Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом

Мочалова, Нина Геннадьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом"

На правахрукописи

МОЧАЛОВА НИНА ГЕННАДЬЕВНА

ИЗМЕНЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ИЗОЛИРОВАННОМ ВВЕДЕНИИ АЦЕТАТА СВИНЦА И ПРИ ЕГО СОЧЕТАНИИ С ЭТАНОЛОМ

03.00.04 - биологическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тверь-2004

МОЧАЛОВА

НИНА ГЕННАДЬЕВНА

03.00.04 - биологическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тверь - 2004

Работа выполнена на кафедре общей, биоорганической и биологической химии ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Минздрава России»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Слободин Виталий Боянович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Каргополов Александр Васильевич Яровая Галина Алексеевна

Ведущая организация:

Российский Государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится 27апреля 2004года на заседании диссертационного Совета К 212.263.01 при Тверском государственном университете по адресу: г.Тверь, пр. Чайковского, 70а, корп. 5, ауд. 318.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тверского государственного университета

Автореферат разослан.

_2004 года

Ученый секретарь

диссертационного с о в е т а А доктор биологических наук

[крушина

Общая характеристика работы.

Актуальность исследования. В настоящее время токсикологическую обстановку в промышленно развитых странах следует расценивать как экологически опасную для здоровья человека. Особый интерес вызывает свинец (РЬ), как приоритетный загрязнитель окружающей среды, ежегодные выбросы которого превышают 400 000 тонн (Ландриган Ф., 1991).

Нагрузка организма свинцом растет с момента рождения до старости (Розанов Б.Г.,1985). Более того, ионы металла начинают накапливаться уже в организме плода, так как легко проникают через плаценту и концентрация свинца в крови новорожденного не отличается от крови матери. Поступление избыточных количеств металла в организм еще в антенатальном периоде повышает риск преждевременных родов и рождения недоношенных детей, а также развития энцефалопатии, нефропа-тий и рахитоподобных заболеваний у новорожденных.

Хотя необходимость РЬ для протекания физиологических и биохимических процессов в организме доказана рядом исследователей (Schwarz К., 1974, Kitch-gessnerM., 1985), механизм его действия, особенно в условиях низких концентраций, изучен и расшифрован в значительно меньшей степени, чем действие других микроэлементов (Victory W., 1979, Fowber B.A., 1981).

При свинцовом токсикозе поражаются в первую очередь органы кроветворения, нервная система и почки. По современным представлениям классическим клиническим проявлением токсического действия металла является морфологически схожая с железодефицитной микроцитарная анемия, возникающая вследствие нарушения синтеза гема и глобина. В то же время можно полагать, что немаловажная роль в патогенезе свинцовой интоксикации принадлежит сокращению продолжительности жизни эритроцитов, которое может быть обусловлено как нарушением состояния мембран, так и изменениями в метаболизме клеток.

Следует учитывать также, что изолированное влияние свинца на организм чаще всего сочетается с воздействием других химических, физических, биологических и социальных факторов, усугубляющих его токсичность, в частности, все возрастающим потреблением алкоголя (Немцов А.В., 1995, Telisraan S., Cvitkovic Р.,2000). Учитывая < социальную значимость данного явления, с одной стороны, и повсеместное загрязнение окружающей среды свинцом, с другой, нельзя исключить возможность модификации этанолом токсического действия металла, которое может вызвать субклинические эффекты, не обнаруживаемые при обычных медицинских обследованиях.

Все вышеизложенное и послужило предпосылкой для проведения настоящей работы.

Цель исследования. Целью настоящей работы явилось изучение влияния малых доз свинца на функциональное состояние эритроцитов и систему эритрона белых крыс при изолированном введении ацетата металла и при его сочетании с этанолом.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

1.Исследовать интенсивность перекисного окисления липидов и интенсивность фосфолиполиза в мембранах эритроцитов при введении малых доз ацетата свинца в организм.

2.Выявить влияние ионов свинца на энергетический обмен эритроцитов в зависимости от сроков воздействия.

3.Сопоставить изменения функционального состояния мембран и энергетического обмена эритроцитов при изолированном введении свинца и при его соче-танном воздействии с алкоголем.

4.Исследовать изменения в системе красной крови как при изолированном действии свинца и спирта, так и при их совместном введении.

5.Установить последовательность включения компенсаторно-приспособительных реакций по мере увеличения сроков свинцовой и свинцово-алкогольной интоксикации.

Научная новизна. В работе показано, что изменения функциональных свойств эритроцитов под действием малых доз свинца по мере увеличения сроков интоксикации носят неоднозначный характер, обусловливая течение как дезадап-тивных, так и компенсаторных реакций организма.

Установлено, что при совместном присутствии свинца и этанола происходит усиление неблагоприятного воздействия металла на организм, обусловленное суммированием эффектов, производимым каждым из токсикантов в отдельности.

Показано, что одним из компенсаторных механизмов, развивающихся в ответ на введение свинца, является активация 2,3-дифосфоглицератного шунта в эритроцитах, повышающая устойчивость организма к возникающей гипоксии.

Выявлены коррелятивные связи между изменениями мембраны эритроцитов и морфо-функциональными характеристиками эритроидного ростка красного костного мозга и периферической крови.

Установлено, что при совместном введении свинца и спирта происходит функциональная перестройка эритропоэза, сокращение времени созревания эритроцитов, что в дальнейшем сказывается на преждевременном старении макрофага.

Практическая значимость. Предложен способ оценки степени связывания ионов свинца мембраной клетки посредством измерения электрофоретической подвижности эритроцитов (патент № 2199733 от 27.02.03).

Полученные новые данные и сформулированные теоретические положения об особенностях действия свинца в малых дозах, как при изолированном введении, так и в присутствии этанола являются основой для выявления наиболее быстрых и точных способов диагностики сатурнизма с последующим проведением соответствующего лечения.

Материал, представленный в диссертации, может быть рекомендован к использованию при дальнейшей разработке вопросов токсикологии свинца, экологической физиологии и химии биогенных элементов.

Апробация работы. Основные положения работы докладывались и обсуждались на конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Челябинск, 1999), 6-ой Международной конференции " Молекулярная биология, химия и физика неравновесных систем" (Иваново, 2002), а также на итоговых научных конференци-

ях Ивановской государственной медицинской академии (Иваново, 1998,1999,2002,2003). По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Полученные в ходе работы результаты внедрены в учебный процесс на кафедрах общей, биоорганической и биологической химии, клинической лабораторной диагностики ФДППО и гигиены с курсом экологии Ивановской государственной медицинской академии.

Обьем и структура диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах, содержит-11 таблиц и 13 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, библиографического указателя цитируемой литературы, включающего 207 отечественных и 67 иностранных источников.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При введении свинца происходят изменения функционального состояния и эритроцитов, выражающиеся в повышении интенсивности перекисного окисления липидов, процессов фосфолиполиза, снижении антиоксидантной активности, нарушении энергетического обмена, что наряду с угнетением активности ферментов синтеза гема приводит к ускоренной деструкции клеток и впоследствии к возникновению анемии.

2. Совместное присутствие свинца и этанола приводит к усилению наблюдаемых эффектов, обусловленному более ранней декомпенсацией развивающихся изменений.

Материалы и методы исследования.

Работа была проведена на 120 белых беспородных крысах-самках, массой 220 - 280 г. Перед началом и во время эксперимента все животные находились на одинаковом сбалансированном рационе питания, обогащенном витаминами. За время эксперимента масса животных практически не изменялась. Выбор данного вида лабораторных животных был обусловлен имеющимися в литературе данными об адекватности преобразований системы красной крови крыс организму человека.

Все животные были разделены на 3 группы: 1-ой вводили 5% водный раствор ацетата свинца в дозе 0,05 мг/кг массы в пересчете на чистый металл (Беляева Н.Н. с соавт., 1994); 2-ая группа подвергалась комплексному воздействию ацетата свинца и спирта и получала 15% спиртовой раствор ацетата свинца из расчета 3 г этанола/кг массы животного и 0,05 мг свинца (в пересчете на чистый металл) также на кг массы животного; растворы вводились животным внутрижелудочно ежедневно в течение 2 месяцев. 3-ю группу составили интактные животные. Помимо этого для оценки изолированного действия спирта были проведены специальные исследования на 20 крысах, которые ежедневно получали этиловый спирт в дозе 3 г/кг массы в течение 2 месяцев.

В конце 1и 2 месяцев у животных забиралась кровь из подъязычной вены, в которой исследовались гематологические и биохимические показатели. Для предотвращения свертывания капилляры и пробирки промывались гепарином (5000 МЕ/мл), разведенным дистиллированной водой в соотношении 1:5 и высушивались.

Для проведения биохимических исследований забранная гепаринизированная кровь центрифугировалась при 3000 об/мин в течение 15 мин при 0 °С. Полученная

эритроцитарная масса трижды отмывалась физиологическим раствором в соотношении 1:3 и использовалась для проведения последующих исследований.

Ряд показателей определялся в мембранах клеток, которые выделялись из ге-молизата эритроцитов путем центрифугирования при 15 000 об/мин в течение 20 мин. В качестве гемолитика использовалась дистиллированная вода в соотношении 1:7 по объему.

Оценка состояния мембран эритроцитов проводилась по результатам определения содержания фосфолипидов и холестерина, методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Сорбитол» с последующим подсчетом площадей треугольников (S =ах Vi h) на лентографической записи, полученной на денситометре «Биан-170». Содержание холестерина и фосфолипидов выражалось в условных единицах . Для оценки микровязкости липидов мембран эритроцитов рассчитывался коэффициент соотношения количества холестерина и фосфолипидов (Ростовцев В.Н., Резник Г.И., 1982).

Об интенсивности процессов перекисного окисления липидов судили по определению малонового диальдегида (ШЛА) методом Yagi К. (1976), основанном на образовании комплексного соединения МДА с 2-тиобарбитуровой кислотой, интенсивность окраски которого определялась спектрофотометрически при длине волны 532 им.

Состояние антиоксндантной системы оценивалось по определению:

• суммарной антиокислительной активности мембран эритроцитов (A.L Timiti, D.L.,Dormandy T.U.,1977 в модификации М.Ш. Промыслова, Д.Л.Демчук,1990) по определению разницы МДА до и после инкубации в присутствии ионов Fe2+ и лино-левой кислоты;

• активности супероксиддисмутазы (СОЛ) в мембранах эритроцитов по методу С.Чевари (1991), основанному на способности СОД конкурировать с нитросиним тетразолием за супероксидные анионы, образующиеся в результате взаимодействия восстановленной формы НАД и феназинметасульфата. Активность выражалась в % торможения реакции, которая рассчитывалась по калибровочной кривой;

• активности каталазы, определяемой по методу Aebi H. (1970), принцип которого основан на способности фермента разрушать в нейтральной среде перекись водорода до молекулярного кислорода и воды. Убыль содержания Н2О2 измерялась спектрофотометрически при длине волны 240 нм. Активность фермента выражалась в единицах активности на 1 мг гемоглобина в секунду.

Для анализа механизмов наблюдаемых изменений свойств мембраны также исследовались:

• активность фосфолипазы A2 по методу Безруковой Г.А и Рубина В.И.(1989),

• концентрация внутриэритроиитарного кальция с помощью набора реактивов Cormay calcium-240 фирмы "Cormay" (Польша).

Для оценки степени связывания ионов свинца с мембранными структурами нами использовалось определение электрофоретической подвижности (ЭФП) клеток как функции заряда мембраны, характеризующей ее состояние. Измерения ЭФП проводились по методу Смирнова С.Г., Голубева О.А., (1965) в нашей модификации (патент № 2199733 от 27.02.03), основанному на определении скорости перемещения

клетки в поле зрения окуляра микроскопа. На впаянные в камеру Горяева платиновые электроды, подавался ток от генератора низких частот (0,1-1 Гц); при этом каждая клетка перемещалась параллельно оси измерения окуляра пропорционально заданной частоте с амплитудой, определяемой собственным зарядом. Для каждого образца проводились измерения электрофоретической подвижности 100 клеток, по результатам которых вычислялись средние показатели амплитуды колебаний эритроцитов, выражающейся в мкм/сек.

О состоянии энергетического обмена судили по определению:

• компонентов адениловой системы методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Silufol -UV-254» (Захарова Н.Б., Рубин В.И., 1980). Количественное определение АТФ, АДФ, АМФ проводилось спектрофотометрически, учитывая, что аденин и его производные в разбавленной соляной кислоте имеют максимум поглощения при 257 нм. Для исключения поглощения неспецифическими примесями измерения проводились также при 290 нм.

Количество нуклеотидов рассчитывалось по формуле:

(Е 257 - Егх) х Розе- х 3

---, где

14,2 х 0,02

Е 257 - эклинкпщ опытной пробы при длине волны 257 нм; Е 290 - эксшнкпця опытной пробы при длине волны 290 нм; 14,2 - коэффициент пересчета в единицы системы СИ; 0,02 - объем наносимой пробы; Разе. -разведений

• величины аденилатного энергетического заряда (A3) (Atkinson D.E., 1977), рассчитываемого по формуле:

A3 = (АТФ+ШАДФ) / (АТФ+АДФ+АМФ)

• содержания 2.3-дифосфоглииерата (2.3-ДФГ) в эритроцитах по методу S. Rapoport в модификации Шаровой ЮА. с соавт., основанному на взаимодействии 2,3-ДФГ с нафторезорцином;

• концентрации молочной кислоты методом Hohorst H.J. в модификации Ещен-ко Н.Д.(1982) по образованию в ходе лактатдегидрогеназной реакции восстановленной формы НАД, эквимолярной количеству окисленного лактата и регистририруе-мой спектрофотометрически при длине волны 340 нм.

• - активностиЛ'я и - зависимых А ТФаз по нарастанию неорганического фосфора в среде, содержащей АТФ и соответствующие катионы в отсутствие уа-баина и при его добавлении, определяемому по методу Lowry О., Lopez J.(1946) в модификации Скулачева В.ГЦ1962).

Состояние эритропоэза исследовалось с помощью показателей, характеризующих как периферическое, так и центральное звено эритрона.

Общепринятыми гематологическими методами, используемыми в клинической лабораторной диагностике, определялось количество эритроцитов (10 Т/л), содержание гемоглобина (г/л) гемоглобинцианидным методом, число ретикулоцитов (в %о на 1000 клеток) в мазках, окрашенных бриллиантовым крезиловым синим, среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг) и цветной показатель (Люблина

А.Я., Ильичева Л.П., Катагонова Т.В., 1984). Полученные результаты давали возможность оценить состояние периферического звена эритрона.

О состоянии центрального звена эритрона судили по исследованию эритробла-стических островков красного костного мозга, выделенных из бедренных костей животных.

Морфологический анализ эритробластических островков проводился по методу, разработанному А.Г. Рассохиным (1985), заключающемуся в том, что 0,1 мл взвеси (гомогенат в среде выделения) помещался на покровное стекло, центрифугировался при 2000 об/мин, в течении 10 мин., затем мазок фиксировался в метаноле и окрашивался азур-эозином. Высушенный препарат рассматривался на предметном стекле под микроскопом с объективом х90 и окуляром х10. Расчет эритробластических островков (ЭО), распределяемых по 5 классам (ЭО I, II, III классов, реконструирующиеся (ЭОрек) и инволюциирующие островки (ЭО инв), производился в процентах от общего их числа (Захаров Ю М., Мельникова И.Ю., Рассохин А.Г., 1990).

Для оценки функциональной активности костного мозга и интенсивности эяитропоэза вычислялись следующие показатели (Воргова Л.В.,Захаров Ю.М., 1990):

•показатель вовлечения колониеобразующих единиц эритропоэза (КОЕэ), являющихся популяцией стволовых кроветворных клеток, способных к дифференцировке во всех направлениях гемопоэза, в дифференцировку (ПВ-КОЕэ-Д): ПВ-КОЕэ-Д =ЭО1 +ЭОрек.

• показатель повторного вовлечения макрофага в эритропоэз (ППВ-Мф-Э):

ППВ-Мф -Э = ЭОрек/ЭОинв

• показатель созревания нормобластов в эритробластических островках (ПС): ПС =(ЭОП +Эоинв) / (ЭО1+ЭОП+ЭОрек).

Статистическая обработка результатов проводилась с помощью системы электронных таблиц Microsoft Excel 98, версия 7,0. Достоверность разницы параметрических величин, исследуемых в динамике, определялась с помощью критерия t Стью-дента. При этом различия считались статистически достоверными при р<0,05 (Лакин Г.Ф.,1980).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

По современным представлениям причиной дестабилизации клеточных мембран могут быть два биохимических механизма: активация перекисного окисления липидов (ПОЛ) и усиление процессов фосфолиполиза, способные как в сочетании друг с другом, так и каждый в отдельности приводить к изменениям мембран и повышению их проницаемости (Болдырев А.А., 1986).

Проведенные нами исследования показали, что в группе животных, подвергнутых изолированному действию ацетата свинца через 1 мес. от начала эксперимента содержание МДА значительно превысило уровень интактной группы животных; при увеличении сроков затравки до двух месяцев отмечалось снижение концентрации МДА, не достигающей, однако, уровня контрольной группы животных.

При сочетанном введении ацетата свинца и этанола концентрация МДА через 1 мес. от начала эксперимента повысилась в значительно меньшей степени, но в отличие от группы животных, подвергнутых изолированному действию свинца, через 2 мес. количество МДА продолжало оставаться повышенным и даже имело

2 мес. количество МДА продолжало оставаться повышенным и даже имело тенденцию к дальнейшему росту (таблица 1).

Таблица 1

Содержание МДА (нмоль/л) и уровень антиоксидантной защиты (%) в мембранах эритроцитов под влиянием ионов РЬ2+ и комбинированном воздействии

свинца и спирта

Показатель интактные животные п=Ю PbJ' РЬ;*+С2Н5ОН

1 мес. п=10 2 мес. п=10 1 мес. п=10 2 мес. п=10

МДА, М±т % к контролю 0,66±0,03 2,45±0,38* 371% 0,97±03* 147% 0,77±0,04 116% 0,92±0^2* 139%

Общая антиоксид антная защита, %, М±ш % к контролю 68,13±0,77 61,89±U8* 90% 64,24:12,37 94% 63,58±3,08 93% 62,50±0 Л* 92%

Примечание: * - достоверность изменений по сравнению с контролем (р <0,05)

Как известно, в поддержании интенсивности ПОЛ на стационарном уровне важная роль принадлежит антиоксидантной системе (АОС). Определение общей антиоксидантной активности выявило ее снижение в эритроцитах обеих групп исследуемых животных. Так, через 1 мес. от начала введения свинца она уменьшилась с 68,13±0,77% до 61,89±1,38%, а при продолжении эксперимента, к концу второго месяца составила 64,24±2,37% (р <0,05).

В группе животных, подвергнутых комбинированному воздействию свинца и этанола, общая антиоксидантная активность также уменьшилась по сравнению с ин-тактными животными: через 1 мес. она составила 63,58±3,08%, а через 2 мес. -62,50 ± 0,21% (р<0,05).

По нашему мнению, данные изменения обусловлены, в основном, уменьшением активности супероксиддисмутазы, стимулирующей дисмутацию свободных радикалов кислорода до перекиси водорода и молекулярного кислорода. Так, в группе животных, подвергнутых изолированному действию свинца, было выявлено снижение процента блокирования восстановления НСТ супероксиддисмутазой мембран эритроцитов почти в 1,5 раза (до 35,45±2,37% и 30,76± 1,18% в конце 1-го и 2-го месяца соответственно) по сравнению с интактными животными (51,36±4,13%; р<0,05), что свидетельствует о нарушении антиоксидантной защиты. Подобные изменения активности СОД в эритроцитах были отмечены нами и при сочетанном воздействии свинца и этанола, однако они были выражены в меньшей степени (40,03±2,14% и 43,75±3,17% в конце 1-го и 2-го месяца соответственно).

Можно полагать, что снижение активности этого фермента обусловлено непосредственным действием свинца, способного вытеснять ионы цинка из металлопро-теинов, а следовательно, и из активного центра СОД, являющейся 2л12+- содержащим ферментом (Авцын А.П. с соавт.,1991).

В результате низкой активности СОД в мембранах эритроцитов животных, подвергнутых свинцовой интоксикации, появляется избыточное количество супероксидных анионов, действие которых усиливается в результате инициирования цепной реакции образования свободных радикалов. Их накопление приводит к нарушениям в клетках вследствие повреждения и инактивации ферментов и окисления

SH-групп белков (Bannester S.V., Allen H., Hell О., 1982, Fridovich J.,973,Heynen M.J.eL al.f 1987).

По-видимому, нарушением дисмутации свободных радикалов до перекиси водорода можно объяснить и тот факт, что при определении активности каталазы, расщепляющей образующиеся в ходе пероксидации избыточные количества перок-сида, не было обнаружено ее повышения, а наоборот, через 1 месяц после начала эксперимента в группе животных, подвергнутых изолированному действию свинца она была несколько снижена (10,07+0,33 усл. ед/л, р>0,05), однако через 2 месяца активность фермента практически не отличалась от уровня контрольных животных (12,93+0,32 усл.ед./л против 12,22+0,57 усл. ед/л соответственно, р>0,05). Вместе с тем, нельзя отрицать и возможности нарушения биосинтеза фермента, так как ката-лаза является гемсодержащим энзимом, а образование гема, как известно, ингибиру-ется даже малыми дозами свинца (Трахтенберг И.М.С соавт.,1994).

При совместном действии свинца и этанола активность каталазы также оставалась практически без изменений: 12,12+0,46 и 11,28+0,85 усл.ед/л через 1 и 2 месяца эксперимента соответственно (р>0,05).

Таким образом, можно полагать, что механизмы действия свинца, как при изолированном введении, так в комбинации с этанолом на клеточные мембраны сходны и заключаются в индуцировании свободных радикалов, вызывающих стимуляцию перекисного окисления липидов.

В свою очередь усиление процессов пероксидации не могло не отразиться на содержании фосфолипидов, входящих в состав билипидного слоя эритроцитарных мембран. Так, через 1 мес. от начала эксперимента в эритроцитах животных, получавших свинец, количество фосфолипидов снизилось с 110,70+9,95 до 79,37+4,32 усл. ед. (72,15% по сравнению с исходным уровнем, р<0,05); однако через 2 мес. оно восстановилось и практически достигло первоначального уровня-111,97+ 1,34 (таблица 2). Расчет коэффициента корреляции между содержанием фосфолипидов и малонового диальдегида выявил прямую корреляционную зависимость между изменениями этих показателей (r = 0,32).

Несколько иная картина изменений в липидном составе мембраны эритроцитов была отмечена нами у той группы животных, которая подвергалась сочетанному воздействию свинца и этанола. Так, содержание фосфолипидов в мембранах эритроцитов через 1 мес. от начала эксперимента составило 73,57+6,30 усл. ед. (66%), а через 2 мес - 80,51+5,65 (74%), (в норме-110,70+9,95). Большая выраженность наблюдаемых изменений в данной группе животных по сравнению с животными, получавшими лишь свинец, по-видимому, обусловлена тем, что избыточное поступление этанола в организм понижает содержание полиненасыщенных жирных кислот в составе фосфатидилхолинов и фосфатидилэтаноламинов эритроцитарных мембран (Соловьев А.Г., Дегтева Г.Н. и др., 1993).

Однако уменьшение содержания фосфолипидов могло быть обусловлено не только повышением интенсивности перекисного окисления липидов, как было отмечено выше, но и усилением процессов фосфолиполиза. И, действительно, определение активности эритроцитарной фосфолипазы А2 в группе животных, подвергнутых изолированному действию свинца, выявило ее статистически достоверное повышение к концу 1-го месяца от начала введения свинца на 29% (0,80+0,01 усл. ед. про-

тив 0,62±0,01 усл. ед. в контрольной группе, р <0,05) и на 21% (0,75±0,01 усл.ед., р<0,05) в конце 2-го месяца эксперимента (таблица 2).

Можно полагать, что активация данного энзима, в свою очередь, приводит к нарушению соотношения отдельных фосфолипидных фракций, в частности, к накоплению лизофосфатидилхолинов, способных повышать мембранную проницаемость (Чернецкий ЕЛ., 1991), а также к увеличению концентрации свободных жирных кислот, обладающих выраженным мембранотропным действием детергентоподобного характера, что в еще большей степени дестабилизирует мембрану (Антипов А.О.,1987).

Таблица 2

Изменения липидного состава мембран эритроцитов белых крыс при введении _свинца и при его сочетанном воздействии с этанолом_

Показатель

интактные животные п=10

РЬ"

1 мес. п=10

2 мес. п=10

Pb-'+CjHjOH

1 мес. п=10

2 мес. п=10

Содержание усл. ед., М±т % к контролю

фосфолипидов,

110,7±9,95

79,37±4>32* 72%

111,97±1,34 101%

73,57±6,30* 66%

80,51 ±5,65* 74%

Содержание холестерина, усл. ед., М±т

% к контролю_

268,09± 9,32

250,50±7,57 93%

381,09±24,53* 142%

176,57±13,54* 66%

306,26±5,63 114%

Коэффициент холестерин/ фосфолиподы, % к контролю

2,43

3,15* 129%

3,40« 135%

2,40 98%

3,80* 156%

Активность фосфолипазы А^ усл. ед. М±т

% к контролю_

0,62 ±0,01

0,80±0,01* 129%

0,75± 0,01* 121%

0,7910,07* 127%

0,75 ±0,09* 121%

Примечание: * - достоверность изменений по сравнению с контролем (р <0,05)

Вместе с тем, приведенные выше изменения количества фосфолипидов не могут полностью охарактеризовать состояние мембран, так как не менее важная роль в поддержании их структуры принадлежит холестерину, который, как известно, обладает выраженным мембраностабилизирующим эффектом (Shinva S. et al.,1978).

Исследование содержания холестерина в составе эритроцитарных. мембран при изолированном действии свинца выявило также его уменьшение в конце первого месяца эксперимента, однако снижение данной фракции произошло на меньшую величину, чем фосфолипидов - с 268,09±9,32 до 250,50±7,57 усл. ед. (93% относительно контрольной группы, р>0,05). Несмотря на то, что снижение концентрации холестерина было незначительным, нам представляется, что данный факт способствует дестабилизации эритроцнтарной мембраны, возникающей через 1 месяц после начала введения свинца. Дальнейшие исследования показали, что через два месяца количество холестерина в эритроцитарной мембране не только не уменьшилось, но даже возросло до 381,07±24,53 усл. ед.(142%).

Хотя увеличение содержания холестерина в мембране повышает толерантность последней к оксидантному стрессу, защищает эритроцит от пероксидации и в конечном итоге препятствует гемолизу, нам представляется, что такие изменения вряд ли можно рассматривать как стабилизирующие, так как при этом ухудшаются вязко-эластические и реологические свойств красных клеток крови.

При комплексном воздействии свинца и этанола содержание холестерина через 1 месяц после начала эксперимента было снижено до 66% по сравнению с контрольной группой (176,57+13,54 усл. ед. и 268,09+9,32 усл. ед. соответственно, р<0,05), однако через 2 месяца превысило уровень интактных животных, но в меньшей степени (114%), чем при изолированном введении металла.

Расчет коэффициента холестерин/фосфолипиды (Арчаков АН. ,1972) выявил его повышение при изолированном введении свинца на протяжении всего исследования (3,15 и 3,40); при комбинированном же действии свинца и этанола в течение первого месяца эксперимента микровязкость мембран эритроцитов не отличалась от интактных животных, но к концу второго месяца увеличилась до 3,80 (156%), что даже превысило цифры, полученные при изолированном введении металла.

Сопоставляя полученные данные, можно сделать заключение о том, что в ранние сроки спирт препятствует проявлению мембранотропного действия свинца, однако при более продолжительном их совместном введении в организм он в еще большей степени нарушает свойства мембран, увеличивая их микровязкость, что затрудняет микроциркуляцию, снижает активность мембраносвязанных ферментов, и в конечном итоге сокращает продолжительность жизни эритроцита.

Отражением повреждающего действия ионов свинца на мембранные структуры клеток крови служит снижение электрофоретической подвижности эритроцитов (ЭФП), выявленное при введении ионов металла в организм (рис.1). Исследуемый параметр характеризует электрокинетический потенциал, возникающий за счет притяжения отрицательно заряженной поверхностью клетки противоионов из окружающей среды, которые под действием электростатических сил прочно связываются с ее поверхностью. Таким образом, по изменениям ЭФП как функции характеризующей состояние собственно мембраны, можно судить о происходящих в клетке изменениях.

Как видно из рисунка, через 1 месяц от начала эксперимента были зафиксированы изменения ЭФП эритроцитов, выражающиеся в снижении процента клеток с наибольшей амплитудой колебаний и, в целом, сдвиге максимума кривой с 9,2мкм/сек., которая была выявлена при измерении ЭФП интактных животных, до 6,5мкм/сек. Отмеченные изменения в данном случае можно объяснить тем, что свинец, обладающий ярко выраженным мембранотропным действием, связывается с сульфгидрильными группами белков на поверхности клетки, снижая тем самым, пластичность мембраны и ее резистентность.

Для доказательства непосредственного воздействия свинца на поверхностные структуры эритроцитов нами были проведены измерения ЭФП в эритроцитах в условиях in vitro, в которых раствор свинца добавлялся к взвеси эритроцитов, выделенных из крови интактных животных. Эти исследования выявили аналогичное, как и в условиях in vivo, снижение данного показателя, однако выраженное в значительно большей степени - с 9,2 до 4,4мкм/сек.

Анализируя полученные результаты, можно полагать, что меньшая степень изменений ЭФП эритроцитов, выделенных их крови животных, получавших свинец, по сравнению с опытами in vitro обусловлена тем, что на начальной стадии воздействия компенсаторно увеличивается продукция молодых эритроцитов, обладающих

большей подвижностью, в результате чего повышается число клеток с максимальной амплитудой колебания (Баширова Р.Н., Гареев Е.М., Киреева НА,1998).

Рис.1. Изменение электрофоретической подвижности эритроцитов при действии свинца.

Ряд 1 - электрофоретическая подвижность эритроцитов при свинцовой интоксикации в условиях действия свинца in vitro.

Ряд 2 - электрофоретическая подвижность эритроцитов животных через 1 месяц после начала введения свинца.

Ряд 3 - электрофоретическая подвижность эритроцитов группы интактных животных

Таким образом, выявленное снижение ЭФП эритроцитов животных, подвергнутых изолированному воздействию свинца, подтверждает непосредственное повреждающее действие ионов металла на мембранные структуры эритроцитов.

Обнаруженные изменения в структуре мембран эритроцитов не могли не отразиться как на продолжительности жизни клеток в целом, так и на их функциональной активности, которая, прежде всего, зависит от состояния механизмов образования и утилизации энергии.

Как известно, ключевое положение в энергетическом обмене, протекающем в клетках, занимают адениловые нуклеотиды. Как показали проведенные исследования, в эритроцитах животных, получавших свинец в течение одного месяца, содержание адениловых нуклеотидов изменялось незначительно: концентрация АТФ снизилась на 14% по сравнению с интактными животными (0,169+0,012 против 0,196+0,016 мкмоль/мл соответственно, р<0,05) при практически неизменном содержании АДФ (0,140+0,018 и 0,151+0,005 мкмоль/мл) и АМФ (0,135+ 0,029 и 0,138+ 0,012 мкмоль/мл). Расчет аденилатного энергетического заряда выявил уменьшение его величины, что свидетельствует о преобладании энергопродуцирующих процессов над энергопотребляющими. Однако интенсивность их, по-видимому, не в состоянии полностью компенсировать развивающуюся энергетическую недостаточность.

Анализируя причины наблюдаемых изменений, можно полагать, что снижение концентрации АТФ могло быть результатом, прежде всего, понижения интенсивно-

сти анаэробного гликолиза - основного энергопоставляющего процесса. Однако при определении количества молочной кислоты как результирующего показателя интенсивности протекания процесса в целом, наблюдалось некоторое увеличение ее содержания в этой группе крыс до 111% относительно группы интактных животных (0,693+0,037 и 0,622+0,066 мкмоль/мл соответственно, р<0,05), что не позволило подтвердить высказанное ранее предположение об угнетении гликолиза.

Уменьшение содержания АТФ в эритроцитах в этих условиях могло быть обусловлено также и изменением интенсивности 2,3-дифосфоглицератного шунта, специфичного для данных клеток. Прохождение глюкозы по этому пути приводит также к образованию двух молекул лактата на каждую потребленную молекулу глюкозы, однако в конечном итоге продуцируется лишь одна молекула АТФ в результате пи-руваткиназной реакции, а свободная энергия, обусловленная наличием высокоэнергетического фосфата в молекуле 2,3-дифосфоглицерата, рассеивается в виде теплоты (Гольдберг Е.Д.,1987). Поэтому образование АТФ в эритроцитах в условиях опыта зависит от того, насколько велико количество потребленной глюкозы, которое используется для образования 2,3-ДФГ.

И действительно, определение содержания 2,3- дифосфоглицерата в эритроцитах животных, подвергнутых воздействию свинца, выявило его существенное повышение (5,81+0,15 против 4,10+0,21 мкмоль/мл интактной группы животных).

Можно полагать, что наблюдаемые изменения содержания 2,3-ДФГ носят компенсаторный характер, так как известно, что данный макроэрг понижает сродство гемоглобина к кислороду и способствует более быстрой диссоциации оксигемог-лобина в тканях, улучшая их оксигенацию в условиях развивающейся гипоксии. Данный механизм не вызывает значительных энергозатрат и изменяет лишь функциональные свойства гемоглобина.

Несколько иная направленность изменений содержания адениловых нуклеоти-дов была выявлена в эритроцитах животных, подвергнутых в течение месяца соче-танному воздействию свинца и этанола (табл.3).

Таблица 3

Показатели энергетического обмена в группах экспериментальных и контрольных животных через 1 месяц после начала эксперимента

АТФ, мкмоль/мл, М±т % к контролю

0,19610,016

0,169± 0,012* 86%

0,16810,025« 85%_

АДФ, мкмоль/мл, М±ш % к контролю_

0,15110,005

0,14010,180 93%

0,2031 0,047« 135%_

АМФ.мкыоль/мл, М±т % к контролю_

0,13810,012

0,13510,029 98%_

0,2601 0,043« 188%

Аденилатный заряд, A3 % к контролю_

0,56

0,53 94%

0,42 75%

Содержание 2,3-ДФГ, мкмоль/мл М±ш % к контролю

4,1010,21

Активность Na*,K*- АТФ-азы, мкмоль Р^мгбелка X 10"", М±ш

% к контролю

5,8110,15* 141%

63210,18* 154%_

41,1213,96

34,1012,40* 83% _

29,0512,81« 70%_

Активность Ca"- АТФ-uu, мкмоль Р. /мгбелка X 10"", Mim

% к контролю_

75,8315,54

62,071 3,46* 82«/.

57,1112,92« 75%

Примечание: * • достоверность изменений по сравнению с контролем, р<0,05.

Так, содержание АТФ в эритроцитах снижалось практически на такую же величину, что и при изолированном действии металла, составляя 0,168±0,025 против 0,196±0,016 мкмоль/мл (85%) у интактных животных. Наряду с этим, количество АДФувеличилось на 35% (0,203±0,047 по сравнению с 0,151±0,005 ммоль/мл в контрольной группе), а содержание АМФ возросло на 188% (0,260±0,043 против 0,138±0,012 соответственно). В еще большей степени повысилось в эритроцитах и содержание 2,3-ДФГ (до 6,32±0,18 мкмоль/мл). Величина аденилатного энергетического заряда понизилась в большей степени по сравнению с животными, получавшими только свинец, и составила 75% по сравнению с уровнем интактных животных. Это свидетельствует о более глубоких нарушениях энергопродуцирующих процессов при сочетанном введении свинца и спирта.

Однако наряду с недостаточностью энергопродукции в обеих группах экспериментальных животных отмечались нарушения и энергопотребляющих процессов. Учитывая, что затраты энергии в эритроцитах обусловлены главным образом транспортом ионов через эритроцитарную мембрану и поддержанию в них постоянного содержания последних, вполне понятно, что недостаточность энергосинтезирующих процессов и уменьшение содержания АТФ в эритроцитах должны были, прежде всего, отразиться на активности транспортных АТФ-аз. Благодаря тому, что активность последних зависит как от энергетических запасов клетки, так и от липидного микроокружения и наличия в молекуле энзима SH-групп, данные ферменты обычно воспринимаются в качестве своеобразного связующего звена между структурой и функцией мембраны (Болдырев А. А., 1986).

Определение активности №+,К+-зависимой- и Са^-зависимой АТФ-азы в эритроцитах животных экспериментальных групп выявили их существенное понижение (табл.3).

Свинец, адсорбируясь на мембране эритроцитов, блокирует активные центры нарушая баланс между транспортируемыми ионами вследствие чего, возникают такие необратимые последствия как:

накопление ионов натрия в эритроцитах, сопровождающееся повышением осмотического давления, и приводящее к дальнейшему снижению резистентности мембран;

понижение содержания ионов калия, усугубляющее гипоксическое состояние и нарушения метаболизма клетки в целом;

уменьшение мембранного потенциала, обеспечивающего функциональную активность эритроцитов.

Снижение активности Са2+-зависимой АТФ-азы, противостоящей накоплению этого катиона за счет активного транспорта Са2+ из эритроцитов в плазму, сопровождалось появлением в эритроцитах пассивной катионной проницаемости и статистически достоверным накоплением в них ионов кальция (316,1±29,4 мкмоль/л по сравнению 207,3+15,2 мкмоль/л у интактных животных,р<0,05).

В свою очередь, изменение содержания приводят к активации фосфоли-пазы и, тем самым, к интенсификации фосфолиполиза. Прямая корреляция, установленная между концентрацией внутриклеточного кальция и уровнем активности фос-фолипазы эритроцитов выявила опосредованный характер активации

этого энзима и позволила установить возможную последовательность биохимиче-

ских изменений, дестабилизирующих мембрану (рис.2).

понижение содержания АТФ |

проницаемости эритроцитов

повышение мембранной

угнетение трансмембранных процессов

гидролиз фосфолипидов

активация ПОЛ

вход Са2+ в эритроциты

активация ♦ фосфолипазы Аг

Рис.2. Последовательность биохимических изменений функциональных свойств мембран эритроцитов при свинцовой и смешанной свинцово-алкогольной интоксикации.

Вполне очевидно, что в ответ на развивающиеся нарушения внутри эритроцитов должен адекватно отреагировать красный костный мозг, компенсируя наблюдаемые изменения путем увеличения массы циркулирующих эритроцитов за счет усиления их продукции в костном мозге. Для выяснения этого механизма нами были проведены исследования центрального и периферического звеньев эритрона.

Так, у животных, подвергавшихся изолированному действию свинца в течение одного месяца, отмечалось повышение числа эритроцитов при практически неизменном содержании гемоглобина, снижение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците и цветного показателя на протяжении всего времени эксперимента, появление выраженного ретикулоцитоза. Учитывая последний фактор, нельзя исключить участия центрального звена эритрона в генезе наблюдаемых изменений, что и показал морфологический анализ состава клеток красного костного мозга (ККМ).

В течение всего времени эксперимента в группе животных, подвергнутых изолированному действию свинца, наблюдалось снижение содержания из короны которых и происходит вымывание ретикулоцитов. В свою очередь, интенсивное освобождение молодых клеток из стромы костного мозга отразилось на снижении показателя созревания (ПС), что свидетельствовало о сокращении периода активных гемоглобинсинтетических процессов. Наряду с этим, интенсификация синтеза гемоглобина в данном случае невозможна вследствие ингибирования свинцом ферментов синтеза гема (Трахтенберг И.М., 1994).

При выявлении механизмов развития эритроцитоза было обнаружено расширение плацдарма кроветворения в костном мозге, подтверждаемое увеличением значения показателя вовлечения КОЕэ в процессы дифференцировки. Нам представляется возможным рассматривать наблюдаемые изменения как компенсаторно-приспособительную реакцию центрального звена эритрона. Однако через два месяца эксперимента отмечалось еще большее снижение цветного показателя и среднего содержания гемоглобина в одном эритроците, повышение показателя вовлечения

КОЕэ в процессы дифференцировки, что свидетельствует об истощении компенсаторно-приспособительных возможностей системы красной крови.

При изолированном введении этилового спирта характер изменений в целом носил ту же направленность, что и при изолированном действии свинца, однако они были выражены в большей степени.

В группе животных, подвергавшихся комбинированному действии свинца и этанола угнетение гемоглобинсинтезирующих процессов выражалось в большей степени и отмечалось уже к концу первого месяца эксперимента. Это нашло свое отражение в более резком снижении среднего содержания гемоглобина в одном эритроците и большей степени ретикулоцитоза. Одновременно увеличилось число ЭОрек, однако, расширения плацдарма кроветворения, как при изолированном действии свинца и спирта, не происходило - показатель повторного вовлечения коло-ниеобразующих единиц в дифференцировку достоверно не отличался от уровня ин-тактных белых крыс. Все это свидетельствовало об истощении компенсаторных возможностей системы эритрона.

Таким образом, проведенные исследования мембран эритроцитов в совокупности с анализом изменений, протекающих в периферическом и центральном звеньях системы эритрона, позволяют дополнить имеющиеся представления о механизмах развития анемии при поступлении свинца в организм, а также показывают необходимость своевременной диагностики, раннего выявления и тщательного лечения свинцовой интоксикации до полного восстановления функциональных свойств красных клеток крови.

Выводы.

1. При введении в организм малых доз свинца в мембране эритроцитов стимулируются процессы перекисного окисления липидов и фосфолипилиза, понижается ан-тиоксидантная активность, что приводит к увеличению коэффициента холесте-рин/фосфолипиды и повышает микровязкость мембран.

2. Отражением повреждающего действия свинца является снижение электрофоре-тической подвижности эритроцитов, свидетельствующее о непосредственном связывании ионов металла мембранными структурами.

3. Изменение функциональных свойств мембран при введении свинца сопровождается нарушениями энергетического обмена в эритроцитах, выражающимися в понижении содержания АТФ и величины аденилатного энергетического заряда, что отражается на активности На+,К+- и Са^-зависимых АТФ-аз. Одновременно отмечается активация 2,3 - дифосфоглицератного шунта, имеющая компенсаторное значение в условиях развивающейся гипоксии.

4. При сочетанном воздействии свинца и этанола наряду со схожей направленностью изменений структурно-функциональных свойств мембраны и энергетического обмена, отмечается большая выраженность и наступление более быстрой декомпенсации наблюдаемых трансформаций.

5. Как при изолированном воздействии свинца, так и при его совместном присутствии с этанолом происходят изменения периферического и центрального звеньев эритрона, выражающиеся в раздражении эритроидного ростка красного костного мзга, расширении плацдарма кроветворения и продукции гипохромных эритроцитов.

Однако совместное введение свинца и этанола приводит к более раннему раздраже- |

нию центрального отдела эритрона и к более быстрому истощению механизмов (

компенсации. !

)

Список опубликованных работ по материалам исследований (

1. Стародумов В.Л., Горбунов В.А., Егорова Н.Г. Механизм действия свинца как ' экотоксиканта в комбинации с этанолом // Окружающая среда и здоровье челове- | ка. Иваново. 1998. стр.20-23.

2. Егорова Н.Г., Горбунов В.А., Слободан В.Б. Влияние свинца и этанола на струк- ,' турно-функциональное состояние мембран эритроцитов белых крыс // Актуаль- / ные проблемы теоретической и прикладной биохимии".Челябинск. 1999.стр.46-48. }

3. Мочалова Н.Г., Голубев О А., Кузнецов О.Ю., Слободан В.Б. Изучение неравновесных систем эритроцитов с помощью электрофореза при свинцовой интоксикации в эксперименте // Материалы 6-ой Международной конференции "Молекулярная биология, химия и физика неравновесных систем". Иваново. 2002. стр. 4648.

4. Мочалова Н.Г., Голубев О.А., Кузнецов О.Ю., Слободан В.Б. Способ измерения J электрофоретической подвижности биологических микрообъектов// Изобретения \ и полезные модели.Москва.2003.№6 (Ич). С.405. \

5. Мочалова Н.Г., Голубев ОА, Кузнецов О.Ю., Слободин В.Б. Патент на изобрете- ' ние "Измерение электрофоретической подвижности биологических объектов" | №2199733 от 27.02.03.

в- 57 6 5

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мочалова, Нина Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Влияние свинца на организм

1.1.1. Свинец как неблагоприятный экологический фактор.

1.1.2. Поступление, депонирование и выведение свинца в организме человека.

1.1.3. Механизмы токсичности свинца.

1.1.4. Особенности влияния свинца на систему кроветворения.

1.2. Особенности строения и функционирования эритроцитов.

1.2.1. Особенности структуры эритроцитов.

1.2.2. Перекисное окисление липидов в эритроцитах.

1.2.3.Особенности энергетического обмена в эритроцитах.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Методы оценки состояния мембран эритроцитов.

2.1.2. Методы оценки состояния энергетического обмена эритроцитов.

2.2. Гематологические методы исследования.

2.3 Статистическая обработка полученных результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА III. Изменение структурно-функциональных свойств мембран эритроцитов под действием свинца.

3.1 Состояние ПОЛ и антиоксидантной защиты мембран эритроцитов.

3.2 Изменение липидного состава мембран эритроцитов.

З.З.Электрофоретическая подвижность эритроцитов при свинцовой интоксикации.

ГЛАВА IV. Особенности энергетического обмена в эритроцитах при свинцовой интоксикации.

ГЛАВА V. Изменение показателей красной крови крыс на фоне свинцовой интоксикации и сочетанного действия свинца и алкоголя.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ

ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом"

Актуальность исследования

Современную токсикологическую обстановку в промышленно развитых странах следует расценивать как экологически опасную для здоровья, о чем свидетельствуют многочисленные публикации в отечественной и зарубежной литературе (Нагорный. П.А., 1984, Рейли К., 1985, Назарбаева Ш.Т., Айтбаев Т.Х., 1990, Авцын А.П. с соавт., 1991,Тактамысова З.С., Кайракбаева Г.М., 1994, Трах-тенберг И.М. с соавт., 1994, Кшшшйо М., е1 а1.,1985). ВОЗ называет более 20 млн. соединений, каждое из которых, является потенциальным ядом для биологических объектов, что в полной мере относится и к микроэлементным аномалиям антропологического происхождения (Зербино Д.Д., Поспишило Ю.А., 1990, Егоров Ю.Л., Кириллов В.Ф.,1996). Среди них особый интерес вызывает свинец (РЬ) как приоритетный загрязнитель окружающей среды, ежегодные выбросы которого превышают 400 000 тонн, угрожая здоровью миллионов людей, особенно детей, период полувыведения которого составляет 10-20 лет (Жукова Т.В., 1997, Ланд-риган Ф., 1991, Тиунов В.А., 1986, СЫзЬоЬп У.У. & а1, 1995).

Нагрузка организма свинцом растет с момента рождения до старости (Розанов Б.Г.,1984), причем 94 - 95% от общего количества поступившего металла депонируется в костной ткани. К группе повышенного риска развития свинцового токсикоза относятся дети, так как всасывание этого микроэлемента из пищеварительного тракта в детском возрасте происходит в 3 раза интенсивнее, чем у взрослых. Более того, свинец начинает накапливаться уже в организме плода, так как он легко проникает через плаценту, и поэтому, концентрация свинца в крови новорожденного не отличается от крови матери. Поступление избыточных количеств металла в организм еще в антенатальном периоде повышает риск преждевременных родов и рождения недоношенных детей, а также развития энцефалопатий, нефро-патий и рахитоподобных заболеваний у новорожденных (Ландриган Ф., 1991).

При свинцовом токсикозе поражаются в первую очередь органы кроветворения, нервная система и почки. Классическим клиническим проявлением токсического действия металла является микроцитарная анемия, которая морфологически схожа с железодефицитной, и обусловлена нарушением синтеза гема и глобина. Опасность анемии, вызванной свинцом, находится в прямой корреляционной связи с его уровнем в крови. Второй мишенью воздействия металла на органном уровне является периферическая нервная система, в частности, двигательные пути. Особое беспокойство вызывают сообщения о возможности развития легких психоневрологических нарушений, угнетения функционального состояния ЦНС и отставания в умственном развитии у детей даже при сравнительно низких уровнях экспозиции свинца (Трахтенберг И.М., 1994). Хроническая нефропатия, которая может привести к почечной недостаточности, представляет собой еще одно классическое проявление токсического действия металла, однако она выявляется лишь при длительном времени его воздействия и относительно высоких концентрациях (Landrigan F., 1995).

Хотя необходимость РЬ для протекания физиологических и биохимических процессов в организме доказана рядом исследователей (Fowler В.А, 1978, Mahaffey Ph., 1984), механизм его действия, особенно в условиях низких концентраций, изучен и расшифрован в значительно меньшей степени, чем действие других микроэлементов. По существующей концепции (Трахтенберг И.М., 1994) считается, что одним из основных токсических последствий действия тяжелых металлов на системы организма является нарушение метаболических процессов вследствие угнетения активности ряда ферментов и дестабилизации биологических мембран. Так, свинец в большей степени воздействует на клеточные и ми-тохондриальные мембраны (Victory W., Fowler В.А., 1984,), причем интенсивность процесса во многом зависит от дозы введенного металла. В исследованиях на эритроцитах установлено, что он ингибирует микросомальные монооксигеназы (Тиунов В.А.,1986), вызывает агрегацию низкомолекулярных мембранных белков с образованием крупных фрагментов высокомолекулярных протеинов (Apostoli et.al., 1988). В экспериментах на животных показано, что введение свинца приводит к перераспределению отдельных фосфолипидов в мембранах клеток, что сопровождается изменением их функции (Кухта В.К., Шкребнева И.И.,1993). Кроме того, ионы металла связываются сульфгидрильными, фосфатными и карбоксильными группами мембраны, повышая ее жесткость и снижая устойчивость к осмотическому шоку, что в свою очередь, приводит к нарушениям в функциональной активности клеток (Lessler M.A.et. al., 1973).

Таким образом, длительное поступление металла в организм даже в низких концентрациях может привести к срыву систем, ответственных за поддержание гомеостаза организма. Однако в первоначальный период диагностика свинцового отравления практически всегда затруднена и в большинстве случаев истолковывается и лечится неправильно (Эйхлер Ю., 1989).

Более того, следует учитывать, что изолированное влияние свинца на организм чаще всего сочетается с воздействием других химических, физических, биологических и социальных факторов, усугубляющих его токсичность, в частности, все возрастающим потреблением алкоголя (Немцов A.B., 1995, Telimman S., Cvitkovich Р.,2000). Учитывая социальную значимость данного явления с одной стороны и повсеместное загрязнение окружающей среды свинцом, с другой, нельзя исключить возможности модификации этанолом токсического действия металла, который способен вызывать субклинические эффекты, не обнаруживаемые при обычных медицинских обследованиях

Все вышеизложенное и послужило предпосылкой для проведения настоящей работы.

Цель работы и задачи исследования.

Целью настоящей работы явилось изучение влияния малых доз свинца на функциональное состояние мембран эритроцитов и систему эритрона белых крыс при введении ионов металла в виде ацетата изолированно и при сочетании с этанолом.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

1 .Исследовать интенсивность перекисного окисления липидов и интенсивность фосфолиполиза в мембранах эритроцитов при введении малых доз ацетата свинца в организм.

2.Выявить влияние ионов свинца на особенности энергетического обмена эритроцитов в зависимости от сроков воздействия металла.

3.Сопоставить изменения функционального состояния мембран и энергетического обмена эритроцитов при изолированном введении свинца и при его со-четанном воздействии с алкоголем.

4.Исследовать изменения в системе красной крови как при изолированном действии свинца и спирта, так и при совместном введении.

Научная новизна.

В работе показано, что изменения функциональных свойств эритроцитов под действием малых доз свинца по мере увеличения сроков интоксикации носят неоднозначный характер, обусловливая течение как дезадаптивных, так и компенсаторных реакций организма.

Выявлены коррелятивные связи между функциональными изменениями мембраны эритроцитов и морфо-функциональными характеристиками эритроид-ного ростка красного костного мозга и периферической крови.

Показано, что одним из компенсаторных реакций, развивающихся в ответ на введение свинца, является активация 2,3-дифосфоглицератного шунта в эритроцитах, повышающая устойчивость организма к возникающей гипоксии.

Установлено, что при совместном введении свинца и спирта происходит более быстрое раздражение красного ростка костного мозга, выражающееся в функциональной перестройке эритропоэза в целом, сокращении времени созревания эритроцитов, снижении среднего содержания гемоглобина в одном эритроците, что в дальнейшем сказывается на более раннем старении макрофага.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Мочалова, Нина Геннадьевна

выводы.

1. При введении в организм малых доз ацетата свинца в мембране эритроцитов повышается концентрация МДА и активность фосфолипазы А2, понижается общая антиоксидантная активность, увеличивается коэффициент холестерин/фосфолипиды.

2. Присутствие ионов свинца снижает электрофоретическую подвижность эритроцитов, что свидетельствует о связывании ионов металла мембранными структурами клетки.

3. Изолированное введение ацетата свинца нарушает энергетический обмен в эритроцитах, доказательством чего служит уменьшение количества АТФ, величины аденилатного энергетического заряда, активности Ка+,К+- и Са2+-зависимых АТФ-аз при одновременной активации 2,3 — дифосфоглицератного шунта.

4. При сочетанном воздействии ионов свинца и этанола характер изменений функциональных свойств мембраны и энергетического обмена носит ту же направленность, что и при изолированном введении ионов металла, но обладает большей выраженностью.

5. При изолированном воздействии свинца и при его сочетании с этанолом происходят изменения в периферическом и центральном звеньях эритрона. Однако совместное введение приводит к более раннему раздражению центрального отдела эритрона и к более быстрому истощению механизмов компенсации.

101

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мочалова, Нина Геннадьевна, Иваново

1. Авцын А.П., Жаворонков A.A., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлемен-тозы человека. М.:Медицина,1991.С.385-393.

2. Авцын А.П. Микроэлементозы человека // Клиннч. медицина. 1987. №6. С.36-38.

3. Агджанян H.A., Кулаков В.И., Зончиева Т.Д., Атаниязова O.A. // Экология человека. Архангельск. 1994.Вып. 1 .С.94-105.

4. Алданазаров А.Т. Изменение системы крови при сатурнизме. Алма-Ата: Наука, 1974.252 с.

5. Аматуни В.П., Сафарян Н.Д. Изменение уровня ПОЛ и суммарной перок-сидазной активности в условиях высокогорья и барокамерной гипоксии // Эксперим. и клинич. медицина. 1986.Т.26. №2.С.114-119.

6. Андрунайте P.E. Токсическое действие свинца на разном уровне кальция в рационе// Гигиена труда и проф. заболевания. 1982. №З.С.54-55.

7. Антипов А.О. Оценка структурно-функционального состояния мембран эритроцитов при острой пневмонии у детей раннего возраста: Дис. .канд. мед.наук. Фрунзе. 1987. 174с.

8. Антипов Е.Е. Адаптивно-компенсаторный морфогенез в механизме структурного гомеостаза // Морфология. 1993.Т. 105, № 9-10.С.39.

9. Артамонова В.Г, Плющ О.Г., Шевелева М.А.Некоторые аспекты профессионального воздействия свинца на сердечно-сосудистую систему // Мед. труда и пром. экология. 1998. №12. С.6-10.

10. Артамонова В.Г., Шлейкин А.П., Федорова Т.Г. Эколого-гигиенический мониторинг окружающей и производственной среды при воздействии свинца и его соединений // Экологическая безопасность городов: Материалы конф. СПб, 1993. С. 106-107.

11. Арчаков А.Н., Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. Москва, 1972.135с.

12. Атауллаханов Ф.И., Витвицкий В.М., Кияткин А.Б., Пичугин A.B.// Биофизика. 1993. Т.38. вып.5. С.80-98.

13. Атчабаров Б.А., Тихонов H.H., Шеремет Т.С. Некоторые механизмы токсического действия свинца.// Актуальные вопросы пром. токсикологии: Сб. науч. тр. Алма-Ата, 1989. С.83-89.

14. Атчабаров Б.А., Тихонов H.H., Ешкова Т.С., Шеремет Т.С. Состояние антиокислительной системы в зависимости от концентрации свинца в крови // Вопросы гигиены и проф. патологии в производстве цветных металлов. Алма-Ата:Наука,1990. С. 104-114.

15. Банкова В.В., Прищепова Н.Ф., Артинский О.И. Способ оценки патологических изменений плазматической мембраны у детей при различных заболеваниях // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1987. №3. С.78-81.

16. Баранова A.A. Экология и здоровье ребенка. Москва. 1995.264с.

17. Баскурян А.К. Морфофункциональное состояние системы крови мышей в процессе постнатального развития. Автореф. дисс. канд. биолог, наук. Томск. 1996. 20с.

18. Батанова Е.Д., Жуков Д.А., Данилова О.П. Различие в реакции старых и молодых крыс на иммобилизационный стресс. // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 1994. Т. 30. № 4. С.541-546.

19. Бауман В.К. Биохимия и физиология витамина Д. Рига: Зинатне. 1989. С.261-295.

20. Баширова P.M., Гареев Е.М., Киреева H.A. Роль гемоглобина в регуляции электрокинетических характеристик и объема эритроцитов // Бюлл. экспе-рим. мед. и биол. 1998. Т. 126. № 7. С.49-51.

21. Безрукова Г.А., Рубин В.И. Метод определения фосфолипазной активности эритроцитов// Лаб. дело. 1989.№8.С. 18-20.

22. Белоконь К.Н. Изменения сердечно-сосудистой системы у детей в условиях экологического прессинга. Дисс. канд. мед. наук. Пермь. 1998.162с.

23. Беляева H.H., Гасимова З.М., Климова Д.М. Влияние интоксикации свинца на течение вирусной инфекции // Гигиена и санитария. 1994.№1. С 3235.

24. Болдырев A.A. Введение в биохимию мембран. М.: Высшая школа. 1986. 112с.

25. Борисов Ю.А., Соболева О.Ю., Суслова Е.Д., Федорович Е.В. Транспорт ионов Na+,K+ через мембрану эритроцитов человека при формировании в ней нистатиновых каналов: некоторые особенности и анализ процессов.// Цитология.1994.Т.36.№5.С427-437.

26. Быков B.JI. Цитология и общая гистология. Функциональная морфология клеток и тканей человека. СПб.: СОТИС, 1998, 520с.

27. Быкова И.А. Морфологические особенности эритроцитов периферической крови в норме и патологии. // Гематология и трансфузиология. 1993. №4. С. 7-9.

28. Бышевский А.Ш., Мкуртмян A.M., Мухачева А.Н. и др. Биохимические сдвиги при хронической свинцовой интоксикации // Здоровье человека и экологические проблемы. Тезисы доклада науч.-практич конф. Киров. 1991. С.34-36.

29. Васильев H.A., Медуницина Н.Д. Экология и заболевания органов дыхания // Российский медицинский журнал. 1997. №1. С.13-14.

30. Величко А.Н., Федорова В.М. Фосфолипидный состав молодых и старых клеток//Цитология. 1981. Т.23. №6. С.714-718.

31. Белякова Л.П., Бондаренко М.И., Аверин Н.Ф., Биологическая целесообразность активации процессов ПОЛУ/ Врачебное дело.1981.№12.С.35-38.

32. Веретенникова Г.И. Особенности структурно-функционального состояния мембран эритроцитов и энергетическое обеспечение клеток при хроническом холецистите. Автореф. дис. канд. биол. наук. Уфа. 1997. 26с.

33. Викулин C.B. 2,3-ДФГ в эритроцитах и регуляция эритропоэза при хроническом алкоголизме. Дисс. канд. мед. наук. Рязань. 1989.164с.

34. Владимиров Ю.А., Оленев В.И., Суслова Т.Б.Механизм ПОЛ и его действие на биологические мембраны.// Биофизика.1975.Т.5.С.56-58.

35. Власов В.В. Реакция организма на внешние воздействия. Общие закономерности развития и методические проблемы исследования. Иркутск. 1984.343 с.

36. Воргова Л.В., Захаров Ю.М. Об особенностях порфиринового обмена и показателей эритрона в условиях сочетанного воздействия тепловой и физической нагрузки на организм крыс // Физиол. журн. СССР им И.М.Сеченова. 1989. Т.75.№ 12.С.1772-1777.

37. Воробьев А.И., Чертков А.Л., Бриллиант М.Д. Кроветворе-ние//Руководство по гематологии. М.: Медицина. 1981. С. 23-43.

38. Габдулгалимова P.A., Соколов В.В. Использование эритроцита для оценки воздействия химических соединений на организм // Гигиена труда и профессиональных заболеваний. 1988. №7. С.28.

39. Гаврилов O.K., Козинец Г.И., Черняк М.Б. Клетки костного мозга и периферической крови. М.: Медицина. 1985. 288 с.

40. Галаян С.Л., Ельдецева С.Н., Мкрутмян A.M. и др. Влияние свинцовой интоксикации на гемокоагуляцию и радикальные процессы // Здоровье человека и экологические проблемы. Тезисы доклада научно-практической конференции. Киров. 1991. С.36-37.

41. Гладилов В.В. Влияние гипоксии на сродство гемоглобина к кислороду у животных//Космич. биология и авиакосмич. медицина. 1981. №4 С.88-89.

42. Гологан Р., Берчану Ш. Клиническая гематология. Бухарест. 1985. С. 107117.

43. Голощапов А.П. Биохимические критерии оценки экологического риска для населения города с развитой химической промышленностью: Авто-реф. дис. канд. биол. наук. Уфа. 1993. 22с.

44. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм. Томск: Изд-во Томского, университета. 1989. 468с.

45. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Структурно-функциональная организация и механизмы адаптации в системе гемопоэза // Биоэнергетические и структурные аспекты гомеостаза в изолированных системах и организме. Красноярск, 1987. С.75-89.

46. Горожанин JI.C. Возрастные особенности гуморальной регуляции эритро-поэза//Успехи физиол. наук.1979. Т.10.№1.С.124-135.

47. Горожанин Л.С., Назаров С.Б., Полумискова Л.А. Адаптационные эритро-цитарные реакции взрослого и развивающегося организма. Иваново. 1992. С.40.

48. Грибова И.А., Евлашко Ю.П., Павловская М.А. и др. О значении морфологического исследования крови при разных уровнях воздействия свинца // Гигиена труда и проф. заболевания, 1983. №2. С. 22-25.

49. Гудим В.И., Марачев А.Г., Иванова B.C. Уровень эритропоэтина у жителей Севера // Тез. докл. II Всесоюз. съезда гематол. и трансф .М., 1985. С. 144.

50. Дегтева Г.Н. Состояние красной крови и эритропоэза у больных алкоголизмом // Журн. невропат, и психиатр. 1987.Вып.2.С.230-235

51. Дегтева Г.Н. Эколого-физиологические особенности обеспечения жизнедеятельности работников нефтегазоразведочных экспедиций в Заполярье. Автореф. дисс. д-ра мед. наук. Архангельск, 1996. 36с.

52. Демин В.Ф., Ключников С.О., Покидкина Р.Н. Значение неблагоприятных экологических факторов в формировании детской патологии // Педиатрия. 1995. №3. С. 48-100.

53. Демин В.В., Османов И.М. Роль тяжелых металлов в формировании заболеваний у детей // Российский медицинский журнал. 1997. №6. С.48-50.

54. Деряпа Н.Р. Развитие экологической физиологии человека в условиях высоких широт// Физиол. журнал. СССР им. И.М. Сеченова. 1994. Т.80. №6. С.63-69.

55. Егоров Ю.Л., Кириллов В.Ф. Экологическая значимость и гигиеническая регламентация свинца и кадмия в различных средах. Медицина труда и промышленная экология. М.: Медицина, 1996. №10. С. 12.

56. Егоров Ю.Л., Крапоткина М.А. Особенности комплексного воздействия растворителей при поступлении в организм ингаляционным и кожным путем на примере бензола, ксилидина, толуидина // Гиг. труда и охрана окр. среды в хим. пром.1987.С.92-96.

57. Елизарова Т.В. Загрязнение окружающей среды и ее влияние на здоровье городского населения Забайкалья (на примере города Читы): Автореф. дис. канд. мед. наук. Иркутск. 1997. 24с.

58. Ершов Ю.А. Плетнева Т.В. Механизм токсического действия неорганических соединений.- М.: Медицина. 1989. С. 199-206.

59. Ефименко A.M., Ширяев В.В. Изменения крови при адаптации к физическим нагрузкам //Физиология человека. 1980.№6.С.1117-1122.

60. Жукова Т.В. Адаптационные реакции организма как критерии регламентации химических загрязнений окружающей среды // Гигиена и санитария. 1997. №6. С.66-68.

61. Ещенко Биохимические метода анализа М.:Медицина.1985. с. 125126.

62. Журавлева А.И., Макаров С.Н., Новиков В.Э. Биофизика: Метод, указ. М.-.МВА.1989. С. 11-20.

63. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев: Выща школа. 1974.304 с.

64. Захаров В.Н., Трушинский З.К., Бурцев Е.М. и др. Основные механизмы адаптации человека. М.: Наука. 1993. 189 с.

65. Захаров Ю.М.Современный взгляд на регуляцию кроветворения // Физи-ол. журн. ССР. 1991.Т.77.№12.С.91-101.

66. Захаров Ю.М., Варыпаева Л.П.Фагоцитарная активность центрального макрофага ЭО при экспериментальном торможении и стимуляции эритро-поэза//Гемат. и трансфузиол. 1992.№9. С.21-23.

67. Захаров Ю.М., Мельников И.Ю.Эритробластический островок — функционально-анатомическая единица эритропоэза // Гемат. и трансфузиоло-гия. 1984.№10. С.51-56.

68. Захаров Ю.М., Мельников И.Ю., Рассохин А.Г. Исследование эритропоэза модифицированным методом выделения эритробластических островков костного мозга//Гемат. и трансфузиология.1984.№4.С.52-54.

69. Захаров Ю.М., Рассохин А.Г. Механизмы регуляции эритропоэза в эритробластических островках // Успехи физиологических наук. 1994. Т.25.№3. С.112-113.

70. Захарова Н.Б., Рубин В.И. Тонкослойная хроматография нуклеотидов эритроцитов на пластинах силуфол // Лаб. дело. 1980.№12.С.735-738.

71. Захарова Н.Б., Хвостова Н.В., Шведова Р.Ф. Значение повреждения белкового и липидного состава эритроцитарных мембран в развитии снижения текучих свойств крови при экстремальных состояниях // Вопр.мед. химии. 1991. Т.37. №1. С.53-56.

72. Зейналлы Э.М., Абдуллаев П.М. ПОЛ и антиоксиданты в крови больных циррозом печени и ЖДА // Гематология и трансфузиология. 1985. №9. С.15-17.

73. Зербино Д.Д., Поспишило Ю.А. Хроническое действие свинца на сосудистую систему: Проблема экологической патологии // Архив патологии. 1990. Т. 52, №7. С.5.

74. Зорина J1.A. Клиника, диагностика, лечение и профилактика свинцовых отравлений. М.: Медицина. 1974. С. 10-11.

75. Иванов В.Н. Свинцовая биогеохимическая обстановка в Читинской области // Экологическая патология: вопросы биохимии, фармакологии, клиники. Тезисы доклада Всероссийской научн. конференции. Чита. 1995. С.27-28.

76. Иванова Н.В. Анемии у детей, проживающих в условиях повышенной антропогенной нагрузки (клинико-гематологические особенности, реабилитация). Дисс.канд. мед. наук. Пермь. 1998.

77. Идельсон Л.И. Нарушение порфиринового обмена в клинике. М.: Медицина. 1968. С. 104-105.

78. Измеров М.Ф. К проблеме оценки воздействия свинца на организм человека. // Медицина труда и пром. экология. 1998. №12. С. 2-4.

79. Казеинов А.М., Маслова М.Н. Структурные и биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов.// Физиолог, журнал. 1987. Т.73. №12. С.1587 -1598.

80. Казеинов A.M., Маслова М.Н., Шалободов А.Д. Исследование Na+,K+-АТФазы в эритроцитах млекопитающих.//Биохимия.1984.Т.49.№7.СЛ089-1095.

81. Клотц И. Энергетика биохимических реакций. М.: Мир. 1970.

82. Козинец Г.И. Экология и кроветворение // Гематология и трансфузиоло-гия. 1990. Т.35. №12. С.7-11.

83. Козинец Г.И., Новодержкина Ю.К. Стабильность кроветворения и его адаптация. // Клинич. лабор. диагностика. 1997. №5. С.16.

84. Козлов М.М., Черномырдик В.В., Маркин В.С.Механизм образования безбелковых участков мембраны эритроцита: разрыв мембранного скелета.// Биолог. Мембраны. 1989.Т.6.С.597-611.

85. Колпаков А.Ф., Влощинский П.Е., Колосова Н.Г. Механизмы адаптации человека и животных к действию экстремальных факторов // Вестн. Рос. АМН.1993. С.39-42.

86. Кометиани З.П., Векуа М.Г. Кинетика мембранных транспортных ферментов// М.: Высшая школа. 1989. 111с.

87. Корниенко И.А. Возрастные изменения энергетического обмена и терморегуляции. М.: Наука, 1979.57 с.

88. Косенко Е.А., Каменский Ю.Г., Гончаренко М.С. Аденилнуклеатиды и аденилатиновый энергетический разряд в эритроцитах при псориазе // Вопр. мед. химии. 1987. №6. С.37-41.

89. Кудаяров Д.К. Особенности красной крови и дефицитных анемий у детей разных зон Киргизской ССР. Дисс. докт. мед. наук. М., 1980. 351с.

90. Кудрявцева Т.В., Дмитриева Н.В., Туркина Т.И. Сравнительный анализ липидного и фосфолипидного спектра сыворотки крови и мембран при ожирении у детей // Вопросы медицинской химии. 1983. №2. С. 120-124.

91. Кунцевич И.Е., Дубровская С.Н., Терещенко О.В. Влияние содержащегося в атмосферном воздухе свинца на накопление его в организме и на некоторые биохимические показатели // Здравоохранение Белоруссии. 1984.1.

92. Кустов В.В., Тиунов JI.A., Васильев Г.А. Комбинированное действие промышленных ядов. М.'.Медицина, 1975.275с.

93. Кухта В.К, Шкребнева И.И. Влияние свинца и адреналина на содержание фосфолипидов в эритроцитах крыс. // Здравоохранение Белоруссии. 1993. №3. С.57-59.

94. Лакин Г.Ф.Биометрия. М.:Высш.шк., 1980.352 с.

95. Ландриган Ф. Современные принципы эпидемиологии и токсикологии профессионального воздействия свинца (обзор) // Гигиена труда и проф. заболевания. 1991. №6. С.25-27.

96. Левина Э.Н. Общая токсикология металлов. Л.: Медицина. 1972.184с.

97. Левина Э.Н, Чекунова М.П, Минкина H.A. Значение накопления металлов в клетке // Фармакология и токсикология. 1980. Т.36. С.620-623.

98. Леонова В.Г. Анализ эритроцитарных популяций в онтогенезе человека. Новосибирск: Наука. 1987.240с.

99. Лужников Е.А. Клиническая токсикология. М., 1994.235с.

100. Луковенко В.П. Совершенствование биологического контроля за воздействием свинца на работающих и население // Проблемы токсикологии и прикладной экологии: Сб. тр. Междунар. симпозиума по экологии и токсикологии. Л., 1991.

101. Луковенко В.П., Денисюк О.Т. Гигиенические аспекты загрязнения окружающей среды свинцом // Проблемы экологии и пути их решения Киев, 1991.

102. Люблина А.Я., Ильичева Л.П., Катагонова Т.В. Клинические лабораторные исследования. М.: Медицина, 1984.288с.

103. Любченко П.Н., Острун Ю.З. Активность дегидратазы АЛК во внутренних органах крыс при свинцовом отравлении // Гигиена труда и проф. заболевания. 1980. №4. С.51-52.

104. Любченко ПН., Ревич Б.А., Левченко Н.И. Скрининговые методы для выявления группы повышенного риска среди рабочих, контактирующих с токсичными химическими элементами: Метод, рекомендации. М., 1989.

105. Макаров В.П. Эритропоэз и энергообмен организма. Новосибирск, 1984.96 с.

106. Макаров В.П., Косиненко C.B. Роль эритропоэтина в регуляции кислотно-основного гомеостаза // Кислотно-основной гомеостаз: физиология, биохимия и клиника. Мат. конф. Сыктывкар, 1994. С.131-132.

107. Макашев K.K. Обменные процессы при сатурнизме. Алма-Ата: Казахстан. 1984. 128с.

108. Маринов Б.С., Обидин А.Б., Гуляева И.В. Изменения активности СОД под действием доноров и акцепторов электронов // Биохимия. 1984. Т.52. Вып.5. С.846-849.

109. Маслова М.Н. Активность мембранных ферментов эритроцитов при различных стрессовых воздействиях // Физиол. журн.1994. Т.80. № 7. С.76-80.

110. Матвеев A.B., Акоев В.Р., Тараховский Ю.С. сравнительное исследование структурных переходов в эритроцитах мембран доноров и новорожденных //Бюл. экспер. биол.1997. Т.123. №2. С.196-200.

111. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г.Влияние строфантина на электрофоре-тическую подвижность эритроцитов при ее различном исходном уровне // Биофизика. 1995. Т.40, Вып.З. С.694-695.

112. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Гурцаева Д.Р. Динамика взаимосвязи электрофоретической подвижности и объема эритроцитов крыс при стрессе // Бюл. экспер. биол.1999. Т. 128. №11. С.504-507.

113. Медведева И.А., Маслова М.Н. Динамика и механизм изменения активности Na, К+ АТФ-азы эритроцитов крыс при действии стрессоров различной природы // Физиол. журн.1993. Т.79. №12. С.29-34.

114. Медяник Б.В.Влияние эритропоэтического стресса на пролиферативную активность «короны» эритробластических островков костного мозга крыс//Успехи физиол. наук. 1994.Т.25.№З.С. 104.

115. Медяник Б.В.Кинетические характеристики эритропоэза в эритробласти-ческих островках костного мозга. Дисс. канд. биол. Наук. Челябинск, 1993.123 с.

116. Мельников И.Ю. Исследования эритробластических островков при различных функциональных состояниях эритропоэза. Автореф. дисс. канд.биол. наук. Челябинск. 1988.24с.

117. Мецлер Д. Биохимия: Хим. реакции в живой клетке. М.:Наука, 1980. Т.1-3.

118. Мингазов P.C., Баширова P.M., Сафин И. А Л Здравоохр. Башкортостана. 1997. №1-2. С.13-17.

119. Моисеева О.И. Физиологические механизмы регуляции эритропоэза. JL: Наука, 1985.183с.

120. Нагорный П.А. Комбинированное действие химических веществ и методы его гигиенического изучения. М.: Медицина. 1984. С.184.

121. Найди С.С., Ганич М.М., Мишанич Ю.В. Особенности репродуктивной функции у паялыциц, какие работают в приборостроительной промышленности // Педиатрия, акушерство и гинекология. 1986. № 6.

122. Насолодин В.В., Дворкин В.А., Куркова С.Д. Биодоступность микроэлементов и взаимодействие их в процессе обмена в организме (обзор) // Гигиена и санитария. 1994. №4. С. 12-15.

123. Немцов A.B. Алкогольная ситуация в России. М., 1996. 70 с.

124. Ненашев A.A., Якушенко М.Н., Оразаева С.МУ/ В кн.: Функциональные резервы и адаптация. Киев.1990.С.353-356.

125. Новицкая В.П., Романова Е.М. Некоторые показатели энергетического обмена клеток крови разных возрастных групп коренного населения Крайнего Севера. М.,1995. 7с. Деп. в ВИНИТИ, № 338-В95.

126. Овчинникова Т.Г. Некоторые химические аспекты воздействия малых доз свинца на организм работающих //Тез. докл. РАМН 1994.

127. Осипов А.Н., Григорьев М.В. Сыпин В.Д.// Радиационная биология. Радиоэкология. 2000. Т.40. Вып.4. С.382-386.

128. Осипов А.Н., Рязанов И.А., Сыпин В.Д. Изменения структурно-функциональных показателей клеток системы крови мышей при длительном воздействии свинца и кадмия // Токсикол. вестн. 2001. №5.С.2-5.

129. Османов И.М. Роль тяжелых металлов в формировании заболеваний органов мочевой системы // Рос. Вестник перинатологии и педиатрии. 1996. Т.41. С.36-39.

130. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф. Регуляция эритропоэза. М.: Медицина , 1987.272с.

131. Пеп Е.А. Диагностическая информативность некоторых биохимических показателей при различных уровнях воздействия свинца. // Гигиена труда и проф. заболевания. 1981. №6. С.46-48.

132. Петруняка В.В., Панюшкина Е.А., Северина Е.П. Активация и ингибиро2+ вание Na, К АТФ-азы мембран эритроцитов эндогенными Ca зависимыми регуляторами. // Биологические мембраны. 1990. Вып.7. №4.1. С.352-358.

133. Подунова Л.Д., Некоторые итоги деятельности санэпидслужбы по изучению влияния свинца па здоровье работающих. // Медицина труда и пром. экология. 1998. №12. С.4-10.

134. Прищепова Н.Ф., Бинкова В.В., Юрков Ю.А. Значение исследования коэффициента накопления M ДА в эритроцитах для диагностики мембранных нарушений у недоношенных детей // Педиатрия. 1986. №12. С. 10-15.

135. Промыслов М.Ш., Демчук М.Л. Определение суммарной антиоксидант-ной активности в сыворотке крови // Вопр. мед. химии. 1990.№4.С.27-29.

136. Подунова Л.Д., Некоторые итоги деятельности санэпидслужбы по изучению влияния свинца на здоровье работающих // Медицина труда и пром. Экология. 1998. №12. С.4-10.

137. Рапоппорт С.М. СКК. М.: Медицина. 1984. С.26.

138. Рассохин А.Г., Крестьянинова О.Г., Захаров Ю.М.О некоторых механизмах комплиментарности клеток в эритробластических островках костного мозга// Физиолог, журн. СССР им. И.М.Сеченова. 1991. Т.77.№1.С.62-67.

139. Рассохин А.Г., Попов Т.К., Захаров Ю.М. Эритробластические островки костного мозга при ожоге // Физиолог, журн. СССР им. И.М.Сеченова. 1991. Т.77.№ 1 .С. 13-16.

140. Рассохин А.Г., Мельников И.Ю. Центрифужная камера для осаждения и фиксирования эритробластических островков костного мозга // Лаб. де-ло.1985. №2. С.77-78.

141. Ревич Б.А., Сает Ю.Е. Биохимические методы оценки городских антропо-экологических систем // Экология человека: основные проблемы. М.,1988. 176с.

142. Рибаров С.Р., Бочев П.Ф. Хемилюминесцентные исследования механизма гемолитического действия свинца// Биохемилюминесценция. М., 1983.

143. Розанов Б.Г. Основы учения об окружающей среде. М.: Прогресс. 1984. 372 с.

144. Рощин A.B. Загрязнение окружающей среды металлами // Металлы: Гигиенические аспекты оценки и оздоровления окружающей среды. М., 1983.

145. Рузавина Т.И. Клинико-лабораторные особенности и диагностика экоза-висимой патологии органов мочевыделеитльной системы у детей. Дисс. канд. мед. наук. Пермь. 1997. 180 с.

146. Рябов С.И. Основы физиологии и патологии эритропоэза. Л.: Наука. 1971. 256 с.

147. Сает Ю.Е. Антропогенные геохимические аномалии свинца // Свинец в окружающей среде. М., 1987.

148. Сапов И.А., Новиков B.C. Неспецифические механизмы адаптации человека. Л.: Наука. 1984. 146 с.

149. Сафронова Л.Н., Дубинина Е.В., Петров З.А. Функциональное состояние мембран и супероксиддисмутазная активность эритроцитов у новорожденных детей при острой и хронической гипоксии // ВОМД. 1986. №11. С.65-66.

150. Свинец в окружающей среде /Отв. ред. В.В. Добровольский. М., 1987.

151. Семенова Л.С., Павловская H.A. Изменение активности дегидратазы дель-та-АЛК в эритроцитах крови при разных уровнях воздействия свинца.// Гигиена труда и проф. заболевания. 1983. №8. С.17-19.

152. Сидоренко Г.И. Гигиена окружающей среды в современных условиях // Гигиена и санитария. 1992. № 5.С.48-51.

153. Сидоренко Г.И., Меркурьева Р.В. Значение ферментной дезорганизации и лабилизации мембран внутриклеточных структур в проявлении биологических эффектов химических факторов окружающей среды // Гигиена и санитария. 1981. № 8. С.54-57.

154. Сидоров Ю.А, Физиологические аспекты индивидуальной экоадаптации человека//Физиолог, журн.1994. Т.80.№6.С.70-79.

155. Сиекевиц Р.И. Реакция биологической структуры на резкое изменение условий. Эндоплазматический ретикулум. // Мембраны и болезнь. 1980.№3 .С .45-47.

156. Симовян Э.М., Алимова Е.К. Липидный состав мембран эритроцитов и сыворотки крови при менингококковой инфекции у детей // Вопросы мед. химии. 1984. №2. С.28-33.

157. Скальный А.В.Свинец и здоровье человека: диагностика и лечение сатурнизма. М. 1997.35с.

158. Скулачев В.П. Соотношение окисления и фосфорилирования в дыхательной цепи. М., 1962.126с.

159. Снакин В.В. Загрязнение биосферы: масштабы и перспективы. // Медицина труда и пром. экология. 1999. №5. С.21-27.

160. Соколов В.В. Свинцовое отравление в промышленности. //Медицина труда и пром. экология. 1988. №4. С. 12-14.

161. Соловьев А.Г., Дегтева Г.Н., Сидоров П.И. и др. Динамика гематологических показателей при алкогольной интоксикации в зависимости от экологической ситуации // Бюллетень эксперимент, биолог, и медицины. 1993. №8. С.195-197.

162. Сорокина Н.С., Евлашко ЮП. Профессиональные заболевания химической этиологии с преимущественным поражением системы крови.// Профзаболевания.1996.С. 108-119.

163. Степнов С.М. Экологозависимые изменения крови у детей: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Пермь. 1997. 24с.

164. Строжак С.А. О механизмах токсического воздействия этанола на систему красной крови. Автореф. дис. канд. мед. наук. Тюмень. 1984. 27с.

165. Сухомлинов В.Ф., Гузар З.В.// Молекулярная генетика и биофизика. Киев. 1990. №15.С.20-23.

166. Тактамысова З.С., Кайракбаева Г.М. Изучение сочетанного действия гек-сахлорина и ртути в зависимости от их содержания в организме. Л.: Гигиена и санитария. 1994. С. 35-39.

167. Талакин Ю.Н., Иваницкая Н.Ф., Епатьева И.А. Профилактическая роль пектина при комбинированном воздействии соединений свинца и ионизирующего излучения // Актуальные вопросы гигиены Донбасса: Тез. докл. обл. науч.-практ. конф. Донецк, 1990.

168. Тверишкин A.M., Сапрыкин Э.В., Сальник Б.Ю. Проницаемость и фосфо-липидный состав митохондрий семенников крыс при аллоксоновом диабете // Вопросы медицинской химии. 1987.Т.ЗЗ. №6. С.121-124.

169. Тиунов Л.А. Биохимические механизмы токсичности // Общие механизмы токсичности. Л., 1986.

170. Ткешелашвили Л.К., Мигисашвили И.С., Мосулишвили Л.М., Кучава Н.Е. Нейтронно-активационный анализ тяжелых металлов в субклеточных компонентах печени интактных крыс // Радиационные исследования Тбилиси, 1975.

171. Трахтенберг И.М. Техногенные воздействия тяжелых металлов на человека и окружающую среду как эколого-гигиеническая проблема // Проблема экологии и пути их решения. Киев, 1991.

172. Трахтенберг И.М. Проблемы токсикологии и прикладной экологии // Международные симпозиум по экологии и токсикологии: Сб. тр. 1991.

173. Трахтенберг И.М., Колесников B.C. Современные эколого-гигиенические аспекты проблемы тяжелых металлов как техногенных загрязнителей внешней среды // Актуальные вопросы профилактической медицины. Рига, 1991.

174. Трахтенберг И.М., Колесников B.C., Луковенков В.П. Тяжелые металлы во внешней среде. Минск: Наука и техника. 1994. 285с.

175. Трахтенберг И.М., Короленко Т.К. Гигиеническая характеристика современных условий труда при работе со свинцом. // Медицина труда и пром. экология. 1999. №4. С. 9-14.

176. Трахтенберг И.М., Тычинин В.А., Талакин Ю.Н. Проблема экзогенных токсических воздействий малой интенсивности // Веста. АМН СССР. 1991. №2.

177. Уринсон Ю.П., Путинская М.М. Сидеробластная анемия у больных со свинцовой интоксикацией //Вопросы патологии.1981.№12.С.16-18.

178. Федоров H.A. Нормальное кроветворение и его регуляция. М.: Медицина, 1976.543с.

179. Филова В.А. Состояние системы крови при подкожном введении бензола кроликам // Клиническаямедицина.1990.№7.С.87-90.

180. Франк Г.М. Клеточные структуры и функции клетки. // Биофизика. 1970.Т.15. Вып.2 С134-136.

181. Фролова А.Д., Чекунова М.П. Воздействие металлов и органических соединений на метаболизирующую систему и проблема гомеостаза // Гигиеническая токсикология металлов. М., 1983.

182. Фоменко В.Н., Глущенко В.И., Катосова Л.Д. и др. К вопросу о мутагенном и гонадотропном действии свинца // Гигиена труда и проф. заболевания. 1982. № 10.

183. Харченко Т.И., Носова Л.И., Андреева C.B. и др. Состояние органов и тканей при свинцовой интоксикации в эксперименте на белых крысах // Морфология некоторых органов и тканей человека и млекопитающих: Тр. Крым. мед. ин-та. 1986. Т. 109.

184. Цейликман В.Э., Пушкарев В.П., Захаров Ю.М. и др. Влияние серии коротких иммобилизаций на показатели периферической крови и эритробла-стические островки костного мозга крыс. // Физиолог, журнал. СССР. 1991. Т.47.№3. С. 41-46.

185. Цейликман В.Э., Волгореченский И.А., Колесников O.J1. Формирование толерантности системы крови крыс к повторному действию стрессового раздражителя // Физиолог, журнал. СССР. 1995.Т.81. №12. С. 88-93.

186. Целковиц JI.C., Рогачева B.C. Репродуктивная функция у женщин, проживающих в условиях воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды // Акушерство и гинекология. 1998. №2. С.24-27.

187. Чевари С., Андял Т., Штренгер Я. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте // Лабораторное дело. 1991. №10. С.9-13.

188. Чернецкий Е.А., Воробей A.B. Структура и функции эритроцитарных мембран. Минск: Наука и техника. 1981. 285 с.

189. Чертков И.Л., Воробьев А.И. Современная система кроветворения. // Проблемы гематологии. 1973. №10. С. 1-2.

190. Чеснокова С.А.Физиология крови // Практикум по нормальной физиологии. М.: Изд-во РУДН, 1996.С.37-58.

191. Шарова Ю.А., Бирюкова Т.В., Таноян С.А. Неферментативный метод определения 2,3-дифосфоглицериновой кислоты эритроцитов и возможности его использования в клинической практике // Лаб. дело. 1978. №7. С.413-415.

192. Шашкин A.B., Терсков И.А. Продукция и деструкция эритроцитов в организме. Новосибирск. 1986.76с.

193. Щукина МЛ. Содержание молочной кислоты в крови и эритропоэз в условиях гипоксии // Физиол. журн. СССР им. И.М.Сеченова.1986. Т.72. №5. С.668-671.

194. Эйхлер В. Яды в нашей пище: Пер. с нем. М., 1989. 86 с.

195. Юсупова И.У. Островский В.Д., Маркова М.Н. Изменение жирнокислот-ного состава эритроцитарных мембран при алкоголизме //Гематология и трансфузиология. 1998. №2. С.37.

196. Юшкова JI.A., Луговецкий В.К. Особенности метаболизма в эритроцитах при воздействии химических веществ // Гигиена и санитария. 1990. №6. С.64-66.

197. Яблоков А.В., Остроумов С.А.Уровни охраны живой природы. М.: Наука. 1985.175 с.

198. Явербаум П.М., Скворцова Р.Г., Скрябина Л.М., Курынев А.В. Физико-химическая характеристика мембран эритроцитов в процессе развития анемии, моделируемой введением свинца // Гематология и трансфузиоло-гия. 1987. №6. С.51-53.

199. Abbott R.E., Schachter D. Topography and Sunctions of subphydryl groups of the human erythrocyte glucose transport mechanism // Mol. And Cell. Biochemistry. 1988. V.82. P.85-90.

200. Aebi H. Methoden oler erymatiechen analyses. 1970. P.636-647.

201. Al-Hakkak L.S., Lahid L.R., Ibrahim D.K. et al. Effects of Ingestions of Lead Monozide Alloy on Male Mouse Reproduction // Arch. Toxicol. 1988. Vol. 62, № l.C. 16-18.

202. Alharho F.M., Barreto L., Waldron H., Silvany-Svedo A. Multiple causes at anemia amongst children living near a lead melber in Brazil // Sci Total. Environ. 1984. Vol.35. №1. P.71-84.

203. Apostoli P., Romeo L., De Motteis M. C. et al. Effects of Lead on Red Cell Membrane Proteins // Int. Arch, occup. environm. Hlth. 1988. Vol. 61, N 1-2.

204. Atkinson D.E. Celluar Energy Metabolism and Jts Regulation. Academic Press. 1977.138 p.

205. Bessis M., Weed R.J., Le Blond P.F. Red cell. Shape. Physiology. Patology. Ultrastructure. New York, Berlin, 1973. 158 p.

206. Bereza U.L., Brewer G.J., Hill G.M. Effect of dietary cholesterol on erythrocyte peroxidant stress in vitro and vitro // Biochem. et biophys. acta: Lipid and Lipid Metab. 1985. V.837 (L74). №3. P.434-440.

207. Bellinger D., Needlman H. Lead and Relationship Between Maternal and Child Intelligence //J. Pediatrics. 1983. Vol. 102, № 4.

208. Bornshein R.L., Hammond P.B., Dietrich K.N. et al. The Clinic Prospective Study of Low-Level Lead Exposure and Its Effects on Child Development: Protocol and Status Report // Environm. Res. 1985. Vol. 38, №1.

209. Burk R.F. Protection by GSH against lipid peroxidation induced by ascorbat and iron in rat liver microsomes // Biochim. Pharmacol. 1982. Vol.31.№ 4. P.601-602.

210. Chisholm Y.Y., Thomas D.Y., Hamill T.G. Erithrocyte porhebilinogen synthase activity by serum // Amer. Y. Physiol. 1990. Vol. A. P. 1016.

211. Clemens M.R., Einsele H., Loadner C. Some new aspects on free radical reaction in red cell pathology // Free radicals chemistry, pathology and medicine. London: Richelien Press. 1988. P.383-404.

212. Crespo L.M., Novak F.S., Freedman Y.C. Calcium, cell shrinkage, and prolytic state of hemon red blood cells // Amer. J. Physiol. 1987. V.252. №2. pt.l. P.130-150.

213. Dannon D. Structural alteretion of aging red blood cells. 10-dn Int. Congr. Gerontol. Jerusalem. 1975. Congr. Alstrs. Vol. I.S.I.s.a. P.97-99.

214. Dexter T.M. Haemopoetic growth factors // Brit. Med. Bull. 1989. Vol. 45. № 2. P.337-349.

215. Dexter T.M., Allen T. Multi-talented stem cells //Nature (Cr. Brit.). 1992. Vol. 360. № 6406. P. 709-710.

216. Drummond R. The role of cell fusion in erythropoiesis // Med. Hypotheses. 1994. Vol 42. № 3. P.173-179.

217. Egle P., Shelton K. Chronic lead intoxication causes a brain-specific nuclear protein to accumutate in the nuclei of cells linning kidney tubules // J. biol.chem.1986. V.261.P.2294-2298.

218. Fowler B.A. General Subcellular Effects of Lead, Mercury, Cadmium and Arsenic // Environm. Health Perspect. 1978. Vol. 22

219. Glaser R., Donath J.// Bioelectrochem. Bioenerg. 1992. Vol.27. P.429-440.

220. Goldstein G.W., Ar D. Lead Activated Calmodulin Sensitive Process // Life Sch. 1983. Vol. 33, №10.

221. Heegard N.H.H. Hvad. Bestemmerden pornale erytrocyte levetid? // Vgeskrlae-ger. 1988. V.150. № 48. P.2949-2959.

222. Heynen M.J., Zaman Z., Verwilghen R.L. Effect of Acute Lead Intoxication on the Ultrastructure of Rat Erythroblast and Reticulocytes // Heamatologia. 1987. Vol. 20, № 3. P.25-28.

223. Holtsman D., Olson J.E., De Vries C., Bensch K. Lead Toxicity in Primary Cultured Cerebral Astrocytes and Cerebellar Granular Neurons // Toxicol. And Appl. Pharmacol. 1987. Vol. 89, № 2.P.67-69.

224. Iohansson L., Wioll M. Long-Term Exposure of the Male Mouse to Lead Effects on Fertility // Environm. Res. 1986. Vol. 41, № 2.

225. Kapoor S.C., van Rossum G.D.V., O'Neil K.J., Mercoreiia J. Uptake of Inorganic Lead in Vitro by Isolated Mitochondria and Tissue Slices of Rat Renal Cortex // Biochem. Pharmacol. 1985. Vol. 34, № 9.P.1102-1107.

226. Kunimoto M., Miria T., Kabota K. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1985. Vol. 77, P. 451-457.

227. Landrigan P.J., Nodd A.S., Wedcen R.P. // Mount Sihal. J. 1995. Vol. 62. P. 360-364.

228. Lareba G., Chmielnicka J. Aminolevulinic Acid Dehydratase Activity in the Blood of Rats Exposed to Lead and Zinc // Ecotoxicol. And Environm. Safety. 1985. Vol. 9,№ 1.

229. Lansdown R., Yule W., Urbanowicz M.A., Hunter J. The Relationship between Blood-Lead Concentrations, Intelligence, Attainment and Behaviour in a School Population: The Second London Stady // Int. Arch. Occup. Environm. Health. 1986. Vol. 57, № 3.

230. Lessler M.A., Watters M J. Erythrocyte osmotic fragility in the presente of Pb jr Hg //Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1973. Vol.142. P.548-553.

231. Lowry O.H., Lopez J.H. Determination of inorganic phosphate in the present of labelling ester//J.Biol.Chem. 1946,T. 162, P.421.

232. Maccay R.I., Moronne M., Michloen R. SH-groups and water transport in red cell // Mol. And cell. Biochemistry. 1988. V.82. P. 1-2.

233. Mahaffey Ph. Toxicity of lead, cadmium and mercury: consideration for total parenteral support//Bull. N.Y. Med. 1984. V.60. №2. P.196-209.

234. Marscher J.-P., Seidlitz T., Rietbrok K. N. Influence of 2,3-difosphoglycerate on oxygen dissociation kinetics of human hemoglobin // Int. J. Clin. Pharmacol. Trer. and Toxicol.1992. Vol.30. №11. P.545-547.

235. Maxwell K., Vinters H.V., Berliner J.A. et al. Effect of Inorganic Lead on the Cerebral Microvessel Endothelium // Toxicol. And Appl.Pharmacol. 1986. Vol. 84, №2.

236. Metcalf D. Stimulation and inhibition of erythropoiesis // Blood. 1986. Vol.67.P.257-267.

237. Millston E., Russell J. Lead Toxicity and public health // J. Roy. Sor. Health. 1995. Vol.115. №6.P.347-350.

238. Morgan E.H. Transferrin, biochemistry, physiology and clinical significance // Molec. Aspects. 1981. V.4. P.l-123.

239. Nicholls D., Feixhert-Kuliszewska K., Kuliczewski M. J. The Activity of Membrane Ebzymes in Homogenate Fractions of Rat Ridney After Administration of Lead // Toxicol, and Appl. Pharmacol. 1983. Vol. 67, №2.C.75-79.

240. Nriagu J.O., Pacyna J.M. // Natura. 1988. V.333. P.134-139.

241. O'Feaherty E.J., Hammond P.B., Lerner S.J. Dependence of Apparent Blood Lead Half-Life on the Length of Previous Lead Exposure to Humans // Fudam. Appl. Toxicol. 1982. Vol. 2.P.83-86.

242. Orkarsson A., Fowler B.A. Effects of Lead Inclusion Bodies on Subcellular Distribution of Lead in Rat Kidney: The Relationship to Mitochondrial Function // Exp. And Mol. Pathol. 1985.Vol. 43, № 3.

243. Ozsoylu S. Lipid peroxidation in iron deficiency anemia // Acta Haematol. 1994. V.91. №3. P. 170.

244. Page R.A. Limits for lead // Environm. Helth.1984. Vol.92. №7. P.181-182.

245. Peters R.A. Biochemical lessons and lether syntesis. New York. 1963. P.63.

246. Pounds G.G., Wright R., Kodell R.L. Cellular metabolism of lead: a kinetic analysis in thy isolated rat hepatocyte // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1982. V.66. P.88-101.

247. Ranney H.M., Lat R., Rosenberg GM Am. J. Hematol. 1993. Vol.42. №1. P.107-111.

248. Roberts T.M., Hutchinson T., Paciga I. Lead contamination around secondary smelters: estimation of dispersal and accumulation by human // Scienct. 1974. V.186. P.l 120-1123.

249. Rosenberg L.E, Short E.M. Inherited diseases of membrane transport. In: Harrison's Principles of Internal Medicine. B^Ed., V.l-2, N.Y.1994.P.2125-2131/

250. Shinva S., Yasunori A. Inhibitory effects of cholesderol on changes in membrane permeabiley and potentael induced wish lysolecithen in red blood cells // Jap. J. Parmacol. 1978. V.28. Suppl. P. 152-157.

251. Scoppa P., Romengous M., Penning W. Hepatic Drug Metabolizing Activity in Lead Poisoned Rats // Experimentia. 1973.Vol.29, № 8.

252. Sirs J.A. Erythrocyte flexibility and metabolism // Bioheology. 1978. V.15. №1. P.53-54.

253. Smith M., Delues T., Lansdown R. et al. The Effect of Lead Exposure on Urban Children: The Institute of Child Health Southampton // Ded. Child. Neurol. 1983. Vol. 47. (Suppl.)

254. Tannert Ch. Alteration of the erythrocyte membrane wish celluar against // Stud. Biophys. 1978. V.74. P.49-50.

255. Telimman S., Cvitkovich P., Jurasovic J. et.al. // Environmental Health Per-spectives.2000. V.108 (1). P.45-53.

256. Thatcher R.W., Lester M.L., McAlarter R., Horst R. Effects of Low Levels of Cadmium and Lead on Cognitive Functioning in Children // Arch, environm. Hlth. 1982. Vol. 37, № 3.P.38-41.

257. Tillmann W., Schröter W. Deformability of erythrocytes in Iron Deficiency Anemia//Blüb. 1980. V.40. №3. P. 179-186.

258. Victhery W., Vander A., Mouw D.R. Effect of acid-base status on renal excretion and accumulation of lead in dogs and rats // Amer.J. PhysioU979.Vol.237.P.F.398.F.407.

259. Victory W., Miller C.R., Fowler B.A. Lead accumulation by rat renal bruch border membrane vesicles // Pharmacol, exp.therap. 1984.Vol.231.№3.P.589-596.

260. Xiao G., Wang J., Y. Ингибирование включения аминокислот в микросомах под воздействием кадмия, ртути и свинца // Хуаньцзин кэсюэ сюэбао. Actra sci. Circumstantial. 1987. Vol. 7, № 3.

261. Winneke G., Kraemer U. Neuropsychological Effect of Lead in Children: Interaction With Social Background Variables // Neuropsychobiology. 1984. Vol. 11, № 3.C.112-117.

262. William C., Clark К. Управление планетой Земля / Пер. с англ. Москва. 1981.672с.

263. Yagi К. Estimation of products of lipid peroxidation by malonyl dialdehyde in biochemical systems // Biochem. Med. 1976. V.15. P.212-213.

264. Yu Ruirong, Wand X. Исследование влияния отравления свинцом на метаболизм кальция у мышей // Наньцзин дасюе сюабаою. Цзыжань кэсюэ. J. Nanjing Univ. Natur. Sci. Ed. 1983. Vol. 2. P.43-46.

265. Zhong C., Ling Y., Wu Z. et al. Distribution of Lead in Renal Proximal Convoluted Tubules of Lead-Poisoned Rats // J.Electron. Microsc. Techn. 1987. Vol. 7, №2. P.85-88.

Информация о работе

Мочалова, Нина Геннадьевна
кандидата биологических наук
Иваново, 2004
ВАК 03.00.04

Диссертация

Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Изменение функционального состояния эритроцитов белых крыс при изолированном введении ацетата свинца и при сочетании с этанолом - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы