Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц в племенных хозяйствах

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц в племенных хозяйствах"

На правах.{5укописи

Смирнов Дмитрий Дмитриевич

Комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц в племенных хозяйствах

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Санкт-Петербург - 2011

4844301

Работа выполнена в отделе микробиологии Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства» Россельхозакадемии (ГНУ «ВНИВИП» Россельхозакадемии)

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Придыбайло Николай Дмитриевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Алиев Алаутдин Ссражутдинович

кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Забровская Анна Владиленовна

Ведущая организация: ФГУ «Федеральный центр охраны

здоровья животных»

Защита диссертации состоится « У\ » мая 2011 г. в Пчасов на заседании диссертационного совета Д 220.059.03 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины» но адресу: 196084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская д.5, тел/факс (812) 3883631.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины» Автореферат разослан « 09 »апреля 2011 г. и размещен на сайте академии (http://spbgavrn.ru ) «08 » апреля 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Л. М. Белова

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Среди инфекционных болезней птицы по данным Росптицесоюза за последние годы более 60% составляют болезни бактериальной этиологии. При этом отмечается возрастание роли микроорганизмов, являющихся возбудителями проблемных для птицехозяйств болезней: колибактериоза, сальмонеллеза, стафилококкоза и др. (Венгсренко Л.А.,2009).

Сальмонеллёз птиц независимо от серовариапта возбудителя, вызвавшего его, причиняет значительный социально-экономический ущерб. Он слагается из снижения яйценоскости кур-несушек, количества оплодотворенных яиц, высокой летальности эмбрионов, потери привесов молодняка, значительных затрат на диагностические и лечебно-профилактические мероприятия (Борисенкова Л.Н. и др., 2008), а также возникновения пищевых токсикоинфекций у людей, часто с летальным исходом, особенно у детей и лиц престарелого возраста (Кафтырева Л.А. и др.2008).

Важным моментом в организации борьбы с сальмонеллёзной инфекцией на птицеводческом предприятии является систематический мониторинг бактериальных патогенов среди больной и павшей птицы, который позволяет регистрировать возможное заражение возбудителем сальмонеллеза у птицы, определять оптимальные схемы применения антимикробных средств, пробиотиков и бактериофагов, а также специфической профилактики и своевременно организовывать необходимые противоэпизоотические мероприятия в хозяйстве (Гусев В. и др.,2003; Афошошкин В. и др., 2008; Рождественская Т.Н„2009).

В связи с тем, что сальмонеллы обладают лекарственной устойчивостью ко многим антибиотикам, ВОЗ не рекомендует широко использовать их в борьбе с инфекцией, а в комплексе мер применять специфическую I профилактику. Требования к вакцинным штаммам, изготовлению, валидации |

и испытанию эффективности вакцин изложены в Руководстве МЭБ по диагностическим тестам и вакцинам для сухопутных животных (млекопитающих, птиц и пчел). Вышеуказанным требованиям отвечает инактивированная бивалентная вакцина «СальмАбик» против сальмонеллеза птиц, производства «Абик биологические препараты, Лтд.», а с 2009 г. компании « Фибро» (США), зарегистрированной в Российской Федерации.

Цель и задачи исследований - профилактика с помощью инактивированной бивалентной вакцины против сальмонеллеза птиц, оценка её эффективности и разработка комплексных мероприятий по профилактике сальмонеллеза птиц в племенных хозяйствах БНПС «Смена».

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- изучить обсемененность комбикормов, производственных объектов и готовой продукции Salmonella spp. в ФГУП Г1ПЗ «Смена» РАСХН;

- провести оценку эффективности иммунизации нтицепоголовья инактивированной бивалентной вакциной «СальмАбик» по сероконвсрсии;

- определить сроки устойчивости молодняка, полученного от привитых родителей инактивированной бивалентной вакциной, в экспериментах и производственных условиях;

- провести микробиологический мониторинг у павшей птицы, на объектах птицеводства и в готовой продукции после применения инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик»;

- разработать комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц в племенном птицезаводе.

Научная новизна и теоретическая значимость работы. Впервые в крупном племенном птицезаводе Российской Федерации для профилактики сальмонеллеза с положительным эффектом применяется инактивированная бивалентная вакцина «СальмАбик» против сальмонеллеза птиц, содержащая культуры S. enteritidis и S. typhimurium. Установлена специфичность и продолжительность гуморального иммунитета у привитой птицы.

В экспериментальных условиях изучена продолжительность трансовариального иммунитета у цыплят, создаваемого инактивированной бивалентной вакциной, при экспериментальном заражении патогенной культурой штамма 8.егисгШ(И8 92 Ки^'И.

Для оценки эффективности инактивированной бивалентной вакцины «СальмЛбик» против сальмонеллеза предлагается руководствоваться результатами проведенного микробиологического мониторинга у павшей птицы, в пробах с производственных объектов и полученной продукции птицеводства.

Установлена множественная резистентность выделенных в хозяйстве микроооганизмов к широко применяемым в птицеводстве антибиотикам, что не позволяет рекомендовать их в лечебно-профилактических целях при бактериальных болезнях птиц.

Теоретически обоснованы и разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонсллёза в племенном птицезаводе, включающие применение средств специфической и неспецифической защиты.

Практическая значимость. Разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц, включающие применение

специфических и неспсцифических средств защиты: инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик», «Сальмофага», пробиотиков «Интсстсвит» и «Биокорм-Пионер».

На основании решения Совета БНГ1С «Смена» от №112 от 05. 04. 2008 г репродукторы 1-го порядка ГУП СО «Птицефабрика Рефтииская» в 2009 году и ООО «Равис-птицефабрика Сосновская» в 2010 году включили в комплексные мероприятия по защите предприятий от сальмонеллеза птиц инактивированную бивалентную вакцину «СальмЛбик», провакцинировапо в общей сложности более 1100 тыс. голов реммолодняка.

Апробации. Результаты исследований по теме диссертации доложены и одобрены на заседаниях Учёного совета ГНУ ВНИВИП РАСХН в 2010 и 2011 гг., научно-производственных конференциях, семинарах, Советах и

Президиумах Советов директоров Бройлерной научно-производствениой системы «Смена» в 2006 - 2011 гг.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликованы 3 научные работы в изданиях, рекомендованных перечнем ВАК РФ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 139 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений.

Работа иллюстрирована 27 таблицами и 2 рисунками. Список использованной литературы включает 186, в т.ч. 95 иностранных, источников.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- результаты применения в крупном племенном птицезаводе РФ инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллеза птиц, содержащей культуры Б. ег^енН^в и Б. 1урЫтипит;

- оценка эффективности иммунизации птицепоголовья инактивированной бивалентной вакциной «СальмАбик» по приросту специфических антител;

-продолжительность защиты материнскими антителами, создаваемыми инактивированной бивалентной вакциной «СальмАбик», при экспериментально вызванном сальмонеллёзе;

микробиологический мониторинг на фоне применения инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик»;

- теоретическое обоснование и разработка комплексных мероприятий по профилактике сальмонеллеза птиц в племптицезаводе.

2. Собственные исследовании

2.1. Материалы и методы исследований

Диссертационная работа выполнена в 2003-2010 гг. в отделе микробиологии ГНУ «ВНИВИП» РЛСХН и ФГУП ППЗ «Смена» РАСХН.

Микробиологический мониторинг проб кормов, патологического материала, взятого от птицы, смывов с технологических объектов и полученной продукции птицеводства, экспериментальное заражение цыплят раннего возраста S. enteritidis на фоне применения инактивированной вакцины против сальмонсллеза птиц проведены с участием сотрудников Федерального государственного учреждения науки Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии (ФГУН ГНЦ ПМБ).

В комплексе мер борьбы с сапьмонеллёзом с 2006 года и по настоящее время применяется следующая схема профилактики:

- аэрозольная обработка пробиотиком «Интестевит» (доза 5см3/м3) в выводном шкафу за 12 часов до выемки цыплят;

- выпаивание на 3-6 сутки сальмофага-энтсритидис по 0,25 дозы сухой вакцины и 0,5 дозы фага, двукратно;

-выпаивание иробиотика «Биокорм-пионср» на 10-60 сутки, курсом по 57 дней;

- в 80 и 110-суточном возрасте иммунизация инактивированной бивалентной вакциной «СальмАбик», изготовленной из культур Salmonella enteritidis (штаммы РТ ВЗ и РТ С8) и S. typhimurium (штамм РТ 2(4+), подкожно в области дорсальной поверхности груди (между крыльями) и объеме 0,5 см3 на голову.

Для оценки эффективности иммунизации использованы следующие показатели: клиническое состояние птицы, данные патологоанатомического вскрытия, показатель сохранности, результаты диагностических исследований и микробиологического мониторинга.

Из печени, селезенки и подвздошной кишки павшей или убитой птицы вырезали кусочки массой около 1 грамма, их гомогенизировали и готовили суспензию в изотоническом растворе хлорида натрия до разведения 10"5. Затем суспензию из разведений 10°, 10~3 и 10"5 высевали в объеме 0,1 мл на чашки с селективной питательной средой - агар Эндо с добавлением рифампицина в концентрации 100 мкг/см3' Посевы выращивали в термостате при 37°С в течение 48 часов. После окончания культивирования подсчитывали количество выросших колоний штамма S. enteritidis и рассчитывали обсеменснность внутренних органов в КОЕ/1г навески органа.

При наличии характерных для сальмонелл не менее 5 колоний проводили дальнейшее серологическое подтверждение принадлежности культур к бактериям рода Salmonella, предварительно пересевая их на поверхность среды, приготовленной из сухого питательного агара. Для серологической идентификации кулыур ставили РА на стекле с О-ноливалентной, О- и Н-монорецепторными адсорбированными сальмонеллсзными сыворотками (ФГУП Санкт-Петербургский НИИ вакцин и сывороток).

Опыты по моделированию экспериментального сальмонеллёза цыплят проводили в виварии ФГУН ГНЦ ПМБ. Для заражения опытных (иммунных) и контрольных (неиммунных) цыплят использовали музейный штамм S.enteritidis 92 Rif/R, устойчивый к рифампицину (МПК >200 мкг/см3), вирулентный для белых мышей (LD 50=500 КОЕ) и способный колонизировать кишечник, печень и селезенку бройлерной птицы в любом возрасте. В первом опыте заражающая доза для цыплят 2-суточного возраста составила 2,2x109 КОЕ/особь, 6-14-суточного возраста - 1,4-3,0х109 КОЕ/особь и 17-20-суточного возраста- 10,1х109 и 7,1x10 9КОЕ/особь, во втором - для 2-16-суточных - 1-2 хЮ9 КОЕ/особь и 18-30-суточных цыплят -3-5 хЮ 9 КОЕ/особь. Каждой особи вводили определенную дозу 18-24 часовой культуры, приготовленную на физиологическом растворе в объеме 0,2 см3.

За экспериментальными цыплятами из опытной и контрольной групп наблюдали 14 суток. Павших и убитых в конце опыта цыплят вскрывали и внутренние органы (печень, селезенку, кишечник) исследовали на наличие штамма S. entcritidis 92 Rif/R

Микробиологический мониторинг на наличие у привитой вакциной «СальмАбик» птицы сальмонелл, эшерихий, стафилококков и других бактериальных патогенов проводили ежемесячно в 9 птичниках, в которых содержалась взрослая птица в возрасте 110 - 361 суток, и в 9 птичниках, в которых содержался молодняк в возрасте 5-36 суток.

Как правило, бактериологическому анализу в каждом птичнике от взрослой павшей и больной птицы подвергали печень, сердце и яичники, а от молодняка печень и ссрдцс (не менее 50 особей из каждой возрастной группы). Кроме этого, исследовали пробы слепых отростков от 50 бройлеров, поступивших в убойный цех, и 30 - 35 проб фекалий от бройлеров 25 - 27-суточного возраста, а также не менее 30 эмбрионов-задохликов разного возраста.

Образцы патологического материала от павшей птицы исследовали на наличие Salmonella spp., Escherichia coli, Staphylococcus spp. Для этого их высевали на агаризованные дифференциально-диагностические питательные среды: висмут-сульфит агар, Эндо агар и мясо-пептонный агар (производство Hi Media, Индия). После 24-48 час. инкубирования посевов при 37°С проводили учет результатов. Полученные чистые культуры микроорганизмов идентифицировали по основным биохимическим свойствам с использованием тест-систем «ENTEROtest 24» - для энтсробактерий и «STAPHYtest 16» - для стафилококков (обе Lachcma, Чехия).

Чувствительность выделенных культур к антибактериальным препаратам определяли диско-диффузионным методом по Керби-Бауэр.

Для подтверждения принадлежности выделенных культур к определенному серовару вида Salmonella enterica дополнительно

использовали ПЦР анализ ДНК этих изолятов. Реакцию амплификации ДНК проводили с праймерами на 4 гена (invA, sefA и iag-гены инвазивности, а также iap-ген, входящий в блок генов, отвечающих за патогенность сальмонелл), используя для этого комбинированные наборы праймеров: 1-я реакция inv+sef праймеры, 2-я - iap+iag праймеры.

Для статистической обработки полученных результатов исследований использовали общепринятые методы: оценка дисперсии, стандартного отклонения и доверительного интервала варьирующих переменных, устанавливали количественные показатели связи зависимых переменных в виде коэффициентов корреляции. Для соответствующих вычислений применили программу Microsoft Excel.

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1.Краткая характеристика ФГУН ППЗ «Смена» и БНПС «Смена»

В Российской Федерации значительная роль в повышении генетического потенциала, внедрении интенсивных технологий производства мяса и воспроизводства птицы, достижении высоких экономических показателей и рентабельности отрасли принадлежит ведущему селекционному центру среди отечественных племенных предприятий - ФГУП ППЗ «Смена» РАСХН и созданной в 1987 году на его основе Бройлерной научно-производственной системы «Смена» (БНПС «Смена»),

В состав БНПС «Смена» входят 2 репродуктора I порядка: ГУП СО «Птицефабрика Рефтинская» и ООО «Равис-птицефабрика Сосновская», 24 репродуктора II порядка и более 20 различных предприятий (ИПС, индивидуальные предприниматели, с/х. кооперативы и др.).

Поставка племпродукции в 2009 году производилась в 45 предприятий 32-х регионов Российской Федерации и занимала в структуре бройлерного производства 27%, а также экспортировалась за пределы страны - в республики Казахстан, Армения и Узбекистан.

Используемый генетический потенциал кросса «Смена 7» позволил 80-95% хозяйств добиться среднесуточных приростов живой массы - 48-55 г, при затратах корма 1,7-1,85 к.е./кг и получить сохранность 95-96%, что обеспечивает высокую рентабельность производства бройлеров. У племенной птицы яйценоскость составила 235-238 штук на несушку при затратах корма на производство 10 штук яиц - 2,67 - 2,75 кг и сохранности взрослой птицы - 98,0 - 98,2%. В российских производственных условиях эти результаты не уступают показателям, получаемым с зарубежных кроссов «Росс», «Кобб» и «Хаббард».

2.2.2. Эпизоотическая ситуация в ФГУП II ИЗ «Смена».

В целом эпизоотическая ситуация в племптицезаводе является стабильной, чему способствует строгое выполнение плана противоэнизоотических мероприятий, разрабатываемых ежегодно ветеринарной службой и утверждаемых директором хозяйства и Главным Государственным ветеринарным инспектором Сергиево-Посадского района Московской области. План включает в себя организационно-хозйственныс, ветеринарно-санитарные, диагностические и лечебно-профилактические мероприятия.

Эпизоотическую ситуацию по сальмонеллсзу в племзаводе в 2003-2005 гг. характеризуют также данные микробиологических исследований по выделению сальмонелл из разных объектов птицеводства и патматериала, полученного от эмбрионов, павших птиц и кормов, которые представлены в табл. 1.

Динамика выделения сальмонелл из разных объектов птицеводства и патматериала от птиц

Объект 2003 г. 2004 г. 2005 г.

исследова ния Кол-во проб Поло житель ных % Кол во про Поло житель ных % Кол-во проб Поло житель ных %

Убойный 240 19 7,9 22 8,3 286 26 9,1

цех, цех 265

разделки, Переработ

ки

Готовая 133 23 17 25 17,1 154 21 13,6

продукция 146

Яйцесклад 640 0 0 550 0 0 530 0 0

Инкубатор 580 24 4,1 580 15 2,6 510 10 1,9

№1

Инкубатор 580 10 1,7 630 13 2,06 550 8 1,5

№2

Патматери ал 396 32 8,0 515 36 6,9 998 70 7,01

Кормовые 291 8 2,7 269 22 8,2 272 37 13,6

ингредиен

ты

Как видно из данных, представленных в табл. 1, в пробах смывов, взятых с различных производственных объектов - убойного цеха, цеха разделки и переработки, инкубаторов № 1 и 2, а также в готовой продукции, кормовых ингредиентах, патматериалс обнаружены сальмонеллы в количестве от 0,9 до 17,1%. Особенно высокий их уровень был в убойном цехе, готовой продукции и в патматериале. Единственный объектом, в смывах которого за все время исследований не было выделено сальмонелл, был яйцесклад.

В 2006 году в связи с предстоящей регистрацией в Российской Федерации инактивированной бивалентной вацины «СальмЛбик» (производства фирмы «Абик биологические лаборатории Лтд.», Израиль)

по разрешению Главного Государственного инспектора Ссргиево-Посадского района Московской области в плсмптицезаводе проведён производственный опыт по изучению влияния вакцины на формирование иммунитета у птицы против сальмонелла-энтеритидис и сальмонелла-тифимуриум инфекции. В связи с чем план борьбы с сальмонеллезной инфекцией был скорректирован (табл. 2).

Таблица 2.

Схема профилактики сальмонеллезной инфекции в условиях ФГУГ1 ППЗ «Смена»

Мероприятие Возраст птицы, сут Применяемый препарат, производство Метод введения

Аэрозольная обработка За 12 час. до выемки цыплят в выводном шкафу Пробиотик «Интестсвит», производство НПО ЦМВЭИ Ингаляция генераторами САГ-2М (дисп. 5 мкм), 5 см3/м3

Вакцинация 3-6 Сальмофаг-энтеритидис, производство ФГУП «Ставропольская биофабрика» Выпойка, двукратно по 0,25 вакцинной дозы и 0,5 дозы фага

Обработка пробиотиками 10-60 Пробиотик «Биокорм-пионер», Производство НПО ЦМВЭИ Выпойка через медикатор, курсами по 5-7 дней

Исследования в ККРНГА 50-55 Пуллорный эритроцитарный антиген,производства «Щелковский б/к»-фирма «Биок» Реакция на стекле

Вакцинация 80 Инактивированная вакцина «Сальм Абик», производство АБИК биол. лаб. Лтд, Израиль Подкожно по 0,5 см3.

Ревакцинация 110 Инактивированная вакцина «Сальм Абик», производство АБИК биол. лаб. Лтд, Израиль Подкожно по 0,5 см3.

Как видно из данных табл. 2, план предусматривает стратегию предотвращения вертикальной передачи возбудителя болезни в условиях ФГУП ППЗ «Смена» РАСХН путем применения живой и инактивированной вакцин против сальмонсллеза птиц в комбинации с препаратами конкурентной микрофлоры.

2.2.3. Результаты применении специфической профилактики сальмонсллезной инфекции у птиц инактивированной бивалентной вакциной «Сальм Абик».

Всего за период 2006-2010 гг. привито 1 201 тыс. птицы исходных линий, прародителей и родителей, в том числе в 2006 г. - 183 000, 2007 г - 288 000, 2008 г. - 250 000, 2009 г. - 210 000 и 2010 г. - 270 000 головы.

При проведении оценки эффективности вакцины учитывали следующие показатели: клиническое состояние птицы, напряженность иммунитета и данные микробиологических исследований.

За все годы (2006 - 2010 гг.) применения в хозяйстве вакцины «СальмАбик» клинических изменений в состоянии птицы не отмечено.

После двукратной иммунизации инактивированной вакциной «СальмАбик» против сальмонеллеза на 85, 115, 145, 175, 255, 300, 350 и 380 сутки совместно с центром ФГУН ГНЦ ПМБ провели серологический контроль напряженности поствакциналыюго иммунитета в развернутой реакции непрямой гемагглютинации (РНГА). Результаты исследований представлены в табл. 3.

Динамика титров антител у привитой птицы против сальмонеллсза (п= 25)

Вакцинация 1-я 2-я

Возраст птицы,сут. 85 115 145 175 255 300 350 380

Средний титр антител 0 372,0 + 25,0 1022,4 + 80.0 682,7 + 59,5 150,0 + 13.7 64,1 ±5,9 22,4 + 3,2 38,4 ±3,7

Из приведенных в табл. 3 данных видно, что протективный уровень антител (1:40) был отмечен у птицы в 115-суточном возрасте. Максимума он достиг на 145 сутки (1:1022,4 +80,0), а затем снизился к 300 суткам к минимуму (1: 64,1+ 5,9). Таким образом, полученные данные указывают на высокую степень выработки антител у иммунизированной птицы до 300 суточного возраста (Р< 0,05).

Для микробиологических исследований брали смывы с производственных объектов (пола, гнезд, стен, подсобных помещений инкубатория, столов сортировки, лотков, ящиков и технологического оборудования), с инкубационных яиц, из клоаки у ослабленной птицы; образцы помета и патматериала (яичные фолликулы, печень, селезенка, костный мозг) от павшей птицы и замерших эмбрионов. Пробы отбирали не реже одного раза в месяц.

Результаты микробиологического мониторинга за период применения вакцины «СальмАбик» представлены в табл.4.

Выделение З.егЦегШсНз с производственных объектов и от павшей птицы, привитой вакциной «СальмАбик»

Объект исследования Количество исследований Количество случаев выделения S.enteritidis, %

2006 г 2007 г 2008 г 2006 г. 2007 г. 2008 г.

Убойный цех, цех разделки и полуфабрикатов 302 489 495 7 2,3 1 0,2 1 0,2

Готовая продукция 162 200 225 20 12,3 4 2,0 0 0

Яйцесклад 45 45 45 0 0 0 0 0 0

Инкубатор №2 58 56 25 1 1,7 0 0 0 0

Инкубатор №3 - - 12 - 0 0

Патматериал 602 382 388 90 15,0 8 2,1 2 0,5

Как следует из данных, представленных в табл. 4, применение вакцины инактивированной бивалентной «СальмАбик» против сальмонеллеза в течение 2006-2008 гг. способствовало многократному снижению выявления S.enteritidis в пробах, взятых с объектов птицеводства и от павшей птицы. Особенно это проявилось после первого года. Так, если в 2006 году количество случаев обнаружения сальмонелл составило 1,7 - 15,0%, что значительно ниже аналогичных показателей, чем до применения вакцины в 2003-2005 гг. (см. табл. 1), то уже в 2007 г. выявлено всего 15 (0,2-2,1%), а в 2008 г. 4 случая (0-0,5%).

2.2.4. Изучение эффективности трансоварналыгого иммунитета на модели экспериментального сальмонсллсза у цыплиг раннего возраста

Опыт проведён на 145 цыплятах кросса «Смсна-7» (2-30 суточного возраста). В день привоза цыплят разделили на две группы: первая (75 голов) - опытная, родители которых были двукратно привиты инактивированной бивалентной вакциной «Сальм Абик», и вторая (70 голов) - контрольная, полученная от не иммунизированных родителей.

Исследование 5 образцов комбикорма, доставленного из хозяйства для проведения опыта, не выявило его инфицирования микроорганизмами.

Для моделирования экспериментального сапьмонеллёза у цыплят использовали микробную культуру штамма 5. сШегШШв 92 КлО'К. За зараженными цыплятами из подопытной и контрольной групп наблюдали в течение 14 суток. В течение этого времени регистрировали данные по состоянию птицы (внешний вид, аппетит, подвижность). Павших цыплят вскрывали, их внутренние органы (печень и кишечник) исследовали на наличие культуры штамма Э. сп1сп'ЦсМя 92 Я ¡(/'К. Птицу, оставшуюся в живых, по истечении срока наблюдения убивали и исследовали на наличие культуры штамма 8. егПепИс^ 92 1Ш'/Н.

Обобщенные сравнительные данные о выделени культуры Б. етегШсПз 92 от цыплят опытной (иммунной) и контрольной (неиммунной) групп спустя 14 дней после заражения представлены в табл. 5.

Таблица 5

Сравнительные данные о выделении 8. етегШсНэ 92 Ш^И от цыплят

опытной (иммунной) и контрольной (неиммушюй) групп

Кол-во Воз- Отноше Отноше Средняя обсемсненность

Под- цыиля раст ние ние павшего или носителя

груп ТВ цыплят павшие/ носител сальмонеллой

-пы группе в день общее и/ КОЕ/г

зараже кол-во общее печень кишечник

ния кол-во

(сутки)

Опытная группа

Оп-1 10 2 2/10 1 0/8 5,07 х103 п 1,92 х105

Оп-2 10 6 0/10 0/10 0 0

Оп-3 10 11 1/10 0/9 З.ЗЗхЮ4 3,79x10"

Оп-4 10 15 0/10 1/10 2,42x102 1,08 х10?

Оп- 5 18 0/5 5/5 1,84 хЮ3 9,71 х10"

5/1

Оп- 5 21 0/5 5/5 2,90 хЮ3 2,95 хЮ3

5/2

Оп- 5 24 0/5 5/5 3,36 xl0J 3,39 хЮ3

5/3

Оп-6 10 28 0/10 10/10 5,75х103 2,70х103

Оп-7 10 30 0/10 10/10 2,27x103- 1,65x103

Контрольная группа

К-1 10 9 0/10 10/10 1,93x10'' 9,95х103

К-2 10 15 0/10 10/10 1,79x10" 6,58х103

К-3 10 17 0/10 10/10 2,47x10" 9,35х103

К-4 10- 20 0/10 10/10 5,53x10' 1,32х103

К-5 10 22 0/10 10/10 2,25x103 5,32x10^

К-6 10 24 0/10 9/10 6,07x103 1,57х103

К-7 10 27 0/10 9/10 3,18х103 8,29 хЮ2

Как следует из данных, приведенных в табл. 5, при экспериментальном заражении цыплят, полученных от родительского стада, иммунизированного инактивировапной сальмонеллезной вакциной, напряженный протективный иммунитет сохраняется у подавляющего большинства птицы подгрупп ОП-1 - ОП-4 (90-100%) до 15- суточного возраста. С 18-суточного возраста напряженность иммунитета, по всей вероятности, у цыплят существенно

снижается (ОП-5/1-3-ОП-7) и они становятся восприимчивыми к сальмоиеллезной инфекции (Б. стсгтс^).

Следует акцентировать внимание на факте, важном с нашей точки зрения для борьбы с сальмонсллсзом: в проведенном эксперименте 4 из 40, т. с. 10% цыплят до 15 дневного возраста оказались незащищенными от экспериментального сальмонеллеза (3 из них погибли от септического сальмонеллеза, 1 был сальмонеллоносителем)- Следовательно, среди цыплят, полученных от вакцинированного инактивированпой корпускулярной вакциной маточного поголовья, всегда может находиться небольшой процент восприимчивого (неиммунного) к Б. еМсгМсНз поголовья, которое может быть опасным источником инфекции в стаде.

Невакцшшрованная (контрольная) птица оказалась весьма восприимчивой к заражению Б. еЩегШсИя: всс цыплята контрольных групп, начиная с 9 -суточного возраста (цыплят более раннего возраста в опыте не было), были обсеменены возбудителем и явились его носителем. Следовательно, вакцинация птицы против сальмонеллеза является существенным звеном в противоэпидемических мероприятиях, направленных на борьбу с этой инфекцией.

Второй опыт по изучению протективных свойств вакцины «СальмАбик» провели на 72 цыплятах-бройлерах суточного возраста, полученных от иммунизированных кур-несушек, которые были доставлены в ФГУН ГНЦ Г1МБ и методом случайной выборки разделены на шесть подгрупп по 12 особей в каждой. Первая группа была заражена культурой штамма Б.ег^егШсНз 92 в 2-суточном, вторая - 6 , третья - 10 , четвертая -14, пятая -17 и шестая - 20-суточном возрасте.

Ввиду отсутствия в племптицезаводе птицы, не .привитой против сальмонеллеза, в качестве контроля в эксперимент были взяты две группы цыплят-бройлеров однодневного возраста, полученных от не-иммунизированного родительского стада кур-несушек ЗАО «Юрьевская птицефабрика» (Владимирская область).

Первую группу в количестве 72 голов (контроль заражения) разделили на б подгрупп, по 12 голов в каждой. Их заражали аналогично опытной группе. Вторую контрольную группу цыплят в количестве 30 голов также разделили на 6 подгрупп, но по 5 голов в каждой. Их не вакцинировали и не заражали. В период всего эксперимента для предотвращения инфицирования сальмонеллами цыплят этой группы содержали в отдельном изоляторе.

Предварительное исследование 3 проб используемого в кормлении цыплят комбикорма не выявило в нем контаминации микроорганизмами.

Перед заражением из каждой опытной и контрольной подгрупп убивали по 2 цыпленка, отбирали пробы внутренних органов и фекалий, после чего исследовали их на обсемененность сальмонеллами прямым высевом на чашки Петри со средой Эндо или методом нсселекгивного и селективного обогащения.

Для заражения цыплят опытных и контрольных групп использовали музейный штамм S.cntcritidis 92 Rif/R. Каждой особи вводили 0,2 см3 18-24 часовой культуры, приготовленную на физиологическом растворе.

В результате изучения обсеменённости объединённых проб внутренних органов (печень, селезенка и кишечник) и фекалий двух убитых цыплят из каждой опытной (иммунной) подгруппы до их заражения штаммом S.enteritidis 92 Rif/R было установлено, что они не были инфицированы бактериями рода Salmonella spp. Аналогичные результаты получены у цыплят контрольных (неиммунных) подгрупп.

Результаты исследования уровня инфицированпости (Р,%) штаммом S.enteritidis 92 Rif/R печени, селезенки и кишечника цыплят, родители которых были иммунизированы вакциной «СальмАбик», и контрольных (не-иммунизированных) цыплят, представлены в динамике на рис. 1.

103 90

80 70 £.0 50 »0 го .'о ю о

Рисунок 1. Зависимость уровня инфицированности печени,сслсзенки и кишечника цыплят от сроков заражения штаммом Б-степНс^ 92

Из представленных данных на рис.1 видно, что при заражении цыплят 1 и 2-й подгрупп (2-6-суточного возраста) инфицирование печени, селезенки и кишечника не установлено, за исключением 1 пробы из 10-и, взятых из кишечника. В 3 и 4-й подгруппах инфицированность всех органов составляет 20-40%, 5-й - 70% и в 6-й подгруппе достигает 100% , что равно показателям контрольной группы.

У всех зараженных цыплят контрольных подгрупп из внутренних органов: печени, селезенки и кишечника- был выделен штамм Б.спЦяШсНз 92 Самые высокие концентрации бактерии ( 1х10х105- 1-10х107 КОЕ/г в исследуемом образце) достигнуты во внутренних органах цыплят 1 и 2-й подгруппы и, напротив, в пробах фекалий у цыплят этих подгрупп они были более низкими (2,18-1,40хЮ9КОЕ/особь) по сравнению с цыплятами старших возрастов (4-6 подгрупп).

Количество возбудителя сальмонеллеза, выделенное из внутренних органов зараженных цыплят иммунной группы, было приблизительно на один порядок выше, чем у цыплят контрольной зараженной группы. В

пробах фекалий от цыплят обеих групп эта разница не проведён существенна.

Таким образом, полученные в экспериментах данные свидетельствуют о высокой протективной эффективности вакцины «СальмАбик», которая обеспечивает в достаточной степени защиту бройлерных цыплят до двухнедельного возраста, наиболее критичного для заражения птицы сальмонеллами вида Б.сЩегШсНв, основного возбудителя пищевой инфекции у человека. В наших экспериментах для заражения цыплят использовали З.сгиегШсНз в высоких дозах. В производственных условиях степень микробного давления значительно ниже, и это даёт основание считать применение инактивированной вакцины гарантией профилактики болезни.

2.2.5. Микробиологический мониторинг на фоне применения инактивированной вакцины против сальмонелл.

Угроза, которую для ФГУП ППЗ «Смена» РАСХН и БНПС «Смена» представляют бактериальные болезни, определила задачу проведения микробиологического мониторинга.

Результаты микробиологического мониторинга проб патологического материала, взятых от птиц разного возраста, представлены в табл. 6.

Таблица 6.

Обнаружение Salmonella spp, Е. coli, Staphylococcus spp., Proteus spp. в патматериале птицы, привитой против сальмонеллеза

№ птичника Возраст птицы (дней) Выделен -ная культура Количест во колоний Бактериологче-ский диагноз

Взрослая птица

22 194 _ _ _

26 361 Е. coli, Proteus +++ Колисептинемия

29 201 Е. coli +++ Колисептицсмия

1 292 Е. coli ++ Колисептицемия

7 222 Е. coli +++ Колисептицсмия

9 233 Е. coli ++ Колисептицемия

15 136 Е. coli. Proteus +++ Колисептиисмия

19 139 Staphylococc us aureus ++ Стафилококкоз

17 110 E. coli ++ Колисептиисмия

Молодняк

52 36 E. coli, Proteus +4- Колисептицсмия

55 27 Staphylococc us aureus t- Стафилококкоз

47 17 E. coli +++ Колисептиисмия

32 40 E. coli. Proteus +++ Колисептиисмия

54 25 E. coli ++ Колисептипемия

50 25 E. coli, Proteus +++ Колисептипемия

53 11 Staphylococc us aureus ++ Стафилококкоз

31 5 E. coli, Proteus + + + Колисептицсмия

45 9 E. coli Колисептицсмия

+++ - сплошной рост культуры

+ + - сотни колоний + - десятки колоний Как следует из данных, представленных в табл. 6, из трупов взрослой птицы культура сальмонелл ни в одном случае не была выделена. В 7 пробах патологического материала, отобранных от взрослой птицы, выделены культуры E.coli, в двух из них в сочетании с Proteus spp., в одной пробе - культура Staphylococcus aureus, а из одной пробы бактериальные культуры выделены не были. У молодняка Е. coli выделена в одной прбс, Е. coli в сочетании с Proteus spp. - 4 пробах и St. aureus - в одной пробе.

Следующим этапом исследований было определение чувствительности выделенных культур - 7 Е. coli, 1 Staphylococcus aureus и 2 Proteus spp к антибиотикам. Из 13 исследованных антибактериальных препаратов выделенные культуры Е. coli обладают выраженной резистентностью к доксициклину, левомицетину, фурадонину, ванкомицину, полимиксину и карбенициллину, и были чувствительны только к двум из испытанных антибиотиков - цефотаксиму и цефтриаксопу (цефалоспоринам 3 поколения).

Изоляты культур Proteus (птичник №32) чувствительны к гентамицину, офлоксаципу, ципрофлоксацину, цсфтриаксону и цсфотаксиму, тогда как

культура Proteus (птичник №26) к перечисленным антибиотикам была слабочувствительна, а характеризуется чувствительностью только к гентамицину- Выделенная из птичника № 55 культура Staphylococcus aureus характеризуется чувствительностью к гентамицину, цефтриаксону, цефотаксиму, стрептомицину, левомицетину, карбенициллину, оксациллипу и устойчивостью к доксициклину, офлоксаципу, ципрофлоксацину, фурадонину, ванкомицину и иолимиксину.

Серологические исследования выделенных культур Е. coli проводили в реакции агглютинации на стекле согласно «Инструкции» изготовителя (ОАО «Биомсд»), используя следующие эшерихиозные О-сьшоротки: 01, 02, 04, 08, 09,018,019,020, 026,055, 086, 0103, 0111, 0113, 0117 и 0127. Результаты её представлены в табл.7.

Таблица 7.

Серологическая идентификация культур F.. coli

Название № Возраст Ссрогруппа

культуры птичника птицы

Е. coli 52 36 0117

Е. coli 15 136 Сепотип не установлен

Е. coli 54 25 0117

Е. coli 17 110 Серотин не установлен

Е. coli 1 292 0117

Е. coli 47 17 Сеоотип не установлен

Е. coli 29 201 09

Как следует из данных табл.7, выделенные от молодой птицы 3 изоляга Е. coli (птичники № 1, 52, 54) относятся к серогруппе Ol 17, а один от взрослой птицы (птичник № 29) - к серогруппе 09. Другие изоляты ссротипировать не удалось.

Результаты бактериологического исследования образцов слепых отростков на наличие Salmonella представлены в табл. 8.

Таблица 8.

Наличие бактерий рода Salmonella в пробах слепых отростков.

№ проб слепых отрост- Рост на дифференциально- диашостичсских средах

Среда Эндо Висмут-сульфит агар

13, 19, 20, 21,30 Колонии круглые, бесцветные, прозрачные Колонии черные, с характерным металлическим блеском

Как следует из данных, представленных в табл. 8, из 50 образцов слепых отростков, взятых от бройлеров в цехе убоя, в 5 пробах (10%) - № 13,19, 20. 21.30 на среде Эндо и висмут-сульфит агаре выделены изоляты, которые по культурально-морфологическим свойствам предварительно отнесены к виду S. cnterica, ссровару S.typhimurium. Для их окончательной идентификации нами проведено биохимическое, серологическое и ГЩР тестирование.

В результате проведенного биохимического и серологического тестирования установлено: все 5 культур, выделенных из проб слепых отростков цыплят 27-сут. возраста, родители которых были привиты инактивированной вакциной «СальмАбик» (№13, 19, 20, 21, 30), были отнесены к серотипу S. typhimurium.

По результатам ПЦР тестирования установлено, что 5 изолятов из 6 также принадлежат к виду S. cnterica (наличие генов inv и iag), серовару S. typhimurium (отсутствие гена sei). Изолят под №3 (21-2) по данным ПЦР

не принадлежит к роду Salmonella.

Все исследованные изоляты S. typhimurium чувствительны к достаточно широкому кругу препаратов: гентамицину. офлоксацину, ципрофлоксацину, норфлоксацину, цефогаксиму, цефтриаксону, левомицетину, сизомицину, слабо чувствительны к карбенициллину и тобрамицину, но в то же время обладают выраженной резистентностью к доксициклину,

стрептомицину, фурадонину, ванкомицину, полимиксину, налидиксовой кислоте и амикаиину. Выделенные изоляты S. typhimurium по спектру чувствительности к антибиотикам оказались одинаковыми, что свидетельствует, по-видимому, о том, что они являются одним штаммом.

В результате бактериологического исследования помета от 35 цыплят 27-суточиого возраста и 30 эмбрионов-задохликов разного возраста Salmonella spp. и другие микроорганизмы не выявлены ни в одном случае.

Таким образом, разработана комплексная система профилактики сальмонеллёза в племенном птицезаводе, которая включает применение сальмофага, инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик», пробиотиков «Интсстевит» и «Биокорм-Пионер», в сочетании с ветеринарно-санитарными мероприятиями обеспечивает предотвращение заноса инфекции в племптицезавод.

3. Вывод ы

1. Применение в племптицезаводе мясного направления с 2006 по 2010 г. инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллеза птиц способствовало многократному снижению выявления S.enteritidis в пробах, взятых от павшей птицы, с объектон птицеводства и в птицеводческой продукции.

2. Вакцина «СальмАбик» за счет передачи пассивных материнских антител от привитых родителей к 1-14 - суточным цыплятам защищает их от заражения высокими дозами вирулентного штамма S.enteritidis 92 Rif/R.

3. С увеличением возраста уровень защищенности иммунных

цыплят от заражения штаммом S.enteritidis 92 Rif/R достоверно снижается. Однако резистентность к заражению у иммунных бройлеров в возрасте 20 суток остается выше, чем у контрольных, неиммунных цыплят. Об этом свидетельствуют более низкая обсемененность (на 50%) сальмонеллами органов иммунных цыплят по сравнению с контрольными цыплятами.

4. Иитактные цыплята-бройлеры чувствительны к патогенному штамму З.еШегШ&з 92 СК, начиная с 2-суточного возраста, были восприимчивы к инфекции, а уже в 9-суточном возрасте отмечали повышенный отход, и их внутренние органы (печень,селезенка, кишечник) обсеменялись возбудителем инфекции.

5. Результаты микробиологического мониторинга проб, взятых у павшей птицы, с объектов птицеводства и полученной продукции, могут использоваться для оценки эффективности применения инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллеза.

6. Установлена множественная резистентность выделенных в хозяйстве микроорганизмов к широко применяемым в птицеводстве антибиотикам, что не позволяет рекомендовать их в лечебно-профилактических целях при бактериальных болезнях пгиц.

7. Вакцинация птицы против сальмонеллеза сальмофагом и инактивированной бивалентной вакциной в сочетании с пробиотиками является важным звеном в противоэпизоотических мероприятиях, направленных на борьбу с этой инфекцией.

4.Предложении для практики.

1. Разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц, включающие применение специфических и неспецифических средств защиты - инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик», «Сальмофага», пробиогиков «Интестсвит» и «Биокорм-Пионер».

2. На основании решения Совета БНГ1С «Смена» от №112 от 05. 04.

2008 г. репродукторы 1 -го порядка ГУП СО «Птицефабрика Рефтинская» в

2009 году и ООО «Равис- птицефабрика Сосновская» в 2010 году включили в

комплексные мероприятия по защите предприятий от сальмонеллсза птиц инактивированную вакцину «СальмАбик». Подвергнуто вакцинации 1060 тыс. голов ремонтного молодняка.

5. Список работ, опубликованных по теме диссертации

Статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ

1. Смирнов Д.Д. Опыт применения специфической профилактики сальмонелло-энтеритидис инфекции у птиц /Д.Д.Смирпов,

С.М.Салгерсев// Ветпатология,- 20Ю.-№2 (33).- С.75-77.

2. Сапгереев С.М. Эффективность специфической профилактики сальмонеллеза в племенном птицезаводе /С.М.Салгереев, Э.А.Светоч, Д.Д.Смирнов //Международный ветеринарный вестник.-2010.-№4.-С.25-28.

3. Тучемский Л.И. Микробиологический мониторинг в племенном

птицезаводе на фоне применения инактивированной вакцины против

сальмонеллсза / Л. И. Тучемский, Д.Д.Смирнов, Э. А. Светоч / / Аграрная наука. -2010.-№10. -С.31-32.

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Смирнов, Дмитрий Дмитриевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ. '

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.' 1. Основные тенденции и перспективы развития мирового и отечественного производства мяса птицы.

2.2. Сальмонеллез птиц.

2.2.1. Характеристика рода Salmonella.

2.2.2. Распространение и экономический ущерб, вызываемый болезнью.

2.2.3. Эпизоотологические особенности сальмонеллезной инфекции у птиц.

2.2.4. Клинические признаки, патологоанатомические и гистологические изменения при сальмонеллёзе птиц.

2.2.5. Диагностика и дифференциальная диагностика сальмонеллезной инфекции птиц

2.2.6.Профилактика и меры борьбы с сальмонеллезной инфекцией.

2.2.6.1. Генетическая и селекционная резистентность к сальмонеллезу.

2.2.6.2. Применение антимикробных препаратов (АМП).

2.2.6.3. Пробиотики.

2.2.6.4. Специфическая профилактика сальмонеллеза.

2.2.6.5. Концепция ХААСП.

2.2.6.6. Программа биобезопасности и законодательных мер.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Материалы и методы исследований.

3.2. Краткая характеристика ФГУПППЗ «Смена» Россельхозакадемии и БНПС «Смена».

3.3. Эпизоотическая ситуация в ФГУПППЗ «Смена».

3.4. Результаты применения специфической профилактики сальмонеллезной инфекции у птиц инактивированной бивалентной вакциной «СальмАбик»

3.5. Изучение эффективности трансовариального иммунитета на модели экспериментального сальмонеллеза у цыплят раннего возраста

3.6. Микробиологический мониторинг в племенном птицезаводе на фоне применения инактивированной бивалентной вакцины против сальмонеллезов.

3.7. Программа профилактики и контроля сальмонеллезов птиц.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллеза птиц в племенных хозяйствах"

Актуальность темы. Среди инфекционных болезней птицы по данным Росптицесоюза за последние годы более 60% составляют болезни бактериальной этиологии. При этом отмечается возрастание роли микроорганизмов, являющихся возбудителями проблемных для птицехозяйств болезней: коли-бактериоза, сальмонеллёза, стафилококкоза и др. (Венгеренко Л:А., 2009).

Сальмонеллёз птиц независимо от сероварианта возбудителя, вызвавшего его, причиняет значительный социально-экономический ущерб. Он слагается из снижения яйценоскости кур-несушек, количества оплодотворенных яиц, высокой летальности эмбрионов, потери привесов молодняка, значительных затрат на диагностические и лечебно-профилактические мероприятия (Борисенкова А.Н. и др., 2008), а также возникновения пищевых токсикоинфекций у людей, часто с летальным исходом, особенно у детей и лиц престарелого возраста (Кафтырева Л.А., 2008).

Важным моментом в организации борьбы с сальмонеллезной инфекцией на птицеводческом предприятии является систематический мониторинг бактериальных патогенов среди больной и павшей птицы,который позволяет регистрировать возможные заражение возбудителем сальмонеллёза у птицы, определять оптимальные схемы применения антимикробных средств, пробиотиков и бактериофагов, а также специфической профилактики и своевременно организовывать необходимые про-тивоэпизоотические мероприятия в хозяйстве (Гусев В. и др., 2003; Афо-нюшкин В. И. др., 2008; Рождественская Т.Н., 2009).

В связи с тем, что сальмонеллы обладают лекарственной устойчивостью ко многим антибиотикам, ВОЗ не рекомендует широко использовать их в борьбе с инфекцией, а в комплексе мер применять специфическую профилактику. Требования к вакцинным штаммам, изготовлению, вали-дации и испытанию эффективности вакцин изложены в Руководстве МЭБ по диагностическим тестам и вакцинам для сухопутных животных (млекопитающих, птиц и пчел). Вышеуказанным требованиям отвечает инак-тивированная бивалентная вакцина «СальмАбик» против сальмонеллёза птиц, производства «Абик биологические препараты, Лтд.», а с 2009 г. компании. «Фибро» (Израиль), зарегистрированной в Российской Федерации.

Цель и задачи исследований - профилактика с помощью инакти-вированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллёза птиц, оценка её эффективности и разработка комплексных мероприятий по профилактике сальмонеллёза птиц в племенных хозяйствах БНПС «Смена».

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- изучить обсемененность комбикормов, объектов птицеводства и готовой продукции Salmonella spp. в ФГУП ППЗ «Смена» РАСХН;

- провести оценку эффективности иммунизации птицепоголовья инакти-вированной бивалентной вакциной «СальмАбик» по сероконверсии;

- определить сроки устойчивости молодняка, полученного от привитых' родителей инактивированной бивалентной вакциной, в экспериментах и производственных условиях;

- провести микробиологический мониторинг у павшей птицы, на объектах птицеводства и в готовой продукции после применения инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик»;

- разработать комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллёза птиц в племенном птицезаводе.

Научная новизна и теоретическая значимость работы. Впервые в крупном племенном птицезаводе Российской Федерации для профилактики сальмонеллёза с положительным эффектом применяется инактивиро-ванная бивалентная вакцина «СальмАбик» против сальмонеллёза птиц, содержащая культуры S. enteritidis и S. typhimurium. Установлена специфичность и продолжительность гуморального иммунитета у привитой птицы.

В экспериментальных условиях изучена продолжительность тран-совариального иммунитета у цыплят, создаваемого инактивированной бивалентной вакциной, при экспериментальном заражении патогенной культурой штамма З.егЦегШсНз 92 Ш^Я.

Результаты проведенного микробиологического мониторинга у павшей птицы, в пробах с объектов птицеводства и полученной продукции могут быть использованы для оценки эффективности инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллёза.

Установлена множественная резистентность выделенных в хозяйстве микроорганизмов к широко применяемым в птицеводстве антибиотикам, что не позволяет рекомендовать их в лечебно- профилактических целях при бактериальных болезнях птиц.

Теоретически обоснованы и разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллёза в племенном птицезаводе, включающие применение средств специфической и неспецифической защиты.

Практическая значимость. Разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонеллёза птиц, включающие применение специфических и неспецифических средств защиты: инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик», «Сальмофага», пробиотиков «Интестевит» и «Био-корм-Пионер».

На основании Совета БНПС «Смена» от №112 от 05. 04. 2008 г репродукторы 1-го порядка ГСО «Птицефабрика Рефтинская» в 2009 году и ООО «Равис- птицефабрика Сосновская» в 2010 году включили в комплексные мероприятия по защите предприятий от сальмонеллёза птиц I инактивированную вакцину «СальмАбик». Провакцинировано 1100 тыс.голов реммолодняка.

Апробация. Результаты исследований по теме диссертации доложены и одобрены на заседаниях Учёного совета ГНУ ВНИВИП РАСХН в 2010 и 2011 гг., научно-производственных конференциях, семинарах; Советах и Президиумах Советов директоров;. Бройлерной научно-производственной системы «Смена» в 2006—2011 гг.

Публикации, результатов исследований. По материалам диссертации опубликованы 3 научные работы в изданиях, рекомендованных: перечнем В АК РФ.

Структура и объем работы. Диссертация? изложена на 138 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений* списка использованной литературы и; приложений:

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Смирнов, Дмитрий Дмитриевич

5. Выводы

1. Применение в племптицезаводе мясного направления с 2006 по 2010 гг. инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмо-неллеза способствовало многократному снижению выявления З.е^егШсИв в пробах, взятых от павшей птицы, с объектов птицеводства и в птицеводческой продукции.

2. Вакцина «СальмАбик» за счет передачи пассивных материнских Антител от привитых родителей к 1-14 - суточным цыплятам защищает и от заражения высокими дозами вирулентного штамма З.еЩегШсИз 92 ШШ^.

3. С увеличением возраста уровень защищенности иммунных цыплят от заражения штаммом Б.еШегШсНз 92 ЬШУЯ достоверно снижается. Однако резистентность к заражению у иммунных бройлеров в возрасте 20 суток остается выше, чем у контрольных, неиммунных цыплят. Об этом свидетельствуют более низкая обсемененность (на 50%) сальмонеллами органов иммунных цыплят по сравнению с контрольными цыплятами.

4. Интактные цыплята-бройлеры чувствительны к патогенному штамму Б.е^епйШв 92 начиная с 2-суточного возраста, были восприимчивы к инфекции, а уже в 9-суточном возрасте отмечали повышенный отход и их внутренние органы (печень, селезенка, кишечник) обсеменялись возбудителем инфекции.

5. Результаты микробиологического мониторинга проб, взятых у павшей птицы, с объектов птицеводства и полученной продукции, могут использоваться для оценки эффективности применения инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик» против сальмонеллеза.

6. Установлена множественная резистентность выделенных в хозяйстве микроорганизмов к широко применяемым в птицеводстве антибиотикам, что >не позволяет рекомендовать их в лечебно-профилактических целях при бактериальных болезнях птиц.

7. Вакцинация птицы против сальмонеллеза сальмофагом и инактивированной бивалентной вакциной в сочетании с пробиотиками является важным звеном в противоэпизоотических мероприятиях, направленных на борьбу с этой инфекцией.

6. Предложения для практики.

1. Разработаны комплексные мероприятия по профилактике сальмонелле-зов птиц в племенном птицеводческом заводе, которые включают применение у цыплят раннего возраста живой вакцины и фага «Сальмонелла энтери-тидис», пробиотиков «Интестевит» и «Биокорм-пионер» и инактивированной бивалентной вакцины «СальмАбик».

2. На основании решения Совета БНПС «Смена» от №112 от 05. 04. 2008 г репродукторы 1-го порядка ГУЛ СО «Птицефабрика Рефтинская» в 2009 году и ООО «Равис- птицефабрика Сосновская» в 2010 году включили в комплексные мероприятия по защите предприятий от сальмонеллезов птиц инактивированную вакцину «СальмАбик». Подвергнуто вакцинации 1060 тыс. голов ремонтного молодняка.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Смирнов, Дмитрий Дмитриевич, Санкт-Петербург

1. Афонюшкин В., Дудаева Е., Малахеева Л., Фролова О., Шкред О., Филиппенко М. Современные методы контроля сальмонеллеза //Птицеводство.-2008.-№9.-С.43-44.

2. Аронов В.М. Роль различных видов сальмонелл в патологии птиц: автореф. дис.канд. вет. наук/Аронов В.М.//.- СПб, 1999.- 21с.

3. Бобылева Г. Птицеводство России/ Г.Бобылева// Птиицеводство.-2005.-№4.-С.4-11.

4. Бобылева Г.А. Состояние и перспективы развития отрасли птицеводства/ Г.А.Бобылева// VI Межд.ветер. конгр. по птицев.(26-29 апреля 2010 г.,М.).-М., 2010.-С.7-14.

5. Бонзак X. Опыт вакцинопрофилактики сальмонеллёзной инфекции (Salmonella gallinarum) у кур-несушек/ X. Бонзак// III Межд. ветер, конгресс по птицев.( 10-13 апреля 2007 г., Москва) .-М., 2007.-С.157-158.

6. Борисенкова А.Н. Бактериальная инфицированность цыплят на выводе в разные сроки их выборки/ А.Н. Борисенкова, Т.Г.Федорчук, А.П. Пили-пенко// Национальное отделение СССР Всемирной научной ассоциации по птицеводству: тез. докл.- Одесса, 1979.-С.67.

7. Бортюк Я.А. Опыт применения! живой вакцины из штамма Salmonella enteritidis для профилактики инфекций, вызываемых Salmonella gallinarium и Salmonella pullorum/ Я.А. Бортюк //IV Межд. ветерин. конгр. по птицев., 8-11 апреля 2008 г.-М.-С. 131-133.

8. Бортюк Я. Применение живой вакцины из штамма Salmonella enteritidis/ Я. Бортюк//Птицеводство.- 2008.-№10.-С.19.

9. Венгеренко JI.A. Эпизоотическое благополучие залог эффективной работы хозяйств / Л.А. Венгеренко // Птицеводство.-2008.- №1.- С. 11-12.

10. Венгеренко Л.А. Ветеринарно-санитарное обеспечение эпизоотического благополучия в птицехозяйствах Российской Федерации/Л.А. Венгеренко //Ветеринария, 2009.-№8.-С.З-6.

11. Габасония Т. Резистентность кишечной микрофлоры к аминоглюкози-дам/ Т. Габасония, К. Детулидзе, Н. Мелашвили, К. Кочламазвили, Т. Элиава, Т. Калануиришвили, М. Надирадзе, Н. Чахунашвили// Птицеводство.-2008.-№8.- С.45.

12. Гусев В.В. Сальмонеллезная инфекция у голубей / В.В.Гусев,

13. B.В.Гусев // Практик.-2003.-№5-6.-С.102-106.

14. Гусев В. Мониторинг возбудителей бактериальных инфекций/ В. Гусев, Э. Светоч, Н. Глазков, М. Теймуразов, С.Приходько, С.Павлов // Птице-водство.-2003.- №2.-С.8-9.

15. Данилевская Н.В. Фармакологические аспекты применения пробио-тиков/ Н.В. Данилевская// Ветеринария.-2005.-№11.-С.6-10.

16. Доклад комитета экспертов ВОЗ №774. Борьба с сальмонеллёзом: роль ветеринарии и пищевой гигиены. -Женева, ВОЗ, 1991.-83 с.

17. Елфимова И.А. Интестивит и биокорм «Пионер» для повышения сохранности молодняка / И.А.Елфимова, С.В.Ясников, А.Н.Перов // Ветерина-рия.-2006.-№7.- С.16-17.

18. Забровская A.B. Устойчивость к антимикробным препаратам сальмонелл, выделенных из пищевых продуктов/ A.B.Забровская, Л.А.Кафтырева,

19. C.А.Егорова, Л.В.Селиванова// Проблемы современной эпидемиологии. Перспективные средства и методы лабораторной диагностики и профилактики актуальных инфекций. Всерос. научн. конф. 19-20 ноября 2009г.,Санкт-Петербург.-С.323-324.

20. Изоляция, идентификация и лекарственная устойчивость Salmonella. Протокол лабораторных исследований. Программа ВОЗ по надзору за сальмонелл ёзами.З, 2002.

21. Калмыков М.В. Лабораторный контроль безопасности продуктов животного происхождения в Российской Федерации / М.В.Калмыков, В.И.Белоусов, Г.В.Иванова, М.М.Сысоев // Ветеринария.-2010.-№3.-C.3-6.

22. Капускина Ю.В. Разработка иммуноферментных тест-систем для определения антител к бактериям рода сальмонелла серогрупп В, С и Д в сыворотках крови свиней и кур / Ю.В .Капускина // Автореф дисс.канд. ветер. наук.-Владимир, 2009.- 23 с.

23. Кафтырёва Л.А. Сальмонеллёзы у людей, связанные с продуктами промышленного птицеводства/ Л.А. Кафтырёва, A.B. Забровская //1-й Международный ветеринарный конгресс по птицеводству 18-22 апреля 2005 г.-М., 2005.-С.188-190.

24. Кафтырева JI.A. Резистентность к дезинфектантам энтеробактерий -возбудителей зооантропонозных инфекций/ Л.А.Кафтырева, С.А.Егорова, М.А.Макарова// Дезинфекционное дело.-2008.-№ 3.-С.43-45.

25. Кафтырева Л.А. Сальмонеллезы на территории Северо-Западного Федерального Округа РФ. Аналитический обзор/Л.А. Кафтырева, З.Н.Матвеева, A.B. Забровская, С.А. Егорова, М.А. Макарова.- С-Пб, 2008.- 41с.

26. Киржаев Ф.С. Динамика титра агглютининов у цыплят при пуллоро-зе-тифе/Ф.С. Киржаев//Ветеринария.-1975.-№ 1.-С.41-42.

27. Киржаев Ф.С. Диагностическая ценность реакции непрямой гемагг-лютинации при пуллорозе-тифе/ Ф.С. Киржаев, М.П. Рожанская //Ветеринария.-1979.-№5.-С.70-72.

28. Киржаев Ф.С. Иммунопрофилактика при сальмонеллёзе гусей/ Ф.С. Киржаев, H.A. Соловьян, A.C. Персов //Сб. научн. тр. ВНИВИП. ч.2.-Л., 1988.-С.67-73.

29. Климов A.A. Повышение эффективности фторхинолов в индустриальном животноводстве/ A.A. Климов // Ветеринария.-2003.-№5.-С.9-11.

30. Кожемяка Н.В. Ветеринарно-санитарные мероприятия при инкубации яиц сельскохозяйственной птицы/ Н.В.Кожемяка, В.В.Анчиов // Ветерина-рия.-2011.-№2.-С.9-14.

31. Козак С.С. Снижение контаминации тушек бройлеров путём использования в корме пробиотиков/ С.С. Козак, С.А. Барышников //Птица и пти-цеПродукты.-2009.-№3 .-С.32-34.

32. Крохин H.JI. Сальмонеллёз птиц основы профилактики/ Н.Л. Кро-хин, C.B. Панкратов //IV Межд. вет. конгр. по птицев., 8-11 апреля 2008 г.-М.,2008.-С. 122-125.

33. Кузьмин В.А. Микробная контаминация инкубатория в период инкубации и вывода цыплят/ В.А.Кузьмин//Сб. научн. тр. ВНИВИП.-1981.-Т.52.-С 100-105.

34. Кузьмин В.А. Комплексная система профилактики сальмонеллёза в птицеводстве/В.А. Кузьмин, И.Д. Ещенко//1-й Международный ветеринарный конгресс по птицеводству 18-22 апреля 2005 г.-М., 2005.-С.167-170.

35. Куликовский A.B. Эмерджентные пищевые зоонозы/ A.B. Куликовский //М., Крафт+, 2004. 174 с.

36. Куликовский A.B. Профилактика пищевых токсикоинфекций человека и концепция ХАССП / A.B.Куликовский // Ветеринария.-2011.-№1.-С. 19-24.

37. Лакин Г.Ф. Боометрия. Изд. Четвертое, перераб. и дополн. /Лакин Г.Ф.-М., «Высшая школа», 1990.-352 с.

38. Ленев C.B. Сальмонеллез птиц и его специфическая профилактика/ С.В.Ленев, О.Н.Виткова, М.В.Калмыков // I Межд. ветерин. конгресс по птицев., 18-22 апреля 2005 г., Москва .-М.,2005.-С.181-183.

39. Ленев C.B. Вакцинопрофилактика сальмонеллёза кур/ С.В.Ленев, Н.А.Дрогалина, С.А.Бугаев// III Межд. Ветер, конгр. по птицев. 10-13 апреля 2007 г., Москва.- M., 2007.-С.153-156.

40. Лыско С. Микробиологический мониторинг в инкубаториях/С. Лыс-ко, О. Макарова// Птицеводство.-2009.-№8.-С.43-44.

41. Макаров B.B. Роль продуктов птицеводства в токсикоинфекции саль-монеллезной этиологии/В.В.Макаров, И.Г.Серегин// Ветеринария.-1992.

42. Мащенко A.C. Эффективная и своевременная» диагностика сальмо-неллезов гарантия безопасности / А.С.Мащенко, В.В.Алутин, С.А.Тутов // II Межд. Ветер, конгр. по птицев.21-23 марта 2006 г., Москва.- М., 2007.-С.87-88.

43. Мишурнова Н.В. Профилактическая эффективность препарата СТФ-1/56 при сальмонеллёзе птиц/ Н.В. Мишурнова// Современные средства борьбы с заразными болезнями сельскохозяйственных животных и птиц: сб. науч. тр. ВНИТИП, ВНИВИП ч.2.- 1988.- С. 73-80.

44. Мишурнова Н.В. Препарат СТФ 1/56 при выращивании бройлеров/ Н.В. Мишурнова, Ф.С. Киржаев// Птицеводство.-1987.-№2.-С.40-41.

45. Панин А.Н. Пробиотики как неотъемлемый компонент рационального кормления животных и птицы/ А.Н.Панин// Птица, и птицеПродукты.-2008.-№3.-С. 13-16.

46. Панин А.Н. Пробиотики неотъемлемый компонент рационального кормления животных / А.Н. Панин, Н.И. Малик // Ветеринария.-2006.-№7.-С.3-6.

47. Панин А.Н. Новый препарат для лечения и профилактики сальмонел-лезов птицы (применение сальмофага) / А.Н. Панин, C.B. Ленёв, Ю.А. Малахов, Э.А Светоч // Докл. РАСХН,- 2006.-№3.- С.53-56.

48. Пименов Н.В. Антибиотикорезистентность сальмонелл, выделенных у домашних голубей/ Н.В.Пименов, Н.В. Данилевская// Ветеринария.-2006.-№9.-С.20-24.

49. Полоцкий Ю.Е. Защита от вирулентных сальмонелл групп В и Д после пероральной иммунизации цыплят гибридом S. typhimurium и S. dublin/ Ю.Е.Полоцкий, В.Е., Ефетов, В.М. Бондаренко и др./ ЖМЭИ.- 1992.-№ 9-10.-С.50-57.

50. Программа ВОЗ по надзору за сальмонеллезами/ Изоляция, идентификация и лекарственная устойчивость Salmonella. Протокол лабораторных исследований.- 3, 2002.

51. Опыт работы бройлерной научно-производственной Системы «Смена». Тучемский Л.И. и др./ ООО «Все для Вас Подмосковье, 2010.-144 с.

52. Программа ВОЗ по надзору за сальмонеллезами (изоляция, идентификация и лекарственная устойчивость Salmonella). Протокол лабораторных исследований.- 3,2002.

53. Рождественский И.К. Эпизоотическая ситуация по заразным болезням животных в Российсой Федерации за 2009 год./ И.К.Рождественский, О.Б. Литвинов, А.Н. Мачнев и др.// Ветеринарная жизнь.-2010.-№9.-С.6-7.

54. Рождественская Т.Н. Специфическая профилактика инфекции Salmonella enteritidis у птицы/ Т.Н.Рождественская// Российский вет. журн. С.-х. животные.-2009.-№Г.-С.46-48.

55. Рождественская Т. Профилактика и лечение сальмонеллёза /Т. Рождественская, А.Борисенкова, С. Панкратов; О. Новикова //Агрорынок.-2007.-№4.-ОЛ6-18.

56. Салаутин В.В. Дифференциальная диагностика сальмонеллеза птиц / В.В.Салаутин// Ветеринария.-2004.-№2.-С.22-25.

57. Светоч Э.А.Факторы патогенности возбудителей эшерихиозов сельскохозяйственных животных/Э. А. Светоч//Автореф. дис.докторавет.наук.-М.,1992.-.с.

58. Сидоров М. А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов/ Сидоров М.А., Скордумов Д. И., Федотов В. Б.-М.: Колос, 1995.-319с.

59. Сидорова А. Микробная загрязненность воздуха в птичнике / А. Сидорова // Птицеводство.- 2008.- №6.- С. 8.

60. СП 3.1. 086-96 и ВП 13.4.1318-96/ Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных: сб. сан. и вет. правил.- М., 1996.-c.50- 70.

61. Старосельский А.,а. Проблемы и пути решения сальмонеллезной инфекции в современном птицеводстве. А. Старосельский /Ветеринария.-2010.-№2.-С. 13-15.

62. Старосельский А.,б. Пути решения проблемы сальмонеллезной инфекции в современном птицеводстве/ А. Старосельский// БИО.-2010.-№6 (117).-С.7-9.

63. Субботин В.В. Опыт применения пробиотического препарата лакто-бифидол в птицеводстве /В.В. Субботин, Н.В. Данилевская// II Межд. вет. конгр. по птицев., 21-23 марта 2006 г., Москва.- М.,2006.-С. 110-112.

64. Тараканов Б. В. Влияние микроцикола на микрофлору кишечника и продуктивность цыплят-бройлеров. / Б. В. Тараканов, Т. А.Николичева, В.Н. Никулин, Т. Е. Палагина // Ветеринария.- 2007.-№9.- С.46-50.

65. Тараканов Б. Влияние пробиотиков на выводимость гусиных яиц, сохранность и продуктивность молодняка / Б. Тараканов, В. Никулин, В. Герасименко, А. Лукьянов // Птицеводство.-2008.-№2.-С.17-18.

66. Тучемский Л.И. Отечественные кроссы продовольственная безопасность страны /Л.И Тучемский, Г.В.Гладкова// Птицеводство.-2011.-№2.С.2-8.

67. Урбан В. П. Профилактика заражения цыплят в инкубатории на выводе/ В. П. Урбан, А. Н. Борисенкова, Н. Г. Пономарчук //Вестн. с.-х. наук.-1985.-№5.-С.135-138.

68. Фисинин В.И.,а. Стратегия инновационного развития мирового и отечественного птицеводства/ В.И. Фисинин// Достижения в современном птицеводстве: исследования и инновации: мат. XVI конф. нац. отд. ВНАП. -Сергиев Посад, 2009.-С.6-14.

69. Фисинин В.И.,б. Промышленное птицеводство России: состояние, инновационные направления развития, вклад в продовольственную безопас-ность/В.И. Фисинин//У Межд. ветерин. конгресс по птицев., 21-24 апреля 2009 г., Москва .-М.,2009.-С.5-26.

70. Фисинин В.И.,в. Птицеводство России — стратегия инновационного развития/ Фисинин В.И.-М.,2009.-147с.

71. Фисинин В. Союз оправдал доверие птицеводов. В.Фисинин, Г. Бобылева / Птицеводство.-2011 .-№1.- 2-7.

72. Цыганова C.B. Выделение бактериофагов против возбудителей бактериальных болезней птиц и изучение их биологических свойств: авт. дисс. . .канд. вет наук.- СПб, 2009.- 23 с

73. Цыганова C.B. ПатентРФ №2342429. Штамм бактериофага bacterio-phagum salmonella IBP-1, обладающий литической активностью по отношению к S.enteritidis /C.B. Цыганова C.B., А.Е. Гончаров, О.Б. Новикова, А.Н. Борисенкова // БИПМ.-2008.-№36.

74. Яковлев C.B. Антибиотикорезистенгтность в стационаре: контролируем ли мы ситуацию?/ C.B. Яковлев, Д.Н.Проценко, Т.В.Шахова и др.// Ан-тибиот. и химиотерап.-2010.-Т.55,№1-2.-С.50-58.

75. Яковлев С.С. Эпизоотическая ситуация в птицеводстве России/ С.С. Яковлев //Современные научные разработки и передовые технологии дляпромышленного птицеводства: мат. юбил. конф. 15 лет. НПП «Авивак».-СПб, 2005.-С.9-12.

76. НАССР/ХАССП. Государственные стандарты США и России.-М., 2002.

77. Alvardo I. R. Flock vaccination reduces of Salmonella enteritidis infection / I.R.Alvardo //Egg Industry.-2009.-Vol. 114, №l.-P.6-9.

78. Anon. Joint Expert Advisory Comm. On Antibiotic Resistance. The use of antibiotics in food producing animals and humans. Commonwealth Dep. Health and Aged Care and Commonwealth Dep. Agricult, Fisheries and Forestry, London, UK, 1999.

79. Barrow P.A. ELISAs and the serological analysis of Salmonella infections in poultry: a review/ P.A.Barrow //Epidemiol. And Infect.-1992.-Vol.l09.-P.361-369.

80. Barrow P.A. Intestinal colonization in the chicken of food-poison Salmonella serotypes: microbial characteristics associated with feacal excretion / P.A. Barrow, J.M.Simpson, M.A. Lovell // Avian Pathol.- 1988.-Vol.17.- P.571-578.

81. Barrow P.A.Immunological control of Salmonella in poultry / Barrow P.A. In: Blankenship L.C., ed. Colonisation control of human bacterial enteropathgenes in poultry.-Acad. Press., San Diego,USA.-1991.-P.199-217.

82. Beaumont C. Selection for increased resistance to Salmonella carrier-state/C. Beaumont, H. Chapuis, N. Sellier, F. Calenge, P. Zongo, P. Velge, J. Pro-tais// Worlds Poultry Sci. J.-2010.-Vol. 66, N 2.- P.251-259.

83. Brindani F. Presence of marRAB Operon in Salmonella spp. Strains Isolated from Pork and Poultry Meat/ F. Brindani, C. Bacci, A. Paris, A. Salsi,

84. S.Bonardi// Vet. Res. Communications; Dordrecht.-2006.-Vol.30, N.-P.341343.

85. BumsteadN. Resistance to Salmonella gallinarum, S. pullorum and S. en-teritidis in inbred lines of chickens| N.Bumstad, P. Barrow|| Avian Dis.-1993.-Vol.37, N 1.-P.189-193.

86. Capita R. Occurrence of Salmonella in retail chicken carcasses and their products in Spain/ R. Capita, M. Alvarez-Astorga, C. Alonso-Calleja // Intern. J. Food Microbiol.-2003.-Vol.81.-P. 161-173.

87. Cason J.A. Location of Salmonella typhimurium during incubation and hatching of inoculated eggs/ J.A. Cason, J.S.Bajley, N.A. Cox// Poultry Sci.-1993.-Vol 72,N11 .-P. 2064-2068.

88. Chappell L. The immunobiology of avian systemic salmonellosis/ L. Chappell, P. Kaiser, P. Barrow, C. Johnston, P. Wigley// Veter. Immunol.& Im-munopathol.-2009.-Vol. 128, N1-3, P.53-59.

89. Cleveland J. Bacteriocins: safe, natural antimicrobials for food preservation / J. Cleveland, T.J. Montville, I. F. Ness, M.L. Chikindas // Int. J. Food Mi-crobiol.-2001 .-Vol.71 .-P. 1 -20.

90. Cloeckart A. Molecular characterization, spread and evolution of multidrug resistance in Salmonella enteric Typhimurium DT 104/ A. Cloeckart, S. Swarz// Vet. Res.-2001.- Vol. 7, P.301-310.

91. Cole K. Bacteriocins Reduce Campylobacter Colonisation and After Gut Morphology in Turkey Poults / K. Cole, N.J. Stern, E. A. Svetoch //J. Poultry. Sci.-2006.-Vol.85.-P. 1570-1575.

92. Cooper G.L. Vaccination of chickens with strain CVL.30, a genetically defined Salmonella Enteritidis aro a liveoral vaccine candidate. / G. L. Cooper, L.M.Venables, M.J. Woodward et al.// InFect. Immun.-1994.-Vol.62.-P.4747-4754.

93. Costerton J.W. Bacterial biofilms: a common cause of persistent infecitions/ J.W.Costerton,' P.S. Stewart, E.P. Greenberg// Science.-1999i-Vol. 284.-P.1318-1332.

94. EC (2003b) Regulation (EC) No 2160/2003 of the European Parliament and the Council of 17. November 2003 on the control of salmonella and other, specified food borne pathogens// Official Journal of the European Commision L 325.-P. 1-15.i

95. European Food Safety Authority (EFSA). The community summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents, antimicrobial resistance and foodborne outbreaks in the European Union in 2006. EFSA J 2007; Vol. 130.-P.25.

96. Eyigor A. Rapid detection of Salmonella from poultry by real-time polymerase chain reaction with fluorescent hybridization probes/ A. Eyigor, K.T. Carli //Avian.Dis.-2003.-Vol.47, N2.-P.380-386.

97. Farber J.M. An introduction tu the howsand whys of molecular typing/ J.M. Farber//J.of Food Protec.-1996.-Vol.59.-P.1091-1101.

98. Feberwee A. Results of a Salmonella Enteritidis vaccination field trial in broiler-breder flocks in the Netherlands. A. Feberwee, T.S.de Vries, A.R. Elbers, W.A.de Jong // Avian Dis.-2000.-Vol.44.-P.249-255.

99. Feberwee A. Vaccination against Sallmonella Enteritidis in Dutch commercial layer flocks with a vaccine based on a live Salmonella Gallinarum 9R strain: evaluation of efficacy, safety, and performance of serologic Salmonella tests

100. A.Feberwee, T.S. De Vries, E.G.Hartman et al.,// Avian Dis.-2001.-Vol.45.-P.83-91.

101. Gast P.K. Age-related changes in the persistence and pathogenicity of Salmonella typhimurium in chicks / P.K Gast, C.W.Beard // Poultry Sei.- 1989.-Vol.68.-P. 1454-1460.

102. Gast P.K. Production of Salmonella enteritidis contaminated eggs by experimentally infected hens / P.K.Gast, C.W/Beard // Avian Dis.-1990.-Vol. 34.-P.438-446.

103. Gast P. K. Evaluation of the efficacy on of oil-emulsion bacterin for protecting chickens against Salmonella Enteritidis/ P.K. Gast, H. D. Stone, C.W. Beard // Avian Dis.-1992.-Vol.36.-P.992-999.

104. Gast R.K. Effect of prior passage through layning hens on invasion of reproductive organs by Salmonella enteritidis / R.K.Gast, J. Guard-Bouldin, R. Guraya, P.S. Holt //Intern. J. of Poultry Sci.-2009 .-Vol.8, N2.-P.116-121.

105. Gingrich E. Health of U.S. egg flocks./ E. Gingrich //Egg Industry.- 2009.-Vol.114, N2.-P.4.

106. Gomez-Lus R. Evolution of bacterial resistance to antibiotics during the last decades/ R. Gomez-Lus// Int. Microbiol.-1998.-Vol.44,- № 1.-P.279-284.

107. Goren E. Reduction of salmonella infection of broilers by spray application of intestinal microflora: a longitudinal study/ E. Goren, W.A. Jong, P. De Doornenbal et al.// Vtter. Q.-1988.-Vol.l0, N4.-P.249-255.

108. Hahn I. A contribution to consumer protection: TAD Salmonella vacR E a new live vaccine for chickens against Salmonella Enteritidis / I. Hahn //Lohmann Inform.-2000.-Vol.23.-P.29-32.

109. Health Protection Agency (HP A). Available online at <http://www.hpa.org.uk/webw/HP Awebw&HPAwebstandard/HPAweb.C/l 195733 760280?p=l 191942172078 accessed 04.08.09..

110. Heyndrickx M. Routes for Salmonella contamination of poultry meat: epidemiological study from hatchery to slaughterhouse / M. Hendrickx, D. Vanderk-erckhove, I. Herman et al. // Epidemiol, and Infect.-2002.-Vol.l29.-P.253-265.

111. Kaukas A. The effect of growth-promoting antibiotics on the feacal en-terococci of healthy young chickens/ A. Rauras, M. Hinton, A.H. Linton// J. appl. Bacteriol.-1988.-Vol. 64, №l.-P.57-64.

112. Keller L. S. enteritidis colonization of the reproductive tract fresh laid eggs of chickens/ L. Keller, C. Benson //Infect. & Immun. -1995.-Vol.63, №7.-P.2243-2249.

113. Khan M.I. Reducing colonization of Salmonella Enteritidis in chicken by targeting outer membrane proteins/ M.I. Khan, A.A.Fadl, K.S. Venkitanaraya-nan// J. Applied Microbiol.-2003.-Vol.95.-P.142-145.

114. Kimura A.C. Chicken consumption is a newly identified risk factor for sporadic Salmonella enteric serotype Enteritidis infections in the United States: a case-control study in FoodNet sites // Clin. Infect. Dis.-2004.-Vol.38.-P.244-252.

115. Klaenhammer TR. Genetics of bacteriocins produced by lactic acid bacteria / TR. Klaenhammer // FEMS Microbiol. Rev.-1993/-Vol.l2.-P39-85.

116. Kolasa A. Influence of the therapy of laying hens with selected antibiotics on the presence of Salmonella enteritidis in the contents of the eggs/ A.Kolasa, J. Rzedzicki, M. Skowron // Med. Weter.-2007.-Vol.63, N10.-P.1168-1171.

117. Kramer J. Association of twelve candidate gene polymorphisms and response to challenge with Salmonella enteritidis in poultry / J. Kramer, M. Malek, S. Lemont // Vet. Immun. and Immunopath.-2003.-Vol.34.-P.339-348.

118. Leveque G. Allelic variation in TLR4 is linked to susceptibility to Salmonella enteric serovar typhimurium infection in chickens / G. Leveque , V. For-getta, S. Morroll et al. // Infect, and Immun.-2002.-Vol.71.-1116-1124.

119. Liebana E. Diversity of strains of Salmonella enteric serotype Enteritidis from Tnglish poultry farms assessed by multiple genetic fingerprinting / E. Liebana, 1. Garcia-Migura, M.F. Breslin et al.// J. Clin. Microbiol.- 2001.-Vol. 39.-P.154-161.

120. Linde K. Development of live Salmonella vaccine optimally attenuated for chickens/ K.Linde, I.hahn, E. Vielitz // Lohmann Inform.- 1997.-Vol.20.-P.23-31.

121. Liu W. Natural resistance-associated macrophage protein 1 gene polymorphism and response to vaccine against on challenge with Salmonella enteritidis in jound chicks/ W. Liu, M. Kaiser, S. Lamont // Poultry Sci.-2003.-Vol.82,-P.259-266.

122. Mariani P. Localization to chicken Chromosome 5 of a novel locus determining salmonellosis resistance / P. Mariani, P.A. Barrow, H.H.Gheng et al.// Immunogen.-2001.-Vol.53.-P.786-791.

123. Mayer H. Salmonella immunization in animals. H. Mayer, P.A. Barrow, P. Pardon / Proc. The Intern. Symp. On Salmonella and Salmonellosis. Ploufragan. France.-15-17 sept. 1992.-P.345-374.

124. Mead J. Scientific and technical factors affecting the setting of Salmonella criteria for raw poultry meat: a global perspective / J. Mead // J. Food pro-tect.-2010.-Vol.73,№8.-P. 1566-1590.

125. Meenakshi M. Adjuvanted outer membrane protein vaccine protects against infection with Salmonella Enteritidis / M. Meenakshi, C.S.Bakshi, G. But-chaiah et al.// Veter. Res. Commun.-1999.-Vol.23.-P.81-90.

126. Messens W. Eggshell penetration by Salmonella: a review/ W. Messens, K.Grijspeerdt, L. Herman // World Poult. Sci. J.-2005.-Vol.61, N1.-P.71-85.

127. Methner U. Intestinal colonization-inhibition and virulence of Salmonella phoP, rpoS and ompC deletion mutants in chickens/ U. Methner, P.A.Barrow, D. Gregorova, I. Rychlik//Veter. Microbiol.-2004.-Vol.98, N1.- P. 37-43.

128. Mohle-Boctani JC. Salmonella enteritidis infection from shell egg: outbreaks in California / JC. Mohle-Boctani, SB. Werner, S. Abbott // West J. Medi-cine.-1998.-Vol.l69.-P.299-303.

129. Murakami K. Epidemiological analysis of Salmonella enteritidis from human outbreaks by pulsed field gel electrophoresis / K. Murakami, K. Horikawa, K. Otsuki //J. Veter. Med. Sci.-1999.-Vol.61.-P.439-442.

130. Nissen-Mayer J. Ribosomally synthesized antimicrobial peptide: their function, structure biogenesis, and mechanism of action / J. Nissen-Mayer, I.F. Nes //Arch. Microbial.- 1997.-Vol. 167.-P.67-77.

131. Opinion of the Scientific Panel on Biological Hazards on the reguest from the Commission related to the use of antimicrobials for the control of Salmonella in poultry (Question EFSA-Q-2004-079).

132. OzbeyG. Salmonella spp. isolation from chicken samples and identification by polymerase chain reaction. /G.Ozbey, H.B.Ertas// Bulg.J.Veter.M^.-2006.-Vol.9, N1.-P.67-73.

133. Poole K. Mechanisms of bacterial biocide and antibiotic resistance/ K. Poole//J. Appl. Microbiol. Symp. Suppl.-2002.-Vol. 92.-P.55-62.

134. Popoff M.Y. Supplement 2001 (no.45) to the Kauffmann-White scheme/ M.J. Popoff, J.Bockemuhl, L.L.Gheesling // Res. Microbiol.- 2003.- Vol.154, №2.-P.173-174.

135. Prevost K. Effect of genetic resistance of the gen to Sallmonella carrier-state on incidence on bacterial contamination: synergy with vaccination / K. Prevost, P. Magal, J. Protais et al.// Veter. Res.-2008.-Vol.39.-P.20-31.

136. Protais J. Changes in Salmonella enteritidis contamination in two layer lines vaccinated during the rearing period/ J. Protais, B. Nagard, E. Boscher, S. Queguiner, C. Beaumont, G. Salvat//.-2006.-Vol.l 14, N 3/4.-P.247-258

137. Punia P. Pulsed-field electrophoretic fibngnerprinting of Salmonella Indiana and epidemiologic applicability /P.Punia // J. Appl. Microbiol.-1998.-Vol.84.-P.103-107.

138. Rabsch W. Non-typhoidal Salmonellosis emerging problems/ W. Rabsch, H. Tschape, A.J. Baumler//Microb. and Infect.-2001.-Vol.3.-P.-237-247.

139. Rantala M. Prevention of the grows of Salmonella infantis in chicks by the flora of the alimentary tract of chicken/ M. Rantala, E. Nurmi, / British Poultry Sci.-1973.-Vol. 14.-P. 627-630.

140. Riley M.A. Bacteriocins: Evolution, Ecology and Application / M.A.Riley, J.E. Wertz //Ann. Rev. Microbiol.-2002.-Vol.56.-P.l 17-137.

141. Rodrigue D. L. International increase in Salmonella enteritidis: a,new pandemic? / D. L. Rodrigue, P. L. Tauxe, B. Rowe// Epidemiol, and Infect.-1990-. Vol. 105.- P.21-27.

142. Rodriguez I. Class 1 integrons in multidrug-resistant non-typhoidal Salmonella enterica isolated in Spain between 2002 and 2004/1. Rodriguez, M.R. Ro-dicio, S. Herrera-Leon, M.C. Mendoza// Int. J. Antimicrob. Agents.- 2008.-Vol. 32, №2.-P.158-164.

143. Salvage. B. Moving forward on food safety/ B. Salvage// Meat & Poul-try.-2008.-Vol.54.-N9.-P. 10.

144. Shane S. Egg production: what does Salmonella infection cost? / S. Shane// Poultry Intern.-2008.-Vol. 47, N11.- P.32-35.

145. Smith H.W. The use of live vaccines in experimental Salmonella Gallinarum infection in chickens with observations on their interference effect/ H.W. Smith // J. Hugiene.-1956.-Vol.54.-P.419-432.

146. Smith H.W. The virulence of Salmonella strains for chickens: their excretion by infected chickens / H.W. Smith, J.F. Tucker // J. of Hygeine.-1980.-Vol.84.-P.479-488.

147. Snoeyebos G.H. Salmonellosis/ Snoeyebos G. H., Williams J.E.// In:Diseases of Poultry, 9. Edition, Iowa State University Press.- 1995.- P.72-144.

148. Springer S. A new live Salmonella Enteritidis vaccine for chickens experimental evidence of its safety and efficacy/ S. Springer, J. Lehmann, Th. Lindner // Berl.Munch. Tierarztl. Wochenschrift-2000.- Jg.l 13.-S.246-252.

149. Stone H.D. Newcastle disease oil-emulsion vaccines prepared with animal, vegetable and synthetic oils/ H.D. Stone// Avian Dis.- 1997.- Vol.41.- P.591-597.

150. Ueda S. Susceptibility of biofilm Escherichia coli, Salmonella Enteritidis and Staphylococcus aureus to detergents and sanitizers/ S.Ueda, Y. Kavabara// Biocontrol Sci.-2007.-Vol 12, №47.-P. 149-153.

151. UK. Salmonella Nationall Control Programme approarches / Poultry In-tern.-2008.-Vol. 47,№8.-P.10, 12. 143.

152. Van den Bogaard A.E. Antibiotic usage in animals impact on bacterial resistance and public health/ A.E.Van den Bogaard, E.E. Stobberingh // Drugs.-1999.-Vol.58.-P. 589-607.

153. Van Hemert S. Gene expression responses to a Salmonella infection in the chicken intestine differ between lines/ S. Van Hemert, A.J.W. Hoekman, M.A. Smits, J.M.J. Rebel // Vet.Immunol. & Immunopathol.-2006.-Vol.l 14, N 3/4.-P.247-258.

154. Velge P. Emergence of Salmonella epidemic : the problems related to Salmonella enteric serothype enteritidis and multiple antibiotic resistance in other major serothypes / P. Velge, A. Cloeckaert, P. Barrow // Veter . Res.-2005.-Vol.36.-P.267-288.

155. World Health Organisation. WHO surveillance Programme for Control of Foodborne Infections and Intoxications in Europe/ 7th Report 1993-1998. FAO/WHO Collaborating Centre for Reseach fnd Training in Food Hygiene fnd Zoonozes, Berlin, Germany, 2001.

156. Woodward M.J. The efficacy of Selenvac, a Salmonella enteric subsp. Enteric serotype Enteritidis iron-restricted bacterin vaccine, in layning chickens/ M.J. Woodw ard, G. Gettinby, M.F. Breslin et al. // Avian Pathol.- 2002.-Vol.31.-P.383-392.

157. Zhang-barber L. Protection of chickens against experimenral fowl typhoid using a nuoG mutant of Salmonella serotype Gallinarum / L. Zhang-barber, A.K. Turner, G. Dougan, P.A. Barrow//Vaccine.-1998.-Vol. 16 (9-10).-P.899-903.

158. Zhang-Barber L. Vaccination for control of Salmonella in Poultry// L.

159. Zhang-Barber, A. K. Turne, P. A Barrow//Vaccine.-2010.-Vol. 17, N.-P.23582545.