Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ФАКТОРЫ. ВЛИЯЮЩИЕ НА УРОВЕНЬ СУПЕРОВУЛЯЦИИ, КАЧЕСТВО И ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ У МЯСНОГО СКОТА

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ФАКТОРЫ. ВЛИЯЮЩИЕ НА УРОВЕНЬ СУПЕРОВУЛЯЦИИ, КАЧЕСТВО И ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ У МЯСНОГО СКОТА"

ъм

Ш правах рукописи ХУАН КАРЛОС МАМАНИ ВЕЛАРДЕ

ФАКТОРЫ. ВЛИЯЮЩИЕ НА УРОВЕНЬ СУПЕРОВУЛЯЦИИ, КАЧЕСТВО И ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ У МЯСНОГО СКОТА

03.00.13 • физиологи* человека и жнвотних

АВТОРЕФЕРАТ ,

диссертации на сонсюшке ученой степени кандндапъ биологических наук

Дубровнцы, Московской области. 1998 г.

Щ . etcor.r - cfoushtv UJT7U/

m отделе гных !

шктупаиюлюмк1м(ВИЖ).

Иаучние руммшпюип логар бммппсспп наук АМ.Гирнт жжгир биологических наук. цюфмсор

ПЛНцмпю

OfnwMHHit ошмиыим: доктор бисмогачесиих мук, цюфесоор

аяшюю»

Г^Ц»/ИГ Ямштчмичп —тух А. Н Нмгпрцм

13 « «•»ар* 1999 года, в 10 Д 020.1602 при

Адрес мстпут M2012 п_ ДуЛрочпш. Покжимп» р«*пи1 Москижжо* сймст.

[иешй.-.-' чипп i Мятпп Вмуосъг^чюп мцгчмн ■сежиидимго wriTTj .лпюмдям.

Аторсфджгрюомк; " í'í »*ечабря 199tгода

I .ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АПУАЛЬНЖТЬ 7ШШ Биотехнологический метод трансплантации эмбрионов является важным фактором ускорения процесса качественного улучшения популяций сельскохозяйственных животных, обеспечивает более' полное и эффективное использование генетических ресурсов высокоценного маточного поголовья.

Программы трансплантации эмбрионов- в мясном скотоводстве направлены на получение быков-производителей от выдающихся матерей, ускоренной проверки быков по качеству потомства, расширенною воспроизводства наиболее ценной части маточного поголовья, получение двойне вых отелов и сохранение генофонда скота.

Однако,, результативность метода, трансплантации 'подвержена воздействию экзогенных и эндогенных факторов, многие из которых до последнего времени малоиэучеиы.

Выраженная сезонность размножения мясного скота не позволяет проводить плановых работ по трансплантации эмбрионов в течение года.В период сезонного или лактационного анэструса трудно получить высокие результаты по индуцированию суперовуляции с помощью экзогенных гонадотропниов. Оплодотворяемость яйцеклеток, даже При наличии высокой овуляторноЗ реакции у доноров, значительно понижена. ■

Существенными факторами, окииыющимн существенное михи« иа результаты трапе плантации эмбрионов, являются прололжнтеллнеягтъ светового дня, температура окружающей среды н наличие полноценного корма. Световой раздражитель непосредственно воздействует на гипоталамо-гипофнзарную систему н через обратную связь - на стероидные гормоны и половые органы животных. Определена отрицательная связь между фотопериодизмом н секрецией гапофкзарных гормонов, особенно пролает»на. который варьирует а зависимости от долготы дня.

Уровень кормления и условия содержания животных мясных пород оказывают негативное влияние на результаты индуцирования, суперовуляции. н качественный состав , извлекаемых эмбрионов. Отрицательный баланс в кормлении нарушает половую шпетн^у я воспроизводительные возможности маток в целом. При создании физиологически обоснованных условий содержания и кормления животных, можно в значительной степени, снизить вариабельность показателей по воспроизводству мясного стада и результатов трансплантации эмбрионов нехнрургическнм путем.

Животные разных- - пород имеют генетически обусловленную плодовитость, связанную с особенностями гормонального статуса и индивидуальными признаками. Число эмбрионов, полученных от отдельных

ЦЕНТРАЛЬНАЯ

НАУЧИЛп емблиотЕКА

Моск. _- ... л.. (адомми

(• «рост одмой породы, зависят от зяжршиога оацо, I сксто4 и лрутил фажюро*.

I вмиткмго смпмям мюгмп и щрммюмго мтк, шлмжм предопределить рпудашивист» «пол Ц1мти)г»|м к^рммм. ,

Ьоюе лстяямюе течение ^«вдгорн! факгоро», юиякиод я редриям

супсрояудяцнк с тффослпносп Мб|мпю я «тмротмясио и«чиии> ресурса» мтркмопогаючи ■

ЦЕЛкМЛШШЖСШШВШШ. Цамлипкгмгг «воавмий жмете» пуптшешдммкрш

КМ1ШМ ю ретуямжт > я кпможных путей поше I мло яоуожлш ршзпотц сюи.

«сши |>мядро» га рецпияк

лрнмсмлми бмомппсом прелзряля с

I и т> суткрсшуялихн я

я шшлая

|ц)шшмм 4<м ■ (ром лвюрр«: яя мзршз я породы донорз не1 р«ул*гати

фаирро« на яряжнулвсмосп эябрномо».

жперимапях м мктоцешмм | иопмии крупного рытого сютта • ст "Ма*к" Пермской м '.Тимшн о"Ншип)и«1п1! областей. Опыгы по иццифаюям» я эмбрмхкреемюи лромдмпя га юром* я, теяш • тгзрасп порах, «ннматлгскаи, герефордооя (опыт) и черно» яепрм (кмпроп).

• / научная номпна ' .

пш№ жшмрых мтоппмт 'я тотшпюяп.' фшгороц, » та секта рождения м стой, лртдотжкткльиосгъ сеегоюго , да», уежммв содержания жпюров, коро»-м<трей я геягг я» подсосе, м* ; регухьптм гф*ктшинга ппимкня супсро«уя*мнн, «ююд ючеспстшя , м^ряемм яюгприжммятость,., • .:'•. -• л ,.

С мймяюю обосяоюнного прнЬспепкя "бяопопмеекм. активных -решуаго» (беюгнц яремикс, конпмке атямяж» А, Д. Ё) лоаытена

вцгапорш [Уотви ппшю и 13.3% и ншц у лммрм ва 17,2% а иопяцшше а осрашые особамоли раужптопрйрппм и ючсстж>

Опрсясасвк фапр|ддшс эибрммм. «по пошолкж супсроиу.1 чп«и ю 23^*1, кяго» цпшммтп 1Ьучея

практическая ША'гткх-тг. пшгы нптгття

щушттшжшшшв.

Иуоше вжип«- ф»|щхя,

я шаек иугеИ

> >^>1 ицш и. суф0»;лиц11м« ретч у » цжимоттта зщкаышгй - 26.4%. в мне это < •осоракз

рогатого емгга а среднем ка 20.0%.

лпткнтя работы

Ммсуии

Ошяа*1 : ВИЖж < 1997-199$ гг_Х ]

щ шрули>Р§ атрофмрмм -'^Голшюо1* Нн'у^ум

обюстм(1997г).

-ПЖШ&ШШ

. По шкршам днидндряпвй работа (щбшшяв работа ■ дпгтргитьном журижяе {Ъссмк.

рдтуыь: пможушя ь. ¿иоппол и* гшигту

ЙС^^ыши шучшх

; факторов ' на ре^жгаи * зародышей ■

|

ОБЬРМ И СТРУКТУРА ПИССЕРТАШШ Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц, 3 рисунка, 6 приложений, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов к практических предложений. Список литературы включает НО источников, из них 72 иностранных. *

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Научные исследования проводили на маточном поголовье крупного рогатого скота опытного хозяйства "Маяк" Пермской и - агрофирмы "Толмачево" Нижегородской области, по представленной схеме.

В качестве доноров эмбрионов использовали телок случного возраста (16-18 мес.) н коров симментальской, герефордской (опыт) н черно-пестрой пород (контроль) от 2,5 до 9,1 и более лет.Нехирургическую пересадку эмбрионов проводили телкам случного возраста и коровам клинически здоровым, нормально циклирующим н не имеющих племенной ценности, ч

Все работы связанные с трансплантацией эмбрионов проводили по общепринятым и частным методикам ВИЖа.

Биохимические исследования и уровень прогестерона в кров» у подопытных животных проводили в зональной лаборатории г.Кстова Нижегородской области по утвержденным методикам. В крови определяли: общий белок, альбумины, общие липкой, фосфолипиды, холестерин, триглицериды, креатннин, щелочную фосфотаэу, каротин и витамин "А".

Гормональное вызывание множественной овуляции у доноров проводили с помощью экзогенных гонадотропинов ФСГ (США) и супер-ФСГ (Россия) в сочетании с простатандином анипрост (Россия). Общая суммарная доза гонадотропинов и лростагланаина была равна 42 мг и 500 мкг соответственно., . *

Индуцирование суперовуляшш проводили по сезонам года у доноров клинически здоровых и условно годных для воспроизводства. При этом учитывали общую овуляторную реакцию организма животных на введение экзогенных гонадотропинов, выход - качественных эмбрионов и оплодотворяемостъ яйцеклеток в зависимости от сезона отела, продолжительности светового дня, условий содержания и кормления подопытных животных. - ■ '

При изучении факторов, влияющих на прижналяемость эмбрионов, учитывали условия проведения работ, уровень прогестерона в кровн реципиентов, породу доноров и качество эмбрионов.

ОБЩАЯ СХЕМА И ОБЬЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ

/ . \

Сезонное проявление половой инклнки У коров к телок у мясных пород Влияние условий содержания к кормления на воспроизводительные возможности мясного скота

1 1

Породные и. возрастные особенности воспроизводительных функций крупно го рогатого скота Влияние клинического состояния доноров на результаты суперову-ляиии и качество эмбрионов

-

| Факторы, влияющие на гтриживляемостъ эмбрионов | | Собственные исследования |

/

Изучение влияния сезонных факторов не воспрошводнтёльи ыо возможности маток (использовано более 80 коров)

Изучение влияния клинического состояния доноров на результаты суоероеу-ляции и выход качественных эмбрионов (использовано <>8 коров к телок)

\

Изучение влияния условий содержания и кормления докеров на результаты суперовуляцнж -(использовано более 80 животных)

Определение взаимосвязи между породой, возрастом к индивидуальными особенностями доноров и результатами суперовуляшш (использовано 89 коров и телок)

Изучение некоторых факторов влияющих на приживляем ость эмбрионов (использовано 140 жнвотных-рецн м неитоа и более 200 эмбрионов)

Условия содержания и кормления подопытных животных соответствовали физиологическим нормам для крупного рогатого скота. Коров н телок кормили по нормам ВИЖа (приложение 1,2, 5,4). В качестве биологически активных препаратов использовали * 'Тривитамин' * и "Белотин" в сочетании с премиксом П 60-3 (приложение 5,6), . ' - . '

Статистическую обработку экспериментальных данных проводили по методике Е.К.Меркурьеъой (1970 г.) с применением компьютерной техники.

s

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3,1. Изучение влияния некоторых сезонных факторов на воспроизводительные возможности коров.

Воспроизводительные функции мясного скота зависят от ряда факторов ■ сезонного происхождении, основным» из которых являются: сезон рождения и отела, продолжительность светового дня и обеспеченность животных полноценным кормлением.

При изучении подобных факторов на воспроизводительные возможности коров и результаты гормонального индуцирования суперовуляция у доноров, нами были получены следующие результаты.

Установлено, что сезон рождения животных оказывает достаточно заметное влияние на возраст коров при отеле и их последующие воспроизводительные возможности.

При рождении животных осенью возраст нх отела составил 870 дней н последующий сервис-период не превышал 52 дней (р<0,05). Общая оплодотворяемое» коров достигала 86,9%, в том числс от 1-го осеменения 67,9%,( р<0,01), при индексе осеменения 1,4. Рождение животных, летом приводит к незначительному снижению подобных показателей. Возраст коров при первом отеле и сервис-период равны 905 и Í8.9 дням. Общая оплодотворяемость животных 60,6%, в т.ч. от 1-го осеменения 62,0% н индексе осеменения рапным 2,0, что вполне приемлемо для мясного скота. При рождении животных весной возраст их отела максимален ( 1099,4 дн)й сервис-период достигает 82 дней. Не более 67,9% животных стали стельными и 32,1% коров остались яловыми. Подобную разницу в показателях можно объяснить тем, что животные, рожденные в наиболее благоприятный t период времени года (лето, осень) и наличии балансированного кормления, имеют возможность полноценного развития всего организма и, в частности, воспроизводительных функций, что в итог« положительно сказывается на конечных результатах репродукции стада. Вместе С этим не следует исключать определенное влияние условий содержания и режима эксплуатации животных на воспроизводительные возможности самок.

С сезоном отела связана продолжительность послеотельного периода и волроизводительные функции животных.

Установлено, что более высокие результаты по индуцированию суперовуляции и выходу качественных эмбрионов были получены у коров отелившихся осенью (табл.1). Из 16 обработанных коров! 2 или 75% реагировали суперовуляцисЙ и выход качественных эмбрионов достигал 73,7%, при общей оплодотворяем ости яйцеклеток 82,1% (р<0,01).

Таблица I

Влияние сезона отела коров на результаты суперовуляцнн н выход качественных эмбрионов

Показатель Сезон спела коров

осень зима весна лето

Обработано коров 16 12 . ■21 19

- Из них с суперовуляимей 12 7 16 13

% 75.0*10,82 58,3* 14.23 76,2*8,58 68,4*10,66

Среднее число овуляций 7,0*0,58 6,2*0,60» 10.0*0,72* 7,4*0,56

Получено в среднем на донора . эмбрионов и к/я Гше клеток 6,1 ±0,50 5,4 ±0,52 8.810,64 6,6*0,50

в т.ч. нормальных эмбрионов 4,5±0,37 3,1±0^0 • 3,6*0,26 4,00,30

% 73,7 57,4 40,9 60,6

Ошюдотворяемость яйцеклеток % 82,1*3,62 <•• 71,4*5,24 70.Cht3.42** 77,4 ±3,52

< * - р < 0,05; - р <0,01)

У подопытных животных, отелившихся весной, полновуляторна* реакция на введение экзогенных гонадотропинов была достаточно высока (76,2%), однако выход морфологически нормальных, эмбрионов не превышал 40,9%.При отеле летом, когда у животных довольно часто наблюдаются температурные стрессы, овуяяторная реакции яичников не слишком высока ( 68,4%), но выход качественных эмбрионов достигает 60,6%, что вполне приемлемо для мясного скота. По-видимому, у животных, отелившихся в наиболее благоприятный период времени года, воспроизводительные функции быстрее приходят в норму, что в итоге сказывается на результатах суперовуляцнн н качестве извлеченных зародышей.

Имеются сообщения о том, что продолжительность сьегоиого дня является существенным фактором, влияющим на воспроизводительные возможности маток.

В результате проведенной серии опытов мамн установлено, что » ■ весенний период, при максимальной продолжительности светового дня (13,94 час.), более 85% животных положительно реагировали па введение экзогенных'гонадотропинов, но выход качественных эмбрионов к обшая ошюдотворяемость яйцеклеток не ■ превышали 45,7 и 75,7% (табл.2). Максимальный выход морфологически нормальных эмбрионов наблюдался а осенний период года (64,2%) н несколько ниже (56,3%) этот показатель был летом, при продолжительности свегоюго дня 10,26 и 12,95 часов.

Таблица 2

Влияние продолжительности светового дня на результаты суиеровуладии н выход качественных эмбрионов у коров-доноров

Показатель Средняя продолжительность светового дня по сезонам года (час)

осень (10,26) зима (7,93) весна (13,94) лето (12,95)

Обработано коров-доноров 21 19 14 14

Из них с суперовуляиией 15 12 9

% 71.419,86 63,2111,07 85,719,36 64,3112,08

Среднее число овуляций 7,3±0,53 6,6±0,)0 8,1 ±0,72 7,1 ±0,63

Получено в среднем на донора эмбрионов и н/яйцеклеток ' 6,710,49 5,8±0,44 . 7,010,62 . 6,410,60

»т.ч. нормальных . эмбрионов 4,3±0,31* з.оюдз 3.2Ю.28* 3,610,32

% 64,2 51,7 45,7 56,3

Оплодотворяемосгь яйцеклеток ' % 82.1 ±3,64 72,4±3,77 75,714,03 76,614,25

( ♦ - р < 0,05 )

Из полученных результатов следует, что такие факторы сезонного происхождения как сезон рождения и отела оказывают существенное влияние на результаты гормонального вызывания суперовуляшш у доноров и в целок на воспроизводительные возможности крупного рогатого скота.В тоже время продолжительность светового дня в меньшей степени влияет на результаты суперовуляшш и качество извлекаемых эмбрионов. По-видимому , для средней полосы России более существенным фактором, влияющим на воспроизводительные возможности животных, является ' уровень кормления и балансировали ость рационов. . '

■ 3.2. Влияние условий содержания и кормления доноров на результаты супероауляцин. * .

Специфика мясного скотоводства предопределяет условия содержания н кормления животных данного направления. Однако, дс последнего времени не определены оптимальные параметры технологии воспроизведения ; мясного скота. .Научные разработки этих положение позволят ускорить процесс воспроизводства наиболее ценной части маточного поголовья , что . будет способствовать повышению рентабельности данной отрасли в целом.

Намк было юучсно влияние условий содержания коров-доноров на результаты гормонального - вызывания суперовуляикн н выход морфологически нормальных эмбрионов.

В результате проведенных исследований установлено, что достаточно высокие показатели по индуцированию сулеровуляиии были получены у доноров при их содержании на пастбищах (табл-Э).Более 84% животных реагировали множественной овуляцией, выход качественных эмбрионов составил 79,7% и общая оплодотворявмостъ яйцеклеток достигала 86,4%. При привязном содержанки только <>1,1% " доноров реагировали суперовуляцией, и средний выход качественных зародышей не превышал 65%, при 73,1% оплодотворенных яйцеклеток. Вместе с этим'следует отметить, что при отборе доноров из числа животных, которые содержались иа привязи, наблюдались случаи (до 23%) скрытых форм эндометрита, которые осложняли работу по трансплантации эмбрионов в целом. Кроме того, отсутствие или ограниченность активного моциона способствует развитию атонии матки, нарушению обменных процессов и гормонального . статуса в организме животных, что в тоге приводит к снижению воспроизводительных возможностей маточного поголовья.

Таблица 3

Влияние условий содержания коров на результаты суперовуляции и выход

эмбрионов у доноров

Показатель Условия содержания коров-доноров

привязное беспривязно-боксовое • СТОЙЛОВО- пзстбищнос

Обработано коров 18 24 26

Из них с полиовуляцией 11 19 22

% 6t.ltl1.49 79,2±8,28 84,647,08-

Среднее число овуляций 6.8*0,53 7,6<±0,52 7,7±0,53

Получено в среднем на донора эмбрионов и н/яйиеклеток б,0±0,47 б,4±0,44 б,9±0,45

в т.ч, нормальных эмбрионов 3,9*0,3 !•* 5,0±0,34 5,5±0,36*»

% 65,0 78,1 79,7

Оплодотворяемость яйцеклеток 73,1 ±4,01 79.4 ±3,00 86,4±2,39

„ (••-1*0,01)

Достаточно высокие результаты по индуцированию полиовуляцин у доноров были получены при беспривязно-боксовом содержании, когда животные имели определенную свободу в перемещениях, по сравнению С ..V привязью. Из 24 обработанных 19 или 79,2% животных реагировали., суперовуляцией и в среднем на донора было получено по 5 качественных эмбрионов, что составляет 78,1% от числа извлеченных яйцеклеток.

Одной нз особенностей мясного скотоводства является совместное содержание коров-матерей и телят на подсосе. Подобная форма содержания, наряду с положительными факторами, в определенной степени подавляет воспроизводительные возможности маток, нарушает половую цикличность, удлиняет сервис-период н снижается выход телят.

Нами было изучено влияние подсоса коров на результаты.гормонального вызывания суперовуляции и возможности снижения его отрицательного влияния на воспроизводительные возможности маток.

В группе коров-доноров без телят были получены наиболее высокие показателя по индуцированию суперовуляцин и выходу, нормальных эмбрионов (табл.4).

Таблица 4

. Влияние совместного содержания коров-доноров и телят на подсосе на результаты суперовуляции

Показатель Группы доноров

без телят (контроль) с телятами постоянно Оп-.ем телят ( час) 24 48

Обработано коров 12 17 20 19

Из них с суперовуляцией • 10 П ' 15 . 14

% 83.3*10,77 64.7± 11.59 75.0±8.10 73,7 ±9,10

Среднее число овуляций 9,0±0,86^ 6.4±0,52* 7.9±0,49 7.6±0Г48

Получено в среднем на донора эмбрионов и к/яйцеклеток 7,5±0,72 5,5±0,44 . 7,0±0,43 7,2±0,54

в т.ч. нормальных эмбрионов 5,7±0,54» 3,5±0Д8* 4,9±0,30 5,0*0,41

% 76,0 , 63,6 : 70,0 69,4

Оплодотаоряеыость яйцеклеток % 91,0±2,75* 78,5±3,94» 85,3*2,34 86,1 ±2,86

( р< 0,05 ) *

До 83,3% животных, от числа обработанных, положительно реагировали на введение экзогенных гонадотропинов и выход качественных эмбрионов в

среднем па донора составил 5,7 или 76,0% от числа извлеченных ооиктов к эмбрионов (р<0,05). Обша* оплодотаоряемость яйцеклеток достигала 91,0%.

Животные с телятами на подсосе по всем показателям уступали контрольной труппе допоро*. Не более 64,7% животных реагировали суперовуляцией и выход качественных эмбрионов не превышал 63,6%.

Установлено, что кратковременный отъем телят от матерей на 48 н 24 часа, перед началом гормональных обработок и осеменением маток, практически в равной степени увеличивает овуляторнуго реакцию яичников на введение экзогенных гонадотропннов (табл.4>. От 73,7 до 75,0% животных реагировали супероауляцней и выход качественных эмбрионов был равен 69,4 и 70,0% от числа извлеченных яйцеклеток.

' Однако, нами установлено, что 48 часовой отьсм телят от матерей, кроме положительного влияния на результаты суперовуляции оказывает отрицательное воздействие на здоровье молодняка. Бол ее 60% тел** переболели расстройством желудочно-кишечного тракта, чего не наблюдается при 24 часовой изоляции телят от матерей. . Исходя кз полученных результатов следует, что более целесообразнее проводить временный отъем молодняка ОТ коров-матерей на 24 часа, перед началом гормональных обработок н осеменением доноров.

Известно, что несбалансированное кормление приводит к значительным ■ отклонениям я организме животных,' а том числе к - снижению воспроизводительных возможностей маток, нарушению обменных процессов и клинического состояния поголовья.

Нами были' изучены основные биохимические показатели крови ¡у подопытных животных-доноров, с различным уровнем полиовуляции, по сезонам года.

Результаты исследований биохимических показателей белкового, ." жирового обмена, витамина "А" позволили установить, что овуляторная \ реакция у животных с отклонениями в обмене веществ в 1,5 - 2 раза ниже, чем у доноров с нормальным обменом. У коров с числом овуляций 0-6, биохимические показатели были достоверно ниже ( р<0,05 ), по сравнению с животными у которых уровень полновуляцин был равен 7-16 в среднем на донора. При этом следует отметить, что в весенний период, по сравнению с . осенью, основ)|ые биохимические показатели крови животных, как при высокой так и при низкой полновулхтормай реакции яичников, были ниже " нормы более чем на 30 • 60%, что по-видимому связано с низким качеством кормов.

В целях нормализации обменных процессов в организме подопытных животных и полунения достаточно высоких результатов по индуцированию суперовуляции у доноров, нами были применены биологически активные препараты: тетравнт, белотин н премнхс ПбО-З. Комплекс витаминов "А, Д, Е " вводили внутримышечно в дозе 10 мл, перед началом гормональных обработок и осеменением доноров. БеяковосодержащиЙ препарат "Белотин" и прем икс П60-3 скармливали живогным с кормом по 230 к 30 гр. на голову в сутки а течение всего периода проведения эксперимента.

Применение в рационах. подопытных животных белковосодержащего препарата "Белотин"(опыт I) и прем икса П60-3 (опыт 2) позволило увеличить овупяторную реакцию яичников до 71,0 «77,8%, ври этом выход • нормальных эмбрионов составил 66,7 и 61,2% (габл 5).

Таблица 5

Влияние биологически активных препаратов на результаты суперовуляции и

выход эмбрионов

Показатель Контроль Опит

белотин (1) премнкс (2) белотин- премикс <3>

Обработано коров 10 16 18 24 .

Из них с полиовуляцией 7 12 14 20

% 70,0± 14,49 75,0± 10,82 77,8±9,80 83,317.61

II 1 1( Среднее число овуляций 6,2±0,65 б,9±0,57 7.0Ю.55 7,6±0,52

Получено в среднем на донора эмбрионов и н/яйие клеток 5,6±0,59 б,0±0,50 б,7±0,53 7,0±0,48

в т.ч. нормальных эмбрионов 3,2±0,33*** 4,0±0,33 . 4,1 ±0,32 5Д±0,35* 4*

% 57,1 66,7 61,2 74,3

Ошюдогворяемость яйцеклеток (%1 71.915,71 80,0±3,81 79,613,59 89.012,57

(•**-р<0,001)

Комплексное применение биологически активных препаратов увеличивает овуллторную реакцию яичников до 83,3% и выход качественных эмбрионов до 5,2 а среднем на донора, что составляет 74,3% от числа извлеченных мродышей к ооцитов, что достоверно выше по Сравнению с контрольной группой животных (р<0,001). При этом общая ошюдотворяемость яйцеклеток достигает 89.0%.

Таким образом, дополнительное введение в рацион доноров биологически активных препаратов "Белотин" н преннкса П60-3, на фоне комплекса витаминов "А, Д, Е" позволяет существенно увеличить ответную реакцию организма животных на введение экзогенных гонад атропинов н увеличить выход ' морфологически нормальных < эмбрионов.

3.3. Клиническое состояние доноров и их сулеровуляториая реакция на •ведение экзогенных гоиадотропинов.

Большинство исследователей считают, что состояние здоровья в первую очередь сказывается на воспроизводительных возможностях магок.При этом овуляторная реакция яичников н выход нормальных эмбрионов у здоровых животных значительно выше, по сравнению С больными или условно годными для воспроизводства.Однако, оправданы случаи получения эмбрионов от выбракованных, но генетически ценных животных.

Нами было изучено влияние клинического состояния мясных коров на ' результаты гормонального вызывания суперовуля ции и выход качественных эмбрионов и возможности использования условно годных для ' воспроизводства животных в качестве доноров эмбрионов.

Установлено, что 80% здоровых животных реагировали суперовуляцией и выход качественных эмбрионов составил 5,0 или 69,4% от числа извлеченных яйцеклеток ( табл. 6). Причем количество дегенерировал><ых зародышей и неоплодотворенных яйцеклеток не превышало 13,9 и 16,7%. В труппе животных, условно пригодных для воспроизводства, положительно реагировали иа введение экзогенных гонадотролинов не более 66,7% маток и выход качественных эмбрионов не превышал 51,4%. Вместе с этом число дегенерированных зародышей и неоплодотворенных яйцеклеток достигало 22,1 и 26,5%,

Несомненно в группе здоровых доноров получены достаточно высокие результаты по индуцированию суперовуляшш (80,0%) и выходу нормальных эмбрионоь (69,4%). Однако в группе животных, условно годных для воспроизводства, получено на донора по 3,5 эмбрионов пригодных для замораживания или пересадок. Трансплантирование этих зародышей позволяет получить около двух телят от высокоценных родителей. Поэтому, если животные представляют значительную ценность в

1.6

племенном к продуктивном отношении, необходимо провести комплекс оздоровительных мероприятий н затем использовать их в качестве доноров эмбрионов.

Таблице 6

Влияние клинического состояния коров* доноров на результаты индуцирования сулеровуляци и

, Показатель Коровы-доноры

здоровые условно годные

Обработано животных 30 18

Из них с полиовуляцней 40 12

' V* 80.015.861 66,7±) 1,11

Среднее число овуляикй 9,3 ±0,4 4 8.010,63

Получено в среднем на донора эмбрионов к к/яЛцеклеток 7,210,34 6,810,33

в т.ч. нормальных эмбрионов . 5.0±0,24«* 3.310,27Ф»*

(V 69,4 51,4

дегенерировал ных 1,0±0,05 1.5 ±0.12

% 13.9 . 22,1

н'яйцеклеток 1.2Ю.06 1.810.14

% 16,7 26.5

Ошюдотворяемостъ яйцеклеток (V.) 83,3' 73,5 •

(***-р<0,001)

3.4. Влияние возрастных, породных и индивидуальных особенностей , доноров на суперовуляцию и выход качественных эмбрионов.

, ! До последнего времени не установлен возрастной предел использования маток крупного рогатого скота в качестве доноров эмбрионов.В научной литературе имеются весьма противоречивые сведения по данному вопросу.

Нами были проведены исследования по изучению ответной реакции организма животных , различных возрастов на введение экзогенных : гонадотропинов, при вызывании сулеровуляцни.

■ В результате проведенных исследований установлено, что достаточно высокие результаты по индуцированию суперовуляции были получены в группе коров-доноров в возрасте от 3,6 до 9 лег.

Более 78% животных реагировали суперовуляцней и при средней -овуляции. • равное. в,3, в среднем на донора, подучено по 5 качественных -эмбрионов, что составляет 66,7% от числа извлеченных яйцеклеток (р<0#5). Общая оплодотворяемостъ яйцеклеток, составила 87,1%. - .

Не более 66,7% первотелок реагировали множественной овуляцией и выход качественных эмбрионов не превышал 43.5%. при весьма низкой оплодотворяем ости яйцеклеток <65,7%), . Низкие показатели по индуцированию иолновупяцни в группе первотелок возможно объяснить наличием скрытых форм послеродовых осложнений и- сложностями перестройки организма животных в послеотепьный период.

У коров в возрасте от 9,1 и более лет наблюдались самые низкие показатели «улеровуляторной реакции (61,1%) и выход качественных эмбрионов не превышал 52,4% .У телок случного возраста выход качественных эмбрионов Бил аналогичным (52,4%), но оаупяторная реакция яичников достигала 72,7%.

Из полученных данных следует, что наиболее оптимальный возраст коров для использования в качестве доноров эмбрионов является от 3,6 до 9 лет. Телок случного возраста (16- 18 мес.) возможно использовать в качестве доноров эмбрионов, ico необходим подготовительны Й период с высоким уровнем кормления животных, контролем регулярности половых циклов и состояния органов воспроизведения.

Не менее важным фактором, влияющим на результаты индуцирования суперовуляцин с помощью экзогенных гонадотропкнов, является порода доноров.

В наших исследованиях была изучена ответная реакция: организма животных мясных пород: симментальская к герефорл, на введение экзогенных гонадотрол и нов. В качестве контроля служила группа доноров из )3 гшов черно-пестрой породы.

' Наиболее высокие показатели по индуцированной суперовуляции были получены в группе доноров симментальской породы (табл.7). Более 81% животных реагировали суперовуляцией и выход качественных эмбрионов достигал 79,7% при максимальной оплодотзоряе мости яйцеклеток (93.1%). ' В группе доноров герефордской породы эти показатели были несколько ниже. Из 34 обработанных животных только '67,6 % реагировали множественной овуляцией а выход качественных эмбрионов не превышал • 67,6%, при достаточно высокой обшей оплодотворяемости яйцеклеток (81,2%). -

В контрольной группе 72,2% доноров положительно реагировали на введение экзогенных гонадотрол и нов сулеровуляциеЙ и выход эмбрионов, пригодных для пересадки, составил 67,2%, при обшей оплодотворяемости яйцеклеток равной 80,0%,

Таблица?

Влияние породы донора на результаты суперовуляции и выход эмбрионов

Показатель Порода коров-доноров

симментальская герефорд черно-пестрая (контроль)

Обработано коров 16 34 18

Из них с супери» овуляцией 13 23 13

% 81,2 ±9,77 67,6±8,03 72,72±10,56

Среднее число овуляций 8,4±0,70 7.4 ±0.4 2 7,0±0,55

Получено в среднем на донора эмбрионови н/яйнсклеток б,4±0,53 6,840,39 6,4 ±0,50

в т.ч. нормальных эмбрионов 5,1 ±0,42 4,б±0Д6 4,3±0,34

% 79,7 67,6 67,2

Оплодотворяемось -яйцеклеток (%) 93,1 ±2,19* 81 ¿£2,46 80,0±3^6*

( *-р<0,05 )

3,5. Изучение влияния некоторых факторов на приживляемое» эмбрионов.

Результативность эмбриопересадок и метода трансплантации эмбрионов в иелом зависит от многих факторов, степень изученности которых весьма недостаточна.

Особым препятствием для повышения приживляемости эмбрионов является отсутствие объективных критериев определения активности яичников реципиентов перед эмбрнопересадками.По мнению некоторых -исследователей, на приживляемостъ эмбрионов в большей степени влияет гормональная активность яичников, а не их структурное развитие. В месте с . этим имеются сообщения о том. что гормональный фон может достаточно широко варьировать у животных разных возрастных и породных групп. : Нами был изучен гормональный фок в организме телок-рецнлеитов, ' герефордской породы в возрасте от 16 до 18 месяцев.Взятие проб крови ' проводили непосредственно перед эмбрнопересадками, Нехирургическую пересадку зародышей проводили по частным методикам ВИЖа, с *'' использованием специальных приборов. Через 2,3 месяцев после пересадок ■ эмбрионов, стельность реципиентов определяли ректальным способом. .: В результате проведенных экспериментов установлено, что наиболее. .'. высокая приживляемостъ -эмбрионов была у реципиентов с уровнем прогестерона2,6 нг/мл и более. Из 24 реципиентов 13. или 54,2% оказались '.; стельными, что достоверно выше по сравнению с первой опытной группой животных; уросснъ прогестерона у которых не преилиал 1,0 нг/мл (р<0,05). При ■ уровне прогестерона в крови подопытных животных, равным 1,0-

2,5 кг/мл, прижиаляемость эмбрионов составила .41,4%, что вполне приемлемо для мясного скота

Таким образом, для' проведения эмбриопересадок необходимо использовать, реципиентов с уровнем прогестерона в крови не менее 1,0 иг/мл, что позволит получить достаточно приемлемые результаты по прнжнвляемостн эмбрионов.

Отмечено, что условия проведения пересадок эмбрионов в определенной степени влияют на их прижиаляемость. .

3 наших исследованиях было щучено влияние условий проведения пересадок эмбрионов на их прижиаляемость. Нехнрургическую пересадку ;, эмбрионов герефордской породы проводили в условиях стойл па привязи, в боксах н на выпасах. В двух последних случаях животных фиксировали в * специальных станках.

При пересаше эмбрионов в стойлах содержания животных на привязи, где достаточно трудно создать стерильные условиях для проведения подобных работ, прнживляемость зародышей не превышала 25,0% {табл.8). Пересадка эмбрионов в изолированных боксах увеличивала их прижиаляемость до 41,4%. Более высокие показатели по приживляемое™ эмбрионов были получены при их пересадке в условиях летнего лагеря, где за счет солнечной инсоляции более стерильные условия для проведения подобных работ. Стельность реципиентов достигала 51 4%.

Таблица 8

Влияние условий проведения пересадок на прнживляемость эмбрионов.

Показатель Условия ш ро ведения эмбриопересадок

на привязи в боксах на пастбищах

Число реципиентов 24 29 35

Стельных реципиентов 6 12 18

Процент стельности 25,0*1062* 41,4±9.15 51,4 ±8,45*

Получено телят 4 10 17

% 66,7±15.Э1 83310,77 94,4±5,42

(* - р<0,05)

Из полученных данных следует, что в летнее время года проведение работ го трансплантации эмбрионов желательно проводить в летнем лагере на выпасах, зимой • в боксах.

Биологически активные препараты, в силу своих химических и биологически-структурных свойств, способны активизировать обменные процессы в организме животных, в том числе и воспроизводительные функции маток,

В целях увеличения прижиелясности эмбрионов мясных порол, нами были применены биологически активные препараты ''Белотин" и прем икс . П60-3 в дозах 230 и 30 гр. в сутки на голову. Контролем служила группа реципиентов, обработанных комплексом витаминов "А, Д, Е" ( '.'Тривитамни") в дозе 10 мл в день синхронизации охоты и непосредственно перед эмбрнопересадкой. Первой опытной группе реципиентов скармливали только белотин, второй-лремикс и третья группа получала комплекс биологически активных препаратов.

Из полученных данных следует, что скармливание реципиентам белаггина и прем икса, на фоне витаминизации организма животных, позволяет повысить нриживляемость эмбрионов до 54,3%, что достоверно выше, по сравнению с контрольной группой маток (р<0,05). При этом наблюдается 100% сохранность телят (табл. 9). Применение белотнна и премикса в отдельности обеспечивает 43,6 и 40,5% стельности животных, что приемлема для мясного скота. В контрольной группе животных-■ рецинисктов прнживляемостъ зародышей не превышала 30,8%,

- ^По-видимому, скармливание подопытным животных комплекса биологически активных препаратов (белотин, прсмикс), служит как дополнением к основному рациону, обогащая его белком, микромакроэлементами и витаминами. Это активизирует обменные процессы а Организме реципиентов, что в итоге повышает" прижнвляемость и жизнеспособность зародышей в матке.

• Таблица 9

- Влияние биологически активных препаратов на прнживляемостъ эмбрионов

Показатель Гр1 ■ппы подопытных животных

контроль 1 опыт 2 опыт 3 опыт

Число реципиентов 26 39 37 35

Стельных реципиентов 8 17 15 19

Процент стельности 30,8*9,64» 43,6*7,94 40,5*8,07 54,3±8,42»

Получено телят 7 16 14 19

% 87,5± 12,65 94.115,71 93,3*4.15 100*0,01

.(•-р<0,05) , ,

Существует мнение о том, что эмбрионы, полученные от доноров ' старших возрастов ( 9 и ; более лет), обладают пониженной жизнеспособностью« -

, Нами были проведены исследования по изучению приживпяемости эмбрионов герефордской породы, полученных от доноров различных возрастов. Пересадку эмбрионов, полученных от телок случного возраста (16-18 месяцев) и коров.от 2,5-3,5 лет, 3,6-9,0 и более 9 пет, проводили. ' ' нехнрургнческнм путем телкам -реципиентам черно-песгрой породы.

Наиболее высокие результаты по -стельности у реципиентов ( 60,0%*) . .. Чыли достигнуты при пересадке эмбрионов, полученных от коров-доноров в

возрасте от 3,6 до 9 лет (р<0,01), при этом отмечается 100% жизнеспособность полученного молодняка (табл.10). Приживляемость эмбрионов, извлеченных у телок и коров-доноров в да^расте от 2,5 до 3,5 лет, не превышала 41,6 и 46,1%. Наиболее низкие показатели по приживляемосги зародышей были у доноров старше 9 лет. - Их приживляем ость едва достигала 30,7%, но сохранность догомства была высока (100%).

Таким образом, для получения достаточно высоких результатов по стельности реципиентов необходимо для пересадок использовать эмбрионы, полученные от доноров в возрасте от 3,6 до 9 лет.

Таблица 10

' Приживляв мость эмбрионов полученных от доноров различных возрастов

Показатель Возрастные группы доноров

телки (16-18 мес) коровы ( лет )

2,5-3.5 3,6-9 9,1 >

Число реципиентов 12 26 30 13

Стельных реципиентов ' 5 12 18 4

Процент стельности 41,6±8,64 46,1 ±9,10 60.0*11,3« 30,7±11,5«

Получено телят '4 10 18 4

% 80,0±12,3 83,3*11.5 100±0,01 100±0,01

{ • - р <0.0) )

Учитывая, что животные разных пород имеют весьма различную генетически обусловленную плодовитость и, по-видимому, эти различия трансформируются через эмбриопродукцию маток, мы изучили прниснЕляемость зародышей, полученных от доноров молочного н мясного направлений.

Пересадку эмбрионов симментальской, герефордскоП к черно-пестрой (контроль) пород проводили телкам-реципнентам молочного направления.

Более высокие показатели по прижнвляемостн были получены при пересадке эмбрионов симментальской породы (табл.11). После пересадки эмбрионов из 26 реципиентов, 16 оказались стельными, что составляет 61,5%.

Пересадка эмбрионов черно-пестрой породы позволила получить 52,6% стельности и несколько ниже (47,2%) этот показатель был при трансплантировании зародышей, полученных от герефордскнх коров .

Таблица 11

Приживляемое»!, эмбрионов разных пород

Показатель Порода эмбрионов

сим меитальс кая герефорд ч/пестрая (контроль)

Число реципиентов 26 36 19

Стельных реципиентов 16 17 10

Процент стельности 61,519,54 47.218,32 52,6111.46

Получено телят' 15 16 8

% 93,716,07 94.1±5,7| 80.0112,65

По-видимому, симментальский скот, в силу своих генетически обусловленных качеств, воспроизводит более жизнеспособные эмбрионы, что положительно сказывается на их приживляем ости.

Таким образом, для получения достаточно высоких показателей по прижнвляемостн эмбрионов, необходимо учитывать и принимать во внимание . комплекс факторов, основными из которых являются: физиологически обоснованные условия содержания и кормления животных, уровень гормонального фона в организме, индивидуальные п породные признаки доноров, оптимальные условия проведения подобных работ и т.д. '' Комплексный подход к данным вопросам позволит получить желаемых результатов по воспроизводству крупного рогатого скота .методом трансплантации эмбрионов.

ВЫВОДЫ •

I, Сезонный фактор оказывает существенное влияние па . воспроизводительные возможности мясного скота! При отеле коров осенью ." их воспроизводительные функции своевременно приходят в норму, что положительно сказывается на результатах суперовудяцнн (75,0%) и выходе - [ качественных эмбрионов (73,7%). ■■'..*.

2 Для средней полосы России более существенным фактором, влияющим на результаты воспроизводства мясных коров, является уровень полноценности рационов и в меньшей степени - продолжительность . светового дня .

3. Сюйлоао-пастбищное содержание коров-доноров обеспечивает ' 79,7% • выход качественных эмбрионов и общую оплодотворяемостъ : яйцеклеток до 86,4%,

4, «Для повышения результатов ' гормонального- индуцирования суперовуляции, целесообразно проводить кратковременный огьем телят от матерей на 24 часа перед началом обработок в осеменением доноров.

5. Комплексное применение Биологически активных препаратов "Белотин" и премикса П60-3, на фойе витаминных обработок, увеличивает овуляторную реакцию яичников до 83,3% и выход качественных эмбрионов достигает 74,3%.

6.Возможно использовать в качестве доноров эмбрионов выбракованных животных, если они представляют* племенную и продуктивную ценностъ.Предварительно необходимо провести комплекс лечебных мероприятий.

7. Наиболее оптимальный возраст мясных коров для использования в качестве доноров эмбрионов является от 3,6 до 9 лет.

8. Воспроизводительные возможности животных разных пород различны. Гормональная обработка коров-доноров симментальской породы

• позволяет вызвать множественную овуляторную реакцию у 81,2%, при выходе качественных эмбрионов до 79,7%, у герефордов эти показатели значительно ниже (67,6% и 67.6%).

9. Для получения достаточно высоких результатов го приживляемости эмбрионов, необходимо учитывать комплекс факторов, основными из которых являются: условия содержания и кормления животных, уровень гормонального фона в организме, индивидуальные и породные признаки доноров, оптимальные условия проведения работ. ,

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. ■ Для повышения результатов гормонального вызывания суперовуляции и выхода нормальных эмбрионов, рекомендуем проводить кратковременный отъем телят от матерев на 24 часа перед началом обработок и осеменением коров-доноров.

2. Для повышения воспроизводительного потенциала коров-доноров, рекомендуем использовать биологически активные препараты "Белотии" и премикс П60-3 в комплексе с витаминными обработками животных. -

3. В качестве доноров эмбрионов необходимо использовать мясных коров в возрасте от 3,6 до 9 лет.

Основные положения диссертации опубликованы в работе: .

1. Гавриков Ж, Мамани Х.К., Самоделки к А.Г., Калягин АЛ.

■ Сезонность воспроизводительной фук ции у мясных коров. Зоотехния, N2, 1997. с.25-27.

Se*. #7170 Тир.-ЛМэкз 1,5 y.п.л. Tim. ГГСДГ НЛОЧ! уч" г.Пэп-элмк IVO.