Изменение системы глутатиона при различных вариантах церебральной ишемии и возможные способы ее коррекции

Лемешко, Елена Халимовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изменение системы глутатиона при различных вариантах церебральной ишемии и возможные способы ее коррекции
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Изменение системы глутатиона при различных вариантах церебральной ишемии и возможные способы ее коррекции"

На правах рукописи

ЛЕМЕШКО ЕЛЕНА ХАЛИМОВНА

ИЗМЕНЕНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ ЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ИШЕМИИ И ВОЗМОЖНЫЕ СПОСОБЫ ЕЕ КОРРЕКЦИИ

03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 9 п£Н 20Ш

004616540

Работа выполнена в ГОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор

Колесниченко Лариса Станиславовна доктор медицинских наук, доцент Верлан Надежда Вадимовна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Вавилин Валентин Андреевич доктор биологических наук, Усынин Иван Федорович

Ведущая организация ГОУ ВПО Сибирский государственный

медицинский университет

Защита состоится «14» декабря 2010 года в _часов на заседании диссертационного совета Д 001.034.01 в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте биохимии СО РАМН по адресу: 630117, Новосибирск, ул. Тимакова, 2; тел.: 8 (383)3335481.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте биохимии

СО РАМН

Автореферат разослан «13» ноября 2010 года

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Русских Г.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Выяснение механизмов биохимических изменений при развитии цереброваскулярных заболеваний является одной из главных проблем современной медицины. Известно, что в последние годы среди сосудистых болезней мозга отмечается увеличение ишемических форм (Путилина М.В., 2009; Федин А.И., 2007; Локшина А.Б., 2005; Дамулин И.В., 2003, 2005).

Хроническая ишемия мозга (ХИМ) - наиболее частая форма цереброваскулярных заболеваний. В нашей стране в настоящее время зарегистрировано 3 млн. больных цереброваскулярными заболеваниями, в течение последних 10 лет распространенность данной патологии увеличилась в 2 раза (Гусев Е. И., Скворцова В. И., 2000; 2001; 2003; Румянцева С. А., Федин А. И., 2004; Верещагин Н. В., Пирадов М. А., Суслина 3. А., 2002; Румянцева С. А. и др., 2010).

С учетом прогрессирующего старения населения планеты, проблема цереброваскулярных заболеваний обещает оставаться актуальной и в будущем (Карникова Н.И. и соавт., 2006; С. Sarti et al., 2002).

В условиях хронической церебральной ишемии запускается каскад биохимических реакций в ткани головного мозга, приводящий к внутриклеточному накоплению свободных радикалов, активации процессов перекисного окисления липидов, избыточной генерации активных форм кислорода и, как следствие, гибели нейронов. Как и в других тканях в мозге есть антиоксидантная система (супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионпероксидаза, GSH), которая защищает его от свободных радикалов. Церебральная ткань восприимчива к окислительному стрессу из-за ее высокой потребности в кислороде. Система GSH необходима для защиты нейронов в условиях окислительного стресса (Кулинский В.И, Колесниченко JI.C. 2007; 2009; Dringen R., et al., 2005; Janaky R., et al., 2007; Levonen A.L., et al., 2007).

У пациентов старшей возрастной группы хроническая ишемия мозга часто развивается на фоне сахарного диабета (СД) второго типа, который является одним из наиболее распространенных заболеваний во всем мире. Число больных СД стремительно растет: в 2009 году насчитывалось 246 млн. человек во всем мире. По прогнозам экспертов ВОЗ к 2025 году общее число больных может достичь 380 миллионов человек (Дедов И. И., Шестакова М.В., 2003; 2004; Майоров А.Ю, Суркова Е.В., 2008).

По данным многих исследований, СД признан независимым фактором риска развития ишемического инсульта, транзиторных ишемических атак, сосудистой деменции (Суслина З.А., Федорова Т.Н., Максимова М.Ю. , 2003; Гусев Е.И., Скворцова В.И., Стаховская JI.B., 2003).

Синтез и метаболизм GSH изменяется при сахарном диабете. Увеличение активных форм кислорода в условиях гипергликемии приводит к разрушению ß-клеток (Kaneto и др., 2007). Установлено снижение концентрации GSH в эритроцитах и плазме крови пациентов с сахарным диабетом, что связано с

увеличением активных форм кислорода (Yoshida и др., 1995; Sharma et al., 2000; Giral и др., 2008). Причины усиления свободнорадикального окисления при СД 2 типа многочисленны, важнейшими из них являются гипергликемия, гликирование белков и активация сорбитолового пути (Esposito К., Giugliano

D., 2002; Maritim A.C., et al. 2003; Dave G., Kalia K., 2007). В ряде исследований показана роль GSH и ферментов его метаболизма в защите клеток в условиях окислительного стресса при сахарном диабете. Доказано уменьшение уровня GSH и активности ГПО, ГР в эритроцитах у пациентов с декомпенсированным сахарным диабетом, что говорит о снижении антиоксидантной защиты в условиях хронической гипергликемии (Dincer Y., et al., 2002).

При сочетании ХИМ и сахарного диабета, нарушается баланс в системе оксиданты/антиоксиданты. В работах Adams Н.Р. и соавт. (1987;1988) отмечено, что тяжесть неврологического дефицита не коррелирует с содержанием глюкозы в крови. Вместе с тем гипергликемия ухудшает последствия церебральной гипоксии/ишемии, что отчасти объясняет более тяжелый прогноз сосудистых заболеваний головного мозга у больных СД. Установлено, что эффективным методом лечения пациентов с хронической недостаточностью мозгового кровообращения и сахарным диабетом второго типа является назначение нейроцитопротекторов, которые предотвращают развитие тяжелых и необратимых повреждений нейронов и ß-клеток ( (Гусев

E.И. Скворцова В.И., 2001; Сивоус Г.И., 2004; Чуканова Е.И., 2004; Plum F., 2004; Laczy В., et al., 2009; Ulusu N.N.,et al., 2010).

На существенный вклад свободнорадикальных процессов в патогенезе ХИМ и СД 2 типа указывает ряд недавних исследований, что повышение антиоксидантного статуса приводит к снижению риска их развития (Скоромец A.A., и соавт. 2005; Яхно H.H., и соавт. 2005; Laczy В., et al., 2009; Ulusu N.N.,et al., 2010). В связи с тем, что снижение уровня глутатиона и антиоксидантных ферментов является одним из ведущих факторов в развитии процессов хронической церебральной ишемии и сахарного диабета второго типа, но и

/1 i ..._____ ___ 1--Т- лллш с_______>-_ ____________________ ___________

и ia[JCtlfl>l ^IVlctlbLLltmUttcl I^.U., ¿ии о/, иильшип DDUDlDdnjl lipwuapaiDi,

которые могут повышать содержание глутатиона и активировать работу ферментов его метаболизма. В связи с этим актуальным является исследование влияния на показатели системы глутатиона препаратов используемых в терапии пожилых больных хронической церебральной ишемией и сахарным диабетом второго типа.

Цель исследования

Изучить показатели системы глутатиона в эритроцитах и плазме крови больных старшей возрастной группы хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа и влияние на них фенотропила и милдроната.

Задачи исследования

1. Исследовать состояние системы глутатиона в эритроцитах и плазме у больных хронической ишемией мозга.

2. Определить характер и выраженность изменений системы глутатиона в эритроцитах и плазме у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа.

3. Установить изменения показателей системы глутатиона у больных хронической церебральной ишемией и сахарным диабетом второго типа в зависимости от степени тяжести сахарного диабета.

4. Выявить изменения в системе глутатиона у больных хронической ишемией мозга на фоне лечения фенотропилом.

5. Оценить влияние фенотропила и милдроната на показатели системы глутатиона у больных старшей возрастной группы с хронической церебральной ишемией и сахарным диабетом 2 типа.

Научная новизна

Впервые проведено комплексное исследование системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа у больных старшей возрастной группы. Установлены изменения в системе глутатиона у больных хронической ишемией мозга, которые проявляются в снижении активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, увеличением активности глутатионтрансферазы и глутатионредуктазы в плазме и глутатионтрансферазы в эритроцитах. Установлены изменения в системе глутатиона у больных сахарным диабетом 2 типа, обусловленные степенью тяжести заболевания. Для сахарного диабета 2 типа легкой степени характерно снижение концентрации ОБН и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, повышение активности глутатионредуктазы в плазме. При сахарном диабете 2 типа средней степени тяжести дополнительно отмечено снижение активности глутатионтрансферазы в эрироцитах. Новыми являются данные о влиянии фенотропила на систему глутатиона у больных хронической ишемией мозга, которая проявлялась: в нормализации уровня глутатиона в эритроцитах, повышении глутатионтрансферазной активности в эритроцитах и глутатионредуктазной - в плазме. Впервые показано воздействие фенотропила на показатели системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сопутствующим сахарным диабетом второго типа у пациентов старшей возрастной группы. Установлена эффективность воздействия на систему вБН фенотропилом при хронической церебральной ишемии и сахарном диабете легкой и средней степени тяжести. Новыми являются данные о влиянии милдроната на систему глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести: нормализует все показатели системы глутатиона в эритроцитах.

Научно-практическая значимость работы

представления о системе глутатиона и активности ферментов метаболизма глутатиона (глутатиопероксидазы, глутатионтрансферазы, глутатионредуктазы) в эритроцитах и плазме крови больных хронической церебральной ишемией и сопутствующим сахарным диабетом 2 типа. Применение фенотропила в лечении пожилых больных с ХИМ и СД 2 типа легкой и средней степени тяжести положительно влияет на систему глутатиона. Милдронат приводит к нормализации антиоксидантного глутатионового статуса у больных ХИМ и СД 2 типа средней степени тяжести, старшей возрастной группы. Полученные данные могут применяться в качестве критериев ответа на проводимую терапию фенотропилом и милдронатом у больных ХИМ и СД 2 типа старшей возрастной группы.

Внедрение результатов в практику

Рекомендации, разработанные на основании полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе в Иркутском государственном институте усовершенствования врачей на кафедре клинической фармакологии; в Клиническом госпитале ветеранов войн г. Иркутска; Иркутском государственном медицинском университете на кафедрах нервных болезней и химии.

В процессе выполнения диссертационного исследования подана заявка на изобретение «Способ прогнозирования эффективности лечения милдронатом больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа», получена приоритетная справка №2010110403/14 от 18.03.2010 года.

Положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая церебральная ишемия вызывает изменения системы ОБН: снижение концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, увеличение активности

ГЛуТаТмОНТраНСфсрЯЗЫ м ГЛуТ«ТПС1»рСДу ¡СТиЗЫ И ПЛ«ЗМе !! глутатионтрансферазы в эритроцитах.

2. Наличие сахарного диабета 2 типа приводит к снижению концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, повышению концентрации глутатиона и активности глутатионредуктазы в плазме. Выявлена зависимость изменений в системе глутатиона от степени тяжести сахарного диабета.

3. Применение фенотропила у больных хронической ишемией мозга приводит к нормализации концентрации ОБН в эритроцитах, повышению активности ГТ в эритроцитах и ГР в плазме.

4. Фенотропил активирует метаболизм глутатиона, нормализует антиоксидантную защиту при сочетанной патологии (хроническая ишемия мозга и сахарный диабет 2 типа) что проявляется в нормализации концентрации вЗН и активности ГПО в эритроцитах и в плазме, при сохранении повышенной активности ГТ и ГР в плазме.

5. Применение милдроната эффективно при лечении больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести, старшей возрастной группы. Милдронат нормализует все показатели в эритроцитах, сохраняется повышение концентрации вБН и активности ГР в плазме.

Апробация работы

Материалы диссертации представлены и обсуждены на проблемной комиссии Иркутского государственного медицинского университета; на I Всероссийском конгрессе молодых ученых в области медицины и биологии по итогам конкурса «Свет знаний во имя здоровья человека» г. Москва (2009); на региональной конференции «Медицина в Кузбассе» г. Кемерово (2009); на ассоциации клинических фармакологов и биохимиков г. Иркутска (2009; 2010).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, изданных в отечественной печати. Из них 2 работы опубликованы в изданиях, рекомендованных ВАК.

Конкретное личное участие автора в получении результатов

Автором лично проведен поиск и анализ литературы по проблеме диссертации, набор больных, организация обследования пациентов, формирование базы данных и их статистическая обработка, анализ результатов, оформление работы, написание статей и диссертации. Исследование концентрации СБН и активности ГПО, ГТ и ГР, проводилось совместно с сотрудниками кафедры биоорганической и бионеорганической химии.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 131 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы содержит 300 источников, из которых 186 - иностранных авторов. Работа иллюстрирована 23 таблицами и 16 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Работа выполнена на базе кафедры химии ГОУ ВПО «Иркутский государственный медицинский университет» и на кафедре клинической фармакологии ГОУ ДПО «Иркутский государственный институт усовершенствования врачей» с 2007-2010гг. Под наблюдением находилось 139 человек пожилого и старческого возраста, находившихся на стационарном лечении в Иркутском госпитале ветеранов войн. Из них в группу исследования вошли 102 пациента, страдающих хронической ишемией мозга. Группу клинического сравнения составили 37 человек без

проявлений цереброваскулярной патологии и нарушений углеводного обмена, сопоставимого возраста. Средний возраст пациентов - 75,1±4,2 лет.

При выполнении клинического этапа работы проводилось комплексное клиническое обследование больных. Тщательно изучались жалобы, анамнез заболевания и жизни больного, медицинская документация амбулаторного периода наблюдения, данные объективного статуса при поступлении в лечебное учреждение и в динамике. Больным проводилось клинико-лабораторное и функциональное обследование, включающее: осмотр, общеклинический минимум. Все больные консультировались неврологом, эндокринологом, по показаниям - другими специалистами. У всех больных были диагностированы I и II стадии хронической ишемии мозга и сахарный диабет 2 типа, легкой и средней степени тяжести. Фоновая терапия была стандартизирована на госпитальном этапе.

Больные с хронической ишемией мозга (102 человека) состояли из пациентов, имеющих I и II стадии хронической ишемии мозга. Из них, 54 пациента с хронической ишемией мозга без сопутствующего сахарного диабета, из которых 16 пациентам оценивали изменения системы глутатиона на фоне применения фенотропила (100 мг/сутки в течение 21 дня).

48 человек имели в качестве сопутствующего заболевания сахарный диабет 2 типа. У больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа в качестве средств фармакологического влияния использовали фенотропил и милдронат. Первый препарат применяли по 100 мг/сутки; второй - по 500 мг/сутки в течение 21 дня.

48 больных с хронической церебральной ишемией и сопутствующим СД 2 типа были разделены на 2 группы: первая, 22 человека, получала лечение фенотропилом, вторая, 26 человек - милдронатом. Из 22 человек первой группы было выделено две подгруппы пациентов в зависимости от степени тяжести сахарного диабета. В первую подгруппу вошли 15 иациснюь с сахаркыг»: д;;а5етс:.: 2 т:;па, легкой стрпрни тяжести. Ко второй подгруппе отнесены 7 больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести. Пациенты с СД 2 типа, легкой степени находились только на диете, лечение сахароснижающими препаратами не получали. Лечение пациентов с сахарным диабетом 2 типа, средней степени тяжести проводилось с использованием сахароснижающих препаратов (группа

сульфонилмочевины, бигуанида).

Из 26 человек 2 группы было выделено две подгруппы в зависимости от степени тяжести сахарного диабета. В первую подгруппу вошли 9 пациентов с сахарным диабетом 2 типа, легкой степени тяжести. Ко второй подгруппе были отнесены 17 больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести. Больные с сахарным диабетом находились в состоянии компенсации (НЬА1с <7%), со средней степенью тяжести диабета получали терапию согласно Федеральному стандарту ведения пациентов с этой патологией.

У всех больных, участвовавших в клиническом исследовании, оценивалась динамика показателей концентрации GSH и ферментов его метаболизма на фоне проводимой фармакотерапии.

Для определения концентрации восстановленного GSH и активности глутатионзависимых ферментов (ГТ-глутатионтрансфераза, ГР-глутатионредуктаза, ГПО-глутатионпероксидаза) исследовалась венозная кровь: при поступлении больных в стационар (до начала лечения) и при выписке из стационара (после лечения) через 21 день.

С целью изучения активности ферментов метаболизма глутатиона, забор венозной крови проводился строго утром натощак.

Кровь с гепарином (6,5-7,5 мл) в центрифужной пробирке, в течение 10 минут центрифугировали при 6000 об/мин в холодильнике. Центрифугирование проводилось на каждом этапе исследования в течение 10 минут на холоде со скоростью 6000 об/мин.

После отделения плазмы, эритроциты дважды промывали холодным физиологическим раствором, затем гемолизировали холодной дистиллированной водой в соотношении 1:3. Полученный при этом гемолизат разводили в 50 раз холодной дистиллированной водой для приготовления рабочего раствора.

Определение концентрации глутатиона проводилось по методу Anderson М.Е.(1989) с реактивом Элмана.

Активность ферментов исследовали стандартными

спектрофотометрическими методами. Активность ГПО определяли по методу Flohe L. (1989), используя в качестве субстратов восстановленный глутатион и третбутилгидропероксид. Активность ГР определяли по методу Mannervik В. (1989). Уровень активности ГТ определяли по методу Habig N.H. et al. (1974).

Активность всех ферментов пересчитывали на концентрацию белка в пробе (Б). Концентрацию белка оценивали на фотометре КФК-3 при

Х=600 нм по методу Lowry О.Н. et al. (1951) в модификации Ohnishi S.T., Barr G.R., (1978). В предварительно разведенные пробы супернатанта добавляли по 4 мл реактива BS-7 и 200 мкл реактива Фолина.

Расчет активности фермента производился по формуле:

AE_V. ,10 нмоль/мин на 1мг белка Б-М

Где:

ДЕ - изменение экстинкции за 1 минуту;

V - объем кюветы (2 мл для ГР и ГТ, 1 мл для ГПО);

Б - концентрация белка в пробе;

М - коэффициент молярной экстинкции (М=6,22-10* для ГПО, ГР; М=9,60-10" для ГТ).

Статистическая обработка результатов проводились при помощи пакета прикладных программ «8ТА5Т1СА 6.0» и включала расчет средних значений, средне-квадратичного отклонения, ошибки средних величин показателей, критерии нормальности распределения (асимметрия, эксцесс).

Для определения значимости различий изучаемых показателей в исследуемых группах использовались параметрические ^-критерий Стьюдента для зависимых и независимых выборок) и непараметрические критерии (и-критерий Манна-Уитни для независимых выборок и критерий парных сравнений \\'-Вилкоксона для зависимых) в соответствии с характером распределения показателей и объемы выборки.

Исследования проведены с учетом рекомендаций Хельсинкской декларации (Хельсинки, 1964, 2000), с одобрения Локального Этического Комитета при наличии подписанного информированного согласия пациента, в период с 2007-2010 годы.

Результаты исследования и их обсуждение

Концентрация восстановленного глутатиона (СБН) была изучена у 37 человек, входящих в состав группы контроля. В контрольной группе практически здоровых лиц данная концентрация в эритроцитах была значительно выше, чем в плазме (в 105 раз). Различие в показателях содержания ОБН в эритроцитах и плазме свидетельствует о том, что он относится к внутриклеточным компонентам с высокой функциональной активностью. В свою очередь, концентрация в8Н в плазме может косвенно отражать процессы, протекающие в тканях и клетках в норме и при патологических состояниях.

В результате проведенного нами исследования установлен дисбаланс в системе глутатиона как у больных ХИМ без сопутствующего сахарного диабета, так и у больных с ХИМ и СД, а также то, что лекарственные препараты влияют на систему глутатиона.

В группе больных с хронической церебральной ишемией выявлено снижение концентрации в эритроцитах (р<0,05) на 19% относительно показателей контрольной группы. При сравнительном анализе активности ферментов ОБН выявлено снижение активности ГПО у пациентов ХИМ в эритроцитах на 26%, в плазме на 24% (р<0,05), повышение активности ГТ в эритроцитах на 136%, плазме на 48% (р<0,01) и активности ГР в плазме на 66% (р<0,05) (таблица 1).

На фоне снижения концентрации вБН и активности ГПО - важного антиоксидантного фермента, обнаружено повышение активности ГТ, что является благоприятным фактором, поскольку он обладает выраженной антиоксидантной функцией и может противодействовать развитию тяжелого окислительного стресса.

Известно, что при ХИМ нарушается равновесие в системе оксиданты/антиоксиданты. Головной мозг особо чувствителен к гиперпродукции свободных радикалов и к так называемому окислительному стрессу. Положительное воздействие препаратов из группы антиоксидантов и

нейропротекторов при ХИМ известно, однако влияние фенотропила на систему глутатиона не изучалось. Нами установлено, что после 21-го дня лечения фенотропилом произошла нормализация концентрации вБН в эритроцитах.

Таблица 1

Показатели концентрации вБН и активности ферментов его метаболизма в эритроцитах и плазме больных хронической ишемией мозга

Показатель Группа Контроля (п=37) Больные ХИМ (п=54)

Концентрация вБН в5Н эритроцитов (ммоль/л) 2,27±0,20 1,84±0,07*

вБН плазмы (мкмоль/л) 21,7± 3,20 28,0±2,15

Активность ферментов метаболизма (нмоль/мин на 1 мг белка) ГПО эритроциты 23,7±2,23 17,6±0,81*

ГПО плазма 2,50±0,22 1,90±0,08*

ГТ эритроциты 4,00±0,28 9,25±0,44*

ГТ плазма 1,09±0,01 1,61±0,10**

ГР эритроциты 2,50±0,20 2,83±0,25

ГР плазма 0,36±0,02 0,53±0,05*

Примечание: п- число наблюдений; значимость различий: *- р<0,05; ** -р<0,01 - по отношению к показателям группы контроля.

Нормализация йБН в эритроцитах на фоне применения фенотропила, может свидетельствовать о его антиоксидантном действии. Фенотропил, вероятно индуцирует ферменты синтеза глутатиона.

Очевидно, что снижение концентрации вБН в эритроцитах может выступать критерием обоснованности назначения фенотропила, а повышение данного показателя - служить критерием эффективности назначенной терапии воздействия на антиоксидантную активность системы ОБН.

При изучении системы вБН у больных ХИМ и СД 2 типа выявлено: снижение концентрации С8Н в эритроцитах на 36% (р<0,05), повышение в плазме на 80% (р<0,01), снижение активности ГПО в эритроцитах на 37% (р<0,01) и повышение активности ГР в плазме на 38% (р<0,05). Данные изменения системы вБН свидетельствуют о снижении антиоксидантной защиты у больных ХИМ и СД 2 типа.

При проведении сравнительной характеристики полученных данных у больных ХИМ без сопутствующего СД 2 типа и больных ХИМ с СД 2 типа обнаружено, что, у больных с ХИМ и СД 2 типа наблюдается более резкое снижение концентрации ОБН в эритроцитах на 36% вместо 19% с одновременным повышением в5Н в плазме, одинаковое снижение активности

ГПО в эритроцитах, снижение активности ГТ в эритроцитах и плазме. Данные изменения системы 0811 безусловно свидетельствует о более выраженном нарушении антиоксидантной защиты, а, следовательно, о развитии глубокого окислительного стресса (рис. 1)

160% 140% -120% 100% -80% -60% 40% ' 20% 0% --20% -40% -60% •

ГПО эр

ГТэр ГР"эр"~

□ Больные ХИМ

□ Больные ХИМ и СД 2 типа

Примечание: значимость различий: *- р<0,05; ** - р<0,01 -по отношению к показателям группы контроля.

Рис. I. Показатели активности ферментов метаболизма глутатиона (%) в эритроцитах крови больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа и больных хронической ишемией мозга, относительно группы

контроля

Таким образом, изменения в системе глутатиона зависят от наличия сопутствующего сахарного диабета 2 типа, и более значимо изменяются при нем.

Также нами были изучены изменения системы ОЗН в зависимости от степени тяжести СД 2 типа. При СД 2 типа легкой степени выявлено: снижение концентрации вБИ в эритроцитах на 20 % (р<0,05) и повышение его в плазме на 66% (р<0,01), снижение активности ГПО в эритроцитах на 41% (р<0,05), повышение активности ГР плазмы на 69% (р<0,05).

При анализе полученных данных у больных с СД 2 типа средней степени тяжести обнаружено: снижение концентрации С8Н в эритроцитах на 42% (р<0,05) и повышение его в плазме на 76% (р<0,01), снижение активности ГПО на 34% и ГТ на 38% в эритроцитах (р<0,05), повышение активности ГР плазмы на 50% (р<0,05).

Таким образом у больных с ХИМ и СД 2 типа средней степени тяжести более выраженное снижение концентрации вБИ и снижение активности как ГПО, так и ГТ в эритроцитах, что свидетельствует о более глубоких изменениях и более выраженном окислительном стрессе.

По результатам полученных данных установлено более выраженное снижение концентрации вБИ в эритроцитах (р<0,05) у больных с ХИМ и СД 2 типа, средней степени тяжести на 42%, чем у больных ХИМ и СД 2 типа,

легкой степени на 20% (р<0,05). В плазме выявлено повышение концентрации вБН в равной степени (рис.2).

У больных обеих групп выявлено снижение активности ГПО на 41% и 37% соответственно, повышение активности ГР в плазме на 69% и 50% и только у больных ХИМ и СД 2 типа средней степени тяжести обнаружено снижение активности ГТ в эритроцитах на 38% (рис.3).

0 Больные 1 подгруппы □ Больные 2 подгруппы

Примечание: значимость различий: *- р<0,05; ** - р<0,01 - по отношению к показателям группы контроля. Рис. 2. Сравнительная характеристика концентрации вБН (%) в эритроцитах и плазме больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени и больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести

□ Больные 1 подгруппы

□ Больные 2 подгруппы

Примечание: значимость различий: *- р<0,05; ** - р<0,01 - по отношению

к показателям группы контроля. Рис.3. Сравнительная характеристика активности ферментов метаболизма глутатиона (%) в эритроцитах больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени и больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести

Таким образом, у больных с СД 2 типа, средней степени тяжести отмечается более выраженный дисбаланс системы глутатиона, что может приводить к более интенсивному накоплению продуктов пероксидации обусловленным метаболическими сдвигами.

Коррекция изменений системы глутатиона у больных хронической

ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа фенотропилом

В исследовании использовался препарат Фенотропил® - компании производителя «Валента фармацевтика», Россия.

Влияние фенотропила на систему вБН изучали у 22 больных, 15 из них страдали хронической ишемией мозга и СД 2 типа легкой степени тяжести; 7 -хронической ишемией мозга и СД 2 типа средней степени тяжести. Препарат использовался в таблетированном виде по 100 мг 1 раз в день на протяжении трех недель.

При изучении влияния фенотропила на состояние системы ОБН у больных ХИМ и СД 2 типа, установлено: нормализация концентрации вБИ и активности ГПО в эритроцитах и в плазме, остается повышение активности ГР в плазме и снижение активности ГТ в плазме.

Выявлено, что у больных ХИМ и СД 2 типа, легкой степени тяжести на фоне лечения фенотропилом нормализуется активность ГПО в эритроцитах, увеличивается концентрация вБИ плазмы на 61% (р<0,05), увеличивается активность ГР в эритроцитах на 48% (р<0,05) и в плазме на 239% (р<0,01) (рис. 4).

С5Н >|>

.ГПО эр

гт >р

ГР >р

-Групп.» контроля

А.. • р<0,0£; р-0,01 - р>0.0?

--А- Больные ХИМ н СД? типа летком степени до лечения —о—Больные ХНМи СД? |ми.) легкой степени после лечения

Рис. 4. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона в эритроцитах и плазме крови (%) у больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени тяжести до и после лечения фенотропилом, относительно группы контроля (100%)

Таким образом, применение фенотропила у больных ХИМ и СД 2 типа легкой степени тяжести оказывает антиоксидантное действие за счет нормализации ГПО и повышения активности ГР в эритроцитах, которые

необходимы для поддержания концентрации СБН путем восстановления его из

При изучении данных показателей системы глутатиона у больных ХИМ и СД 2 типа, средней степени тяжести на фоне лечения фенотропилом обнаружено: нормализация концентрации вБИ в эритроцитах и в плазме, активности ГПО в эритроцитах, что свидетельствует о хорошем атиоксидантном эффекте препарата, так как ГПО является одним из основных ферментов антиоксидантной защиты от отрицательного воздействия липоперекисных соединений (рис. 5).

05 Н Э|)

— Группа контроля

А,« -ре0,0£;р<0,01

А.О - р»0,05

■-Д-- Больные ХИМ и

СД } Ч1П.1

средней с (епенм

до печения

— Больные ХИМн

СД 2 ним

средней сюпенн

после лечення

Рис. 5. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона в эритроцитах и плазме крови (%), у больных с хронической ишемией мозга и

сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести до и после лечения фенотропилом, относительно группы контроля (100%)

Таким образом, применение препарата фенотропил приводит к нормализации показателей системы глутатиона у пациентов в обеих подгруппах (ХИМ и СД 2 тип, легкой степени тяжести; ХИМ и СД 2 тип, средней степени тяжести).

С одной стороны известно, что препарат фенотропил повышает концентрацию норадреналина, дофамина и серотонина в мозге, а с другой стороны норадреналин активирует ГПО, ГТ. Таким образом, мы предполагаем, что эффект фенотропила на систему глутатиона реализуется через норадреналин.

Коррекция изменений системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа милдронатом

В исследовании использовался препарат Милдронат® - компании производителя «Оппс1ех», Латвия.

Влияние милдроната на систему вБН изучали у 26 больных, из них 9 человек с хронической церебральной ишемией и СД 2 типа легкой степени

тяжести, 17 пациентов с хронической церебральной ишемией и СД 2 типа средней степени тяжести.

При изучении влияния милдроната на систему глутатионау больных ХИМ и СД 2 типа установлено: нормализация концентрации С8Н и активности ГПО в эритроцитах (р<0,05), снижение активности ГТ на 29% и ГР на 20% (р<0,05) в эритроцитах после лечения милдронатом.

Также, нами было изучено влияние милдроната на состояние системы глутатиона у больных ХИМ и СД 2 типа, в зависимости от степени тяжести диабета. Так, у больных ХИМ и СД 2 типа легкой степени тяжести на фоне лечения милдронатом выявлено: нормализация уровня вБН в эритроцитах, на фоне нормализации активности ГПО снижение активности ГТ на 44% и ГР на 30% в эритроцитах (р<0,05), сохранение повышения активности ГР в плазме. Значимых изменений компонентов плазмы не установлено. Мы предполагаем, что при легкой степени диабета, которая характеризуется исходно нормальной активностью ГПО и ГТ, снижение активности ГТ на фоне лечения может быть результатом репрессии (рис. 6).

схн >|>

.ГПО 5|>

гт »р

-Группа контроля

р<0,05; р=0,01

, О -

д Больные ХНМи С Д2 типа легкой степени до лечения о—Больные ХПМи СД2 типа легкой с гепеяп после лечения

Рис.6. Сравнительная характеристика показателей системы вБИ в эритроцитах и плазме крови (%) больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени до и после лечения милдронатом, относительно группы контроля (100%)

При анализе данных в группе больных ХИМ и СД 2 тип средней степени тяжести на фоне лечения милдронатом обнаружено: нормализация концентрации С8Н в эритроцитах, нормализация сниженных активностей ГПО и ГТ эритроцитов и повышение активности ГР в плазме на 142%.

Таким образом, можно предположить, что препарат Милдронат при выраженном нарушении антиоксидантного статуса: снижение активности ГТ, ГПО и концентрации 05Н в эритроцитах приводит к нормализации

всех показателей, и следовательно показан при лечении больных ХИМ и СД 2 типа, особенно, средней степени тяжести.

«н »р

-Группа контроля

д., р<0,05; р<0,01 Л, О" Р'О-115

■■ д- Больные ХПМн

—о—Больные ХНМп

СД2 Ч1П.1 средней степенн до лечения

СД? типа средней степенн после лечения

вЗН пл

Рис.7. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона в эритроцитах и плазме крови (%) больных с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести до и после лечения милдронатом, относительно группы контроля (100%)

Милдронат является конкурентным ингибитором гамма-бутиробетаингидролазы, уменьшает концентрацию карнитина, как следствие увеличивается гаммабутиробетаин, который вызывает индукцию биосинтеза N0, как следствие вазодилятация и уменьшение агрегации тромбоцитов. Улучшение кровообращения в очаге ишемии, активирует аэробные процессы в клетке, аэробный гликолиз и стимулирует работу пентозо-фосфатного пути с увеличением выработки НАДФН и пентозы, как следствие увеличение синтез нуклеиновых кислот и ферментов глутатиона ГПО, ГТ, ГР. Так же мы предполагаем, что милдронат может индуцировать или репрессировать работу ферментов метаболизма глутатиона. При исходно нормальной активности ферментов милдронат берет на себя часть функций ГТ, тем самым оказывает антиоксидантное действие. При низкой активности ГТ и ГПО, милдронат самостоятельно не справляется, работает сопряжено с ферментами метаболизма глутатиона повышая их активность.

Результаты нашей работы свидетельствуют о важной роли глутатион-зависимых процессов в антиоксидантном действии препаратов фенотропила и милдроната у пациентов старшей возрастной группы с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа.

ВЫВОДЫ:

1. У пациентов старшей возрастной группы с хронической церебральной ишемией биохимические изменения проявляются развитием адаптивного антиоксидантного ответа, что выражается в снижении концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, увеличением активности глутатионтрансферазы и глутатионредуктазы в плазме и глутатионтрансферазы в эритроцитах.

2. Сочетание хронической церебральной ишемии с сахарным диабетом второго типа сопровождается снижением концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, повышением концентрации глутатиона и активности глутатионредуктазы в плазме. Нарушения антиоксидантной системы более выражены в отличие от больных хронической ишемией мозга без сопутствующего сахарного диабета второго типа.

3. При сахарном диабете легкой и средней степени тяжести установлено снижение концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, повышение активности глутатионредуктазы в плазме, и только при средней степени диабета снижена активность глутатионтрансферазы в эритроцитах. Таким образом, у больных сахарным диабетом 2 типа, средней степени тяжести отмечается более выраженное истощение запасов глутатиона и снижение активности глутатионпероксидазы и глутатионтрансферазы в эритроцитах.

4. Терапия фенотропилом больных старшей возрастной группы с хронической ишемией мозга приводит к нормализации концентрации глутатиона и резкому повышению активности глутатионтрансферазы при сохраняющейся низкой активности глутатионпероксидазы в эритроцитах.

5. Коррекция системы глутатиона фенотропилом при сочетании хронической церебральной ишемии с сахарным диабетом второго типа приводит к нормализации концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах и в плазме, при отсутствии влияния на активность глутатионтрансферазы и глутатионредуктазы в плазме. Таким образом, лечение фенотропилом показано при хронической церебральной ишемии и сахарном диабете легкой и средней степени тяжести у пациентов старшей возрастной группы.

6. Применение препарата милдронат в лечении больных пожилого возраста с хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа средней степени тяжести приводит к росту антиоксидантного статуса эритроцитов, что проявляется в нормализации внутриклеточного содержания глутатиона, активности глутатионпероксидазы, глутатионтрансферазы, глутатионредуктазы и сохранении повышенной концентрации глутатиона и активности глутатионредуктазы в плазме.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки состояния больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа необходимо исследовать показатели системы глутатиона с целью определения эндогенного антиоксидантного статуса организма.

2. При лечении фенотропилом больных хронической ишемией мозга, целесообразно определять исходную концентрацию вБИ в эритроцитах с целью прогнозирования эффективности лечения

3. Прогностически значимыми показателями при лечении больных хронической ишемией мозга и сопутствующим сахарным диабетом являются: концентрация вБИ и активность глутатионпероксидазы, позволяющие прогнозировать результат фармакологической коррекции милдронатом и фенотропилом.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГПО - глутатионпероксидаза

ГР - глутатионредуктаза

ГТ - глутатионтрансфераза

СД - сахарный диабет

ХИМ - хроническая ишемия мозга

вЗН - восстановленный глутатион

НЬА1с - гликированный гемоглобин

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАНЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Верлан Н.В., Кулинский В.И., Колесниченко Л.С., Лемешко Е.Х. Изучение эффективности и безопасности применения Фенотропила® у больных дисциркуляторной энцефалопатией средней степени тяжести // Тез. докл. I Всероссийского конгресса молодых ученых в области медицины и биологии по итогам конкурса «Свет знаний во имя здоровья человека». Москва, 2009. С.34-35.

2. Верлан Н.В., Лемешко Е.Х. Проблемы безопасности фармакотерапии у пациентов старших возрастных групп // Медицина в Кузбассе, 2009. Спецвыпуск №6. С. 33-34.

3. Верлан Н.В., Лемешко Е.Х. Вопросы клинико-экономической оценки фармакотерапии при оказании медицинской помощи пациентам из контингента особого внимания к пожилым больным // Медицина в Кузбассе, 2009. Спецвыпуск №6. С. 7.

4. Верлан Н.В., Колесниченко Л.С., Лемешко Е.Х. [и др.] Свободно-радикальные процессы и их коррекция у пациентов с полиморбидным состоянием // Медицина в Кузбассе, 2009. Спецвыпуск №6. С. 33.

5. Лемешко Е.Х., Верлан Н.В., Колесниченко Л.С. [и др.] Свободно-радикальные процессы и их коррекция у больных ишемией головного мозга с сочетанной патологией // Тез. докл. IV науч.-практ. конференции с международным участием. Новосибирск, 2009. С. 128.

6. Верлан Н.В., Бессонова Л.О., Лемешко Е.Х. [и др.] Значение системы глутатиона в восстановительной терапии при хронической церебральной ишемии у пациентов с полиморбидным состоянием // Тез. докл. Всероссийской науч.-практ. конференции «Перспективы развития восстановительной медицины в сибирском регионе». Белокуриха, 2009. С. 53.

7. Лемешко Е.Х. Фармакологическая коррекция изменений системы глутатиона у больных дисциркуляторной энцефалопатией и сахарным диабетом второго типа // Тез. докл. XV Всероссийской науч.-практ. конференции «Молодые ученые в медицине». Казань, 2010. С. 235.

8. Лемешко Е.Х., Верлан Н.В., Колесниченко Л.С. [и др.] Изучение эффективности и безопасности применения Фенотропила® у больных старшей возрастной группы с хронической ишемией мозга // Тез. докл. XVII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». Москва, 2010. С. 167.

9. Лемешко Е.Х. Фармакологическая коррекция изменений системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа // Тез. докл. Всероссийской науч.-практ. конференции с международным участием, посвященной 1000-летию г. Ярославля Ярославль, 2010. С. 354.

10. Колесниченко Л.С., Лемешко Е.Х., Верлан Н.В. [и др.] Фармакологическая коррекция изменений системы глутатиона у больных с

хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа // Якутский медицинский журнал. 2010. Т. 30, №2. С. 42-44.

11. Лемешко Е.Х., Колесниченко Л.С., Верлан Н.В. [и др.] Система глутатиона и ее коррекция у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом второго типа легкой и средней степени тяжести // Сибирский медицинский журнал. 2010. №7. С. 26-28.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Лемешко, Елена Халимовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Анализ состояния и значения системы глутатиона в организме.

1.1.1. Глутатион.

1.1.2. Глутатионпероксидаза.

1.1.3. Глутатионредуктаза.

1.1.4. Глутатионтрансфераза.

1.2 Ишемия головного мозга и система глутатиона.

1.3. Сахарный диабет и система глутатиона.

1.4. Фармакологические эффекты препарата фенотропил®.

1.5. Фармакологические эффекты препарата милдронат.

Глава 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ.

ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА.

2.1. Характеристика больных.

2.2. Методы исследования.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Показатели системы глутатиона в плазме и эритроцитах у пациентов группы контроля

3.2. Состояние системы глутатиона у больных с хронической ишемией мозга.

3.3. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга до и после фармакологической коррекции фенотропилом.

3.4. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа.

3.5. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа и хронической ишемией мозга без сопутствующего сахарного диабета.

3.6. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой и средней степени тяжести.

3.7. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа, до и после лечения фенотропилом.

3.7.1. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени тяжести до и после лечения фенотропилом

3.7.2. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести до и после лечения фенотропилом

3.7.3. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа, легкой и средней степени тяжести до и после лечения фенотропилом.

3.8. Состояние системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа до и после лечения милдронатом.

3.8.1. Фармакологическая коррекция показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа милдронатом.

3.8.2. Фармакологическая коррекция показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа легкой степени тяжести милдронатом.

3.8.3.Фармакологическая коррекция милдронатом показателей системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести.

3.8.4. Сравнительная характеристика показателей системы глутатиона у больных 1 хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа, легкой и средней степени тяжести до и после лечения милдронатом.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изменение системы глутатиона при различных вариантах церебральной ишемии и возможные способы ее коррекции"

Актуальность работы. Цереброваскулярные заболевания являются одной из основных проблем современной медицины. Известно, что в последние годы среди сосудистых болезней мозга отмечается увеличение ишемических форм. Это обусловлено повышением удельного веса артериальной гипертензии и атеросклероза как основной причины цереброваскулярной патологии (Дамулин И.В., 2005; Локшина А.Б., 2005; Федин А.И., Ермошкина Н.Ю., Солдатов М.А., 2007; Путилина М.В., 2009).

Хроническая ишемия мозга - наиболее частая форма цереброваскулярных заболеваний. В нашей стране в настоящее время зарегистрировано 3 млн. больных цереброваскулярными заболеваниями, в течение последних 10 лет распространенность данной патологии увеличилась в 2 раза (Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2000; 2001; 2003; Верещагина Н.В., Пирадова М.А., Суслина З.А., 2002; Румянцева С.А. и соавт., 2007).

С учетом прогрессирующего старения населения планеты эта проблема обещает оставаться актуальной и в будущем. Сосудистые поражения головного мозга в мире занимают 3-е место в структуре общей смертности, составляя при этом 11,3 % и уступая по частоте в группе сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний (Sarti С. et al., 2002).

Головной мозг восприимчив к окислительному стрессу, из-за его высокой потребности в кислороде. Система GSH необходима для защиты мозга в условиях окислительного стресса (Колесниченко JI.C., 2007; Janaky R. et al., 1999; 2007; Dringen R. et al., 2000; Dringen R., Pawlowsky P.G., Hirrlinger J., 2005; Levonen A.L. et al., 2007). У пациентов старшей возрастной группы ХИМ развивается на фоне таких состояний как гипертоническая болезнь, атеросклеротическое поражение магистральных сосудов шеи и головы, ИБС и инфаркт миокарда, мерцательная аритмия, в том числе и сахарный диабет.

Сахарный диабет - одно из наиболее распространенных хронических заболеваний во всем мире. Число больных стремительно растет: в 2009 году насчитывалось 246 млн. человек во всем мире. По прогнозам экспертов ВОЗ к 2025 году общее число больных может достичь 380 миллионов человек (Дедов И.И., Шестакова М.В., 2003; 2004; Майоров А.Ю., Суркова Е.В., 2008).

Среди больных СД риск развития мозговых инсультов в 4-7 раз выше, чем среди лиц без СД (Гусев Е.И., Скворцова В.И., Стаховская JI.B., 2003). В связи с высоким риском развития сосудистых осложнений, которые приводят к ранней инвалидизации и преждевременной смерти, СД 2 типа в скором будущем может стать главной проблемой здравоохранения во всех странах мира (Дедов И.И., Шестакова М.В., 2003; Дедов И.И., 2004; Майоров А.Ю., Суркова Е.В., 2008).

При СД 2 типа страдают все виды обмена веществ. Возникают аутоиммунные процессы, активируются реакции перекисного окисления липидов (Балаболкин М.И., Креминская В.М., Клебанова Е.М., 2004; 2008; Комбанцев Е.А., 2007). За последние годы проведено много крупных исследований, с позиций доказательной медицины получены новые данные, которые подтверждают возможность значительного снижения риска возникновения сосудистых заболеваний головного мозга у больных с СД, разработаны целевые уровни показателей гликемии, артериального давления, липидов крови, которых следует достигать при проведении терапии больных с СД (Аметов A.C., Карпова Е.В., 2007; Аметов A.C., 2008; Nathan D.M. et al., 2006; 2008; 2009).

Несмотря» на большое количество работ в данной отрасли, многие вопросы все еще до конца не ясны. Недостаточно изученными остаются вопросы метаболических изменений при развитии хронических нарушений мозгового кровообращения и сахарного диабета второго типа, а так же возможные способы их коррекции (Лобов М.А., Котов C.B., Рудакова И.Г. и соавт., 2003; Эниня Г.И. и соавт., 2008).,

Ответы на эти вопросы позволят расширить представление о патогенезе развития хронической ишемии мозга на фоне СД 2 типа и дополнить на этой основе лечебно-профилактические мероприятия, направленные на предотвращение развития и прогрессирования этой патологии. На данный момент доказано, что одной из основных причин развития сосудистых осложнений диабета (в том числе и хронической ишемии мозга) является гипергликемия, повреждающее действие которой реализуется через свободные радикалы кислорода (Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., 2000; Кононенко И.В., Смирнова О.М., 2005; Sivakumar S. et all., 2010). В механизмах развития СД и его поздних осложнений важная роль отводится активации процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системе (Терехина Н.А., Хоробрых О.Ю., Хоробрых Т.П., 1998; Субботина Т.Н., 2003; Антонова К.В., Недосугова Л.В., 2008; Cappiello et al., 2001; Kaneto et al., 2007; Giral et al., 2008). При сочетании ХИМ и сахарного диабета, нарушается равновесие между активностью ПОЛ и антиоксидантной защитой организма.

В связи с этим одним из перспективных методов лечения ишемии головного мозга является применение препаратов из группы антиоксидантов оказывающих нейротропное и нейропротективное действие, которое направлено на предотвращение свободно-радикальных процессов, метаболическую защиту мозга, снижение потребности его в кислороде, увеличение толерантности к гипоксии и антиоксидантное действие.

Данные о роли глутатиона при ишемии головного мозга и сахарном диабете неоднозначны и требуют дальнейшего комплексного изучения.

Таким образом, представляет интерес состояние системы глутатиона (как одного из важнейших компонентов антиоксидантной защиты организма) и возможные способы ее фармакологической коррекции при хронической ишемии мозга и сахарном диабете у пациентов старшей возрастной группы.

Цель исследования

Задачи исследования

1. Исследовать состояние системы глутатиона в эритроцитах и плазме у больных хронической ишемией мозга.

3. Установить изменения показателей системы глутатиона у больных хронической < церебральной ишемией и сахарным диабетом второго типа в зависимости от степени тяжести сахарного диабета.

4. Выявить изменения в системе глутатиона у больных хронической ишемией мозга на фоне лечения фенотропилом.

Научная новизна, Впервые проведено комплексное исследование системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа у больных старшей возрастной группы. Установлены изменения в системе глутатиона у больных хронической ишемией мозга, которые проявляются в снижении активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, увеличением активности глутатионтрансферазы и глутатионредуктазы в плазме и глутатионтрансферазы в эритроцитах. Установлены изменения в системе глутатиона у больных сахарным диабетом 2 типа, обусловленные степенью тяжести заболевания. Для сахарного диабета 2 типа легкой степени характерно снижение концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, повышение активности глутатионредуктазы в плазме. При сахарном диабете 2 типа средней степени тяжести дополнительно отмечено снижение активности глутатионтрансферазы в эрироцитах. Новыми являются данные о влиянии фенотропила на систему глутатиона у больных хронической ишемией мозга, которая проявлялась: в нормализации уровня глутатиона в эритроцитах, повышении глутатионтрансферазной активности в эритроцитах и глутатионредуктазной - в плазме. Впервые показано воздействие фенотропила на показатели системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сопутствующим сахарным диабетом второго типа у пациентов старшей возрастной группы. Установлена эффективность воздействия на систему глутатиона фенотропила при хронической церебральной ишемии и сахарном диабете легкой и средней степени тяжести. Новыми являются данные о влиянии милдроната на систему глутатиона у больных хронической ишемией мозга и сахарным диабетом 2 типа средней степени тяжести: нормализация всех показателей системы глутатиона в эритроцитах.

Научно-практическая значимость работы

Полученные в ходе диссертационного исследования данные позволяют расширить представления о состоянии системы глутатиона у больных хронической ишемией мозга. Наши результаты позволяют детализировать представления о системе глутатиона и активности ферментов метаболизма глутатиона (глутатиопероксидазы, глутатионтрансферазы, глутатионредуктазы) в эритроцитах и плазме крови больных хронической церебральной ишемией и сопутствующим сахарным диабетом 2 типа. Применение фенотропила в лечении пожилых больных с ХИМ и СД 2 типа легкой и средней степени тяжести положительно влияет на систему глутатиона. Милдронат приводит к нормализации антиоксидантного глутатионового статуса у больных ХИМ и СД 2 типа средней степени тяжести, старшей возрастной группы. Полученные данные могут применяться в качестве критериев ответа на проводимую терапию фенотропилом и милдронатом у больных ХИМ и СД 2 типа старшей возрастной группы.

Внедрение результатов в практику

Рекомендации, разработанные на основании полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе в Иркутском государственном медицинском университете на кафедрах нервных болезней и химии; Иркутском государственном институте усовершенствования врачей на кафедре клинической фармакологии; в клиническом госпитале ветеранов войн г. Иркутска.

Положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая церебральная ишемия вызывает изменения системы СБН: снижение концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в эритроцитах, увеличение активности глутатионтрансферазы и глутатионредуктазы в плазме и глутатионтрансферазы в эритроцитах.

2. Наличие сахарного диабета 2 типа приводит к снижению концентрации глутатиона и активности глутатионпероксидазы в

V эритроцитах, повышению концентрации глутатиона и активности глутатионредуктазы в плазме. Выявлена зависимость изменений в системе глутатиона от степени тяжести сахарного диабета.

4. Фенотропил активирует метаболизм глутатиона, нормализует антиоксидантную защиту при сочетанной патологии (хроническая ишемия мозга и сахарный диабет 2 типа) что проявляется в нормализации концентрации ОБН и активности ГПО в эритроцитах и в плазме, при сохранении повышенной активности ГТ и ГР в плазме.

Апробация работы

Материалы диссертации представлены и обсуждены на проблемной комиссии Иркутского государственного медицинского университета; на I всероссийском конгрессе молодых ученых в области медицины и биологии по итогам конкурса «Свет знаний во имя здоровья человека» г. Москва (2009); на региональной конференции «Медицина в Кузбассе» г. Кемерова (2009); на ассоциации клинических фармакологов и биохимиков г. Иркутска (2009; 2010).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ в отечественной печати, из них 2 работы в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы содержит 300 источников, из которых 193 - иностранных авторов. Работа иллюстрирована 23 таблицами и 16 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Лемешко, Елена Халимовна

ВЫВОДЫ:

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. При лечении фенотропилом больных хронической ишемией мозга, целесообразно определять исходную концентрацию ОБН в эритроцитах с целью прогнозирования эффективности лечения

3. Прогностически значимыми показателями при лечении больных хронической ишемией мозга и сопутствующим сахарным диабетом являются: концентрация ОБН и активность глутатионпероксидазы, позволяющие прогнозировать результат фармакологической коррекции милдронатом и фенотропилом.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Лемешко, Елена Халимовна, Новосибирск

1. Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом / Под ред. И.И. Дедова, М.В. Шестаковой. 2-е изд. М., 2006. С. 8-9.

2. Алгоритм терапии дисциркуляторной энцефалопатии у больных с артериальной гипертензией в общей врачебной практике / Дадашева М.Н. и др. // Русский Медицинский Журнал. 2009. №20. С. 1320 -1324.

3. Аметов A.C. Инсулиносекреция и инсулинорезистентность: две стороны одной медали // Проблемы эндокринологии. 2002. Т. 48, № 3. С. 31-36.

4. Аметов А С., Карпова Е.В. Сахароснижающая терапия: эффективность и безопасность // Диабет. Образ жизни. 2007. № 6. С. 82 84.

5. Аметов A.C. Современные методы терапии сахарного диабета 2 типа // Рус. мед. журн. 2008. № 3. С. 170 178.

6. Амосова E.H. Актуальные вопросы лечения больных ишемической болезнью сердца в сочетании с сахарным диабетом // Укр. мед. часопис. 2001. №3. С. 12-18.

7. Антиоксидантное действие милдроната и карнитина при лечении больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга / З.А. Суслина и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. Т. 66, №3. С. 32-35.

8. Антиоксиданты и атеросклероз: Критический анализ проблемы и направление дальнейших исследований / В.З. Ланкин и др. // Патогенез. 2004. № 1. С. 71 86.

9. Антонова К.В., Недосугова Л.В. Роль и место тиокговой кислоты в комплексной терапии сахарного диабета // Трудный пациент. 2010. № 8. С. 35 -37.

10. Ю.Ахапкина В.И. Экспериментальная и клиническая фармакология препарата фенотопил // Российский национальный конгресс "Человек и лекарство", Москва, 19-23 апр. 2004 г.: тез. докл. М., 2004. С. 70.

11. П.Ахапкина В.И., Воронина Т. А. Сравнительная характеристика ноотропной активности препарата фенотропил // Российский национальный конгресс "Человек и лекарство", Москва, 19-23 апр. 2004 г.: тез. докл. М., 2004. С. 70-71.

12. Балаболкин М.И. Диабетология. М.: Медицина, 2000. 402 с.

13. Балаболкин М.И. Инсулинорезистентность и ее значение в патогенезе нарушений углеводного обмена и сахарного диабета 2 типа // Сахарный диабет. 2002. № 1. С. 12 20.

14. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений диабета // Проблемы эндокринологии. 2000. Т. 46, № 6. С. 29-34.

15. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Возможна ли патогенетическая терапия сахарного диабета 2-го типа // Проблемы эндокринологии. 2008. Т. 54, № 5. С. 50-56.

16. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Лечение сахарного диабета и его осложнений. М.: Медицина, 2005. 512 с.

17. Балаболкин М.И., Креминская В.М., Клебанова Е.М. Роль дисфункции эндотелия и окислительного стресса в механизмах развития ангиопатий при сахарном диабете 2-го типа // Кардиология. 2004. № 7. С. 90-97.

18. Барабой В.А., Зозуля Ю.А., Сутковой Д.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга. М.: Знание М, 2000. С. 70-78.

19. Барабой В.А. Роль перекисного окисления липидов в механизме стресса // Физиологический журн. 1989. Т. 35, № 5. С. 85 97.

20. Белоусов Ю.Б., Мухина М.А. // Качественная клиническая практика. 2005. №3. С. 1.

21. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М., 1989. 186 с.

22. Бурлакова Е.Б., Храпова Н.П. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты // Успехи медицинской химии. 1985. Т. 54, №9. С. 1540- 1558.

23. Ванин А.Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях // Вестн. РАМН. 2000. № 4. С. 3-5.

24. Влияние милдроната на показатели оксидантного стресса у больных сахарным диабетом 2-го типа с диабетической периферической (сенсомоторной) нейропатией / М.Е. Стаценко и др. // Терапевтический архив. 2008. Т. 80, № 10. С. 27 30.

25. Герасимова М.М., Чичановская Л.В., Слезкина JI.A. Клинико-иммунологические аспекты влияния фенотропила на последствия церебрального инсульта // Журн. неврологии и психиатрии. 2005. № 5. С. 63-64.

26. Громова О.А., Гоголева И.В. Селен впечатляющие итоги и перспективы применения // Трудный пациент. 2007. №14. С. 13-15.

27. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М.: Медицина, 2001. 328 с.

28. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Современные представления о лечении острого церебрального инсульта // Consilium medicum. Неврология. 2000. № 2. С. 60 66.

29. Гусев Е.И., Скворцова В.И., Стаховская Л.В. Эпидемиология инсульта в России // Журнал неврологии и психиатрии. Инсульт: прил. к журн. 2003. Вып. 8. С. 4-9.

30. Давыдов В.В., Божков А.И. Метаболизм эндогенных альдегидов: участие в реализации повреждающего действия оксидативного стресса иего возрастные аспекты // Биомедицинская химия. 2003. Т. 49, № 4. С. 374-387.

31. Дамулин И.В. Дисциркуляторная энцефалопатия: патогенез, клиника, лечение: метод, рек. М., 2005. 48 с.

32. Дедов И.И. Дебют сахарного диабета у взрослых: пособие для врачей. М.: ЭНЦРАМН, 2004. 43 с.

33. Дедов И.И., Шестакова М.В. Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом. М., 2007. 198 с.

34. Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет. М.: Универсум паблишинг, 2003. 456 с.

35. Демидова Т.Ю., Анциферов М.Б. Современные аспекты комбинированной терапии сахарного диабета 2 типа // Фарматека. 2008. №3. С. 28-31.

36. Диагностическое и прогностическое использование биохимических маркеров ишемического повреждения головного мозга: метод, рек. для практического здравоохранения / В.И. Скворцова и др.. М., 2001. 52 с.

37. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состоянии окислительного стресса // Вопросы медицинской химии. 2001. Т. 47, № 6. С. 561-581.

38. Жирные кислоты инициаторы гемоглобинзависимого перекисного окисления липидов / A.A. Ахрем и др. // Докл. АН СССР 1988. № 2. С. 498-502.

39. Зозуля Ю.А., Барабой В.А, Сутковой Д.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга. М.: Знание-М, 2000. 226 с.

40. Изменение биохимического состава мембран тромбоцитов у больных диабетической нефропатией и его коррекция сулодексидом / Е.А. Александров и др. // Сахарный диабет. 2001. № 3. С. 12-16.

41. Инсульт: диагностика, лечение, профилактика / Под ред. З.А. Суслиной, М.А. Пирадова. М.: МЕДпресс-информ, 2008. 288 с.

42. Инсульт: принципы диагностики, лечения и профилактики / Под ред. Н.В. Верещагина,- М.А. Пирадова, З.А. Суслиной. М.: Интермедика, 2002. 208 с.

43. Интенсивность свободнорадикальных процессов и регуляция активности цитоплазматической NADP-изоцитратдегидрогеназы в кардиомиоцитах крысы в норме и при ишемии / Л.В. Медведева и др. //Биохимия. 2002. Т. 67, № 6. С. 838 849.

44. Кальвинын И.Я. Милдронат механизм действия и перспективы его применения. Рига, 2002. 39 с.

45. Карпов Ю.А. Результаты исследования PROGRESS: предупреждение повторного мозгового инсульта с помощью периндоприла // Рус. мед. журн. 2001. Т. 9, № 13-14. С. 586 589.

46. Клиническая эффективность и антиоксидантная активность милдроната при ишемическом инсульте / М.Ю. Максимова и др. // Рос. кардиологический журн. 2009. № 4. С. 13.

47. Кобалава Ж.Д., Моисеев B.C. Прогресс во вторичной профилактике инсультов (Основные результаты исследования PROGRESS) // Клиническая фармакология и терапия. 2001. Т. 10, № 4. С. 39-41.

48. Колесниченко Л.С. Регуляция катехоламинами и цАМФ ферментов обмена тиолов и дисульфидов в норме, при стрессе и усиленной пролиферации: дис. . д-ра мед. наук. М., 1986. 400 с.

49. Колесниченко Л.С. Система глутатиона эритроцитов и плазмы крови при инсультах и дисциркуляторной энцефалопатии // Биомедицинская химия. 2007. Т. 53, № 4. С. 454^60.

50. Колесниченко Л.С., Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы // Успехи современной биологии. 1989. Т. 107, № 2. С. 179 194.

51. Колесниченко Л.С., Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы // Успехи современной биологии. 2004. Т. 107, № 2. С. 179 193.

52. Колсанов А.Б. Диагностическое значение гамма-глутамат трансферазы при умеренных когнитивных нарушениях у пациентов сдисциркуляторной энцефалопатией I и II стадий: автореф. дис. . канд. мед. наук. Иваново, 2006. 18 с.

53. Комбанцев Е.А. Особенности воспалительно-деструктивных процессов у больных с диабетической ретинопатией после панретинальной лазерокоагуляции сетчатки и на фоне коррекции: автореф. дис. . канд. мед. наук. Новосибирск, 2007. 20 с.

54. Комплекс методов для оценки in vitro антиоксидантных свойств химических соединений / Е.Б. Меньшикова и др. // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. 2008. Прил. 1. С. 42.

55. Комплексная терапия хронической ишемии мозга / C.B. Котов и др.; под ред. В .Я. Неретина. М., 2001. С. 5-32

56. Кононенко И.В., Смирнова О.М. Сахарный диабет 1 типа у взрослых // Лечащий врач. 2005. № 5. с. 29 35.

57. Коржов В.И., Жадан В.Н., Коржов М.В. Роль системы глутатиона в процессах детоксикации и антиоксидантной защиты // Журн. АМН Укр. 2007. Т. 13, № 1. С. 3-19.

58. Корнеев A.A., Комисарова И.А. Роль глутатиона в формировании метаболического ответа на гипоксию// Изв. РАН. Сер. биол. 1994. № 4. С. 62-67.

59. Косолапов В.А., Самохина М.П., Спасов A.A. Окислительный стресс в патогенезе сахарного диабета и его осложнений // Диабет, стратегия и тактика: тез. докл. междунар. конф. М., 2007. С. 121-122.

60. Крылова В.Ю., Насонова Т.И., Турчина Н.С. Хроническая ишемия мозга // Международный неврологический журн. 2007. Т. 3, № 13. С. 23 26.

61. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита // Соросовский образовательный журн. 1999. № 1. С. 2 7.

62. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи современной биологии. 1990. Т. 1, № 4. С. 20-37.

63. Кулинский В.И., Колесниченко JI.C. Структура и свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы // Успехи современной биологии. 1993. № 1. С. 107 122.

64. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях: пособие для врачей. М.: РКНПК МЗ РФ, 2001. 77 с.

65. Ланкин В.3.Ферментативное перекисное окисление липидов // Укр. биохимический журн. 1984. Т. 56, № 3. С. 317-331.

66. Лечебные эффекты милдроната и показания к его применению в нейроангиологии / Г.И. Эниня и др. // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия (Рига). 2008. Вып. 19. С. 164-171.

67. Лобов М.А., Котов C.B., Рудакова И.Г. Патофизиологические, патогенетические и терапевтические аспекты хронической ишемии головного мозга // Рус. мед. журн. 2003. Т. 8, № 12. С. 458 461.

68. Локшина А.Б. Легкие и умеренные когнитивные нарушения при дисциркуляторной энцефалопатии: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2005. 22 с.

69. Майоров А.Ю., Суркова Е.В. Сахарный диабет 2 типа: рук. для врачей общей практики / Под ред. И.И. Дедова. М., 2008. 167 с.

70. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия. М.: Бином; СПб.: Невский Диалект, 1999. 896 с.

71. Меныпикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З. Окислительный стресс. Патологические состояния и заболевания. Новосибирск, 2008. 284 с.

72. Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: Слово, 2006. 553 с.

73. Метелица В.И. Справочник по клинической фармакологии сердечнососудистых лекарственных средств. М.: Бином; СПб.: Невский Диалект, 2000. 926 с.

74. Микроэлемент селен: роль в процессах жизнедеятельности / И.В. Гмошинский и др. // Ekologiya Могуа. 2007. Vol. 54. Р. 5-19.

75. Нарушения кровообращения в головном и спинном мозге / И.В. Дамулин и др. // Болезни нервной системы: рук. для врачей. М.: Медицина, 2003. С. 274-291.

76. Недовишин А.О., Кутузова А.Э., Перепеч Н.Б. Применение милдроната в комплексной терапии сердечной недостаточности // Клиническая медицина. 1999. Т. 77, № 3. С. 41-43.

77. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания / Е.Б.

78. Меныцикова и др.. Новосибирск: АРТА, 2008. 284 с. 81.Опыт применения фенотропила при лечении больных в остром периоде инфаркта головного мозга / Г.Н. Вельская [и др.] // Атмосфера. Нервные болезни. 2005. № 1. С. 25 28.

79. Применение Милдроната в гериатрии у пациентов с сердечной недостаточностью / И.Я. Калвиныш и др. // Терапевтический архив. 2006. Т. 78, №9. С. 75-78.

80. Профилактика нарушений мозгового кровообращения: пособие для врачей) / Н.В. Верещаги и др.; НИИ неврологии РАМН. М., 2003. 28 с.

81. Путилина М.В. Комбинированная нейропротекторная терапия ОНМК // Consilium Medicum. 2009. Т. 11, № 2. С. 9 15.

82. Рудакова И.Г. Заболевания поджелудочной железы // А.П. Калинина,i

83. С.В. Котова Неврологические расстройства при эндокринных заболеваниях. М.: Медицина, 2001. С. 174 188.

84. Сахарный диабет: ангиопатии и окислительный стресс: пособие для врачей / И.И. Дедов и др.. М., 2003. 85 с.

85. Свободнорадикальные процессы и их коррекция при геморрагическом инсульте / С.А. Румянцева и др. // Неврологический журн. 2007. № 5. С. 51-57.

86. Сейфулла Р.Д., Тревизани К., Ким Е.К. Действие производных карнитина на работоспособность предварительно тренированных животных // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1993. Т. 56, №6. С. 34-36.

87. Скоромец А.А., Мельникова Е.В., Голикова Р.В. Рациональный подход к сосудистой терапии хронической недостаточности мозгового кровообращения // Атмосфера. Нервные болезни. 2005. № 1. С. 29-31.

88. Сравнительная оценка церебровазопротекторных эффектов милдроната, рибоксина и их комбинации при моделировании нарушений мозговой гемодинамики / А.И. Бекетов и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2000. Т. 63, № 6. С. 18-21.

89. Субботнина Т.Н. Перекисное окисление липидов и состояние антиоксидантной системы крови у детей и подростков с инсулинзависимым сахарным диабетом : автореф. дис. . канд. мед. наук. Тюмень, 2003. 26 с.

90. Суслина З.А., Варакин Ю.А., Верещагин Н.В. Сосудистые заболевания головного мозга. М.: Медпресс-информ, 2006. 78 с.

91. Суслина З.А., Фонякин А.В., Гераскина JT.A. Профилактика повторного инсульта. Практические рекомендации. М.: НЦ неврологии РАМН, 2007. 48 с.

92. Сыркин A.JI., Добровольский А.В. Антиишемические препараты метаболического действия // Concilium Medicum. 2002. Т. 4, № 11. С. 912.

93. Терехина Н.А., Хоробрых О.Ю., Хоробрых Т.П. Активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах крыс при аллоксановом диабете // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. №4. С.25-26.

94. Титов В.Н. Сложные липиды кровотока: функциональная роль и диагностическое значение // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. №12. С. 3-11.

95. Федин А.И. Антиоксидантная терапия в комплексном лечении острой ишемии мозга // Труды Всероссийского рабочего совещания неврологов России / Под ред. Н.В. Верещагина, М.А. Пирадова, М.А. Евзельмана. М.: Фаворъ, 2002. С. 45.

96. Федин А.И., Ермошкина Н.Ю., Солдатов М.А. Ошибки диагностики инсульта: организационные проблемы и клинические данные // Неврологический журн. 2007. № 1. С. 18 22.

97. Фенотропил в лечении дисциркуляторной энцефалопатии / А.А. Густов и др. //Журн. неврологии и психиатрии. 2006. № 3. С. 52 53.

98. Филиппова С.Ю., Алешина Н.В., Степанов В.П. Фенотропил в лечении астенодепрессивных синдромом при отдаленных последствиях черепно-мозговых травм // Медицинская кафедра. 2005. Т. 3, № 15. С. 158-160.

99. Хроническая ишемия мозга / В.И. Скворцова и др. // Consilium Medicum. 2006. № 3. С. 24 27.

100. Хроническое введение коэнзима Qio ограничивает постинфарктное ремоделирование миокарда у крыс / Е.И. Каленникова и др. // Биохимия. 2007. Т. 72, № 3. С. 407 415.

101. Чазова И.Е., Дмитриев В.В. Предотвращение повторного инсульта возможно (результаты исследования Progress) // Consilium Medicum. 2001. Т. 1, № 10. С. 3-6.

102. Шестакова М.В., Чугунова JI.A., Шамхалова М.Ш. Апидра новый аналог инсулина для лечения сосудистых осложнений при сахарном диабете//Проблемы эндокринологии. 2007. № 3. С. 35-38.

103. Экскреция фосфолипидов с мочой у больных диабетической нефропатией / Ф.В. Валеева и др. // Сахарный диабет. 2001. № 3. С. 6 -8.

104. Яхно Н.Н., Локшина А.Б., Захаров В.В. Легкие и умеренные когнитивные расстройства при дисциркуляторной энцефалопатии // Клиническая геронтология. 2005. Т. 11, № 9. С. 38-39.

105. Яхно Н.Н., Дамулин И.В., Антоненко Л.М. Ноопепт в лечении дисциркуляторной энцефалопатии с умеренными когнитивными нарушениями//Лечащий врач. 2009. №5. С. 14-19.

106. A Commparison of Thiol Peroxidase Mechanisms / L. Flohe et al. // Antioxid Redox Signal. 2010. Jul 22.

107. A model of premature aging in mice based on altered stress-related behavioral response and immunosenescence / M.P. Viveros et al. // Neuroimmunomodulation. 2007. Vol. 14. P. 157-162.

108. A possible role of glutathione as an endogenous agonist at the N-methyl-D-aspartate recognition domain in rat brain / K. Ogita et al. // J. Neurochem. 1995. Vol. 64. P. 1088-1096.

109. Age-associated oxidative damage leads to absence of g-cystathionase in over 50% of rat lenses: relevance in cataractogenesis / J. Sastre et al. // Free Radic. Biol. Med. 2005. Vol. 38. P. 575-582.

110. Alleviating oxidative stress generated from polyunsaturated fatty acids in reast cancer cells / A. Utomo et al. // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279. P. 43522-43529.

111. An Extract of the Pleurotus ostreatus Mushroom Bolsters the Glutathione Redox System in Various Organs of Aged Rats / T. Jayakumar et al. // J Med Food. 2010. Vol. 13, N 4. P. 771 778.

112. Anderson M.F., Nilsson M., Sims N.R. Glutathione monoethylester prevents mitochondrial glutathione depletion during focal cerebral ischemia // Neurochem Int. 2004. Vol. 44. P. 153 159.

113. Anderson M.F., Sims N.R. The effects of focal ishemia and reperfusion on the glutathione content of mitochondria from rat brain subregions // J. Neurochem. 2002. Vol.81, N 3. P. 541 549.

114. Antioxidant role of glutathione S-transferases: protection against oxidanttoxicity and regulation of stress-mediated apoptosis / R. Sharma et al. // Antioxid. Redox Signal. 2004. Vol. 6. P. 289 300.

115. Antioxidant status in acute stroke patients and patients at stroke risk / C. Zimmermann et al. //EurNeurol. 2004. Vol. 51, N 3. P. 157 161.

116. Antioxidative vitamins in prevention of ishemia/reperfusion injury / E. Nagel et al. // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 1997. Vol. 67, N 5. P. 298-306.

117. Apoptosis of astroglial cells / T. Matsuda et al. // Nippon Yakurigaki. Zasshi. 1998. Vol. 1. P. 24 27.

118. Arthur J.R. The glutathione peroxidases // Cell Mol. Life Sci. 2000. Vol. 57, N 13/14. P. 1825-1835.

119. Association between diabetes and stroke subtype on survival and functional outcome 3 months after stroke: data from the European BIOMED Stroke Project / S.E. Megherbi et al. // Stroke. 2003. Vol. 34, N 3. P. 688697.

120. Bains J.S., Shaw C.A. Neurodegenerative disorders in human: the role of glutathione in oxidative stress-induced death caused by glutathione depletion // Brain Res. Rev. 1997. Vol.3. P.335 358.

121. Beckett G.J., Arthur J.R. Selenium and endocrine systems // J Endocrinol. 2005. Vol. 184, N 3. P. 455-465.

122. Beckett G.J., Hayes J.D. Glutathione s-transferases: biomedical applicatios // Advances in clinical chemistry. 1992. Vol. 30. P. 281 380.

123. Blood glutathione decreases in chronic diseases / C.A. Lang et al. // J. Lab. Clin. Med. 2000. Vol. 135. P. 402-405.

124. Board P.G., Anders M.W. // Methods in Enzymol. 2005. Vol. 401. 6177.

125. Bogousslavsky J. The global stroke initiative, setting the context with the International Stroke Society // J Neurol Sciences. 2005. Vol. 238, Supp 1.1. IS. 166.

126. Bolt H.M., Their R. // Curr. Drug Metab. 2006. Vol. 7.613- 628.

127. Boosalis M.G. The role of selenium in chronic disease // Nutr. Clin. Pract. 2008. Vol. 23, N 2. P. 152 160.

128. Brigelius-Flohe R. // Biol. Chem. 2006. Vol. 387. 1329 1335.

129. Brown K.M., Arthur J.R. Selenium, selenoproteins and human health: a review // Public Heallth. Nutr. 2001. Vol. 2B, N 4. P. 593599. ~ j

130. Ceriello A. Oxidative stress and diabetes-associated complications // Endocr Pract. 2006. Vol. 12 Suppl 1. P. 60 62.

131. Ceriello A., Motz E. Is oxidative stress the pathogenic mechanism underlying insulin resistance, diabetes, and cardiovascular disease? The common soil hypothesis revisited // Arterioscler. Th romb. Vase. Biol. 2004. Vol. 24, N5. P. 816-823.

132. CF sputum is glutathione rich and protects epithelial cells from oxidative stree in vitro /N. Dauletbaev et al. // Abstr. 13 th. Annual. North American Cystic Fibrosis Conference, Seatle, Wash. 1999. P. 710.

133. Changens in blood lipid peroxidation markers and antioxidant sailer a single sprint anaerobic exercise / C. Groussard et al. // Eur. J. Appl. Physiol. 2003. Vol. 25. P. 227-232.

134. Changes in hepatic glutathione metabolism in diabetes / S.V. McLennan et al. //Diabetes. 1991. Vol. 40. P. 344-348.

135. Characterization of intracellular elevation of glutathione (GSH) with glutathione monoethyl ester and GSH in brain and neuronal cultures: relevance to Parkinson's disease / G.D. Zeevalk et al. // Exp. Neurol. 2007. Vol. 203. P. 512-520.

136. Characterization of mammalian selenoproteomes / G.V. Kryukov et al. // Science. 2003. Vol. 300. P. 1439 1443.

137. Chiu Y.W., KuoM. C., Chang J.M., Guh J.Y, Lai T.H., Chen H.C. // J. Lab.Clin. Med. 2005. Vol. 45. P. 181 186.

138. Chu F.-F., Esworthy R.S., Doroshov J.H. Role of' Se-dependent glutathione peroxidase in gastrointestinal inflammation and cancer // Free

139. Radic. Biol. Med. 2004. Vol. 36. P. 1481 1495.

140. Coles B.F., Kadlubar, F.F. Human alpha class glutathione Stransferases: genetic polymorphism, expression, and susceptibility to disease // Methods in Enzymol. 2005. Vol. 401. P. 9 42.

141. Comhair S.A.,, Erzurum S.C. The regulation and role of extracellular glutathione peroxidase // Antioxid. Redox Signal. 2005. Vol. 7. P. 72-79.

142. Covalent coupling of reduced glutathione with ribose: loss of cosubstrate ability to glutathione peroxidase / C. Januel et al. // Biochim.Biophys. Acta. 2003. Vol. 1620. P. 125-132.

143. Cutler R. G. Oxidative stress and aging: catalase is a longevity determinant enzyme//Rejuvenation. Res. 2005. Vol. 8. P. 138-140.

144. Dave G., Kalia K. Hyperglycemia induced oxidative stress in type-1 and type-2 diabetic patients with and without nephropathy // Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2007. Vol. 53, N 5. P. 68 78.

145. Downregulation of adipose glutathione S-transferase A4 leads to increased protein carbonylation, oxidative stress, and mitochondrial dysfunction / J.M. Curtis et al. // Diabetes. 2010. Vol. 59, N 5. P. 11321142.

146. Dringen R. Methabolism and functione of glutathione in brain // Progress in Neurobiology. 2000. Vol.62. P. 649 671.

147. Dringen R., Pawlowsky P.G, Hirrlinger J. Peroxide detoxification by brain cells // J. Neurosci. Res. 2005. Vol. 79. P. 157-165.

148. Effect of glycemic control and vitamin E supplementation on total glutathione content in non-insulin-dependent diabetes mellitus / A. Sliarma et al. // Ann. Nutr. Metab. 2000. Vol. 44. P. 11-13.

149. Effect of oxidative stress on glutathione pathway in red blood cells from patients with insulin-dependent diabetes mellitus / Y. Dincer et al. // Metabolism. 2002. Vol. 51, N 10. P. 1360 1362.

150. Effect of peroxynitrite on the mitochondrial respiratory chain: differential susceptibility of neurones and astrocytes in primary culture / J.P. Bolanos et al. // J. Neurochem. 1995. Vol. 64. P. 1965-1972.

151. Effect of vitamin E on glutathione-dependent enzymes / van Haaften R.I. et al. // Drug Metab Rev. 2003. Vol. 35. P. 215 253.

152. Effect of vitro ishemic or hypoxic treatment on mitochondrial electron transfer activity in rat brain slices assessed by gas-tissue autoradiography using / T. Sasaki et al. // Brain. Res. 2001. Vol. 890, N 1. P. 100 109.

153. Effects of pentoxifylline and pentosan polysulphate combination therapy on diabetic neuropathy in type 2 diabetes mellitus / B. Laczy et al. // Acta Diabetol. 2009. Vol. 46, N 2. P. 105 111.

154. Electrostatic association of glutathione transferase to the nuclear membrane. Evidence of an enzyme defense barrier at the nuclear envelope / L. Stella et al. // J. Biol. Chem. 2007. Vol. 282. P. 6372 6379.

155. Elevated gglutamyltransferase activity and perturbed thiol profile are associated with features of metabolic syndrome / P. Giral et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2008. Vol. 28. P. 587-593.

156. Engle M.R., Singh S.P., CzernikPJ., Gaddy D., Montague D.C., Ceci J.D., Yang Y., Awasthi S., Awasthi Y.C., Zimniak P. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2004. Vol. 194. P. 296 308.

157. Enzymatic reduction of phospholipid and cholesterol hydroperoxides in artificial bilayers and lipoproteins / J.P. Thomas et al. // J. Biol. Chem. 1990. Vol. 265. P. 454-461.

158. Esposito K., Giugliano D. Hyperglycemia and vascular damage role of oxidative stress // Recenti Prog. Med. 2002. Vol. 93. N 3. P. 172-174.

159. Exner C., Hebebrand J., Remschmidt H. Leptin suppresses semi-starvation induced hyperactivity in rats: implications for anorexia nervosa // Molecular Psychiatry. 2000. N 5. P. 476-481.

160. Fernandez-Checa J.C., Garcia-Ruiz C. Mitochondrial glutathione: Hepatocellular survival-death switch // J Gastroenterology and Hepatol. 2006. Vol.21,Suppl3. S. 3-6.

161. Firth S., Peters J., Bulfield J. Activity and electrophoretic mobility of glutathione reductase allozymes in different tissue of the mouse // Biochem. Genetics. 1979. Vol. 17, N 3. P. 229 232.

162. Flohe L. The selenoprotein glutathione peroxidase // Glutathione: chemical, biochemical and medical aspects. Part A. Coenzymes and cofactors. Vol. 3 / Eds.D. Dolphin et al.. N.Y.Wiley and Sons, 1989. P. 643-731.

163. Gender related differences in erytrocyte glutathione peroxidase activity in healthy subjects / C. Massafara et al. // Clin. Endocrinol. 2002. Vol. 57, N 5. P. 663-667.

164. Genetic ablation of Nrf2 enhances susceptibility to cigarette smoke-induced emphysema in mice / T. Rangasamy et al. // J. Clin. Invest. 2004. Vol. 114/P. 1248- 1259.

165. Genetic polymorphism of GSTM1 and antioxidant supplementation influence lung function in relation to ozone exposure in asthmatic children in

166. Giblin F.J. Glutathione: a vital lens antioxidant // J Ocul Pharmacol Ther. 2000. Vol. 16, N 2. P. 121-135.

167. Glucose "peak" and glucose "spike": Impact on endothelial function and oxidative stress / Ceriello Antonio et al. // Diabetes research and clinical practice. 2008. Vol. 82, N 2. P. 262 267.

168. Glucose-induced oxidative stress in mesangial cells / M.A. Catherwood et al. // Kidney Int. 2002. Vol. 61. P. 599-608.

169. Glutathione / H. Jefferies et al. // ANZ. J. Surg. 2003. Vol. 7, N 73. P. 517-522.

170. Glutathione and signal transduction in the mammalian CNS / K.Y. Jana et al. // J. Neurochem. 1999. Vol. 73. P. 889-902.

171. Glutathione and signal transduction in the mammalian CNS / R. Janaky et al. // J. Neurochem. 1999. Vol. 73, N 3. P. 889 902.

172. Glutathione export during apoptosis requires functional multidrug resistance-associated proteins / C.L. Hammond et al. // J. Biol. Chem. 2007. Vol. 282. P. 14337 14347.

173. Glutathione metabolism and its implications for health / G. Wu et al. // J. Nutr. 2004. Vol. 3, N 134. P. 489 492.

174. Glutathione monoethylester provides neuroprotection in a rat model of stroke / M.F. Anderson et al. // Neurosci. Lett. 2004. Vol. 354. P. 163 -165.

175. Glutathione peroxidase 2, the major cigarette smoke-inducible isoform of GPX in lungs, is regulated by Nrf2 / A. Singh et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2006. Vol. 35. P. 639 650.

176. Glutathione precursor, N-acetyl-cysteine, improves mismatch negativity in schizophrenia patients / S. Lavoie et al. // Neuropsychopharmacology. 2008. Vol. 33. P. 2187-2199.

177. Glutathione S-transferase polymorphisms and colorectal cancer: a HuGE review. / S.C. Cotton et al. // Am. J. Epidemiology. 2000. Vol. 151, N1. P. 7-32.

178. Glutathione-related enzymes activity during vitrectomy. Effect of BSS Plus(R) in retinal tissue / M.A. Marcos et al. // Arch. Soc. Esp. Oftalmol. 2002. Vol. 77, N 3. P. 133-138.

179. Glutathionylation of mitochondrial proteins / T.R. Hurd et al. // Antioxid. Redox Signaling. 2007. Vol.7. P. 999 1010.

180. GSH-dependent peroxidase activity of the rice (Oryza sativa) glutaredoxin, a thioltransferase / K.O. Lee et al. // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2002. Vol. 296. P. 1152-1156.

181. Hatzelman A., Schatz M., Ullrich V. Involvement of glutathione peroxidase activity in the stimulation of 5-lypoxygenase by glutathione-depleting agents in human polymorphonuclear leukocytes // Eur. J. Biochem. 1989. Vol. 180, N 3. P. 527 533.

182. Hayes J. D., Flangan J. U., Jowsey I. R. Glutathione transferases // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2005. Vol. 45. P. 51-88.

183. Ho J.E., Paultre F., Mosca L. Is Diabetes Mellitus a Cardiovascular Disease Risk Equivalent for Fatal Stroke in Women? Data From the Women's Pooling Project// Stroke. 2003. Vol. 34. P. 2812.

184. Holmgren A., Jeffery J. // Dehydrogenases Requiring Nicotinamide Coenzymes. Birkhauser-Verlag, Basel, 1980. P. 149-180.

185. Identifcation of a novel Nrf2-regulated Antioxidant Response Element in the mouse NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 gene; reassessment of the ARE consensus sequence /N. Paul et al. // Biochem. J. 2003. Vol. 365. 405 -416.

186. Identification of a novel putative non-selenocysteine containing

187. Identification of STAT3 as a substrate of receptor protein tyrosine phosphatase T / X. Zhang et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2007. Vol. 104. P. 4060 4064.

188. Imai H, Nakagava Y. Biological signiecance of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx, GPx4) in mammalian cells // Free Radic. Biol. Med. 2003. Vol. 34. P. 145 169.

189. Increased excitoxic vulnerability of cultures with reduced level of glutathione / R.J. Bridges et al. // Eur. J. Pharmacol. 1991. Vol. 192. P. 199 -200.

190. Insights into the membrane proteome of rat liver peroxisomes: microsomal glutathione-S-transferase is' shared by both subcellularcompartments / M. Islinger et al. // Proteomics. 2006. Vol.6. P. 804 816.

191. Involvement of oxidative stress in the pathogenesis of diabetes / H. Kaneto et al. // Antioxid. Redox Signal. 2007. Vol. 9. P. 355-366.

192. Juurlink B.H. Response of glial cells to ishemia: roles of reactive oxygen species and glutathione // Neurosci. Biobehav. Rev. 1997. Vol. 21, N2. P. 151 166.

193. Juurlink B.H., Paterson P.G. Review of oxidative stress in brain and spinal cord injury: suggestions for pharmacological and nutritional management strategies // J. Spinal Cord Med. 1998. Vol. 21, N 4. P. 309 344.

194. Kamboj S.S., Vasishta R.K., Sandhir R. N-acetylcysteine inhibitshyperglycemia-induced oxidative stress and apoptosis markers in diabeticineuropathy // J Neurochem. 2010. Vol. 112, N 1. P. 77 91.

195. Katakura K., Kishida K., Hirano H. Changes in rat lens proteins and glutathione reductase activity with advancing age // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2004. Vol. 74. P. 329-333.

196. Kim E.H., Surh Y.J. 15-deoxy-Deltal2,14-prostaglandin J2 as a potential endogenous regulator of redox-sensitive transcription factors // Biochem. Pharmacol. 2006. Vol. 72. P. 1516 1528.

197. Klein R., Klein B.,'Moss S. Relation of glycemic control to diabetic microvascular complications in diabetes mellitus // Ann. Intern. Med. 1996. Vol. 124. P. 90 96.

198. Knight J. A. The biochemistry of aging // Adv. Clin. Chem. 2000. Vol. 35. P. 1-62.

199. Kosower N.S., Kosower E.M. The glutathione status of cells // Intern. Rev. Cytol. 1978. Vol. 54. P. 109-160.

200. Kulinsky V.I., Kolesnichenko L.S. The glutathione system. I. Synthesis, transport, glutathione transferases, glutathione peroxidases // Biochemistry (Moscow) Suppl. Series B: Biomedical Chemistry. 2009. Vol. 3, N 2. P. 129-144.

201. Kulinsky V.I., Kolesnichenko L.S. The glutathione system. II. Other enzymes, thiol-disulphide metabolism, inflammation and immunity, functions // Biochemistry (Moscow) Suppl. Series B: Biomedical Chemistry. 2009. Vol. 3, N 3. P. 230-245.

202. Laughlin L.T., Bernat B.A., Armstrong R.N. Mechanistic imperative for the evolution of a metalloglutathione transferase of the vicinal oxygen chelate superfamily // Chem. Biol. Interact. 1998. Vol. 111-112.P. 41 -50.

203. Lei X., Vatamaniuk M. Two Tales of Antioxidant Enzymes on beta Cells and Diabetes // Antioxid Redox Signal. 2010. Jul 10.

204. Leslie E.M., Deeley R.G., Cole S.P.C. Multidrug resistance proteins: role of P-glycoprotein, MRP1, MRP2, and BCRP (ABCG2) in tissue defense // Toxicol. Appl. Pharm. 2005. Vol. 204. P. 216-237.

205. Lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in erythrocytes of type 2 diabetic patients / A. Likidlilid et al. // J Med Assoc Thai. 2010. Vol. 93, N6. P. 682-693.

206. Location of substrate binding sites within the integral membrane protein microsomal glutathione transferase-1. / S.L. Busenlehner et al. // Biochemistry. 2007. Vol. 46. 2812 2822.

207. Long exposure to high glucose concentration impairs the responsive expression of g-glutamylcysteine synthetase by interleukin-lb and tumor necrosis factor-a in mouse endothelial cells / Y. Urata et al. // J. Biol. Chem. 1996. Vol. 271. P. 15146-15152.

208. Low blood glutathione levels in healthy aging adults / C.A. Lang et al. // J. Lab. Clin. Med. 1992. Vol. 120. P. 720-725.

209. Lu S.C. Regulation of hepatic glutathione synthesis: current concepts and controversies //FASEB.J. 1999. Vol. 13. P.l 169-1183.

210. Malone J.I., Shocken D.D., Morrison A.D. Diabetic cardiomyopathy and carnitine deficiency // Diabetes Complications. 1999. Vol. 13, N 2. P. 86-90.

211. Management of hyperglycaemia in type 2 diabetes mellitus: a consensus algorithm for the initiation and adjustment of therapy (ADA-EASD) / M. Nathan et al. //Diabetologia. 2008. Vol. 51. P. 8-11.

212. Mannervik B. In Enzymatic Basis of Detoxication /Academic Press, New York. 1980. Vol. 2. P. 263-273.

213. Mannervik B., Ridderström M. Optimized heterologous expression of the human zinc enzyme glyoxalase I // Biochem. J. 1996. Vol. 314. P. 463467.

214. Maritim A.C., Sanders R.A., Watkins J.B. III. Diabetes, oxidative stress, and antioxidants: A review // J Biochem Mol Toxicol. 2003. Vol. 17, N 1. P. 24-38.

215. Mizui T., Kinouchi H., Chan P.H. Depletion of brain glutathione by buthionine sulfoximine enhances cerebral ischemic injury in rats // Am J Physiol. 1992.Vol. 262. P. 313-^317.

216. Modulation of 3H. dopamine release by glutathione in mouse striatal slices / R. Janaky [et al.] // Neurochem. Res. 2007. Vol. 32, N 8. P. 1357 -1364.

217. Modulation of aldose reductase activity through S-thiolation by physiological thiols / M. Cappiello et al. // Chem. Biol. Interact. 2001. Vol. 130-132. P. 597-608.

218. Modulation of glutamate receptor functions by glutatione / S.S. Oja et al. //Neurochem. Int. 2000. Vol. 37, N 2/3. P. 299-306.

219. Modulation of w3Hxdopamine release by glutathione in mouse striatal slices /K.Y. Jana et al. //Neurochem. Res. 2007. Vol. 32. P. 1357-1364.

220. Mohandas N., Evans E. Mechanical properties of the red cell membrane in relation to molecular structure and genetic defects // Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 1994. Vol. 23. P. 787- 818.

221. Molecular characterization of dopamine-derived quinones reactivity toward NADH and glutathione: Implications for mitochondrial dysfunction in Parkinson disease / M. Bisaglia et al. // Biochim Biophys Acta. 2010. Vol. 1802, N9. P. 699-706.

222. Monoaminergic dysregulation in glutathione-deficient mice: possible relevance to schizophrenia? / J.P. Jacobsen et al. // Neuroscience. 2005. Vol. 132. P. 1055-1072.

223. Mutation of megalin leads to urinary loss of selenoprotein P and selenium deficiency in serum, liver, kidneys and brain / J. Chiu-Ugald et al. //BiochemJ. 2010. Vol. 431, N 1. P. 103 111.

224. Negative correlation between brain glutathione level and negative symptoms in schizophrenia: a 3T 1H-MRS study / D. Matsuzawa et al. // PLoS ONE. 2008. Vol. 3. el944.

225. Neurochemical evidence that phytanic acid induces oxidative damage and reduces the antioxidant defenses in cerebellum and cerebral cortex of rats / G. Leipnitz et al. // Life Sci. 2010. Jul 6.

226. Nrf2 Gene Transfer Induces Antioxidant Enzymes and Suppresses Smooth Muscle Cell Growth In Vitro and Reduces Oxidative Stress in Rabbit Aorta In Vivo / A.L. Levonen et al. // Arterioscler. Tliromb. Vase. Biol. 2007. Vol. 27. P. 741-747.

227. Oscillating glucose is more deleterious to endothelial function and oxidative stress than mean glucose in normal and type 2 diabetic patients. / Ceriello Antonio et al. // Diabetes. 2008. Vol. 57, N 5. P. 1349-1354.

228. Oxidative and nitrosative stress in brain mitochondria of diabetic rats / R. Mastrocola et al. // J. Endocrinol. 2005. Vol. 187. P. 37-44.

229. Oxidative markers in diabetic ketoacidosis / M.C. Vantyghem et al. // J. Endocrinol. Invest. 2000. Vol. 23, N 11. P. 732-736.\

230. Oxidative stress caused by inactivation of glutathione peroxidase and adaptive responses / Y. Miyamoto et al. // Biol. Chem. 2003. Vol. 384, N4. P. 567-574. ^

231. Panfili E., Sandri G., Ernster L. Distribution of glutathione peroxidases and glutathione reductase in rat brain mitochondria // FEES Lett. 1991. Vol. 290, N 1/2. P. 35-37.

232. Phospholipid-hydroperoxide glutathione peroxidase (GPx-4) localization in resting platelets, and compartmental change during platelet activation / C. Januel et al. // Biochim. Biophys. Acta. 2006. Vol. 1761. R. 1228 1234.

233. Pramlintide reduced markers of oxidative stress in the postprandial period in patients with type 2 diabetes / Ceriello Antonio et al. // Diabetes/metabolism research and reviews. 2008. Vol. 24, N 2. P. 103-108.

234. Prediabetes in obese youth: a syndrome of impaired glucose tolerance, severe insulin resistance, and altered myocellular and abdominal fat partitioning/R. Weiss et al. //Lancet. 2003. Vol. 362. P. 951-957.

235. Progressive defect in biliary GSH secretion in streptozotocin-induced diabetic rats / S.C. Lu et al. // Am. J. Physiol. 1997. Vol. 272. G374-G382.

236. Protection against oxidative stress-induced insulin resistance in rat L6 muscle cells by mircomolar concentrations of alpha-lipoic acid / B.A. Maddux et al. // Diabetes. 2001. Vol. 50, N 2. P. 404 410.

237. Protection of cells from oxidative, stress by microsomal glutathione transferase 1 / A. Siritantikorn et al. // Biochem. Biophis. Res. Commun. 2007. Vol. 355. P. 592-596.

238. Rahman I., Adcock I.M. Oxidative stress and redox regulation of lung inflammation in COPD // Eur. Respir. J. 2006. Vol. 28, N 1. P. 219 242

239. Rana S.W., Allen T., Singh R. Inevitable glutathione, then and now // Indian J. Exp. Biol. 2002. Vol. 40, N 6. P. 706-716.

240. Reactive intermediates and the dynamics of glutathione transferases / R. Rinaldi et al. //Drug. Metab. Dispos. 2002. Vol. 30, N 10. P. 1053-1058.

241. Regan R.F., Guo Y. Extracellular reduced glutathione increases neuronal vulnerability to combined chemical hypoxia and glucose deprivation // Brain research. 1999. Vol. 817, N 1-2. P. 145-50.

242. Regulation of g-glutamylcysteine synthetase subunit gene expression in retinal Mu. lier cells by oxidative stress / S.C. Lu et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1999. Vol. 40. P. 1776-1782.

243. Regulation of selenoprotein GP4 expression and activity in human endothelial cells by fatty acids, cytokines and antioxidants / A.A. Sneddon et al. // Athersclerosis. 2003. Vol. 171, N 1. P. 57-65.

244. Regulative potential of glutamine-relation to glutathione metabolism / E. Roth et al. //Nutrition. 2002. Vol. 3, N 18. P. 217-221.

245. Rice M.E., Russo-Menna I. Differential compartmentalization of brain ascorbate and glutathione between neurons and glia // Neuroscience. 1998. Vol. 82. P. 1213-1223.

246. Rikans L.E., Hornbrook K.R. Lipid peroxidation, antioxidant protection and aging//Biochim. Biophys. Acta 1997. Vol. 1362. P. 116-127.

247. Risk factors for coronary artery disease in non-insulin dependent diabetes mellitus: United Kingdom prospective diabetes study (UKPDS: 23)/ R.C. Turner et al. //BMJ. 1998. Vol. 316. P. 823.

248. Robertson R.P. Antioxidant drugs for treating beta-cell oxidative stress in type 2 diabetes: glucose-centric versus insulin-centric therapy // Discov Med. 2010. Vol. 9, N 45. P. 132-137.

249. Rouhier Nicolas, Lemaire Stéphane D., Jacquot Jean-Pierre. The role of glutathione in photosynthetic organisms: emerging functions for glutaredoxins and glutathionylation //Annual review of plant biology. 2008. Vol. 59. P. 143-166.

250. Santangelo F. The regulation of sulphurated amino acid junction: fact or fiction in the field of inflammation //Amino Acids. 2002. Vol. 4, N 23. P. 359-365.

251. Sarti C., Stegmayr B., Tolonen H., et al. Are changes in mortality from stroke caused by changes in stroke event rates or case fatality? Results from the WHO MONICA Project // Stroke 2003; 34: 1833.

252. Saviskan N.E., Borchert A., Brauer A.U., Kuhn H. / Free Radic. Biol.Med. 2007. Vol. 43. P. 191 -201.

253. Schizophrenia: glutathione deficit in cerebrospinal fluid and prefrontal cortex in vivo / K. Q. Do et al. // Eur. J. Neurosci. 2000. Vol. 12. P. 37213728.

254. Selenium and brain function: a poorly recognized liaison / U. Schweizer et al. // Brain. Res. Rev. 2004. Vol. 45, N 3. P.164-178.

255. Sethna S.S., Holleschau A.M., Rathbun W.B. Activity of glutathione synthesis enzymes in human lens related to age // Curr. Eye Res. 1982. Vol. 2. P. 735-742.

256. Sex Differences in the Prediction of Type 2 Diabetes by Inflammatory Markers: Results from the MONICA/KORA Augsburg case-cohort study, 1984-2002 / B. Thorand et al. // Diabetes Care. 2007. Vol. 30, N 4. P. 854 -860.

257. Signaling mechanisms in tumor necrosis factor alpha-induced death of microvascular endothelial cells of the corpus luteum / J.K. Pru et al. // Reprod Biol Endocrinol. 2003. Vol. 11. P. 17.

258. Smeine M., Boyd J., Raviie S.K., Jiao Y., Pond B.B., Hatler M., Wolf R., Henderson C Smeine R.J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2007. Vol. 104.1. P. 1977 -1982.

259. Specific glutathione binding sites in pig cerebral cortical synaptic membranes / K.Y. Jana et al. // Neuroscience. 2000. Vol. 95. P. 617-624.

260. Specific impairment of endothelium-dependent vasodilation in subjects with type 2 diabetes independent of obesity / R. Hogikyan et al. // J. Clin. Endocrinol. Metabol. 1998. Vol. 83, N 6. P. 1946 1952.

261. Stadtman E. R. Cyclic oxidation and reduction of methionine residues of proteins in antioxidant defense and cellular regulation // Arch. Biochem. Bioophys. 2004. Vol. 423. P. 2-5.

262. Stimulation of N-methyl-D-aspartate receptor-mediated calcium entry into dissociated neurons by reduced and oxidized glutathione / S.W. Leslie et al. // Mol. Pharmacol 1992. Vol 41. P. 308-314.

263. Strange R.C., Jones P.W., Fryer A.A. Glutathione S-transferase: genetics and role in toxicology // Toxicol. Lett. 2000. Vol 112-113. P. 357 363.i

264. Structural and conformational properties of peptides interacting with the glutathione receptor of hydra / M.H. Cobb et al. // Mol Pharmacol 1982. Vol 21. P. 629-636.

265. Structure, function and evolution of glutathione transferases: implication for classification of non-mammalian members of an ancient enzyme superfamily/D. Sheehan et al. //Biochem. J. 2001. Vol 360, N 1. P. 1-16.

266. Struznka L., Chalimoniuk M., Sulkowski G. The role of astroglia in Pb-exposed adult rat brain with respect to glutamate toxicity // Toxicology. 2005. Vol 212, N2/3. P. 185- 194.

267. Subcellular distribution of selenoproteins in the liver of the rat / D. Behne et al. //Biochim. Biophys. Acta. 1990. Vol 1033, N 3. P. 219 225.

268. Sun A.Y., Chen Y.M. Oxidative stress and neurodegenerative disorders //J. Biomed. Sci. 1998. Vol 5. P. 401-414.

269. Synthesis and study of L-dopa-glutathione codings as new antiParkinson agents with free radical scavenging properties / F. Pinnen et al. // J. Med. Chem. 2007. Vol. 50. P. 2506-2515.

270. Tew K.D. TLK-286: a novel glutathione S-transferase-activated prodrug. //Expert Opin. Investig. Drugs. 2005. Vol. 14. P. 1047 1054.

271. Tew K.D. Redox in redux: Emergent roles for glutathione S-transferase P (GSTP) in regulation of cell signaling and S-glutathionylation // Biochem. Pharmacol. 2007. Vol. 73. P. 1257 1269.

272. The changing faces of glutathione, a cellular protagonist / A. Pompella et al. // Biochem Pharmacol. 2003. Vol. 66, N 8. P. 1499-503.

273. The effects of polyphenol-containing antioxidants on oxidative stress and lipid peroxidation in Type 2 diabetes mellitus without complications / A.K. Fenercioglu et al. // J Endocrinol Invest. 2010. Vol. 33, N 2. P. 118124.

274. The expression of glutathione reductase in the male reproductive system of rats supports the enzymatic basis of glutathione function in spermatogenesis / T. Kaneko et al. // Eur. J. Biochem. 2002. Vol. 269, N 5. P. 1570-1578.

275. The GI-GPx gene is a target for Nrf2 / A. Banning et al. // Mol. Cell Biol. 2005. Vol. 25. 4914 4923.

276. The human glutathione-S-transferases. Immunohistochemical studies of the developmental expression of Alpha and Pi-class isoenzymes in liver / C. Hiley et al. // Biochem.J. 1988. Vol. 254, N 1. P. 255-259.

277. The Mu class glutathione transferase is abundant in striated muscle and is an isoform-specific regulator of ryanodine receptor calcium channels / Y. Abdellatif et al. // Cell Calcium. 2007. Vol. 41. P. 429 440.

278. Townsend D.M., Tew K.D. The role of glutatihone-S-transferase in anticancer drug resistance // Oncogene. 2003. Vol. 22, N 47. P. 7369 7375.

279. Treatment with intact anti-B7-l mAb during disease remission enhances epitope spreading and exacerbates relapses in R-EAE./ C.L. Vanderlugt et al. // Journal of neuroimmunology. 1997. Vol. 79, N 2. P. 113-118.

280. Tsuboi S. Regulation mechanism of glutathione biosynthesis / Biol. Pharm. Bull. 1999. Vol. 22. P. 1-5.

281. Tsunada S., Iwakiri R., Noda T. Chronic exposure to subtoxic levels of peroxidized lipids suppresses mucosal cell turnover in rat small intestine and reversal by glutathione // Digest Dis. Sci. 2003. Vol. 48, N 1. P. 210-222.

282. Vilsboll T. On the role of the incretin hormones GIP and GLP-1 in the pathogenesis of Type 2 diabetes mellitus // Dan. Med. Bull. 2004. Vol. 51, N 4. P. 364-370.

283. Vilsboll T., Knop F.K. Effect of incretin hormones GIP and GLP-1 for the pathogenesis of type 2 diabetes mellitus // Ugeskr. Laeger. 2007. Vol. 169, N22. P. 2101-2105.

284. Weakened cellular scavenging activity against oxidative stress in diabetes mellitus: regulation of glutathione synthesis and efflux / K. Yoshida et al. // Diabetologia. 1995. Vol. 38. P. 201-210.

285. Wendel G.W. Growth and survival of planted northern red oak seedlings in West Virginia // Southern Journal of Applied Forestry. 1980. Vol. 4, N 1. P. 49-54.

286. Whalen R., Boyer T.D. Human glutathione S-transferases // Semin. Liver Dis. 1998. Vol. 18, N 4. P. 345 358.

287. Whitbread A.K., Masoumi A., Tetlow N., Schmuk E., Coggan M., Board P.G. // Methods in Enzymol.2005. Vol. 401. P. 78 99.

288. Whitin J.C, Bhamre S., Tham D.M., Cohen H.J. Extracellular glutathione peroxidase is secreted basolaterally by human renal proximal tubule cells // Am. J. PhysiolRenal Physiol. 2002. Vol. 283. P. 20 28.

289. Williams K., Frayne J., Hall L. Expression of extracellular Superoxide dismutase in the human male reproductive tract, detected using antisera raised against a recombinant protein // Mol. Human Reproduction. 1998. Vol. 4. P.841 848.

290. Winiarska K., Drozak J. Glutathione in therapy // Postepy Hig Med Dosw. 2002. Vol. 56, N 4. P. 521-536.

291. Wojcik M., Burzynska-Pedziwiatr I., Wozniak L.A. A Review of Natural and Synthetic Antioxidants Important for Health and Longevity // Curr Med Chem. 2010. Vol. 17, N 28. P. 3262-3288.

292. Wright E.Jr., Scism-Bacon E.Jr., Glass L.C. Oxidative stress intype 2 diabetes: the role of fasting and postprandial glycaemia // Int. J. Clin. Pract. 2006. Vol. 60, N 3. P. 308-314.

293. Zeevalk G.D., Razmpour R., Bernard L.P. Glutathione and Parkinson's disease: is this the elephant in the room? // Biomed. Pharmacother. 2008. Vol. 62. P. 236-249.

294. Ziegler D.M. Role of reversible oxidation-reduction of enzyme thiols-disulfides in metabolic regulation // Annu. Rev. Biochem. 1985. Vol. 54. P. 305-329.

Информация о работе

Лемешко, Елена Халимовна
кандидата медицинских наук
Новосибирск, 2010
ВАК 03.01.04

Диссертация

Изменение системы глутатиона при различных вариантах церебральной ишемии и возможные способы ее коррекции - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы