Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ ПОЛНОЦЕННОСТЬ СПЕРМЫ ХРЯКОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ ХРАНЕНИЯ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ ПОЛНОЦЕННОСТЬ СПЕРМЫ ХРЯКОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ ХРАНЕНИЯ"

ЖПЮВВШІ

уда 636.4.06£.4b2/.453

«еиоіогнчясшш пмноданосгь СПЕРШ ХРЯКОВ в ЗДРМЗМУТИ or /сакю« ХРДНЕНШ :

(физиология ОЄЯЬСХОХО»ЯВС*»«К»К

АВТОРВаВРAT

лодюга ■ 1964

Работаюшвлнвна.в отделе воспрои®клства Белорусского научно-нсследовательслого жгетятута хтаотноаодсгаа я 1977 - 1962 гг.

Назгчмый ружоввддавяь - заслуженный деятель наукк БелоруоскоЯ ССР,допер биодолвдсяяк вд -

' заслуженный деятель науки Дмто&сжоАССР, до мгор

кйуидаг' биологически*

старший научнывсетруддак В.А.НАУК;- ' ^ ■ - :

( Ведущее учрардеюга - Гродненский сельскохозяйственна институт .

Заартга диссертации состоится 1964 г.

назаседакяи слвдаализировшшого сове« К 122.20.01 в Балодгссхои . научно-иослодовательсхом институте животиожадетва : ; -

ул.ййуиэе, II, БелШШ Ь;7

С диссертаций можно'ознаколиться вйивлиотекеБаворусского научно^сслвдоватвльсяогоэшститутатвотйоводства^^ ^^^^^^^^

■"■ Автореферат разослан г. - V ;

Ученый секретарь/ •■';.:

\. специализированного совета , ,"■., Г.И.КВЕГКОВСКИЙ . .■-

(с) Белорусский научно-исследовательский ; ;. ••;.' институт животноводства (БелНИИ£)»1984

.■*>;>■ ; СЕ41Я ХДРАКГЕРШТШ РЛБСГШ • ' ;

: 8.решении зедач,1юставлвкньа партивЯ и правительством по реализация Продовольственной программы, пршятойнамайском Пленуме Lfí 1ШСС, большое эначениэпрадается свиноводству.1

Главным направлением свиноводства является' концентрация н -специализация производства, перевод отрасли на проштленцув основу. К концу II пятилетки в республике будет действовать XII Государственник ыежЗСОЗЯЙСТВвНШХ^ совхозных и колхозный комплексов* В 1985 г. эти конплексы долаш производить/около;200 тьк.т свинины* чтосоставляет?8$ от^ общего объема производства ее в республике. Одним из узких, мест существущюс промшленних технологий производства свинины является организация воспроизводства свиней, ОТ которой зависит ритмичность производственного цкхла «организация поточного производства продукции. .-■':. В связи с широким практическим применением метода кскусствен-Кого осеменения на прогшшленйшс комплексах болыпоа значение: приобрвгает воз»и^ость жшм1ьзования за^ра*ен1^й сперш. При этом необходимо научение биохимических процессов, происходящих в сперме во взаимосвязи с физиологическими функциями половых мотох при подготовке к эамор&хнвыиш. /• .

/Известна исключительная роль анергообрвзующкх ферментов (сук-цкнаяедегкдрогеназы и цитохромохеидазы) в обеспечении жизненных =■'■■ функций сг.ерииев (Н.ТЫйергин, 1945; E.ÍÍ.ItaKEC5, I973 ; Г.В.Зверева, 1980 и др.). Установлена полслитсльная взаимосвязь ехтив-1юстц ферюнтоа в сперме сельскахозяйствензых животных с показа-теяяш ее качества и оплодотворяющей способностью слерысев (H.n«!fepriM. 1940 ; O.A.í«rdy, í.H.ttillipe » 1941; В.Г.Семахо», 19611 В.В.Прокопцев, 1969 ; Л»Г.Мороэ и др. .1976). Указанные исследования били проведена, в осношюы, на cnejwo бъжа, бара- -на и жеребца. Отерла хрйка оставала<»1^аиэученнай. Отсут-етвуютданные об активности »тих федоентов в сперме при ее разбавлении и хранении. Актуальны! является изучение причин сни-яеняя фиэиологяческоИ полноценности спермы хряков при эаморзтк- ' вании. Эксперимента по разработке метода глубокого замораживания спермы хряхоз проводятся не менее'чей в 25 странах кира, однако в практических условиях о» применяется в единичных случаях. -Повсеместное внедрение его 8 пралтдау плшекнпД работы будет

.. ■ "... ■ ■■ НАУЧКДЯ ii.'bj;-- ОТ.1ЧД Л ' ....■■

" { . ' ... Mocií, СР.Пс-~ЧОХОЗ. 1. у{--\

способствовать^ іюгшвют эффектов^ «го мнген- ■

"ификацни .к I^eI«вбiвaiдаc*и*.:^^;/'^v ■''■'■■■'■-й-." ' . 11вя^> и аадачи, иссДедстануЯ. Цель» кадия иесведовшпй явяя-лаеь разработка кетодо« и приемов, обвспечявазмфа наиСмеевы-сокув опяедотворящую способности сперм хряков и плодовитость . ■•свиноматок, содеркеероеея » условиях.промышленных комплексов, .".у- Дне достикения указанной целя нами решались сдедупщи®/задачи:

■ Определить изменение физиологичеегап свойств Спермы хряка ..... в процесса ее Подготовки к эаыораяшванкю* оптимальное вроет га»-куСации сдери ори воідаапий тешвратурв веред роэйавлвнием средой! вяиянив цекгрифупфогогем спериы перед разбавданаем : . средой на ее качество { сяорооть оседаная спврыиев и ев взаимо-■ ¿ВЯЗЬ с качествоы • ^^ Шушсть влияние концентрации глицерина »разбавителе, дси-їМЬВостк разбавленной стерт перед замораживанием м

спосоЗовземорвдяваияа иотгсааакия на физиологическую полноцек- ■ ' НОСТЬ спермы. , ;; ^ '■■>4 --;: , ; ^ -*;'' /у": , 3. Усовершвнствоватьспособ подготовхи сдарны хряка к сседе- V '

вентонуехнологітксі^сс^ свиноматок»

\ Ирэиэ^ мсел^^ва^і ^

(активность вхнсютадмт'^рів^в: ^ к

цитиеромоясадаэыУ в спер» хряков во врет подготовки ее к ваио-реаиванта.а«8эаимосвлэие <*мэнологяческнми {ункциями сперымеа, : возводящие сдедат^иаучно обоснованные предложения о продолжительное** юяубации смрад ври 'коїмяая^*^^

б&вяекиен средой. ■ ■-■"„■і ■'.. ; -

2« Установлено, что В процессе инкубации сперм перед разбавлением реакция оседания сяерикев (РТС) в различных еякулятах на одинакова к аависит от вязкости сперва, жснцвитрвцяя половых ' \ .кдетокиактявйдаиокнаиивяьннкферйюо»»^^^^;^^^^^^^^.

- З. При разработка метсдаглуСокпгозаіюрахнваїшяопродвдана скорость адаптацимподовыхклвтож канатом условаян,влиянка . интенсивности аэрации на оплодотворявсую способность сперыаав хряка. а таккв;»частив отдельных фракцкя $осфолкпидов в мбтабо-лише при ааробных ианаэробюа условмх хранения спермы.

.рражт^есвая ценность, работы, Разработаны способ«, способ» стауицие по ви» нии оаходотворпоцеа способности сперш кряжев, ' ■ выхода пероевт ж ихвашоЯ массм при рождении і дяки предложения

■ по повдаеки» аффективности использования сперш хрякоз за счет снижения ее потерь и .погашения етершшюсаи в процессе технологической ее обработки на комплексах цутем инкубации в боксе-V. термостате с Автоматической регулировкой температура и бактери-цнднойлампой; предложен показатель реакции оседакая спермиеа • (РОС) а целы) выявления эяэ^лятов с высокой оседаемость» (редкие эякулята) и частичного их Использования после отстаивания, . что особенно необходимо в период недостатка сперма на комплексах (в летний сезон); рекоаевдованасанация "половых путей «и- ■, коыаток неоветаном после искусственного осеменения с целью увеличения вьосода поросят. .

Реализация результатов исследований. Предложенные нами разработки внедрены в совхозах-комбинатах им.60-летия БССР Борисов. схого района Минской обл. и "Сож" Гомельского района Гомельской обл. производительность!» 106 тыс.свшеЯ в год ; .совхозах, ^Новый" и *Вуцввичи" Минского района Минской -обл^ производительностью 24 тыс. свиней в год; 0ГОС"Вудаг,ово" Сыолевичского района Цин- , ской обл. проязводательность» 12 тис. поросят в-год.

■ Иублитшдкя ■результатов исследований, Основные положения диссертации изложены в 14 статьях.

.исследовани?!. Предяагаешй способ инкубации сяер-; ив хряка перед раэбавлениш средой рассмотрен и одобрен на коллегии ЮБССР и рекомендован для внедрения на комплексах Белоруссии, а тоже внесен в новую пИнстГОШ9по по организащщ я тех— . нологии работы станций и предприятий по искусственному осеменения сельскохозяйственных животных", М.»Колос , 1981, с. 73.

Основные разработки диссертации долоягны, обсуждеш к одобрены на Всесоюзном совещакии-юеьсшаре "Опыт оргениз ацьи воспро-: изЬодства и искусственного осеменения евшей в колхозах к ыеахо-зяйственшх предприятиях" (г.Тернололь, 1991 р.) ; кооткишщюн-. ном совещадии Чг.Ьіосква.' ВИЖі ІЗбЙ г.) ¡расширенном ааседании отдела воспроизводства сельской

ского НИИ животноводства (1963 г.) и на ученом совете Белорусского НИИ животноводства (1964 г*)* ;

рбъец работы, Диссертация изложена на 126 страницах машино- . пкенаго текста и состоит кз введения, обзора литературы» собственных исследований» Выводов» рекомендаций производству ^

списке литература, которой вваппает 204 источника, в таычисло 64 на иностранных язынах, спдэрига 32 тавлкцр и в рисунков.

- 1шж1ал и жггда проведения иссщования

; Работа выполнялась на протяжения 1976-1982 гг. в отделе бос-прогаводства сйльскетслэяйствекша хивотшх ВелШИЕа, конезаводе "Заречье"« совхоэе-коыбккате км.бО-леткя БССР Борисовского ; района, совхозах ГНпВыйТ Hkhcrópü района, ГШ "Будагово" Otón левичского района КинекоЯ области и "ВоисоД" Могилевского райо-. наМогилевской области.

В работе использованы данные по 1468 эякулятом от хряков-производитедей крупной белой, черно-пестроЯ, эстонской пород к специализированных линий; Для опыта баш отобраны только клини-1 чески здоровые жиасткыа с нормальной функцией половых органов. -Во всех сравнительных огая&х для осеменанкя свиноматок исподь- -зовади сперцу разделенные вяхулятов. Осеменение свиноматок проводили при помоци прибора ПОС-5 дозой ZOO ив» содоржащей4-5 ■ иод актившсс сперккзв,Животных формировали в rjynm с учетом вырогненностк гас Во возрасту, породе, «ивой массе» упитанности. . Содержание И КорШЕвКЯЭ ОПЫТНЦХ И КОНТРОЛЬНЫХ ЖКЭОТШХ было.одн-накоьым. <?пяодотворяпчув способность сперма проверили на 743 свиноматках.

От хряков получали сверху на жгкусствокиуо вагкну и оцэниза-ли по общеприняты похаэателлм, а также попоказателв, предложенному нами (реакцкяоседанияспершев-РОС).

Подвикность спорков устанавливали под микроскопом при теа-; пература от чет до +40°С по деслтибалльной системе, вьимваодасгь спермиев определяли д> полной их гибелен. Пря хранении сперт/ при комнаткойтемператур© подвюшость половых клеток определяли че-резкаядые сутки и при "температуре +33°С - через кеждай час. Концентрацию подсчитывали» счетной камере Горявза. •

Концентрацию водородных ионов измеряли лабораторном потвнцао-V метром ЛИ - 58 . - .

Активность сукцкнатдегидрогенаэы определяли rio методу г Б.С.Антоюха (1930). Принцип основан ка измерении времени появ-лекля розовой окраски тетразолиеаого синего, восстанавливавшегося при окислении сукциката натрия под действием сукцииатдегяд-рогеназы, содерашчейся в сперме; Время появлений окраски, прямо

пропорционально активкостя фермента: чем быстрее появляется •. окраска, тем вше активность фермента.' ' ■: ■ " ■

Определение мтивнпстк !9тйсроиокседдэы осуществлялось ПО К9-- тсду а4кЛ*гвоп (1913) ( основанному на окислении цятохрома С " V"в присутствии парафинадецдиамяна с вдт«сро»ю«идаэоЯ,. седар«-,^ : " • ¡цвйся в спорю« : ' -лл*О Ул".1,:;,.-../'^''' '"м ■ ■ 1 ■' -V- Активность ги&яуронедаэы определяли по методу, одасанноцу -/.

'.■■■■; И.В.Виха и др. (1973) , выражали вжягро граммах освобожденных^ : ацетидгексоэашнов за период инкубации на Т кг белка* Пршцяп : метода определения гиалуронвдазы основзд т способности гиалуро- ~ нидазы 'расщеплять гиалуроновувкисдоту о освобоядениеы -В'-ада- -.., тил - Д-глшсоэа-емина, количество которого;определяли спектров •; ' : 'т' фотометрически* ":

. Сосфодияцды определяли методом волча ( д.гъгсЬ 1957), . сущность которого заключается в разделении индивидуальшх 'кошо- -. некгов фосфолипедов по их хроматографическоЗ подвижности в тон- „■' ком слое силикагеля с последующей окстракцвей фракция и опреде» лением количества фосфора в каждой из них.

, * Бяэкость:спериы исследовали с помощью вискозиметра типа Ш-4 .' ■ "" для определения вязкости крови« '-у

Реакцию оседания сперыиев (РГС> измеряли методом О.В.Цеглова > и др. (1965) в модификации Т.П«Ильинской» Л.Н.Дуковской и >

Л.Г.Безлюдникова (1977). Способ заключается в измерении скорости г. оседания сперышзэ по величине прозрачного сдоя, не содержащего* половые клетки. .Чем выше-столбик прозрачного слоя, тем хуже качество спера». V.■ V V--'"-* /V'-.У«." .-'■" Целостность акрпсон .'определяли' методом люминесцентной микро- • ■ скопии (Т.П.Ильинская,: Г.Ы.Казанцева, 1973). Катод основан на флуоресценции акросоыы половы* клеток в сперме. Продоляиталь- • ■уЛ'.. ность флуоресценции сперыиев цветом, характерным для живых ' ' саергиев, в сине-фиолетовых лучах характеризует их оплодотво-■■/■'.* 'ряхцую способность. 'Уг У- ■ .. ^. Об оплодотворяющей способности спершев судили по результатам опоросов» ' ' У'-^/:'--^; - ■' .:-.'■■ ' Полученные во всех исследованиях данные обрабатывали методом вариационной статистики (Н.А.ПдохинскиЯ, 1970). ' ■ - Л , ; " Подробное изложение методик каждого опыта дано при юс описании в разделе собственных исследований.' \ . '' ■-"'*.

V ■.":■■ РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ УЮСЛВДПВШИ ■'.

Изменение физиологических свойств спермы грдка в ; процессе ее подготовки «замораживанию

В качестве исходной среди для зашраживаняя сперма хряков нами была выбрана глюкоэо-оселато-цитратно-судьфатная (ПОР ГОСТ 17637)«

Суде по результатам опыта, концентрация глицерина в

среде для разбавления спермы хряков является оптимальной» При испытании среди* содержащей глицерин от 0 да установлено, что самая Шэкая подвижность спермиев была в среде без глицерина и при 0,5£-ноП'вгоконцентрация (табл. I);

Таблица!. Влияние нонцентрацииглицерина в среде

; иа устойийвпсть спергаев к замораживание

. (п » 16) ■ '■■ ■ -

Показатели

: _ |ш м ;■• Концентрация глицерина г %

: г " : - .

:0 10,55,0 51,5 ; 2,0 й,5;3,0 :3,5 *5,0

- ' " : ; -' ' ; ' *_Г , ' ■ 1 * ' " : Т..

Подвютость ■ " ■

■ спермиев ДО ■■■ '■ замораживания. ■

баллы ■ 7;0 7,3 7,48 6,9 7,1 6,5 7,3 7,3 6,7 6,8 Подвижность ' '• '

спершев пос~ '■'.■."■,"'

ле 0ТТ&ИВ8- ■■"■.-*■<;.'. -■-■-■■.?■.■■■■..- ■ •

ния, баллы; .1,5 1,7 3,1 3,5 4,0 3,0 - 3,3 2,9 2,5 2,7

■ Устойчивость ■ " спермиев к. ■ ■„' ■■ .. замораживанию* % 21,4 23,2 41,4 50,0 56,<^46,1 47,9 39,7 37,3 39,2

Примечание: Здесь к далее: эоос - Р< 0,001, за - Р-^ 0,01, х - < 0,05« .■'■.,■

Оптимальная подвижность спермиев' (4 балла) отмечена при нем содержании глицерина в разбавителе. Поэтов в остальных наших опытах мы применили среду, содер^вшую глицерина. '■'■=.■ . Продолжительность инкубации также является важнш моментом при замораживании. Намиустановлено, что 4-часовая инкубация спермы в среде с глицерином'является оптимальной. Подвижность при этом составила 4,1 балла. При менее или более продолжительг

код инкубации подвгдоюсть спермиеа снижалась (табл. 2).

Таблица 2. Влияние времениинкубации сперш в среде о глицерином на выживаемость спермиев

Про-

Подвижность д спердаев ц _бадлы

^_ П^ря^к^виЯ номер^ атаулята

ность i ккяу- : т бации,: *■ ч .

5'

8 1 9

чв

р<

3 3 3 4 2,5 3 3 4,5 3,5 3,5 3,33±&20 : 3,35 0,01

4 4.4 4,5 3,5 4,5 4 4 4 4,5 4,11+Д12 - -4,5 4,5 3,5 4,5 1,5 2 : 2 3,5 3,5 3,5 3,10^34 2,88 0,05

На успех замораживания влияет скорость охлаждения и оттаивания, которая зависит от многих факторов, в тли числе и от объема замораживаемой спермы. В наших опытах при замораживании спер-ыы в гранулах (контроль) подвижность сперияев посла оттаивания .составила 2,2 балла, в опытных образцах сперыы, замороженной в пакетах объемом 15, 20, 25 мл, подвижность была соответственно 2,6, 2,9 и 3,1 балла. Увеличение объема до 30 ил резко ее снизило (1,5 балла).

Большое влияние на вшиваеиость половых клеток оказывает реши оттаир&нкя. Установлено, что сперму, замороженную в пакетах объемом 20-25 ил, необходимо оттаивать в среде, подогретой до +65°С, затем помещать в всдяцуо бага с температурой +55°С. Конечная, температура оттая1мой спормы - от +27 до +29?С.

По разработанному наш методу замораживания сперш хряков было накоплено 800 одкулятов. После оттаивания подвижность спермиев составила я среднем 3,65 балла (с колебаниями от 2,5 до 6,0 баллов), устойчивость к замораживания - 68,57% (от 57,14 до 1003), выживаемость при +38°С - всреднеы окойо 5 ч (от 3 ч 30 мин до II ч) и оплодотворяющая способность - 332.

Невысокий показатель оплодотворгтацеЯ способности Половых * клеток вызвал необходимость выяснить. на ка&ом атапё подготовки ' сперма к замораживание наступает снижение биологической полноценности, вследствие чего снижается.ее оплодотворяющая способность.

физиологическая полноценность половых клеток."' при различной продолжительности инкубации сперш хряка перед разбавлением средой

Одним из вазвдк факторов в подготовке сперш к. замораживанию является инкубация сперш при комнатной температуре перед раз-.бавдением средой,'

■ /. В наших осытех отмечено, что разбавление сперли, ишубиро-ванной при комнаткой температуре в течение 1-2 ч средой, содер-касрй вещества ингибируэдеге действия (зсвлатон), повышает ее сплодотворящухг способность. Так, оплодотворяемая способность сперш , иикубкроваккоЙ в течение Х,2 и 3 ч при коннапюй температуре составила соответственно 78,9, 73,6 89,4$ протез 63,2% в контрольных образцах посла 30-минутноЯ ввдеркки. Производственная; проверка на 162 свиноматках (табл. 3) подтвердила. Что инкубация есерка перед разбавлением средой в течение 1-а ч способствует увеличению оплодотворяемости свиноматок на ІЗЙ, многоплодия на 1,8 Поросенка, При втом в опыте получено на 149 поросят больше, чем в контроле і экономический эффект на 100 евино-• шток-составил 664 руб.. >

Т а б я ица 3.

Оплодотворяемость свиноматок в связи с продолжительность» инкубации спермы

ї Время инкубации. чї

Показатели : ї 0,5 (контроль) I 1-2 (опыт) ♦ - ' • ---f-----1------:-----

Осеменено, ГоЛов Оплодотворилось, % -Подучено поросят, годов Ііногог^ода», голов Отход поросят, % Осталось живых, голов 1

81

71,0 + 5,0

585 : 7,2 3,6 564

: 61 64,0 + 4,0* V 734 9,0 . , 4,5 ■ , 701 :

Влияние центрифугирования на физиологические показатели качества сперш ■■

. / ■ При подготовке сперш к замораживанио возможно повреждение ссермиеа, вызванное центрифугированием, которое применяется для отделения солових.клеток от плазм*. .!

В своих иселадованиах ш »э устанввшя( чт(> процессцентри-; фугироввкиЯ скаэывавт нвблвмприятаов действие на опдодотворяо-цуп способность спермиев (табл, 4). -/ "\Ч''Ч і ""- '"

Т. а б я н'ц а 4.' Влияние центрифугирования спермы на ' результаты осеменения

Спет«»

-Ч.,Ч Ч'-Ч-.чПоказатели '>-;Чч : нецентрифуги-' * рованная л :г ■ I (контроль) • - * цедгрийггкрован-:,юя . (опыт) - ' л ч- • ' ' •9 ■ . -, . - . ■ 1

Ч Осеменено, годов ' ЧЧ. Ч-'-Ч".'1' • : 'Ч г 25 : . •" '

V Г^поросядось, ГОЛОВ Чї :.Ч 19 Ч : . '.--Ч ; 19 Ч •:

. 76 + 8,54-. Ч, • .76 +8,54

: Всего получавд поросят, голов '.'•• 203 ЧЧ '- ЧЧ^ЧЧ'." 196

Многоплодие, голов . 10,6 . 'Ч ;. ' 10,3

Средняя живая масса одного

т.' Поросенка,„Кр -V - ч-ч-чч ;і,г7 ч- і,іб - ■■.

Отход порося*,"^ Ч-"Чд - 3,4 Ч: ,

Ч Осталось жйвых, голов Ч л'Ч':;'Ч 196. •ч 'V ; . 190 тЧ;:Ч

. ' ' }-- Осйдвние половых клеток хряка во время ^ Г

ЧЧ-'-' "■'.■'. " инкубации спермі У..и '■. • Ч'ЧЧ "^Ч

; ПрзинзіуСаг|^,спершпрошіо^

.чем степень оседаеыости зависит от качества эякулята. Явление седиментации было замечено .еще'в' 1965 г. О.В.ЦеглоВым к И.Г.ГЬзт-1М»ан. Сдвако'предво*енный авторами метод окаэадсянеприеилемым производства иэ-еа да степени "оседав-

мости <36 Ч-.ЧЧЧЧ'; ^ЧгЛ-ЧЧЧ- ЧЧ-Ч"

Ч УсовераенстБованиыЯ нами' метод состоит » следующем: 2 иц • свгаеполученнсй сперыы наливают я градуировавшую пробирку от гемометра Саля я ввдержива»*'I ч. Спврюшоседают, »пробирке '■; "образуется ©садок» Установлено, что чем меньае прозрачный слой плазмы н шэд осадок, тем доеае качество сперш. Спермас и»' вой реакіріей сседания (до !>%) имела более высокие показателя: ■ ' концантрйции.вяэкости и активности окислительных ферментов. Чем вше реакция оседания спермиев (свше20ї), тем годе денные V : показатели (табл. 5). . ; .'■ ЧЧЧЧЧ

:': Таким образом, реакцію .'оседания спершев (РОС) »»но отнести : ■ ^ х одночу из основних показателей ківчества саерши рексмведо—

/"'Уі ч ■ч/'л ■■■■ ч

ватъ для огггякн качества еякулята в производственных условиях.

■ ■" Т в в л и ц а 5* Физиологическая полноценность сперш хрякоа в зависимости пт реакции оседания сперыиев

• Показатели \ до 5 : 5 - © : в - 20 Ї свите 20 . '■■

Концентрация, 0,325+Ц005 0,221 +0^007 0,174+0,008 0,097+^010 ылрд/мл

Вязкость, ед. 2,9+^03 7 2,7 +0,07 ■ 2,4 ¿ 0,03 2,1 + 0,26

Активность сук-4,61 +0,7 6,60+ 0,45 8,00 + 0,60 17,0 + 0,37 ■ цинатдегвдроге-. ■ пазы, кип.■

■Активкоета ЦИТО-4.Є9+ 0,36 5{90+0,38 8,63 + 0,94 9,00 + 0,27 хроыоксвдаза» мин . у.

В производственных условиях около І0-ІЕ5 еякудятов имеют концентрацию спермиав кяяе 100 иш/ш,. реакцию оседания около ZЬ%/ч. Согласно инструкции такие еякустгы не допускаются к ис- \ пользоваш» для йсемененш и оким

низкой опледотвврящеЯ способности, .

Было изучено качество редкой сперш посла ее инкубации и определена возможность ее использования для осеменения. Сперцу хряка с концентрацией нвдсв 100 илн/ыд отстаивали в стеклянной цюпшдре ешостыо 250 ыл в теченив 2 ч. Затем верэшг» фракцию сливали, а нташкэ разбавляли ПСЦЗ средой в отношении 1:1 и использовали для осеменения. Контролен была сперма, инкубированная еря комнатной температуре с периодическим помешиванием. Ссаиенкта 20 свиноматок по 10 годоа в каядай' групЛе. В контрольной труппа опоросились 4 свиноматки (40%), в оштіой б (6СЙ) щи величине помета соответственно 7,7 и 9,б голоэ (табл. 6}. Следовательно* редеуіа сперцу после отстаивания можно с успехом применят* в практике работы свиноводческих комплексов.

- Применение уетода оценка еяхулятов по реакции оседания сперми ев позволяет более объективно определить пригодность еякуляте» киспользованию и повысить результативность осемешшія.

\ Таблица 6. Результаты осеменения свиноматок

І-. .1—— I —. --.І I ■ II............I.......І""- ™

''Х " "Показатели ■ л * : Контроль . | („к^^слоЯ)

Рсоменено, голов Ю Ю

Опоросилось, годов > " 4 б

Оплодотворилось, %; , ." : 40 + 15 60 ¿15

Получако поросят, Голов . 31 68

Многоплодие, голов . 7,7^0,36 9,6^+0,38

Средняя масса одного поросенка, кг 1,20 1,18

Отход поросят, % 6,4 6,8

Взаимосвязь метаболических процессов в сперме хряка во время подготовки к замораядаваниа с ; ■ физиологическими функциями половых клеток

Различная лседаеыость і^овнх клеток и ее взаимосвязь с ка-, чеством аякулятов, а также неодинаковая оплодотворяющая способность сперкн хряка при различной продолжительности ее инкубвцрк перед разбавлением свидетельствуй о взаимосвязи уровня метаболизма с.физиологической полноценностьо спорны, -

'Установлено,: что во время инкубации в густой сперме с высокой ппдвккноетьп половых клеток активность сухциштдогкдрогеназы была значительно выше» чем в редкой с меньшей подвижностью, цитохроиоксвдаза в густыг еякулятах тапке была активнее. Следовательно, 'скорость ферментних реакций зависит как от концентра» : цки, тав и подвижности половых клеток. С увеличением втих показателей быстрее, протеявот метаболические процессе, , *.

:■■- Таблиц а 7. Физиологическая полноценность спер*лі хряков в зависимости от концентрации епершев в

^ :Концеятрашя спушизз в »якуляте. млрд/мя. Показатели :до 0,100 :<Ц01-0,20й 0,201- ї свше . *" ' ■ « ; 0.300 ; 0.300

Подвижное» сверикев. 7,6 . 8,0 ■ 8,6 8.4 ' .■ баллы ■ ■. ' ,■ V ■ ... . >.;.■■ ..

Вязкость сперш, ед, 2,08«&И 2,2840,04 2,68^08 3,20*Д10 -Реакция оседания спер- ■'■« ■ ■

миев(Р0С), % 26,01+^46 8.29+Д57 6.70+^24 4,23^30

Активность цмтэхром - : \

океццазы, мин , ; 6,37+ 0,69 7,36+Д69 6,7^43 5,27+&68

Активность еукцикат- 17,25+^11 9,49-Щ82 б,49+й38 1,86+йЗС дегадрогеназы, мин • • •, — ..•■'

" ■. -г--':;, із

/•,.;: ,А*їкввост> ферментов изменяется под:воадействием накопления у 'іфеяуіто»'о&ева Vспермв иЧязменвввд ведо

г шнов. В первые Мч икгубацян спермы пря комнатной тешерату-Ч ре актавиость сукцинатдегидрогеназы повышается» а гтри дальнейшем хранении до 3-4 ч — скгоается с некоторымуведичением ее рй . ; • <о.7,34 до 7,4іь. Ч V/:,-.---';:: .... Ч/ Ч ^ , . - ..'

* ;І1олноаенноеть п(«іоВіос клеток череа 1-2 ч кнкубациа спермы • ! прккомнатвоЯтемпвраіур^^ в

нюшеМ слов преобладали анаэробные, а в верхнем -ааробиыепро-цассы, чтопривело ксущ^ютаенкомуизменешэд концентрации водородных ионов » Ч

1о1 ' аэробное граненій *; » .....

и

""анаэробное хранение

■ ■ Я в» V ■, • . . л»" -.. «.о . /їг "! . г» ■ *Ч" - ■

-.Ч'-ЧЧ'^-.—^Ч/- хранения» ч

• - Рис; I. Изменение показателя рН в слеше хряка" вЧ Ч ....■>■':;.-' Ч- і- 4-і.,ПР01^®0® хранения при комнатной температуре

; В аеробних условиях, хранения активності» цитохроиоксидаэы ' бшв вш9» чш'при анавробноы хране№ш епермы (табл. 8).

о ТаЗлицаВ.ЧАкг^^ в сперме

Хряка, инкубированной при комнатной -

; -Ч ■■■-■■.: темлературе..;: • .

■:■' * . ., • ; Ч'-"- V ' • ..V;Г- ї Время появления окраски сперьм "Ч -ЛУсл^м иш^^ инубированнлй

■ ■ сперш ; 30 кин I I Ч ■ ■•!'.. 2 ч

чл."' •: "'1 • '/""ч

С периодическим опмехкваниеы 4,25 4,17 "Ч - 4,07

сэробное Хранения (контроль) "Ч ¡■.■їЧ^Ч"-*. Ч: -Ч-'. '-- ^■"'■

■ Нижней■ сл^Йаиаэррбное хране- Ч 6,00 . 5»00 Ч- 7,07

Замедление *жз дьпсаккя спермы способствовало сохраненной аконо-і^ внергетических ресурсов. о чем свидетельствует наличие і; Ч' ; неповречденных акросом в шжкєми в верхнем слсях (табл. 9)."

■ и

V Т а б л и ц а 9. Изменение биохимических показателей . ч ■ - ■ . состава спермы хряков при различных

условиях хранения ■ ■..-. ■ - ._„,'...' „_.._.,,_._'. ■ . ;.. '' ''

'■■'■'■■ V ■■' Ї. ' ■ Ус л ^в^-я,.хранения м_

аэробное .: анаэробное ■ .

Показатели і (верхний сдоф (нижнкй слой)

■ ■ • *

. і..,.—! * ■ * - ■ -

Количество неповрежденных акро- ■■. ■ ■ ■

сом, % * 45,4

Гиалуронидаза, ед.акт./мг белка ' 49,10+ 6,96 49,67 + 6,32

фракции фосфолипедоа, %

сфингомиелин " 112,20 ... 100.

. кефалин 81,62 . 100

лецитин 73,5? 100

Различия в метаболизме поверхностного и глубокого слоев отразились на содержании некоторых'фракций фосфолипидов (сфшгомиели-на, кефалкна и лецитина)» Так, содержание сфингошелина в сперме верхнего слоя по сравнение с нижним было выше на £2,23!. По-видимому, сфкнгоыиелин принимает участие в метаболизме половых клеток в условиях анаэробного хранения (нижний сдой спермы). Содержание кефалина к лецитина было вше в сперме тстамго слоя (соответственно на 18,38 и 26.43Ж), Вероятно, эти фракции фосфолипидов не участвуют в метаболизме при недостатке кислорода, что способствует.повышении физиологической полноценности ПОЛОВЫХ клеток, выдержанных в анаеробных условиях. Поскольку кефа-лин клецитин входят в состав лигіопротеодного покрова сперглев, то можно предположить, что ограниченный расход их в анаэробных условиях является одной нэ'причин сохранения целостности акро-сом и увеличения оплодотворяющей способности половых клеток (табл.10). Гплодотворящая способность спермы, выдержанной до раэйазления в анаэробных условиях, была на 17,72 вше, чем в контроле и получено поросят на 64 головы больше (Р< 0,05). Экономический эффект составил 815 776. на 100 свиноматок.

Следовательно, анаэробные условия хранения спермы при ком-: натноЯ температуре способствуют повыаекив физиологической полноценности спермы, хряков, ее оплодотворяющей способности и выходу поросят. ■' V

Таблица їб. Результаты осеменения свиноматок спермой хряхов после ее осаждения

Показатели

. ; Условия и хранения _ спермы

ï аэробное : анаэробное . контроль .^верхний слой) : (нижний СЛОЙ)

; Осеменено, гол«8 ■ ' . -- 34 ' 34 , 3-1 ..

Опоросилось, голов .22 ; 21 ■ £8

Оплодотворилось, % 64,7 + 8,1 61,7 + 8,3 ; ■. ;'. 82,4 + 6,5*

Получено поросят, голов 259 217 323

Цногоплодие, голов 11,7 + 0,42 10,3^0,6Ъ ■• 11,5 + 0,60

Средняя масса одного ■'"■

поросенка, кг 1,160 1,200 1,150

Отход поросят, % ; 5,4 8,3 6,5

Осталось живых поро- ' „

сят, голов '■■.:■ 245 ■ Î99 -" -302

. Применение (Wtca-repwo стата для снияеккя бактериальной загрязненности спермы хряке в період инкубации

. В связи с широким практические применением метода искусственного осеменения на щхчдащеннкх комплекса* большое внимание доддно уделяться снижению степени микробной загрязненнпсти спер-, мы хряков, от чего зависит результативность осеменения. ■ ■.,..'■

Дня снижения бактериальной загрязненности сперш в период инкубации нами сконструирован бокс-термостат из оргстекла с автоматической реіулировкой температуры и бактерицидной лампой. Размер бокса 100 х 40 х 35 си. При хранении спермы в боксе-термостате микробная загрязненность снижается на 16,22. Выживаемость спермие» при температуре +38ЙС повышается до сравнению с контролем на 1%.

Применение антибиотиков после осеменейия свиноматок с цель» повышения их оплодотворяемости

Как уже отмечалось, на оплодотворяемойть свкнсматок и качество приплода большое влияние оказывает степень микробной загрязненности сперт и приборов для искусственного осеменения,

Впрактихе скотоводства рекомендуют способ осеменения маток с внутриматочным введением антибиотиков, который создает возможность повышения оплодлтворяемости и снижения вибриональной смертности, что значительна сшиает ущерб от яловости маточного

поголовья (В. А. Се редин» 1960). ... - V

С целью изыскания наиболее эффективных антибиотиков для санации половых путей свиноматок т. определили чувствительность микрофлоры к различным антибиотикам (гентошщин, неоветин и йот-мицин). Наиболее эффективным оказался неоветин.

После 1-2 ч инхубации^ сперму оценивали, ^редбавляш'ИЦЗ средой и осеменяли свиноматок. Через б ч после последнего осеменения свиноматкам опытной группы вводили по 0,5 г наоветина внут-рим&точнп, предварительно растворив его в 50 ыл физиологического раствора. Было осеменено 52 свиноматки:(табл. II). >

Т а б л и ц а II. Результаты осеменения свиноматок

Группы

Показатели

i контрольная ; опытная

Осеменено, гол^в . 26 .26

Опоросилось, гол^в ". -.'.:, " ■ 13 : 19

Оплодотворилось, % Я«ЛЗГЧвНЛ поросят, голов ". Многоплодие, голов ' Масса одного поросенка; кг

50,00 + 9,05- л 69,23 + 9,80*.

'133 196

10,2 10,9

1,27 . . ■ . 1,33 - -

Санкция половых путей свиноматок неоветином способствовала увеличении, оплодотворяемости на 19,23$, повышению многоплодия ' на 0,7 поросенка..Экономический эффект составил 830 руб. на ' 100' маток.

'' Выводы

I.: Метода подготовки спер®« хряков к замораживанию влияет на биологическую полноценность и физиологические свойства спермиев. Инкубация неразбавленной сперли при комнатной температуре в те-' чение 1-2 ч влияет на физиологтесху» фуняци» сперыиев. В этот период в сперме протекают обменные процессы, характеризующиеся изменением рН И активности пкислительных ферментов. Через 2 ч инкубации изменяются показатели рН с 7,21 до 7,34, активность сукцинатдегвдрогеназы с 37,8 до 10,3 мин, штохромокевдазы с 4,07 до 7,07; .оплодотворяющая .способность вызе на 13Гь и выход поросят на 1,8 головы*

< : ; 2. Оценка зяяуяяфов по'реакции оседания спершев' <РГС> позволяет определять *ос пригадать к использованию и повысить тизность осеменеш«. Скорость (юедан^ -

спермизв в эякуляте :лри концентрации до 100' шш/мл спермы РОС составдяла*26,01, от 101 до 20. шн - 8,29, от 201 до 300 - 6,7, : саше 300 ион - 4,2з£. .;: . ~ .. _ Я..';^;^'

- / 3* Использование редкой-сперш после отстаивания повысило;' сплйдотвбряёмость свиншаток на 20£ и віссод поросят на 1,9 головы. \ - ■ лЯ-'Я: ■:■'. й Ь'Л'-'

4. Установлено нзыанениэ содержания фосфолипидов в сперма ; -хряков при различных условиях хранения. При аэробном хранении содержание сфкнгоыианина было на12,2Й вше, чем в сперыв .хранившееся в анаэробюк условиях соответственно ва 18,38 и :■■■-' '-."

X;, 5.; Отдедекиэ пдазшотпововькклетон путем. центрифугирова-кия (З тыс.сб./шш в течешаЮ мин) не оказывает отрицатель- ' нога влияния. на подвижность и 'огшздотворгпзщуд. способность половых клеток Хряка. ' "- —Я"'- X Х'Х: Л „ б. Установлена возможность заморазшванияслерш хряков в ... / полиэтиленовнхпакетах объемом 20-55 »^непосредственно на по-веркности хадкого &эота при условии оптимальной 2^-ноЙ концентрации глицерина.в среде для разбавления сперш и 4-часовой выдержи сперш, разбавленной средой о глицерином, при темпе- ' ■ ратуре от до +4°С. .'•''•'• • "'.'-У'.':' X/" 7.; Оплодотворяющая способность заыороженно-оттакнной по разработанной нами методике сперш хряка составила 33,3& Бе сни-' жекие не связано с кнкубадфіей сперми при комнатной температура, и центрифугированием. . '. . - ':'"Х

в. Оплодотворяемость'свиноматок на промышленных комплексах -при внутриыаточном введении неоветина спустя б ч после- послед-: него введения спермы повышается на многопледие на 0,7.по- " росєнка.X ХХлГХ • ; XX- ;..ХХ:: . -Х- ; ■ '. V..V."'X.

; .':••• ПРВДІОШВШ ПРОИЗВОДСТВУ :Хх;

С целью повышения эффективности искусственного осеменения . свинсй предлагается: XX ,Х':Х:V"- XX : X

- инкубировать сперму хряков при комнатной температуре V с' ;. ; течение 1-2 ч до разбавления'средой в боксе-тертостате с автома-

тичэской регулировкой тешературы и бактерицидной яшвюй ; - '

- использовать■ при оценке качества сперм* хряксв-проигоди--, теяей показатель РОС {реакцию оседания сперта») f. •

- пргводить санацип половшспутей свиноматок нвоветкном ; . спустя б ч после последнего осеменения f ' ■■'"'-*,-

- отстаивать редкие еякуляти в течение 2 ч и использовать Только нишшя -фракции с целы» рационального использования спер*

-.■'■"■■ Список работ, опубликованных по теме диссертации

X. О прогнозировании холодостойкости сперш хряков, --Научно-техническая информация по сельскому хозяйству (ШХ), 1973, № 4, с. 19-20 <8 соавторстве). V ;

2.0 взаимосвязи холодостойкости сперш хряков с ' некоторыми показателями ее качества.- Зоотехническая наука Белоруссия. Труда БелНИИЖ, Ык. ; УрадааЯ, 1974, т. 15, с. 84-86 {в соавтор-■' ствэ). .'/.-*/■::;,..■/ :'v.

3. Воспроизводительная способность хряхов и холодостойкость . их cnepuù*-Свиноводство, 1975, I, с. 24-25 (в соавторстве). '■.■"'■ 4. Метаболические процессы в'сперма хряка с различной кон- .',-цснтрацкей сларшев в эягуляте.- Зоотехническая наука Белоруски. Труды БелШЗ, кн. : Урад*аЯ, 1980, т. 2І, с. 32-34 (в соавторстве) » • . . ■.-."

5. Результаты'ксследаваний по заморавсиванипсперыу хрякоз.-' . Деп. в ВевНШКГИ Госплана БССР, 28 апреля 1980 г., 9 І44/ р®Ф*

■ опубл.' в-PS "Свиноводство", i960, Р 8.

6. Усовершенствованна метода замораживания сперш хряков,-Деп. вВелШШГЙ Госплана БССР, 28 апреля 1980 г., Jf 145 / реф. опубл. в К! "Свиноводство", 1980, РЗ. ..... ■

7. Реакция оседания спзршев (РОС) как показатель качества сперкы Хряков.- Деп. в БелШШГИ Госплана БОСР, 28 апреля 1980 п» I4Ô / реф. опубл. в PU "Свиноводство", 1980, № в,

- 6. Увеличение выхода поросят при искусственной осеменении. Информационный листок, £елНИИНШ,-1980, » 334 (в соавторстве).

9. Выход поросят увеличился.- Сельское хозяйство, Белоруссии,': 1931, >'11, с. 31 (в соавторстве),

■ 10. Повышение опяодотзоршкцей способности спермы хряхсв.- ; Свиноводство, 1981, № 10, с, 22 (в соавторстве).

IX, Усовершенствование методов замораживания спермы хрдков,-Зоотехническоя наука Белорусски. Труды ЕелШИ2. Цн.: УраджаЯ, 1382, 22, с. 36-33 (в соавторстве). -- 12, Повышение биологической полноценно сти сперш хряков в условиях промшленик комплексов.- Научные основы развития животноводства в БССР*' - Ыежвед. сб. Кн. : Урадаай, выя, II, с* 31-33Чв соавторстве); V /

13; Осеменение свиноыатокагарыой в различишь сроком инкубации перед избавлением.-- Научные основы развития животноводства в БССР. Ііежвед. сЙ. Ш.; Урадіай,' 1982, " вып. 12, с* 18-19 (в соавторстве).

14. Влияние центрифугирования на качество сперш.- Свиновод* «во, 1983, № 2, с. 18 (в соавторстве).

■ На правах рукопис» Лрдцкдд Николаевна 2укрвсшя

Физигишгичэоая гндоюїданность сперш хршов " в здвгсшосги ОТ условия хранения

03*00*13 - фиэиология чвловека и яяэотаыг (физиология сельскохозяйственных животных)

. ' • . . АВТ.0 РЕвВР AT

диссертация на соискание ученой степени :. кандидата биологических"наук

Подписано в печать ZQ9-ÍM . AT » tólSA Формат 60x04 1/16

Бумага тип.. tf X ' Офсетная «вчать1 Уел. п. д. 095 ' Уч.-иэд.».0,8. . .

Тираж 100 ; 3аказ 8 ■.':/'. Бесплатно

Белоруссква научно-исследовательский институт животноводства, 222160» Г. Еодкяо Иинской области, ys» Фрунзе, И Отпечатано на ротепрянтеЦНВ АН БССР ■ 1Ьотс*,ул.<^ганова,15