Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изменения барьерной функции плазматической мембраны эритроцитов белых крыс разного возраста при воздействии гипертонического фактора среды

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Изменения барьерной функции плазматической мембраны эритроцитов белых крыс разного возраста при воздействии гипертонического фактора среды"

р

ХАРКІВСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

2 0

На правах рукопи£у

ШЕРЕЛШТ ЛІЛІЯ ВІТАЛІЇВНА

ЗМІНИ БАР’ЄРНОЇ ФУНКЦІЇ ПЛАЗМАТИЧНОЇ МЕМБРАНИ ЕРИТРОЦИТІВ БІЛИХ ЩУРІВ РІЗНОГО ВІКУ ПРИ ДІЇ ГІПЕРТОНІЧНОГО ФАКТОРА СЕРЕДОВИЩА

03.00.13 — Фізіологія людини та тварин

АВТОРЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук

1994

Дисертація с рукопис

_Робот* виконана на кафедрі фізіологи дедикі; та ;варин Харкігського державного університету

Науковий керівний: Офіційні опоненти:

доктор біологічній наук, професор В,А<Бондаренко

доктор біологічних наук, професор. В.Й Луговий (Інститут проблем кріобюлопі І кріоасдицинп АЙ України, іц Харків)

кандидат біологічних наук, процесор С.і'.Корсуи (Харківський деревний інститут фіїИЧНОІ культури ?

Прсмдна установа;

Український НДЇ їег>аліІ ниН України, л, Харків

*30

Захист відбудеться * 1934 р. о *

годині на засіданні спеціалізоьаиоі ради іі 053,06,07 Харківського державного університету 131С077,- ц, Харків, «айд, Свободи, аудитори 3-іЬ) .

, 3 дисертацією можна ознайомитися в Центральній науковії

оібдюїеі'і Харківського дерхаваого університету,

Автореферат'розіслана л/'т^* 1 $94 р<

Вчений секретар .спеціалізованої вченої ради кандидат оіогогічнкх наук .

А

А.Ь,Некрасова

ЗАШШ ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуаяьність пЬобземн, Відомо, по вікові зміни здатні вияяк-кат* прогресупче зиихення ефективності систем* язі підтримують гомеостаз у організмі а процесі онтогенезу* спостерігаються на різних рівнях організації організму*

Особяивості хііьхісиого та якісного скіаду спазматичної мембрани, а саме, значні відмінності фізико-хімічних і-астивостей 1 функцій, ххі пов'язані з ліпідами та біяками* вад*»ичаііно їч-сока концентрація білків* вхяачених у «ембрииу, природа взаємодій міх компонентами, дозвовявть віднвс*)» «вибрану н& думку ряда as-торів, до груик таї нвзкзасмих "оргаиізацібко-хінцевах систем” (Воїтекко 1981 ї,дяк аккх характерно зростання дестабіліза-

ції в заіехкості від терміну функціонуваккл-гоивокдаз^

Тому вивченні бар'єрної функції пдазкатичкої мембрани хитин у онтогенезі організму експериментальних тварин мас значний інтерес, т,с, у цьону випадку з'являється меххивіеть виявити фактори здатні викхикатя прогресувче знихения ефективності систем, які підтримувть кгітиннкЙ гаиеостзз у процесі онтогенезу^ .

Вікові) статус кдіткн иохе проявяятися у зміні їх осмотичнсї чутливості 1 визначатися, зокрема, по збереаекии бар'єрної функції менбракк прп переносі хлітин у иефізювогічкі (па осмозарнос-ті, pH та ін.,) умови середовкча.’ЧкзА додатхов»5 адьтерувчвй впхав здатен виявити вікові відмінності структурна-фуняціонаяьного стану хяііик^ які в нормі не проявяяиться* Ці особливості можуть аід-обрахувати ступінь структурної пластичності по відноиеинв до *а-рокого діапазону умов, в котрих иохе знаходитись кя.ітина., Використання різних варіантів початкової кодифікації структури,, у тому чисяі 1 тих, це иоитродивть ссиотячиу поведінку клітин, до-звоаис виявите більа внрахені особливості структурної пнастичкос-ті квітни, які визначаться віком,

Приймаючи це до уваги мето» яаяоі роботи буяо вивчення вікових особливостей чутливості еритроцит 1-і 12- місячних цур) в д» змія осмотичних параметрів при перекосі КД1ТИН ДО rlneptertU-' них розчинів у нативному стані, а Tar.es ирк хімічній ио£*$ік&ціі (геміном і ххорвремазином) «а аісля теиаературної денатурації биків . . .

Крім цього преводядось внвчеин* інвих аекаакмів еритроцитів та їх : ;•*»*>* 41 зиіааия чутднвомі кдітіш до дії гіпертонічного воау, я таяох вквчадясь осовднвасті функцій рецепторного апарату оратроцатіа І- *а 12-німчкнх тваряи* •

і’.;' Задачі аост»енн<« Згідно з поставденов м»»ов ровотн вуд» аапівноаакі сдідуячі «кспврвиентаїкні задачі:

- . Ц Доедідяїнчутлнвіеть еритроцитів цурів рівного »1»у до •«-спок>*е.нн* у гіпертонічному сахарознону середовищ а різно* кок: цонтраціев сохарозв в задехності від тривалості вдспоаувания,

'- ■ Дослідите види» умов інкубації у иеед дтродітноиу середо-

їдці з залежності нд хенцтрації сахарози та тривалості евспо-; ійцИ на чутливість орніррцкти» цурів різкого віху дб паертоніч-ивгс аоху » 4,0 »оль/л УаСЦ :

34 Вивчити «плів температурної (*43°С) »а хімічної иодифіха-П»Е 1 мориромази^см та гемінем ) на чутливість еритроцитів цурів . різного віку до дії гіпертонічного фактора середовица,

44 Вкьчитм динамц.зміни рівня АТ5 і еритроцитах 1- та 12' місячних ЧУР1»» присутності йодоацетатда, а такод водив внутріклітинного рівне АТ5 на спінить клітям тварин різного вії; до .дії гіпертонічного та температурного фалтора середовица., .

5* Вивчити дикаміху аглитінацИ еригроцятів тварин різного • віку під еодиаеи ионханаваліну А, <

М*у*ов> новина» Впграе аохазако* це .8 гіпертонічному нвелех-трсітаиу середовищ ератрсцхтм білях чурів н&був&вть чутливості до гіпертонічного во«у при переносі у 4,0 иоль/л УаСІ*і чо про-втетьса у гомьіізл хитай, рівень ядого залежить від віху ш> рян, кенпентрації нееае«р»лі»* та тривалості «депонування^

Видалені сиові особливості змін* исиотичиоХ сті&сості ернт-*роднтів 1- т* и- ниачнад адрів вкаїдідіа тенпературноїІ хімічної нодафікаци стану днтзсквдвта кдіінн та його взаємодій з «ипонен-»ак» невбрааи. Показано, до характер І ступінь впливу хімічних ч иоднфіаморів иеибран* аавехать від концентрації наемитрі.ітау ; соредоз»чі *а »р8»адості едсв» »іщЦ хлітяа у ньо«у1.

^ ;®е,*к****вв< 48 **»*?іс*» цмивних та модифікованих ерятро-^ цвті» ,9і«х цурів е»ар*ого аиу до дії гіпертонічного фактора се. (одовн^а енца аорІкидко з хяітананя 1»ііісд<(йнс тварин^ ;

-. '/Погазакв, це«рїтроцмвя 1-місачивх аурі» характеризується '

білів зиачнов авхдкоств виснаження внутріклітинного тівня АТФ в присутності Яодоацетаиїді порівняно з клітинами тварин старшо І вікової групи*

Випалені вікові осаблнзості стану рецепторного апарату еритроцитів 1- та 12-цісячнкх тварин* про с;о свідчить різна ивкдкість аглвтінації клітин в присутності конкгнаваіїна Ач

Теоретичне ті практична значенню Результати роб*. .ил дають можливість використовувати осмотичну чутливість еритритів в певних умовах як маркер візового стансу експерлментальних тварин,. Стійкість еритроцитів 1-шеячнях тварин до гіпертонічних уиов в иеелвктролітноау середовищі іа розчині електроліті нкжч*., ніж плітям щурів старшого віку,

Отрииані дані асказузть,, оо ьікові особливості бар"срноЗ функції цитоплазматичної мембрани еритроцитів пов"язані зі іміначи в процесі онтогенезу стдуктурко-функціонального стану цитоскелета та Аого взаємодій з компонентами біліпідногс вару мембрани, Відомій статус організму впливає на фукціонувлння систем енергетичного обміну еритроцитів, а тасої на стан рецепторного апарату .хгіїлн^ олгоиерних вуглеводи*:: ланцетів білка смуги З,

Практичне вкачення роботи полягає у тому* що одержані резуль-

тати можуть бути використані для ровробки нових підходів у вивчен-аі еритроциті» як покавніікі* вІіглзмін організму дядини у аорііі та при патологічкиї станах^

Основні положення, які виносяться на захист<

1, В гіпертонічних розчинах сахарози еритроцити цурі* не тільки набувавті чутливості до г! перікчотичного ііоку в 1,0 коль/л ^аС1<

але гемолпуїт на етапі початкової інкубації, Рівень гемодігу визначаєть * умовами початкового експонування клітин у кеелектро-ліїному середссиці І концеитраціео сахарози І тривалості) інкубації ) та віком тиаркн,

2« Хімічна ( хяорпромагиі'.ом ітякіноч) та температурна (+49°С) .■ модифікація стану плазматичної иеибраіи; і білкового скелета еритроцитів пролвлявїься у 3>:І11І чутливості до дії гіпертонічного факі'о-ра середовища, Конкретний характер впливу залежить від стаду, тонічності с^редояица та віку теарли* ’

Апробація соСотк. Матеріали доповідались ка кінфг’реяцП молодих гченйх ХД/ ( Харків* 1"9і„ 1904 Ь на конференції аолодих вчепи* Харлізськогс иедичногз інституту ( Харків, 12^2 )ґ на Уі

Українському біохімічному з'їзді ( Київ, 1992

Публікації, По матеріалам дисертації опубліковано 3 роботи, з яких 2 яурнальні статті та 1 робота в те?ах* .

Структура та обсяг дисертації, Дисертаційна робота складається із вступу, обліку літератури,, опису матеріалів та методів, 6 розділі» власних досліджень та їх обговорення* захіпчення, висновків, списку літератури^ який вклочає 190 роби закордонних та 28 вітчизняних авторів^ Робота викладена на 130 сторінках машинописного тексту, містить 37 налзикіч^ .

НАТЕРШИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЗШЯ У роботі були використані еритроцити 1- та 12-мІсячнкх самців білих viypis, лінії WiiUl' 1

Еритроцити експонували з гіпертонічних розчинах, які містили різні концентрації сахарози І 0,27 - 1,0 «озь/л ) на протязі певного часу ( 2,10,30^30 хвилин )1 Дані уиови експозиції в неелек-тролііких середовицах зумовливали початкову модифікацій клітин, котрі потій переносили в 410 мояь/л УаСІ, за допомого» чого моделювався ппзросмотичний шох ( Поздняков З^В,, 1989 Ц

Дія модифікації взаємодії цитоскелета з бшпідиим шаром мембрани еритроцити обробляли гешном і гхЮ*^ моль/і ) або хлорлрома-зкном ( 7x10"^ маль/л 5^ “Температурна денатурація бика смуги 2,1 здійснювалась при +4S°C,

, Виснаження еритроцитів nu AT* в присутності йодоацетаміда проводили згідне (

/. і. „ 1982 !. 5аі CT бііуїріКЛІТИНИОГЛ АТ$ визначали гєксо-кіг.азнк;* методом з невеликими модифіхащяии ( ' ігліііі і. , 1975 )1 .

Аглотінацік еритроцитів здійсітвалась обробко» клітин конка-навалімом А ( 67,5 та 135 ахг/мл )<

Стчтистччн/ обробку експериментальних даних проводили по Ст"аденту-Фіиеру^ . .

результати п її обговорення

. Стійкість еритроцитів білих цур і з різного .віку до гіпертонічного чгелектролітного середовища та гіпероснотичного ооку

Стійкість еритроцитів де пперосмотичного цоку в 1,0-4^0 мо-

аярні:х розчинах МіСІ залежить від структуря!>-фі?:ікціонального стану цитоскелета та його взаємодії з хомпонентаик иеибранн І Бондаренко 1S&9)^ При зміні осиотичних napauevpls середовища

стан цитоскелета і його озаемодія з компонентами цекбранк залежать а1д ступеня дегідратації хлітнни* лотра задастьс; початновка рівнем ОСИСЛЯрНОСТІ ЯК У ьркеутності електродlyiBj гак і чеелектролі-тіз ( Поздняг.ов 3,31* 1553 )< а також тривалістю ексзонузання клітям у гіпертонічних розчинах игекектролітіа ( Песіїш 1994 Ц

На етапі початкозо! інкубації в гіпертонічних розчинах* які містять сахарозу* ер«троці:?к білих щурів не тільки набутаять чутливості до наступного переносу в 4jQ ноль/л //аС 1 * але й геиолиу-вть^ Рівень гемолізу залежить від концентрації неелактроліта та тривалості експонування гліт^іц Еритроцити 1- та 12- міснчних тварин характеризуються пізиценно» чутливістю до дії гіяертоииногс фактора середовкца в області критичних концентрацій сахарози* ие-21 якої визначаються часоїі інкубації клітіііц

Вікові особливості стійкості еритроцитів обох ВІКОВІІХ груп до зміні! осмотичній у.чоі» у присутності иеелектроліта { 0,27 - ЬО иоль/л сахарозй)проявід£ться тільки після певного тесового іятерьл іу (від 10 ДО 60 ХЗИЗИИ )w при цьому еритроцити одііємісячних тварин відрізняє висока чутливість до гіпертонічного неедектролітного середовища, яха різко зростає п,звільненні тривалості експонування клітин* При тих хе умовах тонічності середовица та часу інку баціс оеиотичнз чутлизість еритроціпв 12-иісячних цур і в значно нижча* •

Порівняння вікових особливостей чутливості нативних еритроцитів 1- та 12-иісччних білих щурів до переносу в 4,0 иоль/л //аСІ -можливе тільки після короткочасного експонування ( на протязі І хвилин) з гіпертонічному сакарозноау середовищ,, vа:с яі з цих умовах геиолізує неня ЯІХ 10? еритроцитів TS?.Ui!H обох ВЖОВі'Х груп* Стійкість еритроцитів 1-Шсячнкх тварин до гіпертонічного її оку а 4*0 ноль/л Ж'аСі була достовірно нняча,, ніж стійкість плітки 12—u і -скчних цуріа після експонування у гіпертонічних розчинах не електроліт а ( 0,.8-І„0 Міяь/'і сахарози)., ,

. Таким чийпи і ‘бріїтрацлгн хйрккг'еризуаться иеоднаковоа ■-,/гливі с’т в. до вкбп'ойугааиіі у тїпзрчонічн.и'к розчинах селі та н«еяе<гре-

структурного стану цягоскеяеїа та мембрани в умовах дегідратації^ Той факт* що структурна свавільність цртоскелета контролюється слабкими зв'язками міх його компонентами* дня яких харазіерна висока чутливість до змін умов середовища ( Н&ьИ С, л 1932 } ДОЗВОЛЯЄ Прийти ДО висновку,! ІДО вікові розбіжності осмотичної СТІЙКОСТІ еритроцитів ксатрояавться неоднаково*» структуро» <5аг»точисленних Сіаі'лих зв!‘язків у цехах цитоскелета^

Вплив температурної та хімічної модифікації ципскелета на чутливість еритроциті» СІ і д»х і*уріз рівного віку до дії гіпертонічного фактора ^ неелектролітиому середовищ та розчині електрсліта

Відомо,- що температурна обробка еритроцитів щурів ари +49°С зумозл»е вибіркову денатурацій бика смуги 2«1 ( лнкіріну Ь який забезпечує взаємодію спектринових тзтрачерів цитосхелета з білком смуги 2 ( Сади І^Х*, 19К9 )., Ослабленій азаемозв’язлу цитоскеле-т& з інтегральними білками ОШпідного шару знихус осмотичну стійкість еритроцитів білкх щурів 1- та 12-иісяч;юго віку до дії гіпертонічного середовища у розчинах наедектроііта та 4*0 моль/л //аСІ* Ступінь сеискбиїзуячого виливу температурної модифікації структурного стану мгмбргнк на чутливість хлітин до пошкоджуючого фактора не залежить ьід концентрацій кгелектроліта у середовищі* Тривалість експонування такої не має суттєвого впливу ка зміну чутливості модифікованих клітин до гіпертонічних умов.,

Зниження стзіиїзуччого впливу цатоскєгета иа біліпідниіі иар вьаслі.чск температурної денатурації білка смуги 2^1 зумовлює різка підзііцєнь’й чутливості еритроцитів тварин молодшої вікової групи до гіперюкічного середовища, цс мена виражено V аміні осмотичної стійкості модифікованих еритроцитів 12-иісячних щурів порівняно * натквниии клітинами. ,

Обробка еритроцитів х ірпромагичом, інгібітором кальмодуліна (ііліїі&ібі £. іїШЬіУ-й., 1933 )„ зміниг чутливість до гіпертонічного середовааа пееіектрзліта тільки клітин 1-місячних тварин { мак, 1 а,б 1* При цьому хяоряроиазин прсявляе виключно протекту-*чі:5 е^ек: у всій дослідженій області концентрацій сахарояі/ступінь якого зросив прн гбільсечаї тривалості експонування клітин* Хлсрп^сказяч знизує чутливість еритроцити тьарии даної вікової

а

В

1., Війна хіорпроиазика на чутливісп еритроцити 1- ( А ) та 12- ( В ) иісячннх тварин до гіпертонічних рззчині» сахарозу , .

1* її З, 4 - час інкубації І, їй, ЗО* 60 хгилиц, відповідно*

групи І до перекосу в 4^0 аоаь/л //іСі^ .

Вплив хлерпроцазпна на стійкість еритроцитів І-иіслчяих оілих цу"іс до гілсросмотичного соху в 4,0 иоль/л ЛаСІ характеризується рядои особливостей., Ґіо-перзе, після короткочасного експонування КЛІТИН в неелектродітноиу середовищ ( 2 хвилини І виявляється ДВІ облаеті концентрацій сахарози, які характеризуються різною спрлио-ванністо впливу хлорлроиааина на стійкість еритроцитів І-місячних тварин до гіпсросиоткчного ааку^ Так чутливість модифікованих еритроцити після скспонуваннк у розчинах, які містили 0,27-0,6 иольїї сахарози до переносу в 4,0 иольїї //аі» достовірно підзичу-,>тьсл^ Зростання концентрації неелектроліту на етапі початкової інкубації зуиовло* проектування клітин гіпераекотичного паку її присутності хлорпромазина^

По-друге, ступінь прот«ту»чого впливу хверг.роназкка на еритроцити і-і.ісячннх цурів значив иенииГі порівняно з іштинанр, 12-иі-сячних тзарин ари цих ке умовах екс.іонуваліія у иеелактролітному середовищ ■

!1(/-тр:.тє, ПІДВИЦІіННЯ СТІЙКОСТІ еритроцит 1Ь 1-М1СЯЧНЙА тварин під впливом Хлорпроказика до перенесу е 4У0 иоль/л //аСІ спостерігаються після експозиції в білкч вузькій області концентрацій сахарози порівняно а «ркгроцктай'-і 12-икячи;',х білих щурів при цій ■хе тризаіогтІ експонування< ■

Модифікацій взаємодії білка с.<угк 4.1 з елехентаки цкте-скеле-та тг іате.'ральнкмк білкам, яка суиовлена геміної! ! ірііі 1939). ііаь сіиадннй вплив на ог.иотичну стійкість еритроцитів 1- та 12-кі-сячниг тварин до дії гіпертонічного фактора середоаица,, Стуліть та спрлмОїанністі цього впливу зал.гхить з і д уиов експонування еритро -цктів у у.ееле\,тротьоку середовищ та віху твариіц иід впливом геміне, еритроцити тварин оОох товил груп сепсибілізуаться до гіпертонічних рїічиніь сахарози на протязі перзих ЗО хвилин^ Рівень геиолізу модрфиованг.х еритроцити 12-иикчн'лх цури иезначн» під-вкщувїксл порівняно і наливним клітинами, При цьому чі-.ло вирахе-на зьлехгііс?', ступеня сенсибілізації глітин в і г. концентрації не-електроліта у серадсвищ ?а тривалості ехсг.онуїаиня еритроцитів у цехах вказані-юго часу не пролрлхсться. Чутливість ойроОпеких геиі-нок ери^оцнтів 1-місяч ах тварин до гіпертонічного _сахарозного се- • редояіца вкц*, иік клітин старшої оікової групи ,

' Після тривалого експонування ( 60 хвилин ) нодифікс-аних ге-

UlhOII клітин у неелектрозі ткочу середовищ ВИЯЬЛЯСТЬСЯ кілька областей концентрацій сахгрози, які відрізняються спряиованніств впливу геи'на на стійкість еритроцитів до дії гіпертонічного фактора, При цьоиу у похнііі області яоицьнтрації модифікатор' зді Яс— нвє подібний ефект «а еритроцити тварин різного 9і«ь яки* підріз-

няеться лкпе ступінеи його вирахенностц

Сенсибілізуючий вплив геміна проявляється з наіібільа зкрікій області концентрацій сахароз» ( 0,£7 - ОН цаль/л та 0ло - 0**5 молі/х^ З 0,6 га 1,0 молярних розчинах сахарози стійкість ер.чтру-цитів білих щурів різного віку до ді гіпертонічного фактора се-редозіша підвіщусться під впливом геиіна^ При чому протсхтувчпі ебект «едифікатора у випадку еритроцитів 12-тсячнкх білих qypl^ Достовірна різниця у рівні генолігу нзекбнкх та модифікованих ге-«Н.'оа еркт,„цитів вітсуткя пістя тривного експонування в розчинах, які містять ОД’ - 0,7 уоль/л сахарози.,

Спряиозанність та ступінь впливу геиіна на стійкість еритроцитів 1- і 12-иісячних білих цур 1 в до гіпертонічного соку в 4,0 .

моль/я /VaCl зи-ехить від ;иов експонування t неелектролиноиу . середовицІА Еритроцити цурів стапиоі віково! групи протактуаться модифікатором білка смуги 4,1 до переносу в 4,0 иозь/з /ЛСі після тривалого експонування клітин ( ЗО Та 60 хвилин ) в критичних концентраціях неелектроліта ( 0,7 - 0,8 иоль/л ). ,

Проектування геиіноу еритроцитів 1-шсячних тварин до гіаер-

тонічнпго иоку спостерігач іjcs після експонування клітин в тих хе умовах середсвица нрелекгролігу. але тільки після 30-і хвилини

І в знич:ю менша !Л?Ц

Тривалість експонування еритроцитів у розчинах неелектроліта . . має суттєвий вплив на ступінь сенсибілізації клітин після обробки 7 геміпан до Гіпертонічного шоку в 4,3 иоль/л //аСІ, Максимальний сенсибілізупчиіі зллнв модифікатора на еритроцити 1-місячних тварин спостерігається після короткочасного еїспснуааиия в розчинах, які • щетять 0,27 - 0*7 иоль/л сахарози. Збільшення трива-

лості експонування різко знихуе чутливість клітин тварин цієї вікової групи до перекосу в 4,0 иохь/я //аС1^ Стійкість модифікова- ;

них еритроцитів 12-мІсячних тварин до гіпертонічного иоку після початкової інкубації в тих *е умовах значно вища., Але, тривалг ; експонування еоитроцигіг у неелеятролітному середовищі з концеира-

Пал., 2< Чвидіісїь васкахеиня по АТФ еритро-ЦИЇІВ .ВДГРІ® різного в»у 8 вриеут зс»1 йодоацетаміда

( 6,0хІС3 ио»ь/і )ч

1 - 1-иісячні тварини,

2 - 12-иісячні тварини,

Ца», 3, Аі-иїінацій

еритроцитів щурів різного віку в присутності кон*ч-наїїну к і 67,5 икг/шЦ

1 - 1-місячні т-арики*

2 - Ії-місячні тварини..

90 120

час* хвилини

1 Ш час, хвилиьи

- 13 - .

цими иеелектроліта нижче критичних підсилює сенсибілізуючий вплив геміна на клітини указанної г^упи тварин ( мал, 36 ),

Такий чином* зплив хімічних модифікаторів* як 1 осмотичних умов середовища на еритроцити також залежить від віку тварин.. Це можна пояснити неоднаково» чутливістю зформованкх периферічними білками ( білком смуги 4,1 та 2Д, включаючи бики сиуги 3 ) контактних зон, які забезпечують прикріплення цитоскеле-а до мембрани і контролюють осмотичну 1 холодову чутливість клітин ( Раиазн-нов 6,3,, 13У4 р, ),

Вплив виснаження АІі в присутності йодоаиетаміда на стійкість еритроцитів бівих щурів різного віку до дії гіпертонічного та температурного фактора середовища

Багаточисдені експериментальні дані свідчать про значний зплив АТ$' на збереження та підтримання цілого ряду властивостей та характеристик еритроцитарних клітин* які забезпечують високу ефективність

II функціонування І Слобожаніна Є«І,, ШіІРЬ Л. , 1990 )«

Використовупчи метод "пвидксго" виснаження еритроцитів по /ЛЗ в присутності Яздоацетаміда ( бхЮ*3 моль/а ) показано, що еритроцити тварин 1- і 12-місячиога віху характеризуються різними изид-костяии падіння рівня внутріклітинного А73 ( иал« 2 ), Еритроцити 1-мігячних <51 лих щурів втрачалі в перші ЗО хвилин біля 702 АТ5* а за 2 години ‘швидкого* виснаження рівень лїї досягав нульового значення { мал, 2 ), Швидкість виснаження по АТЗ еритроцитів 12-иісячних тварин’ була значно вкцаі, На кінець експерименту рівень АТ5 досягав 20‘/ від початкового,

Зниження рівня внутріклітинного А75 нижче Ю5£ різко підвищує чутливість еритроцитів до гиертонічнего сахарсзного середовища, Стійкість'клітин чурів 12-мігячного віку зростає до зсуву температур (37°С -- 0°С ) у розчинах неелектроїіт* прд виснаженні еритроциті» по до 22?» ьід аочаткового рівня, Яр* досягненні

вказанндг* рівня внутріклімнного АТ8 чутливість еритроцитів 1-ш-сячних «арнн до дії температурного фактора середовища не зиінвг?ься . . їакци чином* метаболічний стан клітин ервтроци.тарноі пояуія-ції знімається у процесі онтогевеза і иоже бути одкіса з причин ■розвитку особіивосіей структурного стану цитоскекета та піазнатич-ноІ мембрани еритроцити 1- та 12-иісячких чур»в«

Агдатінація «ритроцш» біхих цурів ' різного віку з прксутквеи КОНКаИаВаїІНа А,

. рецептори** апарат, у тому числі і иієця зв'язування хонкана-

вадіна А, які роаиіцекі на бику смуги 3 еритроцит, знінвятьса в процесі старіння кдітин VSkiflOXil&& , 1936 ),

Збиь&еннд концентрацій хонкапавацна к 5 67,5нкг/цх до 135 икг/адпідвкцус швидкість агдмтінацМ еритроциті» щурі» різного ьі-. ку, Однак, незадехно від використано! концентрації хехтину* середня . «аидхіт агдтпнації еритроциті» П-иісячнвх тварин а верві 15 хзядин буда у 2 рази вяца, ні* хдітин цурів мояедшої вікової групи,

. • При цьоиу риень агкотінації, який розвивається до закінчення 120' хвилинного акспонуааккя у ічкубащіноиу середовищі^ еритроцитів . цурів різного віку достовірно не відрізняється ( Нк1« З І4

1101V.а припустити, це це зумовдено відсутністю значив! різнячі ' у густині рецепторних иісць на одинице площ поверхні ериіроцймв тварин різкого віку, /_е, конкордат ікай стан бика смуги 3« на* певно, суттєво відрізняється у ерчтроціиах 1- та 12-ииячних qypls* цо зуновдве різний ступінь досі/аноеН рецепторних місць до дехти-ну. Це цохе бути наслідком віковмх зшн цілого ряда структур * арецесі старіння еритроцити, мі називать на конформації бика cuynt З, У чксіі зказаиних компоненті» рохуть бути гемоглобін та продукти його окислення ( K&f M.ttl. t 1990 Ь вадке рівня внутріклітинного АТі на стан білків менбр&нк,

Сияялекі особливості аглвтінації еритроцитів білих курів різного віху е додатковим свідотствоч різниці якісного сладу еритро-цитарної популяції едітик і- та 1£>иісдчі-.их тварян,

' ВИСНОВКИ -

1< Еритроцити вдрн характеризується високої) чутячвіств до інкубації у гіпертонічному середовищ, яке містить сахарог , Най-бідьва чутдавїсть штян до дії гіпертонічного фактора середовица . проявдяєтьса « області критичних концгі;»рацій сахарози, ари яких ссостерігаїться розвиток ізотерщчного геиовізу клітин, Неп вка-заиної обїісті концентрацій неедвктролку ■развирвяться при збт-жени! часу інкубації, я сане з 0,7 - 0,8 мзль/л аісяя 2-х хпиіин до 0«& - 043 мохь/л на 60 хвилині, .

2* Чуми»)сї* еритроцитів «урі» різного віку, модифікованих в гіпертонічних розчинах ахярож, до дії гіпертонічного аоку » 4,0 моль/л Л'аСІ залежить не тільки від початкового рівня тонічно©-ті неелектролітного середоваца,_а»е ft від тривалості експонування в цих умовах, Чутлизіеп еритроцити 1-місячних тварин до ппер-тонічного нелехтролітного середовищ т* 4,0 моль/л УаСі вища порівняно з клітинами цуріа етвря»! s)козо і групи,

3, Температурна денатурація а'нгіріку ( +49аС )сенсийілізус еритроцит» цурів різного віку гіпертонічного шоку S 4,0 моль/л '

//аС1, причому тонічніеть сахарозногс сгредо»иі;а но визначає ступінь проявлення вкізанного ефехта, Рівень гемолізу модифікованих температурно» оЬробхьа еритроцитів 1-місячних таарин з 4.0 иоль/л VaCl вкцв, ніх хдітин цурів етаргого віку,

4, Хі.ряромазин протекгуе еритроцити 12-к!слчних тварин від

ПОвКОДіеНИД В naeprOHUHOvy середовищ., причому ступінь протекції, зростав при збільзенні часу експозиції, Чутливість еритроциті» 1-иісячннх тварин до гіпертонічного неелехтролітного середовица не змінвєтьсл я присутності хлорпромазина, ■

5, Хлорпромазин здійсняє різкокаарамений «плис на чутливість

еритроциїв 1-місячних цурів до переносу в 4,0 моль/і Л'іСІ, характер якого визначається осиоткчниии умолами інкубації та часом експонування в неелектролітному с«редовииц, Хлорпрсиазин знижує осмотичну чутливість клітин, які початкоао експонувалися в розчинах нселехтроліту з високо» точічнсста на протязі всього чаеу інкубації, до 4,0 моль/л, Vail, в той хе час початкова експозиція еритроцитів в розчинах з низьким рівнем осмоіярності ( 0,27 - 0,5 моль/л } на протязі 2 Х5нлнн яідзицуе їх чутливість^ Протектуича . дія хлорпромазину біаьа вирахена у випадку еритроцитів 12-місяч-них тварин 'в умояах гіпертонічного воху ( 4,0 моль/л УаСі ) порівняно з клітинами 1-місячних. щурів, '

6, Гемін підвицус чутливість еритроцитів цурів різного віку до гіпертонічного сахарозарго середовища, причому рівень сенсибілізації клітин 1-місячних тварин виций порівняно з еритроцитьм» 12-місячких тварин,

7, Вплив геміну на чутливість еритроцитів цурів різного віху

до переносу в 4,0 моль/л f/aCl має біфазнхй характеру .

Після експонування клітин у розчинах, які містять 0„27 - 0,6 моль/л сахарозу, спостерігається підвищення під впливом гейшу, ^

чутливості еритроцитів 1—місячних тварин до пперосиотичного шоку, а в середовищ з більш високими концентрации* нееаектрзліту пав місце протектувчні афект в присутності даної еполуки.

Звільнення.часу експонування еритроцитів у розчинах* які кіс* ' тяті, С.-27 - 0,6 иоль/л сахарози зуцовлвс перехід до різионаправіе-його реагування еритроцитів цурів 1- та 12-міеячного віку на . дю пперосиотичного аоку ари переносі у 4*0 иоль/лУаСІ, По мірі збільшення часу інкубації клітин 1-иісдчних тварнн в неелектроліт-нону сердовйці їх чутливість до переносу в 4*0 иоль/лг УаСІ а присутності гені ну знихусться* в той час як еритроцити 12-иивчнях . ' щурів додатково геиодізувть, • •. , / ■

81 Швидкість виенахення еритроцитів по АТ6 в присутності йо- ' доацетаміда різна дія хдітин 1-1 12-мкячних щуріЕритроцити цурів колодко! вікової груди виснадхуються ав:ідие„ ніж клітини 12-тсячнкх тварин* втрачавчи на протезі перших ЗО хвіии більое 60)С початкового вмісту А?4* в той час як у клітинах 12-иісачнкх тварин втрати становлять лине 302, ‘ '

9ц Еритроцити 1- та Ц-місячних тварин характеризуються різ-нов швидкістю аглвтінаііі* в присТтностІ конканаваліну А^ Незалехио від використаної концентрації дектину ввидкіс>ь аглвтінащі еритроцитів 12- місячних тварин а 2 рази іи^а порівняно з клітинами тварин иоаодної вікової груак на, протязі перяих 15 хвилин* але кінцеакй. рівень аглют і нації еритроцитів 1» та 12-шсячних цурів не відрізняються, ' - - ; і /■;.; ../7 - -‘’

, СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ; Р05І.Г >0 ТЕМІ ДЙСБРТАЦІІ ’

1, Перемет 1,В,, Бондаренко. Ступінь дегідратації 1 стів-кість еритроцитів ч5і»их, цу,рів до осиотичного Т" теипературного веху // в сб,; У1 Український біохімічний з’1зд,-1992,-ч,1, с 105,

2, Ееремег 1,8, Осмотическая чувствительность еритіівциїов крыс разного возраста в гиь.ртоничасвих средах, Сборник научных аабот аспирантов ХГУ: естественные и физико-математические науки* ' Карько»: йзд-во "Основа* при ХГУ., 1992,-0,66-71^

,5Ч їїпакоза Зеремет Чувствитедьвость модифицирован-

ных хлорлроказинои еритроцитов к холодовому ио*у //Уіср, баохиМ, хурн, - 1993* - т< 65, 31,-С,69-73, ■ ' .