Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Гетерогенность популяций Listeria monocytogenes по идентификационным признакам в окружающей среде и рыбных продуктах

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Аль-Асбахи Надия Хассон

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

Современные проблемы выявления и идентификации Listeria monocytogenes в неклинических образцах».

1.1. Биологическая характеристика бактерий рода Listeria, особенности, определяемого ими патологического процесса

1.1.1. Биологическая характеристика бактерий рода Listeria

1.1.2. Распространение листерий в природе, устойчивость к неблагоприятным воздействиям.

1.1.3. Особенности протекания листериоза у людей, факторы патогенности листерий.

1.2. Современные методы обнаружения листерий в клинических образцах, объектах внешней среды, в пищевых продуктах.

1.2.1. Накопительные и диагностические среды для листерий.

1.2.2. Видовая идентификация в пределах рода листерия.

1.2.3 Серотипирование листерий.

1.2.4. Гемолитическая активность листерий как видовой идентификационный признак.

1.2.5. Ускоренные методы идентификации листерий.

1.3. Проблемы выявления и идентификации листерий в неклинических образцах

1.3.1. Сублетальные повреждения клеток листерий, переживание листерий в отсутствии питательных веществ.

1.3.2. Смешанный характер популяций лнстерий в неклинических образцах.

1.3.3. Гемолитическая активность L. при сапрофитном способе существования.

1.3.4. Пути решения проблем выявления и идентификации патогенных листерий в неклинических образцах

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

II. 1. Бактериальные штаммы и методы их поддержания.

II.2. Питательные среды.

II. 3. Вявление листерий в рыбе, воде, рыбной продукции.

11.4. Определение подвижности, сбраживания углеводов, проведение каталазного теста.

11.5. Серологические методы исследования.

11.6. Выявление L.monocytogenes методом твердофазной фермент-зависимой иммунофлюоресценции в анализаторе VIDAS.

11.7. Статистическая обработка результатов.

Глава 1П. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ОБСУЖДЕНИЕ.

III. 1. Сравнительная оценка эффективности накопления листерий в различных по составу элективных средах

III. 1.1. Видовая специфичность элективных питательных сред для обнаружения L.monocytogenes.

III. 1.2. Эффективность накопления L.monocytogenes на основных элективных питательных средах.

III.2. Оценка встречаемости листерий в водоемах, на рыбе и рыбной продукции Северо-западного региона РФ.

III.2.1. Частота встречаемости листерий в образцах воды и рыбы из водоемов Ленинградской области

111.2.2. Частота встречаемости листерий в образцах воды и рыбы из рек, озер Северо-западного региона РФ.

111.2.3. Частота встречаемости листерий в рыбной продукции холодного копчения, производимой и реализуемой в Санкт-Петербурге.

III. 3. Формирование коллекции штаммов L.monocytogenes, выделенных из объектов внешней среды, рыбы и рыбных продуктов.

III.4. Гетерогенность коллекций L monocytogenes по родовым признакам.

III. 5. Гетерогенность коллекций L monocytogenes по видовым признакам

III.6. Сравнение результатов идентификации L.monocytogenes классическим набором признаков и методом твердофазной иммунофлюоресценции (VIDAS).

Введение Диссертация по биологии, на тему "Гетерогенность популяций Listeria monocytogenes по идентификационным признакам в окружающей среде и рыбных продуктах"

За последние 20 лет во всем мире резко возрос интерес к бактериям рода Listeria (Bind J.L.,1989; Бакулов И.А. и др., 1992). Это связано с прокатившимися в 80-х годах по странам Европы, Америке и Канаде многичисленными вспышками листериоза людей, причиной которых явились зараженные пищевые продукты (пищевой листериоз). Возбудитель листериоза - Listeria monocytogenes - вызывает у животных и людей заболевание с тяжелыми клиническими проявлениями (Шувалова Е.П., 1990). Летальность при листериозе людей достигает 30% и более процентов (Ortel S., 1989).

Причиной превращения листериоза, традиционно зоонозной инфекции, в заболевание, передаваемое пищевым путем, связано с ухудшением экологической обстановки в густо населенных регионах планеты, широким распространением патогена в окружающей среде.

Патогенные листерии способны вести сапрофитный образ жизни. В настоящий момент их все чаще обнаруживают в озерах, реках, в прибрежной зоне морских заливов (Jones D., Seeliger H.P.R., 1992). Они способны заселять гидробионтов, водные и наземные растения. Листерии выделяют грызунов, насекомых и других членистоногих, диких и домашних животных, включая птиц.

Листерии в месте с сырьем попадают на производства пищевых продуктов и заражают выпускаемую продукцию. Наиболее проблемными в отношении патогенных листерий являются мясные, рыбные и молочные продукты. Листерии обладают повышенной резистентностью к ряду неблагоприятных физических и химических факторов, встречающихся на производстве: пониженным и повышенным температурам, высоким концентрациям поваренной соли, фенольным соединениям коптильного дыма.

С середины 80-х годов во всех цивилизованных странах, а в последние годы и в России, пищевые продукты, в первую очередь, готовые к употреблению без дополнительной тепловой обработки, проверяют на содержание патогенных листерий. В связи с низкой инфекционной дозой для L.nonocytogenes - всего 100 клеток, общепризнанно жесткое требование: отсутствие жизнеспособных клеток L.monocytogenes в 25 г пищевого продукта.

Выявление листерий в пищевых продуктах и объектах окружающей среды представляет определенную проблему. Среди 6 видов листерий только один вид - L.monocytogenes - является патогенным для человека, а остальные виды, по современным представлениям не являются опасными для здоровья людей. Содержание листерий в продуктах и объектах окружающей среды очень низкое. Поэтому исключительно важными при выявлении листерий становятся эффективность стадии накопления и четкая система идентификации.

Обнаружение листерий в рыбе и рыбных продуктах наиболее трудная задача. Высокая питательная ценность рыбы в сочетании с высокой ее влажностью приводят к быстрому росту численности о посторонней по отношению к листериям микрофлоры вплоть до 10 КОЕ/г. На таком фоне обнаружить единичные клетки листерий возможно лишь при наличии высокоэффективной среды накопления.

Первый опыт по выявлению листерий в пищевых продуктах показал, что патогенные листерии могут находиться в состоянии стресса после воздействия замораживания, высушивания, термической обработки, воздействия консервантов, коптильного раствора, моющих и дезинфицирующих средств. Это усложняет выявление листерий в условиях конкурентных взаимоотношений с сопутствующей микрофлорой. Длительное воздействие стрессовых факторов приводит к изменению физиологических и биохимических признаков, ослаблению факторов патогенности, регистрируемых при идентификации листерий. Следствием этого оказывается низкая эффективность обнаружения листерий при анализе пищевых продуктов, морской и пресной воды, снижение вероятности правильной идентификации, большое число ложноотрицательных ответов.

Не все признаки, используемые в видовой идентификации листерий, выделенных из неклинических образцов, уже сейчас кажутся одинаково весомыми. До сих пор при выявлении листерий в пищевых продуктах не сформировалось четкое представление о значимости идентификационных признаков (подвижность при 22° и 37°С, скорость сбраживания углеводов, гемолитическая активность, результаты САМР-теста), используемых для разделения видов листерий.

В связи с выше/изложенным, актуально изучение гетерогенности популяций листерий на рыбе и рыбных продуктах, как наиболее проблемных в этой области, по физиолого-биохимическим и серологическим признакам, используемым для идентификации.

Данная работа выполнялась в лаборатории технической микробиологии Института Гипрорыбфлот, где на протяжении нескольких лет по заданию Государственного комитета Росссийской Федерации по рыболовству велась разработка методов выявления, накопления и идентификации патогенных листерий в рыбе и рыбной продукции. В работе были поставлены следующие задачи:

1. Провести сравнительную оценку эффективности накопления листерий в элективных средах различного состава, разработанных и производимых отечественными и зарубежными фирмами, при анализе рыбной продукции;

2. Провести оценку содержания листерий в водоемах Северозападного региона России, в том числе Ленинградской области, а также в рыбе и рыбных продуктах, производимых в Санкт-Петербурге;

3. Сформировать коллекцию штаммов L.monocytogenes из объектов внешней среды, рыбы и рыбных продуктов;

4. Изучить у коллекционных штаммов L.monocytogenes гетерогенность проявления признаков, существенных для их видовой идентификации;

5. Оценить целесообразность использования иммуноферментного анализа для окончательной идентификации изолятов листерий со слабым проявлением гемолитической активности.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Аль-Асбахи Надия Хассон

ВЫВОДЫ

1. Показана целесообразность использования для выявления L.monocytogenes в неклинических образцах с высоким микробным числом (рыба, рыбная продукция) сочетания мягкой среды накопления (возможно в две стадии с повышающейся концентрацией антибиотиков) и жесткой среды накопления (PALCAM-arapa).

2. Установлено, что в рыбе пресноводных водоемов Ленинградской, Новгородской, Вологодской и Псковской областей L.monocytogenes выявляется в среднем в 8,5% случаев.

3. Анализ рыбной продукции холодного копчения, произведенной и реализуемой в Санкт-Петербурга, показал ее зараженность L.monocytogenes в 20% случаев.

4. Выявлена существенная гетерогенность популяций L.monocytogenes по идентификационным признакам в неклинических образцах различного происхождения: воде, рыбе, рыбных продуктах. Наибольшая гетерогенность наблюдалась в отношении проявления гемолитической активности.

5. Популяция L.monocytogenes, живущая в воде и в симбиозе с рыбой в большей степени сохранила гемолитическую активность (70,2% изолятов), чем популяция L.monocytogenes на рыбе холодного копчения (всего 25,7% изолятов).

6. Типичный для L.monocytogenes; ответ в САМР-тесте также наблюдался чаще в популяции L.monocytogenes, живущей в воде и на рыбе (86,5% изолятов) по сравнению с популяцией L.monocytogenes, встречающейся на рыбе холодного копчения (63,9% изолятов).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученный экспериментальный материал позволяет сделать вывод о существенной гетерогенности популяций L.monocytogenes в неклинических образцах различного происхождения: воде, рыбе, рыбных продуктах - по идентификационным признакам. В неклинических образцах наибольшая гетерогенность наблюдалась в отношении проявления факторов патогенности: гемолитической активности и результатов САМР-теста. Популяция L.monocytogenes, живущая в воде и в симбиозе с рыбой в большей степени сохранила гемолитическую активность (70,2% изолятов), чем популяция L.monocytogenes на рыбе холодного копчения (всего 25,7% изолятов). Правильный ответ в САМР-тесте (S+/R-) также наблюдался чаще в первой популяции L.monocytogenes (86,5% изолятов против 63,9% изолятов для второй популяции).

Полученные нами данные по гетерогенности двух популяций L.monocytogenes дополняют результаты, полученные группой Нортона (Norton et al., 2001) по внутривидовому типированию L.monocytogenes на рыбе холодного копчения и коптильных производствах. Авторами было показано, что внутривидовые типы L.monocytogenes, поступающие с рыбном сырьем на производство элиминируют, а готовая продукция выходит с производства зараженная местными, «производственными» типами L.monocytogenes. Эти данные можно интерпретировать, как признание за популяцией свободно живущих и симбиотических L.monocytogenes низкой конкурентной способности в условиях коптильного производства. По данным Нортона и др. обнаруженные ими «производственные» типы L.monocytogenes также были вирулентны, как и поступающие со свежей рыбой. Нами показано достоверное снижение гемолитической активности у популяций L.monocytogenes на копченой рыбе.

Полученный экспериментальный материал обосновывает необходимость серьезного отношения к популяционным сдвигам по идентификационным признакам L.monocytogenes в разных по происхождению неклинических образца. Пренебрежение этой проблемой может привести к ложноотрицательным ответам при выявлении L.monocytogenes в неклинических образцах.

Данные, полученные в работе, могут быть использованы для разработки тактики выявления L.monocytogenes в образцах внешней среды, рыбы, рыбной продукции, где физиологическая и биохимическая активность листерий ниже, чем в клинических образцах. Существующая на сегодняшний день в отечественной и зарубежной практике неудачная, на наш взгляд, последовательность подтверждения у изолятов сначала родовых признаков p. Listeria, а потом видовых признаков (ГОСТ 51921; МУК 4.2.1122) может быть значительно упрощена без потери достоверности, но с экономией времени и материальных затрат. Имеется резерв и в новой интерпретации результатов САМР-теста, в привлечении в трудных случаях иммуноферментного анализа.

Наиболее оптимальная последовательность операций при выявлении L.monocytogenes в неклинических образцах должна содержать следующие основные этапы:

1. Обязательное использование PALCAM-arapa после любой мягкой, возможно не всегда самой эффективной накопительной среды (ПБЛ, Fraser-бульон и др.). Это сочетание мягкой накопительной среды и жесткой диагностической среды даст возможность в первые 48 часов восстановить жизнеспособность поврежденных клеток листерий и эффективно «отсечь» постороннюю микрофлору на диагностической стадии. Внешний вид колоний маннит- и крахмал-отрицательных листерий на PALCAM-arape настолько характерен, что подтверждение родовых признаков можно отложить до момента, когда из общего числа отсеянных клонов (10-15) будут выявлены изоляты, подозрительные на L.monocytogenes по гемолитическим свойствам и сбраживанию Сахаров.

2. Проверку маннит-отрицательных изолятов листерий следует начать с оценки Р-гемолитической активности, желательно сразу в варианте САМР-теста. Результаты САМР-теста имеют сами по себе низкую информативность, но в случае положительного, пусть аномального ответа, подтверждают наличие у изолята Р-гемолиза, что имеет решающее значение при идентификации листерий до вида.

3. Только гемолитические маннит-отрицательные изоляты листерий проверяют на способность сбраживать рамнозу и ксилозу. Рамноза-положительные и ксилоза-отрицательные Р-гемолитические штаммы листерий считают подозрительными на L.monocytogenes.

4. Подтверждение по родовым признакам проводят только у отобранных изолятов листерий, предположительно L.monocytogenes.

5. При отсутствии изолятов, которые достоверно можно отнести к виду L.monocytogenes, сосредотачивают внимание на изолятах с низкой гемолитической активностью, но с правильным сбраживанием рамнозы и ксилозы. Если САМР-тест не подтверждает у них способности к р -гемолизу, проверяют их принадлежность к L.monocytogenes методом, независящим от физиологических и биохимических свойств (например, иммуноферментным анализом).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Аль-Асбахи Надия Хассон, Санкт-Петербург

1. Бакулов И. А. Международный симпозиум по проблемам листериоза//Вестн. Росс. Акад. с.-х. наук. 1992. N5. С. 60-62.

2. Бакулов И.А., Васильев Д.А. Бактериологический контроль пищевых продуктов на наличие листерий. Методическое пособие // Ульяновская гос.с/х академия. 1999.

3. Бакулов И.А., Котляров В.М., Душко Т.И. Листериоз пишевая инфекция. Масштабы опасности, методы идентификации и меры борьбы//Ветеринария. 1991. N4. С. 32-36.

4. Бакулов И.А., Котляров В.М., Шестиперова Т.И. Эпидемиологические и эпизоотологические аспекты листериоза // Ж.микробиол., эпидемиол., иммунобиол.1994. № 5. С. 100-105.

5. Вайнштейн М.Б., Кудряшова Е.Б. О наннобактериях // Микробиология. 2000. Т. 69. № 2. С. 163-174.

6. Васильев Д.А. Теоретические обоснования и разработка основныхнаправлений в профилактике пищевого листериоза // Автореф. дисс. на соиск. уч. степ. д. вет. н. 1994.

7. Васильев Д.А., Барышников П.И., Белоусов В.Е. О серологической диагностике листериоза. Лит. обзор//Ветеринария. 1988. № 10. С. 64-67.

8. Дарвиш К. Молекулярно-биологическая характеристика штаммов L.monocytogenes , выделенных из различных источников и их типирование // Автореф. дисс. на соиск. уч. ст. к. б. н. М. 1995.

9. Ермолаева С.А. Получение рекомбинантной фосфатидил-инозитол-специфичной фосфолипазы С и оценка её диагностической значимости // Автореф. дисс. на соиск. уч. ст. к. б. н. М. 1995.

10. Ермолаева С.А., Белый Ю.Ф., Тартаковский И.С. Авторегуляция экспрессии секретируемых белков у Listeria monocytogenes // Журн. микробиол. 2000. № 5. С. 3-6.

11. Ермолаева С.А., Белый Ю.Ф., Тартаковский И.С. Изменение уровня экспрессии факторов вирулентности Listeria monocytogenes под влиянием внешних условий // Молек. генетика, микробиол. вирусолог. 2000. № 1. С. 17-19.

12. Казанцев А.П. Внутриутробные инфекционные заболевания детей и их профилактика // Медицина. Ленинград. 1980.

13. Калишин Н.М., Методические рекомендации по диагностике,профилактике, и мерам борьбы с листериозом крупного рогатого скота в Северо-западном регионе СССР // Ленинград. 1988.

14. Котлярова Г.А.Формы гетероморфизма у листерий // Автореф. дисс. на соиск. уч. ст. к. б. н. Москва. 1989.

15. Кох А. Измерение роста // В кн.: Герхардт Ф. (ред.) Методы общей бактериологии. Москва. Мир. 1983. С. 442-511.

16. Кришнамуртхи Ш.Р. Совершенствование бактериологического анализа для индикации листерий в продуктах, импортируемых в Россию // Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. вет. наук. Покров. 1999.

17. МУК 4.2.1122-02. Методические Указания. Организация контроля и методы выявления бактерий Listeria monocytogenes в пищевых продуктах // Госсанэпиднадзор РФ. 2002. 22 с.

18. Мухина Л.Б. Оценка качества и безопасности рыбной продукции // Материалы Второй международной конференции «Совершенствование управления качеством при производстве и реализации рыбной продукции. Санкт-Петербург. Изд. «Лик». 2000. С. 20-37.

19. Пушкарева В.И. Листерии и эризипелотриксы в ассоциации со свободноживущими простейшими // Журн. микробиол. 1996. № 5. С. 93-94.

20. Пушкарева В.И., Емельяненко Е.Н., Литвин В.Ю., Гинцбург А.Л., Кулеш Е.В., Белякова Г.А. Патогенные листерии в почве и вассоциа-ции с водорослями: обратимый переход в некультивируемое состояние //. Журн.микробиол. 1997. № 3. С. 3-6.

21. Пушкарева В.И., Литвин В.Ю., Троицкая В.В. Листерии в растениях: экспериментальное изучение колонизации, численности и изменчивости//Журн.микробиол. 1996. №5. С. 10-12.

22. Смирнова Н.И. Возбудитель листериоза // В кн.: Радчук Н.А (ред.) Ветеринарная микробиология и иммунология. Москва. Агропром-издат. 1991.

23. Тартаковский И.С. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика // КМАХ. 2000. Т. 2. № 2. С. 1-15. http//:www.iacmac.ru/cmac/200022/020text.htm

24. Тартаковский И.С, Малеев В.В., Ермолаева С.А. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика // Москва, «Медицина для всех». 2002. 195 с.

25. Тимченко Н.Ф., Булгаков В.П., Булах Е.В., Яснецкая Е.Г., Журавлев Ю.Н. Взаимодействие Yersinia, Listeria и Salmonella с растительными клетками//Журн.микробиол. 2000. № 1. С. 6-10.

26. Хоулт Дж., Крит Н., Снит П., Стейли Дж., Уильяме С. Определитель бактерий Берджи // Москва., Мир. 1997.

27. Чевелёва С.С. Получение моноклональных антител к антигенам L.monocytogenes и изучение их свойств // Автореф. дисс. на соиск. уч. ст. к. вет .н. Москва. 1991.

28. Черкасский Б.Л. Справочник эпидемиолога // Москва. Медицинская газета. 1994.

29. Шувалова Е.П.,Инфекционные болезни // Москва. Медицина. 1990.

30. Ющенко Г.В., Сильвёрстова Т.И., Алексеева Л.К. Вопросы региональной гигиены, санитарии, эпидемиологии // Тез.докл. науч,-практ. конф. Якутск. 1990. Выпуск 3.

31. Allerberger F., Guggenbichler J.P., Listeriosis in Austria.Report of an Outbreak in 1986 //Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2/3. P. 96-98.

32. Amin A., Danielids B.D., Karaioannoqlou C. Isolation of Listeria spp. from chicken//. Acta Microbiol. Hell. 1994. V.39. No 5. P. 529-535.

33. Bannerman E., Yersin M.-N., Bille J. Evalution of the Organon-Teknika MICRO-Ш LISTERIA System. //App. Env. Microbiol. 1992. V. 58. No. 6. P. 2011-2015.

34. Bayles D.O., Tunick M.H., Foglia T.A., Miller A.J. Cold Shock and its effect on ribosomes and thermal tolerance in Listeria monocytogenes // App. Env. Microbiol. 2000. V. 66. No. 10. P. 4351-4355.

35. Ben Embarek K. Presence, detection and growth of Listeria monocytogenes in seafoods: a review // Int. J. Food Microbiol. 1994. V.23. P. 17-34

36. Berche P., Gaillard J.L., Richard S., Invasiveness and intracellular growth of Listeria monocytogenes//Infection. 1988. V. 16, Suppl. 2. P. 145- 149.

37. Beumer R.R., M.C. te Giffel, Antonie S.V.R., Cox L.J. The effect of acriflavine and nalidixic acid on the growth of Listeria spp. in enrichment media //Food Microbiol. 1996. V. 13. No 2. P. 137-148.

38. Bhunia AK. Antibodies to Listeria monocytogenes // Crit. Rev. Microbiol. 1997. V. 23. No 2. P. 77-107.

39. Bhunia A.K., Ball P.H., Fuad A.T., Kurz B.W., Emerson J.W., Johnson M. Development and characterization of monoclonal antibody specific for Listeria monocytogenes and Listeria innocua // Infect. Immun. 1991.1. V. 59. No 9. P. 176-184.

40. Bhunia A.K., Johnson M.G. Monoclonal antibody specific for Listeria monocytogenes associated with a 66-kilodalton cell surface antigen // App. Env. Microbiol. 1992. V. 58. No 6. P. 1924-1929.

41. Bind J.L. International aspects of the control of an animal listeriosis // Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2/3. P. 91-95.

42. Bille J., Catimel В., Bannerman E., Jacquet C., Yersin M.-N., Caniaux I., Monget D., Rocourt J. API Listeria, a New and promising one-day system to identify Listeria isolates // App. Env. Microbiol. 1992. V. 58. No 6. P. 1857-1860.

43. BioMerieux. 10300. API Listeria // 2000. 07887E-GB-05/2000.

44. BioMerieux. 30703. VIDAS Listeria monocytogenes (LMO) // 2001. 07849 H-GB-04/2001.

45. Bockemul J., Seeliger H.P.R., Kathke P. Acridinfarbstoffe in Selectivnahrbogen zur Isolierung von Listeria monocytogenes // Med. Micro-biol.and Immunol. 1971. V. 157. No 1. P. 84-95.

46. Bogel K., Multisectoral approach in the prevention of human listeriosis // Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2/3. P. 87-91.

47. Bubert A., Kuhn M., Goebel W., Kohler S. Structural and functional properties of the p60 proteins from different Listeria species // J. Bacteriol. 1992. V. 174. No 24. P. 8166-8171.

48. Burtscher C., Fall P.A., Wilderer P.A., Wuertz S. Detection of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes in suspended organic waste by nucleic acid extraction and PCR // App. Env. Microbiol. 1999. V. 65. No 5. P. 2235-2237.

49. Cristie R., Atkins N.E., Munch-Petersen E. Anote on a lytic phenomenon shown by group В streptococci // Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 1944. V. 22. P. 197-200.

50. Curiale M.S., Lewus C. Detection of Listeria monocytogenes in samples containing Listeria innocua // J.Food Protect. 1994. V. 57. P. 1048-1051.

51. Curtis G.D.W., Mitchell R.G., King A.F., Griffin E.J. A selective differential medium for the isolation of Listeria monocytogenes // Lett. App. Microbiol. 1989. V. 8. P. 95-98.

52. Degan A.J., Kaspas Ch.W., Otwell W. Evaluation of lactic acid fermen-tation products and food grade chemicals to control Listeria monocytogenes in blue goal (Callinectes sapidus ) meat // Appl. Env. Microbiol. 1994. V. 60. No 9. P. 3199-3201.

53. Dillon R., Patel Th., Ratnam S. Prevalence of Listeria in smoked fish //

54. J.Food Protect. 1992a. V. 55. No 11. P.866-870.

55. Dillon R., Patel Th., Ratnam S. Occurrence of Listeria in hot and cold smoked seafood products // Int. J. Food Microbiol. 1992b. V. 22. P. 73-77

56. Donnelly C.W. Listeria monocytogenes // In: Hui Y.H. et al. (eds) Foodborne disease Handbook. 1994. V. 1. Diseases caused by bacteria. Sh. 8. P.215-252.

57. Donnelly C.W. Detection and isolation of Listeria monocytogenes from food samples: implications of sublethal injury // J. AOAC Internat. 2002. V. 85. No 2. P. 135-140.

58. El-Kest S.J., Marth E.H. Freezing of Listeria monocytogenes and other microorganisms: a review//J. FoodProt. 1992. V. 55. No. 8. P. 639-648.

59. Erdenling S., Ainsworth J., Austin F.W. Production of monoclonal antibodies to Listeria monocytogenes and their application to determine the virulence of isolates from channel catfish // App.Env.Microbiol. 1999. V. 65. No 7. P. 2827-2832.

60. Farber J.M. Listeria monocytogenes in Fish products // J. Food Protect. 1991. V. 54. No 12. P. 922-924.

61. Farber J.M., Peterkin P.I. Listeria monocytogenes, a food-borne pathogen. Microbiol. Rev. 1991. V. 55. No 3. P. 476-511.

62. Feldsine Ph.T., Lienau A.H., Leung S.C., Mui L.A. Method extension study to validate applicability of AOAC Official Method 996.14

63. Assurance11 polyclonal enzyme immunoassay for detection of Listeria monocytogenes and related Listeria spp. from environmental surfaces: collaborative study //J.AOAC Internat. 2002. V. 85. No 2. 350-358.

64. Ferreira A., O'Byrne C.P., Boor K.J. Role of ств in heat, ethanol, acid, and oxidative stress resistance and during carbon starvation in Listeria monocytogenes //App. Env. Microbiol. 2001. V. 67. No 10. P. 4454-4457.

65. Fiedler F. Biochemistry of the cell surface of Listeria strains: a locating general view//Infection. 1988.V. 16. Suppl. 2. P. 92-97.

66. Flanders K.J., Donelly C.W. Injury resuscitation and detection of Listeria spp. from frozen environments//Food Microbiol. 1994. V.ll. No 6. P. 473-480.

67. Fraser J.A., Sperber W.H. Rapid detection of Listeria spp. in food and environmental samples by esculin hydrolysis // J. Food Prot. 1988. V. 51. No 10. P. 762-765.

68. Friedman M.E., Aim W.L. Effects of glucose concentration in the growth medium on some metabolic activities of L. monocytogenes // J. Bacteriol. 1962. V. 84. No 2. P. 374-376.

69. FSIS Food Safety and Inspection Service. Revised Action Plan for Control of Listeria monocytj genes for the Prevention of Foodborne1.steriosis // May 2000.http://www.fsis.usda.gov/OA/topics/lm action.htm

70. Gangar V., Curiale M.S., D'onorio A., Schultz A., Johnson R.L., Atrache V. VIDASR enzyme-linked immunofluorescent assay for detection of Listeria in foods: collaborative study // J.AOAC Intemat. 2000. V. 83. No 4. P. 903-918.

71. Gendel S.M., Ulaszek J. Ribotype analysis of strain distribution in Listeria monocytogenes // J. Food Protect. 2000. V. 63. No 2. P. 179-185.

72. Golden D.A., Beuchat L.R., Brackett R. Inactivation and injury of Listeria monocytogenes as affected by heating and freezing // Food Microbiol. 1988. V. 5. P. 17-23.

73. Goldsteyn T. E.J., King R.K., Burchak J., Gannon V.P.J. Sensitive and specific detection of Listeria monocytogenes in milk and ground beef with the polymerase chain reaction // App.Env.Microbiol. 1991. V. 57. No 9, P. 2576-2580.

74. Gray M.L., Killinger A.H. L. monocytogenes and listeric infections // Bacteriol. Rev. 1966. V. 30. P. 309-389.

75. Groves R.D., Welshimer H.J. Separation of pathogenic from apathogenic Listeria monocytogenes by three in vitro reactions // J. Clin. Microbiol. 1977. V. 5. P. 559-563.

76. Herbert K.C., Foster S.J. Starvation survival in Listeria monocytogenes: characterization of the response and the role of known and novel components //Microbiology. 2001. V. 147. P. 2275-2284.

77. Herman L. Detection of viable and dead Listeria monocytogenes by PCR//Food Microbiol. 1997. V. 14. No 2. P. 103-110.

78. Herman L.M.F., De Block J.H.G.E., Moermans R.J.B. Direct detection of Listeria monocytogenes in 25 milliliters of raw milk by a two-step PCR with nested primers // App.Env.Microbiol. 1995. V. 61. No 2. P. 817-819.

79. Hitchins A.D. Listeria monocytogenes // In: Bacteriological analytical manual on-line. U.S.Food & Drug Administration, Center for Food Safety & Applied Nutrition, 2002. sh 10.http ;//www. cfsan. fda. gov/~ebam/bam-10 .html

80. Holt J.D. (ed. In chief) The Genus Listeria // In: Bergey s Manual of Determinative Bacteriology. 1994. P.566-567.

81. Hot H., Heftier P. Pathogenicity of L. monocytogenes in comparison to other Listeria species//Infection. 1988. V. 16. Suppl. 2. P. 141-144.

82. Jemni Т., Keusch A. Occurrence of Listeria monocytogenes in fresh water fish farms and fish-smoking plants // Food Microbiol. V. 11. 1994. No 4. P.309-316.

83. Jersek В., Gilot P., Gubina M., Klun N., Mehle J., Tcherneva E., Rijpens N., Herman L. Typing of Listeria monocytogenes strains by repetitive element sequence-based PCR // J.Clin.Microbiol. 1999. V. 37. No 1. P. 103-109.

84. Jones D., Seeliger H.P.R. The Genus Listeria // In: Balous A., Trupel H.G. (eds). The Prokaryotes. A Handbook on Habitat, Isolation, Identification of Bacteria. 1992. V. 2. Sh. 71. P. 1595-1617.

85. Ivanov I. Establishment of non-motile strains of Listeria monocytogenes type 5 // In: Woodbine M. (ed.) Problems of listeriosis. Leicester University Press, Leicester, England. 1975. P. 18-26.

86. Kathariou S., Pine L. The type strain(s) of Listeria monocytogenes: a source of continuing difficulties // Int. J. Syst. Bacteriol. 1991. V. 41. P. 328-330.

87. Kathariou S., Mizumoto C., Allen R.D., Fok A.K., Benedict A.A. Monoclonal antibodies with a high degree of specificity for Listeria monocytogenes serotype 4b // Appl. Env. Microbiol. 1994. V. 60. No 10. P. 3548-3552.

88. Kerdahi K.F., Istafanos Ph. Rapid determination of Listeria monocytogenes by automated enzyme-linked immunoassay and nonradiactive DNA probe //J. AOAC Internat. 2000. V. 83. No 1. P. 86-88.

89. Kerr K.G., Rotowa N.A., Hawkey P.M., Lacey R.W. Evolution of the Mast Ю and API 50CH Systems for Identification of Listeria spp. // App. Env. Microbiol. 1990. V. 56. No 3. P. 657-660.

90. Klein P. G., Juneja V. K. Sensitive detection of viable Listeria monocyto-genes by reverse transcription-PCR // App. Env. Microbiol. 1997. V. 63, No 11. P. 4441-4448.

91. Klinger J.D., Isolation of Listeria. A review of procedure and future prospects//Infection. 1988. V. 16. Suppl. 2. P. 98-105.

92. Knabel S.J., Walker H.W., Hartman P.A., Mendonca A.F. Effects of growth temperature and strictly anaerobic recovery on the survival of Liste-ria monocytogenes // App.Env.Microbiol. 1990. V. 56. No. 2. P. 370-376.

93. Kohler S., Leimeister-Wachter M., Chakraborty T., Lottspeich F., Goebel W. The gene coding for protein p60 of Listeria monocytogenes and its use as a specific probe for Listeria monocytogenes // Infect.Immun. 1990. V. 58. No 6. P. 1943-1950.

94. Kuhn M., Goebel E. Identification of an extracellular protein of Listeria monocytogenes possibly involved in intracellular uptake by mammalian cells //Infect.Immun. 1989. V. 57. P. 55-61.

95. Lampel K.A., Orlandi P.A., Kornegay L. Improved template preparation for PCR-based assays for detection of food-borne bacterial pathogens // App. Env. Microbiol. 2000. V. 66. No 10. P. 4539-4542.

96. Lee W.H., McLain P. Improved L. monocytogenes selective agar// Appl. And Environm. Microbiol. 1986. V. 52. No 6. P. 1215-1217.

97. Leimeister-Wachster M.E., Domann E., Chacraborty T.M. Theexpression of virulence genes in L. monocytogenes is thermoreguleted // J. Bacteriol. 1992. V. 174. No 3. P. 947-952.

98. Linder R., Bernheimer A.W. Enzymatic oxidation of membrane cholesterol in relation to lysis of sheep erythrocytes by corynebacterial enzymes // Arch. Biochem. Biophys. 1982. V. 213. 394-404.

99. Loncarevic S., Danielsson-Tham M.-L., Gerner-Smidt P., Sanhistrom L., Tham W. Potential sources of human listeriosis in Sweden // Food Micro-biol. 1998. V. 15. No 1. P. 65-69.

100. Ludwig W., Shelter K.H., Stackebrandt E., FEMS Microbiol. Lett. 1984. V. 25. P. 199. (цитировано no: Rocourte J. 1988).

101. Mackey B.M, Bratchell N. The heat resistance of Listeria monocytogenes //Lett. App. Microbiol. 1989. V. 9. P. 89-94.

102. Makino S.-L, Okada Y., Maruyama T. A new method for direct detection of Listeria monocytogenes from by PCR // App. Env. Microbiol. 1995. V. 61. No 10. P. 3745-3447.

103. Marshal D.L., Schmidt R.H. Growth of Listeria monocytogenes at 10°C in milk preincubated with selected pseudomonads // J. Food Prot. 1988. V. 51. P. 277-282.

104. Mazzotta A.S. Thermal inactivation of stationary-phase and salt-adapted Listeria monocytogenes during postprocess pasteurisation of surimi-based imitation crab meat // J. Food Protect. 2001. V. 64. No 4. P. 483-485.

105. McKellar R.C. Novel mechanism for the CAMP reaction between Listeria monocytogenes and Corynebacterium equi // Int. J. Food Microbiol. 1993. V. 18. P. 77-82.

106. McKellar R.C. Identification of the virulence factors involved in the CAMP reaction between Listeria monocytogenes and Corynebacterium equ//. Lett. Appl. Microbiol. 1994a. V. 18. P. 79-81.

107. McKellar R.C. Use of the CAMP test for identification of Listeriamonocytogenes // App. Env. Microbiol. 1994b. V. 60. No 12. P. 4219-4225.

108. Mencikova E. Phospholipase С in Listeria // Acta Microbiol.Hung. 1989. V. 36. No 2-3. P. 321-325.

109. Meyer D.H., Donnelly C.W. Effect of incubation temperature on repair of heat-injured Listeria in milk // J. Food Prot. 1992. V. 55. P. 579-582.

110. Miles L., Motes Jr. Incidence of Listeria spp. in shrimp, oysters, and estuarine waters. J. Food Protect. 1991. V. 54. No 3. P. 170-173.

111. Mossel D.A.A. Listeria monocytogenes in foods. Isolation, characterization and control // Int. J. Food Microb. 1989. V. 8. P. 183-195.

112. Nakazawa M., Nemoto H. Synergistic hemolysis phenomen of Listeria monocytogenes and Corynebacterium equi // Jpn. J. Vet. Sci. 1980. V. 42. P. 603.

113. NF EN ISO 11290-1. Methode horizontal pour la recherche et le denombrement de Listeria monocytogenes. Microbiologic des aliments. 1997.

114. Niederhauser C., Candrian U., Hofelein C., Jermini M., Btihler H.-P., Luthy J. Use of polymerase chain reaction for detection of Listeria monocytogenes in food // App. Env. Microbiol. 1992. V. 58. No 5. P. 1564-1568.

115. Nogva H.K., Rudi K., Naterstad K., Hoick A. Application of 5'-nuclease PCR for quantitative detection of Listeria monocytogenes in pure cultures, water, skim milk, and unpasteurized whole milk // App. Env.

116. Microbiol. 2000. V. 66. No 10. P. 4266-4271.

117. Norton D.M., Scarlett J. M., Horton K., Sue D., Thimothe J., Boor K.J., Wiedmann M. Characterization and pathogenic potential of Listeria monocytogenes isolates from the smoked fish industry // App. Env. Microbiol. 2001. V. 67. No 2. P. 646-653.

118. Ortel S. Listeria meningitis and septicaemia im immunocompromised patients//Acta Microbiol. Hung,1998. V. 36. No 2/3. P. 153-157.

119. Otter A., Blackemore W.F., Observation of the presence of L. monocytogenes in foods //Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2/3. P. 125-131.

120. Petran R.L., Swanson K.M.J. Simultaneous growth of Listeria monocyto-genes and Listeria innocua// J. Food Prot. 1993. V. 7. P. 616-618.

121. Picard-Bonnaud F., Cottin J., Carbonnelle B. Persistence of Listeria monocytogenes in three sorts of soil // Acta Microbiol. Hung. 1989a. V. 36. No 2-3. P. 263-267.

122. Picard-Bonnaud F., Cottin J., Carbonnelle B. Preservation of the virulence of Listeria monocytogenes in different sorts of soil. 1989b. // Acta Micro-biol. Hung. V. 36, No 2-3, pp. 269-272.

123. Pongratz G., Seeliger H.P.R. Hemolytic effects on sheep erythrocytes by Listeria innocua // Zentralbl.Bacteriol.Mikrobiol.Hyg.Abt. 1 Orig. B. 1984. V. 257. P. 296-307.

124. Ralovich B. Listeriosis reseach. Present situation and perspective// Aca-demial Kiado, Budapest. 1984.

125. Ralovich B. Listeriosis a worldwide issue// Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2/3. P. 95-102.

126. Raybourne R.B. Virulence testing of Listeria monocytogenes // J.AOAC1.ternat. 2002. V. 85. No 2.

127. Rocourt J. Taxonomy of the genus Listeria // Infection., vol. 16, Suppl. 2. P. 89-91.

128. Rocourt J. Species of the genus Listeria // Acta Microbiol. Hung. 1989. V. 36. No 2-3. P. 285-288.

129. Rossen L., Norskov P., Holmstrom K., Rasmussen O.F. Inhibition of PCR by components of food samples, microbiological diagnostic assays and DNA-extraction solutions // Int. J. Food Microbiol. 1992. V. 17. P. 37-45.

130. Rowan N.J., Anderson J.G. Effects of above-optimum growth temperature and cell morphology on thermotolerance of Listeria monocytogenes cells suspended in bovine milk // Appl. Environ Microbiol. 1998. V. 64. No. 6. P. 2965-2071.

131. Rudi K., Larsen F., Jakobsen K.S. Detection of toxin-producing cyanobacteria by use of paramagnetic beads for cell concentration and DNA purification. App.Env.Microbiol., 1998. V. 64, pp. 34-37.

132. Sabanadesan S., Lammerding A.M., Griffiths M.W. 2000. Survival of Listeria innocua in salmon following cold-smoke application // J. Food Protect. V. 63. No 6. P. 715-720.

133. Schon berg A. Method to determine virulence of Listeria strains // Int. J. Food Microbiol. 1989. V. 8. P. 281-284.

134. Schuchat A., Swaminathan В., Broome С. V. Listeria monocytogenes CAMP reaction // Clin. Microbiol. Rev. 1991. V. 4, P. 396.

135. Scovgaard N. 1989. Listeria: ecology in the food chain // Acta Microbiol. Hung. V. 36. No 2-3. P. 239-243.

136. Seeliger H.P.R. Listeriosis. History and actual developments// Infection. 1988. V. 16. Suppl.2. P. 80-84.

137. Seeliger H.P.R., Jones D. The Genus Listeria // In: Sneath P.H.A., Mair N.S., Shape E.M., Holt J.D. (eds.) Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. 1986. V. 2. P. 1235-1243.

138. Siegle D.A., Almiron M., Kolter R. Approaches to the study of survival and death in stationary phase Escherichia coli // In: Kjelleberg S. (ed.) Starvation in Bacteria. New York. Plenum. 1993. P. 151-167.

139. Simon M. C., Gray D.I., Cook N. DNA extraction and PCR methods for the detection of Listeria monocytogenes in cold-smoked salmon // App. Env. Microbiol. 1996. V. 62. No 3. P. 822-824.

140. Siragusa G.R., Johnson M.G. Monoclonal antibody specific for Listeria monocytogenes, Listeria innocua, and Listeria welshimeri // App.Env. Microbiol. 1990. V. 56. No 6. P. 1897-1904.

141. Skalka В., Smola J., Elischerova K. Routine test for in vitro differentiation of pathogenic and apathogenic Listeria monocytogenes strains // J. Clin. Microbiol. 1982b. V. 15. P. 503-507.

142. Smith-Palmer A., Stewart J., Fyfe L. Inhibition of listeriolysin О and phosphatidylcholine-specific production in Listeria monocytogenes by subinhibitory concentrations of plant essential oils // J. Med. Microbiol. 2002. V. 51. P. 567-608.

143. Smola J. Possibilities of differentiation of listerial hemolysins by synergistic haemolytic reactions (CFVH reactions) // Int. J .Food Microbiol. 1989. V. 8. P. 265-267.

144. Spector M.P., Cubitt C.L. 1992. Starvation-inducible loci of Salmonella typhymurium-regulation and roles in srarvation survival // Mol.Microbiol. V. 6. P. 1467-1476.

145. Strom M.S. Phenotypic and genetic characterization of a non-hemolytic variant of Listeria monocytogenes from cold-smoked salmon // Food Microbiology. 1998. V. 15. No 3. P. 329-337.

146. Tilney L.G., Portnoy D.A. Actin filaments and growth, movement, and spread of the intracellular bacterial parasite, Listeria monocytogenes // J. Cell Biol. 1989. V. 109. P. 1597-1608.

147. U.S. FDA, CFS&AN Bacteriological Analytical Manual Online // April 2001a. Chapter 10. Listeria monocytogenes.http;//www. cfsan. fda. gov/~eb am/bam-10.htm 1

148. U.S. FDA, CFS&AN Bacteriological Analytical Manual Online. January 2001b. Chapter 11. Serodiagnosis of Listeria monocytogenes. http;//www. cfsan. fda.gov/~ebam/bam-l 1 .html

149. Van der Kelen D., Lindsay J. A. Differential haemolytic response of Listeria monocytogenes strains on various blood agars // J. Food Safety. 1990. V. 11. P. 9-12.

150. Van Netten P., Perales I., Mosse D.A.A. An improved selective and diagnostic medium for isolation and counting of Listeria spp. in heavily contaminated foods //Lett. App. Microb. 1988. V. 7. P. 17-21.

151. Vazquez-Boland J.A., Kuhn M., Berche P., Chakraborty Т., Dominguez-Bernal G., Goebel W., Gonzalez-Zorn В., Weliland J., Kreft J. Listeria pathogenesis and molecular virulence determinants // Clin.Microbiol. Rev. 2001. V. 14. P. 584-640.

152. Walker J.K. Listeria innocua isolated from a case of ovine meningoencephalitis // Veterin. Microbiol. 1994. V. 42. No 2-3. P.245-253.

153. Watson S.P., Clements M.O., Foster S.J. Characterisation of the starvation-survival response of Staphylococcus aureus // J. Bacteriol. 1998. V. 180. P. 1750-1758.

154. Welshimer H.J. The Genus Listeria // In: The Prokaryotes. A Hand-book on Habitat, Isolation and Identification of Bacteria ed by Mortimer P., Starr P. Springer, New York. 1981. V. 2. P.1680-1689.

155. Wiedmann M. Molecular subtyping methods for Listeria monocytogenes // J. AOAC Internat. 2002. V. 85. No 2. P. 350-354.

156. Woese K.R., Stackebrandt E. Molecular and cellular aspects of microbial evolution // Cambridge University Press. Cambridge. 1981. P. 1-31