Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Характеристика общего адаптационного синдрома у бычков при транспортировке и способы ограничения стресс-индуцированных повреждений
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Характеристика общего адаптационного синдрома у бычков при транспортировке и способы ограничения стресс-индуцированных повреждений"

■III11111111111111

003467603

На пр^^^^^т си

Лазарева Евгения Викторовна

Характеристика общего адаптационного синдрома у бычков при транспортировке и способы ограничения стресс-индуцированных повреждений

03.00.13- физиология

Авторефератдиссертации на еоисканиеученой степени кандидата биологических наук

Троицк,2009

Диссертационная работа выполнена в ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины)

Научньй руководитель

доктор биологических наук, профессор Таирова Альфия Рахимовна

Официальные оппоненты доктор биологических н^ к, профессор

Ефремов Георгий Георгиевич

доктор биологических наук, профессор Павлова Вера Ивановна

Веду щая ор ганизация

ФГОУ ВПО« Самар екая государственная сельскохозяйственная академия »

Защита состоится «14» мая 2009 г. в чаоов на заседании диссертационного совета Д220.066.02 при ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 457100, Челябинская область, г.Троицк, ул. Гагарина, 13, тел. 8 (35163) 2-04-72;8 (35163) 2-48-88; факс (35163) 2-04-72; E-mail: tvi @mail.ru, официалшый сайт: www.usavm.acxu.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины)

Авгорефератразослан« J » _2009г.

Ученьй секретарь диссертационного совета

ВагаповаОА.

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Транспортировка является одним из самых тяжелых стресс-факторов промышленного животноводства, по причине которой теряется до 30% ожидаемой продукции (А. Сало, 2008; И. Горлов, И. Осадченга, В Ран-делина и др., 2008), но, несмотря на известную изученность проблемы транспортного стресса, многие физиологические аспекты его проявления требуют дальнейшей разработки. Особо это касается изучения выраженности стрессовой реакции и установления закономерностей развития общего адаптационного синдрома, определения адаптационного потенциала самого организма животных, его приспособительных возможностей.

Необходимо также подчеркнуть, что гематологические исследования в условиях стресса часто ограничиваются представлениями о системе крови, как о мишени для стрессорных гормонов и нейромедиаторов, в то время, как современные представления гуманитарной медицины о механизмах индукции стресс-реакции, помимо нервной и эндокринной составляющих, рассматривают гематологическую компоненту в качестве узлового звена в формировании гормонально-метаболического статуса организма при экстремальных воздействиях и как генерализованной реакции гематологического стресс-синдрома системы крови (Ю.Г. Камскова и соавт., 2000). Однако сведения о метаболическом статусе организма бычков на клеточном и органном уровнях при различных экстремальных воздействиях, в частности, при транспортном стрессе, недостаточны, практически не изучены механизмы ограничения стресс-индуцированных повреждений.

Следует отметить, что в последние годы активно изыскиваются способы снижения пагубного воздействия стрессоров на организм животных (В. Попов, А.Сало, А. Черных и др., 2007; A.M. Монастырев, 2000; A.B. Степанов, 2005; А.П. Онищенко, 2007). При этом одним из высокотехнологичных направлений в системе обеспечения защиты здоровья животных в условиях промышленной технологии является применение эффективных и безопасных стимуляторов резистентности на основе природных полимеров: пептидов, нуклеиновых кислот, полисахаридов. Среди последних уникальным сочетанием свойств обладает хи-тин/хитозан - биосовместимый полимер с низкой токсичностью и высокой реакционной способностью (АЛ. Албулов, А.Я. Самуйленко, С.М. Шинкарев, 2004; Г.В.Мещерякова, 2006; C.B. Мерзляков, Л.Ю. Топурия, В.А. Клёнов, 2006; M. Bhanoori, G. Venkateswerlu, 2000; R. Terreux, M Domard, C. Viton, A. Domard, 2005; A.K. Singla, M. Chawla, 2001; A.B. Ильина, В.П. Варламов, 2001; 2005).

Вышеизложенное послужило основанием для изучения ряда морфологических и биохимических показателей крови бычгов при транспортном стрессе; возможности минимизации агрессивного воздействия транспортного стресса и концентрации защитных сил в ответ на потенциально повреждающий стимул путем применения производных хитин/хитозана.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение закономерностей развития общего адаптационного синдрома в организме бьниэв при экс-

тремальном воздействии транспортного стресса и механизмов ограничения стресс-инду циро ванных повреждений их организма препаратами хи-тин/хитозан.

Для реализации указанной цели были определены следующие задачи:

- изучить характер изменений клинико-физиологических параметров (температура тела, частота сердечных сокращений, частота и ритм дыхательных движений) организма бычков после транспортировки;

- оценить глубину воздействия транспортного стресс — фактора на организм бычков и продолжительность периода краткосрочной адаптации;

- установить закономерности функционирования организма бычков на клеточном и органном уровнях при экстремальном воздействии транспортного стресс-фактор а;

- выявить механизмы ограничения препаратами на основе хитан/хитозан стресс-индуцированных повреждений при транспортировке бычков;

- дать экономическое обоснование эффективности применения препаратов на основе хитин/хитозан при транспортном стрессе.

Научная новизна. Проведенные комплексные исследования по изучению динамики клинико-физиологических, морфологических и биохимических показателей крови бычков при транспортировке позволили дать характеристику реакции гематологического стресс-синдрома системы крови, выявить закономерности общего адаптационного механизма поддержания клеточного гомеостаза.

Впервые проведены исследования по ограничению хитиновыми биополимерами индукции транспортной стресс-реакции у бычков. Установлено ярко выраженное адаптогенное, антигипоксическое и антиоксидантное действие низкомолекулярных форм хитозана и су кцината хитозана (патент РФ на изобретение №2336693, приоритет от 02.042007). Доказана их способность снижать глубину воздействия транспортного стресс-фактор а на организм быч ков и сокращать период краткосрочной адаптации (заявка на изобретение № 2008118089/13(020879) «Оюсоб повышения адаптационных возможностей бычков в молочный период выращивания»).

Дано физиологическое обоснование к использованию в практике мясного скотоводства препаратов хитозана низкомолекулярного, сукцината хитозана высокомолекулярного и су кцината хитозана низко молекулярного. Данные препараты являются не только ад ап то генами и антигипоксантами, но и способны проявлять гиполипидемическое, антиоксидантное, антахолестеринемическое и и мму но ста мул ирующее д ей стви е.

Практическая значимость работы. Разработана научно обоснованная система мероприятий, обеспечивающая стойкую адаптационную перестройку организма бычков при транспортировке, что позволило снизить отрицательное воздействие транспортного стресс-фактора, активизировать приспособительные функции организма, расширить функциональные резервы и продуктивные возможности организма животных.

По результатам исследований обобщена, доложена и опубликована на международном, российском и региональном уровнях информация о использова-

нии хитозана и сукцинатахитозана для повышения адаптационных возможностей и мясной продуктивности б ычюэв на откорме.

На XII международной выставке-конгрессе «Высокие технологии. Инновации. Инвестиции» получена золотая медаль и диплом (г. Санкт-Петербург, 2007). На VII Мэсковском международном салоне инноваций и инвестиций (г. Москва, 2007) работе присуждена бронзовая медаль и диплом. На областном салоне инноваций и инвестиций (г. Челябинск, 2007) работа награждена дипломом. На VIII Московском международном салоне инноваций и инвестиций (г. Мэсква, 2008) и на XII международном форуме «Российский промышленник* 2008» (г. Санкт-Петербург,2008) работаотмеченадипломами.

Работа является фант-обладателем Губернатора Челябинской области (г.Челябинск, 2008), лауреатом премии Законодательного собрания Челябинской области (г. Челябинск, 2008).

Патент на изобретение РФ №2336693 (приоритет от 02.04. 2007); заявка на изобретение №2008118089/13(020879) могут быть использованы в адаптивной технологии выращивания и откорма молодняка 1фупного рогатого скота.

Апробация работы. Основные результаты проведенных исследований доложены и обсуждены на международных научно-практических конференциях: «Зоогигиена, ветеринарная санитария и экология - основы профилактики заболеваний животных» (г. Москва, 2006); «Инновационный путь развитая АПК -магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства» (Ростовская область, п. Персиановка, 2007); «Современные проблемы ветеринарной терапии и диагностики болезней животных» (г. Троицк, 2007); «Генетические основы и технология повышения конкурентоспособности животно-водств» (гАлмата, Респ.Казах стан 2008г); «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (г. Москва, 2008); «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (г. Ставрополь, 2008); Всероссийской н^чно-пракгической конференции «Особенности физиологических функций животных в связи с возрастом, составом рациона, продуктивностью, экологией и этологией» (г. Казань, 2006,2008); на конференции фармакологов РФ «Фармакологические и экотоксикологические аспекты ветеринарной медицины» (г. Троицк, 2007г); Сибирской межрегиональной научно-практической конференции «Адаптация, здоровье и продуктивность животных» (г. Новосибирск, 2008); Всероссийском конкурсе на лучшую научно-исследовательскую работу среди студентов и аспирантов (г. Троицк, 2007,2008; г. Тюмень, 2007; г. Москва, 2007, 2008); научно-практической конференции «Применение новых технологий для развития экономики региона» (г. Челябинск, 2007).

Реализация результатов исследований. Результаты исследований внедрены в ОАО ПКЗ «Дубровский» {фасноармейского района Челябинской области. По материалам диссертационной работы выпущены информационные листки Челябинским ЦНТИ № 74-021-08 и № 83-001-08. Научная разработка по материалам исследований демонстрируется на областной действующей губернаторской выставке (г. Челябинск, 2008;2009).

Получен патент РФ №2336693 (приоритет от 02.04.2007) и оформлена заявка на изобретение № 2008118089/13(020879) «Способ повышения адаптационных возможностей бычков в молочный период выращивания».

Материалы научной работы используются в учебном процессе сельскохозяйственных ВУЗов Российской Федерации.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 научных статей, в том числе4 - в рецензируемых изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Работа включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материал и методики исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения, спи со к литературы, приложения.

Диссертация изложена на 178 страницах компьютерного текста, иллюстрированного 14 рисунками, содержит 16 таблиц, 20 приложений. Списоклитера-туры включает202 источников, в том числе40 зарубежных авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

- Характер выраженности транспортного стрессового воздействия на организм бычков и подготовленности функциональных систем к запуску адаптационных процессов.

- Изменяя энергетическое и пластическое снабжение клеток организма бычков, хитиновые биополимеры способствуют их неспецифически повышенной сопротивляемости к действию транспортного стресс-фактора.

- Хитиновые биополимеры не подавляют ответ организма бычков на стрес-сорное воздействие транспортировки, а регулируют адекватность ответа на стресс-фактор, ограничивая тем самым стресс-реализующие механизмы организма и повышая устойчивость животных к стрессу.

2. Материал и методы исследований

В работе обобщены результаты научных исследований, проведенных с 2005 года по 2008 год в соответствии с планом научных исследований кафедры общей химии и экологического мониторинга ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины» по теме: «Разработка методов и моделей оценки антропогенного влияния на агроэкосистемы в условиях Южного Урала и Среднего Поволжья» (номер государственной регистрации 01.0.40001094).

Исследования проводили на кафедре общей химии и экологического мониторинга, в межкафедральной лаборатории ФГОУ ВПО «УГАВМ» и на базе хозяйств: ОАО ПКЗ «Дубровский» Красноармейского района и СПК «Воронино» Уйского района Челябинской области.

Изучение особенностей метаболического статуса на клеточном и органном уровнях при экстремальном воздействии транспортного стресс-фактора на организм бычков и механизмов ограничения стресоиндуцированных повреждений препаратами на основе хитан/хитозан проводили на бьнках черно-пестрой породы, подобранных по принципу аналогов, живой массой 65,81-67,10 кг, в возрасте 2 месяца. При постановке опыта из числа подлежащих транспортировке, были отобраны клинически здоровые животные и сформированы че-

тыре группы бычков по принципу сбалансированных групп в хозяйстве-поставщике «Воронино» Уйского района по 10 голов в каждой. Бычки 1 группы служили контролем. Бычки 2 группы за 3 дня до транспортировки получали рег оэ хитозан (Мм. 38,0 кДа, СД 85,0 %); 3 группы-сукцинатхитозана(М.м. 487,0 кДа, СЗ 753 %);4 группы- сукцинат хитозана (М.м. 80,0 кДа, СЗ 75,2 %) Водорастворимые формы препаратов применяли 2 раза в день в дозе 60мг на 1 кг живой массы. После прибышя в ОАО ПКЗ «Д'бровский» Красноармейского района применение препаратов продолжали в течение двух 5-дневных кур-совсинтервалом5 дней.

Юшнико-физиологический статус бычков оценивали по температуре тела, частоте дыхательных движений, ритма дыхания и частоте сердечных сокращений до транспортировки и на 1, 5,10, 15, 20 дни после транспортировки (А.М. Смирнов, П.Я. Конопелько, В.С. Постников и др., 1981). 1фовь для исследований брали утром до кормления заЗ дня до транспортировки (СПК «Воронино»), а затем на 1, 5, 10, 15, 20 и 30 день после транспортировки (ОАО ПКЗ «Дубровский»), При изучении гематоморфологических показателей проводили дифференциальный подсчет лейкоцитов при микроскопии зафиксированных и окрашенных мазков крови по Романовскому-Гимзе (И.М. Карпуть, 1986) с последующим расчетом показателя состояния (ПС) по формуле (К. С. Десятниченю, 1997; М.А. Дерхо, С.Ю. Концевая, 2004): ПС=К(е+1+ш/пЬ);

где: К- нормализующий коэффициент, равный 102; е, 1, т, п - количество эозинофилов, лимфоцитов, моноцитов, нейтрофилов на 105 клеток крови, соответственно; Ь- число лейкоцитов в 1 мл3 крови.

Из числа биохимических показателей в сыворотке крови определяли: общий белок - методом рефрактометрии (И.П. Кондрахин и др., 1985); белковые фракции - методом нефелометрии (БЛ. Антонов, 1991); активность аспартат- и ала-нинаминотрансферазы - методом колориметрии по Райтману и Френкелю (В.В. Меньшиков, 1987); активность щелочной фосфатазы - фото колориметрией (В.В. Меньшиков, 1987); общиелипиды по Илы^-Дадичу и бета-липопротеиды по Бурштейну определяли колориметрическим методом (В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988); фосфолипиды- по Бартлетту-Ушеру (И.П. Кондрахин, 2004); холестерол - по реакции Либермана-Бурхарда в модификации Илька (В.В. Меньшиков, 1987); глюкозу - глюкозооксидантным методом (В.В. Меньшиков, 1987); церулоплазмин - модифицированным методом Ревина(ИЛ. Кондрахин и др., 1985); пировинограаную кислоту - методом колориметрии в модификации Умбрайта(В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988); молочную кислоту - методом колориметрии по Баркеру и Саммерсону (В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988); малоновый диальдегид - модифицированным методом Э.Н. Коробейниковой (1989); каталазу крови - по методу Бахай Зубмэвой.(Е.С. Савронь, 1967).

В качестве критерия оценки эффективности препаратов на основе хи-тин/хитозан проводили контроль за ростом подопытных бычков, который осуществлялся в молочный период путем ежемесячного индивидуального взвешивания до утреннего кормления, по результатам которого определяли абсолютный прирост (разница в живой массе предыдущего и последующего взвешива-

ния, кг), среднесуточный прирост живой массы (абсолютный прирост/кол ичество нормодней, г) и относительную скорость роста.

Экспериментальный цифровой материал, полученный в опыте, обработан общепринятым методом вариационной статистики с использованием пакета программ STATISTICA, ПК и табличного процессора Microsoft Excel 7.0. Проведен дисперсионный анализ с формированием трех факторного комплекса (Г.Ф. Лакин, 1990).

Оценка экономической эффективности применения препаратов на основе хитин/хитозан проведена с учетом предотвращенного ущерба от потери живой массы бычков при транспортировке (Пу); стоимости дополнительно полученной продукции (Д.) и ветеринарных затрат (Зв) (НА. Севастьянова, 2007).

3. Собственные исследования и их результаты

Характеристика клинико-физиологического статуса подопытных бычков. Результаты исследований свидетельствуют о сильном стрессовом воздействии транспортировки на организм бычков контрольной группы, температура тела у которых повысилась, в сравнении с исходным уровнем, на 1,4 °С, но при этом температура тела повысилась, хотя и с менее выраженной интенсивностью (от 0,7 °С - 2 фуппа до 0,6 °С - 3 и 4 группа), и у бычков опытных групп. Мы считаем, что выявленные изменения являются результатом как сильного возбуждения животных, так и продолжительного мышечного напряжения, а само усиленное теплообразование косвенно свидетельствует о распаде белков и окислении углеводов и жиров.

Транспортировка бычков способствовала увеличению частоты и ритма дыхания, являющихся одним из механизмов регуляции, поддерживающих тепловой гомеостаз. Максимальное превышение показателей частоты дыхания выявлено у бычков 1 группы и было выше фонового уровня в 1,78 раза. При определении ритма дыхания у бычков контрольной группы установлено прерывистое (саккадированное) дыхание, которое сопровождалось неравномерным, толчкообразным протеканием обеих фаз (вдоха и выдоха) дыхательного цикла Бычки, получавшие до транспортировки хитиновые полимеры, оказались более адаптированными к транспортировке. Увеличение частоты дыхательных движений, по сравнению с исходным уровнем, у них было выше на 9,93%, 8,94% и 11,65% соответственно по группам, а ритмичные дыхательные движения характеризовались соотношением между фазами вдохаи выдоха в пределах 1:1 Д. Данная закономерность сохранилась и к 10 дню после транспортировки. На этом фоне у бычков контрольной группы продолжало регистрироваться учащенное дыхание, превысившее по частоте дыхательных движений исходный уровень на2432% (5 день) и 9,49%( 10 день).

О выраженности приспособительных реакций в организме животных к чрезвычайным функциональным нагрузкам можно судить и по частоте сердечных сокращений. Так, на 1 день после транспортировки в контрольной группе животных число сердечных сокращений в минуту увеличилось до 19230уд/мин или на 12,13%, а у животных, получавших хитозан, частота сердечных сокращений составила 181,60 уд/мин. В 3 и 4 группах бычков значение этого показа-

теля, в сравнении с фоновыми величинами, увеличилось на 13,8 и 7,8 ударов в минуту.

Дальнейшее наблюдение за физиологическим состоянием бычков показало, что, если восстановление частоты пульса у бычков опытных групп происходило уже к 5 дню, то в контроле величина этого показателя продолжала превышать исходный уровень на6,78%(5 день) и 6,10%(10 день).

Это позволяет заключить, что применение хитиновых производных, и особенно сукцината хитозана низкомолекулярного, обеспечивает экономичность функционирования системы, ответственной за адаптацию, а именно обеспечивают экономичное функционирование адренергической регуляции.

Характер изменения гемато морфологических показателей и выраженности состояния напряжения организма подопытных бычков. Исходя из того, что лейкоциты различаются между собой как морфологически, так и по биологической роли, выполняемой в организме, при изучении белой крови особое внимание мы обращали на лейкоцитарный профиль. Анализ лейкограммы показал, что транспортировка бычков выступает в качестве достаточно сильного стрессора и вызывает количественные изменения форменных элементов 1рови бычков подопытных групп, характеризующиеся эозинопенией, лимфопенией и нейтрофильным лейиэцитозом. На 1 день после транспортировки в крови стрес-сированных животных 1 группы наблюдались лишь единичные эозинофилы, во 2 группе содержание этих клеток, по сравнению с контролем, было выше в 1,60 раза, вЗ - в 2,15 и 4 - 3,06 раза.

Установленная эозинопения в крови транспортируемых животных развивается преимущественно при нейтрофилезе, главным образом, за счет молодых клеток, а именно палочкоядерных форм, число которых в 1 группе бычков увеличилось в 3,48 раза, на фоне применения хитозана в2,68раза,ав 3 и 4 группах бычков это увеличение составило соответственно 1,94 и 1,06 раза.

Параллельно с количественными изменениями со стороны лейкоцитов с палочиэядерной грануляцией в первые сутки после транспортировки происходит достоверное нарастание числа зрелых форм нейтрофилов - сегментоядер-ных клеток, составившее от 46,21% (контроль) до 20,72% (сукцинат хитозана низко молекулярный). При этом в динамике базофилов, продукция которых определяет напряженность иммуногенеза в организме, снижение их числа на 1 день после транспортировки в 2,73 раза наблюдалось только в контроле.

Транспортировка бычков сопровождается снижением числалимфоцитов в 1 группе бычков на 30,66%, во 2 - 19,49%, 3 - 5,87%ив4 -на8,95%и количественным увеличением моноцитов на 14,90; 28,23; 30,76 и 31,40% соответственно по группам.

В целом, картина крови у бьнюв подопьпных групп, соответствовала таковой при классической стадии тревоги - первой фазе адаптационного синдрома, и изменения лейкограммы характерны для пуска срочной адаптации и смещения в катаболическую сторону метаболических процессов.

На 10 сутки после транспортировки в крови бьнюв контрольной группы содержание базофилов, как и сегмента яд ерных продолжает оставаться на том же

уровне, число лимфоцитов увеличивается на 24,30%. К 20 дню после транспортировки продолжает регистрироваться эозинопения (2,78±0,09% при норме 3,010,0%) и повышенное содержание палоч неядерных нейтрофилов (4,46±0,15% при норме 2,0-5,0%). На этом фоне во 2 группе бьнков к 10 дню опыта число базофилов увеличивается на 39,28; эозинофилов- на 12,5, а нейтрофилов снижается на 19,73%. При этом тенденция повышения количества лимфоцитов и моноцитов сохраняется.

Для объективной оценки адаптивных процессов был проведен расчет показателя состояния, абсолютная величина которого находится в обратной зависимости от выраженности состояния напряжения. Согласно полученным данным величина показателя состояния на 1 день после транспортировки в 1 группе бычков снизилась в 6,63 раза. Такой характер изменений свидетельствует о чрезвычайной напряженности состояния организма. У бычков опытных групп снижение показателя составило во 2 группе 2,13 раза; в 3 - 1,76 и в 4 - 1,58. В то же время с самых низких значений показателя состояния, представленных на рисунке 1, начинается запуск адаптационной реакции у подопытных бьнков, но глубина изменений функциональных систем организма бычков под стрессовым воздействием быларазличной.

35 30 | 25

I

20 15 | 10 5 0

О 1 5 10 15 20

Дни исследований

- — | - контроль - - - И- хьпоэан

-III- сукцинат хитозана высокомолекулярный - - ' [V - сукцинат хитозана низкомолекулярный

Рисунок 1 - Динамика показателя состояния подопытных бьнков

Если учесть, что стратегия адаптации зависит от лабильности функциональных систем организма к перестройке под воздействием стресс-фактор а, то период несовершенной (краткосрочной) адаптации самым продолжительным был у бьнков контрольной группы(= 2,5 дня). У бычков, получавших до транспортировки хитозан и сукцинат хитозана низкомолекулярный, продолжительность периода краткосрочной адаптации составила = 1 сутки. Данный факт мы считаем положительным, так как, чем мобильнее перестраиваются системы организма, тем быстрее запускается адаптационный процесс и перестраивается

энергетическое и пластическое снабжение клеток организма. И именно такой характер изменений установлен нами в большей степени при применении низко мол eity л яр ных формхитозанаи сукцинатахитозана.

В последующие сроки показатель состояния организма постепенно восстанавливается до физиологических значений и, на наш взгляд, отражает динами^ потребления ресурсов адаптации.

Энергетический обмен как лимитирующий фактор функционирования организма подопытных бычков при транспортировке. Транспортировка бычков на значительное расстояние (180 км) вызывает вих организме направленное перераспределение энергетических ресурсов. Энергетическое подкрепление адаптационных реакции осуществляется прежие всего, за счет активации гликонеогенеза в печени путем образования глюкозы из неуглеводистых продуктов и сопровождается увеличением концентрация глюкозы в 1 группе бычков в 1,78 раза. У бычков 2 группы концентрация глюкозы увеличилась на 42% (р<0,05). Еще в большей степени (в среднем, до 37,0%) ограничили развитие гипергликемии препараты хитозана, обогащенные янтарной кислотой.

В дальнейшие сроки изменения концентрации глюкозы носили фазовый хфакгер. К 10 дню исследований её уровень в 1 группе превысил исходный на 30,48% (р<0,01), 2 группы - 13,0%; 3 группы - 13,20% и 4 - группы 14,46%. К 20 дню опыта количество глюкозы повышается на 15,39%(контроль); 15,78% - хитозан; 18,24%- сукцинатхитозана высокомолекулярный и 18,46 - сукцинат хитозана низкомолекулярный. И только к 30-му дню происходит стабилизация этого показателя у бычков, получавших хитиновые производные, в то время, как в мэнтроле содержание глюкозы находилось на уровне верхних границ видовой нормыи составило 4,32±0,18 ммоль/л (таблица 1).

В организме бьнков при транспортировке усиливаются процессы анаэробного окисления глюкозы. Это подтверждается динамикой изменений уровня основных метаболитов углеводного обмена (лактата и пирувата), характеризуется накоплением молочной кислоты и указывает на дефицит кислорода в клетках, при котором метаболизм углеводов перестраивается с аэробного на анаэробный. Об этом же свидетельствуют на 1 день после транспортировки данные по коэффициенту лактат/пируват, составившие у животных в контрольной группе 14,91 и превысившие верхнюю границу видовой нормы в 1,24 раза. У бьнков 2 группы углеводный индекс на 1 день после транспортировки составил 13,05; 3 группы- 13,80 и 4 группы- 12,96. что оказалось выше нормы на6,96; 13,11 и 6,23%соответственно по опьпным группам.

Вероятно, благодаря адаптогенным свойствам, препараты хитин/хитозан изменяя механизмы как срочной, так и хронической адаптации, повышая неспеци-фичесьую резистентность организма, действуют и на энергетический обмен, способствуя активации гликолиза и ингибированию гликонеогенеза - основного источника углеводов. Увеличение интенсивности глимэлитической фазы распада углеводов при применении хитиновых биополимеров подтверждается и количественными изменениями соотношения анаэробной и аэробной фаз обмена, что тестируется снижением уровня молочной кислоты.

Таблица 1 - Динамика показателей углеводного обмена в крови бьнков __(Х±5х, п=10)_

Показатель Гр> /ппа

1 1 2 3 1 4

Др транспортировки

Глююза, ммоль/л 3,15±0,10 323±0,08 3,18±0,11 3^5±0,09

ПВК, мкмоль/л 99,01±2,18 98 <)6±3,12 99£5±2£6 100,71±3,56

Молочная кислота, ммоль/л 1,17±0РЗ 1,09±0,04 1 Д0±0,02 1 Д1±0,03

Лактат/пиру ват 1131 11,01 12,04 12,01

1 день

Глююза, ммоль/л 5,62±0Д1 4,59±0,18" 436±0,14" 4,45±0,19

П ВК, м кмол ь/л 142,19±3,42 11938±2,87" 11330±3,0Г 117^0±234"

Молочная кислота, ммоль/л 2,12±0,04 1 Л6±0,04"' 1,57±0,02" 1,52±0,03"

Лактат/пиру ват 14£1 13,05 1330 12^6

10 дней

Глююза, ммоль/л 4,11±0,13 3,65±0,11 3£0±0,10" 3,72±0,10*

П ВК, м кмол ь/л 127,60±3,70 110,57±4,01" 11134±328 10235±2,01

Молочная кислота, ммоль/л 1,76±0.07 134±0,05 1,43±0.04' 122±0.03"'

Лактат/пиру ват 1330 12,14 12,10 1136

20 дней

Глююза, ммоль/л 458±0,19 3,74±0,14' 3,76±0,16" 335±0,1"

ПВК. мкмоль/л 115.77±3.12 Ю422±2.46" 10236±3,41" 10053±233"'

Молочная кислота, ммоль/л 1_«;2±олз 1 25±0.02 122±0,04' 120±0,04"'

Лактат/пиру ват 13,12 11 £5 1131 12,00

30 дней

Глююза, ммоль/л 432±0,18 369±0,12 3,72±0,10" 3,79±0,14"

ПВК, мкмоль/л 118,72±3,12 9825±2,47** 100,14±3,П" 9633±15»8"'

Молочная кислота, ммол ь/л 1,52±0,04 1,11 ±0,01 1,12±0,03" 1,09±0,02"

Лактат/пиру ват 1235 1136* 11,22*' 11,42"

Примечание: *р<0,05 ;**р<0,01 ;***р<0,001

Немаловажную роль в обмене веществ и энергии в животном организме выполняют фосфатазы, изменение активности которых в 1фови связано с изменением функции и структуры ряда органов и состояния обменных процессов в организме животных.

Согласно полученным данным, более чувствительными к транспортировке оказались бьнки 1 группы, активность щелочной фосфатазы у которых на 1 день после транспортировки повысилась в 1,92 раза и продолжала оставаться на достаточно высоком уровне в последующие изучаемые сроки, превысив ис-

ходный уровень на 62,45%; 29,12% и 10,48% соответственно на 10,20 и 30 дни опыта. На этом фоне динамика каталитической активности фермента у опытных бычков, характеризуется снижением к 10 дню опыта и сохранением такого характера изменений к 20 дню. Бычки 1 группы под воздействием транспортного стресс-фактор а более длительное время переживают энергетический дефицит, признаки гипоксического профиляуглеводного обмена.

Таким образом, выявленные закономерности указывают, прежде всего, на стресс-лимитирующий эффект применяемых препаратов, проявившийся в большей степени у су кцинатахитозана низко молекулярного.

Особенности белкового обмена подопытных бычков. Помимо энергетических ресурсов транспортировка бычков вызвала в их организме мобилизацию и направленное перераспределение ресурсов белкового резерва. Снижение уровня общего белка на 22,12% в контрольной группе бычков после транспортировки указывает на нарушение их синтеза в печени. Аналогичные изменения, свидетельствующие о резком угнетении антитоксической функции альбуминов, установлены в динамике низко молекулярных сывороточных белков. Усиленное их расходование вследствие активной мобилизации резервов организма в ответ на агрессивное действие транспортного стресс-фактора приводит к снижению уровня альбуминов на 22,0%. В последующие сроки концентрация альбуминов у бьнков контрольной группы продолжала оставаться на низком уровне, что было меньше исходного уровня на 14,03%(10 день) и 5,54% (20день). К 30 дню отмечалось дальнейшее снижение концентрации альбуминовой фракции на431%и до конца опыта содержание альбуминов не достигло исходных величин и было меньшена9,62%исходной величины.

В сыворотке крови бычков опытных групп, напротив, концентрация общего белка, по сравнению с контролем, оказалась выше на 17,59; 20,29 и 18,82% и продолжала повышаться к 10 дню опыта на 9,09%, 6,65% и 12,0 % соответственно. При этом необходимо особо отметить, что на 1 день опыта концентрация альбуминов у бычков 2 группы практически не претерпевает изменений и составляет 35,90±1,24 г/л при исходном уровне 35,73±0,98г/л. В 3 и 4 группах б ыч ко в увеличение концентрации альбуминов составило 4,61 и 3,62% (р>0,05) соответственно (таблица2).

На наш взгляд, активация синтеза белков в клетках, ответственных за адаптацию систем и обеспечивающая формирование там системного структурного «следа», сокращает сроки перехода «срочной» адаптации в гарантированную, «долговременную» у бычиэвопытных фупп.

В наших исследованиях об этом свидетельствует как повышение общей концентрации белков, альбуминовой фракции, так и значения белкового индекса (А/Г), которые на 1 день после транспортировки были на 20,66; 33,70 и 22,83% достоверно выше, по сравнению с контролем, и составили 1,11; 1,23 и 1,13 соответственно по группам.

Сдвиг белковой картины в сыворотке крови бычков контрольной группы существенно повлиял на уровень бета- и гамма-глобулинов, являющихся защитными белками крови, и концентрация которых на1 день после транспорти-

ровки оказалась сниженной на 7,00 (р<0,01) и 18,53% (р<0,001) соответственно. В последующие сроки, с 20 дня опыта, уровень гамма-глобулинов начал увеличиваться, но через месяц после начала эксперимента так и не достиг как референтных величин, так и исходного уровня.

Таблица2- Показатели белкового обмена крови бычков (х±5с;п=10)

Показатель Группа

1 1 2 | 3 I 4

До транспортировки

Общий белок, г/л 66,15±1,74 66Д9±1,12 67,12±2,10 6596±1,57

Альбумины,г/л 35,55±0£>7 35,73±098 3637±1,65 3536±031

% к общему белку 53,74 5390 5493 53,60

Глобулины, г/л 30,60±0,71 30,56±032 30 Д5±1,02 2992±094

% кобщему белку 4626 46,10 45,07 4536

Б ел ю вый индекс 1,16 1,17 122 1,18

1 ден ь

Общий белок, г/л 58 Д3±1,13 6835±1,42" 6992±098" 69,07±1 ДО"

Ал ьбу мины, г/л 27$2±0,78 35£0±1Д4" 38,57±127*" 36,63±1,13'

% кобщему белку 47,86 52,52 55,16 53,03

Глобулины, г/л 3031*0,86 32,45±1,12 3135±094 32,44±1,02

% кобщему белку 52,14 47,48" 443"' 4697'

Белковый индекс 0^2 1,И 123 1,13

10 дней

Общий белок, г/л 64,13±1,41 7231±231" 70,50±1 94' 73,74±1,64"

Ал ьбу мины,г/л 30,56±098 38,68±1,62" 3632±037' 3993*124"'

% кобщему белку 47 £5 53^0 51,52 54,15

Глобулины, г/л 33^7±0у88 33,63±1,05 34,18±091 3331±1,Ю

% кобщему белку 5235 46,50 48,48 4535

Белю вый индекс 091 1,15*" 1,06" 1,18™

20 дней

Общий белок, г/л 65 Д1±2,13 69 92±1,73' 6836±134 7035±190"

Ал ьбу мины,г/л 33,58±094 36,67±1,17" 35,79±097' 37,07±1Д1'"

% кобщему белку 51,50 52,45 5198 52,69

Глобулины, г/л 31,63±1,12 3325±095 33,07±1,06 3328±035

% кобщему белку 48,50 47,55 48,02 4731

Белю вый индекс 1,06 1,10 1,08 1,11

30 дней

Общий белок, г/л 65,41±1,14 72,00±1,65" 70 <?2±2,04" 71,74±193"

Ал ьбумины,г/л 32,13±1Д1 39,48±1Д8" 3833±1,08' 39,59±1,14"

% кобщему бел1у 49,12 54^3 54,05 55,19

Глобулины, г/л 3328±099 32,52±1,02 32^9±1,13 32,15±036

% кобщему бешу 5038 45,17 4595 4431

Бел мо вый индекс 096 121 1,18 123

Примечание: *р<0,05 ;**р<0,01 ;***р<0£01

В опытных группах бычмэв интенсивность снижения уровня защитных белков после транспортировки была менее выражена, и уровень грубодисперсных белков (глобулинов) на I день после транспортировки составил по бета - глобулинам 10,12±031г/л (2 группа); 9,38±0Д7г/л (3 группа) и 9,49±0ДЗг/л (4 группа), что оказалось ниже исходного уровня только на 3,98; 4,96 и 5,10% соответственно. При этом к 10 дню опыта выявлено достоверное увеличение концентрации гамма-глобулинов, по сравнению с 1 днем опыта, на 8,79; 9,46 и 13,61 %, и такая тенденция сохраняется до концаопыта.

Задержка биосинтеза белков, выполняющих функцию иммунобиологической резистентности в организме бычков при их транспортировке, приводит к вовлечению аминокислот в непрямое дезаминирование и переаминирование, что подтверждается у бьнков 1 группы увеличением активности АлАТ на 39,25% (р<0,01) и АсАТ - в 1,69 раза (р<0,001). К 10 дню опыта активность ферментов переаминирования в сыворотке крови продолжала оставаться на высоком уровне с преимущественным повышением активности АсАТ и при соотношении АсАТ:АлАТ 2,16 (1 день); 2,12 (10 день); 1,99 (20 день) и 1,95 (30 день).

При применении препаратов интенсивность повышения каталитической активности фермента была значительно ниже, составила после транспортировки, по сравнению с исходным уровнем, по АлАТ - 14,52; 2035 и 9,54%, и по АсАТ - 20,04; 28,77 и 14,91%, соответственно по опытным группам. В дальнейшем, к 10 дню опыта организм опытных бьнков исключает потребность в усиленной активации исследуемых ферментов переаминирования. Одновременно, в процессе применения препаратов отмечается усиление протеинсинтетической функции печени, что также подтверждается динамикой альбуминов и глобулинов.

Состояние липидного обмена в организме подопытных бычков. В условиях транспортного стресса в энергетике организма подопытных бьнков возрастает роль липидов. Энергетический обмен переключается с «углеводного» типа на «липидный». Характерное нарушение промежуточного обмена липидов, в организме бьнков выражается липидемией и гипер-|клипопротеидемией. Установленная нами у бьнков 1 группы длительная гиперлипидемия, проявившаяся повышением концентрации общих липидов на 33,14%, является еще одним из неблагоприятных факторов стресса (таблица 3). Транспортная стресс-реакция характеризуется также увеличением уровня фосфорсодержащей фракции общих липидов - фосфолипидов - на 64,60%. В опьпных группах в изучаемые сроки увеличение содержания общих липидов на 15,63; 1837 и 12,03% соответственно указывает на более полноценный липидный обмен, что также подтверждается величинами липидного индекса, составившими 037;038; и 036 на 1 день после транспортировки; 038; 034 и 036 - на 10 день; 037; 036 и 035 -20 день и 037; 035; 034- 30 деньопыта соответственно по опытным группам.

Более низкие значения этого коэффициента, по сравнению с 1 группой бьнков, свидетельствуют о интенсивной утилизации фосфолипидов с целью энергетического обеспечения повышающихся анаболических процессов в белковом

обмене, имеют выраженный ресурсно-адаптивный характер и характеризуют стойкую адаптацию на стресс.

ТаблицаЗ - Показатели липидного обмена в крови бычков (Xп=10)

Показатель Группа

1 1 2 3 1 4

До транспортировки

Общие липиды, г/л 5Д5±0,16 4,99±0,14 5,17±0,15 5,04±0,15

Фосфолипиды, г/л 1,78±0,04 1,75±0,05 1,80±0,03 1,71±0,04

Липидный индекс 034 035 035 034

Р-липопротеиды, моль/л 2,17±0,08 2,24±0,06 227±0,06 2,23 ±0,09

Холестерол, ммол ь/л 1,02±0,03 1,05±0,04 1,05±0,05 1,04±0,03

1 день

Общие липиды, г/л 6,99±0Д4 5,77±0,18" 6,12±0,20' 5,66±0,16*'

Фосфолипиды, г/л 2,93±0,08 2,13±0,05** 232±0,07" 2,04±0,0б"

Липидный индекс 0,42 037 038 036

Р-липопротеиды, мол ь/л 3,51±0,11 2,54±0,07*' 2,50±0,06 2,44±0,07

Хол естеро л, м мо л ь/л 1,48±0,06 138±0,05 1,45±0,04 1^5±д,03"

10 день

Общие липиды, г/л 6,58±0Д2 5,17±0,15 5Д7±0,16" 5,21±0,1б"

Фосфолипиды, г/л 2,69±0,05 1,96±0,04" 1,79±0,03" 1,87±0,04**

Липидный индекс 0,41 038 034 036

Р-липопротеиды, моль/л ЗД2±0,08 237±0,10" 235±0,09" 2Д7±0,05"

Холестерол ммол ь/л 1,55±0,06 1,06±0,03" 1,09±0,04" 1,16±0,03*

20 день

Общие липиды, г/л 6Д4±0,19 5,10±0,18* 5,12±0,17 5,08±0,18

Фосфолипиды г/л 2,43±0,06 1,89±0,03** 1,84±0,04* 1,78±0,05"

Липидный индекс 039 037 036 035

Р-липопротеиды, моль/л 2,84±0,06 2,25±0,07" 2Д8±0,07* 2,26±0,06

Холестерол, ммол ь/л 137±0,05 1,09±0,04** 1,13±0,03* 1,08±0,03**

30 день

Общие липиды, г/л 5,84±0,15 5,05±0,17* 5,09±0,14 5,06±0,16*

Фосфолипиды, г/л 2Д8±0,07 1,87±0,05 1,78±0,06 1,72±0,05

Липидный индекс 039 037 035 034

Р-липопротеиды, мол ь/л 236±0,08 2Д6±0,08 2,27±0,05 2Д4±0,04

Холестерол, ммол ь/л 1,25±0,04 1,04±0,04" 1,08±0,03* 1,05±0,03*

Примечание: *р<0,05;** р<0,01 ;***р<0,001

Транспортировка бычков во всех опытных группах привела к достоверному увеличению фракции |3-липопротеидов, являющихся транспортными формами жира, у бьннов 1 группы в 1,56 раза и на 13,42; 10,28 и 9,56% - во 2, 3 и 4 группах животных соответственно. В последующие наблюдаемые сроки на фо-

не применения хитиновых препаратов стабилизация показателя произошла к 10 дню опыта, а в контрольной группе бычков его концентрация и на 30-й день превышала исходный уровень на 5,02% (р<0,05). Таким образом, под действием хитозановых полимеров угнетается наблюдавшийся сразу после транспортировки жиромоболизующий эффект и снижается формирование транспортных форм эндогенного жира в организме.

Содержание холестерола в крови бычков, также как и р-липопротеидов, достоверно выше величин сравнения. В контрольной группе бьннов после транспортировки концентрация холестерола превысила исходный уровень на 45,62%, а нормативную величину на 24,54%. К 10 дню опыта его уровень, по сравнению с предыдущим периодом, сохранил тенденцию к повышению и только с 20 дня установлено достоверное снижение изучаемого показателя до 1,25±0,04 ммоль/л (Р<0,01), не достигшее референтных данных. У бьнков опытных групп его концентрация фазу после транспортировки составила 138±0,04 (хитозан), 1,45±0,05 (сукцинатхитозана высокомолекулярный) и 1Д5±0,03 ммоль/л (сукцинатхитозана низиэмолекулярный), что было выше исходного уровня на 35,69; 38,60 и 20,12% соответственно. При этом сравнение с нормативной величиной позволило выявить превышение на25,45; 31,81; 13,63% В последующие сроки исследований мы отмечали статистически достоверное снижение уровня холестерола в сыворотке крови бьнков, по сравнению, как с показателями контрольных групп животных, так и с исходными значениями, указывающее на неспецифическое антихолестери-немичесноедействие препаратов.

Пероксидация липидов и антиоксидантная система защиты организма подопытных бычков при транспортном стрессе. Интенсивность стресс-реакции определяется соотношением степени стимуляции стресс-реализующих механизмов при действии стрессора на организм и активации стресс-лимитирующих факторов. В связи с этим несомненный интерес представляет антиоксидантная система защиты организма, относящаяся к числу периферических стресс-лимититрующих механизмов и являющаяся важным фактором ограничения стресс-реализующих факторов.

Согласно полученным данным, значительное снижение концентрации церулоплазмина, являющегося универсальным внеклеточным «гасителем» свободных радикалов, на 1-й день после транспортировки установлено у бьнков 1 группы, достигшее 1,45±0,04 г/л, что ниже исходного уровня на 38,62%. В опытных группах бьнков, снижение концентрации церулоплазмина составило 6,92%; 7,06% и4,64%р>0,05 соответственно по группам. На наш взгляд, хитиновые препараты проявили антирадикальную активность. Наше предположение подтверждается нарастанием к 10 дню опыта концентрации церулоплазмина в группах бьнков, получавших хитиновые биополимеры. Можно полагать, что в организме бьнков 1 группы на фоне установленной нами гипоксии, более выражено развивается так называемый окислительный стресс, сопровождающийся образованием высокоактивных форм кислорода. Об этом свидетельствует динамика концентрации малонового диалщегида- конечного продукта перекис-ного окисления липидов, концентрация которого в крови бьнков 1 группы пре-

высила исходный уровень в 1,73 раза. Активность вспомогательного фермента дыхания - каталазы, разрушающей гидроперекиси с образованием молекулярного кислорода и, наряду с пероксидазой, составляющей первую линию защиты от свободных радикалов, на 1-й день после транспортировки в организме бычков опытных групп составила 20,12±0,72 мкмольН202 (хитозан); 20,45±0,63 (су кцинат хитозана высокомолекулярный) и20,74±0,71 (сукцинат хитозана низко мол е^л яр ный), и была выше контрольной величины на 11ДЗ; 13,05 и 14,65%, а исходного уровня на 14,39; 16,66 и 15,55% соответственно. В контрольной группе бычков увеличение каталазной активности составило 2,15% (Р>0,05).

дж исследований

5 сукцинат хитозана высокомолекулярный О сукцинат хитозана ниэкомолекулярный

а.

ькокомопекулярный О сукцинат XV б.

дои исследований

а ниэкомолекулярный

Рисунок2 - Динамика концентрации церулоплазмина(а) и малонового диалвдегида(б) в крови подопытных бычюв

Обобщая полученные данные, следует отметить, фаза восстановления изучаемых биохимических показателей в организме б ыч ко в 1 группы наблюдалась лишь на 20 - 30 день. В то же время применение хитиновых производных до транспортировки позволило эффективно мобилизовать и перераспределить в организме бычков основные энергетические источники, столь необходимые в данный момент для обеспечения возросших функций организма по ликвидации последствий действия транспортного стресс фактора. Это подтверждают результаты дисперсионного анализа с составлением трехфакторного комплекса. Как оказалось, в целом, сила влияния учтенных факторов на каждую группу животных для показателей лейкоцитарного профиля составила 40,1 %, для биохимических показателей - 71,4%. Наибольшая сила влияния отмечена для совместного действия факторов А (период адаптации животных ) и В (влияние применяемых препаратов), составившая 20,1% и 41,0% соответственно, что

свидетельствует о усилении влияния применяемых препаратов в адаптационный период на вариабельность показателей.

Динамика живой массы подопытных бычков при применении хитиновых препаратов. С целью экономического обоснования применяемых препаратов было изучено влияние производных хитина на изменение живой массы подопытных бычков до и после транспортировки, а также в молочный период их выращи вания.

Максимальные потери живой массы бычков, составившие 2,18 кг, установлены в контрольной фуппе. На фоне применения хитозана потери живой массы составили 0,94 кг; су кцината хитозана высокомолекулярного - 1,05 и сукци-ната хитозана низкомолекулярного - 0,95 кг, что было ниже контрольной величины в 2 32; 2,08 и 2,30 раза соответственно.

Стабильно высокие показатели живой массы на протяжении всего молочного периода установлены у б ыч ко в опытных групп. Так, при практически одинаковой живой массе животных в начале опыта (от 64,92±0,82 до 65Д1±1,14 кг), наиболее интенсивно росли бычки 2 и 4 групп, получавшие соответственно низко мол е(у л яр ные формы хитозана и су кцината хитозана. В 3-месячном возрасте живая масса бьнков на фоне применения хитозана превосходила живую массу контрольных аналогов на 6,43 кг или на 6,82% (р<0,05). На фоне применения су кцината хитозана низкомоле^лярного разница с контролем составила 7,15 кг (7,58%, р<0,05), высоко мол егул яр но го - 5,72 кг (5,01 %, р<0,01); а в 6-месячном возрасте - на 14,85 кг (хитозан); 13, 74 (су кцинат хитозана высокомолекулярный)

Выявленные особенности в динамике живой массы, на наш взгляд, связаны с применением до транспортировки хитиновых производных, причем, более выраженные адаптационные свойства проявили хитозан и сукцинат хитозана низгомолекулярный, в большей мере обеспечившие в организме мобилизацию защитных сил, направленных на «отражение» неблагоприятных воздействий и сохранение жизни.

Экономическая эффективность применения хитиновых препаратов. Наибольший экономический эффект за счет увеличения прироста живой массы достигается от применения су кцината хитозана низномолекулярного, что 41,40 % выше, чем от использования хитозана и на 79,41 % - су кцината хитозана высокомолекулярного.

Экономическая эффективность в расчете на один рубль затрат при использовании хитозана низкомоле^лярного составила 4,97 руб., су кцината хитозана низкомоле1улярного - 4,28 руб., сукцината хитозана высоко мол екулярного -2,57 руб.

Таким образом, наиболее экономически эффективно применение низкомолекулярных форм хитозана и су кцината хитозана.

Выводы

1. Транспортировка является чрезвычайной функциональной нагрузкой на организм бычков, что проявляется повышением температуры тела на 1,4 °С, увеличением частоты дыхательных движений - 27,38%, сердечных сокращений -12,12%; саккадированным дыханием; развитием состояния напряжения мор-фофункциональных и гомеостатических функциональных систем, сопровождающегося возрастанием роли глиюэнеогенеза и усилением жиромобилизующе-го эффекта, пероксидацией липидов, что приводит к снижению общей неспецифической резистентности, иммунологической реактивности, резко ограничивает адаптационные возможности сопротивления организма и снижает продукта вность б ьи ко в.

2. Хараетер изменений гемограммы бычков свидетельствует о нарушении динамического равновесия в смене клеток белой крови, снижении показателей общей неспецифической резистентности, что проявляется резко выраженной эо-зинопенией, нейтрофильным лейкоцитозом, преимущественным увеличением числа молодых клеток (палочкоэдерных) - в 3,49 раза; количественным снижением в 2,73 разабазофилов, продукция которых определяет напряженность иммуногенеза, на фоне уменьшения на 30,66% числа лимфоцитов, играющих основную роль в специфических защитных реакциях.

3. Период краткосрочной «несовершенной» адаптации при транспортном стрессе у бьнков составляет 2,5 дня и свидетельствует о неподготовленности функциональных систем организма к мобильной перестройке метаболических процессов с катаболического характера на анаболический для быстрого восполнения ресурсов адаптации.

4. Транспортировка бьнков вызывает в их организме направленное перераспределение энергетических и пластических ресурсов. В углеводном обмене при повышении концентрации глюкозы в 1,78 раза выражен гипоксический профиль, сопровождающийся повышением коэффициента лаетат/пируват в 1,27 раза. Белковый и липидный обмен носят катаболический характер и характеризуются гипоальбуминемией и гиперлипидемией. Активация пероксидного окисления липидов сопровождается, угнетением антиоксидантоой системы защиты организма бьнков, что тестируется увеличением уровня малонового диальдеги-да в 1,60 раза и снижением концентрации церулоплазмина в 1,50 раза.

5. Обладая адаптогенными свойствами, хитиновые биополимеры вызывают мобильную перестройку функциональных систем организма, обеспечивающую запуск адаптационного процесса.

5.1. Изменяя механизмы как срочной, так и хронической адаптации, препараты снижают энергозатраты на подкрепление адаптационных реакций, обеспечивают трансформацию анаэробного окисления углеводов в аэробное, предупреждая возникновение ярко выраженного гипергликемического состояния, что сопровождается увеличением концентрации глюкозы на 42,10; 37,10 и 36$2% на1 день (в контроле в 1,79 раза); характером изменения уровня пировиноградной и молочной кислоты; снижением углеводного индекса на 10 день до 12,14; 12,10 и 11,86 (в контроле -13,80); снижением активности щелочной фосфатазы,

по сравнению с контролем, в 136; 1,54 и 1,59 раза соответственно при применении хитозана низко мол екулярного, су кцината хитозана высокомолекулярного и сукцинатахитозананизкомоле1улярного.

52. Хитиновые биополимеры способствуют формированию структурного базиса «гарантированной» долговременной адаптации, обеспечивающего фиксацию сложившихся адаптационных систем и увеличение их мощности до уровня, диетуемого транспортным стресс-фаетором. Об этом свидетельствует как повышение общей концентрации белков, альбуминовой фракции, так и значения белкового индекса, составившие после транспортировки 1,11 (2 хитозан); 1,23 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 1,13 (сукцинат хитозана низко молекулярный), против 0,92 - в контроле и превышающие контрольные величины до конца эксперимента.

53. Функциональное состояние печени бычков при применении хитиновых биополимеров характеризуется активацией белоксинтезирующей метаболической функции и сопровождается повышением общей концентрации белка, альбуминовой фракции, альбуминово-глобулинового коэффициента, нормализацией каталитической активности ферментов переаминирования и снижением величины коэффициентаде Ритиса.

6. Адаптационные реакции иммунной системы после транспортировки характеризуются увеличением синтеза иммуноглобулинов на 1839 (хитозан),

14.12 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 19,16% (сукцинат хитозана низкомоле^лярный) и бета-глобулинов соответственно на 16,67; 20,83 и 19,96; количественным нарастанием клеток, выполняющих защитную функцию: эози-нофилов - в 1,60 - 3,06 раза, лимфоцитов - на 17,16 - 37,80% моноцитов - на

12.13 - 13,81 % и снижением незрелых форм нейтрофилов в 1 23-326 раза.

7. Изменения в липидном обмене организма бычков при применении хитиновых биополимеров носят выраженный ресурсо-адаптивный характер, характеризуют стойкую адаптацию на стресс и сопровождаются угнетением жиромо-билизующего эффекта (концентрация общих липидов снизилась на 21,14 - хитозан, 14,22 - сукцинат хитозана высо го молекулярный и 23,49%- сукцинат хитозана низкомолекулярный), снижением формирования транспортных форм жира в организме (уровень p-липопротеидов соответственно снизился на 38,0; 14,21 и 23,49%) и проявлением неспецифического антихолестеринемическош действия.

8. Ограничение хитиновыми препаратами стресс-реализующих механизмов подтверждается их антиоксидантными свойствами, проявляющимися снижением концентрации малонового диальдегида, в среднем, в 1,6 раза; повышением функционального состояния системы защиты организма бьниэв, тестируемого увеличением концентрации основного антиоксиданта сыворотки крови (церу-лоплазмина) - в 1,5 раза, характером изменений содержания биорастворимых антиоксидантов (фосфолипидов) и повышением активности вспомогательного фермента дыхания (каталазы) - на 1122-14,63%.

9. Моле1улярная масса и струшурная организация хитинсодержащих препаратов определяла закономерности их метаболизма в организме бьнков на про-

тяжении всего научно-хозяйственного опьгга. При этом наибольшей биологической активностью обладали низко молекулярные формы хитин/хитозана. 10. Применение хитиновых производных до и после транспортировки позволяет не только снизить потери живой массы опытных бычков в 2,08-2,32 раза, но и повысить с высокой степенью достоверности живую массу в 6-месячном возрасте на 14,85 кг (хитозан); 13,74 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 19,30 (сукцинат хитозана низко мол екулярный).

Экономический эффект и экономическая эффективность в расчете на 1 рубль затрат от применения препаратов соответственно составили 6223,6 и 4,97 руб. (хитозан низкомолекулярный); 4905,2 и 2,57 руб. - (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 8800,2 и 4,28 (сукцинат хитозана низко молекулярный).

Практические предложения

1. Для подтверждения наличия стресса у сельскохозяйственных животных, определения сроков периода краткосрочной адаптации, глубины перестройки функциональных систем организма при экстремальных воздействиях факторов окружающей среды проводить расчет показателя состояния, абсолютная величина которого находится в обратной зависимости от выраженности состояния напряжения организма.

2. При транспортировке бычков для ограничения стресс-индуцированных повреждений организма применять за три дня до транспортировки низкомолекулярные формы хитозана и сукцината хитозана per os в виде 2% раствора в дозе 60 мг/кг живой массы. При необходимости повышения адаптационного потенциала организма животных применение препаратов продолжить после транспортировки в указанных выше дозах в течение двух 5-дневных курсов с интервалом 5 дней.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Таирова, А.Р. Особенности неспецифической защиты организма бычков черно-пестрой породы, содержащихся на загрязненных тяжелыми металлам/ территориях /Л.Р.Таирова, Е.В. Лазарева, Р.Л. Миргалимов// Ученые записки КГАВМ. - 2006. - Т. 185. - С. 296-300.

2. Лазарева, Е.В. Влияние сукцината хитозана на активность ферментов переаминироватя /Е.В.Лазарева, Р.Л. Миргалимов, А.Р.Таирова// КГАВМ. — 2006. - Т. 185. - С. 178-181.

3. Лазарева, Е.В. Повышение адаптационных возможностей бычков черно-пестрой породы при применении сукцината хитозана /Е.В. Лазарева, А.Р. Таирова//Ученые записки КГАВМ. - 2008.- T. 193.-С.141-144.

4. Таирова, А.Р. Влияние хитинсодержащих препаратов на метаболические процессы в организме бычков /А.Р. Таирова, Е.В. Лазарева, Р.Л. Миргалимов// Аграрный вестник Урала,- 2008. - №6.-С,- 69-71.

5. Таирова, А.Р., Возможность практического применения хитозана при техногенных микроэлементозах крупного рогатого скота //А.Р. Таирова, Е.В.

Лазарева, Р.Л. Миргалимов//Зоогигиена, ветеринарная санитария и экология -основы профилактики заболеваний животных: Межцунар. науч.- пракг. конф. поев. 100-летию со дня ровдения Даниловой А. К.- М., 2006.-С. 122-123.

6. Таирова, А.Р. Особенности обменных процессов в организме 1фупного рогатого смэта в условиях техногенного прессинга на агроэкосистемы /А.Р.Таирова, Е.В. Лазарева, Р.Л. Миргалимов// Инновационный путь развития АПК - магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства: М-лы Междунар. науч.-практ. конф./Дон.ГАУ.-2007- Ч.2.- С.16-18.

7. Применение производных хитина в животноводстве / Р.Л. Миргалимов, Е.В. Лазарева, О.В. Голубева и др. //Современные проблемы ветеринарной терапии и диагностика болезней животных: М-лы юбилейн. Междунар. науч,-пракг. конф. веет, терап., диагностов / УГАВМ.- 2007.- С. 108-109

8. Лазарева, Е.В. Возможность снижения негативного воздействия транспортного стресса на организм бычков /Е.В. Лазарева. - Фармакологические и экотоксинэлогические аспекты ветеринарной медицины: М-лы конф. фармакологов РФ/УГАВМ. - 2007,- С.-158-160.

9. Таирова, А.Р. Динамика живой массы у бьнков черно-пестрой породы в молочный период выращивания на фоне применения сукцината хитозана /А.Р. Таирова, Е.В. Лазарева, Р.Л. Миргалимов// Генетические основы и технология повышения конкурентоспособности животноводства: М-лы юбилейной межд. науч.практ. конф,- Алмата,2008 - С,-223-225.

10. Таирова, АР. Влияние сукцината хитозана на химический состав мышечной ткани бьннэв черно-пестрой породы в условиях техногенной зоны Южного Урала /А.Р. Таирова, Е.В. Лазарева // Адаптация, здоровье и продуктавность животных: М-лы Сибирской межрегион, н^ч.-практ. конф./НГАУ.-2008.-С.-128-132.

11. Лазфева, Е.В. Влияние сукцината хитозана различной молекулярной массы на состояние белкового обмена в организме бьннэв /Е.В. Лазарева, АР. Таирова // Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии: М лымеад. конф. /ФГОУ ВПО МГАВМиБ .- 2008.-С. 128-130.

12. Таирова, АР. Динамика живой массы бьнюв черно-пестрой породы в мо-лочньй период вьращивания при использовании хитинсодержащих препаратав/АР. Таирова, Р.Л Миргалимов, Е.В. Лазарева// Современные перспекгавы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 9-й междунар. иэнф. / ВНИРО,-Ставрополь, 2008.-С,-255-258.

На правах рукописи

Лазарева Евгения Викторовна

Характеристика общего адаптационного синдрома у бычков при транспортировке и способы ограничения стресс-инауцированных повреждений

03.00.13 - физиология

Авторефератдиссертации на со искание \ чекой степени кандидата биологических наук

Сдано в набор 02.03.2009г. Подписано в печать 03.0J.2009 г. Формат 60x84/16. Объём I пл. Тираж 100 экз. Заказ № . Гарнитура Times New Roman Отпечатано в типографии ИП Кузнецовой

ИНН 74 ¡807420320 г.Троицк, Челябинская обл., ул. Гагарина. 13

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лазарева, Евгения Викторовна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Транспортировка и её стрессовое влияние на организм бычков.

1.2. Стресс как особое биологически целесообразное состояние организма.

1.2.1. Понятие и общие представления о стрессе.

1.212. Физиологическая адаптация и ее этапы.

1.2.3. Общий адаптационный синдром

1.2.4. Адаптация и гомеостаз сельскохозяйственных животных при стрессе.

1.3. Пути повышения адаптационных возможностей бычков при транспортном стрессе.

1.3.1. Способы профилактики транспортного стресса у бычков.

1.3.2. Перспективы применения производных хитин/хитозана в качестве адаптогенов при транспортировке бычков.

2. Собственные исследования и их результаты.

2.1. Материал и методы исследований.

2.2. Характеристика клинико-физиологического статуса бычков до и после транспортировки.

2.3. характер изменений гематоморфологических показателей и выраженности состояния напряжения организма подопытных бычков.

2.4. Особенности метаболического статуса подопытных бычков.

2.4.1. Энергетический обмен - лимитирующий фактор функционирования организма подопытных бычков.

2.4.2. Особенности белкового обмена подопытных бычков.

2.4.3.Состояние липидного обмена в организме подопытных бычков.

2.4.4. Пероксидация липидов и антиоксидантная система защиты организма подопытных бычков при транспортном стрессе.

2.4.5. Оценка силы влияния применяемых препаратов, периода адаптации, вариабельности изучаемых гематоморфологических и биохимических показателей на результативный признак (трехфакторный комплекс).

2.5. Динамика живой массы подопытных бычков при применении хитиновых препаратов.

2.6 Экономическая эффективность применения хитиновых препаратов.

3. Обсуждение результатов исследований.

Выводы.

Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Характеристика общего адаптационного синдрома у бычков при транспортировке и способы ограничения стресс-индуцированных повреждений"

Актуальность темы. В системе мероприятий, направленных на увеличение производства говядины, важное место отводится сокращению потерь продукции по причине воздействия на организм животных различных неблагоприятных факторов внешней среды, или так называемых стресс-факторов. Наиболее распространенными из них являются технологические (В. Попов, А. Сало, А. Черных и др., 2007; К. Эзергаиль, 2003). Отбор, формирование групп, транспортировка, взвешивание являются сильнодействующими факторами воздействия на физиологические функции животных. При этом ослабляются защитные реакции организма, замедляется интенсивность роста, уменьшается живая масса скота. Стрессовое состояние вызывает угнетение организма животных, сокращение их продуктивности. Считается, что по этой причине теряется до 30% ожидаемой продукции, нанося значительный ущерб отрасли (А. Сало, 2008; И. Горлов, И. Осадченко, В Ранделина и др., 2008).

Несмотря на известную изученность проблемы транспортного стресса, многие физиологические аспекты его проявления требуют дальнейшей разработки, Особо это касается изучения выраженности стрессовой реакции и установления закономерностей развития общего адаптационного синдрома, определения адаптационного потенциала самого организма животных, его приспособительных возможностей.

Необходимо также подчеркнуть, что гематологические исследования в условиях стресса часто ограничиваются представлениями о системе крови, как о мишени для стрессорных гормонов и нейромедиаторов, в то время, как современные представления гуманитарной медицины о механизмах индукции стресс-реакции помимо нервной и эндокринной составляющих рассматривают гематологическую компоненту в качестве узлового звена в формировании гормонально-метаболического статуса организма при экстремальных воздействиях и как генерализованной реакции гематологического стресс-синдрома системы крови (Ю.Г. Камскова, А.Г. Рассохин, В.Э. Цейликман и др., 2000). Однако сведения о метаболическом статусе организма бычков на клеточном и органном уровнях при различных экстремальных воздействиях, в частности, при транспортном стрессе, недостаточны. При этом практически не изучены механизмы ограничения стресс-индуцированных повреждений.

Следует отметить, что в последние годы активно изыскиваются способы снижения пагубного воздействия стрессоров на организм животных (В. Попов, А.Сало, А. Черных и др., 2007; A.M. Монастырев, 2000; А.В. Степанов, 2005;

А.П. Онищенко, 2007), При этом, одним из высокотехнологичных направлений в системе обеспечения защиты здоровья/ животных в условиях промышленной технологии является коррекция состояний дезадаптации с использованием биологических препаратов мягкого действия (адаптогенов, антиоксидантов, гепатопротекторов, иммунотропных средств), улучшающих состояние функциональных систем организма, способных метаболизироваться в организме до естественных продуктов биотопа, что предопределяет ограничение в применении синтетических препаратов (B.C. Бузлама, Т.И. Агеева, 1987; Г.Н. Богданов, 1999; И.М. Донник, 1999; А.А. Зуев, 2000). Перспективным сырьем для создания эффективных и безопасных стимуляторов резистентности являются природные полимеры: пептиды, нуклеиновые кислоты, полисахариды. Среди последних уникальным сочетанием свойств обладает хитин/хитозан - биосовместимый полимер с низкой токсичностью и высокой реакционной способностью, а изучение адаптогенных свойств препаратов на его основе является актуальной задачей (А.И. Албулов, А.Я. Самуйленко, С.М. Шинкарев, 2004; Г.В.Мещерякова, 2006; С.В. Мерзляков, Л.Ю. Топурия, В.А. Клёнов, 2006; М. Bhanoori, G. Venkateswerlu, 2000; R. Terreux, M. Domard, С. Viton, A. Domard, 2005; A.K. Singla, M. Chawla, 2001; А.В. Ильина, В.П. Варламов, 2001; 2005).

Вышеизложенное послужило основанием для изучения ряда морфологических и биохимических показателей крови бычков при транспортном стрессе; возможности минимизации внешних влияний, агрессивного воздействия транспортного стресса и концентрации защитных сил в ответ на потенциально повреждающий стимул путем применения^ производных хитин/хитозана.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение закономерностей развития общего адаптационного синдрома в организме бычков при экстремальном воздействии транспортного стресса и механизмов ограничения стресс-индуцированных повреждений их организма препаратами^ хитин/хитозан.

Для реализации указанной цели были определены следующие задачи: изучить характер- изменений клинико-физиологических параметров* (температура тела, частота сердечных сокращений, частота и ритм дыхательных движений) организма бычков после транспортировки;

- оценить глубину воздействия транспортного' стресс-фактора на организм бычков и продолжительность периода краткосрочной" адаптации;

- установить закономерности функционирования организма бычков на клеточном и органном уровнях при экстремальном воздействии транспортного стресс-фактора;

- выявить механизмы ограничения препаратами на основе хитин/хитозан стресс-индуцированных повреждений при транспортировке4 бычков;

- дать экономическое обоснование эффективности применения препаратов на' основе хитин/хитозан при транспортном стрессе.

Научная новизна. Проведенные комплексные исследования по изучению динамики клинико-физиологических, морфологических и биохимических показателей крови бычков при транспортировке позволили дать-характеристику реакции гематологического стресс-синдрома системы крови, выявить закономерности общего адаптационного механизма поддержания клеточного гомеостаза.

Впервые проведены исследования по ограничению хитиновыми биополимерами индукции транспортной стресс-реакции у бычков. Установлено* ярко выраженное адаптогенное, антигипоксическое и антиоксидантное действие низкомолекулярных форм хитозана и сукцината хитозана (патент РФ на изобретение №2336693, приоритет от 02.04.2007). Доказана их способность снижать глубину воздействия транспортного стресс-фактора на организм бычков и сокращать период краткосрочной адаптации (заявка на изобретение № 2008118089/13(020879) «Способ повышения адаптационных возможностей бычков в молочный период выращивания»).

Дано физиологическое обоснование к использованию в практике мясного скотоводства препаратов хитозана низкомолекулярного, сукцината хитозана высокомолекулярного и сукцината хитозана низкомолекулярного. Данные препараты являются не только адаптогенами и антигипоксантами, но и способны проявлять гиполипидемическое, антиоксидантное, антихолестери-немическое и иммуностимулирующее действие.

Практическая значимость работы. Разработана научно обоснованная система мероприятий, обеспечивающая стойкую адаптационную перестройку организма бычков при транспортировке, что позволило снизить отрицательное воздействие транспортного стресс-фактора, активизировать приспособительные функции организма, расширить функциональные резервы и продуктивные возможности организма животных.

По результатам исследований обобщена, доложена и опубликована на международном, российском и региональном уровнях информация о использовании хитозана и сукцината хитозана для повышения адаптационных возможностей и мясной продуктивности бычков на откорме.

На XII международной выставке-конгрессе «Высокие технологии. Инновации. Инвестиции» получена золотая медаль и диплом (г. Санкт-Петербург, 2007). На VII Московском международном салоне инноваций и инвестиций (г. Москва, 2007) работе присуждена бронзовая медаль и диплом. На областном салоне инноваций и инвестиций (г. Челябинск, 2007) работа награждена дипломом. На VIII Московском международном салоне инноваций и инвестиций (г. Москва, 2008) и на XII международном форуме «Российский промышленник - 2008» (г. Санкт-Петербург, 2008) работа отмечена дипломами.

Работа является грант-обладателем Губернатора Челябинской области, лауреатом премии Законодательного собрания Челябинской области (г.Челябинск, 2008).

Патент на изобретение РФ №2336693 (приоритет от 02.04. 2007); заявка на изобретение №2008118089/13(020879) могут быть использованы в адаптивной технологии выращивания и откорма молодняка крупного рогатого скота.

Апробация работы. Основные результаты проведенных исследований доложены и обсуждены на международных научно-практических конференциях: «Зоогигиена, ветеринарная санитария и экология — основы профилактики заболеваний животных» (г. Москва, 2006); «Инновационный путь развития АПК - магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства» (Ростовская область, п. Персиановка, 2007); «Современные проблемы ветеринарной терапии и диагностики болезней, животных» (г. Троицк, 2007); «Генетические основы и технология повышения конкурентоспособности животноводства» (г.Алмата, Респ.Казахстан 2008г); «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (г. Москва, 2008); «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (г. Ставрополь, 2008); Всероссийской научно-практической конференции «Особенности физиологических функций животных в связи с возрастом, составом рациона, продуктивностью, экологией и этологией» (г. Казань, 2006, 2008); на конференции фармакологов РФ «Фармакологические и экотоксикологические аспекты ветеринарной медицины» (г.Троицк, 2007г); Сибирской межрегиональной научно-практической конференции «Адаптация, здоровье и продуктивность животных» (г. Новосибирск, 2008); Всероссийском конкурсе на лучшую научно-исследовательскую работу среди студентов и аспирантов (г. Троицк, 2007, 2008; г. Тюмень, 2007; г. Москва, 2007, 2008). научно-практической конференции «Применение новых технологий для развития экономики региона» (г. Челябинск, 2007).

Реализация результатов исследований. Результаты исследований внедрены в ОАО ПКЗ «Дубровский» Красноармейского района Челябинской области. По материалам диссертационной работы выпущены информационные листки Челябинским ЦНТИ № 74-021-08 и № 83-001-08. Научная разработка по материалам исследований демонстрируется на областной действующей губернаторской выставке (г. Челябинск, 2008; 2009),

Получен патент РФ №2336693 (приоритет от 02.04. 2007) и оформлена заявка на изобретение № 2008118089/13(020879) «Способ повышения адаптационных возможностей бычков в молочный период выращивания».

Материалы научной работы используются в учебном процессе сельскохозяйственных ВУЗов Российской Федерации.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 научных статей, в том числе 4 - в рецензируемом издании, рекомендуемом ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Работа включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материал и методики исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения, список литературы, приложения.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Лазарева, Евгения Викторовна

154 Выводы

1. Транспортировка является чрезвычайной функциональной нагрузкой на организм бычков, что проявляется повышением температуры тела на 1,4 °С, увеличением частоты дыхательных движений - 27,38%, сердечных сокращений - 12,12%; саккадированным дыханием; развитием состояния напряжения морфофункциональных и гомеостатических функциональных систем, сопровождающегося возрастанием роли гликонеогенеза и усилением жиромобилизующего эффекта, пероксидацией липидов, что приводит к снижению общей неспецифической резистентности, иммунологической реактивности, резко ограничивает адаптационные возможности сопротивления организма и снижает продуктивность бычков.

2. Характер изменений гемограммы бычков свидетельствует о нарушении динамического равновесия в смене клеток белой крови, снижении показателей общей неспецифической резистентности, что проявляется резко выраженной эозинопенией, нейтрофильным лейкоцитозом, преимущественным увеличением числа молодых клеток (палочкоядерных) - в 3,49 раза; количественным снижением в 2,73 раза базофилов, продукция которых определяет напряженность иммуногенеза, на фоне уменьшения на 30,66% числа лимфоцитов, играющих основную роль в специфических защитных реакциях.

3. Период краткосрочной «несовершенной» адаптации при транспортном стрессе у бычков составляет 2,5 дня и свидетельствует о неподготовленности функциональных систем организма к мобильной перестройке метаболических процессов с катаболического характера на анаболический для быстрого восполнения ресурсов адаптации.

4. Транспортировка бычков вызывает в их организме направленное перераспределение энергетических и пластических ресурсов. В углеводном обмене при повышении концентрации глюкозы в 1,78 раза выражен гипоксический профиль, сопровождающийся повышением коэффициента лактат/пируват в 1,27 раза. Белковый и липидный обмен носят катаболический характер и характеризуются гипоальбуминемией и гиперлипидемией.

Активация пероксидного окисления липидов сопровождается, угнетением антиоксидантной системы защиты организма бычков, что тестируется увеличением уровня малонового диальдегида в 1,60 раза и снижением концентрации церулоплазмина в 1,50 раза.

5. Обладая адаптогенными свойствами, хитиновые биополимеры вызывают мобильную перестройку функциональных систем организма, обеспечивающую запуск адаптационного процесса.

5.1. Изменяя механизмы как срочной, так и хронической адаптации, препараты снижают энергозатраты на подкрепление адаптационных реакций, обеспечивают трансформацию анаэробного окисления углеводов в аэробное, предупреждая возникновение ярко выраженного гипергликемического состояния, что сопровождается увеличением концентрации глюкозы на 42,10; 37,10 и 36,92% на 1 день (в контроле в 1,79 раза); характером изменения уровня пировиноградной и молочной кислоты; снижением углеводного индекса на 10 день до 12,14; 12,10 и 11,86 (в контроле - 13,80); снижением активности щелочной фосфатазы, по сравнению с контролем, в 1,36; 1,54 и 1,59 раза соответственно при применении хитозана низкомолекулярного, сукцината хитозана высокомолекулярного и сукцината хитозана низкомолекулярного.

5.2. Хитиновые биополимеры способствуют формированию структурного базиса «гарантированной» долговременной адаптации, обеспечивающего фиксацию сложившихся адаптационных систем и увеличение их мощности до уровня, диктуемого транспортным стресс-фактором. Об этом свидетельствует как повышение общей концентрации белков, альбуминовой фракции, так и значения белкового индекса, составившие после транспортировки 1,11 (2 хитозан); 1,23 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 1,13 (сукцинат хитозана низкомолекулярный), против 0,92 - в контроле и превышающие контрольные величины до конца эксперимента.

5.3. Функциональное состояние печени бычков при применении хитиновых биополимеров характеризуется активацией белоксинтезирующей метаболической функции и сопровождается повышением общей концентрации белка, альбуминовой фракции, альбуминово-глобулинового коэффициента, нормализацией каталитической активности ферментов переаминирования и снижением величины коэффициента де Ритиса.

6. Адаптационные реакции иммунной системы после транспортировки характеризуются увеличением синтеза иммуноглобулинов на 18,39 (хитозан), 14,12 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 19,16% (сукцинат хитозана низкомолекулярный) и бета-глобулинов соответственно на 16,67; 20,83 и 19,96; количественным нарастанием клеток, выполняющих защитную функцию: эозинофилов - в 1,60 — 3,06 раза, лимфоцитов - на 17,16 - 37,80%, моноцитов -на 12,13 - 13,81% и снижением незрелых форм нейтрофилов в 1,23-3,26 раза.

7. Изменения в липидном обмене организма бычков при применении хитиновых биополимеров носят выраженный ресурсо-адаптивный характер, характеризуют стойкую адаптацию на стресс и сопровождаются угнетением жиромобилизующего эффекта (концентрация общих липидов снизилась на 21,14 - хитозан, 14,22 - сукцинат хитозана высокомолекулярный и 23,49% - сукцинат хитозана низкомолекулярный), снижением формирования транспортных форм жира в организме (уровень Р-липопротеидов соответственно снизился на 38,0; 14,21 и 23,49%) и проявлением неспецифического антихолестеринемического действия.

8. Ограничение хитиновыми препаратами стресс-реализующих механизмов подтверждается их антиоксидантными свойствами, проявляющимися снижением концентрации малонового диальдегида, в среднем, в 1,6 раза; повышением функционального состояния системы защиты организма бычков, тестируемого увеличением концентрации основного антиоксиданта сыворотки крови (церулоплазмина) - в 1,5 раза, характером изменений содержания биорастворимых антиоксидантов (фосфолипидов) и повышением активности вспомогательного фермента дыхания (каталазы) - на 11,22-14,63%.

9. Молекулярная масса и структурная организация хитинсодержащих препаратов определяла закономерности их метаболизма в организме бычков на протяжении всего научно-хозяйственного опыта. При этом наибольшей биологической активностью обладали низкомолекулярные формы хитин/хитозана.

10. Применение хитиновых производных до и после транспортировки позволяет не только снизить потери живой массы опытных бычков в 2,08-2,32 раза, но и повысить с высокой степенью достоверности живую массу в 6-месячном возрасте на 14,85 кг (хитозан); 13,74 (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 19,30 (сукцинат хитозана низкомолекулярный).

Экономический эффект и экономическая эффективность в расчете на 1 рубль затрат от применения препаратов соответственно составили 6223,6 и 4,97 руб. (хитозан низкомолекулярный); 4905,2 и 2,57 руб. — (сукцинат хитозана высокомолекулярный) и 8800,2 и 4,28 (сукцинат хитозана низкомолекулярный).

Практические предложения

1. Для подтверждения наличия стресса у сельскохозяйственных животных, определения сроков периода краткосрочной адаптации, глубины перестройки функциональных систем организма при экстремальных воздействиях факторов окружающей среды проводить расчет показателя состояния, абсолютная величина которого находится в обратной зависимости от выраженности состояния напряжения организма.

2. При транспортировке бычков для ограничения стресс-индуцированных повреждений организма применять за три дня до транспортировки низкомолекулярные формы хитозана и сукцината хитозана per os в виде 2% раствора в дозе 60 мг/кг живой массы. При необходимости повышения адаптационного потенциала организма животных применение препаратов продолжить после транспортировки в указанных выше дозах в течение двух 5-дневных курсов с интервалом 5 дней.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лазарева, Евгения Викторовна, Троицк

1. Азаубаева, Г.С. Картина крови у животных и птиц / Г.С. Азаубаева.- Курган: Зауралье, 2004.- 168с.

2. Албулов, А.И. Влияние скармливания хитозана и фитохитодеза на резистентнось организма телят/ А.И. Албулов, Е.В. Крапивина, А.В. Борода// Достижения науки и практики АПК.-2004.-№3.- С.24-27.

3. Албулов, А.И. Различные виды хитозана для ветеринарии и животноводства/ А.И. Албулов, А .Я. Самуйленко, С.М. Шинкарев //Аграрная Россия.- 2004.- №5.- С.8-12.

4. Аликаев, В.А. Справочник по контролю кормления и содержания животных/ В.А.Аликаев, Е.А. Петухова, Л.Д. Халепева. М.:Колос, 1982.-С.220-223.

5. Амерханов, X. Производство говядины и пути его увеличения в России/ X. Амерханов// Молочное и мясное скотоводство.- 2003. №6. - С.3-10.

6. Антимикробная активность разномолекулярного хитозана в пищевых средах/С.Н. Максимова, Е.В. Ситникова, Г.Н. Ким и др. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 8-й меджунар.конф/ ВНИРО.-2006.-С.77-79.

7. Антимикробная активность хитозана с разной молекулярной массой / В.М. Червинец, В.М. Бондаренко, А.И. Албулов и др.// Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 6-й меджунар.конф./ВНИРО.- 2001.-С. 130-133.

8. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические / Б.И. Антонов. -М.: Агропромиздат, 1991. С. 16.

9. Баева, Е.В. Научные основы адаптивной системы ведения животноводства / Е.В. Баева, Г.М. Бабарэ. Кишинев: Штиинца, 1985. С. 5

10. Баймишева, Т. Спад мясного подкомплекса и пути вывода его из кризиса на Самаре / Т. Баймишева // Молочное и мясное скотоводство 2003. - №4. -С.3-7.

11. Бельков, Г.И. Технология выращивания и откорма скота в промышленных комплексах и на площадках / Г.И. Бельков. М: Росагропромиздат, 1989. -207с.

12. Бережная, Н.М. Иммунорегуляция при аллергических заболеваниях и ее коррекция / Н.М. Бережная // Биохимия человека и животных.-Киев: Наукова Думка, 1986.-Вып.9.-С. 28-38.

13. Бузлама, B.C. Биодинамика витамина С в механизме защитного действия адаптогенов при технологическом стрессе животных/ B.C. Бузлама, Т.И.Агеева // Тез. докл. 2 Всесоюз. симп. / JICXA. 1987: Науч. основы витамин, питания с.-х. жив-х. — С. 47-48.

14. Быканова, О.Н. Перспективы использования хитозана в качестве Б АД к пшце/О.Н. Быканова, С.Н., Максимова, Г.А. Тарасенко// Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 8-й междунар. конф. / ВНИРО.-2006.-С.275-276.

15. Вальдман, А.В. Актуальные проблемы стресса /А.В. Вальдман.-Кишинев: Штиница, 1976.-С.34-43

16. Вальдман, А.В. Фармакологическая регуляция эмоционального стресса /А.В. Вальдман.-М.: Медицина, 1979.-С.38-40.

17. Васильев, Н.В. Система крови и неспецифическая резистентность в экстремальных климатических условиях/ Н.В. Васильев, Ю.М.Захаров, Т.И. Коляда.- Новосибирск: Наука; 1992.- 257с.

18. Вахитов, Т.Я. Концепция создания новых пробиотических препаратов / Т.Я. Вахитов, JI.H. Петров, В.М. Бондаренко //Микробиология. 2005 - № 5. - С. 103-109.

19. Виру, А.А. Гормональные механизмы адаптации и тренировки /А.Виру.- JL: Наука, 1981.- 150 с.

20. Влияние хитозана на иммунную и эндокринную систему поросят / А.А. Буянов, В.Н. Видении, А.Ч. Гречухин и др. // Ветеринария.-2004.-№2.-С.47-51.

21. Воробьев, А.А. Микробиология и иммунология / Под ред. А.А. Воробьева.-М.: Медицина.-1999.- 608с.

22. Гамзазаде, Л.И. Антибактериальная активность хитозанов / Л.И. Гамзазаде, С.М. Насибов, О.В. Лукин // Современные перепективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы Восьмой междунар. конф. Казань, 2006.-С. 183186.

23. Гамидов, М. Цеолиты эффективная кормовая добавка при выращивании телят / М. Гамидов // Молочное и мясное скотоводство.- 2002. - №6. - С.18-19.

24. Гаркави, Л.Х. Адаптацион ные реакции и резистентность организма / Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, М.А. Уколова 2-е изд., доп. - Ростов-на-Дону, 1979. -128 с.

25. Голиков, А.Н. Адаптация сельскохозяйственных животных / А.Н. Голиков. — М.: Агропромиздат, 1985.-215 с.

26. Гольдберг, Е.Д. Роль вегетативной нервной системы в регуляции гемопоэза / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, И.А Хлусов,- Томск, 1997.-217с.

27. Горизонтов, П.Д. Гомеостаз.-М.,1981.- 569с.

28. Гуськов, А.Н. Влияние стресс-фактора на состояние сельскохозяйственных животных /А.Н. Гуськов.- М.: Агропромиздат, 1994. 384 с.

29. Дерхо, М.А. Прогнозирование течения репаративного процесса при чрескостном остеосинтезе / М.А. Дерхо, С.Ю. Концевая/ЛЗетеринария.-2004.-№2.-С.53-55

30. Десятниченко, К.С. Неколлагеновые белки костной ткани в регуляции скелетного гомеостаза, минерализации и репаративного остеогенеза: Автореф.дис.докт. мед. наук: /К.С. Десятниченко. Челябинск, 1997.-35с.

31. Донник, И.М. Биологические особенности сельскохозяйственных животных и устойчивость к заболеваниям в разных экологических зонах Уральского региона // Проблемы радиоэкологии и пограничных дисциплин. Вып. 2. — Екатеринбург, 1999. - С. 214-239.

32. Донцов, В.И. Иммунология постнатального развития / В.И. Донцов.-М.: Наука, 1990.- 486с.

33. Дыгай, A.M. Воспаление и гемопоэз // A.M. Дыгай, Н.А. Клименко .- Томск, 1992.- 275с.

34. Емельянов, A.M. Физиологические особенности новорожденных животных и пути повышения их резистенстности: Учеб.пособ./ A.M. Емельянов, В.Т. Серебренников. Свердловск, 1990.- С.28-45.

35. Еременко, В. Создание помесных маточных стад в мясном скотоводстве на южном Урале /В. Еременко, Ф. Каюмов// Молочное и мясное скотоводство.-2002.- №6. С.11-12.

36. Ермолаев, С.В. Оценка иммунного статуса животных из районов техногенного загрязнения / С.В.Ермолаев // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: Междунар. коорд. совещ.-Воронеж, 1997.-С. 204-206.

37. Зайчик, А.Ш. Общая патофизиология / А.Ш. Зайчик, А.П Чурилов. СПб.,-2001.Т. 1 -243с.

38. Зенков, Н.К. Окислительный стресс: Биохимические и патофизиологические аспекты /Н.К. Зенков, В.З.Ланкин, Е.Б. Меньшикова- М.: Наука-Интрепериодика, 2001.-343 с.

39. Зеньков, А.С. Влияние перевозки на физиологические и биохимические показатели крови свиней /А.С. Зеньков, С.И. Лосьмакова, ЗИ. Ковалева// Научные основы развития животноводства в БССР.-Минск: Ураджай,1979.-Вып.9-С.84-85.

40. Зимин, Ю.С. Стресс: Иммунологические аспекты / Ю.С. Зимин. — М.: Медицина, 1983. С.41-43.

41. Зуев, А.А. Профилактика перинатальной патологии // М-лы Междунар. науч. конф., посвящ. 70-летию образования зооинж. фак-та / Казанск. ГАВМ.-2000.-С. 89-90.

42. Изменения в системе крови при длительной гипокинезии/ Ю.Г. Камскова, А.Г. Рассохин, В.Э. Цейликман и др. //Вестник ЧГПУ. 2000.- Серия 9,-№1.- С.90-93.

43. Ильина, А.В. Ацетил ирование низкомолекулярного водорастворимого хитозана / А.В. Ильина, В.П. Варламов // Новые достижения в исследовании хитина и хитозана: М-лы 6-й междунар. конф / ВНИРО.-2001.- С.281-283.

44. Ильина, А.В., Полиэлектролитные комплексы на основе хитозана/А.В. Ильина, В.П. Варламов// Приют, биохим. и микробиол. 2005.Т.41.№1. С 916.

45. Исследование хитодеза и фитохитодеза как перспективных биологически активных пищевых добавок / Б.А. Комаров, А.И. Албулов, Г.А. Эстрина и др. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 8-й меджунар.конф./ ВНИРО.- 2006.-С.195-198.

46. Казимирко, В.К. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия / В.К. Казимирко, В.Н. Мальцев, В.Ю. Бутылин.- Киев: Морион, 2004.- 160с.

47. Казначеев, В. П. Современные аспекты адаптации /В.П. Казначеев — Новосибирск: Наука, 1980. 188 с.

48. Казначеев, В.П. Биосистема и адаптация /В.П. Казначеев.- Новосибирск, 1973. 74 с.

49. Калашников, В. Мясное скотоводство и пути его развития В России/В.Калашников, В.Левахин // Молочное и мясное скотоводство. — 2004.-№6.-С.2-5.

50. Камскова, Ю.Г. Физиологические основы механики мышечного сокращения /Ю.Г. Камскова.- Челябинск, 2004.-262с.

51. Каплан Е. Я. Оптимизация адаптивных процессов организма / Е. Я. Каплан,

52. О. Д. Цыренжапова, Л. Н. Шантанова. М.; 1990.- 94 с.

53. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных /И.М. Карпуть. Минск: Ураджай, 1986. - 99 с.

54. Кассиль, Г.Н. Некоторые гуморально-гормональные и барьерные механизмы стресса /Т.Н. Кассиль// Актуальные проблемы стресса. — Кишинев, 1975.-С. 100-115.

55. Каюмов, Ф.Г. Морфологический состав, биохимические показаетли крови и факторы гуморальной защиты бычков казахской белоголовой породы разных генотипов / Ф.Г. Каюмов, М.П. Дубовскова, А.В. Кузин// Известия Оренбург. ГАУ. 2006. - №3 (11). - С. 23.

56. Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных / A.M. Смирнов, П.Я. Конопелько, B.C. Постников и др. -Л.: Колос, 1981. 447с.

57. Кобзев, Н.А. Влияние дилудина на показатели крови при транспортировке бычков к месту убоя / Н.А. Кобзев // Тез. докл.науч.-практ. конф. Оренбург, 1987. С.53-57

58. Коваленко, Е.А. Гипокинезия /Е.А. Коваленко, Н.Н. Гуровский.- М, 1980.-123с.

59. Ковальчикова, М. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных/М. Ковальчикова, К. Ковальчик. М.: Колос, 1978. - 270с.

60. Коламин — антистрессовый препарат при выращивании бычков / В.Попов, А. Сало, А. Черных и др.// Молочное и мясное скотоводство.- 2007. №8. -С.7-8.

61. Комаров, Б.А. Почему хитозан полезен человеку / Б.А Комаров// Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 6-й междунар.конф./ ВНИРО.- 2008.-С.187-195.

62. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник/И.П. Кондрахин. — М.: КолосС, 2004. — 520 с.

63. Косилов, В. Особенности роста и мясной продуктивности чистопородных и помесных бычков /В.Косил ов, С. Мироненко// Молочное и мясное скотоводство.- 2004. №4. - С.40-42.

64. Кравченко, Н.А. Разведение сельскохозяйственных животных /М.А. Кравченко.-М.: Колос, 1973.-С.84-218.

65. Ксенц, С.М. Механизмы адаптации и компенсации физиологических функций в экстремальных условиях / С.М. Ксенц// Тр. Зап.-Сиб. объединения физиологов, биохимков, фармакологов.- Томск, 1977.- С. 114115

66. Кубракова, С.И. Качество мясной продукции у бычков при откорме с использованием хлорнокислых солей / С.И. Кубракова// Использование препаратов солей хлорной кислоты в животноводстве.- М., 1984. -С.60-64.

67. Кузнецов, А.И. Влияние стрессовой чувствительности на процент рождения физиологически незрелых поросят / А.И, Кузнецов, В.Ф. Лысов// Физиология молодняка с.-х. животных. Троицк 2002.-С.58-59

68. Кузнецов, А.И. Сравнительная характеристика межуточного обмена веществ и продуктивности свиноматок с разной стрессовой чувствительностью/А.И. Кузнецов, Е.Л. Горбунова//Свиноводство, 2003,-№4.-С.22-23

69. Кузнецов, А.Ф. Влияние транспортировки на резистентность телят/ А.Ф.Кузнецов, Л.А.Пастухова//Ветеринария. 1985.- №2- С. 17-18.

70. Кузнецов, П.А Изучение иммуномодулирующих свойств сукцината хитозана / П.А. Кузнецов, А.И. Албулов, A.M. Клюкина и др. // Ветеринария и кормление.- 2007. №5.- С. 12-13.

71. Левахин, Г.И. Использование ферментного препарата в кормлениимолодняка мясного скота /Г.И. Левахин, Х.А. Дустанов, Г.К. Дускаев //

72. Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства: М-лы,междунар. науч.-практ. конф.- Горки, 2005. Вып.8.-С.98-102.

73. Левахин, Ю Влияние стресс-факторов на клинические показатели бычков /

74. Ю. Левахин, Г.Павленко // Молочное и мясное скотоводство.- 2008. №4.1. С.30-31.

75. Левахин, В.И. Технологические приемы повышения продуктивности молодняка крупного рогатого скота/ В.И.Левахин и др.// М-лы. науч.-практ. конф. -Уфа, 2002.- С.66-67

76. Левахин, В.И. Антистрессовые добавки повышают откорм скота на механизированных площадках //Проблемы проектирования, строительства и эксплуатации комплексов и ферм по производству говядины.-М.,1980,-С. 112-115.8182,83,84,85,86,87,88,89,90,91.

77. Меерсон Ф.З., Адаптация, стресс, и профилактика /Ф.З. Меерсон.- М.: Наука 1981.-140с.

78. Меерсон, Ф.З. Общий механизм адаптации и профилактики/Ф.З. Меерсон.-М.: Наука, 1973.-360с.

79. Мерзляков, С.В. Применение хитозана для повышения воспроизводительной способности коров /С.В. Мерзляков, Л.Ю. Топурия, В.А. Клёнов //Известия ОГАУ. 2006. -№3. - С. 71-73.

80. Миргалимов, P.J1. Использование хитинсодержащих препаратов при выращивании бычков черно-пестрой породы /Р.Л.Миргалимов,

81. A.Р.Таирова//Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство 2008.-№11 .-С.67-76.

82. Митюшов, М.И. Актуальные проблемы стресса / М.И. Митюшов, В.Г. Шаляпина.-Кишинев, 1976.- С. 186-200.

83. Михайлов, В.И. Мясная продуктивность, клинико-физиологическое состояние и обмен веществ у животных, откармливаемых с использованием солей хлорной кислоты: Автореф. дисс.докт. с.-х. наук /В.И. Михайлов.-М., 1983.-50с.

84. Модификация биологических свойств липополисахарида (ЛПС) при образовании им комплекса с хитозаном/ И.М. Ермак, В.Н. Давыдова,

85. B.И.Горбач и др //Бюл. эксперим. биол. мед. 2004. Т. 137. № 7. С. 430-434.

86. Монастырев, A.M. Стрессы и их предупреждении при интенсивной технологии производства говядины/А.М. Монастырев Троицк, 2000.-159 с.

87. Мохов, Б.П. Адаптация и продуктивность крупного рогатого скота в условиях стресса //Б.П. Мохов// Эколого физиологические адаптации с.-х. жив - х: М-лы 6-й Всесоюз. конф. по экологической физиологии / Сыктывкар. СХИ. - 1985. - С. 125-129.

88. Некоторые аспекты действия крилевого хитозана при свободнорадикальных поражениях биообъектов/ И.В. Шугалей, С.Н. Львов, И.В. Целинский и др.//

89. Производство и применение хитина и хитозана: Тез. докл. 4-й Всерос. конф./ ВНИ РО.- 1995 .-С.49.

90. Никитченко, И.Н. Адаптация, стресс и продуктивность сельскохозяйственных животных / И.Н. Никитченко, С.И. Плященко, А.С. Зеньков.- М.:Ураджай, 1988.- 35с.

91. Новые антистрессовые препараты при выращивании и откорме бычков на мясо/И. Горлов, И. Осадченко, В. Ранделина и др.// Молочное и мясное скотоводство.- 2008. №5. - С. 11-12.

92. Онищенко, А.П. Сокращение потерь мясной продуктивности при технологических стрессах/ А.П. Онищенко, A.M. Монастырев, А. Н. Гизатуллин//У ченые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. 2007.-Т.187.-С.48-53.

93. Осадченко И. Использование новых препаратов для коррекции стрессов у убойного скота / И.Осадченко, И. Бушуева, М. Сложенина // Молочное и мясное скотоводство.- 2008. №. - С.20-22.

94. Павлова, А.И. Проблема адаптации крупного рогатого скота в Якутии Экологические эпизоотологические и иммунологические аспекты: Автореф. дис. . докт. вет. наук / А.И. Павлова.- Якутск, 1997.- 39 с.

95. Панин, JI.E. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука, 1983.-233 с.

96. Парин, В.В. Очерки клинической физиологии кровообращения / В.В. Парин, Ф.З Меерсон М.Медицина, 1965.-500 с.

97. Плященко, С.И. Стрессы у сельскохозяйственных животных./СИ. Плященко, В.Т. Сидоров М.: Агропромиздат, 1987. -192 с.

98. Погадаев, К.И. Актуальные проблемы стресса. Кишинев, 1976.-С.211-228.

99. Преображенский, Д.И. Стресс и патология размножения сельскохозяйственных животных /Д.И. Преображенский. М.: Наука, 1993.-С. 22 -25.

100. Приоритетные направления производства говядины и развития мясного скотоводства России /X. Амерханов, В.Шапочкин, Г. Легошин и др// Молочное и мясное скотоводство. -2007.-№3.-С.2-7.

101. Продуктивность и качество мяса свиней разных генотипов и стресс-реактивности /В.И. Степанов, В.Х. Федоров, А.И. Тариченко и др.//3оотехния.-2001 .-№7.-С.28-29

102. Резистентность и интенсивность роста телят под влиянием хитозана/ Ю.П. Фомичев, Р.Г. Шайдуллина, Ю.Н. Федоров и др.// Сельскохозяйственная биология. 2004. -№2 - С. 89-94

103. Савронь, Е.С. Определение каталазы крови по Баху и Зубковой / Е.С. Савронь/ Практикум по биохимии животных. — М., 1967. С. 162-163.

104. Сало, А. Мигуген — эффективный антистрессовый препарат при выращивании и откорме бычков/А. Сало// Молочное и мясное скотоводство.- 2008. №1. - С. 19-20.

105. Свойства хитозановых пленок, модифицированных термообработкой / Г.А. Вихорева, М.А. Зоткин, В.П. Агеев и др.// Новые достижения в исследовании хитина и хитозана: М-лы 6-й междунар. конф. Москва-Щелково, 2001. - С. 14-18.

106. Связь элисирной активности хитина со степенью его ацетилирования/ И.В. Максимов, Е.А.Черепанова, Л.Г., Яруллина и др.// Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 8-й меджунар.конф./ ВНИРО.-2006.-С.110-113.

107. Селье, Г. Концепция стресса, как мы её представляем в 1976 году // Новое о гормонах и механизме их действия.-Киев, 1977.-С.27-36.

108. Селье, Г. На уровне целого организма /Г.Селье.- М.: Медгиз, 1972.- 272с.

109. Селье, Г. Очерки об адаптационном синдроме/ Г. Селье.- М.: Медгиз, 1960.-С.124-129.

110. Сидорович, М. Влияние технологии на адаптацию телят в профилакторный период /М. Сидорович// Молочное и мясное скотоводство.- 2003. №5. -С.12-13.

111. Сизов, Ф.М, Коррекция стрессов у молодняка крупного рогатого скота/ Ф.М.Сизов, В .И. Левахин. Оренбург, 1999. - 228с.

112. Скрябин, К.Г. Хитин и хитозан: получение, свойства и применение/Под ред. К.Г. Скрябина, Г. А. Вихорева, В.П. Варламова.-М.: Наука, 2002. 368 с.

113. Сорбция радионуклидов хитиновыми сорбентами различного происхождения / В.Н. Косяков, И.Е. Велешко, Н.Г. Яковлев и др.// Современные тенденции в исследованиях и использовании хитина и хитозана: М-лы 7 междунар, конф. — СПб., 2002.-С. 520-523.

114. Степанов, А.В. Влияние транспортного стресса на организм бычков /А.В. Степанов// Практик.-2005.-№9.- 10.-С.70-71.

115. Степанов, В.И. Естественная резистентность свиней с различной стресс-реактивностью /В.И. Степанов//Ветеринария.-2000.-№7.-С.37-40.

116. Стресс и животноводство / под ред. Л.П. Марина, В.П. Тонкоглас.-Кишинев.- Штиница, 1982.

117. Судаков К. В. Эмоциональный стресс и артериальная гипертензия. М.,1976.

118. Таирова, А.Р. Влияние хитозана на некоторые показатели иммунитета коров в условиях экологического неблагополучия/ А.Р. Таирова, Г.В. Мещерякова//Актуальные проблемы ветеринарной медицины: М-лы междунар. науч-практ. конф., /УГАВМ.-2005.- С.128-129.

119. Таирова, А.Р. Острая и хроническая токсичность хитозана. / А.Р. Таирова, Т.Н. Давыдова // Продовольственная безопасность. XXI век: экологоэкономические аспекты: М-лы Всерос. науч-практ.конф. /УГСХА.- 2000.-С.292.

120. Тарасенко, Г.А. ' Экспериментальное обоснование гипохолестерин-немического действия хитозана из панциря камчатского краба // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы Пятой Междунар. конф. / ВНИРО, 1999- С. 198.

121. Теоретические исследования механизма комплексообразования в системе хитин Pb(II)/ Т.В. Солодовник, В.Н. Унрод, Б.Ф. Минаев, С.А. Пахарь// Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: М-лы 8-й меджунар.конф./ВНИРО:- 2006.-G. 130-132.

122. Тихонов, СЛ. • Стресс и- качество- мяса: Монография. / C.JI. Тихонов,-Троицк, 2007.-148с.

123. Тэрице, И.Н. Предупреждение стрессов у телят при перевозке //Ветеринария.-1975.- № 4. С. 80.

124. Устинов, Д.А. Стресс факторы в промышленном животноводстве / Д.А. Устинов - М.: Россельхозиздат, 1976. -166 с.

125. Фурдуй, Ф.И. Стресс и животноводство /Ф.И: Фурдуй/ Кишинев.: Штинца, 1982.-183 с.

126. Хаитов, Р. М. Иммунология: Учеб. пособ. / Р. М. Хаитов, Г. А. Игнатьева, И. Г. Сидорович //.- М.: Медицина, 2000.- 429.

127. Хайдарлиу, С.Х. Функциональная биохимия адаптации. — Кишинев: Штиинца, 1984.-272с.

128. Хитозан- и неспецифическая резистентность организма/Э.И. Хасина, М.Н. Сгребнева, И.М. Ермак и др.//Вестник ДВО РАН,- 2005. №1. - С.62I

129. Хусаинова, Н.В. Влияние стрессовой чувствительности свиней на пищевую ценность мяса свинины/Н.В. ХусаиноваЮкономика и социум на рубеже веков: М-лы IV науч.-практ.межвуз.конф.-Челябинск, 2004.-С.168-169.

130. Эзергайль, К. Влияние добавки «Бишас» на сокращение потерь мясной продуктивности /К. Эзергайль //Молочное и мясное скотоводство.- 2003.-№5. -С.-16-18.

131. Эзергайль, К. Глицин антистрессовый препарат при производстве говядины /К. Эзергайль // Молочное и мясное скотоводство.- 2003.- №1. — С. 32-34

132. Эммануэль Н.М. Химическая физика старения и стабилизации полимеров /Н.М. Эммануэль. -М: Химия, 1982.-С.282.

133. Эрнст, Л.К. Поведение сельскохозяйственных животных: Обзорная информация /Л.К. Эрнст, Т.Н. Венедиктов; ВНИИТЭССХ.-1974.-68 с.

134. Эффективность антистрессовых препаратов при сокращении потерь мясной продуктивности скота /В.Ляпина, Е.Нарыжнева, О.Ляпин, Л.Галактионова//Молочное и мясное скотоводство.- 2004. №4. - С. 10-11.

135. Эффективность растительных препаратов при транспортном стрессе у бычков / С.Л. Тихонов, Н.В. Тихонова, А.В. Степанов и др.//Аграрный вестник Урала.- 2005.- №7.- С.41-44

136. Юматов, Е. А. Центральные нейрохимические механизмы устойчивости кэмоциональному стрессу. Автореф. дис. на соискание уч. ст. докт. мед. наук, Москва, 1986.- 45 с.

137. Ярилин, А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М.: Медицина, 1999.-608с.

138. Agnihotri S.A., Mallikarjutta N.N., Aminabhavi Т.М. Recent advances on chitosan-based micro- and nanoparticles in drug delivery // .Controlled Release, 2004. V.100, № l,p. 5-28.

139. Berger J., Reist M., Mayer J. M., Felt O., Gurny R. Structure and interactions in chitosan hydrogels formed by complexation or aggregation for biomedical applications // Eur. J. of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 2004. V. 57. P. 3552.

140. Bernfeld P., Kelley T.F.II Biol J. Chem., 238, 1236 (1936).

141. Bhanoori M., Venkateswerlu G. In vivo chidn-cadmium complexation in cell wall ofNeurospora. Biochim. Biophys. Acta. 2000. P. 21-28.

142. Chatelit C., Damour O., Domard A. Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films//Biomaterials.-V.22.-N.3.- 2001.-P. 261-268.

143. Chung Y.C., Su Y.P., Chen C.C. // Acta. Pharmacol. Sin. 2004,- V.25,- № 7- P.-932-936.

144. Cruz J., Kawasaki M., Gorski W. Electrode coatings based on chitosan scattolds // Anal. Chem. 2000.V 72. № 4. P. 680-686.

145. Davidova V.N., Yermak I.M., Gorbach V.L., Solov'eva T.F. The effect of temperature on the interaction of Yersinia pseudotuberculosis lipopolysaccharide with chitosan. // Membr.Cell Biol. 1999. V. 13. P. 49-58.

146. Felt O., Buri P., Gurny R. Chitosan: A unique polysaccharide for drug delivery // Drug Delivery and Industrial Pharmaceuticals. 1998. V. 24. № 4. P. 979-993.

147. Fujita H. //Sogo Jgaku, 13, 740 (1956), С. A., 54, 22997 (1960)

148. Peluso G., O. Petilla, M Raniei, M. Santin, L. Ambrosio, D. Calabro, B. Awalone, G. Balsamo. Chitosan-mediated stimulation of macrophage function. Biomaterials. 1994 15.P. 1215

149. Gamzazade A.I., Shlimak B.M., Sklyar A.M., Stykova E.V. Pavlova S.- S.A., Rogozin S.V. Investigation of the hydrodynamic properties of chitosan solutions //Acta. Polym., 1985. V. 36, № 8, p. 421-424.

150. Gao Y., LeeK.-H., Oshima M., Motomizu S. Adsorption Behavior of Metal Ions on Cross-linked Chitosan and the Determination of Oxoanions after Pretreatment with a Chitosan Column // Analyt. Sci.— 2000. V. 16. P. 1303-1308.

151. Guibal E., Sweeney N. Von Offenberg, Vincent Т., Tobin J.M. Sulfur derivatives of chitosan for palladium sorption // React. Funct. Polym.— 2000. V. 50. P. 149163.

152. Ishibashi Y., Yamashita T. Effects of phagocytosis stimulating factor on the phaocytic processes of polymorphonuclear neutrophies.//Infect and Immun.-1999.-№l.-p. 825-833,

153. Jayakumar R., New N., Tokura S., Tamura S. Sulfated chitin and chitosan as novel biomaterials // Int J Biol Macromol. 2007. V. 40. № 3. P. 175-181.

154. Kochanowski A., Witek E., Siniarska В., Bortel E. Utilization of postgalvanic wastes with the aid of polymer and mineral materials (A laboratory note). Przemysl Chemiczny . 2003. V. 82. P. 38-39.

155. Kurita K. et ah. Preparation of Nonnatural Branched Chitin and Chitosan // Chemistry Letters. 1998. V. 27. №4. P. 317-318.

156. Lubben I.M., Verhoef J.C, Aelst A.C., Borchard G.Junginger H.E. Chitosan microparticles for oral vaccination: preparation, characterization and preliminary in vivo uptake studies in murine Peyer's patches // Biomaterials, 2001. V. 22, № 7, p. 687-694.

157. Ravi Kumar M.N.V., RAA. Muzzarelli, C. Muzzarelli, H. Sashiwa and A.J. Domb. Chitosan chemistry and pharmaceutical perspectives. // Chem. Rev. 2004. V. 104. P. 6017-6084.

158. Muzzarelli R.A.A. et al New York: Chitin in nature and technology// Plenum Press, 1986.-420 p.

159. Pestov A.V., Skorik Y.A., Yatluk Y.G. Thiocarbamoylation of chitosan // Proc. 10th International Conference on Chitin and Chitosan, Montpellie, 2006. P. 76.

160. Peter M.G., Domard A., Muzzarell R.A.A. Preparation of a fiber-reactive chitosan derivative wth enhanced antimicrobial activity// Advances in chitin science, Potsdam: Univ. Potsdam Press, 2000, 650 p.

161. Pike R.N., Buckle AM., Bonniec B.F., Church F.C. Control of the coagulation system by serpins Getting by with a little help from glycosaminoglycans // FEES Journal. 2005. V. 272. № 19. P. 4842-4851.

162. Ravi Kumar M.N.V. A review of chitin and chitosan applications // Reactive and Functional Polymers. 2000. V. 46. № 1. P. 1-27.

163. Rhoades J., Roller S. Antimicrobial actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods. Appl. Environ. Microbiol. 2000, 66 (1). P. 80-86.

164. Rinaudo M., Milas M., Le Dyng P. Charecterization of chitasan. Influence of ionic strength and degree of acetylation on chain expansion/Ans.J.Biol. Macromol. V.15/N.5, 1993.-P.281-285.

165. Roberts G.A.F. Chitin chemistiy// THE MAGMILAN Press LTD, printed in Hong Rong. 1992.P.350.

166. Sashiwa H., Shigemasa Y. Chemical modification of chitin and chitosan 2: preparation and water soluble property of N-acylated or N-alkylated partially deacetylated chitins // Carbohydrate Polymers. 1999. V. 39. № 2. P. 127-138

167. Singla, A.K., Chawla M. Chitosan some pharmaceutical and biological aspect an uptade //J. Pharrn/ Pharmacol. 2001. V. 53. №8 . P. 1047-1067.

168. SkoricYu.A., Gomes C.A.R., Vasconcelos M.T.S.D.,Yatluk Y u П N-(2 Carboxyetyl) chitosans: regios elective syntesis, characterization and protolytic equilibra//Carbohydrate Research.2003. V.338.p.271-276.

169. Sugimoto M., Morimoto M., Sasbiwa H., Sugimoto M. Preparation and characterization of water-soluble chitin and chitosan derivatives // Carbohydrate Polymers. 1998. V. 36. № 1. P. 49- 59.

170. Terada N. et al. Synthesis of Water-soluble Oxidized Chitosan Derivatives and Their Biological Activity// Chemistry Letters. 1999. V. 28. № 12. P. 1285-1286.

171. Thanou M., Florea Bi., Geldof M., Junginger H.E., Borchard G. Quaternized chitosan oligomers as novel gene delivery vectors in epithelial cell lines// Biomaterials. 2002. V. 23. Na 1. P. 153-159.

172. Tsai, G.J., Su, W.H. Y. Antibacterial activity of shrimp chitosan against E. Coli. // J.Food Prot. 1999. V, 62. P 239-243.

173. Uchida, Y. Antibacterial activity by chitin and chitosan // Food Chemical. 1988. V. 2. P. 22-29.

174. Yurovskikh M.A., Pestov A.V., Kogan G., Skorik Yu.A., Yatluk Yu.G. Sorption properties of the modified chitin-glucans // Advances in Chitin Science and Technology. Proc. of 7th Asia-Pacific Chitin and Chitosan Symposium, Busan. 2006. P. 60-62.

175. Yan X., Khar. Т., Lim L.Y., PEC films prepared from Chitosan-Alginate coacervates // Chem Pharm Bull (Tokyo) 2000. V. 48. N 7. P. 941-946.