Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Множественно-модифицированные липопротеиды низкой плотности, циркулирующие в крови человека

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Тертов, Владимир Викторович

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 1. ОБНАРУЖЕНИЕ И ВЫДЕЛЕНИЕ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ЛНП (цмЛНП).

1.1. Обнаружение циркулирующих атерогенных ЛНП.

1.2. Разработка метода выделения цмЛНП.

1.3. Определение уровня цмЛНП в крови человека.

1.4. Обсуждение результатов.

Глава 2. ВЛИЯНИЕ цмЛНП НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ И СИНТЕЗ КОМПОНЕНТОВ СОЕДИНИТЕЛЬНОТКАННОГО МАТРИКСА

КУЛЬТИВИРУЕМЫМИ КЛЕТКАМИ ИНТИМЫ АОРТЫ ЧЕЛОВЕКА.

Глава 3. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАТИВНЫХ ЛНП И цмЛНП.

3.1. Химический состав.

3.1.1. Углеводный состав.

3.1.2. Липидный состав.

3.1.3. Обсуждение результатов.

3.2. Физические параметры.

3.2.1. Размер частиц.

3.2.2. Плотность.

3.2.3. Заряд.

3.2.4. Обсуждение результатов.

3.3. Анализ аполипопротеида В.

3.3.1. Свободные аминогруппы лизиновых остатков.

3.3.2. Устойчивость к протеолизу.

3.3.3. Обсуждение результатов.

3.4. Степень окисленности и окисляемость липопротеидов.

3.4.1. Содержание гидроперекисей и ТБК-реактивных продуктов в нативных ЛИП и цмЛНП.

3.4.2. Разработка метода определения аддуктов липидов с апоВ - маркеров окисления ЛНП in vivo.

3.4.3. Степень in vivo окисленности нативных ЛНП и цмЛНП.

3.4.4. In vitro окисляемость нативных ЛНП и цмЛНП.

3.4.5. Содержание жирорастворимых антиоксидантов в нативных ЛНП и цмЛНП.

3.4.6. Взаимосвязь между уровнем антиоксидантов в ЛНП и их степенью in vivo окисленности и in vitro окисляемостью.

3.4.7. Взаимосвязь между степенью окисленности ЛНП и их атерогенностью.

3.4.8. Обсуждение результатов.

3.5. Взаимосвязь между выраженностью различных модификаций ЛНП и атерогенностью липопротеидов.

Глава 4. ЦмЛНП И ДРУГИЕ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ЛНП, ОБНАРУЖЕННЫЕ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

4.1. Содержание сиаловой кислоты в электроотрицательных и аортальных ЛНП.

4.2. Обсуждение результатов.

4.3. Сравнение свойств обнаруженных in vivo модифицированных ЛНП.

Глава 5. МНОЖЕСТВЕННАЯ МОДИФИКАЦИЯ ЛНП В ПЛАЗМЕ КРОВИ.

5.1. Десиалирование ЛНП.

5.2. Изменение липидного состава.

5.3. Изменение физических параметров.

5.4. Перекисное окисление липидов и деградация апоВ.

5.5. Появление атерогенного потенциала.

5.6. Обсуждение результатов.

Глава 6. МЕТАБОЛИЗМ цмЛНП В ГЛАДКОМЫШЕЧНЫХ КЛЕТКАХ ИНТИМЫ АОРТЫ ЧЕЛОВЕКА.

6.1. Захват ЛНП.

6.2. Взаимодействие ЛНП с компонентами клеточных мембран.

6.3. Интернализация ЛНП.

6.4. Внутриклеточная деградация аполипопротеида В.

6.5. Метаболизм липидов липопротеидов.

6.6. Обсуждение результатов.

Глава 7. МЕХАНИЗМЫ УСИЛЕНИЯ АТЕРОГЕННОГО ПОТЕНЦИАЛА цмЛНП.

7.1. Агрегация модифицированных ЛНП.

7.2. Образование циркулирующих иммунных комплексов.

7.3. Формирование комплексов ЛНП с компонентами соединительнотканного матрикса.

7.4. Обсуждение результатов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Множественно-модифицированные липопротеиды низкой плотности, циркулирующие в крови человека"

Сердечно-сосудистые заболевания являются основной причиной смертности и инвалидности людей в развитых индустриальных странах. Большинство сердечно-сосудистых заболеваний является следствием атеросклероза магистральных сосудов человека. Поэтому исследование механизмов развития атеросклероза является важнейшей задачей в борьбе с сердечно-сосудистыми заболеваниями.

Одним из наиболее ранних проявлений атеросклеротического поражения является вне- и внутриклеточное отложение липидов, преимущественно эфиров холестерина, в интиме сосудов [Аничков, 1947; Smith, 1974; Houst, 1978; Mahley, 1979; Fowler et ai., 1979]. Образование наполненных липидными включениями пенистых клеток признается рядом авторов инициирующим моментом патогенеза атеросклероза [Alaupovic, 1971; Cookson, 1971; Simpson, 1977; Fowler et al., 1979; Gerrity, 1981; Aguel et al., 1984; Jurukova, 1989]. Однако, механизмы накопления внутриклеточных липидов изучены недостаточно. К началу данного исследования, т.е. в первой половине 80-х годов, было установлено, что источником липидов, накапливающихся в клетках сосудов являются липопротеиды низкой плотности (ЛНП), циркулирующие 6 крови человека [Bates et al., 1976; Ross, Harker, 1976; Wissler et al., 1976; Chen et al, 1977; StClair, Leight, 1978; Goldstein et al., 1979]. При этом, многочисленные попытки вызвать внутриклеточное накопление эфиров холестерина с помощью нативных ЛНП не увенчались успехом [Fogelman et al., 1981; Schechter et al., 1981; Van Lehten et al., 1983; Brown et al., 1983; Henriksen et al., 1983; Haberland et al., 1987, 1988]. С другой стороны, многочисленные химически модифицированные в условиях in vitro ЛНП (ацетилированные, обработанные малоновым диальдегидом, окисленные ионами металлов переменной валентности и т.д.) вызывали отложения липидов в клетках, т.е. были атерогенны [Goldstein et al., 1979; Mahley et al., 1979; Fogelman et al., 1981; Steinberg et al., 1983; Henriksen et al., 1983; Haberland et al., 1982, 1987, 1988; Parthasarathy et al., 1985; Aviram et al., 1988]. В то же время, усиленный поиск в крови человека липопротеидов, сходных с in vitro модифицированными ЛНП, не дал результата. Таким образом, в начале настоящего исследования сложилась парадоксальная ситуация: 1) ЛНП являются источником липидов, накапливающихся в клетках сосудов; 2) нативные ЛНП не вызывают отложения внутриклеточного жира; 3) in vitro модифицированные ЛНП атерогенны, но их нет в кровотоке. Такая ситуация предполагала поиск in vivo модифицированных ЛНП, способных вызывать внутриклеточное накопление липидов.

Цель и задачи исследования Целью настоящей работы явилось обнаружение и выделение циркулирующих атерогенных липопротеидов низкой плотности, изучение характера и механизмов атерогенной модификации, исследование липопротеид-опосредованного накопления липидов в гладкомышечных клетках интимы аорты человека.

В связи с этой целью необходимо было решить следующие основные задачи:

- обнаружить атерогенные модифицированные ЛНП в крови людей;

- разработать метод выделения циркулирующих модифицированных ЛНП (цмЛНП);

- изучить влияние цмЛНП на пролиферативную активность гладкомышечных клеток интимы аорты человека и на биосинтез клетками компонентов соединительно-тканного матрикса;

- провести сравнительное изучение химического состава и физических характеристик нативных и цмЛНП; .

- определить механизмы модификации ЛНП;

- изучить взаимодействие цмЛНП с рецепторами и другими компонентами плазматических мембран клеток;

- провести сравнительное изучение внутриклеточного метаболизма нативных и цмЛНП для выяснения механизмов внутриклеточного накопления липидов;

- определить пути увеличения атерогенного потенциала цмЛНП.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Тертов, Владимир Викторович

выводы

1. Обнаружена и выделена подфракция циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности (цмЛНП), которые, в отличие от нативных ЛНП, стимулируют накопление липидов, в частности, эфиров холестерина, в культивируемых гладкомышечных клетках непораженной интимы аорты человека, т.е. являются атерогенными. Вызванное цмЛНП внутриклеточное накопление липидов сопровождается усилением синтеза компонентов соединительнотканного матрикса и усилением клеточной пролиферацию.

2. ЦмЛНП отличаются от нативных ЛНП низким содержанием аполипопротеид В-связанной и липид-связанной сиаловой кислоты, т.е. представляют собой частично десиалированные ЛНП. ЦмЛНП характеризуются также сниженным уровнем нейтральных углеводов как в апобелке, так и в гликолипидах липопротеидной частицы.

3. Содержание нейтральных липидов (свободного и этерифицированного холестерина и триглицеридов), а также фосфолипидов (фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, сфингомиелина) в цмЛНП ниже, чем в нативных липопротеидах.

4. ЦмЛНП имеют повышенный уровень оксистеролов и аддуктов липидов с апобелком, что указывает на большую степень окисленности in vivo. При этом, способность цмЛНП вызывать накопление внутриклеточного холестерина не коррелирует со степенью in vivo окисленности ЛНП. Сниженное, по сравнению с нативными ЛНП, содержание жирорастворимых антиоксидантов: убихинола, а- и у-токоферолов, каротиноидов, - по-видимому, определяет повышенную окисляемость цмЛНП in vitro.

5. ЦмЛНП имеют меньший размер, большую плотность и повышенный электроотрицательный заряд по сравнению с нативными ЛНП.

6. Изменения доступности аминогрупп лизиновых остатков для взаимодействия с тринитробензолсульфоновой кислотой и устойчивости к протеолитической деградации свидетельствуют о модификации аминогрупп и изменении третичной структуры аполипопротеида В в частицах цмЛНП.

7. Многочисленные изменения, обнаруженные в белковой, липидной и углеводной составляющих атерогенных цмЛНП, а также изменения физических параметров липопротеидных частиц позволяют определить эти липопротеиды как множественно-модифицированные ЛНП.

8. Обнаруженные нами цмЛНП, а также более электроотрицательные ЛНП и мелкие плотные ЛНП, описанные другими исследователями, по-видимому, представляют собой одну и ту же подфракцию близких по свойствам липопротеидных частиц, подвергшихся множественной модификации.

9. Множественная модификация нативных ЛНП может происходить в плазме крови in vitro и представляет собой каскад последовательных событий: десиалирование ЛНП, появление способности вызывать накопление внутриклеточных липидов, потеря нейтральных липидов и фосфолипидов, уменьшение размера частиц, увеличение электроотрицательного заряда частиц, протекание процессов перекисного окисления липидов. Десиалирование ЛНП осуществляется обнаруженной в крови человека транс-сиалидазой, переносящей сиаловую кислоту между гликоконъюгатами липопротеидов, гликопротеидов и ганглиозидов плазмы и клеток крови.

10. Усиленный захват цмЛНП гладкомышечными клетками непораженной и, особенно, атеросклеротической интимы аорты человека обусловлен их дополнительным, помимо ЛНП-рецептора, связыванием со скэвенджер-рецептором, асиалогликопротеид-рецептором, а также с протеогликанами плазматических мембран клеток. Скорость внутриклеточной деградации аполипопротеида В цмЛНП существенно ниже скорости деградации апобелка нативных липопротеидов. Этот феномен объясняется изменением третичной структуры аполипопротеида В цмЛНП, а также вовлечением различных клеточных протеиназ в деградацию апобелка нативных и модифицированных липопротеидов. Усиленный захват и низкая скорость деградации апобелка приводят к накоплению цмЛНП в культивируемых гладкомышечных клетках интимы аорты человека.

11. Низкая скорость гидролиза эфиров холестерина, входящих в состав цмЛНП, и стимуляция внутриклеточной этерификации свободного холестерина являются причиной цмЛНП-зависимого накопления эфиров холестерина в гладкомышечных клетках, культивируемых из интимы аорты человека.

12. Образование крупных комплексов, содержащих цмЛНП (агрегатов, комплексов с компонентами соединительнотканного матрикса, циркулирующих иммунных комплексов), стимулирует захват липопротеидов клетками, подавляет деградацию липидов цмЛНП и, тем самым, усиливает их атерогенный потенциал.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В. этом исследовании в крови людей была обнаружена подфракция липопротеидов низкой плотности, способная вызывать накопление липидов и, в первую очередь, эфиров холестерина, в гладкомышечных клетках непораженной интимы аорты человека. Таким образом, была преодолена парадоксальная ситуация, когда нативные ЛНП не вызывали отложения внутриклеточного жира, а in vitro модифицированные ЛНП не были обнаружены в кровотоке.

Помимо накопления эфиров холестерина цмЛНП стимулируют клеточную пролиферацию и синтез компонентов соединительнотканного матрикса.

Нам удалось показать, что атерогенные ЛНП характеризуются многочисленными изменениями в углеводной, белковой и липидной составляющих и могут быть названы множественно-модифицированными ЛНП. Множественная модификация происходит в плазме крови человека.

Продемонстрировано, что цмЛНП теряют сродство к ЛНП-рецептору, однако, преобретают способность взаимодействовать с рядом других мембранных рецепторов и компонентов. Усиленный захват клетками цмЛНП, низкая скорость деградации липопротеидных частиц и гидролиза их эфиров холестерина, а также стимуляция этерификации свободного холестерина являются причинами внутриклеточного накопления эфиров холестерина, образующих липидные включения, характерные для атеросклеротических клеток. Этот процесс может быть усилен формированием цмЛНП крупных комплексов (агрегаты, иммунные комплексы, комплексы с компонентами матрикса), захватываемых клетками путем фагоцитоза.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Тертов, Владимир Викторович, Москва

1. Аничков НН. Частная патологическая анатомия. Выпуск II. Сердце и сосуды. Второе издание. Москва-Леиниград, Медгиз, 1947.

2. Бошков ВН, Кузьменко ЕС. Ресинк Т, Ткачук ВА. Гормоноподобное действие липопротеидов плазмы крови на тромбоциты и гладкомышечные клетки сосудов человека. Биохимия. 1994; 59, 958-966.

3. Валентинова НВ, Бушуева ТЛ, Медведева НВ, Морозкин АД, Фуки ИВ. Физико-химические свойства подфракций липопротеидов низкой плотности, полученных в равновесном градиенте плотности. Мол Биология. 1989;23, 1447-1454.

4. Герасимова, ЕН, Перова НВ, Торховская ТИ, Рууге ЭК, Твердислов ВА, Пасечник ВИ. Молекулярные аспекты взаимодействия липопротеидов плазмы с сосудистой стенкой. Бюлл ВКНЦ АМН СССР. 1978;1, 21-31.

5. Добрецов ГЕ, Спирин ММ, Кузнецов АА, Попов АВ. Пространственная организация липопротеидов низкой плотности аорты человека. Бюлл Эксп Биол Мед. 1983,96, 45-47.

6. Климов АН. Причины и условия возникновения атеросклероза. Превентивная кардиология (под редакцией Г.И. Косицкого) М., Медицина. 1977, С. 260-321.

7. Климов АН. Аутоиммунная теория патогенеза атеросклероза. Труды 16-й конференции ФЕБО. М.ю Наука. 1987, С. 119-125.

8. Климов АН. Атеросклероз. Превентивная кардиология (под редакцией Г.И. Косицкого) М., Медицина. 1987, С. 239-316.

9. Климов АН. Аутоиммунная теория патогенеза и концепция модифицированных липопротеидов. Вестн АМН СССР. 1990; N11, 30-36.

10. Климов АН, Никульчева НГ. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. Практическая медицина. Питер Пресс, С.-Питербург. 1995.

11. Назарова ВЛ, Андреева ЕР, Тертов ВВ, Гельдиева БС, Орехов АН. Иммуноцитохимическая локализация скэвенджер рецептора в гладкомышечных клетках аорты человека. Бюлл Эксп Биол Мед. 1995; 120, 195-198.

12. Панасенко ОМ, Азизова OA, Торховская ТИ, Дудаев ВА. Изучение особенностей структурной организации липопротеидов плазмы крови больных ИБС методом спиновых зондов. Вопр мед хим. 1984;6, 40-45.

13. Формазюк BE, Добрецов ГЕ, Полесский ВА, Торховская ТИ, Герасимова ЕН, Владимиров ЮА. Изменение структуры атерогенных липопротеидов при экспериментальном атеросклерозе. Вопр мед хим. 1980;4, 540-545.

14. Afifi АА, Azen SP. Statistical analysis. A computer oriented approach, New York: Academic Press, 1979,138-142.

15. Aguel NM, Ball RY, Waldman H, Mitchinson MJ. Monocytic origin of foam cells in the atherosclerotic plaques. Atherosclerosis. 1984;53, 265-271.

16. Alaupovic P. Apolipoproteins and lipoproteins. Atherosclerosis. 1971; 13, 141-159.

17. Austin MA, King MC, Vranizan KM, Newman B, Krauss RM. Inheritance of low-density lipoprotein subclass paterns: results of complex segregation analysis. Am J Hum Genet. 1988;43, 838-846.

18. Austin MA, Breslow JL, Hennekens CH, Buring JE, Willett WC, Krauss RM. Low-density lipoprotein subclass paterns and risk of myocardial infarction. JAMA. 1988;260, 1917-1921.

19. Aviram M, Bierman EL, Chait A. Modification of low density lipoprotein bylipoprotein lipase or hepatic lipase induced enhanced uptake aand cholesterol accumulation in cells. J Biol Chem. 1988,263, 15416-15423.

20. Aviram M, Keidar S, Brook JG. Reduced uptake of cholesterol esterase-modified low density lipoprotein by macrophages. J Biol Chem. 1991 ;11567-11575.

21. Aviram M, Maor I. Phospholipase A-2-mediated LDL is taken up et enhanced rate by macrophages. 1992; 185, 465-473.

22. Aviram M, Maor I. Phosphlipase D modified LDL is taken up by marophages at increased rate. A possible role for phosphatidic acid. J Clin Invest. 1993;91, 19421952.

23. Avogaro P, Bittolo Bon G, Cazzolato G. Presence of a modified low density lipoprotein in humans. Arteriosclerosis. 1988; 8, 79-87.

24. Avogaro P, Cazzolato G, Bittolo-Bon G. Some questions concerning a small, more electronegative LDL circulating in human plasma. Atherosclerosis. 1991 ;91,163-171.

25. Axen R, Porath J. Chemical coupling of enzymes to cross-linked dextran («Sephadex»), Nature. 1966;210, 367-369.

26. Babiy AV, Gebicki JM, Sullivan DR. Vitamin E content and low density lipoprotein oxidizability induced by free radicals. Atherosclerosis. 1990;81, 175-182.

27. Baenziger JU, Fiete D. Structural determinants of Ricinus communis agglutinin and toxinspecificity for oligosaccharides. J Biol Chem. 1979;254, 9795-9799.

28. Balla G, Jacob HS, Eaton JW, Belcher JD,. Verchelotti GM. Hemin: a possible physiological mediator of low density lipoprotein oxidation and endothelial injury. Arterioscler Thromb. 1991; 11, 1700-1711.

29. Basu SK, Goldstein JL, Anderson RGW, Brown MS. Degradation of cationized low density lipoprotein and regulation of cholesterol metabolism in homozygous familial hypercholesterolemia fibroblasts. Proc Natl Acad Sei USA. 1976; 73, 3178-3182.

30. Basu SK, Brown MS, Ho YK, Goldstein JL. Degradation of low density lipoprotein-dextran sulfate complexes associated with deposition of cholesteryl esters in mouse macrophages. J. Biol. Chem. 1979;254, 7141-7146.

31. Bates SR, Wissler RW. Effect of hyperlipemic serum on cholesterol accumulation in monkey aortic medial cells. Biochim Biophys Acta. 1976;450, 78-88.

32. Beaumont JL, Doucet F, Vivier P, Antonucci M. Immunoglobulin-bound lipoproteins (Ig-Lp) as a marker of familial hypercholesterolemia, xanthomatosis and atherosclerosis. Atherosclerosis. 1988; 74, 191-201.

33. Bermes Jr EW, McDonald HJ: The stability of human serum lipoprotein in vitro. Ann Clin Lab Sci. 1972;2, 226-232.

34. Bilheimer DW, Eisenberg S, Levy Rl. The metabolism of very low density lipoprotein proteins. I. Preliminary in vitro and in vivo observations. Biochim Biphys Acta. 1972;260, 212-221.

35. Bligh EG, Dyer WJ. A rapid method for total lipid extraction and purification. Can J Biochem Physiol. 1959;37, 911 -917.

36. Boyd HC, Gown AM, Wolfbauer G, Chait A. Direct evidence for a protein recognised by a monoclonal antibody against oxidativelly modified LDL in atherosclerotic lessions from a Watanabe heritable hyperlipidemie rabbits. Am. J. Pathol. 1989,135, 815-825.

37. Bradby GHV, Walton KW, Watts R. The binding of total low-density lipoproteins in human arterial intima affected and unaffected by atherosclerosis. Atherosclerosis. 1979;32, 403-422.

38. Brown MS, Goldstein JL, Krieger JM, Ho YK, Anderson RGW. Reversible accumulation of cholesteryl esters in macrophages incubated with acetylated lipoproteins. J Cell Biol. 1979;82, 597-613.

39. Brown MS, Basu SK, Falck JR, Ho YK, Goldstein JL. The scavenger cell pathway for lipoprotein degradation: specificity of the binding site that mediates the uptake of negatively-charged LDL by macrophages. J. Supramol. Struc. 1980; 13, 67-81.

40. Brown MS, and Goldstein JL. Lipoprotein metabolism in the macrophage: implications for cholesterol deposition in atherosclerosis. Annu. Rev. Biochem. 1983;52, 223-261.

41. Brown MS, Goldstein JL. A receptor-mediated pathway for cholesterol hemostasis. Science. 1986;232, 34-47.

42. Bruce RA, Hornsten TR. Exercise stress testing in evaluation of patients with ischemic heart disease. Prog. Cardiovasc. Dis. 1969; 11, 371-379.

43. Burton GW, Ignold KU. (1984) Beta-carotine: an unusual type of lipid antioxidant. Science. 1984; 224, 569-573.

44. Bowie A, Owens D, Collins P, Johnson A, Tomkin GH: Glycosylated low density lipoprotein is more sensitive to oxidation: implications for the diabetic patient? Atherosclerosis 1993; 102, 63-67.

45. Bowry VW, Stocker R. Tocopherol-mediated peroxidation. The prooxidant effect of vitamin E on the radical-initiated oxidation of human low-density lipoprotein. J Amer Chem Soc. 1992; 115, 6029-6044.

46. Bowry VW, Ignold KU, Stocker R. (1992) Vitamin E in human low density lipoprotein. When and how this antioxidant becomes a pro-oxidant. Biochem J. 1992,288, 341-344.

47. Camejo G. The interactions of lipids and lipoproteins with the intercellular matrix of arterial tissue: its possible role in atherogenesis. Adv Lipid Res. 1982; 19, 1-53.

48. Camejo G, Lopez A, Lopez F, Quinones J. Interaction of low density lipoproteins with arterial proteoglycans. The role of charge and sialic acid content. Atherosclerosis. 1985;55, 93-105.

49. Campeau L. Grading of agina pectories. Circulation. 1976;54, 522-523.

50. Cathcart MA, McNally AK, Morel DW, Chisolm GM, III. (1989) Superoxide anion perticipation in human monocyte-mediated oxidation of low-density lipoprotein to a toxin. J Immunol. 1989,142, 1963-1969.

51. Chait A, Brazg RL, Krauss RM. Increased oxidative susceptibility of LDL subfractions in subjects with the atherogenic lipoprotein phenotype. Arterioscler Thromb. 1991 ;11, 1425a.

52. Chappell DA, Fry GL, Waknitz MA, Berns JJ Ligand size as a determinant for catabolism by the low density lipoprotein (LDL) receptor pathway. A lattice model for LDL binding. J Biol Chem. 1991;266, 19296-302.

53. Chatterjee S, Kwiterowich PO, Jr. Glycosphigolipids and plasma lipoproteins: a review. Can J Biochem Cell Biol. 1984;62, 385-397.

54. Chen RM, Fisher-Dzoga K. Effect of hyperlipemic serum lipoproteins on the lipid accumulation and cholesterol flux of rabbit aortic medial cells. Atherosclerosis. 1977;28, 339-353.

55. Chiu HC, Jeng JR, Shieh SM: Increased oxidizability of plasma low density lipoprotein from patients with coronary artery disease. Biochim Biophys Acta. 1994; 1225, 200-208.

56. Clark DA, Foulds EL, Jr, Wilson FH, Jr: Effects og hydrogen peroxide on lipoproteins and associated lipids. Lipids. 1969;4,1-8.

57. Clevidence BA, Morton RE, West G, Dusek DM, Hoff JF: Cholesterol esterification in macrophages. Stimulation by lipoproteins containing apo B isolated from human aortas. Arteriosclerosis. 1983;4, 196-207.

58. Cookson FB. The origin of foam cells in atherosclerosis. Br J Exp Path. 1971;52, 62-69.

59. Cooper A, Hatton C, Sardharwalla IB. Acid (3-mannosidase of human plasma: influence of age and sex on enzyme activity. J Inherited Metab Dis. 1987; 10, 229-233.

60. Craig WY, Poulin SE, Nelson CP, Ritchie RF. ELISA of IgG antibody to oxidized low-density lipoprotein: effect of blocking buffer and method of data expression. Clin Chem. 1984;40, 882-890.

61. Dalferes ER, Jr, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Identification of fibronectin and laminin in glycoprotein extracts of human aorta. Artery. 1985; 13, 41-49.

62. Dartsch PC, Bauriedel G, Schinko I, WeissHD, hofling B, Betz E. Cell constitution and characteristics of human atherosclerotic plaques selectively removed by percutaneousatheroctomy. Atherosclerosis. 1989;80, 149-157.

63. Daugherty A, Zweifel BS, Sobel BE, Schonfeld G: Isolation of low density lipoprotein from atherosclerotic vascular tissue of Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. Arteriosclerosis. 1988;8, 768-777.

64. Dean R, Simpson J. Free radical damage to proteins and its role in the immune response. Molec Aspects Med. 1991; 12, 121-128.

65. De Graaf J, Hak-Lemmers HLM, Hectors MPC, Demacker PNM, Hendriks JCM, Stalenhoef AFH. Enhanced susceptibility to in vitro oxidation of the dense low density lipoprotein subtraction in healthy subjects. Arterioscler Thromb. 1991 ;11, 298-306.

66. Dejager S, Bruckert E, Chapman MJ. Dense low density lipoprotein subspecies with diminished oxidative resistance predominate in combined hyperlipidemia. J Lipid Res. 1993;34, 295-308.

67. Diment S, Leech MS, Stahl PD. Cathepsin D is membrane-associated in macrophage endosomes. J Biol Chem. 1988;263, 6901-6907.

68. Dixon WJ, Brown MB. Biomedical Computer Programs. P-Series, University of California Press, Berkeley. 1977, 185-203.

69. Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK, Rebers PA, Smith F. Colormetric method for determination of sugars and related substances. Anal Chem. 1956;28, 350-356.

70. Eber B, Schumacher M, Tatzber F, Kaufmann P, Luha O, Esterbauer H, Klein W. Autoantibodies to oxidized low density lipoproteins in restenosis following coronary angioplasy. Cardiology. 1994;84, 310-315.

71. Eisenberg S, Sehayek E, Olivecrona T, Vlodavsky I. Lipoprotein lipase enhances binding of lipoproteins to heparan sulfate on cell surface and extracellular matrix. J Clin Invest. 1992;90, 2013-2021.

72. Ehnholm C, Garoff H, Renkonen O, and Simons K. Protein and carbohydrate composition of Lp(a) lipoprotein from human plasma. Biochemistry. 1972;11, 32293232.

73. Esterbauer H, Jürgens G, Quehenberger O, Koller E. Autooxidation of human low density lipoprotein: loss of polyunsaturated fatty acids and vitamin E and generation of aldehydes. J Lipid Res. 1987;28, 495-509.

74. Esterbauer H, Striegl G, Puhl H, Rotheneder M. Continuous monitoring of in vitro oxidation of human low density lipoprotein. Free Radical Res Commun. 1989;6, 65-75.

75. Esterbauer H, Gebicki J, Puhl H, Jürgens G. The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL. Free Radcal Biol Med. 1992; 13, 341-390.

76. Falcone DJ, Mateo, N, Shio H, Minick CR, Fowler SD. Lipoprotein-heparin-fibronectin-denaturated collagen complexes enhance cholesteryl ester accumulation in macrophages. J Biol Chem. 1984;99, 1266-1274.

77. Farrell C, Bloth B, Nielson H. A survey for circulating immune complexes in patients with acute myocardial infarction. Scand J Immunol. 11977;6, 1233-1240.

78. Filipovic A, Schwarzmann G, Mraz W, Wiegandt H, Buddecke E. Sialic-acid content of low-density lipoproteins controls their binding and uptake by cultured cells. Eur J Biochem. 1979;93, 51-55.

79. Fisher WR. Heterogenity of piasma low density lipoproteins manifestations of the physiologic phenomenon in man. Metabolism. 1983;32, 283-291.

80. Fless GM, ZumMallen ME, Scanu .AM. Physicochemical properties of apolipoprotein(a) and apolipoprotein(a-) derived from the dissociation of human plasma lipoprotein(a). J Biol Chem. 1986;261, 8712-8716.

81. Fluckiger R. Glycosilation of lipoproteins: chemistry and biological implications. Monogr Atheroscler. 1985; 13, 53-62.

82. Fogelman AM, Shechter I, Seager J, Hokom M, Child JS, Edwards PA. Malondialdehyde alteration of low density lipoproteins leads to cholesteryl ester accumulation in human monocyte-macrophages. Proc Natl Acad Sci USA. 1980;77, 2214-2218.

83. Fogelman AM, Haberland ME, Seager J, Hokom M, Edwards PA.Factors regulating the activities of the low density lipoprotein receptor and the scavenger receptor on human monocyte-macrophages. J Lipid Res. 1981;22, 1131-1141.

84. Folch J, Lees M, Sloane-Stanley GH. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissue. J Biol Chem. 1957;226, 497-509.

85. Fong LG, Parthasarathy S, Witztum JL, Steinberg D. Nonenzymatic oxidative cleavage of peptide bonds in apoprotein B-100. J Lipid Res. 1987;28,1466-1477.

86. Fontaine M, Malmendier CL. Carbohydrate content of human VLDL, IDL, LDL and HDL plasma apolipoproteins from fasting normal and hyperlipemic patients.Clin Chim Acta. 1975;64, 91-93.

87. Fontaine M, Malmendier CL. Relationship between the carbohydrate content of lipoproteins of VLDL, IDL and LDL and the plasma level of these lipoproteins in man. Atherosclerosis. 1978;30, 285-292.

88. Foote CS, Denny RW. Chemistry of singlet oxygen VIII. Quenching of by beta-carotine. J Amer Chem Soc. 1968;90, 6233-6235.

89. Fowler SM, Scio MA, Haley NJ. Characterization of lipid-laden aortic cells from cholesterol rabbiits. IV. Investigation of macrophage-like properties of aortic cell populations. Lab Invest. 1979;41, 372-378.

90. Frei B, Kim C, Ames B. Ubiquinol-10 as an effective lipid-soluble antioxidant at physiological concentrations. Proc Natll Acad Sci USA. 1990/87, 4879-4883.

91. Fust G, Szekely J, Gero S. Circulating immune complexes in vascular disease. Lancet. 1977; 1, 193-194.

92. Fust G, Szondy E, Szekely J. Studies on the occurrence of circulating immune complexes in vascular diseases. Atherosclerosis. 1978;29, 181-190.

93. Gallagher PJ, Jones DB, Casey CR, Sharratt GP. Circulating immune complexes in cardiac disease. Atherosclerosis. 1982;44, 241-244.

94. Garner B, Dean RT, Jessup W. (1994) Human macrophages-mediated oxidation of low-density lipoprotein is delayd and independent of superoxide production. Biochem J, 1994; 301, 421-428.

95. Gerrity RG. The role of the monocyte in atherogenesis. II. Migration of foam cells from atherosclerotic lesions. Am J Pathol. 1981; 103, 191-200.

96. Gimbrone MA, Cotran RS, Folkman J. Human vascular endothelial cells in culture. Growth and DNA synthesis. J Cell Biol. 1974;60, 673-684.

97. Gofman JW, Young W, Tendy R. Ischemic heart disease, atherosclerosis, and longevity. Circulation. 1966;34, 679-697.

98. Goldstein JL, Hazzard WR, Schrott HG, Bierman EL, Motulsky AG. Hyperlipidemia in coronary heart disease. I. Lipid levels in 500 survivors of myocardial infarction. J Clin Invest. 1973;52, 1533-1543.

99. Goldstein JL, Anderson RGW, Buja LM, Basu SK, and Brown MS. Overloading human aortic smooth muscle cells with low density lipoprotein-cholesterol esters reproduced features of atherosclerosis in vitro. J Clin Invest. 1977;59, 1196-1202

100. Goldstein JL, Ho YK, Basu SK, Brown MS. Binding site of macrophages that mediates uptake and degradation od acetylated low-density lipoprotein, producing cholesterol deposition. Proc Natl Acad Sei USA. 1979;76, 333-337.

101. Goldstein JL, Basu SK, Brown MS. Receptor-mediated endocytosis of low-density lipoprotein in cultured cells.Methods Enzymol. 1983; 98, 241-260.

102. Guyton GR, Bocan TMA, Schifani TA. Ultrastructural localization of perifibrous lipid in grossly normal human aortic intima role of elastin. Fed. Proc. 1985;44, 1134.

103. Habeeb AFSA. Determination of free amino groups in proteins by trinitrobenzensulfonic acid. Anal Biochem. 1966; 14, 328-336.

104. Haberland ME, Fogelman AM, Edwards PA. Specificity of receptor-mediated recognition of malondialdehyde-modified low density lipoproteins. Proc Natl Acad Sei USA. 1982; 79, 1712-1716.

105. Haberland ME, Fogelman AM. The role of altered lipoproteins in the pathogenesis of atherosclerosis. Amer Heart J. 1987;259,11305-11311.

106. Haberland ME, Fong D, Cheng L. Malondialdehyde-altered protein occurs in atheroma of Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. Science. 1988;241, 215-218.

107. Hanson GK, Bonjers G, Nilsson L-A. Plasma protein accumulation in injured endothelial cells: Immunofluorescent localization of Ig and fibrinogen in the rabbit aortic endotelium. Exp Mol Pathol. 1979;30, 12-26.

108. Hanson GK, Bonjers G, Bylock A, Hjalmarsson L. Ultrastuctural studies of the localization of IgG in the aortic endothelium and subendothelial intima of atherosclerotic and nonatherosclerotic intima. Exp Mol Pathol. 1980;33, 302-315.

109. Hara A, Radin NS. Lipid extraction of tissue with low-toxicity solvent. Anal Biochem. 1978;90,420-426.

110. Hardy MR, Townsend RR, Lee YC. Monosaccharide analysis of glycoconjugates by anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection. Anal Biochem. 1988; 170, 54-62.

111. Hashim SA, Schuttringer GM. Rapid determination of tocopherol in macro and microquantites of plasma. Am J Clin Nutr. 1966; 19, 137-147.

112. Haust MD. Light and electron microscopy of human atherosclerosis lessions. Adv Exp Med Biol. 1978; 104, 33-59.

113. Hazel LJ, Stocker R: Oxidation of low-density lipoprotein with hypochlorite causes aggregation that is mediated by modification of lysine residues rather than lipid oxidation. Biochem J. 1994;302,165-172.

114. Heinecke JW, Baker L, Rosen H, Chait A. Superoxide-mediated modification of low density lipoprotein by arterial smooth muscle cells. J Clin Invest. 1986;77, 757-764.

115. Henricksen T, Mahoney EM, Steinberg D. Enhanced macrophage degradation of biologically modified low density lipoprotein. Atherosclerosis. 1983;4, 357-364.

116. Hiramatsu K, Rosen H, Heinecke JW, Wolfbauer G, Chait A. Superoxide initiates oxidation of low density lipoprotein by human monocytes. Arteriosclerosis. 1987;7, 5560.

117. Hoff HF, Gaubatz JW. Ultrastructural localization of plasma lipoproteins in human intracranial arteries. Virchows Arch A Pathol Anat Histol. 1975;363, 111-121.

118. Hoff HF, Heideman CI, Gaubatz JW, Scott DW, Gotto AM. Detergent extraction of tightly bound apo-B from extracts of normal aortic intima and plaques. Exp Mol Pathol. 1978;28, 290-300.

119. Hoff HF, Bradley WA, Heideman CL, Gaubatz JW, Karagas MD, Gotto AM Jr: Characterization of low density lipoprotein-like particle in the human aorta from grossly normal and atherosclerotic regions. Biochim Biophys Acta. 1979,573, 361374.

120. Hoff HF, O'Neil J. Lesion-derived low density lipoprotein and oxidized low density lipoprotein share a lability for aggregation, leading to enhanced macrophage degradation. Arterioscler Thromb. 1991;11, 1209-1222.

121. Jaakkola 0, Solakivi T, Yla-Hertuala S, Nikkari T. Receptor-mediated binding and degradation of subfractions of human plasma low-density lipoprotein by cultured fibroblasts. Biochim Biophys Acta. 1989; 1005, 118-122.

122. Jaakkola O, Solakivi T, Tertov W, Orekhov AN, Miettinen TA, Nikkari T: Characteristics of low-density lipoprotein subfractions from patients with coronary artery disease. Coron Artery Dis. 1993;4, 379-385.

123. Jensen BA, Holund B, Clemmensen I. Demonstration of fibronectin in normal and injured aorta by an indirect immunoperoxidase technique. Histochemistry. 1983;77, 395-403.

124. Jessup W, Rankin SM, De Whalley CV, Hoult JRS, Scott J, Leake DS. a-Tocopherol consumption during low-density lipoprotein oxidation. Biochem J. 1990;265, 399-405.

125. Jessup W, Mander EL, Dean RT. The intracellular storage and turnover of apolipoprotein B of oxidized LDL in macrophages. Biochim Biophys Acta ,1992;1126, 167-177.

126. Johnson DC, Polta TZ. Amperometric detection in liquid chromatography with pulsed cleaning and reaction of nobble metal electrodes. Chromatogr Forum. 1986; 1,.37-44.

127. Jurgens G, Lang J, Esterbauer H. Modification of human low density lipoprotein by the lipid peroxidation product 4-hydroxynonenal. Biochem Biophys Acta. 1986; 875, 103114.

128. Jurukova Z. Cytomorphology of atherosclerosis: smooth muscle cells in formation and regression of atherosclerotic lesions. Zentralbl Allg Pathol. 1989;135, 599-606.

129. Kacharava AG, Tertov W, Orekhov AN. Autoantibodies against low-density lipoprotein and atherogenic potential of blood. Ann Med. 1993;25,551-555.

130. Kacharava A.G., Tertov V.V., Orekhov A.N. Low density lipoprotein and atherogenic potential of blood: effect of lovastatin and low-density lipoprotein apheresis. Cardiol. Elderly.-1993,-Vol. 1,- P. 203-207

131. Kagan V, Serbinova E, Packer L. Antioxidant effects of ubiquinone-10s in microsomes and mitochondria are mediated by tocopherol recycling. Biochem Biophys Res Commun. 1990; 169, 851-857.

132. Kawabe Y, Cynshi O, Takashima Y, Suzuki T, Ohba Y, Kodama T. Oxidation induced aggregation of rabbit low-density lipoprotein by azo initiator. Arch Biochem Biophys. 1994;310, 489-486.

133. Kielian MC, Cohn ZA. Intralysosomal accumulation of polyanions. II. Polyanion internalization and its influence on lysosomal pH and membrane fluidity. J Cell Biol. 1982;93, 875-882.

134. Kirschke H, Langner J, Wiederanders B, Ansorge S, Bohley P, Broghammer U. Cathepsin, L. A new proteinase from rat liver lysosomes. Eur J Biochem. 1977;74, 293300.

135. Kleinman Y, Eisenberg S, Oschry Y, Gavish D, Stein O, Stein Y: Defective metabolism of hypertriglyceridemic low density lipoprotein in cultured human skin fibroblasts. Mormalization with bezafibrate therapy. J Clin Invest. 1985;75, 1796-1803.

136. Klimov AN, Denisenko AD, Popov AV, Nagornev VA, Pleskov VM, Vinogradov AG, Denisenko TV, Magracheva EYa, Kheifes GM, Kuznetzov AS. Lipoprotein-antibody immune complexes: Their catabolism and role in foam cell formation. Atherosclerosis. 1985;58, 1-15.

137. Klimov AN, Denisenko AD, Vinogradov AG, Nagornev VA, Pivovarova Yl, Sitnikova OD, Pleskov VM. Accumulation of cholesteryl esters in macrophages incubated with human-antibody autoimmune complexes. Atherosclerosis. 1988;74, 41-46.

138. Kokkonen JO, Kovanen PT. Proteolytic enzymed of mast cells granules degrade low density lipoprotein and promote their granule-mediated uptake by macrophage in vitro. J Biol Chem. 1989;264, 10749-10755.

139. Konarska R, Shaikh M, La Ville A. Immunoglobulins containing circulating immune complexes in hypercholesterolaemic patients. Atherosclerosis. 1986;60, 89-91.

140. Kontush A, Huebner C, Finckh B, Kohlschuetter A, Beisiegel U. Low density lipoprotein oxidizability by cooper correlates to its initial ubiquinol-10 and polyunsaturated fatty acid content. FEBS Lett. 1994;341, 69-73.

141. Kontush A, Huebner C, Finckh B, Kohlschuetter A, Beisiegel U. How different constituents of low density lipoprotein determine its oxidizability by copper: a correlation approach. Free Radical Res. 1996; 24, 135-147.

142. Kosykh VA, Preobrazhenski SN, Fuki IV, Zaikina OE, Tsibulski VP, Repin VS, Smirnov VN. Cholesterol can stimulate secretion of apoB by cultural human hepatocytes. Biochem Biophys Acta. 1985;836, 385-395.

143. Koteliansky VE, Glukhova MA, Bejanian MV, Smirnov VN, Filimonov W, Zalite OM, Venyaminov SYu. A study of the structure of fibronectin. Eur J Biochem. 1981,119, 619-624.

144. Kramsch DM, Franzblau C, Hollander W. The protein and lipid composition of arterial elastin and its relationship to lipid accumulation in the atherosclerotic plaque. J Clin Invest. 1971;50, 1666-1677.

145. Kramsch DM, Hollander W. The interaction of serum and arterial lipoproteins with elastin of the arterial intima and its role in the lipid accumulation in atherosclerotic plaques. J Clin Invest. 1973;52, 236-247.

146. Krauss RM, Burke DJ. Identification of multiple subclasses of plasma low density lipoproteins in normal humans. J Lipid Res. 1982;23, 97-104.

147. Kruth HS, Skarlatos SI, Lilly K, Chang J, Ifrim I. sequestration of acetylated LDL and cholesterol crystals by human monocyte-derived macrophages. J Cell Biol. 1995; 129, 133-145.

148. Kundu SK, Diego I, Osovitz SS, Marcus DM. Glycosphingolipids of human plasma. Arch Biochem Biophys. 1985;238, 388-400.

149. Kwiterovich P, Bachorik P, Simon A. Isolation and partial characterization of the glycopeptides from human plasma low density lipoproteins, Circ. Suppl III. 1974.Vois. 49 &50, Abst. 1032:267.

150. Maebe R, Shimasaki H, Ueta N. Conformational changes in oxidized LDL recognized by mouse peritonei macrophages. Biochim Biophys Acta. 1994; 1215, 79-86.

151. Maggi E, Bellazzi R, Gazo A, Seccia M, Bellomo G. Autoantibodies against oxidatively-modified LDL in uremic patients undergoing dialysis. Kidney Intern. 1994;46, 869-876.

152. Mahley RW, Innerarity TL, Weisgraber KH, Oh SY. Altered metabolism (in vivo and in vitro) of plasma lipoproteins after selective modification of lysine residues of the apoproteins. J Clin Invest. 1979;64, 743-750.

153. Marshall WE, Kummerow FA. The carbohydrate constituents of human serum-lipoprotein: galactose, mannose, glucosamine, and sialic acid. Arch Biochem Biophys. 1962;98, 271-273.

154. Meindl P, Bodo G, Palese P, Schulman J, Tuppy H. Inhibition of neraminidase activity by derivatives of 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid. Virology. 1974;58, 457463.

155. Mellors A, Tappel AL. The inhibition of mitochondrial peroxidation by ubiquinone-10 and ubiquinol-10. J Biol Chem. 1966;241, 4353-4356.

156. Melnic BC, Melnic SF. Analytical isoelectric focusing of apolipoprotein B of human plasma low density lipoproteins in the presence of a nonionic and a zwitterionic detergent. Anal Biochem. 1988; 171, 320-329.

157. Morton RE, West GA, Hoff HF: A low density lipoprotein-sized particle isolated from human atherosclerotic lesions is internalized by macrophages via a non scavenger-receptor mechanism. J Lipid Res. 1986;27,1124-1134.

158. Mu J-Z, Tang L-H, Alpers DH. Asialoglycoprotein receptor mRNAs are expressed in most extrahepatic rat tissues during development. Am J Physiol. 1993;264, G752-G762.

159. Mukai K, Itoh S, Morimota H. Stopped-flow kinetic study of vitamin E regeneration reaction with biological hydroquinones (reduced forms of ubiquinone-10, vitamin K and tocopherolquinone) in solution. J Biol Chem. 1992; 267, 22277-22281.

160. Nagai T, Miyaichi Y, Tomimori T, Yamada H. Inhibition of mouse liver sialidase by plant flavanoids. Biochem Biophys Res Commun 1989; 163, 25-32.

161. Nagamura Y, Kolb H. Presence of a lectin-like receptor for D-galactose on rat peritoneal macrophages. FEBS Lett. 1983; 157, 253-256.

162. Natali PG, Galloway D, Nicotra MR, DeMartino C. Topographic association of fibronectin with elastic fibers in the arterial wall. An immunohistochemical study. Conn Tiss Res. 1987,8, 199-204.

163. Niculescu F, Rus H, Cristea A. Localization of the terminal C5b-9 complement complex in the human aortic atherosclerotic wall. Immunol. Lett. 1985; 10, 109-114.

164. Niculescu F, Rus HG, Vlaicu R. Immunohistochemical localization of C5b-9, S-protein, C3d and apolipoprotein B in human arterial tissues with atherosclerosis. Atherosclerosis. 1987;65: 1-11.

165. Nigon F, Lesnik P, Rouis M, Chapman MJ. Discrete subspecies of human low density lipoproteins are heterogeneous in their interactionwith the cellular LDL receptor. J Lipid Res. 1991 ;32, 1741-1453.

166. Nishida EG, Kummerow FA. Interaction of serum lipoproteins with the hydroperoxide of methyl linoleate. J Lipid Res. 1960;1, 450-458.

167. Noma A, Takahashi T, Wada T. Elastin- lipid interaction in the arterial wall. Part 2. In vitro binding of lipoprotein-lipids to arterial elastin and inhibitory effect of high density lipoprotein. Atherosclerosis. 1981;38, 373-382.

168. Noma A, Hirayama T, Yachi A. Inhibitory effect of high density lipoprotein subfraction on the in vitro binding of low density lipoproteins to arterial elastin. Atherosclerosis. 1983;49, 171-175.

169. Noma A, Hirayama T, Yachi A. Studies on the binding of plasma low density lipoproteins to arterial elastin. Connect Tissue Res. 1983;11, 123-133.

170. Obunike JC, Edwards IJ, Rumsey SC, Curtiss LK, Wagner WD, Deckelbaum RJ, Goldberg IJ. Cellular differences in lipoprotein lipase-mediated uptake of low density lipoproteins. J Biol Chem. 1994;269, 13129-13135.

171. Orekhov AN, Andreeva ER, Shekhonin BV, Tertov W, Smirnov VN. Content and localization of fibronectin in normal intima, atherosclerotic plaque, and under lying media of human aorta. Atherosclerosis. 1984;53, 213-219.

172. Orekhov AN, Tertov W, Kudryashov SA, Smirnov VN: Triggerlike stimulation of cholesterol accumulation and DNA and extracellular matrix synthesis induced by atherogenic serum or low density lipoprotein in cultured cells. Circ Res. 1990;66, 311320.

173. Orekhov AN, Tertov W, Mukhin DN. Desialylated low density lipoprotein naturally occurring lipoprotein with atherogenic potency. Atherosclerosis. 1991;86, 153-161.

174. Orekhov AN, Tertov W, Kabakov AE, Adamova lYu, Pokrovsky SN, Smirnov VN: Autoantibodies against modified low density lipoprotein. Nonlipid factor of blood plasma that stimulates foam cell formation. Arterioscler Thromb. 1991;11, 316-326.

175. Orekhov AN, Kalenich OS, Tertov W, Novikov ID. Lipoprotein immune complexes as markers of atherosclerosis. Int J Tissue React. 1991; 13, 233-236.

176. Orekhov A.N., Tertov V.V. Atherogenicity of autoantibodies against low density lipoprotein. Agents and Actions.-1991,- Vol. 32,- P. 128-129

177. Orekhov A.N., Kalenich O.S., Tertov V.V., Perova N.V., Novikov I.D., Lyakishev A.A., Deev A.D., Ruda M.Ya. Diagnostic value of immune cholesterol as a marker for atherosclerosis // J. Cardiovasc. Risk.- 1995,-Vol. 2,- P. 459-466

178. Palinski W, Rosenfeld ME, Yla-Herttuala S, Gurtner GC, Socher SS, Butler SW, Parthasarathy S, Carew TE, Steinberg D. Low density lipoprotein undergoes oxidative modification in vivo. Proc Natl Acad Sei USA. 1989;86, 1372-1376.

179. Panasenko JV, Volnova TV, Azizova OA, Vladimirov YA. Free radical modification of lipoproteins and cholesterol accumulation in cells upon atherosclerosis. Free Rad Biol Med. 1991; 10, 137-148.

180. Parthasarathy S, Steinbrecher UP, Barnett J, Witztum SL, Steinbrecher D. Essential role of phospholipase A2 activity in endothelial cell-induced modification of low density lipoprotein. Proc Natl Acad Sei USA. 1985;82, 3000-3005.

181. Parthasarathy S, Carew TE, Steinberg D, Witztum JL: Low density lipoprotein undergoes oxidative modification in vivo. Proc Natl Acad Sei USA. 1989;86, 13721376.

182. Parums O, Mitchinson MJ. Demonstration of immunoglobulin in the neighbourhood of advanced atherosclerotic plaques. Atherosclerosis. 1981;38, 211-216.

183. Pearson JD. Lipid metabolism in cultured aortic smooth muscle cells and comparison with other cell types. II. Reversibility of lipid accumulation caused by hyperlipemic serum. Atherosclerosis. 1976;25, 205-212.

184. Petrusevich YuM, Slavinsky YuS. Electrochemiluminescent technique for determining the activity of bioantioxidants in the system citrate-methanol. Biophysika. 1969; 14, 750752.

185. Rankin SM, Knowles ME, Leake DS. Macrophages possess both neutral and acidic protease activities toward low density lipoproteins. Atherosclerosis. 1989;79, 71-78.

186. Regnstrom J, Nilsson J, Tornvall P, Landou C, Hamsten A: Susceptibility to low-density lipoprotein oxidation and coronary atherosclerosis in man. Lancet. 1992; 339, 1183-1186.

187. Rodriguez-Iturbe B, Katiyar VN, Coello J. Neuraminidase activity and free sialic acid levels in the serum of patients with acute poststreptococcal glomerulonephritis. New Engl J Med. 1981;304, 1506-1510.

188. Rose GA, Blackburn H. Cardiovscular survey methods. WHO, Geneva. 1968, pp. 82109.

189. Ross R, Harker L. Hyperlipidemia and atherosclerosis. Science. 1976; 193, 1094-1100.

190. Smith E, Slater RS. Relationship between low density lipoprotein in aortic intima and serum lipid levels. Lancet. 1972; 1;463.

191. Salisbury BGJ, Falcone DJ, Minick CR. Insoluble low-density lipoprotein-proteoglycan complexes enhance cholesteryl ester accumulation in macrophages. Am J Pathol. 1985; 120, 6-11.

192. Salonen JT, Yla-Herttuala S, Yamamoto R, Butler S, Korpela H, Salonen R, Nyyssonen K, Palinski W, Witztum JL. Autoantibody against oxidised LDL and progression of carotid atherosclerosis. Lancet. 1992;339, 883-887.

193. Sato K, Niki E, Shimasaki H. Free radical-mediated chain oxidation of low density lipoprotein and its synergistic inhibition by vitamin E and vitamin C. Arch Biochem Biophys. 1990;279, 402-405.

194. Saxena U, Klein MG, Vanni TM, Goldberg IJ. Lipoprotein lipase increases low density lipoprotein retention by subendothelial cell matrix. J Clin Invest. 1992;89, 373-380.

195. Scarlatos SI, Rao R, Kruth HS. Accelerated development of human monocyte macrophages cultured on plastek-C tissue culture dishes. J Tiss Cult Meth. 1992; 14, 113-118.

196. Sevanian A, Hwang J, Hodis H, Cazzolato G, Avogaro P, Bittolo-Bon G. Contribution of an in vivo oxidized LDL to LDL oxidation aand its association with dense LDL subpopulations. Arterioscler Thromb Vase Biol. 1996; 16, 784-793.

197. Shaikh M, Martini S, Quiney JR, Baskerville P, LaVille AE, Browse NL, Duffield R, Turner PR, Lewis B: Modified plasma-derived lipoproteins in human atherosclerotic plaque. Atherosclerosis. 1988;69, 165-172.

198. Schauer R. Chemistry, metabolism and biology function of sialc acids. Adv Carbohydr Chem Biochem. 1982;40, 131 -234.

199. Schechter I, Fogelman AM, Haberland, Seager S, Hokom M, Edwards PA. The metabolism of native and malondialdehyde-altered low density lipoproteins by human monocyte-macrophages. J Lipid Res. 1981 ;22, 63-74.

200. Scheperd JH, Bedfort DK, Morgan HG. Radioiodination of human low density lipoprotein: a comparison of four methods. Clin chim Acta. 1976;66, 97-109.

201. Schuh J, Fairclough GF, Haschemeyer RH: Oxygen-mediated heterogeneity of apo-low-density lipoprotein. Proc Natl Acad Sei USA. 1978;75, 3173-3177.

202. Schultze HE, Heide K. 1960. Carbohydrate content of different blood components, Med Grundlogenforsch. 1960;3, 357.

203. Senn H-J, Orth M, Fitzke E, Wieland H, Gerok W. Gangliosides in normal human serum. Concentration, pattern and transport by lipoproteins. Eur J Biochem. 1989; 181,657-662.

204. Shen MMS, Krauss RM, Lindgren FT, Forte TM. Heterogeneity of serum low density lipoproteins in normal human subjects. J Lipid Res. 1981;22, 236-244.

205. Shierman RB, Fisher WR. The absence of a role for the carbohydrate moiety in the binding of apolipoprotein B to the low density lipoprotein receptor. Biochem Biophys Acta. 1979;572, 537-540.

206. Shimano N, Yamada N, Isibashi S, Mokuno H, Mori N, Gotoda T, Harada K, Akanuma Y, Murase T, Takaku F. Oxidation-labile subtraction of human plasma low density lipoprotein isolated by ion-exchange chromatography. J Lipid Res. 1991 ;32, 763-773.

207. Silver IA, Murrils RJ, Ethrington DJ. Microelectrode studies on the acid microenvironment beneath adherent macrophages and osteoclasts. Exp Cell Res. 1988; 175, 266-267.

208. Simpson CF. Phagocytosisi by artic modified smooth muscle cells. Artery. 1977;3, 210218.

209. Smith EB. The relationship between plasma and tissue lipids in human atherosclerosis. Adv Lipid Res. 1974; 12, 1-49.

210. Smith EB, Ashall C. Fibronectin distribution in human aortic intima and atherosclerotic lesions: concentration of soluble and collagenase-releasable fractions. Biochim Biophys Acta. 1986;880, 10-15.

211. Sobenin IA, Tertov W, Koschinsky T, Bunting CE, Slavina ES, Dedov II, Orekhov AN. Modified low density lipoprotein from diabetic patients causes cholesterol accumulation in human intimal aortic cells. Atherosclerosis. 1993; 100, 41-54.

212. Srinivasan SR, Lopez SA, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Complexing of serum pre-beta and beta-lipoproteins and acid mucopolysaccharides. Atherosclerosis. 1970; 12, 321-334.

213. Srinivasan SR, Dolan P, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Isolation of lipoprotein-acid mucopolysaccharide complexes from fatty streaks of human aortas. Atherosclerosis. 1972; 16: 95-104.

214. Srinivasan SR, Radhakrishnamurthy B, Pargaonkar PS, Berenson GS. Lipoprotein-acid mucopolysaccharide complexes of human atherosclerotic lesions. Biochim BiophysActa. 1975;388, 58-70.

215. St. Clair RW. Metabolism of the arterial wall and atherosclerosis. In: Atherosclerosis Reviews. 1975. Vol. 1. R. Paoletti and A.M. Gotto, editors. Raven Press, New York. 61-117.

216. StClair RW, Leight MA. Differential effects of isolated lipoproteins from normal and hypercholesterolemic rhesus monkeys on cholesterol esterification and accumulation in arterial smooth muscle cells in culture. Biochim Biophys Acta. 1978,530, 279-291.

217. Steinberg D, Parthasarathy S, Carew TE, Khoo J, Witztum J. Beyond cholesterol: modifications of low density lipoprotein that increase its atherogenicity. N Engl J Med. 1989; 320, 915-924.

218. Steinbrecher UP, Witztum JL, Parthasarathy S, Steinberg D. Decrease in reactive amino groups during oxidation or endothelial cell modification of LDL: correlation with changes in receptor-mediated catabolism. Arteriosclerosis. 1987;1, 135-143.

219. Steinbrecher UP. Role of superoxide in endothelial-cell modification of low-density lipoprotein. Biochim BiophysActa. 1988;959, 20-30.

220. Steinbrecher UP, Lougheed M. Scavenger receptor-independent stimulation of cholesterol esterification in macrophages by low density lipoprotein extracted from human aortic intima. Arterioscler Thromb. 1992; 12, 608-625.

221. Stocker R, Bowry VW, Frei B. Ubiquinol-10 protects human low density lipoprotein more efficiently against lipid peroxidation than does a-tocopherol. Proc Natl Acad Sei USA. 1991; 88, 1646-1650.

222. Suits AG, Chait A, Aviram M, Heinecke JW. Phagocytosis of aggregated lipoprotein by macrophages: low density lipoprotein receptor-dependent foam-cell formation. Proc Natl Acad Sei USA. 1989;86, 2713-2717/

223. Svennerholm L. The quantitative estimating of cerebrosides in nervous tissue. J Neurochem. 1956; 1, 42-53.

224. Swaminathan, N., and F. Aladjem. The monosaccharide composition and sequence of the carbohydrate moiety of human serum low density lipoproteins, Biochemistry. 1976; 19, 1516-1522.

225. Swinkels DW, Demacker PNM, Hendriks JCV, van't Laar A. Low density lipoprotein subfractions and relationship to other risk factors for coronary artery disease in healthy individuals. Arteriosclerosis. 1989;9, 640-613.

226. Szondy E, Horvath M, Mezey Z, Szekely J, Lengyel E, Fust G, Gero S. Free and complexed anti-lipoprotein antibodies in vascular diseases. Atherosclerosis. 1983;49, 66-77.

227. Tabas I, Lim S, Xu X-X, Maxfeld FR. Endocytosed ß-VLVD and LDL are delivered to different intracellular vesicles in mouse peritoneal macrophages. J Cell Biol. 1990;111, 929-940.

228. Taniguchi T, Ishikawa Y, Tsunemitsu M, Fukuzaki H. 1989. The structures of the asparagine-linked sugar chains of human apolipoprotein B-100. Arch Biochem Biophys. 1989,273, 197-205.

229. Taniguchi T, Ishikava Y, Tsunemitsu M, Asaoka Y, Matsumoto K, Fukuzaki H. Stimulation of cholesteryl ester synthesis in human monocite-derived macrophages by asialo low density lipoproteins. Arteriosclerosis. 1989;9, 767a.

230. Teng B, Sniderman A, Krauss RM, Kwiterovich PO Jr, Milne RW, Marcel YL. Modulation of apolipoprotein B antigenic determinants in human low density lipoprotein subclasses. J Biol Chem. 1985;260, 5067-5072.

231. Tertov W, Orekhov AN, Martsenyuk ON, Perova NV, Smirnov VN. Low density lipoproteins isolated from the blood of patients with coronary heart disease induce the accumulation of lipids in human aortic cells. Exp Mol Pathol. 1989;50, 337-347.

232. Tertov W, Sobenin IA, Gabbasov ZA, Popov EG, Orekhov AN. Lipoprotein aggregation as an essential condition of intracellular lipid caused by modified low density lipoproteins. Biochem Biophys Res Commun. 1989; 163, 489-494.

233. Tertov W, Orekhov AN, Kacharava AG, Sobenin IA, Perova NV, Smirnov VN. Low density lipoprotein-containing circulating immune complexes and coronary atherosclerosis. Exp Mol Pathol. 1990;52, 300-308.

234. Tertov W, Sobenin IA, Gabbasov ZA, Popov EG, Yaroslavov AA, Smirnov VN, Orekhov AN. Three types of naturally occuring modified lipoproteins induce intracellular lipid accumulation due to lipoprotein aggregation. Circ Res. 1992;71, 218228.

235. Tertov W, Sobenin IA, Orekhov AN. Modified (desialylated) low-density-lipoprotein measured in serum by lectin-sorbent assay. Clin Chem. 1995;41, 1018-1021.

236. Tertov W, Kaplun W, Dvoryantsev SN, Orekhov AN. Apolipoprotein B-bound lipids as a marker for evaluation of low density lipoprotein oxidation in vivo. Biochem Biophys Res Commun. 1995; 214, 608-613.

237. Tertov W, Sobenin IA, Orekhov AN. Similarity between naturally occurring modified, electronegative and aortic low density lipoprotein. Free Radical Res. 1996;25, 313-319.

238. Tokita K, Kanno K, Ikeda K. Elastin sub-fraction as binding site for lipids. Atherosclerosis. 1977;28, 111-119.

239. Traber MG, Defendi V, Kayden HJ. Receptor activities for low-density lipoprotein and acetylated low-density lipoprotein in a mouse macrophage cell line (IC21) and in human monocyte-derived macrophages. J Exp Med. 1981; 154, 1852-1867.

240. Tribble DL, Holl LG, Wood PD, Krauss RM. Variation in oxidative susceptibility among six low density lipoprotein subfractions of different density and particle size. Atherosclerosis. 1992;93, 189-199.

241. Tribble DL, van den Berg JJM, Motchnik PA, Ames BN, Lewis DM, Chait A, and Kraus RM. Oxidative susceptibility of low density lipoprotein subfractions is related to their ubiquinol-10 and a-tocopherol content. Proc Natl Acad Sei USA. 1994;91,1183-1187.

242. Van Der Bijl P. Human serum low density lipoproteins: carbohydrate composition in health and disease. In Protides of the Biological Fluids. Pergamon Press, 1974. Oxford, 309-314.

243. Van der Bijl P, Reman FC. Human very low density lipoproteins: loss of electrophoretic mobility on enzymatic removal of sialic acid residues. Clin Chim. Acta. 1975;60, 191-195.

244. Van der Westhuyzen DR, Gevers W, Coetzee GA. Cathepsin-D-dependent initiation of the hydrolysis by lysosomal enzymes of apoprotein B from low density lipoprotein. Eur J Biochem. 1980,112, 153-160.

245. Van Lenten BJ, Fogelman AM, Hokom MM, Benson L, Haberland ME, Edwards PA. Regulation of the uptake and degradation of ß-VLDL in human monocyte-macrophages. J Biol Chem. 1983; 258, 5151-5157.

246. Vaskovsky VE, Kostetsky EY, Vasendin IM. A universal reagent for phospholipid analysis. J Chromatogr. 1975; 114,129-141.

247. Vauhkonen M, Viitala J, Parkkinen J, Rauvala H. High-mannose structure of apolipoprotein-B from low-density lipoproteins of human plasma. Eur J Biochem. 1985; 152, 43-50.

248. Veh RW, Corfield AP, Sander M, Schauer R. Neuraminic acid-specific modification and tritium labelling of gangliosides. Biochim Biophys Acta. 1977;486, 145-160.

249. Vijayagopal P, Radhakrishnamurthy B, Srinivasan SR, Berenson GS. Studies of biologic properties of proteoglycans from bovine aorta. Lab Invest. 1980;42, 190-196.

250. Vijayagopal P, Srinivasan SR, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Interaction of serum lipoproteins and a proteoglycans from bovine aorta. J Biol Chem. 1981 ;256, 8234-8241.

251. Vijayagopal P, Srinivasan SR, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Hemostatic properties and serum lipoprotein binding of a heparan sulfate proteoglycan from bovine aorta. Biochim Biophys Acta. 1983;758, 70-83.

252. Vlaicu R. Rus HG, Niculescu F, Cristea A. Immunoglobulins and complement components in human aortic atherosclerotic intima. Atherosclerosis. 1985;55, 35-50.

253. Wallenstein S, Zucker CL, Fleisss JL. Some statistical methods useful in circulation research. Circ Res. 1980;47, 1-49.

254. Walton KW, Morris CJ. Studies on the passage of plasma proteins across arterial endothelium in relation to atherogenesis. Prog Biochem Pharmacol. 1977;14, 138152.

255. Wagner JR, Motchnic PA, Stocker R, Sies H, Ames BN. The oxidation of blood plasma and low density lipoprotein components by chemically generated singlet oxygen. J Biol Chem. 1993;268, 18502-18506.

256. Warren L. The thiobarbituric acid assay of sialic acids. J Biol Chem. 1959;234, 19711975.

257. Weisgraber KH, Innerarity TL, Mahley RW. Role of the lysine residues of plasma lipoproteins in high affinity binding to cell surface receptors on human fibroblasts. J Biol Chem. 1978;253, 9053-9062.

258. Winlove CP, Parker KH, Ewins AR. Reversible and irreversible interactions between elastin and plasma lipoproteins. Biochim Biophys Acta. 1985;838, 374-380.

259. Wissler RW, Vesselinovitch D, Getz GS. Abnormalities of therterial wall and its metabolism in atherogenesis. Prog Cardiovasc Dis. 1976; 18, 341-352.

260. Woodard JF, Srinivasan SR, Zimny ML, Radhakrishnamurthy B, Berenson GS. Electron microscopic features of lipoprotein-glycosaminoglycan complexes from human atherosclerotic plaques. Lab Invest. 1976;34, 516-521.

261. Woolen JW, Walker PG. The fluorimetric estimation of N-acetyl-p-glucosaminidase and p-galactosidase in blood plasma, Clin. Chim. Acta. 1965; 12, 647-658.

262. Yagi K. Lipid peroxidation. Assay for blood plasma and serum. Methods Enzymolol. 1984; 105, 328-342.

263. Yamamoto Y, Brodsky MH, Baker JC, Ames BN. Detection and characterization of lipid hydroperoxides at pikomole levels by high-performance liquid chromatography. Anal Biochem. 1987;160, 7-13.

264. Ziouzenkova O, Winlhofer-Roob BM, Puhl H, Roob JM, Esterbauer H. Lack of correlation between the a-tocopherol content of plasma and LDL, but high correlations for y-tocopherol and carotenoids. J Lipid Res. 1996;37, 1936-1946.