Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярно-генетическое изучение наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия)
ВАК РФ 03.00.15, Генетика
Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетическое изучение наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия)"
На правах рукописи
БАРАШКОВ НИКОЛАЙ АЛЕКСЕЕВИЧ
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ НАСЛЕДСТВЕННОЙ НЕСИНДРОМАЛЬНОЙ СЕНСОНЕВРАЛЬНОЙ ГЛУХОТЫ В РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ)
03.00.15 - генетика
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
ии^иьЭОВ7
Уфа-2007
003059067
Работа выполнена в Якутском научном центре Российской Академии медицинских наук и Правительства Республики Саха (Якутия) и в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской Академии наук
Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор Хуснутдинова Эльза Камилевна
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор
Мустафина Ольга Евгеньевна
доктор медицинских наук Зинченко Рена Абульфазовна
Ведущая организация:
Институт Общей генетики им Н И. Вавилова РАН
Защита состоится " 31 " мая 2007 г. в / V
часов
на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002 133 01 при Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу 450054, Уфа, просп Октября, д 71
С диссертацией и авторефератом можно ознакомиться в Научной библиотеке Уфимского научного центра РАН, по адресу. 450054, Уфа, просп Октября 71 и на сайте Института биохимии и генетики http //www anrb ni/molgen/dissov html
Автореферат разослан " ¿8 " акселя 2007 г
Ученый секретарь
Регионального диссертационного совета,
кандидат биологических наук Бикбулатова С М
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Распространенность врожденной тугоухости и глухоты составляет 1 на 650-1000 новорожденных детей [Mehl et al, 2002, Chalestori et al, 2007] По данным ВОЗ, число людей с различными формами тугоухости и глухоты в России около 13-20 млн [Гинтер и соавт, 2002, Зинченко и соавт, 2007] Распространенность наследственной сенсоневральной тугоухости в Республике Саха (Якутия) составляет 6,2 10s [Тарская и соавт, 2004], что превышает аналогичный показатель по Центральному Федеральному округу РФ в 1,85 раз [Федотова и соавт, 2005] По опубликованным данным, наследственная сенсоневральная тугоухость является одним из пяти наиболее распространенных наследственных заболеваний в Республике Саха (Якутия) наряду с такими частыми моногенными болезнями, как спиноцеребеллярная атаксия 1 типа и миотоническая дистрофия Россолимо-Куршмана-Штейнерта-Батгена [Платонов, 2003, Тарская и соавт, 2004, Сухомясова, 2005]
Примерно 50-60% всех случаев врожденной глухоты имеют наследственные причины [Morton, 1991, Willems, 2000] Наиболее частая форма наследственной глухоты - несиндромальная сенсоневральная глухота (HCT), характеризующаяся клиническим полиморфизмом и генетической гетерогенностью [Cryns et al, 2005] Среди всех идентифицированных генов наследственной глухоты наиболее значимыми являются гены белков-коннексинов 26 (GJB2) и 30 (GJB6), вклад которых в развитие несиндромальных и некоторых синдромальных форм составляет от 4 до 80% [Morton, 2006, Petersen et al, 2006].
Трансмембранные белки, кодируемые генами GJB2 и GJB6, участвуют в образовании межклеточных контактов - коннексонов - в тканях внутреннего уха, которые ответственны за перенос малых молекул, и обеспечивают, в основном, циркуляцию ионов К+ в улитке При дефектах синтеза этих белков происходит нарушение гомеостаза эндолимфы, что приводит к отмиранию волосковых рецепторных клеток и развитию потери слуха по сенсоневральному типу [Kikuchi et al, 1995]
Кроме генов белков-коннексинов, непосредственно участвующих в процессе звуковосприятия, рядом исследователей [Prezant et al, 1993, Estivill etal, 1998] показано, что некоторые мутации генов митохондриалыюй ДНК могут обуславливать «гиперчувствительность» к ототоксическим лекарственным препаратам и вызывать потерю слуха Рибосомальная РНК в волосковых клетках - наиболее вероятная мишень для таких препаратов аминогликозидного ряда как канамицин, гентамицин, стрептомицин, мономицин и т д, наравне с «естественной мишенью» данных антибиотиков - бактериальной рРНК Показано, что замена A1555G в гене 12SrRNA мтДНК делает митохондриальную рРНК человека похожей по структуре на бактериальную рРНК, вследствие чего она становится мишенью для данных лекарственных препаратов [Prezant et al, 1993] Поскольку применение антибиотиков из группы аминогликозидов широко распространено, изучение частоты мутаций A1555G в гене 12S rRNA, и мутаций A7445G и Т7511С в гене tRNASER является актуальным для оценки риска возникновения сенсоневрапьной глухоты в семьях с отягощенным наследственным анамнезом
Целью настоящего исследования является анализ генов коннексина 26 (GJB2'), коннексина 30 (GJB6), генов мтДНК 12S rRNA и tRNAsm у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой и в популяциях Республики Саха (Якутия)
Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:
1 Провести поиск мутаций и полиморфных вариантов в генах GJB2 и GJB6 у больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия)
2 Изучить частоту идентифицированных мутаций гена GJB2 в популяциях якутов и русских из Республики Саха (Якутия)
3 Провести анализ патогенетически значимых мутаций мтДНК A7445G и Т7511С в гене tRNASCR, мутации A1555G в гене 12S rRNA у больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия)
4 Оценить частоту мутации A1555G в гене 12S rRNA мтДНК в популяции якутов
5 Разработать на основе полученных данных алгоритм ДНК-диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в семьях высокого риска в Республике Саха (Якутия)
Научная новшна
В настоящей работе впервые проведено молекулярно-генетическое изучение наследственной несиндромальной глухоты в Республике Саха (Якутия) Впервые получены данные о спектре и частоте мутаций в генах GJB2, GJB6, 12S rRNA и tRNAstA у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой в Республике Саха (Якутия). Оценен вклад мутаций 35delG, V37I гена GJB2 и мутации A1555G гена 12S rRNA в развитие несиндромальных форм глухоты в Якутии Показана этническая неоднородность по спектру и частоте найденных 1 мутаций гена GJB2 в исследованной выборке больных Установлена частота носительства идентифицированных мутаций гена GJB2 в популяциях якутов и русских из РС(Я)
Практическая значимость.
Разработан алгоритм выявления носителей мутаций генов GJB2 и 12S rRNA и проведения ДНК-диагностики наследственной несиндромальной глухоты в семьях высоко риска, что является необходимой предпосылкой повышения эффективности медико-генетического консультирования и профилактики наследственной патологии в РС(Я) Результаты настоящего исследования внедрены и применяются в работе медико-генетической службы региона
Положения, выносимые на защиту:
1 Спектр и частоты мутаций 35delG, 333-334delAA, 312-326dell4, V37I, R127H, R98L и полиморфных вариантов V27I, E114G и М34Т гена GJB2 у больных несиндромальной глухотой из РС(Я)
2 Идентификация мутации A1555G гена 12S rRNA мтДНК у пациентов с несиндромальной глухотой якутов, по этнической принадлежности и частота мутации A1555G гена 12S rRNA в популяции якутов
3 Неоднородность популяций русских и якутов по частоте гетерозиготного носительства мутации 35с1еЮ в гене ОЛ}2
4 Частота носительства мутации У371 в гене 0.1В2 в популяции якутов
5 Алгоритм молекулярно-генетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия)
Апробация работы.
Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на республиканской научно-практической конференции «Теория и практика комплексной реабилитации детей с ограниченными возможностями здоровья» (Нерюнгри. 2005), на международной научно - практической конференции «Генетические аспекты патологии человека Проблемы сохранения генофонда коренных народов Севера» (Якутск, 2005), на международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов 2006» (Москва 2006), межлабораторном семинаре Отдела молекулярной генетики Якутского научного центра Российской Академии медицинских наук и Правительства РС(Я), на 13 международном конгрессе «Приполярная медицина» (Новосибирск, 2006) Публикации
По теме диссертации опубликовано 7 работ, в том числе 3 статьи
Структура н объем работы
Диссертационная работа изложена на 130 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 182 источника (40 - отечественных и 142 иностранных) Диссертация иллюстрирована 40 рисунками, 18 таблицами и дополнена приложением (7 стр )
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В качестве материала для данной работы были использованы пробы ДНК 79 пациентов из 65 неродственных семей с диагнозом двухсторонняя сенсоневральная тугоухость Ш-ГУ степени, предположительно, наследственной
этиологии, а также образцы ДНК членов их семей (всего 86 человек) Материал для исследования предоставлен медико-генетической консультацией РБ№1-НЦМ г Якутска, Сурдологопедическим центром РБ№1-НЦМ г Якутска из числа амбулаторных больных, а также получен в ходе выездов в Республиканские специализированные (коррекционные) школы-интернаты для глухих и слабослышащих детей Все пациенты были осмотрены врачами сурдологами-оториноларингологами и генетиками Всем больным были проведены тональные аудиометрические исследования по костному и воздушному проведению, в некоторых случаях, по показаниям была проведена импедансометрия и РКТ (рентгеновская компьютерная томография) височных костей В ходе исследования уточнялись данные об этнической принадлежности больных путем опроса и выяснения национальной принадлежности родителей Возраст пробандов варьировал от 4 до 22 лет В 47 семьях выявлен аутосомно-рецессивный тип наследования, в 4-х семьях - аутосомно-доминантный, а в 15 семьях, в виду отсутствия генеалогической информации, тип наследования не установлен По этническому составу больные распределились следующим образом 59 якутов из 48 семей, 10 русских из 9 семей, 1 украинец, 3 ингуша из 1 семьи, 1 эвенк, 1 эвен, 3 метиса - русский/якут из 2 семей, 1 метис (украинец/якут) В качестве материала для популяционно-генетического исследования были использованы образцы ДНК здоровых доноров без признаков снижения слуха (N=120) из 2 этногеографических групп якутов (центральные и вилюйские якуты), этническая принадлежность которых учитывалась до третьего поколения Для расчета частоты гетерозиготного носительства мутации 35(1еЮ использовались вышеперечисленные образцы ДНК, а также рандемичная выборка якутов (N=127) (этническая принадлежность которых не учитывалась до третьего поколения, а была установлена путем опроса обследованных) и контрольная популяция русских (N=53) из Банка ДНК ЯНЦ РАМН и Правительства РС (Я)
Методы исследования.
ДНК выделяли из периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции [Mathew et al, ] 984] Анализ мутации 35delG в гене GJB2 проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью праймеров предложенных ранее [Anichkina et al, 2001] Детекцию мутаций 167delT и 235delC гена GJB2 проводили методом ПЦР/ПДРФ с использованием эндонуклеаз рестрикции Apal (235delC) и Pstl (167delT) Скрининг мутации D(GJß6-D13S1830) в гене коннексина 30 (GJB6) выполнен с использованием двух последовательных ПЦР, охватывающих район делеции, с помощью праймеров позволяющих выявить breakpoints-junction фрагменты в 390 пн. и 335 п н , соответственно [Pallarez-Ruez et al, 2002] Скрининг мутаций A7445G и Т7511С в гене tRNASER проводили с помощью ПДРФ-анализа (Xbal и MboII, соответственно) [Reid et al, 1997] Детекцию мутаций A1555G в гене 12S rRNA проводили также с помощью ПДРФ-анализа (HaeIH) [Estivill et al, 1998] Результаты амплификации оценивались путем проведения вертикального электрофореза в полиакриламидных гелях с последующим окрашиванием в растворе бромистого этидия
Исследование образцов ДНК на наличие мутаций и полиморфных вариантов в гене GJB2 проводили методом SSCP-анализа (Single Strand Conformation Polymorphism) [Orita et al, 1989] с последующим определением последовательности нуклеотидов на автоматическом секвенаторе ABI Prism 310 (Applied Biosystems)
Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета программ "STATISTICA 5 0" (StatSoft), программного обеспечения MS Excel X (Microsoft) При попарном сравнении частот аллелей в популяционной выборке использовался двусторонний критерий Фишера Р (F2), а также критерий %2(Р) с поправкой Йетса на непрерывность Статистически значимыми считали различия частот аллелей при значении Р<0 05
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Па первом этапе исследований был проведен анализ наиболее часто регистрируемых в мире мутаций 235<1с1С, 167(1е1Т и 35с1еЮ в гене коннексина 26 (СЛ32) у больных с несиндром ал ьной сен со не враль ной глухотой из РС(Я). Учитывая этническую специфичность мутации 235с!е1С гена СМВ2 для многих популяций Азии, нами был проведен скрининг мутации 235с1е1С в гене С.}В2 (рис. 1) у больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия).
Рис. I, Электр о фореграмма детекции мутации 235deIC в гене CJB2 с помощью ПДРФ-анализа. При наличии мутации 235delC теряется сайт рестрикции для эндонуклеазы ApaL Дорожка 1,4-7 - пробы с генотипом -norm/norm (1 сайт рестрикции для эндонуклеазы Apal), 2 - гетерозигота по мутации 23 5delC/norm., 3 - гомозигота 235delC/235de1C' (отсутствует сайт рестрикции)
Мутация 2353е1С не была зарегистрирована ни у одного индивида из изученной выборки больных, и, по-видимому, не является причиной потери слуха у больных несиндромапьной сенсоневралыгой глухотой из РС(Я). Мутация 167delT в гене С,!В2, встречающаяся, в основном, в популяции евреев-ашкенази, также не была идентифицирована ни у одного пациента из Республики Саха (Якутия).
У 16 пациентов была обнаружена делеция гуанина в 35 положении гена ОЛ32 (табл. 1). Частота мутации 35йе1С составила 11,5% в исследованной выборке больных. Полученный результат согласуется с литературными
' Секвеннрованный контроль пи мутация 235<1е1С/235с1е1С, любезно предоставлен к.б.н., с.н.с. лаб. ре комбинационного и сефегацнонного анализа НИИ Цитологии и генетики СО РАН (г. Новосибирск), О Л. Посух
272 п.н.
данными о высокой распространенности данной мутации в европейских и ее низкой частоте в азиатских популяциях [Rabionet et al, 2000, Хидиятова и соавт, 2002, Mukherjee et al, 2003, Xiao et al, 2004]
Таблица 1
Этническая принадлежность пациентов с мутаций 35delG в гене GJB2
Национальность Генотип 35delG/35delG (количество человек) Генотип 35de)G/normaI (количество человек)
Русский 3 (2 неродственных) 2 (2 неродственных)
Украинец 1 -
Якут . 2 (2 неродственных)
Ингуш 3 (1 неродственный) -
Русский/Якут Украинец/Якут - 3 (2 неродственных) 1
Примечание генотип 35delG/35delG -гомозигота по мутации, генотип 35delG/normal- гетерозиготные носители мутации
У 7 пациентов, на обеих хромосомах которых была выявлена мутация 35delG, причину снижения слуха можно считать установленной Данные пациенты полностью информативны для ДНК-диагностики В этих семьях возможна как дифференциальная диагностика для установления наследственной этиологии заболевания, так и проспективное медико-генетическое консультирование, включающее возможность проведения пренаталыгой (дородовой) ДНК-диагностики
Мутация 35delG выявлена у 8 пациентов в гетерозиготном состоянии Обнаруженная мутация 35delG только в одной копии гена не раскрывает причины развития тугоухости у данных пациентов, тк. мутантный аллель рецессивен по отношению к аллели дикого типа Такое количество гетерозиготных носителей делеции 35delG и наличие у них потери слуха может указывать на сегрегацию различных по происхождению мутантных аллелей у исследованных нами больных, что, вероятно, является следствием ассортативности браков между индивидами с нарушением слуха
Поиск мутаций в гене коннексина 26 (СУВ2) у больных с наследственной глухотой из Республики Саха (Якутия)
На втором этапе исследований с помощью 58СР-анализа с последующим секвенированием образцов с измененной подвижностью был проведен анализ всей кодирующей области гена СЗВ2 в выборке больных из РС(Я). Мрлекулярнсигенетический анализ позволил идентифицировать 5 мутаций -У371, К127Н, К98Ь, 333-334ёе!АА, 312-326ск114 и 3 полиморфных варианта -У271, £1140, М34Т в гене ОШ.
Мутация У371 в гене Щ/В2 была идентифицирована в гомозиготном состоянии у одного пациента, якута по этнической принадлежности (Рис. 2), При данной мутации в 109 положении гуанин заменяется на аденин, что приводит к замене аминокислоты в алии на изолейцин в 37 положении.
□
ШО^О
(ОтЩ Жтт
с с т с
А АДдААА А г А
/ V / у А / V\/\' 1л/.\ А л
I т е
л
0
аДАлАДаА ж
Рис. 2. А) Фрагмент родословной семьи с мутацией У371 (1090>А) в гене С^!В2 у пробанда (111-12) в гомозиготном состоянии и его матери (11-2) в гетерозиготном состоянии. Б) Электрофореграмма $$СР-анализа фрагмента гена ОЖ?. Дорожки 1 (\'371Л/371), 4 (У371/погта!) образцы с измененной подвижностью; дорожки 2, 3 с нормальной подвижностью. В) Фрагмент сиквенса образца с генотипом У371/У371 (А.Ш-12). Г) Фрагмент сиквенса образца с генотипом \'371/логта1 (Л.П-2).
У пациента с генотипом V37I/V37I степень снижения слуха, по данным пороговой тональной аудиометрии, составила AD=78dB, AS=91dB, что соответствует IV степени смешанной тугоухости При этом сенсоневральный компонент по оценке костной проводимости соответствует I-II степени тугоухости Глубокая степень потери слуха объясняется кондуктивным компонентом, обусловленным сопутствующей патологией В частности, у данного индивида отмечаются аномалии развития наружного и среднего уха Полученный результат согласуется с литературными данными о клиническом эффекте мутации ' V37I, которая описывается как причина тугоухости I—-II степени [Cryns et al, 2004]
Частота V37I в общей выборке больных составила 1,51%, среди пациентов якутов - 2% Низкая частота мутации V37I среди больных несиндромальной глухотой из Якутии, вероятно, объясняется особенностями выборки Группа пациентов была сформирована из лиц с врожденной, тяжелой степенью тугоухости (III-IV), а как показали недавние исследования [Snoeckx et al, 2005], мутация V37I описывается как причина тугоухости I—II степени
В гене G.JB2 были выявлены две делеции - 333-334delAA и 312-326dell4 у двух пациентов По этнической принадлежности больной с генотипом 333-334de!AA/normal - русский, а пациент с генотипом 312-326dell4/normal - метис (русский/якут) Обе мутации являются причиной сдвига рамки считывания, вызывая образование преждевременного стоп-кодона, терминирующего трансляцию белка во внутриклеточном домене - ICI Впервые мутации 333-334delAA и 312-326dell4 были описаны в конце 90-х годов как рецессивные [Kelley et al, 1998, Denoyelle et al, 1999] Идентификация этих двух мутаций в гетерозиготном состоянии и наличие выраженной потери слуха у данных пациентов может свидетельствовать о наличии у них пока еще не идентифицированных мутаций в генах других коннексинов, экспрессирующихся в тканях улитки
У одного пробанда, якута по этнической принадлежности, была идентифицирована замена гуанина на аденин в 380 положении гена GJB2,
которая ведет к замене аминокислоты аргинин на гистидин в 127 положении белка коннексина 26 (рис ЗА) Мутация 2930>Т, обнаруженная нами впервые при секвенировании (рис ЗБ), вызывает замену аргинина на лейцин в 98 положении белка коннексина 26 (Я98Ь) Мутация 1198Ь расположена в интрацеллюлярной части коннексина 26 Обе аминокислоты, аргинин и лейцин, имеют различную структуру аргинин является аминокислотой с катионообразующей группой в боковой цепи, а лейцин относится к алифатическим аминокислотам Замена аргинина на лейцин, возможно, влияет на конформационную структуру белка и изменяет функцию коннексина 26, а также приводит к образованию неполноценной субъединицы калиевого канала Наше предположение также подтверждает тот факт, что данная мутация находится у больного в компаунд-гетерозиготном состоянии с мутацией Я127Н Наличие двух мутаций в компаунд-гетерозиготном состоянии в гене ОЛ}2 подтверждает высказанное нами раннее предположение [Барашков и соавт, 2006] о сегрегации различных по происхождению мутантных аллелей у исследованных нами больных Вероятно, это является следствием ассортативности браков между слабослышащими и глухими в Республике Саха (Якутия)
А Б
Рнс. 3. Фрагмент сиквенса гена С.1В2, содержащего мутации в гетерозиготном состоянии А) 380С>А (Я127Н) Б) 2930Т (Я98Ь)
На хромосомах больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия) в гене ОЛ32 были выявлены 3 различные замены известные как полиморфные варианты - М34Т (101Т>С), У271 (790>А) и Е114й (341А>С) На
сегодняшний лень, патогенетическая значимость данных нуклеотидных замен рядом авторов трактуется неоднозначно и носит дискуссионный характер [ЯаЫопе! е1. а]., 2000; Эпоескх еЛ. а!., 2005].
Полиморфный вариант М34Т (101Т>С) в гене ОЛ$2 впервые был описан, как доминантная мутация [КеНеу й. а!., 1998]. Данное изменение приводит к замене полярной аминокислоты метионин на гетероциклическую - триптофан в трансмембранном домене (Тм-!) белка коннексина 26.
У одного индивида из выборки больных, якута по этнической принадлежности, была идентифицирована замена М34Т в гетерозиготном состоянии (рис. 4), а у другого пациента, метиса (украинец/якут), в компаунд-гетерозиготном состоянии с мутацией 35йеЮ в гене ОЗВ2.
0 12 3 0
Рис. 4 Электрофореграмма ЭЗСР-анализа и фрагмент сиквенса гена С№2, содержащего полиморфный вариант М34Т в гетерозиготном состоянии. А) Дорожка 2 - образец с измененной подвижностью (М34Т), 1,3-образцы без изменения подвижности; В) фрагмент сиквенса содержащего замену
1017>С (М34Т) в гетерозиготном состоянии.
Идентификация полиморфизма М34Т в. комяаунд-гетерозиготном состоянии с мутацией ЗЗ^еЮ в гене ОЛ!2 в выборке больных свидетельствует о функциональной значимости М34Т. Частота данного полиморфного варианта среди пациентов, якутов по этнической принадлежности, составила 1,04%. Из литературы известно, что полиморфный вариант М34Т гена СЛ32 встречается как среди больных наследственной глухотой, так и в популяциях Европы (например, частота данной замены во Франции - 2,3%) [Коих а. а!, 2004].
На официальном сайте The Connexin-Deafness Homepage (http //davinci erg езЛ1еа1т1е55Л полиморфные варианты V27I и El 14G, образующие группу сцепления и находящиеся в цис-положении па одной хромосоме, описаны как рецессивная мутация Среди больных сенсоневральной глухотой японцев, корейцев, алтайцев обнаруживается данная группа сцепления двух полиморфизмов, что может косвенно указывать на их патогенетическую значимость [Pandya et al, 2001, Posukh et al, 2005] На хромосомах больных несиндромальной глухотой из PC (Я) полиморфизм V27I выявлен с частотой 6% Однако, полиморфизм E114G (341A>G) был идентифицирован лишь у 1 пациента в сочетании с заменой V27I (79G>A) Следовательно, наличие двух полиморфизмов может указывать на их сочетанное патологическое действие у данного больного Учитывая достаточно высокую частоту полиморфизма V27I (6%) и низкую частоту E144G (1,04%) в выборке больных якутов, можно сделать вывод о том, что в изученной выборке больных вклад полиморфизмов V27I и E114G, образующих группу сцепления, незначителен
Скрининг делеции D(GJß6-D13S1830) в гене коннексина 30 (GJB6) у больных с наследственной глухотой из Республики Саха (Якутия)
Рядом авторов [Sosinsky et al, 1995, White et al, 1998] показана широкая экспрессия коннексина 30 (GJB6) в органе Корти, а также его участие наравне с коннексином 26, в сборке гетерологичных коннексонов в тканях внутреннего уха В связи с этим, нами был проведен скрининг на наличие делеции D(GJB6-D13S1830) в гене GJB6 среди больных из РС(Я) Результаты исследований показали, что делеция D(G.JB6-D 13S1830), захватывающая большую часть гена GJB6, выявленная ранее в некоторых популяциях в ассоциации (или без) с мутациями в гене GJB2, не была зарегистрирована ни у одного пациента из PC (Я) Отсутствие данной мутации в гене GJB6 у больных несиндромальной сенсоневральной глухотой якутов, не противоречит литературным данным о специфичности данной мутации для европейских популяций [del Castillo et al, 2003, Roux et al, 2004]
Анализ мутаций А7445С иТ7511С в гене и А1555С в гене 12Б
гШЧА мгДНК у больных несиндром а ль ной сенсоневральной глухотой из
Мутации А7445в и 17511С в гене (ЯШ^ не были выявлены ни у одного индивида из выборки больных С наследственной глухотой из РС(Я). В гене 123 гМА у двух пациентов из одной семьи, у матери И дочери метисного происхождения, идентифицирована мутация А15550 (рис, 5), которая впервые была описана в 1993 году [РгегаШ и. а!., 1993].
Рис. 5. Идентификация мутации А15550 в гене ИБгКМА в семье К.
А) Фрагмент родословной данной семьи К. Б) ПДРФ-анализ мутации А1555С в гене 123 гИА'А (НаеШ), Дорожки 4 (А.Ш-7) - 5 (А.П-4) образцы с мутацией А15550, 6 - маркер молекулярного веса, 1-3, 7-9 образцы без мутации. В) фрагмент сиквенса гена /25 гКЫЛ содержащего мутацию 1555А>0
Все потомки этой семьи, вероятно, получили данную мутацию от матери (бабушки) пробанда, якутки по этнической принадлежности. Судя по данным анамнеза, оба индивида - мать и дочь (рис. 5), у которых была обнаружена мутация А15550 - глухие, общаются с помощью языка жестов. У пробанда двухсторонняя сенсоневральная глухота считается врожденной. Тем не менее, в
Республики Саха (Якутия) и в популяции якутов.
12345 6789
истории болезни имеются сведения о перенесенной пневмонии, что предполагает возможность терапии антибиотиками из группы аминогликозидов в раннем детском возрасте Степень снижения слуха, по данным пороговой тональной аудиометрии, регистрировалась как IV (А8 104с1В, АО 109с1В) У матери пробанда резкое снижение слуха началось в 7 лет, после лечения антибиотиками (возможно, из группы аминогликозидов), родной сибс матери также глухой Однако, у бабушки пробанда (рис 5) слух нормальный Данное обстоятельство, возможно, объясняется недостаточным количеством мутантных копий в клетках внутреннего уха для развития заболевания -те состоянием гетероплазмии Частота данной мутации в общей выборке больных составила 1,5%, среди пациентов якутов — 2,08%, в популяции якутов - 0,8%
Алгоритм молекулярно-гепетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в РС(Я).
В результате проведенного молекулярно-генетического анализа идентифицировано 6 мутаций и 3 полиморфных варианта в гене ОЛИ и мутация А1555в в гене 125 гКЫЛ мтДНК Спектр и частота данных мутаций имеют выраженную этническую неоднородность Мутации 35с1еЮ, 333-334с1е1АА и 312-326с1е114 в гене СЛ32 выявлены преимущественно у больных европеоидного происхождения (Рис 8) Наиболее распространенной мутацией, идентифицированной на 42% хромосом пациентов русской, ингушской, украинской этнической принадлежности, оказалась мутация 35с1еЮ, что соответствует литературным данным о высокой частоте встречаемости данной делеции среди европеоидных популяций [ЯаЬюпе! е1 а1, 2000, Джемилева и соавт, 2006] Высокая частота мутации 35ёеЮ у больных европеоидного происхождения в РС(Я) предполагает возможность проведения прямой ДНК — диагностики, а также проведения скрининга наследственных форм глухоты среди широких групп населения Учитывая этнический состав населения РС(Я), где примерно 50% жителей являются европеоидами, можно отметить, что ДНК-
тестирование на данную мутацию является обоснованным и необходимым условием при проведении дифференциальной и пренатальной ДНК-диагностики наследственной несиндромальной глухоты в Якутии.
Среди больных, якутов по этнической принадлежности, были идентифицированы мутации V37I, R127H, 35de!G и ранее не описанная - R98L в гене GJB2 (рис. 7). Небольшой вклад мутаций гена GJB2 в развитие несиндромальной глухоты у якутов, возможно, связан О наличием мутаций в других генах, участвующих в процессе з в у ко в осп р пятня. Следует отметить, что низкий вклад мутаций гена GJB2 был отмечен при изучении больных с несиндромальной глухотой алтайцев (не более 10%) [Posukh et. al., 2005], Однако спектр мутаций отличен, так, например, у якутов не бобнаружено мутации 235delC, а у алтайцев - V37I. Кроме того, с небольшой частотой (2%) у якутов регистрируется мутация 35delG, не обнаруженная на хромосомах больных, алтайцев по этнической принадлежности, что, возможно, связано с более интенсивными процессами метисации среди глухих и слабослышащих в РС(Я). Общий спектр мутаций представлен на рисунке 6. На основании изученных спектра и частоты мутаций генов GJB2 и 12S rRNA разработан алгоритм молекулярной диагностики наследственной несиндромальной глухоты в РС(Я) (рис.9).
Hi
идентифицировано 80%
rRNA 1,6%
0,76%
R98L 0,Т5%
Рис. 6. Спектр и частота мутаций генов GJB2 и !2S rRNA в общей выборке больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой из РС(Я)
(N=130 хромосом)
М34Т вариант 1ъв% El WWIi
V27I полиморфный вариант 4,6%
Н* ндактфицнреашФ
«Г*
к
А15536123тюит
Не идентифицирована
504
2%
угтнешо
ИЭВ1
МС4Т полиморфный вариант
У271 полиморфный ■ариант6%
3№!6 42%
312-326<(е114 44
414
Рис. 7. Спектр и частота мутаций генов ОЗВ2 и ¡25 гКЫА у больных наследственной ] [есиндромаяьной глухотой якутов (N=96 хромосом)
Рис. 8. Спектр и частота мутаций гена ОЛИ у больных европеоидного происхождения (русские, украинцы, ингуши) (N=24 хромосомы)
Рис. 9. Алгоритм ДНК-диагностики наследственной несиндромальной сенсоневралыюй глухоты в Республике Саха
(Якутия)
Исследование частоты мутаций гена <33В2 в популяциях РС(Я)
Молекулярно-генетический анализ мутации ЗЗЙеЮ в гене СЛ}2 в популяции якутов показал наличие данной мутации с очень низкой частотой (0,2%), что, вероятно, свидетельствует, во-первых, о неспецифичности данной делеции юя якутской популяции, а во-вторых, является следствием единичных случаев метисации. Частота мутации 35<1еЮ среди популяции русских РС(Я) составила 2,8%, что близко к таковым значениям в популяциях Европы. Таким образом, в РС(Я) риск развития несиндромальной аутосомно-рецессивной сенсоневральной глухоты, обусловленной мутацией 35^еЮ, наиболее высок среди русских, у которых частота мутации составила 2,8%. Среди якутов частота 35<1еЮ оказалось очень низкой и риск «гомозиготации» этой патологической мутации на популяционном уровне можно считать невысоким, особенно, при отсутствии кровнородственных браков.
Мутации 167с1е1Т и 235(1е!С в гене П.1В2 не были обнаружены ни у одного индивида из популяции якутов и русских, проживающих па территории РС(Я). Однако наибольший интерес вызывает тот факт, что, по полученным данным, мутация 235<1е1С, встречающаяся, в основном, в популяциях Азии [Уап е1. а!., 2003], не была обнаружена у больных и в популяции якутов (рис. 10).
Якуты Русские Агтгз^ы Китары Ор-зицузы РС(Я)
Рис. 10. Частота мутаций гена GJB2 в некоторых популяциях
Мутация V371 в гене GJB2 наиболее распространена в монголоидных популяциях и регистрируется с высокой частотой в Китае, Тайване, Японии, гораздо реже встречается в Европе, Турции и на Ближнем Востоке [Ohtsnka et. al., 2003; Roux et. al., 2004], Мировой максимум частоты V37I отмечен в Китае -15% [Xiao et. al., 2004], На сегодняшний день показана неоднородность встречаемости данной мутации в различных популяциях Азии. Так, мутация
V37I не зарегистрирована у алтайцев, корейцев и индийцев [Park et al, 2000, Posukh et al, 2005, Ramchander et al, 2005] Частота мутации V37I в популяции якутов составила 2% Частота полиморфных вариантов - V27I и М34Т гена GJB2 в популяции якутов составила 5% и 0,4%, соответственно, что согласуется с литературными данными о специфичности V27I для многих азиатских популяций [Abe et al, 2002, Wang et al, 2002, Xiao et al, 2004] Низкая частота полиморфного варианта М34Т у якутов объяснятся тем, что данный аллельный вариант встречается, в основном, в европеоидных популяциях
ВЫВОДЫ
1 в гене коннексина 26 (GJB2) у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой из Республики Саха (Якутия) обнаружены 6 мутаций - 35delG (11,5%), V37I (1,5%), 333-334delAA (0,75%), 312-326delI4 (0,75%), R127H (0, 75%), R98L (0,75%) и 3 полиморфных варианта - V27I (6,2%), El 14G (0,75%), М34Т (0,75%) Мутация R98L обнаружена впервые
2 Мутации V37I, R127H, R98L выявлены только у больных - якутов, мутации 35delG, 333-334delAA, 312-326dell4 - преимущественно у больных европеоидного происхождения
3 Скрининг делеции D(GJB6-D 13 S1830) в гене коннексина 30 (GJB6), мутаций A7445G и Т7511С в гене tRNAsm мтДНК у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой не обнаружил данных изменений ни у одного пациента из Республики Саха (Якутия)
4 В гене I2S rRNA мтДНК у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой из Республики Саха (Якутия) идентифицирована мутация A1555G с частотой 1,5% в общей выборке больных и с частотой 2% среди больных якутов по этнической принадлежности, в популяции якутов частота A1555G составила 0,8%
5 Частота мутации 35delG в гене коннексина 26 (GJB2') в популяции русских составила 2,8%, в популяции якутов - 0 2%
6 Частота мутации V37I в гене коннексина 26 (GJB2') в популяции якутов составила 2%
7 Разработан алгоритм молекулярно-генетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в семьях высокого риска из Республики Саха (Якутия)
Работы, опубликованные по теме диссертации
1 Барашков H.A., Кононова С К , Федорова С А , Максимова Н Р , Сухомясова А JI, Ноговицына А Н , Джемилева Л У , Валиев Р Р, Хуснутдинова Э К Апробация методов ДНК-диагностики при наследственной тугоухости в Республике Саха (Якутия) // Материалы международной научно - практической конференции «Генетические аспекты патологии человека Проблемы сохранения генофонда коренных народов Севера» - Якутск - 2005. - С 11-13
2 Барашков H.A., Федорова С А, Кононова С К , Сухомясова А JI, Максимова Н Р , Ноговицына А Н , Джемилева JI У , Хуснутдинова Э К Внедрение идентификации мутации 35delG в гене GJB2 при наследственных формах тугоухости/глухоты в практику медико-генетического консультирования Республики Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал Приложение №3.-2005 -С 90-93
3 Барашков H.A., Терютин Ф М , Сухомясова А J1, Максимова Н Р , Джемилева Л У, Гуринова Е Е , Федотова Э Е, Тапыев Е В , Валиев Р Р , Кононова С К, Федорова С А , Хуснутдинова Э К, Ноговицына А Н Анализ локуса CX26AU гена GJB2 у больных наследственной нейросенсорной тугоухостью и глухотой из Республики Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал -2006 Т-2 №14 -С 11-15
4 Барашков H.A., Кононова С К., Федотова Э Е , Максимова Н Р, Сухомясова А Л , Джемилева Л У., Николаев В М., Федорова С А , Хуснутдинова Э К , Ноговицына АН Анализ распространенности мутации 35delG гена GJB2 у пациентов с нейросенсорной тугоухостью в Якутии // Материалы научно-практической конференции с международным участием «Теория и практика комплексной реабилитации детей с ограниченными возможностями здоровья» -Нерюнгри - 2006 - С 101-104
5 Барашков Н.А , Кононова С К., Максимова Н Р , Терютин Ф М , Сухомясова А Л , Федотова Э Е , Николаев В М, Джемилева Л У , Федорова С А , Хуснутдинова Э К , Ноговицына А Н Идентификация мутации 35delG в гене GJB2 у больных нейросенсорной тугоухостью в Республике Саха (Якутия) // Наука и образование-2006 Т-42.№ 2. С 129-133
6. Барашков Н.А , Терютин Ф М , Сухомясова А Л , Максимова Н Р , Джемилева Л У, Гуринова Е Е , Тапыев Е В , Кононова С К , Федорова С А, Хуснутдинова Э К , Ноговицына А Н Распространенность мутации 35delG в гене GJB2 у больных нейросенсорной тугоухостью в Республике Саха (Якутия) //Бюллетень Сибирского отделения РАМН - 2006 Приложение С 19
7. Барашков Н.А, Максимова Н Р , Сухомясова А Л , Терютин Ф М , Джемилева Л У Молекулярно-генетический анализ локуса CX26AU гена GJB2 у больных наследственной нейросенсорной тугоухостью и глухотой из Республики Саха (Якутия) // Материалы международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов 2006» - Москва Секция «фундаментальная медицина» - 2006 - С 548-550
Отпечатано с готовых диапозитивов в ООО «Принт+» заказ № 116, тираж 120 шт, печать л 2,0, 450054, пр Октября, 71
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Барашков, Николай Алексеевич
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1 .ГЕТЕРОГЕНООСТЬ НАСЛЕДСТВЕННЫХ ФОРМ ТУГОУХОСТИ И ГЛУХОТЫ.
1.2. АНАТОМИЯ И ФИЗИОЛОГИЯ ОРГАНА КОРТИ.
1.3. УЧАСТИЕ КОННЕКСИНОВ В ПРОЦЕССЕ ЗВУКОВОСПРИЯТИЯ.
1.4. ГЕНЫ КОННЕКСИНОВ 26 И 30 (вЖ И вЗВб).
1.5. СПЕКТР МУТАЦИЙ В ГЕНАХ вЖ И вШ.
1.6. МУТАЦИИ В ГЕНАХ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНК, ОБУСЛОВЛИВАЮЩИЕ НАРУШЕНИЕ ПРОЦЕССА ЗВУКОВОСПРИЯТИЯ.
1.7. КРАТКИЕ СВЕДЕНИЯ ОБ ЭПИДЕМИОЛОГИИ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ГЛУХОТЫ В РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ)
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.
2.1. ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1.1. ГРУППА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ.
2.1.2. ПОПУЛЯЦИОННАЯ ВЫБОРКА.
2.2 . МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.2.1 Выделение геномной ДНК.
2.2.2 Методы амплификации и детекции исследуемых локусов.
2.2.2.1 Исследование мутаций генов ОЛ52 и ОЗВ6.
2.2.2.1.1. Анализ мутации 35с1еЮ в гене
2.2.2.1.2. Скрининг мутаций 235ёе1С и 167<!е1Т в гене вЖ.
2.2.2.1.3. Скрининг мутации 381830) гена вШ.
2.2.2.2. Исследования генов ИША™ и 128гША мтДНК.
2.2.2.3. 88СР-анализ.
2.2.2.3.1. Поиск мутаций в гене коннексина 26 (<иВ2).
2.2.2.3.2. Определение нуклеотидной последовательности.
2.3 МЕТОДЫ СТАТИСТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 3.1. АНАЛИЗ СПЕКТРА И ЧАСТОТЫ МУТАЦИЙ В ГЕНЕ КОННЕКСИНА 26 (вЖ) У БОЛЬНЫХ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ГЛУХОТОЙ ИЗ РЕСПУБЛИКИ САХА
ЯКУТИЯ).
3.1.1. Анализ мутации 35с1еЮ в гене коннексина 26 ((НВ2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.2. Скрининг мутации 167с1е1Т в гене коннексина 26 {0№2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.3. Скрининг мутации 235с1е1С в гене СЗВ2 у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.4. Поиск мутаций в гене коннексина 26 ((ЭЛ12) у больных с наследственной глухотой из РС (Я).
3.1.4.1. Анализ мутации У371 в гене 61/52 у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.4.2. Анализ мутаций 333-334с1е1АА и 312-326с1е114 в гене вШ у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.4.3. Анализ мутаций Ш27Н и Я98Ь у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.4.4. Анализ полиморфных вариантов гена коннексина 26 ((7.Л?2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из РС (Я).
3.1.5. Спектр и частота идентифицированных мутаций в гене коннексина 26 ((7.Л?2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия).
3.2. СКРИНИНГ ДЕЛЕЦИИ В^Вб-В 1381830) В ГЕНЕ КОННЕКСИНА 30 {вЖ) У БОЛЬНЫХ НАСЛЕДСТВЕННОЙ НЕСИНДРОМАЛЬНОЙ ГЛУХОТОЙ ИЗ РС(Я).
3.3. АНАЛИЗ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ ПБгША и ИША^* МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНК У БОЛЬНЫХ НЕСИНДРОМАЛЬНОЙ СЕНСОНЕВРАЛЬНОЙ ГЛУХОТОЙ ИЗ РЕСПУБЛИКИ САХА (ЯКУТИЯ).
3.4. АЛГОРИТМ ДНК-ДИАГНОСТИКИ НАСЛЕДСТВЕННОЙ НЕСИНДРОМАЛЬНОЙ СЕНСОНЕВРАЛЬНОЙ ГЛУХОТЫ В РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ).
3.5. ИССЛЕДОВАНИЕ ЧАСТОТЫ МУТАЦИЙ ГЕНА КОННЕКСИНА 26 (вт) В НЕКОТОРЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ РС(Я).
3.5.1. Анализ мутации 35с1еЮ в гене коннексина 26 {0№2) в популяции якутов и русских РС(Я).
3.5.2. Анализ мутаций 167(1е1Т и 235с1е1С гена коннексина 26 (СМВ2) в популяции якутов.
3.5.3. Анализ мутации У371 гене коннексина 26 {С№2) в популяции якутов.
3.5.4. Частота полиморфного варианта У271 в гене коннексина 26 (6752) в популяции якутов.
3.5.5. АНАЛИЗ МУТАЦИИ А15550 ГЕНА 128гША В ПОПУЛЯЦИИ ЯКУТОВ.
3.5.6. СПЕКТР И ЧАСТОТА МУТАЦИЙ ГЕНОВ Ш И 128гША В ПОПУЛЯЦИИ ЯКУТОВ.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетическое изучение наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия)"
Актуальность проблемы. Дефекты органов слуха занимают существенное место среди наследственной патологии. Общепопуляционная частота врожденной тугоухости и глухоты составляет 1 на 650-1000 новорожденных детей [Mehl et. al., 2002, Nance, 2003; Cryns et. al., 2004; Morton, 2006; Chalestori et. al., 2007]. По данным ВОЗ за последние 20 лет число людей с различными формами тугоухости и глухоты увеличилось в 2 раза и составляет только в России около 13-20 млн. [Зинченко и соавт., 2007; Гинтер и соавт., 2002]. По опубликованным данным, наследственная сенсоневральная тугоухость является одним из пяти наиболее распространенных наследственных заболеваний в Республике Саха (Якутия) наряду с такими частыми моногенными болезнями, как спиноцеребеллярная атаксия 1 типа и миотоническая дистрофия Россолимо-Куршмана-Штейнерта-Баттена [Платонов, 2003; Тарская и соавт., 2004; Сухомясова, 2005].
Врожденная глухота и снижение слуха в прелингвальный период приводит к нарушению речевой и социальной адаптации, поэтому дети с такими сенсорными нарушениями нуждаются в своевременно начатой коррекции дефектов органов слуха [Некрасова и соавт., 2002]. Примерно половина врожденных форм нарушений слуха имеют наследственную этиологию [Marazita et. al., 1993; Friedman et. al., 1999], другая половина может быть связана с повреждающим действием факторов внешней среды: инфекциями, осложнениями в родах (асфиксии, родовые травмы), приемом женщиной во время беременности ототоксических лекарственных препаратов, бактериальными менингитами, продолжительными отитами, тяжелыми травмами головы и др. [Блюмина с соавт., 1987; Jacobson et. al., 1995]. Для наследственных форм потери слуха характерен клинический и генетический полиморфизм [Murgia et. al., 1999; Маркова с соавт., 2003]. Генетическая гетерогенность наследственных сенсоневральных форм тугоухости обусловлена тем, что в процессе эмбрионального развития кортиева органа принимает участие более 60 генов [Morton et. al. 2006; Chalestory et. al., 2007].
Мутации в генах коннексинов являются наиболее частой причиной потери слуха и встречаются у больных с наследственными и спорадическими формами глухоты практически во всех странах мира [Kelley et. al., 1998; Liu et. al., 2000].
На сегодняшний день известно более 100 мутаций в гене коннексина 26 (GJB2) и около 10 мутаций в гене коннексина 30 (GJB6), являющихся основной наследственной причиной повреждения процесса звуковосприятия у человека. Трансмембранные белки, кодируемые генами GJB2 и GJB6, участвуют в образовании межклеточных контактов - коннексонов - в тканях внутреннего уха, которые ответственны за перенос малых молекул, и обеспечивают, в основном, циркуляцию К+ в улитке. При дефектах синтеза этих белков происходит нарушение гомеостаза эндолимфы, что приводит к отмиранию волосковых рецепторных клеток и развитию потери слуха по сенсоневральному типу [Kikuchi et. al., 1995]. Согласно опубликованным данным, мутации в гене коннексина 26 (GJB2) могут приводить как к рецессивным, так и доминантным формам глухоты. Основными клиническими проявлениями мутаций в гене GJB2 являются врожденные нарушения слуха и преобладание выраженной степени тугоухости [Murgia et. al., 1999; Cryns et. al., 2004]. Однако, некоторые миссенс-мутации (M34T, V37I, V27I, E114G и т.д.) могут приводить к умеренным и легким формам тугоухости, а в ряде случаев описываются как полиморфные варианты [Kelley et. al., 1998; Cryns et. al., 2004; Snoeckx et. al., 2005; Bicego et. al., 2006].
Кроме генов белков-коннексинов, непосредственно участвующих в процессе звуковосприятия, рядом исследователей [Prezant et. al., 1993; Estivill et. al., 1998] показано, что некоторые мутации генов митохондриальной ДНК могут обуславливать «гиперчувствительность» к ототоксическим лекарственным препаратам и вызывать потерю слуха. Рибосомальная РНК в волосковых клетках - наиболее вероятная мишень для таких препаратов аминогликозидного ряда как канамицин, гентамицин, стрептомицин, мономицин и т.д., наравне с «естественной мишенью» данных антибиотиков -бактериальной рРНК. Показано, что замена 1555A>G в гене 12SrRNA мтДНК
5. Разработать на основе полученных данных алгоритм молекулярно-генетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия).
Научная новизна исследования. В настоящей работе впервые проведено молекулярно-генетическое изучение наследственной несиндромальной глухоты в Республике Саха (Якутия). Впервые получены данные о спектре и частоте мутаций в генах GJB2, GJB6, 12SrRNA и îRNAser у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой в Республике Саха (Якутия). Оценен вклад мутаций 35delG, V37I гена GJB2 и мутации A1555G гена 12SrRNA в развитие несиндромальных форм глухоты в Якутии. Показана этническая неоднородность по спектру и частоте найденных мутаций гена GJB2 в исследованной выборке больных. Установлена частота носительства идентифицированных мутаций гена GJB2 в популяциях якутов и русских из РС(Я).
Практическая значимость. Разработан оптимальный для Республики Саха (Якутия) алгоритм выявления носителей мутаций генов GJB2 и 12SrRNA и проведения ДНК-диагностики наследственной несиндромальной глухоты в семьях высоко риска, что является необходимой предпосылкой повышения эффективности медико-генетического консультирования и профилактики наследственной патологии в регионе. В 13,1 % обследованных семей из РС(Я) выявлены носители мутантных хромосом и установлена причина глухоты у больных. Результаты настоящего исследования внедрены и применяются в работе Якутского научного центра РАМН и Правительства РС(Я), а также в практической деятельности медико-генетической службы региона.
Положения, выносимые на защиту.
1. Спектр и частоты мутаций 35delG, 333-334delAA, 312-326dell4, V37I, R127H и R98L и полиморфных вариантов V27I, E114G и М34Т гена GJB2 у больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия).
2. Идентификация мутации А1555в гена 128гША мтДНК у пациентов с несиндромальной глухотой, якутов по этнической принадлежности, и частота А15550 в популяции якутов.
3. Неоднородность популяций русских и якутов по частоте гетерозиготного носительства мутации 35ёеЮ в гене коннексина 26 ((7./Я2).
4. Частота носительства мутации У371 в гене (7Л?2 в популяции якутов.
5. Алгоритм молекулярно-генетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в Республике Саха (Якутия). Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на республиканской научно-практической конференции «Теория и практика комплексной реабилитации детей с ограниченными возможностями здоровья» (Нерюнгри, 2005), на международной научно - практической конференции «Генетические аспекты патологии человека. Проблемы сохранения генофонда коренных народов Севера» (Якутск, 2005), на международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов 2006» (Москва 2006), межлабораторном семинаре Отдела молекулярной генетики Якутского научного центра Российской Академии медицинских наук и Правительства РС(Я), на 13 международном конгрессе «Приполярная медицина» (Новосибирск, 2006).
По теме диссертации опубликовано 7 работ
Структура и объем диссертации
Диссертационная работа изложена на 134 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 192 источника (45 - отечественных и 147 - иностранных). Диссертация иллюстрирована 42 рисунками, 16 таблицами и дополнена приложением (7 стр.).
Заключение Диссертация по теме "Генетика", Барашков, Николай Алексеевич
ВЫВОДЫ
1. В гене коннексина 26 (СЗВ2) у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой из Республики Саха (Якутия) обнаружены 6 мутаций - 35с1еЮ (11,5%), У371 (1,5%), 333-334(1е1АА (0,75%), 312-326ёе114 (0,75%), Я127Н (0,75%), Я98Ь (0,75%) и 3 полиморфных варианта - V27I (4,6%), E114G (0,75%), М34Т (1,5%). Мутация R98L обнаружена впервые.
2. Мутации V37I, R127H, R98L выявлены только у больных - якутов, мутации 35delG, 333-334delAA, 312-326dell4 - преимущественно у больных европеоидного происхождения.
3. Скрининг делеции D((j./Z?6-D13S1830) в гене коннексина 30 {GJB6), мутаций A7445G и Т7511С в гене tRNASER мтДНК у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой не обнаружил данных изменений ни у одного пациента из Республики Саха (Якутия).
4. В гене 12SrRNA мтДНК у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой из Республики Саха (Якутия) идентифицирована мутация A1555G с частотой 1,5% в общей выборке больных и с частотой 2% среди больных якутов по этнической принадлежности, в популяции якутов частота A1555G составила 0,8%.
5. Частота мутации 35delG в гене коннексина 26 (GJB2') в популяции русских составила 2,8%, в популяции якутов - 0,2%.
6. Частота мутации V37I в гене коннексина 26 (GJB2') в популяции якутов составила 2%.
7. Разработан алгоритм молекулярно-генетической диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в семьях высокого риска из Республики Саха (Якутия).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Распространенность врожденной тугоухости и глухоты составляет 1 на 650-1000 новорожденных детей. По данным ВОЗ число людей с различными формами тугоухости и глухоты в России составляет около 20 млн. человек. Распространенность наследственной сенсоневральной тугоухости в Республике Саха (Якутия) составляет 6,2:105. По опубликованным данным, наследственная сенсоневральная тугоухость является одним из пяти наиболее частых наследственных заболеваний в Республике Саха (Якутия) и занимает второе место после спиноцеребеллярной атаксии 1 типа.
Среди всех идентифицированных генов наследственной глухоты наиболее значимыми являются гены белков-коннексинов - Сх26 {(ЗЗВ2) и СхЗО ((7Л?б), вклад которых в развитие несиндромальных и некоторых синдромальных форм составляет от 4 до 80%. На долю митохондриальных мутаций приходится менее 1% всех случаев наследственной глухоты, однако считается, что некоторые мутации в митохондриальной ДНК могут обуславливать «гиперчувствительность» к ототоксическим лекарственным препаратам. На сегодняшний день показана патогенетическая значимость некоторых митохондриальных мутаций в генах ПБгША, 1ША8ЕЯ, кодирующих различные рРНК и тРНК.
С целью изучения генов 61/52, (7Л?<5, ПБгША, проведен анализ спектра и частоты мутаций данных генов у больных наследственной несиндромальной глухотой и тугоухостью из Республики Саха (Якутия), а также изучена частота мутаций гена коннексина 26 ((7Л?2) и мутации А1555в гена \2SrRNA в популяции якутов.
В качестве материала для данной работы были использованы пробы ДНК 79 пациентов из 65 неродственных семей с диагнозом двухсторонняя сенсоневральная тугоухость Ш-1У степени предположительно наследственной этиологии, образцы ДНК членов их семей (всего 86 человек) и образцы ДНК здоровых доноров без признаков снижения слуха (N=120) из
2 этногеографических групп якутов (центральные и вилюйские якуты), этническая принадлежность которых учитывалась до третьего поколения. В работе использовались следующие методы анализа ДНК: полимеразная цепная реакция синтеза ДНК, ПДРФ-анализ, SSCP-анализ и секвенирование.
На первом этапе исследований был проведен анализ мутации 35delG в гене коннексина 26 (GJB2) у 65 неродственных пациентов с несиндромальной сенсоневральной глухотой из РС(Я). Общая Частота мутации 35delG составила 11,5% в исследованной выборке больных. Частота мутации 35delG среди европеоидной группы пациентов составила 42%, среди больных якутов - 2%. Полученные результаты подтверждают данные о высокой частоте этой мутации в популяциях Европы и ее низкой распространенности в популяциях Азии. У 7 пациентов, на обеих хромосомах которых была выявлена мутация 35delG, причину снижения слуха можно считать установленной. Данные пациенты полностью информативны для ДНК-диагностики. В этих семьях возможна как дифференциальная диагностика для установления наследственной этиологии заболевания, так и проспективое медико-генетическое консультирование, включающее возможность проведения пренатальной (дородовой) ДНК-диагностики. Мутация 35delG выявлена у 8 пациентов в гетерозиготном состоянии. Идентифицированная мутация 35delG только в одной копии гена не раскрывает причины развития тугоухости у пациентов с наследственными формами глухоты и тугоухости, т.к. мутантный аллель рецессивен по отношению к аллели дикого типа. Такое количество гетерозиготных носителей 35delG и наличие у них потери слуха может указывать на сегрегацию различных по происхождению мутантных аллелей у больных с наследственными формами глухоты и тугоухости, что, вероятно, является следствием ассортативности браков между индивидами с нарушением слуха.
Учитывая высокую частоту встречаемости мутации 167delT в популяциях Европы, Средиземноморья, Ближнего Востока, Сев. Америки и Евразии, был проведен скрининг мутации в выборке больных из РС (Я), однако мутация 167с1е1Т гена (7Л?2 не была идентифицирована ни у одного индивида из исследованной выборки больных, что согласуется с данными по распространенности и этнической специфичности данной мутации.
Среди больных несиндромальной глухотой в Восточной Азии наиболее распространенной мутацией в гене (лЛ?2 является 235с1е1С, которая идентифицируется с частотой от 34% до 76% среди всех мутантных аллелей этого гена. Анализ мутации 235с1е1С у больных несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия) не выявил данной делеции ни у одного индивида из изученной выборки больных. Таким образом, мутации 235с1е1С и 167с1е1Т гена (7Л?2 не являются причиной потери слуха среди пациентов с несиндромальной сенсоневральной глухотой в Якутии.
Далее был проведен скрининг мутаций 35с1еЮ, 167с1е1Т и 235с1е1С гена коннексина 26 {СМВ2) в популяционных выборках якутов и русских, проживающих на территории РС(Я). Молекулярно-генетический анализ мутации 35с1еЮ в гене (7Л?2 в популяции якутов показал наличие данной мутации с очень низкой частотой (0,2%), что, вероятно, свидетельствует, во-первых, о неспецифичности данной делеции для якутской популяции, а во-вторых, является следствием единичных случаев метисации. Частота мутации 35с1еЮ среди популяции русских РС(Я) составила 2,8%, что близко по значениям к популяциям Европы. Таким образом, в РС(Я) риск развития несиндромальной аутосомно-рецессивной сенсоневральной глухоты, обусловленной мутацией 35с1еЮ, наиболее высок среди русских, тогда как у якутов риск «гомозиготации» этой мутации на популяционном уровне можно считать невысоким, особенно при отсутствии кровнородственных браков.
Анализ гетерозиготного носительства показал отсутствие мутаций 167с1е1Т и 235с1е1С у 120 индивидов без признаков снижения слуха из 2 этногеографических групп якутов. Отсутствие мутации 167ёе1Т согласуется с литературными данными по этноспецифичности накопления мутаций в гене <л/Я2 (в основном данная мутация встречается среди евреев Ашкенази и народов Средиземноморья) и не вызывает сомнений. Напротив, наибольший интерес вызывает тот факт, что по полученным данным, мутация 235(1е1С (встречающаяся в основном в популяциях Азии) не была найдена у больных и в популяции якутов. Возраст возникновения мутации 235с1е1С в гене СЛ32, на территории Восточной Азии, был оценен исследователями в 11500 лет, а первичным ареалом распространения, по аналогии с анализом вт-маркеров (тяжелой цепи иммуноглобулина в) и мутации 11413Р гена фенилаланингидроксилазы, был указан регион оз. Байкал, населяемый в прошлом недифференцированной группой северных монголоидов. Таким образом, факт отсутствия мутации 235(1е1С в популяции современных якутов представляет значительный интерес в эволюционном отношении, т.к. ряд исторических, антропологических, археологических, лингвистических и др. данных указывает именно на район Прибайкалья, как первичную территорию формирования якутского этноса. Скорее всего, делеция 235с1е1С, в силу популяционных и демографических причин, могла быть элиминирована из популяции якутов, поскольку ряд исследований У-хромосомы, митохондриальной ДНК и аутосомных локусов указывают на низкий уровень генетического разнообразия по многим ДНК-локусам и выраженный «эффект родоначальника» в формировании современного генного пула якутов.
На втором этапе исследований с помощью ББСР-анализа с последующим секвенированием образцов с измененной подвижностью был проведен анализ всей кодирующей области гена коннексина 26 (С№2) в выборке больных из РС(Я). Молекулярно-генетический анализ позволил идентифицировать 5 мутаций УЗ71, Ш27Н, 1198Ь, 333-334с!е1АА, 312-326с1е14 и 3 полиморфных варианта У271, Е1140, М34Т в гене вШ и мутацию А15550 в гене 123гША в группе пациентов с наследственными формами сенсоневральной тугоухости и глухоты из РС(Я). Также был проведен анализ частоты некоторых мутаций и полиморфных вариантов генов ОЗВ2 и 12БгША в популяциях русских и якутов, проживающих на территории Республики Саха (Якутия).
Мутация V37I (109G>A) в гене коннексина 26 (GJB2) была идентифицирована в гомозиготном состоянии у одного пациента, якута по этнической принадлежности. Частота данной мутации в изученной общей выборке больных составила 1,51%, среди пациентов якутов - 2%. Низкая частота мутации V37I среди больных несиндромальной глухотой из Якутии, вероятно, объясняется особенностями выборки. Группа пациентов была сформирована из лиц с врожденной, тяжелой степенью тугоухости (III-IV), а как показали недавние исследования, мутация V37I описывается как причина тугоухости I -II степени. В популяции якутов (N=120) мутация V37I встречалась с частотой 2%. Это один из наиболее высоких мировых показателей частоты данной мутации после популяции китайцев и тайваньцев. Таким образом, риск развития нарушений процесса звуковосприятия, обусловленных данной мутацией, в популяции якутов можно считать достаточно высоким.
В гене коннексина 26 (GJB2) были выявлены 2 делеции - 333-334delAA и 312-326dell4 в гетерозиготном состоянии у 2-х пациентов. Больной с генотипом 333-334delAA/normal - русский по этнической принадлежности, а пациент с генотипом 312-326dell4/normal - метис (русский/якут). Обе мутации являются рецессивными и приводят к сдвигу рамки считывания, вызывая образование преждевременного стоп-кодона, терминирующего трансляцию белка во внутриклеточном домене - ICI. Выявление этих мутаций в гетерозиготном состоянии и наличие выраженной потери слуха у данных пациентов, возможно, свидетельствует о присутствии еще каких-либо не идентифицированных мутаций в генах других коннексинов, экспрессирующихся в тканях улитки.
У одного пробанда, якута по этнической принадлежности, были идентифицированы две мутации в гене GJB2 в компаунд-гетерозиготном состоянии: замена гуанина на аденин в 380 положении (380G>A), которая приводит к замене аминокислоты аргинин на гистидин в 127 положении (R127H) и мутация 293G>T, обнаруженная нами впервые при секвенировании и вызывающая замену аргинина на лейцин в 98 положении белка коннексина 26 (Я98Ь). Мутация Я98Ь, расположенная во внутриклеточной петле коннексина 26, приводит к замене аргинина на лейцин. Обе аминокислоты имеют различную химическую структуру, что, в свою очередь, вероятно, влияет на конформационную структуру белка и изменяет функцию коннексина 26, а также приводит к образованию неполноценной субъединицы калиевого канала. Данное предположение подтверждается тем, что мутация 119 8 Ь идентифицируется у пациента в компаунд-гетерозиготном состоянии с мутацией Я127Н, которая в гетерозиготном положении самостоятельно не приводит к потере слуха.
На хромосомах больных наследственной несиндромальной глухотой из Республики Саха (Якутия) в гене СЗВ2 были выявлены 3 полиморфных варианта - У271 (4,6%), Е114С (0,75%), М34Т (1,5%). На сегодняшний день, патогенетическая значимость данных нуклеотидных замен рядом авторов трактуется неоднозначно и носит дискуссионный характер.
Мутация А1555в гена 128гША, обнаруженная в одной семье у пробанда и у ее матери, якутов по этнической принадлежности, ответственна за 15% «чувствительности» к антибиотикотерапии, и, по данным различных авторов, встречается с частотой от 0,02% до 0,6% среди больных с сенсоневральной глухотой в различных этнических группах. Девочка-пробанд и ее мать в раннем детском возрасте получали препараты из группы аминогликозидов, после чего у них резко снизился слух (IV степень тугоухости). Частота данной мутации в общей выборке больных составила 1,5%, среди пациентов якутов - 2,08%.
Учитывая достаточно высокую частоту встречаемости мутации А15550 в изученной выборке больных (1,5%), нами были проведены исследования на наличие данной мутации в выборке якутов из 2-х этногеографических групп (центральные и вилюйские якуты). Частота данной мутации в популяции якутов составила 0,083%.
Коннексин 30 №В6) наряду с коннексином 26 принимает участие в сборке гетерологичных коннексонов в тканях внутреннего уха. Скрининг на наличие делеции 13Б1830) в гене ОЗВ6 среди больных из РС(Я) показал, что делеция 1381830), захватывающая большую часть гена (7Л?6, выявленная ранее в некоторых популяциях в ассоциации с мутациями в гене (7.752, не была зарегистрирована ни у одного пациента из РС (Я).
На основании изученных спектра и частоты мутаций генов ОЗВ2 и 128гША разработан алгоритм молекулярной диагностики наследственной несиндромальной глухоты в РС(Я).
Важным практическим итогом работы является высокая диагностическая значимость исследованных мутаций генов ОЗВ2 и 123гША для семейного анализа и дородовой диагностики. Полученные в ходе настоящего исследования данные позволили увеличить число семей, для которых выяснение наследственного компонента в диагностике несиндромальной сенсоневральной глухоты ранее в Республике Саха (Якутия) не представлялось возможным. Кроме того, молекулярный скрининг всех лиц, из семей, отягощенных наследственной глухотой, позволит уменьшить число врожденных дефектов звуковосприятия, а у уже родившихся детей с наследственными нарушениями слуха - позволит в самые ранние сроки начинать реабилитационные мероприятия для обеспечения полноценной социальной адаптации таких пациентов.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Барашков, Николай Алексеевич, Уфа
1. Алексеев А.Н. Древняя Якутия. Железный век и эпоха средневековья. Новосибирск: Изд-во Института археологии и этнографии СО РАН. 1996. 95 с.
2. Алексеев А.Н. Древняя Якутия. Неолит и эпоха бронзы. Новосибирск: Изд-во Института археологии и этнографии СО РАН. 1996. 143 с.
3. Альтман Я.А. Таварткиладзе Г.А. Руководство по аудиологии. М.:-ДМК Пресс, 2003. 360с.
4. Барашков H.A., Терютин Ф.М, Сухомясова А.Л. и др. Анализ локуса CX26AU гена GJB2 у больных наследственной нейросенсорной тугоухостью и глухотой из Республики Саха (Якутия) // Якутский медицинский журнал. -2006. Т.-2. №14. С. 11-15.
5. Блюмина М.Г. Медико-генетическое консультирование семей с нейросенсорной тугоухостью неясной этиологии у обоих супругов //Вестник оторинолар. 1987. - №4. - С. 33-35.
6. Брей Д, Рэфф Л. И др. Молекулярная биология клетки: в 3-х т / Пер. с англ. -М.; Мир, 1994. 517с.
7. Васильев В.Б. Генетические основы митохондриальных болезней // «Нестор-История» Санкт-Петербург 2006. 146с.
8. Гоголев А.И. Якуты (проблемы этногенеза и формирования культуры). -Якутск, 1993.-С. 123-126
9. Гоголев А.И. Этническая история народов Якутии (до начала XX в.): Якутск: 2004. изд. ЯГУ. 104с.
10. Ю.Григорьева Л.В., Федорова С.А., Мустафина O.E. и др. VNTR -полиморфизм интрона 4 гена эндотелиальной синтазы окиси азота и анализ ассоциаций с инфарктом миокарда в якутской популяции // Медицинская генетика. 2006. № 11. - С. 43-46.
11. Джемилева Л.У. Анализ генов GJB2 и GJB3 у больных несиндромальной наследственной глухотой и в некоторых популяциях Волго-уральского региона: Автореф. дис. канд. мед. наук. Уфа. - 2002. - 20 с.
12. Джемилева JI.У., Гринберг Э. Р., Хабибуллин P.M., Хуснутдинова Э.К. Гены белков-коннексинов, принимающие участие в процессе звуковосприятия // Вестник оторинолар. 2006. - №4. - С. 15-20.
13. ДНК-диагностика и профилактика наследственной патологии в Республике Башкортостан. /Под редакцией Э.К. Хуснутдиновой Уфа: Китап., 2005. - 204с.
14. Ксенофонтов Г.В. Ураангхай-сахалар: Очерки по древней истории якутов. Якутск: Национальное изд-во РС(Я). ТI. (1937). 1992. 416 с.
15. Маак Р.К. Вилюйский округ.-2-е изд., -М.: «Яна», 1994 -592с
16. Максимов Г.Н. Родная Якутия: Природа, люди, природопользование. Якутск.: «Бичик», 2003. -168с.
17. Маркова Т.Г. Наследственные формы тугоухости и медико-генетическое консультирование //Медицинская генетика-2004. Т. 3. - №2. - С. 50-69.
18. Маркова Т.Г., Некрасова Н.В., Шагина И.А. и др. Генетический скрининг среди детей с врожденной и ранней детской тугоухостью // Вестник оторинолар. 2006. - №4. С. 9-14.
19. Маркова Т.Г., Мегрелишвилли С.М., Шевцов С.П. и др. Клиническое и молекулярно-генетическое исследование синдрома Ваарденбурга // Вестник оторинолар. 2003 - №1. - С. 17-19.
20. Маркова Т.Г., Мегрелешвилли С.М., Зайцева Н.Г. ДНК-диагностика при врожденной и ранней детской тугоухости и глухоте // Вестник оторинолар. №6. С. 12-15.
21. Наследственные болезни в популяциях человека /Под редакцией Е.К. Гинтера. М.: Медицина, 2002. 268с.
22. Панахиан В.М. Кровнородственные браки и врожденная форма глухоты // Вестник оторинолар. 2005. - №2 С. 22-24.
23. Платонов Ф.А. Наследственная мозжечковая атаксия в Якутии. Автореферат:, дисс. доктора медицинских наук. Москва. - 2003.
24. Посух O.JL, Палларес-Руиз Н., Тадинова В.Н., и др. Распространенность мутаций гена GJB2 определяющих нарушение слуха, в популяциях Республики Алтай //Медицинская генетика. 2002. - Т.2. - №10. - С. 437.
25. Посух O.JI. Такая разная тишина // Химия и жизнь 2006 №3, www.hij.ru
26. Пузырев В.П., Степанов В.А., Голубенко М.В. и др. Генофонд якутов по линиям митохондриальной ДНК и Y-хромосомы // Генетика. 2003. - Т.39. -С. 975-981.
27. Пузырев В.П и др. Медико-генетическое исследование населения Республики Саха (Якутия) /Сборник научных трудов.- Якутск.; изд. СО РАН -2002.
28. Серошевский B.JI. Якуты. Опыт этнографического исследования.- 2-е изд., М., 1993.-736с.
29. Степанов В.А. Этногеномика населения Северной Евразии. Томск: Изд-во «Печатная мануфактура», 2002. - 244с.
30. Сухомясова A.JI. Клинико-генетический анализ миотонической дистрофии в Республике Саха (Якутия) Автореф.: дисс. канд. мед. наук. Томск. 2005. - 24с.
31. Таварткиладзе Г.А., Гвелесиани Т.Г. Клиническая аудиология. М., 1996
32. Тарская JI.A., Зинченко P.A., Ельчинова Г.И. и др. Структура и разнообразие наследственной патологии в Республике Саха (Якутия) // Генетика 2004. - Т.40. - №11.- С. 1530-1539.
33. Тарская JI.A., Мэлтон Ф. Сравнительный анализ митохондриальной ДНК якутов и других монголоидных популяций // Генетика 2006. Т.-42. - №12. -С. 1703-1711.
34. Торговкина Т.А., Мажитова JI.A., Мозолевская Е.Б. и др. Статистический ежегодник Республики Саха (Якутия) / «Сахаполиграфиздат» 2005.; 536с.
35. Федорова С.А., Бермишева М.А., Виллемс Р., Максимова Н.Р., Хуснутдинова Э.К. Анализ линий митохондриальной ДНК в популяции якутов //Молекулярная биология 2003. - 37. - С. 643-653.
36. Федотова Э.Е. Эпидемиология нарушений слуха у детей Республики Саха (Якутия):. Автореф. дис. канд. мед. наук. Новосибирск. - 2005. - 20 с.
37. Хитринская И.Ю. Степанов В.А. Пузырев В.П. и др. Генетическое своеобразие населения Якутии по данным аутосомных локусов // Молекулярная биология. 2003. - Т.37. - №2. С. 234-239.
38. Шокарев P.A. Амелина С.С., Зинченко P.A. и др. Роль мутации 35delG в возникновении наследственных форм нейросенсорной глухоты в Ростовской области // Медицинская генетика 2006. - Т.5. - С. 38-43.
39. Шокарев Р.А., Амелина С.С., Кривенцова Н.В. и др. генетико-эпидемиологическое и молекулярно-генетическое исследование наследственной тугоухости в Ростовской области // Медицинская генетика -2005. -Т.4. №12. С. 556-567.
40. Abe S., Usami S., Shinkawa H. et al. Phylogenetic analysis of mitochondrial DNA in Japanese pedigrees of sensorineural hearing loss associated with the A1555G mutation // Eur. J. of Hum. Genet. 1998. - Vol.6. - P. 563-569.
41. Abe S., Usami S., Shinkawa H. et al. Prevalent connexin 26 gene (GJB2) mutations in Japanese // J. Med. Genet. -2003. № - 37. P. 41-43.
42. Anderson S., Bankier A., Barrell B. et. al. Sequence and organization of the human mitochondrial genome // Nature 1981. - №290. P. 457-465.
43. Anichkina, Kulenich, Zinchenko et. al. On the origin and frequency of the 35delG allele in GJB2-linked deafness in Europe // Eur. J. of Human Genetics. -2001.-Vol.9. P. 151.
44. Bason L., Dudley T., Lewis K. et. al. Homozygosity for the V37I Connexin 26 mutation in three unrelated children with sensorineural hearing loss // Clinical genet. 2002.- № 61. - P. 459-464.
45. Bespalova I. N., Van Camp G., Bom S. et. al. Mutations in the Wolfram syndrome 1 gene (WFS1) are a common cause of low frequency sensorineural hearing loss // Hum. Molec. Genet. 2001. №.10 P. 2501-2508.
46. Bicego M., Beltramello M., Melchionda S. et. al. Pathogenetic role of the deafness-related M34T mutation of Cx26 // Human Molecular Genetics. 2006. Vol.15.-№17. P. 2569-2587.
47. Bork J., Peters L., Riazuddin S. Usher syndrome ID and nonsyndromic autosomal recessive deafness DFNB12 are caused by allelic mutations of the novel cadherin-like gene CDH23 // Am. J. Hum. Genet. № 68: P. 26-37.
48. Bors A., Andrikovics H., Kalmar L. et al. Frequencies of two common mutations (c.35delG and c.l67delT) of the connexin 26 gene in different populations of Hungary// International J. of Molecular Medicine. 2004. - № 14. P. 1105-1108.
49. Brobby G., Muller-Myhsok B., Horstmann R. Connexin 26 R143W mutation associated with recessive nonsyndromic sensorineural deafness in Africa // N. Engl. J. Med. 1998. № 19. - Vol. 338(8): P. 548-550.
50. Bykhovskaya Y., Yang H., Taylor K. et al. Modifier locus for mitochondrial DNA disease: linkage disequilibrium mapping of a nuclear modifier gene for maternally inherited deafness // Genetic in Medicine. 2001. Vol.- 3.- P. 177-180.
51. Chalestori H., Farthud D., Taylor R. et.al. Deafness Associated Connexin 26 (GJB2) Mutations in Iranian Population // Iranian J. Publ. Health. - 2002. - Vol.31 -№3. P. 75-79.
52. Denoyelle F., Weil D., Maw M. Prelingual deafness: high prevalence of a 30delG mutation in the connexin 26 gene // Hum. Mol. Genet. 1997. - №6. -Vol.12. P. 2173-2177.
53. Denoyelle F., Lina-Granade G., Plauchu H. et. al. Connexin 26 gene linked to a dominant deafness // Nature. 1998. - № 28; 393 (6683) P.319-320
54. Derenko M.V, Grybowski T, Malyarchuk B.A. et. al. Diversity of Mitochondrial DNA Lineages in South Siberia // Annals of Human Genetics2003.-№67. P. 391-411.
55. Estivill X, Govea N, Barcelo A. et. al. Familial Sensorineural Deafness Is Mainly Due to the mtDNA A1555G Mutation and Enhanced by Treatment with Aminoglycosides // Am. J. Hum. Genet. 1998. - Vol. 62. P. 27-35.
56. Estivill X, Fortina P, Surrey S. et. al. Connexin-26 mutations in sporadic and inherited sensorineural deafness // Lancet. 1998. - №11. - Vol.351(9109) P. 1131.
57. Fedorova S.A., Khusnutdinova E.K, Villems. Diversity of mtDNA and Y-chromosome lineagues in populations of Republic Sakha (Yakutia)// HGM, Kioto, 2005. P. 59.(a).
58. Fefelova V.V. Participation of Indo-European Tribes of the Mongoloid Population of Siberia Analyses of the HLA Antigen Discribution in Mongoloids of Siberia //Amer. J. Hum. Genet. 1990. - V.47. - P.294-301.
59. Fialho G., Matos T, Garia H. et. al. A novel M163L mutation in GJB2 gene associated with autosomal dominant isolates hearing loss // OASIS Online Abstract Submission and Invitation System™ ©1996-2007, Coe-Truman Technologies, Inc.
60. Feldmann D, Denoyelle F, Loundon N. et.al. Connexine 26 M34T variant is a frequent polymorphism in France // OASIS Online Abstract Submission and Invitation System™ ©1996-2007, Coe-Truman Technologies, Inc.
61. Fish L. Deafness as a part of an hereditary syndrome // J. laryn-gol. Otol. -1959. Vol.73.-P. 355-383.
62. Frei K, Szuhai K, Lucas T. et. al. Connexin 26 mutations in cases of sensorineural deafness in eastern Austria // Eur. J. Hum. Genet. 2002. - № 10. -Vol.7 P. 427-432.
63. Friedman R.A., Bykhovskaya Y, Sue C.M, et. al. Maternally inherited nonsyndromic hearing loss //Am. J. Med. Genet. 1999. - V.84(4). P. 369-372.
64. Fuse Y. Doi K., Hasegawa T. et. al. Three novel connexin 26 gene mutations in autosomal recessive non-syndromic deafness // Neuroreport. 1999. №10. P.1853-1857.
65. Jacobson J.T. Nosology of deafiiess // Am. Acad. Audiol. 1995. - V.6. P. 1537.
66. Everett L, Morsli H, Wu D. et. al. Expression pattern of the mouse ortholog of the Pendred's syndrome gene (Pds) suggests a key role for pendrin in the inner ear//Proc. Nat. Acad. Sei. 1999. № 96: P. 9727-9732.
67. Gasparini P, Rabionet R., Barbujani G. et. al. High carrier frequency of the 35delG deafness mutation in European populations. Genetic Analysis Consortium of GJB2 35delG // Eur. J. Hum. Genet. 2000. - Vol.-8(l). P. 19-23.
68. Green G., Scott D., McDonalld J. et. al. Carrier rates in the Midwestern Unated States for GJB2 mutations causing inherited deafness // JAWA. 1999. №16. - Vol. 281(23). P. 2211- 2216.
69. Grifa A., Wagner C., Ambrosio L. et. al. Mutations in GJB6 cause nonsyndromic autosomal dominante deafness at DFNA3 locus // Nat. genet. -1999. Vol. 23. - №.21. P. 347-349
70. Guan M-X. Molecular Pathogenetic Mechanism of Maternally Inherited Deafness // Ann. N.Y. Acad. Sei. 2004. - № .1011. P. 259-271.
71. Humelmann C., Amedofu G., Albrecht K. et. al. Pattern of Connexin 26 (GJB2) Mutations Causing Sensorineural Hearing Impairment in Ghana // Human mutations. 2001. - № 428. P. 1-7.
72. Jun A., McGuirt W., Hinojosa R. Temporal bone histopathology in connexin 26-reIated hearing loss // Laryngoscope. 2000. № 110. Vol. 2 (1): P. 269-275.
73. Kelley P., Weston M., Chen Z. The genomic structure of the gene defective in Usher syndrome type lb (MY07A) // Genomics 1997 №40: P.73-79
74. Kelley P., Harris D., Comer B. et. al. Novel mutations in the connexin 26 gene (GJB2) that cause autosomal recessive (DFNB1) hearing loss //Am. J. Hum. Genet. 1998.-V.62. P.792-799.
75. KelIermayer R., Keller M., Ratajczak E. et.al. Bigenic connexin mutations in a patient with hidrotic ectodermal dysplasia // Eur. J. Dermatol. 2005. - Vol.15. -№2.; P.75-79.
76. Kelsell D., Dunlop J., Stevens et al. Connexin 26 mutations in hereditary nonsyndromic sensorineural deafness //Nature. 1997. - № 387. P. 80-83.
77. Kenna M., Wu B., Cotanche D. et. al. Connexin26 studies in patients with sensorineural hearing loss // Arch. Otolaryngol. Head Neck. Surg. 2001. - №127. -Vol. 9. P. 1037-1042.
78. Kiang D., Jin N., Lin H. Upstream genomic sequence of the human connexin 26 gene // Gene. 1997. - Vol. 199. - P. 165-171.
79. Kikuchi T., Kurima R.S., Paul D.L. et.al. Gap junction in the rat cochlea: immunohistochemical and ultrastructural analysis //Anat Embriol (Berl). 1995.-Vol.191. -P.101-118.
80. Kudo T., Ikeda K., Kure S. et. al. Novel mutations in the connexin 26 gene (GJB2) responsible for childhood deafness in the Japanese population // Am. J. Med. Genet. 2000. № 17. - Vol. 90(2). P.141-145.
81. Kupka S., Toth T., Wrobel M. et. al. Mutation A1555G in the 12S rRNA gene and its epidemiological importance in German, Hungarian, and Polish patients // Human mutations. 2002. - Vol.19. P. 308-309.
82. Kupka S., Braun S., Aberle S. et. al. Frecuences of GJB2 Mutations in German Control Individuals and Patients Showing Sporadic Non-syndromic Hearing impairment // Human mutation 2002. - № 512. P. 1 -7.
83. Kurima K., Peters M., Yang Y. et. al. Dominant and recessive deafness caused by mutations of a novel gene, TMC1, required for cochlear hair-cell function //Nature Genet. 2002. - № 30: P. 277-284.
84. Lalwani A., Goldstein J., Kelley. et. el. A five-generation family with late-onset progressive hereditary hearing impairment due to cochleosaccular degeneration // Audiol. Neurootol. 1997. №2: P. 139-154.
85. Lamartine J., Munhoz Essenfelder G., Kibar Z. Mutations in GJB6 cause hidrotic ectodermal dysplasia // Nat. Genet. 2000. № 26. - Vol. 2. P. 142-144.
86. Lerer I., Sagi M., Malamud E. et. al. Contribution of connexin 26 mutations to nonsyndromic deafness in ashkenazi patients and the variable phenotypic effect of the mutation 167delT // Am. J. Med. Genet. 2000. - № 95. P.53-56
87. Liberman M., Gao J., He D. et. al. Prestin is required for electromotility of the outer hair cell and for the cochlear amplifier // Nature 2002. - №19. - Vol. 419(6904). P. 300-304.
88. Lin D., Goldstein J., Mhatre A. et. al. Assessment of denaturing highperformance liquid chromatography (DHPLC) in screening for mutations in connexin 26 (GJB2) // Hum. Mutat. 2001. - № 18. - Vol. 1. P.42-51.
89. Lynch E., Lee M., Morrow J. et. al. Nonsyndromic deafness DFNA1 associated with mutation of the human homolog of the Drosophila gene diaphanous // Science. 1997. - №278. P. 1315-1318.
90. Liu X.-Z.,Walsh J.; Tamagawa. Y. Autosomal dominant non-syndromic deafness caused by a mutation in the myosin VIIA gene. (Letter) // Nature Genet. -1997. №17. P.268-269.
91. Liu X-L., Xia J-X., Xiao M-K et al. The prevalence of connexin 26 (GJB2) mutations in the Chinese population // Hum. Genet. 2002. - Vol.11. P. 394-397.
92. Liu X-Z., Xia J-H., Adams J. Mutations in GJA1 (connexin 43) are associated with non-syndromic autosomal recessive deafness // Hum. Molec. Genet. -2001. Vol.10. - №25. P.2945-2951.
93. Li Z., Li R., Chen J. et al. Mutation analysis of the mitochondrial 12S rRNA gene in Chinese pediatric subjects with aminoglycoside-induced and non-syndromic hearing loss // Hum. Genet. 2005. - Vol.-l 17. P. 9-15.
94. Loffler J., Nekahm D., Hirst-Stadimann et. al. Sensorineural hearing loss and the incidence of Cx-26 mutations in Austria // Eur. J. Hum. Genet. 2001. - №9 -Vol. 3. P. 226-230.
95. Lucotte G., Pinna A. Elevated frequencies of the 35delG allele of the connexin 26 gene in Corsica, France // (Letter) Clin. Genet. 2001. - V. 64. - P. 517-518.
96. Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA. //Methods in Molecular Biology /Ed. Walker J.M. J.M.Y.L.: Human Press. 1984. - V.2. P. 31-34.
97. Mburu P., Mustapha M., Varela A. et. al. Defects in whirlin, a PDZ domain molecule involved in stereocilia elongation, cause deafness in the whirler mouse and families with DFNB31 // Nature Genet. 2003. - №. 34: P. 421-428.
98. Mehl A., Thompson V. Newborn hearing screening: the great omission // Pediatrics.- 1998.- 101. El 14
99. Mehl A., Thompson V. The Colorado newborn screening project, 19921999: on the threshold of effective of population based universal newborn hearing screening // Pediatrics. 2002;109:E7.
100. Meyer C. Amedofu G., Brandner J. et.al. Selection for deafness // Nat. Med. -2002. №8. P. 1332-1333.
101. Mignon C., Fromaget C., Mattei M-G. et. al. Assignment of connexin 26 (GJB2) and 46 (GJA3) genes to human chromosomes 13qll-ql2 and mouse chromosome 14D1-E1 by in situ hybridization // Cytogenet. Cell. Genet. 1996. -№72.-P. 185-186
102. Minarik G., FerakV., Ferakova E. et. al. High Frequency of GJB2 Mutation W24X among Slovak Romany (Gypsy) Patients with Non-Syndromic Hearing Loss // Gen Physiol. Biophys. 2003. - №. 22. P.549-556.
103. Morell R. J., Kim H.J., Hood L.J. et. al. Mutations in tht connexin 26 gene (GJB2) among Ashkenazi Jews with non-syndromic recessive deafness // Nat. Engl. J. Med. 1998. - V. 339. - P. 1500-1505.
104. Morle L., Bozon M., Alloisio N. A novel C202F mutation in the connexin26 gene (GJB2) associated with autosomal-dominante isolated hearing loss // J. Med. Genet. 2000. - Vol. 37. - №5. P. 368-370.
105. Morton N. Genetic epidemiology of hearing impairment //ANNY Acad. Sci. -1991; 630. P.16-31.
106. Morton C., Walter E., Nance M.D. Newborn Hearing Screening A Silent Revolution // The New England Journal of Medicine. - 2006. - № 354. - P. 215164.
107. Mueller R., Nehammer A., Middleton A. et. al. Congenital non-syndromal sensorineural hearing impairment due to connexin 26 gene mutations-molecular and audiological findings // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. 1999. - №15. - Vol. 50(1). P. 3-13.
108. Murgia A., Orzan E., Polli R. et. al. Cx26 deafness: mutation analyses and clinical variability // J. Med. Genet. -1999. V.36. - P829-832.
109. Mukheijee M., Phadke S., Mittal B. Connexin 26 and autosomal recessive non-syndromic hearing loss // Indian Journal of Human Genetics. 2003. - Vol. 9. - №2. P.40-50.
110. Mustapha M., Weil D., Chardenoux S. An alpha-tectorin gene defect causes a newly identified autosomal recessive form of sensorineural pre-lingual non-syndromic deafness, DFNB21 // Hum. Molec. Genet. 1999. - № 8. P. 409-412.
111. Nagla M.A., Schmidth M., Magzoub M. et. al. Low Frequency of Deafness -associated GJB2 Variants in Kenya and Sudan and Novel GJB2 Variants // Human Mutation. 2004. - №.687. P. 456-460.
112. Najmabadi H., Cucci R., Sahebjam S. et. al. GJB2 mutations in Iranians with autosomal recessive non-syndromic sensoneural hearing loss // Hum. Mut. 2002.-Vol. 504. P.135-138.
113. Nance W. The genetics of deafness // MRDD Research reviews. 2003. № 9. P. 109-119
114. Nance W., Liu X., Pandya A. et. al. Relation between choice of partner and high frequency of connexin-26 deafness // Lancet. 2000. - № 356. P. 500-501.
115. Nance W., Kearsey M. Relevance of Connexin Deafness (DFNB1) to Human Evolution // Am. J. Hum. Genet. 2004. - №.74. P. 1081-1087.
116. Naz S., Giguere C., Kohrman D. et. al. Mutations in a novel gene, TMIE, are associated with hearing loss linked to the DFNB6 locus // Am. J. Hum. Genet. -2002.-№71: P. 632-636.
117. Pallares-Ruiz N., Blanchet P., Mondain M. et. al. A large deletion including most of GJB6 in recessive non syndromic deafness: a digenic effect? Europ. J. Hum. Genet.-2002.-№10. P.72-76.
118. Pampanos A., Economides J., Iliadou V. et. al. Prevalence of GJB2 mutations in prelingual deafness in the Greek population// Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. 2002. - № 65. - Vol.2. P.101-108
119. Pandya A., Xia X., Erdenetungalag R. et. al. Heterogenouse point mutations in the mitochondrial t RNA Ser (UCN) precursor coexisting with the A1555Gmutation in deaf students from Mongolia // Am. J. of Hum. Genet. 1999. - Vol.65. P. 1803-1806.
120. Park H-J., Hahn S-H., Chun Y-M et. al. Connexin 26 mutations associated with nonsyndromic hearing loss // Laryngoscope. 2000. - №110. P. 1535-1538.
121. Petersen M., Willems P. Non-syndromic, autosomal-recessive deafness // Clin. Genet. 2006. - №.69. P. 371-392.
122. Posukh O., Pallarez-Ruiz N., Tadinova V. et. al. First molecular screening of deafness in the Altai Republic population // BMC Medical Genet. 2005. - V.6:12 P. 1- 7.
123. Prasad S., Cucci R., Green G. et. al. Genetic testing for hereditary hearing loss: connexin 26 (GJB2) allele variants and two novel deafness-causing mutations (R32C and 645-648delTAGA) // Hum Mutat. 2000. №16. - Vol.6. P.502-508.
124. Prezant T. R., Agapian J. V., Bohlman M. C. et. al. Mitochondrial ribosomal RNA mutation associated with both antibiotic-induced and non-syndromic deafness. // Nature Genet. 1993. - Vol.4. P. 289-294.
125. Rabionet R., Zelante L., Lopez-Bigas et. al. Molecular bases of childhood deafness resulting from mutations in the GJB2 (connexin 26) gene // Hum. Genet. -2000.-№.106. P. 40-44.
126. Ramchander P.V., Nandur V.U., Dwarakanath K. et. al. Prevalence of Cx26 (GJB2) Gene Mutation Causing Recessive Nonsyndromic Hearing Imparment in India // Int. J. Hum. Genet. 2005. № 5 (4). P241-246.
127. Reid F-M., Rovio A., Holt I-J. et. al. Molecular phenotype of a human limphoblastoid cell-line homoplasmic for the np 7445 deafhess-assoiated mitochondrial mutation//Hum. Molec. Genet. 1997. - Vol.6. - №3. P.443-449.
128. Richard G., Smith L., Bailey, et. al. Mutations in the human connexin gene GJB3 cause erythrokeratodermia variabilis // Nature Genet. 1998. - №20. P. 366369.
129. Rickard S, Kelsell DP, Sirimana T. et. al. Recurrent mutations in the deafness gene GJB2 (connexin 26) in British Asian families // J. Med. Genet. -2001.-№38.-Vol. 8. P. 530-531.
130. Robertson N., Lu L., Heller S. et. al. Mutations in a novel cochlear gene cause DFNA9, a human nonsyndromic deafness with vestibular dysfunction // Nature Genet. 1998. №. 20: P. 299-303.
131. Rouan F., White T., Broun N. et. al. Trance-dominant inhibition of connexin-43 by mutant connexin-26: implications for dominant connexin disorders affecting epidermal differentiation // J. Cell. Sci. 2001. - №114 (Ptll). P. 21052113.
132. Ruszymah B., Wahida I., Zakinah Y. et. al. Congenital deafness: high prevalence of a V37I mutation in the GJB2 gene among deaf Ruzkumah school children in Alor Setar // Med. J. Malaysia. 2005. - № 60. - Vol.3. P. 269-274.
133. Roux A-F., Pallares-Ruize., Vielle A. et. al. Molecular epidemiology of DFNB1 deafness in France // BMC Medical Genetics 2004. - Vol. 5 - №5. P. 110.
134. Scott D., Kraft M., Carmi R. Identification of mutations in the connexin 26 gene that cause autosomal recessive nonsyndromic hearing loss // Hum. Mutat. -1998,- №11.-Vol.5. P. 387-394.
135. Scott H., Kudoh J., Wattenhofer M. Insertion of beta-satellite repeats identifies a transmembrane protease causing both congenital and childhood onset autosomal recessive deafness // Nature Genet. 2001. - № 27. P. 59-63.
136. Seeman P., Malikova M., Raskova D. et. al. Spectrum and frequencies of mutations in the GJB2 (Cx26) gene among 156 Chech patients with pre-lihgual deafness // Clin. Genet. 2002. - №66. P. 152-157.
137. Sobe T., Vreugde S., Shahin H. The prevalence and expression of inherited connexin 26 mutations associated with nonsyndromic hearing loss in the Israeli population // Hum Genet. 2000. №106. Vol.1. P. 50-57.
138. Sosinski G., Mixing of connexins in gap junction membrane channels // Proc. Natle. Acad. Sci. USA 1995. - Vol.92. P. 9210-9214.
139. Shahin H., Walsh T., Sobe T. et. al. Genetic of congenital deafness in the Palestinian population: multiple connexin 26 alleles with shared origins in the Midlle East // Hum. Genet. 2002. - №.110. P.284-289.
140. Snoeckx L., Huygen P., Feldmann D. et. al. GJB2 Mutations and Degree of Hearing Loss: A Multicenter Study // Am. J. Hum. Genet. 2005. - №77. P.945-957.
141. Tekin M., Duman T., Bogoglu G. et. al. Frequency of mtDNA A1555G and A7445G mutations among children with prelingual deafness in Turkey // European Journal of Pediatrics. 2003. - Vol. 162. - P. 154-158.
142. Tekin M., Duman T., Bogoglu G. et al. Spektrum of GJB2 Mutations in Turkey Comprises Both Caucasion and Oriental Variants: Roles of Parental Consanquinity and Assortative Mating // Human Mutation 2003. - №608. P. 345-348.
143. Torroni A., Gruciani F., Rengo C. et. al. The A1555G Mutation in the 12 S rRNA Gene of Human mt DNA: Recurrent Origins in the Founder Events in Families Affected by Sensorineural Deafness // Am. J. Hum. Genet. 1999.Vol.-65-P. 1349-1358.
144. Toth T., Kupka S., Haack et. al. GJB2 Mutations in Patients with Non-Syndromic Hearing Loss from Northeastern Hungary // Human mutation 2004. -№721. P. 1-8.
145. Trussel L. Mutant ion channel in cochlear hair cells causes deafness // Proc.Nat. Acad. Sei. 2000. - Vol. 97. - P. 3786-3788.
146. Tu Z., Kiang D. Mapping and characterization of the basal promoter of the human connexin 26 gene//BBA. 1998.-V. 1443.-P. 169-181
147. Uyguner O., Emiroglu M., Uzumcu A. Frequencies of gap- and tight-junction mutations in Turkish families with autosomal-recessive non-syndromic hearing loss. // Clin Genet. 2003. № 64. -Vol.1. P.65-69.
148. Usami S-I., Abe S., Akita J. et. al. Prevalence of mitochondrial gene mutations among hearing impaired patients //J. Med. Genet.- 2000. Vol.-37.- P.38-40.
149. Yan D., Park H-J, Ouyang X-M et. al. Evidence of founder effect of the 235delC mutation of the GJB2 (connexin 26) in east Asians // Hum. Genet. 2003 Vol.114. P. 44-50.
150. Yuge I., Ohtsuka A., Matsunaga T., Usami S. et. al. Identification of 605ins46, a novel GJB2 mutation in a Japanese family // Auris. Nasus. Larynx. -2002. -№29 -Vol.4. P. 379-382.
151. Yasunaga S., Grati M., Cohen-Salmon M. et. al. A mutation in OTOF, encoding otoferlin, a FER-1-like protein, causes DFNB9, a nonsyndromic form of deafness // Nature Genet. 1999. №21. P. 363-369.
152. Vahava 0., Morell R., Lynch E. et. al. Mutation in transcription factor POU4F3 associated with inherited progressive hearing loss in humans.// Science -1998.-№279. P. 1950-1954.
153. Van Camp G., Willems P.G., Smith R.J. et. al. Nonsyndromic hearing imparment: unparalleled heterogenety. Am. J. Hum. Genet. 1997. - №60. P. 758764.
154. Van Laer L., Coucke P., Mueller R.F. et. al. A common founder for the 35delG GJB2 gene mutation in connexin 26 hearing impairment // J. Med. Genet. -2001. V.38. -P.515-518.
155. Van den Ouweland J., Lemkes H., Ruitenbeek W. et. al. Mutation in mitochondrial (UUR) gene in a large pedigree with maternally transmitted type II diabetes mellitus and deafness //Nature Genet. 1992. - Vol. 1. - P. 368-371.
156. Verpy E., Masmoudi S., Zwaenepoel I. Mutations in a new gene encoding a protein of the hair bundle cause non-syndromic deafness at the DFNB16 locus // Nature Genet. 2001. - №29. P. 345-349.
157. Wang A., Liang Y., Fridell R. Association of unconventional myosin MY015 mutations with human nonsyndromic deafness DFNB3 // Science 1998. -№280. P.1447-1451.
158. Wang Y-C., Kung C-Y., Su M-C. et. al. Mutations of Cx 26 gene (GJB2) for prelingual deafness in Taiwan // European J. of Hum. Genet. 2002. - №10. P. 495-498.
159. Wilcox S., Osborn A., Allen-Powell D. et. al. Connexin26 deafness in several interconnected families // J. Med. Genet. 1999. - № 36. - Vol. 5. P. 383385.
160. Wilcox E., Burton Q., Naz S. et. al. Mutations in the gene encoding tight junction claudin-14 cause recessive deafness DFNB29 // Cell. 2001. - №.104. P. 165-172.
161. Willems P. Genetic causes of hearing loss // The New England Journal of Medicine-2000.-Vol. 342.-№ 15. P. 1101-1109.
162. Walsh T., Walsh V., Vreugde S. et. al. From flies' eyes to our ears: mutations in a human class III myosin cause progressive nonsyndromic hearing loss DFNB30. // Proc. Nat. Acad. Sei. 2002. - №. 99. P. 7518-7523.
163. Xiao Z., Xie D. GJB2 (Cx26) gene mutations in Chinese patients with congenital sensorineural deafness and a report of one novel mutation // Chin. Med. Journal. 2004. - Vol.-117. - №-12. P. 1797-1801.
164. Zelante L., Gasparini P., Estivill. X. et. al. Connexin 26 mutations associated with the most common form of non-syndromic neurosensory autosomal recessive deafness (DFNB1) in Mediterranean // Hum. Mol. Genet. 1997.- V.6. - P. 16051609.
165. Zoll B., Petersen L., Lange K., et. al. Evaluation of Cx26/GJB2 in German hearing Impaired Persons: Mutation Spectrum and Detection of Disequilibrium Between M34T (c.l01>C) and -493dell0 // Human Mutation. 2002. №569 P. 19.
166. Zhang Y., Tang W., Ahmad S. et. al. Gap junction-mediated intercellular biochemical coupling in cochlear supporting cells is required for normal cochlear functions // PNAS 2005. - Vol.102. - № 42. P. 15201-15206.
-
Барашков, Николай Алексеевич
-
кандидата биологических наук
-
Уфа, 2007
-
ВАК 03.00.15
- Структурные особенности генов пендрина (SLC26A4) и престина (SLC26A5) у больных наследственной несиндромальной сенсоневральной глухотой
- Молекулярно-генетический анализ наследственной несиндромальной сенсоневральной тугоухости
- Анализ генов 12SrRNA, tRNASer(UCN), MYO7A и USH2A у пациентов с наследственными формами нарушения зрения и слуха
- Генетико-эпидемиологическое изучение наследственной тугоухости в Кировской области
- Клинико-генеалогическая и молекулярно-генетическая характеристика этноспецифических форм наследственной патологии у якутов
