Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни

Алиева, Айзанат Кадыровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни
ВАК РФ 03.02.02, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни"

На правах рукописи

АЛИЕВА Айзанат Кадыровна

ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БИРНАВИРУСА ПТИЦ И РАЗРАБОТКА СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИОННОЙ БУРСАЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ

03.02.02 - вирусология 03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

2 2 ДЕК 2011

Санкт-Петербург 2011

005005995

Работа выполнена в лаборатории препаратов, применяемых в птицеводстве, Федерального Государственного Учреждения «Всероссийский Государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ») и на базе Общества с ограниченной ответственностью «Биовет» (ООО «Биовет», Санкт-Петербург)

Научные консультанты: доктор биологических наук,

профессор, академик РАМН Киселев Олег Иванович доктор биологических наук, профессор Смоленский Владимир Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Харченко Евгений Петрович доктор медицинских наук Зазимко Любовь Александровна доктор биологических наук Соловьев Борис Васильевич

Ведущая организация: Федеральное государственное

образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина» (Москва)

Защита состоится « 24 » января 2012 г. в_часов на заседании диссертационного совета Д 001.043.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт гриппа» Минздравсоцраз-вития РФ (197376, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 15/17)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального государственного бюджетного учреждения «Научно-исследовательский институт гриппа» Минздравсоцразвития РФ

Автореферат разослан «Об » ^сА-^/и^- 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук

В.Ф. Суховецкая

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Успешному развитию промышленного птицеводства во многом препятствуют различные инфекционные болезни, которые наносят большой экономический ущерб, обуславливая снижение продуктивности птиц и низкую рентабельность отрасли (Фисинин В.И., 2010). В начале 60-х годов прошлого столетия к их числу добавилась новая нозологическая единица -инфекционная бурсальная болезнь (ИББ), которая впервые была описана в США (Cosgrove A.S., 1962). ИББ широко распространена во всем мире и представляет серьезную угрозу развитию отрасли (Смоленский В.И., 1999; Борисов A.B., 2000; Бирман Б.Я., 2003; Бессарабов Б.Ф. с соавт., 2008; Lasher H.N., Shane S.M., 1994).

Вакцинопрофилактика в странах с развитым промышленным птицеводством считается главным способом защиты поголовья от вируса ИББ (Алиев A.C., 1991; Соловьев Б.В., 2001; Смоленский В.И. с соавт., 2011; Winterfield R.W., 1969; CursiefsenD. et al., 1979). За истекшее десятилетие был создан широкий спектр отечественных и зарубежных живых и инактивированных вакцин против ИББ, но, как показывает практика, в крупных птицеводческих хозяйствах среди вакцинированной птицы наблюдаются эпизоотические вспышки ИББ. Одна из причин проявления этих эпизоотии может быть связана со структурными изменениями в геноме вируса ИББ. Так, в конце 80-х годов в вакцинированных стадах птицы в США появились антигенные варианты, а в России и в Европе - антигенно сходные с «классическими» высоковирулентные штаммы вируса ИББ (ввВИББ), которые очень быстро распространились по всему миру. В отличие от ранее известных штаммов, в том числе и от новых американских антигенных вариантов, штаммы ввВИББ могут вызывать до 90% смертности в стадах яичных кроссов птицы (Алиев A.C., 1993; BoxP.G., 1989; Chettle N.J. et al., 1989; Van den Berg T.P. et al., 1991).

и инактивированной, может в значительной степени зависеть от соответствия антигенной специфичности избранного штамма в отношении полевых изолятов вируса ИББ, циркулирующих в птицеводческих хозяйствах.

В России для профилактики ИББ используются культуральные вакцины из слабореактогенных штаммов вируса ИББ (Д-78, ВНИВИП, Бюр S-706, Winterfield 25-12, Био-92 и другие). Известно, что иммуногенная активность культуральных вакцин против ИББ значительно уступает эмбриональным вариантам вакцинного препарата (Норкина С.Н., 2002; Hassan M.K. et al., 1996). Отечественная живая эмбриональная вакцина из штамма БГ обладает остаточной реактогенностью, проявляющейся атрофией фабрициевой сумки, поражением почек и отрицательным влиянием на рост и развитие птицы (Жбано-ва С.Ю., 2005).

Существует широкий спектр поливалентных инактивированных вакцин отечественных и зарубежных производителей для профилактики инфекционных болезней птиц с различными комбинациями входящих в их состав антигенов, в том числе вируса ИББ. Поливалентные вакцины применяют на родительском поголовье для обеспечения пассивного иммунитета у потомства и не предназначены для иммунизации цыплят раннего возраста (Смоленский В.И., 1999; Борисов В.А., 2007). Технология изготовления моновалентной инактивированной вакцины «Авикрон» против ИББ основана на использовании го-могената фабрициевых сумок цыплят, зараженных вирулентным штаммом соответствующего вируса. Низкая технологичность производства вакцины (использование вирулентного вируса, содержание и убой большого количества зараженных вирусом ИББ птиц), потенциальная опасность предприятий-изготовителей как источников эпизоотии являются причинами ограничения сферы применения вакцины и значительно усложняют (технологически и экономически) выпуск биопрепарата в промышленных масштабах (Гусев С.А., 2000).

Очевидно, что на современном этапе развития промышленное птицеводство России нуждается в более совершенных вакцинах против ИББ.

Мировой опыт промышленного птицеводства показал, что для профилактики ИББ нужны живые и инактивированные вакцины. Целесообразность использования живой и инактивированной вакцин или их комбинации определяется комплексом факторов, требующих специального изучения. Детального экспериментального изучения требует также оценка возможности комбинирования живой вакцины против ИББ с вакцинами против других распространенных болезней птицы, в частности, против болезни Марека.

Таким образом создание, усовершенствование и оценка эффективности средств активной специфической профилактики ИББ является актуальной задачей для развития отечественного птицеводства.

Цель работы - разработка и внедрение в ветеринарную практику новых эффективных средств активной специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни птиц.

Задачи исследования

1. Выяснение иммунобиологических свойств отечественных изолятов вируса ИББ, отбор штаммов со стабильными антигенными и другими свойствами для использования их в качестве производственных.

2. Разработка технологии культивирования производственных штаммов вируса ИББ и режима инактивации вируса ИББ.

3. Подбор адъювантов для изготовления инактивированных вакцин против ИББ.

4. Разработка технологии приготовления вакцинных препаратов против ИББ и методов их контроля.

5. Проведение испытаний и оценка эффективности разработанных препаратов в экспериментальных и производственных условиях.

6. Освоение промышленного производства живой и инактивированной вакцин против ИББ и внедрение их в ветеринарную практику.

7. Оценка эффективности ассоциированной вакцинации птиц против ИББ и болезни Марека (БМ).

8. Разработка и проверка в производственных условиях схемы вакцинопрофи-лактики ИББ, оценка эффективности средств и методов борьбы с ИББ в птицеводческих хозяйствах России.

9. Подготовка и утверждение нормативно-технической документации на разработанные биопрепараты.

Научная новизна. Изучены иммунобиологические свойства полевых изолятов и вакцинных штаммов вируса ИББ, отобраны штаммы, обладающие стабильными антигенными свойствами для использования их в качестве производственных.

Выбраны в качестве вакцинных производственные штаммы 52/70-М и КБК вируса ИББ, отработана технология их культивирования в развивающихся эмбрионах СПФ-кур. Штамм КБК паспортизирован и депонирован год № 117-ДЕП 15.10.2001 г. во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, в качестве производственного. Разработаны производственные технологии изготовления живой и инактивированной вакцин ИББ на основе отобранных штаммов, оформлены инструкции по их применению. Освоено промышленное производство живой и инактивированной вакцин против ИББ, которые успешно внедрены в ветеринарную практику. Научная новизна исследований подтверждена патентом Российской Федерации на изобретение №2205021 «Вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц», 27.05.2003 г.

Теоретическая значимость проведенных исследований. Теоретически обоснована необходимость использования иммунобиологических и молекуляр-но-генетических подходов для отбора вируса при получении вакцинного штамма, что позволяет гарантировать выпуск качественных и безопасных вакцин. Полученные новые данные о культуральных, иммунобиологических и генетических свойствах штаммов семейства бирнавирусов расширяют границы фундаментальных знаний о вирусах этой систематической группы и возможностях их использования в различных биотехнологических процессах.

Практическая значимость исследований. Разработаны технологии изготовления и инструкции по применению живой и эмульсионной инактивиро-ванной вакцин против ИББ, обоснована эффективность их практического применения. Внедрена в ветеринарную практику и широко используется в РФ для специфической профилактики ИББ комплексная схема эффективной вакцино-профилактики ИББ.

Результаты научных исследований вошли в нижеперечисленные нормативные документы (НД), одобренные ученым советом ФГУ «ВГНКИ», утвержденные Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России и Россельхоз-надзором МСХ РФ:

1. НД на «Вакцину против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК» (СТО 56204140-0001-2007), 01.02.2008 г.;

2. НД «Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК (вместо «Наставления по применению...»), 03.03.2008 г.;

3. НД на «Вакцину против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкую инактивированную» (ТУ 9384-001-56204140-03) от 05.02.2004 г., без ограничения срока действия;

4. «Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкой инактивированной» (вместо «Наставления по применению...»), 04.06.2009 г.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Изоляты вируса ИББ, выделенные в птицеводческих хозяйствах РФ, анти-генно идентичны прототипному штамму 52/70-М, а их молекулярно-генетическое различие не превышает 2%.

2. Аттенуированный штамм КБК вируса ИББ, селекционированный методом длительных пассажей на эмбрионах СПФ-кур, обладает свойствами, позволяющими использовать его для производства живой вакцины, а именно: авиру-лентностью для молодняка птиц, иммуногенностью и генетической стабильностью.

3. По разработанной технологии промышленного производства живой вакцины против ИББ из штамма КБК осуществлено изготовление и испытание препарата. Вакцина из штамма КБК является безвредной и эффективной при разных способах ее введения птице.

4. Применение новой живой вакцины может быть также эффективным при со-четанной вакцинации слабоиммунного молодняка птицы против ИББ и болезни Марека.

5. Инактивированная эмбриональная вакцина на основе вирулентного штамма 52/70-М вируса ИББ превосходит кулыуральную инактивированную вакцину на основе вакцинных штаммов по антигенности, протективности и технологичности производства.

6. В ряде случаев показана целесообразность одновременного применения живой и инактивированной вакцин против ИББ. Программу вакцинопрофилак-тики ИББ в промышленном птицеводстве целесообразно составлять конкретно для каждого хозяйства с учетом эпизоотической ситуации и особенностей технологии производства.

Внедрение в практику. Промышленное производство живой и инактивированной вакцин против ИББ по технологии, разработанной автором, организовано на базе ООО «Биовет». Предприятием произведено и выпущено 126 млн доз живой и 12,6 млн доз инактивированной вакцин высокого качества. При непосредственном участии автора на ФГУП «Курская биофабрика» внедрена технология производства живой вакцины из штамма КБК против ИББ. Производство осуществляется в соответствии с НД на вакцину (СТО 56204140-00012007), 01.02.2008 г.

Разработанные вакцинные препараты используются с целью профилактики ИББ в птицеводческих предприятиях Российской Федерации.

токол № 1 методического совета Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины от 19.09.06 г.).

2003); научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ (Санкт-Петербург, 2004, 2008, 2010); на международной юбилейной научно-практической конференции «Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве» (Санкт-Петербург-Ломоносов,

2004); на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы производства и применения биологических препаратов» (Алматы, 2004); на I международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2005); на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики болезней животных (Алматы, 2005); на международном научно-практическом конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Москва, 2006); на VII международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2011); на заседаниях специальной комиссии по проблемам вирусных болезней методического и Ученого Советов ФГУ «ВГНКИ» (Москва, 2001-2004), а также на межлабораторном совещании ФГУ «ВГНКИ» (Москва, 2011) и на заседании ученого совета ФГБУ НИИ гриппа (Санкт-Петербург, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 39 научных работ, в том числе 16 работ в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

результатов. Автор лично принимала участие в апробации и промышленном производстве разработанных препаратов, в подготовке публикаций.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 316 страницах машинописного текста и содержит традиционные разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований и их обсуждение, выводы, практические рекомендации, список литературы и приложения. Работа иллюстрирована 57 таблицами и 5 рисунками. Список литературы включает 383 источника, в том числе 272 зарубежных. В приложении представлены копии документов, подтверждающих достоверность результатов работы, ее научную и практическую значимость.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. Работа выполнена в 1994-2010 гг. в лаборатории препаратов, применяемых в птицеводстве, Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) и на базе ООО «Биовет». В связи с многоплановостью исследований в диссертации нашли отражение результаты работ, проведенных совместно с сотрудниками ГНУ ВНИВИП, а также с ветеринарными специалистами практических лабораторий и птицеводческих предприятий.

Вирусные штаммы и препараты. В работе использовали эталонный штамм вируса ИББ - 52/70-М, вакцинные штаммы - Д-78, ST, Си-1М, КБК и ВНИВИП, а также эпизоотические изоляты: Синявинский, Бендерский, Ду-бовляны, Таллинский, Раздельнянский; вакцины против ньюкаслской болезни и болезни Марека.

Культивирование вируса ИББ осуществляли в первичной культуре ФЭК и ПЭК и перевиваемых культурах клеток Vero и BGM-70; в 10-11-дневных развивающихся эмбрионах СПФ-кур и зараженных цыплятах 35-40-суточного возраста.

Определение биологической активности вируса ИББ. Биологическую активность вируса ИББ определяли путем титрования на первичных и перевиваемых культурах клеток, 10-11-суточных эмбрионах СПФ-кур.

Оборудование. Электронный микроскоп JEM-100CXI; световые микроскопы «ЛОМО»; микроцентрифуга «Eppendorf» (Германия), модель 5414; центрифуга «Beckman», модель J2-21; высокоскоростная центрифуга «Sorvall» (США), модель OTD65B; центрифуга MLW К 70-D (Германия); бытовые холодильники ОКА 6М 206 (Россия) (ГОСТ 16317-87); термостат электрический ЗЦ-1125 (Украина) (ТУ 42-1878-60); спектрофотометр «Shimadzu UV-260» (Япония); микроизмельчитель тканей РТ-2 (ТУ 64-1-1505-72); коллоидная мельница «Probst Class G.m.b.h.» (Германия), модель JV-10; гомогенизатор Universal laboratory AID type MPW-309 (Польша); вискозиметр капиллярный ВПЖ-2 (ГОСТ 10028-62) (Россия).

Животные. Для изучения биологических, антигенных и иммуногенных свойств вакцин использовали цыплят СПФ-кур, а также естественно восприимчивую к вирусу ИББ птицу разных возрастных групп и пород из благополучных по ИББ и другим инфекционным заболеваниям хозяйств.

Серологические методы. Наличие специфических антител в сыворотках крови птицы определяли в реакциях нейтрализации (РН), диффузионной преципитации (РДП), торможения гемагглютинации (РТГА), также с использованием коммерческих наборов ИФА. Сыворотки тестировали в рекомендованных рабочих разведениях в соответствии с наставлениями по применению имеющихся коммерческих наборов.

Очистка вируса. Очистку вируссодержащих суспензий от балластных белков проводили протаминсульфатом (0,1-1,0%), хлороформом (0,5-2,0%) и фреоном-113 (0,5-2,0%).

Инактивация вирусного антигена. Для отработки режимов инактивации вируса ИББ использовали формальдегид, димер этиленимина и ß-пропио-лактон.

Приготовление инактивированной вакцины. В качестве адъюванта при изготовлении экспериментальных образцов и производственных серий вакцины использовали гидроокись алюминия (ГОА), аэросил марки А-300 и минеральное масло Маркол-52. Для изготовления экспериментальных серий вакцины готовили водную фазу, состоящую из взвеси очищенного антигена в физрастворе (29%). При постоянном перемешивании в взвесь вируса добавляли гидрофильный эмульгатор - твин 80 (1%). Полученную смесь гомогенизировали в течение 30 мин. Затем готовили масляную среду путем смешивания минерального масла - Маркол 52 (67%) и липофильного эмульгатора - арлацел (3%) с последующей гомогенизацией в течение 30 мин. При получении готовой вакцины к водной фазе при постоянном перемешивании вносили масляную среду в соотношении 30:70. Смесь гомогенизировали в течение 1 ч, расфасовывали во флаконы и этикетировали.

Эффективность разработанных препаратов изучали в экспериментальных и производственных условиях путем сравнения основных эпизоотоло-гических показателей (заболеваемость, смертность, сохранность цыплят и др.) в опытных и контрольных группах. Напряженность иммунитета оценивали по уровню специфических антител в сыворотках крови привитой птицы.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась методом математической статистики, предложенным Г.Ф. Лакиным (1990), с помощью программы OpenOffice Cale. Оценку статистической достоверности различий проводили с использованием теста t-распределения Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Сравнительное изучение иммунобиологических свойств изолятов и эталонного штамма вируса ИББ

До 1978 г. было принято считать, что вирус ИББ не имеет серологических вариантов. В связи с появлением высоковирулентных штаммов вируса ИББ в Европе и России и данных литературы об их антигенной неоднородности (Борисов A.B., 1995; Щербакова Л.О. с соавт., 2002), возникла необходимость

в изучении антигенной специфичности вновь выделенных изолятов вируса в сравнении с ранее известным штаммом возбудителя ИББ, имеющимся в нашей коллекции.

Для выяснения данного вопроса использовали эталонный штамм вируса ИББ - 52/70-М и эпизоотические штаммы: № 1 - Синявинский; № 2 - Бендер-ский; № 3 - Дубовляны; № 4 - Таллинский; № 5 - Раздельнянский.

Антигенное родство штаммов вируса ИББ оценивали серологически путем титрования штаммоспецифических сывороток в РДП с каждым исследуемым антигеном и ш vivo перекрестным заражением привитых цыплят разными штаммами вируса ИББ. Исследования показали, что эпизоотические и эталонный штаммы вируса, использованные в работе, обладают одинаковой преципи-тогенной активностью со всеми штаммоспецифическими сыворотками и образуют одинаковые линии преципитации. Перекрестно-реагирующая активность сывороточных антител в РДП была почти одинакова в отношении гомо- и гете-рологичных антигенов, что свидетельствует о наличии общих вирусоспецифи-ческих антигенных детерминант.

Оценка резистентности птиц к заражению разрешающей дозой вируса ИББ показала, что процент защищенных птиц по группам колеблется в пределах 80-100%, независимо от происхождения штамма вируса, используемого для инфицирования, и согласуются с показателями серологических исследований, проведенных на 28-е сутки после введения антигенов. Уровень антител в РДП и ИФА составил 2,5-3,0 log2 и 3560-4250 соответственно.

При расшифровке в ПЦР структуры гена VP2 выделенных и известных штаммов вируса выявлено, что все они могут быть объединены в одну группу, поскольку отличия между ними не превышали 2%. Это позволило сделать предположение о том, что эти штаммы имеют общее происхождение и обладают родством с известным штаммом вируса ИББ, а индивидуальные иммунобиологические характеристики связаны с разной по длительности пассажной историей и технологическими параметрами их культивирования.

Полученные данные дают основания считать, что в птицехозяйствах стран СНГ циркулируют эпизоотические штаммы вируса ИББ, относящиеся к одному генотипу. Гибель цыплят в контрольной группе при заражении эпизоотическими штаммами была выше, чем в группе птиц, зараженных эталонным штаммом 52/70-М, что свидетельствует о высокой степени патогенности вновь выявленных изолятов по сравнению с ранее выделенным.

2. Оценка иммунобиологических свойств разных штаммов вируса ИББ, отобранных в качестве вакцинных

Предварительно штаммы вируса ИББ были накоплены в соответствующей системе культивирования. После проведения необходимого контроля (стерильность, биологическая активность) и последующей инактивации димером этиленимина эти штаммы были использованы для получения опытных серий препарата. Для этого к инактивированной суспензии каждого вируса добавляли в качестве адъюванта 3% ГОА до конечной концентрации 1,5%.

Опытные образцы вакцин вводили однократно внутримышечно в объеме 0,5 мл цыплятам 21-суточного возраста, серонегативным к вирусу ИББ. Об антигенной активности штаммов судили по уровню накопления специфических антител в РДП, ИФА через 28 сут. после их введения, а протективная активность оценивалась по результатам заражения привитых и интактных цыплят вирулентным штаммом 52/70-М (табл. 1).

Таблица 1

Сравнительная оценка антигенной активности вакцинных штаммов вируса ИББ

Штамм Субстрат для получения вируса Доза вируса в ^ ЭИД50/мл или ТЦДзо/мл Титр антител после иммунизации % зашиты

РДП ИФА

КБК Эмбрионы 6,5 1,6±0,24 2370±0,35 90

КБК Культура ФЭК 7,0 1,4±0,39 2120±0,22 85

КБК Культура ВСМ-70 7,5 1,3±0,13 1940±0,25 80

ВНИВИП Культура ФЭК 7,0 1,1±0,18 1770±0,33 70

ВНИВИП Культура ВСМ-70 7,5 1,0±0,14 1250±0Д4 75

52/70-М Эмбрионы 6,5 3,8±0,53 5650±0,32 100

52/70-М Цыплята 6,0 4,0 ±0,54 6340±0,18 100

Введение инактивированной вакцины против ИББ, приготовленной из 10%-й суспензии фабрициевых сумок инфицированных цыплят, имел самые высокие показатели антигенной и протективной активности при испытаниях в условиях острого опыта. Показатели иммунобиологических свойств вакцины на основе суспензии гомогената тушек, экстраэмбриональной жидкости и хо-рион-аллантоисных оболочек эмбрионов СПФ-кур, инфицированных штаммом 52/70-М, также оказались на достаточном уровне (3,8±0,53 1о«2 в РДП и 5650±0,32 в ИФА при 100%-й эффективности иммунизации), тогда как образцы инактивированной вакцины из эмбрионального и культурального вирусного сырья, полученного при заражении штаммами ВНИВИП и КБК, не обеспечивали выработку достаточно активного иммунитета и, как следствие, защиту цыплят от заражения патогенным вирусом.

3. Разработка технологии производства живой вакцины из штамма КБК против ИББ

Известно, что при производстве живых вакцин используются строго атге-нуированные штаммы вируса, а в технологии инактивированных - патогенные штаммы возбудителя. Руководствуясь данным положением дальнейшую работу по разработке живой вакцины проводили со штаммом КБК, инактивированной - с патогенным штаммом 52/70-М.

Вакцинный штамм КБК получен путем 50-ти последовательных пассажей на эмбрионах СПФ-кур эпизоотического штамма, выделенного от больных цыплят-бройлеров, с последующим получением крупнобляшечного клона вируса методом негативных колоний в культуре клеток ВОМ-70.

В результате исследований был выбран оптимальный режим крупномасштабного культивирования вакцинного штамма КБК вируса ИББ. Технология включает получение полуфабриката вирусной биомассы путем заражения ХАО эмбрионов СПФ-кур в дозе 4,5 1ц ЭИД50/мл вируса и культивирование в течение 72-96 ч при температуре 37°С. С использованием указанного режима накопление вируса достигало титра 6,5 ^ ЭИДз^мл.

Полученные в ходе дальнейших экспериментов данные свидетельствуют о том, что вакцинный штамм КБК свободен от контаминантов, биологически активен (титр вируса 6,5 ^ ЭИД50/мл), безвреден для цыплят, обладает выраженными стабильными протективными свойствами и не вызывает иммуносу-прессию у вакцинированной птицы, что отвечает требованиям Международного эпизоотического бюро (МЭБ), предъявляемым к вакцинным штаммам для производства живых вакцин против ИББ. Иммуногенная эффективность штамма КБК в лабораторных опытах составила 100%.

На основании результатов лабораторных исследований, специфическую профилактику ИББ вакциной из штамма КБК при невысоком уровне пассивных антител рекомендуется проводить однократной подкожной прививкой с суточного возраста. Молодняк птицы, полученный от привитых родителей, следует вакцинировать двукратно не ранее 10-14 сут. путем перорального, интраназаль-ного или окулярного введения вакцины. Вторую вакцинацию рекомендуется проводить не ранее 10 сут. после первой. При подкожном применении вакцины формируется напряженный и длительный иммунитет (6 мес., срок наблюдения) со 100%-й защитой птицы при заражении вирулентным вирусом ИББ.

После наработки вирусного сырья его использовали для составления живой вакцины. В качестве защитной среды при изготовлении живой вакцины против ИББ использовали среды разного состава, из которых наиболее эффективной оказалась среда СПЛФ, состоящая из лактозы, гидролизата белка и же-латозы. Количество защитной среды для лиофилизации составляло 400 мл на 1000 мл вирусного сырья. Установлено, что инфекционный титр вируса ИББ, высушенного в среде с СПЛФ, после 12-месячного хранения при -10°С снизился на 0,3 ЭИДзо/мл, а при +4°С - на 0,8 ^ ЭИД50/мл. Защитные свойства других сред при указанных режимах температур хранения были несколько хуже.

В лабораторных условиях проведены исследования для выяснения влияния на эффективность вакцинации против ИББ в условиях сочетанной вакцинации суточных цыплят живыми вакцинами против ИББ и болезни Марека (БМ). Для этого были сформированы три группы суточных цыплят по 50 голов. Цыплят

первой группы вакцинировали против ИББ и БМ подкожно. Цыплят второй группы вакцинировали только против ИББ. Третью группу не вакцинировали, она являлась контрольной. Уровень иммунитета к вирусу ИББ оценивали серологически в РДП и ИФА, а также по результатам контрольного заражения.

Из данных табл. 2 видно, что невосприимчивость цыплят к заражению вирусом ИББ после одновременной вакцинации их против ИББ и БМ полностью совпадает с резистентностью цыплят к вирусу ИББ у привитых моновакциной из штамма КБК. Устойчивость к контрольному заражению у цыплят 1-й и 2-й групп наступала через 14 сут. после вакцинации и сохранялась до 60 сут. (срок наблюдения).

Таким образом, при одновременной вакцинации цыплят против БМ и ИББ реактогенность вакцин не изменялась, а сроки развития иммунитета соответствовали таковым при раздельной иммунизации данными вакцинами. Способ одновременной вакцинации против БМ и ИББ включен в инструкцию по применению вакцины из штамма КБК, строго вписывается в существующую в промышленном птицеводстве схему иммунизации против болезни Марека и не требует дополнительных материальных затрат.

Таблица 2

Иммуногенная активность штамма КБК при ассоциированной вакцинации цыплят против ИББ и БМ

Сроки исследования (сут.) I группа II группа III группа

вг щ кцинированные ютив ИББ и БМ вакцинированные против ИББ контроль

РДП ИФА % защиты при биопробе РДП ИФА % защиты при биопробе РДП ИФА % защиты при биопробе

7 1,3 820 50 1,4 850 45 0 200 0

14 2,5 1080 90 2,6 1200 90 0 250 0

21 3,8 1350 100 3,4 1290 100 0 200 0

28 4,2 2110 100 3,8 2160 100 0 300 0

60 3,8 2400 100 3,5 2500 100 0 150 0

Для контроля живой вакцины против ИББ из штамма КБК были использованы традиционные параметры, применяющиеся при контроле живых вирусных вакцин: внешний вид, отсутствие контаминации вирусной, бактериальной и грибковой микрофлорой, массовая доля влаги (остаточная влажность), растворимость, безвредность, антигенная активность, биологическая активность.

Результаты контроля безвредности живой вакцины из штамма КБК показали, что введение вакцинного препарата СПФ-цыплятам 14-дневного возраста в дозе 3,5 ^ ЭИД50/мл не вызывает развития каких-либо клинических симптомов и патологоанатомических изменений, свойственных вирусу ИББ.

Контроль промышленных серий живой вакцины из штамма КБК на антигенную и протективную активность проводили на СПФ-цыплятах 14-суточного возраста. В сыворотках крови цыплят специфические антитела после 21 сут. с момента вакцинации обнаруживались в 100% случаях в РДП, а их титр в ИФА составлял не менее 2737±0,44. Протективная активность вакцины оценивалась через 21 сут. после иммунизации цыплят путем заражения патогенным штаммом 52/70-М вируса ИББ в дозе 3,0 ^ ИД50/мл. Все цыплята, иммунизированные живой вакциной в дозе 2,0 ^ ЭИД50/мл, на контрольное заражение не реагировали и имели 100%-ную защиту. В контрольной невакцинированной группе птица болела с типичной клинической картиной ИББ. Однако, учитывая, что для вакцинации цыплят с пассивным иммунитетом требуется некий «запас» вируса, в качестве иммунизирующей была выбрана доза 2,5 ^ ЭИД50/мл.

После успешного испытания образцов вакцины в лабораторных условиях дальнейшее изучение эффективности препарата проводили в условиях неблагополучных по ИББ птицехозяйств ряда регионов Российской Федерации (Воронежской, Новосибирской, Омской, Ростовской, Вологодской, Оренбургской, Псковской областей, Ставропольского и Красноярского краев).

С этой целью в течение ряда лет под нашим наблюдением находилось несколько крупных, неблагополучных по ИББ птицехозяйств, где применяли вакцину из штамма КБК. Применение живой вакцины на неблагополучной по ИББ Забродненской птицефабрике в Воронежской области показало, что вакцинация

цыплят способствует не только увеличению сохранности птицы в привитой вакциной из штамма КБК группе, но и позволяет получать более высокие привесы живой массы, снижает количество «гипотрофиков» и случаев колибакте-риоза.

Позитивные результаты по применению живой вакцины против ИББ также получены на неблагополучных по ИББ в период испытаний птицефабриках «Шекснинская» и «Череповецкая» Вологодской области. Вакцинацию птиц проводили подкожно в суточном возрасте.

На птицефабрике «Череповецкая» привили 150 350 цыплят-бройлеров. Оценку протективных свойств проводили по показателям общей сохранности (табл. 3).

Иммунизация цыплят вакциной из штамма КБК позволила увеличить их сохранность до 93,3-97,92%. Ранее на птицефабрике использовали вакцину из штамма БГ, сохранность птицы при этом по отдельным партиям колебалась в пределах 71-88%. Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности вакцины из штамма КБК и ее преимуществе перед аналогичным препаратом из штамма БГ.

Таблица 3

Результаты влияния вакцины из штамма КБК на сохранность птицы

№ корп. Кол-во цыплят Гибель цыплят Сохранность (%)

голов %

54 19 300 543 2,8 97,2

22 18 250 967 5,3 94,7

43 19 200 1045 5,4 94,6

41 19 000 869 4,6 95,4

35 18 200 978 5,4 94,6

21 18 500 1115 6,03 94,0

13 19 100 1165 6,1 93,9

12 18 800 1257 6,69 93,3

На птицефабрике «Шекснииская» однократно методом подкожной иммунизации были привиты 8 млн цыплят. Осложнений и появления клинических признаков после применения вакцины не наблюдали. При исследовании в ИФА сывороток крови птиц, отобранных через 25 суток после иммунизации, были выявлены антитела в титрах 1225-2750, что подтверждало выраженную антигенную активность препарата. Сохранность привитого птицепоголовья составляла 93-95%, что свидетельствует о высокой иммуногенности вакцины.

Высокая антигенная активность препарата была также подтверждена его применением на птицефабрике «Первомайская» Псковской области, где однократно иммунизировали 293 181 цыплят-бройлеров в сравнении с вакциной Винтерфильд, которую, согласно инструкции, применяли двукратно методом выпаивания (табл. 4). Протективные свойства препарата оценивали по сохранности поголовья и другим производственным показателям.

Полученные результаты свидетельствуют, что по всем производственным показателям вакцина из штамма КБК существенно превосходит (р < 0,05) вакцины из штамма Винтерфильд за счет увеличения сохранности на 10,5%, среднесуточного привеса на 10,5 г, сокращения сроков откорма на 3 сут. и снижения затрат корма на единицу привесов на 0,35 кг.

Таблица 4

Результаты сравнительных испытаний вакцин из штаммов КБК и Винтерфильд

Показатели Единица измерения Штамм КБК Штамм Винтерфильд

Принято на выращивание головы 81 495 78 184

Сохранность % 94,5 84

Срок выращивания сутки 45 48

Живая масса бройлеров граммы 1742 1350

Среднесуточный прирост граммы 39,5 29

Конверсия корма кормовые единицы 2,05 2,4

На ППЗ «Котляревский» вакциной из штамма КБК прививали 434 тыс. цыплят по двум схемам. В одной группе цыплят в количестве 120 тыс. вакцину вводили с питьевой водой двукратно в возрасте 8 и 18 сут., в другой - внутримышечно в суточном возрасте. Третья группа птиц в количестве 114 тыс. одновременно вакцинировалась против двух болезней - ИББ и БМ - в суточном возрасте.

Опыты показали, что, независимо от способа применения вакцины из штамма КБК, признаков, характерных для инфекционной бурсальной болезни, выявлено не было. При двукратной вакцинации методом выпаивания положительная реакция в РДП по разным партиям птицы составила от 80 до 92% в возрасте 35 дней. При однократном внутримышечном применении вакцины цыплята в суточном возрасте имели положительные результаты в РДП в 100% случаев уже в возрасте 25 дней, как и при одновременной вакцинации против ИББ и БМ.

Титры антител в ИФА также были одинаковы как при моновакцинации против ИББ, так и при одновременном методе иммунизации (среднегеометрический титр в ИФА - 2627, процент корреляции - 30-35).

То обстоятельство, что метод применения вакцины не оказал негативного влияния на уровень напряженности иммунитета против ньюкаслской болезни, является существенным показателем, подтверждающим отсутствие иммуносу-прессивного влияния на привитое поголовье. Титр антител в РЗГА к вирусу ньюкаслской болезни после однократной вакцинации через 15 дней составлял от 1:64 до 1:512.

Процент сохранности птицы подопытных групп за период наблюдения составил на ремонтном молодняке 97,1%, у цыплят-бройлеров - 96,4%, среднесуточный прирост массы тела составил 38,4-39,2 г.

На птицефабрике «Дон» Ростовской области после однократной иммунизации вакциной из штамма КБК 280,3 тыс. голов цыплят, размещенных в 4 корпусах, сохранность достигала 96-97%. До начала профилактики ИББ вакциной из штамма КБК показатели сохранности колебались в пределах 86-92%.

Многолетняя плановая иммунизация новым препаратом позволила не только сохранить благоприятную эпизоотическую ситуацию в хозяйстве, но и повысить показатели рентабельности за счет однократного применения препарата и более низкой его стоимости.

В ОПХ «Сибирский НИИ птицеводства» Омской области вакциной из штамма КБК было привито 5,5 млн голов цыплят. Все партии цыплят, поступавшие на выращивание, прививали орально методом выпаивания по схеме: первая вакцинация в 7-10-суточном возрасте, вторая - через 10 суток. Систематическое применение вакцины позволило не только предупредить возникновение острых вспышек ИББ в хозяйстве, но и улучшить производственные показатели. Так, за период вакцинации против ИББ сохранность птиц увеличилась на 11,7%. Среднесуточный привес молодняка увеличился на 5,6 г. Затраты корма на 1 ц прироста массы тела снизились на 0,5 кг.

На птицефабрике «Сибирская Губерния» Красноярского края вакциной из штамма КБК привито около 15 млн голов цыплят-бройлеров. После применения вакцины гибель цыплят сократилась с 7-8% до 1,0-1,5%; сохранность повысилась с 89,4 до 93,6%. Полученные результаты подтверждают представленные ранее экспериментальные данные о высоких протективных свойствах препарата.

В течение ряда лет вакцину из штамма КБК регулярно применяли на птицефабрике «Балахоновская» Ставропольского края взамен используемого ранее препарата из штамма БГ. При периодическом серологическом обследовании привитых партий птиц антитела в РДП выявляли в 100% случаях, сохранность поголовья при этом колебалась в пределах 94-95%.

Таким образом, результаты широких производственных испытаний, проведенных в различных регионах РФ показали, что вакцина из штамма КБК безвредна для цыплят суточного возраста при разных способах введения, она не вызывает клинически выраженных признаков и патологоанатомических изменений у подопытной птицы. Вакцина обладает выраженной антигенной активностью и индуцирует в организме иммунизированной птицы образование специфических антител. Изучение сроков формирования иммунитета вакциниро-

ванной птицы показало, что напряженный иммунный ответ отмечается на 2125 сут. после вакцинации и стабильно сохраняется на высоком уровне на весь восприимчивый период роста цыплят (до 120 сут.). Вакцина обладает выраженными протективными свойствами, создает более высокий уровень иммунитета по сравнению с другими препаратами и предохраняет привитую птицу в неблагополучных по ИББ хозяйствах, что характеризуется отсутствием у привитой птицы признаков заболевания.

4. Разработка технологии производства инактивированной вакцины против ИББ

Необходимость разработки эмульсионной инактивированной вакцины против ИББ связанна с появлением в птицепредриятиях РФ высоковирулентных штаммов и недостаточной безопасностью живых вакцинных препаратов для молодняка птицы.

Данная работа включала разработку технологии получения вирусного сырья, режимов его очистки и инактивации, эмульгирование инактивированно-го антигена и адъюванта, испытание изготовленных образцов вакцины в экспериментальных и производственных условиях, разработку методов контроля препарата и нормативной документации.

Вирулентный штамм 52/70-М вируса ИББ был проверен на инфекционную активность, стерильность, контаминацию посторонними микроорганизмами, антигенность и иммуногенность. Результаты проверки на стерильность и контаминацию показали отсутствие в посевном материале штамма 52/70-М посторонней микрофлоры, грибов и вирусов.

Важным этапом в исследовании биологических особенностей штамма 52/70-М является определение стабильности его инфекционной активности, а также антигенных и иммуногенных свойств штамма в составе инактивированной вакцины. Для этого было проведено 20 последовательных пассажей 52/70-М вируса ИББ на эмбрионах СПФ-кур с определением показателей вирулентности и титра биологической активности.

Результаты проведенных исследований показали, что биологическая активность штамма 52/70-М вируса ИББ при пассировании на эмбрионах СПФ-кур изменяется незначительно, что указывает на его стабильность при длительном культивировании в данной биологической системе. Степень вирулентности штамма 52/70-М вируса ИББ также оказалась стабильной. Так, при заражении цыплят материалом вируса на уровне 5-, 10-, 15- и 20-го пассажей болезнь у цыплят проявляется однотипно и характеризуется, как правило, острым течением: отказом от корма, угнетением и диареей. Во всех случаях отмечали падеж не менее 40% птиц.

Высокая концентрация балластных белков в вирусной суспензии, накопленной в эмбрионах кур, зараженных вирусом ИББ, требует проведения предварительной очистки вирусного материала. Известно, что балластные белки препятствуют осуществлению процесса инактивации, способствуют развитию воспалительных реакций в месте инъекции препарата, а также являются дополнительной нагрузкой на иммунную систему птиц и снижают стабильность эмульсии. Для удаления балластных примесей из вирусного материала были испытаны комбинированные варианты очистки детергентами и центрифугированием.

Результаты проверки иммунобиологических свойств суспензий вируса ИББ, очищенных разными способами, показали, что наиболее успешным является использование фреона-113 в конечной концентрации 1% с последующим низкоскоростным центрифугированием.

В табл. 5 приведены характеристики биологических и физических показателей очищенных суспензий вируса ИББ, определенных с помощью РДП, ИФА и спектрофотометрии, которые подчеркивают зависимость влияния концентрации химических реактивов на степень удаления примесей и иммунобиологические показатели вируса.

Для отработки режимов инактивации вируса ИББ были испытаны традиционные инактиванты, использующиеся в ветеринарной биотехнологии: формальдегид, димер этиленимина и Р-пропиолактон. В результате проведенных экспериментов было установлено, что эффективным и надежным способом

инактивации вируса ИББ является 0,2%-й раствор димера этиленимина при +37°С в течение 24 ч инкубации. С целью безопасности и большей уверенности в надежности инактивации, особенно при работе с производственными объемами вируса, экспозиция воздействия инактиванта была увеличена до 30 ч. Данный режим инактивации позволял необратимо подавить инфекционную активность вируса в производственных объемах при максимальном сохранении антигенных и протективных свойств вакцинного штамма.

Таблица 5

Эффективность очистки эмбрионального вируса ИББ от балластных белков

Способ очистки Концентрация реагента, % Характеристика вирусного материала Титр антител

концентрация белков, мг/мл прозрачность, % РДП, 1ое2 ИФА

Протаминсульфат 0,1 3,75±0,12 39,4+2,16 2,5+0,55 4630+0,23

0,5 3,50+0,23 54,2±3,25 2,6+0,84 4540+0,45

1,0 2,80±0,15 79,1±2,64 1,2+0,52 2150+0,23

Хлороформ 0,5 3,46+0,16 48,5±2,47 2,3+0,24 4230+0,56

1,0 2,95±0,25 44,2+2,24 1,5+0,56 2450+0,45

2,0 2,5±0,15 82,2+2,53 1,0+0,17 1860+0,45

Фреон-113 0,5 3,28±0,26 30,8+3,28 2,9+0,69 5310+0,27

1,0 2,98+0,18 50,8+3,25 2,8+0,54 5240+0,63

2,0 2,97±0,15 56,2+1,29 2,5+0,45 4280+0,45

Контроль без очистки 4,25±0,23 20,4+0,24 2,8+0,46 5340+0,57

Примечание: контрольный образец - эмбриональный вирус ИББ, очищенный низкоскоростным центрифугированием.

В процессе конструирования инактивированной вакцины против ИББ были испытаны рекомендованные для практики адъюванты: ГОА, аэросил марки А-300 и минеральное масло Маркол-52.

Антигенную активность опытных серий вакцин с разными адъювантами оценивали на цыплятах 21-суточного возраста, которым препараты вводили внутримышечно в объеме 0,5 мл. Спустя 4 недели сыворотку крови исследовали в РДП и ИФА (табл. 6).

Таблица 6

Антигенная активность инактивированного вируса ИББ с различными адъювантами

Инактивированный антиген вируса ИББ Количество голов Титр антител

РДП(1оё2) ИФА

С гидроокисью алюминия 10 3,9±0,34 5896±0,34

С аэросилом 10 4,4±0,46 6526±0,58

С минеральным маслом 10 5,2±0,25 9214±0,63

Без адъюванта 10 2,2±0,37 4124±0,45

Контроль (непривитый) 10 0 0

Как следует из результатов опыта наиболее высокой антигенной активностью обладает препарат с масляным адъювантом. Установлен максимальный уровень антител на его введение (5,2±0,25 1о£2 вРДП и 9214±0,63 вИФА). Адъювантная способность гидроокиси алюминия и аэросила существенно не различалась. Наименее выраженный иммунный ответ отмечали у цыплят, которым вводили инактивированный антиген без адъюванта. В дальнейшей работе при изготовлении инактивированной вакцины против ИББ использовали масляный адъювант.

Для определения в инактивированной вакцине против ИББ оптимального компонентного состава - соотношения дисперсной фазы (инактивированный вирус) и дисперсной среды (Маркол-52) - были изготовлены опытные образцы препарата с различным весовым содержанием водной и масляной фаз (20/80, 30/70 и 40/60).

Установлено, что наиболее стабильную эмульсию (более 12 мес. при температуре +2...+8°С) и выраженные иммуногенные свойства имел биопрепарат, приготовленный из 70 частей масляного адъюванта Маркол-52 и 30 частей водной фазы инактивированного вируса ИББ.

Эксперименты по изучению продолжительности и напряженности иммунитета у птиц, привитых инактивированной вакциной против ИББ, полученной на базе Маркола-52, показали, что оба введенных объема вакцинного препарата

(0,3 и 0,5 мл) вызывали выработку напряженного иммунитета у птиц продолжительностью 12 мес. как при подкожной, так и при внутримышечной инъекции (срок наблюдения).

Опытно-промышленные образцы инактивированной эмульгированной вакцины против ИББ имели стабильную эмульсию и обладали выраженной антигенной активностью в процессе хранения продолжительностью 12 мес. (гарантийный срок реализации вакцины) при температуре +2...+8°С.

При изучении иммунобиологических свойств инактивированной эмульгированной вакцины против ИББ в условиях промышленных птицеводческих предприятий было показано, что вакцина не вызывала у привитых птиц поствакцинальных осложнений местного или общего характера, что свидетельствует о ее безвредности.

В производственных опытах, проведенных на птицефабрике «Синявин-ская» Ленинградской области установлено, что однократное подкожное введение инактивированной вакцины в возрасте 10 сут. в дозе 0,3 мл обеспечивает успешную профилактику инфекции. Сохранность молодняка птицы, вакцинированного убитой вакциной, составила 97,1%. При контроле напряженности иммунитета через 3 недели после прививки установили наличие группового иммунитета в 99% случаях, среднегеометрический титр антител в ИФА составил 1504, а в РДП - 3,5 высокий бурсальный индекс цыплят сохранялся на протяжении всего срока выращивания и в возрасте 120 дней составил более 4,0, что свидетельствует о сохранности фабрициевой сумки и высокой иммунологической реактивности организма вакцинированной птицы.

Сравнительные испытания живой вакцины из штамма БГ и инактивированной вакцины провели в условиях птицефабрики «Гайская» Оренбургской области на общем поголовье 130 340 голов с целью разработки эффективной схемы профилактики болезни в дальнейшем. Для этого первую группу цыплят прививали инактивированной вакциной в 10 сут. согласно наставлению, вторую- в 16 сут.; третью и четвертую группы цыплят одновременно иммунизировали инактивированной вакциной и вакциной из штамма КБК в 10 и 16 сут.

соответственно; цыплят пятой группы прививали вакциной из штамма БГ в 7 и 17 сут.

Об эффективности вакцин и схем их применения судили по благополучию хозяйства по ИББ, общей сохранности, продуктивности, деловому выходу ремонтного молодняка и по результатам исследований сыворотки крови на наличие специфических антител в РДП у 30-, 40-, 50- и 60-ти дневных цыплят. Одновременно изучали уровень поствакцинального иммунитета против нью-каслской болезни, а также определяли бурсальный индекс в разные сроки выращивания птицы.

Производственные показатели выращивания цыплят при сравнительных испытаниях вакцин представлены в табл. 7.

Таблица 7

Производственные показатели цыплят, привитых разными вакцинами против

ИББ на птицефабрике «Гайская»

--------Номера групп Показатели ---_ I II 111 IV V

Количество голов 26 380 25 300 26 800 26 110 25 750

Сохранность, % 97,2 99,2 98,5 99,4 91,3

Среднесут. прирост массы, г 11,3 11,1 11,4 11,97 10,6

Масса 1 гол. при переводе в 112 дней, г 1320 1260 1300 1350 1170

% деловой молодки 94,6 94,5 97,3 97,4 85,2

Однородность, % 86,4 87,1 87,5 88,3 78,3

% яйцекладки в 150 сут. 76,8 81,8 82,1 82,9 68,4

Выбраковка, % 1,24 0,8 0,7 0,49 3,3

Вакцинопрофилактика ИББ по указанным схемам вакцинации против ИББ обеспечивают полную защиту цыплят от полевого вируса. Введение инак-тивированной вакцины не вызывает побочных реакций местного и общего характера. Цыплята, привитые инактивированной вакциной в разные сроки отдельно и в ассоциации с живой вакциной, имеют наиболее высокие показатели сохранности (до 99,4%). Среднесуточный прирост их массы соответствует нормативным требованиям. При этом достигаются положительные результаты:

высокий процент выхода деловой молодки (97,4%), низкий процент выбраковки (0,49%) и высокая однородность стада (88,3%).

Динамика серологических показателей реакции на введение вакцин свидетельствует о том, что наиболее активный групповой иммунитет установлен в 4-й группе, где цыплят в 16 сут. иммунизировали одновременно живой и инактивированной вакцинами. Среднеарифметический титр сывороток в РДП составил 3,8 1о§2. Высокие показатели бурсального индекса (более 5,2) отмечены в НУ группах, в то время как в V группе низкие показатели бурсального индекса наблюдали, начиная с 30-суточного возраста.

Таким образом, результаты проведенного опыта свидетельствуют, что эффективность профилактики болезни ИББ тесно связана с типом вакцины, соблюдением правил ее применения, наличием материнских антител, которые отрицательно влияют на выработку поствакцинального иммунитета как при введении живой, так и инактивированной вакцины.

Применение вакцины из штамма БГ позволяет купировать инфекцию, но вызывает поражения бурсы и почек, что приводит к снижению общей сохранности и продуктивности птицы.

Высокая сохранность и продуктивность птицы в условиях данного хозяйства были достигнуты при совместном применении инактивированной и живой вакцин против ИББ в 16-18 сут.

Позитивный эффект от применения эмульсионной инактивированной вакцины против ИББ из штамма 52/70-М был также получен при ее испытании во время острой вспышки ИББ на птицефабрике «Лебедевская» Новосибирской области, где впервые инфекция была установлена 29 марта 1997 года среди цыплят 52-дневного возраста. Продолжительность заболевания равнялась 10 сут. Суточный отход птицы составил до 883 из 19 500 голов, т.е. 4,5%. Всего в этой группе пало 4672 головы (26,8%).

В дальнейшем заболевание проявлялось как среди цыплят более раннего возраста (27-дневного), так и среди молодняка в возрасте 92 дней. Продолжительность заболевания составляла 7-10 сут. Заболеваемость и смертность

нарастали быстро, достигая максимума на 3-4 день, в течение последующих 57 суток шел спад заболеваемости и гибель птиц прекращалась. В отдельных партиях количество заболевших цыплят достигло 100%, а смертность - 44,2%. За время эпизоотии на птицефабрике «Лебедевская» отход птицы от ИББ составил 77 583 головы, что соответствует 15,6% от общего поголовья (498 480).

В период с мая 1997 г. по настоящее время на птицефабрике для вакцинации цыплят используется инактивированная вакцина из штамма 52/70-М. Первые партии цыплят иммунизировали данной вакциной в возрасте 10 дней. При этом процент падежа от ИББ был ниже, чем среди цыплят, иммунизированных вакцинами из штаммов Д-78, БЮР-706. После применения вакцины в более поздние сроки, в возрасте 15-18 дней, клинических признаков ИББ и отхода цыплят не отмечалось.

Совместно со специалистами птицефабрики проведено сравнительное изучение эффективности профилактики болезни с помощью вакцин из разных штаммов вируса ИББ. Результаты этих испытаний приведены в табл. 8.

Таблица 8

Экономические показатели по группам цыплят, вакцинированных против ИББ

Показатели Вакцинный штамм Контрольная группа

БГ Д-78 БЮР-706 52/70-М

% сохранности 92,7 54,4 59,5 96,8 55,0

Среднесуточный привес 12,0 11,1 10,4 12,9 10,9

Вес одной головы при переводе в 110 дней, г 1320 1165 1139 1377 1141

% делового молодняка 89,3 48,7 66,5 96,8 61,0

% однородности 76 68 65 86,5 66

50% яйцекладки, дн. 163 176 172 157 174

% выбраковки 3,4 4,7 2,6 2,2 4,3

Экономическая эффективность на 1000 голов, руб. +8084 -13 790 -7630 +11 966 -

Работу проводили в условиях неблагополучия птицехозяйства по ИББ. Как видно из данных табл. 8, наиболее высокий уровень сохранности птицы (96,8 %) был в группе, привитой инактивированной вакциной из штамма 52/70-М. Уровень сохранности у цыплят, вакцинированных живыми вакцинами из штаммов Д-78 и БЮР-706 был значительно ниже (55,4 и 59,5% соответственно), как и в контрольной группе (55,0%).

Птицефабрика «Витязовская» Краснодарского края в течение ряда лет была неблагополучна по ИББ и стабильных результатов по профилактике инфекции с помощью живых вакцин получать не удавалось.

В производственных опытах для специфической профилактики ИББ испытаны вирусвакцина из штамма Винтерфилд 2512 и инактивированная вакцина из штамма 52/70-М.

Результаты сравнительных испытаний представлены в табл. 9.

Всего за период испытания инактивированной вакциной привито 1 млн 78 тыс. голов птицы. Поствакцинальных осложнений и случаев болезни ИББ среди вакцинированной птицы не выявлено. Эффективность препарата контролировали серологически (ИФА и РДП) и по бурсальному индексу в разные сроки после применения вакцины. Процент положительно реагирующих проб сывороток составляет 90-100%. Бурсальный индекс в 30-дневном возрасте - 4,1, в 40-дневном - 5,2 и в 50-дневном - 7,2.

Таблица 9

Результаты сравнительных испытаний вакцин против ИББ на птицефабрике «Витязовская»

Показатели Вакцинный штамм

Винтерфилд 2512 52/70-М

Всего поголовье, гол. 1 507 860 1 078 722

Сохранность, % 97,82 98,96

Среднесуточный прирост, г 10,7 11,5

Деловой выход молодняка, % 80 82

На основании результатов производственных показателей и лабораторных исследований сывороток крови птицы, проведенных специалистами птицефабрики, можно сделать вывод о том, что инактивированная вакцина из штамма 52/70-М обладает выраженной протективной активностью, безвредна для молодняка и эффективна в очаге инфекции для купирования острых вспышек заболевания.

Производственные испытания на птицефабрике «Витязовская» показали отсутствие у привитой птицы поствакцинальных осложнений местного и общего характера, что свидетельствует о безвредности вакцины. При анализе основных производственных показателей (сохранность, продуктивность, конверсия корма) птицы родительских стад, иммунизированной инактивированной вакциной против ИББ, существенных отличий от нормативных показателей выявлено не было. Вакцина из штамма 52/70-М пригодна для профилактики ИББ среди цыплят яичных кроссов при однократном ее применении с 10-12-дневного возраста в зависимости от уровня материнского иммунитета.

Эффективность профилактики ИББ среди цыплят-бройлеров с помощью инактивированной вакцины из штамма 52/70-М оценивали на птицефабрике «Баксанская» Кабардино-Балкарской Республики в сравнении с широко используемыми для тех же целей в птицеводстве мясного направления живыми вакцинами.

Развернутые производственные показатели эффективности выращивания цыплят-бройлеров, иммунизированных двумя живыми (из штамма БГ и Вин-терфилд 2512) и инактивированной вакцинами против ИББ представлены в табл. 10.

В группе птицы, привитой инактивированной вакциной, сохранность была выше на 4,4 и 3,5% по сравнению с птицей из групп, где применялись живые вакцины из штаммов БГ и Винтерфилд 2512. Соответственно, затраты корма уменьшились на 6,2%, индекс продуктивности был выше в 1,5 раза. Чем выше индекс продуктивности, тем лучше технические показатели стада. Это европейский коэффициент, используемый для сравнения показателей стад.

Таблица 10

Производственные показатели эффективности выращивания бройлеров, иммунизированных живыми и инактивированной вакцинами против ИББ на птицефабрике «Баксанская»

Показатели эффективности Группы цыплят, иммунизированных против ИББ

живая вакцина инактивированная вакцина (штамм 52/70-М)

штамм БГ штамм Винтерфилд2512

Сохранность, % 91,5 92,4 95,9

Живая масса 1 гол., г 1860 1985 2190

Среднесуточный прирост, г 43,3 49,4 52,6

Конверсия корма, кг 2,3 1,91 1,84

Индекс продуктивности 208,5 249,1 279,4

Выход тушек 1 -й категории, % 78,2 81,8 87,1

В последствии в производственных испытаниях на данной птицефабрике использовали комбинированный способ применения живой и инактивированной вакцин. Схема и результаты опыта приведены в табл. 11. Эффективность вакцин и схему их применения оценивали по благополучию хозяйства по инфекции, общей сохранности, продуктивности, деловому выходу ремонтного молодняка и по результатам исследований сыворотки крови птицы на наличие специфических антител в РДП и ИФА у 35-дневных цыплят. Одновременно изучали уровень поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни, а также определяли бурсальный индекс в разные сроки выращивания птицы.

Данные, полученные в производственных условиях, подтверждают результаты лабораторных исследований и свидетельствуют об эффективности комбинированной прививки живой и инактивированной вакцинами против ИББ при специфической профилактике болезни. Согласно результатам серологических исследований, наиболее высокие титры в РДП и ИФА выявлены в группе цыплят, которых в суточном возрасте одновременно прививали живой и инактивированной вакцинами подкожно в разные точки и ревакцинировали в 18-суточном возрасте живой вакциной методом выпаивания. Бурсальный индекс

Таблица 11

Результаты производственных испытаний вакцин против ИББ на птицефабрике «Баксанская»

Вакцина Способ вакцинации Сроки вакцинации (сут.) Кол-во птиц, гол. Результаты опыта

РДП(1оё2) ИФА РЗГА (1ог2) БИ % гибели от ИББ

сут. 35 сут. 35

Живая Выпойка 7и 14 21500 2,3 1,2 2730 4340 4,2 2,3 2,1

Инактивированная Подкожно 1 28340 - 2,6 - 4130 5,6 3,6 0

Инактивированная + живая Подкожно 1 25400 - 3,1 - 5430 5,2 3,2 0

Инактивированная + живая и ревакцинация живой Подкожно и выпойка 1 и 18 29750 - 3,5 5780 4,0 2.8 0

Примечание. РЗГА — средний геометрический титр антигемагглгатининов к вирусу ныокаслской болезни.

и титр антигемагглютининов в этой группе цыплят были максимальными, что указывает на высокую иммунологическую реактивность данной группы птицы. Наблюдения показали, что испытываемая вакцина из штамма 52/70-М не вызывает у птицы осложнений местного и общего характера.

Таким образом, в результате экспериментальных опытов и производственных испытаний выбрана оптимальная схема специфической профилактики ИББ, которая предусматривает одновременное подкожное введение в суточном возрасте инактивированной и живой вакцин в разные точки с последующей ревакцинацией живой вакциной через 10-12 суток. Показана совместимость разработанных биопрепаратов при их комбинированном введении, в том числе отсутствие инактивации живой вакцины. Полученные нами данные соответствуют результатам исследований Ciambrone J.J., Clay R.P. (1986).

Проведенные эксперименты показали, что успех вакцинопрофилактики цыплят зависит от правильно выбранного срока первой вакцинации, используемого штамма и метода его введения.

На основании проведенных с положительным эффектом лабораторных и производственных испытаний и применения вакцины в условиях хозяйств была разработана нормативно-техническая документация (НТД) на вакцину эмульсионную инактивированную против ИББ из штамма 52/70-М. В НТД вошли постоянно действующие технические условия на вакцину, инструкция по применению и регламент по изготовлению и контролю препарата.

ВЫВОДЫ

1. Сравнительный анализ иммунобиологических и молекулярно-генетических свойств вакцинных штаммов и полевых изолятов вируса ИББ, циркулирующих в птицехозяйствах, показал их высокую антигенную гомологию.

2. Штамм КБК вируса ИББ, полученный методом селекции и аттенуации пассажами на эмбрионах СПФ-кур, обладает базовыми свойствами вакцинного штамма для производства живой вакцины: антигенной гомологичностью с полевыми изолятами вируса, высокой иммуногенностью, генетической стабиль-

ностью, апатогенностью при различных способах введения, отсутствием имму-носупрессивного эффекта.

3. Технология промышленного производства живой вакцины против ИББ на основе штамма КБК вируса ИББ включает: культивирование вируса в эмбрионах СПФ-кур, стабилизацию вируссодержащего материала в защитной среде с последующей лиофилизацией и хранением вакцины при температуре +4...+6°С в течение 12 месяцев.

4. Живая вакцина на основе авторского штамма КБК вируса ИББ безвредна и эффективна при различных способах вакцинации: подкожном, пероральном, интраназальном и интраокулярном. Выбор способа введения вакцины определяется наличием и уровнем материнских антител, а также эпизоотической ситуацией в хозяйстве.

5. Живая вакцина на основе штамма КБК вируса ИББ может применяться в сочетанной вакцинации суточных цыплят против ИББ и болезни Марека.

6. Промышленная технология изготовления инактивированной эмульсионной вакцины против ИББ на основе штамма 52/70-М включает: культивирование вируса ИББ на эмбрионах СПФ-кур, его очистку от балластных белков, инактивацию димером этиленимина и получение эмульсии антигена с адъювантом.

7. Инактивированная эмульсионная вакцина против ИББ безвредна, антигенно активна, эффективна при однократном парентеральном введении и вызывает формирование напряженного и продолжительного иммунитета.

8. Инактивированная эмульсионная вакцина против ИББ сохраняет исходные антигенные, иммуногенные свойства и стабильность эмульсии при хранении препарата при температуре +2...+8°С в течение 12-месячного срока наблюдения.

9. Эмульсионная инактивированная вакцина против ИББ в условиях птицеводческих хозяйств высокоэффективна для купирования острых вспышек и для профилактики субклинической формы болезни.

10. На основании практики использования разработанных вакцин против ИББ подтверждена экономическая и противоэпизоотическая эффективность разных схем их применения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты научных исследований вошли в нормативные документы, которые были одобрены ученым советом ФГУ «ВГНКИ», утверждены Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России и Россельхознадзором МСХ РФ:

1. НД на «Вакцину против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК» (СТО 56204140-0001-2007), 01.02.2008 г.;

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Алиева, А.К. Сравнительная оценка эффективности различных методов вакцинации против инфекционной бурсальной болезни птиц / A.C. Алиев, P.C. Сираждинов, А.К. Алиева // Актуальные вопросы диагностики, профилактики и борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных: тез. на-уч.-практ. конф. - Ставрополь, 1999. - С. 33-34.

2. Алиева, А.К. О специфической профилактике инфекционной бурсальной болезни птиц / A.C. Алиев, P.C. Сираждинов, Н.В. Никитина, А.К. Алиева // Актуальные вопросы диагностики, профилактики и борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных: материалы науч.-практ. конф. - Ставрополь, 1999. - С. 35-36.

3. Алиева, А.К. Вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц из штамма КБК / A.C. Алиев, А.К. Алиева // Ветеринария. - 2003. -№ 3. - С. 26-29.

4. Алиева, А.К. Вфусвакцина против ¡нфекционной бурсально1 хвороби птиц! 3i штамму КБК / A.C. Алиев, А.К. Алиева // Ветершарна медщша Укршни. - 2003. - № 3. - С. 37-40.

5. Алиев, A.C., Алиева, А.К., Оганесян, В.А. Вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц // Патент № 2205021, опубл. 27.05.2003.

6. Алиева, А.К. Особенности иммуногенеза при инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева // Пятая международная конференция по птицеводству. - Алушта, 2004. - С. 496-497.

7. Алиева, А.К. Ассоциированная вакцинация против инфекционной бурсальной болезни и болезни Марека / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Материалы междунар. юбилейной науч.-практ. конф.- СПб-Ломоносов, 2004,-С. 63-65.

8. Алиева, А.К. Эпизоотические особенности и клинико-морфологическая характеристика инфекционной бурсальной болезни в промышленном птицеводстве стран СНГ. Сообщение 1 / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Актуальные

вопросы производства и применения биологических препаратов: сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. - Алматы, 2004. - С. 293-302.

9. Алиева, А.К. Эпизоотические особенности и клинико-морфологическая характеристика инфекционной бурсальной болезни в промышленном птицеводстве стран СНГ. Сообщение 2 / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Актуальные вопросы производства и применения биологических препаратов: сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. - Алматы, 2004. - С. 303-316.

10. Алиева, А.К. Диагностика инфекционной бурсальной болезни / A.C. Алиев, А.К. Алиева // Актуальные вопросы диагностики болезни животных: спец. вып. материалов междунар. конф. - Алматы, 2005. - С. 32-37.

11. Алиева, А.К. Птицеводство Казахстана, современное состояние и перспективы развития / A.C. Алиев, Г.К. Калыкова, А.К. Алиева И Материалы I междунар. ветеринарного конгресса по птицеводству. - М., 2005. - С. 5-6.

12. Алиева, А.К. Вирусвакцина против инфекционной бурсальной болезни из штамма «КБК» / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы конф. - СПб., 2005. - С. 6-7.

13. Алиева, А.К. Производственные испытания живой вакцины из штамма КБК для специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы междунар. науч.-практ. конгр. - СПб., 2005. - С. 9-11.

14. Алиева, А.К. Разработка методов очистки вируса инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев, А.И. Банников // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы конф. - СПб., 2005. - С. 7-9.

15. Алиева, А.К. Применение РНГА для выявления специфических антител к вирусу инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев, Э.П. Корнеева, А.И. Банников // Материалы I междунар. ветеринарного конгресса по птицеводству - М., 2005. - С. 68-70.

16. Алиева, А.К. К вопросу специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев, В.А. Оганесян // Материалы

1 междунар. ветеринарного конгресса по птицеводству- М., 2005.-С. 112-115.

17. Алиева, А.К. Принципы специфической профилактики инфекционной бур-сальной болезни / A.C. Алиев, А.К. Алиева // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы междунар. науч.-практ. коигр. - СПб., 2006.-С. 47-51.

18. Алиева, А.К. Инфекционная бурсальная болезнь птиц: учеб.-метод. пособие / A.C. Алиев, А.К. Алиева, В.А. Бакулин. - СПб., 2006. - 11 с.

19. Алиева, А.К. Эффективность ассоциированной вакцинации против инфекционной бурсальной болезни и болезни Марека / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Птица и птицепродукты. - 2006. - № 6. - С. 46-47.

20. Алиева, А.К. Ассоцшована вакцшация протш ¡нфекцюнной XBopo6i и XBopo6i Марека / А.К. Алиева // Ветершарна медщша Украши. - 2008. -№ 3. - С. 17-18.

21. Алиева, А.К. К вопросу культивирования вируса инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева // Актуальные вопросы медицинской биологии и паразитологии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвященной 200-летию кафедры биологии им. акад. E.H. Павловского. - СПб., 2009. -С. 11.

22. Алиева, А.К. Оценка биологических свойств вакцинного штамма КБК вируса инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева // Актуальные вопросы медицинской биологии и паразитологии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвященной 200-летию кафедры биологии им. акад. E.H. Павловского. - СПб., 2009. - С. 10.

23. Алиева, А.К. Желудочно-кишечные болезни птиц вирусной этиологии / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Птица и птицепродукты. - 2009. - № 4. -С. 50-54.

24. Алиева, А.К. Эпизоотология и профилактика инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Эпизоотология, иммунология, фармакология, санитария. - 2009. - № 2. - С. 27-34.

25. Алиева, A.K. Перспективы применения цитокинов в птицеводстве / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Птица и птицепродукты. - 2010. - № 2. -С. 34-36.

26. Алиева, А.К. Роль цнтокинов в регуляции иммунитета у птиц / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Ветеринария. - 2010. - № 12. - С. 24-28.

27. Алиева, А.К. Сравнительное изучение схем вакцинации цыплят-бройлеров против инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Материалы VII междунар. ветеринарного конгр. по птицеводству, - М., 2011.-С. 85-88.

28. Алиева, А.К. Изучение антигенной специфичности полевых изолятов и эталонного штамма «52/70-М» вируса болезни Гамборо / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Материалы VII междунар. ветеринарного конгр. по птицеводству.-М., 2011.-С. 94-97.

29. Алиева, А.К. К вопросу изучения антигенной идентичности полевых изолятов п эталонного штамма «52/70-М» вируса болезни Гамборо / А.К. Алиева, A.C. Алиев, Г.Р. Юсупова // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. - 2011. - Т. 206. - С. 3-8.

30. Алиева, А.К. Оценка различных схем вакцинации цыплят-бройлеров против инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, В.И. Смоленский, A.C. Алиев, Г.Р. Юсупова // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. - 2011. - Т. 207. - С. 33-37.

31. Алиева, А.К. Разработка инактивированной вакцины против инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, О.И. Киселев, М.Г. Алиев, Г.Р.Юсупова // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э.Баумана. - 2011. — Т. 207. - С. 28-33.

32. Алиева, А.К. Оценка иммуносупресивной активности вакцинного штамма «КБК» вируса инфекционной бурсальной болезни птиц / А.К. Алиева II Ветерннарный врач. - 2011. - № 3. - С. 17-18.

33. Алиева, A.K. Изучение режима инактивации вируса инфекционной бурсальной болезни птиц / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Ветеринарный врач. - 2011. - № 4. - С. 5-7.

34. Алиева, А.К. Иммунобиологические свойства живой вакцины против инфекционной бурсальной болезни птиц / А.К. Алиева, В.И. Смоленский II Птица и птицепродукты. — 2011 — № 4. — С. 16-18.

35. Алиева, А.К. Иммунобиологические свойства инактивированной вакцины против инфекционной бурсальной болезни / А.К. Алиева, A.C. Алиев // Ветеринария и кормление. - 2011. - № 4. - С. 20-21.

36. Алиева, А.К. Производственные испытания вакцин против инфекционной бурсальной болезни птиц в неблагополучном хозяйстве / А.К. Алиева, С.Ю. Жбанова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2011. - № 2. - С. 29-30.

37. Алиева, А.К. Оценка эффективности вакцин против инфекционной бурсальной болезни птиц / А.К. Алиева, Г.В. Бегинин // Ветеринарная медицина. - 2011. - № 3. - С. 18-21.

38. Алиева, А.К. Аттенуация бирнавируса птиц и оценка его иммунобиологических свойств Н А.К. Алиева, A.C. Алиев II Ветеринарная медицина. - 2011. - № 3. - С. 22-25.

39. Алиева, А.К. К вопросу вакцинации против инфекционной бурсальной болезни птиц / А.К. Алиева, Г.В. Бегинин // Международный вестник ветеринарии. - 2011. - № 3. - С. 6-9.

Автор выражает искреннюю благодарность и признательность всем сотрудникам учреждений, принимавшим участие в проведении отдельных фрагментов работы и обсуждении их результатов

Подписано в печать 17.11.2011. Формат 60x90/16. Усл. печ. л. 2,5. Тираж 100 экз. Заказ 704.

Отпечатано с готовото оригинал-макета, предоставленного автором, в типографии «Скифия-принт». 197198, Санкт-Петербург, ул. Рошпинская, д. 4. Тел.:(812)715-26-45.

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Алиева, Айзанат Кадыровна

Оглавление.

Перечень условных обозначений.

1. Общая характеристика работы.

2. Обзор литературы.

2.1. Инфекционная бурсальная болезнь птиц.

2.2. Характеристика вируса.

2.3. Патогенез и связь с другими болезнями.

2.4. Средства специфической профилактики ИББ.

2.4.1. Живые вакцины для специфической профилактики ИББ и схемы их применения.

2.4.2. Инактивированные вакцины при ИББ и схемы их применения.

2.4.3. Инактиванты и их характеристики.

2.4.4. Адъюванты и их свойства.

2.4.5. Новые направления в иммунопрофилактике ИББ.

3. Собственные иследования.

3.1. Материалы и методы.

3.1.1 .Характеристика использованных материалов.

3.2. Результаты исследований.

3.2.1. Сравнительное изучение иммунобиологических свойств изолятов и эталонного штамма вируса ИББ.

3.2.2. Оценка репродуктивной способности вакцинных штаммов вируса ИББ в различных биологических системах.

3.2.2.1. Репродукция вируса в эмбрионах птиц.

3.2.2.2. Репродукция в культурах клеток.

3.2.3. Разработка технологии производства живой вакцины против ИББ из штамма КБК.

3.2.3.1. Оценка антигенной активности вакцинных штаммов вируса ИББ.

3.2.3.2. Проверка штамма КБК на стабильность и безвредность.

3.2.3.3. Иммуногенная активность вакцинного штамма КБК.

3.2.3.4. Иммунодепрессивная активность штамма КБК вируса ИББ.

3.2.3.5. Термостабильность и устойчивость к действию различных физико-химических факторов штамма

КБК вируса ИББ.

3.2.3.6. Гемагглютинирующая активность.

3.2.3.7. Морфология и структура штамма КБК вируса ИББ.

3.2.3.8. Комиссионная проверка вакцинного штамма КБК вируса ИББ.

3.2.3.9. Изучение экспериментальных серий вакцины из штамма КБК в лабораторных условиях.

3.2.3.9.1. Изучение иммуногенности вакцины из штамма КБК при различных методах введения.

3.2.3.9.2. Изучение сроков наступления и продолжительности иммунитета.

3.2.3.9.3. Ассоциированная вакцинация против ИББ и болезни Марека.

3.2.3.9.4. Разработка методов контроля вирусвакцины против ИББ.

3.2.3.10. Испытания вирусвакцины в полевых условиях.

3.2.4. Разработка технологии производства инактивированной вакцины против ИББ.

3.2.4.1. Разработка технологии получения вирусного сырья.

3.2.4.2. Разработка метода очистки вируса ИББ.

3.2.4.3. Разработка режима инактивации вируса ИББ.

3.2.4.4. Выбор адъюванта для инактивированной вакцины против ИББ.

3.2.4.5. Разработка методов контроля эмульсионной инактивированной вакцины против ИББ.

3.2.4.6. Испытания эмульсионной инактивированной вакцины против ИББ в полевых условиях.

3.2.5. Характеристика производственных серий вакцин против ИББ.

4. Обсуждение результатов исследования.

5. Выводы.

Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни"

Актуальность темы. Успешному развитию промышленного птицеводства во многом препятствуют различные инфекционные болезни, которые наносят большой экономический ущерб, обуславливая снижение продуктивности птиц и низкую рентабельность отрасли [102]. В начале 60-х годов прошлого столетия к их числу добавилась новая нозологическая единица - инфекционная бурсальная болезнь (ИББ), которая впервые была описана в США [170]. ИББ широко распространена во всем мире и представляет серьезную угрозу развитию отрасли [16,23,30,94,261].

Вакцинопрофилактика в странах с развитым промышленным птицеводством считается главным способом защиты поголовья от вируса ИББ [7,93,97,172,365]. За истекшее десятилетие был создан широкий спектр отечественных и зарубежных живых и инактивированных вакцин против ИББ, но, как показывает практика, в крупных птицеводческих хозяйствах среди вакцинированной птицы наблюдаются эпизоотические вспышки ИББ. Одна из причин проявления этих эпизоотий может быть связана со структурными изменениями в геноме вируса ИББ. Так, в конце 80-х годов в вакцинированных стадах птицы в США появились антигенные варианты, а в России и в Европе - антигенно сходные с «классическими» высоковирулентные штаммы вируса ИББ (ввВИББ), которые очень быстро распространились по всему миру. В отличие от ранее известных штаммов, в том числе и от новых американских антигенных вариантов, штаммы ввВИББ могут вызывать до 90% смертности в стадах яичных кроссов птицы [6,142,161,357].

В этой связи становится актуальным более глубокое изучение иммунобиологических свойств бирнавируса птиц, которому до настоящего времени не уделялось достаточного внимания. Эффективность вакцины, как живой, так и инактивированной, может в значительной степени зависеть от соответствия антигенной специфичности избранного штамма в отношении полевых изолятов вируса ИББ, циркулирующих в птицеводческих хозяйствах.

В России для профилактики ИББ используются культуральные вакцины из слабореактогенных штаммов вируса ИББ (Д-78, ВНИВИП, Бюр 8-706, \Ут1егйеШ 25-12, Био-92 и другие). Известно, что иммуногенная активность культуральных вакцин против ИББ значительно уступает эмбриональным вариантам вакцинного препарата [82, 213]. Отечественная живая эмбриональная вакцина из штамма БГ обладает остаточной реактогенностью, проявляющейся атрофией фабрициевой сумки, поражением почек и отрицательным влиянием на рост и развитие птицы [54].

Существует широкий спектр поливалентных инактивированных вакцин отечественных и зарубежных производителей для профилактики инфекционных болезней птиц с различными комбинациями входящих в их состав антигенов, в том числе вируса ИББ. Поливалентные вакцины применяют на родительском поголовье для обеспечения пассивного иммунитета у потомства и не предназначены для иммунизации цыплят раннего возраста [25,94]. Технология изготовления моновалентной инактивированной вакцины «Авикрон» против ИББ основана на использовании гомогената фабрициевых сумок цыплят, зараженных вирулентным штаммом соответствующего вируса. Низкая технологичность производства вакцины (использование вирулентного вируса, содержание и убой большого количества зараженных вирусом ИББ птиц), потенциальная опасность предприятий-изготовителей как источников эпизоотии являются причинами ограничения сферы применения вакцины и значительно усложняют (технологически и экономически) выпуск биопрепарата в промышленных масштабах [47].

Мировой опыт промышленного птицеводства показал, что для профилактики ИББ нужны живые и инактивированные вакцины.

Целесообразность использования живой и инактивированной вакцин или их комбинации определяется комплексом факторов, требующих специального изучения. Детального экспериментального изучения требует также оценка возможности комбинирования живой вакцины против ИББ с вакцинами против других распространенных болезней птицы, в частности, против болезни Марека.

Задачи исследования

- Выяснение иммунобиологических свойств отечественных изолятов вируса ИББ, отбор штаммов со стабильными антигенными и другими свойствами для использования их в качестве производственных.

- Разработка технологии культивирования производственных штаммов вируса ИББ и режима инактивации вируса ИББ.

- Подбор адъювантов для изготовления инактивированных вакцин против ИББ.

- Разработка технологии приготовления вакцинных препаратов против ИББ и методов их контроля.

- Проведение испытаний и оценка эффективности разработанных препаратов в экспериментальных и производственных условиях.

- Освоение промышленного производства живой и инактивированной вакцин против ИББ и внедрение их в ветеринарную практику.

- Оценка эффективности ассоциированной вакцинации птиц против ИББ и болезни Марека (БМ).

- Разработка и проверка в производственных условиях схемы вакцинопрофилактики ИББ, оценка эффективности средств и методов борьбы с ИББ в птицеводческих хозяйствах России.

- Подготовка и утверждение нормативно-технической документации на разработанные биопрепараты.

Выбраны в качестве вакцинных производственные штаммы 52/70-М и КБК вируса ИББ, отработана технология их культивирования в развивающихся эмбрионах СПФ-кур. Штамм КБК паспортизирован и депонирован под №117-ДЕП 15.10.2001 г. во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, в качестве производственного. Разработаны производственные технологии изготовления живой и инактивированной вакцин ИББ на основе отобранных штаммов, оформлены инструкции по их применению. Освоено промышленное производство живой и инактивированной вакцин против ИББ, которые успешно внедрены в ветеринарную практику. Научная новизна исследований подтверждена патентом Российской Федерации на изобретение №2205021 «Вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц», 27.05.2003 г.

Теоретическая значимость проведенных исследований.

Теоретически обоснована необходимость использования иммунобиологических и молекулярно-генетических подходов для отбора вируса при получении вакцинного штамма, что позволяет гарантировать выпуск качественных и безопасных вакцин. Полученные новые данные о культуральных, иммунобиологических и генетических свойствах штаммов семейства бирнавирусов расширяют границы фундаментальных знаний о вирусах этой систематической группы и возможностях их использования в различных биотехнологических процессах.

Практическая значимость исследований. Разработаны технологии изготовления и инструкции по применению живой и эмульсионной инактивированной вакцин против ИББ, обоснована эффективность их практического применения. Внедрена в ветеринарную практику и широко используется в РФ для специфической профилактики ИББ комплексная схема эффективной вакцинопрофилактики ИББ.

НД на «Вакцину против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК» (СТО 56204140-0001-2007), 01.02.2008 г.;

НД «Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК (вместо «Наставления по применению.»), 03.03.2008 г.;

НД на «Вакцину против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкую инактивированную» (ТУ 9384-001-56204140-03) от 05.02.2004 г., без ограничения срока действия;

Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкой инактивированной» (вместо «Наставления по применению.»), 04.06.2009 г.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Изоляты вируса ИББ, выделенные в птицеводческих хозяйствах РФ, антигенно идентичны прототипному штамму 52/70-М, а их молекулярно-генетическое различие не превышает 2%.

2. Аттенуированный штамм КБК вируса ИББ, селекционированный методом длительных пассажей на эмбрионах СПФ-кур, обладает свойствами, позволяющими использовать его для производства живой вакцины, а именно: авирулентностью для молодняка птиц, иммунногенностью и генетической стабильностью.

4. Применение новой живой вакцины может быть также эффективным при сочетанной вакцинации слабоиммунного молодняка птицы против ИББ и болезни Марека.

5. Инактивированная эмбриональная вакцина на основе вирулентного штамма 52/70-М вируса ИББ превосходит культуральную инактивированную вакцину на основе вакцинных штаммов по антигенности, протективности и технологичности производства.

6. В ряде случаев показана целесообразность одновременного применения живой и инактивированной вакцин против ИББ. Программу вакцинопрофилактики ИББ в промышленном птицеводстве целесообразно составлять конкретно для каждого хозяйства с учетом эпизоотической ситуации и особенностей технологии производства.

По материалам диссертации подготовлено и издано учебное пособие для студентов факультета ветеринарной медицины, слушателей курсов повышения квалификации высших сельскохозяйственных учреждений образования (Протокол № 1 методического совета Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины от 19.09.06 г.).

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на международной научно-практической конференции по проблемам эпизоотологии и инфекционных заболеваний (Одесса, 2003); на юбилейной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ГУ «Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» (Махачкала, 2003); научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ (Санкт-Петербург, 2004, 2008, 2010); на международной юбилейной научно-практической конференции «Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве» (Санкт-Петербург-Ломоносов, 2004); на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы производства и применения биологических препаратов» (Алматы, 2004); на I международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2005); на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики болезней животных (Алматы, 2005); на международном научно-практическом конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Москва, 2006); на VII международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2011); на заседаниях специальной комиссии по проблемам вирусных болезней методического и Ученого Советов ФГУ «ВГНКИ» (Москва, 2001-2004), а также на межлабораторном совещании ФГУ «ВГНКИ» (Москва, 2011) и на заседании ученого совета ФГБУ НИИ гриппа (Санкт-Петербург, 2011).

Личный вклад автора заключается в формулировании проблемы, постановке целей и задач исследований, теоретическом и методологическом обосновании путей решения поставленных задач, непосредственном планировании эксперимента и выполнении исследований, обобщении и интерпретации результатов. Автор лично принимала участие в апробации и промышленном производстве разработанных препаратов, в подготовке публикаций.

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Алиева, Айзанат Кадыровна

5. ВЫВОДЫ

7. Реактивированная эмульсионная вакцина против ИББ безвредна, антигенно активна, эффективна при однократном парентеральном введении и вызывает формирование напряженного и продолжительного иммунитета.

8. Инактивированная эмульсионная вакцина против ИББ сохраняет исходные антигенные, иммуногенные свойства и стабильность эмульсии при хранении препарата при температуре +2.+8°С в течение 12-месячного срока наблюдения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

-НД на Вакцину против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК (СТО 56204140-0001-2007), от 01. 02.2008г.;

-Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни из штамма КБК (вместо «Наставления по применению.) 3.03.2008г.

-НД на Вакцину против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкую инактивированную (ТУ 9384-001-56204140-03) от 26.12.2002г.без ограничения срока действия:

-Инструкция по применению вакцины против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) жидкой инактивированной (вместо Наставления по применению.,) от 04.06.2009г.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Алиева, Айзанат Кадыровна, Санкт-Петербург

1. Алиев A.C.,Инфекционная бурсальная болезнь птиц, Санкт-Петербург:, 2010.208 с.

2. Алиев, A.C. Адаптация вируса болезни Гамборо, прививаемой к культуре клеток / A.C. Алиев, П.Х. Годизов, В.Н. Дьяченко и др. // Ветеринарные проблемы птицеводства: тез. докл. науч.-произв. конф. Л., 1990. - С. 8-9.

3. Алиев, A.C. Диагностика инфекционного бурсита / A.C. Алиев // Птицеводство. 1991. -№ 10. - С. 22-24.

4. Алиев, A.C. Инактивированная вакцина против инфекционной бурсальной болезни из штамма 52/70 / A.C. Алиев, М.Г. Алиев, В.А. Оганесян // Ветеринария. 2004. - № 4. - С. 24-28.

5. Алиев, A.C. Инфекционная бурсальная болезнь птиц: этиология, диагностика и профилактика: автореф. Дис. д-ра вет. наук / A.C. Алиев. СПб., 1993. -42 с.

6. Алиев, A.C. Специфическая профилактика инфекционного бурсита кур /

7. A.C. Алиев // Ветеринария. 1991. - № 3. - С. 36-40.

8. Апатенко, В.М. Иммунодефицит у животных. / В.М. Апатенко // Ветеринария. 1992. - № 5 - С. 29-30.

9. Бакулин, В.А. Болезни птиц / В.А. Бакулин. СПб., 2006. - С. 762.

10. Бакулин, В.А. Патоморфогенез и патоморфологическая диагностика инфекционной бурсальной болезни птиц: автореф. дис. . д-ра вет. наук/

11. B.А. Бакулин. СПб., 1992. - 35 с.

12. Бакулин, В.А. Цилиндрические структуры вируса болезни Гамборо/

13. B.А. Бакулин, A.C. Алиев, Л.А. Радчук и др. // Ветеринария. 1990. - № 12.1. C. 28-30.

14. Бакулин, В.А. Электронномикроскопические исследования при Гамборо / В.А. Бакулин, Г.А. Севастьянов, Л.М. Миркина и др. // Ветеринария. 1985.11.-С. 36-39.

15. Баран, A.A. Флокулянты в биотехнологии / A.A. Баран, А.Я. Тесленко // Флокулянты в биотехнологии. Д.: Химия, 1990. -143 с.

16. Бегинин, Г.В. Опыт профилактики болезни Гамборо/ Г.В. Бегинин// Птицеводство. 2009. - № 4. - с. 47-48.

17. Бентуе Маркое; Беспалов O.A. Контроль инфекционной бурсальной болезни. Ветеринария, 2009; N 12. С. 18-21

18. Бессарабов В.; Демин В. Вакцины для профилактики ИББ/ Вакцины «Винтерфилд» и «БГ». Птицеводство, 2008; N 7. С. 31.

19. Бессарабов, Б.Ф. Болезни сельскохозяйственной птицы / Б.Ф. Бессарабов- М.: Веттрейд.- 2001.- 123 с.

20. Бессарабов, Б.Ф. Синдром снижения яйценоскости (ССЯ-76) / Б.Ф. Бессарабов, И.И. Мельникова, М.М. Горячева // Синдром снижения яйценоскости (ССЯ-76): М.: МГАВМиБ, 1996. - 28 с.

21. Бессарабов, Б.Ф. Специфическая профилактика инфекционной бурсальной болезни цыплят / Б.Ф. Бессарабов, В. Демин // Птицеводство. 2008. - № 3. -С. 61-62.

22. Бирман Б.Я. Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского. Инфекционная бурсальная болезнь. 2003- 111 с.

23. Бирман Б.Я.; Гуков Ф.Д.; Громов И.Н.; Клименкова ИВ. Влияние иммунизации кур на микроморфологию их щитовидной железы. Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария, 2006; N 1. С. 32-35.

24. Бирман, Б.Я. Инфекционная бурсальная болезнь: эпизоотология, этиология, патогенез, клинические признаки, диагностика, меры борьбы и патанатомия вирусной высоконтагиозной болезни цыплят 3-6-недельного возраста / Б.Я. Бирман. Минск, 2003. - 111 с.

25. Бирман, Б.Я. Приобретенные иммунодефицита птиц, их лечение и профилактика: автореф. дис. . д-ра вет. наук / Б.Я. Бирман. Минск, 2003.-42 с.

26. Болезни птиц / Б.Ф. Бессарабов, И.И.Мельникова, Н.К.Сушкова и д р СПб:1. Лань. 2007. - 445 с.

27. Борисов A.B. Дрыгин, В.В., Ирза В.И. и др. Диагностика, профилактика и лечение инфекционных заболеваний птиц /.- Владимир: ВНИИЗЖ.- 2007.-64 с.

28. Борисов A.B.; Кузнецов В.Н. Сравнительная оценка иммунобиологических свойств различных штаммов вируса инфекционной бурсальной болезни птиц. Труды Федерального центра охраны здоровья животных, 2009; т.7. С. 149156

29. Борисов, A.B. Разработка средств и методов диагностики и специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни: дис. . д-ра вет. наук / Борисов Александр Владимирович. Владимир, 2000. - 414 с. ДСП № 37.

30. Борисов, A.B. Профилактика бурсальной болезни птиц/ А.В.Борисов// Уральские нивы. 1995. - № 4-6.

31. Борисов, A.B. Разработка средств и методов диагностики и специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни: автореф. дис. . д-ра вет. наук / A.B. Борисов. Владимир, 2000. - 58 с.

32. Бурцев, В.И. Синдром снижения яйценоскости / В.И. Бурцев, В.А.

33. Бесхлебнов, Д.И. Козлова // Вопр. вет. вирусол., микробиол. и эпизоотол.: тез. докл. науч. конф. Покров, 1983. - С.61-66.

34. Васильев A.B.; Воронин Е.С.; Тихонов И.В.; Васильева JLJI. Перспективные технологии в создании противовирусных вакцин : -М., 2002.-10 с

35. Вирусные болезни животных / В.Н.Сюрин, А.Я.Самуйленко, Б.В.Соловьев и др.- M.: ВНИТИБП. 1998. 928 с.

36. Воронин Е.С.; Петров A.M.; Серых М.М.; Девришов Д.А. Иммунология : / Под ред. Воронина Е.С. : Колос-Пресс, 2002. 407 с

37. Галактионов В.Г. Иммунология / В.Г. Галактионов. — М.: Академия. 2004. -528 с.

38. Гетман Е.В. Технологические этапы изготовления культуральной вакцины против инфекционной бурсальной болезни птиц: Автореф. дис. канд. биол.наук/Всерос. н.-и. и технол. ин-т биол. пром-сти. Щелково, 2000. -31.

39. Глейзер Д.А.; Фролов C.B.; Борисов A.B.; Кулаков В.Ю. Получение инактивированного вируса инфекционного бронхита кур (штамм "Калужский"). Вет.патология, 2008; N 4. С. 75-76.

40. Годизов П.; Алиев А. Диагностика инфекционной бурсальной болезни.

41. Птицеводство, 2006; N 1. С. 18-19

42. Годизов П.Х.; Алиев A.C. Эффективность вирус-вакцины против инфекционной бурсальной болезни птиц из штамма "CT". Птица и птицепродукты, 2004; N 6. С. 78-81.

43. Годизов П.Х.; Алиев A.C.; Мамукаев М.Н. Горский государственный аграрный университет. Научно-теоретические основы производства вакцинного штамма "CT", 2008. 63 с.

44. Громов, И.Н. Иммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо, и влияние на него иммуностимуляторов: автореф. дис. . канд. вет. наук / И.Н. Громов Витебск, 2000. - 21 с.

45. Гусев С.А. Технология изготовления инактивированной вакцины против инфекционной бурсальной болезни : Автореф. дис. канд. вет. наук / Всерос. НИИ защиты животных. Владимир, 2000. 25 с

46. Джавадов Э.Д. Вирус-индуцированные иммуносупрессии и способы их предупреждения в промышленном птицеводстве: Автор дис.док.вет.наук, 2004. 49 с.

47. Джавадов, Э.Д. Диагностика иммунодефицита птиц (иммунологические методы) / Э.Д. Джавадов, Ф.И. Полежаев, B.JI. Пастушенков // Ветеринария. -2003. -№ 10.-С. 11-13.

48. Джавадов, Э.Д. Инактивированные вакцины для птицеводства / Э.Д. Джавадов, A.C. Дубовой // Расцветинформ. 2003. - № 6. - С. 11.

49. Елисеева, E.H. Экономическая эффективность профилактических мероприятий / E.H. Елисеева // Матер. IV Межд. вет. конгресса по птицеводству.- М.:НПП «АВИВАК». 2008.- 42-45.

50. Жбанова С.Ю.; Бакунин В.А. Результаты оптимизации схем специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни и реовирусного теносиноваита кур. Новое в диагностике и профилактике болезней птиц , 2008.-С. 67-71.

51. Жбанова, С.Ю. Эпизоотология инфекционной бурсальной болезни и реовирусного теносиновита кур на птицефабрике яичного направления: автореф. дис. канд. вет. наук / С.Ю. Жбанова. СПб., 2005. - 17 с.

52. Ибрагимов, A.A. Атлас. Патоморфология и диагностика болезней птиц / A.A. Ибрагимов. М.: Колос-2007. - 120 с.

53. Ибрагимов, A.A. Этиология и диагностика изменений фабрициевой бурсы у птиц / A.A. Ибрагимов // Вестник Российского государственного аграрного заочного университета. 2008. - № 5 (10). - С. 104-107.

54. Инфекционная бурсальная болезнь птици вакцинация. Гл.зоотехник, 2004; N 5.- С. 63-65.

55. Ирза, В.Н. Иммуннобиологические свойства вакцины ассоциированной против ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и синдрома снижения яйценоскости-76 инактивированной эмульгированной: автореф. дис. канд. вет. наук. Владимир, 2000. - 25 с.

56. Казанцев И.В. Разработка оптимальной схемы иммунизации кур против ИББ, ИБК и НБ в птицехозяйстве, Автореф. дис.канд. вет. наук / Владимир, 2003. -23 с.

57. Калыкова, Г.К. Биологические свойства вируса и лабораторная диагностика инфекционной бурсальной болезни индеек: автореф. дис. .канд. биол. наук / Г.К. Калыкова. М., 1995. - 18 с.

58. Красильников И.А. Очистка и концентрирование вируса клещевого энцефалита. Дисс. . канд. биол. наук. -М., 1980.

59. Красников, Г.А. Патогистология органов иммунитета кур при действии иммуносупресивных вирусов / Г.А. Красников // Вет. медицина. 1н-т експерим. і клініч. вет. медицини УААН, 2000. - Вип. 78, т. 1. - С. 173-181.

60. Кузнецов Ю.В.; Кузнецов В.Н.; Борисов A.B.; Пономарев А.П.; Смоленский В.И. Иммунобиологические свойства вакцинного штамма "К-58" вируса инфекционной бурсальной болезни. Труды Федерального центра охраны здоровья животных, 2005; т.З. С. 325-337

61. Лакин Г. Ф. Биометрия. М. Высшая школа. - 1990. - 352 с

62. Лезова Т.Н., Михалишин В.В., Улупов H.A., Михалишин Д.В. Инактивация микрофлоры в вируссодержащих суспензиях // Пробл. инфекц. патол. с.-х. ж-ных: тез. докл. конф. Владимир, 1997. - С. 197.

63. Люпке, В. Приложение на инжективно-контактния метод за ваксиниране на пилета срещу болестта Гумборо / В. Люпке, Н. Николов, А. Ангелов и др. // Ветеринарна сбирка. 1986. - Т. 84. - № 2. - С. 18-20.

64. Макогон, В.Ф. Эпизоотические особенности инфекционной бурсальной болезни птиц / В.Ф. Макогон // Общая эпизоотология: иммунологические, экологические и методологические проблемы): мат. междунар. конф. -Харьков, 1995.-С. 113-116.

65. Мамков, Н.С. Масляные адъюванты для противоящурных вакцин: дис. . докт. вет. наук/Мамков Николай Степанович. Владимир, 1999. - 323 с.

66. Медуницын, Н.В. Вакцинология / Н.В. Медуницын. М.: Триада-Х, 2004.-С. 272.

67. Мельникова И.И.; Крыканов A.A.; Крыканов A.A.; Яковлев А.Г. Усовершенствование перорального метода вакцинации цыплят-бройлеров против инфекционной бурсальной болезни. Ветеринарная медицина, 2005; N 3-4. С. 20-22.

68. Муляк, C.B. Вакцинопрофилактика инфекционной бурсальной болезни в неблагополучных хозяйствах / C.B. Муляк, В.И. Смоленский // Ветеринария. 1996. - № 7. - С. 29-32.

69. Насонов И.В.; Бирман Б.Я. Производственные испытания вакцины сухой эмбриональной против инфекционной бурсальной болезни птиц из штамма "КМИЭВ-13" (БД-1).Эпизоотология, иммунобиология, фармакология исанитария, 2005; N 4. С. 22-24.

70. Нонневитц, Т. Профилактика опасных инфекционных заболеваний птицы/ Т. Нонневитц, М. Воос // Птицеводство. 1993. - № 3. - С. 16-21.

71. Норкина, С.Н. Вакцина против инфекционной бурсальной болезни из штамма «Винтерфилд 2512»: автореф. дис. . канд. биол. наук/ С.Н. Норкина.- М., 2002.-27 с.

72. Радчук, J1.А. Биологические свойства вируса и лабораторная диагностика инфекционной бурсальной болезни птиц: автореф. дис. . канд. вет. наук/ JI.A. Радчук. Витебск, 1982. - 18 с.

73. Рождественский, И.К. Инактивация вируса ССЯ-76 / И.К. Рождественский // Ветеринария. -1984. № 4. - С. 61-62.

74. Рождественский, И.К. Химическая инактивация вирусов для получения убитых противовирусных вакцин / И.К. Рождественский, Р.Н. Коровин, A.A. Баранова//Вестник с.-х. наук.-1992. № 1. -С. 139-144.

75. Сафонов, Г.А. Разработка и усовершенствование средств диагностики и специфической профилактики ньюкаслской болезни птиц: автореф. дис. . докт. биол. наук/ Покров, 1984. 33 с.

76. Селезнев, С.Б. Структурная организация иммунной системы птиц и млекопитающих / С.Б. Селезнев. М.: РУДН, 1999. - С. 31.

77. Селиверстов A.B.; Кузнецов В.Н.; Борисов A.B. Иммунобиологическиесвойства инактивированной эмульсионной вакцины против инфекционной бурсальной болезни. Ветеринарный врач, 2010; N 4. С. 18-21.

78. Сергеев, В.А. Вирусные вакцины / В.А. Сергеев // Вирусные вакцины. -Киев: Урожай, 1993. 367 с.

79. Сергеев, В.А. Вирусы и вирусные вакцины / В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер. М.: Библионика, 2007. - 523 с.

80. Скутарь, И.Г. Профилактика инфекционных болезней птиц в условияхреспублики Молдова / И.Г. Скутарь, И.С. Крецу, С.А. Зеленин // Ветеринария. 1997. -№ 2. - С. 12-13.

81. Смоленский В.И., Ю.В.Зуев, Т.В.Руденко, И.П.Горева. Качество и стандартизация биопрепаратов против болезней птиц. //Ветеринария.- 2011. -1. -С.44-47.

82. Смоленский В.И., Разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни / В.И. Смоленский // Состояние, проблемы и перспективы развития вет. науки России. М., 1999. - Т. 2. - С. 244-248.

83. Смоленский, В.И. Средства и методы специфической профилактики болезней птиц вирусной этиологии: автореф. дис. . д-ра биол. наук / В.И. Смоленский. -М., 1999.-44 с.

84. Смоленский, В.И. Эффективность вакцин против вирусных болезней птиц / В.И. Смоленский // Ветинформ. 2002. -№ 1. - С. 6-7.

85. Соловьев, Б.В. Технология промышленного производства культуральных вакцин против болезни Марека и инфекционной бурсальной болезни: автореф. дис. . д-ра биол. наук./Б.В.Соловьев М., 2001. - 51 с.

86. Сорокина З.Ф., Дудников А.И., Морев Ю.Б. и др. Очистка вируса ящура глюконатом кальция с добавлением хлороформа // Акт. пробл. вет. вирусол. -Владимир, 1977. С. 94-96.

87. Сорокина, З.Ф. Очистка вируса ящура солями кальция / З.Ф. Сорокина, В.В. Михалишин //Акт. пробл. вет. вирусол. Владимир, 1978. - С. 28-29.

88. ЮО.Сухинин, A.A. Липосомальные вакцины в промышленном прицеводстве: автореф. дис. . д-ра биол. наук / A.A. Сухинин. СПб., 2004. - 40 с.

89. Тихонов И.В.; Рубан Е.А.; Грязнева Т.Н.; Самуйленко А.Я.; Гаврилов В.А.; под ред. Е.С.Воронина. Биотехнология, Санкт-Петербург: Гиорд, 2008-703с.

90. Фисинин В.И. Настоящее и будущее отрасли. Птицеводство, 2010; N 2 С. 5-10

91. Филипп // Животноводство России. 2008. - № 1. - С. 21-22.

92. Чолакова, P.A. Ассоциированная вакцинация птицы против инфекционного бронхита, болезни Ньюкасла и заразного бурсита / P.A. Чолакова // Вет. мед. науки. 1985. -№ 9. - С. 37-38.

93. Шемельков, Е.В. Антигенная активность вакцины против инфекционных болезней свиней при включении в ее состав адъювантов / Е.В. Шемельков, Ю.Н. Федоров, O.A. Верховский // Сельскохоз. биология. 2008. - № 4. -С. 101-105.

94. Щербакова Л.О.; Борисов A.B.; Дрыгин В.В. Молекулярная эпизоотология инфекционной бурсальной болезни: обзор.Труды Федерального центра охраны здоровья животных, 2005; т.З. С. 310-324

95. Щербакова, JI.O. Анализ антигенозначимой области VP2 штаммов вируса инфекционной бурсальной болезни / JI.O. Щербакова, В.В. Дрыгин, A.B. Борисов и др. // Вестник РАСХН. 1998. -№ 5 . - С. 60-65.

96. Ю.Щербакова, JI.O. Молекулярная эпизоотология ИББ в России/ JI.O. Щербакова, A.B. Борисов, Ю.А. Бочков, В.В. Дрыгин // Аграрная Россия. — 2002. — № 3. С. 6-19.

97. Ш.Эльберт Л.Б., Перваков Ю.В., Крутянская Т.А. и др. Показатели вакцинации людей против клещевого энцефалита инактивированными препаратами с разной концентрацией антигена // Микробиол., эпидемиол. и иммунол. -1981. -№ 6. С. 89-92.

98. Abdel-Alim, G.A. Immunogenicity and antigenicity of very virulent strains of infectious bursal disease viruses / G.A. Abdel-Alim, Y.M. Saif // Avian Dis. -2001.-Vol. 45, N 1. P. 92-101.

99. Adejoro, S.O. Stress sparks epidemics in Nigeria / S.O. Adejoro // World Poult.1990.-Vol. 55, N2.-P. 27, 29.

100. Aghakhan, S.M. Characterization of a highly virulent infectious bursal disease virus / S.M. Aghakhan, S.R. Fereidouni, N. Abshar et al. // Arch. Inst. Razi. -1996.-N46-47.-P. 55-63.

101. Agüero J.A.; Ceballo Y.; Gonzalez Y.; Martinez S.; Enriquez G.A. Molecular cloning and expression of the gene that codifies for the infectious bursal disease virus structural protein, VP3 . Rev.Salud anim., 2007; T.29, N 1. P. 39-47.

102. Ahlam, A. Infections Bursal Disease in Ouails/ A. Ahlam, M.M. Sabry// Vet. Med. J. 2000. - Vol. 43, N 85. - P. 304-315.

103. Alam, J. Effect of maternally derived antibody on vaccination against infectious bursal disease (Gumboro) with live vaccine in broiler / J. Alam, M.M. Rahman, B.K. Sil etal. //Int. J. Poult. Sci.-2002.-Vol. 1.N4.-P. 98-101.

104. Alexander, D.J. Heat inactivation of serotype 1 infectious bursal disease virus/ D.J. Alexander, N.J. Chettle // Avian Pathol. 1998. - Vol. 27, N 1. - P. 97-99.

105. Alfonso-Zamora P.; Deulofeu C.; Pulido M. Infectious bursal disease. Risk for mortality in a parent flock of Leghorn hens. Rev.Salud anim., 2006; T.28, N 2. P. 110-114

106. Allan, W.H. Immunosuppression the infectious bursal agent in chickens immunized against castle disease / W.H. Allan, J.T. Faragher, G.A. Cullen // Vet. Rec.- 1972.-Vol. 90, N 18. P. 511-512.

107. Aucouturier, J. Адъюванты для ветеринарных вакцин/J.Aucouturier, V. Ganne //Peжимдocтyпa:http://www.nbuv.gov.ua/portal/ChemBiol/VBtl/texts/2008 -13/statti/08BFFAVD.pdf. Дата обращения: 10.03.2010.

108. Ashraf, S. Detection of antibodies against serotypes 1 and 2 infectious bursal disease virus by commercial ELISA kits / S. Ashraf, G. Abdel-Alim, Y.M. Saif //

109. Avian Dis. 2006. - Vol. 50, N 1. - P. 104-109.

110. Ashraf, S. Interference between mild and pathogenic strains of infection bursal disease virus in chickens / S. Ashraf, G. Abdel-Alim, Q.M. Al-Natour et al. // Avian Dis. 2005. - Vol. 49, N 3. - P. 99-103.

111. Aucouturier, J. Адъюванты для ветеринарных вакцин/ J. Aucouturier, V. Ganne // Режим доступа: http://www.nbuv.gov.ua/portal/ChemBiol/VBtl/texts/200813/statti/08BFFAVD.pdf. Дата обращения: 10.03.2010.

112. Avic G.; Curie S.; Savic V. Safety evaluation of GUMBOKAL® IM FORTE SPF live intermediate vaccine against infectious bursal disease. Praxis veter., 2004; T.52, N 1-2. P. 135-140.

113. Azad, A. A. Deletion mapping and expression in Escherichia coli of the large genomic segment of a birnavirus / A.A. Azad, M.N. Jagadish, M.A. Brown et al. // Virology.- 1987.-Vol. 161.-P. 145-152.

114. Azad, A.A. The characterization and molecular cloning of the double-stranded RNA genome of an Australian strain of infectious bursal disease virus / A.A. Azad, S.A. Barrett, K.J. Fahey // Virology. 1985. - Vol. 143, N 1. - P. 35-45.

115. Balamurugan V.; Kataria J.M. Economically important non-oncogenic immunosuppressive viral diseases of chicken-current status. Veterinary Research Communications; Dordrecht, 2006; Vol.30, Iss.5. P. 541-557.

116. Baxendale, W. The results of field trials with an inactivated Gumboro vaccine/ W. Baxendale, D. Lutticken // Dev. Biol. Stand. 1982. - Vol. 51. - P. 211-219.

117. Bayyari, G.R. Pathogenicity studies of an Arkansas variant infectious bursadisease virus / G.R. Bayyari, J.D. Story, J.N. Beasley, J.K. Skeeles // Avian Dis.- 1996.-Vol. 40, N3.-P. 516-532.

118. Bayyari, G.R. The quantitation and comparison of infectious bursal disease virus neutralization endpoints using fluorometry and a fluorogenic vital stain / G.R. Bayyari, J.K. Skeeles, J.D Story // Poult. Sci. 1989. - Vol. 71. - P. 13031312.

119. Becht, H. Infectious bursal disease virus / H. Becht// Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1980. - Vol. 90. - P. 107-121.

120. Beet, H. Comparative studies on structural and antigenic properties of two serotypes of infectious bursal disease virus / H. Beet, H. Mller, H.K. Mller // J. Gen. Virol. 1988. - Vol. 69, N 3. - P. 631-640.

121. Benton, W.J. Physicochemical properties of infectious bursal agent (IBA)/ W.J. Benton, M.S. Cover, J.K. Rosenberger et al. // Avian Dis. 1967. - Vol. 11, N3.-P. 438-445.

122. Benton, W.J. Studies on the transmission of the infectious bursal agent (IBA) in chickens/ W.J.Benton, M.S. Cover, J.K. Rosenberger// Avian Dis. 1967. — Vol. 11, N 3. - P. 430-438.

123. Bottcher, B. Three-dimensional structure of infectious bursal disease virus determined by electron cryomicroscopy / B. Bottcher, N.A. Kiselev, V.Y. Stel'mashchuk et al.//J. Virol. 1997. - Vol. 71.-P. 325-330.

124. Box P.G. Potency of infectious bursal disease (IBD) killed vaccines/ P.G. Box // Poult. Intern. 1989. - Vol. 28, N 5. - P. 62.

125. Brown, F. The classification and nomenclature of viruses: Summary of results of meetings of the International Coramitee on Taxonomy of viruses in Sendai, September 1984 / F. Brown // Intervirology. 1986. - Vol. 25. - P. 141-143.

126. Brown, T.P. Spiking mortality of turkey poults. Experimental reproduction in isolation facilities / T.P.Brown, A.P.Garcia, L. Kelley// Avian Dis. 1997. — Vol. 41, N3.-P. 604-609.

127. Bublot, M. Use of a vectored vaccine against infectious bursal disease of chickens in the face of high-titred maternally derived antibody / M. Bublot, N. Pritchard, F.X. Le Gros, S. Goutebroze // J. Comp. Pathol. 2007. - Vol. 137, N l.-P. 81-84.

128. Bygrave, A.C. Mortality associated with Gumboro disease/ A.C. Bygrave, J.T. Faragher // Vet. Rec. 1970. - Vol. 86, N 25. - P. 758-759.

129. Cao San-jie; Wen Xin-tian; Xiao Chi; Zhang Huan-rong; Yang Li; Xiao Guo-sheng; Huang Xiao-bo. Preparation and preliminary application of diagnostic gene chip of several avian infectious. Acta veter.zootechn.sinica, 2006; T.37, N 4. -P. 356-360.

130. Cao, Y.C. Molecular characterization of seven Chinese isolates of infectious bursal disease virus: classical, very virulent and variant strains / Y.C. Cao, W.S. Yeung, M. Law et al. // Avian Dis. 1998. - Vol. 42, N 2. - P. 340-351.

131. Casnocha, E. Izolacia cytopatogenych kmenov virusu infekcnej burzitidy kurciat na bunkovych kulturach/ E. Casnocha// Vet. Med. 1980.- Vol.25, N 12.-P. 725-732.

132. Casnocha, E. Vyskyt choroby Gumboro, reap, infekcnej burzitidy v podmienkach vykrmu brojlerovych kurciat/ E. Casnocha// Veterinarstvi.-1980. Vol. 30,N3.-P. 128-131.

133. Cernik, K. Stabilita vakciny EVLORNIS proti infeckcni burzitidy / K. Cernik // Imunoprofylaxia. 1982. - N 2. - P. 55-60.

134. Chen, H.Y. Sequence analysis of the VP2 hypervariable region of nine infectious bursal disease virus isolates from mainland China / H.Y. Chen, Q. Zhou, M.F. Zhang et al. // Avian Dis. 1998. - Vol. 42, N 1. - P. 762-769.

135. Cheng Yu; Deng Xiao-yun; Gao Yu-long; Gao Hong-lei; Lin Huan; Wang Xiao-yan; Wang Xiao-mei. Development of monoclonal antibodies against VP3 of IBDV and Identification of antigenic epitopes. Acta veter.zootechn.sinica, 2006; T.37, N 12. P. 1323-1327.

136. Chettle, N.J. Comparison of virus neutralizing and precipitating antibodies to infectious bursal disease virus and their effect on susceptibility to challenge / N.J. Chettle, P.K.Eddy, P.J. Wyeth// Br. Vet. J.- 1985.- Vol.141, N2,-P. 146-150.

137. Chettle, N.J. Failure of maternally derived infectious bursal disease antibodies to serotypes 1 and 2 to protect against heterologous virus / N.J. Chettle, P.J. Wyeth //Br. Vet. J.-1989.-Vol. 145.-P. 165-169.

138. Chettle, N.J. Outbreak of virulent infectious bursal disease in East Anglia / N.J. Chettle, J.C. Huart, P.J. Wyeth// Vet. Rec. 1989.- Vol.125, N10,1. P. 271-272.

139. Chettle, N.J. The isolation of infectious bursal disease virus from turkeys in England / N.J. Chettle, P.K. Eddy, P.J. Wyeth // Br. Vet. J. 1985. - Vol. 141, N2.-P. 141-145.

140. Cheville, N.F. Studies on the pathogenesis ofGumboro disease in the bursal of Fabricius, spleen and thymus of the chicken / N.F. Cheville // Am. J. Pathol. -1967.-Vol. 51, N4.-P. 527-551.

141. Cho, B.R. Experimental dual infectious of chickens with bursal and Marek's disease agents. Preliminary observations on the effect of infectious bursal agent on Marek's disease / B.R. Cho // Avian Dis. 1970. - Vol. 14, N 4 - P. 665-675.

142. Coletti, M. Efficacia di un vaccino somministrato in «ovo» contro la malattia di Gumboro / M. Coletti, E. Del Rossi, M.P. Franciosini et al. // Avian Dis. -2001.-Vol. 45, N4.-P. 1036-1043.

143. Coletti, M. Immunodepressione da malattia di Gumboro / M. Coletti// Selez. veter.- 1997.-N 8-9.-P. 611-628.

144. Coman, T. Raspunsul imun indus de unele tulpini de virus al bursitei infectioase aviare utilzate in prepararea vaccinului inactivat uleios / T. Coman, S. Coman, I. Gugiu et al. // Zootechn. Medic. Veter. 1990. - Vol. 50, N 2. - P. 30-38.

145. Confer, A.W. Sequential mitogen stimulation of peripheral blood lymphocytes from chickens inoculated with infectious bursal disease virus / A.W. Confer, W.T. Springer, S.M.Shane et al. // Am. J. Vet. Res.- 1981.- Vol. 42.-P. 2109-2113.

146. Cosgrove A.S. An apparently new disease of chickens avian nephrosis/ A.S. Cosgrove // Avian Dis. 1962 - Vol. 6, N 2. - P. 385-389.

147. Craft, D.W. Effects of standard and variant strains of infectious bursal disease virus on infections of chickens / D.W. Craft, J. Brown, P.D. Lukert. // Am. J. Vet. Res. 1990. -Vol. 51.-P. 1192-1197.

148. Cursiefen, D. Evaluation of a vaccine against infectious bursal disease in field trials / D. Cursiefen, E. Vielitz, H. Landgraf et al. // Avian Pathol.- 1979-Vol. 8, N4.-P. 341-351.

149. Cursiefsen, D. Loss of virulence in a small plaque mutant of the infectious bursal disease virus / D. Cursiefen, I. Kaufer, H. Becht// Arch. Virol. 1979. -Vol. 59.-P. 39-46.

150. De Herdt, P. Significance of infectious bursal disease serology in an integrated quality control program under European epidemiologic conditions / P. De Herdt, R. Ducatelle, E. Uyttebroek et al. // Avian Dis. 2000. - Vol. 44, N 3. - P. 611617.

151. Dobos, P. Biophysical and biochemical characterization of five animal viruses with bisegmented double-stranded RNA genomes / P. Dobos, B.J. Hill, R. Hallet et al. // J. Virol. 1979. - Vol. 32. - P. 593-605.

152. Dobos, P. Peptide map comparison of the infectious bursal disease virus / P. Dobos // J. Virol. 1979. - Vol 32, N 3. - P. 1046-1050.

153. Dohms, J.E. Criteria for evaluating immunosuppression/ J.E.Dohms, Y.M. Saif// Avian Dis. 1984 - Vol. 28, N 2. - P. 305-310.

154. Dohms, J.E.Plasma cell quantitation in the gland of harder during infectious bursal disease virus infection of3-week-old broiler chickens/ J.E.Dohms, K.P. Lee, J.K. Rosenberger et al. // Avian Dis. 1988. - Vol. 32, N 4. - P. 624631.

155. Dohms, J.E. The effect of infectious bursal disease virus infection on local and systemic antibody responses following infection of 3-week-old broiler chickens / J.E. Dohms, J.S. Jaeger // Avian Dis. 1988. - Vol. 32, N 4. - P. 632-640.

156. Dupuis, L. Modern veterinary vaccine adjuvants: from Freund adjuvant to nanoparticles I L. Dupuis II Immunopatentiators in modern Vaccine. Prague, 2002. - P. 2.

157. Eddy, R.K. Antibody responses to infectious bursal disease virus serotypes 1 and 2 in ducks / R.K. Eddy // Vet. Rec. 1990. - Vol. 127, N 15. - P. 382.

158. Edgar, S.A. Immunization of chickens for the control of infectious bursal disease / S.A. Edgar, Y. Cho // Poult. Sci. 1973. - Vol. 52. - P. 492-497.

159. Edwards, K.R. Duration of immunosuppression caused by a vaccine strain of infectious bursal disease virus / K.R. Edwards, J.C. Muskett, D.H. Thornton // Res. Vet. Sci. 1982. - Vol. 32, N 1. - P. 79-83.

160. Eidson, C.S. Comparison of inactivated and live infectious bursal disease virus vaccines in White Leghorn breeder flock / C.S. Eidson, J. Gelb, P. Villegas // Poult. Sci. 1980. - Vol. 59, N 12. - P. 2708-2716.

161. Eterradossi, N. Antigenic and genetic relationships between European very virulent infectious bursal disease viruses and an early West African isolate / N. Eterradossi, C. Arnauld, F. Tekaia et al.// Avian Pathol. 1999.- Vol.28, N l.-P. 36-46.

162. Eterradossi, N. Progress in the diagnosis and prophylaxis of infectious bursal disease in poultry / N. Eterradossi // Comprehensive reports on technical presented to the International Committee or to regional Commissions. Paris, 1995.-P. 75-82.

163. Fabris, G. Valutazione di due programmi vaccinali contro la bursite infettiva in broiler / G. Fabris, L. Gavazzi, T. Rampin et al. // La Selezione Veterinaria. -2000.-N8-9-P. 609-617.

164. Faragher, J.T. Immunosuppressive effect of infectious bursal agent on vaccination against Newcastle disease / J.T. Faragher, W.H. Allan, P.J. Wyeth // Vet. Rec. 1974. - Vol. 95, N 17 - P. 385-388.

165. Farghaly, A.A. Infectious bursal disease in pigeon and chicken / A.A. Farghaly, A. Abd el Raouf, H.Amin// Assiut Vet. Med. J. 2000.- Vol.43, N85.-P. 354-373.

166. Fodor, I. Induction of protective immunity in chickens immunised with plasmid DNA encoding infectious bursal disease virus antigens /1. Fodor, E. Horvaih, N. Fodor et al. // Ada Vet. Hung. 1999. - Vol. 47. - P. 481-492.

167. Gagic A.; Residbegovic E.; Kavazovic A.; Alibegovic-Zecic F.; Kustura A.; Goletic T.; Softie A. Efficacy of the vaccine GUMBOKAL® IM FORTE SPF against infectious bursal disease under field conditions. Praxis veter., 2004; T.52, N 1-2. P. 141-148.

168. Gelb, J. Studies on interferon induction by infectious bursal disease virus (IBDV). I. Interferon production in chicken embryo cell cultures infected with IBDV / J. Gelb, C.S. Eidson, S.H. Kleven // Avian Dis. 1979. - Vol. 23, N 2. -P. 485-492.

169. Giambrone, J.J. IBD spray vaccination: if water fails, try it. / J.J. Ciambrone // Broiler Ind. 1984. - Vol. 47, N 10. - P. 52-54.

170. Giambrone J.J. Evaluation of the immunogenicity, stability, pathogenicity and immunodepressive potential of four commercial live infectious bursal disease vaccines / J.J. Ciambrone, R.P. Clay // Poult. Sci. 1986. - Vol. 65. - P. 12871290.

171. Giambrone, J.J. Effect of infectious bursal agent on the response chickens to Newcastle disease and Marek's disease vaccination/ J.J. Ciambrone, C.S. Eidson, R.K. Page // Avian Dis. 1976. - Vol. 20, N 3. - P. 534-544.

172. Giambrone, J.J. Effects of early infectious bursal disease virus infection on immunity to Newcastle disease in adult chickens / J.J. Ciambrone // Poult. Sci. 1979. - Vol. 58, N 4. - P. 794-798.

173. Giambrone, J.J. Experience with Gumboro disease vaccines / J.J. Ciambrone // Broiler Ind. 1983. - Vol. 10, N 3. - P. 80-87.

174. Giambrone, J.J. Experimental infection of turkeys with infectious bursal disease virus / J.J. Ciambrone, O.J.Fletcher, P.D. Lukert et al.// Avian Dis. 1978.1. Vol. 22.-P. 454-458.

175. Giambrone, J.J. Field trials with an oil emulsion infectious bursal disease vaccine in broiler breeder pullets / J.J. Ciambrone // Poult. Sci. 1982. - Vol. 81, N9.-P. 1823-1827.

176. Giambrone, J.J. Infectious bursal disease virus variants termed emerging problem / J.J. Ciambrone // Poult. Dig. 1987. - Vol. 46, N 541. - P. 116-120.

177. Giambrone, J.J. Interaction of aflatoxin with infectious bursal disease virus infection in young chickens / J.J. Ciambrone, R.D. Wyatt, M. Partadiredja et al. // Avian Dis. 1978. - Vol. 22, N 3. - P. 451-454.

178. Giambrone, J.J. Safety and efficacy of in ovo administration of infectious bursal disease viral vaccines / J.J. Ciambrone, T. Dormitorio, T. Brown // Avian Dis. -2001.-Vol. 45, N 1. P. 144-148.

179. Giambrone, J.J. Specific suppression of the bursa-dependent immune system of chicks with infectious bursal disease virus / J.J. Ciambrone, J.P. Donahoe, D.L. Dawe et al. // Am. J. Vet. Res. 1977. - Vol. 38, N 5. - P. 581-583.

180. Giambrone, J.J. Vaccination of day-old broiler chicks against Newcastle disease and infectious bursal disease using commercial live and/or inactivated vaccines / J.J. Ciambrone, R.P. Clay//Avian Dis. 1986. - Vol. 30, N3.-P. 557-561.

181. Goddard, R.D. Vaccination of commercial layer chicks against infectious bursal disease with maternally derived antibodies / R.D. Goddard, P J. Wyeth, W.C. Varney // Vet. Rec. 1994. - Vol. 135, N 12. - P. 273-274.

182. Guittet M., G. Meulemans, H. Vindevogel, J.-P. Duchatel.Avian vaccines II Vet. Vaccinology. Amsterdam, Netherlands, 1997. - P. 395-400.

183. Haddad, E.E. Efficacy of a novel infectious bursal disease virus immune complex vaccine T broiler chickens / E.E. Haddad, C.E. Wrutfill, A.P. Avakian et al. // Avian Dis. 1997. - Vol. 41. - P. 882-889.

184. Haffer, K. Field test studies of the 2512 strain of infectious bursal disease / K. Haffer // Avian Dis. 1982. - Vol. 26, N 4. - P. 847-851.

185. Hassan M.K. ery Virulent infectious bursal disease virus in egypt: epidemiology, isolation and immunogenicity of classic vaccine. Veterinary Research, 2004; Vol.28, № 4. P. 347-356.

186. Hassan, M.K. Antigenicity, pathogenicity, and immunogenicity of small and large plaque infectious bursal disease virus clones / M.K. Hassan, C.K. Nielsen, L.A. Ward et al. // Avian Dis. 1996. - Vol. 40, N 4. - P. 832-836.

187. Hassan, M.K. Pathogenicity, attenuation, and immunogenicity of infectious bursal disease virus / M.K. Hassan, M.Q. Al-Natour, L.A. Ward et al. // Avian Dis. 1996. - Vol. 40, N 3. - P. 567-571.

188. Heine, H.G. Infectious bursal disease virus structural protein VP2 expressed by a fowlpox virus recombinant confers protection against disease in chickens / H.G. Heine, D.B. Boyle // Arch. Virol. 1993. - Vol. 131. - P. 277-292.

189. Henry, C.W. The detrimental effect of vaccinating parentally immune broilers with a modified live virus vaccine for infectious bursal disease / C.W. Henry, W.P. Williams // Avian Dis. 1980. - Vol. 24, N 4. - P. 1021-1026.

190. Hirai, K. Characterization of immunosuppression in chickens by infectious bursal disease virus / K. Hirai, K. Kunihiro, S. Shimakura // Avian Dis. 1979. -Vol. 23, N4.-P. 950-965.

191. Hirai, K. Electron-microscope characterization of infectious bursal disease virus / K. Hirai, E. Kawamoto, S. Shimakura// Avian Dis. 1974.- Vol. 13, N3.-P. 467-471.

192. Hirai, K. Further morphological characterization and structural proteins of infectious bursal disease virus / K. Hirai, N. Kato // J. Virol. 1979. - Vol. 32, N l.-P. 323-328.

193. Hirai, K. Immunodiffusion reaction to avian infectious bursal virus / K. Hirai, M. Hirose, S. Shimakura// Avian Dis. 1972. - Vol. 16, N 4. - P. 961-964.

194. Hirai, K. In vitro replication of infectious bursal disease virus m established lymphoid cell lines and chicken B lymphocytes / K. Hirai, B.W. Calnek // Infect. Immun. 1979. - Vol. 25. - P. 964-970.

195. Hirai, K. Infectious bursal disease of chickens / K. Hirai // Jpn. Agr. Res. Q. -1980.-Vol. 14, N l.-P. 46-51.

196. Hirai, K. Sequential changes in the number of surface immunoglobulin-bearing B lymphocytes in infectious bursal disease virus-infected chickens / K. Hirai, T. Funakoshi, T. Nakai et al. // Avian Dis. 1981. - Vol. 25, N 2. - P. 484-496.

197. Hirai, K. Some properties of precipitating antigens associated with infectious bursal disease virus / K. Hirai, E. Kawamoto, S. Shimakura // Infect. Immun. -1974.-Vol. 10, N6.-P. 1235-1240.

198. Hirai, K. Structure of infectious bursal disease virus / K. Hirai, S. Shimakura// J. Virol. 1974. - Vol. 14, N 4. - P. 957-964.

199. Hirai, K. The immunodepressive effect of infectious bursal disease virus in chickens/ K. Hirai, E. Kawamoto, S. Shimakura// Avian Dis. 1974.-Vol. 18.-P. 50-57.

200. Hitchner, S.B. Immunization of adult hens against infectious bursal disease virus / S.B. Hitchner // Avian Dis. 1976. - Vol. 20, N 3. - P. 611-613.

201. Hitchner, S.B. Infectivity of infectious bursal disease virus for embryonating eggs/S.B. Hitchner//Poult. Sci.- 1970.-Vol. 49, N2.-P. 511-516.

202. Hovi, T. Stimulation of chicken lymphocytes by T- and B-cell mitogens / T. Hovi, J. Auni, L. Hortling et al. // Clin. Exp. Immunol. 1978. - Vol. 23, N 2. -P. 154-164.

203. Hudson, P.J. Genomic structure of the large RNA segment of infectious bursal disease virus / P.J. Hudson, N.M. McKern, B.E. Power et al. // Nucleic Acids Res. 1986. - Vol. 14. - P. 5001-5012.

204. Hudson, P.J. Predicted sequence of the hostprotective immunogen of infectious bursal disease virus / P.J. Hudson, N.M. McKern, K.J. Fahey et al. // FEBS Lett. 1986. - Vol. 201, N 1. - P. 143-146.

205. Ide, P.R. Broiler breeder vaccination against infectious bursal disease and persistence of maternal antibodies in progeny / P.R. Ide, J.A. Schulte-Nordholt, W.F. Dewitt et al. // Can. Vet. J. 1978. - Vol. 19, N 5. - P. 123-127.

206. Ide, P.R. Infectious bursal agent vaccination of chickens from infectious bursal agent-vaccinated dams / P.R. Ide // Can. Vet. J. 1979. - Vol. 20. - P. 35-44.

207. Inoue, M. Susceptibility of chicken monocytic cell lines to infectious bursal disease virus / M. Inoue, H. Yamamoto, K. Matuo et al. // J. Vet. Med. Sci. -1992.-Vol. 54.-P. 575-577.

208. Inoue, M. Thymic lesions in chicken infected with infectious bursal disease / M. Inoue, M. Fukuda, K. Miyano // Avian Dis. 1994. - Vol. 38, N 4. - P. 839-846.

209. Ismail, N.M. Differentiation between antibodies to serotypes 1 and 2 infectious bursal disease viruses in chicken sera / N.M. Ismail, Y.M. Saif // Avian Dis. -1990. Vol. 34. - P. 1002-1004.

210. Ismail, N.M. Infectious bursal disease virus variant from commercial leghorn pullets/ N.M. Ismail, Y.M. Saif, W.L Wigle et al. // Avian Dis.- 1990.-Vol. 34, N 1. -P. 141-145.

211. Ismail, N.M.Lack of pathogenicity of five serotype 2 infectious bursal disease viruses in chickens / N.M. Ismail, Y.M. Saif, P.D. Moorhead // Avian Dis.1988. Vol. 32, N 4. - P. 757-759.

212. Jackwood, D.H. Antigenic diversity of infectious bursal disease viruses/ D.H. Jackwood, Y.M. Saif// Avian Dis. 1987. - Vol. 31, N 4. - P. 766-770.

213. Jackwood, D.J. Characteristics of a very virulent infectious bursal disease virus from California/ D.J. Jackwood, S.E. Sommer-Wagner, A.S. Stoute// Avian Dis. 2009. - Vol. 53, N 4. - P. 592-600.

214. Jackwood, D.J. Restriction fragment length polymorphisms in the VP2 gene of infectious bursal disease viruses from outside the United States / D.J. Jackwood, S.E. Sommer//Avian Dis. 1999. - Vol. 43, N2.-P. 310-314.

215. Jackwood, D.J. The use of gamma irradiation for the inactivation of infectious bursal disease viruses / D.J. Jackwood, S.E. Sommer-Wagner, H.J. Pharo // Avian Dis. 2007. - Vol. 51, N 2. - P. 606-608.

216. Jeurissen, S.H. The working mechanism of an immune complex vaccine that protects chickens against infectious bursal disease / S.H. Jeurissen, E.M. Janse,

217. P.R. Lehrbach et al. // Immunology. 1998. - Vol. 95. - P. 494-500.

218. Kaufer, I. Electron-microscope studies on the pathogenesis of infectious bursal disease after intrabursal application of the causal virus / I. Kaufer, E. Weiss // Avian Dis. 1976. - Vol. 20. - P. 483-495.

219. Kaufer, I. Significance of bursa Fabricius as target organ in infectious bursal disease of chickens / I. Kaufer, E. Weiss// Infect. Immun. 1980.- Vol.27, N2.-P. 364-367.

220. Kibenge, F.S.B. Biochemistry and immunology of infectious bursal disease virus / F.S.B. Kibenge, A.S. Dhillon, R.G.Russell// J. Gen. Virol.- 1988. -Vol. 69, N8.-P. 1757-1775.

221. Kibenge, F.S.B. Growth of serotypes I and II and variant strains of infectious bursal disease vero in vitro cells / F.S.B. Kibenge, A.S. Dhillon, R.G. Russell // Avian Dis. 1988. - Vol. 17. - P. 298-303.

222. Kibenge, F.S.B. Identification of serotype II infectious bursal disease virus proteins / F.S.B. Kibenge, A.S. Dhillon, R.G.Russell// Avian Pathol. 1988.-Vol. 17, N3.-P. 679-687.

223. Kim, I.J. Enhanced expression of cytokine genes in spleen macrophages during acute infection with infectious bursal disease virus in chickens / I.J. Kim, K. Karaca, T.L. Pertile et al.// Vet. Immunol. Immunopathol. 1998. — Vol. 61.-P. 331-341.

224. Kim, S.J. Protection against very virulent infectious bursal disease virus in chickens immunized with DNA vaccines / S.J. Kim, H.W. Sung, J.H. Han et al. // Vet. Microbiol. 2004. - Vol. 101, N 1.-P. 39-51.

225. Komine, K. Complement activation by infectious bursal disease virus and its relevance to virus growth in the lymphoid cells / K. Komine, H. Ohta, S. Kamata//Jpn. J. Vet. Sci. 1989. - Vol. 51, N 6. - P. 1259-1262.

226. Lambrecht, B. Production of antibodies against chicken interferondemonstration of neutralizing activity and development of a quantitative ELISA / B. Lambrecht, M. Gonze, G. Meulemans et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. -2000.-Vol. 74.-P. 137-144.

227. Landgraf, H. New prophylactic aspects of gumboro vaccination / H. Landgraf// Poult. Int. 1986. - Vol. 25, N 2. - P. 64, 66-67.

228. Lasher, H.N. Infectious bursal disease / H.N. Lasher, S.M.Shane// World's Poult. Sci. J.-1994.-Vol. 50-P. 133-166.

229. Lin, Z. Sequence comparisons of a highly virulent infectious bursal disease virus prevalent in Japan / Z. Lin, A. Kato, Y. Otaki et al. // Avian Dis. 1993. -Vol. 37, N2.-P. 315-323.

230. Lindblad, E.B. Aluminium adjuvants- in retrospect and prospect/ E.B. Lindblad // Vaccine. 2004. - Vol. 22, Iss. 27-28. - P. 3658-3668.

231. Lucio, B. Prevention of infectious bursal disease (IBD) by feeding IBD virusimmune bovine colostrum / B. Lucio, R.D. Schultz // Vet. Immunol.1.munopathol. 1980. - Vol. 1, N 4. - P. 379-386.

232. Lucio, B. Response of susceptible versus immune chicks to killed, live modified, and wild infectious bursal disease virus vaccines / B. Lucio, S.B. Hitchner // Avian Dis. 1979. - Vol. 23, N 4. - P. 1037-1050.

233. Lukert, P.D. A history of an IBD vaccine / P.D. Lukert// Select Laboratories Interlink. 1992. - Vol. 1. - P. 2-4.

234. Lukert, P.D. Infectious bursal disease/ P.D. Lukert, Y.M. Saif// Diseases of Poultry. USA: Blackwell Publishing Company, 2003. - Vol. 9. - P. 829-849.

235. Maganja D.B.; Krapez U.; Mankoc S.; Toplak I.; Grom J.; Hostnik P.; Rojs O.Z. New approaches in diagnostic and typing of viruses causing diseases in poultry. Praxis veter., 2004; Vol.52, N 1-2. P. 19-26.

236. Mahardika, G.N.K. Mapping of cross-reacting and serotype-specific epitopes on the VP3 structural protein of infectious bursal disease virus / G.N.K. Mahardika, H. Becht // Arch. Virol. 1995. - Vol. 140. - P. 765-774.

237. Marquardt, W.W. An indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for measuring antibodies in chickens infected with infectious bursal disease virus / W.W. Marquardt, R.B.Johnson, W.F. Odenwald et al.// Avian Dis. 1980. -Vol. 24.-P. 375-385.

238. Mazariegos, L.A. Pathogenicity and immunosuppressive properties of infectious bursal disease «Intermediate» strains / L.A. Mazariegos, P.D. Lukert, J. Brown // Avian Dis. 1990. - Vol. 34, N 1. - P. 203-208.

239. McFerran, J.B. Isolation and serological studies with infectious bursal disease viruses from fowl, turkeys and ducks: demonstration of a second serotype /

240. J.B. McFerran, M.S. McNulty, E.R. McKillor et al.// Avian Pathol.- 1980. -Vol. 9.-P. 395-404.

241. McIlroy, S.G. Economic effect of subclinical infectious bursal disease on broiler production/ S.G. Mcllroy, E.A. Goodall, P.M.McCracken// Avian Pathol.-1989.-Vol. 18, N3.-P. 465-480.

242. McKercher, P.D. Adjuvants immunizing activity I P.D. McKercher II 171h Conf. O.I.E. FMD Com. - Paris, 1986. - P. 389-390.

243. McKercher, P.D. Oil adjuvants: Their use in veterinary biologist I P.D. McKercher II Advances in carriers and adjuvants for veterinary biologies. -Ames, USA, 1986.-267 p.

244. McNulty, M.S. Antigenic relationship of non-serotype 1 turkey bursal disease virus / M.S. McNulty, Y.M. Saif// Avian Dis. 1988. - Vol. 32, N 2. - P. 374375.

245. McNulty, M.S. Isolation of infectious bursal disease virus from turkeys/ M.S. McNulty, G.M. Allan, J.B. McFerran // Avian Pathol. 1979. - Vol. 8. -P. 205-212.

246. Melchior, I.W Attenuated infectious bursal disease vims strain and vaccine interferon: пат. 4824668 США: A 61 К 35/76 / I.W Melchior, E. Melson; заявл. 09.05.87; опубл. 25.04.89.

247. Mendes, A.R. Experimental infectious bursal disease in the ostrich (Struthio camelus) / A.R. Mendes, M.C.R. Luvizotto, H.F. Ferrari // J. Сотр. Pathol. -2007. Vol. 137, N 4. - P. 256-258.

248. Meulemans, G. Efficacy of some disinfectants against infectious bursal disease virus and avian reovirus / G. Meulemans, P. Halen// Vet. Rec. 1982. — Vol. 111, N 18. - P. 412-413.

249. Minta Z.; Domanska-Blicharz K.; Bartnicka В.; Smietanka K. Applying immunoperoxidase and antigen-capture ELISA methods for rapidly diagnosing infectious bursal disease/ 2006; Vol.62, N 3. P. 335-338

250. Mller, H. Formation, characterization and interfering capacity of a small plaque mutant and of incomplete virus particles of infectious bursal disease virus / H. Mller, H. Lange, H. Becht // Virus Res. 1986. - Vol. 4. - P. 297-309.

251. Mller, H. Molecular weight determination of the two segments of double stranded RNA of infectious bursal disease virus, a member of the birnavirus group / H. Mller, R. Nitschke // Med. Microbiol. Immunol. 1987.- Vol. 176, N l.-P. 113-121.

252. Mller, H. Replication of infectious bursal disease virus in lymphoid cells / H. Mller // Arch. Virol. 1986. - Vol. 87, N 3-4. - P. 191-203.

253. Mller, H. The genome of infectious bursal disease virus consists of two segments of double-stranded RNA/ H. Mller, C. Scholtissek, H Becht// J. Virol. 1979. - Vol. 31. - P. 584-589.

254. Mller, H. The two segments of the infectious bursal disease virus genome are circularized by a 90,000-Da protein / H. Mller, R. Nitschke // Virology. -1987.-Vol. 159.-P. 174-177.

255. Mo, C.W. The in vivo and in vitro effects of chicken interferon alpha on infectious bursal disease virus and Newcastle disease virus infection / C.W. Mo, Y.C. Cao, B.L. Lim // Avian Dis. 2001. - Vol. 45, N 2. - P. 389-399.

256. Moradian, A. Single and combined infections of specific-pathogen free chickens with infectious bursal disease virus and an intestinal isolate of reovirus / A. Moradian, J. Thorsen, R.J. Julian // Avian Dis. 1990. - Vol. 34, N 1. - P. 63-72.

257. Morgan, M.M. Sequence of the small double-stranded RNA genomic segment of infectious bursal disease virus and its deduced 90-kDa product / M.M.Morgan, I.G. Macreadie, V.R. Harley etal.// Virology.- 1988. — Vol. 163.-P. 240-242.

258. Mostov, K. Immunoglobulin transport and the polymeric immunoglobulin receptor / K. Mostov, C.S. Kaetzel // Mucosal Immunology / eds. P. L. Ogra et al.; 2nd ed. San Diego: Academic Press, 1999. - P. 181-212.

259. Muirhead, S. Improved disease protection comes from liposome-adjuvanted vaccines / S. Muirhead // Feedstuffs. 1988. - Vol. 60, N 39. - P. 12.

260. Muller H, Islam MR, Raue R. Research on infectious bursal disease—the past, the present and the future. Vet Microbiol. 2003. Vol - 97 №1-2:153-165.

261. Mundt, E. Identification of a novel viral protein in infectious bursal disease virus-infected cells / E. Mundt, J. Beyer, H. Mller// J. Gen. Virol. 1995,1. Vol. 76.-P. 437-443.

262. Mausa S., Solimán A., Gad N. et al. Immune response and pathogenicity of commercially available infectious bursal disease vaccines// Aust. Vet. Med. J., 1988, Vol. 20, № 39, P. 186-192.

263. Muskett, J.C. Comparison of two infectious bursal disease vaccine strains. Efficacy and potential hazards in susceptible and maternally immune birds / J.C. Muskett, I.Q. Hopkins, K.R. Edwards et al. // Vet. Res. 1979. - Vol. 104, N 15.-P. 332-334.

264. Nakamura, T. The effect of route of inoculation on protection by killed vaccines in chickens / T. Nakamura, S. Hoshi, Y. Nagasawa et al. // Avian Dis. 1995. -Vol. 39, N3.-P. 507-513.

265. Naqi S.A. An evaluation of three commercially available infectious bursal disease vaccines / S.A. Naqi, D.L. Millar// Avian Dis. 1980. - Vol. 24, N 1. -P. 233-240.

266. Nemarnik, D. Nalaz Specificnik protutijela virusa bolesti fabricijeve burze u roditelja vassiniranih Gumbokal — inaktiviranom uljnom vakcinom i njihokin potomaka / D. Nemarnik, Z. Bidin // Prax. Vet. 1986. - N 1-2. - P. 113-119.

267. Nick, H. Structural and growth characteristics of infectious bursal disease virus / H. Nick, D. Cursiefen, H. Becht // J. Virol. 1976. - Vol. 18, N 1. - P. 227-234.

268. Rautenschlein, S. Comparative immunopathogenesis of mild, intermediate, and virulent strains of classic infectious bursal disease virus / S. Rautenschlein, H.Y. Yeh, J.M. Sharma // Avian Dis. 2003. - Vol. 47, N 1. - P. 66-78.

269. Rauw F. Pivotal role ofChlFNy in the pathogenesis and immunosuppression of infectious bursal disease / F. Rauw, B. Lambrecht, T. Van den Berg// Avian Pathol. 2007. - Vol. 36, N 5. - P. 367-374.

270. Reece, R.L. Studies on a vaccine against infectious bursal disease / R.L. Reece, J.A. Gould, M. Hindmarsh // Aust. Vet. J. 1982. - Vol. 59, N 1. - P. 27-29.

271. Repp, H. Infectious bursal disease virus changes the potassium current properties of chicken embryo fibroblasts / H. Repp, H. Nieper, H.J. Draheim et.al. // Virology. 1998. - Vol. 246, N 2. - P. 362-369.

272. Rosales, A.G. Pathogenicity of recent isolates of infectious bursal disease virus inproperties of chicken embryo fibroblasts / H. Repp, H. Nieper, H.J. Draheim et.al. // Virology. 1998. - Vol. 246, N 2. - P. 362-369.

273. Rosemberger, J.K. Immunisation studies with a cell-culture-adapted infectious bursal disease virus / J.K. Rosenberger, S. Klopp, R.J. Eckroade et al. // Avian Dis. 1979. - Vol. 23. - P. 456-465.

274. Rosemberger, J.K. Response to several avian respiratory viruses as affected by infectious bursal disease virus / J.K. Rosenberger, J. Gels // Avian Dis. -1978.-Vol. 22.-P. 95-105.

275. Rosenberger, J.K. Effects of the androgen analog mibolerone on clinical and subclinical infectious bursal disease / J.K. Rosenberger, S.S. Cloud // Avian Dis. 1980. - Vol. 24, N 1. - P. 247-256.

276. Rosenberger, J.K. Immunogenicity of viable and inactivated preparations of infectious bursal disease virus: / J.K.Rosenberger, S.S.Cloud// Proc. 124th Annu. Meeting Am. Vet. Med. Assoc., 1987. N 212.

277. Rosenberger, J.K. Isolation and characterization of variant infectious bursal disease viruses: / J.K. Rosenberger, S.S. Cloud // J. Am. Vet. Med. Assoc. -1985.-Vol. 189.-P. 357.

278. Ruiz-Feria, C.A. Arginine and Vitamin E improve the antibody responses to infectious bursal disease virus (IBDV) and sheep red blood cells in broiler chickens/ C.A. Ruiz-Feria, S.T. Abdukalykova// Br. Poult. Sci. 2009.-Vol. 50, N3.-P. 291-297.

279. Saif Y.M. Infectious bursal disease and hemorrhagic enteritis. Poult Sci. 1998. -Vol. -77. №8:1186-1189.

280. Sakata, M. What's IBD and its effective way of prevention// Niwatori no Kenkyu. 1983. - Vol. 58, N 4. - P. 47-51.

281. Sanchez, L. Montanide ISA 50 as a vaccine adjuvant against avina mycoplasmosis I L. Sanchez II 2th Int. Workshop on Vaccine Adjuvants and Glycoconjugates. Gavana, Cuba, 2004. - P. 52.

282. Savic V.; Curie S.; Sane G. Clinical study on live infectious bursal disease vaccine GUMBOKAL® IM FORTE SPF in broilers/ Praxis veter., 2004; Vol.52, N 1-2. P. 127-134.

283. Savic, V. Epidemic of infectious bursal disease in Croatia during the period 1995-1996: field and experimental observations / V. Savic, Z. Bidin, S. Cajavec et al. // Vet. Arh. 1997. - N 67. - P. 243-251.

284. Shakya, S. Organ culture of chicken bursa as a model to study the pathogenicity of infectious bursal disease virus isolates/ S. Shakya, R.K. Joshi, N. Gupta etal.// Avian Dis. 1999. -Vol. 43, N 2. - P. 167-171.

285. Sharma, J.M.Avian vaccine effective against infectious bursal disease virus: пат. 20040146530 США, МПК З A 61 К 39/12 / J.M. Sharma; заявл. 26.03.04; опубл. 29.07.04.

286. Sharma, J.M. Mechanisms of immunosuppression by infectious bursal disease virus of chicken / J.M. Sharma, T.L. Fredncksen // Proc. Avian Immunol. -1987. Vol. 238. - P. 283-294.

287. Sheppard, M. Fowl adenovirus recombinant expressing VP2 of infectious bursaldisease virus induces protective immunity against bursal disease / M. Sheppard, W. Werner, E. Tsatas et al. //Arch. Virol. 1998. - Vol. 143. - P. 915-930.

288. Skeeles, J.K. Studies with an attenuated cell-culture-adapted infectious bursal disease virus: replication sites and persistence of the virus in specific-pathogen-free chickens / J.K. Skeeles, P.D. Lukert // Avian Dis. 1980. - Vol. 24, N 1. -P. 43-47.

289. Snedeker, C. Some studies on the infectious bursal agent/ C. Snedeker, F.K. Wills, I.M. Moulthrop // Avian Dis. 1967. - Vol. 11, N 4. - P. 519-528.

290. Snyder, D.B. Naturally occurring neutralizing monoclonal antibody escape vanants defi the epidemiology of infectious bursal disease viruses in the United States/ D.B.Snyder, V.N. Vakhana, P.K. Savage// Arch. Virol.- 1992,-Vol. 127.-P. 89-101.

291. Solimán S.M., Hamdy I A., Zaghloul A. W., El-Bordiny F. II Assiut Vet. Med. J. The use of binary ethylenimine and formalin as inactivants for production of inactivated Newcastle disease vaccine -1996. -Vol. 35, N 69. P. 157-165.

292. Stewart-Brown, B. Genetics and management of infectious bursal disesase / B. Stewart-Brown, D. Grieve. // Misset's World Poultry. 1992. - Vol. 8, N 6. -P. 65-68.

293. Stone, H.D. Efficacy of experimental Newcastle disease water-in-oil-emulsion vaccines formulated from squalare and squalene / H.D. Stone, X. Zuixun //Avian Dis. -1990. -Vol. 34. P. 979-983.

294. Stoute, S.T. The Diagnosis of very virulent Infectious Bursal Disease in California Pullets / S.T. Stoute, D.J. Jackwood, S.E. Sommer-Wagner// Avian Diseases. 2009. - Vol. 53, N 2. - P. 321-326.

295. Takase, K. Recovery of virus from feces and tissues of chickens infected with cell-culture-adapted infectious bursal disease virus / K. Takase, F. Nonaka, T. Fukuda et al. // Jpn. J. Vet. Sci. 1982. - Vol. 44, N 2. - P. 207-211.

296. Taukamoto, K. Improved preparation ofELISA antigen of infectious bursal disease virus/ K. Taukamoto, H. Obata, H. Hihara// Avian Dis. 1990.-Vol. 34, N 1. - P. 209-213.

297. Thornton, D.H. Quality control methods for inactivated infectious bursal disease vaccines / D.H. Thornton, J.C. Muskett// Dev. Biol. Stand. 1982. - Vol. 51. -P. 235-251.

298. Thornton, G. Mississipi IBD problem, solutions are explained / G. Thornton// Poult. Dig. 1982. - Vol. 41, N 490. - P. 604-605.

299. Todd, D. Biochemical studies with infectious bursal disease virus: comparison of some of its properties with infectious pancreatic necrosis virus / D. Todd, M.S. McNulty // Arch. Virol. 1979. - Vol. 60. - P. 265-277.

300. Toro H.; Van Santen V.L.; Li L.; Lockaby S.B.; Van Santen E.; Hoerr F.J. Epidemiological and experimental evidence for immunodeficiency affecting avian infectious bronchitis/ Avian Pathology, Dec2006, Vol. 35 JST® 6. P. 455464.

301. Tsukamoto, K. Efficacy of three live vaccines against highly virulent infectious bursal disease virus in chickens with or without material antibodies / K. Tsukamoto, N. Tanimura, S.Kakita// Avian Dis.- 1995.- Vol.39, N2.-P. 218-229.

302. Ture, O. Studies on antigenic relatedness of classic and variant strains of infectious bursal disease virus / O. Ture, H.J. Tsai, Y.M. Saif // Avian Dis. -1993. Vol. 37. - P. 647-654.

303. Vakharia, V.N. Molecular basis of antigenic variation in infectious bursal disease virus / V.N. Vakharia, J. He, B. Ahamed et al.// Virus Res. 1994.-Vol. 31.-P. 265-273.

304. Van den Berg, T.P. Acute infectious bursal disease in poultry immunological and molecular basis of antigenicity of a highly virulent strain / T.P. Van den Berg, M. Gonze, D. Morales et al. // Avian Pathol. 1996. - Vol. 25. - P. 751768.

305. Van den Berg, T.P. Acute infectious bursal disease in poultry isolation and characterization of a highly virulent strain / T.P. Van den Berg, M. Gonze, G.

306. Meulemans // Avian Pathol. 1991. - Vol. 20. - P. 133-143.

307. Van den Berg, T.P. Acute infectious bursal disease in poultry protection afforded by maternally derived antibodies and interference with live vaccination / T.P. Van den Berg, G. Meulemans // Avian Pathol. 1991. - Vol. 20. - P. 409421.

308. Van den Berg, T.P. Acute infectious bursal disease in poultry: a review / T.P. Van den Berg // Avian Pathol. 2000 - Vol. 29, N 3. - P. 175-194.

309. Van den Berg, T.P. Immunodepressive viral diseases in poultry: current situation and perspectives / T.P. Van den Berg // Lohmann Inf. 1995. - N 19. -P. 13-17.

310. Westbury, H.A. Interaction between infectious bursal disease virus and Newcastle disease virus in chickens / H.A. Westbury// Aust. Vet. J. 1978. — Vol. 54, N7.-P. 349-351.

311. Winterfield, R.W. Characteristics of apparent derivatives of the 2512 strain of infectious bursal disease virus when used as vaccines / R.W. Winterfield, A.S. Dhillon, H.L. Thacker // Avian Dis. 1981. - Vol. 25, N4. - P. 900-910.

312. Winterfield, R.W. Etiology of an infectious nephritis-nephrosis syndrome of chickens/ R.W. Winterfield, S.B. Hitchner// Am. J. Vet. Res.- 1962.-Vol. 23,N97.-P. 1273-1279.

313. Winterfield, R.W. Immune response and pathogenicity of different strains of infectious bursal disease virus applied as vaccines / R.W. Winterfield, H.L. Thacker//Avian Dis. 1978.-Vol. 22, N4.-P. 721-731.

314. Winterfield, R.W. Immunity response to the infectious bursal agent/ R.W. Winterfield // Avian Dis. 1969. - Vol. 13, N 3. - P. 548-557.

315. Winterfield, R.W. Infectivity and distribution of infectious bursal disease virus in the chickens. Persistence of the virus and lesions / R.W. Winterfield, A.M. Fadly, A. Bickford // Avian Dis. 1972. - Vol. 16, N 3. - P. 622-632.

316. Winterfield, R.W. Vaccination against infectious bronchitis and the immunosuppressive effects of infectious bursal disease/ R.W. Winterfield, F.I. Hoerr, A.M. Fadly // Poult. Sci. 1978. - Vol. 57, N 2. - P. 386-391.

317. Wood, G.W. Standardization of the quantitative agar gel precipitation test for antibodies to infectious bursal disease / G.W. Wood, J.C. Muskett, C.N. Hebert et al. // J. Biol. Stand. 1979. - Vol. 7, N 2. - P. 89-96.

318. Wood, G.W. The interaction of live vaccine and maternal antibody in protection against infectious bursal disease / G.W. Wood, J.C. Muskett, D.H. Thornton // Avian Pathol. 1981. - Vol. 10, N 3. - P. 365-373.

319. Wood, G.W. Use of inactivated oil emulsion infectious bursal disease vaccine in breeder chickens to prevent immunosuppression in progeny chiks / G.W. Wood, J.C. Muskett, D.H. Thornton // Res. Vet. Sci. 1983. - Vol. 35. - P. 114-115.

320. Wu, C.C. Molecular Detection and differentiation of infectious bursal disease virus / C.C. Wu, P. Rubinelli, T.L. Lin // Avian Dis. 2007. - Vol. 51, N 2. -P. 515-526.

321. Wyeth, P.J. Comparison of efficacy of four inactivated infectious bursal disease oil emulsion vaccines / P.J. Wyeth, N.J. Chettle // Vet. Rec. 1982. - Vol. 110, N 15.-P. 359-361.

322. Wyeth, P.J. Immune responses of breeding chickens to trivalent oil emulsion vaccines: responses to Newcastle disease and infectious bursal disease / P.J. Wyeth, R.E. Gough, G.A. Cullen// Vet. Rec.- 1981,- Vol.108, N4,-P. 72-75.

323. Wyeth, P.J. Improved performance of progeny of broiler parent chickens vaccinated with infectious bursal disease oil emulsion vaccine / P.J. Wyeth, J.D.P. O'Brien, G.A. Cullen // Avian Dis. 1981. - Vol. 25, N 1. - P. 228-241.

324. Wyeth, P.J. The use of inactivated infectious bursal disease oil emulsion vaccinein commercial broiler parent chickens / P.J. Wyeth, G.A. Cullen // Vet. Ree. -1979.-Vol. 104, N9.-P. 188-193.

325. Wyeth, P.J. Use of an inactivated bursal disease oil emulsion vaccine in commercial layer chicks/ P.J. Wyeth, N.J. Chettle, A.R. Mohepat // Vet. Ree. -1992.-Vol. 130.-P. 30-32.

326. Yadin, H. Investigations on live vaccines against infectious bursal disease of chicks / H. Yadin, J. Hoekstra, H.L. Oei et al.// Vet. Q. 1980.- Vol.2, N l.-P. 48-57.

327. Yao, K. Induction of apoptosis in vitro by the 17-kDa nonstructural protein of infectious bursal disease virus: possible role in viral pathogenesis / K. Yao, V.N. Vakharia // Virology. 2001. - Vol. 285, N 1. - P. 50-58.

328. Yu, D.H. Mechanism of suppression by bovine serum on growth of infectious bursal disease virus / D.H. Yu, H. Izawa, T. Kodami // Jpn. J. Vet. Sei. 1986. -Vol. 48, N6.-P. 1141-1146.

329. Zanella, A. Inactivated vaccines in oil emulsion in the control of the infectious diseases of poultry I A. Zanella, R. Marchi II Develop. Biol. Stand. -1981.-Vol. 5 l.-P. 19-32.

330. Zanella, A. Ricerche preliminari sulla riposta immunizaria alia vaccinazione con vaccino inattivato in veicolo oleoso contro la cosiddetta «Sindrome calo di deposizione 76» I A. Zanella, A. Poli, V. Bettoni II Selez. Suinavicunicola. -1978. -Vol. 39.

Информация о работе

Алиева, Айзанат Кадыровна
доктора биологических наук
Санкт-Петербург, 2011
ВАК 03.02.02

Диссертация

Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Иммунобиологические свойства бирнавируса птиц и разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы