Капсульный антиген чумного микроба и его применение

Тюлембаев, Мурат Ахметханович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Капсульный антиген чумного микроба и его применение
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Капсульный антиген чумного микроба и его применение"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН АЛМАТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МВД11ЦИНСЕИЙ ИНСТИТУТ ИМЕНИ С. Д. АСФЕНДЙЯРОВА

>гб ОД

, л На правах рукохтся

; ' УДК 616.98:579.842.23-098

ТЮЛЕМБАЕВ МУРАТ АХМЕТХЛИОВИЧ

КАПСУЛЬНЫЙ АНТИГЕН ЧУМНОГО МИКРОБА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

03.00.07 — микробиология, 14.00.36 — аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

дясеерташш на сетскзхте у-чеппн степмш доктора медицинских паук

Аарлитм

1996 г.

Работа выполнена в Казахской цротивочушсм научно-исследовательской институте Министерства здравоохранения Республики Казахстан.

доктор мадщйнсхих неук, профессор И.ЯДартинеЕский - Руководитель Центра ВОЗ по -гумз, главный каучгшй сотрудник Казахское противочумного научно-исследовательского института; доктор ветеринарных наук, профессор К.Б.Бияшав - заведующий лабораторией противобактериозной биотехнологии АЗИ; доктор издяцинских лгу к Д.А.Саткбалдлава - заведующая лабораторией инфекционной икцунологик.

Ставропольский научно-исследовательски;! противочушш.! институт.

часов пи заседании специализированного Совета Д 09.Qij.-0i, по заците диссертацяЛ прл Алыаткнскоа ордена Трудового Красного Знамена государственном медицинском институте км.С.Д.Асфекдн-ярова£48001£, г.Алматы, ул.Толе би, 63).

С диссертацией мокно ознакомиться в научной библиотеке Алыатинского государственного медицинского института..

&£ЗДШ>ШЕ ОШЮйЕНШ:

ВДТ5ДЯ ОРГАНИЗАЦИЯ:

Автореферат разослав * Защита состоятся

ЫбЛ^-С 1996р.

ЙД Си-О/М 1996 г. в ¡ЛЛи

г.

УченаЯ секретарь специализированного Совета

нвдаяв

AygyaabKsçgb .npofegsi. Среда шгга: mmгепоа зозбудите-ля чуга X. рз sitia иааЗолызо зяззсказ, носсжолно гасдуаа-ssîsï капсудьпкЗ аатпгся, кзторзй в еовржггзлэа лпгорагурв тэдз scaro STHssjGfert ípas^aoít I.

Нетерза к фракции I опгодмлотся, прзддз всего, двушт

ВСПСКТСКЛ.

КалеудьнаЯ оятагеп отнесется к та еду кетгакеотов, яоторяэ твгно сводка с заругзятаоетьэ баятархЗ 4$¡m, т.о. из спссоб-воетьэ зкзазать ccstçrîarcscîîzîî ю^згцгсняпЯ процесс а оргаивзкэ опрздазвтпи аадоз зтвоттаг.

^рггцйя I пггсогай сявцгфлчкоетьэ я врясузд толы»

зозбудетолп дсат зэзесдкосгь псподъаова'гь am глгпгзп

для еерзлзгвгаекэй дпсглостака чуги. Вез шжбодез чуззгзатеяь-йнэ я епедгфмет препарата, з^эдтазиачэтака для ссрояогачзегой дзгатавв¥2шя чукн, гзжгзиэ*? з сгэй егетзз хсяеугдаШ еитагея kej антатвла к ккчу.

.У^ггжетая ярязэдегзпя 1аявдаязз, яэ удяйятзяьпэ, что $р«2К?ш I кэед^щгягао бгиа вгазяисм иейгодогамзей, разраЗа*»-

гжкузз paasipssa стерсла злздеягеяогаз а йшфзбвозэгая ^угт. йатаряага aisrsjtasyja э?ога каягразввная б^ду? дотетьг*э есвезрнн а послодукзрк разделах и&ст&ягрб работа.

Сасдуэ* визгпы», чей шэгкв senpoea, касещдоея капсуяь-псрэ 2йтагч»яа, осгаэ^ся кад««аточкэ пзуетиакя. Известно, одо назвэлеа шттеавта каясуяьннй витгтеи синтезируемся базтгврзяза чует пра Eaps^HEsraa s уежовягга, ^гизнгк s тетпвратурз s ада *зия«щк>влзге зсазязета. (37°С). В зоне белее шэккх гвкаоратур, 28a, 30°G калсуяьвна етуягэя ешгеэаярузтея в трудна улавяивае-й25 аолпчзегваг. Наяз пзггетпо о дэйсгайа ка синтез этого алтв-

гена ряда физических и химически* факторов (хлор содедалзде соли). Не получали исчеркивающего решения вопроси иамевчнаост] возбудителя чумы по признаку синтеза кадсульнэго антигена. lipas тически не разработали гффзктйввде метода аэучеаая клеточного состава бактериальной популяция по способность- возбудителя продуцировать фракцию I, недостаточно раскрыть- возмшвости направленной селевцив мутантов, измененных до этому признаку. Неизвестны до настоящего времени аминокислота, которые активно унаетвуют а процессе синтеза капсульного антигена на плотных питательных средах, а тажхе зависимость выработки фракции I гш-.робаъш чуш от состава питательной среды, на которой выращивают бактерия. Не изучены сенсятяанне свойства квасуяьногс антигена. Нз определены для различных фракций каксудзького антигена оптимпяьнне сенсвСялизирувдие дозы.

Щшвэденный перечень слабо изученных вопросов далеко не полон к ero mosho бит он продолжить, но и он достаточно ярко демонстрирует актуальность а необходимость изучения целого ряда разделов ученая о фракции L возбудителя чуш.

Всестороннее .изучение проблемы ¡лосе?! шетъ не только теор; тйчаское значение, но в практический выход в Ейде усовершенствования км,мукобйологических препаратов, прамекяемых при серологической диагностике чума, путем внесения коррективов в производство некоторых диагностических бактериологических препарате] Цель работы

Изучать влияние температуры роста 28 и 37°С, качества питательных сред и стимуляторов роста на биосинтез капсульного антигена и на его свойства.

Задачи жгедедовДля весттеакая ^вяя й'шга оврздззеия

1. Изучать aOBSKiiüSSib TSStSQSСНЗНЭйта 5Яф!»Лс*ИЛ КвЯсуЯЬЗЗГО азиата»* чузгг-кз ¡saajcdca es тш&деаздтго рззвка щрвг^аваивя,

2. Ояредежять влнякза кзг&гозяил структур? гахохтХ njssisro шшраба з процзссо роста та гшшчесэдэ ¡гадаудького елтягаиа

з колестя.

3. Лолутать цугоита бшгеаряй чуш, кяузесиеко снпгоэяруз-цшс фрлшг^э I пра 28°С.

4. Изучить здпякяс гктатзяьной срздн а сткцулятзроз рзе?а на снаЁражцаи I при 37оС.

5. Нзутата вкгвтеш&э сзойогза фраггрга I чутого кязрзба.

в. йэучзиь сеисйбалаззругг?» csaSetsa каясуяьпого гптпгс:п.

7. Разрайо?ать епосэб иоисгоппя чузетзятодьиогтяг дяатоста-куаа эрагр-эщтарпого аятягвштого.

8. Уевр.ер£йяе?по8а.?ь способ взятая «мгорз&жа для поеуййовгя соролэпгазсклх psasatia з процессе прогэдз.чпя энязоо^еяогггсаского гбсгвдовзапя.

Нау*пгая .ковазда я теорзугптасаая аяачяиасть набата. Доаазекэ s псноцьэ гясюлоглъзсжого аесяедов«гая кодокяй лунного шшргба 5 згазреяяП pH ерздн роста ed исподьзозаязз капсул fr-

iere ештнгека етргзлх аззтад sas лстэ'чюта ютаяяя для рэста t разпнаяетш.

- Вя®рзйз пейааака воэшшкись nosyneiraa з зяачн?йльнз:з годхп»"8с?за каяеугькэго актпгэза sa вякробшж клеток, шросши ipa 28°С. В срагеттелькоа аеяаотв яаутапа ажэгоншаз свойства Ьракаяя I, аозуззгаоЛ из жнсрэбгюх агетоа, шрэсггах пря 28 i 37°С.

Научна обоснована дикзмига синтеза каяеульного антигена etammsük чугшох'о шкроба при 28 я 37°С и гиаедеин оснавша ее прщщжш.

- Опрзделени осяозшо йнияокзаяоты, кообходшш® для заработки к&аеу^ького антигена, показано от.чхг-&;е,\ юеашов кз различию: природных очагоз чумы по кс-личеотау ашшсккслот, каобха-дншх дяя участия в синтез s Фракция I.

В работе доказана зависимость выхода бактериальной кассы и антигена о? тешературы роста, качества питательных сред и стимуляторов роста.

Изучен ошшокнсяотшй состав капсуяьного аятагека.Щказана роль основнмх компонентов (эритроцитов, антигена и форшшша) в псвьсгзшга чувствительности днагиосгтикуна эритроцитарного чуиного антигенного.

Внзрсые установлены оскобшз закояонерностя вэакмодсйствия различных ¿¡¡ракций I напсулького антигена в форшлндазкрозашых

ЭрйТрОДйТОВ,

Разработан способ пэвпгеник чувстштедьности диагностического препарата и внедрен новый способ сбора крови от иертишс грызунов.

Практическая значимость ъабогч, Разработан катод получена субкультур даааиов бактеряЛ чуш, синтазнрукчкх капеульвый антк гон при 28° С (A.C. СССР 133806. Пол. pea. по заявке I79S662). Субкультуры» скитеэярузяцив капсуяьный аяткген при 28°С, йогу? использоваться б производстве в качестве продуцента фракции I при оптнкальной теапературе роста иикроба чуш н для изучения гекзтичаскнх кехашзмов терморегуляции синтеза возбудителя чушг

УстазюБяены максшаяьаые срока накопления кепсуяьного ант»

s, -

?w& a ïsrap&ifesS »итга Í4B~?2 caca), 6s«за дегтлхьгзэ кззргдз--яекг» 'V5 nji-os (заде арягвгго) пржмдп* г екешзза еодеряггзл assraraaa.

¡¡мцвгаурз антатаяьяах ерзд, яэгхекгщта гяхзд гзйорг&когэ aatgreata, а «зет ora еерэдагягйавул. д едкеййяяа-зщзу^тз жгт&:ше?ь,

' РгараЗстгл потод усгарзняей еерядогичемаей дплгиостгга чупя <Р.П. 152;16).

PaspsáoTNi яе^од мятая аатзрааяа о? кортянас грнзуноз для серологических ясеявдоаанзй в казаках условиях.

Прзддодеял способа закггвггая чузс?зи?алькз5та дяагпсстахуйа экироцетариого ^^гкного аитяганкого. Выявдйнз доаолзвггаяьяЕ» аяянояяеяоти з costase жклеулыгаго внтягвпа.

Якпшгй вклад автора а хеддвхтавжп работах. So везх работах созскатсль пргсстяад неяосрздствеязос учаетаэ. Теоретически разработка проблеа я их прахтятасвая рггадяэсция оеуцзстхзяяиеь яятао аззетрета.

Апвобагяя работа. Отдельное ^раткагжг работа доложена ка каучивх хсЕфсрэяцялх Казахского протпгочупзого НИИ (Асга-Ата, Í975-IS92 гг.); на Хт XI, ХП НезреспуЙлихаисдях нзушю-проктячасаш яокфзрепцяях протпзочушшх учргаденяй Средней Азш я Казахстана, Алма-Ата, 1974, I98I, 19® ; ¡¡я Всесовзной научяо-прзхтпглехоа конференции по reputas очаген чует, Душанбе, 1982; На Юбилейной ко£$зрэ:щсга, посвяг^нкой 60-яетаи Таджикского ШИ эгшдекиологяи а гигиены (Дутанбэ, 1991)„

Публикации. По -гена диссертации опубя:иоо£но 30 научных статей. Из шпе 3 - в республиканских, 15 - з совзных и 12 -в кеагосуяарствешшх.

б.

Основные положения, выносимые на защиту. I, Динамика синтеза и накопления капсульного антигена в чумном микробе в зависимости от температуры роста, сроком инкубации на жидких и твердых питательных средах и причина снижения содержания фракции i в отдаленные сроки (4-5 день) инкубации.

2. Использование разработанного метода получения оубкудьтз синтезирующих капсульный антиген при 2В°С на основе бульона Хоттингера и поваренной соли, с последующ:« применением метода селекции.

3. В производстве диагяостикуш зритроцитарного антигенно: чумного сухого иди жидкого, самоз главное, выход капсульного антигена, активность и количество которого зависят от взятых

в производство сред, стимуляторов роста и температуры выращивания и от штаммов.

4. Лнтигеннпе свойства фракции I, длительность циркуляции, иммунные реакции и напряженность иммунитета, зависимость вышеуказанного свойства от серологической активности капсульного антигена.

5. влияние сроков хранения бараньих эритроцитов в 2^-ног формалине на сенсибилизирующие свойства капсульного антигена

и методы улучшения чувствительности диагностику!» арвтроцитарж антигенного чумного сухого и жидкого.

Бнеррение результатов работы. Разработанный метод получе; штаммов чумного микроба при 28°0 (A.C. СССР № 133806 по заявке I79S662).

Способ забора крови фильтровальной бумажкой от мертвых гр; эунов используется эпидотрядами противочумной систем Респубяш Казахстан и СНГ.

Комитетом вакцин и сивороток при Министерстве здразоохра-ионкя СССР утверзден: Регламент производства 1.« 74-87 па дааг-::ост2ху?1 эритроцитарггнй чудной антпгенньй сухой и ждгаи (от 07.07.I9S7); Временная фйшглопеРл'.ж статья 42-109 ВС -87 Эо? 30.10.1987) и инструкция по щркжнегага диагностику»* эрятроцитарного чумного антигенного с>~:эго и кидного (от 04,09.87)

Исггензине $ I х регламенту производства J? 74-87. Срок введения с 17.02.1988 г. Изтанеиле 2 к регламенту производства ?? 74-87. Срок ввэдекня с 10.04.1590 г.

Министерством здравоохранения Республики Казахстан ка оснозатаи перечисленной нор^тявно-технической документации выдано регистрационное свидетельство KFSEII № OCDOIO ка диагностику!! эрятроцатаркьй чумной антигенный сухой и яндкий.

Инструкция по применению ОСС 42-28-80433 "Отраслевой втацяаретшй образец диагностику?» чупного эритроцятаряого антигенного сухого", Москва, I3B-6 г.

Объем и структура .диссертации. Диссертация включает введение , обзор литературы, главу "Матзрмалп и методы", 7 глав гобствокного исследования, обсуждение, зывода, практические рекомендации и указатель литература. Объем диссертации 255 страниц, работа содержит 10 рисунков и 36 таблиц, В указателе литература приведена 332 отечественных и зарубэетнх источников.

Материалы и нетодн* В работа с основном использовались стелет ЕВ (КИИЭГ) и K-I. 3 записиности от поставленных задач

5рали различные дозы этих штаммов от Ю41 до 2.10 ц.к. Сроки знршцивания культур баян от 24 до 120 часов. В качество среды зыращявшгая использовали среды Хоттянгера (агар и бульон) с >азлячнкьгн гвдролизатами: дрозневой (кордовые и пекарские),

мясной к казеиновой. Среды изготамивались в лаборатории питательных сред Казахского противочумного каучно-иссяедоваталь с кого института.

Для изготовления сред использовали различные концентраций (ог 1% до 15$) мор еодеркащае соля ( íiaOLjCaci^.Baci^, ЫеОЬ2 KOL )

Для выяснения влияния температуры роста на интенсивность синтеза югкробаки чуда капсуаыгого антигена балл взяты I ави-рулентний и II варулаятгшх штаммов (413 , 61/83 , 5863 , 4621, 58/62, 356, 4223, 7509, 697, 231, К~1, ЕВ). Культуры засевали на агар Хоттимгера и выращивали хгрк следуяггдх температурных решшах; 8, 16 , 24, 28, 32 , 36°С. Исследование ка наличие антигена проводили через 48, 72, 96, 120 часов роста з РПГА с диагностикушж эрятроцитаривд имцуноглобулиновыа чукнкм и моноклонаяьяьц яхшукоглобулшювка чуквш. Гистологическое исследование колоний прока ведала ко штоду Bono mi. (1953)

Влияние ааняокиояот', штшмнэв» урацюга и некоторых солей на синтез капсульного антигена нзуч&йи на ктаимах, наделенных из различных природных и автономных очагов чумы, отличающихся свощщ прародно-клюихтичесякаи усговшшк и основususi носителями от которых был вздеден возбудитель.

I. Таласский природный очаг, на участке Бен-Тае этого очага, располоаешюго в лесолуговом поясе, веделено от шз-вздных грузнов и юс блох 22 штгшаа вобудителя чу$а*.

2. Верхнекарьтскай автоноетый очаг, относящийся ж Теть-Шанскоыу природному очагу - 28 птакмов от сурков и ах блох с) участка Улан, расположенного в альпийское поясе, на высоте более 3000 ы.

3. .ТоуаукскиЯ а?;?гшс'ггл:Я е^аг - 47 ггмягои (Зезьет: звсчиынои и ш блох с Sjcai!-ri&2ft (г$бшегсндекз28*йя ^мзза, еоодгняяадо! гора я зеезя).

4. Зслгэ-7ралегхй агеаяой с«лг - 16 ятсздаэ, кщашяшах ■ i? казта c7«c2sí>3.

böcr-o пэучзпо из sts&203.

йугртЯпсмь кггйпмв а фззтзрэх росгл пря 373С язузялазь : яскохь*} яЯ5й?вжьк»й срзди ПС-37, прздасяаЕазЗ для огэЗ цед^ M.Àpsnaaso.l а соавг. (1976).

Сяндаггчаск&я ерйдз. содврзааа 23 л-^пнояжсяота, зямгЕиакз, :сх'.5 я сахар, Визяаз.э огдааьнш: юшнокгеяог п ватехстгэ на ¡анТ'Эя I онредэгязи яугеа йс;ш>ч®яая о^даяьшгг гснпоета-

'ôa, жедяцзк в сзстаз зреди. Кузътуру хяр&згоазз в твчякяо кк сугоа» суспензароаия в 0,85£ расгзоро iimci по X довд. r.ît. ''сходноS кокцснградзай З&ятсрзП дяя пссталозгя ИНГА с ятнтэяьдна орзтрсцягаржа дяагггостякуисл слуаздо развздеяве С9, 1С3, Î07, юб.

Кзясузьтмй аатзгек получила по кетоду Бакзг et al 952) s З.Я.Лэва а А.Г.Но-зо? (1963). Вясукягакяе aastarma «тгфсгзаяж* so сгэсзбу а.И.йсяъзова (1970).

¿ЬгятазсдаткйЭ сосала ^¡шсуяьпого аятагаяа определяла на агюаом хрегж?сгрй$® 3&$®о-Эр5а Штаязя) во Actos (1974).

Актягаклгэ ссзЯс?р,а ззучзлл ка б<шпс asrax вссоя 18-20 грая азучажга распрздсяапяя фразцаа I в органах я ?кздяа брзая 7-73 espraa езтггеяа, зеодучещ^а ара акращзваияя стажа ЕВ хгщ

н серил 19-73, яояуч*1пуэ пря poete ^рззэго кззраба. пря 3°С. Акксгоп веодалп э ебгшэ 0,5 га в лзэ|з пшсовуя область кожгегетзв I, Î0, 100 и 500 SCT. йзесжик ПО 2-4 ет. гсягротажй

ежедневно на протяхсним 12 дней с иселедоваияеи кеста введения, лимфатических узлов, кроля, печали, селезепкк, а&гккх, сердца, почзк, мнзц л костей задних конгчкосгей. Эястракг подвергали исследовании на наличие «фракции I в РНАт. Ккцушт реакция оргааявма и напряженность шцуннтета у белых »ааэй научалась по общопринятой иетодика. В исследован}® использовала капсувьшй антиген, осаздешшй серпогаслш шлояаеп в интервале 20-32$, кроне серии 16-74, которая получена при насызценин в пределах-от 18-2.0%, Серологическая активность фракции X серкк 3-74, 4-74, 8-74, 10-74, 10-73 соотаюяла 0,00025 икР, серш 13-74, 17-74 -0,001 |жг и серии 16-74 - 0,005 ккг. Эти свойства определяли в РПРА с ди&гностнжукоа чушшя ©ратрэцх1т»рньш киауноглобулиновыы с титром 1:600 ¥ыо. Всего исследовало 550 животных.

Животных ющунизнровали в объеме 0,25 ад в дозах I, М, 100 н 5Ö0 шг, Ескрдааля по Ю животных из кзадой группы.)

Нссяодовагп» подвергали кровь. Наличке антигена и антител определяли в РИГА к РИА?.

Срк установлении гаа^кологической эффективности препараты вводили животтш в 0,65-5 растворе натрия хлорида и с депонирующих вещзствоа. В качества депонента была взята гидроокись алшшия, приготовленная по методу В.А..Благовещенского и Майоровой (1959).

Изучение кшуиогенише свойств взятых в опыт препаратов проводили на 461 белых ньшах, Через изсяшшй срок после шнунк-зацяк зверьков подвергали контрольноиу ааарааоюю вирулентный юисробоы чуш (шташ 231) в дозе Z00 ДО!*. Одна ДСЬ данного штата, для иивей составляла 15 и.к.

йзркдагшзгщет бзрзг&зх эрзграцятоs, гаэдээджэ a cestcsfe-3œsaiçm дозазодвяя в аовтавтетазга рзгяазгяжгля щяшводс-гга, а» еяготоялкзхэ ДЕ-аготетакупа эржгродлтартэро ттятъттго пуи-r:?ro. Ст&тзстачэсхут) оЯргйотгу шя-эряаял яроаззедягта но В,Ю.Ур1азу (1975).

С6ЩЖ5 РШЯН

ШШШ23 ШШ (®МЩ2Я I) ВОЗВУДЙШЯ ЧУИН

аастеудьяого аятагзпа о? т^оравпеи.

Диапазон разкисязгам чукпстз кжрзбл oí 5 д© 4I°G ( subii et al. 1957. îîoyior et д1. 1961 ). Оптаказькой гешгаразурой роем за асйусе?ЕвйПЕН азтагтольшк ерсдаж стагаэтся 28-30°С (Туяеяеаяй е сой.зт., 1335; yukui «sí; al- * ISóO; Еоребзгога, 1550; Gaàgii ? 1534; Дскдрядсзяй, 1065 а др.).

Сзязь гшнду тсг-лэратурей зузьгзглрозмяя я устгдепхи ыгатаэом кхззузшого eamrem ^скааразайтая з ра5о?о G»ï5.Fukui et (1932). Assoja вжзэчязя?, iwo пагкяй пабор аггготзяоз «сг®* бдаъ гвлько у етгйаоз, гарго^ггшж яря 37°С. У я^льуур, вкрацвжша: Sps S я 26°С, яаясугша® аггаятея обкерузпта та у??,адозь.

На зафгйкгтяу ^paxqjra I чушйа аахрсбея в явэяажтазньвк» адаяжеегзв яря 28°С указывая? S.lî.Iîopsésora (1969), Н.ЗДоу-а-родекаЯ (IS66), а nosaseaae teaaspasypa poeva до 32°С щагодвхо г $иачй1?еяьяо2дг етагеэу алтпте-яа (Еинааметн, Кольцова, 1976), %-л зэучзпзн вопроса наги устаяозяеко еледугцзз* I. Во асах ?г.?тпг»рй?ур:шх rcœssax (8, 16, 24 , 32 , 26°С) jrareasrea рос? аспгроба чуга. Нпгепсивяость рос?.ч бакгеряй ,

>прздвлляась cposcît кявубацап. При казшгг тглпературах 8 и Í6°C рост пабзсдался к 5-4 сутяет.прп 24°С - 1-1,5 суткам, ipn 28°С - 2 сутки, 35°С е 2-3 суткел.

2. Интенсивность синтеза капгульшго антигена увеличивается с ловыаенией тешературц инкубация.

Так при температуре 8 и Хб°С антиген обнаруживался к 6-4 дням, Среднегеометрический титр соответствовал 8,5+0,03 к 7,8+0,07. Нрк 24, 28, 32 н Зб°С - через 48 часов эти показатели была соответственно 7,1+0,06; 6,3+0,04; 4,7+0,04; 4,9+0,5. Максзшальяая величина антигена выявлялась к З-а суткам роста, о* в соответствии с тешературой была 6,8+0,08; 6,2+0,2; 4,8+0,05 I 4,5+0,03. Во всех случаях Р ^ 0,001.

Тажш образен, с увеличением тешхература культивирования возрастает содержание каясульного антигена в чушоа лияробе.

Интенсивность накопления капсульного ан^нгена в чукнок ынкробе ка питательных средах происходит до определенного шкен: в дальнейшей иаблвдается снижение. Причиной счят&от изменения щелочного состава среды (Жуков-Верэетшсов, 1940; 1961 к др.).

Гкс тодопгчвскоо нзучекяе структуры колонии возбудителя уугт

При изучении больного количества срезов вируленишх и авируленушг колоний возбудителя чуш разшщы в характере роста микробов отметать не удалось. На горизонтальных и верти-кальшас срезах колоний наблвдали равноиоршй диффузный рост микробов. Микроскопически, в отдельных случаях, удавалось выявить деформацию колоний. Последние, как правлю, слегка дугообразно прогибались. Верхупка ее представлена основаниеи колоний.

Внутри колоний отчетливо выявляется достаточно широкая зона в виде евагей полосы. Это тете отирания ишерооргашзаов. Наиболее интенсивная гибель ыикробов происходила у основания стой зона, блже всего приасяащей к питательной среде. По

кврзфрк езэгзоЗ вока я •йгет» я аерзугэ» кФявгжн пжгеяеяаяас» гзгёеяа яовтваигз» • сйашьатея. За »«о говори*

яе* ч»о з ужаяюзгах яеетах аггарзба яегчэ я язгагз онра-т-ягзлясь. т.е. яаяяггеаь бозгэ яязлзсйесоЗннгя.

ГеЗзль етярзорггажгтоз гг$у?ри голонпл происходи? в осношспз ТТУТСЯ лязясй жгатаз.

Шнсробя, прзаехсхи кепэередетззяяо а патателкяоЭ сроде я яадв пярхгеЗ полоса, тень хорезо сзгряяадсг. То зге став кегно сказать я а е$з® белее гптрояоЗ зжв корааааиого роста кзвреЗоп, расяолагеггрйзя кяд зеяоЯ гяйвля глЕяроерганязлоз». В перп~зрт-тасхах отделах последкаЯ кокк» гддэть акахзгячз:о<з "^^ггз.

В хелоюта одпэврсйеяко аду? прсетсс?!, это отаярзйяо кязтех я ях разгякхкетгаа. 1?а сяятгсз, то з атся случав одет! гз яеточазхоэ пятатпд я атрпа даа рагяаозас^зхся чуышх клетса, расположениях иед зокэа гибели бактоглй, ггэгу? <5?,г?ь продукты рассада баятаряй» т.о. яяуягзхи. Но каякя кейтадеяшва, ярз роста бажгарзЯ чзупа па «гордых пзтатэльк&х ерздах отлйпгдтсл сякхчгеэ язяэтэетоа яалсужшого гнтягепа з шпфсбязЯ хаетхэ на сутхя роста.

ешчтаза кг-дсуд7>'.?з?а «ггарет. Для пзу^егтм иптеюзгтеетк сшггеза капсульного гзгеягеяа кгигробсун з к&чаяь~ пкэ тез р&гта в заве содходязггга являэтея яцдка© «зтлтадьагэ среди. Эта ср-.мя дет? кмл яоаьдпязсть про следя?}» одпоергнешо рэе? я раяклесогсго йзжгаряй а д^етку нгяояланяя яятягзга а процесса роста пззройа, хах в егкоа ерздо, таа я » каясулэ жгзгяя (Вейпблат, Взрзнхеэ, Дааьвадякц с соавт.» 1983).

Для решения поставлеяящг задач Сил использовав вакцишшй штамм ЕВ (НЙИЭГ). Б бульон Хоттингера засевали односуточную культуру, выросшую на однотипном агаре. Культуру эмульгировали в С,8о% Iia-c;L . До оптическому кййючкому стандарту до яонцент! ции I клод. Посев произволели зз У,0 мл бульона Хоттингера, в оиъеке I 0 мл (10э м.к.). Последовательными десятикратными разведениями получали ряд концентраций бактерий штамма ЕЗ , равных I08, I07, Ю6. Ю5 и Ю4 микробных клеток (м.к.) в I мл среда. Посевы выращивали при 28 и 37°С. Шсевы на пластянк; агара Хоттингера с добавлением 0.1% крови производили через каждый час в течение 28 часов. При этом, посевной материал разводили в 0,85/5 растворе Wj-CL а производили посев на 3 чашки по 0,1 мл (10й ы.х.). Учет выросших колоний производили через 48 и 72 часа роста. Одновременно из кадкой пробирки забирали по 0,5 мл жидкости для постановки РДГА с коммерческим диагностикумом эритроцитаошы шлмукоглобулшювш чумшм сухим.

Перед постановкой РПГА диагноетякум эритроцитарный иммуно-глобулиновый проверяли на чувствительность, специфичность и отсутствие спонтанной агглютинации.

Результаты проведенных исследований показали следующее-Постоянный подъем ломаной кривой с различной интенсивностью. По рисунку криеой, характеризующей размножение бактерий, наблюдается в первые часы уменьшение количества живых микробных клеток о последующим увеличением. Выраженность этого уменьшения для различных доз не одинакова. Она более выракена при лозе .

10 м.к. Цикличность подъема и спада кривой размножения за период набшщцения повторяется от 3-4 раз.

Дал ишфейоз ^sr, рае?уцях яря 37°C, ^ярактср^п

одьсз зшжвваокзя с аезтчзтваытаз еяздааз.

I. Нлй^ддбпйв хазеульямгз вдггзгопа э спшрэбах арз 28 v 3 игзагааьзой орздо дхя bôôx ¿50a означается стугейтига разшихаа. S 7

зя доз 10' , 10 и,к. а трзяз 8 чзлоз прадожЕюаяьаоегь apeona, «агстагедзя г-!?ягепа «остакига 1-й таса с аомедущЕа псдьазгоа, i з длхьггэйгяя зреиош» кшсояяекго йптпгона еодсЗлотся с 1-4 rasos. Пря дозах Ю^, 10 rus. парзгпачазьпэ airrnrss о&гару-ся2зэ?ся z У-il nssm нсследозакая s каяапяя»й«5?ея з течозгза паса, i tiepgs 19 часов, s ктаэета ансоза» крздолкгггзльлс cíí sptaeira юзтамэппя rmnreia в зснзелом состазляла 2 часа.

Ваяагсшяа увагзгтагтая кзлстяького аятягогл при ecos |озях вакцина одинакова, а ярододлятелькссть фгза яааоааояяя юга? б*ль з процсссо огсгга различной.

ВпряЗотаа я&ксульисро яя?ягепа у ятеета S3, кз прсдутцгруг^зго I вря 28°С, по сгштеэкрущзга ара 37®С, (¿чхкчгзчея еле-ааасопеязрйоетяка.

1. Вела кка BS, зт!радзнтаЗ прл 28°С на агара Хоттккгэрл ï течгет> 48 таеов, пересев.1®? з йугьо?! 1ог?йл?эра я хухыпт-зузт ?1рз 37°С, *о для иояпявкяя з достаточной яолпчестзэ жяфо-Зоз с капсулькця анткгзяоа, бзятаргз к^кдаэгеа я

азразде.

2. Для разятанк доз щюдвикатааьиос'гь этого параода

Л f« »» р

теодтомсоза. Яра поезео 10 . IÛ , 10° и 10 , 10 я а. а:, згзг яэрпод ужмачзгаяйя соогвотстзгнкэ дозез ва 2, 13 я 10 чагав. •icjt гадко» к уряяятпкея посевной дозн датеитноз зргая уеояьвазтея. Нрзвля синтеза юшеузмюго «геигодвх яра дезе

10° м'к> доела латентного времени постоянно поднимается вверх.

К 16 часа».: после посева культуры кривая синтеза антигена пой ним.

ступенчатый характер. При посеве 10'', Ю6 м.к. это явление ваб-

людается к 13 часам с момента посева. При малых дозах (10й, К)1 м.к.) чумного микроба синтез антигена с самого качала отмечаете:

подъемом (в течение 2 часов), а в последующем принимает ступенчатый характер, но в первые 2 часа подъем осуществляется на одинаковые гемагглатинирующие дозы. Такое накопление капсуль-ногс антигена в питательной среде и б микробе наблвдали через 15-22 часов роста штамма ЕВ.

ПОЛУЧЕНИЕ ШМйОЗ БАКТЕРИЙ ЧУМЫ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ

ФРАКЦИЮ I ПРИ 23°С Биологической особенностью чумного микроба , выработанной в процессе эволюции, является способность его продуцировать видоспецифический антиген - фракцию I, при температуре, близкой к 37°С, т.е. при температуре тела теплокровных животных-носител! чумного микроба.

'йы попытались заменить биологически активный тешературиьи фактор другим веществом, являющимся слабым биологическим мутантом, при наличии которого в среде чумной микроб рос и размнсжалс Таким условиям соответствовала поваренная соль, которая входит в состав любой питательной среды.

Предполагалось, что гипертоническая среда у мутантов дол.т.ш увеличивать синтез капсульного антигена и тем самым способствовать выживанию бактерий в среде с повышенный! содержанием.

Для поучения штаммов чумного микроба, продуцирующих фракц! I при 28°С, приготовленную на основе обычного бульона Хотчякгерг с рН 7,1, гипертоническую среду (путем добавления стерильного раствора поваренной соли до 2-3-4$) в объеме 5 ш засевали

да^бутй^гэ «rsjesj» стязоба «gras, едвдярциу»

«ра ЗЗ^С в Уйгдагзга 72-96 п. с косжад^етул касаагз жяздка 24 tjaea. баогга^оаогяедйаэй дагя*2 isa «¿годяЯ агар

с рН 7,1. Зосвса •¡шзэ'Йарвяагв asa э топекяв 4SU5S чъгт. Нлгажя» $?ззкс2я I ^вгкстр^р«»^?- ное?гдаэв?ет росщет пзйсяЕйоЭ геягатдятша^гя»

Йогод жйшйя (Л.С. Р 433Ш>) в яабераяоряах усдогяаз:. Еетгэ врязодягвд pssysvísra сераг&зк»*

3 too ззя?о дга sasa^asras (S3 н K-I) я spa «друягат-йш: 2?Екза (31, 1609, 1640) Р-зараанта чраявто здофобз. 8*а jvrszzia яря 37аС гцрззззеаия -гграЗатжадя ^рззщпэ I э зп^тцуоль-tisú яодятзстпз , одна г^лнпгзяьнаа гсггагглэтитяругг^ая доза ги:?л?аа дал эажцгают: гжхпгсз (£3 a ÍÍ-I) сосгайдяла 16-31 хкг, г?л:., а кгггаа 31, 1609, 1649 а* 31 до 62 я. а. Шаека засевала з sí.rr-ísarrL'ríí'p з еоотеэгеятет с прйдяагает,5г нвтедсз.

Bes етаггза кед даЯстзггя гась сгавовгггясь способкгзл зжгЗмигагь фрзжцгэ I, зтгета ЕВ, 1609, 1640 з несколько

больз^й стелена. В контрольны! посевах raí ед?га кз яггккоз вэ дродуцзрозая при 28°С фажща I»

С цозг-я получения пт.г^ов с напболкгэй е?елзиьв supaSo-nc? фраадия I при 28°С, вакцяяные агент ЕВ к H-I л згаш 31 бавя подвергнута сазекцка. Дяя этого озужазга язеезазя яа аг&ровио плаезпяяя дяя получения 100-120 ааозяроганшх ко^опкЛ, чзрзз 3 суток зта жмшнаа отсевала на агаровые пааатяияз и изад^врс-заги ара 28°С в твчзгсяо 43 часов. Субкультура, содвркаг?5о ггаи-бодь^яе геяагмютзяярувззге доза в ИЗГА, подвергала вторичной селеацкл.

С селекцией процент отряцатеяышх реакций уиеньжавтея, а ароцект пологатояьзшх раащкй уюягогшятвяг Такяа способов

кожно о у селехдд о:-шро а&т ь етгаа? чуичог© микроба, у которого вся ясяулкгщя могла бы в течеше 16-20 часов вырабатывать фращка I в достаточной количестве. В пэследу&щ&з ш кознтгшюь получить вирулентные стсьсды, црсдуцнруюяр«} фракцию I при Для этвго

взято "i'pí! вирулентилг птакаа «з горнш; и пустынных очагов чузш 249 , 744, 231. Перед постановкой опыта все культура Еьссвазсади на морских свинках в дозе 10 млн. Бактерии вводили подкожно в правую паховую область. Зараженные еиеотшэ пааи в течение 4-6 дней с патологоацатошческини изнененияни, характерными для чуяной кнфекцш. Лосевы на среду Дваксона Беррауза (по две чашш на каждиЯ сташ) односуточной культура дали в 100% Р+- колония. Проверка их степени интенсивности выработки фракции при 3?°С показала, что одна гекагглвтшшрущая доза антител в PGFA составила 31-62 тыс. п.к. При внращиванни этих культур при 28°С фракции I не было обнаружено. Двухсуточную культуру в дозе Ю и.к. в объзш 0,1 ыл засевали в вкаеопис&нную среду с ссдерганнза процента солн от 2 до 4%, висеви производились в сроки, указанные в додной методике на чалки с агароы Хоттин-гера н 1% геколизнровааной кровя. Постановка реакции пассивной гешитлвтшацпй с 2-х суточной культурой показала, что фракционн субкультуры появляются уке через 48 часов роста в гипертонической среде, на гегштлютикируваая доза составила 1:500 тнс. 1:1 шш. и. к, Появились такие етаггш в 2$ нась бульоннш растворе, пра других концентрациях такие субкультура не получали Роет культур ознеч&ася от 2 до в растворах KaOL бульоне Характерным является то, что во всех случаях оптзшальной кенцент цией для получения фракционных штаааов являлись 2$,иногда 3*. У шташа, гешотдатиннруюзде доза которого 1:500тнс.и.к. »процент Р

s&wtoe домятая s* т.о. ?~хтткз rçgeeae?îgys« едд Р+

жлотяжмя. А у cySsyssswp е г®каггл^а:»зуЕГ>ой дозой 1-2 нам. Р~ клогзя esarasusv аз эадаэ npssasspjs* Р* ase?**.

Яеутааяа вдяяаяа вроиоз грагатза на стсйгяьяссгь ешгаза ч&яззза изя5«б5я »ааеузыяж! аздатваа spa 2£Рс аогазааю, ey^TÇîîb'ûypa, отейжшг» язрхЖатгшгг^гэ »йксвдз I ЕЭ-87 я It.. 1-3, ж-з жраазвая л «зчсяяа I гада 8 заспдккги заде s зззвдеаькгпа ш уурагаяз esos сзвйвгза.

Суйяузьгуря, сгахагггз сггг^эз «arares», aseso ерзтьегп a TOïsapîoro Bascosa зосетажшзгазз «sssa свойства. В so so зрзжс, эазарг'зизроз'гаааэ г.у«5куль-7ра ко зосствпавяззала сз?я епэйстпа весгз пятого етрясзза, Ера яссаздозапвз едрзэ 6-12 ефсяцов поело хрднзкзя. 270 сбз*0я?заьг*е0 сзязахо е тса, п?о spa гплязго пробгз парс^яхеэ з ярсбзрго ка еоздааявя горкогач-посгь» tío щпводз? ж тсягша» аатательноЗ ерадя. Зто обегоя-отрзщ&ташго дэЗйгзуг? на саэтез ааясульяого агшггепа еубзуаьтургст.

СуЗаудыгуул, кграйатавдкза) ^sasrpa I з псЗодкгса згозз-бнзураэ таком? свэйегго сгптозарэгагь аааеугькзЗ аотэтеа.

СШЗЗ Ш1ШШЗГ0 АНШГШ. Ш1 37°С

Обгзяяпзсгао, ето шжшенвнесгь росга баетзрай «упа забасят о* натаете-а срзд. Назатаазэ владства

ия»атвяыгах срэд ксжо досгггд??ь кзсколькпа цууягн: naucsca ssssro ецрья для азаальзозаетя а пачостза осаогн; хокс/руврова- • аап аогза, аугез аэдбсра свсазекаэ: оааоз а дейшшгяяв а угэ bsedbses» ютатолькаэ срздн доаодггиваааа аагрэдсаатаз,

Б наших исследованиях использован третий путь^ В работе пршеияли наряду с кзвесткш стимулятором, такш как гемаливаро-вашая кровь, к каяо изученные: коякбденовокислый шионкй, стимулятор "И", пептон, лентехнан н ОП.

Посев штагша ЕВ чунного микроба производили на ыяскоы и казеиновой агаре Хоттингера в иатрсцах, а которые добавляли стимуляторы роста в различной сочетании 1% гемелнзированной крови, 1% сткаулятора "М", 0,5 CgCl % н 1% пептона. Есего было засеяно 821 иатрац. Посевы инкубировали 72 часа при 37°С. Статуи кякрэбиую кассу обрабатывали по ыетоду Бейкера с соавт. (1952). Жидкую фракция I заыора&дьзлн и высуаивалн и в&кууаио-сушльноа аппарате ЕС-30. При одинаковой посевной дозе 2 вдрд. u.E. 2 ын получены следующие выходы фракции I (си. табл. I).

Таблица I

Процент выхода калсульного антигена аз штаггаа ЕВ

в заваснкостй от стимуляторов роста при 37°С

Среда выращивания и стимуляторы :Кол-во наблюдений :Средний арифметический процент

Агар Хоттингера мясной. 1% геио-лнаированной крови, 0,5 СаСЬо 6 (7,6-10.5) 8,%0,Ö2

Агав Хотмшгера мясной. 1% гемо-лкзироваяной крови, СцСЦ - 5%, пептон 1% 7 (8,8-10.5) 9)2+0,02

Агар Хоттингера мясной, 1% геио-лриро|^нн^й^крови, ^1^стимулятор 8 (8.1Л2,1) iô,4jro;oé

Агар Хоттингера мясной, СаС12 - 0,5^, пептон 1% ' 7 (7,1-9,6)

Агар Хоттингера иясиой, геиоли-зсроваикой крови 1%, пептон 1% 8 (7,7-10,4) 8)8+0,03

Агар казеиновый, СаОЦ - 0,5$, пептон 1% 7 (6,9-9,0) 7'5+0,03

Каа гда аз язжедотш: дзякнх, ааяакгавькза зяход фраяарсг I туаяор© акзроЗа (в йроцгтаг) вазу?®» аа атг^а Хогеангера , s 'лотораЗ де&одог» 1$ гййшгшнрэаяяяая ¡sposi»-, сгкгвдкагорк ЯМ% СйЗЬ а - е гдащнйг.

В г^жпагодеедз чугжаг арпрязюпрааг гетатнга даагяэсяг-гвзззва мэзто заждав* квяз^кйЭ «ш>д йраацга I.

Няуч&кв змзягш» разгичкяа по заязвтау сред к ветфяятврвв роста $шза?дслов0юкио?9 акзоааа а леггаисдаа (ареяара® Явная-грэдскогс тоапологЕчесягге Епзтзтзгта) на слз-гвз калсузьяог© аатягеза.

3 stnt? sx яспзльзодазя сяадугг*яФ сагагаЕмгаз среда, s?sro~ •геглвягзкз лабораторией яятатвяьнва: сред КхдПНБ!. Среда :гз корзэвкг угдегодородязх дрогшей (аяяазшЗ азот 50-60 кг %) с до5азленг.ен сульфата кзтрая (500 ш»/ая), аяенай агар Хаттязгера (глж-жй азот 133 ггг отар из ^ржштатавиого тарзгара яазэает. (гйштагй азот 133 иг

Нолябдсзззоаяслпй вкаоязй (1000 «г/л) добавляла в срзди яерзд их стердааазцязЯ , а лектзхяял (1000 гтг/л) - яосло етврпл^иг-ш, иерзд сЕакявашюм агара в «атрздах. Ддя пзупояяя етяауяятора QU-10 (продукт распада азко я дзазгсагфэяаяез ояясз этнлеяа) йрагя среда с еаягагтя азотоа 140 т % я добавляли аз распета 10 кг на 1л. В этет огятгз яспегьзззалз гадрмцзат, пзготозлеяхма яз гзяарсказ: древней. 3 гапястсо яелтроля асяодь-зозаяя та на .гг^дп без стяцуаяторев. Среда для оготзэ разяя-вана во 350 пж в 20 зэсешшг натрацах, т mac 10 - со стязуля-тергзя рзста. Всего а ояяг бало взято 160 аатржцоз. В Еаадцй аатряд засзгдся едгоеуте^жта яуаьтуру яаящяягого этакгт SB з доао 2.Кг д. я. в 2 мл 0,85 HsOL . Seccsa згцрггрггаяа яра 37°С а течзяпе трех суток, затея кзядий наград сгшааля 5-10 ox СаСЬ.

Результата елнтов показали, что штвшх ЕВ неодинаково рос на взятия в опыт средах. Скуднкй рост отмечали на дроажевоа агаре. Этому соответствует выход бактериальной пассы 200 иг. Добавление к среде кояибденовокисяого аммония значительно улучаало рост культур к увеличивало выход бактериальной касса (580 иг) почти в три раза.

Со стныудятором роста квпеудьного антигена (5,6$) в 1,5 раза больше, чей на дроетшвон агаре без стимулятора (3,7*).

На агаре Хотткягера, приготовленном из мясного и казеинового отвара, рост ютаныа ЕВ каг в опытах, так и в контрольных серзях агара бет обильнш, что хороио видно из выхода бактериальной массы на «йеной среде со стимулятором - 1350 иг и без стнцулятора - 1200 мг, на казеиновом - 780 ш\ я без стимулятора - 950 кг. Процент выхода фракции I из микробной массы, полученной на мясном.агаре без стшзуяятора был 8,8$ к со стимуляторов - Ю,4%, на казеиновом агаре 8,8^ ц 9,5^.

При проверке стимулнрувщих свойств лентахнкна получили следующие результаты. Хороавй рост шкроба отмечался на агаре Хоттннгера с мясным гидролизатом. Со стхгзуяятороа значительно лучие (2390 мг), чем без него (1974 иг). Это хорошо видно по выходу бактериальной кассы. На казеиновом агаре лентехнкн угнетал рост микроба и соответственно выход бактериальной массы был почти в два раза ннже (.1156 иг), чей в контроле (2045 иг). Как и в предыдущей опыте, рост чумного микроба на дроютевои агаре бил значительно хуже (са стимулятором 540 и без него - 450 ыг).

Яроцзя* выхода <Jpw2«ss I кэ какрсбкой hs-ccïï, водуззкаой га дроакзяога ûrsça ее е«иуяя*арся и баз «ягаудягоря, 2,9$ я П9 яяеиого, «оотсэувтвэгаю 12,2^ - в» гааэкновэго -

ï&ass обуазез» хзюеео срздп Хоттаггсра оста»?*« пока iv;is:jrrrr:.vî дяя I«

Результат:: опгеа вог^гзда,, что сзход яязсуяького asrarока на средах Хотеаггвра о дабаогепеез гддр?»зоа»а га» na c^sssr itSîEspccîST, "en яшдоювзгЗ пз сухЕК пз&зрехж: дркетой с. добаз-я»яави сюлфяяторя. ött-IO, что ywssanasiuo гздяд кз&еуз&вого слтагепл та 1,2-32.

ДеЗавхягсо стимулятора ОП-IÖ х та пщхккттоз ГЕК»ГЗС

я мйезяопзх зртгодяго s угггзте.ха crsreesa казсзяыгаго сзкягегз псчгз в 1,6 p&sa a Ï ,8 - по срэгйктггэ с хонурэлся,

Йдятвгэ jsr^oratcaa?. s^Tsrggan, увпаязгл, g'jrasoTogux еалс%» sa ..çmnraa ггегсуз&яого аятэтапд. Изучали прп сптпкаяьнай сшяаза asrareaa гг-гкературэ <37°С), на сядазтагсэсжа сводах ПС-31 (Арукя&эга, Ядтссезс-зП с сослт.s 1978).

ч Взятнэ в ¡яка? ИЗ zœœstQv п® рэедш па срядо ПС-37, трэбул для essswo э ааякспкэста от яоста зздеакйсю»

елеяущзФ сжатозствжопк Бзрхяэяараяоаяа азтоксдяаа очвц> -L щгстеал, sx> -кеягкинеа, ьъ ~ß - ^г.-сгл — - аягхшньиь -задал, х& - дайщш, ь «ззолеШра, ль -трзоязк. Тая&емкгй азтввсяязЛ о-за? - з ?ля«огег-Е2а гхгноюзсяоткк, но ?:з яуэдажясь з DL трвопякэ. Волго-УргаьсхчП степной очзг ï з »ь -рояпзэ, ь -пзагайцпаэ, иь- Ji -фотвюзоС- а.лет», х. чззжшю a Bj. Тауз^ггсггай автояозклй <иш»: a dl -этлше* юь~ ^ -гсхгадс, C-í -2.SSÜSS3, L я i» -азоге&щкэ.

Hp® кзуггеамя aaussssoc-m Bsigaöüvss ^aiuçcK X st гшшэжимс* ват&зажэв к солей, 0ш» установлено, что дяя юмшюв, крсааа фзягорои poaiea, даа в^эай'огкй «яисева кесбходкц рад обдае ашша saoao» к еоаай. К шгз оросятся: х> -ajarsssm, альфаашшешасляная asesoïa м Ca. Иксам о* кш су&шгав,, вдеяеявеп:

йз Волго-Урааьехого етешого очага, дяя шгеексяшой Bspoáotice му^д&атся сер в SL -орштшз, гжщиие, 1 -цктрухиио, альфгаязко ¡аасяяяой L -гжгггажозой кислоте, бкотат@, ;<кко«я1-

, esssjiß и SI* -ceppso. Из Tayiçyîscxoro - ¡stesaa, ввдейвиюш от бозьзих n&sx&OKt и Di» -треошшз, сь -тра&гофааэ. Из Bojseh«-ft&piœexero - s «зетоуксусзза »sesofe, dl игртгевфаз», DL -¥црозшз, ( i -гжстедшо, sswssais Bj, ь г$$трате

катрзя. DL -трэзинве, Ii -аеаарагша к DL «-оршжше. Из Таласского - ет щхзвйдгви: : s вгесгаз Bj, jjl -оравтжа, шшоуЕеуееой eaasota, dl dl -яароэииэ, L -

ГЙСТЩЩКЙ,

Tassîi сйракол, sas кошшгагавт яровддвшгэ enstss, дая esjjsSo* вякроёен шфьва« шгзгеаа. aaseerae» в кастояБ.оо spsâîi œzno~ mexeru нзойходши s пэодккаковой «споен.

йелучгкжа дшзш поЕггкзсвт, дае OTCSS, заделзнака ш, террзторза раздатаак лаг^дафтасг-геегрфэтзсзЕ^г y^assssr, й'гак-чгатся es потребует в еллкоккслотше, шсйходкап: дея фэриа-ровгзшя капаулмютэ еетикша чугшэго гагргСа.

сг,аД?.тг-". Щщеульз^й агггш'&н, паяучзшшй вцрг^вогх^и tjjpsoro ssspstía вра 2S в прэдстсзляат сэбсй

частаa црэтешг с ч&гкчиичяэа структурой, сфэргщроВЁгшой до еуЗьадшпщ (ВоПнЗдад с ceas?.» 1973; Ссрйойккцза с сода., 1992; Т&ргдзако е еоавт., ISS2; lascives, I9&7). В лжфгзьта акоукоиЕса состожЕй цуше«ез, хйзккзвщмэ , £слос Бсгйатйо,

i ., i еоегзяцза кз тсзяш;, хъзхяха ¡^««шкгазегак «давя, paeesopssas ■'

э дасишароваагай гада, $ззяаяоиг»с«са рге*ворэ я раажтезо:

раетзорзтагяс. ^«авз^яяряна гэз еягнрена та ses» I гаи. Дадьтоя •

я а^нзевтея к гезншга&кькзя аякггеззя. КракгсзеЕой тоаар&» j

тур-ой яаяяэтез fea з тэченае 50 сояуад щдаодит к

паякоц7 prise,аду алтетет до слягсгмр с гсдекул.чртга взссз ¡

КД«, ззс субедиакц фразцяа I so дагагя ргзяячннх ;

азторэз тооднозиасзи . по Й.Р.Дадгду с соазт. ( 1^72) -1030ЗД, по ВаЗЕАгеду (197-1) - 120С0Д, ас Л.И.Сев*обаЕцвзу с соачт.; (I9S3) - 135СЩ, яо ПД.Аяжкзгвву с соаот. <IW) - 15030,. ¡ по J'-O.Beruiet, 2.0.ÍornadeaííS'T?) « 16000Д, !

■ч i

Изучая я гзгхгазэ рйадагшшс тггпер ¡и^ркях саптсрод, из только \ ка азтйзпзияэ когчкуляриой структура, яо я гл ейролсгггсосг^гл' активность а евнсЕбалкзпртггсга способность актпгеип эрятроцзтоз б aparra. Прг; зтоа подвзргадя ангагеи изгровнсзз з водяной банз прл pawnwœa тегшаратурнвп раясг&к. Воздвйотпогадз на сотагзн теапературой 60,70,80 , 94-33°С а течагага 2,5,10,20,20,4-0,60 я ' 60 ■¡гжзтг. Контролен слуха« капсулышз turrare», растоорешшв дкстаязчрозаяно»! водой прн кокнатпой температура с рН 7,1-7,2. Свражопивсщи «сгкеяость язупааи в ИНГА. Результата асеяедоэапкя логазодя, чягэ серодогячасяая акк?.яность казсульиого антигена пря двйствпя рл«йгсвея£ тгапзратур саадяяагова. Тек, теалзратура 94-96°С в revoie» 2-5 rsray? разрупаат сятигея.

Прэг^взжиз ¿ратзщя IA 28э и 37° яря 80° в тогзпна 20 пяк. приводило к усздггсйгкз зе ажгавнастя. Волге ддптзльноэ дсйствсэ разругало аитзгзн. Полозптелыггэ ядяяпха тэжоратур» 70°С прояи-аетэсь па 20 изн. прогрввакая ш ижизг&аькоя взлгтаяа действия аа активность достигала к 30 кпяутш, а па зтоп уровне дерзал ось

в veceras ежэг© срзка набяз&ездш, Сарсзйгвдзе^&я ôKïSBHôSïb яроаядвяоъ Çpsaspa Ii кед ахаяпхш тсхаоратурз 60°С кз кшаамзя«!

Иауеэаа® дзйэвдйя passmma «¡ssopasyp ш ipsKçsa IB, assysea^rs npa 28еС к вовегедо, s сзгаазэа шаторяетея sascejïsnepsocïb, дал фравргз IÂ.

Тетка еЗразсгг, доЗствао ^еапэратура та анясудыша мтсатея (SB к 37ÜC> завгек? ©9 ео кштеакд и врэдгхзштоаьсоств.

кктзкх9яаув?& ccg?RO. В.М.ГуйсроЕа с eoaeï. (1967) уе?о коваха, ^îo easasmasssisiä сестаз fjaagsai IA н IB в pasjss^jas Bîîasas щшйго wxspsàа одеаташ^З к еэдорзот 15 ааагоЕвеяо?. B.I.BefinSift* с (1974) устаповаан 17, Д.Й.Акаешэв е

COSBÏ, (I9S7) о^шрушшя 18 егзш^язгсдог.

Нггш ейнарудеш в составе Еаесуйьпого aassreма 20 сгашо-кйслоу: алашш, рлйцип, вахяк, ясйцп!, кзелепцян, çpooaaa, еарак, дранка, тгааанй, аешрагвяэЕая sücsoíü, щгстекя, вкси-нралня, фэетгааашш, ггвтезшовая еесдо?», ораягая, тнрогнн, гнстадан, аривдшз, ш в тряиоф&а. Их ебгро тавга- es swkguv or качр8е*га тага?сльяэа сроди s tssaepasjipa щзагркамия шгрзбо.

АШШЧШЬШ СВОЙСТВА ёРАКЦНН I

йаучзккэ c£o3e?s жезсузьзоео sawmisa aocsaçsas аиеяаниь-кое количество райс-г (Басов с есазт., 1964, 2965, 1970; с еоавг , I9S9; Екарзгаетч, 1968; Нахерюгав, lassai, 1972; и др.). СуфетьаяЕэо вкачзиае я асеяздозашях этаж &в*орэв предавалось азудзшзэ характера вдрауищая п кгаушгашозга фрлдцам I. Пря эяоа устгшомвйо бисгроо удалена® еятатеиА аз ерч шпша пра вводеш® без дааэяаита, есгорггй poaao узздкчазиат epos ареЗявйашз I в ерггшазиз a »ваяна. Но шиза дашга,

в организме белых шшей при подкожом введении в паховую

область капсульнохч) антигена, подученного при температуре

выращивания чумного микроба при 2öüC (серия 19-73) , up количественного содержании 2 организме и по срокам обнаружения при введений малых доз (I в 10 мкг) не отличается от каясульного антигена, полученного при выращивании при 37°С (серия 17-73). При этом, сроки пребывания колеблются от трех до четырех суток. При введении бодьшх доз фракции I (500 мкг), антиген серии

15-73 даже'.несколько превышает по количественному содержании и срокам обнаружения в организме фракции I (до 9 суток), по сравнению с фракцией 17-73, которая циркулировала до 7 суток.

Иммунная реакция организма на подкожное введение каасуль-вого антигена. Изучение иммунной реакции организма белых мышей на подкожное введение антигена из микробов чумы, выращенных при 28° в 3?°С,показало, что продолжительность нахождения антигена в организме жявотных различна и бодьие всего зависит не от температуры культивирования, а от серологической активности антигена и от вводимой дозы. Так антигены серии 8-74 и 19-73, полученные аз микробов, выращенных при 28°С и антиген серии 3-74, выделенный из микробов, выросших при 37°С о серологической активностью 0,00025 мкг, регистрировались в сыворотке крови в течение 5 суток. Антигены серии 13-74 я

16-74, подученные при культивировании микробов при 37°С с серологической активностью 0,0005 и 0,001 мкг, циркулировали

в организме в течение двух-трех суток. Во всех случаях вводимая белым мытам доза антигена составила 100 мкг. Сроки появления антител в крови на первые три антигена (8-74, 19-73 и 3-84) на четвертые и шестые сутки, а на введение капсульных антигенов серии 13-74 и 16-74 антитела появлялись на 3 сутки.

ШрзодЕсвкоеть вздьеиа е спада иезячеетаа аэтягэа s perse храт бедах esasB уетекозаваа. дда ввах/со^мй фржща, кезагзеяео от сэрожогвяоской <шяш»ес« юс в о* гаазюраззграо«» ззйрзззжакая вдздтури.

С цмьа аеучошгя шйушшй рзгйщш оргазагааа íitísosítísc ш вггдаака'Ю s 500 wmtrona вршаэеаик капсулы.ий аигягса есраа 10-74, шаучйкйкй пра гаргццказзг ггпфобе. нрц 28°С и йлжтгаа 4-74 щк шткроба лаз 372С. Ceposonrcacsca

апгсгцсееь о тих easarreüos бкяа 0,00025 кюг. Уеталавлсяо, дао обе I в дозо ДО кет об^л&гигалась в crasoporae кс/аггус-

iza. стаîTEas в течонао; 3-х cjïûz, а aaraïasa сгаас ейнаругез-яагьск к 3 ï&sbso у SQJU и у IÔQ£ ssecîtok: «.^йтс^а обка^у-зшв&агсь к 5 суткса. Црз доез 500 jsr ейр;ш минрепа обн&ру-ш&штеа в opгеиш&э в тачала 7-9 д£зй, йцн^зглебудкгш s ? да весаадогаязя в 60$ osyster», а с 9 дез исслсдсьаакя - в 100$ cay« ifesetsseitse аиздяек дяя обоих apempeutoa » оргиашаэ подо-науках кдаяюас пракагодат ко *еа se зажйашрйФС'ггн, ws к црл доза 100 nu?. ïaaa? образоа, кшеуяькай шютен, ^ушша ШйреЗеа щя 23°С,па eposes яашдеякя о ордо&авз» бедш юетй a отваздааа ssogissS рэикцйю но ycîjaasï еаадогечкаау ксасуаыгс'зу ен-rmsy, аагс/чаглс-иу щ>л Е^аь^швйровашш «гудааго ^asepsia арн serawpasypa 37°С.

И:?щтэг&?глоота> Бкгэдгзакого здгагеаа. Егл-гульгий ОДНЁТСЯ чу1л:о1'о гатрсба ишкзгеа х^отааз^иогеажа дая йезих е^гай» ejco м обеэьш. В отиоь'оааг эф|зетквпости этого катагвка ддя карcees сванок шшвдг расходная. Tas lí.L.Spivack at al. (IS58 îî.j^urgalla (ISSO) угеерздаат, что каяка дога Иракцах Ï (о? 1 до 50 uar ) вырабагаважа у иорскиг сваноа достаточно йащмпашиай еедтвггвг кратав Доза, зрзаа^ацнв 50 кет, isaasas» у ísopcsss; ocíaos . А.^йисвпов с coas?. (1973),

угв^рэдал, «и® $paœ?î« 3 на нрздозсра&го? aapssss вювзаа, а esajawass» Ьк»яш» X гкг) ззракараг» яоззгзэ? яоезь изрзкгяЕ скжзя в этой кяфяяяра. ^ дряг89дка дааяаа со epimtx^sakrt-tíy язушиа ггиуяегзгзгеогл Ojatapai I, яодуадияой путем sup^sssas gaapaSa чуш яри различна* те^язра'щяги: разиках (28 а 37°С).

Рвзуяьзажз огагаоз показала, чгаэ %р»щхя I, яолуашгая яра яжрэ^а яря 37°С, а завзсйгеетя от гзяггшы

д©зн хфадгхражаа о? КФЯгродьвого зараа©яая лэрро/тггs saszpo-~Sf¡n 'XfSJ. 7,8 дэ 30.7 случаев. 3 то прьтя, у фраацая, яэлу-tçKîsS яря amccçssawts гажрзйа прз 2S°G этот показатель гсззб-яе^вя ег 23 до %а авадашет этих аататгявз с доаояеятсз рзззо повидается усгойяаазсгь йгдуяззпровашазс гкзотаах от 53,3 дд -ä сбоях <t?марта.

Тажм образе», ^шцга X, волучеияая при ^ямашарозаава чугного шп-фоба яг?м 28 С, so cskss гаефпагэшкя смйстязя из усгуяаот зкалогапквау amratre^y, ащучжкпогдг яря взруявааяя культуря яря 37°С, а а пело торте дозах я превосходят.

ЗКПРИЩЗДРЙЙ ШЖЕНШЯ ДИДГКШШШ!

ОCH0SJGC1 еттодол дэагяостжя у гркзукоз я ш: эктэ-аар&зятсэ, длл аияслеяяя эядооотяз з пряродгЕз: очагах, является бактарзояогячзсжаа. Из. осяогаяяя рззультатез этого пзтода проводят щготяЕОэаадс^ячосазо аероаряятня а цряроданг очатаж

Ч1ПП1.

Qflpvso, даягай! кгзтод кяее? рлщ кедостагхоэ:

1. Из D IQö$ отдаляется культура чугпюго ггпгроба от sapsrcasoro обмята.

2, Относительно малая кяфогзаг.гйпсг ть блгтеряологггсесгого з отиогежя яятекеававсед^геявяня опязсзтяпесхого процесса. На зпзоотзчяюй терряторга «гасло зкерьяоя с аятажадвйя

в ряда етуч^гг совет бять о'елььз, «сз к&аачзетво пшуиоз, s даажхй -¿iiîaïv ^фисй.

Ьош e веиэць» сарояогячоягах кетодов s БзсгедЕга гада бш« йЗйьрукгцл ©Еиаеоткй ^чуш в Гясс&рз, s Ердвльбрусье,)

г^от гш t C®îsspo~3ааздяоа й гербах очагах

Кцртасташ.

S. Сйрояогачоскда еэгада i;oryï ce&s&v&sjs ессшо, ¡sfçsstms-нйзк, sas еродсгк! уекергжэй дийтеэстией т^укз у трупов хйдой к вврблодоз, s; тахее у бгугьггк явдвй в разгар бояввка кон бельазй 0icsi:cr:cîn:3c52 оргскнгаа бсзторкйкг.

4. Наа^-^се оесдзехо сорсвогггчесхлх истодов ггж срсдстгз рзт?осяштгш!й двагквстшаг чуиу. О&наргуЕзяас у napsteesssx дедой сдязтсд к фразвдяа I слдцоте-льстьуат о перэизссиаой

5» Црзхгд>"цзсУко ссрелег'лйсгога игтеда tssîss Екяазяется eps иссявдоамаги эигазкгзго сетераагс, косткз octstsoh s т.д. В этак случаях бектараояогачоеаоз кеегедованаэ паето охазавестея

î.rO ^cî»** и u*

В с« вчарздь u бахтаркедоггадскай катод фагксетвзш ÎSUÔOT рг<д аваяэущйств:

1. Ащвхекьо «стой гулм-ура ¡тбудктахя является оЗсоаэт-85S» сввэдвюдеэв в&резешаста шдоедуевого объекта.

2. BaiofspîaaoKwscxoe Есехсдевааав особенно васшо яри днагаест» «^ш в иаздгьюхс фаах ш^вярившого арщзсса, когда чжела йс^тзрзй iess copars. чувсм$Е9<ш»иее*0 сзрйлогн'изских методов, а анштоха ецз отсутетяузг.

3. СорологичомшЯ кетод екаашжзтел шша зф^зктквга щ^. ессдедовакаа нерзносшжов, -я оргавдзмв которых банторйп чусн по продударуст в значительно:! количества фрагцкз I.

4. В шкоторых природгих очагах (Ёгкоо Ирлбслхьаье) могут

¡иржулировать формы возбудителя чут, которые почти не сппте-(нруят фракцию I, в следствие особенностей генотипа бакте-щальнак клеток.

5. В некоторых случаях на основании только серологических гсследовааяй просто иевозионно реппть вопрос об энзоотичноста территории.

Как видно, и бактериологические и серологические методы агеэт свои прэкнуцэстса а недостатки. Поэтому целесообразно трименять их в разунком сочетании. В зависимости от задач и конкретных условий работы, удельннй вес каядого из этях^иетодов гажет быть различима.

Изготовление диагиостикуиа эритрсцитарного чумного антигенного или шмуноглобулшювого состоит из нескольких этапов:

I. Заготовка эритроцитов: забор крови у животных и форма-янниэация эритроцитов. 2. Получение антигена. 3. Тонизация и сенсибилизация эритроцитов. 4. Контроль, хранение и пересылка циагностикуяов.

Все перечисленные разделы хорошо освещена (в напасанноп нами) регламенте, фармакопейной статье, инструкции и технических згеловиях производства препаратов.

Влияние фораалкна на способность бараньих эритроцитов сенсибилизироваться капеудьныз антигеном. прзвеялгисследоваяия по выяснения влияния формалина на сенснбшшзирущу» способность бараньих эритроцитов в зависимости от сроков хранения их в консерванте и от серологической активности антигена. Для изучения первой частя поставленной наш цели был: заготовлен анти-геннкй зратрсцитарянЯ диагностику» нз бараньих эритроцитов, законосервяровакннх по методу Чизмеса (1560) в модификации Меньпова и Нмутзра (1969), т.е. фораалинязация 2.0% с последующа

etœnansex ¡a коксвра-цгей ££ фэ^аяяаш к х$взшша ара 4-6®С. Эрк^цзин шред aspewosessö« apsaapaîes чаг^ршф&та ¡кззаяа фхзягшрач©сат раагворш. Сэзс^згяагйфэ вроиедкяа S^KSÄI капвужьэва дожгояод eej. I-ôi» аэразвгге&еяа; акуиенйсть юзтороро О,OSOS ккг/ка- В йашг ósse n&m

ОДрдохпиагфодоаюв spssjoqsara » зфгаааяавса s ««чаш» 2,5, 14,17, 25

5, 10, 20 н 40 zzr/иж. ils казной сegsra &э|згй*1шавяров|ашк npai'pcrçwrcs авготовзшад sa 4 дибгявггзчгсаяг: apompaba. Чувств! ^сладость вагетовгашак арсаар&тов прэвзряаа s HiPâ с чуакйй й^улэжвфуацзй сизоротвой»

Црэвздэяаао асолсдовзаяя азшшалк, аде а кродьесе араков» фор&алсаягкрэв&аагз эратроцатн на enastas соясабавазарзяззув eiíOssáasoTb a аатагоау. Нрясаз, аз разакчзшг сарай фэрггалака-зарэваака* арг?роца?ов аолучаш дгагяэстачгсккй арояара? кав одшаковей, ías* м разной чувст^адаьядета. В осаоваса, цра сеиса&авз&зяз в&жаа дозаак аататсна, арааарат аолучаогся болео lia вз^рзтаегся ааачатальаао аалггсзетво

нзготомфииаг сресара?еа, которкз spa seas кзлтиж. s овда дозах работая^ с одинаковой чуве*в2£*едьаосм>э. Уззлмчеяпе сроков xp&iexaca зратрегртоз в 2$ $орааяикэ новы^ае-г чуввтьь'/ельыость кэготовзвшш: кз кж дкагно«авун°з.

3 посладукцш изучала влияние серолатчссгой аотетногтн касоульшго &я?згеш на цузатватеяьность етготохзленвэгэ зратро-цдо&рвого антаганног© дяыкествчоского прзя&рачеа. Взяж 5 cepaí ваясульпсгго гштагеиа разладкой сорологкчаевоп автавзоств. Tas ееран 5-84 и 8-84, соредогичаокак аатавкость кокорах ссст&вадаа 0,0125 екг/ш, а сераа 10-84 - 0,0301, серш 7-87 -0,0004, cepas 6-84 - 0,0008. Доги: tsnsrsaa йтп ападегачаа

мятш в предыдущая опыт. Использовалась одна серия форйали-гаоированкых эритроцитов, из которой готовили для каздой серии штягена соответственно дозаы, четыре диагностических препарата. Зсего изготовлено 20 препаратов.

Проведанные опыты показали, что эрятроцитаркае диагности-тесккэ препарата, иэготовленнгыэ из наасулького антигена серия 5 Э-84 улавливали противочумные антитела в ШГА при сенсибилизация эритроцитов дозааа 5-10 цкг в 1:25 тыс. Чувствительность препаратов из серии 10-84 при дозах 5-10 цкг/ал составила в титрах 1:1600 тнс.; дальиейиее увеличение дози антигена сшшало чувствительность диагностахуиа до 1:800 тыс. Все препараты, нзготов-аеикае из антигена серии 6-34, 7-84, работала в титре 1:800 -гас.

Таили образом, чувствительность зрнтроцитариого антигенного циагпостякуиа так за зависит от серологической активности взятого в работу капсульяого антигена.

Сенсйбялизируззиэ свойства капсюльного актигепа. Цель настоящего раздела - выяэить характерные закономерности, проявляющиеся при взаимодействии капсульного антигена и форзалини-зированшх эритроцитов. В своей работе мы использовали в качестве сенситина фрагадеза 1А, пояучениуа путей осаадешш серпохнсянз «агокаем в диапазоне 20-30% и 13 - 3355, а таете в диапазонах 35, 38, 40%. В работе использовала 29 серий антигена, изготовленных в разине годи с 1983 по 1988 гг. и 58 серий 1055 фораалини-зировашшх эритроцитов, изготовленных с 1981 по 1986 гг.

Сенсибилизацию форзалилизироваикых эритроцитов производили следующими дозааи: 5, 10, 20 и 40 акт капсульного антигена. Изготовлено 6728 пробпрочных серий дяагностикуиа эритроцитариого антигенного чуиного жидкого. Чувствительность изготовленных

Се и ся би ли зкруюсше свойства различных препаратов фракции I

График .'.'I

Доза в мкт. 40

20 .

303 и 32% .

200

400 800

I- пять раз

2~ пятнадцать раз

3- двадцать раз

4- восемь раз

5- восемь: раз

1600

Кратность аювторяелйстг диаграмм

девятнадцать раз

\ 3- тринадцать раз

3- трв раза

4- пятнадцать ра?

5- пятнадцать раз

800 Тятрн в ею.

статных серяй проверяли в РПГА с кокмерчесазсяи стаццартнюга противочумякш* агглпткнируззгруи снвороткэии. Все диагностические препараты по чувствительности иояло разделить на следуюцие группы: первая группа - при малых (оптинальньос) дозах (5 ют) антигена получается препарат вггсокой чувствительности, г уволи-чсштеи дозы уызньпается чувствительность диагностику?.!.-?, (график

» I).

Вторая - при сенсибилизации формалинизированных эритроцитов »¡тат (оптияальныйи) дозаяи (5 мкг) повышается чувствительность препарата, а при увеличении дозы до Ю, 20, 40 шсг препараты получаются одинаковой "чувствительности, но шлее» чен при 5 нкг.

Третья - форяаяинизироБшгаые эритроцита дозами о? 5 до 20 ккг сэнсябидизируэтся только на опроделешюе количество антигена , я конструируется диагностику« одинаковой чувствитедь-ности, а дальнайпев увеличение дозц снижает активность препарата.

Четвертая - форзалштазироваяннэ эритроциты сенсибилизируются только к определенной дозе (5 шсг), а увеличение доза антигена не повьня&ет чувствительности дкагностякума. Все препараты показывали одинаковый титр.

Пятая - при сенсибилизации оптйаакьмамн дозаая (о ннг) антигена препарат получается повышенной чувствительности, увеличение дозы приводят к снетэшш чувствительности с последующей стабилизацией.

При сенсибилизации эритроцитов фракции 1А и 1В внсоко-чувствнтельные препараты в основной получавтся при нянияальгшх дозах антигена.

%а «эучшво? овй8йбазв1й>«гзж«г8^х «з©£ег£ фразсцяя I» к&ау-щ-зшаё ирй нвевгрии» сврюяшгш «зап&ййй в двзааяенэ 33-35^ ямгвгааа, «го ^йтаяодьнве^ь взявигржгов шашйжчяа. «акогаа, ивлучша® црз евкеайяжжщви эрзигрвдк?©.» вгвшчшшв, сеявдда-шгяк щвх вавй^ашя 39 в еараохасгш «аашаш. Огяшшяся оаа в саедувцза: ©сия краяаран:, вдкгеошхшвтз кэ «ггедасао» 1А в ХВ с аогзжгиаеа деаа, в еенашйш, пряйодят к спященяи чуеггЕатсяьпэгтз препарата, та а-з кторез - уг&взченас доза в ©ековгжг, грлеодйго Е такгшго?

В ежедущзг езрзгх оетгсо шз изучали воакзаяоеть исаодььо-яааая фргкща в пш&езхз ссясы'^айа, яояуедккэЗ оря эдеи^юшг з диапг^оно 35-30$ н 35-4&£ раствор» еграегисл©?© Вагучекэ чотцре группа хрдп^ж, чугсзжа'сль-

посгя щйкар&га, Оъг&чтийя шзгая чуэдгвкздяькоезд язгетоЕДс^

зашезйюезга ^ашатааьвася! ¡азгбгоягкжаэг» двтшетйкуйа а? евясктяшеа к сорагопгчесжэй ваяквкэетй к адеврзщаущвх езоюс?» §арйаяюшз!фоваяшх зрктрзщжт.

Уакаа оЗр&зшг, д&алгз&тнчеегше цретрага шзшо разделить на дев груши. К первой гдою» везко отквети таков еачатаназ внтнгода к орктрецктоз, корд и пасщззЕН® чуъст витальности нрэ-шар&тд кохг.п-з доетачь при имке дезах шгтигека (5 ш).

Угегьхей^о, »торса ярздэдя? х акжегтаз кш гт «к&зиваз* ш^ггого зйфоета ка чувгтгЕтазьпос«. прзп&рата.

Во вторую группу кц о&ьсдешех» еечеташа антагек*. а фериа-лвйненраввяаых эзтроцэтоа, когда уЕздакщр» дози адстйтеыа Ее енкжеяо и кз увадачавало ^гетгятольшетх: араа&р&та.

Слаасй' шш^та чтаствятельяоети дчагкоетттука зтату^о-шгаааа'ого рдтагсааэго, Дзя хюдуплш! двагаов^акуаа

ного антигенного чузгаого ислодьяуат кппсульныИ антиген; но все серии полученного антиггна бывзззт хороаа р?4етвордаогли и обдадмэ-цтж ксобходнй&аш сепсибилнзпругздая свойствами. Перечкслеште скойстза зависят от тдаоэтгх причин, одной из которкх является качество шгтауольной срадн, истод получения» качество сульфата аггхония, способ сузки и т.д. Повкзепие активности препарата щ попытались осуществить под ввздействиея температуры. Действие температуры на капсулышй антиген зависит от продолжительности контакта антигена с температурный фактором. Внсская температура 94-97°С при кратковременной воздействии разругает антиген. Тешзература 60°С положительно действует на структуру белка, активизируя ее через 20 минут прогревания. При 70°С полодитель-най эффект таюге наступает через 20 цннут прогревокйя и держится на протяжении всего врэкеяи наблюдения (в течение I часа). Более низкая температура никакого действия на серологическую активность кгпсуяьного антигена не оказывала.

После получения приведенных вкео результатов исследования ип решали изучить влияние температуры на сенскбилкзирущуа способность двух серий антигенов и б ташзированных эритроцитов. Для реезняя поставленной задачи наш! было взято в опыт 6 серий фору алгсшзирозанних эритроцитов с 17- иесячнш ероша хранения (46, 51, 53, 45, 50, 52-82) и две серия 1-84 и 2-84 напсуяьнсго антигена. Антигоны перед сенсибилизацией растворяли в 0,89$ цаоь с рН 7,2, подогретой до 70-80°С в течение 20 минут, после чего понещали равные объемы антигена к 2,5$ эритроцитов смеаивали и оставляли при комнатной температуре на 18-20 часов. Для сенсибилизации танизированннх эритроцитов брали следувпще доза антигена: 5, 10, 20, 40 ыяг/ня.

Таблица 2

Чувстьк7едь«ос«ь даагкостжкука чуагого эрятрсцпгар«о?о, яриго»овк«2»г® кагрзважш «гтйгеии. иск 7ü-ß0oC в течашш 20 кинут (geht) а Ses кздогрезе, (контроль)

koxctgctco сарай :

-т-----.т яг » 1 и :

1PI 1 ß-« к ♦ я Ëi

Ä-tH § M 1 gsep( 1 а €3 o p,

•í>S «i ю J i=€>©=

Срадагйе геоазтртгзвЕне тигра в ШГЛ. В скобках - капебшае тктроз.

10 20 40

П Н ¥

5 6,7+0,2

6,7+0,2

6,6+0,15 6,6*0,12

Кентрояь

5 5,8+0,00

10 5,8+0,04

20 5,8+0,04

40 5,5+0,01

(1:16.10^-1:12,8.10^)

(1:16.10^-1:12,6.10^) (1:16.10 -1:12,6.10 ) (I:IÔ.I05-I:Ô4.I05)

(1:4.10^-1:6.10°) (1:3.Ю5.

:8Л05)

(1:4.10 -1:8.1«^) (1:4.10 1:8.10s)

Коетрохси алyzmn дк&гнастиадскгз лрзпсраты, сояучсныаа

общзцркизшзз адтадеа. Результата ouütqs показьла, что чусстс®-тедьдаеть дцашзетакзгко®, Ешуеэзаияе ст ярвхишвякя дая ееяскбк-дкаагрог гратах сгдоггоиов, баяа гораздо bïss по срааыеасэ с контрояькша дада^эвтд/кша эрятрзцйтаржйг чркяизг «генганакзх (ш. табл, 2).

Мы ета*ьеа,- 'чгг-j ссраавги^ссиея &теш:©©ть s с^здябвдизкру»-цэя савссбиость капсульаёго аитегека во ккэгш амшсгт от если-чзствй пататахьпсй сроды, на квторэй ЕЦрада&аея шжроб. Чаи

п&зкэцс&сиз штжеяшая ерада- es- essssçr составу к евдйрзашэ s ней кггз&одйазк: ©©лей» »ктежзагав.

ихроэлеяектой л др. веществ, нужных чужому микробу для кнтеза антигенов, тея качественнее антиген, синтезируемый гакробвой клеткой.

Для подтззркдешя сказанного неяи, поставлен следующий •пнт. Штамм ЕВ засевали на среды, изготовленные из различных ю своему качеству гидролиоатоа: из пекарских дроетей, мясного ! казеинового. К ним добавляли стимуляторы: молибдена? агония I лентехнин, Капсулькый антиген, полученный из микробной массы, ?ыросаей ка средах из карповых дрсзггей, з ИГА улавливал антиген 5 дозе 0,0125 ыкг, на мясной агарз - 0,0007 ?»яг и на казеиновом -),0031 ¡акт. Чувствительность диагностических препаратов, кзгогоа-:енкых яз антигена, полученного кз микробов, виросздх на дрояяе-зш агаре, била от 1:50 тыс. до 1:100 тыс. В то время, как 13 антигена, полученного из иняробов, выроспих на мясноя я казеиновом агаре, соответственно 1:1600 тыс. к от 1:600 тис. 50 1:1600 ?ыс.

Стюхуляторы роста значительных влияния на вкаеперечяелвнныз гвойства ке оказывают.

ПНШЕНЕШЕ СЕРОйОГЙЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССВДОВШЯ

В настоящее вреня серологические исследования пряненяот во всех природных очагах яуиы. Все грызуш иагя полевой матерная, наряду с бактериологическим, подвергается серологическому исследовали». Серологические реакции тагазе шроко исяользуятся при постановке дяагяоза больныа различимая форагши чуыы.

Иначе говоря, серологические иетоды исследования заняли достойное кесто наряду с багстеряологяческння я бяологическгеж методами в диагностике и эпизоотология чуш.

Для постановки серологически: реакций, в зависимости от поставленной целн, необходим тот ядк иной исследуеинй материал.

i as, пргг sasaseaaa сасвд^г чееаах для qysmor® isnspo^a аатагол арокьвэдя? забор крага, a spa asacas аатггока щишцз: I -apKiö ароьа» вэстсз» остатка, эагаа&зж® трува граоуюв.

Esa всякого еезггзкяа, дня пзасаа агглстсаазов лучка аезго вввользог&ть катяенуй ееторэтку ар-зш жавзкйгге ass «гааеззка; в с вяза с tea, чго в двласа случае точно ещ^сааится татр еатитал а рзакцяя о&ачаз бкзазт Йедсо чзткэй.

В црародааа счагех чуш два работа с цельной сггророткзй гр^ауса аоступ£й? в лайоратораа а отсодивгав. Этст кзтод аариду с аолоаэтельЕзй стороной, оаот ряд еущэетхсэаваа аз~ достатков.

1. Hsjsösxjcssh ЮО&яеват еврзхогичзгваа сотодса ассагдо-sesaa добатиг гразулоз as-sa r-aäasa гразуаов з врэдзсее отлога.

2. Агрсссмваасть акиз: гразукэв, особсаао суркоз.

Иавевксэкоея нсааодованаа йтх от дуетироваяааг грй-

зуаов a т.д. Учлтвзад ото обстоятельство, С.Н.йьрал е соавт. (I3Ó8), пробовала Ессгодоеа'гь скзгшд грудкой аадсста трупов гризузюэ.

Ос&эввез кэдостатхсй этого катода является его труде-«заость..

Б 1975 г. (líaaaTEaKOB с соазт., 1ST?; Тслсабааз с соаат.,

1884) бежа аредасазиа кодг^двахдо: аселедсвааая крова каазр сердца к.»р?шх сураез с хшгпатшшши Сольтрсванькой бушааш, aas шай>олеа врастая с д^етушаж всгл эвадотря^ей, о^саздуйцга тзррагеркэ автоаагсаа: очагов чуян Тяш»-£аня a Astas. Мвтадкчося оза осущгсталййась (^едувцет sápasoa. 3 sBíícpsacjassi восла вскратиа игваткшс a assraa кусочхоз срггаов сурков для возааа а состешвяи баоаргй, a йзлость сердца одгскавааь атаадврт-кая &датрэеальаая ^указав, обработанная кзртяод&тсз

натрия (2x2). Затем ока переносилась в пробиряу с 0,85$ раствором кaCL а обыске 1,6 пя. З'тка достигалось разведете крови сурков з 20 раз (1:20). После инактивации при 56°С в течение 30 минут и 2x3 часовой экспозиции при кскпатиой температура приступали к постановке реакции.

В итоге во всех эпкдототрядах без дополнительного персонала удалось провести серологическое исследование от 80-95^ суркоз, поступавших в лаборатор:*» для бактериологического исследования. Показатели частоты встречаемости антител и величина их титров при этом в подавляющей большинстве случаев нз уступали результатам серологического исследования пативной сызоротки крови зивых сурков в предыдущие годы и соответствовали, в целой, эпизоотологической ситуации.

Нами таете проверена возможность применения фильтровальной бунаяки при заборе материала для РИГА из грудной полости у мертвых грызунов в песчаных очагах (си. табл.3).

Испытание данного метода проводили в 1978 г. в Таукумскои автоиошом очаге, где в последние годы постоянно проявлялся эпизоотический процесс. Весной 1978 г. эпизоотия была зарегистрирована на пяти участках, из I1? обследованных на площади 7500 тыс. га. Было щцеяено 59 культур микроба чуиы: в урочище Кое-Апш - 53 штамма, нз них от больной песчанки 4, от полуденной -5 и от эктопаразитов - 44. На участке дороги Ак-Дала ввделена одна культура микроба чуш от полуденной песчанки; у рочищэ Нуан -I птаим от эктопаразитов; в урочище Караколь - 2 итамаа от больной песчанки; на участке Алма-Атинская дорога - 2 штскаа от большой песчанки.

При заборе материала для постановки РИГА и РНАг методой

смывов серопозитивныа зверьки были обнаружены на четырех нз пяти эпизоотийинх, а при будаяном методе - на пяти участках.

C<í <Ni к-«

О, О

с-Г eví

о, о, I -î +Í

ÎM ¡M"

«у

о, <лГ о* •f 1 г> о", А о. аь

« t-Ч

*■«

я а

н 1

о О О О .—V о

Hg* 4¡? v

CNä ftt CSi Сч£ /ч

о о о О О Q

м il чэ

* • »* a л * •

i~< и V-; t-i M

S 1 г 4 t 1

О о о О О О

су cv Л? лд су

M S—1 >-t и S»''

СЗ

к ВЦ

S-«

sí

о И

й.

са а.

aä

th &

"Л

Я«

Sag ks»

sa, о

а ю

'У

й,

г» s»

о ®

i а i ь

I 45

î о г.

5 ё

s s »

ï щ чз

i О 0

я» 5» fa. KS С в-

M К M

ЙЙК

Я С-.

и ч »es ss Stic

«(Г ь-s

ь-í к-» {"3

CM С- —S

ï е» * w

I о, ©, о, о.

5 -И -ti 4-1 +(

I счг ^ « ч

i Oí C-f Оч' (.M

о о

J "5? V

I ÍV CVÍ с> <у

5 о о о о

S »-4 5 fi

Q Я»

so O <7» >-« ! Í—S M Ci СО

СО V

счг с- г>

gs со со cî t~í t~i

c\j cvi

о. о г>

счг (si

■íjs

»-? t-i

г>

OÍ

и «s и -«£

jg Ь ^ b

К S ш ш К f^

U Т.;

$ 3 U

и с> Я

в* .

ti о

«я.

i—(

Сопоставляя взяичщг татрэя антител кри заборе материала ¡етодои "сгохбов*' и "булззц««'', -резких отля~!й км ве набжедзли. Частота встречаемости серопсактивных зверьхов яра "бумажки!" га-годе выгз, чем гтрп методе "езннов".

Предлагаем*?. истод нааея куфозсоя прЕненонао з гошнх и [устшшьк очагах чуш Средкой Дзет я Казагстала.

ВЫВОДЫ

1. Капсульный антиген синтезируется чунши микробом при шзкях тояпер&турах в очень незначительной количестве. С певы-¡еккеа температуры синтез антигена увеличивается.

2. С помоя^ью гипертонической питательной среды (2-4$? растер Кась ) и катода селекции козио получить итаггаг чумного Еиярсба, вырабатываецнз капсульный антиген при 2б°С, не уступающие ¡о интенсивности синтезу фракции 1 ?дикрсбаа, выроспин при 37°С. ¡ярулентине гггглгггц, ставззе Фраэдгсогапии, становятся авирулентиькя.

3. Накопление итегдгакя капсульного антигена в жидких средах 1ря 23°С, продуцлруззщ1Ш1 этот антагея при данной тешературе, меэт взд ступенчатой кривой. Кривая интенсивности синтеза «ткгена с сеаого начала поднимается вверх, сменяя период иа-юпления периодом увеличения. Эти два периода для различных доз,

I общих чертах одинаковы, но кневт р&эдячяя.

4. При тешературе 37°С такае отмечается периодичность [аксплення антигена. Однако, в начальные сроки изучения отае-гается постоянный рост калсулыюго антигена в виде вертикальной ряиой, которая после определенного времени принимает вид тупенчатой кривой.

5. Интенсивность синтеза капсульного антигена зависит от ачества питательной среды. При добавлении стимуляторов роста : !тзкки по качеству питательны? средам повышаются ростовые

6. Для вирсСо«кн чушдыа сагробса келсульного антигена ашноккслоти иообходЕйУ в кэодщшЕоаой стопою.

Штязгш, пидежешыо ка рааакчнш: очагоз чуш для синтеза, капсульиого антигена, дувдеатся в определенна cbkhokscsotsr, характерна* тодьго дкя ¿культур, вццеяешшк ка определенного roorpaiísrcecEoro гшвдйфта. ш основного косатегп ш#экрщ.

7. йзпеужышй аизкгек, пояучаиййг аз вдкробвдг ksstös, surpassas щп 2ösC и 37°С, ссдеравяе до 20 «кщиэкнааот. Чвсяо ¡вкяяокаедют» ео^тавлЕгцзз: к&исулькыа антиген, не з&вясит от качества пат&тааьиой сргдо и тстаюратура роста.

8« До аагакгекнш свойствен юккухьяыЯ ■ видак, Еэаучзягшй ира витащавапаи »о^эго югароба пра 28°С, m уступах кипсуяькску аатигеду, погучеюящу ks зивробянх каетох, гаросгзос врп 37°С.

9. Аггяззяоеть каготовгешето эретротратарасго шггкгетого дкагкостнкука в зка*штели:ай стэяа^ »авзсвт от сенейтвзазш: свиста, серохогзшеской аяткшостк t¡vrx.v<mu к его дези.

Iß. Сжзужетврн роста, павшаязко «вестго якт&тгиыгш: сред, kosssbmv осксеФеявзеруецео csoScfsa « серсжогачэску» акта» кость.

11. Прсдавтазтея два свссоба покгаиая чувствительности дкагщстзжезетэ .^препарата:

а) йеямьзоаать дсс гцргцгзахия sazpo&iz: кхогок кзгсоке-í«,48CTB3Ssysí среду;

б) ■ езкеьбйгпеащэ эрятроцдтйв прэводнть кслсульЕка шгтззгеко иагратш до 70-8ô°G в тоташ® 3-5 ккяут.

и второстедюммс йвеитеяой t-ггш upa эгкзостсчссхса сбеяодэЕаязя Te^jesopsa ©5котшжо труд восаадо&меквй я даа© вввнонкавта,

исследовать всех грызунов, ностулгик^их я лабораторией,

13» Шдролов аряяенеша ««рохопгеесзих азгодов яседедоваияя з эпязоотячесхся ойследозшшя подведомственных территорий длэт спациалястяи ишюэ яредстапдзняе об эпизоотическое состоянии обсЕсдуемой территорий.

ЙР.4ШЧЕК£ЙВ ЕаКШЩАЩИ

1. С целы) пояучош;я капсулы-oro ентягека рекоаеццува г>ирал?свать накробы чуяи на агаре Хотткнгера из мясного гндро-дязата со стимул яторазд: I/S геаолизнровалной крови, 1$ стггаулято-ра "M!í, Q,5% GaCX^. Заееотпаге на эту среду яггагош взращивали

в течение 72 часов.

2. Хороший выход бахтерзальноЗ массы мсшю получить при добавлашк: к агару Хоггяигера стсауляторов нолкбденовокпслого mmonm (от 50 до 1000 кг/л) к лаитехнина (1000 ыг/я).

3. Дяя получения субкультур, вырабатывающих капсульный антиген пря 2о°С, аяируяеятшз ятжам микроба чуш, выросяиз яри 28°С засевать в дозэ 10®ц.к. в 5 мя на бульон Хотткнгера

с рН 7,1, содержащий 2-Л% хлористого натрия. Посевы инкубировать а течение 96 часов, с высевом чорзз каждые 24 traca на агаровые пластинка и внраз-ивать при 28°С в течение 48 часов. Наяячне фракции I регистрировать РИГА с диагностякумоа чуатам эритро-цитаргжз тацуногхобулииогдо. С цеяьэ получения микробов, синтез орусщх нанбодьзге количество антигена, субкультур/ подззр-гаются селекции.

4. Производстзеншю гаташа, пмрабатывгжще капсульний антиген при 28 я 37°С, желательно хранить в днофильно высушенной состояния яян запаянных косячках в холодильника при 4-6°С.

5. Для изготовления диагкостияуиов чушшх эрмтроцитариых актиганнаж гадких и сухкх использовать эритроцита, консервированные в 2% формалине со сроком хранзгс;я 1-25 иесяцез.

6- CesсззЗеенэщзв стакгиг о? fojSMSJÄ эрзтрзцетев ееуцзето-ss^S ваЕсугьад asmsreKsu» сэрзявШЕаввая азтогггосгь ка-герзро C0CÏ6S22Û бы ко ШШЗв 0,0016 ißt? в 1,0 ES.

7. Ргае^зццуаз каясузььий йатагон расадорять s точеим 20 гэщут растгорс^: ааорада ььтрия, каграткл дс С0ЭС и Еутслярозсть в ггечаазз I *гага с шсдедущой сопсггбжл&ааЦЕ&'й орлтроцктов,

СПНСОЕ ШБЗНШШШХ PAS0Ï "ÏsssîsSess ií.A., Fytfapcs M.S., Сулейггзав Б.М., Макарова S.A. Ващакацся прзгкз ящ е п-зяекатедыс^з! dsyiíaxo-ra4.icffi.22 gsas^msî im бруцехгсз. ïpysu Дша-Агевгового годи-цяиввого EïiSTEîjïa. Агщ&^Ата, IS69, г.25,е.273-283.

2. Тшеай&ав H.A. „ .Сугвйезнов Б.М. Влкяйзо седой ка csaîicït. «QQ^ioro сзвроба. Вжшэе хяорзстсгй к&трая па, бкагхгмчгссуг озжаавоеиь ю ъщ%£<лстг>с'2и Bosöygasesa чует. И&тарасдаг Еауззшй ков^зрГфотшячутас учр^вд^пЗ! Сргдкзй Асш к Harfiznîsi^i. izïav-^'fa, ISS9, ща.1, с. 122-123.

3. Кагжгов В.В., AgsssusHCB В.А., Е^уяер И.й,, ïbsesîSassïi.i Чуасгкатолшсзть рзагцдт сйнсЕЙгштзнрэзшшетг эрэтрзодгазд spa кияваокяй сэяетаг у гздей, ярЕкгеыг против тулярзавя. Еурквл ккзробимогйн, экадеаяеегоги;: к ис^ноаогш. 1971, & 10, с.93-97.

ЗЪяскЗаов H.A., ЕЬааез H.A., Суяейазгш» Б.й., Аубека-ров С.А, Способ получения вхеззгов чушого иккреба, продуцпрр^рз; фршщко I ирг тежзратурз 289С. Азтореаоэ свцдотеяьство l> 43360с 1974.

5. Твле^баев U.A., Шзгаэв H.A., Аубшшрэв С.А., СудеГше-шв В.И. , Урустеков СД. Иэучоявв плеточного состава некоторых ата^коЕ чугс:зго шкрзба по способности ярэдуциров&ть фракцко I зори 28°С. И&торгакы УВ научной ког^зр-знцан противочумных учреждений Средней Азез и Казахстана. А®га-Ата, 1974, с.97-98.

6. лекбаез М.А., Уенызоз П.И., Сулейнеиов Б.М., îfenbco-за М.К. Возможность использования фражцш X» нолу^лной при 28°С, для приготовления зрктроцитарного антигенного днагнастнкуаа. Материалы УШ научной конференция пратцвочужйгх учреждений Средней лтп и Казахстана, Аяя -Ата, 1977, с.459-461,

7. Маа&ткансз О.М., Пзйсаткс Л.А., Тшалиеза Т.Д., Тпяенбазз H.A. Об использовании кровп иартвше сурков для серологических исследований чуш при зпизостологическом обследовании Тянь-Шаня я Алтая. Здравоохранение Киргизии, 1977, & 2 с.16-19.

8. Айдралигв H.A., Борисов И.В., Твдейбаев U.A. К методика гистологического изучения структуры колонки возбудителя чутш . Материала краевой эпидемиологии н гигкета. %>унзе, 1977,т.16, с.37-39.

9. Твдекбаез М.А., Маныжов П.И., Айдралиез К.А., Урустенов С.Х., Аубахяроа С.А. Сравнительное изучение шауногепностя фракции I р&эяячшх серий, полученных при анргщшакяи культуры чукяого шкроба при 28 я 37°С. Материалы краевой эпидемиологии и гигиены, Фрунзе, Î977, т.16, с.32-37.

10. Борисов И.В., Тшенбаев H.A., Айдраянзв К.А., Качурина А.Г. Патокорфодогичэскке изменения у керегах свинок при введении неполного адъэванта Фейнда вакцинного ителяа ЕВ п их сочетании. Материалы краевой эпздениологии и гигиены. Издательство "Киргизия", 1977, т.Ш, с.39-42.

11. Тзпеыбаев М.А., Изучение динеешкн я сроков выработки чудака шкробои фракции I при 28°С. Профилактика особо опасных нкфзкздЯ, Алма-Ата, 1981, с.124-130.

12. Тпдеибаев М.А., Соорбекоо О.С., Якунин Б.М., Полз С.В., Слюняин Ю.С., Шзарц A.B. О выявлении эпизоотии чуш среди мшеввдных грызунов в Таласской автономном очаге пуда. Вопросы

прарсдной оч&говос«* гооаозоз. Слратоэ, 1982, с.40-42,

13. Ыеншов И.И., Красикова М.А,, Меньшова M.K»,

бави H.A. Влияние соотаz& umsreshwx сред im вшсод фраяцян I чуииого вахроба. Медицинский реферативная яуртад, ISS3, p.S, Р I, публ.

14. Тмлеябаев U.A., Arvceäаров Б.Б., Береди» Г.Х. Влияние амянокксдот, вит&зянэв, урацяла и юкоторш: солей ва ckhvös фракцзш I чуаного ьзжроба. Патологическая фаэияяогня, яащуне-догвя и вллеррологЕя особо опасных няфевцяЗ. Саратов,I2B4, «.£?'

15. Tsseußms U.A., Якукяя B.U., Ксцднрбаев S.A., Мааатка-коа О.Н. Буагшшй катод язягвя крови для соразогачсскях родвдвЯ яря ю&мотагэлгаееяшх обслодок&шгй s очагах чрш. Журнал кикрзбнолопш, впедешологшз и кщуназогка. 1984, & 5, c-IIo—III

IS. Esapq A.B., Соорбеяов O.G., Вжутш Б.Н., Доле С.Б., Твлеаб&эв М.А. Талассяяй пряродгаШ епаг чукы. Актуаяывго водросз &нздяэдзора в аряродахк очагах чуш. Ставроноль, 1985, с. 116.

IV. Твдсзбьвв H.A. Ио?робыос*ь кякрзбов чуш, Евдаяешшх ss рааявшет пркродяггк оч&гов в вшЕзетслотах, вят&эаяах и соля: для щшбогвв каясуэгьтге аятш'ена. Нагоряалы ебъедяианкого съезда гйгесшстов, окздешологов, кякребкологов, паразитологов а Ейфатрекястов Казахстеяа. Карагеада, 1985, т.Ш, с.120-121.

18. Тшекбгюв М.А. йовзгззкаю чувствяуельшстй дсагкосукауга эрзгр®Чя?®рного едаягешого. Е&тераали рабочего совгцшзш "Сое*< няе црзблеш я порсяектеви развктш! диагностика бавтеряалышх ке#зщкй" (1-2 ееяёря 1989 г., ©болсяся). ©болепсх, 1939, с.97,

19. Тщгхбаев U.A., П&рфггрьееа Л.Н., Рьзушсожа В.й. Завясн-коеть свойств каасузьяэго «нтатвиа чуазоге шнроба о* качества гштатаяьмй среды. Аятуаяьшэ Еояроса ирсфгдактшз: шзфэщеозгацх zsäassszzuü; я охрана, бксяьйй ерзда. IS9I, с.80-58,

20. Тк^екбаов М.А. Вля,1Кй® тетературы на авойстаа шшсузь-оро nirrarsKa чуяпого киароба. Катеряалн У объадшгзнкого саэцда «гиенистов, эпэдсдаодогой, инкробйологсв, паразитологов к ифзвцкояастов Казахстана. Araa-^Ta, 1991, ».У, с.Ю2-ЮЗ.

21. Твлекбаеа М.А,, КдассовапиЯ Л.Ii., Тлвугабюгова A.M., apirtpbeaa А.К. йзиявво качества питптслыел: сред и стимуляторов оста ка сшггез и свойства каасулького антагеаа возбудителя чуяы, еветкаа, микробиология а соверзенствованае иэтодоз лабораторной дагиоетикк особо опасных инфекций. Саратов, 1991, с. 135-139.

22. Тилецбаэв М.А. Дккааака скитеза калсульиого антигена гушша ннкробоа в бульоне Хоттгшгера. Организация зааднадзора [ри чуяе и азры еэ профилактика. Материала мгагосударствзнаой Еаучко-гграктачзскоЯ конференции. Алма-Ата, 1992, ц.2, зД70.

23. Тзолсабайв М.А. Селснбизазарувщив свойства калсульиого юткгена. Организация эаядяэдвора при -гума я шрц ее арофэтактика.) 'аториаггк аежгссударстзс.'той научно-практической хонфэрзнцая.) изга-Ата, 1992, ч.2, с.1'72.

24. Тшгсибоез М.А., Апсатароза P.A., Номина М.П. Амано-гисдотяый состав калсульиого антигена. Организация эаиднадзора tps* чуяе и мэры es арофалактаки. Адгга-Ата, 1992, ч.2, с.17?.

25. Апсатароза P.A., Орел Л.Л., Тяглеабаев М.А. Уяутаониэ гачества питательной среда для шращаваная чуаного някроба. 5рганизацяя зпяднэдзора а яэрн еэ прсфилаатикп.Материала юагосударственной каучно-практической конференции. Адаа-Ата, :992, 9.1, с.74-75.

26. Твлезибазз М.А. Влияние отдельных компонентов пята-голькой среды на синтез фракции I пра 37°С. Материала аежго-¡ударстгенкэй каучяой гокфороацая "Профилактика я коры борьбы ; чукой", аосвященаой IOO-леткв открытая возбудителя чукы

(6~? сегдайря 1594 г.), Ажз&та, 1994, с.145.

27, feaenSsaa М.А. ßssrniac тсзгаоратури роста та ешгода вапеудьного ватягена ч^ниэга Еиграба. Матерааш йзетес^дарст-воаиок научной тфршщш! "Дрсфзя&хтгва к кари борьба с чуяеа" сеаея^Бкяой 100-дати» сгкригпя воабудатедя чуиг (6-7 сеяадбрж IS34 г.), Акита, 1994, с.145-146.

23. Тзмтбтп h.A. Вившего форшшета на сногобшеть ба~ раяьнх эрЕтрсщтов сэсссбслванроваться капеуаышзз mrzro-яага. Н&7арггшш Ееттосударетвашзй научной к«н£зрзкцкя "Про^-яшгтика й кара борьба с чукзй", шгеагщоккай 100-дегаа ртгрыти* возбудителя чуш (6-7 сентября 1994 г.), Алаати, 1994, е.146-14

29. Тагеабаэв К. А. Циркуляция в органязао баик швей фракции I. Маторзака каагосударетвапной научной кокфаренщш "Профажахзгкга и шра борьбы е чукой*, пэсйкцшшой КЮ^яетнэ открытия овабудитовя сентября 1994 г.), Азт&га, 1994,

сД47-148.

Ж). Тмекбааа H.A. Мшуикая рзшщзя оргадазш бежа. шггз£ на essäcigjo кшеуяьиого антигена чухаюго какроба. Матермаш ксагоеударстаакной научной кооферендкк "Профилактика в керц борьбы о чуиой", посвященной ЮО-гетиа открытая возбудителя чу; (6-7 сентября 1994 г.), Адшага, 1994, с.148-149.

Т У Я Ы Р к м

Тшкшбаев Мурат Ахметхаиули

Оба гдакробика!} кгбзх; антигегп кзиа онын цолдлиылук

Е?л жумыс оба микробы антигэнхнхи, яг ни няггвгх ауру адзадир-ьязышч э сйр*ня тткеякй байлаиыста иэиа ауруга ?;арс:ы угкыунчтет ту-ьсзу часи^да, сол ари^лы оба ауруни акыцтауга мтак!яд1к тугыэуы-в. арнадады.

Зарттву Хф&ыстаршыя айгагыиа ^арагавда млкробтнп антиген иы-аруы яняу ?.юлзер:Ые байлаиыста еквпд1г1 анидталды.

Антагчн шыгаратык мнхроб жлу уш!н 28° С жылыды5$та оны арнау-4 2-4 процент М8дтзр1ндегх хяорлк натрий цоспасы бар Хоттингср зректхк ортага енгхзу цажет.

Микробтан антиген шкгару екп!и? 23° С жылылыцта и)р баспалдвц грхнче етп касиеттвн, ярки горлану жэне улксю кезетнен турады. }г!а!ши алгаш^н кеа«нх /корлану/ бхр сагаттаи бтрнеше пагатца !й1.ч сояыдуы адумк!и. Антигеннтн ектнат кеаен} /улкию/ алдынгы ке-;нге Караганда екг все улгая гуседх. Антигенк!» кабехп жэне мик-)^тын саны Хоттикгер к;орект{к ортага байланисгы. Мундэйда микроб-ш кобещие ьщпзл етет!н заттарды кскхнсн пайдалаяган ~вн.

Эр турлг табиги ортадаи тараган микробтар ^абыцты антиген шы-:ру угпгн взхме тон амяно тфгщлыдын к;ажет етвдх. Ь'абык;ты антигеннхк •рашнда 20 амин о яыи^ылк бар. Дабыцты антигскнтн з^рямындагы ами-| к;ыщгзыыкын санм микробты кябейтуге эсер ететхн жылнльщка жене ¡рект1к ортага байланысты емес.

Ауруда аньщтайтьда аопаптын ^апиет-кгах оритроцитт^а жэне анти-ннхи расистI мян мелшергне байланысты. Кдн алу ушхп сузбе-н;ягаз гсгн цолдану 9Л1 хёмхргтитсрд!!? барлыгын зерттеуге мумкхндхк бя-дх.

SUMMSC.

MUMS ¿,£JUL32iBA8y

"Cajituiiir antlgsa of pls.gue microbe and hie application"

Bissertatien are dedicated to tha invatigation. of capsular antigen wish are eloaely conaseied with a vlraloaco of tha bactori »ad Is a saaia isaaunosen of tha plague iiisrobe. This sign give a p< sibility to use the capsular antigen for ssrun diagnosis of plcgu' She intensity of antigen, synthesis wera Bhowa by analysis axe dependence of temperature bacterial cultivation.

la order to teoeivo a otruins vrioh can to synthesis a considerable quantity of capsular antigen vrith ?.3°C this aust be dons in special hypertonic Ejediua containing of Z-^% oodima chlorido.

She curve of antigen synthesis dynamics for temperature 2S°C j ne t'sfo-stepped curve* period of nccunul&tion ib a first Bw2pf the period of antigen inoseaeing ia a ascona step» SJho 1st period continue frosi one to few hours, and during of the second period ti antigen quantity in asdiua bscass 2 tiase as Kors as before« Shs : tensity of antigen synthesis end quantity of tha aicrobe colls ars dependence of nutrient aodiua quality, ffho growth factor aro rais. of an antigen bacterial macs yield.

Stains froa different natural plague foci are needa an appoim set of amino acids for each focus « capsular nntigen contains about 20 aalno acids and its number independent of tenteraturo an( nutrient medium quality»

The activity of erythrocytic antigenic plague diagnostician"to no small degree dependence of foraaalinized erythrocyte, froa sens; tivity of aeroligic activity and of antigen dose* Using the earoli gic paper sethod of serua collection were peraits to investigate < a dead rodents*

Информация о работе

Тюлембаев, Мурат Ахметханович
доктора медицинских наук
Алматы, 1996
ВАК 03.00.07

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Капсульный антиген чумного микроба и его применение ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Капсульный антиген чумного микроба и его применение"

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Капсульный антиген чумного микроба и его применение
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология