Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Физико-химические механизмы трансмембранной активации лимфоцитов лектинами

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шестакова, Светлана Васильевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Рецепторы лектинов поверхности плазматических мембран

2. Физико-химические состояния рецепторов митогенов в плазматических мембранах

3. Взаимодействие митогенов с компонентами плазматической мембраны

4. Распределение ионов кальция в лимфоцитах

5. Роль трансмембранного переноса ионов в активации лимфоцитов

6. Роль ионов кальция в образовании кэпов

7. Определение трансмембранного потенциала клеток с помощью флуоресцентных красителей

Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава Ш. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Описание феномена образования кэпов рецепторов КонА-ФИТЦ

2. Температурная зависимость процесса перераспределения рецепторов

3. Влияние метаболических ингибиторов на образование кэпов

4. Влияние концентрации лектина на процесс образования кэпов

5. Ограничение подвижности рецепторов плазматической мембраны

6. Динамика митоген-рецепторных взаимодействий

7. Суммирование сигналов от разных рецепторов во времени

8. Особая роль клеток, рецепторы которых длительно не исчезают с клеточной поверхности в трансмембранной активации лимфоцитов

9. Количественные характеристики процесса взаимодействия рецепторов плазматической мембраны лимфоцитов меченным радиоактивным тритием КонА

10. Количественное определение связывания меченного КонА

11. Влияние преинкубации клеток с митогенными концентрациями КонА на последующие связывание меченного лектина обработанными клетками

12. Различия в зависимости эффекта стимуляции лимфоцитов от количества рецепторов, оккупированных с самого начала инкубации и от количества рецепторов, оставшихся связанными после взаимодействия с гаптенными углеводами

13. Биохимические параметры активации лимфоцитов.

Роль ионов кальция в активации лимфоцитов

Использование метода флуоресценции хлортетра-циклина для изучения ассоциации ионов кальция с лимфоцитами НО

14. Трансмембранный потенциал лимфоцитов 129 ВЫВОДЫ 135 УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Физико-химические механизмы трансмембранной активации лимфоцитов лектинами"

Актуальность темы. Одной из наиболее актуальных проблем современной биологии являются исследования механизмов передачи сигнала от рецепторов плазматической мембраны в клетку. Наиболее удачной и хорошо изученной моделью для подобного рода исследований являются плазматические мембраны лимфоцитов. Рецепторы лимфоцитов способны при взаимодействии с лектинами перестраиваться и передавать ядру сигнал о клеточном делении.

Изучение этих процессов имеет не только теоретический интерес, так как позволяет понять механизмы трансмембранной передачи сигнала внутрь клетки, но имеет и практическое значение, поскольку ответ иммунной системы организма при взаимодействии с антигеном, моделью которого являются лектины, позволяет судить об иммунном состоянии данной клеточной популяции. Известно, что именно иммунная система участвует в развитии практически всех патологических процессов, в том числе и злокачественного роста. Клеточный иммунитет играет ведущую роль в процессе трансплантации тканей.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы явилось изучение физико-химических механизмов взаимодействия некоторых лекти-нов (конканавалина А - КонА, фитогемагглютинина - ФГА) с рецепторами плазматической мембраны лимфоцитов. Выяснение этих механизмов может пролить свет на проблему передачи сигнала с поверхности плазматической мембраны к ядру. По состоянию иммунной системы можно судить о тех патологических процессах, которые происходят в организме. Расшифровка механизмов активации лимфоцитов лектинами позволяет создать диагностические модели для изучения иммунного статуса организма.

Основные задачи работы:

I. Исследование динамики взаимодействия лектинов с рецепторами плазматической мембраны лимфоцитов; определение скорости перераспределения рецепторов плазматической мембраны лимфоидных клеток, выделенных из различных тканей;

2. Изучение соотношения между сигналами активации от КонА и ФГА и выяснение возможности суммирования этих сигналов во времени;

3. Исследование роли клеток, рецепторы которых различаются по подвижности в суммарном процессе активации лимфоцитов;

4. Исследование роли кальция как посредника в активации лимфоцитов при взаимодействии рецепторов плазматической мембраны с лектинами;

5. Изучение изменений трансмембранного потенциала лимфоцитов при взаимодействии с конканавалином А; изучение влияния кальция на величину трансмембранного потенциала лимфоцитов.

Научная новизна. Впервые установлено, что процесс активации лимфоцитов представляет собой ряд циклически повторяющихся стадий связывания, взаимодействия лектинов с рецепторами с последующим исчезновением комплекса митоген-рецептор с поверхности плазматической мембраны.

Изучение влияния лектинов на лимфоциты в условиях, позволяющих определить взаимозаменяемость рецепторов КонА и ФГА, показало, что сигнал активации поддерживается свободными молекулами лектина в среде, которые связываются со вновь синтезируемыми рецепторами на мембране. Получены доказательства в пользу того, что комплексы молекул лектина и рецептора на значительной части популяции лимфоцитов длительное время не исчезают с клеточной поверхности в ходе реакции бластной трансформации, и именно они важны для развития митогенеза.

Следствием взаимодействия лектина с мембраной лимфоцитов является резкое увеличение проницаемости мембран для ионов кальция; существенное количество кальция связывается с клеточной поверхностью, не проникая внутрь клетки» ;. :. . .

Практическое значение. Результаты исследований могут быть использованы для создания новых и модификации уже применяемых в клинической иммунологии тестов для оценки системы клеточного иммунитета, а также для разработки методов усиления или подавления (трансплантация тканей) реакций клеточного иммунитета.

Апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 7 работ. Основные положения диссертационной работы доложены на Объединенном пленуме Научных советов АН СССР и АМН СССР "Рецепторы лимфоцитов и клиническая иммунология", Москва, 1980 г., III Всесоюзном симпозиуме "Ранние проявления тканевой несовместимости"Москва, 1979 г., на заседании Московского отделения Всесоюзного Биохимического общества, Москва, 1979 г.

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Шестакова, Светлана Васильевна

ВЫВОДЫ

1. Из сравнения расчетной скорости движения рецепторов, связанных с КонА с результатами, полученными в эксперименте, следует, что скорость движения рецепторов в плоскости плазматической мембраны не может быть описана в рамках броуновского движения. Подвижность рецепторов определяется суммарным действием ряда факторов, включающих не только функциональные свойства клетки, но и условия взаимодействия клетки с внеклеточным сигналом.

2. На основании данных о связывании 3Н-КонА с мембранами лимфоцитов установлено наличие двух типов рецепторов: высокоаффинные рецепторы, количество которых составляет около 5 млн на о клетку для лимфоузлов крыс (константа ассоциации 0,4-10° л/Моль) и низкоаффинные рецепторы, максимальное количество которых доо тсигает 26 тыс. (константа ассоциации 0,06»10° л/Моль).

3. Показано, что для стимуляции лимфоцитов необходимо длительное (более 24 часов) присутствие лектина на поверхности клетки; получены доказательства в пользу возможности суммирования сигналов от различных рецепторов во времени.

4. Функционально важную роль в развитии процесса активации лимфоцитов играют те молекулы лектинов, которые длительное время связаны с поверхностью клетки и не покидают ее вследствие латерального перераспределения или схождения в среду.

5. В результате взаимодействия лектинов с мембраной лимфоцитов происходит резкое увеличение проницаемости мембран для ионов кальция, однако существенное количество кальция связывается с поверхностью мембраны лимфоцитов, не проникая внутрь клетки.

6. Увеличение внутриклеточной концентрации кальция под влиянием ионофора A23I87 приводит к гиперполяризации мембран лимфоцитов.

7. Взаимодействие рецепторов мембран лимфоцитов с КонА, приводящее к входу кальция в клетки, вызывает гиперполяризацию мембраны. Это указывает на участие ионов кальция в регуляции трансмембранного потенциала при активации лимфоцитов лектинами.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шестакова, Светлана Васильевна, Москва

1. Владимиров Ю.А., Добрецов Т.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. Из-во "Наука", М., 1980, с.156-159.

2. Гуковская А.С., Зинченко В.П., Рябиченко В.В., Асташкин В.И. Мембранный потенциал лимфоцитов периферической крови человека. Факторы, определяющие мембранный потенциал. Биол. мембр., I, №2, с.192-199, 1984.

3. Добрецов Г.Е., Коркина Л.Г., Вальцель Г. ., Зимин Ю.И., Коган Э.М., Владимиров Ю.А. Флуоресцентный зонд индикатор различий Т- и В-лимфоцитов крови. Бюлл.эксп.биол., 1979, №1, с.51-53.

4. Комиссаренко С.В. Механизмы реализации иммунологического распознавания. В сб. "Стволовые и иммунокомпетентные клетки в норме и при опухолевом росте". Киев, "Наукова думка", 1981,с.148-160.

5. Линг Н.Р. Стимуляция лимфоцитов. М., Медицина, 1971, 298с.

6. Петров Р.В., Хаитов P.M., Атауллаханов Р.И. Иммуногенетика и искусственные антигены. М., Медицина, 1983.

7. Печатников В.А., Ризванов Ф.Ф., Турчина С.Л. Исследования трансмембранного потенциала митохондрий с помощью цианиновых красителей. Биофизика, 1978, ХХ1У, т.24, №1, с.178-179.

8. Сергеева Н.С., Клебанов Г.И., Козлов Ю.П., Ситковский М.В. Влияние конканавалина А на адсорбцию ионов кальция лимфоцитами. Биофизика, 1980, вып.З, №25, с.508-510.

9. Ситковский М.В. Молекулярные механизмы активации лимфоцитов. Итоги науки и техники. Сер. "Биолог.химия", М., 1979, т.13.

10. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах. М., Наука, 1972.

11. Фонталин JI.H., Певницкий JI.A. Иммунологическая толерантность. М., Медицина, 1978, с.16-22.

12. Хайтов P.M., Атауллаханов Р.И. Мембранозависимые медиаторы, регулирующие метаболизм, пролиферацию и дифференцировку иммуноцитов. Итоги науки и техники. Сер.Иммунология, Медиаторы иммунной системы, М., 1981, с.144-211.

13. Хоробрых В.В., Киркин А.Ф., Пронин А.В., Санин А,В., Меримская О.С., Бартенева И.С., Каулен Д.Р. Механизмы активации Т-лимфоцитов поликлональными митогенами. Иммунология, 1983, №2, с.26-38.

14. Шестакова С.В., Ситковский М.В., Брус^ованик В.И., Ко-телевцев С.В., Козлов Ю.П. Трансмембранные механизмы активации лимфоцитов. Иммунология, 1982, №2, с.19-33.

15. Орлов С.Н. Регуляция внутриклеточного распределения кальция в норме и при артериальной гипертонии. Докторская диссертация, 1982, 326с.

16. Орлов С.Н., Кравцов Г.М. Участие кальмодулина в регуляции электрического потенциала плазматической мембраны внутриклеточным кальцием. Биохимия, 1983, т.48, №9, с.1447-1455.

17. Ситковский М.В., Шестакова С.В., Брусованик В.И., Козлов Ю.П. Особая роль клеток, рецепторы которых длительно не исчезают с клеточной поверхности в трансмембранной активации лимфоцитов КонА. Докл. АН СССР, 1981, т.258, №5, с.1261-1264.

18. Брондз Б.Д., Рохлин О.В. "Молекулярные и клеточные основы иммунологического распознавания", М., "Наука", 1978.

19. Огибалов Ю.А., Ситковский М.В., Баранова Ш.С., Ципин А., Козлов Ю.П. "Вопросы прикладной биохимии и микробиологии", 1979.

20. Петров Р.В. "Иммунология и иммуногенетика", М., "Медицина", 1976.

21. Сергеева Н.С. Диссертация канд.наук, М., 1977.

22. Ситковский М.В., Шестакова С.В., Козлов Ю.П. Взаимодействие митогенных лектинов с плазматическими мембранами лимфоцитов. Бюлл.эксп.биол. и мед., 1979, №7, с.89-91.

23. Ситковский М.В., Варданян И.К., Голубева Н.Н., Козлов Ю.П. "Биофизика", 1979, ХХХ1У.

24. Ситковский М.В., Макаренко И.Г., Козлов Ю.П. "Научные доклады Высшей школы", "Биологические науки", 1977, с.7-24.

25. Лавров В.Ф., Шестакова С.В., Ситковский М.В., Голубева Н.Н. Электрофоретическое разделение лимфоцитов селезенки и тимуса крыс и их реакция на митогены. Бюлле.эксп.биол. и мед., 1979,9, с.322-324.

26. Adler V/• ,Takiguchi Т. , Smith R. , March B. Cellular recognition by mouse lymphocytes in vitro. I. Definition of a new technique and results of stimulation "by phytohe-am agglutinin and specific antigens» J, exp. Med., 1970, v. 131, p. 1049-1078.

27. Adler V/., Osunlcoya В., Takiguchi T, , Smith R. The interactions of mitogens with lymphoid cells and the effect of neuraminidase on the cells resposivenessto stimulation. Cell immunol., 1972, v. 3) p. 590-605.

28. Albertini F., Clark J, Membrane microtubule interactions concanavalin A capping induced redistributionof cytoplasma microtubules and colchicine binding proteins.i

29. Proc. Nat. Acad. Sci. /USA/, 1975, r. 72, p. 4976-4983.

30. Allan D. , Auger J., Crumpton M, Nature /Lond./ New Biol., 1972, v. 23 6, p. 23-25 (цит. по: Итоги науки и техники/ВИНИТИ. Биохимия; т. 13).

31. Allwood G. , Asherson G. , Davey M., Goodford P. The early uptake of radioactive calcium by human lymphocytes treated with phytohaemagglutinin. Immunol., 1971,v. 21, N 3, p. 509-516.

32. Alvarez-Leetmans Т., Rink T. Free calcium ions in neurones of Helix aspera meansured with ion-selective micro-electrodes. J, Physiol, /bond./, 1981, v. 315,p. 531-548.

33. Andersson I., Edelman G., Moller G, Sjoberg 0. Activation of В lymphocytes by locally concentrated con-conavalin A. Eur. j. Immunol., 1972, v. 2, p. 233.

34. Augelo F. , Borghetti, John E, Kay. Enhanced stability of the Na -dependent amino acid - transport system after lymphocyte activation, - Biochem. J., 1979,v. 182, p. 237-239.

35. Beyer C. , Bowers V/. Periodate and concanavalin A induced blast transformation of rat lymphocytes by an indirect mechanism. Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1975, v. 72, p. 3590.

36. Bhalla D.K., Braun I., Karnovsky M.I, Lymphocyte surface and cytoplasmic changes associated with translational motility and spontaneous capping of Ig. -J. Cell Biol., 1979, v. 79, p. 137-147.

37. Bona C., Joy D., Truffa-Bachi P., Kaplan G.I. Binding, capping and internalization of lipopolysachari-de in thymic and non-thymic lymphocytes of the mouse. Biological and autoradiographic study. J. Microscopie Biol. Cell, 1976, т. 25, p. 47-56.

38. Borle A. Cyclic AMF-stimulation of calcium fflux from kidney, lirer and heart mithochondria. J, Membrana Biol., 1974, v. 16, p. 221-236.

39. Borle A. Methods Enzymol., 1975, т. 39, p.513.573 (цит. по: Итоги науки техники/ВИНИТИ. Биохимия; т. 13).

40. Boyurn A, Separation of white blood cells. -Nature /Loud./, 1964, v. 204, p. 793-794.

41. Braun J., Fujiv/ara K., Pollard Т., Unanue E., Two distinct mechanisms for redistribution of lymphocyte surface macromolecules. II. Contrasting effects of local anestheticts and a calcium ionophore, J. Cell Biol., 1978, v. 79, К 2, p. 419-426.

42. Braun J., Fujiwara K., Pollard Т., Unanue E. Two distinct mechanisms for redistribution of lymphocyte surface macromolecules. I. Relationship to cytoplasmic myosin, J. Cell Biol., 1978a, v. 79, p. 409-418.

43. Braun J. Crosslinking by ligands to surface Ig4 5 2+triggers mobilization of intracellul in lymphocytes. J. Cell Biol., 1979

44. Braun J., Ramadan J., Unanue E. Crosslinking by ligands to surface immunoglobulin triggers mobilization of intracellular in B-lymphocytes. J.Cell Biol., 1979, v. 82, N 3, p. 755-765.

45. Brinley F. Calcium buffering in sq.uid axons. -Ann, Rev. Biophys. Biochem., 1978, v. 7, p. 363--392.

46. Chaplin D., Wedner H. Inhibition of Lectin-in-duced lymphocyte activation by diamide and other sulthyd-ryl reagentes. Cell. Immunol., 1978, v. 36, N 2, p.303-311.

47. Chen S., Kon A. The effect of colchicine on cholesterol biosynthesis in concanavalin A stimulated lymphocytes. Biochem. and Biophys. Res. Commun., 1980,v. 97, N 3, p. II40-II45.

48. Emerson S.G., Cone R.E, Differential effect of colchicine and cytochalasins on the shedding of murine В cell membrane IgM and IgD. Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 1979, v. 76, N 12, p. 6582-6586.

49. Faguet G.B. Mechanisms of lymphocyte activation: Effect of ligand concentration and induction time. -In: Reticuloendothel Syst. Health and Disease Funct. and Charac. N.-T. London, 1976, p. 329-337.

50. Farrar J,, Benjamin W,., Hilfiker M,, Howard M., Farrar W. , Fuller-Farrar J, Immunological Rev., 1982,v. 63, p. 129-167 (цит. по: Итоги науки и техники/ВИНИТИ. Биохимия; т. 13).

51. Freedman LI. , Raff М. , Gomperts В. Induction of increased calcium uptake in mouse T-lymphocytes by Con A and its modulation Ъу cyclic nucleotides. Nature, 1975, v. 255, II 5507, p. 370-382.

52. Felber S., Brand Ы. Factors determining the plasmamembrane potential of lymphocytes. Biochem. J., 1982, т. 204, N 2, p. 57.7-585.

53. Ferber E., Resch K. Phospholipid metabolism of stimulated lymphocytes: activation of acyl Con A: lyso-lecithin acyltransferases in microsomel membranes. Biochem. Biophys. Acta, 1973, v. 296, p. 335-349.

54. Ferber E., Reilly C.E., Resh K. Phospholipid metabolism of stimulated lymphocytes. Comparison of the. activation of acyl-conA: lysolecithin acyltransferase Y/ith the binding of Con A to thymocytes. Biochem. biophys. Acta. 1976, v. 448, p. 143-146.2+ 2+

55. Ferreira H,, Lev/ V. Ca 1 transport and Ca'pump reversal in human red blood cells. J. Physiol. /Lond./, 1975, v. 252, p. 86-87.

56. Fisher D., Mueller G. An early alteration in thephospholipid metabolism of lymphocytes by PHA. Proc.

57. Nat. Acad. Sci., 1968, v. 60, p. 1396»65* Greaves M.F, , Banminger S. Activation of T and В lymphocytes by insoluble phytomitogens. Nature New Biol., 1972, v. 235, p. 67-69»

58. Greaves M.F., Janossy G., Feldman M., Roen-hoff M. Polyclonal mitogens ana the nuture of В lympho-r cyte activation mechanisms. In: The Immune System./Ed. E.E.Secarz et al., Acad» Press Inc., N.I., 1974, p. 271.

59. Hesketh Т., Smith G., Houslay М., Warren G., Metcalfe J. Is an early calcium flux necessary to stimulate lymphocytes? Nature /bond./, 1977, v. 267, N 5611, p. 490-494.

60. Holssli D. , Rungger-Brandle E., Jockusch В•, Gabbiani G. Lymphocyte a-actinin. Relationship to cell-membrane and Co-capping with surface receptors. J. Cell Biol., 1980, v. 84, p. 305-314»

61. Hovi T., Allison A., Williams S. Proliferation of human peripheral blood lymphocytes inducted by A23I87 a strepthomyces antibiotic. Exp. Cell Res., 1976, v.97, N I, p. 92-100.

62. Inbar Id., Sachs J. Interaction of carbohydrate binding protein concanaralin A with normal and transformed cells. Proc. Hat. Acad. Sci., USA, 1969, v. 63,p. 1418.

63. Kohler S. , Harwitz д., Klein Id. Magnetic resonance studies on membranes and model membrane systems. iy. a comparison of yeast and egg lecithin dispersions.-Biochem. Biophys. Res. Comm., 1972, v. 49, N 6, p. 14141420.

64. Krolick K.A., Wisnieski B.J., Sercarz E.R, Differential lateral mobility of IgM and IgD receptors in mouse В lymphocyte membranes. Proc. Nat, Acad. Sci., USA, 1977, v. 74, N 10, p. 4595-4599.

65. Larsson E., G-ullberg M., Coutihno A. Heterogene sity of cells and factors participating in the concanava-lin A dependent activation of T-lymphocytes with cytotoxic potential, - Immunobiol., 1982, т. 161, p. 5-20.

66. Leor F. Binding and distribution of lectins on lymphocyte membranes. Eur. J. Immunol., 1974, v. 4,p. 210.

67. Lettvin J., Pickard \7, Theory of passive ion fluxes through axon membrane. -Nature, 1964, v. 202, p. 1338-1339.

68. Lev/is C. , Pegrum G. Lymphocyte surface membrane changes in divining cell and following rigidification with mitogens. Immunol., 1977, v. 32, Ы 3, p. 265-269.

69. Lichtman A., Segel G. , Lichtman M. Calcium transport and calcium ATPase activity of lymphocyte plasma membrane vesicles. J, Biol. Chem., 1981, v. 256,1. N 12, p. 6148-6154.

70. Linthicum D., Elson E., Mendelsohn J., Sell S. Endocytosis and exocytosis of FGA cell surface receptors of human lymphocytes during blast transformation, Exp. Cell Res., 1977, v. 110, N 2, p. 234-245.

71. Lippman M., Thompson E. Differences between cytoplasmic glucocorticoid-binding proteins shown by hetero-genicity of nuclear acceptor sites. Nature, 1973, v.246, p. 353-355.

72. Lipsky P., Ellner J., Risrnthal A. Phytohemagglutinin-induced proliferation of guinea pig thymus-deri-, ved lymphocytes. I. Accesory cell dependence. J.Immunol.,1976, v. 116, p. 886-875.

73. Lis H. The biochemistry of plant lectins. -Ann. Rev. Biochem., 1973, v. 42, p. 541-574.

74. Loev/renstein N. Permeable functions. Cold Spring Harbor Syrnp. Quant. Biol., 1976, v. 40, p. 49-63.

75. Loor P. Cell surface design. Nature /bond./, 1976, v. 264, p. 272-273.

76. Luckasen J., White J., Kersey J. Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 1974, v. 71, p. 5088-5090 (цит. ПО: ИТОГИ науки и техники/ВИНИТИ. Биологическая химия; т. 13).

77. Lyrll R., Dubois D., Crumpton M. Ionomycin stimulates T-cells to grow. Biochem. Soc. Trans., 1980,v. 8, p. 720-721.

78. Majeris P., Brodie J. The binding of phytohema-gglutinins to human platelet plasms membranes. J, Biol. Chem., 1972, v. 274, N 13, p. 4253-4257.

79. Mastro A., Shiezek M. Yet. Immunol. Immunopath., /in press/, 1983•

80. Mendelsohn J., Skinner S., Korafeld S, The rapid induction by phytohemagglutinin of in creased Jv,-arnino-isobutyria acid uptake by lymphocytes. J. Clin. Invest., 1971, v. 50, N 4, p. 818-826.

81. Mikkelsen R., Schmiat-Ulrich R. Concanavalin A induced the release of intracellular Ca^"*" in infact rabbit thymocytes. J. Biol. Chem., 1980, v. 255, N II,p. 5177-5183.

82. Mines C. Action of berrylium, lauthanium, yttrium and cezzium on the freg's heart. J. Physiol., I960, v. 40, p. 327-346.

83. Mizel S., Steven and Amos Ben-Zvi. Studies on the role of lymphocyte-activating factor /interleukin I/ in antige n—induced lymphode lymphocyte proliferation. — Cell Immunol., 1980, v. 54, N 2, p. 382-389.

84. Montecucco C., Rink Т., Pozzan Т., Metcalfa J. Triggering of lymphocyte capping appears not to require changes in potential or ion fluxes across the plasma membrane. BBA, 1980, v. 595, N I, p. 65-70.

85. Montecucco C., Ballardin S., Pozzan T. Effect of local anesthetics on lymphocyte capping and energy metabolism. Biochem. Pharmaool., 1981, v. 30, p. 29892992.

86. Morgan J., Bramhall J., Britten A., Porris A. Calcium and oestrogen interactions upon rat thymic lymphocyte plasma membrane. Biochem, Biophys. Res. Comm., 1976, v, 72, N 2, p. 663-671.

87. Murphy E., Coll K., Rink Т., Williamson J. Hormonal effects on calcium homeostasis in isolated he-patocytes, J. Biol. Chem., 1980, v. 255, p. 6600-6608.

88. Nicholls D. Calcium transport and proton electrochemical potential gradient in mitochondria from guinea pig cerebral cortex and rat heart. Biochem. J., 1978, v. 170, p. 5II-5I2.

89. Nilsson S., Waxdal M. Isolation and identification of the major concanavalin L binding glycoproteins from murine lymphocytes. Biochemistry, 1976, v, 15,p. 2698-2705.

90. Novogradsky A., Katchalski E. Mechanism oflectins activation. EEBS Lett., 1971, v. 12, p. 297300.

91. Novogradsky A., Katchalski E. Induction of lymphocyte transformation hy seq.uentig.1 treatment with neuraminidase and galactose oxidase. Proc. Nat. Acad. Sci., 1973, v. 70, p. 1824-1830»

92. Oppenheim J., Rosenstreich D, Signals regulating in vitro activation of lymphocytes. Prog. Allergy, 1976, v. 20, p. 65-194.

93. Ozato K. , Huang L., Ebert J. Accelerated calcium ion uptake in murine thymocytes induced by concana-valin A. J. Cell Physiol., 1977, v. 93, N I, p. 153160.

94. Palmer J., Civan M, Distribution of Na , К and CI between nucleus and cytoplasma in Chironomus salivary gland cell. J, Membr. Biol., 1977, v. 33, p.41-61.

95. Parker C.W. Correlation between mitogenicity and stimulation of calcium uptake in human lymphocytes, -Biochem. Biophys. Res. Commun., 1971, v. 61, p# 1180.

96. Parker C.W. Control of lymphocytes function. -N. Engl. Med., 1976, v. 295, p. 1180.

97. Phillips P., Furmanski P., Lubin M, Cell surface interactions with concanavalin A. Exp. Cell Res., 1974, v. 86, p. 301-308.

98. Phillips C., Guit E., Kay J. Changes in intracellular prostaglandin content during activation of lymphocytes by phytohaemagglutinin. FEBS Lett., 1978,v. 94, N I, p. II5-H9.

99. Pozzan T# , Arslan Р» , Tsien R. Anti-immunoi ■ , : globulin, cytoplasmic free calcium, and capping in Bi lymphocytes. J, Cell Biol., 1982, v, 94, N 2, p# 3351340. . . • ^ .

100. Rink T. The influence of sodium on calcium movements and catecho lamine relese in thin slices of bovine adrenal medulla. J, Physiol. /Lond./, 1977, v. 266, p. 297-325.

101. Rink Т., I.Iontecucco C. , Hesketh Т., Tsien R, Lymphocyte membrane potential assessed with fluorescent probes. BBA, 1980, v. 595 , N I, p. 15-36.

102. Rink Т., Tsien R., Pozzan T. Cytoplasmic pH and free big2-* in lymphocytes, J. Cell Biol., 1982, v. 95, N I, p. 189-196.

103. Rubin A., Schultz E. The significance of direct activation of lymphocyte nuclei by phytohaemagglutinin /РНА/. DANS: 8th leucocyte culture conference Lindahl-Kiessling K. et Osoba, ads. Acad. Press, 1974, p. 39-48.

104. Rudd C., Kaplan J. Thimidine transport in human lymphocytes stimulated with concanavalin A: effect of colchicine. J. Immunol., 1981, v. 126,' N 4, p. 16401643.

105. Rudd C., Stoen H. On the importance of substrate adhesion and cell aggregation in the ConA-induced blas-togenesis of lymphocytes. Scand. J. Immunol., 1981,v. 14, N 2, p. 153-160.

106. Saining R., Bhisey A., Sundaramand K., Phondke &. Cell electrophoretic studies on mouse lymphocytes treated with concanavalin A; Possible existence of two types of receptors on cell surface. Immunol., 1979, v. 37, p. 555-560.

107. Sainis K., Forrester J., Phonake G, Concanavalin A induced modification of the electrophoretic mobility of lymphocytes. Effect of colchicine and cytochala-sin В. - BBA, 1981, v. 643, N I, p. 134-139.

108. Sarcadi В., Szacr L., Gardos G. Active calcium transport in human peripheral blood lymphocytes. Haema-tologia, 1981, v. 14, N 4, p. 439-^440.

109. Sasaki Ivi. , Norman A. Proliferation of human lymphocytes in culture. Nature, 1966, v. 210, p. 913.

110. Schmidt-Ulrich R. , Mikkelsen R., Y/allach D. Transmembrane disposition on the 55000 dalton concanavalin A receptor protein on thymocyte plasma membrane. J. Biol. Chem., 1978, v. 253, p. 6973-6978.

111. Schreiner G., Unanue E. Calcium seusitive modulation of Ig capping evidence supporting a cytoplasmic control of ligand-receptor complexes. J. Exp. Ivied., 1976, v. 143, p. 15.

112. Schreiner G.F., Fujiwara K., Pollard T.D., Unanue E.R. Redistribution of myosin aceompaning capping of surface Ig. J- Exp. Med., 1977, v. 145, p. 1393-1397.

113. Schreiner G.F., Unanue E.R. Capping and the lymphocyte: Models for membrane reorganization. J, Immunol., 1977, v. 119, N 5, p. I549-I55I.

114. Simonsen C., Christofferssen. Intracellular Ca2+2+activity in Helix neurones* effects of extracellular Ca H+, Na+ and Hr+. Сотр. Biochem. Physiol., 1979, v. 63A, p. 615-618.

115. Sinis P., Y/ag goner A., V/ang C. , Hoffman J, Studies on the mechanism by which cyanine dyes measure membrane potential in red blood cells and phosphatidyl choline vesicles. Biochemistry, 1974, v. 13, N 16,p. 3315-3330.

116. Sramel Li., Somogui J., Resch K. The role of the plasma membrane in the regulation of stimulation. Hae-matologia, 1980, v. 14, N 4, p. 442-443.

117. Stein M., Sage H., Leon M. Arch. Biophys. Biochem., 1972, v. 150, p. 412 (цит. по: Итоги науки и техники/ВИНИТИ. Биологическая химия; т. 13).

118. Sundquist К., V/anger L. Anchorage and lymphocyte function. Contact-induced increase of T-cell activation. Immunol., 1980, v. 41, N 4, p. 883-890.

119. Szacr L., Sarcadi В., Gardos G. Demonstration of the Ca2+" dependent K4" /Rb4/-transport in human lymphocytes. Haematologia, 1981, v. 14, H 4, p. 440-441.

120. Takata M., Pickrd \7. , Lettvin J., Mo ere J. Ion conductance changes in lobster axon membrane when lantha-nium is inhibited calcium fluxes. J. Gen Physiol., 1966,v. 50, p. 461-471.

121. Taylor II., Duffus \7., Raff M. , de Petris S. Redistribution and pinocytosis of lymphocyte surface immunoglobulin molecules induced by anti-immunogldbulin antibody. Nature New Biol., 1971, v. 233, p. 225-229.

122. Toyoshima S. , Iwata IvI. , Osawa T. Kinetics of lymphocyte stimulation by concanavalin A. Nature, 1976, v. 264, N 5585, p. 447-449.

123. Tsien П., Rink T. Neutral carrier ion-selective micro eleotroaes for measurement of intracellular free calcium. BBA, 1980, v. 599, p. 623-638.

124. Tsien П., Pozzan Т., Rink T. Calcium homeostasis in intact lymphocytes: cytoplasmic free calcium monitored with, a new intracellularly trapped fluorescent indicator. J. Cell Biol., 1982, v. 94, N 2, p.325-334.

125. Tsien R., Pozzan Т., Rink T. T-cell mitogensp Jcause early changes in cytoplasmic free Ca^ and membrane potential in lymphocytes. Nature, 1982a, v. 295, p. 68-70.

126. Unanue E. , Perkins V/. , Karnovsky M. Ligand-induced movement of lymphocyte membrane macromolecules. I. Analysis by immunofluorescence and ultrastructural radioautography. J. Exp. Med., 1972, v. 136, p.885-906.

127. Unanue E., Earnovsky M. bigand-induced movement of lymphocyte membrane macromolecules. Y. Capping, cell movement, and microtubular function in normal and lectin-treated lymphocytes. J. Exp. Med., 1974, v. 140, p. 1207-1220.

128. V/ainberg M. , Margolese R. The effects of T-cell growth factor and virus purification on virus-mediated inhibition of lymphocyte,mitogenesis. Clin. Exp. Immunol., 1982, v. 48, N I, p. 163-170.

129. Waggoner A. Optical probes of membrane potential. J. Membrane Biol., 1976, т, 27, N 4, p. 317-334.

130. Waksman B., Wagshal A. Lymphocytic- functions acted on by immunoregulatory cytokines. Significance of the cell cycle. Cell Immunol., 1978, v. 36, p. 180196.

131. Weiner N., Lee K. Active calcium ion uptake by inside and right-side-out vesicles of red blood cell membranes, J. Gen, Physiol., 1972, v. 59, p. 462-475.

132. Wijermans P., Astaldi G., Facchini A., Schel-lekensand P., Astaldi A. Early evens in thymocyte activation. I. Stimulation of protein synthesis by a thymus-dependent human serum factor. Biochem. Biophys, Res, Commun., 1979, v. 86, N I, p. 88-96.

133. Whitney R., Sutherlaud R. Characteristics of calcium accumulation by lymphocytes and ulteractions in the process induced by phytohemagglutinin. J. Cell Physiol., 1973, v. 82, p. 9-20.

134. Wottawa A., Klein G., Altman H. Fine Methode sur xoolierung manschlicher und tiorischer Lymphocyten.-Weiner Klin. Wochenschr., 1974, v. 86, p. I6I-I65.

135. Xahara H., Edelman G.M, Restriction of mobility of lymphocyte immunoglobulin receptors by concanava-lin A. Proc. Nat. Acad. Sci., 1972, v. 69, p. 608.

136. Xahara I., Edelman G.M. The effects of conca-navalin A on the mobility of lymphocyte surf ace recep— tors. Exp. Cell Res., 1973, v. 81, p. 143-155.

137. Xahara I., Kakimoto-F,-Sameshima. Ligand-inaependens cap-formation: Redistribution of surface receptors on mouse lymphocytes and thymocytes in hypertonic medium. Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 1977, v. 74, N 10, p. 45H-45I5.

138. Zagyansky Xuly A., Yard S. Does lectin-recep-tor complex formation produce rons of restricted mobility within the membrane? Nature, 1979, v. 280, N 5723,p. 591.593.

139. Van Breeman G. , Farine.s В., Gerba P., Menaugh-ton E. Constraction ocupling in rabbit aorta. Studies by the lanthanium method for measuring cellular calcium influx. Circulat. Res., 1972, v. 30, N I, p. 44-45.

140. Yaresio L. , Govarelli M. , Landelfe S,, Foral G. Suppression of proliferative response and lymphokine production during the progression of a spontaneous tumor. -Cancer Res., 1979, v. 39, N 12, p. 4963-4988.

141. Yaresio L., Holden H., Taramelli D, Mechanism of lymphocyte activation. II. Requirements for macromole-cular synthesis in the production of lympholcines. J. Immunol., 1980, v. 126, N 6, p. 2810-2817.