Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы

Орлов, Александр Владимирович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы"

ОРЛОВ Александр Владимирович

Р Г 6 од - з АИР 2^03

МОДИФИЦИРУЮЩЕЕ ВЛИЯНИЕ ГЕПАРИНА НА ПРОЯВЛЕНИЕ КАРДИОТРОПНЫХ ЭФФЕКТОВ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕПТИДНОЙ ПРИРОДЫ

03.00.13. - физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2000

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии человека и животных биологического факультета Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского.

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор А.Е. Хомутов Научным консультант: доктор медицинских наук Ю. В. Зимин

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Д. Б. Гелашвнлн доктор медицинских наук, профессор В. И. Щербаков

Ведущее учреждение - Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии МЗ РФ

Защита диссертации состоится марта 2000 г. в ^ часов на заседании

диссертационного совета К.063.77.13. на биологическом факультете ННГУ (603 600 г. Нижний Новгород, пр. Гагарина, 23, ННГУ, биологический факультет).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского

Автореферат разослан "/Ус/" _ 2000 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

И. Ф. АЛЕКСАНДРОВА

¡>¿¿1. У У 0

Общая характеристика работы

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Актуальной задачей современной физиологии является выяснение роли эндогенных физиологически активных веществ в регуляции вегетативных функций организма. Одним из важных биорегуляторов является гепарин, шрающий особую роль в поддержании гомеостаза. Хорошо установленным фактом является способность гепарина образовывать комплексы с широким спектром белков, пептидов, ферментов, катионных соединений (Кудряшов, 1975; Ляпина. Ульянов, 1977; Ляпина и др. 1989), при этом могут меняться как его собственные свойства, гак и свойства веществ, вступающих с ним во взаимодействие (Хомутов, Орлов, 1987; Ляпина, 1987; Ляпина и др., 1989; Умарова и др., 1993; Кондашевская, Лянина, 1998).

Гепарин может образовывать комплексы с физиологически активными пептидами. Это группа веществ участвует практически во всех физиологических процессах (Климов, 1983, 1986; Ашмарин, Каменская, 1988; Соколова, 1988; Ерошенко, Лукьянова, 1989; Громов, 1992; Угрюмов, 1999). Их роль в системе регуляции, как правило, повышается при измененных состояниях организма: стрессе, гипоксии, ишемии, фармакологическом, токсическом или ином воздействии (Громов, 1992; Лишманов и др., 1997). Многие пептиды активно изучаются как фармакологические средства (Ашмарин, 1988, 1991; Бахарев, 1989). В частности, некоторые из них (тиролиберин, семакс (АКТГ4.7-Про-Гли-Про), далларгин (аналог энкефалина), инсулин) или уже используются или предлагаются использованию как антигипоксанты (Орлов и др., 1987; Брагин, Яснецов, 1991; Ашмарин и др., 1992; Ашмарин, 1997; Антонова и др., 1996; Волков и др., 1996, Слепушкин, 1997).

Взаимодействие гепарина с пептидами может существенным образом отражаться на различных звеньях системы регуляции. Установлено, что гепарин in vivo влияет на проявление некоторых эффектов ряда регуляторных пептидов: адренокортикотропного гормона (Чазов, Лакин, 1977; Le Petit, 1986), тиролиберина (Mollard et al., 1990; Lupu-Meiri et al., 1994), лютенизирующего гормона (Шапиро и др., 1986), опиоидных пептидов (Hasbi et al, 1988; Morikawa, 1998), брадикинина (Шим, Леонтьев, 1981), инсулина (Кудряшов и др., 1984) и др.

Гепарин давно широко используется в терапии инфаркта миокарда и других заболеваний, связанных с гипоксией органов (Грицюк, 1981; Башков и др., 1993; Ройтман, Майба, 1997). Он способен влиять на многие звенья системы регуляции (Jaques, 1980, 1983), существенно меняя значение тех или иных механизмов, в том числе участвуя в трансформации и фармакокинетике регуляторных пептидов. Для экспериментальной физиологии и практической медицины актуальным является вопрос о его влиянии на различные регуляторные системы. Вместе с тем вопрос о взаимодействии гепарина и пептидов в системе регуляции вегетативных функций является слабо изученным. Большинство исследований проведены на уровне целого эрганизма. Однако, пептидергическая регуляция построена по принципу каскада, эбразуя сложный континуум регуляторных взаимодействий (Ашмарин, Обухова, 1986, 1994; Ашмарин, Каменская, 1988; Ерошенко и др., 1991). При этом оценить влияние какого-то одного пептидного звена очень затруднительно, тем более его паимодейсгвие с другими физиологически активными соединениями, в том числе и с

гепарином. Влияние последнего, в свою очередь, также распространяется на многие регуляторные системы и может зависеть от множества факторов.

В этой связи возрастает значение исследований взаимодействия гепарина и пептидов на уровне отдельного органа, например, на изолированном сердце. Данная модель позволяет исследовать собственные эффекты гепарина и пептидов на сократительную активность миокарда в условиях изоляции органа от влияний большинства других регулягорных агентов.

В начальной фазе исследований, посвященных взаимодействию гепарина и пептидов в регуляции сердечной деятельности, целесообразно проанализировать, прежде всего, эффекты пептидов, для которых показано образование комплексов с г епарином, и которые могут оказывать выраженные эффекты на работу сердца, либо в условиях нормы, либо при гипоксии. Таким требованиям удовлетворяют инсулин (Кудряшов и др., 1981; Орлов и др., 1987), тиролиберин (Ашмарин и др., 1996; Soeci ct al., 1996), семакс (Ашмарин и др., 1996; Балан и др., 1997; Маслова и др., 1999). Представляет интерес, так же исследование влияния гепарина на проявление кардиотропных эффектов мелиттина (пептид пчелиного яда), который образует прочные комплексы с гепарином (Kind, Allaway, 1982) и способен как угнетать сердечную деятельность, так и, по мнению ряда авторов, при определенных условиях стимулировать (Fletcher, Jiang, 1993; Okamoto et al., 1995; Крылов 1995).

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью работы было изучение влияния гепарина на проявление кардиотропных свойств биологически активных соединений пептидной природы на модели изолированного сердца крысы в условиях нормы и тотальной ишемии.

При этом ставились следующие задачи:

1. Изучить влияние инсулина, тиролиберина, семакса, мелиттина, а также пчелиного яда и их смесей с гепарином на различные показатели работы изолированного сердца крысы в условиях относительной нормы: частоту и силу сердечных сокращений, работу, скорость сокращения и скорость расслабления сердца.

2. Исследовать влияние данных пептидов и их смесей с гепарином на восстановление сердечной активности после тотальной ишемии.

3. Изучить возможные адаптогенные свойства данных пептидов и их смесей с гепарином.

4. Провести анализ физиологических механизмов модифицирующего влияния гепарина на проявление кардиотропных свойств пептидов и восстановление сердечной деятельности после тотальной ишемии.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые показана модификация гепарином кардиотропных эффектов тирлиберина, семакса, мелиттина, а также пчелиного яда на модели изолированного сердца. Установлено, что гепарин способствует проявлению положительной инотропной реакции на инсулин как в условиях нормы, так и в реперфузионный период после тотальной ишемии и в целом повышает стимулирующий эффект гормона. Впервые показано, что тиролиберин и семакс оказывают непосредственное влияние на сократительную активность изолированного сердца в реперфузионном периоде после тотальной ишемии, а гепарин может

изменять проявление эффектов данных пептидов. Выявлено, чго гепарин устраняет развитие фибрилляции желудочков и препятствует увеличению силы сердечных сокращений сердца в иостишемический период, вызываемых тнролиберином. Обнаружено, что гепарин способствует проявлению адаитогенных свойств семакса, повышая резистентность миокарда к ишемическим повреждениям; стимулирующее влияние пептида на работу сердца при его ностишсмическом введении в составе смеси с гепарином не снижается. Установлено, что гепарин препятствует угнетению сократительной активности изолированного сердца под действием мелиттина и пчелиного яда в условиях относительной нормы. Кроме того, он способствует проявлению кардиостимулирующих свойств цельного яда, но не мелиттина после тотальной ишемии миокарда. Впервые показано, что иод влиянием инсулина, тиролиберина, семакса и пчелиного яда в реперфузионном периоде усиливается прямая лактатдегидрогеназная реакция (образование пирувата) в митохондриях кардиомиоцитов, что может косвенно свидетельствовать о стимуляции данными веществами процессов аэробного дыхания и снижении ацидоза. Гепарин не препятствует проявлению данных эффектов.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Диссертационная работа является одной из первых работ, посвященных исследованию модификации гепарином кардиотропных эффектов инсулина, тиролиберина, семакса. Полученные данные расширяют представления о роли гепарина, как регулятора функций сердечно-сосудистой системы. Результаты исследований позволяют предполагать важную роль гепарина в реализации некоторых эффектов ряда пептидных соединений на сократительную функцию миокарда в условиях гипоксии и ишемии. Обнаруженные свойства гепарина и его смесей с пептидами позволяют рассматривать данный глюкозаминогликан и его комплексы как перспективные средства для исследований в токсикологии, кардиологии, физиологии критических состояний и предполагать возможность использования этих сведений в клинической практике.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Гепарин способен модифицировать кардиотропные эффекты биологически активных веществ пептидной природы.

2. Гепарин способствует проявлению кардиотропных эффектов инсулина в условиях относительной нормы, усиливая положительный инотропный эффект пептида.

3. Гепарин может выступать в роли неспецифического регулятора состояния ишемизированного миокарда при действии на него различных физиологически активных веществ.

4. Гепарин в составе смесей с инсулином, тнролиберином, ссмаксом усиливает кардиостимулирующие эффекты пептидов при восстановлении сердца после тотальной ишемии, способствует проявлению адаитогенных свойств данных пептидов.

5. Инсулин, тиролиберин, семакс влияют на направленность лактатдегидрогеназной реакции в сторону стимуляции образования пирувата в

постишсмический исриол; гепарин не препятствует проявлению данных свойств пептидов.

6. Гепарин снижает токсические эффекты мслиттина и способствует тем самым проявлению кардиостимулирующих свойств пчелиного яда при восстановлении сердца после тотальной ишемии.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Международных конференциях студентов и аспирантов по фундаментальным наукам "Ломоносов-96", "Ломоносов-97", "Ломоносов-99" (Москва, 1996; 1997; 1999), II и III Нижегородских сессиях молодых ученых (Н. Новгород, 1997; 1998), VI и VII конференциях по ашперапии (Рыбное. 1997; 1999), I-м Российском кошрсссе по патофизиологии (Москва. 1996), конференции молодых ученых России с международным участием "Фундамсшальные науки и прогресс клинической медицины", IV Пущинской конференции молодых ученых (Пущино, 1999), Всероссийской конференции "Перспективы развития Волжского региона" (Тверь, 1999), Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 150-летию со дня рождения академика И. П. Павлова (Санкт Петербург, 1999), 3-м Всероссийском симпозиуме "Физиологические механизмы природных адаптации" (Иваново, 1999), конференции молодых ученых Поволжья и Северного Кавказа (Н.Новгород, 2000).

По теме диссертации опубликовано 15 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Материал диссертации изложен на 157 страницах машинописного текста, иллюстрирован 25 таблицами и 7 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, глав результатов исследования и обсуждения, выводов и списка литературы, содержащего 268 источников, из которых 151 на русском и 117 на иностранных языках.

Материалы и методы исследований

Эксперименты проводили на крысах массой 250-300 грамм. Работали по стандартной методике изолированного сердца Лангендорфа-Фаплена (Fallen, 1967). Крысам под нембуталовым наркозом (35 мг/кг) вскрывали грудную полость, быстро вырезали сердце и помещали его в охлажденный раствор Крсбса-Ханзеляйта. В нем быстро отпрепарировали аорту и подсоединили к установке, обеспечивающей ретроградную перфузию через восходящую аорту буфера Кребса-Ханзеляйга. Установка представляла собой термостатируемый резервуар (оксигенатор), куда подавался перфузионный раствор. Резервуар соединялся силиконовой трубкой с металлической канюлей, на которую подвешивалось сердце, и термостатируемый камерой, куда оно помещалось. Перфузионный раствор подавался под давлением 85 мм водного столба, температура перфузата составляла 37"С. Для аэрации питающего раствора использовался воздух, который подавался через распыляющий фильтр. В левый желудочек сердца через предсердие вставляли латексный баллончик соединенный с манотроном "МДХ11С" и с самописцем "Н338".

Сократительную активность сердца исследовали в изоволюмических условиях по Фаллсну (Fallen, 1967). При этом проводили запись кривой внутрижелудочкового

давления для последующего расчета частоты сердечных сокращений (ЧСС, уд/мин), развиваемого левым желудочком давления (максимальной силы сердечного сокращения, мм. рт. ст.), конечного диастолического давления (КДД, мм. рт. ст.) и скоростных показателей - максимальной скорости сокращения +(№„„,./111 (мм.рт.ст./с) и максимальной скорости расслабления -<1РЧ|ШЛ1| (мм.рт.сг./с) левого желудочка. Рассчитывали сократительную работу сердца, как произведение силы сердечных сокращений на частоту (Гацура, 1991).

Через 15 минут после начала перфузии (стабилизационный период) производили контрольную регистрацию параметров сократимости миокарда. Эти данные принимали за исходные, после чего производили воздействие. Запись показателей проводили через 1, 2, 3, 5, 8, 10, 15, 20, 30 мин после введения веществ в опытах в условиях относительной нормы, или через 1,5, 10, 15. 20, 30, 40 мин после начала реперфузии в опытах на модели тотальной ишемии.

Ишемию вызывали полным прекращением перфузии органа. После 40-минутной нормотермической ишемии начинали реперфузию. Реакции восстановления сердечной деятельности наблюдали в течение 40 минут.

Через 40 минут реперфузии выделяли митохондрии для определения активности лактатдегидрогеназы. Сердце охлаждали, освобождали от жировой и соединительной ткани измельчали. Измельченную ткань помещали в стеклянный сосуд, заливали 9 мл 0,25 М раствора сахарозы (рН 7,4) и гомогенизировали. Гомогенат центрифугировали 15 минут при 1000 об/мин в центрифуге "РС-6". После этого надосадочную жидкость переносили в другую пробирку и снова центрифугировали 20 минут при 15000 об/мин. В осадке получали митохондриальную фракцию. Активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) определяли спектрофотометрически (Кочетов, 1980). Активность ЛДГ выражали в нмоль за I минуту на 1 мг белка. Вычисляли коэффициент отношения прямой (У,ф) и обратной (У,*;) реакции:

=У0</Улр

В работе использовались высокомолекулярный гепарин производства Московского эндокринного завода, инсулин свиной высокоочищеный быстродействующий производства Ро^а ТагсЬотт в. А., тиролиберин и семакс синтезированные в институте Молекулярной генетики РАН, высокоочищенный мелиттин, выделенный из пчелиного яда в институте биоорганической химии РАН им. М.М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова и пчелиный яд - сырец.

Смеси гепарина с физиологически активными веществами готовили с целью получения максимального количества комплексов гепарин-пептид в среде по специально разработанным методикам (Кудряшов и др., 1981; Хомутов и др., 1985; Хомутов, 1987; Ульянов и др., 1989; Ашмарин и др., 1996), при этом пептиды смешивали с гепарином в дистиллированной воде в определенных соотношениях (инсулинтепарин - 5:1; тиролиберин:гепарин - 1:1; семакс:гепарин - 1:1; мелиттин:гепарин - 1:0,5; пчелиный яд : гепарин - 1:0,5), затем смесь инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре и вводили в условиях относительной нормы, непосредственно перед ишемией или сразу после ишемии. Вещества вводили

с перфузируемым раствором через канюлю непосредственно в аорту, при ном исходные концентрации веществ разбавлялись в 3 мл перфузируемо! о раствора.

Соогвс1С1венно количеству пептидов, нами проведено 4 блока экспериментов. В блоке исследований эффектов мелиттина изучали также для сравнения пчелиный яд, в котором содержание этого пептида достигает 50%, и который является основным ею источником. В каждом блоке изучали влияние веществ, как в условиях относительной нормы, так и на модели тотальной ишемии. В опытах использовано 275 нелинейных белых крыс весом 250-300 г.

В условиях относительной нормы исследовали дозозависнмое влияние на сократительную активность миокарда гепарина (0,03. 0,3, !, 3 и 10 мг, или с учетом разведения 0,01, 0.1. 0,33, 1, 3.3 мг/мл), инсулина (0,03, 0,3, 1, 2 мг), тиролиберина (0,03, 0,3, 1 мг), ссмакса (0,03, 0,3, 1 мг), мелиттина (0,03 мг) и пчелиного яда (0,05 мг), а также смесей пептидов и зоогоксинов с гепарином в соответствующих соотношениях. На модели тотальной ишемии изучали восстановление сердечной деятельности после тотальной ишемии при пред- и постишемическом введении гепарина (0,03 мг), исследуемых пептидов (0,03 мг каждого вещества), пчелиного яда (0,05 мг) и смесей пептид-гепарин и зоотоксин-гепарин в соответствующих соотношениях. Кроме того, были две группы сравнения: 1) интактные животные, у которых сердце изолировали и через 15 минут перфузии без какого-либо воздействия брали для биохимического анализа; 2) контрольная группа, у животных которой сердце изолировали, ишемизировали и через 40 мин реперфузии и регистрации параметров сократительной активности миокарда выделяли митохондрии.

Результаты исследований и их обсуждение

Кардиотропные эффекты гепарина

В условиях относительной нормы гепарин практически не влиял на сократительную активность миокарда. Только сразу после введении 3 и 10 мг вещества наблюдалась в течение 1-2 секунд остановка сердца, затем 2-3 сильных сокращений в 2-3 раза превышающих норму, после чего нормальный режим работы сердца восстанавливался.

Сердечная деятельность после 40-минутной ишемии в контрольной группе животных характеризовалась неполным восстановлением сократительной активности, нарастанием контрактуры, развитием аритмий. К 40 минуте реперфузии значения ЧСС не превышали в среднем 80 уд/мин, Р„а„. - 70 мм. рт. ст. Скоростные показатели достигали значений не более 50-60% от исходного состояния. КДД увеличивалось в среднем в 10 раз. Предишемическое введение гепарина не влияло на восстановление сократительной активности миокарда. При постишемическом введении достоверным было только увеличение РмаК1. в первые минуты реперфузии до 140-170 мм. рт. ст. (43%) превышающего контрольные (на 100%) и исходные (на 70%) значения (Рис.1) но это не сказалось на сократительной работе сердца и его последующем восстановлении. Существенно ниже было нарастание КДД (Рис. 1), в среднем в 2 меньше чем в контроле. Возможно это связано со способностью гепарина образовывать прочные комплексы с ионами Са2* с большей афинностью, чем с

другими ионами (Романенко, Коцар, 1974; Jaques, 1980; Кудряшов, Ляпнна. 1982), и тем самым регулировать баланс данного иона на мембране кардномиоцитов (Marlines et al., 1994; Wu, Wung, 1995). Это может препятствовать накоплению данного иона в клетках при их реперфузионном повреждении и значительному увеличению КДД.

Рнс. I. Влияние гепарина на восстановление развиваемого (а) и конечного диастолического (6) давления изолированного сердца после тотальной ишемии

Примечания: По оси абсцисс - время рсперфузии; по оси ординат - значения показателя сокрашмостн в % относительно исходных данных

Условные обозначения: -ишемия (контроль);

------гепарин, предишемнчсское введение;

гепарин, постишсмичсскос введение; + различия с контролем достоверны (р<0.05).

В целом можно констатировать, что собственное влияние гепарина на сократительную активность изолированного сердца и восстановление его деятельности после тотальной ишемии незначительно.

Кардиотропные эффекты инсулина и его смеси с гепарином Введение инсулина в количестве 0,03 и 0,3 мг не сказывалось на сократительной активности сердца. Повышение количества до 1 или 2 мг приводило к недостоверному повышению Рмаю: максимумом на 3 мни. и снижению ЧСС (Рис. 2). Введение смеси инсулин-гепарин в соотношении (0,3 мг : 0,06 мг) вызывало постепенное увеличение Р„„с на 74 мм. рт. ст. (75%) максимум к 5 минуте (р<0,01). При этом частота сердечных сокращений недостоверно снижалась в среднем на 20% к 5 минуте, но сократительная работа сердца при этом достоверно увеличивалась на 40% (р<0,05), что в целом может говорить о стимуляции смесью инсулин-гепарин сократительном активности миокарда. Через 15 минут эффект исчезал полностью и при повторном введении не проявлялся.

200 180 160 140 120 100 № 60 40 20 О

Рис. 2. Влияние инсулина и его смеси с генарином на сокрагИ1е.1ьную ак1нвнос1ь изолированного серлиа

При.чечанин: Но оси абсцисс - время реперфузии; по оси ординат - значения показателя сократимости в % относительно исходных данных Условные обозначения: а) развиваемое давление (маркер •): 0) частота ссрдсчных сокращении (без маркера) --инсулин (1 мг/мл)

----------------смесь инсулина (0,1 мг) и гепарина (0.02 мг);

- различия с исходными значениями достоверны (р<0.05)

Полученные данные хорошо согласуются с гипотезой о возможном участии гепарина в рецепции инсулина (Кудряшов и др., 1984; Шапиро и др., 1986). Не исключено, что, легко соединяясь с гликокаликсом клеток, гепарин может способствовать адсорбции инсулина на мембране кардиомиоцитов, препятствовать вымыванию пептида и облегчать его связывание с рецепторами. Положительный инотропный эффект гормона, возможно, связан с повышением содержания внутриклеточного кальция (Перцева и др., 1996; Новицкий и др., 1997). Удаление из цитоплазмы иона требует значительного количества АТФ, возможно, поэтому снижается такой чувствительный к дефициту энергии показатель как ЧСС. Однако, это не приводит к снижению значений сократительной работы сердца, что может косвенно свидетельствовать о стимуляции инсулином и в большей степени его смесью с гепарином энергетики кардиомиоцитов.

При постишемичсском введении инсулин (0,03 мг) практически не влиял на восстановление сердечной активности по сравнению с контролем. При предтишемическом введении он приводил к достоверному повышению Рма> до 157 мм. рт. ст., что в 2 раза превышало контрольные и в 1,5 раза исходные данные, и стимулировал увеличение ЧСС на 50-60% на 15-20 минуте реперфузии (Рис.3), при этом скоростные показатели не отличались от контрольных. Эффект к 30 минуте исчезал.

Введение смеси было более эффективным. При постишемическом введении в первые минуты реперфузии Рмакс в 2 раза превышала исходный уровень и в 2,5 раза показатели контроля, затем постепенно снижалась и к 40 мин. реперфузии достигала исходных значений. При предишемическом введении инотропный эффект был незначительным, только на 5-10 минуте реперфузии Рмакс достоверно превышала

1 2 3 5 В 10 16 20м*

показатели контроля на 40% (р<0,05). Значения ЧСС при обоих способах введения смеси были достоверно (р<0,05) выше контрольных данных на 30-60% в реиерфузионный период (Рис.3). Аналогично изменялись скорость сокращения и скорость расслабления миокарда. Значения сократительной работы сердца достоверно превышали контрольные все время наблюдения, что подчеркивает более высокую эффективность смеси в стимуляции сократительной активности сердца по сравнению с действием одного инсулина.

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

а. ♦♦ ^ / . - -ч- --

/ __----1м»

/ -V

зоо 4 б

250 \

200 4 ^ ч

150

100 го о

»<• .....• . —•

10 15 20 30 40 мин

10 15 20 30 40

200 | 0 1

1 5 10 15 20 30 40 мин

Рис. 3. Влияние инсулина и его смеси с гепарином на восстановление ЧСС (а) развиваемого (б) и конечного диастол и ческого давления (в) изолированного сердца после тотальной ишемии

Примечания: По оси абсцисс - время реперфузии; по оси ординат - значения показателя сократимости в % относительно исходных данных

Условные обозначения: -ишемия (контроль);

------предишемическос введение веществ;

постишсмическое введение веществ; + различия с контролем достоверны (р<0,05); график без меркера - эффект инсулина, график с маркером (•) - эффект смеси.

Для групп с пое г- (на протяжении всего времени наблюдения) и предишемическим (юлько первые минуты) введением инсулина характерны высокие значения КДЦ (Рис.3), превышающие контрольный уровень на 20-30%. что может свидетельствовать о накоплении Ca2t в цитоплазме кардиомиоцитов. Увеличение этого показателя в случаях применения смеси было на 50-60% ниже контрольных значений, что может говорить о высокой интенсивности работы кальциевых АТФ-аз и возможном влиянии гепарина, как вещества, способствующею удалению Са:* из клетки.

В целом можно констатировать, что введение инсулина в составе смеси с гепарином в условиях относительной нормы способствует проявлению положительного инотропного эффекта пептида. В реиерфузионный период гепарин значительно увеличивает н пролонгирует кардиостимулирукмций эффект инсулина.

Кардиотропные эффекты тиролиберина и его смеси с гепарином

В условиях относительной нормы ни тиролиберин в диапазоне концентраций от 0,03 до I мг. ни его смесь с гепарином не влияли на сократительную активность изолированною сердца, что согласуется с литературными данными (Socci et al., 1996).

В самом начале реиерфузионного периода как при пред- , так и при постишемичесском введении тиролиберин (0,03 мг) способствовал развитию фибрилляции желудочков, после чего в 30% случаев при предишемическом введении сердце не восстанавливалось. В остальных случаях в первые 10-15 мин наблюдалось увеличение PMJkl до 200-220 мм.рт.ст. максимум, что достоверно (р<0,01) превышало исходный уровень (в первые минуты реперфузии) и контрольные значения (Рис.4). Начиная с 10 мин реперфузии сила сердечных сокращений начинала снижаться и при постишемическом введении пептида к 15 мин достигала исходных значений и далее не менялась за время наблюдения, а при предишемическом введении уже на 30 минуте не превышала показателей контроля. Со снижением PMJKC постепенно увеличивалась ЧСС до показателей, близких к исходным. Сократительная работа сердца в рсперфузионный период достоверно превышала значения контроля (р<0,01), что может говорить о стимуляции тиролиберином сократительной активности миокарда в реиерфузионный период. Скорость сокращения и скорость расслабления под влиянием пептида постепенно восстанавливались до значений достоверно превышающих контрольные (р<0,05), что согласуется с данными, полученными in vivo (Zheng et al., 1992).

Гепарин достоверно (р<0,01) блокировал проявление положительного инотропного эффекта тиролиберина независимо от введения, различия с контролем были незначительны (Рис.4). Вместе с тем под влиянием смеси как при пред-, так и при постишемическом введении происходила стимуляция ритмической активности миокарда, которая в конечном итоге достигала исходных значений, превышая уровень контроля почти в 2 раза (р<0,01). Это вызывало постепенное увеличение значений сократительной работы сердца, которые к 40 минуте реперфузии были выше контрольных на 75% (р<0,01). Изменения скоростных показателей были аналогичны таковым в группах по изучению влияния одного тиролиберина. Блокада гепарином положительного инотропного эффекта тиролиберина возможно связана с

ангагонисшческими взаимоотношениями между глюкозамииогликаном и пептидом (Ашмарин и др., 1991) и способностью гепарина шпибировать действие инозитол-3-фосфата, который является вторичным мсссснжсром тиролиберина (Тбэо, Би, 1996).

1 200

Рис. 4. Влияние тиролиберина и его смеси с гепарином на восстановление ЧСС (а) рашнваечою (б) и конечного диастол и чес кого давления (в) изолированного сердца после тотальной ишемии

Условные обозначения: -ишемия (контроль);

------предишсмичсскос введение веществ;

----постишемичсское введение веществ;

+ различия с контролем достоверны (р<0,05); график без меркера - эффект тиролиберина, график с маркером (•) - эффект смеси.

Обращают на себя внимание сравнительно низкие значения КДД при постишемичееком введении пептида и при обоих способах введения смеси тиролиберин-гепарин (в 2 -2,5 раза ниже контрольных, р<0,05), что может свидетельствовать об эффективной работе кальциевых АТФ-аз (Рис. 4).

Исходя из полученных данных можно предполагать наличие в сердце рецепторов к тиролиберину и ею прямое влияние на работу данного органа.

Кардиотропные эффекты семакса и его смеси с гепарином В условиях относительной нормы ни семакс в количестве от 0,03 до 1 мг, ни его смесь с гепарином не вызывали изменений в сердечной деятельности. При ишемии пептид вел себя различно в зависимости от введения.

120 а 200 6

180 1 ♦i 1«

" - V

V 120 V _ ♦ 60 ioo ч ■.---•---•

40 /А ^ .

' * ' 60 //:

20 40

•' 20

О 0 .

1 5 10 15 20 30 «мин , 5 10 15 20 30 40 мин

1600 В

1400 _.....-....._......................

1200

1000 ____—----

800 — — — _

——л__♦ *

600 ; + ♦ . т~ — —.

•-'i.- .....•.....•.....•.....•.....•

400 + ♦ + ♦ ♦ — «ф-- — —-----т

200

О ' ...

1 5 10 15 20 30 40 мин

Рис. 5. Влияние семакса н его смеси с гепарином на восстановление ЧСС (а) развиваемого (б) и конечного диастол и ческого давления (в) изолированного сердца после тотальной ишемии

Примечания: Но оси абсцисс - время реперфузии; по оси ординат - значения показателя сократимости в % относительно исходных данных

Условные обозначения: -ишемия (контроль);

------предишемичсскос введение веществ;

постшиемическос введение веществ; + различия с контролем достоверны (р<0,05); график без меркера - эффект семакса, график с маркером (•) - эффект смсси.

При предишемичсском введении семакса (0,03 мг) к 40 минуте реперфузии все более отчетливо заметно его угнетающее воздействие на все основные показатели сократительной активности (Рис.5). Достоверно (р<0,05) снижались по сравнению с контролем сила сердечных сокращений (на 20%), сократительная работа сердца (на 20%), скоростные показатели (на 30-50%), увеличивалась КДЦ (на 40%). Введение

ссмакеа в постишсммчсский период, наоборот, в значительной степени по сравнению с контролем стимулировало восстановление к 40 минуте реперфузии Р^ (на 20 мм.рт.сг., 18%), ЧСС (на 60 уд/мин, 55%), а также скорости сокращения миокарда(на 550 мм.рг.ст./с., 68%). Значительные различия от условий введения могут быгь связаны с активацией АКТГ и его аналогами аденилатциклазы (Сергеев, Шимановский, 1987; Чекман, 1991). По некоторым данным увеличение соотношения цАМФ/цГМФ при активации этого фермента снижает устойчивость изолированного сердца к последующей гипоксии, но улучшает работу препарата при иостишемическом воздействии (Кожемякин, Коростовцев, 1977; Гацура, 1981; 1991).

Введение смеси гепарин-семакс как перед, так и после ишемии, вызывало однотипные изменения, напоминающие влияние одного семакса при иостишемическом введении. В отличие от предварительного введения пептида, его смесь с гепарином обладает значительными адаптогенными свойствами, повышая резистентность миокарда к ишемическим повреждениям. Такая особенность, в данном случае и в случае с тиролиберином, возможно, связана со способностью гепарина, образуя комплексы, особым образом "депонировать" некоторые физиологически активные вещества, выступать в роли своеобразного буфера, и таким образом он может препятствовать их эффекту, превышающему оптимальные для данного состояния органа значения, но способствовать стимулирующему влиянию низких доз пептида.

Кардиотропные эффекты мелиттина. пчелиного яда и их смесей с гепарином

Для сравнения с пептидами, имеющими рецепторный характер действия, в четвертом блоке экспериментов изучался мелиттин, который может образовывать каналы, увеличивая проницаемость мембран для ионов Na* и Са:* (Chung et al„ 1997; Okamoto et al., 1995) и пчелиный яд.

i2o a 160 б

1 > 5 10 20 30 мин 0

1 3 5 10 20 ммн

Рис. 6. Влияние мелиттина, пчелиного яла и их смесей с гепарином на частоту (а) и силу сердечных сокращений

Примечания: По оси абсцисс - время перфузии после введения веществ; по ос» ординат - значения показателя сократимости в % относительно исходных данных Условные обозначения:

----------мелиттин

----------------пчелиный яд

+ различия с исходными значениями достоверны (р<0,05)

графики без меркера - эффекты зоотоксинов, график с маркером (•) - эффекты смесей.

1 5 10 15 20 30 40

300 б 250

200 150

100 »

г-Ч ••

\ - * ^^^^

1 5 10 15 20 30 40м»

1200 в

Рис. 7. Влияние смесей мелиттина, пчелнны о яда с гепарином на восстановление ЧСС (а) развиваемою (б) и конечного диастол и ческого давления (в) изолированного сердца после тотальной ишемии

Условные обозначения: -ишемия (контроль);

------ирсдишсмичсскос введение смесей;

----постишсмичсское введение веществ;

+ различия с контролем достоверны (р<0,05); график без меркера - эффект смеси гепарин - пчелиный яд, график с маркером (•) • эффект смеси гепарин - мслиггин.

В условиях относительной нормы и мслиттин (0,03 мг) и пчелиный яд (0,05 мг) вызывали ярко выраженные токсические эффекты (Рис.6). Эти вещества достоверно (р<0,01) вызывали постепенное угнетение ЧСС и Рмакс на 40%, а также скоростных показателей (на 50-70%), при этом наблюдалось развитие аритмий и рост контрактуры (КДД увеличивалось в 10 раз относительно исходного состояния). Гепарин снижал токсические эффекты зоотоксинов. Все показатели сократительной активности слабо отличались от нормы, однако высокий процент аритмий сохранялся. По нашим данным, похожим образом гепарин влиял на проявление эффектов яда кобры: введение этого зоогоксина в составе смеси с гепарином

полное 1ью предотвращало угнетение активности изолированного сердца. При этом в первые минуты после воздействия наблюдался положительный хронотропный эффект - ЧСС повышалась в среднем на 67% (Орлов, Хомутов, 1998).

При введении как перед, так и после ишемии и пчелиный яд и мелиттин вызывали прекращение работы сердца, его сократительная активность в 90% случаев не восстанавливалась. Напротив, введение смеси гепарин-пчелиный яд сопровождалось достоверным (р<0,05) повышением ритмической активности в 2 раза, силы серсчных сокращений на 30% и в целом сократительной работы сердца по сравнению с контролем (Рис.7). Данные показатели в конечном итоге приближались к исходным значениям. Однако восстановление сократительной активности сердца сопровождалось значительным количеством аритмий на протяжении всего времени наблюдения. Ведение смеси геиарин-мелиттин не приводило к значительным изменениям сократительной активности по сравнению с контролем в ренерфузионный период, за исключением высокого процента аритмий. Увеличение кошрактуры было небольшим (на 10%), что характерно для всех случаев использования смесей с гепарином (Рис. 7).

Данные результаты могут говорить о том, что мелиттин не является тем компонентом пчелиного яда, который стимулирует работу сердца. Можно предполагать, что гепарин блокирует мелиттин, в составе пчелиного яда, снижая кардиотоксические свойства последнего и способствуя проявлению его кардиостимулирующих эффектов в реперфузионном периоде.

Влияние пептидов и их смесей с гепарином на направленность лактатдегидрогеназной реакции в реперфузионном периоде

Ишемия и последующая реперфузия приводили к значительному смещению ЛДГ-рсакции в сторону образования лактата. Скорость обратной реакции в 4-5 раз превышала скорость прямой реакции (р<0,001). Превентивное введение гепарина не отражалось на активности фермента. Напротив, при посгишемическом введении гепарина коэффициент направленности ЛДГ-реакшш К„6пр достигал исходных значений, характерных для группы интактных животных (Табл.).

Инсулин, тиролиберин, семакс стимулировали прямую и угнетали обратную лактатдегидрогеназные реакции в реперфузионный период. Значения коэффициента КиГ1|1р не отличались от группы интактных животных. Гепарин в составе смесей с пептидами не снижал проявление данного эффекта независимо от введения. Эш данные косвенно подтверждают способность данных пептидов стимулировать аэробное дыхание в реперфузионный период, что сказывается на восстановлении сердечной деятельности после тотальной ишемии.

Мелиттин не влиял на направленность лактатдегидрогеназной реакции в реперфузионный период. Однако, его смесь с гепарином достоверно (р<0,01) снижала значения Ко6/„р до показателей, характерных для состояния относительной нормы. В то же время пчелиный яд как сам по себе, так и в смеси с гепарином и при предишемическом введении и при посгишемическом стимулировал прямую и угнетал

обратную ЛДГ-рсакции, изменяя (р<0,01) значение коэффициента К,„-11]р. Данный эффект может быть связан с наличием в составе пчелиного яда компонентов, стимулирующих данные процессы.

Таблица

Влияние инсулина, тиролиберииа, семакса, мелиттнна, пчелиного яда и их смесей с гепарином на активность лактатдегидрогеназы митохондрий карлиомиоцитов в ренерфузионный период после тотальной ишемии изолированного сердца

Группы исследований Коэффициент отношения прямой и обратной реакции (К^,,,,,)

Собственное влияние исследуемого вещества Влияние смеси с гепарином

Прслишсмичсскос введение Постишсмичсское введение Прслишсмичсскос введение Постишемичсскос введение

Гепарин 15,58±1,66 3,79±0,17*

Инсулин 4,35±0,30* 4,27±0,38* 4,68±0,54* 3,46±0,26*

Тиролиберин 4,97 ±0,13* 4,5310,22* 4,47±0,1* 4,67±1,09*

Семакс 6,32±0,62* 6,46±0,17* 7,78±0,88* 7,48±0,7*

Мслиттин 14,4±1,00 12,55*0,92 4,36±0,12* 5,17±0,78*

Пчелиный яд 4,95±0,19* 4,03±0,28* 4,67±0,11* 4,11±0,07*

Интактные животные 3,24 ± 0,36

Ишемия (контроль) 14,50 ± 0,71

Примечание: * - различия с контролем достоверны (р<0,05)

Заключение

Общий анализ полученных данных позволяет сделать вывод, что гепарин способен значительно видоизменять те или иные кардиотропные эффекты пептидов. Он может их усиливать и пролонгировать, например, положительный инотропный эффект инсулина, может блокировать, как, например, инотропную реакцию на тиролиберин, или токсические эффект мелиттина. Гепарин способен менять направленность эффекта, например, угнетающее действие семакса при предишемическом введении он может модифицировать в кардиостимулирующее. Эффекты гепарина могут быть связаны с образованием комплексов в смеси гепарин-пептид, по крайней мере, они проявляются при использовании смесей с предположительно высоким содержанием комплексов. Возможно, комплексообразование является одним из важнейшим фактором регуляции активности регуляторных пептидов в организме. В целом влияние гепарина в состоянии смеси с данными пептидами как бы направлено на нормализацию сократительной активности миокарда. Несмотря на то что собственные

карлиогромныс эффекты гепарина не выражены, его модифицирующее влияние на действие физиологически активных пептидов таково, что существенным образом отражается на регуляции работы сердца после тотальной ишемии. Во всех случаях применение данного глюкозаминогликана в составе смесей с пептидами и зоогоксинами способствовало лучшему восстановлению сердечной деятельности. Это позволяет предполагать важную роль гепарина в поддержании гомеостаза в организме не т олько как антикоагулянта, но и как вещества-модулятора регуляторных процессов в организме.

Выводы

1. Гепарин усиливает и пролонгирует в условиях относительной нормы увеличение силы сердечных сокращений изолированного сердца крысы, вызываемое инсулином. Инсулин (0,03 мг) в составе смеси с гепарином при пред- и постишемическом введении стимулирует восстановление сократительной активности изолированного сердца после 40-минутной тотальной ишемии.

2. Тиролиберин (0,03 мг) как при пред-, так и при постишемическом введении вызывает в реперфузионном периоде увеличение силы сердечных сокращений. Гепарин устраняет реперфузионную фибрилляцию желудочков, вазванную тиролиберином, блокирует развитие положительного инотропного эффекта пептида, способствует более быстрому восстановлению ритмической активности изолированного сердца после тотальной ишемии.

3. Семакс (0,03 мг) при предишемическом введении вызывает угнетение сердечной деятельности в реперфузионный период, снижая силу сердечных сокращений и увеличивая конечное диастолическое давление. Введение пептида в постишемический период стимулирует восстановление частоты и силы сердечных сокращений и в целом сократительной активности миокарда. Гепарин способствует проявлению адаптогенных свойств семакса, усиливает кардиостимулирующее влияние пептида на изолированное сердце после тотальной ишемии.

4. Гепарин снижает токсические эффекты мелиттина (0,03 мг) и пчелиного яда (0,05 мг) на изолированное сердце, препятствуя развитию отрицательных инотропного и хронотропного эффектов. В реперфузионный период гепарин способствует проявлению кардиостимулирующего влияния пчелиного яда, но не мелиттина при пред- и постишемическом введении смеси.

5. Инсулин, тиролиберин, семакс и пчелиный яд как при пред-, так и при постишемическом введении в количестве 0,03 мг способствуют активации прямой и угнетению обратной реакций лактатдегидрогеназы до значений, близких к показателям относительной нормы. Гепарин не препятствует проявлению данного эффекта.

Список работ опубликованных по теме диссертации

1. Антонова C.B.. Лхалаи М.Я.. Байжуманов А.Н., Шестакова C.B., Гончаренко E.H., Крушинская Я.В., Орлов A.B.. Соколова H.A., Каменский A.A., Парии С.Б., Ашмарин И.П. Функциональные и биохимические корреляты гиноксического шока: кооперативное влияние регул игорных пептидов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1997. - № 10. - С. 400 - 403.

2. Орлов A.B., Крушинская Я.В. Влияние смеси регуляторных пептидов (FMRFa, тиролиберин , семакс) на течение геморрагического шока и выживаемость лабораторных крыс // Регуляция и управление в биосистемах: Сборник работ молодых ученых биологического факультета ННГУ /Под ред. А. П. Всселова. -Нижний Новгород, 1998. - С. 68-72.

3. Крушинская Я.В., Орлов A.B., Соколова H.A. Влияние смеси регуляторных пептидов на устойчивость крыс к экстремальной гипобарической гипоксии // Тезисы докладов 1 Российского конгресса по патофизиологии. 17 - 19 октября 1996 г., г. Москва.-M., 1996.-С. 300.

4. Орлов A.B., Крушинская Я.В. Влияние смеси регуляторных пептидов (FMRFa, тиролиберин, семакс) на гемодинамику и выживаемость лабораторных крыс при остром геморрагическом шоке: сезонные различия //Вторая Нижегородская сессия молодых ученых 21 -25 апреля 1997г. г. Нижний Новгород. Тезисы докладов. -Н. Новгород, 1997. - С. 226.

5. Орлов A.B., Хомутов А. Е. Модификация гепарином эффектов яда кобры на работу изолированного сердца //Химия для медицины и ветеринарии: Сб. научн. трудов. - Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 1998. - С. 137-139.

6. Орлов A.B., Хомутов А. Е. Влияние гепарина на электрокардиографические характеристики действия яда кобры //Материалы конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", посвященной 240-летию Московской медицинской академии им. И. М. Сеченова. Москва, 27-30 апреля 1998 г. - М., 1998. - С. 332-333.

7. Дерюгина А. В., Орлов А. В., Хомутов А. Е. Усиление токсического действия пчелиного яда антагонистами гепарина //Апитерапия сегодня (сборник 6). Материалы VI научно-практической конференции по апитерапии, г. Рыбное, 14-17 октября 1997г. - Рязань: Рязанский гос. медицинский ун-т, 1998. - С. 73-74.

8. Орлов А. В.. Хомутов A. Е„ Мухина И. В., Зимин Ю. В., Парин С. Б., Козин Д.

B. Влияние Семакса и его смеси с гепарином на работу изолированного сердца крысы после тотальной ишемии //Бюлл. экспер. биол. и медицины - 1999. - Т. 128. - № 11.-

C. 494 - 496.

9. Орлов А. В., Комиссарова Е. //., Козин Д. В. Влияние гепарина на кинетические свойства лактатдегидрогеназы //Материалы IV Пущинской конференции молодых ученых, г. Пущино, 19-23 апреля 1999 г. Секция "Физиология и биомедицина, клеточная биология" - Пущино, 1999. - С. 11-12.

10. Орлов А. В., Зимин Ю. В., Мухина И. В.. Козин Д. В., Плохое Р. Л. Влияние 1епарина на активность лактатдегидрогеназы кардиомиоцитов изолированного сердца крысы //Структура и регуляция биосистсм: Сборник работ молодых ученых

биологическою факультета ННГУ /Пол. ред. Г. А. Ануфриева. - Нижний Новгород, 1999. - С. 97-101. - (Труды биологического факультета ННГУ, вып. 2).

11. Ор лов А. В.. Хомутов А. Е., Зимин Ю. В., Мухина И. В., Козин Д. В. Влияние гепарина на сократительную функцию сердца и активность лактатдегидрогеназы кардиомиоцитов после тотальной ишемии //Материалы Международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам "Ломоносов". Выпуск 3. - М.: Изд-воМГУ. 1999.-С. 22-23.

12. Хомутов А. Е.. Орлов А. В., Мухина И. В., Козин Д. В. Антитоксические свойства гепарина - Материалы Всероссийской конференции "Перспективы развития Волжскою региона". Тверь, 31 мая 1999 г. - Тверь, 1999. - С. 218-219.

13. Орлов А. В.. Хомутов А. Е,, Мухина И. В., Зимин Ю. В., Парин С. Б., Козин Д. В., Пошлин А. С. Влияние Семакса на работу изолированного сердца крысы и активность лактатдегидрогеназы митохондрий кардиомиоцитов // Физиологические механизмы природных адаптаций: Тезисы докладов 3 Всероссийского международного симпозиума. Иваново, 27 июня - 1 июля 1999 г. - Иваново, 1999. - С. 119-120.

14. Орлов А. В., Хомутов А. Е., Мухина И. В., Зимин Ю. В., Парин С. Б., Козин Д. В., Пошлин А. С. Влияние Семакса (AKTr4.7-Pro-Gly-Pro) и его смеси с гепарином на восстановление сократительной активности миокарда после ишемии // Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 150-летию со дня рождения академика Ивана Петровича Павлова: Материалы конференции. Санкт Петербург, 15-17 сентября 1999 г. - СПб., 1999. - С. 242.

15. Орлов А. В., Пазилин А. С., Плохое Р. А., Козин Д. В. Влияние гепарина на проявление кардиотропных свойств инсулина // Тезисы конференции молодых ученых Поволжья и Северного Кавказа, г. Нижний Новгород, 15-17 февраля 2000 г. -Н. Новгород, 2000. - С. 156-157.

16. Хомутов А. Е., Орлов А. В., Мухина И. В., Козин Д. В. Влияние гепарина на проявление кардиотоксических свойств зоотоксинов //Вестник ННГУ. - в печати

17. Орлов А. В., Хомутов А. Е., Мухина И. В., Зимин Ю. В.. Пазилин А. С., Козин Д. В. Влияние смеси пчелиного яда с гепарином на работу изолированного сердца крысы после тотальной ишемии //Апитерапия сегодня. Материалы VII научно-практической конференции по апитерапии, г. Рыбное, 3-5 октября 1999 г. - Рязань - в печати.

18. Орлов А. В., Хомутов А. Е., Мухина И. В., Зимин Ю. В., Пазилин А. С., Козин Д. В. Влияние тиролиберина и его смеси с гепарином на восстановление сократительной активности изолированного сердца крысы после тотальной ишемии //Ломоноеов-99. Материалы конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам. Москва, 1999 г. - в печати.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Орлов, Александр Владимирович

Введение. Общая характеристика работы.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Строение гепарина.

1.2. Комплексообразование гепарина.

1.3. Физиологические свойства гепарина.

1.4. Взаимодействие гепарина с физиологически активными пептидами.^

1.4.1. инсулин и близкородственные пептиды.

1.4.2. адренокортикотропнйи гррмотн^.его аналоги.

1.4.3. тиролиберин.

1.4.4. мелиттин

Глава 2. Материалы и методы исследований.

Глава 3. Результаты исследований. кардиотропные эффекты гепарина. кардиотропные эффекты инсулина кардиотропные эффекты тиролиберина. кардиотропные эффекты семакса. кардиотропные эффекты мелиттина и пчелиного яда. влияние пептидов и их смесей с гепарином на направленность лактатдегидрогеназной реакции в реперфузионном периоде.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы"

Общая характеристика работы

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Актуальной задачей современной физиологии является выяснение роли эндогенных физиологически активных веществ в регуляции вегетативных функций организма. Одним из важных биорегуляторов является гепарин, играющий особую роль в поддержании гомеостаза. Хорошо установленным фактом является способность гепарина образовывать комплексы с широким спектром белков, пептидов, ферментов, катионных соединений (Кудряшов, 1975; Ляпина, Ульянов, 1977; Ляпина и др. 1989), при этом могут меняться как его собственные свойства, так и свойства веществ, вступающих с ним во взаимодействие (Хомутов, Орлов, 1987; Ляпина, 1987; Ляпина и др., 1989; Умарова и др., 1993; Кондашевская, Ляпина, 1998).

Гепарин может образовывать комплексы с физиологически активными пептидами. Это группа веществ участвует практически во всех физиологических процессах (Климов, 1983, 1986; Ашмарин, Каменская, 1988; Соколова, 1988; Ерошенко, Лукьянова, 1989; Громов, 1992; Угрюмов, 1999). Их роль в системе регуляции, как правило, повышается при измененных состояниях организма: стрессе, гипоксии, ишемии, фармакологическом, токсическом или ином воздействии (Громов, 1992; Лишманов и др., 1997). Многие пептиды активно изучаются как фармакологические средства (Ашмарин, 1988, 1991; Бахарев, 1989). В частности, некоторые из них (тиролиберин, семакс (АКТГ47-Про-Гли-Про), далларгин (аналог энкефалина), инсулин) или уже используются или предлагаются использованию как антигипоксанты (Орлов и др., 1987; Брагин, Яснецов, 1991;

Ашмарин и др., 1992; Ашмарин, 1997; Антонова и др., 1996; Волков и др., 1996, Слепушкин, 1997).

Гепарин давно широко используется в терапии инфаркта миокарда и других заболеваний, связанных с гипоксией органов (Грицюк, 1981; Башков и др., 1993; Ройтман, Майба, 1997). Он способен влиять на многие звенья системы регуляции (Jaques, 1980, 1983), существенно меняя значение тех или иных механизмов, в том числе участвуя в трансформации и фармакокинетике регуляторных пептидов. Для экспериментальной физиологии и практической медицины актуальным является вопрос о его влиянии на различные регуляторные системы. Вместе с тем вопрос о взаимодействии гепарина и пептидов в системе регуляции вегетативных функций является слабо изученным. Большинство исследований проведены на уровне целого организма. Однако, пептидергическая регуляция построена по принципу каскада, образуя сложный континуум регуляторных взаимодействий (Ашмарин, Обухова, 1986, 1994; Ашмарин, Каменская, 1988; Ерошенко и др., 1991). При этом оценить влияние какого-то одного пептидного звена очень затруднительно, тем более его взаимодействие с другими физиологически активными соединениями, в том числе и с гепарином. Влияние последнего, в свою очередь, также распространяется на многие регуляторные системы и может зависеть от множества факторов.

В начальной фазе исследований, посвященных взаимодействию гепарина и пептидов в регуляции сердечной деятельности, целесообразно проанализировать, прежде всего, эффекты пептидов, для которых показано образование комплексов с гепарином, и которые могут оказывать выраженные эффекты на работу сердца, либо в условиях нормы, либо при гипоксии. Таким требованиям удовлетворяют инсулин (Кудряшов и др., 1981; Орлов и др., 1987), тиролиберин (Ашмарин и др., 1996; Socci et al., 1996), семакс (Ашмарин и др., 1996; Балан и др., 1997; Маслова и др., 1999). Представляет интерес, так же исследование влияния гепарина на проявление кардиотропных эффектов мелиттина (пептид пчелиного яда), который образует прочные комплексы с гепарином (Kind, Allaway, 1982) и способен как угнетать сердечную деятельность, так и, по мнению ряда авторов, при определенных условиях стимулировать (Fletcher, Jiang, 1993; Okamoto et al., 1995; Крылов 1995).

При этом ставились следующие задачи:

3. Изучить возможные адаптогенные свойства данных пептидов и их смесей с гепарином.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые показана модификация гепарином кардиотропных эффектов тиролиберина, семакса, мелиттина, а также пчелиного яда на модели изолированного сердца. Установлено, что гепарин способствует проявлению положительной инотропной реакции на инсулин как в условиях нормы, так и в реперфузионный период после тотальной ишемии и в целом повышает стимулирующий эффект гормона. Впервые показано, что тиролиберин и семакс оказывают непосредственное влияние на сократительную активность изолированного сердца в реперфузионном периоде после тотальной ишемии, а гепарин может изменять проявление эффектов данных пептидов. Выявлено, что гепарин устраняет развитие фибрилляции желудочков и препятствует увеличению силы сердечных сокращений сердца в постишемический период, вызываемых тиролиберином. Обнаружено, что гепарин способствует проявлению адаптогенных свойств семакса, повышая резистентность миокарда к ишемическим повреждениям; стимулирующее влияние пептида на работу сердца при его постишемическом введении в составе смеси с гепарином не снижается. Установлено, что гепарин препятствует угнетению сократительной активности изолированного сердца под действием мелиттина и пчелиного яда в условиях относительной нормы. Кроме того, он способствует проявлению кардиостимулирующих свойств цельного яда, но не мелиттина после тотальной ишемии миокарда. Впервые показано, что под влиянием инсулина, тиролиберина, семакса и пчелиного яда в реперфузионном периоде усиливается прямая лактатдегидрогеназная реакция (образование пирувата) в митохондриях кардиомиоцитов, что может косвенно свидетельствовать о стимуляции данными веществами процессов аэробного дыхания и снижении ацидоза. Гепарин не препятствует проявлению данных эффектов.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Гепарин способен модифицировать кардиотропные эффекты биологически активных веществ пептидной природы.

4. Гепарин в составе смесей с инсулином, тиролиберином, семаксом усиливает кардиостимулирующие эффекты пептидов при восстановлении сердца после тотальной ишемии, способствует проявлению адаптогенных свойств данных пептидов.

5. Инсулин, тиролиберин, семакс влияют на направленность лактатдегидрогеназной реакции в сторону стимуляции образования пирувата в постишемический период; гепарин не препятствует проявлению данных свойств пептидов.

6. Гепарин снижает токсические эффекты мелиттина и способствует тем самым проявлению кардиостимулирующих свойств пчелиного яда при восстановлении сердца после тотальной ишемии.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Международных конференциях студентов и аспирантов по фундаментальным наукам "Ломоносов-96", "Ломоносов-97", "Ломоносов-99" (Москва, 1996; 1997; 1999), II и III Нижегородских сессиях молодых ученых (Н. Новгород, 1997; 1998), VI и VII конференциях по апитерапии (Рыбное, 1997; 1999), 1-м Российском конгрессе по патофизиологии (Москва, 1996), конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", IV Пущинской конференции молодых ученых (Пущино, 1999), Всероссийской конференции "Перспективы развития Волжского региона" (Тверь, 1999), Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 150-летию со дня рождения академика И. П. Павлова (Санкт Петербург, 1999), 3-м Всероссийском симпозиуме "Физиологические механизмы природных адаптаций" (Иваново, 1999), конференции молодых ученых Поволжья и Северного Кавказа (Н.Новгород, 2000).

По теме диссертации опубликовано 15 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Материал диссертации изложен на 157 страницах машинописного текста, иллюстрирован ¿6 таблицами и 11 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, глав результатов исследования и обсуждения, выводов и списка литературы, содержащего 268 источников, из которых 151 на русском и 117 на иностранных языках. В приложение в виде таблиц вынесены основные числовые данные по результатам поведенных исследований.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Орлов, Александр Владимирович

103 Выводы

4. Гепарин снижает токсические эффекты мелиттина (0,03 мг) и пчелиного яда (0,05 мг) на изолированное сердце, препятствуя развитию отрицательных

104 инотропного и хронотропного эффектов. В реперфузионный период гепарин способствует проявлению кардиостимулирующего влияния пчелиного яда, но не мелиттина при пред- и постишемическом введении смеси.

Заключение

Общий анализ полученных данных позволяет сделать вывод, что гепарин способен значительно видоизменять те или иные кардиотропные эффекты пептидов. Он может их усиливать и пролонгировать, например, положительный инотропный эффект инсулина, может блокировать, как, например, инотропную реакцию на тиролиберин, или токсические эффект мелиттина. Гепарин способен менять направленность эффекта, например, угнетающее действие семакса при предишемическом введении он может модифицировать в кардиостимулирующее. Эффекты гепарина могут быть связаны с образованием комплексов в смеси гепарин-пептид, по крайней мере, они проявляются при использовании смесей с предположительно высоким содержанием комплексов. Не менее вероятно то, что гепарин играет роль модулятора пептидных эффектов, регулируя ионные токи на мембране кардиомиоцитов, а также влияя на взаимодействие с рецептором и систему вторичных мессенжеров пептида. Возможно, комплексообразование с гепарином является одним из важнейших факторов регуляции активности физиологически активных пептидов в организме.

В целом влияние гепарина в состоянии смеси с изучаемыми нами пептидами как бы направлено на нормализацию сократительной активности миокарда. Несмотря на то, что собственные кардиотропные эффекты гепарина не значительно выражены, его модифицирующее влияние на действие физиологически активных пептидов таково, что существенным образом отражается на регуляции работы сердца после тотальной ишемии. Во всех случаях применение данного глюкозаминогликана в составе смесей с пептидами и зоотоксинами способствовало лучшему восстановлению сердечной деятельности. Это позволяет предполагать важную роль гепарина в поддержании гомеостаза в организме не только как антикоагулянта, но и как вещества-модулятора регуляторных процессов в организме.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Орлов, Александр Владимирович, Нижний Новгород

1. Агаджанян Н. А., Елфимов А. И. Функции организма в условиях гипоксии и гипаркапнии. М., 1986. - 272 с.

2. Ажуцкий Д. Г., Ажуцкий Г. Ю., Борисенко С. Н. Взаимодействие мелиттина пчелиного яда с альбумином крови человека // Укр. биохим. журн. 1995. - Т. 67, №. 4. - С. 54-62

3. Айвазян А. И., Назаров Г. Ф., Петрищев Н. Н. Влияние гепарина на проницаемость и реактивность сосудов //Микроциркуляция /Под ред. А. М. Чернуха, В. В. Куприянова. М., 1972. - С. 236

4. Алекперов А. Ф., Алиев А. М. Комплексообразование гепарина с органическими катионами // Фармация. 1987. - Т. 36, № 1. - С. 80-85

5. Алексеева Г. В., Боттаев Н. А., Горошкова В. В. Применение семакса в отдаленном периоде у больных с постгипоксической патологией мозга //Анестезиол. и реаниматол. 1999. - № 1. - С. 40-43

6. Ахмедов Б. К. О возможности нейтрализации гепарином свертывающего действия яда гюрзы на кровь //Тез. докл. XII сессии научн. студ. об-ва Сталинабадского мед. ин-та. Сталинабад, 1956. - С. 7-8

7. Ашмарин И. П. Пептиды сильного и быстрого действия //Патол.физиол. -1988.-№3.-С. 3-8

8. Ашмарин И. П. Пути пролонгации действия нейропептидов //Вестн. РАМН. -1991.-№8.-С. 7-10

9. Ашмарин И. П., Каменский А. А., Шелехов С. Л. Действие фрагмента адренокортикотропного гормона АКТГ(4-10) на обучение белых крыс приположительном подкреплении //Докл.АН СССР. 1978. - Т. 240. - № 5. - С. 12451246 с.

10. Ашмарин И. П., Каменская М.А. Нейропептиды в синаптической передаче //Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. физиология человека и животных. -. М.Д988. Т.34.-184 с.

11. Ашмарин И. П., Кулаичев А. П., Чепурнов С. А. Каскадные однонаправленные регуляторные процессы, осуществляемые короткоживущими пептидами (тиролиберин) //Физиологический журн. СССР им. И. М. Сеченова. -1989.-Т.75,№5.-С. 627

12. Ашмарин И. П., Ляпина Л. А., Пасторова В. Е., Кудряшов Б. А. Действие регуляторных пептидов с различной биологической активностью на процессы полимеризации фибрина и неферментативный фибринолиз //Вопр. мед. химии. -1991.-Т. 37,№ 1.-С. 85-86

13. Ашмарин И. П., Чепурнов С. А. Тиролиберин, меланостатин и их аналоги -нейрофизиологическое обоснование расширенного клинического применения. //Нейроэндокринологические аспекты современной эндокринологии. М., 1991. -С. 7

14. Ашмарин И. П., Гурская И. Е., Гусева А. А. и др. Тиролиберин: новые физиологические эффекты и перспективы клинического применения //Вестн. РАМН. -1992. № 6. - С. 40

15. Ашмарин И. П., Обухова М. Ф. Современное состояние гипотезы о функциональном континууме регуляторных пептидов //Вестник РАМН. 1994. - № 10.-С. 28-34

16. Ашмарин И. П., Ляпина Л. А., Пасторова В. Е. Модуляция гемостатических реакций in vitro и in vivo представителями семейств регуляторных пептидов //Вестн. РАМН 1996. - N6. - С. 50-57.

17. Ашмарин И. П., Незавибатько В. Н., Мясоедов Н. Ф. и др. Ноотропный аналог кортикотропина 4-10 семакс (15-летний опыт разработки и изучения) //Журн. высш. нервн. деятельности. - 1997. - Т. 47, Вып. 2. - С. 28-36

18. Балаж А., Блажек И. Эндогенные ингибиторы клеточной пролиферации. -М., 1982. 302 с.

19. Балан П. В. Острая гипобарическая гипоксия в постнатальном периоде: влияние регуляторных пептидов: Автореферат . канд. биол. наук. М., 1999. - 20 с.

20. Бастрикова Н. А., Крушинская Я. В., Дубынин В. А. и др., Влияние пептидергической коррекции геморрагического шока на поведение крыс в постгеморрагическом периоде // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1995. - Т. 120, № 12.-С. 623-625

21. Бахарев В. Д. Клиническая нейрофизиология регуляторных пептидов. -Свердловск, 1989. 136 с.

22. Башков Г. В. Калишевская Т. М., Голубева М. Г., Соловьева М. Е. Низкомолекулярные гепарины: механизм действия, фармакология и клиническое применение //Эксперим. и клин, фармакол. 1993. - Т. 56. - № 4. - С. 66-76.

23. Биленко М.В. Ишемические и репефузионные повреждения органов. М., 1989 - 325 с.

24. Брагин Е. О., Яснецов В. В. Опиоидные и моноаминовые механизмы регуляции функций организма в экспериментальных условиях //Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. физиология человека и животных. М., 1991. - Т.47. - 180 с.

25. Бровкович В. М., Мойбенко А. А. Влияние меллитина на сократительную активность папиллярной мышцы крысы //Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1997. -Т. 124,№7.-С. 611-614

26. Бычков С.М. Новые данные о гепарине //Вопр. мед. химии. 1981. - Т.27, № 6. - С.726-735

27. Вальцева И. А. Патофизиологические особенности действия ядов змей, обитающих на территории СССР и некоторые вопросы экспериментальной терапии. М., 1969. - 193 с.

28. Вальцева И. А. Материалы к патогенезу и лечению поражений ядами змей фауны СССР: Автореф. дисс. . докт. биол. наук. М., 1972. - 39 с.

29. Виноградов В. В., Воробьева Н. Ф. Тучные клетки. Новосибирск, 1973.212 с.

30. Власова И. Г., Чепурнова Е. В., Ефимова Е. В., Чепурнов С. А., Ашмарин И. П. Тиролиберин антигипоксическое действие пролонгированного характера // Физиол. человека. - 1994. - Т. 20, № 6. - С. 118-123

31. Войнов В. А., Лосев Н. И., Булаев В. М. Влияние налоксона и тиролиберина на дыхание в условиях острой гипоксии //Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1984. -Т. 98,№ 10.-С. 408-411

32. Войнов В. А., Лосев Н. И., Ромаданова Н. Б. Инспираторно-стимулирующие эффекты тиролиберина в условиях острой респираторной гипоксии //Реактивность и резистентность. Фундаментальные и прикладные аспекты. М, 1987. - С. 20

33. Волков А. В., Муравьев О.В., Мишарина Г. В. Возможности терапии постреанимационного процесса с помощью регуляторных пептидов после 10 и 15 минут остановки сердца //Анестезиол. и реаниматол. 1996. - № 5. - С. 67-70

34. Воробьева Н. Д., Аникин Г. Д. Особенности реоксигенационных повреждений ишемизированной почки на фоне введения гепарина //Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1994. - № 3. - С. 40-43

35. Гацура В. В. Энергетический обмен миокарда при острой ишемии и его фармакологическая коррекция //Успехи физиол. наук. 1981. - Т. 12, № 1. - С. 97117

36. Гацура В. В. Энергетический обмен ишемизированного миокарда // Антигипоксанты: Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. Фармакология. Химиотерапевтические средства. 1991. - Т.27. - С. 130-145

37. Георгиева С. А. О некоторых механизмах, обуславливающих изменение гепариновой активности крови при действии на организм животных //Гепарин: физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзн. конф. М., 1973. - С.70-72

38. Геренко А. Н., Незавибатько В. Н., Волков А. В., Каменский А. А. Двигательная активность у крыс в постреанимационном периоде //Вестн. Московского ун-та. Сер. 16. Биология. 1991. № 3. С. 24-29

39. Германюк Я. Л. Роль инсулина в биосинтезе нуклеотидов, нуклеиновых кислот и белков. Киев, 1973. - 198 с.

40. Глебов Р. Н., Горячева Т. В. АКТГ как нейропептид. Функциональная роль АКТГ в мозге //Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1990. - № 4. - С. 54-57

41. Гулый М. Ф. Реакции трикарбонового цикла и фиксация С02 при сахарном диабете //Новое о гормонах и механизме их действия. Киев, 1977. - С. 260-274

42. Гольдберг Е. Д., Дыгай А. М., Шахов В. П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск, 1992. - 264 с.

43. Гомазков О. А. Функциональная биохимия регуляторных пептидов. М.,1993.-160 с.

44. Гомазков О. А. Современные тенденции в исследовании физиологически активных пептидов //Успехи совр. биол. 1996. - Т. 116, № 1. - С. 60-68

45. Григорьев Ю. А. К механизму действия гепарина на ферментативный профиль клеток в культуре ткани и в условиях изолированного органа //Вопросы физиологии и патологии гепарина: Материалы симпозиума. Новосибирск, 1965. -С. 42-43

46. Грицюк А. И. Лекарственные средства и свертываемость крови. Киев, 1978.- 108 с.

47. Грицюк А. И. Клиническое применение гепарина. Киев, 1981.-206 с.

48. Громов Л.А. Нейропептиды. Киев, 1992. - 240 с.

49. Громова И.А., Молотковский Ю.Г., Бергельсон Л.Д. Изучение взаимодействия мелиттина с многокомпонентными смесями с помощью липид-специфических флуоресцентных зондов // Биол. мембраны. 1990. - № 9. - С. 9861000

50. Демченко А.Н., Костржевская Е.Г. Мелиттин: структура, свойства, взаимодействие с мембраной // Укр. биохим. журн. 1986. - Т. 58, № 5. - С. 74-90

51. Долгих В. Т. Повреждение и защита сердца при острой смертельной кровопотере: Автореф. дисс. . д-ра мед. наук. Томск, 1987. - 36 с.

52. Дубинина Е. В., Надирова Т. Я. Влияние гепарина на АТФ-азную систему митохондрий белых мышц кролика //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1973. - Т.76, № 11. - С. 62-64

53. Ердикян К. А., Трапков В. А. Гликозаминогликаны: взаимодействие с биомолекулами и их функциональная роль //Изв. АН СССР. Сер. биол. 1988. - № 5,- С. 650-665

54. Ерзинкян K.JI., Алавердян К. Г., Нижний С. В., Пирузян Л. А. Исследование молекулярной природы комплекса гистамин гепарин // Изв. АН СССР. Сер. биологическая. - 1977. № 6. - С. 813-818

55. Ерзинкян К.Л, Розенфельд М. А., Тер-Маркарян А.Г. Спекрофотометрические исследования реакции комплексообразования фибриногена с антикоагулянтом гепарином (КФГ) // Изв. АН СССР. Сер. биолог. -1979. № 6. С. 920-924

56. Ермолаев Ю. А., Маркосян Р. А. Гепарин и электропроводность плазмы //Гепарин: физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзн. конф. М., 1973. - С.111-112

57. Ерошенко Т. М., Лукьянова Л. А. Физиологические свойства регуляторных пептидов //Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. физиология человека и животных. М. - 1989 - Т.46. - 162 с.

58. Ерошенко Т. М., Титов С.А., Лукьянова Л. А. Каскадные эффекты регуляторных пептидов //Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. физиология человека и животных. М. - 1991--Т.51. - 161 с.

59. Епифанова О. И., Терских В. В., Полуновский В. А. Регуляторные механизмы пролиферации клеток //Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. Общие проблемы физико-химической биологии. М., 1988. - Т. 10. - 164 с.

60. Ефимов А. С., Чебан А. К. и др. Гепарин в терапии диабетических ангиопатий //Тер. арх. 1974. - № 10. - С. 78-84

61. Ефимова Е. В., Чепурнов С. А., Чепурнова Н. Е. и др. Ближайшие и отдаленные эффекты тиролиберина при интраназальном введении человеку //Принципы и механизмы деятельности мозга человека. Л., 1989. С. 247

62. Жгенти Г. Р. Гепарин блокирует торможение плазмина пептидами лимфы //Успехи физиол. наук. 1994. - Т. 25, № 1. - С. 136-137

63. Закусов А. А., Булаев В. М., Ганынина Т. С.и др. К фармакологии тиролиберина //Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1983. - Т. 96, № 9. - С. 611-6144

64. Замятнин А. А. Общие функциональные особенности эндогенных регуляторных пептидов //Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1992. - Т. 78, № 9. -С. 39-50

65. Заремба Е.Ф., Кияк Ю.Г., Пилипчук И.И. и др. Антиаритмическая эффективность апитерапии у больных пожилого возраста // Тез. и рефер. докл. Съезда геронтол. и гериатров. Днепропетровск, 1988. - С. 87.

66. Захаров Н. Н. К вопросу о периферическом и центральном действии АКТГ на свертывание крови и уровень гепарина в крови //Механизмы реакций свертывания крови и внутрисосудистого тромбообразования. Саратов, 1971. - С. 103-107

67. Захаров Н. Н. Влияние адренокортикотропного гормона на уровень гепарина и количество базофильных лейкоцитов в периферической крови //Гепарин: физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзн. конф. М., 1973. - С. 123-124

68. Казначеев В. П. Гепарин и проблемы гомеостазиса //Вопросы физиологии и патологии гепарина. Новосибирск, 1965. - С. 113-114

69. Казначеев В. П., Дзизинский А. А. Клиническая патология транскапиллярного обмена. М, 1975. - 240 с.

70. Казначеев В.П., Шурин С. П., Дзизинский A.A. Гепарин и гисто-гематические барьеры //Структура и функция гисто-гематических барьеров. М.: Наука, 1971. - С. 158-162.

71. Калинкина С. А. Эффективность пролонгированного применения средств метаболической коррекции (инсулин-глюкозо-гепариновой смеси, солкосерила) в комплексной реабилитации больных инфарктом миокарда: Дисс. канд. мед. наук. Свердловск, 1987. - 186 с.

72. Калишевская Т. М. Выделение и нейтрализация серотонина гепарином //Тез. Ill Всес. конф. "Гепарин, физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение". М., 1973. - С. 137.

73. Каплан А. Я., Кошелев В. Б., Незавибатько В. Н., Ашмарин И. П. Повышение устойчивости организма к гипоксии с помощью нейропептидного лекарственного препарата Семакс //Физиол. человека. 1992. - Т. 18, № 5. - С. 104-107

74. Каримов 3. Н. Гемокоагулирующее и геморрагическое действие яда гюрзы // Механизмы патол. процессов. Ташкент, 1976. - С. 58-60

75. Кендыш И. Н. Глюконеогенез и диабет //Пробл. эндокрин. 1976. - № 5. - С. 94-100

76. Кендыш И. Н. Молекулярные аспекты механизма действия инсулина //Успехи совр. биол. 1983. - № 2. - С. 238-254

77. Кендыш И. Н. Регуляция углеводного обмена. М., 1985. - 272 с. Климов П. К. Пептиды и пищеварительная система (Гормональная регуляция функций органов пищеварительной системы). - JI., 1983. - 272 с.

78. Климов П. К. Физиологическое значение пептидов мозга для деятельности пищеварительной системы. Л., 1986. - 256 с.

79. Кожемякин Л. А. Коростовцев Д. С. Динамика соотношения клеточных медиаторов адрено- и холиноэргических систем (цАМФ-цГМФ) в механизмах адаптации к гипоксии //Докл. АН СССР. 1977. - Т. 237, № 6. - С. 1519-1521

80. Кондашевская М. В., Ляпина Л. А. Новое свойство комплекса гепарин-серотонин //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1998. - Т. 126, № 10. - С. 425-426

81. Конышев В. А. Стимуляторы и ингибиторы роста органов и тканей животных. М., 1974. - 192 с.

82. Королева М. В., Мейзеров Е. Е., Незавибатько В. Н. и др. Изучение анальгетического действия препарата семакс //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1996. - Т. 122, № 11. - С. 527-529

83. Корочкин И. М., Балтийская Н. В., Сысоева Н. А. и др. Влияние глюкозо-инсулин-калиевой смеси на уровень циклических и адениловых нуклеотидов у больных в остром периоде инфаркта миокарда //Кардиология. 1983. - Т. 23, № 1. -С. 35-40

84. Корпачева О. В., Долгих В. Т. Коррекция верапамилом постреанимационных повреждений сердца //Анестезиол. и реаниматол. 1996. - № 5. - С. 48-51

85. Коршунов Г.В., Бабиченко Н.В., Власова Т.В. О комплексообразовании гепарина с гормонами // Гепарин: физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзн. конф. М., 1973. - С 163-164

86. Костржевська О.Г., Корнийчук Г.О., Щербацька Н.В. Выделение высокоочищенного препарата мелиттина из пчелиного яда методом аффинной хроматографии // Укр. биох. журн. 1989. - Т. 61, № 5. - С. 54-59.

87. Крылов В.Н. Пчелиный яд. Свойства, получение, применение. Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 1995. - 223 с.

88. Крылов В.Н., Синицын Л.Н., Абрамова И.В., Ошевенский Л.В. Действие пчелиного и жабьего ядов на экспериментальные аритмии сердца // Механизмы действия зоотоксинов. Межвуз. сб. Горький: Изд-во ГГУ, 1981. - С. 40-46

89. Кудряшов Б. А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и его свертывания. М., 1975. - 487 с.

90. Кудряшов Б.А., Калишевская Т.М., Ляпина Л.А. Комплекс серотонин -гепарин и его физиологическое значение в осуществлении защитной реакции противосвёртывающей системы // Вопр. мед. химии. 1973. - Т. 19, вып.З. - С, 269274

91. Кудряшов Б.А., Ляпина Л.А, Житникова Е.С. Образование вторичного комплекса адреналин гепарин - фибриноген и его свойства // Вопр. мед. химии. -1975.-Т.21,вып.1.-С. 65-69

92. Кудряшов Б.А., Ляпина Л.А Комплекс гепарин мочевина, его физикохимические свойства//Вопр. мед. химии. - 1975. - Т.21, вып.2. - С. 165-168

93. Кудряшов Б. А., Ляпина Л.А. Комплекс гепарин аспирин; его физико-химические и физиологические свойства//Вопр. мед. химии. - 1977. - Т. 23, № 1. -С. 44-51

94. Кудряшов Б.А., Ляпина Л А. Физиологические свойства комплекса гепарин -тромбопластин. // Физиол. журн. СССР им. И. М. Сеченова. 1978. - Т.64, № 6. -С. 771-776

95. Кудряшов Б. А., Пытель Ю.А., Ляпина Л. А., Баскакова Г. М. Комплекс инсулин-гепарин, его физиологические свойства // Вопр. мед. химии. 1981а. - Т. 27, № 4. - С. 547-552

96. Кудряшов Б. А, Пасторова В.Е., Ляпина Л.А. Комплексы гепарин -антитромбин III и антитромбин III гепарин - тромбин, их антикоагулянтная активность и литическое действие на нестабилизированный фибрин // Биохимия. -19816. - Т. 46, № 11. - С. 2024-2027

97. Кудряшов Б.А., Ляпина Л.А. Неферментативный фибринолиз //Биохимия животных и человека. 1982а. - № 6. - С. 62-73

98. Кудряшов Б.А., Ляпина Л.А. Образование комплекса гепарина с кальцием // Вопр. мед. химии. 19826. - Т.28, № 5. - С. 112-115

99. Кудряшов Б. А., Шапиро Ф., Б., Ульянов А. М. Гормональная обусловленность начальных этапов клиренса гепарина при иммобилизационном стрессе у крыс //Физиол. журн. СССР. 1982. - № 11. - С. 1531-1536

100. Кудряшов Б. А., Ульянов А. М., Шапиро Ф., Б., Базазьян Г.Г., Пытель Ю.А. Роль гепарина в осуществлении гипогликемического действия инсулина //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1984а. - № 5. - С. 516-518

101. Кудряшов Б. А., Шапиро Ф. Б., Ульянов А. М., Пытель Ю. А. Резистентность к гипогликемическому действию инсулина, вызванная протаминсульфатом // Пробл. эндокринол. 19846. - № 1. - С. 51-56

102. Кудряшов Б. А., Ляпина Л.А., Зверева Е.Г. Сравнительное изучение свойств дикумарина и его соединений с гепарином // Вопр. мед. химии. 1985. Т- 31, № 2.1. С. 79-83

103. Кудряшов Б. А., Ляпина Л. А., Кондашевская М. В. Комплексы гепарина с никотиновой кислотой и никотинамидом и некоторые их физиологические свойства //Докл. АН СССР. Сер. биологическая. 1986. - Т.291, № 1. - С. 242

104. Кудряшов Б. А. Ульянов А. М., Тарасов Ю. А. Значение эндогенного гепарина в защите организма от действия факторов риска, вызывающих экспериментальный диабет // Вопр. мед. химии. 1989а. - № 6. - С. 80-82

105. Кудряшов Б. А., Тарасов Ю. А., Ульянов А. М. Роль поджелудочной железы в появлении диабетогенного фактора при развитии аллоксанового диабета //Патол. физиол. и эксперим. терапия. 19896 - № 3. - С. 75 - 78

106. Кудряшов Б. А., Ляпина Л. А., Азиева Л. Д. Комплексное соединение гепарина с гистамином, его физико-химические и биологические свойства //Вопр. мед. химии. 1990. - Т.36, № 4. - С. 55-57

107. Куликов В. Ю., Казначеев В. П., Колосова Н. Г., Молчанова Л. В. Влияние гепарина на реакции перекисного окисления липидов эритроцитов и их устойчивость //Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 1976. - № 9. - С. 1086-1088

108. Ксенжек О.С., Гевод B.C. Мелиттин. Поверхностная активность и возможный механизм литического действия // Биол. мембраны. 1985. - Т. 2, - №. 4. - С. 395-404

109. Лабори А. Регуляция обменных процессов. М., 1970. - 346 с. Лазутин В. К., Броун Д. К. Применение глюкозо-инсулино-калиевой смеси при инфаркте миокарда // Кардиология. -1982. - Т. 22, № 12. - 90-95

110. Лакин К. М., Овнатанова М. С. Исследование действия на агрегацию эритроцитов средств, применяемых в терапии тромботических геморрагических состояний //Кардиология. 1977. - № 5. - С. 79-83

111. Лаптев Б.И. Халиулин И.Г., Ущеко Д.В. Предупреждение реперфузионных повреждений сердца крыс с помощью предварительных кратковременных эпизодов ишемии различной длительности //Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова. 1997.- Т. 83, № 9. С. 69-73

112. Лейбуш Б. Н. Рецепторы инсулина и инсулиноподобного фактора роста 1: пути структурной и функциональной дивергенции двух эволюционно родственных молекул //Журн. эволюц. биохим. и физиол. 1998. - Т. 34, № 1. - С. 82-96

113. Лескова Г. Ф., Архипенко Ю. В. Фосфолипидный состав митохондрий печени при экспериментальном геморрагическом шоке //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1997. - Т. 124, № 7. - С. 43-45

114. Лещинский Л. А., Пименов Л. Т., Трусов В. В. и др. Лечебное применение обогащенной инсулино-глюкозо-гепариновой смеси у больных острым инфарктом миокарда //Кардиология. 1983. - Т. 23, № 1. - С. 40-45

115. Литвицкий П. Ф., Сандриков В. А., Демуров Е. А. Адаптивные и патогенные эффекты реперфузии и реоксигенации миокарда. М., 1994. - 312 с.

116. Лишманов Ю. Б., Маслов Л. Н., Ласукова Т. В. Роль опиоидной системы в адаптации организма и защите сердца при стрессе //Успехи физиол. наук. 1997. -№ 1.- С. 75-95

117. Лукашин Б. П., Агапов Я. В., Бахтыбаев О. Д., Гойденко А. С. Влияние гепарина на общий адаптационный синдром //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1975.- Т.80, № 9. С. 16-18

118. Лукашин Б. П. Роль гепарина в повышении неспецифической резистентности организма//Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1982а. - № 5. - С. 81-87

119. Лукашин Б. П., Влияние гепарина на постлучевое восстановление тимуса у мышей с различной радиочувствительностью // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -19826. Т.93, № 6. - С. 112-115

120. Лукашин Б. П., Софронов Г. А. Радиозащитное действие цистамина и гепарина в опытах на мышах с различной резистентностью //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1996. - Т.121, № 5. с. 544-546

121. Ляпина Л. А. Профилактическое действие комплексных соединений гепарин мочевина и адреналин - гепарин - фибриноген при имитации у животных тромбообразования // Кардиология. - 1978. - Т. 18, № 8. - С. 147-148

122. Ляпина Л. А. О взаимодействии гепарина с сериновыми протеиназами системы свертывания крови //Физиол. человека. 1980. - Т. 6, № 2. - С. 265-273

123. Ляпина Л. А. Физиологические функции гепарина //Успехи совр. биологии. -1987.-Т. 103, № 1.-С. 66-80

124. Ляпина Л.А., Кудряшов Б.А. Образование комплексов АМФ, АДФ, АТФ с гепарином in vitro //Науч. докл.высш.школы. Сер. биолог, науки. 1977. № 9. - С. 22-26

125. Ляпина Л. А., Ульянов А. М. Комплексообразование гепарина с биологически активными веществами и его физиологическая роль в организме. Сообщение 1 //Физиол. человека. 1977. - Т. 3, № 6. - С. 1074-1083

126. Ляпина Л. А., Ульянов А. М. Комплексообразование гепарина с белками и его физиологическая роль в организме. Сообщение 2 // Физиол. человека. 1978. -Т. 4, № 2; - С. 295-305

127. Ляпина Л. А, Струкова С.М., Кудряшов Б.А. Образование комплекса гепарина с протромбином // Вопр. мед. химии. 1979. - Т.24, вып.1. - С. 41-46

128. Ляпина Л.А., Кудряшов Б.А. Получение, свойства, и метилирование in vitro комплексов гепарина с ДНК // Биохимия. 1980. - Т.45, вып.12. - С. 2189-2197

129. Ляпина Л. А., Пасторова В. Е., Кудряшов Б. А. Комплексные соединения гепарина и их физиологическое значение //Успехи физиол. наук. 1989. - Т. 20, № 1.-С. 90-105

130. Ляпина Л. А., Пасторова В. Е., Кудряшов Б. А. и др. Действие пептидов тимоптина на систему гемостаза //Изв. АН СССР. Сер. биол. 1990. - № 3. - С 377381

131. Ляпина Л. А., Пасторова В. Е., Кондашевская В. Е. и др. //Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1994. - Т. 116,№ 11.-С. 1317-1319

132. Макарова В. Г. Действие гепарина на углеводный обмен тканей крыс в норме и при высокой гипоксии //Научные труды Рязавнского мед. института. Рязань. 1972. - Т. 43. - С. 98-100

133. Макарова В. Г. Влияние гепарина на ферментные процессы в сердце и печени животных разных возрастов //Фармакол. и токсикол. 1977. - Т. 40, № 1. -36-40

134. Малая Л. Т., Власенко М. А., Микляев И. Ю. Инфаркт миокарда. М., 1981.488 с.

135. Маркосян А. А. Гепарин и его место в нарушении и сохранении процессов гемокоагуляции //Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Л., 1969. - С. 5-11

136. Марри Р., Гредднер Д., Мейерс П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х т. М., 1993.-Т. 2.-408 с

137. Маслаков Д. А., Королев П. М., Шелестная Е. А. Сравнительная характеористика некоторых биологических эффектов гепарина и гепарин-протаминовой смеси //Адаптационные механизмы и методы их регуляции. -Гродно, 1980. С. 90-91

138. Меерсон Ф. 3. Адаптация, стресс и профилактика. М., 1981. - 324 с. Меерсон Ф. 3. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. - М., 1984. - 272 с.

139. Механизмы памяти /Отв. ред. Г. А. Вартанян. JL, 1987. - 432 с. -(Руководство по физиологии).

140. Мирзоян Р. С., Ганыпина Т. С., Рагимов X. С. и др. Значение адренергических механизмов в цереброваскулярном эффекте тиролиберина //Фармакол. и токсикол. 1985. - Т. 48, № 5. - С. 18-22

141. Мищенко В. И. Влияние гепарина на агрегацию кровяных пластинок и тромбообразование под действием постоянного электрического тока // Физиол. журн. СССР им. И. М. Сеченова. 1972. - Т. 58, № 11. - С. 1744-1748

142. Моренко Г. С. Проницаемость гепарина через мембраны эритроцитов //II съезд фармацевтов Казахской ССР (Тезисы) Чикмент, 1981. - С. 406-407

143. Мотин В. Г., Яснецов В. В. Влияние синтетических аналогов энкефалина, морфина и их антагонистов на течение экспериментального травматического шока //Фармакол. и токсикол. 1986. - Т. 49, № 3. - С. 103-107

144. Назаров Г. Ф. Гепарин и проницаемость капилляров //Механизм действия гормонов, патогенез, лечение, профилактика и эпидемиология эндокринных заболеваний. Тезисы докладов II съезда эндокринологов УССР. Киев, 1977. - С. 164-165

145. Назаров Г. Ф., Петрищев Н. Н., Станкевич А. Н. К механизму антиэкссудативного действия гепарина //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1979. - Т. 87, № 4. - С. 304-305

146. Несмеянов В. А. Цитокины иммунной системы //Белки и пептиды: В 2-х т. -М., 1995.-Т. 1.-С. 368-384

147. Нещерет А. П., Шурупова Э. Н. Якушева JI. Ф. и др. Влияние инсулина на адренергические и холинергические реакции коронарных сосудов //Кардиология. -1978.-Т. 18, №6.-С. 126-131

148. Никитин В. Н. и др. Активация гепарином липолитичеекой активности сыворотки крови белых крыс разного возраста //Вопр. мед. химии. 1973. - Т. 19, № 3. - С. 275-278

149. Никольский Н. Н., Трошин А. С. Транспорт Сахаров через клеточные мембраны. Л., 1973. - 222 с.

150. Новицкий В. В., Козлов Ю. А., Лаврова В. С., Шевцова Н. М. Гемопоэз, гормоны, эволюция. Новосибирск, 1997. - 432 с.

151. Новицкая С. А., Петрова И. В., Серебряков Н. Г. Действие гепарина на способность лимфоцитов крови человека к бласттранмформации //Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 1975. - Т. 62, № 9. - С. 66-68

152. Оганов Р. Г., Сысоева Н. А., и др. Влияние глюкозо-инсулино-калиевой смеси на размеры и клиническое течение инфаркта миокарда //Кардиология. 1983. - № 1.-С. 31-35

153. Орлов А. В., Хомутов А. Е. Модификация гепарином эффектов яда кобры на работу изолированного сердца //Химия для медицины и ветеринарии: Сб. научн. трудов. Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 1998а. - С. 137-139

154. Орлов Б. Н., ВальцеваИ. А. Яды змей. Ташкент: Медицина, 1977. - 252 с.

155. Орлов JL Л., Шилов А. М., Ройтберг Г. Е., Сократительная функция и ишемия миокарда. М., 1987. - 246.

156. Орлова Н. П. и др. Влияние фибринолизина и гепарина на кинетические свойства тромбоцитов и процессы оксидоредукции у больных инфарктом миокарда //Кардиология. 1978. - № 1. - С. 115-118;

157. Осипов В. В. Вахрушева М. П. Активация паратиреоидного гормона гепарином in vitro //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1975. - Т.80, № 9. - С. 98-99

158. Островский Ю.М., Величко М. Г., Якубчик Т. Н. Пируват и лактат в живом организме. Минск, 1984. - 175 с.

159. Пасторова В. Е. Антиромбин III в регуляции функции свёртывающей и противосвертывающей систем крови // Успехи соврем, биологии. 1983. - Т. 96, № 4. - С. 69-75

160. Пасторова В. Е., Кудряшов Б. А., Родина В. И. Комплексы гепарина с антиплазминами и изучение некоторых их свойств // Вопр. мед. химии. 1973. -Т.19, № 5. - С. 492-497.

161. Перцева М. Н., Шпаков А. О. Плеснева С. А. Современные достижения в изучении сигнальных механизмов действия инсулина и родственных ему пептидов //Журн. эвол, биохим. и физиол. 1996. - Т. 32, № 3. - С. 318-339

162. Платонов И. А., Яснецов В. В. Влияние фрагментов адренокортикотропного гормона и атриопептидов на развитие токсического отека-набухания головного мозга//Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1996. - Т. 122, № 11. - С. 521-523

163. Петрищев Н. Н., Назаров Г. Ф., Станкевич А. Н. К механизму противогипоксического действия гепарина //Кровообращение в условиях высокогорной и экспериментальной гипоксии. Фрунзе, 1982. - С. 104

164. Петрищев Н. Н., Гавришева Н. А., Дубина М. В. Влияние гепарина на проницаемость сосудов кожи крыс при гипобарической гипоксии //Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1994. - Т. 80, № 5. - С. 41-45

165. Поликар А. Молекулярная цитология мембран живой клетки и ее микроокружение. Новосибирск, 1975. - 184 с.

166. Пономарева-Степная М. А., Бахарев В. Д., Незавибатько В. Н. и др. Сравнительное исследование аналогов АКТГ4.ю стимуляторов обучения и памяти //Хим. фарм. журн. - 1986. - № 6. - С. 667-670

167. Пустовалов А. П., Никулин А. А., Воронков Н. Ф. Влияние гипоксии и гепарина на кровь и брюшную аорту крыс //Патол. физиол. и эксперимент, терапия. 1991.-№5.-С. 13-14

168. Романенко В. Д., Коцар МЛ. До питания про взаэмодш кальщю з гепарином /А^юлопчний журнал АН УССР. 1974. - Т. 21, № 4. - С. 533-535

169. Руда М. Я. Об ограничении очага поражения при инфаркте миокарда //Кардиология. -1981. № 1. - С. 5-8

170. Русяев В. Ф., Савушкин А. В. //Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1974. - № 8.- С. 23-25

171. Русяев В. Ф., Русяева А. А. Влияние гепарина на электрические свойства сосудистой стенки //Гепарин: физиология, биохимия, фармакология и клиническое применение. Тезисы III Всесоюзн. конф. М., 1973. - С.267-268

172. Сербенюк У. В., Чурская И. Е., Слюта А. Д. и др. Восстановление нарушенной дыхательной активности кошек тиролиберином // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 1990. - Т. 106, № 7. - С. 17

173. Сергеев П. В., Шимановский Н. Л. Рецепторы физиологически активных веществ. М., 1987. - 400 с.

174. Сергеева JI. И. Хомутов А. Е., Михайлова Н. Л. О торможении гепарином ганглиоблокирующего и кардиотокеичеекого действия яда среднеазиатской кобры //Научн. докл. высш. школы. Биологические науки. 1975. - № 8. - С. 36-40

175. Синицын Л.Н., Крылов В.Н. Влияние пчелиного яда на экспериментальные аритмии // Фармакология и токсикология. 1991. - Т. 54, № 6. - С. 84-88

176. Скробонская Н. А. и др. Лечение диабетических ангиопатий //Механизм действия гормонов, патогенез, лечение, профилактика и эпидемиология эндокринных заболеваний. Киев, 1977. - С. 204

177. Соколова Н. А. Регуляторные пептиды и веретативная регуляция сердца //Пат. физиол. и эксперим. терапия. 1988. - № 6. - С. 74-79

178. Слепушкин В. Д. Нейропептиды в анестезиологии и реаниматологии //Анестезол. и реаниматол. 1997. - № 6. - С. 59-62

179. Смоленский В. С., Бокарев И. Н., Беликов В. К., Фролова А. И. О хроническом внутрисосудистом свертывании крови у больных сахарным диабетом //Клин, медицина. 1982. - № 1. - С. 49-52

180. Стойка Р., Кусень С. И. Регуляция активности ЛДГ и ее изоыерментные спектры в тканях позвоночных животных //Успехи совр. биол. 1981. - № 2. -С.17-193

181. Теппермен Дж., Теппермен X. Физиология обмена веществ и эндокринной системы. М, 1989. - 656 с.

182. Угрюмов М. В. Механизмы нейроэндокринной регуляции. М., 1999. - 299с.

183. Ульянов А. М., Ляпина Л. А. Образование комплекса фибриноген-гепарин при взаимодействии комплекса адреналин-гепарин и фибриногена in vitro и in vivo //Научн. докл. высш. школы. Биол. науки. 1973. - № 9. - С. 44-49

184. Ульянов А. М. и др. Комплексообразование гепарина с фибриностабилизирующим фактором плазмы in vitro. //Биохимия. 1978. - Т. 36, № 6.-С. 1281-1287

185. Ульянов A.M., Ляпина Л.А. Современные данные о гепарине и его биохимических свойствах // Успехи соврем, биологии. 1977. - Т. 83, №1. - С. 6985.

186. Ульянов A.M., Шапиро Ф.Б., Ляпина Л.А. Гипогликемическая активность комплекса инсулин гепарин и условия её проявления //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1989. - № 1. - С. 54-57

187. Умарова Б. А., Шапиро Ф. Б., Хлгатян С. В., Струкова С. М. Включение 35S-гепарина в тучные клетки крысы и выделение его в кровеносное русло //Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1989. - Т., № 12. - С. 648-651

188. Умарова Б. А., Шапиро Ф. Б., Дугина Т. Н., Хлгатян С. В., Струкова С. М. Влияние иммобилизационного стресса на секрецию гепарина тучными клетками крысы //Тез. доклю Всесоюзн. конф. "физиология и патология гемостаза". -Полтава, 1991. С. 40-41

189. Умарова Б. А., Шапиро Ф. Б., Струкова С. М. Роль катехоламинов в стимуляции секреции гепарина тучными клетками крысы в условиях in vivo //Физиол. журн. 1993. - №4. - С. 11-16

190. Умарова Б. А., Шапиро Ф. Б., Струкова С. М. Участие гепарина тучных клеток в физиологических реакциях организма //Вестн. Моск. ун-та. Сер. биол. -1994.-№3.-С. 18-24

191. Умарова Б. А., Шапиро Ф. Б., Коган А. Е., Кулиева С. В., Струкова С. М. Участие тромбина в активации секреции гепарина тучными клетками при иммобилизационном стрессе у крыс // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1997. - Т. 123, №2.-С. 143-145

192. Фетисова Т. В., Фролькис Р. А. Биохимия инфаркта миокарда. Киев, 1976.156 с.

193. Федорова П. И., Маджидова Н. М. Ангиопатии при сахарном диабете. -Ташкент, 1974. С. 183-184

194. Флекенштейн А., Флекенштейн-Грюн Г. Характеристики и механизм действия кальциевых антагонистов и других антиангинальных препаратов //Физиология и патофизиология сердца: В 2-х т. /Под. Ред. Н. Сперелакиса. М., 1988. - Т. 1.-С. 475-503.

195. Харченко М. Ф., Рыбакова JI. П., Голенко О. Д., Корнилова Н. В., Захаров Ю. М. Роль гликозаминогликанов в гемопоэзе и физиологических функциях клеток крови // Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1996. - Т. 82, № 5-6. - С. 18-25

196. Хлгатян С. В., Умарова В. А. Шапиро Ф. В., Струкова С. М. Поведение нефракционированного и низкомолекулярного гепарина в организме крысы //Докл. АМН СССР. 1990. - Т. 313, № 2. - С. 509-511

197. Хомутов А. Е. Гепарин и зоотоксины //Механизмы действия зоотоксинов: Межвуз. сб. Горький, 1987. - С. 13-30

198. Хомутов А. Е., Ягин В. В., Некрасова JI. А. Физиологическая роль гепарина в условиях действия на организм зоотоксинов //Механизмы действия зоотоксинов: Межвуз. сб. Горький, 1985. - С.35-42

199. Хомутов А.Е., Орлов Б.Н. Физиологическая роль гепарина. Горький: Изд-во ГГУ, 1987. -11с.

200. Хомутов А. Е., Орлов А. В., Дерюгина A.B., Калашникова JI.M., Мальгина Т.А., Бакаринов П.В. Средство от ужалений //Пчеловодство. 1999. - № 1. - С. 6061

201. Храмов В. Н. Обогащенная инсулино-глюкозо-гепаринова смесь в комплексном лечении инфаркта миокарда. Дисс. . канд. мед. наук. Ижевск, 1984. - 193 с.

202. Чазов Е.И., Лакин K.M. Антикоагулянты и фибринолитические средства. -М.: Медицина, 1977. 312 с.

203. Российская научная конференция, Санки-Петербург, 1-3 марта 1994 г. СПб., 1994 .-С. 107.

204. Чиж Б. А., Каспаров С. А. Возможное участие рецепторов И-метил-Д-аспартата в стимулирующем действии на дыхание тиролиберина и аналога 1ШН 2202 //Фармакол. и токсикол. 1990. - Т. 53, № 1. - С. 58-61

205. Шапиро Ф. Б., Никитина М. М., Ульянов А. М., Кудряшов Б. А. Участие гепарина в реализации действия некоторых белковых гормонов //Пробл. эндокринол. 1986. - Т.32, № 6. - С. 62-65.

206. Шапиро Ф. Б., Ульянов А. М. Влияние инсулина на начальные стадии клиренса гепарина //Вопр. мед. химии. 1988. - № 6. - С. 57-60

207. Шапиро Ф. Б., Умарова Б. А., Струкова С. М. Роль адренокортикотропного гормона в активации секреции гепарина тучными клетками при стрессорных воздействиях // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1995. - Т.120, № 10. - С. 349-351

208. Шапиро Ф. Б., Умарова Б. А., Струкова С. М. Гормональная регуляция секреции гепарина тучными клетками крыс при стрессорных воздействиях //Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1998. - Т. 84, №5-6. - С. 469-473

209. Шимонаева Е. Е., Андреенко Г. В. Тромболитические свойства комплекса гепарин тканевый активизатор плазминогена и его влияние на фибринолитическую и свёртывающую системы // Вопр. мед. химии. - 1988. - Т.34, №1. - С. 59-62

210. Шольц К.Ф. , Г.И. Резник, Соловьёва Н.А. и др. Действие мелиттина и его тетраацетильного производного на митохондрии печени крыс // Биохимия. 1980. -Т. 54, № 10.-С. 1840-1848

211. Шурин С. П. О роли гепарина в обменно-ферментативных процессах в клетке //Вопросы физиологии и патологии гепарина: Материалы симпозиума. -Новосибирск, 1965. С. 13-38.

212. Юшков Б. Г., Попов Г. К., Северин М. В., Ястребов А. П. Гликопротеиды и гемопоэз. Екатеринбург: Изд-во УрГМИ, 1994. - 127 с.

213. Яснецов В. В., НовиковВ. Е. Фармакотерапия отека головного мозга. -М.,1994. 224 с.

214. Яснецов В. В., Правдивцев В. А., Крылова И. Н. и др. Влияние семакса и АКТГ(5-10) на импульсную активность центральных нейронов //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1998. - Т. 125, № 3. - С. 304-306

215. Actin E., Meng H. G. Depletion and repletion of heparin-released lipase in normal and diabetic rats //Fed. Proc. 1965. - V. 32, N. 2 - P. 112-125

216. Adler S., Eng B. Reversal of inhibition of rat glomerular epithelial cell growth by growth factors //Am. J. Pathol. 1990. - Vol. 136, N 3. - P. 557-63.

217. Ahuja M.L.,Brooks A.G. A note of the action of heparin on Rüssel s Viper Venom //Jud. Jour. Med.Res. 1946. - Vol. 34, N 2. - P. 317-322

218. Aksnes G., Kirkeboen K. A., Christensen G. et al. Characteristics and development of myocardial stunning in the pig // Amer. J. Physiol. 1992. - 263. - P. H544-H551

219. Alant O., Antoni F., Yarga L., Faller Y. Metabolism and anticoagulant effect of 51Cr-labelled heparin //Acta physiol. Acad. Sei. Hung. 1973. - Vol. 43, N 3. - P. 261

220. Alder G. M., Arnold W. M., Bashford C. L. et al., Divalent cation-sensitive pores formed by natural and synthetic melittin and by Triton X-100 // Biochim. Biophys. Acta. -1991.- Vol.1061, N 1.-111-120

221. Apstein C. S., Gravino F. N., Haudenschild Ch. C. et al. Determinants of a protective effect of glucose and insulin on the ischemic myocardium //Circulation Research. 1983. - Vol. 52, N 5. - P. 515-562

222. Asboe-Hansen G. //An. of Reumatic. Dis. 1950. - Vol. 9, № 2. - 55-65 Aschraf M., Onda M., Hirohata Y. Et al. // J. Molec. Cell. Cardiol. - 1982. - Vol. 14. - P. 323-327

223. Atkin A. et al. //Clin. Endokrin. 1994. - Vol. 41. - P. 503 Baker K. J., East J. M., Lee A. G. Mechanism of inhibition of the Ca2+-ATPase by melittin // Biochemistry. - 1995. - Vol. 34, № 11. - P. 3596-3604

224. Bayliss D. A., Viana F., Berger A. J. Effects of thyrotropin-releasing hormone on rat motoneurons are mediated by G proteins. // Brain Res. 1994. Vol. 668, N 1 -2. - P.220.229

225. Bertolini A., Guarini S., Rompianesi E., Ferrari W. Alpha-MSH and other ACTH fragments improve cardiovascular function and survivae in experimental hemorrhagic shock //Eur. J. Pharmacol. - 1986 a. - Vol. 130. - P. 19-26

226. Bertolini A., Guarini S., Ferrari W., Rompianesi E. Adrenocorticotropin reversal of experimental hémorragie shock is antagonized by morphine //Life Sei. 1986 b. - Vol. 39, N14.-P. 1271-1280

227. Black S. C., Gralinski M. R., Friedrichs G. S. et al. Cardioprotective effects of heparin or N-acetylheparin in an in vivo model of myocardial ischaemic and reperfusion injury //Cardiovasc. Res. 1995. - Vol. 29, N 5. - P. 629-636

228. Bkaily G., Sperelakis N., Renaud J. F, Payet M. D. Apamin, a highly specific Ca2+ blocking agent in heart muscle //Am. J. Physiol. 1985. - Vol. 248, N 6, Pt 2. - P. H961-H965

229. Bkaily G., Jacques D., Sculptoreanu A. et al. Apamin, a highly potent blocker of the TTX- and Mn2(+)-insensitive fast transient Na+ current in young embryonic heart // J. Mol. Cell. Cardiol. 1991.-Vol.23, N 1.-P. 25-39

230. Blair O. C. Sartorelli A. C. Incorporation of 35S-sulfate and 3H-glucosamine into heparan and chondroitin sulfetes during the cell cycle of B16-F10 cells //Cytometry. -1984.-Vol.5, N3.-P. 281-288

231. Bonta I. L., De Vries-Kragt K., De Vos C. J., Bhargava N. Preventive effect of local heparin administration on microvascular pulmonary hemorrhages induced by cobravenom in mice // Eur. J. Pharmacol. 1970. - Vol.13, N 1. - P. 97-102

232. Brooks G. A. Role of mitochondrial lactate dehydrogenase and lactate oxidation in the intracellular lactate shuttle //Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96, N 3. - P. 1129-1134.

233. Chen C. C., Lin-Shiau S. Y. Mode of inhibitory action of melittin on Na+-K+-ATPase activity of the rat synaptic membrane. //Biochem. Pharmacol. 1985. - Vol. 34, N 13. -P.2335-2341

234. Chepurnov S. A., Iniyushkin A. N. Respiratory effect of TRH: microinjection into nucleus tractus solitarii //Neuropeptides. 1994. - Vol. 26, Suppl. 1. - P. 27

235. Chiarugi V. P., Uanucchi S. Surface heparin sulphate as a control element in eukaryotic cells: a working model //J. Theor. Biol. 1976. - Vol. 61, N 2. - P. 459-475

236. Chiu I. M., Wang W. P., Lehtoma K. Alternative splicing generates two forms of mRNA coding for human heparin-binding growth factor 1 // Oncogene. 1990. - Vol. 5, N 5. - P. 755-762

237. Chua B., Race L., Kao D. et al. Inhibition of protein degradation by anoxia and ischemia in perfused rat heart // J. Biol. Chem. 1979. - Vol. 254, N 14. - P. 6617-6623;

238. Chen S.-Y., van der Meer B. Fluorescence studies of heparin dynamics and activities on biomimetic membranes //Biophys. J. 1994. - Vol. 66, N 2, Pt. 2. - P. 126132.

239. Cissik G. H. et al. The effects of sodium heparin on arteriol blood //Gas. Analysis. C. V. P. //Cardiovasc. Pulm.- 1977. V. 5, N 1. - P. 17-20

240. Comte M., Maulet Y., Cox J. A. Ca2+-dependent high-affinity complex formation between calmodulin and melittin // Biochem. J. 1983. - Vol. 209, N 1. - P. 269-272

241. Cuppoletti J., Abbott A. J. Interaction of melittin with the (Na+ + K+)ATPase: evidence for a melittin-induced conformational change //Arch. Biochem. Biophys.1990. Vol. 283, N 2. - P. 249-257

242. Cuppoletti J., Blumenthal K. M., Malinowska D. H. Melittin inhibition of the gastric H+-K+-ATPase and photoaffinity labeling with azidosalicylyl melittin //Arch. Biochem. Biophys. 1989. - Vol. 275, N 1. - P. 263-270

243. Dawson C. R., Drake A.F. Helliwell J., Hider R.C. The interaction of bee melittin with lipid bilayer membranes // Ibid. 1978. - Vol.510, № 1. - P. 75-86

244. De Bony I., Dufoureg I., Clin B. Lipid-protein interactions: NMR-study of melittin and its binding to ^phosphatidylcholine // Ibid. 1979. - Vol.552, № 3. - P. 531-534

245. Dimari S. J., Lembach K. J., Chatman V. B. The cytotoxins of cobra venoms. Isolation and partial characterization //Biochim. Biophys. Acta. 1975. - Vol. 393, N 2.- P. 320-334

246. Downey D. et al. //Surg. Forum. 1985. - Vol. 36. - P. 573

247. Drummond A. H. Chlordiazepoxide is a competitive thyrotropin-releasing hormone receptor antagonist in GH3 pituitary tumour cells //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. - Vol. 127, N 1. - P. 63-70

248. Drummond A. H. Inositol lipid metabolism and signal transduction in clonal pituitary cells //J. Exp. Biol. 1986. - Vol. 124. - 337-58

249. Edens R. E., Linhardt R. J., Bell C. S., Weiler J. M. Heparin and derivatized heparin inhibit zymosan and cobra venom factor activation of complement in serum //Immunopharmacology. 1994. - Vol. 27, N 2. - P. 145-53

250. Eidne K. A., Zabavnik J., Allan W. T. et al. Calcium waves and dynamics visualized by confocal microscopy in Xenopus oocytes expressing cloned TRH receptors //J. Neuroendocrinol. 1994. - Vol. 6, N 2. - P. 173-178

251. Elbein A. D. Interactions of polynucleotides and other polyelectrolytes with enzymes and other proteins // Advan. Enzymol. 1974. - Vol.40. - P. 29-64

252. Engelberg H. Heparin: metabolism, physiology and clinical application. -Springfield, 1963. 200 pp

253. Engelberg H. Probable physiologic functions of heparin //Fed. Proc. 1977. - V. 36, N. 1 - P. 70-72;

254. Erdi A. et al. Effekt of low-dose subcutaneous heparin on whole-blood viscosity //Lancet. 1976. - V. 14. - P. 342-343

255. Evequoz D., Burner M., Niederberger M. et al. Mechanisms of the pressor response to intravenous thyrotropin-releasing hormone in the rat //Circ. Shock. 1995.-Vol. 39, N3.-P. 169-173.

256. Fairbrother W. J., Champe M. A., Christinger H. W. et al. Solution structure of the heparin-binding domain of vascular endothelial growth factor //Structure. 1998. - Vol. 6.-N 5.-P. 637-648

257. Fletcher J. E., Jiang M. S. Possible mechanisms of action of cobra snake venom cardiotoxins and bee venom melittin //Toxicon. 1993. - Vol. 31, N 6. - P. 669-695

258. Galas L., Lamacz M., Gamier M. et al. Involvement of extracellular and intracellular calcium sources in TRH-induced alpha-MSH secretion from frog melanotrope cells //Mol. Cell. Endocrinol. 1998. - Vol. 38, N 1-2. - P. 25-39

259. Gao G., Goldfarb M. Heparin can activate a receptor tyrosine kinase //EMBO J. -1995. Vol. 14, N 10. - P. 2183-2190

260. Ganot C. E., Kaltenbach J. P. Oxygen-induced enzyme release: early evens and a proposed mechanisms // J. Molec. Cell. Cardiol. 1979. - N 11. - P. 389

261. Cardin A. D., Weintraub H. J. R. Molecular modeling of protein-glycosaminoglycans interactions //Arteriosclerosis. 1989. - N 9. - P. 21-32

262. Gesteland R. F., Atkins J. F. The RNA world. New York, 1993. - 632 pp Gevod V. S., Birdi K. S. Melittin and the 8-26 fragment. Differences in ionophoric properties as measured by monolayer method //Biophys. J. - 1984. - Vol. 45, N 6. - P. 1079-1083

263. Godlowski Z. Z. Prevention ofhumoral eosinopenia and lymphopenia and inhibition of clotting in blood // Brit. Med. J. N1. - 1951. - P. 854-855

264. Goldstein. J., Walman A. A., Marx G. Heparin as an inhibitor of mammalian protein synthesis //Advan. Exp. Med. Biol. 1974. - Vol. 62. - P. 289-297

265. Goto H., Kushihashi T., Benson K. T. et al. Heparin, protamine, and ionized calcium in vitro and in vivo //Anesth. Analg. 1985. - Vol. 64, N 11. - P. 1081-1084

266. Grande J., Perez M., Itarte E. Phosphorylation of hepatic insulin receptor by casein kinase 2 //FEBS Lett. 1988. - Vol. 232, N 1. - P. 130-134

267. Gujral M. L., Dhawan B. N. Studies on tourniquet shock in rats. Part II: Effect of heparin, histamine and their antagonists on survival time //J. Sci. Ind. Res. 1977. - Vol. 160.-P. 104-105

268. Habermann E. Bee and Wasp venom //Science. -1972.-Vol. 177.-P. 314-322 Habermann E. Melittin stuctura and activity // Natural toxins / Ed. D. Eaker, T. Wadstrom. - Oxford, New York, 1980. - P. 173-181

269. Hamilton, L. H. Heparin-induced block of the leucocyte response to cortisone //Endocrinology. 1957. - Vol. 61. - 393-397

270. Hasbi A., Polastron J., Allouche S. et al. Desensitization of the delta-opioid receptor correlates with its phosphorylation in SK-N-BE cells: involvement of a G protein-coupled receptor kinase // J. Neurochem. 1998. - Vol. 70. N 5. - P. 2129-2138

271. Haver V. M., Namm D. H. Generation of a vasoactive substance in human plasma during coagulation. Evidence of thrombin-induced contraction of rabbit aorta and dog coronary artery //Blood Vessels. 1983. - Vol. 20, N 2. - P. 92-98

272. Heaney-Kieras J., Kieras F. J. Glycosaminoglycans synthesized by tumorigenic and nontumorigenic mouse melanoma cells in culture //J. Nat. Cancer Inst. (Wash.). -1980. Vol. 65, N 6. - P. 1345-1350

273. Hiebert L., Ping T. Protective effect of dextran sulfate and heparin on adult rat cardiomyocytes damaged by free radicals // J. Mol. Cell. Cardiol. 1997. - Vol. 29, N 1. -P. 229-235

274. Heigard G. G. Studier over heparinetes farmaci //Arch. Pharmacol, and Chem. -1953. V.60, N. 10. - P. 599-608

275. Henderson, J. R. Serum-insulin or plasma-insulin? //Lancet. 1970. - N 1. - P. 645-547

276. Hezelton B. J., Tupper J. T. Calcium transport and exchange in mouse 3T3 and Sv 40-3T3 cells //J. Cell. Biol. 1979. - Vol. 81, N 3. - P. 538-542

277. Hildebrand A., Schweigerer L., Teschemacher H. Characterization and identification of heparin-induced nonopioid-binding sites for beta-endorphin in human plasma // J. Biol. Chem. 1988. - Vol. 263, N 5. - P. 2436-2441

278. Higgibotham B. D., Karnella S. D. The significanse of the mast cell response to bee venom // Journ. Immunology. -1971. Vol. 106, N 6. - P. 92-96

279. Hollenberg C. H. Control of adipocyte development and lipid content //Insulin action /Ed. by I. B.Fritz. New York - London, 1972. - P. 325-343

280. Hricovini M., Guerrini M., Bisio A. Structure of heparin-derived tetrasaccharide complexed to the plasma protein antithrombin derived from NOEs, J-couplings and chemical shifts // Eur. J. Biochem. 1999. - v.261, №3. - P.789-801

281. Jackson R. L., Busch S. J., Cardin A. D. Glycosaminoglycans: Molecular Properties, Protein Interaction, and Role in Physiological Processes //Physiol. Rev. -1991. Vol. 71, N 2. - P. 481-539

282. Jaye M., et al. //Science. 1986. - Vol. 233. - P. 541

283. Jaques L. B. Heparins Anionik polyelectrolyte drugs //Pharmacol. Rev. - 1980. -Vol. 31, N2.-P. 99-166

284. Jaques L. B. Physiology of heparin. //Angeiologie. 1983. - Vol. 35, N 5 - P. 145-154.

285. Jedrusiak J., Bras R., Kostrzewa R. M., Slowinski Z. Dopaminergic neuronal systems modulate the central cardiovascular effects of TRH in rats // Pol. J. Pharmacol. -1995. Vol. 47, N 1. - P . 43-52

286. Jonas E. A., Knox R. L., Smith T. C. et al. Regulatijn by insulin of a unique neuronal Ca2+ pool and of neuropeptide secretion //Nature. 1997. - Vol. 385. - N 6614. -P. 343-346

287. Jones E., Kaplan J., Domey E. et al. //Amer. J. Cardiol. 1976. - Vol. 38. - P. 696700

288. Juwadi P., Vunnam S., Yoo B., Merrifield R. B. Structure-activity studies of normal and retro pig cecropin-melittin hybrids //J. Pept. Res. 1999. Vol. 53, N 3. - P. 244-251

289. Kaiser U. B., Katzenellenbogen R. A., Conn P. M., Chin W. W. Evidence that signalling pathways by which thyrotropin-releasing hormone and gonadotropin-releasing hormone act are both common and distinct// Mol. Endocrinol. 1994. - Vol.8, N 8. -1038-1048

290. Kajita S., Iizuka H. Melittin-induced alteration of epidermal adenylate cyclase responses //Acta. Derm. Venereol. 1987. - Vol. 67. -N 4. - P. 295-300

291. Kakuta Y., Sueyoshi T., Negishi M., Pedersen L.C. Crystal structure of the sulfotransferase domain of human heparan sulfate N-deacetylase/ N-sulfotransferase // J. Biol. Chem. 1999. - Vol.274, №16. - P.10673-10676.

292. Kaplinsky E. Iskely J., Ben-Shachwi D., Gitter S. Effects of bee (Apis mellifera)venom on the electrocardiogram and blood pressure //Toxicon. 1977. - Vol. 15, № 3. -P. 251-256

293. Karli J., Stamatelopoulos S., Karikas G. et al. Effect of heparin on myocardial contractility of the dog and on Na, K-ATPase //Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 1984. - Vol. 43, N 1. - P. 79-96

294. Katsu T., Sanchika K., Jamanaka H. et al. Mechanism of cellular membrane damage induced by melittin and mastoparan // Jap. J. Med. Sci. and Biol. 1990. - Vol. 43, № 6. - P. 259

295. Katzir Z. , Wald H., Rubinger D., Popovtzer M. M. Effect of heparin on cortical adenylate cyclase activity and on urinary excretion of 3',5'-adenosine monophosphate in rat // Miner. Electrolyte. Metab. 1989. - Vol. 15, N 6. - P. 326-331

296. Kawada T., Yoshida Y., Sakurai H., Imai S. Myocardial Na+ during ischemia and accumulation of Ca2+ after reperfusion: a study with monensin and dichlorobenzamil //Japan J. Pharmacol. 1992. - Vol.59. - P. 596-609

297. Kiley S. C., Jaken S. Activation of alpha-protein kinase C leads to association with detergent-insoluble components of GH4C1 cells //Mol. Endocrinol. 1990. - Vol. 4, N 1. -P. 59-68

298. Kim P. J., Sakaguchi K., Sakamoto H. et al. Colocalization of heparin and receptor binding sites on keratinocyte growth factor //Biochemistry. 1998. - Vol.37, N 25. - P. 8853-8862

299. Kinsella L., Chen H. L., Smith J. A. et al. Interactions of putative heparin-binding domains of basic fibroblast growth factor and its receptor, FGFR-1, with heparin using synthetic peptides //Glycoconj. J. 1998. - Vol. 15, N 4. - P. 419-422

300. Kirshenbaum L. A., Singal P. K. Changes in antioxidant enzymes in isolated cardiac myocytes subjected to hypoxia-reoxigenation //Lab. Invest. 1992. - 67, № 6. -P. 796-803.

301. Kind L. S., Allaway E. Enhanced IgE and IgG anti-melittin antibody formation induced by heparin-Melittin complexes in mice //Allergy. 1982. - Vol. 37, N 4. - P. 225-229

302. Kinnunen A., Kinnunen T., Kaksonen M. et al. N-syndecan and HB-GAM (heparin-binding growth-associated molecule) associate with early axonal tracts in the rat brain //Eur. J. Neurosci. 1998. - Vol. 10, N 2. - P. 635-648

303. Kinzie J., Studer R. K., Perez B., Potchen E. J. Noncytokinetic radiation injury: anticoagulants as radioprotective agents in experimental radiation hepatitis //Science. -1972. Vol. 195. - P. 1481-1483

304. Kjellen L., Oldberg A., Rubin K. et al. //Biochem. biophys. Res. Commun. 1977. - Vol. 74. - P. 126-133

305. Koh T. Y., Bharucha K. R. Stable orally active heparinoid complexes //Patent USA. №3577534. Kn. A. - 61x17/18

306. Mach H., Volkin D. В., Burke C. J. et al. Nature of the interaction of heparin with acidic fibroblast growth factor //Biochemistry. 1993. - Vol. 32, N 20. - P. 5480-5489

307. Malencik D. A., Anderson S. R. Effects of calmodulin and related proteins on the hemolytic activity of melittin //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. - Vol. 130, N 1.-P. 22-29

308. Marciniak E. Binding of heparin in vitro and in vivo to plasma proteins / J. Lab. and Clin. Med. 1974. - Vol. 84, № 3. - P 344-356

309. Markwardt F., Vogel G. Antithrombotika. Pharmakologie und klinische Anwendung. Berlin, 1982. - 176 S.

310. Martin T. F., Kowalchyk J. A. Evidence for the role of calcium and diacylglycerolas dual second messengers in thyrotropin-releasing hormone action: involvement of Ca+2. // Endocrinology. 1984. - Vol. 115, N 4. - P. 1527-1536

311. Martinez M., Farias J. M., Garcia M. C., Sanches J. A. //Biophys. J. 1994. - Vol. 66., N 2, Pt. 2. - P. 243.

312. Maurelli M., Marchioni E., Savoldi F. et al. //Farmaco. Ed. Sci. 1987. - Vol. 42. -P. 33-41.

313. Mikhailov D., Mayo K.H., Vlahov I.R. et al. NMR solution conformation of heparin-derived tetrasaccharide // Biochem. J. 1996. - №318. - P.93-102

314. Mikhailov D., Linhardt R.J., Mayo K.H. NMR solution conformation of heparin-derived hexasaccharide // Biochem. J. 1997. - №.328. - P. 51-61

315. Milos M., Schaer J. J., Comte M., Cox J. A. Microcalorimetric investigation of the interactions in the ternary complex calmodulin-calcium-melittin //J. Biol. Chem. 1987. - Vol.262, N 6. - P. 2746-2749

316. Mix L. L., Dinerstein R. J., Villereal M. L. Mitogens and melittin stimulate an increase in intracellular free calcium concentration in human fibroblasts //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1984. - Vol.119, N 1 - P. 69-75

317. Mochizuki S. Effect of insulin on cardiac metabolism during reperfusion following ischemia //Jikeikai. Med. J. 1979. - Vol. 26, N 3. - P. 173-194

318. Morikawa H., Fukuda K., Mima H. et al. Desensitization and resensitization ofdelta-opioid receptor-mediated Ca2+ channel inhibition in NG108-15 cells //Br. J. Pharmacol. 1998.-Vol. 123, N6.-P. 1111-1118.

319. Morley J. E. Extrahypothalamic Thyrotropin releasing hormone (TRH) ist distributional ist function //Life Sci. - 1979. - Vol. 25. - P. 1539-1550

320. Muller J. E., Rude R. E., Braunwald E. Current status of measurements and efforts to reduce myocardial infarct size in man // Myocardial infarction. Boston, 1982. - P. 517-546

321. Murakami M., Hara N., Kudo I., InoueK. The trigger loss of granulations in mastocites by phospholipase A2 // J. Immunol. 1993. - Vol. 151, N 10. - P. 5675-5684

322. Nabil Z. I., Hussein A. A., Zalat S. M., Rakha M. Kh. Mechanism of action of honey bee venom on different types of muscles IIHum. Exp. Toxicol. 1998. Vol. 17, N 3.-P. 185-190

323. Najjam S. Gibbs R. V., Gordon M. Y., Rider C. C. Characterization of human recombinant interleukin 2 binding to heparin and heparan sulfate using an ELISA approach //Cytocine. 1997. Vol. 9, N 12. - P. 1013-1022

324. Navaratnam N., Virk S. S„ Ward S., Kuhn N. J. Cationic activation of galactosyltransferase from rat mammary Golgi membranes by polyamines and by basic peptides and proteins //Biochem. J. 1986. - Vol. 239, N 2. - P. 423-433

325. Nishija T. Mechanistic study on membrane basis by bee venom 12th Int. Conf. Phosp. Chem., Touluse, 6-10 July, 1992 // Phosph., Sulfur, Silicon and Relat. Elem. -1993. - Vol. 77, № 14. - P. 117-120.

326. Noble E. P., Bommer M., Liebisch D., Herz A. Hl-histaminergic activation of catecholamine release by chromaffin cells //Biochem. Pharmacol. 1988. - Vol. 37, N 2. -P. 221-228

327. Nykyforiak Ch. J., Young R. B., Phillips T. A. Changes in intracellular Ca distribution during the transition of fibroblastic from proliferating to stationary state //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - Vol. 93, N 2. - P. 583-587

328. O'Brian C. A., Ward N. E. ATP-sensitive binding of melittin to the catalytic domain of protein kinase C //Mol. Pharmacol. 1989. - Vol. 36, N 3. - P. 355-359

329. Ohki S., Marcus E., Sukumaran D. K., Arnold K. Interaction of melittin with lipid membranes //Biochim. Biophys. Acta. 1994. - Vol. 1194, N 2. - P. 223-232

330. Okamoto T., Isoda H., Kubota N. et al. Melittin cardiotoxicity in cultured mouse cardiac myocytes and its correlation with calcium overload //Toxicol. Appl. Pharmacol. -1995. Vol. 133, N 1. - P. 150-163

331. Olivecrona T. et al. Heparin-lipoprotein lipase interactions //Fed. Proc. 1977. - V. 36, N. 1 - P. 60-65

332. Opie L. H. Myocardial infarcts size. Pt 2: Comparison of anti-infarct affects of beta-blockade, glucose-insulin-potassium, nitrates andhyaluronidae //Amer. Heart J. -1980.-Vol. 100.-P. 531-552

333. Opie L. H., Brujneel K., Owen P. Effects of glucose insulin and potassium infusion on tissue metabolic changes within first hour of myocardial infarction in the baboon //Circulation. 1975. - Vol. 52. - P. 49-57

334. Opie L.H., du Toit E.P. Postischemic stunning: the two-phase model for the role of calcium as pathogen //J. Cardiovasc. Pharmacol. 1992. - 20, Suppl, 5. - P. S1-S4.

335. Ornitz D. M., Yayon A., Flanagan J. G. et al. //Mol. Cell. Biol.- 1992. -N 12. P. 240-247

336. Orosz Z. et al. A heparin lipasa a glucose and insulin secretiorakutuan // Kiserl Orvostud. 1975. - V. 27, N. 3. - P. 254-259

337. Orosz, L., Michael. R., Ziegler. M. Serum-insulin or plasma-insulin //Lancet.1971.-N 2.-P. 1149-1150

338. Otey E. S. The effect of heparin on blood lactate and pyruvate during acute hypoxia //Fed. Proc. 1963. - Vol. 22. - P. 635

339. Pachter J. A., Law G. J., Dannies P. S. Ca2+ channel agonists enhance thyrotropin-releasing hormone-induced inositol phosphates and prolactin secretion// Eur. J. Pharmacol. 1991. - Vol.195, N 3. - P. 373-379

340. Park J. L., Tanhehco E. J., Kilgore K. S. et al. Reviparin-sodium prevents complement-mediated myocardial injury in the isolated rabbit heart //J. Cardiovasc. Pharmacol. 1997. - Vol. 30, N 5. - P. 658-666

341. Patel H. V., Vyas A. A., Vyas K. A. et al. Heparin and heparan sulfate bind to snake cardiotoxin. Sulfated oligosaccharides as a potential target for cardiotoxin action //J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272, N 3. - P.1484-1492

342. Perlick E. Antikoagulantien. Leipzig, 1964. - 216 pp

343. Peptide hormone action: a practical approach /Ed. by K. Siddle, J. C. Hutton. -Oxford, 1990. 256 pp

344. Pestronk A., Parhad I. M., Drachman D. B., Price D. L. Membrane myopathy: morphological similarities to Duchenne muscular dystrophy// Muscle Nerve. 1982. -Vol. 5, N 3. - P. 209-214

345. Phillips S. J. The effect of snake and bee venom in cardiovascular hemodynamics and function // Toxins Anim. and Plant Origin. N.Y., 1972. - Vol. 2. - P. 683-701

346. Pierce G. N., Meng H. The role of sodium-proton exchange in ischemic/reperfusion injury in the heart. Na+-H+ exchange and ischemic heart disease //Amer. J. Cardiovasc. Pathol. 1992. - № 4. - P. 91-102

347. Prater J. W., Russel A. O., Manfle J. A. et al. Metabolic consequences of glucose-insulin-potassium infusion in treatment of acute myocardial infarction //Amer. J. Cardiol.- 1976.-Vol., 38.-P. 95-99

348. Pugliese F., Cinotti G. A., Mene P. Regulation of cultured human mesangial cell growth by ionized macromolecules //J. Am. Soc. Nephrol. 1992. - Vol. 2, N 10, Suppl. -P. S95-S99

349. Rackley Ch. E., Russel R. O., Rogers W. Y. et al. Clinical experience with glucose-insulin-potassium the rapy in acute myocardial infarction //Progress in cardiology. 1982. - Vol. 102, N. 6. - P. 1038-1048

350. Rao N. M. Differential susceptibility of phosphatidylcholine small unilamellar vesicles to phospholipases A2, C and D in the presence of membrane active peptides. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - Vol. 182, N 2. - P. 682-688

351. Raspe E., Roger P. P., Dumont J. E. Carbamylcholine, TRH, PGF2 alpha and fluoride enhance free intracellular Ca++ and Ca++ translocation in dog thyroid cells //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1986. - Vol. 141, N 2. - P. 569-577

352. Rauvala H. An 18-kd heparin-binding protein of developing brain that is distinct from fibroblast growth factors //EMBO J. 1989. - Vol. 8, N 10. - P. 2933-2941

353. Reches A., Eldor A., Salomon Y. Heparin inhibits PGE1-sensitive adenylate cyclase and antagonizes PGE1 antiaggregating effect in human platelets. //J. Lab. Clin. Med. 1979. - Vol. 93, N 4. - P. 638-644

354. Regelson W. The growth-regulating activityof polyanions: a theoretical discussion of their place in the intercellular environment and their role in cell physiology //Adv. Cancer. Res. 1968. - Vol. 11. - P. 223-304

355. Reilly C. F., Fritze L. M., Rosenberg R. D. Antiproliferative effects of heparin on vascular smooth muscle cells are reversed by epidermal growth factor //J. Cell. Physiol. -1987.-Vol.131, N2.-P. 149-157

356. Rozengurt E., Gelehrter T. D., Legg A., Pettican P. Melittin stimulates Na entry, Na-K pump activity and DNA synthesis in quiescent cultures of mouse cells //Cell. 1981. Vol. 23. N 3. P. 781-7X8

357. Rinderknecht E., Humbel R. //PNAS USA. 1976. - Vol. 73. - P. 2365 Rita G. A., Davies P., Krakuer K. et al. //Boll. Soc. Ital. Biol. Sper. - 1972. - Vol. 48.-P. 1138-1142

358. Rosenberg R. D., Shworak N. W., Liu J., Schwartz J. J., Zhang L. Heparan Sulfate Proteoglycans of the Cardiovascular System // J. Clin. Invest. 1997 - Vol. 99, № 9. - P.2062-2070

359. Scaffrath D., Stuhlsatz H. W., Greiling H. Glycosaminoglycan inhibition of DNA and RNA polymerases // Physiol. Chem. 1976. - Vol. 367. - P. 499-508

360. Schlegel W., Wuarin F., Zbaren C., Zahnd G. R. Lowering of cytosolic free Ca2+ by carbachol, a muscarinic cholinergic agonist, in clonal pituitary cells (GH3 cells)// Endocrinology. 1985a. -Vol.117, N 3. - P. 976-981

361. Schlegel W., Wuarin F., Zbaren C. et al. Pertussis toxin selectively abolishes hormone induced lowering of cytosolic calcium in GH3 cells. // FEBS Lett. 1985b. -Vol. 189,N l.-P. 27-32

362. Severson D. L., Carroll R., Kryski A. Jr., Ramirez I. Short-term incubation of cardiac myocytes with isoprenaline has no effect on heparin-releasable or cellular lipoprotein lipase activity // Biochem. J. 1987. - Vol. 248, N 1. - P. 289-292

363. Simon E. R. Molecular basis of heparin action introductory Session //Fed. Proc. -1977.-V. 36, N. 1-P. 9-19

364. Sleeman J. P, Kondo K., Moll J. et al. Variant exons v6 and v7 together expand the repertoire of glycosaminoglycans bound by CD44.//J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272,N50.-P. 31837-31844

365. Smith G. F., Craft T. J. Heparin reacts stoichiometrically with thrombin during thrombin inhibition in human plasma // Biochem. and Biophys. Res. Communs. 1976. Vol. 71. №3. - P. 738-745

366. Socci R., Kolbeck R. C., Meszaros L. G. Positive inotropic effect of thyrotropin-releasing hormone on isolated rat hearts //Gen. Physiol. Biophys. 1996. - Vol. 15, N 4. -309-316

367. Sobel M., Adelman B. Characterization of platelet binding of heparins and other glycosaminoglycans // Thromb. Res. 1988. - N 6. - P. 815-826

368. Soteriou A., Cryer A. Distinct immunoreactivities suggest the existence of potential tissue variants in rat lipoprotein lipase //Biochem. J. 1994. - Vol.299, Pt 2. -P. 417-423.

369. Speir E., Zhou Y. F., Lee M. et al. Fibroblast growth factors are present in adult cardiac myocytes, in vivo //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. - Vol.159, N 3. -P. 1336-1340

370. Spence M. J., Lemberg L., et al. Glucose-insulin-potassium in acute myocardial infarction //Heart. Lung. 1980. - Vol. 9, N. 5. - P. 905-909

371. Sperr W. R., Bankl H. C., Mundigler G. et al. The human cardiac mast cell: localization, isolation, phenotype, and functional characterization. //Blood. 1994. Vol.84. N 11. P. 3876-3884

372. Steiner R. F., Norris L. The interaction of melittin with troponin C. // Arch. Biochem. Biophys. 1987. - Vol. 254, N 1. - P. 342-352

373. Stone A. L., Epstein P. //Biochim. biophys. Acta (G). 1977. - Vol. 497. - P. 298306

374. Subbalakshmi C., Nagaraj R., Sitaram N. Biological activities of C-terminal 15-residue synthetic fragment of melittin: design of an analog with improved antibacterial activity. //FEBS Lett. 1999. - Vol.448, N 1. - P. 62-66

375. Talbot J. C., Lalanne J., Faucon J. F., Dufourcq J. Effect of the state of association of melittin and phospholipids on their reciprocal binding. // Biochim. Biophys. Acta. 1982. Vol. 689, N 1. P. 106-112

376. Tarnawski A., Wajdavicz A. Heparyna-sibstancja o duzym biologicznym znaczeniu //Posthig. Med. Dosv. 1970. - Vol. 24, N 1. - P. 125-131

377. Tatham A. S., Hider R. C., Drake A. F. The effect of counterions on melittin aggregation //Biochem. J. 1983. - Vol.211, N 3. - P. 683-686

378. Terwilliger T. C., Eisenberg D. The structure of melittin. I. Structure determination and partial refinement. // J. Biol. Chem. 1982a. -Vol.257, N 11. - P. 6010-6015

379. Terwilliger T. C., Eisenberg D. The structure of melittin. II. Interpretation of the structure. // J. Biol. Chem. 1982b. - Vol. 257, N 11. - P. 6016-6022

380. Thomas J., Linssen M., van der Vusse G. J. et al. Acute stimulation of glucose transport by histamine in cardiac microvascular endothelial cells //Biochim. Biophys. Acta. 1995. - Vol. 1268, N 1. - 88-96

381. Ticshler M. E., Ost A. H., Spina B. et al. Regulation of protein turnover by glucose, insulin and amino acid in adipose tissue //Amer. J. Physiology. 1984. - Vol. 427, N3, P. 1.-P. 228-233

382. Tofukuji M., Metais C., Li J. Myocardial VEGF expression after cardiopulmonary bypass and cardioplegia. //Circulation. 1998. - Vol. 98, N 19, Suppl. - P. II242-II246

383. Tosteson M. T., Tosteson D. C. The sting. Melittin forms channels in lipid bilayers.//Biophys. J. 1981. - Vol. 36, N 1. - P. 109-116

384. Tosteson M. T, Holmes S. J., Razin M., Tosteson D. C. Melittin lysis of red cells //J. Membr. Biol. 1985. - Vol. 87, N 1. - P. 35-44

385. Transcription factors: a practical approach / Ed. by G. Spedding. Oxford, 1993.224 pp

386. Tsao L. I., Su T. P. IP3 receptor antagonist heparin uncompetitively inhibits 3H.(+)-SKF-10047 binding to sigma receptors //Eur. J. Pharmacol. 1996. - Vol. 311, N l.-P. R1-R2

387. Van Rijn J., Trillon V., Mardiguian J. et al. Selective binding of heparin to human endothelial cells implications for pharmacokinetics //Thromb. Res. 1987. - N 3. - P. 211-222

388. Vives R. R., Pye D. A., Salmivirta M. et al. Sequence analysis of heparan sulphate and heparin oligosaccharides //Biochem. J. 1999. - v.339, №3. - P.767-773.

389. Voss J., Birmachu W., Hussey D. M., Thomas D. D. Effects of melittin on molecular dynamics and Ca-ATPase activity in sarcoplasmic reticulum membranes: time-resolved optical anisotropy //Biochemistry. 1991. - Vol. 30, N 30. P. 7498-7506

390. Vyas A. A., Pan J. J., Patel H. V. et al. Analysis of binding of cobra cardiotoxins to heparin reveals a new beta-sheet heparin-binding structural motif. //J. Biol. Chem. -1997. Vol.272, N 15. - P. 9661-9670

391. Vyas K. A., Patel H. V., Vyas A. A., Wu W. Glycosaminoglycans bind to homologous cardiotoxins with different specificity //Biochemistry. 1998. - Vol. 37, N 13.-P. 4527-4534

392. Waite M., Sisson P. //J. biol. Chem. 1973. - Vol. 248. - 7201-7206

393. Wang J. P., Teng C. M. Comparison of the enzymatic and edema-producing activities of two venom phospholipase A2 enzymes. //Eur. J. Pharmacol. 1990. - Vol. 190, N3.-P. 347-354

394. Weiler J. M., Edens R. E., Linhardt R. J., Kapelanski D. P. Heparin and modified heparin inhibit complement activation in vivo. //J. Immunol. 1992. - Vol. 148, N 10. -P. 3210-3215

395. Weisz P. B., Joullie M. M., Hunter C. M. et al. A basic compositional requirement of agents having heparin-like cell-modulating activities. //Biochem. Pharmacol. 1997. -Vol. 54, N1.-P. 149-157

396. Welsh G. I., Proud C. G. Molecular basis of the action of insulin on mRNA translation //Diabetologia. 1991. Vol. 34, Suppl. 2. - P. 35

397. Wiss O., Wiss V. Influence of insulin and glucagon on the cholesterol synthesis in rat liver in vivo //Helv. Chim. Acta. 1977. - Vol. 60. - P. 1967-1968

398. Wildenthal K., Stanley J. C. et al. The role of lysosomes and lysosomal enzymes in cardioac protein turnover //Federation Proceedings. 1980. - Vol. 39, N 1. - P. 37-41

399. Yayon A., Klagsbrun M., Esko J. D., Leder P., Ornitz D. M. Cell surface, heparin-like molecules are required for binding of basic fibroblast growth factor to its high affinity receptor // Cell. 1991. - Vol. 64, N 4. - P. 841 -848

400. Yeagle P. L. //FASEB J. 1989. - Vol. 3. - P. 1833-1842

401. Yu P., De Petris G., Biancani P. et al. Cholecystokinin-coupled intracellular signaling in human gallbladder muscle //Gastroenterology. 1994. Vol.106, N 3. - P. 763-770

402. Yu P., Chen Q., Xiao Z. et al. Signal transduction pathways mediating CCK-induced gallbladder muscle contraction //Am. J. Physiol. 1998. - Vol.275, N 2, Pt 1. -P. G203-G211

403. Zheng D., Chen H. S., Hu D. Y. Cardiovascular mechanisms of thyrotropin-releasing hormone against experimental hemorragic shock //Circ. Shock. 1992.-Vol. 36, N3,-P. 169-173

404. Zucker M. B. Heparin and platelet function //Fed. Proc. 1977. - V. 36, N. 1 - P.47.49

405. Zlokovic B.V., Segal M. B., Begley D. J. Permebility of the blood-cerebrospinal fluid and blood-brein barries to thyrotropin-releasing hormone //Brain Res. 1985. - Vol. 358.-P. 191-199

Информация о работе

Орлов, Александр Владимирович
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2000
ВАК 03.00.13

Диссертация

Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Модифицирующее влияние гепарина на проявление кардиотропных эффектов физиологически активных веществ пептидной природы - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы