровня приоритетности (лактоны, ацетилморфолин, метаболиты триптофана и метаболиты серотонина в ликворе, сернистые соединения в крови, фурановые эфиры бора, фенолы и амиды в моче); II группа — метаболиты среднего уровня приоритетности (хинолоны, липидные компоненты сыворотки крови; сернистые соединения в моче); III группа — метаболиты низкого уровня приоритетности (фенилкарбоновые кислоты и ЛЖК в моче, углеводные компоненты сыворотки крови, изомеры Сахаров в ликворе).

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО ММА им. И.

М. Сеченова.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на:

• научной конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ММА им. И. М. Сеченова;

• II Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» 26-28 октября 2005 года, Москва;

• IV Научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» 9-12 сентября 2008 года, Краснодарский край, пос. Джемете;

• совместной научной конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ММА им. И. М. Сеченова и клинико-биохимической лаборатории Института хирургии им. А. В. Вишневского РАМН (31 августа 2007 года, протокол № 9).

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Терехова, Юлия Борисовна

Выводы:

1. В ликворе больных сифилисом определены молекулярные маркёры поражения ЦНС: Б-галактоза, Б-трентол, пировиноградная кислота; метаболиты серотонина и его производных — индолуксусная и индолмасляная кислоты; изомеры глюкозы — а- и (3-глкжоза, Б-манноза, рибоза, 1М-ацетил-ВЬ-триптофан (ацетилированная форма предшественников серотонина), 4-ацетилморфолин (ацетилированная форма гетероциклического амина), являющиеся продуктами деградации наиболее активных субстратов ЦНС — фосфатидилинозитола и фосфатидилэтаноламина.

2. В моче больных сифилисом определены молекулярные маркёры поражения почек: летучие жирные кислоты — уксусная, пропионовая, изомаслянная, маслянная, изовалериановая, валериановая, капроновая, лауриловая; ароматические жирные кислоты — фенилуксусная и фенилпропионовая, 1-1-бензодиокси-5-ол, 2-пропанамид; 1-4-дитозил-2, 3-изопропил- Ь -трейтол; нитробензен; 4-4-ацетомидо-2,2,6,6-тетрометил-пиперадино-1-оксил; ацетамид-М-аминооксиметил, 2-метил-5-(1-метил-этил)-фенол, 4-4-1-метилэтил-бутил-фенол, являющиеся продуктами нарушенного метаболизма углеводов и аминокислот при развитии вторичной инфекции мочеполовой сферы.

4. В крови больных сифилисом определены соединения, которые относятся к группе активаторов «кооперативной чувствительности» микробов и родственные соединения: бутиролактон, 2,3,6,7-тетрагидро-1-Н-5-Н-бензохинолон, диметил-метамин-тригидро-боран, 2,2-бихинолин и 2-фуранил-2~ пропиеновая кислота.

7. Определены 3 группы молекулярных маркёров по уровню приоритетности: I группа — метаболиты высокого уровня приоритетности — лактоны, ацетилморфолин, метаболиты триптофана и серотонина в ликворе, сернистые соединения в крови, фурановые эфиры бора, фенолы и амиды в моче; II группа метаболиты среднего уровня приоритетности — хинолоны, липидные компоненты сыворотки крови, сернистые соединения в моче; III группа — метаболиты низкого уровня приоритетности фенилкарбоновые кислоты и ЛЖК в моче, углеводные компоненты сыворотки крови, изомеры Сахаров в ликворе.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Терехова, Юлия Борисовна, Москва

1. Айвазов Б. В. Введение в хроматографию.- М: Высшая школа. - 1983.-240 с.

2. Аковбян В. А. Заболеваемость сифилисом в России: опыт истории, эпидемиологический анализ, прогнозы // 31И111, 1995 - Т 4 - с . 123-129.

3. Аковбян В. А. и соавт. Сифилис. Иллюстрированное руководство под ред. В. И. Прохоренкова. - М.: Мед.книга.-2002. - 298 с.

4. Аковбян В. А. Новый диагностический комплекс серологических реакций на сифилис: прощание с Вассерманом. // Венеролог. - 2005. - №12 - с. 43-46.

5. Аковбян В. А., Дмитриев Г. А. Комментарий к приказу Минздрава России от 26.03.2001 N 87 "О совершенствовании серологической диагностики сифилиса" //Здравоохр.: Журн. для руководителей и гл. бухгалтера. - 2001 - N 6. - 103-106.

6. Аковбян, Г. В. Бензатин бензил пенициллин (экстенциллин) в лечении раннего скрытого сифилиса.: Дисс. ... канд. мед. наук.-М. - 1998.- 116 с.

7. Аковбян, Г. В. Бензатин бензилпенициллин (экстенциллин) в лечении раннего скрытого сифилиса. Центр, н.-и. кожно-венерол. ин-т.: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - М. -1998.- 14 с.

8. Акопова 3. П. Роль реакции гемагглютинации в серодиагностике сифилиса. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2000. - N 6. - 12-13.

9. Базиков И. А. Новый метод экспресс-диагностики сифилиса с помощью иммуноферментного анализа на стекле. // Здоровье и болезнь как состояния человека : Сборник статей. -Ставрополь. - 2000. - 563-565.

10. Базиков И. А., Тюменцева И. С , Афанасьев Е. Н. Применение трепонемных магнитных иммуносорбентов в иммуноферментном анализе для диагностики сифилиса. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2000. -N3.-С.44-46.

11. Бондаревский Я. И. Роль терапии ex juvantibus в диагностике сифилиса. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2002. - N 1.. 46-47.

12. Венерические болезни. Руководство для врачей под ред. О. К. Шапошникова. - М . Медицина - 1991. - 140 с.

13. Вилявин М. Ю. Диагностика и лечение очаговых поражений печени с помощью компьютерной томографии.: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. - 1986. - 23 с.

14. Витенберг А. Г., Иоффе Б. В. Газовая экстракция в хроматографическом анализе. - Ленинград: Химия. - 1982. -279 с.

15. Воробьев А. А., Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А. Оценка диагностических критериев сифилитической инфекции методом газовой хроматографии и масс-спектрометрии. // Вестник РАМН - 2005. - №2. - с. 22-26.

16. Гариб Н. Ф. Регистрация антигенсвязывающих лимфоцитов как основа нового метода иммунодиагностики сифилиса. // Журнал теоретической и клинической медицины. - 1999. - N 1. -С. 104-107.

17. Гасапов М. М. Дифференцированная тактика хирургического лечения гнойно-некротических заболеваний стопы.: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. - 2000. - 25 с.

18. Гвоздева Л. И. Ошибки в диагностике сифилиса. // Актуальные вопросы дерматовенерологии: Сборник научных трудов, посвященный 70-лет. юбилею акад. РАМН Ю. К. ' Скрипкина. - Курск. -1999. - Вып. 2.- 22-23.

19. Гуляй П. Д., Курилюк В. Приобретенный сифилис у детей. // Здравоохранение. - Минск. - 1999. - N 8. - 55.

20. Данилов И., Назаров П. Г. Новая концепция формирования серорезистентности после лечения сифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 2000. - N 2. - 16-19.

21. Данилов, И. Критерии диагностики, иммунокоррекция и реабилитация больных с серорезистентностью после лечения сифилиса.: Автореферат дисс. ... д-ра мед. наук. - СПб. - 1996. - 3 8 с.

22. Дмитриев Г. А. К вопросу о серорезистентности при сифилисе. // Венеролог. - 2005. - №9 - с. 27-31.

23. Дмитриев Г. А. Состояние лабораторной диагностики сифилиса в России. // Венеролог. - 2005. - №7 - с. 46-30.

24. Дмитриев Г. А. Состояние лабораторной диагностики сифилиса в России. // Венеролог. - 2005. - №10 - с. 33-38.

25. Дмитриев Г. А., Беднова В. Н., Тимченко Г. Ф. И др. Постановка отборочных и диагностических тестов на сифилис: Методические указания. - М.- 2001 - 41 с.

26. Дмитриев Г. А., Брагина Е. Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Часть I. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1996. - № 2. - 29-33.

27. Дмитриев Г. А., Брагина Е. Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Ч. 2. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1996. - № 3. - 33-38.

28. Дмитриев Г. А., Глазко И. И. Диагностика инфекций, передаваемых половым путем. - М.: Бином. - 2007. - 320 с.

29. Дмитриев Г. А., Киселева Г. А., Акопова 3. П. Современное состояние серодиагностики сифилиса. // Вестник службы крови России. - 1999. - № 2. - 25-29.

30. Дмитриев Г. А., Урывская Е. А. Реакция пассивной гемагглютинации в диагностике сифилиса. // Биопрепараты. -2001.- №4. -С. 16-17.

31. Дмитриев Г. А., Фриго Н. В. Сифилис. Дифференциальный клинико - лабораторный диагноз. - М.: Медицинская книга. -2004. - 364 с.

32. Довжанский И. Сифилис. - Саратов. - 1993. - 68 с.

33. Доля О. В. Современные методы профилактики, диагностики и лечения сифилиса у детей: Автореферат дисс. ... д-ра мед. наук. -М. - 2001. -41с.

34. Доля О. В. Современные методы профилактики, диагностики и лечения сифилиса у детей.: Дисс. ... д-ра мед. наук. - М. -2001.-172 с.

35. Дударева Л. А. Клиническая оценка современных методов диагностики у больных ранними формами сифилиса (клинико-лабораторные исследования).: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - М.- 2007. - 23 с.

36. Думченко В. В., Ткаченко Т. А. Анализ ошибок в диагностике сифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 2001. - № 4. - 29-30.

37. Дунязина Т. М. Диагностика сифилиса на стоматологическом приеме. // Институт стоматологии. - 2000. - № 4. - 36-37.

38. Жибурт Е. Б., Бельгесов Н. В., Бондарчук Ю. В., Серебряная Н. Б., Сидоркевич С В . Исследование маркеров сифилиса у доноров гемокомпонентов. // Клиническая лаборатория диагностика. - 1998. - № 11. - 15-17.

39. Жуков А. О. Дифференциальная диагностика сепсиса в хирургической клинике.: Автореферат дисс. доктора, мед. наук.-М.-1998.-33 с.

40. Земляной А. Б. Гнойно-некротические формы синдрома диабетической стопы: патогенез, диагностика, клиника, лечение.: Автореферат дисс. Доктора мед. наук. - М. - 2003. -20 с.

41. Иванов А. М. Совершенствование диагностики сифилиса на основе модифицированного иммуноферментного анализа: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - СПб. - 2000. - 22 с.

42. Иванов А. М. Совершенствование диагностики сифилиса на основе модифицированного иммуноферментного анализа: Дисс. ... канд. мед. наук. - СПб. - 2000. - 202 с.

43. Иванов A.M. Оптимизация серологической диагностики сифилиса: Дисс. .. .доктора мед. наук. - М. — 2005. - 147 с.

44. Иванов В. М. Динамика клинико-серологических показателей у больных ранними формами сифилиса при лечении различными антибиотиками: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. -М. - 1998.-20 с.

45. Иванов, В. М. Динамика клинико-серологических показателей у больных ранними формами сифилиса при лечении различными антибиотиками: Дисс. ... канд. мед. наук. -Новокузнецк. - 1998. - 117 с.

46. Иванова, М. А. Диагностическое и прогностическое значение комплекса факторов, влияющих на исход беременности у женщин, больных и болевших сифилисом: Дисс. ... канд. мед. наук. - М. - 2000. - 110 с.

47. Ильин И. И., Яровинский Б. Г., Галеева А. Тактика врача при сохранении положительных серореакций после лечения ранних форм сифилиса. // Вестник дерматологии. - 1984. - № 2 . - С . 57-61.

48. Истратов В. Г. Диагностика анаэробной хирургической инфекции с помощью газовой хроматографии и масс-спектрометрии. Дисс...доктора мед. наук. - М. - 1991.

49. Истратов В. Г. Диагностика анаэробной хирургической инфекции с помощью газовой хроматографии и масс-спектрометрии.: Автореферат дисс... доктора мед. наук. - М. -1991 -27 с.

50. Истратов В. Г., Жуков А. О. Новые методические подходы к оценке тяжести состояния больных хирургическим сепсисом. Тезисы доклада на международной конференции «Раны и раневая инфекция». - М. - 1993. - с. 361-362.

51. Истратов В. Г., Миронов А. Ю., Осман К. А. Новые методические подходы к диагностике септических состояний с помощью методов газовой хроматографии и хромато-масс-спектрометрии // Клиническая лабораторная диагностика. -2004. - №9. - с. 65.

52. Истратов В. Г., Миронов А. Ю., Осман К. А. Хроматографические аспекты люэтической инфекции // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - №9. - с. 65.

53. Каральник Б. В., Денисова Т. Г., Кешилева 3. Б., Пшеничная Л. А., Азизов Д. А., Тимофеева Л. Н., Амиров Ш. Н. Антигенсвязывающие лимфоциты и антитела в диагностике сифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 1999. - № 5. - 34-36.

54. Кардашенко Б. Я., Сафарова Э. А. Экстрагенитальные твердые шанкры. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 1999. -№ 2 . - С . 30-31.

55. Каур С, Сильм X., Виндиревских Г., Шевчук О. Усовершенствование методов диагностики сифилиса при помощи определения антител к специфическим белкам возбудителя. // Заболевания, передаваемые половым путем. -1998.-№ 4.-С. 21-22.

56. Киселева Г. А., Беднова В. Н., Дмитриев Г. А., Тактамышева Э. А., Волкова 3. И. Новая методика ликвордиагностики нейросифилиса с помощью реакции иммобилизации бледных трепонем. Дата депонирования 28.02.2000. - М. - 1999. - 12.

57. Киселева Г. А., Ткачев В. К., Беднова В. Н., Дмитриев Г. А. Разработка новой методики получения лиофилизированного трепонемного антигена для реакции иммунофлюоресценции при сифилисе. Дата депонирования 28.02.2000. - М. - 2000. - 8 с.

58. Киселева Г. А., Ткачев В. К., Беднова В. Н., Дмитриев Г. А., Тактамышева Э. А., Волкова 3. И. Новая методика ликвордиагностики нейросифилиса методом иммуноферментного анализа. Дата депонирования 28.02.2000. - М. - 2000. 9 с.

59. Комаров Г. Д. Идентификация сальмонелл по составу жирных кислот в системе автоматизированного хромато-электрохимического обнаружения возбудителя.: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. - 1998. - 27 с.

60. Коновалова О. П., Исаева И. В., Журбенко И. А., Савченко Е. В., Бобрышева Н. А. Серорезистентность у больных сифилисом. // Здоровье и болезнь как состояния человека. -Ставрополь. - 2000. - 281-284.

61. Короткий Н. Г., Чиненова Е. Г. Клинико-диагностические особенности раннего врожденного сифилиса. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 1998. - № 6. - 44-47.

62. Короткий Н. Г., Чиненова Е. Г. Современные особенности течения врожденного сифилиса. // Педиатрия. - 1998. - № 3. -С. 61-64.

63. Красносельских Т. В., Соколовский Е. В. Врождённый сифилис: старая проблема на фоне новой эпидемиологической ситуации. // Журналъ акушерства и женских болезней. - 2005. - т.54. - №4. - с. 88-92.

64. Красносельских Т. В., Соколовский Е. В. Сифилис на рубеже тысячелетий. // Венеролог. - 2005. - №4 - с. 76-77.

65. Красносельских, Т. В. Определение спектра и соотношения антитрепонемных антител в диагностике приобретенного сифилиса: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - СПб. - 1998. -22 с.

66. Красносельских, Т. В. Определение спектра и соотношения антитрепонемных антител в диагностике приобретенного сифилиса: Дисс. ... канд. мед. наук. - СПб. - 1997. - 230 с.

67. Кубанова А. А., Кисина В. И., Лосева О. К., Мартынов А. А., Петухова И. И., Бобкова И. Н. Протокол ведения больных «Сифилис». // Вестник дерматологии и венерологии. - 2005. -№ 2 . - с . 15-20.

68. Кулешов Е. Диагностика и хирургическое лечение анаэробной неклостридиальной инфекции мягких тканей: Автореферат дисс. канд. мед. Наук. - М. - 1989. - 48 с.

69. Ломоносов К. М. Иммунорегуляторные нарушения как причина серорезистентности и замедленной негативации серологических реакций при сифилисе (Клинико-иммунологические аспекты): Автореферат дисс. ... д-ра мед. наук. - М. - 2000. - 47 с.

70. Ломоносов К. М., Новоселов B.C. Положительные серологические реакции на сифилис как проблема в клинической медицине. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2005. - №4. - с. 5-7.

71. Ломоносов, К. М. Иммунорегуляторные нарушения как причина серорезистентности и замедленной негативации серологических реакций при сифилисе (Клинико-иммунологические аспекты): Дис. ... д-ра мед. наук. - М. -2000. - 222 с.

72. Лосева В. А., Цыганкова Е. П., Макушкина В. К., Торшина И. Е., Вознесенский В. Л. Ошибки диагностики ранних заразных форм сифилиса. // Российский журнал кожных и венерических болезней. -1999. - № 4. - 15-17.

73. Лосева О. К. Бобкова И. Н. Добрачное, брачное и внебрачное сексуальное поведение и ориентации мужчин и женщин: сравнительное панельное исследование больных сифилисом и здоровых. Часть 2. // ИППП. - 2000. - № 1, - с. 16-22.

74. Лосева О. К. Бобкова И. Н. Изучение сексуального поведения мужчин и женщин, заболевших сифилисом (панельное исследование) // Вестник, дерматологии и венерологии. -1999.-№1,-с.43-45

75. Лосева О. К., Ловенецкий А.Н. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение сифилиса: Руководство для врачей. - М. - 2000. - 62.

76. Лосева О. К., Тактамышева Э. Ш. Современный нейросифилис: клиника, диагностика, лечение. // Русский медицинский журнал. - 1998. - т. 6, № 15. - 981-984.

77. Лосева О. К., Тактамышева Э. Ш., Куприянова Л. В., Шишков А. С , Грудометов Ю. П. Анализ методов диагностики и лечения нейросифилиса в Москве в 1995-1996 г. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1997. - № 3. - 42-45.

78. Лосева О. К., Тактамышева Э. Ш.3 Штульман Д. Р. Современный нейросифилис: диагностика, лечение и тактика ведения больных. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 1999. - № 4. - 39-44.

79. Лукьянов А. М. Клинико-иммунологическая характеристика, диагностика и лечение больных нейросифилисом и серорезистентным сифилисом: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - Минск. - 2000. - 24.

80. Лукьянов А. М., Панкратов В. Г. Клинико- иммунологические аспекты серологической резистентности после лечения сифилиса. // Здравоохранение : Орган МЗ Республики Беларусь. - 2000. - № 6. - 50-51.

81. Люгер А. Ф., Шмидт Б. Л., Каулих М. Значение лабораторных данных для диагностики нейросифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 2000. - № 5. - 4-13.

82. Мавров Г. И., Щербакова Ю. В. Скрытый сифилис на современном этапе. // Венеролог. - 2005. - №1 - с. 27-30.

83. Масеткин И. П., Резникова Л. С , Лучникова Т. А., Елькин В. Д. Серодиагностика сифилиса. - Пермь. - 1977. -195 с.

84. Маховская Т. Г., Кемайкина Л. В., Ананьев К. Г. Проблемы диагностики нейросифилиса. // Актуальные проблемы психиатрии, наркологии и неврологии: Сборник научных трудов. - М. - 1998. - 83-86.

85. Маякова Т. И. Физико-химические методы в экспресс- диагностике возбудителей хирургической инфекции: Автореферат дисс. канд. химических наук. — Иркутск. - 1994. -24 с.

86. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Учебник / под ред. А. А. Воробьева. - М.: Медацинское информационное агенство. - 2004. - 264 с.

87. Метревели Г. В., Джальмухамедова Э. И. Сифилис у новорожденных. // Актуальные вопросы дерматологии и венерологии: Сборник научных трудов, посвященный 60-летию со дня рождения Н. И. Рассказова. - Астрахань. - 1998. -С. 166-168.

88. Милич М. В. Серологическая резистентность при сифилисе. - Москва. -1984. - 48 с.

89. Милич М. В. Эволюция сифилиса. - М.: Медицина. - 1987.-158 с.

90. Милявская И. Р. Горланов И. А., Качанов В. П. Современные вопросы эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики врожденного сифилиса: Учебное пособие для студентов. - ГПМА. - 1999. - 28 с.

91. Миракян М. Е., Бабаян К. Р. Реакция ТРНА в серологической диагностике сифилиса. // Современные проблемы клинической и теоретической медицины: (Сборник научных трудов). - Ереван. - 1998. - 152-154.

92. Миронов А. Ю. Бактериологическое и газохроматографическое исследование неспорообразующих анаэробов при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области и ЛОР-органов.: Дисс... канд. мед. Наук. -М. - 1988.

93. Миронов А. Ю. Бактериологическое и газохроматографическое исследование неспорообразующих анаэробов при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области и ЛОР-органов.: Автореферат дисс. Канд. мед. наук. - М. - 1988.

94. Митрука Б. М. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине. - М.: Медицина. - 1978. - 600 с.

95. Назаров П. Г., Старченко М. Е., Касаткин Е. В., Данилов И. Новая концепция формирования серорезистентности при сифилисе. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1996. - № 6.-С. 17-19.

96. Нейросифилис: клинические формы, течение, диагностика: Учебное пособие. Сост.: Т. Г. Маховская и др.; Дальневосточный гос. мед. Университет, Хабаровский краевой центр психического здоровья. - 1998. - 27 с.

97. Немкаева Р. М., Трубина Е. В. Ранний врожденный сифилис. // Медицинский журнал Чувашии. - 1997. - т. 8, №3 -с. 137-139.

98. Овчинников Н. М., Беднова В. Н., Делекторский В. В. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. - М.: Медицина. - 1987. - 303 с.

99. Овчинников Н. М., Делекторский В. В. Ультраструктура возбудителей венерических заболеваний и её клиническое значение. - М.: Медицина. - 1986. - 224 с.

100. Оловянишников О. В., Крышко Д. К. К вопросу дифференциальной диагностики сифилитического облысения. // Сборник материалов конференции: Пробл., пути развития. -СПб. - 2000. - Ч. 2. - 193-194.

101. Осман К А. Хроматографические диагностические критерии люэтической инфекции: Автореферат дисс. ... кандидата мед. наук. - М. - 2005. - 47 с.

102. Осман К. А. Хроматографические диагностические критерии люэтической инфекции: Дисс. ... канд. мед. наук. -М. - 2005. - 123 с.

103. Панкратов О. В. Роль перекисного окисления липидов в патогенезе сифршиса. // Здравоохранение. - Минск. - 1999. - № 8.-С. 10-14.

104. Папий Н. А. Ошибки в диагностике манифестных форм сифилиса. // Здравоохранение: Орган МЗ Республики Беларусь -1996.-№ 5.-С. 67-68.

105. Парфенова Н. В., Карелин В. О неспецифических положительных серологических реакциях на сифилис. // Труды врачей и фармацевтов Могилевщины: (К 135-летию врачебного общества). -Могилев. - 1999. - 487-489.

106. Платонова О. К. Поражение нервной системы при сифилисе. Соматоневрологические синдромы // Сборник научных трудов. - М. - 1996. - 110-113.

107. Пожарская В. О. Функциональные свойства клеточных структур культуральных Treponema pallidum. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1997. -№ 3 . - С . 11-14.

108. Пожарская В. О. Функциональные свойства клеточных структур культуральных бледных трепонем и научно-производственная разработка новых специфических диагностических препаратов на сифилис: Автореферат дисс. ... д-ра мед. наук. - М. - 1997. - 33.

109. Пожарская В. О. Функциональные свойства клеточных структур культуральных бледных трепонем и научно-производственная разработка новых специфических диагностических препаратов на сифилис: Дисс. ... д-ра мед. наук. - Ставрополь. - 1996. - 247.

110. Попов А. Дифференциация культур микобактерий туберкулеза методами газожидкостной хроматографии: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. - 1991. - 22 с.

111. Попова О. В., Ялхороева Р. М., Коновалова О. П., Исаева И. В. Серологические рецидивы у больных заразными формами сифилиса. // Здоровье и болезнь как состояния человека: Сборник статей. - Ставрополь, 2000. - 284-286.

114. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 26.03.2001 г. № 87 "О совершенствовании серологической диагностики сифилиса". // Здравоохранение: журнал для руководителей и главного бухгалтера. - 2001. - № 7. - 50-75.

115. Приказ Министерства здравоохранения РФ от 26.03.2001 № 87 "О совершенствовании серологической диагностики сифилиса". // Здравоохранение: журнал для руководителей и главного бухгалтера. - 2001. - № 6. - 77-102.

116. Прохоренков В. И., Мисенко Д. Н., Карачева Ю. В., Шергин Н., Родиков М. В. Нейросифилис (патогенез, диагностика и лечение): Обзор. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1997. - № 5. - 20-25.

117. Пшеничная Л. А. Организация и эффективность службы серологической диагностики сифилиса в лечебно-профилактических учреждениях Республики Казахстан: Автореферат дисс. д-ра мед. наук. - М. - 1997. - 32.

118. Пшеничная Л. А. Организация и эффективность службы серологической диагностики сифилиса в лечебно-профилактических учреждениях Республики Казахстан: Дисс. ... д-ра мед. наук. - Алматы. - 1997. - 196.

119. Разнатовский И. М., Красносельских Т. В., Соколовский Е. В. Поражение нервной системы и внутренних органов у больных ранним приобретенным сифилисом в настоящее время. // Журнал дермато-венерологии и косметологии. - 1996. - №1.-С.67-71.

120. Раснюк О. В. Совершенствование диагностики манифестных форм сифилиса, ассоциированных с эндотоксикозом. Оптимизация фармакотерапии и фармакоэкономический анализ.: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - М.- 2007. - 24 с.

121. Рассказов Н. И., Алтухов А., Еланцева Т. X. Ранний врожденный сифилис в неонатальном периоде: клинические особенности и диагностические проблемы. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 1999. - № 4. - 33 - 3 6 .

122. Родиков М. В. Современные особенности клиники и течения нейросифилиса: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - Новосибирск. - 1998. - 21.

123. Родиков М. В. Современные особенности клиники и течения нейросифилиса: Дисс. ... канд. мед. наук. -Красноярск. - 1998. - 159.

124. Родин Ю. А., Родин А. Ю. Персистенция бледных трепонем и иммунитет при сифилисе. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2000. - № 6. - 23-24.

125. Родионов А. Н. Сифилис. - СПб. Питер. - 2007. - 320 с.

126. Рокицкая В. Н., Минуллин И. К., Низамова Н. Ю., Бильдюк Е. В., Платонова О. В. Практические аспекты современной серологической диагностики сисфилиса. // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 2005. - № 4 . - с . Ю-12.

127. Румянцева Е. В., Бакулев А. Л., Суворов А. П. Сравнительный анализ чувствительности некоторых серологических методов диагностики при различных формах сифилиса. // Новые технологии в медицине : Сборник научных трудов - Саратов. - 1999. - 143-145.

128. Селютина О. В. К диагностике сифилиса. // Стоматология. - 2000. т. 79. - № 2. - 50.

129. Скотникова О. И. Применение новых молекулярно- биологических технологий для выявления Mycobacterium tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью.: Дисс. ... доктора биологических наук. - М. - 2006. - 215 с.

130. Сметов В. К., Моргуль М. П., Уразовская Е. В., Крушинская И. А. О применении иммуноферментного анализа в диагностике сифилиса. // Вестник дерматологии и венерологии. - 1997. № 3. - 46-47.

131. Соколовский Е. В. Серологическая резистентность после лечения сифилиса (причины и факторы развития, профилактика и лечение): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. -Санкт-Петербург. - 1995. -40 с.

132. Соловых Н. Н., Оркин В. Ф., Завьялов А. И., Бакулев А. Л., Румянцева Е. В., Денисов Н. Нейросифилис: наблюдения из практики последних лет. // Российский журнурнал кожных и венерических болезней. - 1998. - № 5. -С. 31-34.

133. Суколин Г. И. Клинико-эпидемиологические особенности сифилиса и его дифференциальная диагностика. Иллюстрации к докладу, сделанному на XVI Рахмановской конференции. // Российский журнурнал кожных и венерических болезней - 1999. - № 4. - 44-48.

134. Сурганова, В. И. Эпидемиологические и клинико- диагностические аспекты раннего скрытого сифилиса: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - Екатеринбург. - 1998. -С. 21.

135. Сурганова, В. И. Эпидемиологические и клинико- диагностические аспекты раннего скрытого сифилиса.: Дисс. ... канд. мед. наук. - Екатеринбург. - 1998. - 205.

136. Сухова Л. П., Машеро В. В., Воинова Н. Н., Щербаков В. М. Опыт применения иммуноферментных тест-систем с использованием рекомбинантных белков в диагностике сифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 1999. - № 1 . - 34-35.

137. Тактамышева, Э. Ш. Современные методы диагностики и лечения нейросифилиса.: Автореферат дисс. ...канд. мед. наук.-М.-1999.-С. 25.

138. Тактамышева, Э. Ш. Современные методы диагностики и лечения нейросифилиса.: Дисс. ...канд. мед. наук. - М. -1999.-С. 124.

139. Теличко, И. Н. Оптимизация диагностики и лечения раннего нейросифилиса.: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук.-СПб.-2001.-С. 18.

140. Тония К. Лечение больных серорезистентной формой сифилиса (клинико-иммунологические и электронно-микроскопические исследования). // Мед. новости Грузии. -1997.-№ 10.-С. 24-25.

141. Торшина И. Е., Лосева В. А., Цыганкова Е. П., Тарасова Н. Н., Макушкина В. К. Клиника, диагностика и профилактика раннего врожденного сифилиса. // Российский журнурнал кожных и венерических болезней. - 1999. - № 4. - 36-39.

142. Федосеева С В . Биотехнологические подходы к повышению информативности серологической диагностики сифилиса.: Автореферат дисс. ... канд. биолог, наук. - М;-2005.-20 с.

143. Фриго Н. В., Главинская Т. А., Комарова В. Д., Новикова И. Новые возможности "Lues Screen": определение антител к ДНК в сыворотках крови, исследованных для подтверждения сифилиса. // Заболевания, передаваемые половым путем. -1998.-№6.-С. 17-21.

144. Фриго Н. В., Китаева Н. В., Ротанов В. Современные аспекты дифференциальной диагностики ложноположительных результатов серологических реакций на сифилис. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2005. - №4. - с. 16-20.

145. Фриго, Н. В. Современные критерии дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных результатов стандартных серологических реакций на сифилис: Автореферат дисс. ... д-ра мед. наук. - М. - 2001. - 34.

146. Фриго, Н. В. Современные критерии дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных результатов стандартных серологических реакций на сифилис: Дисс. ... д-ра мед. наук. - Н. Новгород. - 2001. - 446 с.

147. Фришман М. П. О серологической устойчивости после лечения больных сифилисом. // Вестник дерматологии - 1984. - №7. - 32-34.

148. Фурнье Альфред. Учение о сифилисе: Пер. с франц. — СПб.-1903.-Т. 1.-254 с.

149. Фурнье Альфред. Учение о сифилисе: Пер. с франц. - СПб.-1903.-Т. 2.-523 с.

150. Хамаганова И. Дифференциальна диагностика сифилиса. // Венеролог. - 2005. - №7 - с. 34-40.

151. Ховальт В. Т. Оментобурсотомия в хирургическом лечении инфицированного панкреонекроза: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. - 2004. - 26 с.

152. Хурадо Р. Л. Серология сифилиса: практический подход. // Заболевания, передаваемые половым путем. - 1997. - № 3. -С. 3-10.

153. Цераиди Н. Ф., Мажников А. Т., Короткое Н. В., Дерюгин И. Л. Актуальные аспекты серорезистентности у больных сифилисом. // Заболевания, передаваемые половым путем. - 1998. - № 4. - 23-26.

154. Чеботарёв В. В., Земцов М. А., Чеботарёва Н. В. Серологические реакции в диагностике сифилиса: реальность и перспективы. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2005. - №4. - с. 7-10.

155. Чеботарев В. В., Павлик Л. В., Гужвиева О. Д., Чеботарева Н. В. Актуальные проблемы нейросифилиса. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2002. - № 1. - 69-71.

156. Чернова Т. А. Региональные проявления эпидемиологического процесса и новые алгоритмы серодиагностики сифилиса.: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук.-М.-2006.-21 с.

157. Чимитова И. А. Серорезистентный сифилис и обоснование применения цефалоспорина III поколения цефтриаксона в лечении этого состояния: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - М. - 2000. - 22.

158. Чимитова И. А. Серорезистентный сифилис и обоснование применения цефтриаксона в лечении больных: Дисс. ... канд. мед. наук. - М. - 2000. - 101.

159. Шахматов Д. А. Сравнительная оценка полимеразной цепной реакции в лабораторной диагностике сифилиса: Автореферат дисс. ... канд. мед. наук. - Новосибирск. - 1999. -С. 16.

160. Шахматов Д. А. Сравнительная оценка полимеразной цепной реакции в лабораторной диагностике сифилиса: Дисс. ...канд. мед. наук. - Новосибирск. - 1999. - 87.

161. Шахматов Д. А., Кузнецов П. В., Киншт В. Н. Полимеразная цепная реакция в диагностике сифилиса. // Консилиум. - 1999. - № 3. - 28-30.

162. Ширшов О. Н. Комплексное хирургическое лечение некротической формы рожи: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М . - 1999.-32 с.

163. Штульман Д. Р., Лосева О. К., Артемьев Д. В., Хатиашвили И. Т., Тактамышева Э. А. Нейросифилис: современное состояние проблемы. // Российский медицинский журнал.- 1998.-№ 2.-С. 11-16.

164. Штульман Д. Р., Лосева О. К., Тактамышева Э. Ш. Клиника, диагностика и лечение современного нейросифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. -1999.-№ 2.-С. 22-25.

165. Штульман Д. Р., Лосева О. К., Тактамышева Э. Ш. Клиника, диагностика и лечение современного нейросифилиса. // Инфекции, передаваемые половым путем. -1999.-№3.-С. 12-15.

166. Шулешова Н. В., Никитина В. В., Скоромец А. А., Голиков К. В., Пешков Б. А. Трудности диагностики ранних форм нейросифилиса. // Ученые записки -Петербургского государственного медицинского университета им. И. П. Павлова. - 2000. - № 1. - 66-69.

167. Щербаков М. А. Комплексное лечение больных серорезистентным сифилисом с использованием иммуномодулятора "Полиоксидоний": Дисс. ... канд. мед. наук. -М. - 2001. -С. 133.

168. Эглстоун И., Тернер А. Дж. Л. Серологическая диагностика сифилиса: Обзор // Инфекции, передаваемые половым путем. - 2001. - № 3. - 4-9.

169. Эфендиев И. X. Клиника, диагностика и лечение неклостридиальной анаэробной инфекции у больных абсцессами легких: Автореферат дисс. канд. мед. наук. - М. -1986.-28 с.

170. Юцковский А. Д., Дубняк Н. С, Стефанович Я. А., Каменская О. Г. Особенности клинических проявлений сифилиса. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2000. - № 1. - 41-42.

171. Юцковский А. Д., Тихомирова Н. В., Стефанович Я. А., Миловидова Е. В., Черных Н. К проблеме серологической резистентности при сифилитической инфекции. // Инфекции, передаваемые половым путем. - 2000. - № 1. - 23-28.

172. Юцковский А. Д., Хаманина М. Б. К проблеме сифилитической инфекции среди детей. // Вестник постдипломного образования. - 2002. - №1. - с. 97-98.

173. Яковлев Н. А., Дубенский В. В. Нейросифилис (клиника, диагностика, лечение). Учебное пособие под редакцией В. В. Дубенского - Тверь - 2004 - 175 с.

175. Aplevich VA. Use of immunoenzyme test systems for diagnosis of syphilis in the troop unit of a medical service // Voen Med Zh. -2001. № 322(1). - P. 30-33.

176. Basse-Guerineau A.L., Assous M.V. Interpretation of questionable syphilis serologies. // Rev Prat. - 2004. - № 54(4). -P. 387-391.

177. Brown D.L., Frank J.E. Brown D.L., Frank J.E. Diagnosis and management of syphilis. // Am Fam Physician. - 2003. № 68 (2). - P. 283-290.

178. Castro R., Prieto E.S., Santo I, Azevedo J, Exposto Fda L. Evaluation of an enzyme immunoassay technique for detection of antibodies against Treponema pallidum. // J Clin Microbiol. -2003. №41(1) .-P. 250-253.

179. Centrurion-LaraA, Castro С, Shaffer JM, Van VoorhisWC, Marra CM, Lukehart SA. Detection of Treponema pallidum by a sensitive reverse transcriptase PCR // Journal of Clinical Microbiology. - 1997. - № 35. - P. 1348-1352.

180. Collart P., Borel L., Durel P. Significance of spiral organisms found, after treatment in latt human and experimental syphilis. // Brit J Vener Dis - 1964. - № 40 (2). - P. 81-89.

181. Dettori G, Grille R, Mora G, Cavalli A, Alinovi A, Chezzi C, et al. Evaluation of western immunoblotting technique in the serological diagnosis of Human syphilitic infections. // European Journal of Epidemiology. - 1989. - № 5. - P. 22-30.

182. Dicker LW, Mosure DJ, Steece R, Stone KM. Laboratory tests used in US public health laboratories for sexually transmitted diseases, 2000. // Sex Transm. Dis. - 2004. - № 31(5). - P. 259-264.

183. Fleck F., Fleck M. Lehrbuch der Haut- und Geschlechtskrankheiten Berlin: Veb Verlag Volk und Gesundheit. 1962.-P. 320-338.

184. Golden M.R., Marra СМ., Holmes K.K. Update on syphilis: resurgence of an old problem. // JAMA. - 2003. - № 290(11). - P. 1510-1514.

185. Goldmeier D., Guallar С Syphilis: an update. // Clin Med. - 2003.-№3(3). _ p . 209-211.

186. Gosbell LB., Sullivan E.A., Maidment C.A. An unexpected result in an evaluation of a serological test to detect syphilis. // Pathology. - 1999. - № 31(4). - P. 398-402.

187. Guglielmone H., Vitozzi S., Elbarcha O., Fernandez E. Cofactor dependence and isotype distribution of anticardiolipin antibodies in viral infections. // Ann Rheum Dis. - 2001. - № 60(5). - P. 500-504.

188. Gutierrez J., Vergara M. J., Soto M. J., Piedrola G., Maroto M. Clinical utility of a competitive ELISA to detect antibodies against Treponema pallidum. // J Clin Lab Anal. - 2000. - № 14(2).-P.83-86.

189. Hartmann M. Therapy of syphilis. // Hautarzt. - 2004. - № 55(2).-P. 215-216.

190. Hollier L. М., Hill J., Sheffield J. S., Wendel G. D. Jr. State laws regarding prenatal syphilis screening in the United States. // Am J Obstet Gynecol. - 2003. - № 189(4). - P. 1178-1183.

191. Kolman C.J., Centurion-Lara A., Lukehart S.A., Owsley D.W., Tuross N. Identification of Treponema pallidum subspecies pallidum in a 200-year-old skeletal specimen. // J Infect Dis. -1999. - № 180(6). - P . 2060-2063.

192. Kouznetsov AV, Prinz JC. Molecular diagnosis of syphilis: the Schaudinn-Hoffmann lymph-node biopsy. // Lancet. - 2002. -№360(9330). P. 388-389.

193. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. // Clinical Microbiology Reviews. - 1995. - № 8. - P. 1-21.

194. Lewis L.L., Taber L.H, Baughn R.E. Evaluation of immunoglobulin M western blot analysis in the diagnosis of congenital syphilis. // Journal of Clinical Microbiology. - 1990. -№ 28. P. 296-302.

195. Linde K. Grundriss der Medizinischen Mikrobiologie fur Medizinisch-technische Assistentinnen Leipzig // Veb Georg Thhieme. - 1963. - suppl. 47-83. - P. 218-222.

196. Nagano I, Abe K. Neurosyphilis. // Nippon Rinsho. - 2004. - №62, Suppl.-P. 231-234.

197. Orle K. A., Gates С A., Martin D. A., Body B. A., Weis J. B. Simultaneous PCR detection of Haemophilus ducreyi, Treponema pallidum and herpes simplex virus 1 and 2 from genital ulcers // Journal of Clinical Microbiology. - 1996. - № 34. - P. 49-54.

198. Osato K. Syphilis. // Nippon Rinsho. - 2003. - № 61, Suppl. 2. - P. 542-546.

199. Peeling R.W, Ye H. Diagnostic tools for preventing and managing maternal and congenital syphilis: an overview. // Bull World Health Organ. - 2004. - № 82(6). - P. 439-446.

200. Peeling R.W., Mabey D.C. Syphilis. // Nat Rev Microbiol. - 2004. - № 2(6). - P. 448-449.

201. Phelps R.G., Knispel J., Tu E.S., Cernainu G., Sarak M. Imrnunoperoxidase technique for detecting spirochetes in tissue sections: comparison with other methods. // Int J Dermatol. - 2000. - № 3 9 (8).-P. 609-613.

202. Romanowski В., Sutherland R., Pick G.H., Mooney D., Love E.J. Serologic response to treatment of infectious syphilis // Annals of Internal. Medicine. - 1991. - № 114. - P. 1005-1009.

203. Rosanna W. Peeling, Hum Ye Diagnostic tools for preventing and managing maternal and congenital syphilis: an overview // Bulletin of the World Health Organization. - 2004. - № 82(6).-P. 439-446.

204. Saloojee H, Velaphi S, Goga Y, Afadapa N, Steen R, 1.incetto O. The prevention and management of congenital syphilis: an overview and recommendations.// Bull World Health Organ. - 2004 - №82 (6) - P. 424-30.

205. Sato NS, de Melo CS, Zerbini LC, Silveira EP, Fagundes LJ, Ueda M. Assessment of the rapid test based on an immunochromatography technique for detecting anti-Treponema pallidum antibodies.// Rev Inst Med Trop Sao Paulo. - 2003 -№45(6)-319-322.

206. Schaffzin JK, Koumans EH, Kahn RH, Markowitz LE. Evaluation of syphilis reactor grids: optimizing impact. // Sex Transm Dis. - 2003 - №30(9) - P. 700-706.

207. Schmid G. Economic and programmatic aspects of congenital syphilis prevention. // Bull World Health Organ. - 2004 -№82(6)-P. 402-409.

208. Shin J.L., Chung K.Y., Kang J.M., Lee Т.Н., Lee M.G. The effects of Treponema pallidum on human dendritic cells. // Yonsei Med J. - 2004 - №30;45(3) - P. 515-522.

209. Siedner M., Zapitz V., Ishida M., De La Roca R., Klausner J.D. Performance of rapid syphilis tests in venous and fingerstick whole blood specimens // Sex Transm Dis. - 2004 - №31(9) - P. 557-60.

210. Singh AE, Romanowski B. Syphilis: review with emphasis on clinical, epidemiologic, and some biologic features // Clinical Microbiology Reviews. - 1999 - №12 - P. 187-209

211. Steuerwald U, Sander J, Sander S, Janzen N, Andree M. Syphilis specific antibodies in newborn infants in Lower Saxony, Germany 1993-2001. // Sex Transm Infect. - 2003 - №79(4) - P. 351-352.

212. Thoma-Greber E. Syphilis - renaissance of a forgotten disease? A recommendation of the DSTDG for diagnosis and therapy // Hautarzt. 2003 - №54 (12) - P. 1224-8.

213. Uthman I.W., Bizri A.R., Gharavi A.E. Infections and antiphospholipid antibodies. // J Med Liban. - 2000. - №48(5) - P. 324-326.

214. Venkatesh P., Verma L., Garg S.P., Tewari H.K. Rapid seroconversion to Treponema pallidum and HIV positivity in a patient with retinal vasculitis. // Clin Experiment Ophthalmol. -2002. - №30 (4) - P. 297-299.

215. Wenhai L., Jianzhong Z., Cao Y. Detection of Treponema pallidum in skin lesions of secondary syphilis an characterization of the inflammatory infiltrate.// Dermatology. - 2004. - №208(2) -P. 94-97.

216. Wheeler H.L., Agarwal S., Goh B.T. Dark ground microscopy and treponemal serological tests in the diagnosis of early syphilis. // Sex Transm Infect. - 2004. - №80 (5) - P. 411-414.

217. Wicher K, Horowitz H.W., Wicher V. Laboratory methods of diagnosis of syphilis for the beginning of the third millennium. // Microbes and infections. - 1999. - №1 - 1035-1049.

218. World Health Organization. Laboratory diagnosis of sexually transmitted diseases. Geneva: World Health Organization; 1999

219. World Health Organization. Laboratory tests for the detection of reproductive tract infections, 1999 available from http: // www. wpro. who. int pdf/rti. pdf

220. Young H., Aktas G., Moyes A. Enzywell recombinant enzyme immunoassay for the serological diagnosis of syphilis. // Int J STD AIDS. - 2000 - №11 (5) - 288-291.

221. ZarakoluP, Buchanan-I., Tarn M., Smith K, Hook EW. Preliminary evaluation of an immunochromatographic strip test for specific Treponema pallidum antibodies. // J Clin Microbiol. -2002. - № 40 (8) - P. 3064 - 3065.

Информация о работе

Терехова, Юлия Борисовна
кандидата медицинских наук
Москва, 2008
ВАК 03.00.07

Диссертация

Молекулярные маркеры сифилитической инфекции - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Молекулярные маркеры сифилитической инфекции ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Молекулярные маркеры сифилитической инфекции"

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Терехова, Юлия Борисовна

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярные маркеры сифилитической инфекции"

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Терехова, Юлия Борисовна

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Терехова, Юлия Борисовна, Москва

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярные маркеры сифилитической инфекции
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология