Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

β-фруктозидаза дрожжей Kluyveromyces Marxianus Y-303

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мальцева, Татьяна Васильевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Характеристика Р-фруктофуранозидазы

1.1. Микробный синтез Р-фруктофуранозидазы.

1.1.1. Продуценты Р-фруктофуранозидазы.

1.1.2. Направленный биосинтез Р-фруктофуранозидазы. Индукция и репрессия синтеза.

1.1.3. Факторы, влияющие на биосинтез Р-фруктофуранозидазы при культивировании продуцентов.

1.2. Локализация Р-фруктофуранозидазы в дрожжевой клетке.

1.3. Методы выделения и очистки дрожжевой Р-фруктофура-нозидазы.

1.4. Физико-химические свойства Р-фруктофуранозидазы.

1.5. Субстратная специфичность действия Р-фруктофуранозидаз.

1.6. Применение препаратов Р-фруктофуранозидазы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. Объекты и методы исследований

2.1. Объекты исследований.

2.1.1. Оживление чистой культуры дрожжей.

2.1.2. Культивирование дрожжей К. тагх1апг/5.

2.2. Определение активности гликозидаз.

2.2.1. Определение активности Р-фруктофуранозидазы.

2.2.2. Определения инулиназной активности.

2.3. Биохимические и микробиологические методы исследования.

2.4. Выделение и очистка фермента.

2.4.1. Извлечение Р-фруктофуранозидазы из дрожжевых клеток.

2.4.2. Получение спиртоосажденных ферментных препаратов.

2.4.3. Выделение Р-фруктофуранозидазы танинном.

2.4.4. Очистка Р-фруктофуранозидазы

2.5. Определение молекулярной массы.

2.5.1. Определение молекулярной массы белка методом электрофореза.

2.5.2. Определение молекулярной массы белка методом гель-фильтрации.

2.6. Аминокислотный анализ.

2.7. Общие методы.

2.8. Статистическая обработка экспериментальных данных.

Глава 3. Исследование биосинтеза (3-фруктофуранозидазы

3.1. Характеристика некоторых культуральных признаков дрожжей К1иу\еготусе$ тагхшпик У-303.

3.2. Выбор исходной питательной среды.

3.3. Влияние различных источников углерода и азота на биосинтез (3-фруктофуранозидазы.

3.4. Влияние некоторых факторов на биосинтез (3-фруктофура-нозидазы.

3.5. Подбор оптимальных условий глубинного культивирования дрожжей К.тагхгапш.

Глава 4. Получение ферментного препарата (3-фруктофуранозидазы и исследование его свойств

4.1. Извлечение фермента из дрожжевой клетки.

4.2. Очистка (3-фруктофуранозидазы К.тагхгапш У-303.

4.3. Молекулярная масса и аминокислотный состав молекулы (3-фруктофуранозидазы.

4.4. Исследование некоторых физико-химических свойств (3-фруктофуранозидазы.

4.5. Кислотная и термическая инактивация (3-фруктофуранозидазы

4.6. Специфичность действия (3-фруктофуранозидазы.

Глава 5. Применение (3-фруктофуранозидазы в пищевой промышленности

5.1. Факторы, влияющие на ферментативный гидролиз сахарозы.

5.2. Ферментативный гидролиз сахарозы, содержащейся в сахарной свекле.

5.3. Приготовление инвертного сиропа.

5.4. Применение инвертного сиропа в кондитерской промышленности.

5.5. Выбор технологии получения печенья на основе положений теории нечеткой логики.

5.7. Ферментативный гидролиз инулинсодержащего сырья.

Введение Диссертация по биологии, на тему "β-фруктозидаза дрожжей Kluyveromyces Marxianus Y-303"

Актуальность работы. Изучение ферментов представляет особый интерес, так как, с одной стороны, ферменты играют большую роль в обмене веществ - все многообразие биохимических реакций, протекающих в микроорганизмах, растениях и животных, осуществляется соответствующими ферментами, и любое изменение их действия может повлечь за собой тяжелые последствия для живого организма. С другой стороны, ферментные препараты находят широкое применение в различных отраслях промышленности, в сельском хозяйстве, медицине, генной инженерии.

В энзимологии особо актуальны вопросы активности и специфичности действия ферментов, исследования биосинтеза, физико-химических свойств, механизма действия ферментов. Решение этих вопросов имеет важное практическое значение с точки зрения рационального использования ферментных препаратов и интенсификации технологических процессов.

Среди гидролитических ферментов, нашедших свое применение в промышленности, важное место занимает ß-фруктофуранозидаза (2Д-Р-Э-фрук-тофуранозид-фруктогидролаза, К.Ф. 3.2.1.26), которая расщепляет ß-l,2-nra-козидную связь молекулы сахарозы с образованием фруктозы и глюкозы. Вопросам исследования свойств ß-фруктофуранозидаз и их применения в пищевой промышленности посвящены работы Жеребцова H.A. (1977, 1999), Бару А.З. (1954), Ляховской Л.П. (1973), Куликовой А.К. (1986), Кирилловой Л.М. (1997), Островского Д.И. (2000), Herwig С. (2001), Cheng W.C. (1995), El-Sayed Sanaa Т. N. (1994), Wistmans J.G. (1984) и других отечественных и зарубежных авторов. Однако поиски новых продуцентов высокоактивных ферментов, исследования биосинтеза и специфичности их действия, физико-химических свойств гидролитических ферментов являются актуальной задачей, и имеют важное теоретическое и практическое значение. В решении данного вопроса перспективными являются дрожжи Kluyveromyces marxicmus Y-303, продуцирующие внутриклеточную ß-фруктозидазу, которая проявляет активность не только по отношению к сахарозе, но и к инулину, что дает возможность расширить область применения фермента в биотехнологии.

Несмотря на многочисленные работы по исследованию Р-фруктофура-нозидаз, нет четких представлений о физико-химических и каталитических свойствах |3-фруктофуранозидазы из К.тагхгстия, хотя данный род дрожжей обладает высокой биосинтетической способностью; отсутствуют данные по специфичности действия фермента.

Настоящая работа выполнялась в соответствии с научным направлением кафедры микробиологии и биохимии Воронежской государственной технологической академии по проблеме "Изыскание оптимальных условий биосинтеза микроорганизмами биологически активных веществ и изучение их физико-химических свойств" (гос. регистр. № 01930004491) и в рамках научно-технической программы "Научные исследования высшей школы по приоритетным направлениям науки и техники". Данная тема включена в координационный план РАН по программе "микробиологический синтез и научные основы микробиологического получения практически ценных веществ".

Цель и задачи исследования. Целью диссертационной работы явился выбор высокоактивного продуцента |3-фруктофуранозидазы, получение активного высокоочищенного ферментного препарата, исследование его некоторых физико-химических свойств и субстратной специфичности, а также процесса ферментативного гидролиза сахарозы и разработка технологических режимов получения инвертного сиропа.

Исходя из цели, были поставлены следующие задачи:

• исследование условий биосинтеза Р-фруктофуранозидазы и рационального режима культивирования продуцента;

• выбор эффективного метода выделения и очистки Р-фруктофуранозидазы;

• изучение некоторых физико-химических свойств фермента;

• определение кинетических закономерностей и термодинамических параметров кислотной и термической инактивации высокоочищен-ной р-фруктофуранозидазы;

• исследование субстратной специфичности Р-фруктофуранозидазы;

• разработка технологических режимов гидролиза сахарозы и рекомендации по практическому применению Р-фруктофуранозидазы.

Научная новизна. Расширены сведения о биохимических и физико-химических характеристиках ферментного препарата Р-фруктофуранозидазы дрожжей К.тагхшпт У-303. Подобраны рациональные режимы биосинтеза фермента и состав питательной среды для глубинного культивирования продуцента. Предложены способ получения препарата Р-фруктофуранозидазы и схема его очистки. Проведены комплексные исследования физико-химических свойств фермента и субстратной специфичности, дана термодинамическая характеристика процессов его кислотной и термической инактивации. Изучен процесс ферментативного гидролиза сахарозы. Показана целесообразность использования полученного инвертного сиропа в производстве кондитерских изделий.

Практическая значимость работы. Получен ферментный препарат р-фруктофуранозидазы с высокой удельной активностью (ТУ 9291-00502068108-2002), обладающий высокой кислотной устойчивостью. Результаты исследований дают дополнительную информацию о субстратной специфичности дрожжевой Р-фруктофуранозидазы. Установлены рациональные режимы ферментативного гидролиза сахарозы: температура, рН, длительность процесса и дозировка ферментного препарата. Использование Р-фруктофу-ранозидазы для инверсии сахарных растворов в рекомендуемых условиях позволяет улучшить качество инвертного сиропа (ТУ 9291-004-02068108-2002) и повысить его биологическую ценность, что положительно сказывается на качественных характеристиках кондитерских изделий. Это подтверждено производственными испытаниями на ОАО "Воронежская кондитерская фабрика".

Апробация работы. Основные результаты исследований по теме диссертации докладывались и обсуждались на внутривузовских и международных конференциях. Они были представлены на III международной научно-производственной конференции "Интродукция нетрадиционных и редких сельскохозяйственных растений" (Пенза, 2000); международной научной конференции "Биотехнология на рубеже двух столетий" (Саранск, 2001); международной конференции молодых ученых "От фундаментальной науки - к новым технологиям. Химия и биотехнология биологически активных веществ, пищевых продуктов и добавок. Экологически безопасные технологии" (Тверь, 2002); 6-ой и 7-ой Пущинской школе-конференциях молодых ученых "Биология - наука XXI века" (Пущино, 2002, 2003) и внутривузовских конференциях ВГТА за 2000 - 2002г.

Публикации. Основные результаты диссертационной работы изложены в 10 публикациях.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения результатов (3 главы), заключения, выводов, списка литературы (260 источников, в том числе 146 - зарубежных авторов) и приложений. Иллюстративный материал включает 40 рисунков и 28 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Мальцева, Татьяна Васильевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Изучены некоторые культуральные признаки и биосинтетическая способность дрожжей К. татапш У-303. Установлена высокая эффективность дрожжей К. тагхюпих У-303 к биосинтезу внутриклеточной Р-фруктофу-ранозидазы.

2. Методом математического планирования эксперимента оптимизирован состав питательной среды и параметры процесса культивирования дрожжей (температура 25°С, начальное значение рН среды 6,5, продолжительность биосинтеза 48 ч). При таких значениях параметров активность Р-фруктофуранозидазы составила 3500-3900 ед/г биомассы.

3. Получен гомогенный ферментный препарат Р-фруктофуранозидазы с удельной активностью 2720 ед/мг белка. Установлено, что фермент является димером с молекулярной массой 260 кДа.

4. Изучены физико-химические и каталитические свойства Р-фруктофуранозидазы и дана термодинамическая характеристика процесса кислотной и термической инактивации фермента.

5. Исследована кинетика действия и субстратная специфичность Р-фруктофуранозидазы К. тагхгапш У-303. Кроме сахарозы и инулина, фермент способен гидролизовать раффинозу, стахиозу и леван, т.е. проявлять химическое сродство как к Р-2Д-, так и Р-2,6-фруктозидной связи в олигосахаридах.

6. На основании исследования физико-химических свойств Р-фруктофуранозидазы К. татапш У-303 разработан ферментативный способ получения инвертных сиропов из сахарозы. Определены рациональные условия гидролиза 80% раствора сахарозы: температура 70°С, рН 4,0, дозировка препарата 10 ед/г сахара, продолжительность 3-4 ч.

7. Показана целесообразность замены кислотного способа получения инвертных сиропов ферментативным, что способствует улучшению их качества и биологической ценности. Методом теории нечеткой логики

138 обоснована технология получения сахарного печенья "Шахматное" и помадных конфет "Морские" с инвертным сиропом, полученным путем ферментативного гидролиза сахарозы, апробирован в производственных условиях.

8. Исследована возможность применения дрожжей К. тагхшпш• У-303 для переработки нетрадиционного сельскохозяйственного сырья. Разработан ферментативный способ получения глюкозо-фруктозных сиропов из якона - культуры, содержащей 60-70% инулина на сухую массу.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследован процесс гидролиза сахарозы спиртоосажденным препаратам инвертин ШОх. Установлены оптимальные режимы инверсии сахарных растворов: величина рН гидролизата 4,0; концентрация сахарозы 13-14%; дозировка ферментного препарата 10 ед. на 1 г сахара; температура 55°С. Наибольшей стабильностью фермент обладал в зоне рН 4,0-5,0 и при температуре 30-50°С, термостабильность фермента возрастала в присутствии субстрата. Изучена кинетика гидролиза сахарозы при одновременном изменении концентрации фермента и субстрата. Полученные данные свидетельствуют о том, что сиропы низкой концентрации (5-40%) целесообразно подвергать инверсии при температуре не выше 55°С, а сахарные растворы высокой концентрации (50-80%) - при температуре не выше 70°С.

Подобраны рациональные режимы гидролиза сахарозы сахарной свеклы ферментным препаратом инвертин ШОх: температура 55°С; рН 4,0; дозировка фермента 8-10 ед/г сахарозы и продолжительность гидролиза 9 ч. При этом степень гидролиза составляет 100%. Гидролиз 10% сахарозы протекает в таких же условиях, но быстрее на 6 ч.

Предложен ферментативный способ получения инвертного сиропа препаратом Р-фруктофуранозидазы К1. ташапия У-303 из высококонцентрированных растворов сахарозы. Установлено, что оптимальной продолжи

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мальцева, Татьяна Васильевна, Воронеж

1. Абелян В.А. Характеристика экзо-инулиназ Kluyveromyces marxianus Bacillus lichenifonnis / В.А. Абелян, Л.С. Манукян // Прикладная биохимия и микробиология. - 1996. - Т. 61, № 6. - С. 1028-1036.

2. Абелян В.А. Получение фруктозо-глюкозного сиропа из инулинсодержа-щего сырья с применением иммобилизованных клеток дрожжей / В.А. Абелян, Л.С. Манукян, Э.Г. Африкян // Прикладная биохимия и микробиология. 1998. - Т. 34, № 5. - С. 544-548.

3. Абрамов Ш.А. Новая питательная среда для выращивания дрожжей Sac-charomyces cerevisiae / Ш.А. Абрамов, С.Ц. Котенко, Д.А. Эфендиева, Э.А. Халилова, Э.А. Исламмагомедова, С.М. Даунова // Прикладная биохимия и микробиология. 1995. - № 2. - С. 232-233.

4. Авнерс В.Я. Секреции глюкоамилазы и инвертазы при непосредственном культивировании дрожжей Saccharomyces cerevisiae в режиме аксистата/ В.Я. Авнерс, A.B. Глазунов, В.Э. Стеркин// Биотехнология. 1993. - № 6. - С. 24-26.

5. A.C. 1703689 СССР, МКИ 5. C12N 9/26; 9/14. Штамм гриба Pénicillium са-nascens продуцент ß-фруктофуранозидазы / Э.Т. Ломкаци, А.К. Церетели, Т.П. Билай (СССР). - № 4763459/13; Заявл. 28.11.89; Опубл. 07.01.92, Бюл. № 1.

6. A.C. 1471559 AI СССР. Способы получения внеклеточной инвертазы дрожжей. № 4183269/13; Опубл. 1993, Бюл. № 43-44.

7. A.C. СССР. Способ производства гидролизата сахарозы / Г.Д. Мадзгара-швили, Ц.Б. Заркау, В.Л. Яровенко. № 578341; Заявл. 23.06.76; Опубл. 1977, Б.И. № 407.

8. A.C. RU 2084536 Cl, C13K3/00. Способ получения сиропа инвертного сахара / Г.А. Ермолаева. № 93043288/13; Заявл. 31.08.93; Опубл. 20.07.97 Бюл. №20.

9. A.C. СССР 18824451 Al, C13K3/00. Способ получения инвертного сиропа / П.Я. Заринь, В.А. Озола, Х.В. Ветерис. № 4871047/13; Заявл. 21.08.90; Опубл. 30.06.93. Бюл. №24.

10. A.C. СССР 700547, C13K3/00. Способ получения инвертного сиропа 01.02.78; Опубл. 30.11.79. Бюл. №44.

11. П.Алексанян Е. 3. Бета-фруктофуранозидаза микроорганизмов / Е.З. Алекса-нян, JT.C. Маркосян // Прикладная биохимия и микробиология. 1986. - Т. 22, №2.-С. 163 - 176.

12. Алексанян Е.Р. Влияние источников углерода на синтез внеклеточной ин-вертазы, белка, пигмента и биомассы Auerobasidium pullulans/Е.З. Алексанян, JI.C. Маркосян // Микробиология. 1985. - Т. 54, № 1,- С.49-54.

13. Бару А.З. Исследования по получению ферментных препаратов и применение их в кондитерской промышленности. Автореф. канд. Диссер. Харьков, 1954.

14. Безбородов A.M. Ферменты микроорганизмов, их ингибиторы и биокаталитические процессы в биотехнологии // Прикладная биохимия и микробиология. 1995. - Т. 31, № 1. - С. 21-26.

15. Безбородов A.M. Биотехнология продуктов микробного синтеза. М.: Аг-ропромиздат. - 1991. -238 с.

16. Белуков C.B. Криорезистность клеток Saccharomyces cerevisiae в зависимости от температуры культивирования при аэрации /C.B. Белуков, Ю.В. Иванова, H.A. Кустова//Биотехнология. 1997. -№ 3. - С. 39-44.

17. Березин И.В. Исследования в области ферментативного катализа и инженерной энзимологии. Избранные труды М.: Наука. - 1990. - 384 с.

18. Бернштейн Т.С. Снижение сахароемкости замесного печенья / Т.С. Берн-штейн, JI.A. Землинская, А.Н. Архангельская // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1987. - № 4. - С. 16.

19. Берри Д. Биология дрожжей: Пер. с англ. М.: Мир. - 1985. - 96 с.

20. Билай В.И. Основы общей микологии. Киев: Вища шк. 1980. - С. 68.

21. Биотехнология / Под ред. И. Хиггинс-М.: Мир, 1988. С. 468-465.

22. Васильев H.H. Моделирование процессов микробиологического синтеза / H.H. Васильев, В.А. Амбросов, A.A. Складнев. М.: Лесная пром-ть. -1975. - 541 с.

23. Варфоломеев С.Д. Биокинетика: Практический курс / С.Д. Варфоломеев, К.Г. Гуревич. М.: ФИР-ПРЕСС, 1999. - 720 с.

24. Варфоломеев С.Д. Кинетические методы в биохимических исследованиях / С.Д. Варфоломеев, C.B. Зайцев. М.: Изд-во МГУ, 1982. - 343 с.

25. Галчева-Гаргова З.И. Регуляция образования ß-фруктозидазы у дрожжей уровнем этого фермента в среде: Дис. . канд. биол. наук: защищена в МГУ имМ.В. Ломоносова. -М., 1975. 109 с.

26. Горкина Н.Б. Биохимическое и цитохимическое изучение препаратов иммобилизованной инвертазы в процессе инверсии сахарозы/Н.Б. Горкина, К.А. Луста, Г.А. Репик, З.Г. Соломон // Прикладная биохимия и микробиология. 1992.-Т. 28, № 1.-С. 100-106.

27. Грачев Ю.П. Математические методы планирования экспериментов. М.: Пищ. пром-ть. —1979. - 192 с.

28. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. 2-е изд., перераб. и доп. -М.: Агропромиздат. - 1987. - 335 с.

29. Дашиев М.И. К теории растворов сахарозы / М.И. Дашиев, Л.Н. Дашиева, Н.В. Орлова // Изв. Вузов. Пищевая технология. 1974. - № 2. - С. 40-44.

30. Дашиев М.И. Удельные объемы и коэффициенты преломления компонентов сахарного раствора / М.И. Дашиев, Н.В. Орлова // Изв. Вузов. Пищевая технология. 1975. -№ 3. - С. 98-102.

31. Денисова O.A. Пути получения ферментных препаратов на основе автоли-зирующих дрожжей / O.A. Денисова, Е.В. Богданова, O.A. Трушина, И.В. Кручинина-Богданов //Биотехнология. 1992. -№ 2. - С. 14-15.

32. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты: В 3 т. -М.: Мир. 1982. - Т. 1, 2. - 1118 с.

33. Добролинская Г.М. Биосинтез (3-фруктофуранозидазы грибами из рода Aspergillus / Г.М. Добролинская, Ю.З. Серова // Прикладная биохимия и микробиология. 1974. - Т. 10, № 5. - С. 717-720.

34. Добролинская Г.М. Влияние питательной среды на биосинтез 3-фруктофуранозидазы грибом Aspergillus awamori 16 / Г.М. Добролинская, Ю.З. Серова // Прикладная биохимия и микробиология. 1976. - Т. 12, № 3. -С. 372-377.

35. Добролинская Г.М. Выделение препарата p-фруктофуранозидазы и его характеристика / Г.М. Добролинская, Ю.З. Серова // Прикладная биохимия и микробиология. 1976. - Т. 12, № 5. - С. 709-7. 4.

36. Егоров С.Н. Взаимное влияние инвертазы и кислой фосфатазы дрожжей Saccliaromyces cerevisiae на их секрецию в среду культивирования / С.Н. Егоров, И.Н. Семенова, В.Н. Максимов // Микробиология. 2000. - Т. 69, № 1. - С. 34-37.

37. Жеребцов Н.А. Амилолитические ферменты в пищевой промышленности. М.: Легкая и пищевая пр-сть. - 1984. - 160 с.

38. Жеребцов Н.А. Биохимия: Учебник / Н.А. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. Воронеж: Изд. Воронежского гос. униворситета, 2002. - 696 с.

39. Жеребцов Н.А. Влияние температуры и концентрации на инверсию сахарозы препаратом 3-фруктофуранозидазы Aspergillus awamori / Н.А. Жеребцов, В.Б. Букова // Прикладная биохимия и микробиология. 1978. - Т. 14, №2. - С. 217.

40. Жеребцов Н.А. О механизме каталитического действия карбогидраз (обзор) / Н.А. Жеребцов, О.С. Корнеева, Т.Н. Тертычная // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. - Т. 35, № 2. - с. 123-132.

41. Жеребцов Н.А. О Р-фруктофуранозидазе плесневого гриба Aspergillus awamori / Н.А. Жеребцов, В.Б. Букова // Прикладная биохимия и микробиология. 1977. - Т. 13, № 2. - С. 289-294.

42. Жеребцов H.A. Получение и некоторые свойства ß-фруктофуранозидазы / H.A. Жеребцов, B.C. Григоров, Е.Ю. Ухина, О.Б. Мараева // Хранение и переработка сельхозсырья. 1999. - № 7. - С. 18-20.

43. Иванова Ю.В. Зависимость криорезистности клеток рас дрожжей Saccharomy-ces cerevisiae от кислотности среды культивирования / Ю.В. Иванова, C.B. Бе-луков, A3. Коршунов // Биотехнология. 1996. - № 11. - С. 42-45.

44. Казанская A.A. Применение в хлебопечении новых функциональных добавок из нетрадиционного сырья / A.A. Казанская, Н.К. Синявская // Хлебопродукты. 1993. - № 3. - С. 42-48.

45. Катаева A.A. Новое в технологии производства затяжных сортов печенья/ A.A. Катаева, Л.С. Вишавская, Г.Ф.Севрюкова, В.В. Поспелов // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1992. -№ 2. - С. 24.

46. Квасников Е.И. Дрожжи. Биология. Пути использования / Е.И. Квасников, И.Ф. Щелокова Киев: Наукова думка. - 1991. -328 с. С. 25

47. Кириллова Л.М. Инвертазная активность сахарозотолерантных и осмо-фильных микромицетов // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. -Т. 33, № 1. - С. 49-52.

48. Ковалева Н.С. ß-Фруктозидаза дрожжевых организмов. Диссертация канд. биол. наук; Утв. - М., 1973. - 140 л.с.

49. Коновалов С.А. Биохимия бродильных производств. М.: Пищ. промышленность. 1967. - 312 с.

50. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Пищ. промышленность. - 1980. - 271 с.

51. Корнеева О.С. Исследование механизма расщепления гликозидных связей сахарозы Р-фруктозидазой Aspergillus niger БКМ F-801 / О.С. Корнеева, Н.А. Жеребцов, И.В. Черемушкина, Е.Ю. Ухина // Биохимия. 1998. - Т. 63, № 10. - С. 1220-1225.

52. Корнеева О.С. Карбогидразы: препаративное получение, структура и механизм действия на олиго- и полисахариды. Воронеж: Изд-во Воронеж, гос. ун-та., 2001. - 186 с.

53. Корнеева О.С. Сбраживание топинамбура дрожжами рода Kluyveromyces для получения спирта / О С. Корнеева, А.Н. Яковлев: Информ. Листок № 79-013-00 / Воронеж. ЦНТИ. Воронеж, 2000. - 3 с.

54. Котенко С.Ц. Активность ферментов зимазного комплекса дрожжей Sac-charomyses cerevisiae / С.Ц. Котенко, М.Е. Котенко // Хранение и переработка сельхозсырья. 2000. - № 4. - С. 32-33.

55. КретовичВ.Л. Основы биохимии растений. -М.: Высшая школа. 1986. -547 с.

56. Кретович В.Л. Ферментные препараты в пищевой промышленности. М.: Пищ. пром-ть, 1975. - 535 с.

57. Крупянко В.И. О выборе концентрации субстрата для определения константы Михаэлеса и максимальной скорости ферментативной реакции / В.И. Крупянко, П.В. Крупянко // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. - Т. 35, № 2. - С. 133-136.

58. Куликова А.К. Очистка внутриклеточной инвертазы Saccharomyces fragilis / А.К. Куликова, В.Г. Чичуа, А.К. Церетелли, Г.И. Квеситадзе // Прикладная биохимия и микробиология. 1986. - Т.22, № 5. - С. 648-651.

59. Кунцев В. Технология солода и пива: пер. с нем./ В.Кунцев, Г. Мит. -СПб.: Изд-во "Профессия", 2001. 912 с.

60. Ломкаци Е.Т. Экзогенная Р-фруктофуранозидаза мутантов Pénicillium canescens sopp. 20171 / Е.Т. Ломкаци, А.Т. Школьный, М.М. Гомартели,

61. A.K. Щеретели, М.Д. Джобава, Т.И. Билай, Г.И. Квеситадзе // Прикладная биохимия и микробиология. 1991, № 2. - С. 189-195.

62. Ляховская Л.П. Влияние препарата инвертазы и хлебопекарных дрожжей на качество и сохранность помадных конфет. Дисс. . канд. техн. наук. -Москва, 1975. 175с.

63. Мазур П.Я. Снижение сахароемкости булочных и сдобных изделий / П.Я. Мазур, Л.И. Смолярова, В.А. Сибирко, Т.Г. Троепольская, В.Н. Дятлов // Хлебопекарная и кондитерская пром-ть. 1987. - № 7. - С. 21.

64. Малков A.M. Производство дрожжей из непищевого сырья. М.: Гослес-бумиздат, 1953. - 176 с.

65. Матулатайте Е.Ю. Выделение и изучение свойств ß-фруктофуранозидазы из дрожжей Saccharomyces cerevisiae / Е.Ю. Матулатайте, В.Ю. Авиженис, А.К. Янулайтене, A.A. Гегужене // Прикладная биохимия и микробиология. 1980. - Т. 16, № 4. - С. 528-537.

66. Матулатайте Е.Ю. Препараты инвертазы и мутаротазы, иммобилизованные в трехмерной системе с глокозооксидазой / Е.Ю. Матулатайте, Д.П. Карпавичене, Г А. Гавенас, В.В. Кулене // Прикладная биохимия и микробиология. 1990. - Т. 26, №3,-С. 333-340.

67. Методы биохимических исследований растений / Под ред. Ермакова А.И., 3-е изд., перераб. и доп. Л.: Агропромиздат Ленинградское отделение. -1987.-С. 430.

68. Мильский A.B. Применение инвертина в кондитерской промышленности. в кн. Внедрение ферментных препаратов в народное хозяйство, Е. 2. -М.: Цинтипищепром, 1961, С. 42-62.

69. Мирзарахметова Д.Т. Кинетика иммобилизованной и нативной инвертаз / Д.Т. Мирзарахметова, С.Х. Абдуразакова // Химия природ, соед. 1998. -№3.-С. 346-348.

70. Наумов Д.Г. ß-Фруктозидазы: новое суперсемейство гликозил-гидролаз / Д.Г. Наумов, В.Г. Дорошенко // Молекулярная биология. 1998. - Т. 32, № 5. - с. 902-907.

71. Неклюдов А.Д. Кравченко Л.В. Влияние аминокислот и полипептидов на процесс автолиза биомассы Saccharomyces cerevisiae / А.Д. Неклюдов, Н.В. Федорова, В.П. Илюхина, Х.А. Купов // Прикладная биохимия и микробиология. 1994. -№ 1. - С. 127-131.

72. Неклюдов А.Д. Ферментативный профиль автолизирующих дрожжей рода Saccharomyces cerevisiae / А.Д. Неклюдов, Н.В. Федорова, В.П. Илюхина, Е.П. Лисицина // Прикладная биохимия и микробиология. 1993. - № 5. -С. 734-743.

73. Нигматулин P.P. Мембранные очистка и концентрирование инвертазы из дрожжей Saccharomyces cerevisiae / P.P. Нигматулин, М.Т. Быков, Е.К. Во-внянко, В.К. Янгевской, Н.И. Смирнова // Биотехнология. 1993. - № 5. -С. 26-31.

74. Пищеков Г.Б. К оптимизации процесса роста и размножения дрожжевых клеток // Хранение и переработка сельхозсырья. 1999. - № 12. - С.66-68.

75. Пищеков Г.Б. К методу математического моделирования процесса роста и размножения дрожжевых клеток в аппаратах периодического и непрерывного действия // Хранение и переработка сельхозсырья. 1999. - № 8. -С.66-68.

76. Петраш И.П. Возможность использования ГФС в хлебопечении / И.П. Петраш, И.В. Кузнецова, P.C. Зуевская, Л.П. Сикуринова // Хлебопродукты. 1989. - № 2. - С. 38-39.

77. Плевако Е.А. Технология дрожжей. М.: Пищевая промышленность. - 1970.

78. Поландова Р.Д. Применение новых ферментных препаратов в хлебопекарном производстве // Хлебопекарная и макаронная промышленность. -1988. С. 2-8.

79. Путнам Ф. Денатурация белков. В кн.: Белки. - М., 1984. - 24 с.

80. Раевская О.Г. Новые гибриды, сбраживающие полностью раффинозу и имеющие активную мальтозу / О.Г. Раевская, К.В. Кошков // Микробиология. 1969. - Т. 38, № 4. - С. 571-576.

81. Роуз Э. Химическая микробиология. -М.: Мир, 1971. -294 с.

82. Рубин А.Б. Биофизика: В 2 т. Т. 1: Теоретическая биофизика: учебник для вузов. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Книжный дом "Университет", 1999. - 448с.

83. Рудольф В.В. Производство безалкогольных напитков и розлив минеральных вод /В.В. Рудольф, В.Е. Балашов. -М.: агропромиздат. 1988. - С. 70-71.

84. Рузинов Л.П. Статистические методы оптимизации химико-технологических процессов. М.: Химия, 1972. - 199 с.

85. Русанова Л.А. Применение натуральных высокосахаристых продуктов как заменителей сахара / Л.А Русанова, Г.А. Красненко // Известия Вузов. Пищевая технология. 1993. -№ 3-4. - С. 56-57.

86. Рухлядева А.П. Методы определения активности гидролитических ферментов / А.П. Рухлядева, Г.В. Полыгина - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981. -288 с.

87. Сапронов А.Р. Технология сахарного производства. М.: Колос, 1999. -495 с.

88. Свишцов А.А. Новые возможности ультрафильтрации в биотехнологии: Обз. инф. / А.А. Свишцов, Г.М. Барсукова, И.А. Ипатов. М.: ЦБНТИ Минмедбиотехника. - 1987. - № 5 - С. 32.

89. Серова Ю.З. Гидролиз сахаросодержащих растворов препаратом фруктоа-ваморин Г10х / Ю.З. Серова, Г.М. Добролинская, В.Ф. Суходол // Ферментативная и спиртовая промышленность. 1978. - № 1. - С. 42-44.

90. Слюсаренко Т.П. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых производств. М.: Легкая пром-ть. - 1984. - 208 с.

91. Способ получения препарата инвертазы для гидролиза сахарозы: Пат. 2157844 Россия, МПК{7} C12N 9/26 / Островский Д.И., Рязанов Е.М., Бубнов А.В. -N99110850/13; Заявл. 17.05.99; Опубл. 20.10.00, Бюл. N 29.

92. Способы получения фермента p-фруктофуранозидазы и его применение /под ред. Катаевой А.А., Байера Н.И. -М.: ЦНТИПишепрома. 1966. - 45с.

93. Ухина Е.Ю. (З-Фруктофуранозидаза Aspergillus niger-2259. препаративное получение и некоторые физико-химические свойства: Автор, дис. . канд. техн. наук. спец. 03.00.23-Биотехнология. Воронеж, 1998. - 17 с.

94. Ушаков В.М. Способ извлечения инвертазы из дрожжевых клеток в процессе их культивирования / В.М. Ушаков, А.Б. Циоменко, Г.П. Туйметова, В.В. Лупашин, И.С. Кулаев//Биотехнология. 1992. -№ 1. - С.43-45.

95. Ферментация и технология ферментов: Пер. с англ. / Д. Уонг, Ч. Кооней, А. Демайн и др. М.: Легкая и пищевая промышленность. - 1983. - 336 с.

96. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир. -1980.-432 с.

97. Хамани Д. Некоторые особенности регуляции биосинтеза (3-фруктофу-ранозидазы у дрожжевых организмов. Автор, дис. . канд. биол. наук. -М., 1972. 17 с.

98. Харин Т.С. О водно-сахарных растворах / Т.С.Харин, А.А. Книга // Изв. Вузов. Пищевая технология. 1963. -№ 5. - С. 47-51.

99. Чичуа В.Г. Влияние температуры и концентрации сахарозы на эффективность действия фермента инвертазы при получении сахарных сиропов / В.Г. Чичуа, Г.Г. Микеладзе // Ферментативная и спиртовая промышленность. 1973. - № 6. - С. 40-41.

100. Чичуа В.Г. О перспективах использования микробных инвертаз в производстве безалкогольных напитков // Изв. АН ГСССР. Сер. биол. 1983. -Т. 9, №2.-С. 99.

101. Шлегель Г. Общая микробиология / под ред. Е. Н. Кондратьевой. М.: Мир, 1987. - 567 с.

102. Юркевич В.В. (З-Фруктофуранозидаза из Saccharomyces (Kluyvero-myces) lactis / В.В. Юркевич, А.С. Ковалева, Х.Х. Бакер // Физиология растений. 1972. - Т. 19, № 5. - С. 937-945.

103. Юркевич В.В. / В.В. Юркевич, Н.В. Шамшурина, Д. Хамани // Биол. науки 1973. - Т. 3, № 7. - С. 97.

104. Юркевич В.В. Биосинтез (3-фруктозидазы дрожжей под влиянием повышенной осмотической концентрации среды / В.В. Юркевич, Д. Хамани // Научные доклады Высшей школы. Биологические науки. 1972. - Т. 11. - С. 101-104.

105. Юркевич В.В. Локализация эффекта регуляции биосинтеза (3-фруктозидазы у дрожжей уровнем активного фермента среды / В.В. Юркевич, З.И. Галчева-Гаргова // Доклады АН СССР 1975. - Т. 2225, № 4. - С. 971-973.

106. Юркевич В.В. О (3-фруктозидах дрожжевых организмов / В.В. Юркевич, А.С. Ковалева // Научные доклады Высшей школы. Биологические науки. 1972. - Т. 6. - С. 98-108.

107. Юркевич В.В. О сахарной и инулиназной функциях активного центра Р-фруктофуранозидазы из Kluyveromyces (Saccharomyces) fragilis /В.В. Юркевич, А.С. Ковалева // Доклады АН СССР 1972. - Т. 207, № 5. - С. 1233-1235.

108. Яровенко В.Л. Производство ферментных препаратов из грибов и бактерий / В.Л. Яровенко, К.А. Калунянц, Л.И. Голгер. М.: Агропромизд. -1970. - 396 с.

109. Acosta N. Characterization of recombinant invertase expressed in methy-lotrophic yeasts / N. Acosta, A. Beldarrain, L. Rodriguez, Y.Alonso // Biotech-nol Appl Biochem. 2000 Dec. - V. 32, № 3. - P. 179-87.

110. Arnold W.N. The cryptic P -fr uctofuranosidae of Saccharomyces rouxii // Mol. and Cell. Biochem. 1982. - V. 45, № 1 - P. 59-64.

111. Ait M. Sucrose and raffmose breakdown by Escherichia coli / M. Arr, T. Per-enyi, E.K. Novak // Acta, microbiol. Acad. sci. hung. 1970. - № 17. - P. 117.

112. Arruda L.M.O. Characterization of invertase entrapped into calcium alginate beads / L.M.O.Arruda, M. Vitolo // Biotecnol. 1999. - V. 6. - P. 89-99.

113. Baker R.W., Stratman H. // J. Appl. polymer Sci. 1970. - V. 14, № 5. - P. 1197-1214.

114. Bealing F.J. //Biochem. J. 1953. -№ 55. - P. 93.

115. Belcarz A. The novel non-glycosylated invertase from Candida utilis (the properties and the conditions of production and purification) / A. Belcarz, G. Ginalska, J. Lobarzewski, C.Penel // Biochim Biophys Acta. 2002 Jan 31. -V. 1594, № l.-P. 40-53.

116. Bielecki S. Oligosaccharide synthesis by invertase in organic media containing SDS / S. Bielecki, R.I. Somiari // Biotechnol. Lett. 1998. - V. 20, № 3. -P. 287-290.

117. Boddy L.M. Purification and characterisation of an Aspergillus niger invertase and its DNA sequence / L.M. Boddy, T. Berges, C. Barreau, M.H. Vain-stein, M.J. Dobson, D.J. Ballance, J.F. Peberdy // Curr Genet. 1993 Jul-Aug. -V. 24, № 1-2. - P. 60-66.

118. Bugbee W.M. Partial purification and properties of an invertase from Pseudomonas flurescens // Can. J. Microbiol. 1984. - V. 30. - P. 1326-1329.

119. Burger M. Libiration of invertase from disintegrated yeas cells / M. Burger, E.E. Balen, J.S.D. Bacer//Nature. 1958. -V. 182. - P. 1508.

120. Cavaille D. Effect of temperature and pressure on yeast invertase stability: A kinetic and conformational study / D. Cavaille, Didier Combes // J. Biotechnol. 1995. - V. 43, № 3. - P. 221-228.

121. Chang P.L.Y. Release of wall-bound invertase and trehalase on Neurospora crassa by hydro lytic enzymes / P.L.Y. Chang, J.R. Trevithick // J. Gen. Microbiol. 1972. -V. 70. - P. 13.

122. Charng Y.Y. Partial purification and characterization of invertase isozymes from rice grains (Oryza sativa) / Y.Y. Charng, R.H. Juang, J.C. Su, H.Y. Sung// Biochem Mol Biol Int. 1994 Jim. - V. 33, № 3. - P. 607-615.

123. Chassy B.M. Extracellular invertase Streptococcus mutans and Streptococcus salivarius / B.M. Chassy, R.M. Bielawski, J.R. Beall // Life Sci. 1974. -V.15, № 6. -P. 1173.

124. Chaudhuri A. A novel invertase from a thermophilic fungus Thermomyces lanuginosus: its requirement of thiol and protein for activation/A. Chaudhuri, R. Maheshwari//Arch Biochem Biophys. 1996 Mar 1. - V.327, №1. - P.98-106.

125. Chen W.C. Production of (3-frictofuranosidase by Aspergillus japonicus / C.W. Chang, Liu Chi-hsien // Enzymen and Microb. Technol. 1996. - V. 18, №2. - P. 153-160.

126. Chen W.C. Production of (3-fructofuranosidase by Aspergillus japonicus in bath and fed-batch cultures // Biotechnol. Lett. 1995. - V. 17, № 12. - P. 1291-1294.

127. Cuezzo de Gines S. Purification and characterization of invertase from Lactobacillus reuteri CRL 1100 / Cuezzo de Gines S, M.C. Maldonado, Font de Valdez G. // Curr Microbiol. 2000 Mar. - V. 40, № 3. - P. 181-184.

128. Davies R. A new factor stimulating invertase production by Saccharomyces fragilis // J. Gen. Microbiol. 1971. V. 66, № 1 - P. 37.

129. Draper N.R. "Ridge analysis" of Response Surfaces // "Technometrics". -1963. № 4,5. -P. 3-18.

130. Ettalibi M. Purification, properties and comparison of invertase, exoinuli-nases and endoinulinases of Aspergillus ficuum / M. Ettalibi, J.C. Baratti // Appel. Microbiol. Biotechnol. 1987, № 26. - P. 13-20.

131. Fiscer E., Kohner L., Felling J. // Helv chim. acta. 1951. - V. 75, № 34. -P. 1132.

132. Fujita K. Purification and some properties of beta-fructofuranosidase I from Arthrobacter sp. K-l / K. Fujita, K. Hara, H. Hashimoto, S.Kitahata // Agnc Biol Chem. 1990 Apr. - V. 54, № 4. - P. 913-919.

133. Gancedo C. Energy-yielding metabolism / C. Gancedo, R.G. Serrano // The yeasts. 2nded. / Ed. A. h. Rose, J. s. Harrison. - London etc.: acad. Pres, 1989. - V. 3,-P. 206-259.

134. Georis I. Glucose repression of the Kluyveromyces lactis invertase gene K1INV1 does not require Miglp / I. Georis, JP Cassart, KD Breunig, J. Van-denhaute // Mol Gen Genet. 1999 Jun. - V. 261, № 4-5. - P. 862-870.

135. Ghosh K. Purification and characterization of an invertase produced by Aspergillus ochraceus TS / K. Ghosh, A. Dhar, T.B.Samanta // Indian J Biochem Biophys. 2001 Jun. - V. 38, № 3. - P. 180-185

136. Gill R. K. Harmaline interactions with yeast invertase / R. K. Gill, J. Kaur, S. Mahmood, J.P. Nagpaul, A. Mahmood // Indian J. Biochem. and Biophys. -1998. 35, №2.-P. 86-90.

137. Greiner S. Ectopic expression of a tobacco invertase inhibitor homolog prevents cold-induced sweetening of potato tubers / S. Greiner, T. Rausch, U. Sonnewald, K. Herbers // Nat Biotechnol. 1999 Jul. - V. 17, №7. - P.708-711.

138. Grootwarssink J.W.D. Inducible and constitutive formation of ß-fructofiira-nosidase (inulase) in batch and continuous cultures of the yeast KX fragilis / J.W.D. Grootwarssink, G.M. Hewitt // J. Gen. Microbiol. 1983. - V. 129. - P. 31-42.

139. Gruiraid J.P. Alcohol production from Jerusalem artichoke using yeasts with invertase activity / J.P. Gruiraid, J. Daurelles, P. Galzy // Biotechnol. and Bioeng.- 1981.-Vol. 23, №7.- P. 1461-1465.

140. Gruiraid J.P. / J.P. Gruiraid, J. Bourgi, J. Stervionou, M. Claisse, P. Galzy // Biotechnol. and Bioeng. 1987. - Vol. 29, № 7. - P. 850-858.

141. Guiraud J.P. Impairment of insulin assimilation and beta-fructosidase activity due to a petite mutation in Kluyveromyces marxianus /J.P. Guiraud, D. Mouillet, J. Bourgi, M. Claisse, P.Galzy // Antonie Van Leeuwenhoek.1988. V.54, № 2. - P. 127-138.

142. Gupta A.K. Production, purification and immobilization of inulinase from Kluyveromyces fragilis // J. Chem. Technol. and Biotechnol. 1994. - V. 59, №4.-P. 377-385.

143. Gupta A.K. Glucofructosan biosynthesis Fusarium oxysporum: regulation and substrate specificity of fructosiltransferase and invertase / A.K. Gupta, I.S. Bhatia // Phytochemistry 1982. - Vol. 21, № 6. - P. 1249-1253.

144. Hagashi Sachio. Miyazaki daigaku Kogakubu Kenkyu hokoku / Hagashi Sa-chio, Ito Kuniaki, Kinoshita Junko. // Bull. Falc. Eng., Univ. Miyazaki. 1992. - № 38. - P. 67-70.

145. Hankin L. Hydrolytic and transferase activities of invertase from physiological races of Phytophthora parasitica var. Nicotinae / L. Hankin, J. Mclntyre // Mycologia. 1980. - V. 72, № 4. - P. 749.

146. Haysishi Sachio. Utilisation of ß-frictofuranosidase / Haysishi Sachio, Ma-tsuzaki Katsuhiro, Kawahara Toshikazu, Takasaki Yoshiyuki, Imada Kiyohisa // Bioresour. technol. 1992. - V. 41, № 3. - P. 231-233.

147. Herwig C. Quantitative analysis of the regulation scheme of invertase expression in Saccharomyces cerevisiae / C. Herwig, C. Doerries, I. Marison, von Stockar U. // Biotechnol Bioeng. 2001 Nov. -V. 76, № 3. - P.247-258.

148. Hidaka Hidemasa. Purification and properties of a fructooligosaccharide-producting ß-fructofuranosidase from Aspergillus niger ATCC 20611 // Agr. and Biol. Chem. 1989. - V. 53, № 93. - P. 667-673.

149. Husain S. Covalent immobilization of invertase and horseradish peroxidase on concanavalin A-Seralose via carbohydrate moieties / S Husain, F. Jafri // Biochem Mol Biol Int. 1995 Jul. - V. 36, № 3. - P. 669-677.

150. Iizuka M. Chemical and physicochemical properties of invertase of Candida utilis/M. Iizuka, T. Yamamoto//Agric. and Biol. Chem. 1979. - V.43,№2. -P.217.

151. Iizuka M. Some physicochemical properties of invertase of Candida utilis / M. Iizuka, Y. Tsuji, T. Yamamoto // Agric. and Biol. Chem. 1974. - V. 38. -P. 213-215.

152. Imamura L. Purification and characterization of beta-fructofuranosidase from Bifidobacterium infantis / L. Imamura, K. Hisamitsu, K. Kobashi // Biol Pharm Bull. 1994 May. - V. 17, № 5. - P. 596-602.

153. Ishikawa H. Transfructosylation of rebaudioside A (a sweet glycoside of Stevia leaves) with Microbacterium beta-fructofuranosidase / H. Ishikawa, S. Kitahata, K. Ohtani, O.Tanaka // Chem Pharm Bull (Tokyo) 1991 Aug. V. 39, № 8. - P. 2043-2045.

154. Isla M.I. Invertase activity associated with the walls of Solanum tuberosum tubers / M.I. Isla, M.A. Vattuone, R.M. Ordonez, A.R. Sampietro // Phytochem-istry. 1999 Feb. - V. 50, № 4. - P. 525-534.

155. Itoh Y. Purification and properties of fructosetransferrmg enzyme from P. oxalicum. (3-Frictofuranosidases enzyme isolation and characterization / Y. Itoh, S. Shimura // Nippon Shkuhin Kogyo Gakkaishi. 1986. - V. 33, № 12. -826-830.

156. Janssen F. Factors affecting invertase action in cast cream centers // Manu-fact. confectioner. 1961. - V. 41, № 8. - P. 56-61.

157. Kida M. Formastion of fructooligosaccharides from sucrose cotaluzed by immobilized p-fructofuranosidase originated Aspergillus oryzae / M. Kida, Y. Yosliihiro // J. Chem. Soc. Jap., Chem. and hid. Chem. -1988, № 11. P. 1830-1835.

158. Kim J.Y. Characterization of two members of the maize gene family, Incw3 and Incw4, encoding cell-wall invertases / J.Y. Kim, A. Mahe, S. Guy, J. Brangeon, O. Roche, P.S. Chourey, J.L. Prioul // Gene. 2000 Mar 7. - V.245, № 1. - P. 89-102.

159. Kuramitsu H.K, Characterization of invertase activity from cariogenic Streptococcus mutans // J. Bacteriol. 1973. - V. 115, № 3. - P. 1003.

160. Kyono K. Cloning and characterization of Zymomonas mobilis genes encoding extracellular levansucrase and invertase / K. Kyono, H. Yanase, K. Tono-mura, H. Kawasaki, T. Salcai // Biosci Biotechnol Biochem. 1995. - V. 59, № 2. - P. 289-293

161. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T. 4 Nature (London). 1970. - V. 277. - P. 680-685.

162. Lamper J.O. Yeast and Neurospora invertases. In 6: The enzymes V. 5, Ed. Bayer P.D. - New York, London: Academic Press, 1972. - P. 292-305.

163. Lee H.S. Purification and characterization of neutral and alkaline invertase from carrot / H.S. Lee, A. Sturm // Plant Physiol. 1996. - V. 112, № 4. - P. 1513-1522.

164. Lehle L. Carbohydrate structure of yeast invertase. Demonstration of a form with only core oligosaccharides and a form with completed polysaccharide chains / L. Lehle, R.E. Cohen, C.E. Ballou // J Biol Chem. 1979 Dec 10. - V. 254, №23.-P. 12209-18.

165. L'Hocine L. Purification and partial characterization of fructosyltransferase and invertase from Aspergillus niger AS0023 / L. L'Hocine, Z. Wang, B. Jiang, S. Xu // J Biotechnol. 2000 Jul 28. -V. 81, № 1. -P.73-84.

166. Looten Ph. The |3-fructofuranosidase activities of a strain of Clostridium acetobutylicum grown on inulin / Ph. Looten, D. Blanchet, J.P. Vandecasteele // Appl. Microbiol. And Biotechnol. 1987. - V. 25, № 5. - P. 419-425.

167. Lowry O.H. Protein estimation with folin phenol reagent / O.H. Lowry, N.J. Resebrough, A.L. Farr, R.J. Randell // J. Biol, cliem. 1951. - V. 193, № 1. -P. 265-275.

168. Makarow M. Secretion of invertase in mitotic yeast cells // EMBO J. 1988 May. - V. 7, № 5. - P.1475-1482.

169. Marzluf G.A. Regeneration of invertase in Neuropora crassa // J. Bacteriol. -1973,-V. 115, № 1. P. 146.

170. Meachum Z.D. Chemical and physical studies of invertase Neuropora crassa. Molecular weight, quaternary structure / Z.D. Meachum, H.J. Colvin, H.D. Brayner // Biochemistry. 1971. - V. 10, № 2. - P. 326.

171. Metzenberg R.L. The purification and properties of invertase Neurospora crassa//Arch. Biochem. Biophys. 1963. - V. 100. - P. 503-511.

172. Meyer J. Regulation of isoenzymes and secretion of invertase in baker's yeast / J. Meyer, Ph. Matile //Biocliem. Physiol. Rflanzen. 1974. - V. 166. - P. 377.

173. Moreno S. Purification and characterization of the invertase from Schizosac-charomyces pombe. A comparative analysis with the invertase from Saccharomyces cerevisiae / S. Moreno, Y. Sanchez, L. Rodriguez // Biochem J. 1990. - V.267, № 3. - P. 697-702.

174. Moreno S. Subcellular localization and glycoprotein nature of the invertase from the fission yeast Schizosaccharomyces pombe / S. Moreno, T. Ruiz, Y. Sanchez, J.R. Villanueva, L.Rodriguez // Arch Microbiol. 1985 Sep. - V. 142, 3 4.-P. 370-374.

175. Muramatsu M. Enzymatic synthesis of novel fructosyl and oligofructosyl trehaloses by Aspergillus sydowi beta-fructofuranosidase / M. Muramatsu, T. Nakakuki // Biosci Biotechnol Biochem. 1995 Feb. - V. 59, №2. - P.208-212.

176. Nadkarni M.A. An invertase with unusual properties secreted by sucrose-grown cells of Corynebacterium murisepticum / M.A. Nadkarni, V.N. Pandey, D.S.Pradhan// Indian J Biochem Biophys. 1993Jun. - V.30,№3. - P.156-159.

177. Naruandi R.E. Hidhlevel production of recombinant invertase in Hansenula polymorapha / R.E. Natciandi, L. Rodriguez, E. Rodriguez, R. Diaz, J. Delgado, L. Herrera // Biotechnol. Lett. 1995. - V. 17, № 3. - P. 949-952.

178. Negoro H. Inulase from Kluyveromyces fragilis // J. Ferm. Technol. 1978. -V. 56. -P. 102-107.

179. Negoro H. Purification and enzymatic properties of extracellular p-fructofu-ranosidase form Candida utilis / H. Negono, E. Kito // J. Ferment. Technol. -1973.-V. 51.-P. 879-886.

180. Negoro H. Purification and enzymatic properties of intracellular (3-fructo-furanosidase form Candida utilis / H. Negono, E. Kito // J. Ferment. Technol. -1973. V. 51, №2. - P. 103-110.

181. Nelson N.J. // J. Biol. chem. 1944. - V. 153, № 2. - P. 375-381.

182. Nguyen-Quoc B. A role for 'futile cycles' involving invertase and sucrose synthase in sucrosemetabolism of tomato fruit / B. Nguyen-Quoc, C.H. Foyer // J Exp Bot.-2001 May.-V. 52, № 358.-P. 881-889.

183. Obenland D.M. Purification and characterization of three soluble invertases from barley (Hordeum vulgare L.) leaves / D.M. Obenland, U. Simmen, T. Boiler, A.Wiemken // Plant Physiol. 1993 Apr. - V. 101, № 4. P. 1331-1339.

184. Olivera I. M. Screening of (3-fructofuranosidase producing microorganusmus for production of fructooligosaccarides and studies of some enzyme properties / I. M. Olivera, Y.K. Park // Rev. microbiol. 1995. - V. 26, № 2 - P. 125-129.

185. Olusanya O. The purification and characterization of intracellular invertase obtained from pathogenic Escherichia coli / O. Olusanya, P.O. Olutiola // Afr J Med Med Sci. 1994 Sep. - V. 23, № 3. - P. 291-299.

186. Olutiola P.O. Extracellular invertase from A. flavus / P.O. Olutiola, O.O. Cole // Physiol. Plant. 1980. - V. 50, № 1. - P. 26-31.

187. Onodera K. Purification and crystallization of invertases from Fusarium ox-ysporum / K.Onodera, Y. Maruyama // J. Gen. Appl. Microbiol. 1979. - V. 25. - P. 335-337.

188. Palenik Ch. J. Extracellular invertase activity from Actinomyces viscosus / Ch. J. Palenik, C.H. Miller // J. Dent. Research. 1975. - V. 54, № 1. - P. 186.

189. Pejin D. / D. Pejin, J. Jakovljevic, R. Razmovaski J. Berrenji // J. Ferment. Bioeng. 1993. - V. 75, № 1. - P. 79-81.

190. Pitombo R.N. Effect of moisture content on the invertase activity of freeze-dried S. cerevisiae / R.N. Pitombo, C. Spring, Passos R.F., M. Tonato, M. Vitolo // Cryobiology. 1994 Aug. - V. 31, № 4. - P. 383-392.

191. Pyun Y.R. Effects of oxygen on invertase expression in continuous culture of recombinant Saccharomyces cerevisiae containing the SUC2 gene / Y.R. Pyun, J.S. Jo, J.W. Park, H.H. Shin // Appl Microbiol Biotechnol. 1999 Mar. -V. 51, №3,-P. 334-339.

192. Quiroga E.N. Purification and characterization of the invertase from Pycnoporus sanguineus / E.N. Quiroga, M.A. Vattuone, A.R. Sampietro // Bio-chim Biophys Acta. 1995 Sep 6. - V. 1251, № 2. - P. 75-80.

193. Raheja G. Effect of sodium on Saccharomyces cerevisiae invertase activity / G. Raheja, R.K. Gill, S. Kumar, S. Mahmood, A. Mahmood // Indian J Exp Biol. 1998 May. - V. 36, № 5. - P. 493-496.

194. Rodriguez J. Characterization of the invertase from Pichia anomala / J. Rodriguez, J.A. Perez, T. Ruiz, L. Rodriguez // Biochem J. 1995 Feb 15. - V. 306, № l.-P. 235-239.

195. Rouwenhorst R.J. Localization of inulinase and invertase in Kluyveromyces species / R.J. Rouwenhorst, W.S. Ritmeester, W.A. Scheffers, Van Dijken J.P. // Appl Environ Microbiol. 1990 Nov. - V.56, № 11. - P. 3329-3336.

196. Rowwenhorst R.J. The (3-fructofuranosidase of Kl. marxianus / R.J. Row-wenhorst, A.A. Baan, L.E. Visser, J.P. Dijken, W.A. Sheffers // Proc. 4th Eur. Congr. Biotechnol., 14-19 June 1987,Amsterdam. 1987. - V.3. - P. 370.

197. Rubio M.C. Purification and characterization of the invertase from Aspergillus niger / M.C Rubio, M.C. Maldonado // Curr. Microbiol. 1995. - V. 31. - P. 80-83.

198. Sabioni J.G. Reciclagem de celulas de Saccharomyces cerevisiae contendo alfta atividade de invertase//Arq. boil, e tecnol. 1996. - V.39, №1. - P.105-111.

199. Saeki Takeshi. Localization of a-glucosidase in yeast cells / Saeki Takeshi, Okuyama Masayuki, Mori Haruhide, Kimura Atsuo, Chiba Seiya // Oyo to-shitsu kagaku = J. Appl. Glycosci. 1998. - V. 45, № 3. - P. 281-283.

200. Sakakibara M. Inrluence of ultrasound Irradiation on hydrolysis of sucrose catalyzed by invertase / M. Sakakibara, D. Wang, R. Takahashi, K. Takahashi, S. Mori // Enzyme and Microb. Technol. 1996. - V. 18, № 6. - P. 444-448.

201. Sanchez M.P. Evolution of invertase activity in honey over two years / M.P. Sanchez, J.F. Huidobro, I. Mato, S. Muniategui, M.T.Sancho // J Agric Food Chem. 2001 Jan. -V. 49, № 1. - P. 416-422.

202. Saris N. Transient ER retention as stress response: Conformational repair of heat-damaged proteins to secretion-component structures / N. Saris, M. Makarow//J. Cell Sci. 1998. - 111, № 11. - P. 1575-1582.

203. Schebor C. Glassy state and thermal inactivation of invertase and lactase in dried amorphous matrices // C. Schebor, L. Burin, M.P. Buera, J.M. Aguilera, J. Chirife / Biotechnol Prog. 1997. - V. 13, № 6. - P. 857-863.

204. Semenza G. The minimum catalytic mechanism of intestinal sucrose and isomal-tase // Indian J. Biochem. and Biophys. 1991. - V. 28, № 5-6. - P. 331-339.

205. Somogyi M.J. Determination of reducing sugar // J. Biol. Chem. 1952. V. 195, № 1 - P. 19-28.

206. Su Y.C. Recovery and properties of a fructooligosaccharides-producing |3-fructofuranosidase from Aspergillus japonicus CCRC 38011 / Y.C. Su, C.S. Sheu //Proc Natl Sci Counc Repub China B. 1993. - V. 17, № 2. - P. 62-69.

207. Sund M.L. Regulation of synthesis of beta-fructofuranosidase (invertase) in Streptococcus mitis / M.L. Sund, L.Linder // J. Gen Microbiol. 1980 May. -V. 118, № l.-P. 85-94.

208. Tang G.Q. Antisense repression of vacuolar and cell wall invertase in transgenic carrot alters early plant development and sucrose partitioning / G.Q. Tang, M. Luscher, A. Sturm // Plant Cell. 1999. - V.ll, №2. - P.177-189.

209. Tanzer J.M. Identification, preliminary characterization and evidence for regulation of invertase in Streptococcum mutans / J.M. Tanzer, A.T. Brown, M.F. Mclnerney // J. Bactenol. 1973. - Y. 116, № l.-P. 192.

210. Terenzi Hernan. Effect of cyclic AMP on invertase a etivity in Neurospopa crassa // J. Gen Microbiol. 1992. - V/ 138, № 11. - P. 2433-2439.

211. Toda K. Kinetics of enzymatic sucrose inversion at elevated temperatures // J. Ferment. Technol. 1972. - V. 50, № 9. - p. 615.

212. Uhm T.B. Purification and properties of ß-fructofuranosidase from Aspergillus niger / T.B. Uhm, D.Y. Jeon., S.M. Byun, J.S. Hong, J.W.D. Groot-Wassik // Biochim. Biophys. Acta. 1987. -№ 926. - P. 119-126.

213. Vainstein M.H. Regulation of invertase in Aspergillus nidulans: effect of different carbon sources / M.H. Vainstein, J.F. Peberdy // J Gen Microbiol. 1991 Feb. -V. 137, №2.-P. 315-21.

214. Vandamme E. Microbial inulinases: fermentation process, properties, and applications / E. Vandamme. D. Deryscke // Adv. Appl. microbiol. 1983. - V. 78, № 29. -V. 139-176.

215. Vitolo M. Effect of pH, aeration and sucrose feeding on the invertase activity of intact S. cerevisiae cells grown in sugarcane blackstrap molasses / M. Vitolo, M.A. Duranti, M.B. Pellegrini // J. Ind Microbiol. 1995 Aug. - V. 15, № 2. - P. 75-79.

216. Yorster D.J. Partial purification and characterisation of sugarcane neutral in-vertase / D.J. Vorster, F.C. Botha // Phytochemistry. 1998 Oct. - V. 49, № 3. -P. 651-655.

217. Wallis G.L. Secretion of two beta-fructofuranosidases by Aspergillus niger growing in sucrose / G.L. Wallis, F.W. Hemming, J.F. Peberdy // Arch Bio-chem Biophys. 1997 Sep 15. - V. 345, № 2. - P. 214-222.

218. West C. Purification and properties of invertases extractable from Phy-tosphtoro megasperma var. sojae Mycelia / C. West, M. Wade, C. McMillan, P. Albershenn // Arch. Biochem. and Biophys. 1980. - V.201, №1. - P.25-35.

219. Whitalcer J.R. Determination based on difference in absorbance at 235 and 280 nm / J.R. Whitaker, Per Granum //Analyt. Biochem. 1980. - V. 109. - P. 156-159.

220. Williams R.S. Comparative properties of amplified external and internal in-vertase from the yeast SUC2 gene / R.S.Williams, R.J. Trumble, R. MacColl, R.B. Trimble, F. Maley// J. Biol.Chem. 1985. -V. 260. - P. 13334-13341.

221. Wistmans J.G., Nakao S.I., Smolders C.A. // J. Memr. Sci. 1984. - V. 20, №2. -P. 165-178.

222. Workman W.E. Purification and properties of the beta-fructofuranosidase from Kluyveromyces fragilis / W.E. Workman, D.F. Day // FEBS Lett. 1983 Aug 22. - Y. 160, № 1-2. - P. 16-20.

223. Workman W.E. The P-fructofuranosidase of Kl. fragilis and ist use in inulin hydrolisis // Disertation Abstracts international. 1984. - V. 45,№ 3. - P. 785.

224. Wu A.C.M. Effect of fluctuatig temperature on the stability and activity of invertase / A.C.M. Wu, R.R. Eitenmiller, J.J. Powers // J. Food Sci. 1974. -V. 39, №6.-P. 1179.164

225. Xiao R. Purification and characteristics of two exoinulinases from Chryso-sporium panorum / R. Xiao, M. Tanida, S. Takao // J. Ferment. Bioeng. 1989. -V. 67, №4. - P. 244-248.

226. Yebuki M. Sbudise of Aspergillus amstelodami FYII / M.Yebuki, Tokano J. // J. Apr. chem. Soc. Jappan. 1968. - V. 42. - P. 120-128.

227. Zech M. Invirtase from Saccharomyces cerevisiae: Reversible inactivation by components of industrial molasses media / M. Zech, H. Gorisch // Enzyme and Microb. Technol. 1995. - V. 17, № 1. - P. 41-46.

228. Ziobro C.C. Kinetics analysis of inulinase from Kluyveromyces fragilis / C.C. Ziobro, R.B. Boulton, K.K. Williams / Int. conf. Jerusalem artichoke and other biomass utilization for energy production, Suwon, Korea. 1985.

229. Zrenner R. Soluble acid invertase determines the hexose-to-sucrose ratio in cold-stored potato tubers / R. Zrenner, K. Schüler, U. Sonnewald // Planta. -1996.-V. 198, №2. P. 246-252.

230. Леунг В. Разделение на торговые зоны в нечетких условиях. Нечеткие множества и теория возможностей. Последние достижения // Радио и связь.- 1986.-С. 339-348.

231. ВОРОНЕЖСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ1. АКАДЕМИЯ (ВГТА)

232. Группа С05 'ОКС 07.100.30 67.040.00

233. ПРЕПАРАТ ФЕРМЕНТНЫЙ ИНВЕРТИН ШОх1. Технические условия1. ТУ 9291-005-02068108-20021. Вводятся впервые1. Дата введения в действие

234. РАЗРАБОТАНЫ в ВГТА: Зав. каф. микробиологиии биохимии, проф. О-С. Корнееваасп. каф. микробиологиии биохимии Т.В. Мальцева асп. каф. микробиологии, и биохимии . П. А. Попов1. Воронеж

235. Препарат представляет собой гигроскопический порошок, получаемый осаждением этиловым спиртом из автолизата дрожжей КЛиууеготусеБ тагх-хапиз У-303, штамм которого должен иметь разрешение к применению, утвержденное в установленном порядке.

236. Пример обозначения при заказе:

237. Препарат ферментный инвертин ШОх ТУ9291-005-02068108-2002"1. Технические требования