Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Использование липосомальных форм антимикробных препаратов для лечения раневой инфекции в эксперименте

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Снатенков, Евгений Александрович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика возбудителей раневой инфекции.

1.2. Лечение проникающих инфицированных ранений брюшной полости.

1.3.Антимикробные препараты, используемые при лечении проникающих инфицированных ранений брюшной полости

1.4. Липосомальные антимикробные препараты, их получение, фармакокинетика и применение в инфекционной практике.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.Бактериологический метод исследования возбудителей проникающих инфицированных ранений брюшной полости

2.2.0пределение чувствительности штаммов к антибиотикам.

2.3.Метод получения липосомальных форм антимикробных препаратов.

2.4.Метод изучения распределения липосом в органах и тканях экспериментальных животных.

2.5.Метод изучения поглощения перитонеальными макрофагами липосомальных антибактериальных препаратов.

2.6.Изучение токсичности иммобилизованных антимикробных препаратов.

2.6.1 .Исследование острой токсичности препаратов.

2.6.2.Изучение хронической токсичности липосомальных антибактериальных препаратов.

2.7. Изучение эффективности лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости липосомальными формами антибактериальных препаратов.

2.8 Методы статистической обработки результатов опытов.

Глава 3. Возбудители проникающих инфицированных ранений брюшной полости, их биохимические, культурально-морфологические свойства, чувствительность к антибиотикам.

3.1 Изучение штаммов возбудителей инфицированных-проникающих ранений брюшной полости.

3.2 Биохимические, культурально-морфологические свойства возбудителей.

3.3 Определение антибиотикочувствительности мироорганизмов, выделенных из ран брюшной полости.

Глава 4. Получение липосомальных форм антибактериальных препаратов, оценка их физико-химических свойств, изучение распределения в органах и тканях макроорганизма, взаимодействия с перитонеальными макрофагами.

4.1 Получение липосомальных форм антимикробных препаратов.

4.2 Сравнительное изучение распределения в организме экспериментальных животных антибактериальных препаратов в свободной и липосомальной формах.

4.3 Поглощение антибиотиков в свободной и липосомальной формах перитонеальными макрофагами белых мышей.

Глава 5. Исследование общетоксических свойств полученных антибактериальных липосомальных препаратов.

5.1 Острая токсичность липосомальных антибактериальных препаратов в сравнении с их свободными формами.

5.2 Хроническая токсичность препаратов антибиотиков в свободной и липосомальной формах.

Глава 6. Изучение эффективности лечебного действия ли-посомальных тетрациклина гидрохлорида, стрептомицина сульфата, гентамицина сульфата, цефоперазона в сравнении с их свободными формами при экспериментальном проникающем инфицированном ранении брюшной полости.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Использование липосомальных форм антимикробных препаратов для лечения раневой инфекции в эксперименте"

Актуальность проблемы.

Лечение проникающих инфицированных ранений брюшной полости является актуальной проблемой современной медицины, не теряющей своей значимости с течением времени. Эффективность лечения зависит от многих факторов, которые обусловлены не только особенностями организма больного, но и выраженностью патогенных свойств возбудителей, способностью их приспосабливаться к неблагоприятным условиям среды обитания, в том числе к действию антибиотиков[23, 26, 30]. Недостаточную эффективность антибиотикоте-рапии при проникающих инфицированных ранениях брюшной полости связывают с внутриклеточным расположением возбудителей. Необходимость длительных и повторных курсов лечения часто приводит к развитию побочных реакций. Наиболее грозными осложнениями являются перитонит, сепсис, аллергические реакции, токсические поражения печени и почек [32, 38, 40, 55, 73]. Большое практическое значение в борьбе с возбудителями раневого процесса приобретает разработка новых антимикробных препаратов, их носителей и схем лечения [58, 72, 86, 99, 210].

Эффективность лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости может быть увеличена при применении липосом в качестве-носителей для антибиотиков [18, 24, 60, 65, 67, 95, 117].

Липосомы —■ это микроскопические сферические везикулы, заполненные жидкостью, их мембрана состоит из молекул природных фосфолипидов, аналогичных входящим в состав клеточных мембран эукариотов.

Достоинства липосом. как. носителей лекарств очевидны: полученные из природных фосфолипидов липосомы полностью биодеградируемы и биосовместимы, они пригодны для иммобилизации в них многих фармакологических агентов, в том числе антибиотиков [113, 129, 156]. Антибактериальные препараты внутри липосом более устойчивы в организме, так как изолированы ли-пидной мембраной от повреждающих воздействий внешних условий, не оказывают общетоксического действия на макроорганизм [18, 67, 85, 104, 130, 166].

Уникальной особенностью липосом является возможность доставки лекарственных препаратов внутрь клеток, где располагаются возбудители раневой инфекции, что позволяет проводить более эффективное лечение [95, 98, 162, 188].

Большая часть антибиотиков в течение первых 6-8 часов выводится из организма. Использование липосом позволяет удлинить время элиминации антибактериальных препаратов до 72 - 96 ч [62, 66, 70].

Таким образом, сниженная активность антибиотиков за счет их неспособности эффективно воздействовать на внутриклеточно расположенных возбудителей раневого процесса, токсическое воздействие на макроорганизм антимикробных препаратов и их быстрая элиминация дают основания считать весьма актуальной проблему разработки химиотерапевтических средств на основе ли-посомальной технологии и отработки схем их введения для лечения проникающих инфицированных ран брюшной полости.

Цель работы. Создание липосомальных форм антимикробных препаратов и разработка эффективной схемы лечения этими препаратами проникающих инфицированных ранений брюшной полости в эксперименте.

Задачи исследования

1. Выделить и идентифицировать штаммы отдельных видов микроорганизмов, вызывающих раневую инфекцию в госпитальной практике.

2. Получить липосомальные формы антимикробных препаратов, оценить их физико-химические свойства, изучить их фармакокинетику и фармакодина-мику в макроорганизме.

3. Изучить в сравнительном аспекте токсичность антимикробных препаратов в свободной и липосомальной формах на экспериментальных животных.

4. Оценить эффективность лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости тетрациклина гидрохлоридом, стрептомицина сульфатом, гентамицина сульфатом и цефоперазоном в свободной и липосомальной формах.

Научная новизна

Впервые показана возможность применения"липосомальных форм антибактериальных препаратов (тетрациклина гидрохлорида, стрептомицина сульфата, гентамицина сульфата, цефоперазона) для успешного лечения экспериментального проникающего инфицированного ранения брюшной полости.

Впервые разработана перспективная схема лечения проникающего инфицированного колотого ранения брюшной полости экспериментальных животных, позволяющая в 2 раза снизить дозу антибактериальных препаратов и сократить количество введений липосомальных препаратов с 15 до 8, увеличивая при этом эффективность лечения проникающих ранений брюшной полости.

Практическая ценность

На основании результатов, полученных в ходе выполнения диссертационной работы оформлено: 3 инструкции по изготовлению и контролю липосомальных антибактериальных препаратов и 3 инструкции по их применению, внедренных на учрежденческом уровне.

1. Инструкция по изготовлению и контролю липосомальной формы гентамицина сульфата. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 27.12.02 г.

2. Инструкция по применению липосомальной формы гентамицина сульфата при лечении раневой инфекции. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 27.12.02 г.

3. Инструкция по изготовлению и контролю липосомальной формы стрептомицина сульфата. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 25.06.03 г.

4. Инструкция по применеиию липосомальной формы стрептомицина сульфата. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 25.06.03 г.

5. Инструкция по изготовлению и контролю липосомальной формы гентамицина сульфата. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 25.06.03 г.

6. Инструкция по применению липосомальной формы гентамицина сульфата при лечении раневой инфекции. Утверждена директором Волгоградского НИПЧИ 25.06.03 г.

Полученные экспериментальные данные по фармакокинетике стрептомицина сульфата и гентамицина сульфата, иммобилизованных в липосомы используются в разделе "Антибактериальные химиотерапевтические средства " в лекционном и практическом курсах по фармакологии и биофармации для слушателей факультета усовершенствования врачей Волгоградского медицинского университета, по фармакологии и клинической фармакологии и интенсивной терапии для студентов Волгоградского медицинского университета.

Основные положения, выносимые на защиту

1. В этиологии раневой инфекции ведущее место занимают Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa, вызывающие стандартный инфекционный процесс как в виде монокультур (91 %), так и их микробных ассоциаций (9 %).

2. Получение липосомальных препаратов путём обращения фаз позволяет включать во внутренний объём везикул от 50 до 85 % используемых антибактериальных средств, что повышает эффективность их лечебного действия.

3. Иммобилизованные в липосомы антимикробные препараты более интенсивно (в 4 - 5 раз), в сравнении с их свободными формами, поглощаются клетками мононуклеарно-фагоцитарной системы, в которых, в основном, локализуются возбудители раневого воспаления, что пролонгирует действие антибиотиков в этих клетках.

4. Применение для лечения раневой инфекции антибактериальных препаратов, включенных во внутренний объём везикул, значительно (в 1,6 — 3,5 раза) снижает их общее токсическое воздействие на макроорганизм.

5. Предложенная схема лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости липосомальными формами антибактериальных препаратов позволяет получить высокий терапевтический эффект при снижении дозы применяемых лечебных средств и сокращения кратности (в 2 раза) их введения.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 104 листах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав материалов и методов, глав результатов собственных исследований, заключения, выводов и библиографического указателя, включающего 233 литературных источников (отечественных и иностранных авторов).

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Снатенков, Евгений Александрович

Выводы

1. В пробах клинического материала пациентов с проникающими инфицированными колотыми ранениями брюшной полости были изолированы и идентифицированы следующие виды микроорганизмов: S. aureus (35,5 %), P. aeruginosa (32,7 %), S. epidermidis (9,3 %), Е. coli (8,4 %), К. pneumoniae (3,7 %), причем в 91 % случаев они были представлены в виде монокультур и в 9 % - микробными ассоциациями.

2. Методом обращения фаз получены липосомальные формы препаратов с г высоким содержанием в них (50 - 85 % от исходного количества) антибактериальных средств (тетрациклина гидрохлорида, стрептомицина сульфата, гентамицина сульфата, цефоперазона).

3. Изучена динамика накопления липосомальных антимикробных препаратов в органах и тканях экспериментальных животных. Концентрация липосомальных антибиотиков в крови и паренхиматозных органах от 3 до 10 раз превышает таковую величину применяемых препаратов в свободной форме.

4. Установлено, что липосомальные формы антибиотиков, в отличие от свободных форм препаратов, гораздо интенсивнее (в 3 раза) поглощаются клетками мононуклеарно-фагоцитарной системы, являющейся местом нахождения внутриклеточных патогенов.

5. Сравнительное изучение токсичности иммобилизованных в липосомы антибиотиков и их свободных форм показало явное снижение токсичности (в 1,6 - 3,5 раза) в случае введения экспериментальным животным препаратов, приготовленных путем липосомальной технологии.

6. Разработана оптимальная схема лечения проникающих колотых инфицированных ранений, позволяющая повысить эффективность лечения в 2 - 3,5 раза. Показатель ED50 антибиотиков соответственно в липосомальной и свободной формах составили: для тетрациклина гидрохлорида 3,1 мг и 7,2 мг; стрептомицина сульфата 1,9 мг и 6,8 мг; гентамицина сульфата 0,75 мг и 1,62 мг и цефоперазона 0,84 мг и 3,0 мг.

Заключение

Лечение проникающих инфицированных ранений брюшной полости является актуальной проблемой современной медицины. Причиной увеличения числа проникающих ранений брюшной полости является всё более возрастающее количество локальных военных конфликтов, дорожный травматизм, несоблюдение населением техники безопасности при работе с механизмами в промышленном и сельскохозяйственном производстве, широкое распространение антибиотикоустойчивых возбудителей раневого процесса.

Эффективность лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости зависит от многих факторов, которые обусловлены не только особенностями больного организма, состоянием его защитных сил, но и выраженностью патогенных свойств возбудителей, способностью их приспосабливаться к неблагоприятным условиям среды обитания, в том числе действию антибиотиков [23, 26, 30]. Слабый эффект антибиотикотерапии при раневой инфекции, в основном, связывают с внутриклеточным расположением микроорганизмов. Необходимость длительных и повторных курсов лечения часто приводит к развитию побочных реакций. Наиболее грозными осложнениями являются сепсис, анафилактический шок, аллергические реакции, токсические поражения печени, почек [32, 38, 40, 55, 73].

Ранее для лечения проникающей раневой инфекции брюшной полости часто применяли антибиотики I - II поколения: группы аминогликозидов, тет-рациклинов, цефалоспоринов [10, 41]. В настоящее время данные препараты для лечения инфицированных ран применяются редко в связи с возникновением к ним устойчивости у микроорганизмов, вызывающих раневой процесс. Антибиотики данных групп не всегда эффективны при лечении инфекций с внутриклеточным расположением возбудителей [9, 12, 15, 21, 39], кроме того, они имеют узкий терапевтический диапазон и достаточно выраженные побочные эффекты. Проникновение антимикробных препаратов в клетки - мишени и поддержание их бактерицидных концентраций в течение длительного времени является одним из важных условий успеха антибактериальной терапии. Не все антибиотики обладают данными свойствами. Поэтому разработка рациональных схем лечения проникающих инфицированных ранений брюшной полости, поиск новых путей и способов введения антибактериальных препаратов является актуальным.

Одним из путей решения является использованием липосом - носителей лекарственных препаратов.

Повышение эффективности липосомальных антибактериальных препаратов обусловлено их направленным проникновением в ткани и клетки мононук-леарно-фагоцитарной системы, в которых, в основном, локализуются возбудители раневой инфекции, а также отсутствием побочных эффектов самих везикул. Эффективность липосом как носителя антибактериальных препаратов определяется эффективностью доставки включенного вещества в клетки-мишени, способностью к деградации в биологических системах без разрушения включенного вещества.

Адекватная антибактериальная терапия проникающих инфицированных ранений брюшной полости требует микробиологической диагностики. Проведение микробиологических исследований раневого отделяемого предоставляет информацию, необходимую для диагностики и лечения. Проведение культура-логического исследования материала, полученного от больного, для адекватного выбора антибактериальной терапии у больных с инфицированными проникающими ранами брюшной полости остаётся важным условием успешнопгле-чения.

При изучении штаммов возбудителей проникающих инфицированных колотых ранений у больных хирургических стационаров г. Волгограда (МУЗ №4 и №7) в пробах клинического материала от пациентов выявлено, что в 35,5 % и 32,7 % присутствовали S. aureus и P. aeruginosa соответственно, S. epider-midis и Е. coli были изолированы в 9,3 и 8,4 процентах случаев соответственно. Менее всего из раневого отделяемого больных выделено штаммов К. pneumoniae и С. albicans - 3,73 и 1,86 % соответственно. В 91 % случаев вышеуказанные возбудители проникающей раневой инфекции брюшной полости были выделены в виде монокультур. Среди микробных ассоциаций (9 %) также преобладали ассоциации S. aureus с P. aeruginosa и с Proteus, что согласуется с данными некоторых исследователей, которые показали, что основными возбудителями инфекционных осложнений проникающих ран различной этиологии в первую очередь являлись стафилококки и энтеробактерии [32, 34, 42].

Высокая степень включения лекарственных препаратов во внутренний объем везикул является одним из важных условий их использования в качестве транспортной системы. В настоящей работе, используя метод " выпаривания и обращения фаз" получены липосомы с высоким содержанием в них антибиотиков (от 50 до 85 %), средний размер везикул, содержащих антибиотик, составил 1000 нм (800 -1200 нм), перекисный индекс Клейна при этом равнялся 1,1 (1,3±0.2) условной единице, что соответствует нормальным значениям для не-окисленных липидов. Способность даже больших липосом (свыше 1200 нм), введенных внутрибрюшинно, проникать в кровеносное русло, является очень важным фактором, подтверждающим возможность их преодолевать гистогема-тический барьер [66, 117, 128, 132, 149]. Это объясняется, во-первых, технологией получения препаратов, во-вторых, высокой растворимостью и липофиль-ностью изучаемых антибиотиков [55]. Указанные характеристики полученных нами липидных везикул позволяют предположить высокую эффективность использованного метода, его простоту и доступность [60, 66, 67, 119].

Результаты наших исследований по изучению фармакокинетики липосомальных антибактериальных препаратов свидетельствуют о том, что при внут-рибрюшинном введении экспериментальным животным везикул, содержащих антибиотики, их концентрация быстро (в течение 2 - 4 ч) достигает максимальных показателей, значительно превышая таковую при введении свободного антибиотика. Полученные при выполнении работы экспериментальные данные свидетельствуют о том, что после внутрибрюшинного введения животным терапевтических доз липосомальных антибиотиков, пиковые концентрации препаратов в крови являются очень высокими. В печени экспериментальных животных уже через 2 ч после введения липосомального препарата его концентрация составила 28,2 %. После введения животным свободного гентамицина сульфата, его концентрация в печени достигла максимального значения через 4 ч и составляла всего 16,31 %. В крови экспериментальных животных концентрация липосомального антибиотика через 1 ч превышала таковую свободного препарата в 7,76 раза. Максимальной концентрации в лёгких экспериментальных животных липосомальный препарат достигал уже через 2 ч после введения, далее его количество снижалось и через 48 ч составляло 1,2 % . Содержание в лёгких животных свободного препарата через 1 час после введения было всего 0,61 %.

Накопление наибольшего количества липосомального гентамицина в селезёнке наблюдалось в период от 4 до 8 ч и составило 6,73 % , после 48 ч количество препарата уменьшилось до 2,74 % . Концентрация свободного гентамицина сульфата достигла 1,82 % через 2 ч и уже через 8 ч была ниже 1 % . В почках наблюдалась иная картина: ко второму часу концентрация свободного гентамицина сульфата превышала показатель липосомальной формы антибиотика в 2,5 раза, затем следовало быстрое снижение концентрации, что свидетельствует о значительном выведении из организма неиммобилизованного препарата.

Основным местом локализации липосом различного липидного состава и размеров при внутрибрюшинном введении являются органы мононуклеарной фагоцитарной системы. Благодаря этому в органах, содержащих большое количество макрофагов, создается повышенная концентрация препарата, причем на более длительный промежуток времени [70, 91, 94, 95, 132, 156, 188].

Липосомы проникают в клетки мононуклеарной фагоцитарной системы (альвеолярные макрофаги, звездчатые ретикулоэндотелиоциты, макрофаги селезенки и лимфатических узлов) чаще всего путем эндоцитоза [8, 68, 162, 166, 217].

В наших исследованиях показано, что уровень средних концентраций липосомальных препаратов в макрофагах значительно (в 8 - 10 раз) превосходит уровни свободных препаратов. При введении в организм экспериментальных животных свободного антибиотика его максимальное количество в перитонеальных макрофагах через 1 ч не превышало 7,5 % от введенной дозы и через 8 ч составляло менее 1 % . Концентрация липосомального антибиотика через час после введения в 3 раза превышала таковую свободного препарата. Иммобилизованный препарат находился в макрофагах до 48 ч в относительно высоких концентрациях, и даже через 72 ч его количество превышало 4 %.

Применение в лечебной практике антибиотиков в ряде случаев сопровождается возникновением различных побочных реакций, иногда опасных для жизни больного. В последнее время этой проблеме уделяется большое внимание, как в отечественной, так и в зарубежной печати [1, 6, 60]. Используя липосомы в качестве носителей химиопрепаратов, можно значительно снизить токсический эффект воздействия на макроорганизм.

При сравнительном изучении острой токсичности гентамицина сульфата в свободной и липосомальной форме установлено, что иммобилизация антибиотиков в липосомы позволила уменьшить токсичность в 1,65 раза. Изучение хронической токсичности иммобилизованных антимикробных препаратов показало, что токсическая доза тетрациклина гидрохлорида, находящегося во внутреннем объеме липосом, составила 6,46.мг/мышь, что в 3,4 раза выше, чем при использовании свободного антибиотика. Снижение токсичности антибиотиков, включенных в липосомы, у белых мышей можно объяснить тем, что препараты, ограниченные липидной мембранной липосом медленно разрушаются ферментными системами (фосфолипидная мембрана), выделяя ограниченное количество антибиотика, что не создает его критических концентраций в макроорганизме, что согласуется с данными ряда исследователей, изучавшими токсическое воздействие липосомальных антибактериальных препаратов на макроорганизм [18, 104]. Таким образом, иммобилизация антибиотиков в липосомы позволила снизить их острую токсичность в 1,6 раза, хроническую в 3,5 раза. Полученные результаты по исследованию токсичности липосомальных антибиотиков позволяют использовать их с меньшим риском развития токсического поражения макроорганизма для лечения экспериментальных проникающих инфицированных колотых ранений брюшной полости.

Преимущественный захват липосом печенью и активное поглощение их клетками мононуклеарной фагоцитарной системы, низкая токсичность явились предпосылкой для проверки возможности их использования при лечении раневой инфекции брюшной полости.

В наших исследованиях изучение лечебного эффекта липосомальных препаратов показало значительные преимущества фосфолипидных везикул с включенными внутрь антибиотиками перед обычными формами этих лекарственных веществ при лечении проникающего колотого инфицированного ранения брюшной полости в эксперименте.

Применение липосомального тетрациклина гидрохлорида в дозе 3,36 мг увеличило процент выживших животных до 67, в то время как свободная форма препарата в дозе 6 мг позволила выжить лишь 17 % экспериментальных животных. Снижение-дозы липосомального антибиотика до 1,68 мг позволило выжить 17 % мышей, в то же время при введении препарата в свободной форме в дозе 3 мг - процент выживших животных равнялся нулю. Применение липосом в качестве переносчика для тетрациклина гидрохлорида снизило ЕД50 препарата в 2,3 раза, терапевтический индекс при этом увеличился 9,21 раза, индекс клинической эффективности (ИКЭ) был в 16,1 раза выше, чем у свободного тетрациклина гидрохлорида.

Стрептомицина сульфат в дозе 6 мг предохранял от гибели 33 % животных при средней продолжительности жизни 8,1 суток. Введение липосомального антибиотика в дозе 2,25 мг повысило продолжительность жизни мышей до 14,1 суток и процент выживших животных до 83,3 %. Липосомальный стрептомицин в дозе, вдвое меньшей (1,12 мг), чем свободный, предохранял от гибели 50 % особей и увеличивал продолжительность их жизни до 13,1 суток. Иммобилизация препарата в липосомы позволила увеличить ЕД50 антибиотика в 3,5 раза по сравнению с обычным препаратом. Стрептомицина сульфат в свободной и липосомальной формах в дозах 3,0; 1,5; 0,75 мг (для свободной формы) и 0,28 мг (для липосомальной) при лечении изучаемой инфекции был неэффективен. Гибель 100 % особей отмечена в различные сроки наблюдения. Терапевтический индекс (ТИ) свободной формы препарата (1,64) в 5,55 раз ниже, чем-у иммобилизованного в липосомы стрептомицина. Индекс клинической эффективности стрептомицина в липосомах (ИКЭ) в 3,5 раза выше по сравнению со свободной формой препарата.

При сравнительном изучении эффективности гентамицина сульфата в свободной и липосомальной формах антибиотик в тривиальной форме предохранял от гибели 50 % животных в дозе З мг, в липосомальной-форме - 100 % в дозе 1,06 мг. При этом возрастание средней продолжительности жизни животных отмечалось в 2 раза. Включение препарата в липосомы снизило ЕД50 антибиотика в 2,16 раза в и увеличило терапевтический индекс в 3,5 раза, а также индекс клинической эффективности в 6,2 раза.

Нами показано, что при использовании цефоперазона, иммобилизованного внутрь липосомальных везикул в дозе, 0,75мг/мышь, средняя продолжительность жизни экспериментальных животных возросла в 1,2 раза в сравнении со свободным антибиотиком. При лечении проникающей раневой инфекции свободной формой препарата в дозе Змг/мышь процент выживших животных возрос от 33 % для свободного антибиотика до 83 % при лечении иммобилизованной формой препарата ЕД50 антибиотика в липосомальной форме составила 0,84 мг, а свободного цефобида 3,0 мг.

Эффект липосомальных антибиотиков вероятно объясняется не только следствием направленного транспорта липосом к клеткам - мишеням, но и возможным воздействием на основные звенья течения воспалительного процесса (экссудацию и пролиферацию). Уменьшение.текучести мембран при этом способствует сохранению клеточных структур в условиях гипоксии и ишемии [116, 166, 175, 201]. Klein R. А. показал, что высокая эффективность антибиотиков включенных в липосомы, возможно, обусловлена тем, что липосомы способны в некоторой степени ингибировать процессы перекисного окисления ли-пидов за счет экзогенного фосфатидилхолина (входящего в состав липосом), который обладает антиоксидантными свойствами [167].

Повышение эффективности липосомальных антибиотиков связано и с тем, что особенности фармакокинетики липосом способствует созданию более высоких бактерицидных концентраций не только в паренхиматозных органах, но и в крови.

Таким образом, лечение липосомальными формами тетрациклина гидрохлорида, стрептомицина сульфата, гентамицина сульфата и цефоперазона проникающего инфицированного колотого ранения брюшной полости оказалось в 2-3 раза эффективнее, чем при использовании свободных антибиотиков.

В целом, полученные результаты открывают широкие возможности для дальнейшего теоретического и экспериментального изучения липосомальных форм антимикробных препаратов в плане усовершенствования биотехнологии их получения, а также использования при лечении и профилактики особо опасных инфекций.

81

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Снатенков, Евгений Александрович, Саратов

1. Адамиров Е.Д., Теренова О.А., Адамиров Н.Е. Токсикологическая характеристика лекарственных препаратов на разных стадиях клинической разработки// Матер.УП Российского науч. конгресса "Человек и лекарство".: Тез. докл.- М. 2000. - С. 469 - 470.

2. Акатов А.К., Зуева B.C. Стафилококки/ АМН СССР. М.: Медицина, 1983. - 256с.

3. Альберт Э.Избирательная токсичность. М.: Мир, 1971.- С. 31 - 46.

4. Алюшин М.Т., Артемьев А.И., Трукман Ю.Г. Синтетические полимеры в отечественной фармакологической практике. М.: Медицина, 1976. - С. 12-24.

5. Антонов В.Ф., Князев Ю.А., Мапиковский Ю.Ш. Липосомы и их взаимодействие с клетками и тканями. М.: Наука. - 1981. - С. 3 - 9.

6. Артюхина А.И. Влияние липосом на активность ферментов печени.// Сб. научн. трудов./ Волгоград, мед. академия. Волгоград, 1996., Вып.2. -С.49 - 52.

7. Ашмарин И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях. -М.: Медицина, 1962. 180с.

8. Барсуков А.А., Бердичевский В.Р., Заисков В.М. Эндоцитоз липосом макрофагами in vitro// Успехи современной биологии. 1980. -Т.90, №3.- С. 394 - 404.

9. Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.:, 1993. 397 с.

10. Бертраш Г., Катцунг. Базисная и клиническая фармакология. Москва. Бином. - 1998. -С. 260 - 270, 225 - 237.

11. Блатун J1.А., Павлова М.В., Терехова Р.П. Лечение и профилактика раневой инфекции. Нов. мед. журн. 1998; 3 : 7 11.

12. Биологический эффект липосом при гипоксических состояниях различной этиологии/ А.В.Стефанов, В.П.Пожаров., Т.Д.Миняйленко и др.// Вест. Акад. мед. Наук СССР. 1990.- №6. - С.47 -51.

13. Бубнова Н.А., Шляпников С.А. Инфекции кожи и подкожной клетчатки. Хирургические инфекции .Рук. / Под ред. Ерюхина И.А., Гельфанда, Б.Р.Шляпникова С.А., СПб: 2003, 379 409.

14. Буянов В.М., и др. Артериолимфатическое введение антибиотиков при лечении больных с гнойно-воспалительными заболеваниями органов брюшной полости.// Хирургия. 1998. - №8. - С. 27 - 29.

15. Взаимодействие липосом различного состава с компонентами сыворотки крови/ Т.И.Шраер., Н.А. Голубчикова, В.Н.Сидоров., В.М. Крайнее // Вестник Акад. мед. наук. 1990. - № 6. - С. 36 - 38.

16. Владимирский М.А., Ладыгина Г.А., Тенцова А.И. Эффективность стрептомицина, включенного в липосомы, при экспериментальном туберкулезе у мышей// Антибиотики. 1983. - №1. - С. 23 - 26.

17. Гельфанд Б.Р. Рекомендации по классификации, диагностике, профилактике и лечению сепсиса. / Б.Р. Гельфанд// Вестник интенсивной терапии. -2002. -№2. С. 30-32.

18. Гентамицин и его лекарственные формы/ А.Д.Назаров, Н.И.Синицина, О.Н.Торопцева, Э.З.Коган // Антибиотики. 1983. - № 5. - С. 376 - 386.

19. Генгиков Л.А., Прозоровский С.В., Гагаев Г.Г. Эпидемиологические аспекты антибиотико-резистентных госпитальных микроорганизмов // Антибиотики. 1984, - № 2. - С. 99 - 104.

20. Грегориадис Г. Липосомы как носители лекарств. Развитие и будущее концепции.// Липосомы в биологических системах.: Пер. с англ./ Под ред. Грегориадис Г., Аллисон А. М.: Медицина, - 1983. - С. 36 - 93.

21. Гришина И.А., Галанкин В.Н. Моделирование генерализованной синег-нойной инфекции с наличием первичного очага/ Журн.микробиол.эпид.иммунол. 1982. - №2. - С. 82 - 85.

22. Гурин Н.Г. Рациональное применение антибиотиков основа профилактики их побочных эффектов // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. - № З.-С. 40 -43.

23. Давыдов В.Ю. и др. Встраивание антибиотиков в липосомы, содержащие фосфатидилэтанол // Антибиотики и химиотерапия 1996. - №5. - С. 25 -29.

24. Дехнич А.В. Оптимизация выбора антибиотиков при нозокомиальных инфекциях, вызванных Staphylococcus aureus, на основе данных многоцентрового исследования: Автореф. дис. канд. мед. наук.: 14.00.25/ А.В.Дехнич Смоленск. 2002. - 24с. - Библиогр.

25. Дмитриева Н.В., Дронова О.Н. Об оценке эффекта антибактериальной терапии. // Антибиотики и химиотерапия. 1991. - Т. 36, №2. - С. 34 - 36.

26. Ермолов А.С., Убовский Е.Е., Миронер Е.Ф. и др. Профилактика и лечение гнойных осложнений в абдоминальной хирургии // Профилактика илечение гнойных осложнений в хирургии и травматологии. М., 1988. С. 20-25.

27. Журило А.А., Горбунова М.Л., Короленко А.С. Моделирование раневого синегнойного процесса/ Журн.микробиол.эпид.иммунол. -1990. № 2. -С. 7- 10.

28. Зайцев А.А., Карпов О.И. Лечение стафилококковых инфекций. Новые Санкт-Пебербургские врачебные ведомости. 2001, 2:52 55.

29. Илиев И. Гефгиева М., Кабанванов В. Полимерные химиотерапевтиче-ские свойства с канцеролитической активностью // Успехи химии. 1974. -С. 134 - 147.

30. Исхакова Х.И. Характеристика госпитальных штаммов P.aeruginosa// Журн. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1985. - № 2. - С. 11 - 14.

31. Камалов Е.Х.Интенсивная антибактериальная терапия политравмы// Анестезиология и реаниматология. 1996. - № 3. - С. 71 - 73.

32. Каминский Л.С. Стат. обр-ка лабор. и клинич. данных. Л.: 1964, С. 252.

33. Кашкин К.П., Караев З.О. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия. Л.: 1984, 199с.

34. Козлов Ю.С. Анализ применения цефоперазон/ сульбактама в терапии бактериального сепсиса / Ю.С.Козлов., О.И.Денисова // Вестник интенсивной терапии. 2003. - № 2. - С. 28 - 34.

35. Котельников В.П. Раны и их лечение. М.: Знание, 1991. - С. 12 - 14.

36. Кузин М.И., Костюченок Б.М. Хирургический сепсис современное состояние проблемы // Вести. АМН СССР. - 1983. - № 8. - С. 7 - 14.

37. Кузин М.И., Костюченок Б.М. Раны и раневая инфекция // Руководство для врачей. М.: Москва. 1990. С. 150 - 158.

38. Кузин М.И., Костюченок Б.М. Раны и раневая инфекция// Руководство для врачей. Издание второе переработанное и дополненное. Москва, Медицина. 1990. С. 298 - 306.

39. Ладыгина Г.А., Тенцова А.И., Зизина О.С. Использование липосом для направленной доставки лекарственных веществ к органам и тканям // Фврмация. 1978. - № 27. - С. 52 - 57.

40. Ларионова Н.И., Точилин В.П. Современное состояние и перспективы использования в медицине иммобилизованных физиологически активных веществ белковой природы // Хим.-фармацевт.журн. 1980. -'№ 14. - С. 21 -36.

41. Лидак М.Ю., Паэгле Р.А., Гиллер С.А. Изыскание новых противоопухолевых веществ среди биополимеров и их синтетических аналогов // Хим. -фарм. журн. 1976. - № 8. - С. 28 - 35.

42. Лупальцев В.И., Кутафин Ю.Н., Хаджиев О.И. Эффективность сочетан-ной СВЧ и лазеротерапии в комплексном лечении гнойных ран // Клин, хирургия. - 1991. - № 3.- С. 25 - 27.

43. Майорова В.А. Проникновение антибиотиков тетрациклинового ряда в макрофаги in vivo // Антибиотики. 1976. - № 6. - С. 500 - 503.

44. Мисетова Е.Н. Метаболические изменения в крови при различных способах введения липосом: Автореф. дисс. канд. мед. наук: 03.00.04/ Е.Н.Мисетова Ростов - н/Д.: 2002. - 21с.

45. Методические рекомендации по приготовлению липосом, содержащих биологически активные вещества / Закревский В.И., Ефременко В.И., Мельников В.А. и др. Волгоград, 1982. - 23с.

46. Марголис Л.Б., Бергельсон Л.Д. Введение митотических ядов в липосо-мах как метод повышения чувствительности клеток резистентным к этим ядам.//Докл. АН СССР.-1975. -Т.225., №4. С. 941 - 944.

47. Марголис Л.Б., Дорфман Н.А. Получение липосом, обладающих иммунологической специфичностью.// Бюл.эксп.биол.и мед. 1977. - Т.83. -№ 1.- С. 53 - 57.

48. Марголис Л.Б., Бергельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клет-ками.-М.: Наука. 1986. - С.42 - 56.

49. Навашин П.С. Сравнительное изучение действия сизомицина и других аминогликозидных антибиотиков на возбудителей хирургической инфекции// Антибиотики и химиотерапия. 1982. - № 12. - С. 902 - 906.

50. Навашин С.М., Фомина И.П. Проблемы и перспективы химиотерапии бактериальных инфекций// Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т.35, №10.-С. 3-6.

51. Особенности микрофлоры гнойных ран в большом городе/ Конычев

52. A.В., Бечишев О.Б., Лебедева Т.П. и др.// Вестн. хирургии им.И.И.Грекова. 1991. - Т. 146, № 4. - С. 28 - 31.

53. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии// Под ред. Страгунского Л.С., Белоусова Ю.Б., Козлова С.Н.М.: 2002, 223 242 с.

54. Применение квантовой лимфотерапии при гнойно-воспалительных заболеваниях органов брюшной полости/ Колесников Е.Б., Гамалея Н.Ф., Машев А.Ф. и др.//Клин, хирургия. 1991. -№1. - С. 71.

55. Проблемы создания липосомальных лекарственных форм антибиотиков/ Л.Н.Березовская, Н.С.Грязнова, Д.И.Байрашашвили, С.В.Яроцкий// Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т. 35, № 10. С. 31 - 35.

56. Противовоспалительные эффекты липосом / В.М.Крейнес,

57. B.М.Мельникова, Л.М.Марголин и др.// Вестн.Акад.мед.наук СССР. -1990. -№ 6.-С.44-47.

58. Рожков А.С. Инфекционные осложнения тяжелых механических травм: (Вопросы патогенеза, профилактики и лечения): Авторефер.дис.на со-иск.учен.степ.канд.мед.наук: (14.00.27) ВМА. СПб. 1995. - 19с.

59. Разводовский Е.Ф. Фармакологически активные полимерные вещества. // Химия и технол.высокомолекулярных соединений. 1976. - С. 61 - 95.

60. Рахман И.Е. Токсичность липосом// Липосомы в биологических системах: Пер.с англ./ Под ред. Грегориадис Г., Аллисон А. М.: Медицина. -1983.-С. 269-274.

61. Ротов К.А. Включение антибиотиков и сульфаниламидных препаратов в липосомы.// Актуальные вопросы экспериментальной, клинической и профилактической медицины (Тез.науч.докл. на Х-ой обл.конф.мол.ученых- медиков и врачей). Волгоград, 1988. - С. 60.

62. Ротов К.А., Васильев В.П., Антонов Ю.В. Получение и характеристика липосом, содержащих антибиотики // Микробиол.журн. 1989. - т.51, № 6.-С. 79 - 83.

63. Ротов К.А., Васильев В.П., Ревенко Л.Г. Распределение липосом в органах и тканях животных при внутрибрюшинном и подкожном путях введения// Особо опасные инфекц. заб.: диагн. проф. и биол. свойства возбудителей. 1990. - Вып.4.- С. 74 - 79.

64. Ротов К.А., Тихонов Н.Г. Конструирование липосомальных антимикробных препаратов и использование их для лечения и профилактики лептос-пироза, бруцеллеза, бронхопневмоний различной этиологии: Отчет о НИР (заключительной). Волгоград. 1996. - С. 19-22.

65. Ротов К.А., Перепелкин А.И., Петров В.И./ Эффективность лечения острого мелиоидоза липосомальным цефотаксимом// Материалы VII Российского научного конгресса "Человек и лекарство", Тез. докл. Москва. -2000. - С. 540.

66. Савельев B.C., Гельфанд Б.Р. Антибактериальная терапия абдоминальной хирургической инфекции. М.: Москва. 2003.- С. 49 86.

67. Сергеев С.Г., Гилев А.Ф., Устьянцова И.М. Влияние длительного подкожного введения липосом на функциональное состояние органов и систем экспериментальных животных// Вест. акад. мед. наук. 1990.- № 6. — С. 32-35.

68. Смольянников А.В. О гнойно-резорбтивной лихорадке и раневом сепсисе// Архив патологии. 1998. - № 1. - С. 10 - 14.

69. Современные аминогликозиды в хирургической практике: возможности и перспективы/ Б.С.Брискин, Н.Н.Хагатрян, З.И.Савченко, О.Г.Сосновикова// Проблема инфекции в интенсивной терапии. Использование современных аминогликозидов. М.: 1998. - С. 19 - 26.

70. Соловьев Г.М., Петрова И.В., Ковалев С.В. Иммунокоррекция, профилактика и лечение гнойно-септических осложнений в кардиохирургии. М.: 1987. 159с.

71. Соловьев Г.М. и др. Лечебная тактика при сочетанных торакеабдоми-нальных ранениях// Хирургия. 1998. - № 9. - С. 18 - 25.

72. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования ( М.О.Биргер, Е.А.Ведьмина, В.В.Влодавид и др.); Под ред. М.О.Биргера. 3-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1982. - 462с.

73. Сравнительная характеристика некоторых экспериментальных моделей Staph. Ифекции/ Анатолий С.А., Антоновская И.И., Таек С.Я., Падерина Е.М.// Журн. микробиол. эпид. иммунол. -1971, -№ 9. С. 60 - 63.

74. Стефанов А.В. Использование липосом в медицине// Молекулярная биология (Киев). 1980. - № 27. - С. 32 - 44.

75. Стефанов А.В. Перспективы использования липосом в медицине// Биохимия животных и человека. 1983. -№ 7. - С. 33 - 36.

76. Страчунский А.С. Политика применения антибиотиков в отделениях интенсивной терапии. Нозокомиальные инфекции в интенсивной терапии: Мат.международ.конф. М.: 1998; 19-20.

77. Страчунский JI.C., Богданович Т.М. Состояние резистентности к антиинфекционным химиопрепаратам в России. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии./ Под ред. Страчунского JT.C., Белоусо-ва Ю.Б., Козлова С.Н.,М.: 2002, С. 32 39.

78. Тенденции в развитии исследований в области липосом (обзор патентной литературы) (Н.Ю.Несытова, Н.С.Панеева, Е.Б.Ильина, П.Шенк с соавт)// Вестник акад.мед.наук СССР. 1990. № 6,- С. 8 - 19.

79. Тенновер Ф.С. Глобальная проблема антимикробной резистентности// Русск.мед. журн. 1996. - Т.З. № 4. - С. 217 - 219.

80. Тенцова А.И., Ажгихин Н.С. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств. -М.: Медицина. 1974.

81. Торчилин В.П., Бобкова А.С., Чазов Е.И. Иммобилизация ферментов на биосовместимых носителях.// Биоорганическая химия. 1976. № 2. - С. 116- 124.

82. Торчилин В.П., Тищенко Е.Г., Чазов Е.И. Иммобилизация ферментов на биосовместимых носителях.// Биоорганическая химия. 1976. - № 3. -С. 399 - 405.

83. Хмелевская И.Г., Ковальчук J1.B. Иммунокорригирующее и протектив-ное действие протеолитических ферментов на антителогенез у мышей при стафилококковой инфекции и применении антибиотиков.// Журн. микробиол. 2001, № 1. С.54 - 56.

84. Хромов О.С. Механизм лимфостимулирующей активности липосом// Физиологический журнал. 1998. - № 44. - С. 49 - 58.

85. Чикаев В.Ф. Прогнозирование и лечение гнойно-септических осложнений в неотложной абдоминальной хирургии: (клинико-экспериментальное исследование): Автореф. дис.д ра мед. наук: (14.00.27; 14.00.16)-Казань, 1999.-46с.

86. Шляпников С.А. Хирургические инфекции мягких тканей старая проблема в новом свете. Инфекц. хирур.2003. 1:1:14-22.

87. Шраер Г.И., Шапошников Ю.Г., Крайнее В.М. Применение липосом в раннем лечении экспериментальных ран.// Хирургия. 1994. -№ 12. - С. 35 -38.

88. Экстрем А.В. и др. Диагностика и интенсивная терапия тяжелых соче-танных травм.// Вестн. ВМА. 2000. - № 6. - С. 163 - 166.

89. Эффективность лечения стафилококковой пневмонии липосомальным гентамицином в свободной и липосомальной форме/ Перепалкин А.И., К.А.Ротов, Н.Г.Тихонов и др.// Антибиотики и химиотерапия. 1996. Т.41. № 10,-С. 28 -29.

90. Эффективность стрептомицина, включенного в липосомы при лечении туляремии у животных / Н.Г.Тихонов, А.И.Перепелкин, К.А.Ротов и др.// Материалы VII Российского научного конгресса "Человек и лекарство": Тез. докл. М.: 2000. С - 540.

91. Яковлев С.В. Современный взгляд на антибактериальную терапию ин-трабдоминальных инфекций// Consil Med.2001. 4:6:304 309.

92. Яковлев В.П. Цефоперазон цефалоспориновый антибиотик 3 поколения. Анализ 10 - летнего применения в России при госпитальных инфекциях. Антибиотики и химиотер. 1994. 2-3: 57- 60.

93. Яковлев В.П., Щавелев Д.Л., Яковлев С.В. Клинико-лабораторное обоснование назначение цефоперазона/сульбактама больным с тяжелыми госпитальными инфекциями. Инфекц. и антимикроб, тер.2002. 4:5: 132 -137.

94. A comparison of negatively and positively charged liposomes entrapped polyinosinic acid for interferon induction in mice / W.Magee, M.Talcott, S.X.Struab, Y.Vriend // Biochim.Biophys.Acta. 1976. - V.451, N 2. - P. 610 -618.

95. Administration of liposomal agent and blood clearance capacity of the mononuclear phagocyte system // E.W.Van-Etten, M.T.ten Kate. S.V.Snijders, J.A.Bakker-Wondenberg // Antimicrob.Agents.Chemother.-1998.-V.42, N 7. -P. 1677- 1681.

96. Albernethy D. Pharmacological effects and toxicity liposomes. Ch.l 5. Liposomes from physical to therapeutic applications /Ed.by C.Knight // Research monographs in cell physiology. 1981.- V.7. -P.435 - 436.

97. Allen T.M. Liposomal drug formulations. Rationale for development and what we can expect for the future // Drugs. 1998. - V.56, N 5. - P. 747 - 756.

98. Allison A.C., Gregoriadis J. Liposomes as immunological adjuvants // Nature. 1974. - N 252. - P. 252 - 264.

99. Antidigoxin antibody incorporation into liposomes a potential therapy for digoxin toxicity / D.A.Tyrrell, P.I.Campbell, K.J.L.Harding et al. // Bio-chem.Soc.Trails. - 1978. - N 6. - P. 1239- 1241.

100. Application of drug-containing liposomes to the duration of intramuscular absorption of water-soluble drugs in rats / E.Arakawa, Y.Imai, H.Kabayashi, K.Okumura // Chem.Pharm.Bull. 1975. - N 23. - P. 2218 - 2222.

101. Bali A., Dhawan S., Jupta C.M. Stability of liposomes in circulation is markedly enhanced by structural modification of their phospholipids component//FEB S Lett. 1983. - V.154, N 2. - P. 373 - 377.

102. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins I.C. Diffusion of univalent ions across the lamellae of swollen phospholipids // J.Mol.Biol. 1965. - N 13. -P. 238 - 252.

103. Bangham A.D., Hill M.W., Miller N.J. A. Methods in membrane biology. -New York: Plenum Press, 1974. -N 1. P. 1 - 68.

104. Barennhols Y., Amselem S., Liehtenbery D. A new method preparation of phospholipid vesicles (liposomes) // FEBS Lett. 1979. -N 99. - P. 210 - 214.

105. Black C.D.V., Gregoriadis J. Intracellular fate and effect of liposome-entrapped actinomycin D injected into rats // Biochemical. Soc.Trans. 1974. -N2.-P. 869- 871.

106. Black C.D.V., Gregoriadis G. Interaction of liposomes with blood plasma proteins //Biochem. Soc. Trans. 1976. - Vol. 4. - P. 253-256.

107. Batzri S., Korn E.D. Single bilayer liposomes prepared without sonification //Biochim.Biophys.Acta. 1973. -N 298. - P. 1015-1019.

108. Bigon E., Boarato E., Bruni A. Pharmacological effects of phosphatidyl-serine liposomes // Brit.J.Pharmacol. 1979. -N 66. - P. 167 - 174.

109. Bonventre P.P., Gregoriadis J. Killing of intraphagocytic staphylococcus aureus by dihydrostreptomycin entrapped within liposomes // Antimi-crob.Agents.Chemother. 1978. -N 13. - P. 1049 - 1051.

110. Brunner J., Skrabal P., Hauser U. Single bilayer vesicles prepared without sonification. Physio-chemical properties // Biochim.Biophys.Acta. 1976. -V.455.-P. 322-331.

111. Buboltz J., Feigenson G.W. A novel for the preparation of liposomes: rapid solvent exchange // Biochim.Biophys.Acta. 1999. - V. 1417. - N 2. -P. 232 - 245.

112. Bussian R., Wriston J.C. Influence of incorporated cerebrosides on the action of liposomes with He-La cells // Biochim.Biophys. Acta. 1977. - V.47, N 2. -P. 336-340.

113. Chen S., Keehan R.M. Effect of phosphatidylcholine liposomes on the mi-togenstimulated phagocyte activation // Biochim;Biophys.Res.Commun. -1979.-N79.-P. 852 858.

114. Cafiso D.S., Petty H.R., McCoxinell H. Preparation of unilamellar lipid vesicles at 37° С by vaporization method // Biochim.Biophys.Acta. 1981. -V.649.-P. 129-131.

115. Cooper R.A., Leslie M.H., Fischkoff S. Factors influencing the lipid composition arid fluidity of red cell membranes in vitro: Production of red cell possessing more than two cholesterol per phospholipids // Biochemistry. 1980. -V.17.-P. 327-331.

116. Corbach S.L. Intraabdominal infections // Clin.Infect.Dis. 1993. - V.17, N 6.-P. 961 - 965.

117. Dapergolas G., Neerunjun E.D., Gregoriadis G. Penetration of target areas in the rat by liposome-associated bleomycin, glucose oxidase and insulin // FEBS Lett. 1976.-N63.-P. 235 -239.

118. Deamer D., Bangham A.D. Large volumen liposomes by an ether vaporization method // Biochim.Biophys.Acta. 1976. - V.443. - P. 629 - 634.

119. Deamer D.W. Preparation and properties of ether-injection liposomes // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1978. - V.308. - P. 250 - 258.

120. De Barsy Т., Devos P., van Hoof F. A morphologic and biochemical study of the fate of antibody-bearing liposomes // Lab.Invest. 1976. - N 34. - P. 273 - 282.

121. Dees C., Fountain M.W., Schultz R.D. Liposome antibiotic activated phagocytes enchanced intraphagocytic killing of Brucella abortus by liposomes, containing gentamycin//Fed.Proc. 1982. - V.41, N 3. - P. 4361 - 4364.

122. Deol P., Khuller G.K. Lung specific stealth liposomes: stability biodistribu-tion and toxicity of liposomal antitubercular drugs in mice // Biochim. Bio-phys. Acta. 1997. - V. 1329, N 2. - P. 57 - 67.

123. Differential antitumor activity of free versus lipid entrapped cytosine ara-binoside (ARA-C) against mouse leukemia L 1210 / Y.Rustum, C.Dave, E.Mayhew etal.// Amn.N.Y.Sci. 1978.-N 308. - P. 436 - 440.

124. Differential uptake of liposomes in size and lipid composition by parenchymal and kupffer cells of mouse liver // Y.E.Rahman, E.A.Cerny, K.R. Patel et al. // Life Sci. 1982/- N 31. - P. 2061 -2071.

125. Dingle J.Т., Gordon J.L., Hazleman L.E. Novel treatment for joint inflammation // Nature. 1978. - N 271. - P. 378 - 379.

126. Distribution and fate of synthetic lipid vesicles in the mouse: a combined radionuclide and spin label study / J.R.McDongall, J.K.Dunnick., M. G. McNaminee et al. // Proc.-Nat. Acad.Sci.USA. 1974. - V.71, N 9. - P. 3487 -3491.

127. Distribution of free and liposome-entrapped H-MTX in the central nervous system after intracerebroventricular injection in a primate / H.K.Kimelberg, T.P.Tracy, R.E. Watson et al. // Cancer Res. 1978. -N 38. - P. 706 - 712.

128. Effect of proteins on thermotropic phase transition of phospholipids membranes / D.Papahadjopoulos, M.Moscarella, E.H.Eylar et al. // Biochim. Bio-phys. Acta. 1975. - N 401. - P. 317 - 335.

129. Enoch H.G., Strittmatter P. Formation and properties of 100-A-diameter, single bilayer phospholipids vesicles // Proc.Nat.Acad.Sci.USA. 1979. - N 76.-P. 145 - 149.

130. Enzyme therapy in genetic diseases birth defects original Article series / G. Gregoriadis, E.D.Neerunjun, T.Neade et al. 1979. - P. 58.

131. Fate of cholesterol-rich liposomes after subcutaneous injection into rats / A.Tumor, C. Kirby, J.Senior et al. // Biochim.Biophys.Acta. 1983. - V.760., N l.-P. 119 - 125.

132. Fountain M.W., Dees С., Schultz R.D. Enhanced intracellular killing of Staphylococcus aureus by canine monocytas treated with liposomes containing amicacin, gentamycin and tobramycin // Curr.Microbiol. 1981. - V.6, N 6. -P. 373 - 376.

133. Gales MA, Gales BJ. Rapid infusion of amphotericin В in dextrose. Ann Pharmacother. 1995; 29:523-9.

134. Gallis HA, Drew RH, Pickard WW. Amphotericin B: 30 years of clinical experience. Rev Infect Dis. 1990; 12:308-29

135. Gregoriadis G., Allison A.C. Entrapment of proteins in liposomes prevents allergic reactions in pre-immunised mice // FEBS Lett. 1974. - N 45. - P. 71 -74.

136. Gregoriadis G., Neerujun D.E. Control of the rate of hepatic uptake and ca-tabolism of liposome-entrapped proteins injected into rats. Possible therapeutic applications // Eur.J.Biochem. 1974. - V.47, N 1. - P. 179 - 185.

137. Gregoriadis G. Drug entrapment in liposomes: possibilities for chemotherapy // Biochem.Soc.Trans. 1974. - N 2. - P. 117 - 119.

138. Gregoriadis G., Ryman B.E. Fate of protein-containing liposomes injected into rats. An approach to the treatment of storage diseases // Eur.J.Biochem. -1972. V.24, N 3. - P. 485 - 491.

139. Gregoriadis G. The earner potential о liposomes in biology and medicine // New Engl J.Med. 1976. - N 295. - P. 707 - 710.

140. Gregoriadis G., Neerunjun E.D., Hunt R. Fate of a liposome-associated agent injected into normal and tumor-bearing rodents. Attempts to improve localization in tumor tissues // Life Sci. 1977. -N 21. - P. 367 - 369.

141. Gregoriadis G., Ryman B.E. Liposomes as carriers of enzymens or drugs: a new approach to the treatment storage diseases // Biochem.J. 1977. - N 124. -P. 58 - 63.

142. Gregoriadis G. Targeting of drugs // Nature (London). 1977. - N 265. - P. 407-411.

143. Gregoriadis G. Liposomes in therapeutic and preventive medicine: the development of the drug-carrier concept // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1978. - N 308. -P. 343 - 370.

144. Gregoriadis G. Drug carriers in biology and medicine / Ed.by G. Gregoriadis. London, New York, San Fransisco: Academic Press, 1979. - P.287-341.

145. Gregoriadis G. Drug entrapment in liposomes // FEBS Lett. 1973. - V.36, N3.-P. 293 -296.

146. Gregoriadis G., Kirby C., Senior J. Optimization of liposome behaviour in vivo // Biol.Cell. 1983. - N 47. - P. 11 - 18.

147. Hamilton R.L., Goerke J., Guo L.S. Unilamellar made with the French pressure cell: a simple preparative and semiquantitave technique // J.Lipid.Res. -1980.-P. 981 992.

148. Haynes D.H., Kang C.H. Saturation of uptake of liposomes by the reticuloendothelial system: possible use for increased tumor specificity // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1978.-N 308. - P. 440-446.

149. Hauser H.O. The effect of ultrasonic irradiation on the chemical structure of egg lecithin // Biochem.Biophys.Res.Commun. 1971. - N 45. - P. 1049-1055.

150. Heath T.D., Edwards D.S., Ryman B.E. The adjuvant properties of liposomes//Biochem.Soc.Trans.-1976.-N 4.-P. 129- 133.

151. Helenius A., Simons K. Solubilization of membranes by detergents // Bio-chim.Biophys.Acta. 1975. - N 415. - P. 29 - 79.

152. Huang L., Ozato K., Pagano R.E. Interaction of phospholipids vesicles with murine lymphocytes. I. Vesicle-cell adsorbtion and fusion as alternative pathways of uptake // Membrabe Biochem. 1978. - N 1. - P. 1 - 25.

153. Improved therapy of experimental leishmaniasis by use of a liposome-encapsulated antimonial drug / C.Alving, E.A. Steck, W.L.Handson et al. // Life Sci. 1978.-P. 1021 - 1026.

154. Intracellular delivery and antibacterial activity of gentamycin encapsulated in pH-sensitive liposomes // P.Lutwyche, C.Cordeiro, D.S.Wiseman, M.St.-Louset al. // Antimicrob.Agents.Chemother. 1998. - V/42, N 10. - P. 2511 -2520.

155. Ivey H., Roth S., Kattwinkel J. Nebulization of sonificated phospholipids for treatment of respiratory distress syndrome // Pediatr.Res. 1977. -Nil.- P. 573 - 580.

156. Juliano R.L., Stamp D. The effect of particle size and charge on the clearance rates of liposomes and liposome encapsulated drugs // Biochem.Biophys. Res. Commun. 1975. - V.63. - P. 651 - 658.

157. Karlowsky-JA; Zhanel-GG Concepts on the use of liposomal antimicrobial agents: applications for aminoglycosides.Clin-Infect-Dis. 1992 Oct; 15(4): 654-67

158. Kimelberg H.K., Mayhew E.G. Properties and biological effects of liposomes and their uses in pharmacology and toxicology // CRS Crytical reviews in toxicology. 1978. - V.6, N 1. - P. 27 - 29.

159. Klein R.A. The detection of oxidation in liposome preparations // Bio-chim.Biophys.Acta. 1970. - N 21. - P. 486 - 489.

160. Kurnana C.R., Yuen K.Y. Parenteral aminoglicoside therapy. Selection, management and check // Drugs. 1994. - V.45, N 5. - P. 520 - 528.

161. Liposomes amphotericin infections in patients with cancer: a preliminary study / G.Lopez-Berstein, V.Fainstein, R.Hopfer R. et al. // J.Infect.Dis. -1985. -V. 151, N 4. P. 704-710.

162. Liposome-encapsulated actinomycin D: potential in cancer chemotherapy / Y.E.Rahman, E.A.Cerny, S.L.Tollaksen et al. // Proc.Soc.Exp.Biol.Med. -1974.-N 146.-P. 1173 1176.

163. Liposomes in arthritis: a new approach / M.De Silva, D.P.Page Thomas, B.L.Hazleman, P.Wraighht // Lancet. 1979. -N 1. - P. 1320 - 1322.

164. Liposome-incorporated corticosteroids. 1. The interaction of liposomal Cortisol palmitate with inflammatory synovial membrane / J.H.Shaw, C.G.Knight, D.P.Page Thomas, N.C.Phillips // Brit.J.Exp.Pathol. 1979. - N 60. - P. 142 -150.

165. Liposome toxicity in the mouse central nervous system / D.H.Adams,

166. G.Jouce, V.J.Richarddson et al. // J.Neurol.Sci. 1977. - N 31. - P. 173 - 179.

167. Lucy J. A. The fusion of biological membranes //Nature. 1970. - V.227, N 5260.-P.815-817.

168. Magee W.E., Miller O.V. Liposomes containing antiviral antibody can protect cells from virus infection // Nature (London). 1972. - N 23. - P. 339 -341.

169. Mayhew E., Papahadjopoulos D., O'Malley J.A. Cellular uptake and protection against virus infection by polyinosinic-polycytidylic acid entrapped within phospholipids vesicles // Mol.Pharmacol. 1977/ - V. 13, N 3. - P. 488 - 496.

170. Mantovani P., Pipin G., Amadneei J. Investigation into the relationship between phospholipids and brain acetyl-choline//Adv.Exp.Med.Biol. 1976.— N72.-P. 285 -292.

171. Martin F.J., MacDonald R.C. Lipid vesicle-cell interactions. I. Hemmag-glutination and hemoliysis // J.Cell.Biol. 1976. -N 70. - P.494-496.

172. Martin F.J,, MacDonald R.C. Lipid vesicle-cell interactions. II. Induction of cell fusion //J.Cell.Biol. 1976. -N70. -P. 506 - 515.

173. Manosroi A., Blume A. et al. Thermodynamic characteristics of human insulin deae-dextran complex entrapped in liposomes // Drag. Dev. and Ind. Pharm. 1990. V. 16. №5. P. 837—854.

174. Membrane cholesterol and cell fusion of hen and guinea-pig erythrocytes / M.J.Hope, K.R.Bruckdorfer, C.A.Hart, J.A. Lucy // Biochem.J. 1977. -N 166.-P. 255 -267.

175. Modification of noradrenergic hypothalamic system in rat injected with phosphatidylserine liposomes / G.Teffano, A.Leon. S.Mazzari et al. // Life Sci.(Oxford). 1978. - N 23. - P. 1093 - 1102.

176. Morley C.J., Bangman A.D., Johnson P. Physical and physiological properties of dry lung surfactant // Nature. N 271. - P. 162 - 163.

177. Neerunjun E.D., Gregoriadis G. Tumor repression with liposome-entrapped asparaginase: some immunological advantages // Biochim.Soc.Trans. 1976. -V.4, N 1. — P. 133 - 134.

178. New aspects of liposomes / D.A.Tyrrell, T.D.Heathh, C.M.Colley, B.E.Ryman // Biochim.Biophys.Acta. 1976. - V.457, N 3/4. - P. 259 - 302.

179. Nordlund J.R., Schmidt C.F., Thompson Т.Е. Transbilayer distribution in small unilamellar phosphatidylglycerolphosphatidylcholine vesicles // Biochemistry. 1981. -N 20. P. 6415 - 6420.

180. Olson F., Hunt C.A., Szoka F.C. Preparation of liposomes of defined size distribution by extrusions through polycarbonate membranes // Biochim. Bio-phys. Acta. 1979.-N 557.-P. 9-23.

181. Oussoren C., Storm G. Role of macrophages in the localization of liposomes in lymphonodi after subcutaneous administration // Int.J.Pharm. 1999. -V.183,N l.-P. 37-41.

182. Pagano R.E., Takechi M. Adhesion of phospholipid vesicles to Chinese hamster fibroblasts // J.Cell.Biol. 1977. -N 17. - P. 435 - 468.

183. Pagano R.E., Huang L. Interaction of phospholipids vesicles with cultured mammalian cells //J.Cell.Biol. 1975. -N 74. - P. 49 - 52.

184. Pagano R.E., Weinnstein J.N. Interaction of artificial lipid vesicles with mammalian cells // Annu.Rev.Biophys.Bioeng. 1978. - N 17. - P. 435 - 468.

185. Papahadjopoulos D., Watkins J.C. Phospholipid model membranes. II. Permeability properties of hydrated liquid crystal // Biochim.Biophys.Acta. -1967.-N 135.-P. 639-652.

186. Papahadjopoulos D., Cowden M., Kimelberg H.K. Role of cholesterol in membranes. Effect on phospholipid-protein interactions, membrane permeability and enzyme activity // Biochim.Biophys.Acta. 1973. N 330. - P. 8 -26.

187. Papahadjopoulos D., Poste G., Mayhew E. Cellular uptake of cyclic AMP captured withing phospholipids vesicles and effect on cellgrowth behaviour // Biochim.Biophys.Acta. 1974. - V.363, N 3. - P. 404 - 418.

188. Papahadjopoulos D., Vali W.J., Newton C. Studies of membrane fusion. III. The role of calcium-induced phase changes // Biochim.Biophys.Acta. 1977. -N 465.-P. 579 - 598.

189. Papahadjopoulos D., Vali W.J. Incorporation of macromolecules within large unilamellar vesicles // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1978. - N 308. - P. 259 -267.

190. Patel H.M., Ryman B.E. Oral administration of insulin by encapsulation within liposomes // FEBS Lett. 1976. - N 2. - P. 60 - 63.

191. Pica U. Liposomes with a large trapping capability prepared by freezing // Arch.Biochim.Biophys. 1981. - N 212. - P. 186- 194.

192. Poole A.R., Howell J.T., Lucy J.A. Lysolecithin and cell // Nature. 1970. -V.227,N 5260.-P. 810-814.

193. Possible tumor localization ofTc.(99) m-labelled liposomes: effects of lipid composition, charge and liposome size / V.J.Richardson, K.Jeysingh, B.E. Rymman et al. // J.Nucl.Med. 1978. -N 5. - P. 118 - 123.

194. Poste J., Papahadjopoulos D. Lipid vesicles as carriers for introducing for materials into cultured cells: influence of vesicle lipid composition on mechanism^) of vesicle incorporation into cells // Proc.Nat. Acad.Sci.USA. 1976. -N73.-P. 1603 - 1607.

195. Potencial applications of liposomes to therapy / B.Ryman, R.S.Jewkes, K.Jeyasingh et al. // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1978. -N 308. - P. 281 - 307.

196. Preparation and prolonged tissue retention of liposome-encapsulated chelating agents / Y.E.Rahman, M.W.Rosenthal, E.A.Cerny et al. // J.Lab.Clin.Med. 1974.-N83.-P. 640-647.

197. Preparation of liposomes by reverse-phase evaporation using alternative organic solvents / R.Cortesi, E.Esposito, S.Gambarin, P.Telloli et al. // J.microencapsul. 1999. - V. 16, N 2. - P. 251 - 256.

198. Rachman Y.E., Wright B.J. Liposomes containing chelating agents. Cellular penetration and possible mechanism of metal removal // J.Cell.Biol. — 1975. — N65.-P. 112- 115.

199. Redistribution and altered excretion of digoxin in rats receiving digoxin antibodies incorporated in liposomes / C.A.Campbell, N.G.Harding, B.E.Ryman et al. // Eur.J.Biochem. 1980. - N 109. - P. 87 - 92.

200. Richardson V.J. Liposomes in antimicrobial chemotherapy // J. Antimicrobial. Chemother. 1983. - V. 12, N 6. - P. 532 - 564.

201. Ryman B.E., Tyrrell D.A. Liposome-bags of potencial // Assays in biochemistry. 1980. - N 16. - P. 49 - 98.

202. Role of lyposomal type and route of administration in the antitumor activity of liposome entrapped I-13-D-arabinofuranosyl cytosine against mouse L-1210 leukemia / Y.M.Rustum, D.Chandracant, E.Mayhew et al. // Cancer Res. -1979.-N39.-P. 1390- 1395.

203. Saba T.M. Physiology and physiopathology of reticuloendothelial system // Arch.Intern.Med. 1970.-N 126.-P. 1031 - 1036.

204. Sauders L., Perrin J., Gammack D. Ultrasonic irradiation of some phospholipid sols // J.Pharm.Pharmacol. 1962. - N 14. - P. 567 - 572.

205. Scherphof G., Damen J., Hoextra D. Interactions of liposomes with plasma proteins and components of the immune system // C.J.Knight. Research monographs in cell and tissue physiology. 1981. - P. 299 - 323.

206. Schieren H., Rudolph S., Fincelstein M. Comparison of large unilamellar vesicles prepared by a petroleum ether vaporization method with multilamellar vesicles // Biochim.Biophys.Acta. 1979. -N 572. - P. 137 - 153.

207. Schffman F.J., Klein J. Rapid induction of amphotericin В sensitivity in LI210 leukemia cells by liposomes containing ergosterol // Nature. 1977. -V.269, N 5623. - P. 65 - 66.

208. Shaw J.H., Knight C.G., Dingle J.T. Liposomal retention of a modified antiinflammatory steroid // Biochem.J. 1976. - N 158. - P. 473 - 476.

209. Shinozawa S., Araki Y., Oda T. Antitumor effect of neocarcinostatin entrapped in liposomes // Gan.Jap.J.Cancer Res. N 71. - P. 107 - 111.

210. Silverstein S.C., Steinman R.M., Cohn Z.A. Endocytois // Annu. Rev. Bio-chem. 1977. - N 46. - P. 669 - 674.

211. Sporozoite-induced malaria: effects of glycolipids in liposomes / C.R.Alving, J.Schneide, G.M. Swarts, E.A.Steck // Science. 1979. - N 205. - P. 1142 -1144.

212. Stamp D., Juliano R.L. Factors affecting the encapsulation of drugs within liposomes // Can.J.Physiol.Pharmacol. 1979. - N 57. - P. 535 - 539.

213. Steger L.D., Densic R.J. Enzyme therapy. VI. Comparative in vivo fates and effects on lysosomal integrity of enzyme entrapped in negatively and positively charged liposomes // Biochim.Biophys.Acta. 1977. - V.464, N 3. - P. 530 - 546.

214. Studies on membrane fusion. Introduction of fusion in pure phospholipids membranes by calcium ions and other divalent metal / D.Papahadjopoulos, W.J.Vail, W.A.Pangborn, G.Poste // Biochim.Biophys.Acta. 1976. - N 448. -P. 265 -283.

215. Surolia A., Bachhawat B.K. Monosialoganglioside liposome-entrapped enzyme uptake by hepatic cells // Biochim.Biophys.Acta. 1977. - V.497, N 3. -P. 760 - 765.

216. Szjka F., Papahandjopoulos D. Procedure for preparation of liposomes with large internal space and high capture by reverse-phase evaporation // Proc.Nat.Sci.USA. 1978. - V.75, N 9. - P. 4194 - 4198.

217. Therapy of leishmaniasis: superior efficacies of liposome-encapsulated drugs / C.R.Alving, E.A.Steck, W.I.Chapman et al. // Proc.Nat.Acad.Sci.USA. -1978.-N75.-P. 2959.

218. Transbilayer distribution of phosphatidyl-ethanolamine in large and small unilamellar vesicles / J.R.Nordlung, C.F.Schmidt, Dicken et al. // Biochemistry. 1981.-N 20.-P. 3237-3241.

219. Treatment of Gaucher's disease with liposome-entrapped glucocerebroside: fi-glucosidase / P.E.Belchetz, J.P.Braidman, J.C.Crawlley et al. // Lancet. -1971.-N l.-P. 116- 117.

220. Use of liposomes in treating type II glycogenosis / D.A.Tyrrel, B.E.Ryman, B.R.Keeton et al. // Brit.Med.J. 1976. -N 2. - P. 88 - 92.

221. Use of lipid vesicles as carriers to introduce actinomycin D into resistant tumor cells / D.Papahadjopoulos, G.Poste, W.J.Vail et al. // Cancer Res. 1976. - V.36, N 9. - P. 2989-2994.

222. Venkatasubramhian K., Vieth W., Bernath F. Use of collagen immobilized enzymes in blood treatment // Enzyme. 1974. - N 2. - P. 439 - 445.

223. Vesicle interaction with polyamidoacids and antibody: in vivo and in vitro studies / J.K.Dunnick, J.R.McDougall, S.Aragon et al. // J.Neurol.Med. 1975. -N 16.-P. 483 -487.

224. Vesicles of variable diameter prepared by a modified injection method / J.M.H. Kremer, M.W.J.Esker, C.Pathmamanoharan et al. // Biochemistry. -1977.-N 16.-P. 3933 3935.

225. Wursh P. Immobilization of human intestinal mucose enzymes on sepharose // Analyt.Biochem. 1977. - N 77. - P. 265 - 273.

226. Zumbuehl O., Weder M.G. Liposomes of controllable size in the range of 40 to 80 nm by defined dialysis of lipid/detergent mixed micelles // Biochim.Biophys.Acta. 1981. - N 640. - P. 252 - 262.