Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров

Кугелева, Татьяна Игоревна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров
ВАК РФ 06.02.03, Звероводство и охотоведение

Автореферат диссертации по теме "Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров"

На правах рукописи

Кугелева Татьяна Игоревна

Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров

06.02.03. - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 9 МАЙ 2011

Москва 2011

4847144

Работа выполнена в отделе качества и стандартизации фармакологических лекарственных средств для животных ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»).

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

академик РАСХН Борис Вениаминович Уша Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Н.С. Преображенский доктор биологических наук, профессор Т.С. Новик Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ «ВНИИВСГЭ» Россельхозакаде-мии)

Защита диссертации состоится «X » ^^^^ 2011 года в асов на

заседании диссертационного совета Д 220.011.01. при Федеральном государственном учреждении «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов». Адрес: Россия, 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, д.5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «ВГНКИ».

Автореферат разослан » СХус|\!Ца^ 2011 г.

Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат ветеринарных наук, доцент, ^

Заслуженный ветеринарный врач РФ Ю.А

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Успешное ведение молочного скотоводства основано на максимальном и рациональном использовании репродуктивного потенциала маточного поголовья. Однако в современных условиях животные постоянно подвергаются воздействию различных стресс-факторов, вызывающих вторичные иммунодефициты, которые способствуют появлению заболеваний различной этиологии. (B.C. Бузлама, 2000; Ю.Н. Федоров, 2006; ГО.Н. Масьянов, 2009).

Исследованиями Mallard В.А. (1998) показано, что механизмы защиты организма коров и нетелей наиболее уязвимы в период, охватывающий последние 3 недели стельности и первые 3 недели после отела. При этом снижается неспецифическая резистентность и реактивность иммунной системы, что обуславливает возникновение послеродовых заболеваний.

По данным зарубежных авторов, задержание последа отмечается у 339% отелившихся коров (Ahmed W.M., 1999; Drillich М„ 2006; Stephen J.L., 2008). В России акушерско-гинекологическую патологию регистрируют у 15 - 60% маточного поголовья (А.Н. Турченко, И.О. Коба, 2009; В.П. Иноземцев, И.И. Балковой, А.Г. Нежданов, 2000).

Задержание последа приводит к дальнейшим заболеваниям половой системы, в том числе, к различным формам метрита (Correa, 1993; Emanuelson, 1993), длительной ановуляции после отела (Fonseca, Britt, 1983; Oltenacu, Britt, 1983), многократным повторным осеменениям, удлинению межотельного периода, снижению воспроизводительной способности. Развивающиеся при этом патологические процессы характеризуются снижением локального и общего иммунитета, активацией свободноради-кальных механизмов и перекисного окисления липидов, развитием интоксикации (И.М. Карпуть, 1990, 1993; В.И. Слободяник, 2005; А.Г. Нежданов, 2005; О.В, Распутина, 2007).

В настоящее время с целью повышения неспецифической резистентности организма, стимуляции воспроизводительной способности живот-

ных, профилактики и лечения акушерско-гинекологических заболеваний у коров широко применяются фармакологические препараты различных групп: адаптогены, антиоксиданты, иммуномодуляторы природного и синтетического происхождения, пробиотики, детоксиканты, а также так называемые «фармакологические стимуляторы» (А. Г. Нежданов, В. П. Иноземцев, 1996; B.C. Бузлама, С.М. Сулейманов, C.B. Шабунин, И.В. Трутаев,

H.П. Мещеряков, 2006, 2007; H.H. Шпоганяч, С.А. Семенютина, 2009).

Препараты данных групп повышают неспецифическую резистентность организма животных, экологически безопасны, однако для достижения оптимальных результатов зачастую требуется их сочетанное применение, что приводит к увеличению материальных и трудовых затрат, возникновению стресса у животных при проведении мероприятий по профилактике послеродовых осложнений у коров.

Исходя из вышеизложенного, актуальным направлением является разработка удобного в применении комплексного иммуномодулирующего препарата на основе экологически безопасных фармакологических компонентов для профилактики послеродовых заболеваний коров.

Цель и задачи исследований. Целью исследований явилась разработка, изучение и внедрение в практику ветеринарии нового комбинированного лекарственного препарата в форме раствора для инъекций, содержащего в качестве действующих веществ субстанцию АСД-2Ф, витамины А и Е и янтарную кислоту, предназначенного для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых заболеваний у коров.

Для достижения поставленной цели нами были определены следующие задачи:

I. Научно обосновать состав комбинированного иммуномодулирующего лекарственного препарата в форме раствора для инъекций АйСиДивит.

2. Изучить физико-химические свойства и стабильность препарата в процессе хранения. Определить показатели качества препарата и методы их контроля.

3. Изучить фармако-токсикологические свойства препарата в опытах на лабораторных животных и крупном рогатом скоте.

4. Установить оптимальную дозу и схему применения препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров.

5. Испытать в условиях производства эффективность препарата в качестве средства повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

6. Разработать и представить для согласования и утверждения проекты инструкции ио применению препарата в ветеринарии и технических условий (ТУ).

Научная новизна. Впервые разработан отечественный комбинированный лекарственный препарат в форме раствора для инъекций, содержащий в качестве биологически активных веществ субстанцию АСД-2Ф, витамины А, Е и янтарную кислоту, изучены его физико-химические, фармако-токсикологические свойства, иммуномодулирующая активность. В производственных условиях установлена профилактическая эффективность и целесообразность применения препарата для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

Практическая значимость. Разработан, стандартизирован и предложен для применения в ветеринарии новый комбинированный лекарственный препарат на основе субстанции АСД-2Ф, витаминов А, Е и янтарной кислоты, определены показатели и методы контроля качества, установлена его оптимальная доза и схема применения для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

На основании полученных результатов подготовлены проекты ТУ и инструкции по применению препарата, которые согласованы и утверждены Россельхознадзором в установленном порядке.

Апробации работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветерина-

рии» (Санкт - Петербург, 2009 г.); II Съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России «Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии» (Казань, 2009); III Международной научной конференции «Ветеринарные препараты: разработка, контроль качества и применение» (Украина, Львов, 2009); Заседаниях Ученого совета ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» ( Москва, 2008,2009, 2010 гг.). Основные положения, выносимые на защиту:

- требования к составу лекарственного препарата, показатели качества и методы их контроля, результаты изучения стабильности препарата в процессе хранения;

- характеристика фармакологических и токсикологических свойств препарата по результатам опытов на лабораторных животных и крупном рогатом скоте;

- результаты испытания в условиях производства эффективности применения препарата в целях профилактики послеродовых осложнений у коров;

- практические предложения по стандартизации, контролю качества и применению препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 7 - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 134 страницах печатного текста и состоит из введения, обзора литературы и собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и практических предложений. •

Список литературы содержит 218 источников, в том числе 158 на русском языке и 60 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 31 таблицей, 7 рисунками. Приложение на 11 страницах.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы

Экспериментальная часть работы выполнена в 2008-2010 гг. в отделе качества и стандартизации фармакологических лекарственных средств для животных ФГУ ((Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»), в животноводческих хозяйствах Московской, Рязанской и Смоленской областей РФ.

Объектом исследований служил комбинированный лекарственный препарат АйСиДивит на основе фармацевтической субстанции АСД-2Ф, витаминов А, Е и янтарной кислоты.

Фармако-токсикологичсские свойства препарата изучали в опытах на 139 белых мышах, 107 крысах, 12 морских свинках, 10 кроликах, 15 телятах и 80 коровах. Эффективность препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров в условиях производства испытали на 167 животных.

Для стандартизации и контроля качества препарата, а также определения срока его годности при хранении были предложены методы исследования качества препарата в соответствии с требованиями, предъявляемыми Государственной фармакопеей (ГФ XI издание) к растворам для инъекций, включающие: определение внешнего вида, цвета, прозрачности раствора, его плотности, рН, объема заполнения флаконов, стерильности, токсичности в тест-дозе, наличия механических включений, пирогенности, а также модифицированные нами методики определения подлинности фармацевтической субстанции АСД-2Ф, массовой доли свободных и связанных аминокислот, ретинола ацетата, альфа-токоферола, янтарной кислоты.

Определение внешнего вида, цвета, прозрачности и окраски препарата, рН, объема заполнения флаконов, стерильности, пирогенности и испытание на токсичность проводили согласно ГФ XI, т.1; плотность раствора при температуре 20°С - в соответствии с ГФ ХП, ч.1. Контроль препарата

на наличие механических включений - в соответствии с инструкцией по контролю на механические включения инъекционных лекарственных средств РД-42-501.

Для определения подлинности препарата был выбран метод тонкослойной хроматографии. В качестве подвижной фазы испытали 3 различные смеси, в качестве индикатора использовали раствор пингидрина. Общее содержание аминокислот, свободные аминокислоты, витамины А и Б, а также массовую долю янтарной кислоты определяли методом ВЭЖХ.

Стабильность препарата изучали в условиях естественного хранения при температуре 23±2°С в течение 2 лет.

Исследование фармако-токсикологических свойств препарата проводили в соответствии с методическими рекомендациями Фармакологического Государственного комитета «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2005 г.).

Изучение специфической активности препарата АйСиДивит проводили на мышах линии СВА массой 18-20 г.

Влияние препарата на антителообразование изучали методом локального гемолиза и в реакции гемагглютинации при иммунизации мышей эритроцитами барана (ЭБ). Титры агглютининов определяли в микроварианте прямой реакции гемагглютинации.

О влиянии препарата на клеточный иммунитет судили по индукции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и по изменению количества ауторозеткообразующих клеток (ауто-РОК) по ^пс1а1 М. с! а! .(1972), в качестве эритроцитарного маркера в этом тесте применяли 1,5 % взвесь аутологичных эритроцитов.

Для определения параметров острой токсичности исследуемого препарата использовали белых мышей обоего пола массой 19-21 г и белых крыс массой 200-240 г. Перед опытом животных в течение 6 часов выдерживали на голодной диете, после чего взвешивали и распределяли по группам.

Для установления параметров острой токсичности препарат вводили белым мышам однократно (в максимальной дозе дробно, с интервалом 1 час) в желудок с помощью шприца с оливой в дозах от 1 до 25 мл/кг массы животного (6 доз), а также белым крысам однократно подкожно в область бедра (в максимальных дозах - с обеих сторон тела) в дозах ог 0,1, до 30 мл/кг массы.

Каждую дозу препарата испытывали на 7 животных, контрольным животным вводили воду для инъекций в том же объеме. Наблюдения проводили в течение 14 суток; в первые сутки наблюдение вели непрерывно. Регистрировали общее состояние животных, поведение, интенсивность и характер двигательной активности, координацию движений, состояние кожно-волосяного покрова, слизистых оболочек, количество и консистенцию фекальных масс, частоту мочеиспускание и окраску мочи, потребление корма и воды. Регистрировали сроки развития интоксикации и гибели мышей, проводили макроскопическое исследований внутренних органов и тканей в месте введения препарата (степень кровенаполнения, наличие кровоизлияний, изъязвлений слизистой оболочек и др.). Оценку степени опасности лекарственного средства проводили согласно ГОСТ 12.1.007-76.

Исследования субхронической токсичности препарата проводили на белых мышах исходной массой 19 + 23 г, из которых сформировали 4 группы по 10 голов в каждой. Препарат вводили животным в желудок ежедневно в течение 15 суток в дозах 0,1 и 0,3 мл/кг массы. Животным контрольной группы вводили физиологический раствор в объеме 0,5 мл.

В процессе опыта ежедневно регистрировали массу мышей, характер, степень и обратимость патологических изменений. На 16 сутки мышей де-капитировали и отбирали пробы крови (с и без антикоагулянта) для последующих гематологических и биохимических исследований. Извлекали печень, почки, сердце, лёгкие, селезёнку и проводили взвешивание органов.

Состояние гемопоэза оценивали по количеству эритроцитов и лейкоцитов, которое определяли с помощью камеры Горяева, уровень гемогло-

бина - фотометрическим методом. Биохимические исследования проводили на анализаторе «Бреко! 220/221» (Германия).

Влияние препарата на антитоксическую функцию печени изучали методом гексеналовой пробы (Д.Г. Розин, 1964) на 36 белых крысах-самцах, которых распределили на опытную и контрольную (по 18 животных) группы. Животным опытной группы вводили препарат в дозе 0,3 мл/кг. Крысам контрольной группы препарат не вводили. Через 1,5; 3 и 6 часов животным обета групп вводили гексенал внутрибрюшинно в дозе 60 мг/кг в объеме 1 мл свежеприготовленного раствора на 100 г массы животного. Продолжительность сна учитывали в минутах от момента развития бокового положения до первых попыток крыс принять положение «спиной вверх».

Для определения массового коэффициента печени на 1, 3 и 7 сутки белых крыс опытной и контрольной групп декапитировали, вскрывали брюшную полость, извлекали печень.

Изучение раздражающего действия на кожу провели на 10 кроликах массой 1,9-2,2 кг. Препарат наносили на выстриженный участок кожи (10 см2) боковой поверхности туловища 5 кроликам в дозе 1 мл. Остальные животные служили контролем (наносили дистиллированную воду). Экспозиция составляла 4 часа, после чего кожу аккуратно протирали ватным тампоном, смоченным дистиллированной водой. Реакцию оценивали через 1 и 16 часов после нанесения препарата.

Для изучения раздражающего действия на слизистые оболочки препарат однократно вносили в конъюнктивальный мешок левого глаза кроликов (10 голов) в количестве 1 капли. Правый глаз служил контролем, и в него вносили 1 каплю физиологического раствора. Оценку раздражающего действия проводили в баллах через 15 минут, 2 часа (быстрая реакция) и через 24 - 48 часов (гиперчувствительность замедленною типа) по изменению кровенаполнения конъюнктивы, наличию лакримации и состоянию века и роговицы.

Аллергизирующие свойства препарата тестировали методом шста-минного шока (М.Л. Гершанович, 1954) на 12 морских свинках массой 250 - 300 г. Шести подопытным морским свинкам перорально вводили препарат в дозе - 0,1 мл/кг. Контрольным животным препарат не применяли. Через 6 и 12 часов всем животным подкожно вводили гистамин в дозе 5 мг/кг. Регистрировали время наступления гибели животных.

В основу выявления возможного тератогенного и эмбриотоксическото действия препарата были положены «Методические рекомендации по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств» (МЗ РФ, 1986) и «Методические указания по тестированию тератогенной активности химических веществ» (А.П. Дыбан и др., 1970).

Эксперименты провели на 72 беременных самках белых крыс с установленным сроком начала беременности, которых разделили на 6 групп (3 контрольных и 3 опытных). Препарат вводили крысам опытных групп виутрижелудочно в трехкратной терапевтической дозе (0,1 мл/кг) массы животного по следующей схеме: с 1 по 7 сутки беременности (ежедневно); с 8 по 14 (ежедневно) и с 1 по 19 сутки беременности (ежедневно). Учёт результатов эксперимента проводили после декапитирования подопытных и контрольных крыс на 20 сутки беременности. При вскрытии в яичниках подсчитывали количество резорбций, жёлтых тел, в матке - число мест имплантаций, живых и погибших плодов. Оценивали анатомическое строение и определяли массу и размеры плодов.

Влияние препарата на организм крупного рогатого скота изучали в ЗАО «Дашковка» Серпуховского района Московской области на 15 клинически здоровых телятах чёрно-пёстрой породы 2-месячцого возраста, которых разделили на 3 группы (по пять голов в каждой). В период опыта всех животных содержали в одинаковых условиях, на одинаковом рационе.

Препарат вводили телятам внутримышечно один раз в сугки в течение 30 дней: первой опытной группе животных в дозе 0,03 мл/кг массы, второй

опытной группе - в дозе 0,1 мл/кг массы. Третьей (контрольной) группе животных препарат не вводили.

За животными вели наблюдение в течение опыта и 30 дней после его окончания. Определяли общий клинический статус животных, оценивая температуру тела, количество сердечных толчков, частоту дыхательных движений, а также состояние кожного покрова, видимых слизистых оболочек, состояние тканей в месте введения препарата, подвижность животных, приём ими корма и воды. Проводили морфологический, биохимический анализ крови и исследование мочи до и после введения препарата.

Гематологические исследования включали: подсчёт количества эритроцитов и лейкоцитов (в камере Горяева), определение количества гемоглобина (гемометром Сали). Для вычисления лейкограммы кровь фиксировали на мазках, которые окрашивали по Романовскому - Гимза, определяли также лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки крови.

Биохимические показатели крови, включая аланин- и аспартатаминотрансферазу, щелочную фосфатазу, билирубин общий и прямой, креатинин, мочевину, мочевую кислоту, триглицериды, белок, определяли общепринятыми методами, а также на анализаторах марок «8тсЬгоп-4», «Ьуазуа», «ЕЬАМ-Апа^гег 4145».

Анализ физико-химических и биохимических свойств мочи включал определение цвета, запаха (органолептически), рН (с помощью универсальной индикаторной бумаги), сахара (экспресс методом), белков (с суль-фаллициловой кислотой), ацетоновых тел (с реактивом Лестраде) и инди-кана (с перманганатом калия; проба Яффе).

Определение оптимальной профилактической дозы препарата проводили в ЗАО «Дашковка» на 40 глубоко стельных коровах черно-пестрой породы разного возраста, разделенных по принципу аналогов на 4 группы по 10 голов в каждой. Коровам 1, 2 и 3 опытных групп вводили препарат внутримышечно в дозах: 10, 15 и 20 мл на животное в день отела, на 3 и 5 сутки после него. Животные 4 группы служили контролем.

Эффективность лекарственного средства оценивали по общему клиническому состоянию животного, времени отделения последа, характеру течения послеродового периода, наличию послеродовых заболеваний.

Изучение эффективности препарата для профилактики задержания последа у коров проводили в ОАО «Авангард» Рязанской области на 40 коровах черно-пестрой породы массой 500 кг, с годовой продуктивностью выше 5 тыс. кг молока. По принципу аналогов были сформированы 2 группы животных, по 20 коров в каждой. Коровам контрольной группы применяли химиотерапевтические препараты (окситоцин, антибиотики широкого спектра действия) по принятой в хозяйстве схеме. Коровам опытной группы на фоне применяемой схемы дополнительно вводили испытуемый препарат - трехкратно, внутримышечно в оптимальной дозе 15 мл (в день отела, на 3 и 5 сутки после него).

За животными вели наблюдение, оценивая клиническое состояние после отела, течение послеродового периода, учитывая число коров с задержанием последа и послеродовыми осложнениями.

Гематологические и биохимические исследования крови проводили через 10-12 дней после отела, затем на 19-21 и 28-30 дни. Определяли следующие показатели: количество эритроцитов, лейкоцитов (в камере Горяе-ва), уровень гемоглобина (по Сали), скорость оседания эритроцитов, лейкоцитарную формулу; лютеинизирукнций гормон, эстрадиол, прогестерон (методом твердофазного иммуноферментного анализа по Головаченко ВА, Полыцеву Д.Г., 2000), общий белок (спектрофотометрическим и хромато-графическим методом), мочевину (цветная реакция с диацетилмоноокси-мом), креатинин (по цветной реакции Яффе, методом Поппера), общий кальций (по Вичеву, Каракашеву), аспартатаминотрансферазу и аланина-минотрансферазу.

Данные показатели были выбраны с целью изучения функционального состояния желез внутренней секреции (гипофиза, яичников), печени, кро-

ветворных органов, а также для определения наличия и динамики развития воспалительного процесса в матке после применения препарата.

Производственное испытание препарата проводили в ЗАО «Дашков-ка» и ФГУ «Смоленское» на 167 коровах черно-пестрой породы.

В каждом хозяйстве по принципу аналогов были сформированы 2 группы животных. Коровам контрольной группы применяли химиотера-певтические препараты (антибиотики широкого спектра действия и окси-тоцин) по принятой в хозяйстве схеме. Коровам опытной группы в день отела, на 3 и 5 сутки после него дополнительно вводили внутримышечно испытуемый препарат в дозе 15 мл на животное.

Профилактическую эффективность препарата оценивали на основании общего клинического состояния животных, случаев задержания последа, послеродовых осложнений.

Полученные данные были проанализированы методом математической статистики с вычислением средней арифметической величины (М), её ошибки (+111) и уровня значения величины Р с помощь программы статистического анализа BioStat 2008 AnalystSoft Inc.

Результаты исследований

Для характеристики качественных и количественных показателей препарата были предложены показатели и нормы, а также методы контроля, представленные в Таблице 1.

Показатели качества препарата и методы их контроля Таблица 1

Наименование показателя Метод Характеристика и норма

Внешний вид, цвет, прозрачность Визуально, ГФ XI, т.1. Прозрачная жидкость светло-желтого цвета

Окраска раствора Визуально, ГФ XI, т.1. Не должна превышать эталон 7 б

Плотность, г/см3 при 20°С Ареометром, ГФ XII, ч. 1 1,070-1,090

Концентрация водородных ионов (рН) Потенциомет-рически, ГФ XI, т.1. 5,0-6,0

Подлинность субстанции АСД-2Ф Тонкослойная хромато1ра-фия Должен выдерживать испытание

Массовая доля аминокислот мкг/см3, не менее: свободных связанных ВЭЖХ 20 150

Массовая доля ретинола ацетата, ЕД/см3 ВЭЖХ 15 000+ 1500

Массовая доля альфа-токоферола ацетата, мг/см3 ВЭЖХ 10,0+1,0

Массовая доля янтарной кислоты, мг/см3 ВЭЖХ 5,0 + 0,5

Объём заполнения флаконов, см3 ГФ XI, т.1 Должен быть не меньше номиначьного

Стерильность ГФ XI Должен быть стерильным

Токсичность в тест дозе 0,5 см3/мышь ГФ XI Должен быть не токсичным

Механические включения Инструкция РД-42-501 Должен выдерживать испытание

Пирогенность ГФ XI Должен быть апиро-генным

Для определения подлинности препарата методом тонкослойной хро-

матографии в насыщенной хроматографической камере на пластинках Сорбфил УФ-254 в качестве подвижной фазы была выбрана смесь н-бутанол - пиридин - уксусная кислота - вода в соотношении 13:2:0,6:3,0, а в качестве индикатора - раствор нингидрина.

Подготовка проб для определения общего содержания аминокислот заключалась в гидролизе образца соляной кислотой (с = 6 моль/л) в течение 24 часов при температуре 110°С. Гидролизат доводили до рН 2,20. Свободные аминокислоты экстрагировали из образцов препарата разбавленной соляной кислотой, затем осаждали выделенные азотистые макромолекулы сульфосалициловой кислотой и удаляли их фильтрацией. Фильтрованный раствор доводили до рН 2,20. Аминокислоты разделяли ионообменной хроматографией и определяли нингидриноЕой реакцией со спектрофотометрическим детектированием при 570 нм.

При изучении стабильности опытных серий препарата в процессе естественного хранения установлено, что срок годности препарата при комнатной температуре составляет 2 года. В течение этого периода качественных и количественных изменений препарата не происходит.

При изучении специфической активности определяли количество ан-тителопродуцентов (АОК) в селезенке при внутримышечном введении препарата мышам в дозе 0,03 мл/кг одновременно с внутрибрюшинной иммунизацией их эритроцитами барана индекс стимуляции (отношение числа АОК в опыте к числу АОК контроле) составил 1,5±0,04 (Р < 0,05).

Судя по полученным данным, при введении препарата активизируется трансформация В-лимфоцитов в АОК. Гуморальная антителопродукция к тимус-зависимому антигену (ЭБ) обусловлена кооперативным взаимодействием В-лимфоцитов и Т-хелперной популяцией иммунокомпетентных клеток (Р.В. Петров, А.И. Чередеев, 1974).

Результаты определения изменения титров антител в сыворотке крови мышей при внутримышечном введении препарата одновременно с внутрибрюшинной иммунизацией 2 % взвесью ЭБ (индуктивная фаза иммунного ответа) увстановлено, что на 7-й день после введения препарата татры агглютининов в сыворотке крови мышей 1-ой группы достигли 3,7±0,1 Ьо£2. У контрольных животных этот показатель был на уровне 3,1±0,1 (Ьо£2). Таким образом, под влиянием препарата у мышей наблюдали активизацию

гуморального иммунного ответа, индекс стимуляции составил 1,2, что указывает на наличие иммуностимулирующих свойств.

При изучении действия препарата на клеточное звено иммунного ответа установили, что препарат в дозе 0,03 мл/кг вызывает у мышей индукцию ГЗТ, т.е. местную воспалительную реакцию, которая обусловлена инфильтрацией клетками воспалительного очага, а не сосудистой реакцией (Ройт И. 1991). У мышей это полиморфноядерные лейкоциты, мононук-леары, которые через несколько дней превращаются в тканевые макрофаги. Внутримышечное введение препарата мышам с одновременной внут-рибрюшинной иммунизацией взвесыо ЭБ и последующее (на 5-е сутки) введение разрешающей дозы ЭБ в подушечки правых лап (в коллатеральную лапу вводили физиологический раствор) привело через сдвигу индекса воспаления (ИВ). ИВ в опытной группе был равен 8±0,2, что достоверно отличалось от показателей контрольных животных - 2,7±0,1 (Р < 0,05). Интенсивность синтеза и секреции лимфоцитами факторов клеточного иммунитета соответствует степени выраженности воспалительной реакции в месте введения разрешающей дозы антигена (ЭБ) и характеризует активность популяции хелперных клеток, ответственных за проявление реакции гиперчувствительности замедленного типа.

В результате определения параметров острой токсичности на белых мышах установлено, что согласно гигиенической классификации ГОСТ 12.1.007-76, по степени воздействия на организм АйСиДивит относится к 4 классу опасности - «вещества малоопасные»: ЬВ50 при введении в желудок белым мышам составила более 23 400 мг/кг массы, а при подкожном введении белым крысам - 27000 мг/кг.

При введении препарата в максимальных дозах отмечен выраженный диуретический эффект, картина интоксикации развивалась в течение первых минут и характеризовалась легким угнетением животных. При вскрытии животных патологических изменений слизистой желудка и кишечника,

брыжеечных сосудов, печени и селезенки, признаков воспаления в тканей в месте введения препарата не отмечали.

В процессе изучения субхронической токсичности препарата на белых мышах при внутрижелудочном введении табели животных не отмечали. Клиническое состояние животных не изменялось, в течение эксперимента подопытные мыши были активны, подвижны, потребление воды и корма в опытных и контрольных группах было одинаковым.

Достоверного различия в приросте массы тела подопытных и контрольных животных не наблюдали. Морфологические и биохимические показатели крови у опытных и контрольных мышей находились на одном уровне в пределах физиологической нормы для данного вида животных.

Во всех тестируемых дозах препарат не оказал статистически достоверного влияния на концентрацию белка, холестерина, креатинина, а также активность ферментов аспартат- и аланинамино-трансферазы, щелочной фосфатазы, активность которых является показателем функционального состояния печени и почек. Масса внутренних органов подопытных и контрольных животных достоверно не отличалась.

Результаты изучения влияния препарата на массу и функции печени представлены в Таблицах 2 и 3.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что препарат не оказывает влияния на обезвреживающую функцию и массовый коэффициент печени крыс.

Влияние препарата на антитоксическую функцию печени крыс Таблица 2

Время после введения препарата, час Длительность гексеналового сна, мин Р

Опытная группа Контрольная группа

1,5 26,20+0,52 25,40+1,16 >0,05

3 28,42+2,25 24,20+1,22 <0,05

б - 25,540+2,10 24,45+1,03 >0,05

Влияние препарата на массовый коэффициент печени крыс Таблица 3

Вводимая доза Период после введения Массовый коэф- Р

препарата,мл/кг препарата, сутки фициент печени

0,1 1 32,82+0,57 <0,05

0,1 3 31,23+0,26 >0,05

0,1 7 31,71+0,29 >0,05

контроль 1 32,63 ±1,48 -

контроль 3 33,10+1,31 -

контроль 7 32,00+0,93 -

Результаты изучения местно-раздражающего действия препарата при нанесении на кожу и слизистые оболочки показали, что при 4-часовой аппликации препарата на кожу кроликам не отмечено каких-либо изменений в состоянии кожного покрова животных.

При инсталляции препарата в конъюнктивальный мешок через 15 минут и 2 часа наблюдалось слабое покраснение конъюнктивы, а через 24—48 часов признаков раздражения слизистой оболочки глаз ни у одного из подопытных кроликов отмечено не было. Суммарный балл выраженности раздражающего эффекта составил 1 («слабое раздражение»). Экспериментальные данные по изучению аллергизирующего действия на морских свинках показывают, что препарат в дозе 0,1 мл/кг не обладает антигистаминной активностью, так как не предотвращает смерть животных от введённой дозы шетамина, и не ускоряет её, что указывало бы на сенсибилизирующее действие.

Анализ результатов изучения эмбриотоксического и тератогенного действия показал, что внутрижелудочное введение беременным крысам препарата в трехкратно увеличенной дозе 0,1 мл/ кг массы в различные сроки беременности, включая критические, не оказывает отрицательного влияния на эмбриональное развитие плода.

При введении препарата с 1 по 7 дни беременности предимплантационная, постимплантационная и общая эмбриональная

смертность плодов, составили 8,7; 7,4 и 15,3% против соответствующих показателей в контроле (9,8; 7,8 и 18,6%). При введении препарата в течение всей беременности предимплантационная смертность составила 7,2% против 11,8% в контроле; постимплантационная смертность - 10,7% против 7,8% в контроле; общая эмбриональная - 17,1% против 18,6% в контроле (Р>0,05). Такие показатели, как число, масса, размеры плодов и плодоплацентарный коэффициент в опытных и контрольных группах также не имели статистических различий (Р>0,05). При визуальном осмотре плодов случаев уродств, аномалий развития внутренних органов не выявлено.

В результате изучения влияния препарата на организм крупного рогатого скота установлено, что препарат в дозах 0,03 мл/кг и 0,1 мл/кг не вызывает отклонений в физиологическом состоянии подопытных телят по сравнению с контрольными. Шерстный покров животных был гладким, блестящим и упругим, слизистые оболочки ротовой полости и конъюнктивы глаз - розовыми. Животные легко перемещались по загону, охотно поедали корм, температура тела, число сердечных толчков и дыхательных движений у спокойно стоящих животных не выходило за пределы показателей физиологической нормы

Отсутствие токсического действия препарата при введении в дозах 0,03 мл/кг и 0,1 мл/кг массы подтверждается результатами гематологических исследований. Установлено, что количественный и качественный состав периферической крови телят опытных и контрольных групп в целом соответствовал физиологической видовой норме.

Введение телятам препарата привело к увеличению бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови по сравнению с контролем на 23 и 18% соответственно, что свидетельствует о стимулирующем влиянии препарата на неспецифическую резистентность.

Результаты исследования мочи показали, что функциональное состояние почек по исследованным показателям было неизменным.

На основании результатов проведенных исследований можно сделать обоснованный вывод о хорошей переносимости препарата крупным рогатым скотом в рекомендуемой (0,03 мл/кг) и трехкратно увеличенной (0,1 мл/кг) дозах, а также о стимулирующем влиянии препарата на неснецифическую резистентность.

Результаты испытания по подбору оптимальной дозы показали, что эффективность препарата в дозе 10 мл на животное оказалась недостаточной и составила 80%. Эффективность препарата в дозах 15 и 20 мл на животное составила 100%, что позволяет рекомендовать дозу 15 мл как оптимальную для профилактики задержания последа у коров.

Показатели течения послеродового периода у коров при применении АйСиДивита в дозе 15 мл на животное представлены в Таблице 4 (Р<0,05). Влияние препарата на течение послеродового периода у коров Таблица 4

Показатели Контрольная группа Опытная группа

Время отделения последа, час 12,5±0,5 4,1±0,2

Задержание последа, % 40 0

Послеродовая субинволюция, эндометрит, % 30 0

Проявление половой охоты, дней после отела 69,1±13,3 60,8±6,9

Сервис-период, дней 76,5±23,2 69,8±20,1

Индекс осеменения 1,8 1,2

У всех животных, которым на фоне применяемой в хозяйстве схемы профилактики вводили препарат в дозе 15 мл на животное, отмечалось своевременное отделение последа (в течение 4-6 часов после отела), отсутствие побочных эффектов и послеродовых осложнений. Коровы опытной группы раньше проявляли признаки восстановления половой цикличности (признаки половой охоты отмечены в среднем на 8 дней раньше, чем у животных контрольной группы).У коров опытной и контрольной 1рупп сервис-период составил 69,8 и 76,5 дней, а индекс осеменения - 1,2 и 1,8 соответственно (средний показатель по хозяйству - 2,2-2,4).

В результате изучения эффективности препарата для профилактики задержания последа у коров при трехкратном применении в день отела, на 3 и 5 сутки после него АйСиДивита в дозе 15 мл/животное на фоне применяемой в хозяйстве схемы профилактики (антибиотики, окситоцин) установлено, что у животных опытной и контрольной групп в первые дни после отела наблюдается увеличение скорости оседания эритроцитов, а также количества лейкоцитов, при этом отмечается общий лейкоцитоз, что говорит о наличии воспалительного процесса в организме. Впоследствии, на 19-20, а также 29-30 дни эти показатели приходят в норму у животных опытной группы без применения специфической терапии, а у животных контрольной группы в этот период все еще отмечается лейкоцитоз.

Исследованные нами биохимические показатели сыворотки крови животных опытной и контрольной групп находились в пределах физиологической нормы. У коров обеих групп наблюдалось повышение содержания общего белка и уменьшение содержания мочевины в сыворотке крови в послеродовой период, однако эти изменения находились в пределах физиологической нормы.

У животных опытной группы наблюдалось повышение уровня лю-теотропного гормона к 19-21 дню после родов и резкое снижение его к 2930 дню, что может указывать на постепенное восстановление половой цикличности в первый месяц после отела. У животных контрольной группы отмечалось снижение уровня содержания ЛГ на протяжении 30 дней после отела. У всех животных регистрировали постепенное снижение уровня эстрогенов и увеличение уровня прогестерона на протяжении месяца после отела.

Влияние препарата на течение послеродового периода у коров Таблица 5

Показатели Контрольная группа Опытная группа

Время отделения последа, час 12,0±0,5 4,1 ±0,2

Задержание последа, % 30 0

Послеродовая субинволюция, эндометрит, % 20 0

Проявление половой охоты, дней после отела 68,0±3,0 60,1±1,0

Сервис-период, дней 80,5±2,2 69,9±0,8

Индекс осеменения 2,0 1,1

Р<0,05

У всех коров опытной группы отмечалось своевременное отделение последа, отсутствие послеродовых осложнений, признаки половой охоты проявились в среднем на 8 дней раньше, чем у животных контрольной группы. Таким образом, введение препарата в дозе 15 мл на животное в день отела, на 3 и 5 сутки после родов позволяет предупредить послеродовые заболевания и сократить продолжительность сервис-периода у высокопродуктивных коров.

Результаты производственного испытания эффективности препарата для профилактики задержания последа и послеродовых осложнений у крупного рогатого скота представлены в таблице 6.

Эффективность применения препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров Таблица 6

Группа Количество Доза пре- Задержание Послеродовой

животных животных парата, мл последа эндометрит

в группе на животное Кол-во % Кол-во %

ЗАО «Дашковка»

Опытная 18 15 1 5,5 6 33

Контрольная 19 - 8 42 13 68

ОАО «Смоленское»

Опытная 80 15 2 2,5 2 2,5

Контрольная 50 - 20 40 16 32

Из таблицы видно, что обработка коров препаратом профилактировала задержание последа у коров (2,5 - 5,5 % против 40-42% в контроле), а также заболеваемость животных послеродовым эндометритом. В процессе испы-

тания препарата во всех опытных хозяйствах побочных явлений и осложнений у животных при применении АйСиДивита не наблюдалось.

Таким образом, на основании полученных нами экспериментальные данных по оценке фармако-токсикологических свойств и положительных результатов испытания эффективности в условиях производства, комбинированный препарат на основе витаминов А и Е, субстанции АСД-2Ф, янтарной кислоты может быть рекомендован для повышения неспецифической резистентности животных, профилактики задержания последа и послеродовых осложнений у коров.

ВЫВОДЫ

1. Теоретически обоснован и апробирован состав и лекарственная форма комбинированного иммуномодулирующего препарата на основе фармацевтической субстанции АСД-2Ф, витаминов А и Е, янтарной кислоты с торговым наименованием АйСиДивит; изучены его физико-химические свойства, определены качественные и количественные показатели и методы их контроля для стандартизации и экспертизы качества препарата.

2. АйСиДивит оказывает стимулирующее влияние на иммунную систему, в частности, увеличивает количество антигелопродуцентов (АОК) в селезенке мышей в 1,5 раза и титры агглютининов в сыворотке крови мышей в 1,2 раза; повышает активность иммунокомиетентных клеток (индекс воспаления в опытной группе мышей - 8+0,2; в контроле - 2,7+0,1), бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови крупного рогатого скота.

3. Но степени воздействия на организм согласно ГОСТ 12.1.007-76 препарат относится к 4 классу опасности - «вещества малоопасные»: ЛД50 для белых мышей при введении в желудок составляет более 23 400 мг/кг, ЛД50 для белых крыс при подкожном введении - более 27 000 мг/кг массы животного. Препарат не обладает аллергизирующим, а также раздражающим действием на кожу, слабо и кратковременно раздражает слизистые оболочки глаз, не вызывает воспаления тканей в месте инъекции.

4. АйСиДивит не проявляет эмбриотоксического и тератогенного действия при ежедневном внутрижелудочном введении крысам в трехкратной терапевтической дозе в разные сроки беременности, включая критические периоды эмбриогенеза.

5. В субхронических экспериментах на белых мышах при ежедневном введении в желудок в дозах 0,1 и 0,3 мл/кг массы препарат не вызывает гибели и достоверных изменений в клиническом состоянии животных, приросте массы тела, относительной массы внутренних органов, гематологических и биохимических показателей, а также нарушений функций печени и почек.

6. Препарат хорошо переносится крупным рогатым скотом, его введение телятам в дозах 0,03 (терапевтическая доза) и 0,1 мл/кг массы не вызывает статистически достоверных изменений в физиологическом состоянии, морфологических показателях крови и физико-химических показателях мочи.

7. В дозе 15 мл/животное при внутримышечном введении в день отела, на 3 и 5 сутки после отела АйСиДивит в комплексе с антибактериальными средствами достоверно ггрофилактирует задержание последа и послеродовые осложнения у коров.

8. Клиническими испытаниями подтверждена высокая эффективность АйСиДивита для профилактики послеродовых осложнений у коров при его применении в рекомендуемой дозе в комплексе с традиционно применяемыми антибактериальными средствами (эффективность составила 92-96%).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для применения в ветеринарии предложен комбинированный лекарственный препарат на основе фармацевтической субстанции АСД-2Ф, янтарной кислоты, витаминов А и Е в форме раствора для инъекций, с торговым наименованием АйСиДивит. Установлены оптимальная доза и схема применения препарата для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

2. Определены показатели качества и методы их контроля; разработаны и согласованы в установленном порядке технические условия, регламентирующие требования к используемому сырью, производству, контролю и хранению препарата.

3. Результаты исследований нашли отражение в инструкции по применению АйСиДивига для повышения резистентности, лечения и профилактики желудочно-кишечных, респираторных, гинекологических заболеваний и регуляции репродуктивных функций сельскохозяйственных животных и собак, утвержденной Россельхознадзором.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Кугелева Т.И. Изучение переносимости препарата Айсидивит на лабораторных животных / Абрамов В.Е., Кугелева Т.И.// Ветеринарная патология. - 2008. - № 3 (26). - С. 84 - 86.

2. Кугелева Т.И. Иммунотропная активность препарата Айсидивит. / Кугелева Т.Н. Курочкина К.Г. // Ветеринарная патология. - 2008. - № 3 (26). - С. 104 - 105.

3. Кугелева Т.И. Эффективность АйСиДивита при эндометритах и маститах коров. / Кугелева Т.И., Абакин С.С., Киц Е.А., Пономаренко Д.А., Мальцев А.Н. //Ветеринария. - 2009. -№ 1. - С. 38 - 40.

4. Кугелева Т.И. Айсидивит для профилактики послеродовых осложнений у коров. / Кугелева Т.И., Болотин В.М., Кобельков A.M., Новиков Д.Д. // Ветеринария. - 2009. - № 4. - С. 35.

5. Кугелева Т.И. Профилактика эмбриональной гибели у высокопродуктивных коров. / Кугелева Т.И., Абрамов В.Е. // Мат. Всерос. съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии». - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 95.

6. Кугелева Т.И. Эмбриональная смертность у коров и способы ее профилактики // Мат. II Съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России «Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии». - Казань. - 2009. -С. 439 - 445.

7. Кугелева Т.И. Применение препарата АйСиДивит для профилактики бесплодия крупного рогатого скота. / Кугелева Т.И., Абрамов В.Е., Енгашев C.B. // Научно-технический бюллетень. - Львов. - 2009. -Выпуск 10. - № 3.

8. Кугелева Т.И. К вопросу определения показателей качества субстанции АСД-2Ф. / Кугелева Т.И., Абрамов В.Е., Сироткина В.П., Касперович В.П. //Ветеринария. - 2010. - №2. - С. 42.

9. Кугелева Т.И. Опыт применения препарата АйСиДивит в комбинированной схеме профилактики послеродовых осложнений у коров. // Ветеринарная патология. - 2010. -№2. - С. 65-68.

10. Кугелева Т.И. Айсидивит для профилактики послеродовой патологии крупного рогатого скота. / Енгашев C.B., Даугалиева Э.Х., Новак М.Д., Абрамов В.Е., Кугелева Т.И. // Ветеринария. - 2010. - №5. - С. 18.

11. Кугелева Т.И. Эффективность применения препарата Айсидивит для профилактики послеродовых осложнений у коров // Тез. Докл. Междунар. научной конференции «Лекарственные препараты для животных (разработка, производство, эффективность и качество)», поев. 80-летию организации ВГНКИ. - М. -2011. - С. 162-164.

ВНИИВСГЭ, 2011 Г. Москва, Звенигородское ш., д.5 Зак. 381/4, тираж 100 экз

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кугелева, Татьяна Игоревна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Средства повышения неспецифической защиты организма и профилактики послеродовых заболеваний крупного рогатого скота

1.2. Теоретическое обоснование состава препарата АйСиДивит

1.2.1. Фармакологический биостимулятор - антисептик-стимулятор Дорогова (АСД)

1.2.2. Антиоксиданты - витамины А, Е, янтарная кислота

1.2.3. Обоснование выбора лекарственной формы

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Показатели качества, методы контроля и стабильность препарата в процессе хранения

2.2.2. Фармако-токсикологическая характеристика препарата

2.2.2.1. Специфическая активность

2.2.2.2. Острая токсичность в опытах на лабораторных животных

2.2.2.3. Субхроническая токсичность в опытах на лабораторных животных

2.2.2.4. Влияние на антитоксическую функцию и массовый коэффициент печени у крыс

2.2.2.5.Местно-раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки

2.2.2.6. Аллергизирующее действие

2.2.2.7. Эмбриотоксические и тератогенные свойства

2.2.3 Влияние на физиологическое состояние организма и уровень неспецифической резистентности крупного рогатого скота

2.2.4 Изучение эффективности препарата 80 2.2.4.1. Определение оптимальной дозы для профилактики задержания последа и послеродовых заболеваний у крупного рогатого скота

2.2.4.2. Эффективность препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров

2.2.4.3. Производственное испытание эффективности препарата для профилактики послеродовых осложнений у коров

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4. ВЫВОДЫ

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров"

Успешное ведение молочного скотоводства основано на максимальном и рациональном использовании репродуктивного потенциала маточного поголовья. Однако в современных, условиях животные постоянно- подвергаются воздействию различных стресс-факторов, вызывающих вторичные иммунодефициты, которые способствуют появлению заболеваний различной этиологии. (B.C. Бузлама, 2000; Ю.Н. Федоров, 2006; Ю.Н. Масьянов, 2009).

Исследованиями В.A. Mallard (1998) показано, что механизмы защиты организма коров и нетелей наиболее уязвимы в период, охватывающий последние 3 недели стельности и первые 3 недели после родов. При этом снижается неспецифическая резистентность и реактивность иммунной системы, что обуславливает возникновение послеродовых заболеваний. Стресс, обусловленный стельностью, отелом и лактацией, может способствовать снижению неспецифической резистентности и повышению заболеваемости в послеродовой период.

По данным зарубежных авторов, задержание последа отмечается у 339% отелившихся животных (W.M. Ahmed,1999; М. Drillich, 2006; J.L. Stephen, 2008). По данным отечественных авторов, заболеваемость маточного поголовья акушерско-гинекологической патологией составляет от 15 до 60% (И.С. Коба, А.Н. Турченко, 2001; В.П. Иноземцев, И.И. Балковой, А.Г. Нежданов; 2000).

Задержание последа приводит к дальнейшим заболеваниям половой системы, в том числе, к различным формам метрита (М.Т. Correa, 1993), длительной ановуляции после отела (F.A. Fonseca, J.H. Britt, 1983; P.A. Oltenacu, J.H. Britt, 1983), многократным повторным осеменениям, удлинению межотельного периода, снижению воспроизводительной^ способности. Развивающиеся при этом патологические процессы характеризуются снижением локального и общего иммунитета, активацией свободнорадикальных механизмов и перекисного окисления липидов, развитием интоксикации (И.М. Карпуть, 1990, 1993; В.А. Томчук, Д.А. Мельничук, 2003; В.И. Слободяник, 2005; А.Г. Нежданов, 2005; О.В. Распутина, 2007).

В настоящее время- с целью повышения неспецифической резистентности организма, стимуляции воспроизводительной способности животных, профилактики и лечения акушерско-гинекологических заболеваний у коров широко применяются фармакологические-препараты различных групп: адаптогены (препараты элеутерококка, женьшеня, левзеи, витамины Е, С, группы В, фумаровая и янтарная кислоты), антиоксиданты (витамины А, Е, К, аминокислоты, биогенные амины), иммуномодуляторы природного (полисахариды бактерий и дрожжей, нуклеиновые кислоты, интерферон, вакцины, тимозин) и синтетического происхождения (производные пурина, пиримидина, имидазола, тимоген, неоген и др.), пробиотики (бифидобактерин, ацидофилин, пропиовит), детоксиканты (микрокристаллическая целлюлоза, препараты гуминовых кислот, лигнина, целлюлозы и энтеросорбенты), а также так называемые «фармакологические стимуляторы»: гидролизат плаценты денатурированный эмульгированный (ПДЭ), гамавит, фоспренил, овариолизат, эмбриолизат, белково-витаминные смеси, Антисептик Стимулятор Дорогова (АСД) и другие (А. Г. Нежданов, В. П. Иноземцев, 1996; B.C. Бузлама, С.М. Сулейманов, C.B. Шабунин, И.В. Трутаев, Н.П. Мещеряков, 2006, 2007; Н.Н. Шпоганяч, С.А. Семенютина, 2009).

Цель и задачи исследований. Целью исследований явилась разработка, изучение и внедрение в практику ветеринарии, нового комбинированного лекарственного препарата в форме раствора для инъекций, содержащего в качестве действующих веществ витамины А и Е, субстанцию АСД-2Ф и янтарную кислоту, предназначенного для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых заболеваний у коров.

Для достижения поставленной цели нами были определены следующие задачи:

1. Научно обосновать состав комбинированного иммуно-модулирующего лекарственного препарата в форме раствора для инъекций АйСиДивит.

6. Разработать и представить для согласования и утверждения проекты инструкции по применению препарата в ветеринарии и технических условий (ТУ).

Научная новизна. Впервые разработан отечественный комбинированный лекарственный препарат в форме раствора для инъекций, содержащий в качестве биологически активных веществ субстанцию АСД-2Ф, витамины А, Е и янтарную кислоту, изучены его физико-химические, фармако-токсикологические свойства, иммуно-модулирующая активность, оптимальная доза и схема применения. В производственных условиях установлена профилактическая эффективность и целесообразность применения препарата для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

Практическая значимость. Разработан, стандартизирован и предложен для применения в ветеринарии новый комбинированный лекарственный препарат на основе фармацевтических субстанций витаминов А, Е, АСД-2Ф и янтарной кислоты, определены показатели и методы контроля качества, установлена его оптимальная доза и схема применения для повышения неспецифической резистентности и профилактики послеродовых осложнений у коров.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на:

- Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии» (г. Санкт - Петербург, 2009 г.);

- II Съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России «Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии» (г. Казань, 2009);

- III Международной научной конференции «Ветеринарные препараты: разработка, контроль качества и применение» (Украина, г. Львов, 2009);

- Заседаниях Ученого совета ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (г. Москва, 2008 г., 2009 г., 2010 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

Заключение Диссертация по теме "Звероводство и охотоведение", Кугелева, Татьяна Игоревна

выводы

2. АйСиДивит оказывает стимулирующее влияние на иммунную систему, в частности, увеличивает количество антителопродуцентов (АОК) в селезенке мышей в 1,5 раза и титры агглютининов в сыворотке крови мышей в 1,2 раза; повышает активность иммунокомпетентных клеток (индекс воспаления в опытной группе мышей - 8+0,2; в контроле — 2,7+0,1), бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови крупного рогатого скота.

3. По степени воздействия на организм согласно ГОСТ 12.1.007-76 препарат относится к 4 классу опасности - «вещества малоопасные»: ЛД50 для белых мышей при введении в желудок составляет более 23 400 мг/кг, ЛД5о для белых крыс при подкожном введении — более 27 000 мг/кг массы животного. Препарат не обладает аллергизирующим, а также раздражающим действием на кожу, слабо и кратковременно раздражает слизистые оболочки глаз, не вызывает воспаления тканей в месте инъекции.

7. В дозе 15 мл/животное при внутримышечном введении в день отела, на 3 и 5 сутки после отела АйСиДивит в комплексе с антибактериальными средствами достоверно профилактирует задержание последа и послеродовые осложнения у коров.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

3. Результаты исследований нашли отражение в инструкции по применению АйСиДивита для повышения резистентности, лечения и профилактики желудочно-кишечных, респираторных, гинекологических заболеваний и регуляции репродуктивных функций сельскохозяйственных животных и собак, утвержденной Россельхознадзором.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Кугелева, Татьяна Игоревна, Москва

1. Абрамов В.Е. Определение показателей качества препарата АСДт2. /Абрамов В.Е., Абдрахманов В.И., Дорогова O.A., Кирюткин F.B., Краснов? В.л://Ветеринария: 2004.- № 9:

2. Абрамченко В.В: Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве. /Абрамченко В.В. //СПб. -Изд. ДЕАН. -2001.

3. Алексеев А.П'. Сравнительная эффективность различных способов; отделения последа у коров. /Алексеев А.П: //Автореф. канд. дисс.-Саратов. .2003.

4. Антипов. В.А. Бета-каротин: значение для жизни животных и птиц, их воспроизводства и продуктивности. /Антипов. В.А., Турченко А.Н., Васильев В.Ф., Самойлов B.C., Казарян Р.В., Кузьминова Е.В., Полтщук Л.В. // Краснодар. -2006.

5. Архипова О.Г. Методы исследований в профпатологии (биохимические). /Архипова О.Г., Шацкая H.H., Семенова Л:С. и др. //М.: Медицина. 1988.

6. Бадалян A.M. Новые данные некоторых показателей морфологий отделения последа у коров /Бадалян A.M. //Тезисы докладов Всесоюзн. науч. конф. 28-30 октября.- Воронеж. -1986.

7. Баженова Н.Б. Влияние биологически активных препаратов на репродуктивную функцию у коров / Баженова Н.Б. //Методические рекомендации. —СП-Пушкин: СПбАВМ/С. -1995.

8. Батраков А .Я. Применение ихтиола при задержании последа у коров/ Батраков А.Я://Ветеринария. -1999. -№9

9. Березкин В:Г. Количественная тонкослойная хроматография. Инструментальные методы. / Березкин В.Г., Бочков A.C. //М. -1980.

10. Букин В.Н. Витамины в животноводстве / Букин В.Н.//, М. -1966.

11. Валдман А.Р. Значение витаминов в питании сельскохозяйственных животных и птицы / Валдман А.Р.// Рига. -1957.

12. Валитов И.В. Повышение воспроизводительной способности коров подкормкой макро и микроэлементами в условиях Зауралья. /Валитов И.В.//Автореф. канд. дисс. -Уфа. -1970.

13. Варганов А.И. Профилактика бесплодия и яловости крупного рогатого скота. / Варганов А.И., Леонтьев Ю.Н. уч. пособие //Киров. -Вятская ГСА. -2000.

14. Вильчинская A.C. К фармакологии препарата АС Д. /Вильчинская A.C.// Ученые записки Витебского ветеринарного института, -т.8. -1958.

15. Волкова C.B. Иммунологическая реактивность организма коров и их потомства /Волкова C.B., Мелешкина С.Р., Семёнов С.Н. //Фундаментальные исследования. -2004. -№3.

16. Волынец М.П. Тонкослойная хроматография в неорганическом анализе. / Волынец М.П. //М. -1974.

17. Георгиевский В.И. Физиология сельскохозяйственных животных. /Георгиевский В.И. //М.:ВО «Агропромиздат». -1990.

18. Горлов И.Ф. Олеум-АСД и его влияние на резистентность молодняка и воспроизводительную функцию у коров. /Горлов И.Ф., Безбородин В.В. //Технология пр-ва и перераб. продукции животноводства. -Волгоград. -1996.

19. Государственная фармакопея. Одиннадцатое издание, выпуск 1. Общие методы анализа. /Министерство Здравоохранения// Издательство :М. Медицина. -1987.

20. Гуськов A.M. Влияние стресс-факторов на репродуктивную функцию животных. /Гуськов A.M., Пузына Г.И. //Зоотехния: -1994. №4.

21. Дерябина З.И. Определение биологической активности препарата АСД ф-2 / Дерябина З.И. //Ветеринария. -1980. -№10 с. 58

22. Дерябина З.И. Определение биологической активности препарата АСД-2 / Дерябина З.И. //Ветеринария.- 1980.- №10.-С.58-59.

23. Дерябина З.И. Химико-фармакологическая характеристика препарата АСД /Дерябина З.И., Николаев A.B. //Труды ВИЭВ, том 35. -М. -1968.

24. Диагностика, профилактика и лечение бесплодия у коров/ Под ред. Серебрякова Ю.М. //Владивосток. -2003.

25. Дорогов A.B. Влияние препарата АСД Ф-2 на течение окислительных процессов в организме. /Дорогов A.B., Дерябина З.И. //Труды ВНИИВСЭ. -т.2. -1957.

26. Дорогов A.B. Применение препарата АСД в ветеринарной практике./ Дорогов A.B. //«Ветеринария». -1951. -№11.

27. Дорогов A.B. Терапия заболеваний половых органов препаратом АСД. /Дорогов A.B., Никифоров Н.И., Волоскова А.П. //Бюллетень научно-технической информации ВНИИВСЭ. -№2. -1957.

28. Дыбан А.П. Основные методические подходы к тестированию тератогенной активности химических веществ /Дыбан А.П., Баранов B.C., Акимова И.М. //Арх. Анат. Гистол. и Эмбр. 1970. -№ 10. -С. 89-100.

29. Западнюк И.П. Лабораторные животные /Западнюк И.П. и др. //Киев. -1983.

30. Заянчковский И.Ф. Задержание последа и послеродовые заболевания у коров. /Заянчковский И.Ф //М. -Колос -1964.

31. Заянчковский И.Ф. Профилактика и лечение акушерско-гинекологических заболеваний у коров. / Заянчковский И.Ф. //Уфа. -1982

32. Ивницкий Ю.Ю. Янтарная кислота в системе средств метаболичесокй коррекции функционального состояния резистентности организма. /Ивницкий Ю.Ю., Головко А.И., Сафронов Г.А. //СПб.:Лань. -1998.

33. Ильинский Е.В. Патогенетическая терапия при бесплодии коров на почве неспецифических воспалительных процессов гениталий. /Ильинский Е.В. Автореф. докт. дис. //Харьков. -1968.

34. Ильинский Е.В. Физиология размножения и предупреждения бесплодия крупного рогатого скота./Ильинский Е.В. //Краснодар: Кн. из-во. -1972.

35. Иноземцев В.П. Изучение распространения задержания последа и заболеваемости коров эндометритами. /Иноземцев В.П. //Сборник науч. тр. МГАВМиБ им. К.И. Скрябина. -Москва. -1994.

36. Казюлин А.Н. Клиническое и профилактическое значение витамина А. /Казюлин А.Н., Маев И.В., Проскурников Г.Н., Демочко Е.А., Давыдовская O.A. //Неотложная помощь в клинической практике. Сборник научных работ, -том X. -М. -2003.

37. Карпуть И. М. Внутренние незаразные болезни животных: учебник для студентов спец-ти "Вет. медицина" /Карпуть И.М. и др.//Минск. -Беларусь. -2006.

38. Карпуть И.М. Вопросы теории практики ветеринарии и зоотехнии. /Карпуть И.М. и др. //Минск. -Урожай. -1992.

39. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. /Кирхнер Ю. -пер. с англ. //М. -1981.

40. Кирюткин Г.В. Справочник ветеринарных препаратов (химиотерапевтические препараты). /Кирюткин Г.В., Тимофеев Б.А., Созинов В.А. //Киров. -1997.

41. Коба И.С. Распространение послеродового эндометрита у коров. /Коба И.С., Турченко А.Н. //Новые фармакологические средства, для животноводства и ветеринарии. Мат. юбилейной конф. -том-I. -Краснодар. -2001.

42. Коваленко A.JI. Янтарная кислота: Фармакологическая активность и лекарственные формы. /Коваленко A.JI. //Фармация. 2000. - № 5-6.

43. Колоднев Ч. Скорая помощь при задержании последа. /Колоднев Ч //Животноводство России. -2001 -№11.

44. Кондрашова М. Н. Терапевтическое действие янтарной кислоты. /Кондрашова М. Н. //Пущино. -1976.

45. Кондрашова М. Н. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве. /Кондрашова М. Н., Каминский Ю.Г., Маевский Е.И. //Сб. научн. статей. -Пущино. -1996.

46. Коновалова М.С. Янтарная кислота против воспалений и опухолей. /Коновалова М.С. //ИД «Весь». -2005.

47. Конюхова С.Г. Роль активации ПОЛ в патогенезе экспериментального перитонита. /Конюхова С.Г., Дубикайтис А.Ю., Шебуневич Л.В. и др. //Бюлл. Экспер. Биол. -1989.

48. Коробов A.B. Лабораторный анализ мочи в диагностике незаразных болезней животных. /Коробов A.B., Никулин И.А., Громова О.В., Паршин П.А. уч.-методич. Пособие. //М. МГАВМиБ им. К.И. Скрябина. 2005.

49. Коутс М.Е. Витамины в питании животных./Коутс М.Е. и др. //Новое в кормлении сельскохозяйственных животных. -Сб. переводов, -т.2. -М. -1958.

50. Кривенко Д.В. Нарушение родового процесса у коров и его коррекция / Кривенко Д.В. докт. дис //Краснодар. -2006.

51. Круглов В.Т. О токсичности третьей фракции препарата АСД и ее компонентов при различных способах введения в организм. /Круглов В.Т. //Труды ВИЭВ. -т.22. -1959.

52. Кудрявцев А.А.Клиническая гематология животных. /Кудрявцев A.A., Кудрявцева Л.А. //М. -1974.

53. Ленинджер А., Биохимия. Молекулярные основы структуры и функций клетки. /Ленинджер А. //пер. с англ. -М. -1976.

54. Лесков . В.П. Иммунология для врачей. /Лесков В.П //М.: Фармарус Принт. -1997.

55. Лободин К.А. Применение препарата Утеротон для коррекции воспроизводительной функции молочных коров. /Лободин К.А. //Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных. Матер, междунар. науч.-практ. конф. -Воронеж. -2009.

56. Логвинов Д.Д. Беременность и роды у коров. /Логвинов Д.Д. //Киев. -1975.

57. Лопарев В.И. Совершенствование применения простагландинов и рилизинг-факторов для повышения воспроизводительной функции коров и телок./ Лопарев В.И. автореф. канд. дис.//ВИЖ. -Дубровицы. -2000.

58. Любимов Б.И. Оценка аллергизирующих свойств фармакологических средств. /Любимов Б.И. //«Ведомости фармакологического комитета». -1999. -№ 2.

59. Маев И.В. Гипо- и авитаминозы. /Маев И.В., Казюлин А.Н. //Медицинская газета. -2001. -№ 36.

60. Маев И.В. Дефицит витамина Е. /Маев И.В., Казюлин А.Н. //Медицинская газета. -2001. -№7.

61. Маев И.В. Профилактическое и клиническое значение витаминов. /Маев И.В., Казюлин А.Н., Кучерявый Ю.А. //Фармацевтический вестник. -2002.-№ 12.

62. Мартынов В.Г. Применение синестрола с питуитрином и антибиотикамипри задержании последа у коров. /Мартынов В.Г. //Ветеринария. -1968. -№10.

63. Масьянов Ю.Н. Иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространенных болезнях и его коррекция. /Масьянов Ю.Н. //Автореф. докт.дис. -2009.

64. Машаров Ю.В. Рациональный метод профилактики задержания последа у коров путем иссечения культи пуповины /Машаров Ю.В. //Дис. канд. вет. наук. -Смоленск -2001.

65. Машковский М. Д. Лекарственные средства. 6 изд. /Машковский М. Д. //М.-1961.

66. Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.2. 11 изд /Машковский М.Д. //М.Медицина, 1988.

67. Медицинские лабораторные технологии. Справочник /Под ред. А.И. Карпищенко.//СПб. -Интермедика -2002.

68. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. /Меньшиков В.В. //М.Медицина -1987.-368с.

69. Методика выполнения измерений массовой доли аминокислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. //Корма, Комбикорма, Комбикормовое сырье. М-02-902-142-07.

70. Методика выполнения измерений массовой доли водорастворимых витаминов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. //М-02-902-146-08.

71. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. /Милованов В.К. //М. -Сельхозиздат. -1962.

72. Милованов В.К. Повышение эффективности воспроизводства крупного рогатого скота. /Милованов В.К., Соколовская И.И. //Зоотехния. -1989. -№1.

73. Мисайлов В.Д. Моторика матки коров при хронических эндометритах

74. Мозгов И.Е. Значение биогенных стимуляторов в животноводстве. / Мозгов И.Е. //Вестник с/х науки. -1956. -№3.

75. Мозгов И.Е. Фармакологические стимуляторы в животноводстве. /Мозгов И.Е. //М. -1964.-352с.

76. Мороз Т.А. Действие биостимуляторов на выживаемость эмбрионов высокопродуктивных коров. /Мороз Т.А., Решетникова Н.М. //Матер. Междунар. научно-практич. Конф. «Актуальные проблемы биологии воспроизводства животных». -Дубровицы. -ВНИИЖ. -2007.

77. Найденский М.С. Применение янтарной кислоты для стимуляции роста и развития цыплят. /Найденский М.С., Нестеров В.В., Кармолиев Р.Х., ЛукичеваВ.А. //Ветеринария. -2002. -№ 12.

78. Нежданов А.Г. Акушерско-гинекологические болезни коров. /Нежданов А.Г., Иноземцев В.П. //Ветеринария. -1996. -№6.

79. Нежданов А.Г. Общая неспецифическая резистентность и воспроизводительная функция коров. /Нежданов А.Г. //Проблемы патологии обмена веществ в современном животноводстве. —Воронеж. -1981.

80. Нежданов А.Г. Физиологические основы профилактики симптоматического бесплодия коров. /Нежданов А.Г., Иноземцев В.П. Докт. дис. //ВНИВИПФиТ. -Воронеж. -1985.

81. Нежданов А.Г. Фоллимаг для регуляции половой цикличности у коров. / Нежданов А.Г., Лободин К.А., Матюнин В.И., Калужский В.Е.//Ветеринария. -2003. -№5. С.-32.

82. Нежданов А.Г., Восстановление плодовитости коров при гипофункции яичников./Нежданов А.Г., Лободин К.А., Богданова Н.Е. //Ветеринария. -2007. -№7.

83. Нежданов, А.Г. Принципиальные вопросы применения гормональных препаратов для регуляции реподуктивной функции животных / А.Г. Нежданов // Сб. науч. тр.-Ставропольская ГСХА. -1998. -С. 57 59.

84. Нежданов, А.Г. Физиология и патология родов и послеродового

85. Николаев A.B. О химическом составе и новых фракциях препарата АСД. /Николаев А.В: //Труды ВИЭВ. -т.22. -1959.- с. 317-326.

86. Панков Б.Г. Метод борьбы с алиментарной формой бесплодия коров. /Панков Б.Г.// Российский ветеринарный журнал. -«КолосС».- 2005. -№2.

87. Панков Б.Г. Профилактика, фармакопрофилактика, ранняя диагностика, лечение клинических и скрытых форм эндометритов у коров. /Панков Б.Г., Жаров A.B. уч. Пособие. //М: ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 2007.

88. Паркадзе З.О. Сравнительная эффективность акупунктуры, электропунктуры и различных лекарственных средств при лечении высокопродуктивных коров с задержанием последа. /Паркадзе 3. О. Автореф. канд. дис. //-Воронеж. -1991.

89. Петров Р.В. Иммунология. /Петров P.B. //М. -Медицина. -1983.

90. Полянцев Н.И. Акушерско гинекологическая диспансеризация на молочных фермах. /Полянцев Н.И., Синявин А.Н. //М. -Росагропромиздат. -1989.

91. Полянцев Н.И. Ановуляция как причина повторных осеменений и бесплодия коров. /Полянцев Н.И. //Ветеринария; -2000. -№1.

92. Полянцев Н.И. Применение биорегуляторов половой функции коров. /Полянцев Н.И. //Зоотехния. -1999. -№6.

93. Полянцев Н.И. Системы ветеринарных мероприятий при воспроизводстве крупного рогатого скота. /Полянцев Н.И., Подберезный В.В. //Ветеринария.-2004.-№5.

94. Попова-Батуева JI.B. Действие препарата АСД на организм животных при внутривенном и наружном применении. /Попова-Батуева JI.B. //Ветеринария. -1954. -№10/

95. Прозоровский В.Б. Рекомендации по статистической обработке результатов токсикологических исследований. /Прозоровский В.Б //М. -1965.-36с.

96. Распутина О.В. Разработка и применение лекарственных средств на основе ароксиалканкарбоновой кислоты при болезнях животных, вызываемых условно патогенной микрофлорой. /Распутина О.В. Автореф. докт. дис. //Новосибирск. -2007.

97. Розин, Д.Г. Сравнительная оценка токсичности хлорпроизводных водородов жирного ряда по гексеналовому тесту на белых мышах. /Розин, Д.Г. //Фармакология и токсикология. -Москва.-1964,- №4.

98. Ройт И.М. Основы иммунологии. /Перевод с англ. под ред. Василова Р.Г., Киркина А.Ф. //М. -Мир. -Редакция литературы по биологии. -1991.

99. Романовский В.Е. Витамины и витаминотерапия. / Романовский В.Е., Синькова Е.А. //Ростов-на Дону: Феникс.-2000.-320 с.

100. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, /под.ред. Хабриева Р.У. //Изд. Медицина. -2005.

101. Семенченко H.A. Профилактика бесплодия у коров. /Семенченко H.A. //Издательство «Карелия». -Петрозаводск -1971.

102. Семиволос, A.M. Электростимуляция матки для отделения последа и профилактики послеродовых заболеваний у коров /Семиволос A.M. //Зоотехния и ветеринария. -1999.

103. Семиволос, A.M. Электростимуляция моторики матки при задержании последа у коров /Семиволос A.M. //Успехи физиол. науки. -1994. -№ 1.

104. Сергеев Н.И. Гормональные взаимодействия при возникновении беременности. /Сергеев Н.И., Некрасов. A.A. //Сельское хозяйство за рубежом. -1981.

105. Серебряков Ю.М. Применение молозива для профилактики и лечения акушерско-гинекологических болезней коров. /Серебряков Ю.М. Методические рекомендации.//Новосибирск. -1986.

106. Сизоненко Ф.Я. Ветеринарное акушерство. Издание второе дополненное и переработанное. /Сизоненко Ф.Я. //Изд.«Урожай». -Киев. -1997.

107. Скопичев В.Г. Физиология репродуктивной системы млекопитающих: учебное пособие. / Скопичев В.Г., Боголюбова И.О. //Изд. Лань. -2007.

108. Слободяник В.И. Сравнительная профилактическая эффективность антимикробных и иммуномодулирующих препаратов при мастите и болезнях половых органов у коров. /Слободяник В.И., Ширяев С.И. // Ветеринарная практика.-2007.-№ 4 (39).1.t

109. Соколовская И.И. Иммунная система регулятор воспроизведения. /Соколовская И.И. //Зоотехния. -1994. -№1.

110. Справочник по гематологии. /Под. ред. Романовой А.Ф. //К. -Здоровье. -1997.

111. Студенцов А.П. Акушерство, гинекология и биотехника1. Л .размножения животных. /Студенцов А.П., Шипилов B.C., Никитин В.Я и др. //М.:КолосС. -2005.

112. Ступников A.A. Токсичность гербицидов и арборицидов и профилактика отравлений животных. /Ступников A.A. //Л. -Колос (Ленингр. отд-ние). -1975.-240с.

113. Субботин А.Д. Эффективность воспроизведения коров в связи с действием витамина А. /Субботин А.Д., Парлакян А. //Вестник с.-х. науки. -1975.-№11.

114. Тельцов Л.П. Концепция выращивания животных и увеличения продукции животноводства в 2-3 раза. /Тельцов Л.П. //Современные наукоемкие технологии. -2004. -№2.

115. Титов В.В. Некоторые итоги применения препарата АСД. /Титов В.В. //Ветеринария. -1952.-№10.

116. Томчук В.А. Перекисное окисление липидов крови телят больных ! диспепсией. /Томчук В.А., Мельничук. Д.А //Ветеринария. -2003.-№8.

117. Торосян С.И. новые данные о биостимулирующем действии препарата АСД Ф-2 в норме и патологии. /Торосян С.И. Автореф. канд. дис. -Ереван. -1963.

118. Торчинский Ю.М. Сульфгидрильные и дисульфндные группы белков. /Торчинский Ю.М. //М. -1971.

119. Тру фанов A.B. Биохимия и физиология витаминов и антивитаминов. /Труфанов A.B. //М. -1959.

120. Тютюнник H.H. Оптимизация физиологического состояния и продуктивности норок янтарной кислотой. /Тютюнник H.H., Кожевникова Л.К., Мелдо Х.И., Кондрашова М.К., Бадовская Л.А., Унжаков А.Р. //С.-х. биология. -1999. -№4.

121. Узенбаева Л.Б. Адаптогенное влияние янтарной кислоты на организм1 iнорок. /Узенбаева Л.Б., Илюха В. А. //Янтар.кислота в медицине, пищ.пром-ти, сел.хоз-ве. -Пущино. -1997.

122. Федоров Ю.Н. Иммунодефицита домашних животных. /Федоров . Ю.Н., Верховский O.A. //М. -1996.-95с.

123. Физико-химические методы контроля ингредиентов, питательных сред и биопрепаратов. /Колл. авторов, под. общ. ред. Колесова С.Г. Методич. Пособие. //Москва. -1970.

124. Филатов В.П. Основные теоретические вопросы тканевой терапии. /Филатов В.П. //В кн. Тканевая.терапия. -Киев. -1953. с.46-62.

125. Хазанов В.А. Роль системы окисления янтарной кислоты вэнергетическом обмене головного мозга. /Хазанов В.А. Автореф. докт. дис. //Томск. -1993.

126. Хаитов P.M. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы. /Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Ярилин A.A. //Гэотар-Медиа. -2003.

127. Хаитов P.M. Экспериментальное изучение иммунотропной активности фармакологических препаратов. /Хаитов P.M., Гущин И.С., Пинегин Б.В., Зебрев А.И. методич. реком. //Ведомости фармакологическтго комитета. -1999. -№1.

128. Хантер Р.Х.Ф. Физиология и технология воспроизводства домашних животных. /Перевод с англ. под. Ред. Шипилова B.C. //М. -Колос. -1984.

129. Хилькевич С.Н. Теория и практика интенсификации воспроизводительной функции коров и телок. /Хилькевич С.Н., Насибов Ф.Н., Байтлесов Е.У., Титова В.А., Тяпугин Е.А. //Вологда. -2008.

130. Черемисинов Г.А. Методические рекомендации по диагностике, терапии и групповой профилактике болезней органов размножения крупного рогатого скота/Под ред. Черемисинова Г. А. //Липецк. -1996.

131. Черемисинов Г.А. Совершенствование биотехнологии интенсивного воспроизводства животных. /Черемисинов Г.А. //Институт орган. Химии. -Уфа. -1992.

132. Чомаев A.M. Лечение послеродовых эндометритов у коров. /Чомаев A.M. //Зоотехния. -1997. -№10.

133. Чомаев A.M. Метод повышения оплодотворяемости коров. /Чомаев

134. A.M., Божко А. //Животновод.-2002.-№ 3.

135. Чомаев A.M. Методы нормализации воспроизводительной функции у коров. /Чомаев A.M., Хмылов А.Г. //Москва. -2005.

136. Шаршунова М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии. /Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. -пер. со словац. //М. -1980.

137. Шахов А.Г. Концепция эколого-адаптивной теории возникновения, развития массовой патологии и защиты здоровья животных в сельскохозяйственном производстве. /Шахов А.Г., Самохин В.Т., Бузлама

138. B.C. и др. //М. -ФГНУ «Росинформагротех». -2000.

139. Шахов А.Г. Повышение эффективности специфической профилактики факторных инфекций путем коррекции антиоксидантного и иммунного статуса коров и телят. /Шахов А.Г., Рецкий М.И., Золотарева А.И., Бригадиров Ю.Н. //Ветеринарный консультант. -2008. -№23-24.

140. Шипилов B.C. Физиологические основы профилактики бесплодия коров. /Шипилов B.C. //М. -Колос -1977.

141. Шпоганяч H.H. Влияние антиоксидантов разной природы на неспецифическую реззистентность и витаминную обеспеченность сухостойных коров. /Шпоганяч H.H. Автореф. дис. //Белгород. -2009.

142. Шпоганяч H.H. Влияние введения сухостойным коровам витаминно-антиоксидантных препаратов. /Шпоганяч H.H., С. А. Семеиютина //Зоотехния.-2009.-1У.

143. Шустовский Ф.А. Опыт применения препарата АСД. /Шустовский Ф.А. //Ветеринария. -1952. -№4.

144. Эпштейн H.A. Оценка пригодности (валидация): ВЭЖХ-методики в фармацевтическом анализе (обзор). /Эпштейн H.A. //Хим.-фарм. журн.2004. -t. 38. -№ 4.

145. Ahmed W.M. Investigations on retained fetal membranes in Friesian cows in Egypt. /Ahmed W.M., El-Ekhnawy, K.I.; Desouky, H.M. Zaabal, M.M!. and Ahmed, Y.F. //Egypt. J*. Comp. Pathol. & Clin. Pathol. -1999. -12 -p. 160-177.

146. Allison R.D: Effect of vitamin E supplementation on the health and fertility of dairy cows: a review. /Allison R.D., Laven R:A. //Veterinary Record -2000. -147.

147. Arthur G.H. Retention of the afterbirth in cattle: A review and commentary. / Arthur G.H. //Vet Ann. -1979.-19:26-36.

148. Bhandarel P. Determination of amino acid without derivatization by using HPLC HILIC column. /Bhandarel P., Madhavanl P., Rao B.M., N Someswar //J. Chem. Pharm. Res. -2010, 2(2): 372-380

149. Blankenhorn G. Clinical effectiveness of Spondyvit (vitamin E) in activated arthroses. A multicenter placebo-controlled double-blind study. /Blankenhorn G. //Z Orthop. Ihre Grenzgeb. -1986. -124(3).

150. Bolinder A. Retained fetal membranes in cows: manual removal versus nonremoval and its effect on reproductive performance. /Bolinder A., Seguin B., Kindahl H., Bouley D., Otterby D. //Theriogenology. -1988. -30:45-56.

151. Bosu W.T.K. Peripartal changes in plasma progesterone and 15-keto-13,14-dihydro-prostaglandin F2a-concentrations in Holstein cows with or without retained foetal membranes. /Bosu W.T.K., Liptrap R.M., Leslie K.E. //Anim. Reprod. Sci. -1984.-7:497-510.

152. Breuel K., Factors affecting fertility in the postpartum cow: role of the oocyte and follicle in conception rate /Breuel K., Levis P., Schick F. et al. //Biol. Reprod. -1993.-V.48.-P.655-661.

153. Burton G. B-Carotene, an unusual type of lipid antioxidant. /Burton G., Ingold K. //Science -1984. -224: 569-73.

154. Burton M.J. Effect of fenprostalene on postpartum myometrial activity in dairy cows with normal or delayed placental expulsion. /Burton M.J., Herschler R.C., Dziuk H.E., Fahning M.L., Zemjanis R. //Br Vet J 1987. -143:549-554.

155. Butler W.R. Interrelationships between energy balance and postpartum reproductive function in diary cattle. /Butler W.R., Smith R.D. /J. Dairy Sci.1989. -72:767-783.

156. Chew B.P. Role of Carotenoids in the Immune Response. /Chew B.P. //Journal of Dairy Science. -1993. -Vol.76. -No.9. -2804-2811.

157. Chow C. K. Biological' Functions and Metabolic Fate of Vitamin E Revisited. /Chow C. K. //Journal of Biomedical Science. -2004. -11:295-302

158. Correa M.T. Path analysis for, seven postpartum disorders of Holstein cows./Correa M.T., Erb H., Scarlett. J. //J. Dairy Sei. -1993. -76:1305.

159. Curtis C.R. Path analysis of dry period nutrition, postpartum metabolic and reproductive disorders, and mastitis in Holstein cows. /Curtis C.R., Erb H.N., Sniffen C.J., Smith D., Kronfeld D.S. //J Dairy Sei. -1985. -68:2347-2360.

160. Diplock A.T. The role of vitamin E and selenium in the prevebtion of oxygen-induced tissue damage. / Diplock A.T. //Selenium in biology and medicine, ed. AVI Publ. Co. Inc. -Westport, CT. -1981.

161. Drillich M. Comparison of two protocols for the treatment of retained fetal membranes in dairy cattle. /Drillich M., Pfutzner A., Sabin H-J., Sabin M., Heuwieser W. //Theriogenology. -2003. -59.

162. Drillich M. Efficacy of a treatment of retained placenta in dairy cows with prostaglandin F2 alpha in addition to a local antibiotic treatment. /Drillich M., Schroder A., Tenhagen B.A., Heuwiser W. //Deutsche Tierarztliche Wochenschrift. -2005. -112.

163. Drillich M. Update on uterine infections in dairy cattle./Drillich M. //Slovenian Veterinary Research. -2006. -43.

164. Eger S. Eger Effects of selenium and vitamin E on incidence of retained placenta. /S., Drori D., Kadoori I., Miller N., Schindler H. //J Dairy Sei -1985. -68:2119-2122.

165. Emanuelson U. Nonlinear mixed model analyses of five production disorders of dairy cattle. /Emanuelson U., Oltenacu P.A., Grohn Y.T. //Vet Immunol. Immunopathol. -1993. -49(4):307-20.

166. Erb R.E. Retained fetal membranes — The effect of prolificacy of dairy cattle. /Erb R.E., Hinze P.M., Gildow E.M., Morrison R.H. //J. Am. Vet. Med. Assoc.-1958.-133:489.

167. Erskine R.J.P. Effects of parenteral administration of vitamin E on healthof periparturient dairy cows. /Erskine R.J.P., Bartlett P.C., Herdt T., Gaston P. //JAVMA -1997. -211:466-469.

168. Ferguson J.D. Diet, production, and reproduction in dairy cows. /Ferguson J.D. //AnimFeed Sci Tech -1996. -5:173-184.

169. Folman, Y. The relationship between plasma progesterone concentration and conception in postpartum dairy cows maintained on two levels of nutrition. /Folman, Y., M. Rosenberg, Z Herz, and M. Davidson. I IT. Reprod. Fert. -1973. -34:267-278.

170. Fricke P.M. Efficacy of decreasing the dose of GnRH used in a protocol for synchronization of ovulation and timed AI in lactating dairy cows. /Fricke P.M., Guenther J.N., WiltbankM.C. //Theriogenology. -1998. -50:1275-1284.

171. Garcia A. The effects of treatment with cloprostenol or dinoprost within one hour of induced parturition on the incidence of retainte placenta in cattle. /Garcia A., Barth A.D., Mapletoft R.J. //Can Vet J. -1992. -33:175-183.

172. Gey K.F. Inverse correlation between plasma vitamin E and mortality from ischemic heart disease in cross-cultural epidemiology. /Gey K.F., Puska P., Jordan P., and Moser U.K. //Am. J. Clin. Nutr. -1991. -53:326S-334S.

173. Gwazdauskas F.C. Effect of prepartum selenium-vitamin E injection on time for placenta to pass and on productive functions. /Gwazdauskas F.C., Bibb T.L., McGilliard M.L., Lineweaver J.A. //J. Dairy Sci. -1979. -62:978.

174. Harrison .J.H. Vitamin E and selenium for reproduction of the dairy cow. / Harrison J.H., Hancock D.D:, Conrad H.R. //J Dairy Sci. -1984.-67.

175. Harrison E.H. Subcellular localization of retinoids, retinoid-binding proteins, and acyl-CoA: retinol acyltransferase in rat liver. /Harrison E.H., Blaner W.S., Goodman D.S., Ross A.C. //J Lipid Res. -1987.-28.

176. Joosten I. Retained placenta: an immunological approach. / Joosten I., Hensen E.J. //Anim Reprod Sci. -1992. -28:451-461.

177. Julien W.E. Selenium and vitamin E and incidence of retained placenta in parturient dairy cows. /Julien W.E., Conrad H.R., Jones J.E., Moxon A.LJ //Dairy Sci. 1976a. -59.

178. Julien W.E. Selenium and vitamin E and incidence of retained placenta in parturient dairy cows. /Julien W.E., Conrad H.R., Jones J.E.,' Moxon A.L.J //Dairy Sci. 1976b. -59.

179. Kagan V.E. Fluorescence measurements of incorporation and hydrolysis of tocopherol and tocopheryl esters in biomembranes. /Kagan V.E., Bakalova R.A., Serbinova E.E., Stoytchev T.S. //Methods in Enzymology. -1990. -186:355-367.

180. Krinsky N.I. Interaction of oxygen and oxy-radicals with carotenoid. /Krinsky N.I., Deneke S.M. //J.Natl.Cancer Inst. 1982. -69.

181. Laven R.A. Bovine retained placenta: aetiology, pathogenesis and economic loss. /Laven R.A., Peters A.R. //Vet. Rec. 1996.-139.

182. LeBlanc S. Postpartum uterine disease and dairy herd reproductive performance A review. /LeBlanc S.//The Veterinary Journal. -2008. -176(1).

183. Lucey, S. Short-term associations between disease and milk yield of dairy cows. /Lucey, S., Rownalds G.J., Russel A.M. //J. Dairy Res. -1986. -53:7-15.

184. Martin J. M., C. J. Wilcox, J. Moya, and E. W. Klebanow. 1986. Effects of retained fetal membranes on milk yield and reproductive performance. J.Dairy Sci. 69:1166

185. Mollo A. The use of oxytocin for the reduction of cow placental retention and subsequent metritis. /Mollo A., Veronesi M.C., Cairoli F., Soldano F. //Anim. Reprod. Sci. -1997. -48:47-51.

186. Muller L.D. Factors associated with the incidence of retained placentas. /Muller L.D., Owens M.H. //J Dairy Sci. -1974. -57:725-728.

187. Nebel R.L. Interactions of high milk yield and reproductive performance in dairy cows. /Nebel R.L., McGilliard //J Dairy Sci. 1993. -76:3257-3268.

188. Oltenacu P.A. Relationship between days open and cumulative milk yield

189. Paisley L.G. Mechanisms and therapy for retained fetal membranes and uterine infections of cows: A review. /Paisley L.G., Mickelsen W.D., Anderson P.B. //Theriogenology. -1986. -25:353-381.

190. Peters A.R. Reproductive problems in the bull and cow /Peters A.R. //Reproduction in cattle 2nd ed. -Blackwell Science. -Oxford. -1995 -172.

191. Peters A.R. Treatment of bovine retained placenta and its effects. /Peters A.R., Laven R.A. //Vet Rec. -1996. -139.

192. Pursley J.R. Effect of time of artificial insemination on pregnancy rates, calving rates, pregnancy loss, and gender ratio after synchronization of ovulation in lactating dairy cows. /Pursley J.R., Silcox R.W., Wiltbank M.C. //J Dairy Sci. -1998. -81.

193. Pursley J.R. Reproductive management of lactating dairy cows using synchronization of ovulation. Pursley J.R., Kosorok M.R., Wiltbank M.C./J Dairy Sci. -1997. 80.

194. Roberts S.J. Veterinary Obstetrics and Genital Disease (theriogenology). 3rd Ed. /Roberts S.J. //David & Charles, Inc.:North Pomfert. -Vermont. -1986.

195. Sandals W.C.D. The effect of retained placenta and metritis comples on reproductive performance in dairy cattle. /Sandals W.C.D., Curtiss R.A., Cote J.F., Martin S.W. A case control study. //Can. Vet. J. -1979. -20.

196. Snijders S. Relationship between genetic merit, milk production, body condition, blood parameters, and reproductive performance of dairy cows. In:

197. Fertility in the high-producing dairy cow. /Snijders S., Dillon P., O'Farrel K. et al. //Animal Science. -1999. -V.33.:1201-1219.

198. Stephen J.L. A postpartum uterine disease and dairy herd reproductive performance: A review. /Stephen J.L. //Vet. J. -2008. -176: 102-114.

199. Trinder N. The relationship between the intake of selenium and vitamin E on the incidence of retained placenta. /Trinder N., Hall R.J., Renton //C.P.Vet. Rec. -1973. 93:641.

200. Wetherill G.D. Retained placentae in the bovine. A brief review. /Wetherill G.D. //Can. Vet. J. -1965. -6:290.

201. Zhang C.K. The changes of mineral contents of serum during the dry period and prior to and after calving in dairy cows with retained placenta. /Zhang C.K., Ye J.P., Chen J.H.//Chinese J. Vet. Med. -1992. -18:10-11.

Информация о работе

Кугелева, Татьяна Игоревна
кандидата биологических наук
Москва, 2011
ВАК 06.02.03

Диссертация

Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Фармако-токсикологические свойства и эффективность препарата АйСиДивит для профилактики послеродовых осложнений у коров - тема автореферата по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы