Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Исследование вязкоэластических свойств мембран эритроцитов беспородных белых крыс с различным уровнем двигательной активности в ответ на стрессы различной этиологии и оценка деформируемости эритроцитов людей с гипертонией
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Исследование вязкоэластических свойств мембран эритроцитов беспородных белых крыс с различным уровнем двигательной активности в ответ на стрессы различной этиологии и оценка деформируемости эритроцитов людей с гипертонией"
На правах рукописи
МАРЬИНСКИХ Василий Владимирович
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЯЗКОЭЛАСТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ БЕСПОРОДНЫХ БЕЛЫХ КРЫС С РАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ ДВИГАТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ В ОТВЕТ НА СТРЕССЫ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ И ОЦЕНКА ДЕФОРМИРУЕМОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ ЛЮДЕЙ С ГИПЕРТОНИЕЙ
03 00 13 — Физиология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Тюмень —
2007
Диссертация выполнена на кафедре анатомии и физиологии человека и животных Тюменского государственного университета
Научный руководитель: Официальные оппоненты:
Ведущая организация:
кандидат биологических наук, доцент Белкин Алексей Васильевич
доктор биологических наук, профессор
Кузнецов Александр Павлович
доктор медицинских наук, профессор
Сторожок Сергей Анатольевич
Южно-Уральский Государственный Университет
Защита состоится Ж-е)^ 2007 года в ^О ча-
сов на заседании диссертационного совета ДМ 212 274.07 в Тюменском государственном университете по адресу: 625043, г Тюмень, ул Пирогова, 3
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тюменского государственного университета
Автореферат разослан « 2-4 » 2007 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор
Е. А. Чирятъев
Актуальность проблемы.
В последние годы оценка реологических свойств крови и ее компонентов приобретают все большее значение для научно-исследовательской и клинической практики В норме эритроциты обладают высокой деформируемостью, что определяется вязкоэлаетическими свойствами мембраны, высоким отношением площади поверхности к объему клетки и низкой вязкостью внутриклеточного содержимого Это позволяет эритроцитам, имеющим диаметр около 8 мкм, свободно проходить через капилляры диаметром до 3 мкм., обеспечивая транспорт кислорода всем клеткам живого организма.
По мнению ряда авторов /Weed, 1980; Mohandas, 1992/ деформируемость эритроцитов является одним из главных свойств, определяющих продолжительность их жизни in vivo, и зависит как от внешних сил (главным образом сдвигового напряжения и скорости сдвига), так и от внутренних факторов вязкоэластичее-ких свойств мембраны, вязкости внутриклеточного гемоглобина и геометрии клетки (отношению площади поверхности к объему)
Существует ряд методов, позволяющих определять деформируемость эритроцитов, но они крайне сложны и требуют дорогостоящего оборудования (ротационные вискозиметры), или проводятся в условиях далеких от m vitro (микропипеточные методы и способ центрифугирования) /Соггу, Mieselman, 1978, Jones еа, 1984/ Эти методы недостаточно точны и трудоемки по выполнению На наш взгляд, самый адекватный на сегодняшний день метод, который позволяет провести оперативную и информативную оценку деформируемости эритроцитов основан на компьютерной эктацитометрии и реализован в приборе получившим название эктацитометр /Bessis, et al., 1981, Mohandas, et al., 1981/ Способ измерения деформируемости эритроцитов с помощью эктацито-метра позволяет получать объективную количественную и качественную информацию о физических свойствах эритроцитов, а использование компьютера значительно повышает точность измерений, снижает трудоемкость проведения эксперимента и ускоряет процесс обработки полученных данных
В настоящее время отсутствует отечественная серийная модель эктацитометра, что в значительной мере ограничивает возможности проведения исследований по изучению деформируемости эритроцитов
Поэтому, разработка и создание отечественной модели экта-цитометра с компьютерной обработкой полученной информации, отработка технологии эктацитометрических исследований деформируемости эритроцитов, внедрение эктацитометрии в практику научно-исследовательских и клинических лабораторий России, является актуальной проблемой
Цель исследования С использованием разработанной модели эктацитометра изучить деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности при моделировании стрессов различной этиологии, а также у больных артериальной гипертонией
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи
1 Сконструировать эктацитометрическую установку новой модификации
2 Исследовать влияние физико-химических факторов на деформируемость эритроцитов крыс в опытах in vitro
3 Изучить роль физиологических стрессов на деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности
4 Исследовать деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией
Научная новизна.
Создана лабораторная установка на основе принципа лазерной дифрактометрии по техническим характеристикам не уступающая зарубежным аналогам (патент на изобретение № 2236009)
Показано, что деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности достоверно отличается деформируемость эритроцитов активных крыс выше, чем пассивных
Установлено, что у больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца деформируемость эритроцитов снижена
Впервые показано, что у больных артериальной гипертонией после амбулаторного курса лечения гипотензивным препаратом «Таветен» увеличивается деформируемость эритроцитов
Полученные результаты по деформируемости эритроцитов в опытах in vitro, m vivo и в клинических исследованиях свиде-
тельствуют о высокой разрешающей способности установки и возможности ее использования в научно-исследовательской и клинической практике
Основные положения, выносимые на защиту:
1 Созданная лабораторная установка (эктацитометр) позволяет объективно оценивать способность к упругой деформации эритроцитов теплокровных (патент на изобретение № 2236009)
2 Показано, что деформируемость эритроцитов крыс дифференцированных по уровню двигательной активности, достоверно отличается способность к упругой деформации эритроцитов активных крыс выше, чем эритроцитов пассивных животных
3 Характер стресс-нагрузок отражается на степени изменения деформируемости эритроцитов крыс
4 Деформируемость эритроцитов у больных артериальной гипертонией ниже, чем деформируемость эритроцитов у здоровых людей Корректирующая терапия с использованием препарата «Таветен» улучшает деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией после прохождения курса амбулаторного лечения.
Апробация работы Основные положения диссертации доложены на конференциях «Физика и биология в медицине» (Екатеринбург, 2001), «Актуальные проблемы эволюционной и попу-ляционной физиологии человека» (Тюмень, 2001), «XII Международное совещание и V школа по эволюционной физиологии» (С-Петербург, 2001), «XVIII Съезд физиологического общества им И П Павлова» (Казань, 2001), «VI Всероссийская конференция по биомеханике — Биомеханика 2002» (Н Новгород, 2002), «Югра-Гемо-международный научный симпозиум» (Ханты-Мансийск 2003)
Публикации По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ
Структура и объем работы Диссертация изложена на 121 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов и списка литературы Работа иллюстрирована таблицами и рисунками Библиографический указатель включает 108 отечественных и 134 зарубежных источников
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Экспериментальные исследования проводились на половозрелых беспородных крысах самцах массой 160-180 г (162 особи) Все животные содержались в стандартных условиях вивария на полноценной диете и были одного возраста Опыты проводились в осенне-зимний период Исследование деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца проводилось на базе Тюменского кардиологического центра-филиала НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН Было обследовано 35 человек в возрасте от 30 до 60 лет Контролем служили 20 человек в возрасте от 30 до 55 лет, которые не страдали артериальной гипертонией Кровь у больных и здоровых людей забиралась с помощью венопункции из вены правого плеча в одноразовый шприц объемом 2 мл и стабилизировалась 0,3% раствором цитрата натрия Проба крови экспериментальных животных и людей в объеме 100 мкл помещалась в инкубационную среду содержащую 3 мл 20% раствора полисахарида Ficoll-400 Все исследования деформируемости эритроцитов проводились методом лазерной дифрактометрии с непосредственным использованием специально сконструированного нами прибора — эктацитометра
В экспериментах m vitro по влиянию температуры среды инкубирования на деформируемость эритроцитов контроль температуры проводили с помощью термостата марки UTU-2 (Poland) Принимая во внимание влияние температурного фактора на изменение кислотности среды инкубирования эритроцитов, в среды специально добавляли один из растворов 10% раствор НС1 или 10% раствор КОН Контроль над кислотностью сред проводили с использованием рН метра марки Анион-7010 В экспериментах по изучению влияния различных концентраций глютарового диаль-дегида на деформируемость эритроцитов в инкубационные среды добавляли разные навески этого реагента (0,01%, 0,02% и 0,03% растворы). Для исследования деформируемости эритроцитов инкубированных в средах с различной осмоляльностью в инкубационные среды добавляли различные навески NaCl Осмоляльность растворов контролировали при помощи осмометра 1Ц-01
Для разделения экспериментальных животных на группы активных и пассивных крыс использовался тест «открытое поле» /Буреш, Бурешова, Хъюстон, 1991/
Эксперименты по влиянию физической нагрузки, кратковременного охлаждения, перегревания, иммобилизации и вибрации на деформируемость эритроцитов крыс проводили по стандартным методикам /Горизонтов, 1964/ В эксперименте по кратковременному охлаждению крыс помещали в специальную холодильную камеру КХН-2-6СМ, где температуру воздуха поддерживали на уровне 1-2 °С Время содержания животных в холодильной камере составляло 30 мин В эксперименте для управляемого нагревания с сохранением заданного теплового режима животных использовался термостат SPT-200 (Poland) Экспериментальные животные подвергались воздействию температуры 41°С в течение 50 минут Исследование по влиянию физических нагрузок на деформируемость эритроцитов экспериментальных животных проводили по методике «свободное плавание в клетке» (СПК) /Бондаренко с соавт, 1999/ Иммобилизацию крыс проводили с использованием специального плексигласового бокса, который ограничивал подвижность животных Время стрессорного воздействия составляло 40 минут
Лейкоформулу крови экспериментальных животных определяли по стандартным методикам с использованием камеры Го-ряева, а окраску лейкоцитов проводили по Романовскому-Гим-зе /Стенко, 1975/.
Вся статистическая обработка данных проводилась на персональном компьютере (процессор марки Celeron 1700, программа Ecto-1 со всеми основными формулами для расчета статистических показателей) О достоверности различий судили по í-крите-рию Стьюдента
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Создание эктацитометра собственной разработки.
Для оценки деформируемости эритроцитов теплокровных животных мы остановились на методе лазерной дифрактометрии с использованием созданной нами лабораторной установки (эктацито-метр) Этот выбор основывался на том, что данный метод обладает достаточной информативностью, высокой точностью, а экспериментальный материал наблюдается при условиях максимально приближенным к in vivo Основным отличительным признаком нашей установки в сравнении с существующими зарубежными аналогами явля-
ется то, что все базовые элементы нашего эктацитометра располагаются в вертикальной плоскости, что значительно уменьшает габариты установки Также был принципиально изменен механизм деформирующего воздействия на исследуемый материал Вся установка, кроме периферийных элементов, размещена внутри жесткого светонепроницаемого кожуха, что в значительной степени улучшает контрастность изображения дифракционной картины При необходимости смены образцов крови кожух легко снимается Масса установки составляет 6 5 кг, высота 50 см, длина 30 см, ширина 20 см Блок-схема эктацитометра изображена на рис 1
1 Лазер 2 Металлическая опора 3 Модуль серводвигателя 4 Поворотное зеркало 5 Нижняя вращающаяся пластина с пробой крови 6 Верхняя термостатируемая пластина с «рубашкой» для циркуляции воды 7 Термодатчик 8 Механизм регулирования ширины зазора между пластинами 9 Экран 10 Вертикальный крепежный стержень 11 Цифровая видеокамера 12 Персональный компьютер 13 Цифровое табло термодатчика
Основанием установки служит металлическая опора с жестко закрепленным стержнем, выполняющим функцию направляющей оси для размещения элементов установки шагового двигателя, обеспечивающего вращение прозрачной пластины, выполненной из проницаемого для видимого света материала (оргстекло) относительно неподвижной, гелий неонового лазера (ГИ-3-1 Р = 1,9*10"3 Вт, X = 632,8 нм), цифровой видеокамеры Canon. Усилие сдвига, вызывающее деформацию эритроцитов, создается за счет вращения нижней пластины относительно верхней — неподвижной Постоянство температуры пробы крови обеспечивается наличием специальной «рубашки», размещенной на верхней пластине и контролируется при помощи термодатчика Вращение нижней пластины регулируется при помощи шагового двигателя с переменной, но заданной частотой
Рис 1 Блок-схема портативного эктацитометра
оборотов от 0 до 28 об/мин. Это позволяет изменять усилие сдвига от 0 до 49 Н/м=. Ширина зазора между пластинами фиксируется при значении 0,5 мм. Изображение дифракционной картины проецируется на полупроницаемый экран и регистрируется при помощи цифровой видеокамеры Canon (рис. 2).
Полученное при помощи видеокамеры изображение передаётся на персональный компьютер, записывается в видеоролик посредством программы Movie Maker и сохраняется в файл формата avi. Это позволяет анализировать изменение деформируемости эритроцитов в динамике.
В качестве количественной оценки деформируемости эритроцитов используется эктацитометрический индекс или индекс деформируемости Id.
Для его расчета и построения графиков зависимости индекса деформируемости от усилия сдвига, используется программа Ecto-1, написанная в среде программирования Delphi 5.
А, В.
Рис, 2. Реальное изображение дифракционной картины, получаемое при прохождении луча лазера через слой эритроцитов, и выводимое на монитор для программного анализа. А-дифракционная картина для покоящихся эритроцитов. В-дифракциокная картина для эритроцитов, находящихся в сдвиговом потоке
С учетом того, что радиус вращающегося сектора в районе прохождения луча лазера составляет 38 мм, формула для расчета скорости
(где £3 — частота вращения; И — радиус вращающейся пластины; I — зазор между пластинами; N — скорость вращения (N/60 — число оборотов в минуту)), приобретает вид:
y=J|^ = 4V7 28 ф
При фиксированных значениях радиусов верхней и нижней пластин, скорость сдвига зависит только от скорости вращения нижней пластины, а при постоянном значении динамической вязкости t], усилия сдвига г, также определяется только скоростью вращения
г = уг]
Поэтому информация о технических константах нашей установки была записана в память программы Ecto-1, а различные усилия сдвига достигались изменением скорости вращения нижней пластины за счет переключателя расположенного на серводвигателе
Для количественной оценки выявляемого среднеклеточного удлинения при сдвиге использовался эктацитометрический показатель или индекс деформируемости Id = (А-В)/(А+В) где А и В — большая и малая полуоси дифракционного эллипса
Формулы по вычислению индекса деформируемости и основных статистических показателей также были записаны в память программы Ecto-1
Для оценки разрешающей способности портативного эктаци-тометра необходимо было провести серию экспериментов для определения степени достоверности получаемых результатов на основании их повторяемости и соответствия данным, полученным на зарубежных аналогах и представленным в литературе
2. Исследование деформируемости эритроцитов крыс в опытах in vitro.
Исследования по влиянию температурного фактора на деформируемость эритроцитов крыс в опытах m vitro проводились в суспензионных средах, термостабилизация которых поддерживалась за счет регулируемого нагревания воды в термостате
Получены достоверные различия деформируемости эритроцитов при инкубировании этих клеток в средах с температурами 37°С и 20°С на различных усилиях сдвига Индекс деформируемости эритроцитов на усилии сдвига 49 Н/м2 и при температуре среды инкубирования клеток 37°С составлял 0,24 ± 0,01, тогда как при температуре инкубационной среды 20°С и на том же усилии сдвига этот показатель составлял 0,15 ± 0,01 (Р <0,05)
На усилии сдвига 24,5 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов инкубированных в среде с температурой 37°С составлял 0,23±0,01, а при инкубировании этих клеток в среде при 20°С — 0,15±0,01 (Р<0,05) Индекс деформируемости эритроцитов на усилии сдвига 5,2 Н/м2 и при температуре среды инкубирования клеток 37°С был равен 0,11±0,01, в то время как при температуре инкубационной среды 20°С индекс деформируемости составлял 0,05±0,01 (Р<0,05)
Результаты, которые мы получили в ходе исследований, согласуются с результатами других авторов, проводивших исследования деформируемости эритроцитов при разных температурах методом фильтрации /Fiocco, Quattrocchi, Neirotti, et al, 1984, Sung, Chien, 1992/
В следующем эксперименте для оценки разрешающей способности эктацитометра был проведен эксперимент на эритроцитах крыс, инкубированных в средах с различными значениями рН (от 5,4 до 9) Эксперимент проводился при постоянном усилии сдвига г = 49 Н/м2 и температуре 37°С Индекс деформируемости эритроцитов в интервале рН от 7,0 до 7,4 достигал максимального значения (0,24 ± 0,01), в то время как при отклонении рН в кислую и щелочную сторону наблюдалось достоверное снижение этого показателя Так, например, при инкубировании эритроцитов крыс в слабо-щелочной среде (рН=8,2) индекс деформируемости клеток составлял 0,19±0,01, а при рН=5,8 - 0,16±0,01 Результаты наших исследований хорошо согласуются с данными зарубежных авторов, изучавшими деформируемость эритроцитов методами фильтрации /Crandal, Critz, Osher, 1972, Kucera, et al, 1984/ и эктацитометрии /Koutsouris, Delatour-Hanss, Hanss, 1985/
Для исследования деформируемости эритроцитов крыс, инкубированных в средах с различной концентрацией глютарового диальдегида проводилась следующая серия экспериментов
После 5 минут инкубации эритроцитов крыс в средах содержащих 20% раствор Ficoll-400 в буферном растворе (0,30 M NaCl, 0,020 M Na2HP04, 0,005 M KH2P04, pH = 7,4, при 37°C) с добавлением глютарового диальдегида в конечных концентрациях равных 0,01%, 0,02%, 0,03% были получены следующие результаты
Было показано, что после инкубирования эритроцитов в средах с более высокими концентрациями глютарового диальдегида
наблюдалось явное снижение деформируемости клеток относительно контроля Так, после инкубирования эритроцитов в среде содержащей глютаровый диальдегид в концентрации 0,01% индекс деформируемости этих клеток на максимальном усилии сдвига (49 Н/м2) составлял 0,18±0,01, тогда как в отсутствие глютарового диальдегида в среде инкубирования — 0,24±0,01 (Р<0,05) При увеличении концентрации глютарового диальдегида в среде инкубирования до 0,02% и 0,03% — индекс деформируемости составлял 0,12±0,01 и 0,07 ± 0,01 соответственно
На следующем этапе нашей работы исследовалась деформируемость эритроцитов крыс после инкубирования клеток в растворах с различной осмоляльностью Эксперимент проводился при постоянном значении усилия сдвига (г = 49 Н/м2) Диапазон осмоляльности растворов находился в пределах от 100-450 mOsm/ kg Максимальное значение индекса деформируемости эритроцитов крыс (0,24 ± 0,01) было зарегистрировано после инкубации этих клеток в изоосмоляльной среде (300 mOsm/kg) При увеличении осмоляльности инкубационной среды от 300 до 450 mOsm/kg наблюдалось постепенное снижение деформируемости эритроцитов Так, после инкубации эритроцитов в гиперос-моляльном растворе (450 mOsm/kg) индекс деформируемости эритроцитов достоверно снижался до 0,12±0,02 и это снижение по сравнению со значением индекса деформируемости эритроцитов, инкубированных в изоосмоляльной среде, составило 50% После инкубирования эритроцитов в гипоосмоляльной среде (200 mOsm/kg) индекс деформируемости эритроцитов составлял 0,18±0,01, те был на 25% ниже значения индекса деформируемости эритроцитов, инкубированных в изоосмоляльной среде
Результаты проведенных нами исследований хорошо согласуются с результатами, полученными Н Schmid-Schonbem (1982) исследовавшим деформируемость эритроцитов методом фильтрации Исследования деформируемости эритроцитов в опытах in vitro показывают, что различные физико-химические факторы по-разному влияют на деформируемость эритроцитов, а использование сконструированного нами эктацитометра позволяет выявлять эти различия
Полученные результаты исследований показали хорошую разрешающую способность используемого эктацитометра, что
позволило нам применять его для изучения деформируемости эритроцитов крыс не только в опытах m vitro, но и m vivo.
3. Исследование деформируемости эритроцитов у крыс с различным уровнем двигательной активности в опытах in vivo.
Результаты разделения экспериментальных животных методом «открытое поле» на группы активных и пассивных крыс представлены в таблице 1 Как видно из данных таблицы 1 активные животные характеризуются большим количеством пересечений квадратов, вертикальных стоек и числом актов грум-минга по сравнению с пассивной группой
В качестве факторов влияющих на деформируемость эритроцитов активных и пассивных крыс использовались такие воздействия как холодовой стресс, механическая вибрация, кратковременное перегревание, иммобилизационный стресс и физическая нагрузка в виде принудительного плавания
Таблица 1
Поведенческие характеристики крыс с различной двигательной активностью при тестировании в открытом поле
Характеристики
Тип Число Число Число стоек Число Число дефекации Число
поведения животных пересечении выходов актов
квадратов в центр грумминга
Активное 60 135,0+10,3 46,5±7,4 3,5±1,0 5,8±0,2 9,3+3,2
Пассивное 60 41,5+4,2* 8,4±1,3** 0,4+0,1 3,7±0,7 4,2±1,3*
Известно, что стрессорные воздействия изменяют иммуноге-матологическую реакцию, которая развивается достаточно быстро и может быть зарегистрирована по изменению количественного состава лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови /Гольдберг, 1992/ Поэтому в качестве гематологического критерия стрессорного состояния организма экспериментальных животных использовался анализ лейкоформулы /Стенко, 1975/ 3.1. Влияние кратковременного охлаждения на деформируемость эритроцитов крыс.
Результаты исследований по воздействию холодового стресса на лейкограмму и деформируемость эритроцитов крыс представлены в таблице 2 и на рисунке 3
Как видно из таблицы 2 после кратковременного охлаждения в крови опытных животных было зарегистрировано досто-
верное возрастание количества лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, сегментоядерных нейтрофилов, а также отмечалось достоверное снижение относительного содержания эозино-филов и лимфоцитов, что свидетельствовало о возникшей стресс реакции организма
Таблица 2
Лейкограмма активных и пассивных крыс после кратковременного охлаждения (М±т)
Показаюль Лейкоциш, Ю'/л Палочкояд НСЙф, % Cci мен г НСЙ ф , % Эозинофилы, % МОНОЦИ1Ы, % лигифоци 1 ы, %
контроль (п—10) 4,40±0,11 0,75±0,25 16 75±2,03 1,38±0,42 1,82±0,23 79,30±2,23
Холодовой стресс (пассивные) (п-10) б,10±0,17 1,54±0,20 * 24,70+2,01 *** 0,19+0,12 * 1,98+0,16 71,75± 1,75 **
Холодовой стресс (астивныс) (п-10) 6,30±0,18 *** 1,69±0,22 ** 27,04±1,75 *** 0,60±0,15 ** 1,36±0,12 69,18+1,78 **
Примечание достоверность различий по сравнению с контролем * - Р < 0,05, **- Р < 0,01, *** - Р < 0,001
Деформируемость эритроцитов активных и пассивных крыс также достоверно изменялась по сравнению с контролем (рис 3) Так, на максимальном усилии сдвига (49 Н/м2) индекс деформируемости клеток контрольных крыс составлял 0,24±0,01, а после кратковременного охлаждения активных крыс данный показатель увеличивался до 0,37±0,02 (увеличение на 54%) У пассивных крыс индекс деформируемости эритроцитов на максимальном усилии сдвига увеличивался на 20% и составлял 0,29± 0,01 (Р< 0,05) На среднем усилии сдвига (21 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов экспериментальных животных в контроле составлял 0,22±0,01, у активных крыс данный показатель увеличивался до 0,32±0,01 (на 45%) Индекс деформируемости эритроцитов у пассивных крыс на усилии сдвига 21 Н/м2 достоверно увеличивался на 13% и составлял 0,25±0,01 (Р<0,05)
На минимальном усилии сдвига (5,2 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов контрольных крыс составлял 0,13±0,01, тогда как у активных крыс данный показатель увеличивался на 46% и составлял — 0,19±0,02 У пассивных крыс достоверных
различий по сравнению с контрольной группой на данном усилии сдвига не обнаружено
1(1
0,45 -|
0 5Д 8,7 12,2 17,5 21 24,5 33,2 36,7 45,5 49 Н/м3
Рис 3 График зависимости индекса деформируемости эритроцитов активных и пассивных крыс от усилия сдвига после кратковременного охлаждения 1 — активные крысы, 2 — пассивные крысы, 3 — контроль
3.2. Влияние иммобилизационного стресса на деформируемость эритроцитов крыс.
Результаты исследований по воздействию иммобилизационного стресса на лейкограмму и деформируемость эритроцитов крыс представлены в таблице 3 и на рисунке 4
Как видно из таблицы 3 после иммобилизационного стресса в крови крыс увеличивалось содержание лейкоцитов, палочкоя-дерных нейтрофилов и сегментоядерных нейтрофилов, при этом отмечалось достоверное снижение относительного содержания эозинофилов и лимфоцитов
У крыс, подвергнутых иммобилизационному стрессу, индекс деформируемости эритроцитов достоверно увеличивался на малых, средних и больших усилия сдвига по сравнению с показателями контрольной группы (рис 4) Так, например, при усилии сдвига 49Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов контрольных крыс составлял 0,24 ± 0,01, тогда как у активных крыс увеличивался на 70% (0,41 ± 0,01), у пассивных животных данный показатель возрастал на 29% и составлял 0,31 ±0,02
Таблица 3
Лейкограмма активных и пассивных крыс после иммобилизационного стресса (М±т)
Показатель Лейкоциты, Ю'/л Палочкояд нейтр, % Сегмент нсйтр, % Эозинофилы Моноциты, % Лимфоцит, %
ком гроль (п-10) 4,28±0,13 0,7510,25 16,7512,03 1,3810,42 1,82Ю,23 79,3012,23
Иммобилизация (пассивные) (п-10) 5,91+0,20 1,21+0,15 ** 24,5211 51 0,2010,11 ** 2,0010,29 73,7511,82 **
Иммобилизация (активные) (п-Ю) б,00±0,18 *** 1,5810,19 * 26,8611,63 ** 0,4210,24 * 1,2911,01 70,1912,00 ***
Примечание достоверность различий по сравнению с контролем * — Р < 0,05, **— Р < 0,01, *** — р < 0,001
О 5,2 8,7 12,2 17,5 21 24,5 ЗЗД 36,7 45,5 49 Н/м*
Рис 4 График зависимости индекса деформируемости эритроцитов активных и пассивных крыс от усилия сдвига
после иммобилизационного стресса 1 — активные крысы, 2 — пассивные крысы, 3 — контроль
На усилии сдвига 21 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов экспериментальных животных в контроле составлял 0,22 ±0,01, у активных и пассивных крыс данный показатель достоверно увеличивался до 0,35±0,01 (увеличение на 59%) и 0,28±0,01 (увеличение на 27%) соответственно На усилии сдвига 5,2 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов опытной группы крыс достоверно увеличивался по сравнению с контрольными показателями Так, у контрольной группы крыс на данном усилии сдвига индекс деформируемости составлял 0,13±0,01, у активных — 0,20±0,01 (увеличение на 53%), у пассивных — 0,19±0,01 (увеличение на 46%)
3.3. Влияние кратковременного перегревания на деформируемость эритроцитов крыс.
Результаты исследований по воздействию кратковременного перегревания на количественный состав лейкоцитов и деформируемость эритроцитов крыс представлены в таблицах 4 и на рисунке 5
Как видно из таблицы 4, в результате стресс-реакция произошли существенные изменения в показателях лейкофориулы, что свидетельствует о включение адаптационных механизмов организма
Таблица 4
Лейкограмма активных и пассивных крыс подвергнутых кратковременному перегреванию (М±т)
Показатель Лейкоциты, 109/л Палочкояд иейтр, % Сегмент иейтр, % Эозинофилы, % Моноциты, % Лимфоциты, %
Контроль (п-10) 4,20±0,12 0,71 ±0,22 16,61±2,Ю 1,42±0,41 1,90±0,25 80,31 ±2,25
Перегревание (пассивные) (п-10) 5,90±0.П ** 1,44±0,10 * 25,60±1,01 0,20±0,16 * 1,80±0,24 70,48±0,12 **
Перегревание (активные) (п-10) 6,10±0,16 *** |,70±0,12 28,14±!,34 *** 0,55±0,42 ** 1,00±0,17 59,!4±0,1б #*
Примечание достоверность различий по сравнению с контролем * — Р < 0,05, **— Р < 0,01, *** — Р < 0,001
Результаты исследования, представленные на рисунке 5, показывают, что деформируемость эритроцитов у активных и пассивных крыс достоверно увеличивалась после кратковременного перегревания по сравнению с контрольной группой
На усилии сдвига 49 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов контрольной группы крыс был равен 0,24±0,01, у опытных животных достоверно увеличивался и составлял для активных — 0,38±0,02 (увеличение на 58%) и пассивных животных — 0,29±0,01 (Р<0,05) (увеличение на 20%)
На среднем усилии сдвига (21 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов контрольной группы крыс составлял 0,22±0,02, у активных крыс данный показатель был равен 0,33±0,01 (увеличение на 50%), у пассивных крыс индекс деформируемости эритроцитов составлял 0,27±0,01 (Р<0,05) (увеличение на 22%)
Рис 5 График зависимости индекса деформируемости эритроцитов активных и пассивных крыс от усилия сдвига после кратковременного перегревания 1 — активные крысы, 2 — пассивные крысы, 3 — контроль
На усилии сдвига 5,2 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов контрольных крыс составлял 0,13±0,01, тогда как у опытных животных данный показатель был достоверно выше у активных крыс увеличивался на 61% и составлял 0,21±0,01, а у пассивных крыс на 23% и составлял 0,16^=0,01
3.4. Влияние принудительного плавания на деформируемость эритроцитов крыс.
Результаты исследований по воздействию принудительного плавания на лейкограмму и деформируемость эритроцитов крыс представлены в таблице 5 и на рисунке б
Как видно из таблицы 5, после перенесенного стресса, вызванного принудительным плаванием, в крови опытных животных было зарегистрировано достоверное возрастание количества лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, сегментоядер-ных нейтрофилов, а также отмечалось достоверное снижение относительного содержания эозинофилов и лимфоцитов Данные представленные на рисунке 6 показывают, что у крыс, подвергнутых принудительному плаванию индекс деформируемости эритроцитов достоверно увеличивался по сравнению с показателями контрольной группы
Таблица 5
Лейкограмма активных и пассивных крыс подвергнутых принудительному плаванию (М±т)
Показатель Лейкоциты, Ю'/л Палочкояд нейтр, % Сегмент нейтр, % Эозинофилы, % Моноциты, % лимфоциты, %
Контроль (п-10) 4,20±0,12 0,71 ±0,22 !6,61±2,10 1,42±0,41 1,90±0,25 80,3112,25
Плавание (пассивные) (п-10) 4,80±0,12 1,4510,79 ** 23,53±0,51 ** 0,32±0,71 ** 2,11±0,17 74,47±2,92
Плавание (активные) (п-10) 5,90±0,14 *** 1,78±0,!4 * 25,29±0,48 ** 0,53±0,58 2,12±2,05 67,19± 1,21 ***
Примечание достоверность различий по сравнению с контролем * — Р < 0,05, ** — Р < 0,01, *** — Р < 0,001
Так, например при усилии сдвига 49Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов контрольных крыс был равен 0,24±0,01, тогда как у активных крыс увеличивался на 50% (0,36±0,01), у пассивных животных данный показатель увеличивался на 16% и составлял 0,28±0,01 (Р<0,05) На среднем усилии сдвига (21 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов экспериментальных животных в контроле был равен 0,22±0,02, у активных крыс данный показатель достоверно увеличивался до 0,30±0,01 (увеличение на 36%) и
Рис 6 График зависимости индекса деформируемости эритроцитов активных и пассивных крыс от усилия сдвига после принудительного плавания 1 — активные крысы, 2 — пассивные крысы, 3 — контроль
На усилии сдвига 5,2 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов опытной группы крыс достоверно увеличивался по сравнению с контрольными показателями. Так, у контрольной группы крыс на данном усилии сдвига индекс деформируемости составлял 0,13±0,02, у активных — 0,20±0,01 (увеличение на 53%) 3.5. Влияние вибрационного стресса на деформируемостьэ-ритроцитов крыс.
Результаты исследований по воздействию вибрационного стресса на лейкограмму и деформируемость эритроцитов крыс представлены в таблице 6 и на рисунке 7
Результаты исследований лейкограммы представленные в таблице 6 демонстрируют, что после вибрационного стресса в крови опытных животных наблюдалось достоверное возрастание количества лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, сегментоя-дерных нейтрофилов, а также отмечалось достоверное снижение относительного содержания эозинофилов и лимфоцитов
Таблица 6
Лейкограмма активных и пассивных крыс подвергнутых вибрационному стрессу (М±ш)
Показатель Лейкоциты, 109/л Палочкояд нейтр, % ССГУСНТ нейтр , % эозинофилы, % моноциты, % Лимфоциты, %
контроль (п=10) 4,40±0,И 0,94+0,21 17 б0±1 06 !,37±0,18 2,31 ±0,20 77,80±1,03
механическая вибрация (активные) (п=10) 6,06±0,П 1,36±0,19 27,73±1,04>-* 0,1б±0,11 2,11±0,2б 68,92+1,87
механическая вибрация (пассивные) (п=Ю) 5,09+0,11 1,47+0,20 * 28,75±1,08** 0,18+0,13 2,1340,28 65,81 ±1,22
Примечание достоверность различий по сравнению с контролем * — Р < 0,05, « — р < 0,01, — Р < 0,001
У крыс, подвергнутых вибрационному стрессу, индекс деформируемости эритроцитов достоверно снижался на различных усилиях сдвига по сравнению с показателями контрольной группы (рис 7)
На усилии сдвига 49 Н/м2 индекс деформируемости контрольной группы крыс был равен 0,24±0,01, у опытных активных животных достоверно снижался на 25% и составлял 0,18±0,02, а
у пассивных животных на 34% и составлял 0,16±0,01 На среднем усилии сдвига (21 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов контрольной группы крыс составлял 0,22±0,02, у активных крыс данный показатель был равен 0,18±0,01 (снижение на 19%), у пассивных крыс индекс деформируемости эритроцитов составлял 0,16±0,01 (снижение на 28%) На минимальном усилии сдвига (5,2 Н/м2) индекс деформируемости эритроцитов контрольных крыс составлял 0,13±0,01, тогда как у опытных животных данный показатель был достоверно ниже у активных крыс — 0,08±0,01 (на 39%), а у пассивных крыс — 0,07±0,01 (на 47%)
м
Рис 7 График зависимости индекса деформируемости эритроцитов активных и пассивных крыс от усилия сдвига после вибрационного стресса 1 — контроль, 2 — активные крысы, 3 — пассивные крысы
4. Влияние гипотензивного препарата «Таветен» на деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца.
В нашей работе проводилось исследование деформируемости эритроцитов у больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца до лечения и после 8-ми недельного курса лечения препаратом «Таветен»
На первом этапе исследовалась деформируемость эритроцитов здоровых людей и больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца до лечения препаратом «Таветен» (рис 8)
Отмечено достоверное различие деформируемости эритроцитов у больных артериальной гипертонией по сравнению со здоровыми людьми Так, у больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца индекс деформируемости эритроцитов на максимальном усилии сдвига (49 Н/м2) составлял 0,33± 0,01, у здоровых этот показатель был выше на 12% (0,37±0,01) На усилии сдвига 21 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов здоровых людей составлял 0,31±0,01, в то время как у больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца — 0,27±0,01 (Р<0,05)
и
5,2 8,7 12,2 17,5 21 24,5 33,2 36,7 45,5 49 Н/м2
Рис 8. График зависимости индекса деформируемости эритроцитов здоровых людей и больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца 1 — здоровые люди, 2 — больные артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца
На следующем этапе исследовалось влияние гипотензивного препарата «Таветен» на деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца после 8-ми недельного курса лечения (рис 9)
Отмечалось, что после лечения препаратом «Таветен» индекс деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией на усилии сдвига 49 Н/м2 достоверно увеличивался и составлял 0,37±0,01 по сравнению с исходным значением полу-
ченным до лечения — 0,33±0,01 (увеличение на 12% при Р<0,05) На среднем усилии сдвига 21 Н/м2 индекс деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией после лечения препаратом «Таветен» достоверно увеличивался на 11% и составлял 0,30±0,01, тогда как до лечения этот показатель был равен 0,27±0,01 (Р<0,05)
Id
Рис 9 График зависимости индекса деформируемости больных
артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца до и после после 8-ми недельного курса лечения гипотензивным препаратом «Таветен» 1 — больные после лечения, 2 — больные до лечения препаратом «Таветен»
ВЫВОДЫ
1 Создана новая модель устройства, отличающаяся от ранних прототипов, меньшими габаритами, точностью измерений и возможностью оперативной обработки изображения дифракционных картин с использованием персонального компьютера и специального программного обеспечения
2 В опытах по оценке деформируемости эритроцитов крыс помещенных в среды с различными нефизиологическими значениями температуры, рН и осмоляльности было отмечено достоверное снижение деформируемости. Наиболее физиологические показатели деформируемости эритроцитов крыс в опытах in vitro отмечались после инкубирования клеток в средах с температурой 37 °С, рН 7-7,4, осмоляльностью 300 mOsm/kg
3. У животных с различным уровнем двигательной активности выявлены отличия в деформируемости эритроцитов Деформируемость эритроцитов активных крыс была достоверно выше по сравнению с данным показателем пассивных животных
4 Деформируемость эритроцитов экспериментальных животных как в группе пассивных, так и в группе активных крыс увеличивалась после воздействия стрессорных нагрузок таких как, физическая нагрузка, кратковременное охлаждение, перегревание, иммобилизация После воздействия вибрационного стресса в обеих группах экспериментальных животных отмечалось снижение деформируемости эритроцитов относительно контрольной группы
5 Деформируемость эритроцитов у больных артериальной гипертонией снижена по сравнению со здоровыми людьми Применение препарата «Таветен» в течение 8-ми недельного курса лечения, приводит к увеличению деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1 Эктацитометрия Новые технические решения Новые перспективы / Белкин А В, Марьинских В В, Сайфиев Р Р., Ша-лабодов АД// Сборник тезисов научных работ' «Физика в биологии и медицине» - Екатеринбург, - 2001. - С 1011
2 Оценка деформируемости эритроцитов различной степени зрелости /Белкин А В, Марьинских В. В, Сайфиев Р. Р, Шала-бодов АД// Тезисы докладов1 «XVIII Съезд физиологического общества им. И П Павлова» - Казань, - 2001. - С. 309.
3 Влияние физиологических стрессов на реологические показатели эритроцитов крыс / Белкин А В., Марьинских В В, Сайфиев Р Р, Шалабодов А Д // В сборнике научных работ «Актуальные проблемы эволюционной и популяционной физиологии человека» - Тюмень, - 2001 - С 39-40
4 Новые конструктивные решения в эктацитометрии / Белкин А В, Марьинских В В, Сайфиев Р Р, Шалабодов АД.// Тезисы докладов «XII Международное совещание и V школа по эволюционной физиологии» - С-Петербург, - 2001 - С 20.
5 Исследование деформационных свойств эритроцитов с использованием усовершенствованного эктацитометра / Белкин А, В, Марьинских В В, Шалабодов АД// Тезисы докладов' «VI Всероссийская конференция по биомеханике — Биомеханика-2002» - Н Новгород, 2002 - С 33
6 Оценка влияния механических вибраций на реологию эритроцитов крыс/ [А В Белкин, А В Колычева, В В Марьинских и др] // Югра-Гемо материалы международного научного симпозиума - Ханты-Мансийск, - 2003 - С 31-34
7 Исследование вязкоэластических свойств мембран эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности и их реакция на стрессы различной этиологии / Белкин А В, Марьинских В В, Турбасова Н. В, Шалабодов АД// Вестник Тюменского Государственного Университета. - 2007 - № 3 - С 234-239
Подписано в печать 18 09 2007 Тираж 100 экз Объем 1,0 уч-изд л Формат 60x84/16 Заказ 509
Издательство Тюменского государственного университета 625000, г Тюмень, ул Семакова, 10 Тел/факс (3452) 45-56-60, 46-27-32 E-mail izdatelstvo@utmn ru
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Марьинских, Василий Владимирович
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I (Обзор литературы)
1.1. Строение мембранного скелета эритроцита
1.2. Значение реологических свойств крови для функционирования систем организма
1.2.1. Параметры клеток, определяющие их деформируемость
1.2.2. Величина деформируемости эритроцита во многом зависит от механических свойств мембраны клетки и от способа деформации
1.2.3. Гетерогенность популяции эритроцитов по параметрам, определяющим их деформируемость
1.2.4. Механизмы, обеспечивающие способность эритроцитов к деформации
1.3. Влияние патологических состояний организма на деформируемость эритроцитов
1.4. Особенности физиолого-биохимических показателей крыс с различным уровнем двигательной активности
1.5. Обзор методов, применяющихся для изучения деформируемости эритроцитов
1.5.1. Эксперименты с эритроцитом в проточной камере
1.5.2. Опыты с микропипеткой
1.5.3. Метод микрофильтрации
1.5.4. Метод центрифугирования
1.5.5. Метод лазерной дифрактометрии
ГЛАВА II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 42 2.1. Исследование деформируемости эритроцитов крыс в опытах in vitro
2.2. Исследование деформируемости эритроцитов крыс in vivo
2.2.1. Методика определения различного уровня двигательной активности крыс методом «открытое поле»
2.2.2. Моделирование стрессов у экспериментальных животных
2.2.3. Методика расчета лейкоформулы крови крыс
2.3. Методика проведения эктацитометрических измерений
2.3.1. Физико-химические свойства инкубационной среды Ficoll
2.3.2. Описание эктацитометрической установки
2.4. Клинические исследования деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца
ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Исследование деформируемости эритроцитов крыс в опытах in vitro
3.1.1. Влияние температуры на деформируемость эритроцитов крыс
3.1.2. Влияние рН среды инкубирования на деформируемость эритроцитов крыс
3.1.3. Влияние глютарового диальдегида на деформируемость эритроцитов крыс
3.1.4. Влияние осмоляльности среды инкубирования на деформируемость эритроцитов крыс
3.2. Исследование деформируемости эритроцитов у крыс с различным уровнем двигательной активности в опытах in vivo
3.2.1. Влияние кратковременного охлаждения на деформируемость эритроцитов крыс
3.2.2. Влияние иммобилизационного стресса на деформируемость эритроцитов крыс
3.2.3. Влияние кратковременного перегревания на деформируемость эритроцитов крыс
3.2.4. Влияние принудительного плавания на деформируемость эритроцитов крыс
3.2.5. Влияние вибрационного стресса на деформируемость эритроцитов крыс
3.3. Исследование влияния гипотензивного препарата таветен на деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией в клинике
ГЛАВА IV ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ
Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование вязкоэластических свойств мембран эритроцитов беспородных белых крыс с различным уровнем двигательной активности в ответ на стрессы различной этиологии и оценка деформируемости эритроцитов людей с гипертонией"
В последние годы оценка реологических свойств крови и ее компонентов приобретают все большее значение для научно-исследовательской и клинической практики. В норме эритроциты обладают высокой деформируемостью, что определяется вязкоэластическими свойствами мембраны, высоким отношением площади поверхности к объему клетки и низкой вязкостью внутриклеточного содержимого. Это позволяет эритроцитам, имеющим диаметр около 8 мкм., свободно проходить через капилляры диаметром до 3 мкм., обеспечивая транспорт кислорода всем клеткам живого организма.
По мнению авторов /Weed, 1980; Mohandas, 1992/, деформируемость эритроцитов является одним из главных свойств, определяющих продолжительность их жизни in vivo и зависит как от внешних сил (главным образом сдвигового напряжения и скорости сдвига), а так же от внутренних факторов: вязкоэластических свойств мембраны, вязкости внутриклеточного гемоглобина и геометрии клетки (отношению площади поверхности к объему).
Существует ряд методов, позволяющих определить деформируемость эритроцитов, но они крайне сложны и требуют дорогостоящего оборудования, или выполняются в условиях далеких от in vitro (микропипеточные методы и способ центрифугирования) /Соггу, Mieselman, 1978;Jones е.а., 1984/, эти методы недостаточно точны и трудоемки по выполнению. На наш взгляд, самый адекватный на сегодняшний день метод, который позволяет провести оперативную и информативную оценку деформируемости эритроцитов основан на компьютерной эктацитометрии и реализован в приборе получившим название эктацитометр/Bessis, et.al., 1981; Mohandas, et.al., 1981/.
Таким образом, способ измерения деформируемости эритроцитов с помощью эктацитометра, позволяет получать объективную количественную и качественную информацию о физических свойствах эритроцитов, а использование компьютера значительно повышает точность измерений, снижает трудоемкость проведения эксперимента и ускоряет процесс обработки полученных данных.
В настоящее время в России отсутствует серийная модель эктацитометра, что в значительной мере ограничивает возможности проведения исследований по изучению деформируемости эритроцитов и ее влияние на реологические свойства клеток крови.
Поэтому, разработка и создание отечественной модели эктацитометра с компьютерной обработкой полученной информации, отработка технологии эктацитометрических исследований деформируемости эритроцитов млекопитающих с различным уровнем двигательной активности, внедрение эктацитометрии в практику научно-исследовательских и клинических лабораторий России, безусловно является актуальной проблемой.
Цель исследования: С использованием разработанной модели эктацитометра изучить деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности при моделировании стрессов различной этиологии, а также у больных артериальной гипертонией. Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
1. Сконструировать эктацитометрическую установку новой модификации.
2. Исследовать влияние физико-химических факторов на деформируемость эритроцитов крыс в опытах in vitro.
3. Изучить роль физиологических стрессов на деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности.
4. Исследовать деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией.
Научная новизна
Создана лабораторная установка на основе метода лазерной дифрактометрии по техническим характеристикам не уступающая зарубежным аналогам, (патент на изобретение №2236009)
Показано, что деформируемость эритроцитов крыс с различным уровнем двигательной активности достоверно отличается: деформируемость эритроцитов активных крыс выше, чем пассивных.
Установлено, что у больных артериальной гипертонией с ишемической болезнью сердца деформируемость эритроцитов снижена.
Впервые показано, что у больных артериальной гипертонией после амбулаторного курса лечения гипотензивным препаратом «Таветен» увеличивается деформируемость эритроцитов.
Полученные результаты по деформируемости эритроцитов в опытах in vitro, in vivo и в клинических исследованиях свидетельствуют о высокой разрешающей способности установки и возможности ее использования в научно-исследовательской и клинической практике.
Основные положения, выносимые на защиту:
1.Созданная лабораторная установка (эктацитометр) позволяет объективно оценивать способность к упругой деформации эритроцитов теплокровных, (патент на изобретение №2236009)
2.Показано, что деформируемость эритроцитов крыс дифференцированных по уровню двигательной активности, достоверно отличается: способность к упругой деформации эритроцитов активных крыс выше, чем эритроцитов пассивных животных.
3.Характер стресс-нагрузок отражается на степени изменения деформируемости эритроцитов крыс.
4.Деформируемость эритроцитов у больных артериальной гипертонией ниже, чем деформируемость эритроцитов у здоровых людей. Корректирующая терапия с использованием препарата «Таветен» улучшает деформируемость эритроцитов больных артериальной гипертонией после прохождения курса амбулаторного лечения.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на конференциях: «Физика и биология в медицине» (Екатеринбург, 2001),
Актуальные проблемы эволюционной и популяционной физиологии человека» (Тюмень, 2001), «XII Международное совещание и V школа по эволюционной физиологии» (С.-Петербург, 2001), «XVIII Съезд физиологического общества им. И.П. Павлова» (Казань, 2001), «VI Всероссийская конференция по биомеханике - Биомеханика 2002» (Н.Новгород, 2002), «Югра-Гемо - международный научный симпозиум» (Ханты-Мансийск 2003).
Публикации: По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ.
Структура и объем работы: Диссертация изложена на 121 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Библиографический указатель включает 108 отечественных и 134 зарубежных источников.
Заключение Диссертация по теме "Физиология", Марьинских, Василий Владимирович
ВЫВОДЫ
1. Создана новая модель устройства, отличающаяся от ранних прототипов, меньшими габаритами, точностью измерений и возможностью оперативной обработки изображения дифракционных картин с использованием персонального компьютера и специального программного обеспечения.
2. В опытах по оценке деформируемости эритроцитов крыс помещенных в среды с различными нефизиологическими значениями температуры, рН и осмоляльности было отмечено достоверное снижение деформируемости. Наиболее физиологические показатели деформируемости эритроцитов крыс в опытах in vitro отмечались после инкубирования клеток в средах с температурой 37 °С, рН 7-7,4, осмоляльностью 300 mOsm/kg.
3. У животных с различным уровнем двигательной активности выявлены отличия в деформируемости эритроцитов. Деформируемость эритроцитов активных крыс была достоверно выше по сравнению с данным показателем пассивных животных.
4. Деформируемость эритроцитов экспериментальных животных как в группе пассивных, так и в группе активных крыс увеличивалась после воздействия стрессорных нагрузок таких как, физическая нагрузка, кратковременное охлаждение, перегревание, иммобилизация. После воздействия вибрационного стресса в обеих группах экспериментальных животных отмечалось снижение деформируемости эритроцитов относительно контрольной группы.
5. Деформируемость эритроцитов у больных артериальной гипертонией снижена по сравнению со здоровыми людьми. Применение препарата «Таветен» в течение 8 -ми недельного курса лечения, приводит к увеличению деформируемости эритроцитов больных артериальной гипертонией.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Марьинских, Василий Владимирович, Тюмень
1. Александрова Н.П., Кириенко А.И., Петухов Е.Б., Матюшенко А.А. Особенности реологии крови у больных с хронической постэмболической легочной гипертензией // Кардиология. 1991. - № 6. - С. 70-72.
2. Апполонова Л.А. Эритроцитарные реакции и метаболические сдвиги при длительной экспериментальной гиперкатехоламинемии / Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1987. № 2. С. 148-151.
3. Айрапетянц М.Г., Вейн A.M. Неврозы в эксперименте и клинике. М.: Наука, 1982. 272 с.
4. Айрапетянц М.Г., Хоничева Н.М., Мехедова А.Я., Ильяна Вильяр X. реакция на умеренные функциональные нагрузки у крыс с индивидуальными особенностями поведения // Журн. высш. нерв. деят. 1980. Т.30. №5. С. 944.
5. Барабаш Н.А. Периодическое действие холода на устойчивость организма /Успехи физиологических наук. 1996. №4. С. 1165-119.
6. Белкин А.В. Эктацитометрическая характеристика деформабильности эритроцитов разных возрастных популяций в условиях нормального и напряженного эритропоэза.: Дисс канд. биол. наук. Тюмень., 1996.121 с.
7. Белопухов В. М. Коагуляционные и реологические показатели при синдроме повышенной вязкости крови // Лабораторное дело. 1991. - № 4.-С. 29-30.
8. Бианки В.Л., Филлипова Е.Б., Мурик С.Э. Межполушарная асимметрия «эмоционального резонанса» у крыс // Журн. высш. нерв. деят. 1985. Т.35. №2. С.261.
9. Бондаренко О.Н., Бондаренко Н.А., Манухина Е.Б. Влияние различных методик стрессирования и адаптации на поведенческие и соматические показатели у крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - № 8. - С.157-160.
10. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Дж. П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. М.: Высш. шк., 1991. 399 с.
11. Вершинина A.M., Гапон Л.И., Шуркевич Н.П., Красноперова И.Ф., Петелина Т.Н., Криночкин Д.В. Роль патологии клеточных мембран в формировании артериальной гипертонии // Терапевтический архив. -1998.-№12.-С. 24-28.
12. Витриченко Е.Е. Гематологические и гемодинамические корреляты экспериментального эмоционального стресса: Автореф. Дис. . канд. Биол. наук. Харьков, мед. Ин-т. 1987. 16 с.
13. Визир А.Д., Островская С.В. Морфометрические характеристики эритроцитов крови и их катехоламиносвязывающие свойства у больных гипертонической болезнью II стадии // Медицинская реабилитация, курортология, физиотерапия. 1998. - №1. - С. 44-45.
14. Викулов А.Д., Мельников А.А., Осетров И.А. Деформируемость эритроцитов у спортсменов // Физиология человека. 1999. - № 4. - С. 136-139.
15. Ганелина И.Е., Денисенко А.Д., Катюхин JI.H., Николаева Е.П., Скверчинская Е.А., Степанова Т.А., Чуреков Г.А. Липиды плазмы крови и реологические свойства эритроцитов у больных со стабильной стенокардией // Кардиология. 2000. - №8. - С. 62-63.
16. Герштейн Л.М., Камышева А.С., Чеботарева Т.Л. и др. Морфохимическая характеристика мозга крыс линии Вистар, различающихся по локомоторной активности в открытом поле // Журн. высш. нерв. деят. 1991. Т.41. №2. С. 300.
17. Гольдберг Е.Д., Дыгай М.А., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск.: Издательство Томского Университета, 1992. 264 с.
18. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Богдашин И.В. Роль гуморальных факторов в регуляции гемопоэза при стрессе / Бюл. эксперим. Биологии и медицины. 1991. №7. С. 15-18.
19. Горизонтова М.П. Микрогемодинамика и проницаемость микрососудов в условиях стресса / Вестник академии медицинских наук СССР. 1988. №2. С. 44-51.
20. Гуляева Н.В. перекисное окисление липидов в мозге при адаптации к стрессу. Дис. .докт. биол. наук. М., 1989.450 с.
21. Гуревич B.C., Моисеева О.М., Михайлова И.А., Рой А.Ю. Активность транспортных АТФаз и функциональные свойства клеток крови у больных гипертонической болезнью // Вопросы медицинской химии. -1993.-№1.-С. 32-34.
22. Гущин А.Г., Муравьев А.В., Шаечкина И.К. Оценка комплекса гемореологических параметров при эритроцитозе // Физиология человека. 2000. - № 2. - С. 111-114.
23. Дешевой Ю.Б., Мороз Б.Б., Лебедев В.Г. Система крови при действии на организм холодового стресса и ионизирующей радиации в низких дозах /Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2001. № 4. С. 18-20.
24. Дудаев В.А., Аль-Мубарак М. Механическая резистентность эритроцитов при гипертонической болезни // Советская медицина. 1990. - № 2. - С. 10-12.
25. Зодченко B.C., Багатырова К.М. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз и реологические свойства крови при лечении тенололом больных артериальной гипертензией // Кардиология. 1993. - № 3. - С. 40-42.
26. Иваненко А.И., Филев Л.В., Тулупов АЛ., Попов В.И., Долганов А.Г. Деформируемость эритроцитов у больных эпилепсией без лечения и на фоне противосудорожных препаратов // Физиология человека. 1990. -№ 6.-С.155-157.
27. Иванцов Е.С., Санников И.В. Морфологические и биофизические параметры эритроцитов у детей больных р-талассемией и наследственным сфероцитозом // Гематология и трансфузиология. -2001.-№5.-С. 15-18.
28. Ивенс И., Скейлак Р. Механика и термодинамика биологических мембран. М.: Мир, 1982. - 257 с.
29. Ивлева А.Я. Клиническое применение ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента и антогонистов ангиотензина II. М: Изд-во «Миклош» 1998; 158.
30. Казеннов A.M., Ульянова Т.П., Ганелина И.Е., Гусев Г.П., Кручинина И.А., Маслова М.Н. Ионный гомеостаз и деформируемость эритроцитов у больных с первичной артериальной гипертензией // Кардиология. -1990.-№7.-С. 19-22.
31. Карандашов В.И., Птухов Е.Б. Изменение реологических свойств крови при ее облучении гелий-неоновым лазером // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - №1. - С. 17-19.
32. Карпов В.А., Савин А.А., Смертина Л.П., Редчиц Е.Г. Изменение реологических свойств крови при рассеяном склерозе и их коррекция // Журнал невропатологии и психиатрии. 1990. - № 11. - С. 47 - 50.
33. Кассиль Г.Н. Оценка состояния парасимпатического отдела вегетативной нервной системы по холинэргической активности крови / Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1987. Т.4. С. 539-545.
34. Катюхин Л.Н.Сравнительная оценка и пути коррекции реологических свойств крови (экспериментальные и клинические аспекты).: Дисс доктора, биол. наук. Санкт-Петербург., 2003. 238 с.
35. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 1995. - Т. 81, № 6. - С. 122-129.
36. Катюхин Л.Н., Ганелина И.Е., Олесин А.И., Карабанова Э.П. Деформируемость и агрегационные свойства эритроцитов при воздействии на организм человека электромагнитных излучений различных видов // Физиология человека. 1996. - № 6. - С. 95 - 99.
37. Катюхин Л.Н., Маслова М.Н. Характеристика эритроцитов крови при эссенциальной гипертензии // Лабораторное дело. 1989. - №11. - С. 4951.
38. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов крови. Современные методы исследования. // Физиол. журнал им. Сеченова И.М. 1999. Т.81, №6. С. 122.
39. Китаева Н.Д., Шабанов В.А., Левин Г.Я., Костров В.А. Микрореологические нарушения эритроцитов у больных гипертонической болезнью // Кардиология. 1991. - № 1. - С. 51 - 54.
40. Колпаков А.Р., Влощинский П.Е., Колосова Н.Г. Механизмы адаптации человека и животных к холоду / Вестник Росс. Академии медицинских наук. 1993. №8. С. 29-31.
41. Коплик Е.В., Салиева P.M., Горбунова А.В. Тест открытого поля как прогностический критерий устойчивости к эмоциональному стрессу у крыс линии Вистар / Журн. высш. нерв. деят. Том 45., вып. 4. 1995. С. 775-781.
42. Коровин A.M., Савельева Е.А., Чухловина M.JI. Кислородтранспортная функция гемоглобина при некоторых неврологических заболеваниях /Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1979. т.79. вып. 8. С. 993-997.
43. Корочкин И.М., Картелишев А.В., Лешаков С.Ю. Клинико-биохимические параллели на фоне традиционного лечения и лазеротерапии больных ишемической болезнью сердца // терапевтический архив. 1988. - № 12. - С. 40 -43.
44. Костюченков В.Н. Влияние фармакологических средств на организм экспериментальных животных при иммобилизационном стрессе / Фармакология и токсикология. 1986. Т. 49. №6. С. 65-68.
45. Кравцов Г.М., Дулин Н.О., Постнов Ю.В. Связывание кальция с цитоскелетом эритроцитов крыс со спонтанной гипертензией // Кардиология. 1991. -№ 10.-С. 77- 80.
46. Краковский М.Э. Активность узловых окислительно-восстановительных ферментов у кроликов с разными типологическими особенностями // Журн. высш. нерв. деят. 1987. Т. 37. №3. С. 457.
47. Краковский М.Э., Каменецкая Ц.Л., Тремасова Г.И., Ашерметов А.Х. особенности некоторых биохимических процессов в печени крыс с различными типами поведения в открытом поле // Журн. высш. нерв, деят. 1989. Т. 39. №3. С. 506.
48. Левтов В.А., Регирер С.А., Шадрина Н.Х. Реология крови. М.: Медицина. 1982.-272 с.
49. Логинов В.А., Сухоплвчев СЛ., Минченко Б.И., Александров А.А., Оганов Р.Г. Изменение количественного соотношения мембранных белков эритроцитов при гипертонической болезни // Кардиология. -1990.-№1. с. 17-22.
50. Люсов В.А., Дудаев В.А., Аль-Мубарак М., Дюков И.В., Бородкин В.В., Халилов Э.М. Реологические свойства крови у больных гипертонической болезнью // Кардиология. 1986. - №8. - С. 70-73.
51. Маколкин В.И., Бранько В.В., Богданова В.А. Пособие для врачей «Метод лазерной доплеровской флуометрии в кардиологии». М. 1999. - С. 48.
52. Маколкин В.И., Подзолков В.И., Павлов В.И., Богданова Э.А., Камшинина Л.С., Самойленко В.В. Состояние микроциркуляции при гипертонической болезни // Кардиология. 2002. - № 7. - С. 36- 39.
53. Мартынов А.И., Остроумова О.Д., Мамаев В.И. и др. Применение фозиноприла при лечении пожилых больных с мягкой и умеренной эссенциальной артериальной гипертензией // Рос. мед. вести. 2000. - № 2. - С. 54-62.
54. Маслова М.Н., Титков Ю.С., Огородникова Л.Е. Активность Na,K-АТФазы в эритроцитах и состояние гемодинамики малого круга кровообращения при формировании артериальной гипертонии // Кардиология. 1992. - № 3. - С. 44-46.
55. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Ахунова А.Р. Элктрофоретическая подвижность эритроцитов крови крыс при адаптации организма к воздействию низких температур / Цитология. 1996. Т. 38. № 11. С. 34-37.
56. Микаэлян Э.М., Шалджян A.JL, Мхитарян В.Г. перекисное окисление липидов в эритроцитарных мембранах и крови при стрессе /Журнал экспериментальной биологии и медицины. 1984. № 2. С. 123-126.
57. Микаэлян Э.М. Барсегян JT.A. Перекисное окисление липидов крови при остром стрессе / Журнал экспериментальной биологии и медицины. 1988. №3. С. 286-289.
58. Мишин В.И., Чернин В.В. Состояние микроциркуляции у больных острым и хроническим диффузным гломерулонефритом // терапевтический архив. 1980. - № 4 - С. 88-91.
59. Мищук И.И., Трещинский А.И. Принципы коррекции реологических свойств крови // Анестезиология и реаниматология. 1981. - № 2. - С. 21 -24.
60. Мищук И.И., Березовская З.Б., и др. Нарушение деформируемости эритроцитов. // Анестезиология и реаниматология. 1993. №2. С. 72-77
61. Мосягина Е.И., Федоров Н.А., Гунин В.И., и др. Эритропоэз. / В кн.: Нормальное кроветворение и его регуляция. Под. ред. Н.А. Федорова М.: Медицина, 1976. - С. 341-457.
62. Муравьев А.В., Зайцев Л.Г., Муравьев А.А., Замышляев А.В. Микрореологические свойства разных популяций эритроцитов у людей с повышенным артериальным давлением и у физически активных лиц // Физиология человека. 2000. - №4. - С. 101-105.
63. Муравьев А.В., Зайцев Л.Г., Симаков М.И. Макро- и микрореологические свойства крови у лиц с разным уровнем тренированности // Физиология человека. 1995. - № 4. - С. 137-142.
64. Муравьев А.В., Зайцев Л.Г., Якусевич В.В., Муравьев А.А. Гемореологические профили у лиц с нормальным и повышеннымартериальным давлением // Физиология человека. -1998. №2. - С. 6366.
65. Муравьев А.В., Якусевич В.В., Зайцев Л.Г., Сироткина А.К., Муравьев А.А. Гемореологические профили у пациентов с артериальной гипертензией в сочетании с синдромом гипервязкости // Физиология человека. 1998. - №4. - С. 113-117.
66. Мурик С.З. Межполушарная асимметрия и типологические особенности нервной системы у крыс // журн. Выш. Нерв. Деят. 1990. Т. 40. №5. С. 963.
67. Надирадзе Н.И., Геркулова А.Н., Кавтарадзе В.Г. Проницаемость мембран эритроцитов для Na+ и К+ и их фосфолипидный состав у больных гипертонической болезнью // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. - №2. - С. 135-136.
68. Никулин М.А., Гранитов В.А., Лычев В.Г., Усынин В.В. Реологические свойства крови у больных клещевым сыпным тифом // Клиническая медицина. 1998. - № 7. - С. 32 - 34.
69. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф. Регуляция эритропоэза. М.: Медицина,1989. С. 1-217.
70. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск.: Наука, 1983. С. 22-69.
71. Панченко Л.Ф., Сторожок С.А. Эритроциты и алкоголь // Гематология и трансфузиология. 1987. - № 4.- С. 3 - 4.
72. Парфенов А.С., Редчиц Е.Г. Иванова М.В. Метод оценки состояния механической резистентности эритроцитов у больных гипертонической болезнью // Лабораторное дело. 1987. - №4. - С. 261-264.
73. Полеев Н.Р., Карандашов В.И., Воронина М.А., Финько И.А. Изменение реологических свойств крови при чрескожном облучении локтевого сосудистого пучка гелий-неоновым лазером // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. - № 10. - С. 428 - 430.
74. Постнов Ю.В. Первичная гипертензия клеточный ресетинг и переключение почки // Кардиология. - 1993. - №8. - С. 7-15.
75. Преображенский Д.В., Сидоренко Б.А. Побочные эффекты блокаторов ATi ангиотензиновых рецепторов // Кардиология. - 2002. - №3. - С.88-94.
76. Селезнев С.А., Назаренко Г.И., Зайцев B.C. Клинические аспекты микрогемоциркуляции. Л.: Медицина, 1985. - 208 с.
77. Семагин В.Н., Зухарь А.В., куликов М.А. тип нервной системы, стрессоустойчивость и репродуктивная функция. М.: наука, 1988.135 с.
78. Сергеев П.В., Усенко А.Н. Фирсов Н.Н., Шимановский Н.Л. Влияние рентгеноконтрастных средств на деформационные свойства эритроцитов человека // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1989. - № 2. - С. 194-196.
79. Сидоренко Б.А., Савченко М.В., Преображенский Д.В. Ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента при лечении гипертонической болезни // Кардиология. 2000. № 2. - С.74 - 82.
80. Сидоренко Б.А., Преображенский Д.В. Клиническое применение ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента. М.: ЛИА Персид, 1998.-96 с.
81. Слинченко О.И., Александрова Н.П., Квитко Н.Н., Корнеев А.А. Влияние экстракорпорального гелий-неонового лазерного облучения крови на морфофункциональное состояние эритроцитов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - №3. - С.338-340.
82. Соколов Е.И., Заболотнов В.И., Подагина С.В., Балуда М.В. Нарушение реологических свойств крови и липидно-фосфолипидного спектра мембран эритроцитов у больных сахарным диабетом // Кардиология. -1996. №9. - С.67-70.
83. Сорокина Н.Ю., Ослопов В.Н. Трансмембранный обмен в эритроцитах крыс в норме и при патологии // Вестник Ивановской медицинской академии. 1998. - №3. - С. 51- 54.
84. Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф. Механизм снижения чувствительности тромбоцитов к лекарственным средствам под влиянием низкоэнергетического лазерного облучения крови // Гематология и трансфузиология. 2001. - №2. - С. 36 - 39.
85. Стенко М.И. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1975. С.21-56.
86. Сторожок С.А., Соловьев С.В. Структурные и функциональные особенности цитоскелета мембраны эритроцита // Вопр. мед. химии. -1992.-№2.- С. 14-17.
87. Сторожок С.А., Санников А.Г., Белкин А.В. Зависимость стабильности и деформабильности мембран эритроцитов от межмолекулярных взаимодействий белков цитоскелета // Научный вестник Тюменского государственного университета. 1996. - №1. - С. 8-15.
88. Стрюк Р.И., Длусская И.Г., Токмачев Ю.К., Ефремушкина О.Д. Функциональное состояние эритроцитов у больных гипертонической болезнью с различной степенью гипертрофии левого желудочка // Кардиология. 1996. - № 7. - С. 42-45.
89. Суслина З.А., ВысоцкаяВ.Г. О роли поражений магистральных артерий головы в нарушении гемостаза и реологических свойств крови // Журнал невропатологии и психиатрии. 1983. - Вып. 7. - С. 1033-1038.
90. Тимошин С.С., Животова Е.Ю. Участие компонентов системы ангиотензина II в регуляции синтеза ДНК в эпителии пилорического отдела желудка белых крыс // Бюл. эксп. биол. и медицины. 2000. - №2. -С. 214-216.
91. Ульянитский JI.C., Медведев О.С. Изменения гемодинамики при иммобилизационном стрессе /Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1985. №9. С. 282-285.
92. Фатенков В.Н., Зарубина Е.Г., Миляков М.Н. Нарушения в структуре мембран эритроцитов у больных инфарктом миокарда // Кардиология. -2002.-№6.-С. 54-60.
93. Хоничева Н.М., Ильяна Вильяра X. Характер поведения в ситуации избегания как критерий оценки типологических особенностей крыс // Журн. высш. нерв. деят. 1981. Т.31. №5. С. 975.
94. Хрусталева Р.С., Гусев Г.П. Проницаемость мембран эритроцитов для одновалентных катионов у крыс со спонтанной артериальной гипертензией // Кардиология. 1987. - №8. - С. 65-68.
95. Цудечкис В.Я., Косырев А.Б., Дмитриев А.А., Дресвянников А.В. Деформируемость эритроцитов при ультрафиолетовом облучении компонентов крови у кардиохирургических больных // Анестезиология и реаниматология. 1993. - №. 3. - С. 47 - 48.
96. Чазов И.Е., Мычка В.Б. Метаболический синдром и артериальная гипертония // Артериальная гипертензия. 2002. - №1. - С. 7-10.
97. Шабанов В.А., Китаева Н.Д., Левин Г.Я., Корсаков В.В., Костров В.А. Оптимизация лечения больных гипертонической болезнью с реологических позиций // Кардиология. 1991. - № 2. - С. 66-67.
98. Шабанов В.А., Китаева Н.Д., Левин Г.Я., Костров В.А., Серьезова О.В. Клиническое значение изучения нарушений реологических свойств крови у больных гипертонической болезнью // Терапевтический архив. -1990.-№5.-С. 89-94.
99. Щепотин Б.М., Ена Я.Н., Зарицкая В.Н. Показатели реологических свойств крови и гемостаза у больных гипертонической болезнью // Врачебное дело. 1988. - №4. - С.66-69.
100. Шепотинский В.И. Обменные процессы в эритроцитах при стрессе и экстремальных воздействиях /Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1984. № 2. С. 70-74.
101. Ширяев В.В., Ширяев Н.В., Изменение эритроцитов при физической нагрузке // Физиология человека. 1994. - № 4. - С. 45-53.
102. Allali J., Valensi P. Diabetes and hemorheology // Diabete Metabol. -1999.-№1.-P. 1-6.
103. Allikmets K., Pank Т., Teesalu R. et al. Plasminogen activator inhibitor -1 and Plasma von Willebrand factor in essential hypertension: association with oxidative stress and hyperisulanemia // Europ. Heart J. 1998. - Vol. 19 (Abst. Suppl.). - P. 69.
104. Arvinte Т., Cudd A., Schulz В., Nicolau C. Low-pH association of proteins with the membranes of intact red blood cells. II. Studies of mechanism // Biochim. Biophis. Acta. 1989. - Vol. 1. - P. 61-68.
105. Baumann E., Linss W., Frohner M., Stoya G., Richter W. pH- induced denaturation of spectrin changes the interaction of membrane proteins inerythrocyte ghosts. Biochemical and electron microscopic evidence // Anat. Anz.- 1994.-Vol. l.-P. 93-99.
106. Beck K., Nelson J. A spectrin membrane skeleton of the Golgi complex //Biochim Biophys Acta. 1998 - №14. - P. 153.
107. Bellary S.S., Arden W.W., Schwartz R.W. et al. Effect of lipopolysaccharide, leukocytes, and monoclonal anti-lipid A antibodies on erythrocyte membrane elastance // Shock.- 1995.- Vol. 3, №2.- P. 132-136.
108. Bennett V. The spectrin-actin junction of erythrocyte membrane skeletons //Biochim. Biophys. Acta. 1989.- Vol. 988. - P. 107 - 121.
109. Bennett V. Spectrin-based membrane skeleton: a multipotential adaptor between plasma membrane and cytoplasm // Physiol. Rev. -1990. Vol. 70. - P. 1029- 1065.
110. Bessis M., Mohandas N. Deformability of normal, shape-altered and pathological red cells//Blood Cells. 1975. - Vol. l.-P. 315-321.
111. Bessis M., Mohandas N., Feo C. Automated ektacytometry: A new method of measuring red cell indices and red cell quality // Blood Cells. -1980. -Vol. 6.-P. 315-327.
112. Bessis M., Mohandas N., Laser diffraction patterns of sickle cells in fluid shear fields // Blood Cells. 1977. - Vol. 3. - P. 229-239.
113. Bocci V. Determinants of erythrocyte ageing: a reappraisal // Brit. J. Haematol. 1989. - Vol. 48, № 4. - P.515-522.
114. Branton D., Cohen C.N., Tyler J. Interaction of cytoskeletal proteins on the human erythrocyte membrane // Cell -1981. Vol. 24, № 1. - P. 24-32.
115. Bunn, H.F., Ransil, В J., Chao, A. // Dynamical changes in levels of ions of Mg2+ in red cells // J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 246. - P. 5273 - 5279.
116. Chabamel A., Reinhart W., Chien S. Increased resistance to membrane deformation of shape-transformed human red blood cells // Blood. 1987. -Vol. 69, №3.- P. 739-743.
117. Chasis J. A., Agre P., Mohandas N. Decreased membrane mechanical stability and in vivo loss of surface area reflect spectrin deficiencies in hereditary spherocytosis // J. Clin. Inves. 1988. - Vol. 82. - P. 617- 623.
118. Chasis J.A., Mohandas N. Erythrocyte membrane deformability and stability. Two distinct membrane properties that are independently regulated by skeletal protein associations // J. cell. Biol.-1989.-Vol. 103.-P. 343 350.
119. Chien S., Sung K.L.P., Skalak R., Usami S., Tozeren A. Theoretical and experimental studies on viscoelastic properties of erythrocyte membrane // Biophys. J. -1978. Vol. 24. - P. 463.
120. Clark M.R., Mohandas N., Shohet S.B. Osmotic gradient ektacytometry: comprehensive characterization of red cell volume and surface maintenance // Blood. 1983. - Vol. 61. - P. 899-910.
121. Coakley W. Hyperthermia effects on the cytoskeleton and on cell morphology // Symp. Soc. Exp. Biol. 1987. - Vol. 41. - P. 187-211.
122. Cohen C.M., Foley S.F. Biochemical characterization complex formation by human erythrocyte spectrin protein 4.1 and actin // Biochemistry. -1991.-Vol. 23.-P. 6091-6098.
123. Corry W.D., Meiselman H.J. Deformation of human erythrocytes in a centryfugal field //Biophys. J. -1978. Vol. 21, - P. 19 - 34.
124. Crandall E.D., Critz A.M., Osher A.S. et al. Influence of pH on elastic deformability of the human erythrocyte membrane // Am. J. Physiol. 1972. -Vol. 5.- P. 269-278.
125. Cushman D., Wang F., Grover G. Comparisons in vitro, ex vitro, and in vivo of the actions of seven structurally diversr inhibitors of angiotensin converting enzyme (ACE) // BR. J. Clin. Pharmacol. 1989. - Vol. 28. - P. 115-131.
126. Cushman D., Wang F., Fung W., et.al. Effects of different angiotensinconverting enzyme inhibitors by their selective inhibition of ACE in physiological important target organs // Am. J. Hypertension. 1993. - Vol. 2.-P. 294-306.
127. Dalmark M. Chloride transport in human red cells // J. Physiol. (Lond.). -1975.-Vol. 250. P. 39 - 64.
128. Davis J., Lux S.E., Bennett V. Mapping the ankyrin-binding site of the human erythrocyte anion exchanger // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264. - P. 9665 - 9672.
129. Davis J., Bennett V. Mapping the binding sites of human erythrocyte ankyrin for the anion exchanger and spectrin // J. Biol. Chem. 1990. -Vol. 265. P. 10589-10596.
130. Detrick R., Ruhling R., Detrick D. Retrogression and the red blood cell // J. Sports. Med. & Phisical Fitness. 1980. - Vol. 1. - P. 67-76.
131. Discher D.E., Carl P. New insights into red cell network structure, elasticity, and spectrin unfolding //Cell Mol Biol Lett.- 2001. № 3. - P. 593606.
132. Donner M., Weng D., Stoltz F. In vitro effects of ionic and non-ionic contrast media on erythrocyteaggregation // J Mai Vase.- 1993. Vol. 2. - P. 135-143.
133. Draaijer P., De Leeuw P., Van Haff J. Naifold capillary density in salt-sensitive and salt -resistance barderline hypertension // J. Hypertens. 1995. -№ 11.-P. 11-25.
134. Duchin К., Walkawski A., Tu J. et.al. Pharmacokinetics, safety, and pharmacological effects of fosinopril natrium, an angiotensin -converting enzyme inhibitor in healthy subjects // J. Clin. Pharmacol. 1991. - Vol. 31. -P. 58-64.
135. Dupuy-Fons C., Brun J.F., Mallart C. et al. In vitro influence of zinc and magnesium on the deformability of red blood cells artificially hardened by heating // Biol. Trace. Elem. Res. 1995.- Vol. 47, №1-3.- P. 247-255.
136. Dzau V. Mechanism of protective effects of ACE inhibition on coronary artery disease //Eur. Heart J. 1998; 19 (Suppl. S): S2-S6.
137. Evans E., Skalak R. Mechanics and thermodynamics of biomembrane. -Boca Raton: CRC Press, 1980. 241 p.
138. Evans E.A., Waugh R., Melnik L. Elastic area compressibility modulus of red cell membrane // Biophys. J. -1977. Vol. 16. - P. 585 - 595.
139. Evans E.A., Waugh R. Mechano-chemistry of closed, vesicular membrane systems //J. Colloid Interface Sci. 1977. - Vol. 60. - P. 286-295.
140. Evans E.A., Hochmuth R.M. Mechano-chemical properties of membranes // Current Topics in Membranes and Transport / edited by A.Kleinzeller, F. Bronner. N.Y. 1976. - Vol. 10. - P. 1.
141. Faquin W.C., Husain A., Hung J., Branton D. A immunoreactive form of erythrocyte protein 4.9 is present in non-erythroid cells // Eur. J. Cell Biol. -1988.-Vol. 46.-P. 168- 175.
142. Faquin W., Chanwala S., Cantley L., Branton D.Protein kinase С of human erythrocyte phosphorylates bands 4.1 and 4.9 // Biochim. Biophys. Acta. 1995. Vol. 887. - P. 142 - 149.
143. Faquin W.C., Chahwala S.G., Hung J., Campbell E., et al. Protein kinase С human erythrocytes phosphorylation bands 4,1 and 4,9 // J. Cell Biol. 1993. -Vol. 101.-P. 283.
144. Fiocco R., Quattrocchi D., Neirotti M. et al. Effects of temperature on red cell filtration // Panminerva Med. 1984. - Vol. 26, № 3. - P. 193-195.
145. Ford N., Lasseter K., Hammett J., et.al. Single-dose and steady-state pharmacokinetics of fosinopril in patients with hepatic impairment // Am. J. Hypertension. 1992. - Vol. 5. - P. 123-128.
146. Fowler V.M., Bennett V. Tropomyosin: a new component of the erythrocyte membrane skeleton // Erythrocyte Membranes 3: Recent Clinical and Experimental advances/ edited by W. Kruckeberg, J. Eaton, G. Brewer. -New York, 1984.-P. 57- 71.
147. Fowler V.M. Identification and purification of a novel Mr 43.000 tropomyosin binding protein from human erythrocyte membranes // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262. - P. 12792 - 12800
148. Freedman J.C., Hoffman J.F. Ionic and osmotic equilibria of human red blood cells treated with nistatin // J. Gen. Physiol.-1979. Vol. 74. - P. 157 -185.
149. Fujikava S. Tannic acid improves the visualization of the human erythrocyte membrane skeleton by freeze-etching // J. Ultrastruct. Res. -1983.-Vol. 84.-P. 286-289.
150. Gasser P., Buhler F. Nailfold microcirculation in normotensive and essential hypertensive subjects, as assessed by video-mycroscopy // J. Hypertens. 1992. - № 10. - P. 83-90.
151. Gisma J., reid C. Do band 3 protein conformational changes mediate shape changes of human erythrocytes ? // Mol. Membr. Biol. 1995. - Vol. 3. -P. 247-254.
152. Goodman S.R., Yu J., Witfield C.F., Culp E.N. e.a. Erythrocyte membrane skeletal protein bands 4.1 and are seqvence-related phosphoproteins // J. Biol. Chem. 1982. Vol. 257. - P. 4564-4569.
153. Goodman S.R., Shiffer К. The spectrin membrane skeleton of normal and abnorman human erythrocytes: a review // Amer. J. Physiol. 1990. - Vol. 244 P. 121 - 141.
154. Greenfield N., Fowler V. Tropomyosin requires an intact N-terminal coiled coil to interact with tropomodulin //Biophys J. -2002- №5. P. 2580.
155. Gulevskii A., Riazantsev V., Belous A. Structural reorganizations of the lipids and proteins of erythrocyte membranes under the action of low temperatures // Nauchnye Doki. Vyss. Shkoly Biol. Nauki. 1990 . - Vol. 5. -29-36.
156. Harper L., Begg G., Speicher D. Role of terminal nonhomologous domains ininitiation of human red cell spectrindimerization //Biochemistry.-2001.-№8. P. 993.
157. Heusinkveld R.S., Goldstein D.A., Weed R.I., LaCelle P.L. Effect of Proyein Modification on Erythrocyte Membrane mechanical Properties // Blood Cells 1977. - Vol. 3. P. 175-182.
158. Hochmuth R., Mohandas N., Blackshear P. (Jr.) Measurement of the elastic modulus for red cell membrane using a fluid mechanical technique //Biophys. J.- 1973.-Vol. 13.-P. 747.
159. Hughes C.A., Bennett V. Adducin: a physical model with implications for function in assembly of spectrin-actin complexes // J. Biol. Chem.-1995.-V.270,N32. P.l8990-18996.
160. Hurry A., Struijker В., Giuseppe A. Microcirculation and cardivascular disease.- Lipponocot Williams and Wilkins. 2000. - P. 179.
161. Husain A., Branton D. Purification of erhytrocyte band 4.1 and other cytoskeletal components using hydrohyapatite-ultrogel // Anal. Biochem. -1986.-Vol. 5.-P. 206-211.
162. Husain-Chisti A., Faquin W., Wu C.-C., Branton D. Purification of erythrocyte dematin (protein 4.9) reveals an endogenous protein kinase that modulates actin binding activity // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264. - P. 8985 -8991.
163. Itoh Т., Chien S. Usami S. Deformability measurements on individual sickle cells using a new system with p02 and temperature control // Blood. -1992.-Vol. 79. -P. 2141-2147.
164. Kamal E. Habib MD, Philip W. Gold MD George P. Chrousos MD, Neuroendocrinology of stress / Endocrinology and Metabolism Clinics. 2001. V. 30. №3. P. 261.
165. Keilani Т., Schleuter W., Molteni A., et.al. Converting enzyme inhibition with fosinopril does not suppress plasma aldosterone and may cause hyperkalemia despite moderate renal impairment // J. Am. Soc. Nephrol. -1991.-Vol. 2.-P. 281 -287.
166. Koutsouris D., Delatour-Hanss E., Hanss M. Physico-chemical factors of erythrocyte deformability // Biorheology. 1985. - Vol. 22, № 2. - P. 119-132.
167. Kucera W., Meier W., Lerche D. Influence of heat -induced changes in the mechanical properties of the membrane on the filterability of human erythrocytes // Biomed Biochim Acta. 1986. - Vol. 3. - P.353-360.
168. Kucera W., Meier W., Lerche D. Ein fluss thermisch induzierter Veranderungen mechanischer Membranei genschaften auf die Filtrierbarkeitmenschlicher Erythrozyten // Biomed. Biochim. Acta. 1986. - Vol. 45, № 3. -P. 353-358.
169. Kucera W., Meier W., Lerche D., Paulitschke M. Importance of pH -and osmolarity-depend changes in deformability-determining factors on the filterability of human erythrocytes // Biomed. Biochim. Acta. 1984. - Vol.3 -P. 337-348.
170. Kuypers F.A., Scott M.D., Schott M.A., Lubin В., Tsun-Yee Chiu D. Use of ektacytometry to determine red cell susceptibility to oxidative stress // J. Lab. Clin. Med. 1990. - Vol. 116. - P. 535- 545
171. La Celle P.L., Kirkpatrick F.H. Determinants of erythrocyte membrane elasticity // Brewer G.J. ed. Erythrocyte structure and function. New York, Liss, 1992.- Vol. l.-P. 535-557.
172. Lambert S., Prchal J., Lawler J., Ruff P., Speicher D., Cheung M., Kan Y., Paiek J. cDNA sequence for human erythrocyte ankyrin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol. 87. - P. 1730 - 1734.
173. Libera J., Pomorski Т., Muller P., Herrmann A. Influence of pH on phospholipid redistribution in human erythrocyte membrane // Blood 1997 -Vol. 4.-P. 1684-1693.
174. Ling E., Gardner K., Bennett V. Protein kinase С phosphorylates a recently ident fred membrane skeleton-associated calmodulin-binding protein in human erythrocytes // J. Biol. Chem. 1986. - Vol. 261. - P. 13875 - 13878.
175. Ling E., Danilov Y., Cohen C. Modulation of red cell band 4.1 function by cAMP dependent kinase and protein kinase С phosphorylation // J. Biol. Chem. 1988. Vol. 263. - P. 2209 - 2216.
176. Lip G., Blann A., Beevers D. Ethnic differences blood pressures, lipids and haemorheological factors amongst hypertensive patients // Europ. Yeart J. 1997. - Vol. 18(Abst. suppl.). - P. 258.
177. Leyko W., Ertel D., Bartosz G. Effect of hypertermia and lipid peroxidation on the erythrocyte membrane structure // Int. J. Radiat. Biol. -1991-Vol. 5.- 1185- 1193.
178. Luo В., Mehboob S., Hurtuk G., Pipalia N., Fung W. Important region in the beta-spectrin C-terminus for spectrin tetramerformation //Eur J Haematol.-2002.-№2.-P.-73.
179. Makris P., Hatzizachanas A et al. Increased heart rate and haemostatic balance disorders pre-exist the established hypertension // Europ. Heart J. -1998. Vol. 19 (Abst. suppl.). - P. 134.
180. Makris Th., Krespi P., Votteas V., et. al. Trombomodulin and TFPI levels in patients with arterial hypertension // Europ. Heart J. 1997. - Vol. 18.-P. 85.
181. McCury S., Lockhart J., Small M. Do rheological variables play a role in diabetic peripheral neuropathy? // Diabetic Med. 2000. - № 8. - P. 232-236.
182. Meir W., Paulitschke M., Lerche D. et al. Action of rHuEpo on mechanical membrane properties of red blood cells in children with end-stage renal disease // Nephrol Dial Transplant. 1995. - № 2. - P. 110.
183. Mische S.M., Mooseker M.S., Morrow J.S. Erythrocyte adducin: a calmoduli regulated actin-bindling protein that stimulates spectrin-actin binding // J. Cell Biol. 1987. - Vol. 105. - N 6. - P. 2837-2849.
184. Mohandas N. Molecular basis for red cell membrane viscoelastic properties // Biochem Soc Trans. 1992. - № 4. - P. 776 - 82.
185. Mohandas N., Chasis J.A., Shobet S.B. The influence of membrane skeleton on red cell deformability, membrane material properties, and shape // Seminare in Hematology. 1989. - Vol. 20, № 3. - P. 225-242.
186. Mohandas N., Clark M., Jacobs M., GronerW., Shohet S. B. Ektacytometryc analysis of factors regulating red cell deformability // Automation in hematology / edited by D. Ross, G. Brecher, M. Bessis. -New York, Liss, 1981. Vol. 8. P. 167-171.
187. Morimoto M., Feo C.J. Effect des corps de Heinz produits in vitro sur la deformabilite des erythrocytes. Mesure par une technique diffractometrique (ektacytometre). Resultats preliminaires // Nouv. rev. franc, hematol. 1980. -Vol. 22, № l.-P. 53-57.
188. Morimoto M., Feo C.J. Effect des corps de Heinz produits in vitro sur la deformabilite des erythrocytes. Mesure par une technique diffractometrique (ektacytometre). Resultats preliminaires // Nouv. rev. franc, hematol. 1980. -Vol. 22, № l.-P. 53-57.
189. Mulvany M. Resistance vessels in hypertension // Textbook of hypertension. Ed. J. Swales. Oxford: Blackwell. 1994. - P. 103-111.
190. Murdock D., McTavish M. Fosinopril: a review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties, and therapeutic potential in essential hypertension // Drugs. 1992. - Vol. 43. - P. 123 - 140.
191. Nakao M., Jinbu Y., Sato S. at al. Structure and function of red cell cytoskeleton // Biomed. Biochim. Acta. 1995. - Vol. 46. - P. 5-9.
192. Nash G.B., Mesielman H.J. Alteration of the cell membrane viscoelasticity by heat treatment: effect on cell deformability and suspension viscosity // Biorheology. 1985. - Vol. 22, № 1. - P. 73-84.
193. Nash G.B., Parmar J. Reid M.E. Effects of deficiencies of glycophorins С and D on the physical properties of the red cell // Brit. J. Haematol. -1990. -Vol. 76.-P. 282-287.
194. Nash G.B., Mieselman H.J., Effect of dehydration on the viscoelastic behavior of red cells // Blood Cells. 1991. - Vol. 17. - P. 517 - 522.
195. Nigg E. Cherry R. Influence of temperature and cholesterol on the rotational diffusion of band 3 in the human erythrocyte membrane // Biochemistry. 1979. - Vol. 16. - P. 3457-3465.
196. Ohanian V., Gratzer W. Preparation of red cell membrane cytoskeletal constituents and characterization of protein 4.1 // Eur. J. Biochem. -1984. -Vol. 144.-P. 375-379.
197. Ohanian V., Wolfe L., John K., Pinder J., Lux S., Gratzer W. Analysis of the ternary interaction of the red cell membrane skeletal proteins spectrin, actin and 4.1 //Biochemistry. 1984. - Vol. 23. - P. 4416 -4420.
198. Opie L.H. Angiotensin converting enzyme inhibitors. The advance continues. 3 edition. Authors' Publishing House, New-York, 1999; 275.
199. Packer M. The neurohumoral hypotensis: a theory to explain the mechanism of disease progression in heart failure // J. Amer. Coll. Cardiology. -1992.-Vol. 20.-P. 248-254.
200. Park S., Mehboob S., Luo В., Hurtuk M., Johnson M., Fung L. Studies of the erythrocyte spectrin tetramerization region. // Cell Mol Biol Lett.-2001. -№6. P. 571-85.
201. Paterson S., Morgan H. Effect of changes in the ionic environment of reticulocytes on the uptake oftransferrin-bound iron // J. Cell. Physiol. 1980.-Vol.3-P. 489-502.
202. Pinder J., Ohanian V., Gratzer W.B. Spectrin and protein 4.1 as an actin filament capping complex // FEBS Lett. 1984. - Vol. 169. - P. 161 -164.
203. Racca A, Biondi C, Cotorruelo C. et al. Senescent erythrocytes: modification of rheologic properties, antigenic expression and interaction with monocytes // Medicina B. Aires. 1999. - Vol. 59, №1. - P. 33-37.
204. Rand R.P. Mechanical properties of the red cell membrane. Viscoelastic breakdown of the membrane // Biophys. J. -1964 Vol. 4. - P. 303.
205. Reid M.E., Ghasis J.A., Mohandas N. Identification of a functional role for human erythrocyte syaloglycoprotein beta and gamma // Blood. .-1987. -Vol. 69.-P. 1068-1072.
206. Retting M., Orendorff C., Campanella E., Low P. Effect of pH on the self-association of erythrocyte band 3 in situ // Biochim. Biophys. Acta. -2001.-Vol. l.-P. 72-81.
207. Salomon Y. Cellular responsiveness to hormones and neurotransmitters:1. Ч лconversion of H. adenine to [ H]camp in cell monolayers, cell suspensions,and tissue slices // Methods in enzymology. V. 195 N.Y.; L.: Acad. Press, 1992. P. 22.
208. Schischmanoff P.O., Winardi R., Discher D.E., Parra M.K., Bicknese S.E.,Witkowska H.E., Conboy J.G., Mohandas N. Defining of the minimal domain of protein 4.1 involved in spectrin-actin binding // J. Biol. Chem. -1995. -V.270, N36. -P.21243-21250.
209. Schmid-Schonbein H. Blood rheology and oxygen transport to tissues // Adv. Physiol. Sci. 1982. - Vol. 25. - P. 279-289.
210. Shan B.H. Epidermal growth factor receptor transactivasion in angiotensin II induced signaling: role of cholesterol-rich microdomains // Trends in Endocrinology and Metabolism. - 2002. - Vol. 13. - P. 1-2.
211. Sica D., Cutler R., Parmer R., et.al. Comparison of the steady-state pharmacokinetics of fosinopril, lisinopril, and enalapril in patients with chronic renal insufficiency// Clin. Pharmacokinet. 1991. - Vol. 20. - P. 420-427.
212. Speicher D.W. The present status of erythrocyte spectrin structure: the 106 residue repetitive structure is a basic feature of an entire class of proteins // J. Cell Biochem. 1986. - Vol. 30. - P. 245 - 258.
213. Speicher D.W., Marchesi V.T. Erythrocyte spectrin is composed of many homolgous triple helical segments // Nature Lond. 1984. - Vol. 311. -P. 177- 180.
214. Scwartzkophff В., Kelm M., Strauer B.E. Miocardial ischemia in hypertension: the role of coronary microcirculation abnormalites // Mediographia. 1999. - № 21. - P. 65-69.
215. Sneetr M., Casely J. 2,3-DPG and ATP dissociate erythrocytes membrane // J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 225, № 26. - P. 9925-9960.
216. Sorette M.P., Lavenant M.G., Clark M.R. Ektacytometric measurement of sickle cell deformability as a continious function of oxygen tension // Blood. 1992.-Vol. 69, № 1,-P. 316-323.
217. Stoltz J.F., Donner M. Red blood cell aggregation: measurements and clinical applications // Turk. J. of med. sciences. 1991. Vol.1. - P. 26.
218. Stoltz J.F., Donner M., Larcan A. Introduction to hemorheology: theoretical aspects and hyperviscosity syndromes // Inter. Angio. 1987. - № 6. -P. 119-132.
219. Stoltz J. F., Duvivier C., Malher E. Using of policarbonate filter for studing of erythrocyte deformability // Biorheology. 1984. - Suppl. 1. - P. 255-259.
220. Sung K., Chien S. Influence of temperature on rheology of human erythrocytes // Chin J Physiol. 1992. - № 2. - P. 81-94.
221. Takakuwa Y. Protein 4.1, a multifunctional protein of the erythrocyte membrane skeleton: structure and functions in erythrocytes and nonerythroid cells //Int J Hematol.- 2000. -№ 3. P. 298-309.
222. Tanner M. Band 3 anion exchanger and its involvement in erythrocyte and kidney disorders // Curr Opin Hematol. 2002. - № 9,- P. 133. - 140.
223. Tatsumi L., Matsusoka J. Negative potential and erytrocyte filtration throug the policarbonate filter // Biorheology. 1984. - Vol. 29. - P. 102-106.
224. Tillmann W., Levin C., Prindull G. et al. Rheological properties of young and aged human erythrocytes // Klin. Wochenschr. 1992. - Vol. 58, № l.-P. 569-574.
225. Vicant E. Hypertension and microcirculation: an overview of experimental studies // Mediographia. 1999. - № 21. - P. 34-40.
226. Waugh R.E. Effects of 2,3-diphosphoglycerate on mechanical properties of erythrocyte membrane // Blood. 1990. - Vol. 68, № 1. - P. 231-238.
227. Williams A.R., Morris D.R. The internal viscosity of the human erythrocyte may determine its lifespan in vivo //Scand. J. Haematol. 1990. -Vol. 24, № 1.- P. 57-62.
228. Winnicki M., Somers K., Accurso V., Hoffmann M., Pawlowski R., Frigo G., Visentin P., Palatini P. Alpha-Adducin Gly460 Trp polymorphism, left ventricular mass and plasma rennin activity //J Hypertens.- 2002- №9. P. 1771.
229. Yamashina S., Katsumato 0. Structural analysis of red blood cell membrane with an atomic force microscope //J Electron Microsc (Tokyo).-2000.-№49.-P. 445.
-
Марьинских, Василий Владимирович
-
кандидата биологических наук
-
Тюмень, 2007
-
ВАК 03.00.13
- Динамика и механизм изменения активности Na, K-АТФазы эритроцитов крыс в условиях стресса
- Na, К-АТФаза как интегральный компонент плазматической мембраны эритроцитов и её свойства при некоторых физиологических состояниях
- Биохимические изменения эритроцитов при остром отравлении метафосом и их коррекция перфтораном
- Исследование деформируемости эритроцитов млекопитающих с использованием усовершенствованного эктацитометра
- Реологические свойства крови и параметры сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у физически активных лиц
